CN101084929B - 一种中药皂苷类成分的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中药皂苷类成分的制备方法，按顺序包括如下步骤：(1)取中药药材，加入溶剂，将溶液调至碱性后再进行提取，得提取液；(2)提取液上大孔型碱性阴离子交换柱，先用碱水和纯水冲洗，冲洗液弃去，再用含水乙醇洗脱，洗脱液浓缩，即得皂苷类成分。本发明的中药皂苷类成分提取方法的提取分离效率高，皂苷类成分含量高，可保持更高的生理活性，并易于工业化大生产。
Description
技术领域
本发明属于中药提取物的提取方法，具体地说，涉及中药皂苷类成分的提取方法。
背景技术
皂苷(saponins)是一类比较复杂的苷类化合物，它是由皂苷元(sapogenins)和糖，糖醛酸或其它有机酸所组成。皂苷中常见的糖有葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、***糖、木糖及其它戊糖类；常见的糖醛酸有葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸等。这些糖或糖醛酸先结合成糖链的形式再与皂苷元相连。根据苷元的化学结构可分为三萜皂苷和甾体皂苷两大类。三萜皂苷的皂苷元是三萜类化合物，除个别外，均由30个碳原子所组成，基本骨架可分为五环三萜和四环三萜两大类。三萜皂苷广泛分布于自然界，其数量大大超过甾体皂苷，比较集中地分布于豆科、五加科、葫芦科、桔梗科、远志科、伞形科等植物中，此外在石竹科、含羞草科、毛茛科、菊科、无患子科、藜科、茜草科、报春花科、山茶科、七叶树科等植物也较常见。近年来对五加科(人参、常春藤等)、葫芦科(绞股蓝、苦瓜等)、豆科(黄芪等)、伞形科(柴胡等)植物中三萜皂苷的研究尤为深入，并发现一些皂苷具有重要的生物活性。甾体皂苷的皂苷元是甾体衍生物，除个别外，均由27个碳原子组成，基本骨架为螺旋甾烷，有A、B、C、D、E、F六个环。甾体皂苷是植物中一类重要的生物活性物质。迄今为止，从植物中分离到约400种甾体皂苷，大都分布于百合科、薯蓣科、茄科、石蒜科、菝葜科、豆科、龙石兰科、玄参科、棕榈科和姜科等植物中。皂苷具有抗菌、抗病毒、抗癌、抗生育、降血糖、降血脂、抗炎、免疫调节等多方面的作用，对心血管***、神经***、肾上腺皮质***和酶活性都有明显的生理活性，20世纪80年代以来皂苷的研究进入了一个新阶段，很多重要中草药如人参、三七、绞股蓝、柴胡、远志、甘草、桔梗、知母、穿山龙等得到了***研究，对各种皂苷的提取、分离、鉴定和生物活性等方面进行了深人的探讨。在皂苷的提取分离方法上，层析方法如反相硅胶层析法、凝胶层析法、液滴逆流分配层析以及大孔树脂等方法的应用，是皂苷类提取分离的效率大有提高，但由于皂苷的分子量大，极性大，现有的皂苷工艺较为烦琐，有效成分损失较大，不便于工业化生产，因此，研究更加有效而高纯度的皂苷类成分的提取分离方法具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种工艺更加合理、效率更高的中药皂苷类成分的提取方法。
本发明通过下述技术方案予以实施。
本发明的中药皂苷类成分的提取方法，按顺序包括如下步骤：
(1)取中药药材，加入溶剂，将溶液调至碱性后再进行提取，得提取液；
(2)提取液上大孔型碱性阴离子交换柱，先用碱水和纯水冲洗，冲洗液弃去，再用含水乙醇洗脱，洗脱液浓缩，即得皂苷类成分。
步骤(1)所述溶剂为水或者含水乙醇；所述溶液调至碱性为调pH值9～14，可用NaOH或者KOH或者Na2CO3或者NaHCO3调节pH值。
步骤(1)所述提取液可进一步除杂，水提取液可用醇沉方法除杂，醇提取液可用水沉方法除杂。
步骤(2)所述大孔型碱性阴离子交换柱优选大孔型弱碱性阴离子D392、D380、D382、D371交换柱，或者大孔型强碱性阴离子D201交换柱；碱水可为1～3％NaOH或者KOH或者Na2CO3；所述含水乙醇为40～95％乙醇。
所制备的中药皂苷类成分可以单独，或者与其他活性成分合用，与任何一种或一种以上药剂学上辅料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、聚乙二醇、硬脂酸镁、微粉硅胶、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸、羟丙基-β-环糊精等混合制成的各种剂型，例如，可制成注射剂、片剂、缓释片、滴丸、颗粒剂、粉针剂、胶囊剂、微粒剂。
与现有技术相比，本发明的中药皂苷类成分提取方法的提取分离效率高，皂苷类成分含量高，可保持更高的生理活性，并易于工业化大生产。
具体实施方式
参考下列实施例将更易于理解本发明，给出实施例是为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
实施例一
取柴胡药材，粉碎，加水煮沸提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的6倍水量和0.7％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍水量和0.3％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍水量；侧逆流循环提取，沸后分别保持1.5、1、1小时；药液合并冷至室温，浓缩药液至药材量2倍体积，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水溶解，滤过；滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D382交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得柴胡总皂苷(总皂苷含量85.4％)。柴胡总皂苷含量测定参照文献(天津药学，2001年10月，13(5)：60)。
实施例二
取柴胡提取挥发油后的残渣，加50％乙醇回流提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍50％乙醇量和1％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍50％乙醇量和0.5％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍50％乙醇量；侧逆流循环回流提取，回流开始后分别保持1.5、1、1小时；药液过滤并合并滤液，滤液70℃下减压浓缩至无醇味后，浓缩液加水稀释至药材药液比为1∶1.5，过滤，滤液上已经处理好的大孔型强碱性阴离子D201交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的85％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得柴胡总皂苷(总皂苷含量71.4％)。柴胡总皂苷含量测定参照文献(天津药学，2001年10月，13(5)：60)。
实施例三
取刺五加药材(根、根茎、茎)，粉碎，加50％乙醇回流提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍50％乙醇量和1％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍50％乙醇量和0.5％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍50％乙醇量；侧逆流循环回流提取，回流开始后分别保持1.5、1、1小时；药液过滤并合并滤液，滤液70℃下减压浓缩至无醇味后，浓缩液加水稀释至药材药液比为1∶1.5，过滤，滤液上已经处理好的大孔型强碱性阴离子D201交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的85％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得刺五加总皂苷提取物(总皂苷含量47.3％)。刺五加总皂苷含量测定参照文献(中成药，2003年1月，25(1)：12)。
实施例四
取刺五加叶，捣碎，加水煮沸提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的6倍水量和0.7％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍水量和0.3％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍水量；侧逆流循环提取，沸后分别保持1.5、1、1小时；药液合并冷至室温，浓缩药液至药材量2倍体积，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水溶解，滤过；滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D382交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得刺五加总皂苷提取物(总皂苷含量64.6％)。刺五加总皂苷含量测定参照文献(中成药，2003年1月，25(1)：12)。
实施例五
取黄芪药材，粉碎，加水超声提取四次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍水量和0.9％药材量的NaHCO3，第二次为药材量的4倍水量和0.5％药材量的NaHCO3，第三次和第四次为药材量的3倍水量；药液合并冷至室温，过滤，药液滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D380交换柱(南开大学化工厂)，用1.5倍树脂床体积的2.5％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再4倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用8倍树脂床体积的65％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得黄芪总皂苷(总皂苷含量87.5％，黄芪甲苷71.4％)。黄芪总皂苷含量测定参照文献(西北药学杂志，2001年8月，16(4)：157)，黄芪甲苷含量测定参照文献(中国药典2005版一部，213页黄芪甲苷含量测定)。
实施例六
取黄芪药材，粉碎，加70％乙醇超声提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍70％乙醇量和1％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍70％乙醇量和0.5％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍70％乙醇量；药液合并冷至室温，过滤，滤液70℃下减压浓缩至无醇味后，浓缩液加水稀释至药材药液比为1∶1.5，离心，上清液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D371交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的75％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得黄芪总皂苷(总皂苷含量95.6％，黄芪甲苷78.1％)。黄芪总皂苷含量测定参照文献(西北药学杂志，2001年8月，16(4)：157)，黄芪甲苷含量测定参照文献(中国药典2005版一部，213页黄芪甲苷含量测定)。
实施例七
取桔梗药材，粉碎，加水超声提取四次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍水量和0.9％药材量的NaHCO3，第二次为药材量的4倍水量和0.5％药材量的NaHCO3，第三次和第四次为药材量的3倍水量；药液合并冷至室温，过滤，药液滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D380交换柱(南开大学化工厂)，用1.5倍树脂床体积的2.5％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再4倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用8倍树脂床体积的65％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得桔梗总皂苷(总皂苷得率7.5％)。桔梗总皂苷测定参照文献(中国药典2005版一部，196页桔梗含量测定)。
实施例八
取桔梗药材，粉碎，加50％乙醇回流提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍50％乙醇量和1％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍50％乙醇量和0.5％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍50％乙醇量；侧逆流循环回流提取，回流开始后分别保持1.5、1、1小时；药液过滤并合并滤液，滤液70℃下减压浓缩至无醇味后，浓缩液加水稀释至药材药液比为1∶1.5，过滤，滤液上已经处理好的大孔型强碱性阴离子D201交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的85％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得桔梗总皂苷(总皂苷得率5.3％)。桔梗总皂苷测定参照文献(中国药典2005版一部，196页桔梗含量测定)。
实施例九
取麦冬药材，粉碎，加水煮沸提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的6倍水量和0.7％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍水量和0.3％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍水量；侧逆流循环提取，沸后分别保持1.5、1、1小时；药液合并冷至室温，过滤，滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D392交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得麦冬总皂苷(总皂苷含量82.3％)。麦冬总皂苷含量测定参照文献(中草药，2003年12月，34(12)：1090)。
实施例十
取麦冬药材，粉碎，加70％乙醇超声提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍70％乙醇量和1％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍70％乙醇量和0.5％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍70％乙醇量；药液合并冷至室温，过滤，滤液70℃下减压浓缩至无醇味后，浓缩液加水稀释至药材药液比为1∶1.5，离心，上清液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D371交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的75％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得麦冬总皂苷(总皂苷含量87.9％)。麦冬总皂苷含量测定参照文献(中草药，2003年12月，34(12)：1090)。
实施例十一
取人参叶，捣碎，加水超声提取四次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍水量和0.9％药材量的NaHCO3，第二次为药材量的4倍水量和0.5％药材量的NaHCO3，第三次和第四次为药材量的3倍水量；药液合并冷至室温，过滤，药液滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D380交换柱(南开大学化工厂)，用1.5倍树脂床体积的2.5％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再4倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用8倍树脂床体积的65％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得人参总皂苷(总皂苷含量87.2％)。人参总皂苷含量测定参照文献(安徽中医学院学报，2003年8月，22(4)：51)。
实施例十二
取人参药材(根、茎)，粉碎，加水超声提取四次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍水量和0.9％药材量的NaHCO3，第二次为药材量的4倍水量和0.5％药材量的NaHCO3，第三次和第四次为药材量的3倍水量；药液合并冷至室温，浓缩药液至药材量2倍体积，加乙醇使含醇量达80％，静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水溶解，滤过；滤液上已经处理好的大孔型强碱性阴离子D201交换柱(南开大学化工厂)，用1.5倍树脂床体积的2.5％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再4倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用8倍树脂床体积的85％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得人参总皂苷(总皂苷含量92.1％)。人参总皂苷含量测定参照文献(安徽中医学院学报，2003年8月，22(4)：51)。
实施例十三
取三七药材(根、茎)，粉碎，加50％乙醇回流提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍50％乙醇量和1％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍50％乙醇量和0.5％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍50％乙醇量；侧逆流循环回流提取，回流开始后分别保持1.5、1、1小时；药液过滤并合并滤液，滤液70℃下减压浓缩至无醇味后，浓缩液加水稀释至药材药液比为1∶1.5，过滤，滤液上已经处理好的大孔型强碱性阴离子D201交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的85％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得三七总皂苷(总皂苷含量95.7％)。三七总皂苷含量测定参照文献(沈阳药科大学学报，2002年3月，19(2)：122)。
实施例十四
取三七叶，捣碎，加水煮沸提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的6倍水量和0.7％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍水量和0.3％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍水量；侧逆流循环提取，沸后分别保持1.5、1、1小时；药液合并冷至室温，浓缩药液至药材量2倍体积，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水溶解，滤过；滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D382交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得三七总皂苷(总皂苷含量97.7％)。三七总皂苷含量测定参照文献(沈阳药科大学学报，2002年3月，19(2)：122)。
实施例十五
取西洋参茎叶，粉碎，加水超声提取四次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍水量和0.9％药材量的NaHCO3，第二次为药材量的4倍水量和0.5％药材量的NaHCO3，第三次和第四次为药材量的3倍水量；药液合并冷至室温，过滤，药液滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D380交换柱(南开大学化工厂)，用1.5倍树脂床体积的2.5％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再4倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用8倍树脂床体积的65％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得西洋参总皂苷(总皂苷含量93.5％)。西洋参总皂苷含量测定参照文献(天津医科大学学报，2000年1月，6(1)：26)。
实施例十六
取西洋参根，粉碎，加50％乙醇回流提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍50％乙醇量和1％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍50％乙醇量和0.5％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍50％乙醇量；侧逆流循环回流提取，回流开始后分别保持1.5、1、1小时；药液过滤并合并滤液，滤液70℃下减压浓缩至无醇味后，浓缩液加水稀释至药材药液比为1∶1.5，过滤，滤液上已经处理好的大孔型强碱性阴离子D201交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的85％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得西洋参总皂苷(总皂苷含量95.3％)。西洋参总皂苷含量测定参照文献(天津医科大学学报，2000年1月，6(1)：26)。
Claims (5)
1.一种中药皂苷类成分的制备方法，按顺序包括如下步骤：
(1)取中药药材，加入溶剂，将溶液调至碱性后再进行提取，得提取液；
(2)提取液上大孔型碱性阴离子交换柱，先用碱水和纯水冲洗，冲洗液弃去，再用40～95％乙醇洗脱，洗脱液浓缩，即得皂苷类成分；
其特征在于，所述步骤(1)中的溶剂为水或者40～95％乙醇；
所述步骤(1)中的将溶液调至碱性为调pH值9～14；
所述步骤(2)中的大孔型碱性阴离子交换柱选自大孔型弱碱性阴离子D392交换柱、大孔型弱碱性阴离子D380交换柱、大孔型弱碱性阴离子D382交换柱、大孔型弱碱性阴离子D371交换柱或者大孔型强碱性阴离子D201交换柱；
所述步骤(2)中的碱水为1～3％NaOH、1～3％KOH或者1～3％Na2CO3。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，用NaOH、KOH、Na2CO3或者NaHCO3调节溶液pH值。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)得到提取液后，进一步除杂，水提取液用醇沉方法除杂，或者醇提取液用水沉方法除杂。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，它按顺序包括如下步骤：
(1)取中药药材，加入水或40～95％乙醇，将溶液调至碱性为调pH值9～14，加热或超声提取2～4次，合并提取液，滤过；滤液进一步除杂，水提取液用醇沉方法除杂，醇提取液则用水沉方法除杂，得到除杂后的澄清液；
(2)澄清液上大孔型弱碱性阴离子D392交换柱、大孔型弱碱性阴离子D380交换柱、大孔型弱碱性阴离子D382交换柱、大孔型弱碱性阴离子D371交换柱或者大孔型强碱性阴离子D201交换柱，先用1～3％NaOH、1～3％KOH或者1～3％Na2CO3冲洗，再用纯水冲洗，冲洗液弃去，然后用40～95％乙醇洗脱，洗脱液浓缩，干燥，即得皂苷类成分。
5.一种中药皂苷类成分制剂的制备方法，其特征在于，取权利要求1或4所述方法得到的皂苷类成分，单独或者与其他活性成分合用，与任何一种以上药剂学上的辅料制成注射液、片剂、滴丸、颗粒剂、粉针剂、胶囊剂或者微粒剂。
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