CN101356952A

CN101356952A - 朴菇多糖粉在动物生产中的应用

Info

Publication number: CN101356952A
Application number: CNA2007101198950A
Authority: CN
Inventors: 伍松陵; 李爱科; 程树峰; 张晓琳; 唐芳; 郝淑红
Original assignee: Academy of State Administration of Grain
Current assignee: Academy of State Administration of Grain
Priority date: 2007-08-02
Filing date: 2007-08-02
Publication date: 2009-02-04
Anticipated expiration: 2027-08-02
Also published as: CN101356952B

Abstract

本发明涉及朴菇多糖粉在动物生产中的应用，属微生物制造领域。朴菇多糖粉，以金针菇Flammulina velutipes(Fr.)Sing.As5.632作为生产菌种，采用下述发酵培养基配方，进行液体深层发酵：每升培养基配方如下：麸皮20g、玉米5g、蔗糖10g、豆粉50g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g，加水定容至1升；接种量为5－10％，培养基体积占发酵罐体积的60－70％，发酵温度为22－25℃，通气量为1∶0.04－1.0，经摇瓶、液体种子罐、液体发酵罐逐级放大，每级发酵时间为72－120小时；发酵后发酵液经过滤、进行浓缩，浓缩液与过滤湿菌丝体进行干燥，粉碎。本发明生产的朴菇多糖粉，可广泛应用饲料行业，能显著提高畜禽免疫功能，提高抗病力，可减少抗生素用量，无任何毒副作用，同时能促进动物生长，降低死亡率。

Description

朴菇多糖粉在动物生产中的应用

技术领域

本发明涉及朴菇多糖粉在动物生产中的应用，尤指一种工业化液体发酵工艺生产的朴菇多糖粉的发酵生产及其在动物生产中的应用，属微生物制造领域。

背景技术

随着全球经济一体化，食品安全已成为一个世界性的挑战和全球重要的公共卫生问题。动物源食品(肉、蛋、奶、水产及其制品)的安全是全世界关注的焦点，其中抗生素和化学药物残留问题是影响动物源食品安全的重要因素之一。长期使用抗生素会产生耐药性和环境污染等问题，动物养殖过分依赖于抗生素等药物，产生了许多问题，如动物饲用抗生素后导致药物残留，引起耐药菌株扩散，对动物、人和生态环境造成严重危害，引起动物菌群失调，抑制动物的免疫力，继发二次感染。同时使用的大量药物通过食物链被人体吸收，产生了不良的后果。残留问题不仅影响经济发展和社会稳定，还严重影响产品在国际间的贸易竞争。发达国家对饲料卫生安全、药残危害十分重视。早在1986年瑞士就开始限制部分抗生素用作饲料添加剂，欧盟将于2006年全面禁止在饲料中添加抗生素。美国、日本等国也不断加强对饲用抗生素的限制。

目前我国养殖生产面临的另一个主要问题是，动物疾病没有得到有效的预防和控制，以致不能最大限度地发挥动物品种和饲料的生产潜力。据统计，我国畜禽的死亡率在8～20％，远远高于世界平均水平。其中细菌及病毒性疾病是危害养殖业的大敌。近年来流行的猪、鸡的免疫抑制性病毒感染使得这一问题更加复杂化。以养猪生产为例，猪繁殖与呼吸道综合症(PRRS)病毒、猪II型圆环病毒等免疫抑制性病毒感染导致的断奶后多***衰竭综合症使得继发性的感染此起彼伏。马立克(MD)、传染性法氏囊(IBD)、鸡传染性贫血(CIA)等免疫抑制性病毒的普遍感染已成为影响养鸡生产的重要疾病。对于免疫抑制性病毒病，如何选择合适的药物治疗一直是令养殖业者头疼的问题，病毒性疾病的药物治疗也很难奏效，必须进行免疫接种加以预防。但在生产过程中，动物的免疫失败现象又时常发生，如何保证免疫成功是生产中必须考虑的问题。一直以来，人们普遍在饲料中添加抗生素以控制疾病发生，促进动物生长，但抗生素的滥用已引起细菌抗药性和残留问题。因此，抗生素替代品的研制开发将成为今后饲料行业发展的主流方向之一。而提高机体免疫力是对抗病毒性疾病的关键和根本。多糖作为一种生物非特异性免疫促进剂，现正为人们所关注。

发明内容

本发明要解决的首要技术问题是提供一种用工业化液体发酵工艺生产的朴菇多糖粉。

本发明要解决的第二个技术问题是提供适于大规模工业化生产的制造朴菇多糖粉液体发酵生产工艺。

本发明要解决的第三个技术问题是提供朴菇多糖粉在提高动物生产性能方面的应用。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种朴菇多糖粉，采用下述方法制备：以金针菇Flammulina velutipes(Fr.)Sing.As5.632(购于中国科学院微生物研究所)作为生产菌种，采用下述发酵培养基配方，进行液体深层发酵：

每升培养基配方如下：麸皮20g、玉米5g、蔗糖10g、豆粉50g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g)，加水定容至1升，(不用调pH值)；

接种量为5-10％，培养基体积占发酵罐体积的60-70％，发酵温度为22-25℃，通气量为1∶0.04-1.0，经摇瓶、液体种子罐、液体发酵罐逐级放大，每级发酵时间为72-120小时；

发酵后发酵液经过滤、将过滤液进行浓缩，浓缩液与过滤湿菌丝体进行干燥，粉碎。

一种含有朴菇多糖粉的产品，采用上述方法制备，在过滤液进行浓缩后，向浓缩液与过滤湿菌丝体中加入载体，进行干燥，粉碎后进行混粉。

所述载体为玉米芯细粉，80-100目，与浓缩液按1∶1(每1升浓缩液加入1千克载体)添加。

一种制造朴菇多糖粉液体发酵生产工艺，以金针菇Flammulina velutipes(Fr.)Sing.As5.632(购于中国科学院微生物研究所)作为生产菌种，采用下述发酵培养基配方，进行液体深层发酵：

每升培养基配方如下：麸皮20g、玉米5g、蔗糖10g、豆粉50g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g，不用调pH值，加水定容至1升；

接种量为5-10％，培养基体积占发酵罐体积的60-70％，发酵温度为22-25℃，通气量为1∶0.04-1.0，经摇瓶、液体种子罐、液体发酵罐逐级放大，每级发酵时间为72-120小时；发酵后发酵液经过滤、将过滤液进行浓缩，向浓缩液与过滤湿菌丝体中加入载体，进行干燥，粉碎。

所述发酵后发酵液的过滤为经板框过滤。

所述将过滤液进行浓缩，为用薄膜浓缩方法将过滤液浓缩为原体积的1/8至1/10。

朴菇多糖粉在提高动物生产性能方面的应用。所述动物为畜禽和水产动物。本发明通过大量动物实验首次证明，朴菇多糖粉能够有效促进动物生产，从而能够作为新型饲料添加剂。

本发明的有益效果是：(1)本发明的方法可显著提高朴菇多糖粉中多糖的含量；(2)生产工艺中所添加的载体为玉米芯，有益于在动物生产中的应用；(3)朴菇多糖粉在提高动物生产性能中和对动物免疫功能影响方面具有突出的效果；(4)生产的朴菇多糖粉，可广泛应用饲料行业，朴菇多糖粉作为新型绿色饲料添加剂能显著提高畜禽免疫功能，提高抗病力，可减少抗生素用量，无任何毒副作用，同时能促进动物生长，降低死亡率。

下面结合附图和具体实施方式作进一步说明，以使公众充分了解本发明的新颖性和创造性所在，并非对本发明的限定。凡依照本发明已公开内容所实施的任何技术特征的等同替换，均属于本发明的保护范围之内。

附图说明

图1为本发明的生产工艺流程图。

具体实施方式

实施例1：制备含有朴菇多糖粉的产品

金针菇Flammulina velutipes(Fr.)Sing.As5.632(购于中国科学院微生物研究所)作为生产菌种，采用下述配比的培养基，进行液体深层发酵。

接种量为5-10％，培养基体积占发酵罐体积的60-70％，发酵温度为22-25℃，通气量为1∶0.04-1.0，发酵时间为96-120小时，具体为：

(1)从斜面挑取菌种接种于摇瓶中，23-25℃，96-120小时；

(2)摇瓶放大到100L液体种子罐，23-25℃，72-96小时；

(3)100L液体种子罐放大到1000L液体发酵罐，23-25℃，72-96小时；

(4)1000L液体发酵罐放大到5000L液体发酵罐，23-25℃，72-96小时；

最终的发酵罐体积为5000L，最大装量为发酵罐体积的70％，发酵产物经板框过滤、将过滤液进行真空薄膜蒸发器浓缩，浓缩液体积为过滤液体积的1/10，浓缩液与过滤湿固体并加入载体(载体∶浓缩液＝1∶1，每1升浓缩液加入1千克载体)，混合后，进行热风循环干燥，粉碎至60-80目后在三维混粉器中进行混粉，并进行包装。

实施例2：朴菇多糖粉的急性毒性及遗传毒性检验报告

一.实验材料

1.朴菇多糖粉：为浅褐色粉末，采用实施例1的方法制备。

2.动物：清洁级ICR小鼠购自维通利华实验动物技术有限公司，合格证号为SCXK(京)2002-0003。化学试剂2-氨基芴(2-AF)、2，4，7.三硝基-9-芴酮、叠氮钠(NaN3)、丝裂霉素C(MMC)、1，8二羟基蒽醌，伊红购自北京化学试剂公司。环磷酰胺：山西普德药业有限公司产品，批号：20050604。

二.方法

1.小鼠急性毒性实验：采用一次最大限量法，体重18～22g清洁级健康ICR小鼠20只，雌雄各半。禁食16h后，按10g/kg体重经口给予受试物，连续观察2周。记录中毒症状及死亡情况。

2.Ames试验：选用经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门氏组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102四株实验菌株，采用平板掺入法，分加与不加S9混合液两种。受试物加热灭菌后，共设5个剂量组，分别为200，500，1000，2500，5000μg/皿(每皿给受试物量为0.1ml)。同时设空白对照、阳性对照(9一芴酮、2-AF、NaN3、MMC、1.8一二羟蒽醌)。每组均做3个平行皿。在37℃下培养48h，计数每皿回变菌落数，求出每组平均菌落数。当受试物回变菌落数超过自发回变的2倍以上并有剂量一反应关系时即可判定为阳性。

3.小鼠骨髓细胞微核试验：选用体重26～30g ICR小鼠50只，随机分为5组，每组10只且雌雄各半，剂量分为1250mg/kg，2500mg/kg，5000mg/kg体重，同时设溶剂对照组(水)和阳性对照组(环磷酰胺50mg/kg体重)。各组均采用2次经口给受试物，中间间隔24h，于第2次给受试物后6h处死动物，取一侧股骨制备骨髓涂片。Gimsa染色后镜检计数嗜多染红细胞中的微核发生率。采用Poinsson分布u检验进行统计分析。

4.小鼠***畸形试验：选体重25～29g雄性性成熟小鼠25只，随机分为5组，每组5只，设1250mg/kg，2500mg/kg，5000mg/kg体重3个剂量组，同时设溶剂对照组(水)和阳性对照组(环磷酰胺50mg/kg体重)。连续5d经口给予受试物，每天1次。均于首次给受试物后的第35天处死动物，取两侧副睾，制备***标本，伊红染色，高倍镜下检查每只动物的***形态，计数结构完整***1000个，数据经X 2进行统计分析。

三.结果

1.急性毒性实验：在14d的观察期内.动物的活动及体重增长正常，无一动物死亡。表明该受试物对雌雄小鼠经口半数致死量(LD50)均＞10g/kg体重。

2.Ames试验：结果见表1。该受试物对TA97、TA98、TA100、TA102四株试验菌株无论直接作用(-S9)或经代谢活化作用(+S9)均不引起自发回变数增加，也无剂量-效应关系，说明受试物剂量在200-5000μg/皿时无致突变性。

表1：朴菇多糖粉Ames试验结果

注：(1)9-芴酮(0.5μg/皿)，(2)2-氨基芴(20μg/皿)，(3)叠氮钠(1.5μg/皿)，(4)丝裂霉素C(4.0μg/皿)，(5)1，8二羟基蒽醌(50μg/皿)

3.小鼠骨髓细胞微核试验：由表2可见朴菇多糖粉1250mg/kg、2500mg/kg、5000mg/kg三个剂量组微核发生率均在正常范围内，经统计学处理与阴性对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，阳性对照组与阴性对照组比较差异显著(P＜0.01)。

表2：朴菇多糖粉对小鼠骨髓细胞微核发生率的影响(n＝5)

注：与阴性对照比：^*P＜0.01

4.小鼠***畸形试验：由表3可见，朴菇多糖粉3个剂量组的***畸形率均在正常范围内，经统计学处理与阴性对照组比较无显著差(P＞0.05)，阳性对照组与阴性对照组比较差异显著(P＜0.01)。

表3：朴菇多糖粉对小鼠***畸形发生率的影响

注：与阴性对照比：^*P＜0.05

四.结论：选择一次最大限量法、Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、***畸形试验观察了受试物的急性和遗传毒性。结果表明受试物朴菇多糖粉对雌雄小鼠经口半数致死量(LD50)均＞10g/kg体重。按急性毒性剂量分级标准属实际无毒级物质。无论加与不加代谢活化物S9，朴菇多糖粉对TA97、TA98、TA100、TA102菌株的回变菌落数均在正常范围内，并无剂量一反应关系；朴菇多糖粉各剂量组微核率、***畸形率与正常对照组比较，没有统计学差异。提示在体内外条件下，朴菇多糖粉均无致突变作用。因此，朴菇多糖粉在遗传毒性方面是安全的。

实施例3：朴菇多糖粉对仔猪生长性能及饲料转化率影响的研究

一.试验材料

1.朴菇多糖粉：实施例1方法制造，多糖净含量为10％。

2.喹乙醇：上海湘大新杨兽药公司提供，含量为50％。

3.实验动物：选用65头体重相近(平均体重为13.91kg)的断奶三元杂交仔猪(宁乡猪与杜洛克脑大约克的杂交猪)，根据体重随机分为4个处理，各处理雌、雄比例一致，每个处理3个重复(其中抗生素组为2个重复)，每个重复6头猪。组别为：

(1)处理1添加250ppm的朴菇多糖粉日粮(3、4、8号栏)

(2)处理2添加500ppm的朴菇多糖粉日粮(2、6、9号栏)

(3)处理3添加抗生素喹乙醇日粮(10、11号栏)

(4)处理4对照组日粮(对照组，1、5、7号栏)。

二.试验方法

1.饲养管理

试验前先测定各种饲料原料的常规营养成分，根据断奶仔猪的营养需求和生理特点，并参照NRC(1998)营养需要推荐量标准配制日粮。对照组猪饲喂不添加朴菇多糖或药物的基础日粮，按断奶仔猪管理方案进行饲养，每次饲料添加量以吃饱后槽内略有余料为度，自由饮水。试验开始前和试验期间，按猪场正常程序防疫、驱虫。试验时间为30天。

表4：试验用基础日粮及营养水平

2.生长性能指标和测定

分别于试验开始、结束时称量各组每头猪的体重，称重在早晨空腹状态下(断料12小时)进行，计算各组的平均日增重。试验开始后记录各处理每重复的采食量，计算出全期平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

三.结果与分析

1.生长性能指标的变化

表5：不同剂量朴菇多糖粉对断奶仔猪生长性能的影响

	250克/吨朴菇多糖，不加抗生素	500克/吨朴菇多糖，不加抗生素	不加朴菇多糖，加抗生素(喹乙醇)	不加朴菇多糖，不加抗生素
	250克/吨朴菇多糖，不加抗生素	500克/吨朴菇多糖，不加抗生素	不加朴菇多糖，加抗生素(喹乙醇)	不加朴菇多糖，不加抗生素	初始重Initial Weight(Kg)	14.13	15.53	12.10	14.90
末重Finish weight(Kg)	34.47	34.50	33.20	32.00	初始重Initial Weight(Kg)	14.13	15.53	12.10	14.90
末重Finish weight(Kg)	34.47	34.50	33.20	32.00	净增重(Kg)	20.33	18.97	19.9	18.3
平均日采食量ADFI(g)	1133	1100	1100	1000	净增重(Kg)	20.33	18.97	19.9	18.3
平均日采食量ADFI(g)	1133	1100	1100	1000	平均日增重ADG(g)	450	420	440	410
料重比F/G	2.49	2.58	2.30	2.64	平均日增重ADG(g)	450	420	440	410

由表5可见，加250克/吨多糖组的净增重、ADFI和ADG大于加抗生素组和不加多糖不加抗生素组；加500克/吨多糖组的净增重、ADFI和ADG大于不加多糖不加抗生素组；加250克/吨多糖组和加500克/吨多糖组的F/G小于不加多糖不加抗生素组，但大于加抗生素组。同时，朴菇多糖低剂量的效果优于高剂量，达到了抗生素喹乙醇组的生长性能，因此250ppm和500ppm朴菇多糖添加量没有显著差异。

四.结论

本研究结果表明，添加250克/吨朴菇多糖组可增加断奶仔猪日增重，提高饲料转化率，降低饲料成本。

实施例4：朴菇多糖粉对断奶仔猪外周血T淋巴细胞转化活性的影响

一.材料

1.朴菇多糖粉：同实施例3。

2.抗生素喹乙醇：同实施例3。

3.实验动物：选用72头体重相近(平均体重为14.2kg)的断奶三元杂交仔猪(杜洛克×长白×大约克)，随机分为4个实验组，各处理雌、雄比例一致，每个处理3个重复，每个重复6头猪。处理1为添加250ppm的朴菇多糖粉日粮，处理2为添加500ppm的朴菇多糖粉日粮，处理3为添加抗生素喹乙醇日粮，处理4为基础日粮。试验前先测定各种饲料原料的常规营养成分，根据断奶仔猪的营养需求和生理特点，并参照NRC(1998)营养需要推荐及饲养标准配制日粮。按断奶仔猪管理方案进行饲养，每次饲料添加量以吃饱后槽内略有余料为度，自由饮水。

二.方法：

1.样品采集

分别于试验开始后第14、28和42d从各处理随机选取6头试猪，无菌采集前腔静脉血样，肝素抗凝，用于测定淋巴细胞转化活性。

2.外周血T淋巴细胞转化活性测定

采用MTT法。将抗凝血样用Hanks’液稀释1倍，小心加在淋巴细胞分离液上层，3000r·min^-1离心20min，吸取中间云雾状淋巴细胞层，用无血清RPMI1640营养液洗2遍，1500r·min^-1离心15min。活细胞计数后，用RPMI1640培养液调整细胞浓度为2.5×10⁶个·mL-1，加入到96孔细胞培养板中，80μl/孔，每孔再加20μL ConA(80μg·mL^-1)，每个样品重复4孔，然后置于37℃、5％CO2培养箱中培养44h，每孔加MTT 20μL(用pH 7.4的PBS液配成5mg·mL^-1的溶液)，继续培养4h后，每孔加裂解液DMSO(分析纯)100μL，将细胞板置于微孔板震荡器上震荡5min使沉淀完全溶解，在酶联免疫仪上检测570nm处的吸光(OD570)值，作为表示淋巴细胞转化活性的指标。

计算4孔平均值和标准差，用SPSS软件统计分析，比较淋巴细胞转化情况。试验组OD值显著高于对照组，表明中药显著促进淋巴细胞转化；反之则表明显著抑制淋巴细胞转化。

三.结果与分析

表6：不同剂量朴菇多糖粉对断奶仔猪外周血T淋巴细胞转化活性的影响(OD570)

注：同行数据标注不同字母者表示差异显著(P＜0.05)。

由表6可见，D14和D28时，250ppm和500ppm朴菇多糖粉组的OD570均高于喹乙醇组和基础日粮组(P＞0.05)；D42时，250ppm朴菇多糖粉组的OD570显著高于喹乙醇组(P＜0.05)、高于500ppm朴菇多糖粉组(P＞0.05)，500ppm朴菇多糖粉组的OD570也高于喹乙醇组和基础日粮组(P＞0.05)。上述试验结果表明，朴菇多糖粉可增强断奶仔猪的细胞免疫功能，低剂量后期效果更明显。

四.结论

本研究结果表明，低剂量朴菇多糖粉可通过增加外周血淋巴细胞转化活性增强断奶仔猪免疫力和抗病力，从而降低断奶应激对机体的危害。

实施例5：朴菇多糖粉对断奶仔猪血清中免疫球蛋白的影响

一.材料

1.朴菇多糖粉：同实施例3。

2.抗生素喹乙醇：同实施例3。

3.实验动物：选用72头体重相近(平均体重为14.2kg)的断奶三元杂交仔猪(杜洛克×长白×大约克)，根据体重随机分为4个处理，各处理雌、雄比例一致，每个处理3个重复，每个重复6头猪。处理1为添加250ppm的朴菇多糖粉日粮，处理2为添加500ppm的朴菇多糖粉日粮，处理3为添加抗生素喹乙醇日粮，处理4为基础日粮。试验前先测定各种饲料原料的常规营养成分，根据断奶仔猪的营养需求和生理特点，并参照NRC(1998)营养需要推荐及饲养标准配制日粮。按断奶仔猪管理方案进行饲养，每次饲料添加量以吃饱后槽内略有余料为度，自由饮水。

二.方法：

1.分别于试验开始后第14、28和42d从各处理随机选取6头试猪，前腔静脉采血，3000r·min^-1离心10min分离血清，用于免疫球蛋白的测定。

2.血浆中免疫球蛋白含量测定

利用CX4型全自动血液生化分析仪(Beckman公司产品)，按照相关试剂盒说明，测定血浆中免疫球蛋白IgG、IgM和IgA(北京利德曼生化技术有限公司产品)的含量；利用ELISA方法测定猪瘟抗体效价。

三.结果与分析

1.D14时不同剂量朴菇多糖粉对断奶仔猪血清免疫球蛋白含量或效价的影响

由表7可见，D14时，250ppm朴菇多糖粉组的IgG含量高于250ppm朴菇多糖粉组和基础日粮组(P＞0.05)，显著高于喹乙醇组(P＜0.05)，500ppm朴菇多糖粉组的IgG含量也高于喹乙醇组和基础日粮组(P＞0.05)；250ppm和500ppm朴菇多糖粉组的IgA含量均高于基础日粮组(P＞0.05)；250ppm朴菇多糖粉组的IgM含量高于其他各处理(P＞0.05)；250ppm朴菇多糖粉组的猪瘟抗体效价高于500ppm朴菇多糖粉组和喹乙醇组(P＞0.05)。

表7：D14时不同剂量朴菇多糖粉对断奶仔猪血清免疫球蛋白含量或效价的影响

注：血清样品1∶20倍稀释后，采用ELISA试剂盒测定猪瘟抗体效价，测定结果以样品的阳性数值除以阴性对照之比值表示，高于2.1就为阳性，比值越高表示保护性越好。

2.D28时不同剂量朴菇多糖粉对断奶仔猪血清免疫球蛋白含量或效价的影

由表8可见，D28时，250ppm和500ppm朴菇多糖粉组的IgG和IgM含量均高于喹乙醇组和基础日粮组(P＞0.05)；250ppm和500ppm朴菇多糖粉组的IgA含量均高于喹乙醇组和基础日粮组(P＞0.05)；250ppm朴菇多糖粉组的猪瘟抗体效价高于500ppm朴菇多糖粉组和基础日粮组(P＞0.05)、显著高于喹乙醇组(P＜0.05)。

表8：D28不同剂量朴菇多糖粉对断奶仔猪血清免疫球蛋白含量或效价的影响

3.D42时不同剂量朴菇多糖粉对断奶仔猪血清免疫球蛋白含量或效价的影响

由表9可见，D42时，250ppm朴菇多糖粉组的IgG含量高于其他各处理(P＞0.05)，500ppm朴菇多糖粉组的IgG含量高于喹乙醇组(P＞0.05)；250ppm和500ppm朴菇多糖粉组的IgA和IgM含量均高于喹乙醇组和基础日粮组(P＞0.05)；250ppm和500ppm朴菇多糖粉组的猪瘟抗体效价均显著高于喹乙醇组(P＜0.05)、高于基础日粮组(P＞0.05)。

表9：D42不同剂量朴菇多糖粉对断奶仔猪血清免疫球蛋白含量或效价的影响

四.结论

本研究结果表明，朴菇多糖粉可通过增加仔猪免疫球蛋白的产生等途径，增强断奶仔猪免疫力和抗病力，从而降低断奶应激对机体的危害，且中后期作用明显，低剂量优于高剂量。

实施例6：朴菇多糖对肉鸡生产性能的影响

一.试验动物及试验设计

本试验选用1日龄爱拨益加(AA)公雏540只。试验分为5个处理，每个处理6个重复，每个重复18只鸡。处理1为不加抗生素的负对照组，处理2为加抗生素的正对照组，处理3、4、5为不加抗生素添加朴菇多糖饲料添加剂的试验组，肉鸡三阶段朴菇多糖添加量分别为100ppm、200ppm、300ppm。各处理组的营养水平符合中国2004版“鸡饲养标准”。试验设计见表10、表11。

表10：试验设计(1)

表11：试验设计(2)

二.方法

试验在中国农业大学家禽代谢室进行，试验鸡采用三层笼养。喂给干粉料，自由采食和饮水。温度控制在20～26℃之间，相对湿度45％～55％。按照正常免疫程序免疫，每日观察鸡群健康情况与精神状况。

1.试验日粮

试验日粮及营养水平见表12。试验各处理组营养水平为等能量、等蛋白。

2.检测指标

分别在1日龄、21日龄、42日龄、49日龄称重并记录耗料量，计算日采食量(ADFI)、日增重(ADG)、饲料转化效率(FCR)，记录进鸡时总鸡数和21日龄、42日龄、49日龄的鸡数，计算死亡率。

3.统计分析

试验数据用SPSS12.0软件中One-way ANOVA程序处理，用Duncan比较。

三.结果与讨论

试验结果见表13。

1.采食量

从表13中得知，1～21日龄和1～49日龄各处理之间日采食量差异不显著(P＞0.05)；22～42日龄处理3与处理4差异显著(P＜0.05)，且处理3组采食量最低；43～49日龄时处理4组的采食量与处理1组和处理2组差异极显著(P＜0.01)，处理3组和处理5组的日采食量极显著地低于处理1组(P＜0.01)，且各处理组中处理4组的日采食量最低。

2.日增重

从表13中得知，0～21日龄和0～49日龄各处理组间日增重差异不显著(P＞0.05)；22～42日龄处理4组的日增重极显著地高于处理1、处理3及处理5组(P＜0.01)，处理5组的日增重极显著地低于处理2和处理4组(P＜0.01)，且处理4组的日增重在各处理组中最高；43～49日龄时处理4组的日增重显著高于处理2组(P＜0.05)，且处理4组的日增重在各处理组中最高。

3.饲料转化效率

从表13中得知，0～21日龄和0～49日龄时各处理组间饲料转化效率差异不显著(P＞0.05)；22～42日龄时处理2和处理4组的饲料转化效率与处理1和处理5组差异极显著(P＜0.01)，其中处理4组的饲料转化效率在各处理组中最高。43～49日龄时处理4的饲料转化效率与处理2组差异极显著(P＜0.01)，处理4组的饲料转化效率在各处理组中最高。

4.死亡率

试验过程中鸡只的死亡情况表明，1～21日龄、22～42日龄、43～49日龄及1～49日龄的鸡只死亡率均差异不显著。

四.结论

本试验结果表明处理4组的生产性能最好，与正对照组(处理2组)差异不显著，其次为处理3组，最差的是负对照组(处理1组)和处理5组。表明肉鸡日粮中添加200ppm朴菇多糖效果较好。

本试验发现，多糖饲料添加剂在肉鸡中的应用效果表现为在试验的中期和后期明显好于试验前期，这可能是由于试验的前期试验鸡采食量和多糖的添加量均较小所致，随着试验鸡采食量以及多糖饲料添加剂饲喂量的增加，出现了累积效应导致生产性能明显好转。

Claims

1.一种朴菇多糖粉，其特征在于：采用下述方法制备：以金针菇Flammulinavelutipes(Fr.)Sing.As5.632作为生产菌种，采用下述发酵培养基配方，进行液体深层发酵：

每升培养基配方如下：麸皮20g、玉米5g、蔗糖10g、豆粉50g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g，加水定容至1升；

2.一种含有朴菇多糖粉的产品，其特征在于：采用权利要求1的方法制备，在过滤液进行浓缩后，向浓缩液与过滤湿菌丝体中加入载体，进行干燥，粉碎后进行混粉。

3.根据权利要求2所述的一种含有朴菇多糖粉的产品，其特征在于：所述载体为玉米芯细粉，80-100目，与浓缩液按1∶1添加。

4.一种制造朴菇多糖粉液体发酵生产工艺，其特征在于：以金针菇Flammulinavelutipes(Fr.)Sing.As5.632作为生产菌种，采用下述发酵培养基配方，进行液体深层发酵：

5.根据权利要求4所述的一种制造朴菇多糖粉液体发酵生产工艺，其特征在于：所述发酵后发酵液的过滤为经板框过滤。

6.根据权利要求4所述的一种制造朴菇多糖粉液体发酵生产工艺，其特征在于：所述将过滤液进行浓缩，为用薄膜浓缩方法将过滤液浓缩为原体积的1/8至1/10。

7.朴菇多糖粉在提高动物生产性能方面的应用。

8.根据权利要求7所述的朴菇多糖粉在提高动物生产性能方面的应用，其特征在于：所述动物为畜禽和水产动物。

9.根据权利要求7所述的朴菇多糖粉在提高动物生产性能方面的应用，其特征在于：所述应用为作为饲料添加剂。