CN101050462A - 来源于拟南芥的缺磷诱导基因及其编码蛋白与应用 - Google Patents
来源于拟南芥的缺磷诱导基因及其编码蛋白与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101050462A CN101050462A CN 200710065082 CN200710065082A CN101050462A CN 101050462 A CN101050462 A CN 101050462A CN 200710065082 CN200710065082 CN 200710065082 CN 200710065082 A CN200710065082 A CN 200710065082A CN 101050462 A CN101050462 A CN 101050462A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sequence
- dna
- gene
- seq
- plant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 122
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 87
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 18
- 230000006698 induction Effects 0.000 title claims description 21
- 241000219195 Arabidopsis thaliana Species 0.000 title abstract description 9
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims abstract description 69
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims abstract description 66
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 28
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 28
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 claims abstract description 9
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 85
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 28
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 23
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 15
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 15
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 claims description 12
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims description 12
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 11
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 11
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 8
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 7
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 7
- 241000209510 Liliopsida Species 0.000 claims description 3
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 claims description 3
- 241001233957 eudicotyledons Species 0.000 claims description 3
- 101100463466 Arabidopsis thaliana PER8 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101100407810 Pichia angusta PEX10 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 230000008676 import Effects 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 abstract description 5
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 abstract description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 5
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 abstract description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 abstract description 4
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 abstract description 3
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 abstract description 3
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 abstract description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 abstract description 3
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 abstract description 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 abstract description 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 abstract description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 abstract 3
- 241000219146 Gossypium Species 0.000 abstract 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 abstract 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 10
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 10
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 10
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 9
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 9
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 6
- 241000589155 Agrobacterium tumefaciens Species 0.000 description 5
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 5
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 101150054900 gus gene Proteins 0.000 description 5
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 108091092724 Noncoding DNA Proteins 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000702488 Rattus norvegicus High affinity cationic amino acid transporter 1 Proteins 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 4
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 4
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 4
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 3
- 208000037065 Subacute sclerosing leukoencephalitis Diseases 0.000 description 3
- 206010042297 Subacute sclerosing panencephalitis Diseases 0.000 description 3
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 3
- BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N hydridophosphorus(.) (triplet) Chemical compound [PH] BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 3
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 2
- 241001302160 Escherichia coli str. K-12 substr. DH10B Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 2
- 108010025815 Kanamycin Kinase Proteins 0.000 description 2
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 2
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 2
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000003208 gene overexpression Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 2
- 108010002685 hygromycin-B kinase Proteins 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 235000018343 nutrient deficiency Nutrition 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 2
- 230000037351 starvation Effects 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150111419 ATH1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 241001133760 Acoelorraphe Species 0.000 description 1
- 101710197633 Actin-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000589156 Agrobacterium rhizogenes Species 0.000 description 1
- 101100433747 Arabidopsis thaliana ABCA2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100084108 Arabidopsis thaliana At1g17710 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100288148 Arabidopsis thaliana KNAT5 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100135611 Arabidopsis thaliana PAP12 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- BHSYMWWMVRPCPA-CYDGBPFRSA-N Arg-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N BHSYMWWMVRPCPA-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- DNUKXVMPARLPFN-XUXIUFHCSA-N Arg-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O DNUKXVMPARLPFN-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- SSZGOKWBHLOCHK-DCAQKATOSA-N Arg-Lys-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N SSZGOKWBHLOCHK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- ACRYGQFHAQHDSF-ZLUOBGJFSA-N Asn-Asn-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ACRYGQFHAQHDSF-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- NCFJQJRLQJEECD-NHCYSSNCSA-N Asn-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NCFJQJRLQJEECD-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- HGGIYWURFPGLIU-FXQIFTODSA-N Asn-Met-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O HGGIYWURFPGLIU-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- ICTXFVKYAGQURS-UBHSHLNASA-N Asp-Asn-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O ICTXFVKYAGQURS-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- ILQCHXURSRRIRY-YUMQZZPRSA-N Asp-His-Gly Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N ILQCHXURSRRIRY-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- RQHLMGCXCZUOGT-ZPFDUUQYSA-N Asp-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O RQHLMGCXCZUOGT-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- UXIPUCUHQBIQOS-SRVKXCTJSA-N Asp-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O UXIPUCUHQBIQOS-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 101150002428 Atoh1 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 241000209763 Avena sativa Species 0.000 description 1
- 235000007558 Avena sp Nutrition 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241001164374 Calyx Species 0.000 description 1
- 101100057132 Candida albicans (strain SC5314 / ATCC MYA-2876) ATC1 gene Proteins 0.000 description 1
- YXPNKXFOBHRUBL-BJDJZHNGSA-N Cys-Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CS)N YXPNKXFOBHRUBL-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- KSMSFCBQBQPFAD-GUBZILKMSA-N Cys-Pro-Pro Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 KSMSFCBQBQPFAD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- BCFXQBXXDSEHRS-FXQIFTODSA-N Cys-Ser-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O BCFXQBXXDSEHRS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150066002 GFP gene Proteins 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- VEYGCDYMOXHJLS-GVXVVHGQSA-N Gln-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VEYGCDYMOXHJLS-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Asp Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- CYHBMLHCQXXCCT-AVGNSLFASA-N Glu-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CYHBMLHCQXXCCT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- PXHABOCPJVTGEK-BQBZGAKWSA-N Glu-Gln-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O PXHABOCPJVTGEK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- OGNJZUXUTPQVBR-BQBZGAKWSA-N Glu-Gly-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OGNJZUXUTPQVBR-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- DVLZZEPUNFEUBW-AVGNSLFASA-N Glu-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N DVLZZEPUNFEUBW-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- CXRWMMRLEMVSEH-PEFMBERDSA-N Glu-Ile-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O CXRWMMRLEMVSEH-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- ZCOJVESMNGBGLF-GRLWGSQLSA-N Glu-Ile-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O ZCOJVESMNGBGLF-GRLWGSQLSA-N 0.000 description 1
- XTZDZAXYPDISRR-MNXVOIDGSA-N Glu-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N XTZDZAXYPDISRR-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- GRHXUHCFENOCOS-ZPFDUUQYSA-N Glu-Ile-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N GRHXUHCFENOCOS-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- NWOUBJNMZDDGDT-AVGNSLFASA-N Glu-Leu-His Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 NWOUBJNMZDDGDT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- JYXKPJVDCAWMDG-ZPFDUUQYSA-N Glu-Pro-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCC(=O)O)N JYXKPJVDCAWMDG-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- UGVQELHRNUDMAA-BYPYZUCNSA-N Gly-Ala-Gly Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC([O-])=O UGVQELHRNUDMAA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- XXGQRGQPGFYECI-WDSKDSINSA-N Gly-Cys-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O XXGQRGQPGFYECI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- FIQQRCFQXGLOSZ-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FIQQRCFQXGLOSZ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 1
- VSLXGYMEHVAJBH-DLOVCJGASA-N His-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VSLXGYMEHVAJBH-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- 208000019025 Hypokalemia Diseases 0.000 description 1
- UMYZBHKAVTXWIW-GMOBBJLQSA-N Ile-Asp-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N UMYZBHKAVTXWIW-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 1
- ZDNORQNHCJUVOV-KBIXCLLPSA-N Ile-Gln-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZDNORQNHCJUVOV-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- LPFBXFILACZHIB-LAEOZQHASA-N Ile-Gly-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N LPFBXFILACZHIB-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- PWDSHAAAFXISLE-SXTJYALSSA-N Ile-Ile-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PWDSHAAAFXISLE-SXTJYALSSA-N 0.000 description 1
- FCWFBHMAJZGWRY-XUXIUFHCSA-N Ile-Leu-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N FCWFBHMAJZGWRY-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- JCGMFFQQHJQASB-PYJNHQTQSA-N Ile-Val-His Chemical compound N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)O JCGMFFQQHJQASB-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 1
- DLEBSGAVWRPTIX-PEDHHIEDSA-N Ile-Val-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)[C@@H](C)CC DLEBSGAVWRPTIX-PEDHHIEDSA-N 0.000 description 1
- 206010022971 Iron Deficiencies Diseases 0.000 description 1
- SENJXOPIZNYLHU-UHFFFAOYSA-N L-leucyl-L-arginine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N SENJXOPIZNYLHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N L-leucyl-L-phenylalanine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- LZDNBBYBDGBADK-UHFFFAOYSA-N L-valyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 LZDNBBYBDGBADK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UILIPCLTHRPCRB-XUXIUFHCSA-N Leu-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N UILIPCLTHRPCRB-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- LAPSXOAUPNOINL-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Asp Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O LAPSXOAUPNOINL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- KEVYYIMVELOXCT-KBPBESRZSA-N Leu-Gly-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)NCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 KEVYYIMVELOXCT-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N Leu-Leu-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)N1CCCC1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PWPBLZXWFXJFHE-RHYQMDGZSA-N Leu-Pro-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PWPBLZXWFXJFHE-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- GCMWRRQAKQXDED-IUCAKERBSA-N Lys-Glu-Gly Chemical compound [NH3+]CCCC[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C(=O)NCC([O-])=O GCMWRRQAKQXDED-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- VSTNAUBHKQPVJX-IHRRRGAJSA-N Lys-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VSTNAUBHKQPVJX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- HKXSZKJMDBHOTG-CIUDSAMLSA-N Lys-Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN HKXSZKJMDBHOTG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- DLCAXBGXGOVUCD-PPCPHDFISA-N Lys-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O DLCAXBGXGOVUCD-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- RMOKGALPSPOYKE-KATARQTJSA-N Lys-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RMOKGALPSPOYKE-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008167 Magnesium Deficiency Diseases 0.000 description 1
- QAHFGYLFLVGBNW-DCAQKATOSA-N Met-Ala-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN QAHFGYLFLVGBNW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- SBSIKVMCCJUCBZ-GUBZILKMSA-N Met-Asn-Arg Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N SBSIKVMCCJUCBZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KQBJYJXPZBNEIK-DCAQKATOSA-N Met-Glu-Arg Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N KQBJYJXPZBNEIK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- AFVOKRHYSSFPHC-STECZYCISA-N Met-Ile-Tyr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 AFVOKRHYSSFPHC-STECZYCISA-N 0.000 description 1
- CRVSHEPROQHVQT-AVGNSLFASA-N Met-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N CRVSHEPROQHVQT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- OBPCXINRFKHSRY-SDDRHHMPSA-N Met-Met-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N OBPCXINRFKHSRY-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 1
- KVNOBVKRBOYSIV-SZMVWBNQSA-N Met-Pro-Trp Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O)N KVNOBVKRBOYSIV-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 1
- 244000131316 Panax pseudoginseng Species 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- MRNRMSDVVSKPGM-AVGNSLFASA-N Phe-Asn-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MRNRMSDVVSKPGM-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- WIVCOAKLPICYGY-KKUMJFAQSA-N Phe-Asp-Lys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N WIVCOAKLPICYGY-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- KRYSMKKRRRWOCZ-QEWYBTABSA-N Phe-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KRYSMKKRRRWOCZ-QEWYBTABSA-N 0.000 description 1
- GPLWGAYGROGDEN-BZSNNMDCSA-N Phe-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GPLWGAYGROGDEN-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- ZLAKUZDMKVKFAI-JYJNAYRXSA-N Phe-Pro-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ZLAKUZDMKVKFAI-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- PTDAGKJHZBGDKD-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N)O PTDAGKJHZBGDKD-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 108700001094 Plant Genes Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FZHBZMDRDASUHN-NAKRPEOUSA-N Pro-Ala-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O FZHBZMDRDASUHN-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- ORPZXBQTEHINPB-SRVKXCTJSA-N Pro-Arg-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O ORPZXBQTEHINPB-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FJLODLCIOJUDRG-PYJNHQTQSA-N Pro-Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 FJLODLCIOJUDRG-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 1
- RPLMFKUKFZOTER-AVGNSLFASA-N Pro-Met-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 RPLMFKUKFZOTER-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- LNICFEXCAHIJOR-DCAQKATOSA-N Pro-Ser-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LNICFEXCAHIJOR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 240000000528 Ricinus communis Species 0.000 description 1
- 235000004443 Ricinus communis Nutrition 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- KNZQGAUEYZJUSQ-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asp-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N KNZQGAUEYZJUSQ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- CDVFZMOFNJPUDD-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O CDVFZMOFNJPUDD-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- SQBLRDDJTUJDMV-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O SQBLRDDJTUJDMV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- QGAHMVHBORDHDC-YUMQZZPRSA-N Ser-His-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CN=CN1 QGAHMVHBORDHDC-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- MUJQWSAWLLRJCE-KATARQTJSA-N Ser-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MUJQWSAWLLRJCE-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- GYDFRTRSSXOZCR-ACZMJKKPSA-N Ser-Ser-Glu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O GYDFRTRSSXOZCR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- JZRYFUGREMECBH-XPUUQOCRSA-N Ser-Val-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O JZRYFUGREMECBH-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 101710197175 Sulfiredoxin Proteins 0.000 description 1
- LXWZOMSOUAMOIA-JIOCBJNQSA-N Thr-Asn-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O LXWZOMSOUAMOIA-JIOCBJNQSA-N 0.000 description 1
- NLSNVZAREYQMGR-HJGDQZAQSA-N Thr-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NLSNVZAREYQMGR-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- GMXIJHCBTZDAPD-QPHKQPEJSA-N Thr-Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N GMXIJHCBTZDAPD-QPHKQPEJSA-N 0.000 description 1
- XGFYGMKZKFRGAI-RCWTZXSCSA-N Thr-Val-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N XGFYGMKZKFRGAI-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- 102100029373 Transcription factor ATOH1 Human genes 0.000 description 1
- DDHFMBDACJYSKW-AQZXSJQPSA-N Trp-Thr-Asp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O DDHFMBDACJYSKW-AQZXSJQPSA-N 0.000 description 1
- FIRUOPRJKCBLST-KKUMJFAQSA-N Tyr-His-Asp Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O FIRUOPRJKCBLST-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- VLOYGOZDPGYWFO-LAEOZQHASA-N Val-Asp-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VLOYGOZDPGYWFO-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- YODDULVCGFQRFZ-ZKWXMUAHSA-N Val-Asp-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YODDULVCGFQRFZ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- RWOGENDAOGMHLX-DCAQKATOSA-N Val-Lys-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C(C)C)N RWOGENDAOGMHLX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WMRWZYSRQUORHJ-YDHLFZDLSA-N Val-Phe-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N WMRWZYSRQUORHJ-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- NHXZRXLFOBFMDM-AVGNSLFASA-N Val-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)C(C)C NHXZRXLFOBFMDM-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N Val-Ser-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N Val-Ser-Pro Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(CO)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKUAXEQHGKSLHN-UHFFFAOYSA-N [C].[N] Chemical compound [C].[N] CKUAXEQHGKSLHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010070944 alanylhistidine Proteins 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229940027138 cambia Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 1
- 108010060199 cysteinylproline Proteins 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- KXZOIWWTXOCYKR-UHFFFAOYSA-M diclofenac potassium Chemical compound [K+].[O-]C(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl KXZOIWWTXOCYKR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010054812 diprotin A Proteins 0.000 description 1
- 108010054813 diprotin B Proteins 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000012851 eutrophication Methods 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 108010085325 histidylproline Proteins 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-FWAVGLHBSA-N hygromycin A Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](C(=O)C)O[C@@H]1Oc1ccc(\C=C(/C)C(=O)N[C@@H]2[C@@H]([C@H]3OCO[C@H]3[C@@H](O)[C@@H]2O)O)cc1O YQYJSBFKSSDGFO-FWAVGLHBSA-N 0.000 description 1
- 108010051673 leucyl-glycyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010000761 leucylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 230000003050 macronutrient Effects 0.000 description 1
- 235000021073 macronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000004764 magnesium deficiency Nutrition 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 108010056582 methionylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 239000002686 phosphate fertilizer Substances 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 208000007645 potassium deficiency Diseases 0.000 description 1
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003900 soil pollution Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 108010031491 threonyl-lysyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000012256 transgenic experiment Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明公开了一个来源于拟南芥的缺磷诱导基因及其编码蛋白与应用。其目的是提供一个拟南芥的缺磷诱导基因及其编码蛋白与其在提高植物吸磷能力中的应用。该基因的cDNA是下述核苷酸序列之一:1)序列表中SEQ ID NO:2的DNA序列;2)编码序列表中SEQ ID NO:1的DNA序列;3)与序列表中SEQ ID NO:2限定的DNA序列具有90%以上同源性且具有提高植物吸磷能力功能的核苷酸序列;4)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID NO:2限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。本发明的基因及其编码蛋白将在植物,特别是油菜、棉花、小麦、玉米、水稻和番茄等经济作物的品种改良中发挥重要作用,应用前景广阔。
Description
技术领域
本发明涉及植物基因及其编码蛋白与应用,特别是涉及一个来源于拟南芥的缺磷诱导基因及其编码蛋白与其在提高植物吸磷能力中的应用。
背景技术
磷是植物生长所必需的大量营养元素之一,它不仅是植物细胞中ATP、核苷酸和磷脂的重要组成成份,而且在能量转移、蛋白激活和碳氮代谢中起到非常重要的调节作用。但是,由于磷在土壤中极易被固定,因此土壤中磷的浓度非常低,大约为2-10μM,扩散到根表面的磷更低,很难被植物利用,因而磷成为限制农作物生长发育和产量形成的最主要缺素之一。实践中通过大量施磷肥来满足植物生长需要,但会引起局部水资源污染,造成水的富营养化和增加农产品成本。因此,鉴定和分离磷高效吸收利用相关基因,研究其生物学功能,利用生物技术和遗传学的方法,改良农作物耐低磷能力和提高磷的吸收利用效率,对培育资源节约型的磷高效农作物新品种,有着重要的理论意义和经济价值。
发明内容
本发明的目的是提供一个来源于拟南芥的缺磷诱导基因。
本发明所提供的缺磷诱导基因,名称为AtAPL1(Acid phosphatase-like gene 1),来源于拟南芥属拟南芥(Arabidopsis thaliana),其cDNA是下述核苷酸序列之一:
1)序列表中SEQ ID NO:2的DNA序列;
2)编码序列表中SEQ ID NO:1的氨基酸序列;
3)与序列表中SEQ ID NO:2限定的DNA序列具有90%以上同源性且具有提高植物吸磷能力功能的核苷酸序列;
4)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID NO:2限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。
所述高严谨条件为在0.1×SSPE(或0.1×SSC)、0.1%SDS的溶液中,65℃条件下杂交并洗膜。
序列表中的SEQ ID NO:2由840个碱基组成,其编码序列为自5’端第1-837位碱基,编码具有序列表中SEQ ID NO:1的氨基酸残基序列的蛋白质。
其基因组基因,是下述核苷酸序列之一:
1)序列表中SEQ ID NO:3的DNA序列;
2)与序列表中SEQ ID NO:3限定的DNA序列具有90%以上同源性且具有提高植物吸磷能力功能的核苷酸序列;
3)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID NO:3限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。
所述高严谨条件为在0.1×SSPE(或0.1×SSC)、0.1%SDS的溶液中,65℃条件下杂交并洗膜。
序列表中的SEQ ID NO:3由1459个碱基组成,自5′端第44-190位碱基为该基因组基因的第一个外显子,自5′端第191-314位碱基为该基因组基因的第一个内含子,自5′端第315-436位碱基为该基因组基因的第二个外显子,自5′端第437-508位碱基为该基因组基因的第二个内含子,自5′端第509-710位碱基为该基因组基因的第三个外显子,自5′端第711-887位碱基为该基因组基因的第三个内含子,自5′端第888-1256位碱基为该基因组基因的第四个外显子,自5′端第1-43位碱基为该基因组基因的5’非编码区(UTR),自5′端第1257-1459位碱基为该基因组基因的3’非编码区。
所述缺磷诱导基因AtAPL1的启动子,是下述核苷酸序列之一:
1)序列表中SEQ ID NO:4的DNA序列;
2)与序列表中SEQ ID NO:4限定的DNA序列具有90%以上同源性且具有启动所述缺磷诱导基因转录功能的核苷酸序列;
3)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID NO:4限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。
所述高严谨条件为在0.1×SSPE(或0.1×SSC)、0.1%SDS的溶液中,65℃条件下杂交并洗膜。
序列表中的SEQ ID NO:4由1232个碱基组成。
本发明缺磷诱导基因的编码蛋白(AtAPL1),是下述氨基酸残基序列之一:
1)序列表中的SEQ ID NO:1;
2)将序列表中SEQ ID NO:1的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有提高植物吸磷能力功能的蛋白质。
序列表中的SEQ ID NO:1由279个氨基酸残基组成。
所述取代、缺失或添加的一至十个氨基酸残基可以是非结构域中的氨基酸残基,其改变不会对该蛋白的功能产生影响。
含有本发明基因和启动子的表达载体、转基因细胞系及宿主菌均属于本发明的保护范围。
扩增本发明基因和启动子中任一片段的引物对也在本发明的保护范围之内。
本发明的另一个目的是提供一种提高植物吸磷能力的方法。
本发明所提供的提高植物吸磷能力的方法,是将所述缺磷诱导基因AtAPL1或与AtAPL1具有90%以上同源性且编码相同蛋白的DNA序列导入植物组织、细胞或器官,植物吸磷能力获得提高。
在上述提高植物吸磷能力的方法中,所述缺磷诱导基因AtAPL1既可为AtAPL1的cDNA序列,也可为AtAPL1的基因组基因序列;与AtAPL1具有90%以上同源性且编码相同蛋白的DNA序列,是将AtAPL1的cDNA或基因组基因序列用已知的方法进行分离和/或修饰和/或设计得到的。本领域的技术人员应该理解的是,特定基因序列中核苷酸同一性的微小改变可能会导致该基因效能的降低或者加强,而且在一些应用(例如,反义或共抑制技术)中,部分序列经常会和全长序列同样有效地发挥作用。基因序列变化或缩短的方法,以及测试这些发生变化的基因的有效性的方法均是本领域技术人员熟知的。
所述缺磷诱导基因AtAPL1或其同源序列可通过含有AtAPL1或其同源序列的植物表达载体导入植物组织、细胞或器官;用于构建所述植物表达载体的出发载体可为任意一种可用于根瘤农杆菌或发根农杆菌转化植物的双元载体或可用于植物微弹轰击的载体等,如pJIT163-hGFP、pCAMBIA系列载体、PER8、PX6、pBI系列载体、pBin系列载体或其它衍生植物表达载体,所述出发载体还可为可在原核生物中复制的载体,如pUC系列载体或pBluescript系列载体等。
使用AtAPL1或其同源序列构建植物表达载体时,在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子;所述组成性表达启动子可为花椰菜花叶病毒(CAMV)35S启动子,玉米Ubiquitin启动子或水稻actin1启动子等;所述组织特异性表达启动子可为种子特异性表达启动子、花特异性表达启动子或花粉特异性表达启动子,如2S1启动子(GenBank号:NM_118848.2,GI:30687489)和NapinA(GenBank号:M64633.1,GI:349405)启动子;所述诱导型启动子可为受ABA、乙烯或化学等诱导的启动子;上述启动子可单独使用或与其它的植物启动子结合使用;此外,使用本发明的基因构建植物表达载体时,还可使用增强子,包括翻译增强子或转录增强子,这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等,但必需与编码序列的阅读框相同,以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的,可以是天然的,也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。
为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选,可对所用植物表达载体进行加工,如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、GFP基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(新霉素磷酸转移酶(NPTII)基因、潮霉素磷酸转移酶(Hygromycin phosphotransferase)基因、庆大霉素标记物或卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。所述含新霉素磷酸转移酶基因的宿主植物细胞、组织或器官可由卡那霉素或其替代衍生物如G418等进行筛选,含潮霉素磷酸转移酶基因的宿主植物细胞、组织或器官可由潮霉素进行筛选。从转基因植物的安全性考虑,可不加任何选择性标记基因,直接以逆境筛选转化植株。经上述方法进行筛选后还可采用Southern、PCR或点杂交等分子检测手段对转基因植株进行检测,以确定其是否转化有目的基因。
其中,以pJIT163-hGFP为出发载体,构建的含有AtAPL1的植物表达载体为pBINPLUS::AtAPL1。
携带有本发明缺磷诱导基因AtAPL1或其同源序列的植物表达载体可通过使用原生质体-化学介导法(Ca2+、PEG)、Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、花粉管、微注射、电激、基因枪、农杆菌介导等常规生物学方法中的任何一种或几种方法的组合转化植物细胞、组织或器官,并将转化的植物细胞、组织或器官培育成植株;所述组织和器官可包括宿主植物的果荚、愈伤组织、茎尖、叶片和种子等。
此外,通过将转化有本发明缺磷诱导基因AtAPL1或与AtAPL1具有90%以上同源性且编码相同蛋白的DNA序列的转基因植株进行继代培养后,可从中进一步筛选出基因纯合的转基因植株。
本发明的方法对双子叶植物和单子叶植物均适用,因此,所述被转化的植物细胞、组织或器官既可来源于拟南芥、油菜、花生、棉花、大豆、向日葵、棕榈树、橄榄树、蓖麻、马铃薯或烟草等双子叶植物,也可来源于玉米、水稻、小麦、大麦、燕麦、黑麦、高梁、谷子或草坪草等单子叶植物。
本发明提供了一个来源于拟南芥的缺磷诱导基因AtAPL1及其编码蛋白。转基因实验证明,AtAPL1过表达株系的含磷量极显著高于野生型植株,AtAPL1过表达后增加了转基因植株对磷的吸收,从而可改善植株的磷营养状况,使得植株的株高、荚数和粒数与野生型植株相比均得到明显增加。此外,由于过表达AtAPL1可增加植物的吸磷能力,因而在同样的土壤肥力条件下,AtAPL1转基因植物可以少施肥料,减少土壤污染,节约自然资源。本发明的基因及其编码蛋白将在植物,特别是油菜、棉花、小麦、水稻和番茄等粮食和经济作物的品种改良中发挥重要作用,应用前景广阔。
下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。
附图说明
图1A为拟南芥在缺少N、P、K、Mg、Fe不同营养元素胁迫处理3天后AtAPL1基因在根和叶中表达水平的RT-PCR检测结果
图1B为拟南芥在2.5mM磷和0mM磷条件下AtAPL1基因在不同时间段根和叶中表达水平的RT-PCR检测结果
图1C为拟南芥在不同磷浓度下处理3天后AtAPL1基因在根和叶中的表达水平的RT-PCR检测结果
图2为含有缺磷诱导基因AtAPL1的启动子及GUS基因的重组载体PAtAPL1::GUS的结构示意图
图3为转PAtAPL1::GUS拟南芥在正常和缺磷条件下培养的植株的GUS染色结果
图4为转PAtAPL1::GUS拟南芥在缺磷条件下培养的植株各个组织的GUS染色结果
图5为缺磷诱导基因AtAPL1过表达载体pBINPLUS::AtAPL1的结构示意图
图6为5个成熟期AtAPL1过表达拟南芥株系与野生型植株地上部含磷量的统计结果
具体实施方式
下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法,具体步骤可参见:《Molecular Cloning:A Laboratory Manual》(Sambrook,J.,Russell,David W.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,3rd edition,2001,NY,Cold SpringHarbor)。所用引物及DNA序列均由上海生工生物工程有限公司合成。
实施例1、缺磷诱导基因AtAPL1的获得
在ATS培养基(配方:5mM KNO3,2mM MgSO4,2mM Ca(NO3)2,2.5mM KH2PO4,70μMH3BO3,14μM MnCl2,1μM ZnSO4,0.5μM CuSO4,10μM NaCl,0.2μM Na2MoO4,40μM FeSO4,43mM蔗糖,4.7mM MES,8g/1000mL琼脂,pH调成6.0)上播种拟南芥野生型Columbia,4℃春化3天后,在21℃,16h光照/8h黑暗的光照培养间生长7天,然后分成两组,分别转移至正常ATS培养基和缺磷的ATS培养基中处理3天,最后提取在两种生长条件下的植株的根系RNA进行拟南芥ATH1基因组芯片杂交(拟南芥芯片从Affymetrix公司购买,芯片杂交由上海晶泰生物技术有限公司完成)。对芯片杂交数据进行分析,其中一个基因(位点:At1g17710)在缺磷诱导时的表达强度比在正常供磷条件下增加142倍。然后,对该基因序列进行BLASTX分析,分析结果显示该基因与番茄、水稻和拟南芥中编码酸性磷酸酶的基因在氨基酸水平上的的同源性分别高达75%、62%和59%。因此,将该基因命名为类酸性磷酸酶基因AtAPL1(Acid phosphatase-likegene 1)。该基因位于拟南芥第一染色体,其基因组基因具有序列表中SEQ ID NO:3的核苷酸序列,由1459个碱基组成,自5′端第44-190位碱基为该基因组基因的第一个外显子,自5′端第191-314位碱基为该基因组基因的第一个内含子,自5′端第315-436位碱基为该基因组基因的第二个外显子,自5′端第437-508位碱基为该基因组基因的第二个内含子,自5′端第509-710位碱基为该基因组基因的第三个外显子,自5′端第711-887位碱基为该基因组基因的第三个内含子,自5′端第888-1256位碱基为该基因组基因的第四个外显子,自5′端第1-43位碱基为该基因组基因的5’非编码区(UTR),自5′端第1257-1459位碱基为该基因组基因的3’非编码区。该基因的cDNA具有序列表中SEQ ID NO:2的核苷酸序列,由840个碱基组成,其编码序列为自5’端第1-837位碱基,编码具有序列表中SEQ ID NO:1的氨基酸残基序列的蛋白质,蛋白分子量大小约为31.6kD。
实施例2、AtAPL1专一受缺磷诱导表达的检测
一、不同缺素处理
为检测在拟南芥根和叶中AtAPL1基因的转录启动是否只受磷调控,对野生拟南芥幼苗分别进行缺氮、磷、钾、镁、铁处理(缺P、Mg和Fe处理方法:在ATS培养基中分别不加KH2PO4,MgSO4和FeSO4;缺N处理方法:用5mM KCl和2mM CaCl2取代ATS培养基中的5mM KNO3和2mM Ca(NO3)2,以补偿培养基中Ca2+的浓度;缺K处理方法:用2.5mM NH4NO3和2.5mM NaH2PO4取代ATS培养基中的5mM KNO3和2.5mM KH2PO4,以补偿培养基中的N和P离子浓度),具体方法为:首先,将野生型拟南芥种子用1%的NaClO消毒15分钟,然后用灭菌的蒸馏水清洗4次,再用1g/1000mL的琼脂悬浮后,播种在磷含量在2.5mM的ATS正常培养基上。4℃春化3天后,转移至16小时光照/8小时黑暗、22-24℃的培养间,培养皿垂直放置,当拟南芥在正常加磷的ATS培养基中生长7天后,再将其转移至上述分别缺N,P,K,Mg和Fe处理的ATS培养基和正常ATS培养基(对照,CK)中继续生长3天,然后收集叶片和根系,在液氮中速冻,用Trizol试剂提取总RNA,用RT-PCR法分析AtAPL1基因的表达水平,以AtACT2为量参,其中,PCR扩增AtAPL1的引物序列为F(上游引物):5′-GCTTCTCCCAACAATGCC-3′和R(下游引物):5′-TTCTCCTCTCCTTCCTCTGAT-3′;PCR扩增AtACT2的引物序列为F1(上游引物):5′-GGTAACATTGTGCTCAGTGGTGG-3′和R1(下游引物):5′-CTCGGCCTTGGAGATCCACATC-3′。反应结束后,对PCR扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,检测结果如图1A所示,在缺氮、缺磷、缺钾、缺镁和缺铁胁迫处理植株中,只有在缺磷条件下可检测到AtAPL1基因的转录,证明AtAPL1基因在拟南芥根和叶中的转录受磷专一调控。
二、不同时间段处理
把在正常ATS培养基生长7天的拟南芥幼苗分别转移至正常ATS培养基和不加磷的ATS培养基生长不同时间(0小时(对照,ck),6小时,12小时,1天,3天和5天),在不同时间点取样(叶片和根系),然后把在缺磷ATS培养基生长5天的幼苗重新转移至正常加磷的ATS培养基上继续生长1天和3天。在每个时间点取在正常ATS培养基和缺磷ATS培养基上生长幼苗的叶片和根系,在液氮中速冻,用Trizol试剂提取总RNA,用与步骤一相同的RT-PCR方法进行AtAPL1基因的表达谱分析。分析结果如图1B所示(“+”含磷,“-”不含磷),缺磷后12小时AtAPL1即开始在叶片中上调表达,而在根中缺磷1天后AtAPL1上调表达,到缺磷5天后AtAPL1在根和叶中表达量达最大。当把在缺磷培养基中生长5天后的植株重新转移至磷充足的ATS培养基中,AtAPL1基因表达关闭,进一步证明AtAPL1基因的转录受磷专一调控。
三、不同磷浓度处理
为检测培养基中的磷浓度对AtAPL1基因表达丰度的影响,将野生型拟南芥的种子播种在正常加磷的ATS培养基中生长7天后,将幼苗转移至磷含量分别为0,0.05,0.1,0.25,1.0,2.5和10mM的ATS培养基中继续生长3天,然后收集叶片和根系,在液氮中速冻,用Trizol试剂提取总RNA,用与步骤一相同的RT-PCR方法进行AtAPL1基因的表达谱分析。分析结果如图1C所示,在根中,AtAPL1基因只在不加磷的ATS培养基中生长的植株中强烈表达;在叶片中,未加磷时表达量最大,随磷浓度的增加,AtAPL1基因的转录丰度下降,到正常供磷1mM或过量供磷10mM时还能检测到AtAPL1的转录产物。
实施例3、AtAPL1基因原位表达模式分析
用Promoter-GUS转基因的方法进行AtAPL1基因的原位表达模式分析,具体方法包括以下步骤:
一、AtAPL1基因启动子的分离
根据拟南芥的基因组序列,设计扩增AtAPL1基因启动子的特异引物F2(上游引物):5′-
GAATTCCTTACCTCAAGAAGAGTGTCG-3′(带下划线碱基为限制性内切酶EcoR I识别位点)和R2(下游引物):5′-
GTCGACTCTATCAGATACAATG-3′(带下划线碱基为限制性内切酶Sal I识别位点),然后提取Columbia生态型拟南芥的基因组DNA并以此为模板,在引物F2和R2的引导下,PCR扩增AtAPL1基因的启动子片段并在序列的两端分别添加限制性内切酶EcoR I和Sal I识别位点,PCR扩增体系为:DNA 2μl(约10ng),10×ExTaq缓冲液2.5μl,dNTPs(2.5mM)2.0μl,引物F2(10μM)0.5μl,引物R2(10μM)0.5μl,ExTaq(5u/μl,购自TaKaRa公司)0.2μl,H2O 17.3μl。PCR扩增程序为:先94℃预变性5分钟;然后94℃1分钟,50℃1分钟,72℃1.5分钟,共35个循环;最后72℃延伸5分钟。反应结束后,对PCR扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,结果经PCR扩增得到大小约位1232bp的DNA片段,与预期结果相符,回收并纯化该目的片段,将其连接到pMD18-T(购自Takara公司)载体中,得到携带AtAPL1基因启动子的重组载体,对其进行测序,测序结果表明获得了序列正确的AtAPL1基因启动子片段,具有序列表中SEQ ID NO:4的核苷酸序列,由1232个碱基组成,将该启动子命名为PAtAPL1。
二、含有PAtAPL1和GUS基因的载体PAtAPL1::GUS的构建及其转基因植株的获得
1、含有PAtAPL1和GUS基因的载体PAtAPL1::GUS的构建
用限制性内切酶EcoR I和Sal I双酶切步骤一获得携带AtAPL1基因启动子的重组载体,回收纯化得到1232bp的启动子片段,再将其与经同样酶双酶切的载体pCAMBIA1381(CAMBIA,Canberra,Australia)连接,将连接产物转化大肠杆菌DH10B感受态细胞,筛选阳性克隆,提质粒,经EcoR I和Sal I双酶切鉴定和菌落PCR鉴定,得到***序列及位置均正确的携带AtAPL1基因启动子的重组载体,将其命名为PAtAPL1::GUS,该载体的结构示意图如图2所示(Promoter表示PAtAPL1)。
2、PAtAPL1::GUS转基因植株的获得
将PAtAPL1::GUS转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株GV3101,用扩增启动子的引物F2和R2进行菌落PCR鉴定,经扩增得到大小为1232bp DNA片段的为阳性克隆,对阳性克隆进行大量培养,通过蘸花浸染法转化拟南芥,当代收获的为T0代转基因种子。将T0代转基因种子在含有50mg/L抗生素Hygromycin和150mg/LTimenten的MS培养基上进行筛选,得到T1代转基因阳性植株,成熟后得到T1代种子。再将T1代种子播种在含有50mg/L抗生素Hygromycin的MS培养基上进行筛选,转基因阳性植株成熟后得到T2代种子。最后,将T2代种子播种在含有50mg/L抗生素Hygromycin的MS培养基上,全部为绿苗的株系为PAtAPL1::GUS转基因纯合系,其所获得的种子为T3代。
三、PAtAPL1启动GUS基因表达
选步骤二获得的5个T3代PAtAPL1::GUS转基因纯合系,将种子播种在ATS培养基上使其发芽,生长7天后,将幼苗分别移到正常ATS培养基(对照)或缺磷的ATS培养基(不含KH2PO4的ATS培养基)中继续生长3天,然后取整株进行GUS染色,用70%的乙醇脱绿后,进行镜检观察并照相。检测结果如图3所示,正常供磷条件下整株检测不到GUS活性,而在缺磷条件下,叶片、表皮毛和根系都能检测到很强的GUS活性,特别是在开花期的根、茎、叶、花和幼嫩的荚果全部检测到很强的GUS活性(见图4),在花器官中,花萼、花丝、部分花粉粒和柱头被染色。
实施例4、检测过表达AtAPL1对植物的影响
用下述转基因试验检测过表达AtAPL1对植物的影响,具体过程包括以下步骤:
一、AtAPL1基因的全长CDS的获得
以缺磷处理的拟南芥根系的cDNA为模板,在引物F3(上游引物):5′-
GGATCCATGGCTAAGAATAACAAC-3′(带下划线碱基为限制性内切酶BamH I识别位点)和R3(下游引物):5′-
CCCGGGTCACTTGACCAAATTTAAAG-3′(带下划线碱基为限制性内切酶Sma I识别位点)的引导下,PCR扩增两端分别添加限制性内切酶BamH I和Sma I识别位点的AtAPL1基因的全长cDNA片段,其中,PCR扩增体系为:cDNA 2μl(约10ng),10x ExTaq缓冲液2.5μl,dNTPs(2.5mM)2.0μl,引物F3(10μM)0.5μl,引物R3(10μM)0.5μl,ExTaq(5u/μl)0.2μl,H2O 17.3μl。PCR扩增程序为:先94℃预变性3分钟;然后94℃50秒,52℃50秒,72℃1分钟,共35个循环;最后72℃延伸5分钟。反应结束后,对PCR扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,结果经PCR扩增得到大小约852bp的DNA片段,与预期结果相符,回收并纯化该目的片段,将其连接到pMD18-T(购自Takara公司)载体中,对该重组载体进行测序,测序结果表明获得了序列正确的AtAPL1基因全长CDS,具有序列表中SEQ ID NO:2的核苷酸序列,将该携带有AtAPL1基因全长CDS的重组载体命名为pMD18-AtAPL1。
二、利用35S强启动子构建过表达载体
用限制性内切酶BamH I和Sma I对步骤一获得的携带有AtAPL1基因全长CDS的重组载体pMD18-AtAPL1进行双酶切,回收并纯化852bp的AtAPL1基因全长CDS片段(带2个酶切位点),将其与经相同酶双酶切切去hGFP的载体pJIT163-hGFP(Liu etaL.Molecular and functional characterization of sulfiredoxin homologs fromhigher plants.Cell Research(2006)16:287-296)连接,转化大肠杆菌,酶切和菌落PCR鉴定正确的质粒用Xho I和Kpn I双酶切,得到带有目的片段的中间载体片段,再与Sal I(与Xho I是同尾酶)和Kpn I双酶切的pBINPLUS连接,将连接产物转化大肠杆菌DH10B感受态细胞,筛选阳性克隆,提质粒,经BamH I和Sma I双酶切鉴定和菌落PCR鉴定,得到***序列及位置均正确的携带AtAPL1基因全长CDS的重组载体,将其命名为pBINPLUS::AtAPL1,该载体的结构示意图如图5所示。
三、AtAPL1转基因株系生育性状及含磷量的统计
将pBINPLUS::AtAPL1转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株GV3101,用扩增全长CDS的引物F3和R3进行菌落PCR鉴定,经扩增得到大小为852bp(带2个酶切位点)DNA片段的为阳性克隆,对阳性克隆进行大量培养,通过蘸花浸染法转化拟南芥,经3代筛选获得5个AtAPL1基因过表达转基因纯合系(OE22-8、OE28-12、OE34-2、OE8-7和OE25-1),当植株接近成熟时,调查这5个AtAPL1过表达株系与野生型植株的生育性状(株高、单株荚数和单荚粒数),每个株***计10-20株,平行测3次,其中3个过表达株系OE28-12、OE34-2和OE25-1的株高与野生型植株的差异达到显著水平,而且这3个过表达株系的单株荚数显著高于野生型植株(Col),所有过表达株系的单荚粒数(单株所有荚的平均粒数)极显著高于野生型植株(见表1,**表示过表达株系与野生型之间的差异达1%的极显著水平,*表示过表达株系与野生型之间的差异达5%的显著水平)。测定上述AtAPL1过表达株系和野生型植株的含磷量,结果如图6所示(**表示过表达株系与野生型之间的差异达1%的极显著水平,*表示过表达株系与野生型之间的差异达5%的显著水平),其中4个AtAPL1过表达株系的含磷量极显著高于野生型植株,说明基因AtAPL1过表达后增加了转基因植株对磷的吸收,从而改善了植株的磷营养状况,使得植株的株高、荚数和粒数也得到明显增加。
表1 5个AtAPL1基因过表达转基因纯合系的株高、单株荚数和单荚粒数的统计结果
过表达株系 | 株高(cm) | 单株荚数 | 单荚粒数 |
ColOE 22-8OE 28-12OE 34-2OE 8-7OE 25-1 | 23.8±3.624.0±1.026.7±2.2*26.5±2.1*24.8±1.026.6±2.5* | 45.2±12.133.4±3.361.0±19.7*75.6±13.4**52.2±8.573.0±25.0** | 38.2±3.948.4±1.5**46.3±2.7**47.7±3.0**46.2±1.3**45.8±3.0** |
序列表
<160>4
<210>1
<211>279
<212>PRT
<213>拟南芥属拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400>1
Met Ala Lys Asn Asn Asn Ile Val Ile Val Phe Asp Phe Asp Lys Thr
1 5 10 15
Ile Ile Asp Val Asp Ser Asp Asn Trp Val Val Asp Glu Leu Gly Phe
20 25 30
Thr Asp Leu Phe Asn Gln Leu Leu Pro Thr Met Pro Trp Asn Ser Leu
35 40 45
Met Asn Arg Met Met Lys Glu Leu His Asp His Gly Lys Thr Ile Glu
50 55 60
Glu Ile Lys Gln Val Leu Arg Arg Ile Pro Ile His Pro Arg Val Ile
65 70 75 80
Pro Ala Ile Lys Ser Ala His Ala Leu Gly Cys Glu Leu Arg Ile Val
85 90 95
Ser Asp Ala Asn Thr Leu Phe Ile Glu Thr Ile Ile Glu His Leu Gly
100 105 110
Ile Gly Glu Phe Phe Ser Glu Ile Asn Thr Asn Pro Gly Leu Val Asp
115 120 125
Glu Gln Gly Arg Leu Ile Val Ser Pro Tyr His Asp Phe Thr Lys Ser
130 135 140
Ser His Gly Cys Ser Arg Cys Pro Pro Asn Met Cys Lys Gly Leu Ile
145 150 155 160
Ile Asp Arg Ile Gln Ala Ser Leu Thr Lys Glu Gly Lys Thr Ser Lys
165 170 175
Met Ile Tyr Leu Gly Asp Gly Ala Gly Asp Tyr Cys Pro Ser Leu Gly
180 185 190
Leu Lys Ala Glu Asp Tyr Met Met Pro Arg Lys Asn Phe Pro Val Trp
195 200 205
Asp Leu Ile Ser Gln Asn Pro Met Leu Val Lys Ala Thr Val Arg Asp
210 215 220
Trp Thr Asp Gly Glu Asp Met Glu Arg Ile Leu Met Glu Ile Ile Asn
225 230 235 240
Glu Ile Met Ser Ser Glu Glu Gly Glu Glu Asn Asp Lys Met Leu Ser
245 250 255
Ser Glu Asn Cys Lys Ile Ser Val Gly Ile Val His Glu Pro Ile Gln
260 265 270
Val Pro Leu Asn Leu Val Lys
275
<210>2
<211>840
<212>DNA
<213>拟南芥属拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400>2
atggctaaga ataacaacat cgtgatcgtc ttcgattttg acaagacaat catcgatgta 60
gacagcgata attgggtcgt ggatgaactt ggtttcactg atttgttcaa ccagcttctc 120
ccaacaatgc cttggaactc tctcatgaat cggatgatga aggagcttca tgatcatggt 180
aaaaccattg aagaaatcaa acaagtcctt aggagaatcc caattcatcc acgtgtcatc 240
ccagccatca aatctgctca tgctttaggg tgcgagctga gaatagtgag cgacgcaaac 300
acgttgttca tcgaaacaat cattgaacat ctcgggattg gtgagttttt ctccgagatt 360
aacacaaatc caggacttgt agatgaacaa ggaagattaa tagtctctcc ttaccatgac 420
ttcaccaaat cttctcatgg ttgctctcgt tgccctccta acatgtgcaa gggtttaata 480
atcgatagga ttcaagcttc tctaacgaaa gaagggaaga cgagcaagat gatctatctt 540
ggagatggtg ctggtgatta ctgtcccagt cttggactca aagctgaaga ttacatgatg 600
ccaaggaaga atttcccggt ttgggatttg attagtcaaa atcccatgtt ggttaaggct 66a
accgttagag attggaccga tggagaagat atggagagga tactaatgga aataatcaac 720
gaaattatgt catcagagga aggagaggag aatgacaaga tgttgagctc tgaaaactgc 780
aagatatctg ttgggattgt tcatgaacct attcaagttc ctttaaattt ggtcaagtga 840
<210>3
<211>1459
<212>DNA
<213>拟南芥属拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400>3
gaaatcgata aaacagtacc tataaaacat tgtatctgat agaatggcta agaataacaa 60
catcgtgatc gtcttcgatt ttgacaagac aatcatcgat gtagacagcg ataattgggt 120
cgtggatgaa cttggtttca ctgatttgtt caaccagctt ctcccaacaa tgccttggaa 180
ctctctcatg gtttgttttg ttcatccatc tctaactctt ctctgtttcg gtttctctag 240
ggctttgtta cgttggtcta tatatgttca tcagtcataa cactaaatcc ttatttggtt 300
ttatttcaaa acagaatcgg atgatgaagg agcttcatga tcatggtaaa accattgaag 360
aaatcaaaca agtccttagg agaatcccaa ttcatccacg tgtcatccca gccatcaaat 420
ctgctcatgc tttagggtaa aaatccatgt taaattcctc attcttcgtt tgataacacg 480
gtactgaatc atacgacata atatttaggt gcgagctgag aatagtgagc gacgcaaaca 540
cgttgttcat cgaaacaatc attgaacatc tcgggattgg tgagtttttc tccgagatta 600
acacaaatcc aggacttgta gatgaacaag gaagattaat agtctctcct taccatgact 660
tcaccaaatc ttctcatggt tgctctcgtt gccctcctaa catgtgcaag gtactgcagt 720
tacactaatc tcatattgat tgattagttc aaaagataag atttgtcatt actattttca 780
gggattttgg gaaacttttt ggtgtaaaat atattatctt tgattctgtt atgagtcaat 840
atggacctat ctgtgtgcta aattaatact aaattttgtt tatacagggt ttaataatcg 900
ataggattca agcttctcta acgaaagaag ggaagacgag caagatgatc tatcttggag 960
atggtgctgg tgattactgt cccagtcttg gactcaaagc tgaagattac atgatgccaa 1020
ggaagaattt cccggtttgg gatttgatta gtcaaaatcc catgttggtt aaggctaccg 1080
ttagagattg gaccgatgga gaagatatgg agaggatact aatggaaata atcaacgaaa 1140
ttatgtcatc agaggaagga gaggagaatg acaagatgtt gagctctgaa aactgcaaga 1200
tatctgttgg gattgttcat gaacctattc aagttccttt aaatttggtc aagtgattga 1260
tgaaaacaag aaattgaaga tttttgtttt gtattcgaga tattcttcat gcaattatgt 1320
aagatgtcta aagatgaatg gttcatgcac gttaagtgat ttcttttttt tgtatacgta 1380
attaagggat ctccttcgga ggagcgtcta gctaccacgg aagcttaatg ggctcatttt 1440
tcgtatcact tctttaatt 1459
<210>4
<211>1232
<212>DNA
<213>拟南芥属拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400>4
cttacctcaa gaagagtgtc gagggcaaca ttaatattac gtaacttaat ttgatttctg 60
ctaagaaaaa tgaaatgttt gccaattgag gtagtggatg cagtgaaatg tagttttttc 120
gtggtgccac aagatttaca actagatata aaatattatg ttccttgttc tatatcacaa 180
tctaaagaca cgaggaagag aaataaaaga agcttgtttt gatgcgtctc ttctgataat 240
gtctgataga agtatattat tttatagata gaggattaca cacacacaca cacatttgtt 300
ttgttgtcat gctaagactt gtttggttag aatactttta attgttattg aagaaatcaa 360
atacagatga atattgaaag atgtggctac caaatgaaaa gatgatgtga tccttaaccc 420
ctagaatatt ctttctgctt acaattgtga tttgtcactc aatattcctt ccaagttgca 480
accttattcc ttcctagtgc cttctgatgc aattcccata tatttcgata aatttcatgt 540
ttttaagttt aaatccaatc gagtatgaat gttgtggttt ttacaattaa ctttatcgat 600
caaatgtgtg acataaagca actatcccat gcacatttat ttatttttca tcccatgata 660
aatcaaaact tattcatacg ataaacacca atatattcat tttgcatttt ttactttttt 720
tgggttgcgt attaaaagaa aaataaacct ttttgggtaa cggattttat tttcctttaa 780
taaaaatgaa aataatgacg aaaacgcata aataggtgga atattctttt tttttatctt 840
attccattcc ggtgtcttct caaatctcaa ctgcctaaat cccactaaat aaaactttta 900
acaagccaaa ctaaataata cccacaaaat aaaccaaaga gtcatcaaca ccgttggatc 960
agtataccta gtcaatgttt gacacataaa cgtcatcaga tctaacggtt caaaagatac 1020
gaatcatatc agattaggat tcttaattat ctatcttacc ttgcgtttga cggtaagtaa 1080
tattccaatg gcatcttcct cgaaagatcc ctattcgtct ctagcctttt caccttctct 1140
cactcgtata tatatcacat tcttcttctc caaattccat aatcatacag aaatcgataa 1200
aacagtacct ataaaacatt gtatctgata ga 1232
Claims (10)
1、来源于拟南芥的缺磷诱导基因,其cDNA是下述核苷酸序列之一:
1)序列表中SEQ ID NO:2的DNA序列;
2)编码序列表中SEQ ID NO:1的氨基酸序列;
3)与序列表中SEQ ID NO:2限定的DNA序列具有90%以上同源性且具有提高植物吸磷能力功能的核苷酸序列;
4)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID NO:2限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。
2、根据权利要求1所述的基因,其特征在于:其基因组基因是下述核苷酸序列之一:
1)序列表中SEQ ID NO:3的DNA序列;
2)与序列表中SEQ ID NO:3限定的DNA序列具有90%以上同源性且具有提高植物吸磷能力功能的核苷酸序列;
3)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID NO:3限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。
3、权利要求1或2所述基因编码的蛋白,是下述氨基酸残基序列之一:
1)序列表中的SEQ ID NO:1;
2)将序列表中SEQ ID NO:1的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有提高植物吸磷能力功能的蛋白质。
4、权利要求1或2所述基因的启动子,是下述核苷酸序列之一:
1)序列表中SEQ ID NO:4的DNA序列;
2)与序列表中SEQ ID NO:4限定的DNA序列具有90%以上同源性且具有启动所述缺磷诱导基因转录功能的核苷酸序列;
3)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID NO:4限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。
5、含有权利要求1或2所述基因的表达载体、转基因细胞系及宿主菌。
6、含有权利要求4所述启动子的表达载体、转基因细胞系及宿主菌。
7、一种提高植物吸磷能力的方法,是将权利要求1或2所述缺磷诱导基因或与该基因具有90%以上同源性且编码相同蛋白的DNA序列导入植物组织、细胞或器官,植物吸磷能力获得提高。
8、根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述缺磷诱导基因或与该基因具有90%以上同源性且编码相同蛋白的DNA序列通过含有该基因或与该基因具有90%以上同源性且编码相同蛋白的DNA序列的植物表达载体导入植物组织、细胞或器官;用于构建所述植物表达载体的出发载体为pJIT163-hGFP、p3301、PER8、PX6、pBI系列载体、pBin系列载体、pCAMBIA系列载体、pUC系列载体或pBluescript系列载体。
9、根据权利要求8所述的方法,其特征在于:所述植物表达载体为pBINPLUS::AtAPL1。
10、根据权利要求7-9任一项所述方法,其特征在于:所述植物包括单子叶植物和双子叶植物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2007100650828A CN101050462B (zh) | 2007-04-02 | 2007-04-02 | 来源于拟南芥的缺磷诱导基因及其编码蛋白与应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2007100650828A CN101050462B (zh) | 2007-04-02 | 2007-04-02 | 来源于拟南芥的缺磷诱导基因及其编码蛋白与应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101050462A true CN101050462A (zh) | 2007-10-10 |
CN101050462B CN101050462B (zh) | 2010-06-16 |
Family
ID=38782060
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2007100650828A Expired - Fee Related CN101050462B (zh) | 2007-04-02 | 2007-04-02 | 来源于拟南芥的缺磷诱导基因及其编码蛋白与应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101050462B (zh) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102559673A (zh) * | 2010-12-16 | 2012-07-11 | 华中农业大学 | 甘蓝型油菜缺磷特异诱导表达的启动子 |
CN108424893A (zh) * | 2018-05-18 | 2018-08-21 | 西南大学 | 玉米磷高效基因ZmAPL9及其应用 |
CN112980847A (zh) * | 2021-04-21 | 2021-06-18 | 中国热带农业科学院橡胶研究所 | 一种橡胶树泛素基因启动子proHbUBI3及其克隆与应用 |
CN113025616A (zh) * | 2021-04-21 | 2021-06-25 | 中国热带农业科学院橡胶研究所 | 一种橡胶树泛素基因启动子proHbUBI2及其克隆与应用 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100413965C (zh) * | 2006-04-20 | 2008-08-27 | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 一种缺磷诱导基因启动子及其应用 |
-
2007
- 2007-04-02 CN CN2007100650828A patent/CN101050462B/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102559673A (zh) * | 2010-12-16 | 2012-07-11 | 华中农业大学 | 甘蓝型油菜缺磷特异诱导表达的启动子 |
CN102559673B (zh) * | 2010-12-16 | 2013-07-17 | 华中农业大学 | 甘蓝型油菜缺磷特异诱导表达的启动子 |
CN108424893A (zh) * | 2018-05-18 | 2018-08-21 | 西南大学 | 玉米磷高效基因ZmAPL9及其应用 |
CN108424893B (zh) * | 2018-05-18 | 2021-05-11 | 西南大学 | 玉米磷高效基因ZmAPL9及其应用 |
CN112980847A (zh) * | 2021-04-21 | 2021-06-18 | 中国热带农业科学院橡胶研究所 | 一种橡胶树泛素基因启动子proHbUBI3及其克隆与应用 |
CN113025616A (zh) * | 2021-04-21 | 2021-06-25 | 中国热带农业科学院橡胶研究所 | 一种橡胶树泛素基因启动子proHbUBI2及其克隆与应用 |
CN113025616B (zh) * | 2021-04-21 | 2023-05-02 | 中国热带农业科学院橡胶研究所 | 一种橡胶树泛素基因启动子proHbUBI2及其克隆与应用 |
CN112980847B (zh) * | 2021-04-21 | 2023-05-02 | 中国热带农业科学院橡胶研究所 | 一种橡胶树泛素基因启动子proHbUBI3及其克隆与应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101050462B (zh) | 2010-06-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101050461A (zh) | 来源于拟南芥的与耐逆性相关的转录因子及其编码基因与应用 | |
CN1914321A (zh) | 来自甘薯的蔗糖诱导型启动子 | |
CN101048508A (zh) | 植物发育和形态学的修饰 | |
CN101054411A (zh) | 玉米钙调磷酸酶b类似蛋白及其编码基因与应用 | |
CN1887903A (zh) | 硅藻的硝酸盐转运蛋白及其编码基因与应用 | |
CN1680437A (zh) | 小金海棠Fe(Ⅱ)转运蛋白及其编码基因与应用 | |
CN1772899A (zh) | 野生稻的一个抗旱基因及其编码蛋白与应用 | |
CN1273483C (zh) | 一个玉米bZIP类转录因子及其编码基因与应用 | |
CN1309835C (zh) | 植物可选择标记物和植物转化方法 | |
CN1831010A (zh) | 一个玉米抗逆转录调控因子及其编码基因与应用 | |
CN101050462A (zh) | 来源于拟南芥的缺磷诱导基因及其编码蛋白与应用 | |
CN1821395A (zh) | 一种水稻促***原活化蛋白激酶及其编码基因与应用 | |
CN1202203A (zh) | 植物谷胱甘肽s-转移酶启动子 | |
CN1948338A (zh) | 一个调控植物脂肪酸代谢的转录因子及其编码基因与应用 | |
CN1824779A (zh) | 一种大豆热激转录因子及其编码基因与应用 | |
CN1769457A (zh) | 蝴蝶兰pPI15编码序列及其应用 | |
CN1296383C (zh) | 一种植物dreb转录因子及其编码基因与应用 | |
CN1325448A (zh) | 植物纤维的修饰 | |
CN1302110C (zh) | 水稻Osfad8编码序列及其应用 | |
CN1919866A (zh) | 一种大豆Trihelix转录因子及其编码基因与应用 | |
CN1807627A (zh) | 一个麻疯树盐诱导转录因子及其编码基因与应用 | |
CN100351380C (zh) | 罗布麻dna解旋酶基因apdh1序列及其克隆与应用 | |
CN1218959C (zh) | 一种水稻乙烯受体类蛋白及其编码基因与应用 | |
CN1778925A (zh) | 植物表皮毛特异表达启动子 | |
CN1724667A (zh) | 一种水稻锌指蛋白基因及其编码的蛋白质 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20100616 Termination date: 20170402 |