CN101084200A

CN101084200A - 1,2,4－***基氨基芳基(杂芳基)磺酰胺衍生物

Info

Publication number: CN101084200A
Application number: CNA2005800415390A
Authority: CN
Inventors: S·黄; R·林; P·J·康诺利; S·伊曼纽尔; S·A·米德尔顿; R·H·格鲁宁格; S·K·韦特
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2004-10-08
Filing date: 2005-10-06
Publication date: 2007-12-05
Also published as: EP1797049A1; US8299082B2; US20060173020A1; JP2008515925A; US7888380B2; WO2006042215A1; KR20070061907A; EA200700818A1; IL182314A0; AU2005295016A1; ZA200703680B; BRPI0516569A; NO20072310L; EP1797049A4; CA2583150A1; MX2007004155A; US20110077249A1

Abstract

本发明公开式(I)的1，2，4***基氨基芳基(杂芳基)磺酰胺衍生物及其药学上可接受的盐，1，2，4***基氨基芳基(杂芳基)磺酰胺衍生物和含有1，2，4***基氨基芳基(杂芳基)磺酰胺衍生物的药用组合物的制备方法。式(I)的1，2，4***基氨基芳基(杂芳基)磺酰胺衍生物具有细胞周期抑制活性，并因其抗细胞增殖(例如抗癌)活性而为有用的化合物。

Description

1，2，4-***基氨基芳基(杂芳基)磺酰胺衍生物

相关申请的交叉参照

本申请要求2004年10月8日提交的美国临时专利申请系列号60/617119的权益，该申请全文和全部目通过引用结合到本文中。

发明领域

本发明涉及1，2，4-***基氨基芳基(杂芳基)磺酰胺(sulfonamide)衍生物或药学上可接受的盐，它们具有细胞周期抑制活性并因此可利用它们的抗细胞增殖(例如抗癌)活性。本发明还涉及所述1，2，4-***基氨基芳基(杂芳基)磺酰胺衍生物的制备方法，涉及含有它们的药用组合物，和涉及它们在药物制备中的用途或在产生抗细胞增殖作用中的用途。

发明背景

细胞***周期是基本的生物过程，通过该过程，细胞生长、复制其DNA并再***，得到两个子细胞。它包括四个连续期：G1、S、G2和M(参见Pardee等；″Animal cell cycle″，Ann.Rev.Biochem.，Vol.47(1978)，715-750)。DNA复制出现在S期，且被复制的DNA在M期分成在遗传上相同的两个子细胞。这两期之间是间期1(G1)和间期2(G2)。当细胞响应细胞外刺激并开始生长时，G1介于M期和S期之间。当细胞准备进入有丝***时，间期2介于S期和M期之间。细胞周期各期的长度可随细胞类型和条件而变化。此外，存在称为G0(或静止期)的第五期，进入该期，细胞会可逆地退出细胞周期，但保留代谢活性。

细胞***周期受细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)调节，它属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族。对于全部活性，这些激酶必须形成带有一部分细胞周期蛋白家族的调节亚基的复合物并在特定苏氨酸或丝氨酸残基(例如，cdk1的Thr 161)上被磷酸化。这些活性CDK/细胞周期蛋白复合物再通过使它们的蛋白底物磷酸化(其活性在细胞周期的特定阶段是需要的)来调节细胞周期进程。例如，在S期后期，细胞周期蛋白B被表达并形成活性CDK1/细胞周期蛋白B复合物，其对于细胞进入M期是需要的并被认为是M期促进因子(参见Kishimoto等，″In vivo regulation of the entry into M-phase：initial activation andnuclear translocation of cyclin B/Cdc2″，Prog.Cell cycle Res.，Vol.3(1997)，241-249)。该CDK1/细胞周期蛋白B复合物可使几种蛋白磷酸化，包括组蛋白H1、DNA聚合酶α、RNA聚合酶II、视网膜母细胞瘤肿瘤抑制蛋白(Rb)、核层状体蛋白A、cAb1、核仁素，它们涉及有丝***的早期过程。在G1早期，细胞周期蛋白Ds被表达，并生成活性CDK4/细胞周期蛋白D和CDK6/细胞周期蛋白D，然后它们使视网膜母细胞瘤肿瘤抑制蛋白Rb磷酸化(参见Kato等，″Induction of S phase by G1 regulatory factors″，Front.Biosci，Vol.4(1999)，787-792)。在G1后期，细胞周期蛋白Es被表达和活性CDK2/细胞周期蛋白E复合物被生成，它们也磷酸化Rb。正是这种被CDK4/细胞周期蛋白D、CDK6/细胞周期蛋白D和CDK2/细胞周期蛋白E的连续磷酸化的Rb阻碍其生长抑制作用。当Rb被次磷酸化时，它紧紧地限制和阻碍E2F的活性，E2F是控制G1向S期转变的基因表达所必需的一种转录因子复合物。当Rb被磷酸化时，其与E2F的相互作用被中断，并发生E2F依赖性转录。这使细胞通过限制点，此后细胞不再需要促有丝***刺激来完成一个细胞周期。在S期中，细胞周期蛋白A(s)被表达，和活性CDK2/细胞周期蛋白A复合物被形成，它们可磷酸化转录因子B-Myb和E2F，以及cdc6(一种启动DNA复制所需要的因子)(参见Kitagawa等，″Phosphorylation of E2F-1by cyclin A-cdk2″，Oncogene，Vol.10(1995)，229-236)。CDK/细胞周期蛋白复合物和其磷酸化并因此调节其它蛋白的作用的能力的相继活化，使细胞按照正确的顺序从一个已完成细胞周期阶段进行到下一阶段。

CDKs功能和细胞周期顺序的中断涉及高增殖疾病，例如癌、银屑病和类风湿性关节炎(Kamb等，″A Cell Cycle Regulator PotentiallyInvolved in Genesis of Many Tumor Types，″Science，Vol.264(1994)，436-440)。

例如，细胞周期蛋白D1被过度表达于***、食管和鳞状细胞癌中(DelSal等，″Cell Cycle and Cancer：Critical Events和the G1Restriction Point，″Critical Rev.Oncogenesis，Vol.71(1996)，127-142)，而细胞周期蛋白E的过度表达与很多种实体瘤有关。既是基质又是CDK2/细胞周期蛋白E抑制剂的CDK抑制剂p27的表达往往被抑制于***、结肠和乳腺癌，且p27的细胞水平与疾病阶段呈反相关(参见Loda等，″Increased Proteasome-dependent Degradation of the CyclinDependent Kinase Inhibitor p27 in Aggressive Colorectal Carcinomas，″Nature Medicine，Vol.3(1997)，231-234)。此外，在肉瘤、白血病、神经胶质瘤、家族性黑素瘤和胰腺、非小细胞肺癌和头和颈癌中，对p16家族的CDK4类抑制剂编码的基因常常缺失和突变(参见Nobori等，″Deletions of the Cyclin Dependent Kinases 4 Inhibitor Gene in MultipleHuman Cancers，″Nature，Vol.368(1994)，753-756)。这些资料明显证实，在瘤形成中CDKs活性不受调节。

所呈现的资料为采用化合物抑制CDKs、CDK2和CDK4，尤其是作为抗增殖治疗药剂，提供有力证据。例如，BMS 387032作为肿瘤化疗剂(Bristol-Myers Squibb)目前正处于I期临床试验(参见Kim等，″Discovery of Aminothiazole Inhibitors of Cyclin Dependent Kinase 2：Synthesis，X-ray Crystallographic Analysis，and Biological Activities″，J.Med.Chem.，Vol.45(2002)，3905-3927)，而且是CDK2的选择性ATP竞争抑制剂(IC₅₀为48nM)。伴随着对CDK2基质，例如视网膜母细胞瘤蛋白的磷酸化的抑制作用，该化合物诱导细胞周期停止和细胞凋亡，在40种细胞系中表现出细胞毒性，并在五种肿瘤模型，包括P388鼠白血病、细胞周期蛋白E过度表达转基因鼠乳腺癌、A2780人卵巢癌、Colo205人结肠直肠癌和A431人鳞状细胞癌中显示出抗肿瘤活性。同样地，黄酮类抗肿瘤药(flavopiridol)已经通过直接抑制CDK2、CDK4和CDK1和通过下调细胞周期蛋白D1、D3和B，表现出抗CDKs的有效活性，停止G1和G2期中的细胞周期，抑制各种人癌细胞系，并在***黑素瘤、乳腺癌和NSCLC肿瘤异种移植模型中表现出活性。在I期研究中，黄酮类抗肿瘤药经静脉注射提供给患有前期肿瘤的患者(参见Thomas等，″Phase I Clinical andPharmacokinetic Trial of the Cyclin Dependent Kinase InhibitorFlavopiridol″，Cancer Chemotherapy&Pharmacology，Vol.50(2002)，465-72)。在肾癌患者中观察到部分响应，在结肠或***癌和非霍奇金氏淋巴瘤患者中各有一位观察到3种较小的响应。II期试验研究与或不与顺铂共同给药的黄酮类抗肿瘤药和紫杉醇在治疗54位前期实体瘤患者中的用途。在该51位可评价患者中，报道共有1位痊愈、1位部分治愈和1位较小响应，21例病况稳定(参见Koroukis等，″Flavopiridol in Untreated or Relapsed Mantle-cell Lymphoma：Results ofa Phase II Study of the National Cancer Institute of Canada Clinical TrialsGroup″，Journal of Clinical Oncology，Vol.21(2003)，1740-45；和Schwartz等，″Phase II Study of Cyclin Dependent Kinases InhibitorFlavopiridol Administered to Patients with Advanced Gastric Carcinoma″，Journal of Clinical Oncology，Vol.19(2001)，1985-93)。Indisulam(E-7070)是一种新的磺胺药物，在使用Eisai的II期中治疗头和颈癌、实体瘤、CRC和NSLC中，并已经表现出独特的体外抗肿瘤谱和优异的体内抗肿瘤活性，影响多重细胞周期关卡。E-7070通过在几个点阻断细胞周期进程，包括G1/S和G2/M转变，抑制细胞周期蛋白E的表达和CDK2的磷酸化。体内研究表明其抗各种人癌，例如结肠癌HCT116、LS174T、SW620和HCT15和NSCLC PC-9的活性(参见Ova等，″Discovery of Novel Antitumor Sulphonamides Targeting G1Phase of the Cell Cycle″，J.Med.Chem.，Vol.42(1999)，3789-3799；和Ozawa等，″E7070，A Novel Sulphonamide Agent With Potent AntitumorActivity in vitro and in vivo″，Eur.J.of Cancer，Vol.37(2001)，275-282)。Roscovitine(Cyc 202)(Cyclacel)处于各种癌的临床开发中，它抑制CDK2并在较小程度上也抑制CDK1。该化合物在HCT116人结肠癌细胞中具有细胞毒性，并已经在患者中表明，通过作用于G1/S或早期关卡诱导细胞凋亡(参见McClue等，″In Vivo and In VitroAntitumor Properties of The Cyclin Dependent Kinase Inhibitor CYC 202(R-roscovitine)″，International Journal of Cancer，Vol.102(5)(2002)，463-468)。UCN-01(Kyowa Hakko Kogyo)是一种具有抗PKCs和CDKs活性的非特异性激酶抑制剂。临床前资料显示，UCN-01的主要潜力在于治疗白血病，尤其是CLL，但该化合物已经临床应用于肾细胞癌和胰腺癌。而且，该化合物已经表现出对黑素瘤和淋巴瘤患者的抗肿瘤活性(参见Senderowicz等，″Phase I Trial of Infusion UCN-01，aNovel Protein Kinase Inhibitor，in Patients With Refractory Neoplasms″，Annals of Oncology，Vol.9(Suppl.2)(1998)，111)。

WO200109106公开二氨基-1，2，4-***-羧酸类(carboxylics)及其在治疗与需要抑制GSK-3相关的疾病中的用途。

WO2002057240公开取代的***二胺衍生物和它们作为蛋白激酶抑制剂的用途。

WO2004046120公开二氨基***和它们作为蛋白激酶抑制剂的用途。

然而，仍然更加需要易于制备的小分子量化合物，它们是一种或多种CDKs或CDK/细胞周期蛋白复合物的有效抑制剂。因为CDK1可用作M期促进因子，并控制细胞周期的G2期，而CDK2/细胞周期蛋白E控制细胞周期的早期G1期，需要有效和特异性的CDK1和/或CDK2抑制剂，以治疗多种肿瘤中的一种。

CDKs抑制还可预防正常细胞中的细胞周期进行，并限制在S期、G2或有丝***中起作用的细胞毒素的毒性。所以，细胞周期或正常增殖细胞的这类破坏会保护增殖细胞例如毛囊和上皮粘膜免受细胞毒药物的影响，从而有效治疗与癌的化疗和放疗有关的副作用。

发明简述

本发明基于这样的发现，即某些1，2，4-***基氨基芳基(杂芳基)磺酰胺化合物抑制细胞周期激酶的作用，显示出对CDK1和CDK2的选择性，因而具有包括(抗细胞增殖\迁移和\或凋亡)性质的抗肿瘤活性。

这些性质可用于治疗被异常细胞周期控制所表现的CDK介导的疾病，例如癌(实体瘤和白血病)、纤维增生和分化性疾病(differentiativedisorders)、银屑病、急性和慢性肾病、类风湿性关节炎、卡波济氏肉瘤、血管瘤动脉粥样化、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自身免疫性疾病、慢性和急性炎症、骨病和伴有视网膜血管增生的眼病。

因此，本发明提供式(I)的1，2，4-***氨基芳基(杂芳基)磺酰胺衍生物：

其中：

X₁、X₂独立选自CH和N，

R₁是碳环基、杂环基或杂芳基，其中R₁任选被一种或多种取代基所取代，所述取代基独立选自酰氨基、膦酰氧基(phosphonato)、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基(thiol)、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、羟基或C_1-6-烷氧基，

R₂是氢、羟基、硝基、氨基、羧基、氨基甲酰基、卤代基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨磺酰基、巯基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、C_1-6-烷氧基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基或磺酰基，

R₃和R₄独立选自氢、-CH₂OPO₃R₅R₆、-CH₂OCOR₇、-CH₂OCO₂R₇、-CH₂OCONHR₇、-COR₇或-CONHR₇，其中R₃和R₄不同时为氢，

R₃′选自氢、杂环基或C_1-8烷基，其中C_1-8烷基任选被一个或多个-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、羟基、C₁₆烷氧基、氨基、氨酰基氨基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、杂环基或杂芳基取代，

R₅和R₆各自选自氢、C_1-6烷基、Na、K和NH₄且为相同的，除非R₅或R₆不存在、为氢或C_1-6烷基，在这种情况下，另一个为不同的，或作为选择，R₅和R₆共同表示钙或镁，

R₇是杂环基或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基被一个或多个以下基团任选取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0-400的-(O CH₂CH₂)_nOH或其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H，和

R₈是被一个或多个以下基团任选取代的C_1-6烷基：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨酰基氨基、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H。

式(I)化合物的实例包括其中X₁和X₂各为CH的化合物。

式(I)化合物的实例包括这样的化合物，其中R₁是选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、苯基或萘基的碳环化合物，其各自任选被一个或多个酰氨基、膦酰氧基、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、羟基或C_1-6-烷氧基取代。

式(I)化合物的实例包括其中R₁是苯基的化合物，所述苯基任选被一个或多个酰氨基、膦酰氧基、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、羟基或C_1-6-烷氧基取代。

式(I)化合物的实例包括其中R₁是任选被一个或多个卤素取代的苯基的化合物。

式(I)化合物的实例包括其中R₁是选自吡咯烷基、哌啶基或哌嗪基的杂环化合物的化合物，这些杂环各自任选被一个或多个酰氨基、膦酰氧基、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、羟基或C_1-6-烷氧基取代。

式(I)化合物的实例包括其中R₁是杂芳基化合物的化合物，所述杂环基选自吡唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、吗啉基、噻嗪基、嗪基、吡咯基、吲哚基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、唑基、异唑基、噻唑基、***基、四唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、吖啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基或苯并呋喃基，它们各自任选被一个或多个酰氨基、膦酰氧基、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、羟基或C_1-6-烷氧基取代。

式(I)化合物的实例包括其中的R₂是氢的化合物。

式(I)化合物的实例包括这样的化合物，其中R₃和R₄独立选自氢或-COR₇，其中R₃和R₄不同时为氢。

式(I)化合物的实例包括这样的化合物，其中R₃′是选自吗啉基、四唑基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或4-甲基-哌嗪-1-基的杂环化合物。

式(I)化合物的实例包括这样的化合物，其中R₃′是选自咪唑基、2-甲基-咪唑基、2，3-二甲基-咪唑基、1，2，3-***基或1，2，4-***基的杂芳基化合物。

式(I)化合物的实例包括其中R₃′是氢的化合物。

式(I)化合物的实例包括这样的化合物，其中R₇是选自吗啉基、四唑基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或4-甲基-哌嗪-1-基的杂环化合物。

式(I)化合物的实例包括这样的化合物，其中R₇是杂环基或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基被一个或多个以下基团任选取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在苯基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的苯基、杂环基、其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H。

式(I)化合物的实例包括其中R₇是杂环基或C_1-6烷基的化合物，其中C_1-6烷基被一个或多个以下基团任选取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在苯基上被一个或多个羟基任选取代的苯基、杂环基、其中n是1或2的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃或其中n是1或2的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H。

式(I)化合物的实例包括其中R₇是杂环基或C_1-6烷基的化合物，其中C_1-6烷基任选被一个或多个-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、羟基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、杂环基、其中n是1或2的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃，或其中n是1或2的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H取代。

式(I)化合物的实例包括这样的化合物，其中R₈是C_1-6烷基，它被一个或多个以下基团任选取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基或氨基烷基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H。

式(I)化合物的实例包括这样的化合物，其中R₈是任选被一个或多个氨基取代的C_1-6烷基。

在本发明的第二方面，提供式(II)化合物：

其中：

R₅和R₆各自选自氢、C_1-6烷基、Na、K和NH₄且为相同的；除非R₅或R₆不存在、为氢或C_1-6烷基，在这种情况下，另一个为不同的，或作为选择，R₅和R₆一起表示钙或镁，和

R₇是杂环基或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基被一个或多个以下基团任选取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H，和

R₈是C_1-6烷基，它被一个或多个以下基团任选取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨酰基氨基、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H。

在本发明的第三方面，提供式(III)化合物：

其中：

R₃是-COR₇，

因此，还提供一种药用组合物，它含有：式(I)、(II)或(III)化合物，或式(I)、(II)或(III)化合物的药学上可接受的盐；或式(I)、(II)或(III)化合物的药用活性代谢物，或该代谢物的药学上可接受的盐，以及该组合物在治疗或预防由细胞高增殖引起的激酶介导的疾病，例如癌、类风湿性关节炎和银屑病中的医疗用途。

本发明提供采用式(I)化合物治疗或缓解激酶受体介导的疾病的方法。

本方法的一方面包括抑制不受调节的激酶活性，包括用一种或多种式(I)化合物接触激酶结构域。

本方法的一方面包括用式(I)化合物接触激酶受体抑制激酶。

本方法的一方面包括用一种或多种式(I)化合物接触激酶受体，抑制导致不受调节的细胞增殖的增加的或不受调节的激酶表达或信号传导。

本方法的一方面包括用式(I)化合物接触激酶受体，抑制细胞周期蛋白依赖性激酶。

本方法的一方面包括抑制细胞周期蛋白依赖性激酶的不受调节的表达等。

本发明还涉及在有需要的患者中治疗或预防激酶介导的疾病的方法，它包括给予所述患者有效量的所述化合物。

本发明还涉及在有需要的患者中治疗或预防细胞周期蛋白依赖性激酶介导的疾病的方法，它包括给予所述患者有效量的所述化合物。

所述方法还包括给予所述患者有效量的呈药物形式的式(I)、(II)或(III)化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、所述代谢物的盐或组合物。

从下列详述中，本发明的几个其它方面、特征和优点会变得明显。

发明详述

用于本文的术语″ 有效量″意指会产生改善的治愈、预防或治疗，或降低疾病或病症发展速度，或缓解疾病、病症或副作用的药物或药剂的量。该术语还表示该量能有效增强生理功能。

用于本文的术语″ 烷基″意指具有1-8个碳原子的直链或支链烃，它任选被低级烷基、低级卤代烷基、低级烷基硫烷基(sulfanyl)、低级烷基亚磺酰基、低级烷基磺酰基、低级烷氧基、氧代、硝基、巯基、任选被烷基取代的氨基、羧基、任选被烷基取代的氨基甲酰基、任选被烷基取代的酰氨基(carboxamide)、任选被烷基取代的氨基磺酰基取代。用于本文的″烷基″的实例包括，但不限于，甲基、乙基、丙基、正丁基、正戊基、异丁基、异丙基等。

用于本文的术语″ 链烯基″意指具有2-8个碳原子和至少一个碳-碳双键的直链或支链烃，它任选被低级烷基、低级卤代烷基、低级烷基硫烷基、低级烷基亚磺酰基、低级烷基磺酰基、低级烷氧基、氧代、硝基、巯基、任选被烷基取代的氨基、羧基、任选被烷基取代的氨基甲酰基、任选被烷基取代的酰氨基、任选被烷基取代的氨基磺酰基取代。用于本文的″链烯基″的实例包括，但不限于，1-丙烯基、1-丁烯基、1-戊烯基和1-己烯基等。

用于本文的术语″ 炔基″意指具有2-8个碳原子和一个碳-碳三键的直链或支链烃，它任选被低级烷基、低级卤代烷基、低级烷基硫烷基、低级烷基亚磺酰基、低级烷基磺酰基、低级烷氧基、氧代、硝基、巯基、任选被烷基取代的氨基、羧基、任选被烷基取代的氨基甲酰基、任选被烷基取代的酰氨基、任选被烷基取代的氨基磺酰基取代。用于本文的″炔基″的实例包括，但不限于，1-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-戊炔基和1-己炔基等。

术语″ 烷氧基″或″ 烷基氧基″意指通过氧连接原子连接的具有1-8个碳原子的直链或支链烃，它任选被低级烷基、低级卤代烷基、低级烷基硫烷基、低级烷基亚磺酰基、低级烷基磺酰基、低级烷氧基、氧代、硝基、巯基、任选被烷基取代的氨基、羧基、任选被烷基取代的氨基甲酰基、任选被烷基取代的酰氨基、任选被烷基取代的氨基磺酰基取代。用于本文的″烷氧基″的实例包括，但不限于，甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基和异丙氧基等。

用于本文的术语″ 碳环″指环烷基或芳环。

用于本文的术语″ 环烷基″指具有3-10个碳的饱和环烃。用于本文的″环烷基″的实例包括，但不限于，环丙基、环丁基、环戊基和环己基等。

用于本文的术语″ 杂环基″或″ 杂环的″指含有一个或多个选自S、SO、SO₂、O或N的杂原子的3-12元饱和或部分饱和环，所述环任选被低级烷基、低级卤代烷基、低级烷基硫烷基、低级烷基亚磺酰基、低级烷基磺酰基、低级烷氧基、氧代、硝基、巯基、任选被烷基取代的氨基、羧基、任选被烷基取代的氨基甲酰基、任选被烷基取代的酰氨基、任选被烷基取代的氨基磺酰基取代。这类环可任选稠合到一个或多个其它杂环基、环烷基、杂芳基或芳基环上。杂环基的实例包括，但不限于，2H-吡咯(包括2-吡咯啉基或3-吡咯啉基)、2-咪唑啉基(也称为4，5-二氢-1H-咪唑基)、咪唑烷基、2-吡唑啉基、吡唑烷基、四唑啉基(tetrazolinyl)、四唑烷基(tetrazolidinyl)、哌啶基、吡咯烷基、1，4-二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基、4-甲基-1-哌嗪基、2-吡咯烷酮、氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基(azepanyl)、六氢-1，4-二氮杂基、六氢-1，4-氧氮杂环庚烷基(oxazepanyl)、四氢-呋喃基、吡喃基、1，4-二氧杂环己烷基、1，3-二氧戊环基、四氢-吡喃基、四氢-哒嗪基、1，3-苯并间二氧杂环戊烯基、2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己烯基、吗啉基、4-吗啉基丙基、四氢硫代吡喃基和四氢噻吩基等。

用于本文的术语″ 芳基″指任选取代的苯环或稠合到一个或多个任选取代苯环的任选取代的苯环***。任选的取代基包括低级烷基、低级卤代烷基、低级烷基硫烷基、低级烷基亚磺酰基、低级烷基磺酰基、低级烷氧基、氧代、硝基、巯基、任选被烷基取代的氨基、羧基、任选被烷基取代的氨基甲酰基、任选被烷基取代的酰氨基、任选被烷基取代的氨基磺酰基。芳基的实例包括，但不限于，苯基、2-萘基、1-萘基、联苯基、芴基、茚基、甘菊环基和蒽基等。

用于本文的术语″ 杂芳基″指含有一个或多个选自S、SO、SO₂、O或N的杂原子的5-7元不饱和环，或指含有两个这类5-7元不饱和环的稠合双环不饱和环，所述环任选被低级烷基、低级卤代烷基、低级烷基硫烷基、低级烷基亚磺酰基、低级烷基磺酰基、低级烷氧基、氧代、硝基、巯基、任选被烷基取代的氨基、羧基、任选被烷基取代的氨基甲酰基、任选被烷基取代的酰氨基、任选被烷基取代的氨基磺酰基取代。用于本文的杂芳基的实例包括，但不限于，呋喃基、噻吩基、吡咯基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并异唑基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并***基、中氮茚基、吲哚基、氮杂吲哚基、异吲哚基、吲唑基、氮杂吲唑基、噻二唑基、异噻唑基、吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、嘧啶基、嘌呤基、4H-喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基(phthalzinyl)、喹唑啉基、喹喔啉基、咪唑基、吡唑基、***基、四唑基、噻唑基、异噻唑基、唑基、异唑基、二唑基、吲唑基、1，5-二氮杂萘基和蝶啶基等。

用于本文的酰基意指基团-C(O)烷基。

用于本文的醛意指基团-C(O)H。

用于本文的胺或氨基意指基团-NH₂。

用于本文的氨基烷基意指基团-NHR或N(R)₂，其中R是(C_1-4)烷基。

用于本文的氨酰基氨基意指基团-NHCO-烷基-NHR或-NHCO-烷基-N(R)₂，其中R是氢或烷基，以及NHR和N(R)₂各自连在任何烷基碳原子上。

用于本文的羰基或酮意指基团-C(O)-。

用于本文的羧基(carboxy)或羧基(carboxyl)意指基团-C(O)OH。

用于本文的酰氨基、酰胺基或氨基甲酰基意指基团-C(O)NH₂。

用于本文的氨基甲酰基(C_1-4)烷基意指基团-C(O)NHR或-C(O)N(R)₂，其中R是本文所定义的(C_1-4)烷基。

用于本文的酯意指基团-C(O)OR，其中R是本文所定义的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。

用于本文的卤素或卤代基意指基团氯、溴、氟或碘。

用于本文的卤代烷基意指基团-烷基(卤代基)_1-3，并包括单氟代甲基、二氟代甲基、三氟甲基、三氟代乙基等。

用于本文的卤代烷氧基意指基团-烷氧基(卤代基)_1-3，并包括单氟代甲氧基、二氟代甲氧基、三氟甲氧基、三氟代乙氧基等。

用于本文的巯基意指基团-SH。

用于本文的膦意指基团-PH₃。

用于本文的膦酰氧基意指基团-OP(O)OR，其中R是氢或烷基。

用于本文的硫烷基或硫羟意指基团-S-。

用于本文的亚磺酰基或亚硫酰基意指基团-SO-。

用于本文的磺酰基意指基团-SO₂-。

用于本文的磺基意指基团-SO₂OH。

用于本文的氨基磺酰基意指基团-SO₂NH₂。

用于本文的氨磺酰基、氨磺酰或磺酰胺意指基团-SO₂NHR或-SO₂N(R)₂，其中R是氢或本文所定义的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。

用于本文的硫代(C1-4)烷基意指基团-S-(C_1-4)烷基。

用于本文的硫代羰基意指基团-C(S)R，其中R是本文所定义的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。

用于本文的硫醚意指基团-SH₂。

用于本文的氧基氨基甲酰基意指基团-OC(O)NHR，其中R是氢或本文所定义的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。

本文所述的某些化合物可含有一个或多个手性中心。因此，本发明的化合物可包括纯对映异构体或对映异构体富集的混合物或外消旋体。本发明范围还包括上述用式(I)、(II)和(III)表示的化合物的各个异构体或平衡(equilibrated)混合物。

本发明还涉及呈不同的晶型、多晶型和(无水)水合物形式的式(I)、(II)和(III)化合物。在制药工业中熟知，可通过稍微改变从用于合成制备这类化合物的溶剂中纯化和/或分离的方法，分离出呈任何这类形式的化学化合物。

在本发明的一个实施方案中，提供式(I)化合物：

其中：

X₁，X₂独立选自CH和N，

R₁是碳环、杂环或杂芳基，其中R₁任选被一种或多种取代基所取代，所述取代基独立选自酰氨基、膦酰氧基、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、羟基或C_1-6-烷氧基，

R₂是氢、羟基、硝基、氨基、羧基、氨基甲酰基、卤代基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨磺酰基、巯基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、C_1-6-烷氧基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)2氨基或磺酰基，

R₃′选自氢、杂环基或C_1-8烷基，其中C_1-8烷基任选被一个或多个-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、羟基、C_1-6烷氧基、氨基、氨酰基氨基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、杂环或杂芳基取代，

R₅和R₆选自氢、C_1-6烷基、Na、K和NH₄且是相同的；除非R₅或R₆不存在，为氢或C_1-6烷基，在这种情况下，另一个为不同的，或作为选择，R₅和R₆共同表示钙或镁，

R₇是杂环或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基被一个或多个以下的基团任选取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H，和

R₈是被一个或多个以下的基团任选取代的C_1-6烷基：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨酰基氨基、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H。

在本发明的另一个实施方案中，提供式(II)化合物：

其中：

R₅和R₆各自选自氢、C_1-6烷基、Na、K和NH₄且为相同的；除非R₅或R₆不存在、为氢或C_1-6烷基，在这种情况下，另一个为不同的，或作为选择，R₅和R₆共同表示钙或镁，

在本发明的另一个实施方案中，提供式(III)化合物：

其中：

R₃是-COR₇，

R₇是杂环基或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基被一个或多个以下的基团任选取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H，和

典型地，药学上可接受的盐是无毒的，并能经本领域的任何适当方法，用合适的酸或碱处理本发明化合物而形成。这些酸包括氢氯酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、氨基酸例如天冬氨酸或谷氨酸、芳香酸例如苯甲酸或肉桂酸、磺酸例如对甲苯磺酸或乙烷磺酸、α-OH酸例如柠檬酸和酒石酸、吡喃糖苷酸例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸。如果本发明化合物是酸，可通过用无机或有机碱，包括氨基酸例如甘氨酸和精氨酸、氨、胺(伯胺、仲胺或叔胺)、环胺例如哌啶、吡咯烷、哌嗪和吗啉、NaOH、Ca(OH)₂、KOH、Mg(OH)₂、Fe(OH)₃、Cu(OH)₂、LiOH、Zn(OH)₂和Al(OH)₃处理游离酸，制备该药学上可接受的盐。

本发明包括药用组合物，其含有式(I)、(II)或(III)化合物，或式(I)、(II)或(III)化合物的药学上可接受的盐，或式(I)、(II)或(III)化合物的药用活性代谢物或该代谢物的药学上可接受的盐，和该组合物在治疗激酶介导的疾病中的医疗用途。

本发明包括在有需要的患者中治疗或预防激酶介导的疾病的方法，它包括向患者提供有效量的所述化合物。

本发明包括在有需要的患者中治疗或预防细胞周期蛋白依赖性激酶介导的疾病的方法，它包括向患者提供有效量的所述化合物。

该方法还包括向患者提供呈药品形式的有效量的式(I)、(II)或(III)化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、该代谢物的盐或组合物。

用于本文的术语″ 有效量″还意指约0.001mg/kg-约300mg/kg体重每天范围的量。该术语也包括IC₅₀(50％抑制浓度)为约50μM或更低，约25μM或更低，约15μM或更低，约10μM或更低，约1μM或更低，约0.5μM或更低，或约0.1μM或低的本发明化合物。

用于本文的术语″ 激酶介导的疾病″包括并不限于与不受调节的激酶活性有关的综合征、障碍或疾病和伴随这类活性的病症。

术语″ 不受调节的激酶活性″和″ 不适当的蛋白激酶活性″指1)增加的或不受调节的激酶表达或信号传导，2)增加的激酶表达导致不受调节的细胞增殖，3)增加的激酶信号传导导致不受调节的细胞增殖，或4)导致组成性激酶活化的突变。可通过本领域熟知的程序确定不受调节的激酶活性的存在。

术语″ 不受调节的细胞增殖″和″ 不受调节的细胞增殖活性″指多细胞生物体中一种或多种细胞亚群的细胞增殖导致对多细胞生物体的损害(例如不适或减少的生命期望)。

此外，任何前述方法中的术语″ 激酶介导的疾病″意欲包括本发明化合物在疗效上对治疗、预防或缓解有效的激酶诱导的综合征、障碍、疾病或病症，例如，不限于，慢性和急性炎症、骨关节炎、类风湿性关节炎、关节炎中的滑液翳侵入、多发性硬化、重症肌无力、糖尿病、糖尿病性血管病或视网膜病、伴有视网膜血管增生的眼病、炎性肠道疾病、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、骨病、移植或骨髓移植排斥反应、狼疮、慢性胰腺炎、恶病质、败血症性休克、纤维增生和分化性皮肤疾病或病症(例如，***瘤形成、银屑病、皮炎、湿疹、皮脂溢等)、中枢神经***疾病(例如，早老性痴呆、帕金森氏病、抑郁症等)、癌(包括实体瘤和白血病，例如，神经胶质瘤、表皮样癌、头和颈癌、肺癌、乳腺癌、结肠直肠癌、***癌、胃癌、食道癌、***状癌或卡波济氏肉瘤等和相关病变，例如，不受调节的细胞增殖、肿瘤生长或血管化或转移的癌细胞侵入和迁移等或白血病或淋巴瘤)、眼病(例如，黄斑变性、角膜病、青光眼等)、自身免疫性疾病、病毒性感染(例如，巨细胞病毒)、心脏病(例如，血管瘤动脉粥样化、动脉粥样硬化等)、新内膜形成或移植诱导的血管病(例如，动脉再狭窄等)、肺或肺部疾病(例如，过敏性哮喘、肺纤维化或慢性阻塞性肺部疾病引起的并发症等)或急性和慢性肾病(包括肾或肾脏疾病，例如急性、亚急性或慢性形式的肾小球肾炎或膜性增生性肾小球肾炎、肾小球硬化、先天性多囊肾发育不良、肾纤维化等)。

与本发明方法有关的术语″ 给予″所指的意思是，用明确公开的化合物或虽然未明确公开的某些本发明化合物却明显包括在本发明范围内的化合物或其前药，处理、缓解或预防本文所述的疾病、障碍或综合征。

这类方法包括在疗程期间以不同次数或同时以组合形式给予有效量的一种或多种式(I)化合物或其组合物或药物。这类方法还包括在疗程期间，与一种或多种治疗剂一起，以不同次数或同时以组合形式给予有效量的一种或多种式(I)化合物。

术语″ 前药″指式(I)化合物或其药学上可接受的形式的代谢前体。一般说来，前药是这样的化合物的功能衍生物，当提供给患者时，该化合物是非活性的，但在体内易于转化为活性代谢物的化合物。

术语″ 活性代谢物″指药学上可接受和有效的化合物的代谢产物。例如，合适的前药衍生物的选择和制备的常规程序描述于H.Bundgaard，Elsevier 1985年编辑的″Design of Prodrugs″。

用于本文的术语″ 患者″指各为治疗、观察或实验的对象并处于(或易于)疾病或障碍的发生风险或患有与不受调节的CDK活性相关的疾病或障碍的动物、哺乳动物、人或患者。

术语″ 组合物″指含有本发明化合物的产物(例如，含有特定量的特定成分的产物以及直接或间接由特定量的特定成分的这类组合产生的任何产物)。

术语″ 药物″指用于处理或缓解激酶介导的疾病或病症的产物。

术语″ 药学上可接受的″指这样的分子实体和组合物，它们具有用于配制本发明组合物或药物的足够的纯度和质量，且当被适当提供给动物或人时，它不会产生不利的、过敏的或其它麻烦的反应。由于人用(临床和非处方药)和兽用同样包括在本发明范围，药学上可接受的制剂应包括针对人或兽用的组合物或药物。

术语″ 联合治疗″指为治疗大量不同的激酶诱导的障碍，与一种或多种治疗剂联合，采用一种或多种式(I)化合物或其组合物或药物，并能有利地促进比被推荐用于治疗特定不受调节的细胞增殖障碍的更减少的有效剂量的式(I)化合物和/或该治疗剂的利用。因此，预期可在用特定治疗剂治疗之前、期间或之后采用本发明化合物。

术语″ 治疗剂″指用来治疗CDK诱导的癌的化学治疗剂或用来治疗巨细胞病毒的抗病毒剂。化学治疗剂包括但不限于抗血管生成剂(anti-angiogenic agents)、抗肿瘤剂、细胞毒性剂、细胞增殖抑制剂、放射治疗等或它们的组合。

术语″ 治疗″或″ 预防″指但不限于，促进对恶性肿瘤的根治、抑制其发展或促进其停滞。

术语″ 放射治疗″指包括使有需要的患者暴露于辐射的疗法。本发明包括与放射治疗联合提供一种或多种式(I)化合物或其组合物或药物的方法。提供这类治疗的程序为本领域的那些技术人员所知。放射治疗的适当方案会类似于已经用于临床治疗的那些，其中的放射治疗单独或与其它化学治疗剂结合采用。

药物制剂可表现为每单位剂量含有预定量的活性成分的单位剂型。根据要治疗的病症、提供途径等，这类单位剂量可含有约1mg-约700mg的本发明化合物。典型地，医师会确定会最适于个体患者的实际剂量，而这会随具体患者的年龄、体重和响应而不同。

可通过制药领域熟知的任何方法制备药物制剂，且该制剂适于通过任何适当的途径，例如经口(包括口腔或舌下)、局部(包括口腔、舌下或透皮)、***、胃肠外(包括静脉内、皮下、肌内或皮内)、直肠或经鼻途径提供。

经口给药的制剂可作为胶囊剂或片剂；散剂或颗粒剂；水或非水液体中的溶液剂或悬液剂；水包油型液体乳剂或油包水型乳剂、可食用泡沫剂或咀嚼剂(whips)存在。

局部给药的制剂可作为软膏剂、霜剂、悬液剂、洗剂、散剂、溶液剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油剂存在。

透皮给药的制剂可作为打算与接受者的表皮保持长时间的密切接触的离散贴剂存在。

直肠给药的制剂可作为栓剂或灌肠剂存在。

经鼻给药的制剂可作为鼻喷雾剂或滴鼻剂存在，并包括活性成分的水或油溶液或具有约20-约500微米粒径范围的粗粉末。

吸入制剂可以作为细颗粒粉或烟雾存在，其可通过各种类型的计量剂量的加压气雾剂、喷雾器或吹入器的方式产生。

***给药的制剂可作为***栓剂、卫生栓、霜剂、凝胶剂、糊剂、模剂(forms)或喷雾制剂存在。

适于胃肠外给药的药物制剂包括含水和不含水灭菌注射溶液，它可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与预定的接受者血液等渗的溶质；和含水和不含水灭菌悬液，它包括悬浮剂和增稠剂。

也可经脂质体传递***，例如小单层囊泡(vesicles)和大单层囊泡和多层囊泡，提供本发明化合物或其药学上可接受的盐。可经多种磷脂例如硬脂胺、卵磷脂或胆固醇形成脂质体。

也可通过以单克隆抗体作为载体传递本发明化合物或其药学上可接受的盐。该化合物也可与作为靶向药物载体的可溶聚合物偶合。这类聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基丙基甲基丙烯酰胺酚、聚羟基乙基天冬酰胺酚或被棕榈酰残基取代的聚环氧乙烷多熔素。此外，所述化合物可偶合到用于实现药物控释的一种可生物降解的聚合物中，例如，聚乳酸(polyactic acid)、聚ε己内酯(polepsilon caprolactone)、多羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲嵌段共聚物。

在癌治疗领域中，普遍采用不同处理的组合治疗癌患者。因此，本文所述的抗增殖活性可用作唯一的治疗或可涉及一种或多种其它物质和/或治疗。可通过同时、顺序或分别提供单独的组成来实现这样的联合治疗。除上述抗增殖治疗外，这些联合治疗的其它组成包括手术、放疗或化疗。这类化疗可包括三种主要种类的治疗剂：

1.细胞周期特异性化疗剂，包括但不限于，表鬼臼毒素(例如，依托泊苷和替尼泊苷)；双萜类(例如，紫杉醇和多西他赛)；长春生物碱(例如，长春新碱、长春地辛、长春碱和长春瑞滨)；抗代谢药(例如，克拉屈滨、阿糖胞苷、别嘌醇、氟达拉滨、甲氨蝶呤、巯嘌呤、硫鸟嘌呤、5-氟尿嘧啶和氟代脱氧尿苷)和喜树碱(例如，9-氨基喜树碱、托泊替康和伊立替康)。

2.细胞毒化疗剂，包括但不限于烷基化剂(例如，六甲蜜胺、白消胺、美法仑、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、氮芥、卡莫司汀、洛莫司汀、达卡吧嗪、卡铂、顺铂和奥沙利铂)；抗肿瘤抗生素(例如，博来霉素、伊达比星、丝裂霉素-c、多柔比星、道柔霉素、表柔比星、放线菌素D和普卡霉素)；

3.其它抗癌剂，包括但不限于，睾酮5α-二氢还原酶抑制剂(例如，非那雄胺)；抗***(例如，他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和iodoxyfene)；孕激素类(progestrogens)(例如，醋酸甲地孕酮)；芳香酶抑制剂(例如，阿那曲唑、来曲唑、伏氯唑和依西美坦；抗雄激素(例如，氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、和cytorterone acetate)；LHRH激动剂和拮抗剂(例如，醋酸戈舍瑞林和luprolide)；金属蛋白酶抑制剂(例如，马立马司他)；尿激酶纤溶酶原激活剂受体功能抑制剂；环加氧酶2型抑制剂(例如，塞来考昔)；血管形成抑制剂，例如VEGFR和TIE-2抑制剂；生长因子功能抑制剂，例如肝细胞生长因子的抑制剂；erb-B2、erb-B4、表皮生长因子受体(例如，Iressa和Tarceva)、血小板衍生的生长因子受体、血管内皮细胞生长因子受体和TIE-2；除本发明所述的这些之外的其它酪氨酸激酶抑制剂；和除本发明所述那些之外的其它丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂。

最常用的药物部分选自紫杉醇、喜树碱、依托泊苷、多柔比星、bohemine、甲氨蝶呤和鬼臼毒素。

用于本文所述的治疗方法和药用组合物中的代表性化合物包括选自下列的化合物：

和

可采用下述的反应途径和合成方案，使用本领域可得的技术，采用易于得到的原料，制备根据本发明的化合物。

方案A

通常，制备式(I)化合物的方法包括以下步骤：

a.使式A1化合物与式A2化合物反应，制备式A3化合物；

其中式A1化合物含有合适的保护基团部分PG_a、合适的连接基团部分R_a和合适的反应基团部分Q_a；

其中式A2化合物含有合适的反应基团部分Q_b和合适的保护基团部分PG_b；

其中式A3化合物含有合适的保护基团部分PG_a、合适的连接基团部分R_a和合适的反应基团部分Q_a；

其中R_a连接基团还结合某些部分的作为反应产物的Q_a和Q_b反应基团；

b.使式A3化合物转化为式A4化合物；

其中式A4化合物含有合适的保护基团部分PG_a、合适的连接基团部分R_a和合适的反应基团部分Q_c；

c.使式A5化合物与式A4化合物反应，制备式A6化合物；

d.使式A6化合物转化为式(I)化合物，

在式(I)化合物中，R₃基团结合作为反应产物的某些R_a连接基团部分。

方案B

更具体地说，生成式A3混合酐化合物的方法包括：

向氮气吹洗过的烧瓶加入THF、羧酸和Et₃N。冷却混合物至0℃和逐滴加入THF中的新戊酰氯。加入后，0℃下搅拌混合物1小时，再过滤，用THF洗涤沉淀。浓缩滤液，无须任何纯化，快速使用产物。

方案C

通常，制备式(I)化合物的方法包括下列步骤

更具体地说，式A3混合酐化合物的生成程序包括下列步骤：

更具体地说，式(I)前药化合物的生成程序包括下列步骤：

向氮气吹洗过的烧瓶加入4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺(如WO2002057240中所述般制备)和THF。冷却混合物至0℃并逐滴加入叔丁醇钾。加入后，于0℃搅拌混合物1小时，再逐滴加入THF中的混合酐。继续搅拌30分钟，再将混合物加热至室温(rt)并彻夜搅拌。浓缩后，经快速层析法纯化残余物。

本领域技术人员所知的其它已知或商业上可得到的环状或无环、对称或不对称的酐，可用来制备本发明范围内的其它代表性化合物。

举出下列实施例帮助理解本发明，而并不打算且不应该被解释为以任何方式限制随后的权利要求书中所要求的本发明。

实施例1

4-{4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰基氨基}-4-氧代-丁酸(Cpd1)

向氮气吹洗过的烧瓶加入4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(0.10g，0.25mmol)和THF(10mL)。冷却混合物至0℃并逐滴加入叔丁醇钾(0.28mL，THF中的1.0M溶液)。加入后，于0℃搅拌混合物1小时，再逐滴加入琥珀酸酐(5mL THF中28mg，0.28mmol)。继续搅拌30分钟，再加热混合物至室温并彻夜搅拌。加入几滴乙酸，再浓缩混合物。经快速层析法纯化残余物(硅胶，CH₂Cl₂∶MeOH/8∶2)，得到白色固体的所需产物(39mg，31％)。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.70(d，2H)，7.63(m，1H)，7.42(d，2H)，7.15(t，2H)，2.41(brs，4H)；MS(ESI)m/z：493(M+H)⁺。

实施例2

N-(2-氨基-乙酰基)-4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺(Cpd2)

采用混合酐形成程序，由N-叔丁氧基羰基甘氨酸(2.0g，11.4mmol)和新戊酰氯(5mL THF中1.55mL，12.4mmol)形成2.9g(100％)化合物2a。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ4.95(brs，1H)，4.01(brs，2H)，1.45(s，9H)，1.29(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(1.5g，3.8mmol)、叔丁醇钾(4.2mL，THF中的1.0M溶液)和化合物2a(10mL THF中1.2g，4.6mmol)生成化合物2b(250mg，15％)。¹H NMR(300MHz，DMSO)δ9.58(s，2H)，7.92(brs，2H)，7.69(p，1H)，7.47(d，2H)，7.30(m，4H)，3.15(d，2H)，1.31(s，9H)；MS(ESI)m/z：550(M+H)⁺。

使化合物2b(0.20g，0.36mmol)悬浮于CH₂Cl₂(40mL)中并逐滴加入MsOH(1.0mL)，再彻夜搅拌混合物。浓缩后，加入EtOAc以沉淀所需产物，经过滤收集。生成0.22g(36％)盐。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.78(d，2H)，7.67(p，1H)，7.48(d，2H)，7.16(t，2H)，3.72(s，2H)，2.75(s，15H)；MS(ESI)m/z：450(M+H)⁺。

实施例3

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙酰基]-苯磺酰胺(Cpd3)

采用混合酐形成程序，由2-(2-甲氧基乙氧基)乙酸(2.0g)和新戊酰氯(1.98g)生成3.2g(100％)化合物3a。¹H NMR(300MHz，CDCCl₃)δ4.25(s，2H)，3.75(m，4H)，3.35(s，3H)，1.23(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(1.0g)和化合物3a(0.65g)生成130mg(11％)化合物3。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.78(d，2H)，7.68(p，1H)，7.50(d，2H)，7.16(t，2H)，3.96(s，3H)，3.59(t，2H)，3.52(t，2H)，3.35(s，3H)； MS(ESI)m/z：509(M+H)⁺。

实施例4

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-(2-四唑-1-基-乙酰基)-苯磺酰胺(Cpd4)

采用混合酐形成程序，由四唑基乙酸(tetaazolylacetic acid)(1.0g)和新戊酰氯(1.0g)生成1.6g(96％)化合物4a。¹H NMR(300MHz，CDCCl₃)δ8.90(s，1H)，5.45(s，2H)，1.21(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(1.0g)和化合物4a(0.65g)生成120mg(10％)4。¹H NMR(300MHz，D₂O)δ9.05(s，1H)，7.65(m，3H)，7.25(d，2H)，7.12(t，2H)，5.15(s，2H)，3.96(s，3H)；MS(ESI)m/z：503(M+H)⁺。

实施例5

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙酰基]-苯磺酰胺(Cpd5)

采用混合酐形成程序，由3-N-甲基哌嗪基丙酸(3.0g)和新戊酰氯(2.36g)生成4.38g(98％)化合物5a。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ2.75(t，2H)，2.65(t，2H)，2.60-2.40(m，4H)，2.25(s，3H)，1.21(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a和化合物5a(0.78g)生成190mg(14％)化合物5。¹H NMR(300MHz，DMSO)δ9.80(s，2H)，8.00(brs，2H)，7.70(p，1H)，7.55(d，2H)，7.41(d，2H)，7.30(t，2H)，2.65(t，2H)，2.38(brs，4H)，2.20(t，2H)，2.15(s，3H)；MS(ESI)m/z：549(M+H)⁺。

实施例6

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-(2-二甲基氨基-乙酰基)-苯磺酰胺(Cpd6)

采用混合酐形成程序，由N，N-二甲基甘氨酸(5.12g)和新戊酰氯(6.73g)生成9.1g(98％)化合物6a。¹H NMR(300MHz，CDCCl₃)δ3.30(s，2H)，2.35(s，6H)，1.21(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a和化合物6a(0.57g)形成180mg(15％)该前药。¹H NMR(300MHz，DMSO)δ9.60(s，1H)，7.90(brs，2H)，7.70(p，1H)，7.55(d，2h)，7.35(m，4H)，3.48(s，2H)，2.65(s，6H)；MS(ESI)m/z：480(M+H)⁺。

实施例7

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-(3-吗啉-4-基-丙酰基)-苯磺酰胺(Cpd 7)

采用混合酐形成程序，由吗啉基丙酸(1.25g)和新戊酰氯(1.05g)生成1.9g(100％)化合物7a。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ3.68(m，4H)，2.75(t，2H)，2.65(t，2H)，2.45(m，4H)，1.21(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(1.0g)和化合物7a(0.74g)生成120mg(9.6％)化合物7。¹H NMR(300MHz，DMSO)δ9.95(s，1H)，7.90(brs，2H)，7.70(p，1H)，7.60(d，2H)，7.45(d，2H)，7.25(t，2H)，3.48(s，4H)，2.65(m，2H)，2.35(m，4H)；MS(ESI)m/z：536(M+H)⁺。

实施例8

4-{4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰基氨基}-4-氧代-丁酸乙酯(Cpd8)

向氮气吹洗过的烧瓶加入4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(1.0g，2.5mmol)和THF(100mL)。冷却混合物至0℃并逐滴加入叔丁醇钾(2.8mL，THF中1.0M溶液)。加入后，0℃下搅拌混合物1小时，再逐滴加入4-氯-4-氧代丁酸乙酯(0.46g in 10mL THF，2.8mmol)。继续搅拌30分钟，再加热混合物至室温并彻夜搅拌。浓缩后，经快速层析法纯化残余物(硅胶，CH₂Cl₂∶MeOH/9∶1)，得到白色固体的所需产物(200mg，15％)。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.72(d，2H)，7.70(m，1H)，7.50(d，2 H)，7.15(t，2H)，4.20(q，2H)，3.32(s，2H)，2.71(s，2H)，1.25(t，2H)；MS(ESI)m/z：523(M+H)⁺。

实施例9

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-{2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基}-苯磺酰胺(Cpd9)

采用混合酐形成程序，由2-2-甲氧基乙氧基乙氧基乙酸(2.00g)和新戊酰氯(1.49g)生成2.7g(92％)化合物9a。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ4.27(s，2H)，3.78(t，J＝7.0Hz，2H)，3.69(t，J＝6.9Hz，2H)，3.66(t，J＝7.0Hz，2H)，3.58(t，J＝7.0Hz，2H)，3.37(s，3H)，1.24(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(2.0g)和化合物9a(1.6g)生成422mg(15％)化合物9。¹H NMR(300MHz，丙酮)δ11.13(brs，1H)，9.20(brs，2H)，7.80(p，J＝6.9Hz，1H)，7.71(d，J＝7.0Hz，2H)，7.64(d，J＝7.0Hz，2H)，7.29(t，J＝7.0Hz，2H)，6.33(brs，2H)，4.30(s，2h)，3.86(t，J＝6.9Hz，2H)，3.75(t，J＝7.0Hz，2H)，3.60(t，J＝6.9Hz，2H)，3.48(t，J＝7.0Hz)，3.21.(s，3H)；MS(ESI)m/z：555(M+H)⁺。

实施例10

N-[2-(2，6-二氟-苯甲酰基)-5-(4-氨磺酰-苯基氨基)-2H-[1，2，4]***-3-基]-2-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰胺(Cpd10)

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟代苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(2.0g)和化合物9a(1.6g)生成394mg(14％)化合物10。¹HNMR(300MHz，丙酮)δ10.23(brs，1H)，8.92(brs，1H)，7.83(d，J＝7.0Hz，2H)，7.75(p，J＝6.9Hz，1H)，7.63(d，J＝7.0Hz，2H)，7.50(brs，2H)，7.27(t，J＝7.0Hz，2H)，3.96(s，2H)，3.69(t，J＝6.9Hz，2H)，3.63(brs，6H)，3.29(s，3H)。

实施例11

5-{4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰基氨基}-5-氧代-戊酸(Cpd11)

向氮气吹洗过的烧瓶加入4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(2.0g，5.1mmol)和THF(200mL)。冷却混合物至0℃并逐滴加入叔丁醇钾(6.1mL，THF中的1.0M溶液)。加入后，0℃下搅拌混合物1小时，再逐滴加入戊二酸酐(10mL THF中0.69g，6.0mmol)。继续搅拌30分钟，再加热混合物至室温并彻夜搅拌。加入几滴乙酸，再浓缩混合物。经快速层析法纯化残余物(硅胶，CH₂Cl₂∶MeOH/8∶2)，得到白色固体的所需产物化合物11(670mg，26％)。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.75(d，J＝7.0Hz，2H)，7.68(m，1H)，7.50(d，J＝6.9Hz，2H)，7.15(t，J＝6.9Hz，2H)，2.36(t，J＝6.8Hz，2H)，1.80(t，J＝6.8Hz，2H)；MS(ESI)m/z：493(M+H)⁺。

实施例12

{2-[2-(2-{4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰基氨基}-2-氧代-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-乙酸2TFA盐(Cpd12)

向烧瓶中加入2-(2-羧基甲氧基乙氧基)乙氧基乙酸(17.0g，76.5mmol)、EDCI(22.0g，114.8mmol)、t-BuOH(5.7g，76.5mmol)、DMAP(0.9g，7.6mmol)和DCM(300mL)。彻夜搅拌混合物再浓缩。使残余物溶解于水，再用EtOAc萃取。分离有机层，经MgSO₄干燥，再浓缩并经快速层析法纯化残余物[硅胶，DCM∶MeOH/7∶3]，得到17.2g(81％)所需产物2-(2-叔丁氧基羰基甲氧基)乙氧基乙氧基乙酸化合物12a。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ4.00(s，4H)，3.75(m，8H)，1.46(s，9H)。

采用混合酐形成程序，由2-(2-叔丁氧基羰基甲氧基)乙氧基乙氧基乙酸化合物12a(3.0g)和新戊酰氯(1.4g)生成3.6g(91％)化合物12b。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ4.30(s，2H)，3.94(s，2H)，3.75(m，2H)，3.70(m，6H)，1.46(s，9H)，1.22(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(3.0g)和化合物12b(3.3g)生成790mg(16％)化合物12c。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.46(brs，1H)，7.78(d，J＝6.9Hz，1H)，7.55(p，J＝7.0Hz，1H)，7.36(d，J＝7.0Hz，2H)，7.05(t，J＝7.0Hz，2H)，5.90(brs，2H)，4.20(s，2H)，4.03(s，2H)，3.82(m，2H)，3.73(m，6H)，1.45(s，9H)。

使化合物12c(50mg)溶解于TFA(1mL)和DCM(1mL)并搅拌2小时。真空除去溶剂，用EtOAc洗涤残余物，得到56mg(96％)化合物12。¹H NMR(300MHz，CD3OD)δ 7.73(m，3H)，7.56(d，J＝7.0Hz，2H)，7.21(t，J＝6.9Hz)，4.26(s，2H)，4.16(s，2H)，3.90-3.50(m，8H)。

实施例13

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-((S)-2-氨基-3-羟基-丙酰基)-苯磺酰胺(Cpd13)

向烧瓶中加入N-Boc-L-丝氨酸(3.0g，14.6mmol)、PPTS(0.37g，1.47mmol)、二氢吡喃(1.23g，14.6mmol)和DCM(100mL)。室温下彻夜搅拌混合物，再浓缩。使残余物溶解于EtOAc，用水洗涤。有机层经MgSO₄干燥，浓缩得到3.9g(92％)化合物13a。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)5.58(m，1H)，5.42(非对映异构体，m，1H)，4.61(m，1H)，4.59(非对映异构体，m，1H)，4.47(m，1H)，4.43(非对映异构体，m，1H)，4.15(m，1H)，3.94(m，1H)，3.84(非对映异构体，m，1H)，3.65(非对映异构体，m，1H)，3.53(m，1H)，1.90-1.46(m，6H)，1.45(s，9H)。

采用混合酐形成程序，由化合物13a(3.0g)和新戊酰氯(1.4g)生成3.5g(91％)化合物13b。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ5.55(m 1H)，5.42(非对映异构体，m，1H)，4.61(m，1H)，4.55(非对映异构体，m，1H)，4.52(m 1H)，4.19(m，1H)，3.93(m，1H)，3.84(非对映异构体，m，1H)，3.65(非对映异构体，m，1H)，3.50(m，1H)，1.90-1.50(m，6H)，1.45(s，9H)，1.23(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(2.0g)和化合物13b(2.3g)生成410mg(12％)化合物13c。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.50(s，1H)，7.82(d，J＝7.0Hz，2H)，7.53(m，1H)，7.40(d，J＝6.9Hz，2H)，7.12(s，1H)，7.05(t，J＝7.0Hz，2H)，5.68(m，1H)，4.56(m，1H)，4.50(m，1H)，3.93(非对映异构体，m，1H)，3.78(m，1H)，3.74(m，1H)，3.45(m，1H)，1.80-1.45(m，6H)，1.40(s，9H)。

使70mg化合物13c溶解于MOH并浓缩。加入HCl。室温下彻夜搅拌后，真空除去溶剂，用EtOAc洗涤残余物，得到39mg(62％)所需产物化合物13。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.80(d，J＝7.0Hz，2H)，7.70(p，J＝6.9Hz，1H)，7.50(d，J＝7.0Hz，2H)，7.20(t，J＝7.0Hz，2H)，4.05-3.75(m，3H).MS(ESI)m/z：482(M+H)⁺。

实施例14

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-((R)-2-氨基-丙酰基)-苯磺酰胺(Cpd14)

采用混合酐形成程序，由N-Boc-D-Ala(2.0g)和新戊酰氯(1.4g)生成2.6g(92％)化合物14a。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ4.96(brs，1H)，4.40(m，1H)，1.46(d，J＝6.8Hz)，1.45(s，9H)，1.25(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(2.0g)和化合物14a(1.7g)生成470mg(16％)化合物14b。¹H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.78(d，J＝7.0Hz，1H)，7.68(m，1H)，7.52(d，J＝7.0Hz，2H)，7.12(t，J＝6.9Hz，2H)，4.01(m，1H)，1.32(s，9H)，1.21(m，3H)。

使化合物14b(200mg)溶解于二氯甲烷和TFA的混合溶剂并搅拌1小时。真空除去溶剂，用EtOAc洗涤残余物，得到155mg(46％)化合物14。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.78(d，J＝7.0Hz，2H)，7.65(p，J＝6.9Hz，1H)，7.51(d，J＝7.0Hz，2H)，7.15(t，J＝7.0Hz，2H)，3.85(q，J＝7.1Hz，1H)，1.42(d，/＝7.1Hz，3H).MS(ESI)m/z：466(M+H)⁺。

实施例15

(S)-2-氨基-N-((S)-2-{4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰基氨基}-1-甲基-2-氧代-乙基)-丙酰胺3 TFA盐(Cpd15)

采用混合酐形成程序，由N-Boc-L-Ala-L-Ala(3.0g)和新戊酰氯(1.5g)生成3.7g(92％)化合物15a。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ5.05(brs，1H)，4.60(m，1H)，4.20(m，1H)，1.50(m，15H)，1.22(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(3.0g)和化合物15a(3.3g)生成580mg(13％)化合物15b。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.68(d，J＝7.0Hz，2H)，7.64(p，J＝6.9Hz，1H)，7.32(d，J＝7.0Hz，2H)，7.06(t，J＝7.0Hz，2H)，4.14(m，1H)，3.63(m，1H)，1.30(m，15H).MS(ESI)m/z：636(M+H)⁺。

使化合物15b(200mg)溶解于二氯甲烷和TFA的混合溶剂并搅拌1小时。真空除去溶剂，用EtOAc洗涤残余物，得到116mg(60％)化合物15。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.71(d，J＝7.0Hz，2H)，7.65(p，J＝6.9Hz，1H)，7.46(d，J＝7.0Hz，2H)，7.14(t，J＝7.0Hz，2H)，4.23(m，1H)，3.83(m，1H)，1.30(m，6H).MS(ESI)m/z：537(M+H)⁺。

实施例16

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-((S)-吡咯烷-2-羰基)-苯磺酰胺(Cpd 16)

采用混合酐形成程序，由N-Boc-L-Pro(2.0g)和新戊酰氯(1.1g)生成2.5g(91％)化合物16a。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ4.28(m，1H)，3.75(m，1H)，3.50(m，1H)，2.25(m，1H)，2.10(m，1H)，1.93(m，1H)，1.83(m，1H)，1.42(s，9H)，1.28(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(2.0g)和化合物16a(1.8g)生成420mg(14％)化合物16b。¹H NMR(300MHz，丙酮)δ9.15(s，1H)，7.79(p，/＝6.8Hz，1H)，7.75(d，J＝6.9Hz，2H)，7.72(d，J＝7.0Hz，2H)，7.25(t，J＝7.0Hz，2H)，6.41(brs，2H)，4.52(m，1H)，3.55(m，2H)，2.40-1.90(m，4H)，1.40(brs，9H)。

使化合物16b(100mg)溶解于二氯甲烷和TFA的混合溶剂中，并搅拌1小时。真空除去溶剂，用EtOAc洗涤残余物，再将TFA盐转换为HCl盐，得到62mg(62％)化合物16。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.75(p，J＝6.9Hz，1H)，7.70(d，J＝7.0Hz，2H)，7.45(d，J＝7.0Hz，2H)，7.20(d，J＝6.9Hz，2H)，7.71(m，1H)，4.20(m，1H)，4.08(m，1H)，4.68(m，2H)，4.59(m，1H)，4.32(m，1H).MS(ESI)m/z：492(M+H)⁺

实施例17

(S)-3-氨基-4-{4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰基氨基}-4-氧代-丁酸(Cpd 17)

采用混合酐形成程序，由N-Boc-O-t-Bu-L-Asp(3.0g)和新戊酰氯(1.4g)生成3.5g(88％)化合物17a。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ5.55(m，1H)，4.60(m，1H)，2.88(m，1H)，2.78(m，1H)，1.40(s，18H)，1.20(s，9H)。

采用前药形成程序，由4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(3.0g)和化合物17a(3.4g)生成500mg(10％)化合物17b。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.75(d，J＝6.8Hz，2H)，7.68(p，J＝6.8Hz，1H)，7.45(d，J＝6.9Hz，2 H)，7.12(d，J＝7.0Hz，2H)，4.25(m，1H)，2.56(m，1H)，2.45(m，1H)，1.40(s，9H)，1.30(s，9H).MS(ESI)m/z：664(M-H)⁺。

使化合物17b(200mg)溶解于二氯甲烷和TFA混合溶剂并搅拌1小时。真空除去溶剂，用EtOAc洗涤残余物，再将TFA盐转换为HCl盐，得到110mg(59％)化合物17。¹H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.80(d，J＝6.9Hz，2H)，7.78(p，J＝7.0Hz，1H)，7.50(d，J＝7.0Hz，2H)，7.15(d，J＝6.9Hz，2H)，3.65(m，1H)，3.90(m，2H).MS(ESI)m/z：510(M+H)⁺。

实施例18

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-戊酰基-苯磺酰胺(Cpd18)

通过室温下，在无水四氢呋喃(5ml)中，使4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a(100mg，0.254mmol)与叔丁醇钾(0.305mmol)反应1小时，制备化合物18。随后加入戊酰氯(0.305mmol，36.2ul)并于室温下搅拌16小时，再经用5％甲醇/二氯甲烷的柱层析法纯化，得到得率为17％的化合物18。¹H NMR(400MHz，DMSO)δ11.75(s，1H)，9.99(s，1H)，8.02(s，2H)，7.71(m，1H)，7.65(d，2H)，7.49(d，2H)，7.35(t，2H)，2.14(t，2H)，1.36(m，2H)，1.14(m，2H)，0.77(t，3H)；MS(ESI)m/z 479(M+H⁺)，501(M+Na⁺)。

实施例19

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-丁酰基-苯磺酰胺(Cpd19)

通过在无水四氢呋喃中，使4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a与丁酰氯和叔丁醇钾反应，得到得率为14％的化合物19。¹H NMR(400MHz，DMSO)δ11.75(s，1H)，9.99(s，1H)，8.02(s，2H)，7.71(m，1H)，7.65(d，2H)，7.49(d，2H)，7.35(t，2H)，2.12(t，2H)，1.40(q，2H)，0.73(t，3H)；MS(ESI)m/z 464(M+H⁺)，487(M+Na⁺)。

实施例20

4-[5-氨基-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-N-丙酰基-苯磺酰胺(Cpd 20)

通过在无水四氢呋喃中，使4-[5-氨基-1-(2，6-二氟苯甲酰基)-1H-[1，2，4]***-3-基氨基]-苯磺酰胺化合物1a与乙酸酐和叔丁醇钾反应，制备得率为22％的化合物20。¹H NMR(400MHz，DMSO)δ11.80(s，1H)，9.99(s，1H)，8.01(s，2H)，7.71(m，1H)，7.65(d，2H)，7.49(d，2H)，7.35(t，2H)，1.87(s，3H)；MS(ESI)m/z 437(M+H⁺)，459(M+Na⁺)。

生化和生物评价

研究从以上实施例选择的化合物的激酶活性。采用一组蛋白激酶，它包含CDK1、VEGFR和HER2。各实验描述如下：

CDK1筛选试验

制备激酶反应混合物，它含有50mM Tris-HCl pH＝8、10mMMgCl₂、0.1mM Na₃PO₄、1mM DTT、10μM ATP、0.025μM生物素化组蛋白-H1肽底物和0.2μCuries每孔³³P-γ-ATP(2000-3000Ci/mmol)。将70μL激酶反应混合物分配进链霉抗生物素覆盖的FlashPlate^TM(Cat.#SMP103，NEN，Boston，MA)的每孔中。再将于100％DMSO中的1μL测试化合物储备液加至各孔，产生反应中最终浓度为1％的DMSO，最终反应体积为100μl。

接着，CDKl：Cyclin-B蛋白质被稀释于50mM Tris-HCl pH＝8.0、浓度为1ng/每μL的0.1％BSA，将30μL(每测试孔30ng酶)加至各孔，以启动反应。30℃下培养该反应物1小时。1小时培养结束后，通过从培养板抽吸混合物，以终止反应，并用含100mM EDTA的PBS洗涤各孔两次。组蛋白-H1生物素化肽底物被固定于Flashplate^TM，用闪烁计数器读出培养板测量对P-γ-ATP的结合。通过观察结合到被固定肽的³³P-γ-ATP的量的减少测定CDK1酶活性的抑制作用。

CDK2筛选试验

制备激酶反应混合物，它含有50mM Tris-HCl pH＝8、10mMMgCl₂、0.1mM Na₃PO₄、1mM DTT、10μM ATP、0.025μM生物素化组蛋白-H1肽底物和0.2μCuries每孔³³P-γ-ATP(2000-3000Ci/mmol)。将70μL激酶反应混合物分配到链霉抗生物素覆盖的FlashPlate^TM(Cat.#SMP103，NEN，Boston，MA)的每孔中。再将lμL于100％DMSO中的测试化合物储备液加至各孔，反应中所产生的最终浓度为1％DMSO，最终体积为100μl。接着，将CDK2：Cyclin-E蛋白质稀释于50mM Tris-HCl pH＝8.0中，浓度为1ng/每μL的0.1％BSA，将30μL(每测试孔30ng酶)加至各孔，以启动反应。30℃下培养该反应1小时。1小时培养结束后，通过从培养板抽吸混合物终止反应，并用含100mM EDTA的PBS洗涤各孔两次。组蛋白-H1生物素化肽底物被固定于Flashplate^TM，用闪烁计数器读出培养板测量对³³P-γ-ATP的结合。通过观察结合到被固定肽的³³P-γ-ATP的量的减少测定CDK2酶活性的抑制作用。

VEGF-R2激酶筛选试验

制备激酶反应混合物，它含有50mM Tris-HCl pH＝8、10mMMgCl₂、0.1mM Na₃PO₄、1mM DTT、10μM ATP、0.025μM生物素化肽底物和0.8μCuries每孔³³P-γ-ATP(2000-3000Ci/mmol)。将70μL激酶反应混合物分配到链霉抗生物素覆盖的Flashplate^TM(Cat.#SMP103，NEN，Boston，MA)的各孔中。再将于100％DMSO中的1μL测试化合物储备液加至各孔，反应中所产生的最终浓度为1％DMSO，最终反应体积为100μL。接着，将含有N-端的6XHIS标记的可溶解大鼠酪氨酸激酶稀释于50mM Tris-HCl pH＝8.0中，浓度为5ng每μL的0.1％BSA，将30μL(每测试孔150ng酶)加至各孔，以启动反应。30℃下培养该反应1小时。1小时培养结束后，通过从培养板抽吸反应混合物终止反应，并用含100mM EDTA的PBS洗涤各孔两次。PLCl生物素化肽底物被固定于Flashplate^TM，用闪烁计数器读出培养板测量对³³P-γ-ATP的结合。通过观察结合到被固定肽的³³P-γ-ATP的量的减少测定VEGF-R2激酶的酶活性的抑制作用。

HER2激酶筛选试验

HER2激酶试验如上对VEGF-R激酶试验所述进行，但用人表皮生长因子受体-2(HER2)构件(在N-端含有聚组氨酸标记，后接24个额外的氨基酸，并于氨基酸676(检索号M11730)开始，后接HER2细胞质域的剩余部分)代替上述酶。

激酶的定义和来源

VEGF-R(血管内皮细胞生长因子受体-2)是融合蛋白，它在N-端含有聚组氨酸标记，后接大鼠VEGF-R2激酶域的氨基酸786-1343(GenBank检索号U93306)。从表达人CDK1催化亚基和其正调节的亚基细胞周期蛋白B(New England Biolabs，Beverly，MA，Cat.#6020)的昆虫细胞分离CDK1(细胞周期蛋白依赖性激酶1)。可从商业途径得到含细胞周期蛋白A的复合物中的CDK2(Upstate Biotech，LakePlacid，NY)。HER2(人表皮生长因子受体-2)构件在N-端含有聚组氨酸标记，后接24个额外的氨基酸并于氨基酸676开始，后接HER2细胞质域的剩余部分(remainder)。

肽底物

VEGF-R和HER2 (Biotin)KHKKLAEGSAYEEV-酰胺

CDK1和CDK2 (Biotin)KTPKKAKKPKTPKKAKKL-酰胺

对上述化合物进行的试验的结果列于下表I。所列出的IC₅₀＞10或＞100意指在最高试验浓度下观察到少于50％的抑制作用。

表I：激酶活性的抑制作用(IC₅₀)

化合物	IC₅₀(μM)CDK1	IC₅₀(μM)CDK2	IC₅₀(μM)VEGFR	IC₅₀(μM)HER2
化合物	IC₅₀(μM)CDK1	IC₅₀(μM)CDK2	IC₅₀(μM)VEGFR	IC₅₀(μM)HER2	1234567891011121314151617181920	0.491.071.665.391.342.131.550.474.692.5512.370.761.410.741.360.230.981.930.281.82	0.070.120.250.430.270.320.120.060.440.301.530.080.140.060.100.030.090.470.050.28	1.661.972.562.341.881.221.650.471001.762.7716.781.540.892.037.311.561.540.771	101010101010＞1001.23＞100＞100＞100＞10010101050205510

测定细胞增殖抑制作用的试验

通过测量细胞中结合进新合成的DNA的¹⁴C-示踪的胸苷，确定测试化合物抑制细胞生长增殖的能力。该方法用在衍生自癌的细胞系，所述癌源自几种组织，例如，HeLa子***(American TypeCulture Collection(ATCC)，Virginia，Cat.#CCL-2)、A375恶性黑素瘤(ATCC CRL-1619)和HCT-116结肠癌(CCL-247)。这样，可确定化合物对带有许多不同表型的细胞的细胞生长的作用。细胞被胰蛋白化并被计数，将3000-8000个细胞加至100μl体积的完全培养基中的96孔CytoStar组织培养处理过的闪烁微培养板(Amersham#RPNQ0160)的每孔中。于37℃、含5％CO₂大气压下，在完全培养基中培养细胞24小时。

接着，将100％DMSO中的1μl测试化合物加至培养板的各孔中。DMSO只加至各对照孔。于37℃、含5％CO₂大气压下，在完全培养基中培养细胞超过24小时。将甲基¹⁴C-胸苷56mCi/mmol(NEN#NEC568或Amersham#CFA532)稀释于完全培养基中，将0.2uCi/孔加至20ul体积的CytoStar培养板的各孔中。于37℃、5％CO₂下，在药物和¹⁴C-胸苷中培养该培养板24小时。倒转培养板将培养板的内容物倒入¹⁴C放射活性废物容器中，用200μl PBS洗涤培养板两次。

将200μl PBS加至各孔。用透明培养板密封层密封培养板的顶部，并将白色培养板衬背密封层(Packard#6005199)施加至培养板的底部。用Packard Top Count量化甲基¹⁴C-胸苷结合程度。

上述化合物的抗增殖作用列于下表II。所列的IC₅₀＞10或＞100意指低于50％抑制作用，这是最高测试浓度下所观察到的。

表II：对癌细胞增殖的抑制作用(IC₅₀)

化合物	IC₅₀(μM)HeLa	IC₅₀(μM)HCT116	IC₅₀(μM)A375
化合物	IC₅₀(μM)HeLa	IC₅₀(μM)HCT116	IC₅₀(μM)A375	1234567891011121314151617181920	31.914.86＞10＞100＞100＞1020.9160.16＞10＞100＞10030.84.021.961.0410.2358.381.26.8958.84	＞10036.95＞10＞100＞10＞1050.8440.14＞100＞100＞100＞1071.238.520.793.9428.35＞10011.57＞10	20.39.45＞100＞100＞100＞100＞100＞10＞10＞100＞100＞10＞1071.0612.0826.78＞100＞10024.11＞10

标准的大鼠药物动力学(PK)

用标准的大鼠PK方案评估前药向活性形式的转化。遵循下列程序。

用1.5-3mg/kg水平的静脉注射(IV)和10-30mg/kg水平的口服管饲法(PO)给予大鼠候选前药。针对每一研究，四只大鼠用于IV给药，四只大鼠用于PO给药。IV给药的前药往往配制成灭菌水赋形剂中的5％葡萄糖(D5W)中的10％W/V溶质的溶液。口服给药的前药往往配制成0.5％甲基纤维素赋形剂中的均匀悬液。给药后，经眼眶静脉窦针刺将血样(0.5mL)收集到肝素化管中。对于IV给药，给药后，于5、15和30分钟、1、2、4、6、8和24小时收集血样。对于PO给药，于30分钟、1、2、4、6、8和24收集血样。为除去细胞离心分离血样，再将精确的200μL血浆上清液移入干净小瓶，置于干冰上，随后在分析前贮存于-70℃冰箱。经WinNonlin Pro version 3.1计算结果，确定血浆水平，比较该浓度与时间曲线下经口和经静脉给药的面积(AUC)，用下式确定％生物利用率(％F)：剂量(IV)^*AUC(口服)/剂量(口服)^*AUC(IV)。这些前药的标准大鼠PK研究结果列于表III。

表III：标准大鼠PK

Cpd	剂量(mg/kg)IV/PO	前药C_max(μM)IV	药物C_max(μM)IV	前药C_max(μM)PO	药物C_max(μM)PO	％F
Cpd	剂量(mg/kg)IV/PO	前药C_max(μM)IV	药物C_max(μM)IV	前药C_max(μM)PO	药物C_max(μM)PO	％F	1234567891011121314151617181920	3/301.5/153/303/301.7/173/303/303/302/102/102/102/102/102/102/102/102/103/303/303/30	4711.8442.9223.4723.2425.220.572.23067.2681.7908.1511.031.841.818.3134.38127.1533.5	183.677.6100.930.501.4429.070.1612.411.121.00.630.181.080.60.140.5201.8	0.3600.3200000.19000.3460.0400.080.16700.100.410.270.02	0.120.390.2300000.880.1690.190000.030.4200.06000.03	10200000.170000010000.400.410.34

体内模型-肿瘤生长抑制

可通过将人肿瘤细胞移植入无胸腺小鼠的后胁腹，并将测试化合物给予这些小鼠，评估化合物对人肿瘤细胞生长的体内作用。源自各种不同肿瘤类型，例如A375人黑素瘤细胞的人肿瘤细胞被皮下植入到雄性无胸腺小鼠(Charles River)的后胁腹，经6-10天生成相当大的肿瘤，如经卡钳测量所确定的。再经腹膜内注射配制于适当赋形剂中的化合物，每天一次共30天，向小鼠提供测试化合物。也可经其它途径例如经口、皮下或静脉内输液提供测试化合物。研究中，每四天测量一次肿瘤的大小，通过比较用药物处理过的动物和只注射赋形剂的动物，确定抑制程度。

也可用该模型，通过比较仅用标准疗法的动物和用测试化合物加上相同标准疗法处理的动物，确定测试化合物的对常规化疗剂的协同作用或促进作用。如果出现源于测试化合物的协同作用，就可观察到对延缓肿瘤生长的额外作用。

尽管前述说明书采用旨在说明而提供的实施例论述本发明的原理，但应该理解，本发明的实现包含所有的通常变化、修改和修饰。

本申请引用了各种出版物。因此，通过引用将这些出版物的内容结合到本申请中，以更充分地描述本发明所属领域的现状。

Claims

1.一种式I化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

X₁、X₂独立选自CH和N；

R₁选自碳环基、杂芳基和杂环基，且其中R₁被独立选自以下的一个或多个取代基任选取代：酰氨基、膦酰氧基、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6烷基、C_2-6链烯基、C_2-6炔基、羟基和C_1-6烷氧基；

R₂选自氢、羟基、硝基、氨基、羧基、氨基甲酰基、卤代基、氰基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨磺酰基、巯基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、C_1-6-烷氧基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基和磺酰基；

R₃′选自氢、杂环基和C_1-8烷基，其中C_1-8烷基被一个或多个-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、羟基、C_1-6烷氧基、氨基、氨酰基氨基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6烷基)₂氨基、杂环基或杂芳基任选取代；

R₅和R₆各自选自氢、C_1-6烷基、Na、K和NH₄且为相同的；除非R₅或R₆不存在，为氢或C_1-6烷基，在这种情况下，另一个为不同的；或作为选择，R₅和R₆共同表示钙或镁；

R₇是杂环基或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基被一个或多个以下基团任选取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H；和

R₈是被一个或多个以下基团任选取代的C_1-6烷基：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨酰基氨基、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)2氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nO CH₃、其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0-400的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H。

2.权利要求1的化合物的药用活性代谢物。

3.根据权利要求1的化合物，其中：

X₁和X₂是CH；

R₁是2，6-二氟代苯基；和

R₂是氢。

4.根据权利要求1的化合物，其中R₄是氢。

5.根据权利要求1的化合物，其中R₃选自-COR₇。

6.根据权利要求1的化合物，其中X₁和X₂各为CH。

7.根据权利要求1的化合物，其中R₁是碳环化合物，它选自各自任选被一个或多个酰氨基、膦酰氧基、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、羟基或C_1-6-烷氧基取代的环丙基、环丁基、环戊基、环己基、苯基或萘基。

8.根据权利要求1的化合物，其中R₁是任选被一个或多个酰氨基、膦酰氧基、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6-烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、羟基或C_1-6烷氧基取代的苯基。

9.根据权利要求1的化合物，其中R₁是任选被一个或多个卤素取代的苯基。

10.根据权利要求1的化合物，其中R₁是杂环化合物，它选自各自任选被一个或多个酰氨基、膦酰氧基、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、羟基或C_1-6-烷氧基取代的吡咯烷基、哌啶基或哌嗪基。

11.根据权利要求1的化合物，其中R₁是杂芳基化合物，它选自各自任选被一个或多个酰氨基、膦酰氧基、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、硝基、硫基、硫醚、胺、氰基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、氨磺酰基、酮、醛、酯、卤素、氧、卤代烷基、C_1-6.烷基、C_2-6-链烯基、C_2-6-炔基、羟基或C_1-6-烷氧基取代的吡唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、吗啉基、噻嗪基、嗪基、吡咯基、吲哚基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、唑基、异唑基、噻唑基、***基、四唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、吖啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基或苯并呋喃基。

12.根据权利要求1的化合物，其中R₂是氢。

13.根据权利要求1的化合物，其中R₃和R₄独立选自氢或-COR₇，其中R₃和R₄不同时为氢。

14.根据权利要求1的化合物，其中R₃′是杂环化合物，它选自吗啉基、四唑基、吡咯烷基、哌啶基，哌嗪基或4-甲基-哌嗪-1-基。

15.根据权利要求1的化合物，其中R₃′是杂芳基化合物，它选自咪唑基、2-甲基-咪唑基、2，3-二甲基-咪唑基、1，2，3-***基或1，2，4-***基。

16.根据权利要求1的化合物，其中R₃′是氢。

17.根据权利要求1的化合物，其中R₇是杂环化合物，它选自吗啉基、四唑基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或4-甲基-哌嗪-1-基。

1 8.根据权利要求1的化合物，其中R₇是杂环基或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基任选被一个或多个以下的基团取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、(C_1-6)烷硫基、羟基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在苯基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基、氨基烷基、硝基或氰基任选取代的苯基、杂环基、其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H。

19.根据权利要求1的化合物，其中R₇是杂环基或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基任选被一个或多个以下的基团取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、氨基甲酰基、氨基甲酰基(C_1-6)烷基、胍基、巯基、硫代(C_1-6)烷基、羟基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在苯基上被一个或多个羟基任选取代的苯基、杂环基、其中n是1或2的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃或其中n是1或2的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H。

20.根据权利要求1的化合物，其中R₇是杂环基或C_1-6烷基，其中C_1-6烷基任选被一个或多个-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、氨基-COR₈、羟基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、杂环基、其中n是1或2的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃或其中n是1或2的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H取代。

21.根据权利要求1的化合物，其中R₈是C_1-6烷基，它任选被一个或多个以下的基团取代：-CO₂H、-CO₂(C_1-6)烷基、氨基、羟基、N-(C_1-6-烷基)氨基、N，N-(C_1-6-烷基)₂氨基、在芳基上被一个或多个C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基、卤素、氨基或氨基烷基任选取代的芳基、杂环基、其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOCH₃、其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOH或其中n是0、1、2或3的-(OCH₂CH₂)_nOCH₂CO₂H。

22.根据权利要求1的化合物，其中R₈是被一个或多个氨基任选取代的C_1-6烷基。

23.一种选自下列的化合物：

24.权利要求1的化合物，其中所述化合物是其离析的形式。

25.一种药用组合物，它包含有效量的权利要求1-24中任一项的化合物和药学上可接受的载体。

26.一种药用组合物，它包含(a)有效量的权利要求1-24中任一项的化合物，和(b)药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

27.权利要求26的药用组合物，其中所述化合物的有效量介于每天约0.001mg/kg-约300mg/kg体重范围内。

28.一种制备药用组合物的方法，它包括使权利要求1-24中任一项的化合物和药学上可接受的载体混合的步骤。

29.一种制备权利要求1-24中任一项的化合物的方法，它包括以下步骤：

a.使式A1化合物与式A2化合物反应，制备式A3化合物；

其中式A1化合物包含合适的保护基团部分PG_a、合适的连接基团部分R_a和合适的反应基团部分Q_a；

其中式A2化合物包含合适的反应基团部分Q_b和合适的保护基团部分PG_b；

其中式A3化合物包含合适的保护基团部分PG_a、合适的连接基团部分R_a和合适的反应基团部分Q_a；

其中R_a连接基团还结合某些Q_a和Q_b反应基团的部分作为反应产物；

b.使式A3化合物转化为式A4化合物；

其中式A4化合物包含合适的保护基团部分PG_a、合适的连接基团部分R_a和合适的反应基团部分Q_c；

c.使式A5化合物与式A4化合物反应，制备式A6化合物；

d.使式A6化合物转化为式(I)化合物，

其中式(I)化合物R₃基团结合某些R_a连接基团的部分作为反应产物。

30.一种使用权利要求1-24中任一项的化合物抑制不受调节的激酶活性的方法，它包括使激酶结构域与一种或多种所述化合物接触。

31.权利要求30的方法，其中所述激酶结构域是激酶受体。

32.权利要求30的方法，其中所述不受调节活性是导致不受调节的细胞增殖的增加的或不受调节的激酶表达或信号传导。

33.权利要求30的方法，其中所述激酶是细胞周期蛋白依赖性激酶。

34.一种在有需要的患者中治疗不受调节的细胞增殖活性所致疾病的方法，它包括给予所述患者有效量的权利要求1-24中任一项的化合物。

35.一种在有需要的患者中治疗由不当蛋白激酶活性介导的疾病的方法，它包括给予所述患者有效量的权利要求1-24中任一项的化合物。

36.一种在有需要的患者中治疗或预防激酶介导的疾病的方法，它包括给予所述患者有效量的权利要求1-24中任一项的化合物。

37.根据权利要求34-36中任一项的方法，其中的蛋白激酶选自一种或多种CDK、VEGFR和HER2。

38.根据权利要求37的方法，其中CDK是CDK1。

39.根据权利要求37的方法，其中CDK是CDK2。

40.权利要求的方法36，其中所述激酶介导的疾病是与一种或多种非小细胞肺癌、结肠癌或乳腺癌有关的慢性或急性疾病。

41.权利要求36的方法，其中所述激酶介导的疾病选自慢性和急性炎症、骨关节炎、类风湿性关节炎、关节炎中的滑液翳侵入、多发性硬化、重症肌无力、糖尿病、糖尿病性血管病或视网膜病、伴有视网膜血管增生的眼病、炎性肠道疾病、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、骨病、移植或骨髓移植排斥反应、狼疮、慢性胰腺炎、恶病质、败血症性休克、纤维增生和分化性皮肤疾病或病症、中枢神经***疾病、癌、眼病、自身免疫性疾病、病毒性感染、心脏病、新内膜形成或移植诱导的血管病、肺或肺部疾病或急性和慢性肾病。

42.权利要求37的方法，其中纤维增生和分化性皮肤疾病或病症选自***瘤形成、银屑病、皮炎、湿疹或皮脂溢；其中的中枢神经***疾病选自早老性痴呆、帕金森氏病或抑郁症；其中的癌症选自实体瘤和白血病例如神经胶质瘤、表皮样癌、头和颈癌、肺癌、乳腺癌、结肠直肠癌、***癌、胃癌、食道癌、***状癌、卡波济氏肉瘤和相关病变，例如，不受调节的细胞增殖、肿瘤生长或血管化或转移癌细胞侵入和迁移或白血病或淋巴瘤；其中的眼病选自黄斑变性、角膜病或青光眼；其中的病毒性感染是巨细胞病毒；其中的心脏病选自血管瘤动脉粥样化或动脉粥样硬化；其中的新内膜形成或移植诱导的血管病是动脉再狭窄；其中的肺或肺部疾病选自过敏性哮喘、肺纤维化或慢性阻塞性肺部疾病引起的并发症；以及其中的急性和慢性肾病是选自急性、亚急性或慢性形态的肾小球肾炎或膜性增生性肾小球肾炎、肾小球硬化、先天性多囊肾发育不良或肾纤维化的肾或肾脏疾病。

43.权利要求36的方法，其中所述化合物的有效量介于每天约0.001mg/kg-约300mg/kg体重。

44.一种治疗癌症的方法，它包括给予有效量的权利要求1-24中任一项的化合物。