CN101444589A - 一种分清五淋丸的质量标准及其检验方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于中药技术领域，具体说是一种分清五淋丸的质量标准及其检验方法，原分清五淋丸的质量标准只有显微鉴别和检查项，本发明进行各项试验摸索后，增加了大黄、栀子、黄柏、黄芩的薄层鉴别，并对该制剂进行了重金属及砷盐的考察，其测定结果低于常规限度，同时对处方中木通所含齐墩果酸和常春藤皂苷元进行了含量测定的试验摸索，对处方中木通所含齐墩果酸和常春藤皂苷元建立了高效液相含量测定方法，提高了质量标准，加强了该药的质量可控性，保证了患者服用的有效性，通过本发明增加的质量控制，结果满意，提高了原标准，使得产品质量更加可控，同时更利于产品工业化生产要求，有利于本产品的工业化生产的监控。
Description
技术领域：
本发明属于中药技术领域，具体说是涉及一种分清五淋丸的质量标准及其检验方法。
背景技术：
分清五淋丸是木通、车前子、黄芩、茯苓、猪苓、黄柏、大黄、萹蓄、瞿麦、知母、泽泻、栀子、甘草、滑石14味药组成的复方，收载于中国药典2005年版一部。原标准只收载有显微鉴别和检查项，按照药品注册管理办法中有关仿制产品提高质量标准的要求，参照中国药典2005年版一部相关品种项下和有关文献资料，进行各项试验摸索后，增加了大黄、栀子、黄柏、黄芩的薄层鉴别；并对该制剂进行了重金属及砷盐的考察，其测定结果低于常规限度，同时对处方中木通所含齐墩果酸和常春藤皂苷元进行了含量测定的试验摸索，结果满意，大大的提高了原标准，使得产品质量更加可控，同时更利于产品工业化生产要求。
发明内容：
本发明的目的是公开一种分清五淋丸的质量标准及其检验方法，对处方中木通所含齐墩果酸和常春藤皂苷元建立了高效液相含量测定方法，同时增加了处方中大黄、栀子、黄柏、黄芩的薄层鉴别，提高了质量标准，加强了该药的质量可控性，保证了患者服用的有效性，通过本发明增加的质量控制，有利于本产品的工业化生产的监控。
本发明的目的是由以下技术方案实现的：
一种分清五淋丸的质量标准及其检验方法，其特点在于：该方法中的鉴别方法是以下的一种或几种：
a、鉴别：
显微鉴别包括下列步骤：取分清五淋丸，置显微镜下观察：可见车前子、黄芩、茯苓、猪苓、黄柏、大黄、萹蓄、瞿麦、知母、泽泻、栀子、甘草的显微特征，
大黄的鉴别包括下列步骤：取分清五淋丸0.5～1g，研细，加甲醇20～40ml，浸泡1～2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10～20ml使溶解，再加盐酸1～2ml，加热回流30～40分钟，立即冷却，用***分2～4次振摇提取，每次20～30ml，合并***液，蒸干，残渣加三氯甲烷1～2ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1～0.2g，同法制成对照药材溶液。再取大黄酸对照品，加甲醇制成每1ml含1～1.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚30～60℃-甲酸乙酯-甲酸(15～20∶5～7∶1～1.4)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变为红色，阴性对照无对应斑点，
栀子的鉴别包括下列步骤：取分清五淋丸5～10g，研细，加40～70％甲醇50～100ml，超声处理40～60分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取栀子对照药材1～1.5g，同法制成对照药材溶液。再取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含4～6mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5～10∶5～10∶1～2∶1～2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5～10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，
黄柏的鉴别包括下列步骤：取分清五淋丸2～5g，研细，加甲醇25～50ml，加热回流30～40分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取黄柏对照药材10～20mg，加甲醇1～2ml，制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1～2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10～15∶6～15∶1～2∶1～2)为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，
黄芩的鉴别包括下列步骤：取分清五淋丸5～10g，研细，加乙酸乙酯-甲醇(3～6∶1～2)的混合溶液50～100ml，加热回流30～40分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5～10ml使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取黄芩对照药材1～1.5g，同法制成对照药材溶液。再取黄芩素、汉黄芩素对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5～1mg的对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各2～4μl及上述两种对照品溶液各1～2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10～15∶3～4.5∶1～1.5∶2～7.5)为展开剂，预饱和30～40分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱及对照药材色谱相同的位置上，显相同颜色的暗色斑点，
b含量测定：
齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量测定方法包括下列步骤：
色谱条件与***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸三乙胺80～95∶20～5∶0.02～0.5∶0.01～0.05为流动相；检测波长为210nm，理论板数按齐墩果酸峰计算应不低于2000；
对照品溶液的制备；精密称取齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品，加甲醇制成每1ml各含0.4～0.7mg的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备：取分清五淋丸，研细，取约10～15g，精密称定，加甲醇50～80ml，超声处理功率250W，频率50kHz30～40分钟，滤过，残渣用甲醇洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加水10～15ml溶解，用水饱和正丁醇萃取3～5次，每次20～30ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇20～30ml、盐酸2～4ml，加热水解4～6小时，水解物加水10～15ml，用三氯甲烷振摇提取2～4次，每次20～30ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至5～10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
分清五淋丸每1g含木通以齐墩果酸(C30H48O3)和常春藤皂苷元(C30H48O4)的总量计，不得少于0.20mg；
该方法中的质量标准鉴别a及含量测定b方法是以下方法的一种或几种：
a鉴别：
显微鉴别：取分清五淋丸，置显微镜下观察：不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4～6μm；菌丝黏结成团，大多无色；草酸钙方晶正八面体形，直径32～60μm；种皮内表皮细胞表面观类长方形，壁微波状，以数个细胞为一组，略作镶嵌状排列；韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细；纤维束鲜黄色，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞的壁木化增厚；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；草酸钙簇晶大，直径60～140μm；草酸钙针晶成束或散在，长26～110μm；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙簇晶，形成晶纤维，含晶细胞纵向成行；叶表皮细胞平周壁有角质线纹，气孔不等式，副卫细胞3个；上下表皮均可见栅栏组织；薄壁细胞类圆形，有椭园形纹孔，集成纹孔群；内皮层细胞垂周壁波状弯曲，较厚，木化，有稀疏细孔沟；种皮石细胞黄色或淡棕色，多破碎，完整着长多角形、长方形或不规则形，壁厚，有大的圆形纹孔，胞腔棕红色；
大黄的鉴别：取分清五淋丸0.5g，研细，加甲醇20ml，浸泡1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，加热回流30分钟，立即冷却，用***分2次振摇提取，每次20ml，合并***液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚30～60℃-甲酸乙酯-甲酸15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；
栀子的鉴别：取分清五淋丸5g，研细，加50％甲醇50ml，超声处理40分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取栀子对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水5∶5∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
黄柏的鉴别：取分清五淋丸2g，研细，加甲醇25ml，加热回流30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取黄柏对照药材50mg，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水10∶6∶1∶1为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
黄芩的鉴别：取分清五淋丸5g，研细，加乙酸乙酯-甲醇3∶1的混合溶液50ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，取上清液作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩素、汉黄芩素对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各2μl及上述两种对照品溶液各1μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸10∶3∶1∶2为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱及对照药材色谱相同的位置上，显相同颜色的暗色斑点；
b含量测定：齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量测定
照高效液相色谱法中国药典2005年版一部附录VID测定，色谱条件与***适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺87∶13∶0.04∶0.02为流动相；检测波长为210nm；理论板数按齐墩果酸峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备取分清五淋丸，研细，取约10g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理功率250W，频率50kHz30分钟，滤过，残渣用甲醇洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加水10ml溶解，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇20ml、盐酸2ml，加热水解4小时，水解物加水10ml，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
分清五淋丸每1g含木通以齐墩果酸(C30H48O3)和常春藤皂苷元(C30H48O4)的总量计，不得少于0.20mg。
本发明的有益效果：本发明通过显微鉴别车前子、黄芩、茯苓、猪苓、黄柏、大黄、萹蓄、瞿麦、知母、泽泻、栀子、甘草，采用薄层色谱法鉴别大黄、栀子、黄柏、黄芩，含量测定采用高效液相色谱法测定木通中齐墩果酸对照品和常春藤皂苷元，是提供分清五淋丸质量检验方法及标准，通过建立明确专属性强的鉴别及重现性、稳定性及精密度良好的含量测定方法，能够有效控制分清五淋丸的质量，使分清五淋丸质量达到稳定、可控、高效及安全，是对产品的投料要求及质量控制严格，克服现有技术的不足，提高产品的质量、疗效、生物利用度，产品质量高，能保证产品疗效，更好地满足医疗的需要。
附图说明：
图1是本发明的分清五淋丸中大黄紫外灯下鉴别图；
图2是本发明的分清五淋丸中大黄氨蒸气熏后鉴别图；
图3是本发明的分清五淋丸中栀子鉴别图；
图4是本发明的分清五淋丸中黄柏鉴别图；
图5是本发明的分清五淋丸中黄芩鉴别图；
图6是本发明的齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品的高效液相色谱图；
图7是本发明的分清五淋丸中样品的高效液相色谱图；
图8是本发明的分清五淋丸阴性对照溶液高效液相色谱图；
具体实施方式：
实施例1：
1、在分清五淋丸的定性鉴别的研究中，首先按中国药典2005版一部分清五淋丸标准，保留了显微鉴别项，同时设计对处方中木通、黄芩、茯苓、黄柏、大黄、知母、栀子、甘草进行定性鉴别，参考药典方法及文献报道方法，经反复试验摸索，结果木通、茯苓、知母、甘草分离效果依旧很差，有的甚至无法分离，阴性样品有干扰，大黄、栀子、黄柏、黄芩分离效果很好，阴性样品无干扰。
2、分清五淋丸在定量分析的设计中，因原标准中没有含量测定项，对木通进行了成分分析的实验。采用的高效液相色谱法对其中所含齐墩果酸对照品和常春藤皂苷元进行含量测定，经过对***适用性、线性回归、精密度、重现性、稳定性、回收率等试验考察，证明本检验方法，重现性好，能快速准确的检验药品质量。
【鉴别】
1、分清五淋丸的显微鉴别：
取分清五淋丸研细，置显微镜下观察：不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4～6μm。菌丝黏结成团，大多无色；草酸钙方晶正八面体形，直径32～60μm。种皮内表皮细胞表面观类长方形，壁微波状，以数个细胞为一组，略作镶嵌状排列。韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细。纤维束鲜黄色，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞的壁木化增厚。纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。草酸钙簇晶大，直径60～140μm。草酸钙针晶成束或散在，长26～110μm。纤维束周围薄壁细胞含草酸钙簇晶，形成晶纤维，含晶细胞纵向成行。叶表皮细胞平周壁有角质线纹，气孔不等式，副卫细胞3个；上下表皮均可见栅栏组织。薄壁细胞类圆形，有椭园形纹孔，集成纹孔群；内皮层细胞垂周壁波状弯曲，较厚，木化，有稀疏细孔沟。种皮石细胞黄色或淡棕色，多破碎，完整着长多角形、长方形或不规则形，壁厚，有大的圆形纹孔，胞腔棕红色。
2、大黄的薄层鉴别：
供试品溶液的制备：取分清五淋丸0.5g，研细，加甲醇20ml，浸泡1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，加热回流30分钟，立即冷却，用***分2次振摇提取，每次20ml，合并***液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，即得。
阴性对照溶液制备：取缺大黄的阴性样品0.5g，加甲醇20ml，浸泡1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，加热回流30分钟，立即冷却，用***分2次振摇提取，每次20ml，合并***液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，即得。
对照药材溶液的制备：取大黄对照药材0.1g，研细，加甲醇20ml，浸泡1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，加热回流30分钟，立即冷却，用***分2次振摇提取，每次20ml，合并***液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，即得。
对照品溶液的制备：取大黄酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，即得。
试验方法：照薄层色谱法试验(中国药典2005年版一部附录VI B)，吸取上述四种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；而阴性对照溶液无斑点出现，结果不干扰黄芪的鉴别，见图1。
3、栀子的鉴别：
供试品溶液的制备：取分清五淋丸5g，研细，加50％甲醇50ml，超声处理40分钟，滤过，即得。
阴性对照溶液制备：取缺栀子的阴性样品5g，研细，加50％甲醇50ml，超声处理40分钟，滤过，即得。
对照药材溶液的制备：取栀子对照药材1g，加50％甲醇50ml，超声处理40分钟，滤过，即得。
对照品溶液的制备：取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含4mg的溶液，即得。
试验方法：照薄层色谱法试验(中国药典2005年版一部附录VI B)，吸取上述四种溶液各2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5∶5∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；而阴性对照溶液无斑点出现，结果不干扰栀子的鉴别，见图2。
4、黄柏的鉴别：
供试品溶液的制备：取分清五淋丸2g，研细，加甲醇25ml，加热回流30分钟，滤过，即得。
阴性对照溶液的制备：取缺黄柏的阴性样品2g，研细，加甲醇25ml，加热回流30分钟，滤过，即得。
对照药材溶液的制备：取黄柏对照药材50mg，加甲醇5ml，加热回流30分钟，滤过，即得。
对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
试验方法：照薄层色谱法试验(中国药典2005年版一部附录VI B)，吸取上述四种溶液各1μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶6∶1∶1)为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；而阴性对照溶液无斑点出现，结果不干扰黄柏的鉴别，见图3。
5、黄芩的鉴别：
供试品溶液的制备：取分清五淋丸5g，研细，加乙酸乙酯-甲醇3∶1的混合溶液50ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，即得。
阴性对照溶液的制备：取缺黄芩的阴性样品5g，研细，加乙酸乙酯-甲醇3∶1的混合溶液50ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，即得。
对照药材溶液的制备：取黄芩对照药材1g，加乙酸乙酯-甲醇3∶1的混合溶液50ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，即得。
对照品溶液的制备：取黄芩素、汉黄芩素对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的对照品溶液，即得。
试验方法：照薄层色谱法试验(中国药典2005年版一部附录VI B)，吸取供试品溶液、对照药材溶液各2μl及上述四种对照品溶液各1μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸10∶3∶1∶2为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱及对照药材色谱相同的位置上，显相同颜色的暗色斑点；而阴性对照溶液无斑点出现，结果不干扰黄芩的鉴别，见图4。
【含量测定】齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量测定
照高效液相色谱法中国药典2005年版一部附录VI D测定，色谱条件与***适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺87∶13∶0.04∶0.02为流动相；检测波长为210nm；理论板数按齐墩果酸峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备取分清五淋丸，研细，取约10g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理功率250W，频率50kHz30分钟，滤过，残渣用甲醇洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加水10ml溶解，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇20ml、盐酸2ml，加热水解4小时，水解物加水10ml，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
分清五淋丸每1g含木通以齐墩果酸(C30H48O3)和常春藤皂苷元(C30H48O4)的总量计，不得少于0.20mg。
含量测定：
木通收载于《中国药典》2005年版一部，为木通科植物木通Akebia quinata(Thunb.)Decne.、三叶木通Akebia trifoliata(Thunb.)Koidz.或白木通Akebia trifoliata(Thunb.)Koidz.var.australis(Diels.)Rehd.的干燥藤茎。具有清心火，利小便，通经下乳之功效。用于治疗胸中烦热，喉痹咽痛，尿赤，五淋，水肿，周身挛痛，经闭乳少等症，为方中主药。据文献报道，木通主要含有三萜皂苷类化学成分[4]。，其皂苷元齐墩果酸、常春藤皂苷元是主要活性成分，因此，我们参照《中国药典》2005年版一部等文献资料，对处方中木通所含齐墩果酸和常春藤皂苷元进行了高效液相色谱法含量测定的试验摸索，结果满意，可作为该药内在质量控制指标。
1.样品来源：由内蒙古包头中药有限责任公司提供(批号：20050408、20050410、20050412、20050503、20050510、20050516、20050528、20050601、20050602、20050603)。
2.仪器与试药：美国Alltech高效液相色谱仪，M626输液泵，UVIS-201型检测器；齐墩果酸和常春藤皂苷元对照品由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯试剂；冰醋酸，三乙胺均为分析纯试剂；水为超纯水。
3.色谱条件：Alltech RP-C18色谱柱(5μm，4.6mm×250mm)；流动相：甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(87∶13∶0.04∶0.02)；检测波长：210nm；流速：1.0ml/min；柱温：室温。
4.试验条件的选择：
4.1 高效液相色谱条件的选择
4.1.1 检测波长的选择：取对照品溶液，在400∽190nm波长范围内进行光谱扫描，结果齐墩果酸、常春藤皂苷元在205nm波长处都有最大吸收，但由于205nm处溶剂峰干扰较大，经试验选用210nm为测定波长，以减少溶剂对皂苷元测定的干扰。
4.1.2 流动相的选择：参考《中国药典》2005年版一部木通项下：以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(87∶13∶0.04∶0.02)为流动相，其中冰醋酸可产生弱酸性环境，有利于样品中酸性物质的分离，既可使齐墩果酸与常春藤皂苷元得到良好的分离，又能与其他成分达到基线分离；三乙胺可良好地改善峰形，故选择该流动相。
4.2 样品提取条件的选择
分别考察了索氏提取、加热回流提取、超声提取等三种方法对含量的影响，结果见表1。
表1 不同提取条件的测定结果
索氏提取4小时，超声提取0.5小时，回流提取1小时的结果基本一致，而超声提取方法简单易行，且提取副产物少，所以选用超声提取法。
5.阴性对照试验：
取按处方量比例以相同工艺制备的阴性对照溶液(缺木通)，同法测定。测得结果为：阴性对照溶液的HPLC色谱中在与齐墩果酸和常春藤皂苷元对照品色谱中相对应的保留时间处无色谱峰出现。表明处方中其他组分对齐墩果酸和常春藤皂苷元的测定无干扰。对照品溶液、样品溶液、阴性对照溶液HPLC图谱见图5-图7。
6.含量测定：
6.1 对照品溶液的制备：精密称取齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，即得。
6.2 供试品溶液的制备：取分清五淋丸，研细，取约10g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，滤过，残渣用甲醇洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加水10ml溶解，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇20ml，盐酸2ml，加热水解4小时，水解物加水10ml，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并定量转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
6.3 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
7.方法学考察
7.1 线性关系考察：分别精密称取齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液。精密吸取该溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，置5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密吸取10μl分别注入液相色谱仪，测定峰面积值。结果对照品峰面积Y与其进样量X(μg)之间呈良好的线性关系，线性范围及回归方程见表2，回归曲线见图8。
表2 标准曲线结果
7.2 精密度试验：精密吸取供试品(批号：20050601)溶液，连续进样5次，记录齐墩果酸、常春藤皂苷元峰面积积分值。结果见表3。
表3 精密度试验结果
结果表明：本法精密度良好。
7.3 稳定性试验：精密吸取供试品(批号：20050601)溶液，分别于0、4、8、12小时进样，记录齐墩果酸、常春藤皂苷元峰面积积分值。结果见表4。
表4 稳定性试验结果
结果表明，本法在12小时内测定方法稳定。
7.4 重复性试验：取供试品(批号：20050601)5份，分别按[含量测定]项下方法操作并测定含量，齐墩果酸和常春藤皂苷元总含量的平均值为0.432mg/g，RSD为1.20％。结果见表5。
表5 重复性试验结果(n＝5)
结果表明，本法重复性较好。
7.5 回收率试验：采用加样回收法，精密称取已知齐墩果酸和常春藤皂苷元总含量的供试品(批号：20050601)5份，分别精密加入齐墩果酸和常春藤皂苷元对照品，按[含量测定]方法测定，计算回收率，结果见表6。
表6 回收率试验结果(n＝5)
结果表明回收率均在95％～105％以内，符合方法学考察要求
7.6 样品含量测定：按上述[含量测定]项下方法操作，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。结果见表7。
表7 含量测定结果(n＝2)
8.木通药材中齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量测定：取药材粉末(过四号筛)2g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，滤过，残渣用甲醇洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加水10ml溶解，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇20ml、盐酸2ml，加热水解4小时，水解物加水10ml，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并定量转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，按【含量测定】方法进行测定。结果见表8。
表8 木通药材含量测定结果
药材木通中齐墩果酸和常春藤皂苷元总含量为0.40％，十批样品中齐墩果酸和常春藤皂苷元总含量均高于0.2mg/g，转移率约为98.77％。参照《中国药典》2005年版一部“木通”项下齐墩果酸和常春藤皂苷元的总含量限度及市售木通药材所含齐墩果酸和常春藤皂苷元的总含量的不同，分清五淋丸含木通以齐墩果酸(C30H48O3)和常春藤皂苷元(C30H48O4)的总量计，暂定为每1g不得少于0.2mg。
Claims (2)
1、一种分清五淋丸的质量标准及其检验方法，其特征在于：该方法中的质量标准a鉴别及b含量测定方法是以下方法的一种或几种：
a 鉴别：
显微鉴别：取分清五淋丸，置显微镜下观察：可见车前子、黄芩、茯苓、猪苓、黄柏、大黄、萹蓄、瞿麦、知母、泽泻、栀子、甘草的显微特征；
大黄的鉴别包括下列步骤：取分清五淋丸0.5～1g，研细，加甲醇20～40ml，浸泡1～2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10～20ml使溶解，再加盐酸1～2ml，加热回流30～40分钟，立即冷却，用***分2～4次振摇提取，每次20～30ml，合并***液，蒸干，残渣加三氯甲烷1～2ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1～0.2g，同法制成对照药材溶液；再取大黄酸对照品，加甲醇制成每1ml含1～1.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5～10μl，分别点于硅胶薄层板上，以石油醚30～60℃-甲酸乙酯-甲酸15～20∶5～7∶1～1.4的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变为红色，阴性对照无对应斑点；
栀子的鉴别包括下列步骤：取分清五淋丸5～10g，研细，加40～70％甲醇50～100ml，超声处理40～60分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取栀子对照药材1～1.5g，同法制成对照药材溶液；再取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含4～6mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2～5μl，分别点于同一硅胶薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水5～10∶5～10∶1～2∶1～2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5～10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
黄柏的鉴别包括下列步骤：取分清五淋丸2～5g，研细，加甲醇25～50ml，加热回流30～40分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取黄柏对照药材10～20mg，加甲醇1～2ml，制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1～2μl，分别点于同一硅胶薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水10～15∶6～15∶1～2∶1～2为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
黄芩的鉴别包括下列步骤：取分清五淋丸5～10g，研细，加乙酸乙酯-甲醇3～6∶1～2的混合溶液50～100ml，加热回流30～40分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5～10ml使溶解，取上清液作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1～1.5g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩素、汉黄芩素对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5～1mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各2～4μl及上述两种对照品溶液各1～2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸10～15∶3～4.5∶1～1.5∶2～7.5为展开剂，预饱和30～40分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱及对照药材色谱相同的位置上，显相同颜色的暗色斑点；
b 含量测定：
齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量测定方法包括下列步骤：
色谱条件与***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺80～95∶20～5∶0.02～0.5∶0.01～0.05为流动相；检测波长为210nm，理论板数按齐墩果酸峰计算应不低于2000；
对照品溶液的制备：精密称取齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品，加甲醇制成每1ml各含0.4～0.7mg的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备：取分清五淋丸，研细，取约10～15g，精密称定，加甲醇50～80ml，超声处理功率250W，频率50kHz30～40分钟，滤过，残渣用甲醇洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加水10～15ml溶解，用水饱和正丁醇萃取3～5次，每次20～30ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇20～30ml、盐酸2～4ml，加热水解4～6小时，水解物加水10～15ml，用三氯甲烷振摇提取2～4次，每次20～30ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至5～10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
分清五淋丸每1g含木通以齐墩果酸(C30H48O3)和常春藤皂苷元(C30H48O4)的总量计，不得少于0.20mg。
2、根据权利要求1所述一种分清五淋丸的质量检验方法，其特征在于：该方法中的a鉴别方法和b含量测定是以下方法的一种或几种：
a 鉴别：
显微鉴别：取分清五淋丸，置显微镜下观察：不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4～6μm；菌丝黏结成团，大多无色；草酸钙方晶正八面体形，直径32～60μm；种皮内表皮细胞表面观类长方形，壁微波状，以数个细胞为一组，略作镶嵌状排列；韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细；纤维束鲜黄色，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞的壁木化增厚；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；草酸钙簇晶大，直径60～140μm；草酸钙针晶成束或散在，长26～110μm；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙簇晶，形成晶纤维，含晶细胞纵向成行；叶表皮细胞平周壁有角质线纹，气孔不等式，副卫细胞3个；上下表皮均可见栅栏组织；薄壁细胞类圆形，有椭园形纹孔，集成纹孔群；内皮层细胞垂周壁波状弯曲，较厚，木化，有稀疏细孔沟；种皮石细胞黄色或淡棕色，多破碎，完整着长多角形、长方形或不规则形，壁厚，有大的圆形纹孔，胞腔棕红色；
大黄的鉴别：取分清五淋丸0.5g，研细，加甲醇20ml，浸泡1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，加热回流30分钟，立即冷却，用***分2次振摇提取，每次20ml，合并***液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；再取大黄酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚30～60℃-甲酸乙酯-甲酸15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；
栀子的鉴别：取分清五淋丸5g，研细，加50％甲醇50ml，超声处理40分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取栀子对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水5∶5∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
黄柏的鉴别：取分清五淋丸2g，研细，加甲醇25ml，加热回流30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取黄柏对照药材50mg，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水10∶6∶1∶1为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
黄芩的鉴别：取分清五淋丸5g，研细，加乙酸乙酯-甲醇3∶1的混合溶液50ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，取上清液作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩素、汉黄芩素对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各2μl及上述两种对照品溶液各1μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸10∶3∶1∶2为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱及对照药材色谱相同的位置上，显相同颜色的暗色斑点；
b 含量测定：齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量测定
照高效液相色谱法中国药典2005年版一部附录VI D测定，色谱条件与***适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺87∶13∶0.04∶0.02为流动相；检测波长为210nm；理论板数按齐墩果酸峰计算应不低于2000；
对照品溶液的制备：精密称取齐墩果酸对照品、常春藤皂苷元对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备：取分清五淋丸，研细，取约10g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理功率250W，频率50kHz30分钟，滤过，残渣用甲醇洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加水10ml溶解，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇20ml、盐酸2ml，加热水解4小时，水解物加水10ml，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
分清五淋丸每1g含木通以齐墩果酸(C30H48O3)和常春藤皂苷元(C30H48O4)的总量计，不得少于0.20mg。
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|---|---|
| CN (1) | CN101444589A (zh) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102520108A (zh) * | 2011-11-21 | 2012-06-27 | 浙江国镜药业有限公司 | 一种复方鱼腥草合剂的薄层色谱的质量检测方法 |
| CN102707010A (zh) * | 2012-06-29 | 2012-10-03 | 天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂 | 一种中药制剂胎产金丸的质量检测方法 |
| CN103175938A (zh) * | 2013-04-01 | 2013-06-26 | 山西振东开元制药有限公司 | 一种治疗咳嗽药物的质量控制方法 |
| CN103424501A (zh) * | 2013-08-20 | 2013-12-04 | 广西迪泰制药有限公司 | 一种中药痔特佳制剂的质量控制方法 |
| CN103705818A (zh) * | 2014-01-16 | 2014-04-09 | 张云刚 | 一种治疗***的中药 |
| CN104274580A (zh) * | 2013-07-04 | 2015-01-14 | 河北以岭医药研究院有限公司 | 一种中药组合物及其鉴别方法 |
| CN105548452A (zh) * | 2016-02-05 | 2016-05-04 | 四川德成动物保健品有限公司 | 清瘟败毒散中栀子的薄层色谱检测方法 |
| CN106501442A (zh) * | 2016-12-13 | 2017-03-15 | 佛山科学技术学院 | 一种芩黄清肺散的质量检测方法 |
| CN110455976A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-11-15 | 广西壮族自治区药用植物园 | 一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法 |
-
2008
- 2008-07-11 CN CNA2008101377211A patent/CN101444589A/zh active Pending
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102520108B (zh) * | 2011-11-21 | 2014-03-12 | 浙江国镜药业有限公司 | 一种复方鱼腥草合剂的薄层色谱检测方法 |
| CN102520108A (zh) * | 2011-11-21 | 2012-06-27 | 浙江国镜药业有限公司 | 一种复方鱼腥草合剂的薄层色谱的质量检测方法 |
| CN102707010A (zh) * | 2012-06-29 | 2012-10-03 | 天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂 | 一种中药制剂胎产金丸的质量检测方法 |
| CN102707010B (zh) * | 2012-06-29 | 2014-03-26 | 天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂 | 一种中药制剂胎产金丸的检测方法 |
| CN103175938A (zh) * | 2013-04-01 | 2013-06-26 | 山西振东开元制药有限公司 | 一种治疗咳嗽药物的质量控制方法 |
| CN103175938B (zh) * | 2013-04-01 | 2014-10-29 | 山西振东开元制药有限公司 | 一种治疗咳嗽药物的检测方法 |
| CN104274580A (zh) * | 2013-07-04 | 2015-01-14 | 河北以岭医药研究院有限公司 | 一种中药组合物及其鉴别方法 |
| CN103424501A (zh) * | 2013-08-20 | 2013-12-04 | 广西迪泰制药有限公司 | 一种中药痔特佳制剂的质量控制方法 |
| CN103705818A (zh) * | 2014-01-16 | 2014-04-09 | 张云刚 | 一种治疗***的中药 |
| CN103705818B (zh) * | 2014-01-16 | 2016-03-16 | 张云刚 | 一种治疗***的中药 |
| CN105548452A (zh) * | 2016-02-05 | 2016-05-04 | 四川德成动物保健品有限公司 | 清瘟败毒散中栀子的薄层色谱检测方法 |
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