本发明的最佳实施方式
下面,将详细描述本发明。
本发明的“抗菌组合物”是指具有防腐杀菌剂性质的改进试剂,它含有(a)9-(3’,7’-二甲基-2’,6’-辛二烯基)-4-羟基-7H-呋喃并[3,2-γ][1]苯并吡喃-7-酮(下式(1))和(b)8-(3’,7’-二甲基-2’,6’-辛二烯基)-5-羟基-7-甲氧基-2H-1-苯并吡喃-2-酮(下式(2))的混合物作为活性元素。
式(1)
式(2)
每种化合物都可以根据日本专利No.2864436所描述的方法制备。具体而言,首先对柠檬油进行减压蒸馏。向残余物中加入是所述残余物10倍或以上体积(优选,10-20倍体积)的甲醇,加热搅拌以分散,然后置于冷冻机中过夜。随后,将所得物分成甲醇溶液和不溶于甲醇的蜡状沉淀物,用过滤助剂比如硅藻土进行过滤。将溶液进行真空浓缩以获得油状物质。然后,将所述油状物质溶于有机溶剂中,分成强酸性部分、中性部分和弱酸性部分。合适的有机溶剂是酯和醚,酯比如乙酸甲酯、乙酸乙酯和乙酸丙酯,醚比如二乙基醚和二丙基醚,优选乙酸乙酯。首先,用弱碱性水溶液萃取有机溶剂相。萃取液用酸中和,并用所述有机溶剂萃取,以获得强酸性部分(部分SA)。接下来,用强碱性水溶液萃取所述有机溶剂相。萃取液用酸中和,并用所述有机溶剂萃取,以获得弱酸性部分(部分WA)。和所述强碱性水溶液相分离的有机溶剂相用水清洗并浓缩,以获得中性部分(部分N)。然后,通过柱色谱法从具有强抗氧化能力的弱酸性部分中离析,得到各种化合物。
本发明的抗菌组合物仅仅在上述化合物混和以将抗菌活性提高到实际水平之后,才产生作为抗菌组合物的作用。(a)和(b)的比例可以根据最终制品而变,但是(a)∶(b)的重量比为1∶30-30∶1的抗菌组合物是理想的。为了进一步提高组分(a)和组分(b)的混合物的抗菌活性的协同效果,更希望(a)∶(b)的重量比是1∶10-10∶1的抗菌组合物,特别希望(a)∶(b)的重量比是1∶8-8∶1的抗菌组合物。
这样获得的本发明的抗菌组合物对各种细菌产生改进的抗菌效果。这些细菌的例子包括生龋细菌、牙周细菌、痤疮细菌、脓肿细菌、腋臭细菌、头皮屑生成细菌、皮肤寄生型细菌、腐败细菌、食品中毒细菌、胃馈疡发生细菌、金黄色葡萄球菌和耐热嗜酸细菌,优选生龋细菌、牙周细菌、痤疮细菌、脓肿细菌、腐败细菌、金黄色葡萄球菌和耐热嗜酸细菌。
这些细菌的具体实例如下。
生龋细菌;内氏放线菌(Actinomyces naeslundii)、粘放线菌(Actinomyces viscosus)、变异链球菌(Streptococcus mutans)。
牙周细菌;具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)、中间普雷沃氏菌(Prevotella intermedia)、牙龈卟啉单胞菌(Prophyromonasgingivalis)。
痤疮细菌;疮疱丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)。
脓肿细菌;脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)。
腋臭细菌;干燥分枝杆菌(Corynebacterium xerosis)。
头皮屑生成细菌:糠秕马拉色菌(Malassezia furfur)
皮肤寄生型细菌:表皮葡萄球菌(Staphyrococcus epidermidis)、极小棒杆菌(Corynebacterium minutissimum)。
腐败细菌:枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)。
食品中毒细菌:副溶血孤菌(Vibrio parahaemoliticus)、空肠弯曲杆菌空肠亚种(Campylobactor jejuni)。
胃馈疡发生细菌:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)。
金黄色葡萄球菌:金黄色葡萄球菌(Staphyrococcus aureus)。
耐热嗜酸细菌;酸热脂环酸杆菌(Alicyclobacillus acidocaldarius(NCIMB))、酸土脂环酸杆菌(Alicyclobacillus acidoterrestris(NCIMB))。
由此获得的上述化合物的混合物可以直接作为抗菌组合物加入到食品等中。上述化合物的混合物可以溶解在或者分散在合适的液体载体(例如,乙醇、含水乙醇、苄醇、中等链长甘油三酸酯(MCT)等)中,或者混和到或者吸附到合适的粉末载体(例如,多糖、加工的淀粉、活性炭、硅胶等)上,以用作本发明的抗菌组合物。在一些情况中,可以加入乳化剂、分散剂、悬浮剂、铺展剂、渗透剂、润湿剂或者稳定剂以调制出乳液、吸水剂、粉末或者片剂,以用作食品、化妆品、口腔用品或者药品的抗菌组合物。
而且,本发明的抗菌组合物可以和一种掺混剂、或者两种或多种掺混剂的组合进行混和,以制备特征性的抗菌组合物,其中所述掺混剂比如填料、抗氧化剂、颜料、已知的防腐抗菌剂、除臭物质、表面活性剂、芳香成分、稳定剂、吸收剂(氯化钙、强吸水性聚合物等)和赋型剂(乳糖,等)。
例如,当本发明的抗菌组合物结合到化妆品、盥洗用品、或者口腔用品等中时,优选在抗菌组合物中加入芳香成分以便能产生清洁的映像。当本发明的抗菌组合物结合到食品中时,也优选在该抗菌组合物中加入芳香成分以便能补偿由于各种原因从食品中丢失的芳香成分。优选在本发明的抗菌组合物中加入表面活性剂,使得当该抗菌组合物加入制品中时,表面活性剂使得该抗菌组合物可以在制品中有效溶解或者分散。在本发明的抗菌组合物中优选加入除臭物质,使得它可以去除令人讨厌的臭味并抑制导致所述臭味的细菌的繁殖。在本发明的抗菌组合物中优选加入填料,使得该抗菌组合物可以以粉末形式以及液体形式使用。在本发明的抗菌组合物中优选加入已知的防腐和/或抗菌剂,从而对最宽可能范围的细菌产生抗菌效果。
掺混剂的量没有限制,只要能实现主要目标即可。
填料的实例包括糖类、多糖类加工的淀粉、酪蛋白、明胶、羧甲基纤维素(下面称作“CMC”)和卵磷脂。
抗氧化剂的实例包括丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、柠檬酸、biofulvic acid、谷胱甘肽、硒、番茄红素、维生素A、维生素E、维生素C以及吡咯并吡咯衍生物、源自各种植物提取物的自由基清除剂、过氧化物歧化酶、和具有抗氧化性质的酶,比如谷胱甘肽过氧化酶。
就颜料而言,染料、色淀、合成颜料比如有机色料(tarcolor)和天然颜料是已知的,其实例具体包括木槿属植物颜料、越桔颜料、李子颜料、紫菜颜料、悬钩子颜料、葡萄汁颜料、黑莓颜料、蓝莓颜料、桑椹颜料、黑樱桃颜料、红醋栗颜料、罗甘莓颜料、辣椒粉、麦芽提取物、芸香苷、类黄酮、红球甘蓝颜料、红萝卜颜料、赤豆颜料、姜黄颜料、橄榄茶、牛浆果颜料、小球藻粉、藏红花颜料、紫苏颜料、草莓颜料、菊苣颜料、美洲山核桃颜料、红曲霉颜料、红花颜料、紫甘薯颜料、紫胶颜料、螺旋藻颜料、洋葱颜料、罗望子颜料、辣椒颜料、栀子颜料、紫草根颜料、花梨木颜料、磷虾颜料、桔子颜料、胡萝卜素、焦糖、二氧化钛、叶绿酸铁钠、核黄素、钾降胭脂树素、钠降胭脂树素、苋菜红、赤藓红、新胭脂红、焰红染料B、玫瑰红、酸性红、酒石黄、晚霞黄、坚牢绿、亮蓝、靛蓝胭脂红、色淀红C、立索红、罗丹明、焰红染料、靛蓝、深红、(酸性)一号橙、苏丹蓝、云母、滑石粉、碳酸钙、高岭土、硅酸酐、氧化铝、Bengara、氧化铁、佛青、碳黑、氧化锌、白云母、氯氧化铋、氮化硼、光致变色色料、颗粒复合粉(混和细粉)和合成云母。
已知防腐剂和抗菌剂的实例包括苯甲酸、苯甲酸钠、对羟苯甲酸异丙酯、对羟苯甲酸异丁酯、对羟苯甲酸乙酯、对羟苯甲酸甲酯、对羟苯甲酸丁酯、对羟苯甲酸丙酯、亚硫酸钠、硫代硫酸钠、焦亚硫酸钾、山梨酸、山梨酸钾、脱水乙酸钠、侧素、土当归(aralia cordata)提取物、苏合香提取物、菌陈蒿提取物、乌龙茶提取物、鱼精蛋白提取物、酶降解操作的液滴提取物(enzyme-degraded job’s tearextract)、茶叶儿茶酸、苹果多酚、果胶降解物质、脱乙酰壳多糖、溶菌酶和e-聚赖氨酸。
已知的除臭剂的例子包括具有脱硫作用的除臭剂(例如,铁硫酸盐比如硫酸亚铁或者铁氢氯化物)、具有化学作用的除臭剂(例如,酸性剂、碱性剂、氧化剂或者还原剂)、具有加成/缩聚作用的除臭剂(加成剂:(甲基)丙烯酸酯、马来酸酯等;缩聚剂:glyoxysal等),具有离子交换作用的除臭剂(例如,用于离子交换树脂的两性剂、阳离子剂和阴离子剂)、具有药物浸渍吸附作用的除臭剂(碱性或酸性的浸渍活性炭以及活性炭和化学反应物的混合物)、具有吸附作用的除臭剂(例如,中性活性炭、纤维碳吸附剂、沸石和多孔吸附剂,比如活性粘土)、具有吸收作用的除臭剂(例如,有机溶剂比如醇和己烷、水和表面活性剂)、具有酶作用的除臭剂(例如,消化酶、有益口腔细菌LS-1乳酸细菌、酵母和土壤细菌)、具有防腐/消毒作用的除臭剂(例如,氯胺T、对羟基苯甲酸酯和酚)、多酚除臭剂(例如,柿子多酚、茶叶儿茶酸、迷迭香提取物、乌龙茶提取物、艾菊提取物、白背栎(quercus salicina)叶提取物、和米糠/大豆烘烤后的提取物)、环糊精、食用伞菌提取物、Rooibos提取物、叶绿酸铁钠、活性炭和沸石。
优选的,表面活性剂是一种非离子型表面活性剂或者两种或多种非离子型表面活性剂的组合,尤其是聚氧乙烯烷基醚和脂肪酸烷基醇酰胺,或者酰基谷氨酸。聚氧乙烯烷基醚的例子包括聚氧乙烯硬脂基(polyoxyethylenestearyl)和聚氧乙烯氢化蓖麻油.脂肪酸烷基醇酰胺的例子包括椰子油脂肪酸二乙醇酰胺。酰基谷氨酸型的例子包括碳数目为12-18的饱和和非饱和脂肪酸的谷氨酸酯或者其混合物,比如椰子油脂肪酸、氢化椰子油脂肪酸、棕榈油脂肪酸、氢化棕榈油脂肪酸、动物脂脂肪酸和氢化动物脂脂肪酸,尤其包括N-椰子油脂肪酸酰基-L-谷氨酸三乙醇胺、月桂酰-L-谷氨酸三乙醇胺、N-椰子油脂肪酸酰基L-谷氨酸钠、N-月桂酰L-谷氨酸钠、N-肉豆蔻酰L-谷氨酸钠、N-椰子油脂肪酸/氢化动物脂脂肪酸酰基L-谷氨酸钠和N-椰子油脂肪酸酰基L-谷氨酸钾。
另外,芳香成分(香料或者香味物质)可以和抗菌组合物掺混。结果,加入了香味以进一步提高可用性。
芳香成分的掺混量随着抗菌组合物的应用及用量而变,但通常优选是抗菌组合物的0.001-50重量%。
用于本发明的香料实例包括合成的芳香成分,比如酯类、醇类、醛类、酮类、缩醛类、酚类、醚类、内酯类、呋喃类、烃类和酸类,以及天然芳香成分。
用于本发明的香味物质包括烃类、醇类、酚类、醛类和/或缩醛类、酮类和/或缩酮类、醚类、合成麝香类、酸类、内酯类、酯类、含卤素化合物以及天然芳香成分。
除了上述香料和香味物质以外,可以采用在如下文献中描述的芳香成分:“Field survey of food flavoring ingredient compounds used inJapan”(2000,Health Science Study Report;Japan Flavor andFragrance Materials Association,2001年3月发布);“Syntheticflavoring ingredient chemicals and product knowledge”(Genichi Indo,1996年3月6日发布,Chemical Daily Co.,Ltd.);和“Perfume andFlavor Chemicals(Aroma Chemicals)1,2”(Steffen Arctender(1969))。
这些香料和香味物质可以单独使用或者以两种或多种的组合使用。
也可以采用市售的香料和芳香物质。每一种都可以是合成的,或者来自天然来源比如植物的。精油、香树脂、香脂、净油、浸膏(concrete)和酊剂可以通过已知方法制备。
本发明的抗菌组合物可以加入到和与,例如但不限于,食品、化妆品(香味制品、皮肤护理化妆品、毛发护理化妆品、盥洗用品、洗浴添加剂、身体护理产品、清洁剂、柔软剂、芳香除臭剂)、口腔用品和药品掺混。优选的,本发明的抗菌组合物可以加入到食品和口腔制品中和与食品和口腔制品掺混。
上述食品的实例包括饮料例如水果饮料、非水果饮料、茶饮料、乳酸饮料和粉末饮料,冷冻甜点心比如冰淇淋、果子露和冰冻甜点心,甜点心比如布丁、果冻、巴伐利亚奶酪和乳酪,糖果比如胶质软糖和蜜饯和鱼酱制品。
上述香味制品的实例包括香水、淡香水、科隆香水和洗浴科隆香水。
上述皮肤护理化妆品的实例包括护肤霜、清洁霜、润肤液、须后水、粉底、唇膏和滑石粉。
上述毛发护理化妆品的实例包括毛发护理产品,比如香波、清洗液、调理剂、清洗香波和处理剂,毛发造型剂,比如润发脂、生发油、美发液和发胶,头发生长剂、头发染料和冷态卷发乳液。
上述盥洗用品的实例包括化妆香皂、浴皂和透明皂。
上述清洁剂的实例包括粉状织物清洁剂、液体织物清洁剂、柔软剂、厨房清洁剂、盥洗室清洁剂、浴室清洁剂、玻璃清洁剂和霉菌去除剂。
上述洗浴添加剂的实例包括浴粉、浴饼、泡泡浴饼、浴油和泡泡浴。
上述芳香除臭剂的实例包括凝胶芳香除臭剂、薄雾芳香除臭剂和浸渍的气溶胶芳香除臭剂。
上述药品的实例包括片剂、液体药物、胶囊型药物和颗粒药物。
上述口腔制品的实例包括漱口剂、牙膏、口腔护理树胶和口腔护理糖果。
加入到或者掺混于上述抗菌组合物中的添加剂的量根据待加入的对象(“对象”可以是最终制品或者最终制品的原料)和目标细菌而发生显著变化,但通常优选是对象重量的0.0000001-50%量。当所述量为0.0000001重量%或以下时,抗菌活性能力可能不足,当为50重量%或以上时,抗菌活性能力足够,但是从经济上不利。最优选的,所述量是对象重量的0.0001-10%。
本发明的抗菌组合物显示出对例如生龋细菌、牙周细菌、痤疮细菌、腋臭细菌、头皮屑生成细菌、皮肤寄生型细菌、脓肿细菌和食物中毒细菌的强抗菌效果。
食物中毒细菌导致食物制品腐烂和变质,由此显著降低食品的商业价值。而且,随着细菌繁殖,在食品中产生毒素,对所述食品的食用者有严重的负面效果。因此,通过在食物制品中加入本发明的抗菌组合物,可以实现更长的货架期并防止食物中毒。
生龋细菌导致龋齿。牙周细菌导致牙周病。另外,这些细菌在口腔内繁殖变成口臭源。因此,本发明的抗菌组合物可以包含在口腔制品中以防牙齿出现空腔、牙周病和口臭。
本发明的抗菌组合物可以包含在各种化妆品等中以控制头皮屑生成细菌、痤疮细菌、腋臭细菌和脓肿细菌的增生,其在除臭、防止头皮屑生成和防止痤疮形成的效果是可以预期的。
实施例
下面,将参考实施例和对比实施例更详细地描述本发明,所述实施例和对比实施例不是对本发明的限制。
实施例1
制备抗菌组合物(水溶性抗菌组合物)
将分别按照日本专利No.2864436所述的方法制备的9-(3’,7’-二甲基-2’,6’-辛二烯基)-4-羟基-7H-呋喃并[3,2-γ][1]苯并吡喃-7-酮(a)和8-(3’,7’-二甲基-2’,6’-辛二烯基)-5-羟基-7-甲氧基-2H-1-苯并吡喃-2-酮(b)以下列重量比混和,以制备抗菌组合物。每种抗菌组合物在用于实施例之前制成0.2%乙醇溶液。
抗菌组合物(A) (a)∶(b)=1∶8
抗菌组合物(B) (a)∶(b)=1∶1
抗菌组合物(C) (a)∶(b)=8∶1
抗菌组合物(D) (a)∶(b)=1∶30
抗菌组合物(E) (a)∶(b)=30∶1
抗菌组合物(F) (a)∶(b)=0∶1
抗菌组合物(G) (a)∶(b)=1∶0
实施例2
制备抗菌组合物(油溶性抗菌组合物)
将分别按照日本专利No.2864436所述的方法制备的9-(3’,7’-二甲基-2’,6’-辛二烯基)-4-羟基-7H-呋喃并[3,2-γ][1]苯并吡喃-7-酮(a)和8-(3’,7’-二甲基-2’,6’-辛二烯基)-5-羟基-7-甲氧基-2H-1-苯并吡喃-2-酮(b)以下列重量比混和,以制备抗菌组合物。每种抗菌组合物在用于实施例之前制成0.2%中等链长甘油三酸脂(MCT)溶液。
抗菌组合物(H) (a)∶(b)=1∶8
抗菌组合物(I) (a)∶(b)=8∶1
抗菌组合物(J) (a)∶(b)=1∶1
实施例3
确定最小抑制浓度(MIC)
通过琼脂稀释测试(Agar Dilution Test,ADT)来确定最小抑制浓度(MIC)。
将实施例1中得到的每种抗菌组合物溶解到乙醇或水(根据每种抗菌组合物的溶解性)中以进行二倍连续稀释。将100微升的所得物加入到10ml的消毒后的琼脂介质中(在Mueller-Hinton Medium(Difco)中的皮肤相关细菌和标准细菌、在Sabroud Medium(Difco)中的酵母和丝状细菌、和在Trypticase Soy琼脂(BBL)中的厌氧细菌)、充分搅拌、转移到9cmf的皮氏培养皿中,在室温下固定。向该皮氏培养皿中,采用Sakuma Seisakusho,LTD.的27点微型植入器(microplanter)MIT-P点入1×105cfu(菌落形成单位)的皮肤相关细菌和标准细菌,所得物在37℃培养18小时。将厌氧细菌在37℃于压氧条件(采用BBL气密厌氧***)下培养72小时。在完成培养后,将每种细菌的生长情况和在仅有醇的皮氏培养皿中的(空白样)进行比较。将没有细菌生长的试样浓度定为最小抑制浓度(MIC)。
作为对比物质,还确定了丁基对羟基苯甲酸酯9BPHB)和三氯生。结果如下。
表1
|
三氯生 |
丁基对羟基苯甲酸酯 |
抗菌组合物(A) |
抗菌组合物(F) |
抗菌组合物(G) |
Se-1 |
1.6 |
200 |
12.5 |
200 |
200 |
Se-2 |
1.6 |
200 |
12.5 |
200 |
200 |
Cx-2 |
3.1 |
50 |
6.3 |
200 |
200 |
Mf-1 |
1.6 |
100 |
1.6 |
25 |
50 |
Sa-3 |
1.6 |
100 |
1.6 |
25 |
100 |
Bs-1 |
0.78 |
200 |
6.3 |
200 |
200 |
Se-3 |
1.6 |
200 |
12.5 |
200 |
200 |
Sa-4 |
1.6 |
200 |
6.3 |
200 |
200 |
Pa-2 |
- |
100 |
1.6 |
25 |
100 |
Bf-1 |
- |
50 |
12.5 |
100 |
100 |
Fn-1 |
- |
100 |
1.6 |
25 |
50 |
Pg-1 |
- |
50 |
1.6 |
25 |
50 |
Pt-1 |
- |
100 |
12.5 |
100 |
100 |
Aa-1 |
- |
100 |
12.5 |
25 |
200 |
Av-1 |
- |
100 |
3.1 |
25 |
100 |
*每个数值单位是ppm
表2
测试细菌(实施例中所用测试细菌的代码列表)
皮肤相关细菌
代码 |
细菌 |
注释 |
Se-1 |
表皮葡萄球菌JCM2414 |
皮肤寄生型细菌 |
Se-2 |
表皮葡萄球菌var.h-6 |
皮肤寄生型细菌 |
Se-3 |
表皮葡萄球菌ATCC 12228 |
皮肤寄生型细菌 |
Cx-2 |
干燥分枝杆菌JCM 1324 |
腋臭细菌 |
Mf-1 |
糠禾比马拉色菌(Malasseziafurfur)IFO 0656 |
头皮屑生成细菌(酵母) |
Sa-3 |
金黄色葡萄球菌209P LAM12082 |
金黄色葡萄球菌 |
Sa-4 |
金黄色葡萄球菌ATCC6538 |
金黄色葡萄球菌 |
标准细菌
代码 |
细菌 |
注释 |
Bs-1 |
枯草芽孢杆菌PCT IFO3134 |
腐败细菌 |
厌氧细菌
代码 |
细菌 |
注释 |
Pa-2 |
疮疱丙酸杆菌JCM6473 |
痤疮细菌 |
Bf-1 |
脆弱拟杆菌GM7000JCM5560 |
脓肿细菌 |
Fn-1 |
具核梭杆菌JCM6328 |
牙周细菌 |
Pt-1 |
中间普雷沃氏菌JCM6322 |
牙周细菌 |
Pg-1 |
牙龈卟啉单胞菌JCM8525 |
牙周细菌 |
Aa-1 |
内氏放线菌JCM8350 |
生龋细菌 |
Av-1 |
粘放线菌JCM8352 |
生龋细菌 |
根据上述结果,发现作为本发明一个方面的抗菌组合物(A)和常规抗菌剂BPHB相比,对所有上述细菌的抗菌效果更强。虽然三氯生具有最强的抗菌效果,但是由于它是含有卤素的化合物并因而涉及到对环境和人体的影响,所以使用受限。分别含有组分(a)和组分(b)的抗菌组合物(F)和抗菌组合物(G)也显示出一些抗菌效果。但是,抗菌组合物(F)和抗菌组合物(G)与通过混和组分(a)及组分(b)制备的抗菌组合物(A)相比,显然具有更窄的抗菌范围,而且即使显示了抗菌效果,但是绝对不会强于抗菌组合物(A)。相应地,很难说抗菌组合物(F)和抗菌组合物(G)具有充分的抗菌效果。从抗菌组合物(A)的结果可以发现,仅仅在混和了组分(a)和组分(b)之后,才能得到具有实践水平效果的抗菌组合物。
实施例4
不同混和比的抗菌活性比较
通过实施例3中所述的琼脂稀释测试确定最小抑制浓度,以确定在不同混和比的抗菌活性差异。结果如下。
表3
抗菌组合物 |
(A) |
(B) |
(C) |
(D) |
(E) |
(F) |
(G) |
Pt-1 |
12.5 |
25 |
25 |
50 |
50 |
100 |
100 |
Bs-1 |
6.3 |
12.5 |
12.5 |
25 |
50 |
200 |
200 |
Sa-4 |
6.3 |
6.3 |
12.5 |
25 |
50 |
200 |
200 |
Bf-1 |
12.5 |
12.5 |
12.5 |
50 |
25 |
100 |
100 |
*每个数值的单位是ppm
根据上述结果,本发明的抗菌组合物在组分(a)和组分(b)的比值为1∶8-8∶1时显示出最强的抗菌活性。组分(a)和组分(b)的比值为1∶30-30∶1的抗菌组合物和单独具有组分(a)或组分(b)的抗菌组合物相比,也显示出更强的抗菌效果。最小抑制浓度,例如100ppm-50ppm,意味着为了获得一定的抗菌效果而加入的抗菌组合物的量可以减半,这从经济角度来看是个很大的差异。
实施例5
采用耐热嗜酸细菌确定最小抑制浓度(MIC)
将酸热脂环酸杆菌(NCIMB)和酸土脂环酸杆菌(NCIMB)的孢子用缓冲盐水稀释成1-2百万/100μl,在80℃加热10分钟,然后对每种而言,在每5ml的AAM(酸土脂环酸杆菌介质)液体介质中加入100μl。在如上制备的测试介质中,根据下列步骤加入实施例1中得到的抗菌组合物(A)。将在葡萄柚香料中的20mg/ml、10mg/ml、5mg/ml和2.5mg/ml抗菌组合物(A)加入到各个介质(0.1%)中(抗菌组合物(A)的最终浓度是:20ppm、10ppm、5ppm和2.5ppm)。作为对照样,制备了具有0.1%葡萄柚香料的介质和空白介质,以确认细菌生长没有问题。将由此制备的介质在50℃培养10天,基于和细菌繁殖相关的介质混浊来确定细菌生长,由此检查生长控制效果。对于每种测试细菌和每个试样而言,将5份介质进行试验,将细菌在每种介质中受到抑制时的浓度确定为最小抑制浓度(MIC)。
为了比较,也确定了蔗糖脂肪酸酯。结果如下。
表4
试样 |
酸热脂环酸杆菌
|
酸土脂环酸杆菌
|
抗菌组合物(A) |
10ppm |
10ppm |
蔗糖脂肪酸酯 |
20ppm |
20ppm |
根据上述结果,发现本发明的抗菌组合物和蔗糖脂肪酸酯相比,具有改善的对耐热嗜酸细菌的抗菌效果。
将实施例1中制备的抗菌组合物(A)用于制备具有如下组成的化妆品、食品和口腔用品。
实施例6
牙膏(单位:重量%)
磷酸二钙 10.0
月桂基硫酸钠 2.0
羧甲基纤维素钠 0.5
糖精钠 0.02
薄荷香料 1.0
抗菌组合物(A) 0.05%
甘油 最佳量
100.0
实施例7
漱口剂(单位:重量%)
乙醇 10.0
聚氧乙烯氢化蓖麻油 2.0
薄荷香料 0.5
糖精钠 0.02
甘油 10.0
颜料 最佳量
抗菌组合物(C) 0.25
纯净水 最佳量
100.0
实施例8
糖果(单位:重量%)
粉末糖 50.0
淀粉浆 33.0
柠檬酸 1.0
抗菌组合物(C) 0.25
纯净水 最佳量
100.0
实施例9
口香糖(单位:重量%)
树胶底物 21.0
粉末糖 63.9
玉米淀粉 12.5
柠檬香料 1.0
酸性剂 0.6
抗菌组合物(A) 1.0
100.0
实施例10
胶质软糖(单位:重量%)
淀粉 98.45
粉末薄荷香料 0.8
蔗糖脂肪酸酯 0.5
抗菌组合物(B) 0.25
100.0
实施例11
卫生洗涤剂 (单位:重量%)
乙醇 20.0
抗菌组合物(C) 5.0
纯净水 最佳量
100.0
实施例12
粉末清洁剂(单位:g)
硫酸月桂基、硬脂基钠 15.0
碳酸钠 15.0
硅酸钠 13.0
柠檬酸钠 15.0
羧甲基纤维素 2.0
硫酸钠 38.0
麝香树香水 1.0
抗菌组合物(A) 1.0
100.0
实施例13
止汗剂(单位:g)
PEG-7甘油基可可酸酯 2.0
氢化油 5.0
肉豆蔻酸肉豆蔻酯 15.0
环甲基硅酮 33.5
十八烷醇 20.0
异壬烯酸硬脂基酯 3.0
氯水合铝 20.0
用于止汗剂的芳香成分 0.5
抗菌组合物(C) 1.0
100.0
实施例14
润肤霜(单位:g)
十六烷醇 5.0
硬脂酸 3.0
凡士林 5.0
角鲨烷 10.0
甘油三2-乙基己酸酯酯 7.0
二丙二醇 5.0
甘油 5.0
丙二醇单硬脂酸酯 3.0
POE(20)十六烷醇醚 3.0
三乙醇胺 1.0
对羟基苯甲酸酯 0.3
用于润肤霜的芳香成分 1.0
抗菌组合物(C) 1.0
纯净水 最佳量
100.0
实施例15
香波(单位:g)
硫酸月桂酯钠(sodium laureth sulfate)40.0
椰油基两性乙酸钠 10.0
Cocamide DEA 2.0
丁二醇 2.0
柠檬酸 0.35
氯化钠 0.1
对羟基苯甲酸酯 0.3
EDTA四钠 0.1
用于香波的芳香成分 0.5
抗菌组合物(A) 1.0
纯净水 最佳量
100.0
实施例16
含有果汁的饮料(单位:g)
果糖/葡萄糖液体糖 107.0
柠檬酸 1.0
柠檬酸钠 0.3
浓缩的桔子汁 51.8
水溶性桔子香料 1.0
抗菌组合物(B) 0.1
水 最佳量
1000.0
实施例17
运动饮料(单位:g)
糖 31.0
葡萄糖 15.7
柠檬酸 1.0
乳酸钙 0.679
柠檬酸钠 0.3
氯化钠 0.28
氯化钾 0.22
维生素C 0.864
L-谷氨酸钠 0.03
烟酸 0.013
泛酸钙 0.007
维生素B6 0.0022
维生素B12 0.000006
柠檬香料 1.0
抗菌组合物(B) 0.1
纯净水 最佳量
1000.0
实施例18
咖啡牛奶饮料(单位:g)
常规咖啡 50.0
精制白糖 50.0
牛奶 150.0
乳化剂(脂肪酸酯) 0.5
咖啡香料 1.0
牛奶香料 0.8
抗菌组合物(A) 0.1
纯净水 最佳量
1000.0
实施例19
碳酸饮料(单位:g)
果糖/葡萄糖液体糖 127.0
柠檬酸 1.24
纯净水 200.0
柠檬香料 0.12
抗菌组合物(B) 0.05
碳酸水 最佳量
1000.0
实施例20
含果汁的果冻(单位:g)
苹果果汁 6.0
淀粉浆 3.5
精制白糖 13.0
苹果酸 0.21
凝胶剂 0.9
柠檬酸钠 0.05
焦糖颜料 0.08
苹果香料 0.2
抗菌组合物(C) 0.01
纯净水 最佳量
100.0
实施例21
柠檬茶(单位:g)
茶叶提取物(白利糖度1.0) 200.0g
精制白糖 60.0
柠檬浓缩汁 1.56
维生素C 0.1
抗菌组合物(A) 0.05
纯净水 最佳量
1000.0
在如上制备的酸性饮料中(实施例16、17、19和21)没有目测发现混浊或沉降。
本发明的抗菌组合物具有改进的抗菌效果。具体而言,它对各种细菌具有改进的抗菌活性,所述细菌包括口腔相关的细菌,比如生龋细菌和牙周细菌,食品工业中的食物中毒细菌和腐败细菌,和化妆品工业中涉及的痤疮细菌、头皮屑生成细菌和皮肤寄生细菌。因此,本抗菌组合物可以适用于宽范围的制品中,比如食品、化妆品(芳香制品、皮肤护理制品、毛发护理制品、盥洗制品、洗浴添加剂、身体护理制品、清洁剂、柔软剂、芳香除臭剂)、口腔用品和药品。而且,本发明的抗菌组合物可以和其它抗菌剂或具有抗菌活性的物质一起使用,因此可以预期它们的协同抗菌效果。通过在上述制品中使用本发明的抗菌组合物,可以提供改进的抗菌效果和保存稳定性。