CN104906165A

CN104906165A - 一种桔梗皂甙的提取方法

Info

Publication number: CN104906165A
Application number: CN201510263738.1A
Authority: CN
Inventors: 刘东锋; 杨成东
Original assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2015-05-22
Filing date: 2015-05-22
Publication date: 2015-09-16

Abstract

本发明公开了一种桔梗皂甙的提取方法。方法步骤如下：1）将桔梗烘干，粉碎，过筛；2）称取一定量的桔梗粉末加水浸润，然后加入桔梗粉末重量0.5%-2%的生物酶试剂进行酶解处理；3）酶解完成后，加入乙醇水溶液回流提取，得到提取液；4）将提取液过滤，滤渣重复提取，合并提取液，减压浓缩成浸膏状；5）将浸膏溶解并将溶解液上大孔吸附树脂柱洗脱，收集洗脱液减压浓缩，干燥，即得桔梗皂甙。采用本发明制备桔梗皂甙，工艺操作简单、生产成本低、所得产品纯度高。

Description

一种桔梗皂甙的提取方法

本发明属于生物技术领域，涉及一种生物酶解技术与大孔吸附树脂相结合的方法提取、纯化桔梗皂甙。

背景技术

桔梗（学名：Platycodon grandiflorus，英语：Balloon Flower），别名包袱花、铃铛花、僧帽花，桔梗科桔梗属植物，多年生草本，叶子卵形或卵状披针形，花暗蓝色或暗紫白色，可作观赏花卉；朝鲜族人用作野菜食用；其根可入药，有止咳祛痰、宣肺、排脓等作用，中医常用药。

桔梗所含的化学成分为：根含多种皂甙，迄今已分得18种三萜皂甙，它们是；桔梗皂甙（platycodin）A、C、D、D2、D3，去芹菜糖基桔梗皂甙（deapioplatycodin）D、D3，2-O-=乙酰基桔梗皂甙（2-O-acetylplatycodin）D2，3-O-乙酰基桔梗皂甙（3-O-acetylplaty-codin）D2，远志皂甙（polyglalacin）D、D2，2-O-乙酰基远志皂甙（2-O-acetylpolygalacin）D、D2，3-O-乙酰基远志皂甙（3-O-acetylpolygalacin）D、D2，桔梗甙酸-A甲酯（methyl platyconate-A），2-O-甲基桔梗甙酸-A甲酯（methyl-2-O-methyplatyconate-A），桔梗甙酸-A内酯（platyconic acid-A lactone），其中主成分是桔梗皂甙D，桔梗皂甙A又叫做2-O-乙酰基桔梗皂甙D，桔梗皂甙C又叫做3-O-乙酰基桔梗皂甙D。多种混合皂甙经完全水解所产生的皂甙元有：桔梗皂甙元（platycodigenin），远志酸（polygalacic acid），以及少量的桔梗酸（platycogenic acid）A、B、C；

皂苷（saponin）别称：碱皂体、皂素、皂甙、皂角苷或皂草苷。“皂苷”一词由英文名 Saponin 意译而来，英文名则源于拉丁语的Sapo，意为肥皂。皂苷（Saponin）是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷，主要分布于陆地高等植物中，也少量存在于海星和海参等海洋生物中。许多中草药如人参、远志、桔梗、甘草和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷还具有抗菌的活性或解热、镇静、抗癌等有价值的生物活性。

经现代研究证明，桔梗皂甙具有的药理作用：1．祛痰与镇咳作用；2．抑制胃液分泌和抗溃疡作用；3．抗炎作用；4．对循环***的作用；5．其他作用，粗桔梗皂甙有镇静、镇痛和解热作用。

目前，在我国有关提取桔梗皂甙的工艺文献和专利很多，其主要是采取溶剂浸提，超声波提取，这两种方法制备的桔梗皂甙不仅提取率低，而且纯度不高。本发明采用生物酶解技术与大孔吸附树脂相结合的方法提取、纯化桔梗皂甙，可以很好地解决这些问题。

发明内容

本发明的目的是为了弥补现有提取桔梗皂甙的技术不足和缺陷，提供一种操作简单、提取效率高、所得纯度高、污染小的桔梗皂甙的提取方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

1）将桔梗烘干，粉碎，过20~60目筛；

2）称取一定量的桔梗粉末加水浸润，然后加入桔梗粉末重量0.5%-2%的生物酶进行酶解处理；

3）在步骤（2）所得物料中加入乙醇水溶液回流提取，得到提取液；

4）将提取液过滤，滤渣重复提取2-3次，合并提取液，减压浓缩成浸膏状；

5）将步骤（4）中所得浸膏用水溶解，并将溶解液上大孔吸附树脂柱、60%~70%的乙醇洗脱，收集洗脱液减压浓缩，干燥，即得桔梗皂甙。

步骤2）中所述的粉末与水的质量体积比为1：0.5-1，浸泡时间为20-60分钟。

步骤2）中所述的生物酶为纤维素酶、淀粉酶、半纤维素酶和果胶酶中的一种，酶解时的温度设定在30-45℃，酶解时间为2-4小时。

步骤3）中所述的乙醇水溶液浓度为50%-70%，体积为粉末重量的3-6倍。

步骤5）中所述的大孔吸附树脂为X-5、AB-8、NK-2、NKA-2、NK-9、D3520、D101、WLD中的一种。

步骤5）中所述洗脱过程为先用2~4倍柱体积水洗去糖分，然后用2~5倍柱体积、10%~20%乙醇洗去部分杂质，最后用2~5倍柱体积、60%~70%的乙醇洗脱，收集洗脱液。

采用本方法生产桔梗皂甙，利用生物酶解技术与大孔吸附树脂相结合的方法，充分破坏细胞壁，增加和加快了活性成分的流出，通过大孔吸附树脂柱纯化过程，不仅大大提高了桔梗皂甙的纯度，而且大孔吸附树脂可以回收再利用，从而降低了生产成本。该工艺简便易操作、提取效率高、污染小、所得产品纯度高、易于实现工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取新鲜的桔梗烘干、粉碎、过20目筛。称取桔梗粉末50克放入提取器中，加入25毫升的水浸泡20分钟，然后加入0.25克的果胶酶试剂，在温度为30℃的条件下酶解2分钟，收集酶解原料，然后加入250毫升60%的乙醇水溶液回流提取，滤渣提取2次，合并3次滤液，减压浓缩成浸膏，将所得浸膏溶解，并将溶解液倒入X-5大孔吸附树脂柱中，先用2倍柱体积水洗去糖分，然后用2倍柱体积、10%乙醇洗去部分杂质，最后用2倍柱体积、60%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液减压浓缩，干燥，即得总皂苷。经检测总皂苷的含量为88.53%，总皂苷的提取率为57.5%。

实施例2：

取新鲜的桔梗烘干、粉碎、过40目筛。称取桔梗粉末50克放入提取器中，加入30毫升的水浸泡40分钟，然后加入0.5克的果胶酶，在温度为40℃的条件下酶解3分钟，收集酶解原料，然后加入250毫升60%的乙醇水溶液回流提取，滤渣提取2次，合并3次滤液，减压浓缩减压浓缩成浸膏，将所得浸膏溶解，并将溶解液倒入D3520大孔吸附树脂柱中，先用3倍柱体积水洗去糖分，然后用4倍柱体积、15%乙醇洗去部分杂质，最后用4倍柱体积、65%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液减压浓缩，干燥，即得总皂苷。经检测总皂苷的含量为89.13%，总皂苷的提取率为60.52%。

实施例3：

取新鲜的桔梗烘干、粉碎、过60目筛。称取桔梗粉末50克放入提取器中，加入50毫升的水浸泡60分钟，然后加入1g克的生物酶试剂，在温度为45℃的条件下酶解4分钟，收集酶解原料，然后加入250毫升60%的乙醇水溶液回流提取，滤渣提取3次，合并4次滤液，减压浓缩成浸膏，将所得浸膏溶解，并将溶解液倒入AB-8大孔吸附树脂柱中，先用4倍柱体积水洗去糖分，然后用5倍柱体积、20%乙醇洗去部分杂质，最后用5倍柱体积、70%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液减压浓缩，干燥，即得总皂苷。经检测总皂苷的含量为90.55%，总皂苷的提取率为61.45%。

Claims

1.一种桔梗皂甙的提取方法，其特征在于采用以下步骤：

1）将桔梗烘干，粉碎，过20~60目筛；

2.根据权利要求1所述的桔梗皂甙的提取方法，其特征在于：步骤2）中所述的粉末与水的质量体积比为1：0.5-1，浸泡时间为20-60分钟。

3.根据权利要求1所述的桔梗皂甙的提取方法，其特征在于：步骤2）中所述的生物酶为纤维素酶、淀粉酶、半纤维素酶和果胶酶中的一种，酶解时的温度设定在30-45℃，酶解时间为2-4小时。

4.根据权利要求1所述的桔梗皂甙的提取方法，其特征在于：步骤3）中所述的乙醇水溶液浓度为50%-70%，体积为粉末重量的3-6倍。

5.根据权利要求1所述的桔梗皂甙的提取方法，其特征在于：步骤5）中所述的大孔吸附树脂为X-5、AB-8、NK-2、NKA-2、NK-9、D3520、D101、WLD中的一种。

6.根据权利要求1所述的桔梗皂甙的提取方法，其特征在于：步骤5）中所述洗脱过程为先用2~4倍柱体积水洗去糖分，然后用2~5倍柱体积、10%~20%乙醇洗去部分杂质，最后用2~5倍柱体积、60%~70%的乙醇洗脱，收集洗脱液。