CN101126105A - 一种用大米分离蛋白制备降血压肽的方法 - Google Patents

一种用大米分离蛋白制备降血压肽的方法 Download PDF

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陈季旺
刘�英
杨国燕
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Abstract

本发明公开了一种用大米分离蛋白制备降血压肽的方法，其技术要点是：将重量百分比浓度为5－15％(W/W)的大米分离蛋白溶液，用碱性蛋白酶水解，水解的工艺条件为：pH值为8－10、反应温度40－50℃、加酶量1－2％、反应时间120－180min，搅拌酶解。然后经大孔吸附树脂脱盐，树脂为NKA，用40－80％的酒精洗脱。经脱盐后的小分子肽再经浓缩或干燥，制得具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的小分子肽。本发明所具有的特点：提供了一种制备降压肽的新方法；工艺科学合理、简单易行；原料来源广泛。

Description

一种用大米分离蛋白制备降血压肽的方法
技术领域
本发明属于食品加工技术或制药技术领域，具体涉及功能性食品加工技术，特别是用大米分离蛋白制备降血压肽的方法。
背景技术
ACE抑制剂是降血压药物中发展最快的一种，但是合成的血管紧张素转化酶具有不良反应，如引发蛋白尿和白细胞减少等，另外，在停药后易引起“停药综合症”，严重威胁患者的生命安全。
来源于食物蛋白质的降血压肽完全可以克服药物治疗中出现的种种副作用，它只对高血压患者起到降压作用，对血压正常者却无降压作用；这些肽是经酶在温和条件下水解获得，安全性高，同时它还有免疫调节等其他作用。因此，开发天然降血压肽产品将成为非药物治疗中的重要组成部分。
目前已有研究发现大豆蛋白、胶原蛋白和酪蛋白等蛋白质经碱性蛋白酶水解后的产物具有ACE抑制活性，并通过离子交换色谱、高效液相色谱等分析了部分有抑制活性的组分。这些研究选择的原料多为动物蛋白质，且分离方法或者成本太高，或者肽中灰分含量较高而影响其活性等，不适合大规模生产。利用碱性蛋白酶水解大米分离蛋白生产降血压肽国内外目前还未见报道。
为了克服上述方法的不足，本发明利用来源广泛的碎米或米渣为原料，分离提取碎米或米渣中的蛋白质，利用碱性蛋白酶水解大米分离蛋白，水解产物经大孔吸附树脂脱盐后，获得具有ACE抑制活性的小分子肽。
发明内容
本发明的目前可通过以下技术方案来实现。
将重量百分比浓度为5-15％(W/W)的大米分离蛋白溶液，用碱性蛋白酶水解，水解的工艺条件为：pH值为8-10、反应温度40-50℃、加酶量0.5-2％、反应时间120-180min，搅拌酶解。然后经大孔吸附树脂脱盐，经脱盐后的小分子肽再经浓缩或干燥，进一步制成液态或固态制剂。
具体地来说，本发明工艺包括3个主要步骤，即：大米分离蛋白的制备→酶解大米分离蛋白→脱盐精制，其中脱盐精制选择大孔吸附树脂。
具体的制备方法：
将分离得到的大米分离蛋白配制成浓度为5-15％的溶液，调节pH值为8-10，碱性蛋白酶的添加量为0.5-2％。40-50℃水解120-180min后，离心分离。上清液经浓缩后经大孔吸附树脂脱盐精制，树脂为NKA，用40-80％的酒精洗脱。洗脱液经浓缩回收酒精后，进行喷雾或冷冻干燥，即可获得具有ACE抑制活性的大米降血压肽制品。
本发明具有的优点：
1.提供了一种制备降血压肽的新方法
本发明制品具有生理功能，对ACE具有极强的抑制活性。同其他生物活性肽一样，具有直接、快速、主动、完整吸收的特点，特别是对高血压等心血管疾病有疗效。本发明的制成品可作为功能食品、食品、食品添加剂、药物增效剂等。
2.工艺科学合理、简单易行
3.原料来源广泛
本发明所选择的原料来源广泛，资源丰富，使本发明具有较强的适用性。
具体实施方式
实施例1
采用广西南宁庞博生物工程有限公司提供的碱性蛋白酶(酶活力为150万U/g)，工艺条件为：大米分离蛋白浓度15％，pH值为8，反应温度50℃，加酶量1％，反应时间120min。测定大米降血压肽制品对ACE的抑制率和浓度，计算IC50，以及灰分等其他指标见表1。
表1大米降血压肽制品主要理化指标
项目     指标
IC50/(mg/mL)灰分(以干基计)/％可溶性氮(以干基计)/％肽(以干基计)/％pH(10％水溶液)     0.755.590.679.47.2
实施例2
采用无锡杰能科生物工程有限公司提供的碱性蛋白酶(酶活力为60万U/g)，工艺条件为：大米分离蛋白浓度10％，pH值为9.5，反应温度40℃，加酶量2％，反应时间180min。测定大米降血压肽制品对ACE的抑制率和浓度，计算IC50，以及灰分等其他指标见表2。
表2大米降血压肽制品主要理化指标
  项目     指标
  IC50/(mg/mL)灰分(以干基计)/％可溶性氮(以干基计)/％肽(以干基计)/％pH(10％水溶液)     1.356.588.277.66.9
实施例3
采用诺维信(中国)生物技术有限公司提供的碱性蛋白酶(酶活力为2.4AU/g)，工艺条件为：大米分离蛋白浓度10％，pH值为8.5，反应温度45℃，加酶量1％，反应时间150min。测定大米降血压肽制品对ACE的抑制率和浓度，计算IC50，以及灰分等其他指标见表3。
表3大米降血压肽制品主要理化指标
项目     指标
IC50/(mg/mL)灰分(以干基计)/％可溶性氮(以干基计)/％肽(以干基计)/％pH(10％水溶液)     0.53.092.481.27.0

Claims (2)

1.一种用大米蛋白制备降血压肽的方法，其特征在于：将重量百分比浓度为5-15％(W/W)的大米分离蛋白溶液，用碱性蛋白酶水解，水解的工艺条件为：pH值为8-10、反应温度40-50℃、加酶量0.5-2％、反应时间120-180min，搅拌酶解。然后经大孔吸附树脂脱盐，制得具有ACE抑制活性的小分子肽。
2.根据权利要求1所述的大米分离蛋白制备降血压肽的方法，其特征在于：经脱盐后的小分子肽再经浓缩或干燥，进一步制成液态或固态制剂。
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