CN102010405B

CN102010405B - 4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑及其作为抗肿瘤药物的应用

Info

Publication number: CN102010405B
Application number: CN2010105337865A
Authority: CN
Inventors: 胡艾希; 沈芳; 夏曙; 李婉; 向建南
Original assignee: Hunan University
Current assignee: Hunan University
Priority date: 2010-11-08
Filing date: 2010-11-08
Publication date: 2012-07-25
Anticipated expiration: 2030-11-08
Also published as: CN102010405A

Abstract

本发明公开了化学结构式I所示的4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑：

Description

4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑及其作为抗肿瘤药物的应用

技术领域

本发明涉及一类新的化合物及其制备方法和应用，具体是4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑及其制备方法和作为制备抗肿瘤药物的应用。

背景技术

邵玲等描述了4-芳基-5-***基噻唑-2-亚胺类化合物，生物活性测定结果表明部分化合物对苹果轮纹菌具有杀菌活性(高等学校化学学报，2007，28，270)。Michael等描述了2-氨基噻唑类乳腺癌药物(Bioorg&Med.Chem.2004，12，1029)；姜凤超等描述了对细胞凋亡有抑制活性的4-芳基噻唑-2-亚胺衍生物(药学学报，2006，41：727)。Lin等描述了西佛碱类化合物对COX-2具有选择性抑制作用(Bioorg&Med Chem，2008，16(5)：2697)。何道航等描述了4-芳基-2-(2-羟苄亚氨基)噻唑的合成与杀菌活性[华南理工大学学报自然科学版，2008，(3)：60]；中国专利(CN 101602761，CN 200910226728.5)描述了4-叔丁基-5-(1，2，4-***-1-基)-2-苄亚氨基噻唑的杀菌活性和抗肿瘤活性；胡艾希等描述了5-苄基-4-叔丁基-2-苄亚氨基噻唑的合成与环氧合酶-2活性[湖南大学学报自然科学版，2009，36(2)，70-74；中国专利，CN 101492426]和抗肿瘤活性[CN 200910226774.5，CN 101781269]。4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑的制备及其抗肿瘤活性没有研究和开发报道。

发明内容

本发明的目的在于提供化学结构式I所示的4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑。4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑化学名为4-(7-羟基/烷氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑。

其中，X选自：2-氯、2-氟、2-羟基、2-甲氧基、2-乙氧基、2-硝基、3-二甲氨基、3-氯、3-溴、3-氟、3-甲基、3-乙基、3-三氟甲基、3-羟基、3-甲氧基、3-乙氧基、3-硝基、3-磺酸基、3-甲磺酰氨基、3-氨磺酰基、4-二甲氨基、4-氯、4-溴、4-氟、4-甲基、4-乙基、4-三氟甲基、4-羟基、4-甲氧基、4-乙氧基、4-乙酰氧基、4-硝基、4-磺酸基、4-甲磺酰氨基、4-氨磺酰基、2-氯-5-硝基、3-乙基-4-羟基、3，4-二甲氧基、2，4-二氯、2-羟基-5-溴、2-羟基-5-碘、2-羟基-5-氯、2，4-二氟、2-羟基-3，5二溴、2-羟基-3，5二碘、2-羟基-3，5二氯或2-羟基-3，5二氟；R选自：H，C₁～C₂烷基，C₃～C₄直链烷基或支链烷基。

本发明的目的在于还提供了4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑的制备方法，其制备包括如下步骤：

(1)1-(7-羟基/烷氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮、乙醇搅拌，回流，分批加入溴化铜，反应2～4h，制得2-溴-1-(7-羟基/烷氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮；制备按如下反应式进行：

R选自：H，C₁～C₂烷基，C₃～C₄直链烷基或支链烷基。

(2)2-溴-1-(7-羟基/烷氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮、硫脲、乙醇，加热，搅拌反应约1～2h，过滤，滤饼用浓氨水中和至碱性，制得4-(7-羟基/烷氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑；制备按如下反应式进行：

R选自：H，C₁～C₂烷基，C₃～C₄直链烷基或支链烷基。

(3)4-(7-羟基/烷氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与芳醛在甲苯中，哌啶催化反应制得4-(7-羟基/烷氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑；制备按如下反应式进行：

X选自：2-氯、2-氟、2-羟基、2-甲氧基、2-乙氧基、2-硝基、3-二甲氨基、3-氯、3-溴、3-氟、3-甲基、3-乙基、3-三氟甲基、3-羟基、3-甲氧基、3-乙氧基、3-硝基、3-磺酸基、3-甲磺酰氨基、3-氨磺酰基、4-二甲氨基、4-氯、4-溴、4-氟、4-甲基、4-乙基、4-三氟甲基、4-羟基、4-甲氧基、4-乙氧基、4-乙酰氧基、4-硝基、4-磺酸基、4-甲磺酰氨基、4-氨磺酰基、2-氯-5-硝基、3-乙基-4-羟基、3，4-二甲氧基、2，4-二氯、2-羟基-5-溴、2-羟基-5-碘、2-羟基-5-氯、2，4-二氟、2-羟基-3，5二溴、2-羟基-3，5二碘、2-羟基-3，5二氯或2-羟基-3，5二氟；R选自：H，C₁～C₂烷基，C₃～C₄直链烷基或支链烷基。

本发明的目的在于提供的4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑具有抗肿瘤活性。

本发明与现有技术相比具有如下优点：

1.本发明将呋喃酚与噻唑和西佛碱拼合在同一分子中，设计制备了4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑新型化合物。

2.4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑可用于制备抗肿瘤药物。

具体实施方式

以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。

实施例1 4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-氯苄亚氨基)噻唑的制备

(1)2-溴-1-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮的制备

0.02mol 1-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮、80ml乙醇，搅拌回流，分批加入0.04mol溴化铜，反应约2.0h，反应液趁热过滤，蒸馏回收溶剂，乙酸乙酯溶解，稀酸洗涤，过滤，滤液经水洗，分液，干燥，乙醇重结晶得2-溴-1-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮，产率50.0％，熔点90～91℃。

(2)4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑的制备

0.012mol 2-溴-1-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮、0.012mol硫脲、60ml乙醇，加热搅拌，反应约1.0h，反应液冷却析出固体，过滤，滤饼氨水中和，得4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑，产率72.6％，熔点160～162℃。

(3)4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-氯苄亚氨基)噻唑的制备

4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与4-氯苯甲醛按1∶1.1摩尔比投料，甲苯作溶剂，哌啶催化反应1.0h；得到4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-氯苄亚氨基)噻唑；产率62.7％，熔点149～151℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.55(s，6H，2×CH₃)，3.08(s，2H，CH₂)，3.96(s，3H，CH₃)，7.24(s，1H，噻唑环5-H)，7.35，7.36(2×s，2H，C₆H₂)，7.48(d，J＝8.8Hz，2H，C₆H₄2，6-H)，7.95(d，J＝8.8Hz，2H，C₆H₄3，5-H)，9.04(s，1H，N＝CH)。

实施例2 4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-氟苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例1的方法，4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与4-氟苯甲醛反应1.5h；得到4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-氟苄亚氨基)噻唑；产率53.7％，熔点148～150℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.55(s，6H，2×CH₃)，3.08(s，2H，CH₂)，3.96(s，3H，CH₃)，7.17～7.22(m，3H，C₆H₄2，6-H，噻唑环5-H)，7.35，7.37(2×s，2H，C₆H₂)，8.00～8.04(m，2H，C₆H₄3，5-H)，9.03(s，1H，N＝CH)。

实施例3 4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-二甲氨基苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例1的方法，4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与4-二甲氨基苯甲醛反应9.0h；得到4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-二甲氨基苄亚氨基)噻唑；产率72.1％，熔点166～168℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.54(s，6H，2×CH₃)，3.07(s，2H，CH₂)，3.09(s，6H，2×CH₃)，3.95(s，3H，CH₃)，6.73(d，J＝8.8Hz，2H，C₆H₄3，5-H)，7.09(s，1H，噻唑环5-H)，7.35，7.41(2×s，2H，C₆H₂)，7.88(d，J＝8.8Hz，2H，C₆H₄2，6-H)，8.81(s，1H，N＝CH)。

实施例4 4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-甲氧基苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例1的方法，4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与2-甲氧基苯甲醛反应1.5h；得到4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-甲氧基苄亚氨基)噻唑；产率72.3％，熔点142～144℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.54(s，6H，2×CH₃)，3.08(s，2H，CH₂)，3.91～3.96(m，6H，2×OCH₃)，6.98～7.40(m，7H，C₆H₂，C₆H₄，噻唑环5-H)，9.43(s，1H，N＝CH)。

实施例5 4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例1的方法，4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与2-羟基苯甲醛反应8.0h；得到4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基苄亚氨基)噻唑；产率71.9％，熔点162～164℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.54(s，6H，2×CH₃)，3.10(s，2H，CH₂)，3.97(s，3H，CH₃)，6.97～7.06(m，2H，C₆H₄)，7.24(s，1H，噻唑环5-H)，7.34(s，2H，C₆H₂)，7.42～7.53(m，2H，C₆H₄)，9.29(s，1H，N＝CH)，12.33(s，1H，OH)。

实施例64-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基-5-溴苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例1的方法，4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与2-羟基-5-溴苯甲醛反应2.0h；得到4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基-5-溴苄亚氨基)噻唑；产率69.7％，熔点167～170℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.56(s，6H，2×CH₃)，3.10(s，2H，CH₂)，3.97(s，3H，CH₃)，6.57(d，J＝8.8Hz，1H，C₆H₃3-H)，7.27(s，1H，噻唑环5-H)，7.33(s，2H，C₆H₂)，7.51(dd，J＝8.8Hz，J＝2.4Hz，1H，C₆H₃4-H)，7.63(d，J＝2.4Hz，1H，C₆H₃6-H)，9.24(s，1H，N＝CH)，12.33(s，1H，OH)。

实施例7 4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基-3，5-二溴苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例1的方法，4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与2-羟基-3，5-二溴苯甲醛反应2.5h；得到4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基-3，5-二溴苄亚氨基)噻唑；产率很低。熔点175～177℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.55(s，6H，2×CH₃)，3.10(s，2H，CH₂)，3.97(s，3H，CH₃)，7.26(s，1H，噻唑环5-H)，7.31，7.33(2×s，2H，C₆H₂)，7.63(s，1H，C₆H₂6-H)，7.81(s，1H，C₆H₂4-H)，9.27(s，1H，N＝CH)，13.30(s，1H，OH)。

实施例8 4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-硝基苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例1的方法，4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与2-硝基苯甲醛反应2.5h；得到4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-硝基苄亚氨基)噻唑；产率68.5％，熔点161～163℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.55(s，6H，2×CH₃)，3.09(s，2H，CH₂)，3.96(s，3H，CH₃)，7.31(s，1H，噻唑环5-H)，7.37(s，2H，C₆H₂)，7.69(t，J＝7.6Hz，1H，C₆H₄5-H)，7.77(t，J＝7.6Hz，1H，C₆H₄4-H)，8.11(d，J＝8.0Hz，1H，C₆H₄6-H)，8.44(d，J＝7.2Hz，1H，C₆H₄3-H)，9.56(s，1H，N＝CH)。

实施例9 4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(3-硝基苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例1的方法，4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与3-硝基苯甲醛反应1.0h；得到4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(3-硝基苄亚氨基)噻唑；产率83.1％，熔点199～201℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.55(s，6H，2×CH₃)，3.09(s，2H，CH₂)，3.97(s，3H，CH₃)，7.32(s，1H，噻唑环5-H)，7.36(s，2H，C₆H₂)，7.70(t，J＝8.0Hz，1H，C₆H₄5-H)，8.35(d，J＝8.0Hz，1H，C₆H₄6-H)，8.39(d，J＝8.0Hz，1H，C₆H₄4-H)，8.85(s，1H，C₆H₄2-H)，9.22(s，1H，N＝CH)。

实施例10 4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-硝基苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例1的方法，4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与4-硝基苯甲醛反应2.0h；得到4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-硝基苄亚氨基)噻唑；产率91.7％，熔点191～193℃；¹HNMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.55(s，6H，2×CH₃)，3.09(s，2H，CH₂)，3.97(s，3H，CH₃)，7.34(s，1H，噻唑环5-H)，7.36(s，2H，C₆H₂)，8.18(d，J＝8.8Hz，2H，C₆H₄2，6-H)，8.35(d，J＝8.8Hz，2H，C₆H₄3，5-H)，9.22(s，1H，N＝CH)。

实施例11 4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-氟苄亚氨基)噻唑的制备

(1)2-溴-1-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮的制备

0.02mol 1-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮、80ml乙醇，搅拌回流，分批加入0.04mol溴化铜，反应约2h，反应液趁热过滤，蒸馏回收溶剂，乙酸乙酯溶解，稀酸洗涤，过滤，滤液经水洗，分液，干燥，乙醇重结晶得2-溴-1-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮，产率72.0％，熔点98～100℃。

(2)4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑的制备

0.013mol 2-溴-1-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮、0.013mol硫脲、60ml乙醇，加热搅拌，反应约1h，反应液冷却析出固体，过滤，滤饼氨水中和，得4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑，产率90.2％，熔点138～140℃。

(3)4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-氟苄亚氨基)噻唑的制备

4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与4-氟苯甲醛按1∶1.1摩尔比投料，甲苯作溶剂，哌啶催化反应0.5h；得到4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-氟苄亚氨基)噻唑；产率79.5％，熔点131～132℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.47(t，J＝7.2Hz，3H，CH₃)，1.54(s，6H，2×CH₃)，3.07(s，2H，CH₂)，4.22(q，J＝7.2Hz，2H，CH₂)，7.16～7.22(m，3H，C₆H₄2，6-H，噻唑环5-H)，7.35，7.36(2×s，2H，C₆H₂)，8.00～8.04(m，2H，C₆H₄3，5-H)，9.04(s，1H，N＝CH)。

实施例12 4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-二甲氨基苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例11的方法，4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与二甲氨基苯甲醛反应7.5h；得到4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(4-二甲氨基苄亚氨基)噻唑；产率42.8％，熔点187～189℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.46(t，J＝6.8Hz，3H，CH₃)，1.54(s，6H，2×CH₃)，3.06(s，2H，CH₂)，3.10(s，6H，2×CH₃)，4.22(q，J＝7.2Hz，2H，CH₂)，6.74(d，J＝9.2Hz，2H，C₆H₄3，5-H)，7.08(s，1H，噻唑环5-H)，7.35，7.39(2×s，2H，C₆H₂)，7.89(d，J＝9.2Hz，2H，C₆H₄2，6-H)，8.82(s，1H，N＝CH)。

实施例13 4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例11的方法，4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与2-羟基苯甲醛反应8.0h；得到4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基苄亚氨基)噻唑；产率35.5％，熔点145～147℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.48(t，J＝7.2Hz，3H，CH₃)，1.55(s，6H，2×CH₃)，3.08(s，2H，CH₂)，4.23(q，J＝7.2Hz，2H，CH₂)，6.99～7.05(m，2H，C₆H₄)，7.23(s，1H，噻唑环5-H)，7.34(s，2H，C₆H₂)，7.45～7.52(m，2H，C₆H₄)，9.29(s，1H，N＝CH)，12.35(s，1H，OH)。

实施例14 4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基-3，5-二溴苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例11的方法，4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与2-羟基-3，5-二溴苯甲醛反应4.5h；得到4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基-3，5-二溴苄亚氨基)噻唑；产率12.7％，熔点187～189℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.49(t，J＝7.2Hz，3H，CH₃)，1.56(s，6H，2×CH₃)，3.08(s，2H，CH₂)，4.23(q，J＝7.2Hz，2H，CH₂)，7.26(s，1H，噻唑环5-H)，7.30，7.32(2×s，2H，C₆H₂)，7.62(s，1H，C₆H₂6-H)，7.81(s，1H，C₆H₂4-H)，9.26(s，1H，N＝CH)，13.32(s，1H，OH)。

实施例15 4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基-3，5-二碘苄亚氨基)噻唑的制备

按实施例11的方法，4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与2-羟基-3，5-二碘苯甲醛反应1.0h；得到4-(7-乙氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-羟基-3，5-二碘苄亚氨基)噻唑；产率97.5％，熔点197～199℃；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)，δ：1.48(t，J＝6.8Hz，3H，CH₃)，1.55(s，6H，2×CH₃)，3.08(s，2H，CH₂)，4.23(q，J＝6.8Hz，2H，CH₂)，7.29(s，1H，噻唑环5-H)，7.31，7.32(2×s，2H，C₆H₂)，7.80(d，J＝2.4Hz，1H，C₆H₂6-H)，8.16(d，J＝2.0Hz，1H，C₆H₂4-H)，9.18(s，1H，N＝CH)，13.54(s，1H，OH)。

实施例16 4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑的抗肿瘤活性

1.抗肿瘤活性原理

MTT法生物活性测试又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT分析法以活细胞代谢物还原剂噻唑蓝[3-(4，5-二甲基-2-噻唑)-2，5-二苯基溴化四氮唑；3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenyltetrazolium bromide，MTT]为基础。MTT是一种能接受氢原子的染料。活细胞线粒体中与NADP相关的脱氢酶在细胞内可将黄色的MTT转化成不溶性的蓝紫色的甲瓒(formazon)，而死细胞则无此功能。用DMSO溶解formazon后，在一定波长下用酶标仪测定光密度值，既可定量测出细胞的存活率。根据光密度值的变化观察样品对肿瘤细胞的抑制作用。

2.抗肿瘤活性实验

试样：4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑。

细胞系：***细胞系Hela；肝癌细胞系Bel 7402和肺腺癌细胞系A549(中南大学湘雅医学院细胞库提供)。

试剂：噻唑蓝(MTT)、RPMI 1640培养液、新生牛血清、抗生素(美国英杰生命技术公司)；胰酶(美国AMRESCO公司)；96孔培养板(美国英杰生命技术公司)；二甲基亚砜(美国Sigma公司)。

仪器：HFsafe-1500型超净工作台、HF151UV型CO₂培养箱(上海力申科学仪器有限公司)；XSP-15C型倒置显微镜(上海长方光学仪器有限公司)；Multiskan MK3型酶标仪(美国Thermo公司)；超纯水制备仪(美国Milli-Q公司)。

实验操作：试样对于Hela细胞、Bel 7402细胞和A549细胞的测试。每种细胞的实验操作过程相同，一次实验过程中，每种试样设置5个浓度梯度(0.025μmol/mL、0.05μmol/mL、0.1μmol/mL、0.25μmol/mL和0.5μmol/mL)，每个浓度四个平行试样，每组实验平行3次，并通过空白组对照得出结论。酶标仪检测各孔OD值，检测波长570nm。

3.抗肿瘤活性评价

1)细胞抑制率计算：

2)IC₅₀值计算

试样浓度对数值与细胞抑制率线性回归，利用软件计算试样对细胞的半数抑制浓度IC₅₀值。优选化合物4-(7-甲氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-(2-硝基苄亚氨基)噻唑对于Hela细胞、Bel 7402细胞和A549细胞的IC₅₀分别为0.118μmol/mL、0.071μmol/mL和0.095μmol/mL。

测试结果显示，4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑对于人***细胞(Hela细胞)、人肝癌细胞(Bel 7402细胞)和人肺腺癌细胞(A549细胞)具有良好的抑制活性，可用于制备抗肿瘤药物。

Claims

1.化学结构式I所示的4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑：

其中，X选自：2-氯、2-氟、2-羟基、2-甲氧基、2-乙氧基、2-硝基、3-二甲氨基、3-氯、3-溴、3-氟、3-甲基、3-乙基、3-三氟甲基、3-羟基、3-甲氧基、3-乙氧基、3-硝基、4-二甲氨基、4-氯、4-溴、4-氟、4-甲基、4-乙基、4-三氟甲基、4-羟基、4-甲氧基、4-乙氧基、4-硝基、2-氯-5-硝基、3-乙基-4-羟基、3，4-二甲氧基、2，4-二氯、2-羟基-5-溴、2-羟基-5-碘、2-羟基-5-氯、2，4-二氟、2-羟基-3，5二溴、2-羟基-3，5二碘、2-羟基-3，5二氯或2-羟基-3，5二氟；R选自：H，C₁～C₂烷基，C₃～C₄直链烷基或支链烷基。

2.权利要求1所述的4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑的制备方法，其制备包括如下步骤：

反应式中，R的定义如权利要求1所述；

(2)2-溴-1-(7-羟基/烷氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)乙酮、硫脲、乙醇，加热，搅拌反应1～2h，过滤，滤饼用浓氨水中和至碱性，制得4-(7-羟基/烷氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑；制备按如下反应式进行：

反应式中，R的定义如权利要求1所述；

(3)4-(7-羟基/烷氧基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基)-2-氨基噻唑与芳醛在甲苯中，哌啶催化反应制得4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑；制备按如下反应式进行：

反应式中，R和X的定义如权利要求1所述。

3.权利要求1所述的4-(苯并呋喃-5-基)-2-苄亚氨基噻唑在制备抗肿瘤药物中的应用。