BR112018016396B1

BR112018016396B1 - Composto, composição farmacêutica, e, uso de um composto

Info

Publication number: BR112018016396B1
Application number: BR112018016396-1A
Authority: BR
Inventors: Niall Andrew Anderson; Nicholas Paul Barton; Sebastien Andre Campos; Edward Paul Cannons; Anthony William James Cooper; Kenneth David Down; Kevin James Doyle; Julie Nicole Hamblin; Graham George Adam Inglis; Arnelle Le Gall; Vipulkumar Kantibhai Patel; Simon Peace; Andrew Sharpe; Gemma Victoria White
Original assignee: Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited
Priority date: 2016-02-12
Filing date: 2017-02-10
Publication date: 2023-11-14
Also published as: EP3414228A1; US20200071311A1; CN108884046B; WO2017137535A1; AU2017218530A1; ES2786948T3; CN108884046A; AR107570A1; GB201602527D0; RU2018127494A; EP3414228B1; KR20180105726A; JP2019504858A; US10457674B2; UY37121A; JP6916195B2; CA3013404A1; US10793559B2; BR112018016396A2; TW201738238A

Abstract

A invenção está direcionada a certos novos compostos. Especificamente, a invenção está direcionada a compostos da fórmula (I): (I) e sais dos mesmos. Os compostos da invenção são inibidores da atividade da cinase, em particular da atividade da PI3 cinase.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção está direcionada aos compostos que são inibidores da atividade da cinase, composições farmacêuticas compreendendo os compostos, e ao uso dos compostos ou das composições no tratamento de vários distúrbios. Mais especificamente, os compostos da invenção são inibidores da atividade ou função da família da fosfoinositida 3’OH cinase (a seguir PI3-cinases), por exemplo, PI3Kδ, PI3Kα, PI3Kβ e/ou PI3KY.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[002] As membranas celulares representam um grande depósito de mensageiros secundários que podem ser alistados em uma variedade de caminhos da transdução de sinal. Em relação à função e regulagem de enzimas efetoras nos caminhos da sinalização de fosfolipídios, as PI3-cinases Classe I (por exemplo, PI3Kdelta) geram mensageiros secundários a partir das reuniões de fosfolipídio de membrana. As PI3Ks Classe I convertem o fosfolipídio de membrana PI(4,5)P2 em PI(3,4,5)P3, que funciona como um segundo mensageiro. PI e PI(4)P também são substratos de PI3K e podem ser fosforilados e convertidos em PI3P e PI(3,4)P2, respectivamente. Além disso, estas fosfoinositidas podem ser convertidas em outras fosfoinositidas pelas fosfatases 5’-específicas e 3’-específicas. Assim, a atividade enzimática de PI3K resulta direta ou indiretamente na geração de dois subtipos de 3’- fosfoinositida que funcionam como mensageiros secundários nos caminhos intracelulares da transdução de sinal (Trends Biochem. Sci. 22(7) p. 267-72 (1997) por Vanhaesebroeck et al.; Chem. Rev. 101(8) p. 2365-80 (2001) por Leslie et al.; Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17 p. 615-75 (2001) por Katso et al.; e Cell. Mol. Life Sci. 59(5) p. 761-79 (2002) por Toker). Até agora, oito PI3Ks de mamífero foram identificadas, divididas em três Classes principais (I, II, e III) com base na homologia de sequência, estrutura, parceiros de ligação, modo de ativação, e preferência de substrato. In vitro, as PI3Ks Classe I podem fosforilar fosfatidilinositol (PI), fosfatidilinositol-4-fosfato (PI4P), e fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato (PI(4,5)P2) para produzir fosfatidilinositol-3-fosfato (PI3P), fosfatidilinositol-3,4-bisfosfato (PI)(3,4)P2, e fosfatidilinositol-3,4,5-trisfosfato (PI(3,4,5)P3), respectivamente. As PI3Ks Classe II podem fosforilar PI e PI4P. As PI3Ks Classe III podem apenas fosforilar PI (Vanhaesebroeck et al. (1997), acima; Vanhaesebroeck et al. Exp. Cell Res. 253(1) p. 239-54 (1999); e Leslie et al. (2001), acima).

[003] A PI3K Classe I é um heterodímero consistindo de uma subunidade catalítica p110 e uma subunidade reguladora, e a família é dividida adicionalmente em enzimas da Classe Ia e Classe Ib com base nos padrões reguladores e mecanismos de regulagem. As enzimas de Classe Ia consistem de três subunidades catalíticas distintas (p110α, p110β e p110δ) que dimerizam com cinco subunidades reguladoras distintas (p85α, p55α, p50α, p85β e P55Y), com todas as subunidades catalíticas sendo capazes de interagir com todas as subunidades reguladoras para formar uma variedade de heterodímeros. A PI3K Classe Ia são geralmente ativadas em resposta à estimulação do fator de crescimento de tirosina cinases receptoras, via interação dos domínios SH2 da subunidade reguladora com resíduos de fosfotirosina específicos do receptor ativado ou proteínas adaptadoras tais como IRS-1. As GTPases pequenas (ras como um exemplo) também estão envolvidas na ativação de PI3K em conjunção com a ativação da tirosina cinase receptora. Tanto p110α quanto p110β são constitutivamente expressas em todos os tipos de célula, ao passo que a expressão de p110δ é mais restrita às populações de leucócito e algumas células epiteliais. Ao contrário, a enzima de Classe Ib única consiste de uma subunidade catalítica p110Y que interage com uma subunidade reguladora p101. Além disso, a enzima de Classe Ib é ativada em resposta aos sistemas de receptor ligado à proteína G (GPCR) e a sua expressão parece ser limitada aos leucócitos. Esquema A: Conversão de PI(4,5)P2 para PI(3,4,5)P3

[004] Como ilustrado no Esquema A acima, as fosfoinositida 3- cinases (PI3Ks) fosforilam a hidroxila do terceiro carbono do anel de inositol. A fosforilação de fosfoinositidas para gerar PtdIns(3,4,5)P3, PtdIns(3,4)P2 e PtdIns(3)P, produz mensageiros secundários para uma variedade de caminhos da transdução de sinal, incluindo aqueles essenciais para a proliferação celular, diferenciação celular, crescimento celular, tamanho celular, sobrevivência celular, apoptose, adesão, motilidade celular, migração celular, quimiotaxia, invasão, rearranjo citoesqueletal, mudanças na forma da célula, tráfego vesicular e caminho metabólico (Katso et al. (2001), acima; e Mol. Med. Today 6(9) p. 347-57 (2000) por Stein et al.).

[005] A atividade de PI3-cinases responsáveis por gerar estes produtos de sinalização fosforilados foi originalmente identificada como estando associada com oncoproteínas virais e tirosina cinases receptoras do fator de crescimento que fosforilam fosfatidilinositol (PI) e seus derivados fosforilados na 3’-hidroxila do anel de inositol (Panayotou et al. Trends Cell Biol. 2 p. 358-60 (1992)). Entretanto, estudos bioquímicos mais recentes revelaram que as PI3-cinases Classe I (por exemplo isoforma PI3Kδ Classe IA) são enzimas de cinase específicas duplas, significando que elas demonstram tanto a cinase de lipídio (fosforilação de fosfoinositidas) assim como atividade da cinase de proteína, que foi mostrada ser capaz de fosforilação de outra proteína como substratos, incluindo a autofosforilação como um mecanismo regulador intramolecular (EMBO J. 18(5) p. 1292-302 (1999) por Vanhaesebroeck et al.). Os processos celulares em que as PI3Ks desempenham um papel essencial incluem a supressão da apoptose, reorganização do esqueleto de actina, crescimento de miócito cardíaco, estimulação da glicogênio sintase pela insulina, preparação de neutrófilo mediada pelo TNFα e geração de superóxido, e migração e adesão de leucócito para as células endoteliais.

[006] A ativação da PI3-cinase, é acreditada estar envolvida em uma ampla variedade de respostas celulares incluindo crescimento, diferenciação, e apoptose celulares (Parker, Current Biology 5(6) p. 577-79 (1995); e Yao et al. Science 267(5206) p. 2003-06 (1995)). A PI3-cinase parece estar envolvida em vários aspectos da ativação de leucócito. Uma PI3-cinase associada com p85 foi mostrada associar fisicamente com o domínio citoplásmico de CD28, que é uma molécula coestimuladora importante para a ativação de células T em resposta ao antígeno (Pagès et al. Nature 369 p. 32729 (1994); e Rudd, Immunity 4 p. 527-34 (1996)). A ativação de células T através de CD28 diminui o limiar para ativação pelo antígeno e aumenta a magnitude e duração da resposta proliferativa. Estes efeitos são ligados aos aumentos na transcrição de vários genes incluindo interleucina-2 (IL2), um fator de crescimento de célula T importante (Fraser et al. Science 251(4991) p. 313-16 (1991)).

[007] PI3KY foi identificada como um mediador da regulagem dependente de G beta-gama da atividade de JNK, e G beta-gama são subunidades de proteínas G heterotriméricas (Lopez-Ilasaca et al. J. Biol. Chem. 273(5) p. 2505-8 (1998)). Recentemente, (Laffargue et al. Immunity 16(3) p. 441-51 (2002)) foi descrito que PI3KY conta com sinais inflamatórios através de vários receptores ligados a G(i) e é central para a função de mastoide, estímulos no contexto de leucócitos, e imunologia incluindo citocinas, quimiocinas, adenosinas, anticorpos, integrinas, fatores de agregação, fatores de crescimento, vírus ou hormônios por exemplo (J. Cell Sci. 114 (Pt 16) p. 2903-10 (2001) por Lawlor et al.; Laffargue et al. (2002), acima; e Curr. Opinion Cell Biol. 14(2) p. 203-13 (2002) por Stephens et al.).

[008] Inibidores específicos contra membros individuais de uma família de enzimas provê ferramentas inestimáveis para decifrar funções de cada enzima. Dois compostos, LY294002 e wortmanina (a seguir), foram amplamente usados como inibidores da PI3-cinase. Estes compostos são inibidores de PI3K não específicos, visto que eles não distinguem entre os quatro membros das PI3-cinases Classe I. Por exemplo, os valores IC50 da wortmanina contra cada uma das várias PI3-cinases Classe I estão na faixa de 1 a 10 nM. Similarmente, os valores IC50 para LY294002 contra cada uma destas PI3-cinases é de cerca de 15 a 20 μ M (Fruman et al. Ann. Rev. Biochem. 67 p. 481-507 (1998)), também 5 a 10 microM na cinase da proteína CK2 e alguma atividade inibidora sobre as fosfolipases. A wortmanina é um metabólito fúngico que irreversivelmente inibe a atividade de PI3K pela ligação covalente ao domínio catalítico desta enzima. A inibição da atividade de PI3K pela wortmanina elimina a resposta celular subsequente ao fator extracelular. Por exemplo, neutrófilos respondem à quimiocina fMet- Leu-Phe (fMLP) pela estimulação de PI3K e sintetização de PtdIns (3, 4, 5)P3. Esta síntese correlaciona-se com a ativação da explosão respiratória envolvida na destruição neutrofílica de micro-organismos invasores. O tratamento de neutrófilos com wortmanina impede a resposta da resposta da explosão respiratória induzida por fMLP (Thelen et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91 p. 4960-64 (1994)). Na verdade, estes experimentos com wortmanina, assim como outra evidência experimental, mostram que a atividade de PI3K nas células da linhagem hematopoiética, particularmente neutrófilos, monócitos, e outros tipos de leucócitos, está envolvida em muitas das respostas imunes não destinadas à memória associadas com inflamação aguda e crônica.

[009] Com base nos estudos usando wortmanina, há evidência de que a função da PI3-cinase também é requerida para alguns aspectos de sinalização de leucócito através dos receptores ligados à proteína G (Thelen et al. (1994), acima). Além disso, foi mostrado que a wortmanina e LY294002 bloqueiam a migração neutrofílica e a liberação de superóxido.

[0010] É agora bem entendido que a desregulagem de oncogenes e genes supressores de tumor contribui para a formação de tumores malignos, por exemplo por via do crescimento e proliferação celulares aumentados ou sobrevivência celular aumentada. Também é agora conhecido que os caminhos da sinalização mediados pela família PI3K têm um papel central em vários processos celulares incluindo a proliferação e sobrevivência, e a desregulagem destes caminhos é um fator causativo de um amplo espectro de canceres humanos e outras doenças (Katso et al. Annual Rev. Cell Dev. Biol. (2001) 17 p. 615-675 e Foster et al. J. Cell Science (2003) 116(15) p. 30373040). As proteínas efetoras PI3K iniciam caminhos e redes de sinalização pela translocação para a membrana plasmática através de um domínio conservado de Homologia da Pleckstrina (PH), que especificamente interage com PtdIns(3,4,5)P3 (Vanhaesebroeck et al. Annu. Rev. Biochem. (2001) 70 p. 535-602). A sinalização das proteínas efetoras através de PtdIns(3,4,5)P3 e domínios PH incluem Serina/Treonina (Ser/Thr) cinases, Tirosina cinases, Rac ou Arf GEFs (fatores de troca de nucleotídeo Guanina) e Arf GAPs (proteínas ativadoras de GTPase).

[0011] Nas células B e T PI3Ks têm um papel importante através da ativação da família Tec de tirosina cinases de proteína que incluem as tirosinas cinases de Bruton (BTK) nas células B e cinase de célula T indutível por Interleucina-2 (ITK) nas células T. Na ativação de PI3K, BTK ou ITK translocam para a membrana plasmática onde elas são subsequentemente fosforiladas pelas Src cinases. Um dos alvos principais da ITK ativada é a fosfolipase C-gama (PLCYI), que hidrolisa PtdIns(4,5)P2 em Ins(3,4,5)P3 e inicia um aumento intracelular nos níveis de cálcio e diacilglicerol (DAG) que pode ativar as Cinases C de Proteína nas células T ativadas.

[0012] Diferente da p110α e p110β Classe IA, p110δ é expressa em uma maneira restrita a tecido. O seu alto nível de expressão em linfócitos e tecidos linfoides sugere um papel na sinalização mediada por PI3K no sistema imune. Os camundongos mortos knock-in na p110δ cinase também são viáveis e seu fenótipo é restrito aos defeitos na sinalização imune (Okkenhaug et al. Science (2002) 297 p. 1031-4). Estes camundongos transgênicos têm oferecido discernimento na função de PI3Kδ na sinalização de célula B e célula T. Em particular, p110δ é requerido para a formação de PtdIns(3,4,5)P3 a jusante de CD28 e/ou sinalização do Receptor de célula T (TCR). Um efeito chave da sinalização de PI3K a jusante de TCR é a ativação de Akt, que fosforila fatores antiapoptóticos assim como vários fatores de transcrição para a produção de citocina. Como uma consequência, as células T com p110δ inativo têm defeitos na proliferação e secreção das citocinas Th1 e Th2. A ativação das células T através de CD28 diminui o limiar para a ativação de TCR pelo antígeno e aumenta a magnitude e duração da resposta proliferativa. Estes efeitos são mediados pelo aumento dependente de PI3Kδ na transcrição de vários genes incluindo IL2, um fator de crescimento de célula T importante.

[0013] Portanto, os inibidores de PI3K são previstos prover benefício terapêutico via seu papel na modulação das respostas inflamatórias mediadas pela célula T associadas com as doenças respiratórias tais como asma, COPD e fibrose cística. Além disso, há indicação de que as terapias direcionadas à célula T podem prover propriedades de distribuição de corticosteroide (Alexander et al. Lancet (1992) 339 p. 324-8) sugerindo que a mesma possa prover uma terapia útil como um autônomo ou em combinação com glicocorticosteroides inalados ou orais nas doenças respiratórias. Um inibidor de PI3K também seria usado junto com outras terapias convencionais tais como um beta-agonista de longa ação (LABA) ou antagonista de leucotrienio na asma.

[0014] Na vasculatura, a PI3Kδ é expressa pelas células endoteliais e participa no tráfego de neutrófilo pela modulação do estado pró-adesivo destas células em resposta ao TNFalfa (Puri et al. Blood (2004) 103(9) p. 3448-56.). Um papel para PI3Kδ na sinalização induzida por TNFalfa de células endoteliais é demonstrada pela inibição farmacológica da fosforilação de Akt e atividade de PDK1. Além disso, a PI3Kδ está implicada na permeabilidade vascular e edema de tecido das vias aéreas através do caminho VEGF (Lee et al. J. Allergy Clin. Immunol. (2006) 118(2) p. 403-9). Estas observações sugerem benefícios adicionais da inibição de PI3Kδ na asma pela redução combinada de extravasação de leucócito e permeabilidade vascular associada com a asma. Além disso, a atividade de PI3Kδ é requerida para a função de mastoide tanto in vitro quanto in vivo (Ali et al. Nature (2004) 431 p. 1007-11; e Ali et al. J. Immunol. (2008) 180(4) p. 2538-44) sugerindo adicionalmente que a inibição de PI3K deve ser de benefício terapêutico para indicações alérgicas tais como asma, rinite alérgica e dermatite atópica.

[0015] O papel da PI3Kδ na proliferação de célula B, secreção de anticorpo, antígeno de célula B e sinalização do receptor de IL-4, a função que apresenta a função de antígeno de célula B também é bem estabelecida Okkenhaug et al. (2002), acima; Al-Alwan et al. J. Immunol. (2007) 178(4) p. 2328-35; e Bilancio et al. Blood (2006) 107(2) p. 642-50) e indica um papel em doenças autoimunes tais como artrite reumatoide ou lúpus eritematoso sistêmico (SLE). Portanto os inibidores de PI3K também podem ser de benefício para estas indicações.

[0016] A inibição farmacológica de PI3Kδ inibe a quimiotaxia neutrofílica dependente de fMLP em um sistema polarizado dependente de integrina de matriz de agarose revestido com ICAM (Sadhu et al., J. Immunol. (2003) 170(5) p. 2647-54.). A inibição de PI3Kδ regula a ativação, adesão e migração de neutrófilo sem afetar a fagocitose mediada por neutrófilo e atividade bactericida sobre Staphilococcus aureus (Sadhu et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. (2003) 308(4) p. 764-9). Geralmente, os dados sugerem que a inibição de PI3Kδ não deve inibir globalmente as funções de neutrófilo requeridas para a defesa imune inata. O papel da PI3Kδ em neutrófilos oferece escopo adicional para tratar doenças inflamatórias envolvendo a remodelagem de tecido tal como COPD ou artrite reumatoide.

[0017] A inibição de PI3Kδ também pode levar à imunoterapia contra o câncer. Por exemplo, PI3Kδ tem um papel de sinalização crítico nas células T reguladoras (Tregs), que permite a sua expansão (Patton et al. PLoS One. 2011;6(3): e17359). A ativação de Tregs é um dos processos chave que permitem as células cancerosas desenvolver tolerância imunológica e escapar da vigilância imune. Um outro aspecto da imunidade do câncer onde inibidores de PI3Kδ podem desempenhar um papel é na suprarregulagem da expressão de PD-L1 (morte de célula programada 1 ligando 1) como foi mostrado nas células epiteliais das vias aéreas cultivadas (Kan-O et al. Biochem Biophys Res Commun. 2013; 435(2): 195-201). PD-L1, expressa nos vários tipos de célula tais como linfócitos T e B, células NK e DC ou células epiteliais, está envolvida na supressão da imunidade dependente da célula T tal como a ativação de células T CD8 citotóxicas. Os anticorpos neutralizantes que alvejam PD-L1 estão correntemente sendo desenvolvidos como produtos imunoterapêuticos contra o câncer. Portanto, a inibição de PI3Kδ pode prover um novo modo de realçar as respostas antitumor. Um argumento similar também pode ser aplicado à imunidade anti-infecciosa onde o equilíbrio de Tregs e CD8s é conhecido desempenhar um papel importante no resultado da resposta imune tal como infecções virais.

[0018] O sistema nervoso central (CNS) também é enriquecido com a expressão de PI3Kδ (Eickholt et al. PLoS One 2007 11;2(9): e869). Um relato mais recente descobriu adicionalmente um elo entre PI3Kδ e a neurregulina NRG-1 e receptor de ErbB4 no CNS com implicações para a esquizofrenia (Law et al. Proc Natl Acad Sci U S A. 2012; 109(30): 12165-70). Foi anteriormente conhecido que a expressão aumentada de uma variante de junção de ErbB4 contendo a porção citoplásmica, Cyt1, resultou na ativação do caminho PI3K assim como risco aumentado de esquizofrenia. A publicação por Law et al. indica que a Cyt1 geneticamente associada com a esquizofrenia casa preferencialmente com a isoforma PI3Kδ. Além disso, o inibidor seletivo em PI3Kδ, IC87114, mostrou eficácia acentuável em um modelo de camundongo de psicose induzida por anfetamina (Law et al. Proc Natl Acad Sci U S A. 2012; 109(30): 12165-70). Portanto os inibidores de PI3Kδ têm o potencial para formar a base para novos métodos de terapia contra a esquizofrenia.

[0019] Além disso, existe também boa evidência de que as enzimas PI3K Classe IA também contribuem para a tumorigênese em uma ampla variedade de cânceres humanos, direta ou indiretamente (Vivanco e Sawyers, Nature Reviews Cancer (2002) 2(7) p. 489-501). Por exemplo, a inibição de PI3Kδ pode ter um papel terapêutico para o tratamento de distúrbios hematológicos malignos tais como leucemia mieloide aguda (Billottet et al. Oncogene (2006) 25(50) p. 6648-59). Além disso, mutações ativadoras dentro de p110α (gene PIK3CA) foram associados com vários outros tumores tais como aqueles do cólon e da mama e pulmão (Samuels et al. Science (2004) 304(5670) p. 554).

[0020] Também foi mostrado que PI3K está envolvido no estabelecimento da sensibilização central nas condições inflamatórias dolorosas (Pezet et al. The J. of Neuroscience (2008) 28 (16) p. 4261-4270).

[0021] Uma ampla variedade de retrovírus e vírus com base em DNA ativam o caminho da PI3K como um modo de prevenir a morte da célula hospedeira durante a infecção viral e por fim explorar o mecanismo de síntese da célula hospedeira para a sua replicação (Virology 344(1) p. 131-8 (2006) by Vogt et al.; e Nat. Rev. Microbiol. 6(4) p. 265-75 (2008) por Buchkovich et al.). Portanto inibidores de PI3K podem ter propriedades antivirais além das indicações oncolíticas e anti-inflamatórias mais estabelecidas. Estes efeitos antivirais incitam perspectivas interessantes nas exacerbações inflamatórias viralmente induzidas. Por exemplo, o rinovírus humano do resfriado comum (HRV) é responsável por mais do que 50% das infecções do trato respiratório, mas complicações destas infecções podem ser significantes em certas populações. Isto é particularmente o caso nas doenças respiratórias tais como asma ou doença pulmonar de obstrução crônica (COPD). A infecção rinoviral de células epiteliais leva a uma citocina dependente de PI3K e secreção de quimiocina (J. Biol. Chem. (2005) 280(44) p. 36952 por Newcomb et al.). Esta resposta inflamatória correlaciona-se com a piora dos sintomas respiratórios durante a infecção. Portanto inibidores de PI3K podem moderar uma resposta imune exagerada a um vírus de outro modo benigno. A maioria das cepas do HRV infectam as células epiteliais brônquicas ligando- se inicialmente ao receptor de ICAM-1. O complexo HRV-ICAM-1 é depois internalizado adicionalmente pela endocitose e foi mostrado que este evento requer atividade de PI3K (J. Immunol. (2008) 180(2) p. 870-880 por Lau et al.). Portanto, os inibidores de PI3K também podem bloquear infecções virais pela inibição da entrada viral dentro das células hospedeiras.

[0022] Os inibidores de PI3K podem ser úteis na redução de outros tipos de infecções respiratórias incluindo a infecção aspergilose (Mucosal Immunol. (2010) 3(2) p. 193-205 por Bonifazi et al.). Além disso, camundongos deficientes em PI3Kδ são mais resistentes às infecções pelo parasita protozoário Leishmania major (J. Immunol. (2009) 183(3) p. 19211933 por Liu et al.) ou pelas bactérias intracelulares Listeria (Pearce et al. J. Immunol. (2015) 195(7) p. 3206-17). Juntos com os efeitos sobre as infecções virais, estes relatos sugerem que os inibidores de PI3K podem ser úteis para o tratamento de uma ampla variedade de infecções.

[0023] Um relato publicado aponta para inibidores de PI3Kδ tendo benefícios potenciais na prevenção de infecções pelo patógeno bacteriano das vias aéreas comuns S. Pneumoniae (Fallah et al., Mech. Ageing Dev. 2011; 132(6-7): 274-86). Neste relato PI3Kδ é mostrado reduzir as citocinas derivadas de macrófago requeridas para montar uma resposta de anticorpo eficaz para S. pneumoniae nas pessoas idosas. O benefício antibacteriano dos inibidores de PI3Kδ pode assim ser útil no tratamento de infecções bacterianas do trato respiratório e exacerbações bacterianas de condições respiratória e dano pulmonar tais como asma, COPD e fibrose cística, e pneumonia.

[0024] A inibição de PI3K também foi mostrada promover a diferenciação de célula T reguladora (Proc. Natl. Acad. Sci. U S A (2008) 105(22) p. 7797-7802 por Sauer et al.) sugerindo que os inibidores de PI3K podem servir para propósitos terapêuticos em indicações autoimunes ou alérgicas pela indução da imunotolerância para auto antígeno ou alérgeno. A isoforma PI3Kδ também foi ligada à insensibilidade ao glicocorticoide induzida por fumaça (Am. J. Respir. Crit. Care Med. (2009) 179(7) p. 542548 por Marwick et al.). Esta observação sugere que pacientes com COPD, que de outro modo respondem insuficientemente aos corticosteroides, podem se beneficiar da combinação de um inibidor de PI3K com um corticosteroide.

[0025] PI3K também foi envolvido em outras condições respiratórias tais como fibrose pulmonar idiopática (IPF). A IPF é uma doença fibrótica com declínio progressivo da função pulmonar e mortalidade aumentada devido à insuficiência respiratória. Na IPF, fibrócitos circulantes estão direcionados ao pulmão via o receptor de quimiocina CXCR4. A PI3K é requerida tanto para a sinalização quanto para a expressão de CXCR4 (Int. J. Biochem. e Cell Biol. (2009) 41 p. 1708-1718 por Mehrad et al.). Portanto, reduzindo-se a expressão de CXCR4 e bloqueando-se a sua função efetora, um inibidor de PI3K deve inibir o recrutamento de fibrócitos ao pulmão e consequentemente diminuir o processo fibrótico subjacente à IPF, uma doença com alta necessidade não atendida.

[0026] Tentativas foram feitas para preparar compostos que inibissem a atividade PI3 da cinase e vários de tais compostos foram descritos na técnica. Entretanto, em vista do número de respostas patológicas que são mediadas pelas PI3 cinases, permanece uma necessidade contínua quanto a inibidores da PI3 cinase que podem ser usados no tratamento de uma variedade de condições.

[0027] Os presentes inventores descobriram compostos que são inibidores da atividade da cinase, em particular atividade da PI3 cinase. Os compostos que são inibidores da PI3 cinase podem ser úteis no tratamento de distúrbios associados com a atividade inadequada da cinase, em particular atividade da PI3 cinase inadequada, por exemplo no tratamento e prevenção de distúrbios mediados pelos mecanismos da PI3 cinase. Tais distúrbios incluem doenças respiratórias incluindo asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e fibrose pulmonar idiopática (IPF); ciliopatia incluindo discinesia ciliar primária, doença hepática policística e nefronoftise; infecções bacterianas incluindo infecções bacterianas do trato respiratório, por exemplo infecções por S. Pneumoniae, H. Influenzae, M. Catarrhalis e/ou micobactérias tais como Mycobacterium tuberculosis, e exacerbações bacteriana de condições respiratórias e dano pulmonar tais como asma, COPD e fibrose cística; infecções virais incluindo infecções virais do trato respiratório, por exemplo infecções por influenza, rinovírus, vírus sincicial respiratório (RSV), vírus da parainfluenza humana (HPIV), adenovírus e/ou coronavírus, e exacerbação viral de condições respiratórias e dano pulmonar tais como asma, COPD e fibrose cística; outras infecções respiratórias não virais incluindo aspergilose e leishmaniose; doenças alérgicas incluindo rinite alérgica, dermatite atópica e psoríase; doenças autoimunes incluindo espondilite anquilosante, síndrome de Churg-Strauss, doença de Crohn, Glomerulonefrite, púrpura de Henoch-Schonlein, púrpura trombocitopênica idiopática (ITP), cistite intersticial, pênfigo, colangite esclerosante primária, psoríase, artrite reumatoide, sarcoidose, síndrome de Sjogren, diabete Tipo 1, colite ulcerativa, vasculite e granulomatose de Wegener’s; distúrbios inflamatórios incluindo doença intestinal inflamatória; diabete; doenças cardiovasculares incluindo trombose, aterosclerose e hipertensão; malignidades hematológicas; doenças neurodegenerativas; pancreatite; insuficiência múltiplas dos órgãos; doenças renais; agregação de plaqueta; câncer; motilidade do esperma; rejeição a transplante; rejeição a enxerto; lesões pulmonares; dor incluindo dor associada com artrite reumatoide ou osteoartrite, dor nas costas, dor inflamatória geral, neuralgia pós herpética, neuropatia diabética, dor neuropática inflamatória (trauma), neuralgia trigeminal e dor central; doenças fibróticas; depressão; e distúrbios psicóticos incluindo esquizofrenia.

[0028] Em uma modalidade, os compostos da invenção podem apresentar seletividade para PI3 cinases em relação às outras cinases.

[0029] Em uma outra modalidade, os compostos da invenção podem ser inibidores potentes de PI3Kδ.

[0030] Em uma outra modalidade, os compostos da invenção podem apresentar seletividade para PI3Kδ em relação às outras PI3 cinases.

[0031] Em uma outra modalidade, os compostos da invenção podem ter propriedades que as tornem particularmente adequadas para a administração oral.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0032] A invenção é direcionada a certos novos compostos. Especificamente, a invenção é direcionada aos compostos da fórmula (I) em que R1 a R8 são como definidos abaixo, e sais dos mesmos.

[0033] Os compostos são inibidores da atividade da cinase, em particular atividade da PI3 cinase. Os compostos que são inibidores da PI3 cinase podem ser úteis no tratamento de distúrbios associados com a atividade inadequada da PI3 cinase. Consequentemente, a invenção é direcionada adicionalmente às composições farmacêuticas compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. A invenção é direcionada adicionalmente aos métodos de tratar distúrbios mediados pela atividade inadequada da PI3 cinase compreendendo administrar uma quantidade segura e eficaz de um composto da fórmula (I), ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável, a um paciente em necessidade do mesmo.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0034] A Figura 1 mostra um padrão de difração de raio X em pó (XRPD) para N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin- 4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (anidrato - Forma 1).

[0035] A Figura 2 mostra um padrão de XRPD para N-(2-(2-fluoro-4- ((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolino- piridino-3-sulfonamida (hidrato - Forma 1).

[0036] A Figura 3 mostra um padrão de XRPD para N-(2-(2-fluoro-4- ((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolino- piridino-3-sulfonamida (anidrato - Forma 2).

[0037] A Figura 4 mostra um padrão de XRPD para N-(2-(2-fluoro-4- ((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolino- piridino-3-sulfonamida (hidrato - Forma 3).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0038] Em Uma Modalidade, A Invenção É Direcionada Aos Compostos Da Fórmula (I) Em Que R1 É Alcóxi C1-6 Ou -n(Alquila C1-6)2; r2 É Hidrogênio Ou Alquila C1-6 Opcionalmente Substituído Por - C(O)Oalquila C1-6 Ou -oc(O)Alquila C1-6; R3, R4, R5 E R6 São, Cada Um, Independentemente Selecionado A Partir De Hidrogênio E Halógeno; R7 E R8 São, Cada Um, Independentemente Alquila C1-6, Ou R7 E R8, Juntos Com O Átomo De Nitrogênio Ao Qual Eles Estão Ligados, São Ligados Para Formar Uma Heterociclila De 5 Ou 6 Membros Em Que A Heterociclila De 5 Ou 6 Membros Opcionalmente Contém Um Átomo De Nitrogênio Adicional E É Opcionalmente Substituído Por Cicloalquila C3-6, Heterociclila De 4 A 6 Membros Contendo Um Ou Dois Heteroátomos Independentemente Selecionados A Partir De Oxigênio E Nitrogênio, Ou Alquila C1-6 Em Que O Alquila C1-6 É Opcionalmente Substituído Por Hidróxi Ou Alcóxi C1-6, Ou R7 E R8, Juntos Com O Átomo De Nitrogênio Ao Qual Eles Estão Ligados, São Ligados Para Formar Uma Heterociclila De 5 Ou 6 Membros Em Que A Heterociclila De 5 Ou 6 Membros Contém Um Átomo De Oxigênio E É Opcionalmente Substituído Por Um Ou Dois Substituintes Independentemente Selecionados A Partir De Alquila C1-6; E Sais Dos Mesmos (A Seguir “compostos Da Invenção”).

[0039] Em uma modalidade, R1 é alcóxi C1-6. Em uma outra modalidade, R1 é metóxi.

[0040] Em uma modalidade, R2 é hidrogênio. Em uma outra modalidade, R2é alquila C1-6.

[0041] Em uma modalidade, R3, R4, R5 e R6 são, cada um, independentemente selecionados a partir de hidrogênio e fluoro. Em uma outra modalidade, R3 é fluoro e R4, R5 e R6 são, cada um, hidrogênio.

[0042] Em uma modalidade, R7 e R8 são, cada um, metila. Em uma outra modalidade, R7 e R8, juntos com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, são ligados para formar uma heterociclila de 5 ou 6 membros em que a heterociclila de 5 ou 6 membros opcionalmente contém um átomo de nitrogênio adicional e é opcionalmente substituído por cicloalquila C3-6, heterociclila de 4 a 6 membros contendo um ou dois heteroátomos independentemente selecionados a partir de oxigênio e nitrogênio, ou alquila C1-6 em que o alquila C1-6 é opcionalmente substituído por hidróxi ou alcóxi C1-6. Em uma outra modalidade, R7 e R8, juntos com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, são ligados para formar uma heterociclila de 6 membros em que a heterociclila de 6 membros contém um átomo de nitrogênio adicional e é opcionalmente substituído por alquila C1-6. Em uma outra modalidade, R7 e R8, juntos com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, são ligados para formar uma heterociclila de 6 membros em que a heterociclila de 6 membros contém um átomo de nitrogênio adicional e é substituído por alquila C1-6.

[0043] Deve ser entendido que a presente invenção abrange todas as combinações de grupos substituintes descritos acima.

[0044] Os compostos da invenção incluem os compostos dos Exemplos 1 a 37 e sais dos mesmos.

[0045] Em uma modalidade, o composto da invenção é: N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(terc-butil)piperazin-1-il)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((dimetilamino)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolino-piridino-3-sulfonamida; N-(2-(3-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(terc-butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)- 2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-ciclobutilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2,6-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(sec-butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(3-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(3,5-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; 2-metóxi-5-morfolino-N-(2-(4-((4-(oxetan-3-il)piperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida; N-(2-(2,3-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-(oxetan-3-il)piperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-ciclobutilpiperazin-1-il)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2,5-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-(2-metoxietil)piperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((3-metilpirrolidin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((2-metilpirrolidin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-(piperidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-(((cis)-2,6-dimetilmorfolino)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; 2-metóxi-5-morfolino-N-(2-(4-(morfolinometil)fenil)piridin-4- il)piridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-(piperazin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; 2-(dimetilamino)-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)-piridin-4-il)-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(terc-butil)piperazin-1-il)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-(dimetilamino)-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(terc-butil)piperazin-1-il)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-metóxi-N-metil-5-morfolinopiridino-3- sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-N-metil-5-morfolinopiridino-3- sulfonamida; N-etil-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolino-N-propilpiridino-3- sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-N-isopropil-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3- sulfonamida; 2-(N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3- sulfonamido)acetato de etila; pivalato de (N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3- sulfonamido)metila; ou N-(2-(5-cloro-2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-etóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; ou um sal dos mesmos.

[0046] Em uma outra modalidade, o composto da invenção é: N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(terc-butil)piperazin-1-il)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((dimetilamino)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolino-piridino-3-sulfonamida; N-(2-(3-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(terc-butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)- 2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-ciclobutilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2,6-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(sec-butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(3-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(3,5-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; 2-metóxi-5-morfolino-N-(2-(4-((4-(oxetan-3-il)piperazin-1- il)metil)fenil)-piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida; N-(2-(2,3-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-(oxetan-3-il)piperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-ciclobutilpiperazin-1-il)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2,5-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-(2-metoxietil)piperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((3-metilpirrolidin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((2-metilpirrolidin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-(piperidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-(((cis)-2,6-dimetilmorfolino)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; 2-metóxi-5-morfolino-N-(2-(4-(morfolinometil)fenil)piridin-4- il)piridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-(piperazin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; 2-(dimetilamino)-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)-piridin-4-il)-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(terc-butil)piperazin-1-il)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-(dimetilamino)-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(terc-butil)piperazin-1-il)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-metóxi-N-metil-5-morfolinopiridino-3- sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-N-metil-5-morfolinopiridino-3- sulfonamida; N-etil-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolino-N-propilpiridino-3- sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-N-isopropil-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3- sulfonamida; 2-(N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3- sulfonamido)acetato de etila; pivalato de (N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3- sulfonamido)metila; ou N-(2-(5-cloro-2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; ou um sal dos mesmos.

[0047] Em uma outra modalidade, o composto da invenção é: N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; ou um sal do mesmo.

[0048] Em uma outra modalidade, o composto da invenção é: ou um sal do mesmo.

Termos e Definições

[0049] “Alquila” refere-se a tendo o número especificado de átomos membros. Por exemplo, alquila C1-6 refere-se a um grupo alquila tendo de 1 a 6 átomos membros, por exemplo de 1 a 4 átomos membros. Os grupos alquila podem ser retos ou ramificados. Os grupos alquila ramificados representativos têm uma, duas, ou três ramificações. Os grupos alquila podem ser opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes como aqui definidos. Alquila inclui metila, etila, propila (n-propila e isopropila), butila (n-butila, isobutila e t-butila), pentila (n-pentila, isopentila e neopentila), e hexila. Os grupos alquila também podem ser parte de outros grupos, por exemplo alcóxi C1-6.

[0050] “Cicloalquila” refere-se a um anel de hidrocarboneto saturado tendo o número especificado de átomos membros. Os grupos cicloalquila são sistemas de anel monocíclico. Por exemplo, cicloalquila C3-6 refere-se a um grupo cicloalquila tendo de 3 a 6 átomos membros. Cicloalquila inclui ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila e ciclo-hexila. Em uma modalidade, os grupos cicloalquila aqui são ciclobutila.

[0051] “Enantiomericamente enriquecido” refere-se a produtos cujo excesso enantiomérico é maior do que zero. Por exemplo, enantiomericamente enriquecido refere-se a produtos cujo excesso enantiomérico é maior do que 50% ee, maior do que 75% ee, e maior do que 90% ee.

[0052] “Excesso enantiomérico” ou “ee” são o excesso de um enantiômero em relação ao outro expresso como uma porcentagem. Como um resultado, visto que ambos enantiômeros estão presentes em quantidades iguais em uma mistura racêmica, o excesso enantiomérico é zero (0% ee). Entretanto, se um enantiômero foi enriquecido tal que o mesmo constitua 95% do produto, então o excesso enantiomérico seria de 90% ee (a quantidade do enantiômero enriquecido, 95%, menos a quantidade do outro enantiômero, 5%).

[0053] “Enantiomericamente puro” refere-se a produtos cujo excesso enantiomérico é 99% ee ou maior.

[0054] “Meia-vida” (ou “meias-vidas”) refere-se ao tempo requerido para metade de uma quantidade de uma substância ser convertida para uma outra espécie quimicamente distinta in vitro ou in vivo.

[0055] “Halógeno” refere-se ao radical halógeno flúor, cloro, bromo ou iodo.

[0056] “Heteroátomo” refere-se a um átomo de nitrogênio ou oxigênio.

[0057] “Heterociclila”, a menos que de outro modo definido, refere-se a um anel saturado tendo o número especificado de átomos membros e contendo 1 ou 2 heteroátomos como átomos membros no anel. Os grupos heterociclila podem ser opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes como aqui definidos. Os grupos heterociclila aqui são sistemas de anel monocíclico tendo 4, 5 ou 6 átomos membros. Heterociclila monocíclica inclui oxetanila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila e morfolinila. Em uma modalidade, o heterociclo é piperazinila.

[0058] “Átomos membros” refere-se ao átomo ou átomos que formam uma cadeia ou anel. Onde mais do que um átomo membro está presente em uma cadeia e dentro de um anel, cada átomo membro é covalentemente ligado a um átomo membro adjacente na cadeia ou anel. Os átomos que compõem um grupo substituinte em uma cadeia ou anel não átomos membros na cadeia ou anel.

[0059] “Opcionalmente substituído” indica que um grupo pode ser não substituído ou substituído com um ou mais substituintes como aqui definidos.

[0060] “Substituído” em referência a um grupo indica que um átomo de hidrogênio ligado a um átomo membro dentro de um grupo é substituído. Deve ser entendido que o termo “substituído” inclui a provisão implícita de que tal substituição está de acordo com a valência permitida do átomo substituído e o substituinte e que a substituição resulte em um composto estável (isto é, um que não sofra espontaneamente transformação tal como pelo rearranjo, ciclização, ou eliminação). Em certas modalidades, um único átomo pode ser substituído com mais do que um substituinte contanto que tal substituição esteja de acordo com a valência permitida do átomo. Os substituintes adequados são aqui definidos para cada grupo substituído ou opcionalmente substituído.

[0061] “Farmaceuticamente aceitável” refere-se àqueles compostos, sais, materiais, composições, e formas de dosagem que são, dentro do escopo do julgamento médico criterioso, adequados para o uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade, irritação, ou outro problema ou complicação excessivos, comensurados com uma razão benefício/risco razoável.

[0062] Como aqui usado os símbolos e convenções usados nestes processos, esquemas e exemplos são compatíveis com aqueles usados na literatura científica contemporânea, por exemplo, o Journal of the American Chemical Society ou o Journal of Biological Chemistry. As abreviações de letra única ou de três letras padrão são geralmente usadas para designar resíduos de aminoácido, que são assumidos estar na configuração L a menos que de outro modo mencionado. A menos que de outro modo mencionado, todos os materiais foram obtidos a partir de fornecedores comerciais e usados sem outra purificação. Especificamente, as seguintes abreviações podem ser usadas nos exemplos e por todo o relatório descritivo: Ac: Acetato Boc: terc-Butiloxicarbonila BrettPhos: 2-(Diciclo-hexilfosfino)3,6-dimetóxi-2’,4’,6’- tri-isopropil-1,1’-bifenila EtOAc: Acetato de etila DavePhos: 2’-(Diciclo-hexilfosfino)-N,N-dimetil-[1,1’- bifenil]-2-amina DCM: Diclorometano DIPEA: N,N-Di-isopropiletilamina DMAP: 4-Dimetilaminopiridina DMF: N,N-Dimetilformamida DMSO: Sulfóxido de dimetila EDTA: Ácido etilenodiaminotetra-acético EtOH: Etanol h: Hora(s) HPLC: Cromatografia Líquida de Alto Desempenho id: Diâmetro interno IPA: Isopropanol JohnPhos: 2-Bifenil)di-terc-butilfosfina LCMS: Espectrometria de massa com cromatografia líquida μL: Microlitro(s) min: Minuto(s) mL: Mililitro(s) mmol: Milimol(s) M: Molar Me:Metila MeCN: Acetonitrila MeOH: Metanol MS: Espectro de Massa NMR: Ressonância Magnética Nuclear PdCl2(dppf): [1,1’- Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) Pd(dba)2: bis(Dibenzilidenoacetona)paládio(0) Pd2(dba)3: Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) Pd(OAc)2:Acetato de paládio(II) Rt: Tempo de retenção RuPhos: 2-Diciclo-hexilfosfino-2’,6’-di-isopropoxibifenila s: Segundo(s) SPE: Extração de fase sólida TFA: Ácido trifluoroacético THF: Tetraidrofurano UPLC: Cromatografia líquida de ultra desempenho UV: Ultravioleta v/v: Em volume p/p: Em peso Xantphos: 4,5-Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno Paladaciclo XPhos: Cloreto de (2-Diciclo-hexilfosfino- 2’,4’,6’-tri-isopropil-1,1’-bifenil)[2-(2-aminoetil)fenil)]paládio(II) 2a geração de pré-catalisador Xphos: Cloro(2-diciclo-hexil- fosfino-2’,4’,6’-tri-isopropil-1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)] paládio(II)

[0063] Incluído dentro do escopo dos “compostos da invenção” estão todos os polimorfos, derivados radiorrotulados, estereoisômeros e isômeros ópticos dos compostos da fórmula (I) e sais dos mesmos.

[0064] Os compostos da invenção podem existir na forma sólida ou líquida. No estado sólido, os compostos da invenção podem existir na forma cristalina ou não cristalina, ou como uma mistura do mesmo. Para os compostos da invenção que estão na forma cristalina, o técnico habilitado avaliará que os solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados em que moléculas de solvente são incorporadas no retículo cristalino durante a cristalização. Os compostos da invenção podem existir nas formas solvatada e não solvatada. Os solvatos podem envolver solventes não aquosos tais como etanol, isopropanol, DMSO, ácido acético, etanolamina, e EtOAc, ou eles podem envolver água como o solvente que é incorporado dentro do retículo cristalino. Os solvatos em que água é o solvente que é incorporado dentro do retículo cristalino são tipicamente aludidos como “hidratos”. Os hidratos incluem hidratos estequiométricos assim como composições contendo quantidades variáveis de água.

[0065] O técnico habilitado avaliará adicionalmente que certos compostos da invenção que existem na forma cristalina, incluindo os vários dos seus solvatos, podem exibir polimorfismo (isto é, a capacidade para ocorrer em estruturas cristalinas diferentes). Estas formas cristalinas diferentes são tipicamente conhecidas como “polimorfos”. A invenção inclui todos de tais polimorfos. Os polimorfos têm a mesma composição química, mas diferem na embalagem, arranjo geométrico, e outras propriedades descritivas do estado sólido cristalino. Os polimorfos, portanto, podem ter propriedades físicas diferentes tais como propriedades de forma, densidade, dureza, deformabilidade, estabilidade e dissolução. Os polimorfos tipicamente exibem pontos de fusão diferentes, espectros de IR, e padrões de difração de raio X em pó, que podem ser usados para identificação. O técnico habilitado avaliará que polimorfos diferentes podem ser produzidos, por exemplo, mudando-se ou ajustando-se as condições de reação ou reagentes, usados na fabricação do composto. Por exemplo, mudanças na temperatura, pressão, ou solvente podem resultar em polimorfos. Além disso, um polimorfo pode espontaneamente converter para um outro polimorfo sob certas condições.

[0066] Em um aspecto, a presente invenção provê GSK2292767A. N9251-66-6. N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin- 4-il)-2-metóxi-5-morfolino-piridino-3-sulfonamida ou um sal da mesma na forma cristalina.

[0067] Em uma modalidade, a presente invenção provê N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida na forma cristalina.

[0068] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD (difração de raio X em pó) tendo picos (°2θ) a cerca de 5,2, cerca de 8,0, cerca de 11,9 e/ou cerca de 13,2.

[0069] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-[5-[4- (5-{[(2R,6S)-2,6-dimetil-4-morfolinil]metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol-6- il]-2-(metiloxi)-3-piridinil]metanosulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD compreendendo picos substancialmente como apresentados na Tabela 1.

[0070] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD substancialmente de acordo com a Figura 1.

[0071] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD (difração de raio X em pó) tendo picos (°2θ) a cerca de 6,8, cerca de 9,4, cerca de 11,0 e/ou cerca de 11,7.

[0072] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-[5-[4- (5-{[(2R,6S)-2,6-dimetil-4-morfolinil]metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol-6- il]-2-(metiloxi)-3-piridinil]metanossulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD compreendendo picos substancialmente como apresentados na Tabela 2.

[0073] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD substancialmente de acordo com a Figura 2.

[0074] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD (difração de raio X em pó) tendo picos (°2θ) a cerca de 6,4, cerca de 9,0, cerca de 10,4 e/ou cerca de 11,6.

[0075] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-[5-[4- (5-{[(2R,6S)-2,6-dimetil-4-morfolinil]metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol-6- il]-2-(metiloxi)-3-piridinil]metanossulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD compreendendo picos substancialmente como apresentados na Tabela 3.

[0076] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD substancialmente de acordo com a Figura 3.

[0077] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um Padrão de XRPD (difração de raio X em pó) tendo picos (°2θ) a cerca de 8,1, cerca de 9,1, cerca de 10,2, cerca de 11,7 e/ou cerca de 12,7.

[0078] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-[5-[4- (5-{[(2R,6S)-2,6-dimetil-4-morfolinil]metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol-6- il]-2-(metilóxi)-3-piridinil]metanossulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD compreendendo picos substancialmente como apresentados na Tabela 4.

[0079] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida cristalina distinguida em que a mesma provê um padrão de XRPD substancialmente de acordo com a Figura 4.

[0080] Quando é aqui indicado que existe um pico em um padrão de XRPD em um dado valor, é tipicamente intencionado que o pico está dentro de ± 0,2, por exemplo ± 0,1, do valor citado.

[0081] A invenção também inclui compostos isotopicamente rotulados, que são idênticos aos compostos da invenção, mas quanto ao fato de que um ou mais átomos são substituídos por um átomo tendo uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa mais habitualmente encontrada na natureza. Os exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos da invenção incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio e flúor, tal como 2H, 3H, 11C, 14C e 18F.

[0082] Os compostos da invenção podem conter um ou mais centros assimétricos (também aludidos como um centro quiral) e, portanto, podem existir como enantiômeros individuais, diastereômeros, ou outras formas estereoisoméricas, ou como misturas dos mesmos. Os centros quirais, tais como átomos de carbono quiral, também podem estar presentes em um substituinte tal como um grupo alquila. Onde a estereoquímica de um centro quiral presente em um composto da invenção, ou em qualquer estrutura química aqui ilustrada, não é especificada a estrutura é intencionada a abranger qualquer estereoisômero e todas de suas misturas. Assim, os compostos da invenção contendo um ou mais centros quirais podem ser usados como misturas racêmicas, misturas enantiomericamente enriquecidas, ou como estereoisômeros individuais enantiomericamente puros.

[0083] Estereoisômeros individuais de um composto da invenção que contêm um ou mais centros assimétricos podem ser resolvidos pelos métodos conhecidos por aqueles habilitados na técnica. Por exemplo, tal resolução pode ser realizada (1) pela formação de sais diastereoisoméricos, complexos ou outros derivados; (2) pela reação seletiva com um reagente específico de estereoisômero, por exemplo pela oxidação ou redução enzimáticas; ou (3) pela cromatografia gasosa-líquida ou líquida em um ambiente quiral, por exemplo, sobre um suporte quiral tal como sílica com um ligante quiral ligado ou na presença de um solvente quiral. O técnico habilitado avaliará que onde o estereoisômero desejado é convertido em uma outra entidade química por um dos procedimentos de separação descritos acima, uma outra etapa é requerida para liberar a forma desejada. Alternativamente, estereoisômeros específicos podem ser sintetizados pela síntese assimétrica usando reagentes, substratos, catalisadores ou solventes opticamente ativos, ou pela conversão de um enantiômero ao outro pela transformação assimétrica.

[0084] Os compostos da invenção também podem conter centros de assimetria geométrica. Onde a estereoquímica de um centro de assimetria geométrica presente em um composto da invenção, ou em qualquer estrutura química aqui ilustrada, não é especificada, a estrutura é intencionada a abranger o isômero geométrico trans, o isômero geométrico cis, e todas as suas misturas. Igualmente, todas as formas tautoméricas também são incluídas se tais tautômeros existem em equilíbrio ou predominantemente em uma forma.

[0085] Deve ser entendido que as referências aqui aos compostos da fórmula (I) e sais dos mesmos abrange os compostos da fórmula (I) como ácidos livres ou bases livres, ou como sais dos mesmos, por exemplo como sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Assim, em uma modalidade, a invenção é direcionada a um composto da fórmula (I) como o ácido livre ou a base livre. Em uma outra modalidade, a invenção é direcionada a um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo. Em uma outra modalidade, a invenção é direcionada a um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável.

[0086] O técnico habilitado avaliará que sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de acordo com a fórmula (I) podem ser preparados. De fato, em certas modalidades da invenção, sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de acordo com a fórmula (I) podem ser preferidos em relação à respectiva base livre ou ácido livre porque tais sais podem comunicar maior estabilidade ou solubilidade para a molécula facilitando deste modo a formulação em uma forma de dosagem.

[0087] Como aqui usado, o termo “sais farmaceuticamente aceitáveis” refere-se aos sais que retêm a atividade biológica desejada do composto objeto e exibem efeitos toxicológicos indesejados mínimos. Estes sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados in situ durante a isolação e purificação finais do composto, ou reagindo-se separadamente o composto purificado na sua forma de ácido livre ou base livre, ou um sal não farmaceuticamente aceitável, com uma base ou ácido adequados, respectivamente.

[0088] Sais e solvatos tendo contraíons não farmaceuticamente aceitáveis ou solventes associados estão dentro do escopo da presente invenção, por exemplo, para o uso como intermediários na preparação de outros compostos da fórmula (I) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Assim uma modalidade da invenção abrange compostos da fórmula (I) e sais dos mesmos.

[0089] Em certas modalidades, os compostos de acordo com a fórmula (I) podem conter um grupo funcional ácido. Os sais farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem sais de tais grupos funcionais ácidos. Os sais representativos incluem sais metálicos farmaceuticamente aceitáveis tais como sais de sódio, potássio, lítio, cálcio, magnésio, alumínio e zinco; carbonatos e bicarbonatos de um cátion metálico farmaceuticamente aceitável tais como sódio, potássio, lítio, cálcio, magnésio, alumínio e zinco; aminas primárias, secundárias, e terciárias orgânicas farmaceuticamente aceitáveis incluindo aminas alifáticas, aminas aromáticas, diaminas alifáticas, e hidróxi alquilaminas tais como metilamina, etilamina, 2- hidróxi-etilamina, dietilamina, TEA, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina e ciclo-hexilamina.

[0090] Em certas modalidades, os compostos de acordo com a fórmula (I) podem conter um grupo funcional básico e são, portanto, capazes de formar sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis pelo tratamento com um ácido adequado. Os ácidos adequados incluem ácidos inorgânicos farmaceuticamente aceitáveis e ácidos orgânicos farmaceuticamente aceitáveis. Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis representativos incluem cloridreto, bromidreto, nitrato, metilnitrato, sulfato, bissulfato, sulfamato, fosfato, acetato, hidróxi-acetato, fenilacetato, propionato, butirato, isobutirato, valerato, maleato, hidróxi-maleato, acrilato, fumarato, malato, tartarato, citrato, salicilato, p-aminossalicilato, glicolato, lactato, heptanoato, ftalato, oxalato, succinato, benzoato, o-acetoxibenzoato, clorobenzoato, metilbenzoato, dinitrobenzoato, hidróxi-benzoato, metoxibenzoato, naftoato, hidróxi-naftoato, mandelato, tanato, formiato, estearato, ascorbato, palmitato, oleato, piruvato, pamoato, malonato, laurato, glutarato, glutamato, estolato, metanossulfonato (mesilato), etanossulfonato (esilato), 2-hidróxi-etanossulfonato, benzenossulfonato (besilato), p- aminobenzenossulfonato, p-toluenossulfonato (tosilato) e naftaleno-2- sulfonato.

Preparação de Composto

[0091] Os compostos da invenção podem ser fabricados por uma variedade de métodos, incluindo química padrão. Qualquer variável anteriormente definida continuará a ter o significado anteriormente definido a menos que de outro modo indicado. Os métodos sintéticos gerais ilustrativos são apresentados abaixo e depois compostos específicos da invenção são preparados na seção de Exemplos.

Processo A

[0092] Os compostos da fórmula (I) e sais dos mesmos podem ser preparados reagindo-se um composto da fórmula (II) ou um sal do mesmo em que R1 a R8 são como definidos acima e X1 é halógeno, por exemplo cloro ou bromo, com morfolina na presença de um catalisador adequado.

[0093] O catalisador usado na formação do composto da fórmula (I) é tipicamente um complexo de catalisador de paládio, por exemplo um complexo de paládio com um ligante adequado. O ligante pode ser, por exemplo, um ligante de Buchwald tal como RuPhos (2-diciclo-hexilfosfino- 2’,6’-di-isopropoxibifenila) ou DavePhos (2’-(diciclo-hexilfosfino)-N,N- dimetil-[1,1’-bifenil]-2-amina). Em uma modalidade, o catalisador de paládio é um complexo de paládio com RuPhos.

[0094] O composto da fórmula (II) ou sal do mesmo pode ser preparado reagindo-se um composto da fórmula (III) ou um sal do mesmo em que R1, R2 e X1 são como definidos acima e X2 é halógeno, por exemplo bromo, com um ácido borônico ou éster da fórmula (IVa) ou fórmula (IVb) em que R3 a R8 são como definidos acima, na presença de um catalisador adequado.

[0095] O catalisador usado na formação do composto da fórmula (II) é tipicamente um complexo de catalisador de paládio, por exemplo [1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II) ou BrettPhos.

[0096] Os exemplos de processos adequados para a preparação de compostos das fórmulas (IVa) e (IVb) estão resumidos no Esquema 1 abaixo.

[0097] Alternativamente, o composto da fórmula (II) ou sal do mesmo pode ser preparado reagindo-se um composto da fórmula (V) ou um sal do mesmo em que R1 a R6 e X1 são como definidos acima, com um composto da fórmula (VI) HNR7R8 (VI) em que R7 e R8 são como definidos acima, na presença de um agente redutor.

[0098] Os compostos da fórmula (V) e sais dos mesmos podem ser preparados reagindo-se um composto da fórmula (III) como definido acima com um ácido borônico ou éster das fórmulas (VIIa) ou (VIIb) em que R3 a R8 são como definidos acima, na presença de um catalisador adequado.

[0099] O catalisador usado na formação do composto da fórmula (V) é tipicamente um complexo de catalisador de paládio, por exemplo o complexo de cloreto de 2’-(dimetilamino)-2-bifenilil-paládio(II) dinorbornilfosfina ou o pré-catalisador de 2a geração Xphos.

[00100] Os exemplos do processo A são representados nos Esquemas 2 a 7 abaixo.

Processo B

[00101] Os compostos da fórmula (I) e sais dos mesmos também podem ser preparados reagindo-se um composto da fórmula (VIII) ou um sal do mesmo em que R1 a R6 são como definidos acima, com um composto da fórmula (VI) como definido acima, na presença de um agente redutor.

[00102] Os compostos da fórmula (VIII) e sais dos mesmos podem ser preparados reagindo-se um composto da fórmula (IX) em que R1 a R6 são como definidos acima e X3 é halógeno, por exemplo cloro, com um ácido borônico ou éster da fórmula (VIIa) ou (VIIb) como definido acima, na presença de um catalisador adequado.

[00103] O catalisador usado na formação do composto da fórmula (IX) é tipicamente um complexo de catalisador de paládio, por exemplo paladaciclo XPhos.

[00104] Os compostos da fórmula (IX) e sais dos mesmos podem ser preparados reagindo-se um composto da fórmula (III) ou um sal do mesmo como definido acima com morfolina.

[00105] Um exemplo do processo B é representado no Esquema 8

Processo C

[00106] Os compostos da fórmula (I) e sais dos mesmos também podem ser preparados reagindo-se um composto da fórmula (X) ou um sal do mesmo em que R1 e R3 a R8 são como definidos acima, com um composto da fórmula (XI) R2-X4 (XI) em que R2 é alquila C1-6 opcionalmente substituído por - C(O)Oalquila C1-6 ou -OC(O)alquila C1-6 e X4 é halógeno, por exemplo iodo.

[00107] Um exemplo de processo C é representado no Esquema 9 abaixo.

Processo D

[00108] Como a pessoa habilitada avaliará, os processos para preparar os compostos da fórmula (I) e sais dos mesmos podem utilizar um grupo(s) de proteção adequado(s). Consequentemente, a etapa final no processo pode envolver a remoção de tal(is) grupo(s) de proteção.

[00109] Um exemplo de processo D é representado no Esquema 10 abaixo.

[00110] Assim, em uma modalidade a invenção provê um processo para preparar um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo compreendendo: a) reagir um composto da fórmula (II) ou um sal do mesmo em que R1 a R8 são como definidos acima e X1 é halógeno, com morfolina na presença de um catalisador adequado, b) reagir um composto da fórmula (VIII) ou um sal do mesmo em que R1 a R6 são como definidos acima, com um composto da fórmula (VI) como definido acima, na presença de um agente redutor, c) reagir um composto da fórmula (X) ou um sal do mesmo em que R1 e R3 a R8 são como definidos acima, com um composto da fórmula (XI) R2-X4 (XI) em que R2 é alquila C1-6 opcionalmente substituído por - C(O)Oalquila C1-6 ou -OC(O)alquila C1-6 e X4 é halógeno, ou d) desproteção de uma forma protegida de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo.

Métodos de Uso

[00111] Os compostos da invenção são inibidores da atividade da cinase, em particular atividade da PI3 cinase. Os compostos que são inibidores da PI3-cinase podem ser úteis no tratamento de distúrbios em que a patologia subjacente é (pelo menos em parte) atribuível à atividade inadequada da PI3 cinase, tal como asma e doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD). “Atividade inadequada da PI3 cinase” refere-se a qualquer atividade da PI3 cinase que desvie da atividade normal da PI3 cinase esperada em um paciente particular. A PI3-cinase inadequada pode tomar a forma de, por exemplo, um aumento anormal na atividade, ou uma aberração na cronometragem e ou controle da atividade da PI3 cinase. Tal atividade inadequada pode resultar então, por exemplo, da expressão excessiva ou mutação da PI3 cinase levando à atividade inadequada ou descontrolada. Consequentemente, em um outro aspecto a invenção é direcionada aos métodos de tratar tais distúrbios.

[00112] Tais distúrbios incluem doenças respiratórias incluindo asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e fibrose pulmonar idiopática (IPF); ciliopatia incluindo discinesia ciliar primária, doença hepática policística e nefronoftise; infecções bacterianas incluindo infecções bacterianas do trato respiratório, por exemplo infecções por S. Pneumoniae, H. Influenzae, M. Catarrhalis e/ou micobactérias tais como Mycobacterium tuberculosis, e exacerbações bacterianas de condições respiratórias e dano pulmonar tal como asma, COPD e fibrose cística; infecções virais incluindo infecções virais do trato respiratório, por exemplo infecções pela influenza, rinovírus, vírus sincicial respiratório (RSV), vírus da parainfluenza humana (HPIV), adenovírus e/ou coronavírus, e exacerbação viral de condições respiratórias e dano pulmonar tal como asma, COPD e fibrose cística; outras infecções respiratórias não virais incluindo aspergilose e leishmaniose; doenças alérgicas incluindo rinite alérgica, dermatite tópica e psoríase; doenças autoimunes incluindo espondilite anquilosante, síndrome de Churg- Strauss, doença de Crohn, Glomerulonefrite, púrpura de Henoch-Schonlein, púrpura trombocitopênica idiopática (ITP), cistite intersticial, pênfigo, colangite esclerosante primária, psoríase, artrite reumatoide, sarcoidose, síndrome de Sjogren, diabete Tipo 1, colite ulcerativa, vasculite e granulomatose de Wegener; distúrbios inflamatórios incluindo doença intestinal inflamatória; diabete; doenças cardiovasculares incluindo trombose, aterosclerose e hipertensão; malignidades hematológicas; doenças neurodegenerativas; pancreatite; insuficiência de órgão múltiplo; doenças renais; agregação de plaqueta; câncer; motilidade de esperma; rejeição de transplante; rejeição de enxerto; lesões pulmonares; dor incluindo dor associada com artrite reumatoide ou osteoartrite, dor lombar, dor inflamatória geral, neuralgia pós hepática, neuropatia diabética, dor neuropática inflamatória (trauma), neuralgia trigeminal e dor central; doenças fibróticas; depressão; e distúrbios psicóticos incluindo esquizofrenia.

[00113] Tais doenças fibróticas podem incluir fibrose pulmonar idiopática, doenças pulmonares intersticiais, pneumonia intersticial não específica (NSIP), pneumonia intersticial usual (UIP), fibrose endomiocárdica, fibrose mediastinal, mielofibrose, fibrose retroperitoneal, fibrose maciça progressiva (uma complicação de pneumoconiose do trabalhador de carvão), fibrose sistêmica nefrogênica, doença de Crohn, infartação miocárdica no idoso, escleroderma/esclerose sistêmica, neurofibromatose, síndrome de Hermansky-Pudlak, nefropatia diabética, fibrose renal, cardiomiopatia hipertrófica (HCM), nefropatia relacionada com a hipertensão, glomerulosclerose segmental focal (FSGS), fibrose induzida por radiação, leiomiomas uterinos (fibroides), doença hepática alcoólica, esteatose hepática, fibrose hepática, cirrose hepática, infecção pelo vírus da hepatite C (HCV), rejeição crônica ao transplante de órgão, condições fibróticas da pele, síndrome da cicatrização de queloide, contratura de Dupuytren, Ehlers-Danlos, epidermólise bolhosa distrófica, fibrose submucósica oral, e distúrbios fibroproliferativos.

[00114] Em uma modalidade, o distúrbio é asma. Em uma outra modalidade, o distúrbio é COPD.

[00115] Dentro do contexto da presente invenção, os seguintes termos descrevendo as indicações aqui usadas são classificados no Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disturbances, 4a Edição, publicado pela American Psychiatric Association (DSM-IV) e/ou no International Classification of Diseases, 10a Edição (ICD-10). Os vários subtipos dos distúrbios aqui mencionados são considerados como parte da presente invenção. Os números em parênteses depois das doenças listadas abaixo se referem ao código de Classificação em DSM-IV.

[00116] Dentro do contexto da presente invenção, o termo “distúrbio psicótico” inclui Esquizofrenia incluindo os subtipos Tipo Paranoico (295.30), Tipo Desorganizado (295.10), Tipo Catatônico (295.20), Tipo Não Diferenciado (295.90) e Tipo Residual (295.60); Distúrbio Esquizofreniforme (295.40); Distúrbio Esquizoafetivo (295.70) incluindo os subtipos Tipo Bipolar e Tipo Depressivo; Distúrbio Desilusional (297.1) incluindo os subtipos Tipo Erotomânico, Tipo Pomposo, Tipo Ciumento, Tipo Persecutório, Tipo somático, Tipo Misto e Tipo Não Especificado; Distúrbio Psicótico Breve (298.8); Distúrbio Psicótico Compartilhado (297.3); Distúrbio Psicótico Devido a uma Condição Médica Geral incluindo os subtipos Com Ilusões e Com Alucinações; Distúrbio Psicótico Induzido por Substância incluindo os subtipos Com Ilusões (293.81) e Com Alucinações (293.82); e Distúrbio Psicótico Não De Outro Modo Especificado (298.9).

[00117] Dentro do contexto da presente invenção, o termo “depressão” inclui depressão e distúrbios de humor incluindo Episódio Depressivo Maior, Episódio Maníaco, Episódio Misto e Episódio Hipomaníaco; Distúrbios Depressivos incluindo Distúrbio Depressivo Maior, Distúrbio Distímicos (300.4), Distúrbio Depressivo Sem Outra Especificação (311); Distúrbios Bipolares incluindo Distúrbio Bipolar I, Distúrbio Bipolar II (Episódios Depressivos Maiores Recorrentes com Episódios Hipomaníacos) (296.89), Distúrbio Ciclotímico (301.13) e Distúrbio Bipolar Sem Outra Especificação (296.80); Outros Distúrbios de Humor incluindo Distúrbio de Humor Devido a uma Condição Médica Geral (293.83) que inclui os subtipos Com Traços Depressivos, Com Episódio tipo Depressivo Maior, Com Traços Maníacos e Com Traços Mistos), Distúrbio de Humor Induzido por Substância (incluindo os subtipos Com Traços Depressivos, Com Traços Maníacos e Com Traços Mistos) e Distúrbio de Humor Sem Outra Especificação (296.90).

[00118] Os métodos de tratamento da invenção compreendem administrar uma quantidade segura e eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável a um paciente em necessidade do mesmo. As modalidades individuais da invenção incluem métodos de tratar qualquer um dos distúrbios mencionados acima pela administração de uma quantidade segura e eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável a um paciente em necessidade do mesmo.

[00119] Como aqui usado, “tratar” em referência a um distúrbio significa: (1) melhorar ou prevenir o distúrbio ou uma ou mais das manifestações biológicas do distúrbio, (2) interferir com (a) um ou mais pontos na cascata biológica que leva a ou é responsável para o distúrbio ou (b) uma ou mais das manifestações biológicas do distúrbio, (3) para aliviar um ou mais dos sintomas ou efeitos associados com o distúrbio, ou (4) para diminuir a progressão do distúrbio ou uma ou mais das manifestações biológicas do distúrbio.

[00120] Como indicado acima, “tratamento” de um distúrbio inclui a prevenção do distúrbio. Os técnicos habilitados avaliarão que “prevenção” não é um termo absoluto. Na medicina, “prevenção” é entendido se referir à administração profilática de um fármaco para diminuir substancialmente a probabilidade ou severidade de um distúrbio ou manifestação biológica do mesmo, ou para retardar o início de tal distúrbio ou manifestação biológica do mesmo. Em uma modalidade, os métodos da invenção são direcionados para tratar um distúrbio. Em uma outra modalidade, os métodos da invenção são direcionados para prevenir um distúrbio.

[00121] Como aqui usado, “quantidade segura e eficaz” em referência a um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável ou outro agente farmaceuticamente ativo significa uma quantidade do composto suficiente para tratar a condição do paciente, mas suficientemente baixa para evitar efeitos colaterais sérios (em uma razão benefício/risco razoável) dentro do escopo do julgamento médico criterioso. Uma quantidade segura e eficaz de um composto variará com o composto particular escolhido (por exemplo considerando a potência, eficácia, e meia- vida do composto); a via de administração escolhida; o distúrbio sendo tratado; a severidade do distúrbio sendo tratado; a idade, tamanho, peso, e condição física do paciente sendo tratado; a história médica do paciente a ser tratado; a duração do tratamento; a natureza da terapia concorrente; o efeito terapêutico desejado; e fatores similares, mas não obstante pode ser rotineiramente determinada pelo técnico habilitado.

[00122] Como aqui usado, “paciente” refere-se a um ser humano (incluindo adultos e crianças) ou outro animal. Em uma modalidade, “paciente” refere-se a um ser humano.

[00123] Os compostos da fórmula (I) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser administrados por qualquer via adequada de administração, incluindo tanto a administração sistêmica quanto a administração tópica. A administração sistêmica inclui a administração oral, administração parenteral, administração transdérmica e administração retal. A administração parenteral refere-se às vias de administração outras que não a enteral ou transdérmica, e é tipicamente por injeção ou infusão. A administração parenteral inclui a injeção ou infusão intravenosas, intramusculares e subcutâneas. A administração tópica inclui aplicação à pele assim como a administração intraocular, óptica, intravaginal, inalada e intranasal. Inalação refere-se à administração dentro dos pulmões do paciente seja inalado através da boca ou através das passagens nasais. Em uma modalidade, os compostos da fórmula (I) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser administrados oralmente. Em uma outra modalidade, os compostos da fórmula (I) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser administrados pela inalação. Em uma outra modalidade, os compostos da fórmula (I) ou sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis podem ser administrados intranasalmente.

[00124] Os compostos da fórmula (I) ou sais farmaceuticamente aceitável dos mesmos podem ser administrados uma vez ou de acordo com um regime de dosagem em que várias doses são administradas em intervalos variáveis de tempo durante um dado período de tempo. Por exemplo, as doses podem ser administradas uma, duas, três, ou quatro vezes ao dia. Em uma modalidade, uma dose é administrada uma vez ao dia. Em uma outra modalidade, uma dose é administrada duas vezes ao dia. As doses podem ser administradas até que o efeito terapêutico desejado seja obtido ou indefinidamente mantendo o efeito terapêutico desejado. Os regimes de dosagem adequados para um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável dependem das propriedades farmacocinéticas deste composto, tal como absorção, distribuição, e meia-vida, que pode ser determinada pelo técnico habilitado. Além disso, os regimes de dosagem adequados, incluindo a duração em que tais regimes são administrados, para um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável dependem do distúrbio sendo tratado, da severidade do distúrbio sendo tratado, da idade e condição física do paciente sendo tratado, da história médica do paciente a ser tratado, da natureza da terapia concorrente, do efeito terapêutico desejado, e fatores semelhantes dentro do conhecimento e perícia do técnico habilitado. Será entendido adicionalmente por tais técnicos habilitados que os regimes de dosagem adequados podem requerer ajuste dado a uma resposta do paciente individual ao regime de dosagem ou com o tempo conforme as necessidades do paciente individual muda.

[00125] As dosagens diárias típicas podem variar dependendo da via particular de administração escolhida. As dosagens diárias típicas para a administração oral variam de 0,001 mg a 50 mg por kg de peso corporal total, por exemplo de 1 mg a 10 mg por kg de peso corporal total. Por exemplo, as dosagens diárias para a administração oral podem ser de 0,5 mg a 2 g por paciente, tal como 10 mg a 1 g por paciente.

[00126] Adicionalmente, os compostos da fórmula (I) podem ser administrados como pró-fármacos. Como aqui usado, um “pró-fármaco” de um composto da fórmula (I) é um derivado funcional do composto que, na administração a um paciente, eventualmente libera o composto da fórmula (I) in vivo. A administração de um composto da fórmula (I) como um pró- fármaco pode permitir que o técnico habilitado realize um ou mais dos seguintes: (a) modifique o início da atividade do composto in vivo; (b) modifique a duração da ação do composto in vivo; (c) modifique o transporte ou distribuição do composto in vivo; (d) modifique a solubilidade do composto in vivo; e (e) supere um efeito colateral ou outra dificuldade encontrada com o composto. Os derivados funcionais típicos usados para preparar pró-fármacos incluem as modificações do composto que são química ou enzimaticamente cliváveis in vivo. Tais modificações, que incluem a preparação de fosfatos, amidas, ésteres, tioésteres, carbonatos, e carbamatos, são bem conhecidos por aqueles habilitados na técnica.

[00127] Em um aspecto, a invenção assim provê um método de tratar um distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase compreendendo administrar uma quantidade segura e eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável a um paciente em necessidade do mesmo.

[00128] Em uma modalidade, a invenção assim provê um método de tratar um distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase compreendendo administrar uma quantidade segura e eficaz de N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida ou um sal da mesma farmaceuticamente aceitável a um paciente em necessidade do mesmo

[00129] Em uma modalidade, o distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase é selecionado a partir do grupo consistindo de doenças respiratórias (incluindo asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e fibrose pulmonar idiopática (IPF)); ciliopatia (incluindo discinesia ciliar primária, doença hepática policística e nefronoftise); infecções bacterianas (incluindo infecções respiratórias do trato bacteriano, por exemplo infecções pela S. Pneumoniae, H. Influenzae, M. Catarrhalis e/ou micobactérias tais como Mycobacterium tuberculosis) e exacerbações bacterianas de condições respiratórias e dano pulmonar (tal como asma, COPD e fibrose cística); infecções virais (incluindo infecções virais do trato respiratório, por exemplo infecções pela influenza, rinovírus, vírus sincicial respiratório (RSV), vírus da parainfluenza humana (HPIV), adenovírus e/ou coronavírus) e exacerbação viral de condições respiratórias e dano pulmonar (tais como asma, COPD e fibrose cística); outras infecções respiratórias não virais (incluindo aspergilose e leishmaniose); doenças alérgicas (incluindo rinite alérgica, dermatite tópica e psoríase); doenças autoimunes (incluindo espondilite anquilosante, síndrome de Churg-Strauss, doença de Crohn, Glomerulonefrite, púrpura de Henoch-Schonlein, púrpura trombocitopênica idiopática (ITP), cistite intersticial, pênfigo, colangite esclerosante primária, psoríase, artrite reumatoide, sarcoidose, síndrome de Sjogren, diabete Tipo 1, colite ulcerativa, vasculite e granulomatose de Wegener); distúrbios inflamatórios (incluindo doença intestinal inflamatória); diabete; doenças cardiovasculares (incluindo trombose, aterosclerose e hipertensão); malignidades hematológicas; doenças neurodegenerativas; pancreatite; insuficiência de órgão múltiplo; doenças renais; agregação de plaqueta; câncer; motilidade espermática; rejeição a transplante; rejeição a enxerto; lesões pulmonares; dor (incluindo dor associada com artrite reumatoide ou osteoartrite, dor lombar, dor inflamatória geral, neuralgia pós hepática, neuropatia diabética, dor neuropática inflamatória (trauma), neuralgia trigeminal e dor central); doenças fibróticas; depressão; e distúrbios psicóticos (incluindo esquizofrenia).

[00130] Em uma modalidade, o distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase é uma doença respiratória. Em uma outra modalidade, o distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase é a asma. Em uma outra modalidade, o distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase é a doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD).

[00131] Em um aspecto, a invenção provê um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável para o uso na terapia médica.

[00132] Em uma modalidade, a invenção provê N-(2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino- 3-sulfonamida ou um sal da mesma farmaceuticamente aceitável para o uso na terapia médica.

[00133] Em um outro aspecto, a invenção provê um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável para o uso no tratamento de um distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase.

[00134] Em uma modalidade, a invenção provê N-(2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino- 3-sulfonamida ou um sal da mesma farmaceuticamente aceitável para o uso no tratamento de um distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase.

[00135] Em um outro aspecto, a invenção provê o uso de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável na fabricação de um medicamento para o uso no tratamento de um distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase.

[00136] Em uma modalidade, a invenção provê o uso de N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida ou um sal da mesma farmaceuticamente aceitável na fabricação de um medicamento para o uso no tratamento de um distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase.

[00137] Várias variantes genéticas diferentes em PI3Kδ foram observadas (Jou et al., International Journal of Immunogenetics, 2006, 33, 361 a 369). Uma mutação (c.3061G>A, correspondendo a m.3256G>A no mRNA em que o número de nucleotídeo está fundamentado nos dados de sequência no GenBank: NM_005026) observada em uma posição altamente conservada no domínio responsável pela função catalítica resulta em uma substituição do ácido glutâmico pela lisina (E1021K). É acreditado que esta mutação possa resultar em pacientes sendo particularmente suscetíveis ao desenvolvimento de infecções respiratórias e/ou exacerbações de infecções respiratórias, e dano às paredes das vias aéreas, vias aéreas grandes e pequenas, e parênquima pulmonar (Angulo et al., Science DOI: 10.1125/science. 1243292). Outras mutações de ganho de função identificadas no gene PIK3CD e levando a deficiências imunes incluem a substituição do resíduo de aminoácido N334K ou E525K (Lucas et al. Nat. Immunol. (2014) 15 p. 88-97). Mutações levando à junção aberrante de PIK3R1 exon 10 e truncagem da proteína p85α resultaram em atividade de PI3Kδ elevada e a sintomas similares às mutações de ganho de função no gene PIK3CD (Deau et al. J. Clin. Invest. (2014) 124(9) p. 3923-8).

[00138] Assim, em um aspecto, a invenção provê assim um método de tratar ou prevenir uma infecção respiratória, tratar dano às vias aéreas, e/ou prevenir lesão das vias aéreas em um paciente com uma mutação PI3Kδ, ou expressão ou atividade de PI3Kδ aumentada, compreendendo administrar uma quantidade segura e eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável a um paciente em necessidade do mesmo.

[00139] Em uma modalidade, a invenção provê um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável para o uso no tratamento ou prevenção de uma infecção respiratória, no tratamento de dano às vias aéreas, e/ou na prevenção de lesão das vias aéreas em um paciente com uma mutação PI3Kδ, ou expressão ou atividade de PI3Kδ aumentadas.

[00140] Em uma outra modalidade, a invenção provê o uso de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável na fabricação de um medicamento para o uso no tratamento ou prevenção de uma infecção respiratória, no tratamento de dano às vias aéreas, e/ou na prevenção de lesão das vias aéreas em um paciente com uma mutação PI3Kδ, ou expressão ou atividade de PI3Kδ aumentadas.

[00141] Em uma outra modalidade, a presente invenção provê um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável para o uso no tratamento ou prevenção de uma infecção respiratória, o tratamento de dano às vias aéreas, e/ou a prevenção de lesão das vias aéreas em um paciente, compreendendo: a) ensaiar uma amostra do paciente, b) determinar se o paciente tem uma mutação PI3Kδ, ou expressão ou atividade de PI3Kδ aumentadas, e c) administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável ao paciente se ele tem uma mutação PI3Kδ, ou expressão ou atividade de PI3Kδ aumentadas.

[00142] Em uma outra modalidade, a invenção provê um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável para o uso no tratamento ou prevenção de uma infecção respiratória, o tratamento de dano às vias aéreas, e/ou a prevenção de lesão das vias aéreas em um paciente classificado como um respondedor, em que um respondedor é distinguido pela presença de uma mutação PI3Kδ, ou expressão ou atividade de PI3Kδ aumentadas.

[00143] Em uma outra modalidade, a invenção provê o uso de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável na fabricação de um medicamento para o uso no tratamento ou prevenção de uma infecção respiratória, no tratamento de dano às vias aéreas, e/ou na prevenção de lesão das vias aéreas em um paciente classificado como um respondedor, em que um respondedor é distinguido pela presença de uma mutação PI3Kδ, ou expressão ou atividade de PI3Kδ aumentadas.

[00144] Em uma outra modalidade, a invenção provê um método de avaliar a terapia com um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável, compreendendo: a) obter uma amostra do paciente, b) testar quanto a uma mutação PI3Kδ, ou expressão ou atividade de PI3Kδ aumentadas, e c) determinar se o paciente deve passar pela terapia com um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável se uma mutação PI3Kδ, ou expressão ou atividade de PI3Kδ aumentadas, está presente.

[00145] Tais infecções respiratórias podem ser o resultado de infecções bacterianas incluindo, por exemplo, infecções pela S. Pneumoniae, H. Influenzae, M. Catarrhalis e/ou micobactérias tais como Mycobacterium tuberculosis; infecções virais incluindo, por exemplo, infecções pela influenza, rinovírus, vírus sincicial respiratório (RSV), vírus da parainfluenza humana (HPIV), adenovírus e/ou coronavírus; e outras infecções respiratórias não virais incluindo aspergilose e/ou leishmaniose. Em uma modalidade, pacientes com uma mutação PI3Kδ pode ser particularmente suscetível de desenvolver infecções respiratórias e/ou exacerbações de infecções respiratórias como um resultado de infecções bacterianas por S. Pneumoniae, H. Influenzae, e/ou M. Catarrhalis.

[00146] Como aqui usado, o termo “dano às vias aéreas” refere-se ao dano à parede das vias aéreas, vias aéreas grandes e pequenas, e/ou parênquima pulmonar que está presente no momento em que um paciente começa o tratamento. Dano às vias aéreas, tal como inflamação, cicatriz e/ou remodelagem, pode ser causado, por exemplo, por infecções respiratórias repetidas em um paciente com uma mutação PI3Kδ.

[00147] Como aqui usado, o termo “lesão das vias aéreas” refere-se ao dano, ou dano adicional, às paredes das vias aéreas, vias aéreas grandes e pequenas, e/ou parênquima pulmonar que pode se desenvolver em um paciente se tratamento não ocorrer.

[00148] Como aqui usado, o termo “respondedor” significa alguém que é identificado (usando um teste ou método particulares) ser mais provável de derivar benefício em resposta ao tratamento (por exemplo resposta positiva ao fármaco, redução nos eventos adversos, etc.). É entendido que nem todas as pessoas que foram identificadas como um respondedor necessariamente derivam benefício, mas como uma classe de paciente, eles são mais prováveis de assim fazê-lo. Por exemplo, pode ser que da população doente não testada total, aproximadamente 80% desta população derivam benefício de um fármaco, mas do grupo de “respondedores” (isto é, aqueles indivíduos que foram testados, e identificados como um respondedor de acordo com os critérios apresentados) aproximadamente 99% derivarão benefício.

[00149] Como aqui usado, o termo “avaliar a terapia” significa determinar se a terapia com um composto da fórmula (I), ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável, seria benéfica a um paciente.

[00150] Pacientes com uma mutação de PI3Kδ pode ser particularmente suscetível a uma exacerbação de uma infecção respiratória. Como aqui usado, o termo “exacerbação de uma infecção respiratória” refere- se a uma infecção respiratória distinguida pela piora de uma infecção respiratória subjacente persistente, incluindo infecções bacterianas, infecções virais e/ou outras infecções respiratórias não virais. Em uma modalidade, a presente invenção provê assim um método de tratar ou prevenir uma exacerbação de uma infecção respiratória em um paciente com uma mutação de PI3Kδ compreendendo administrar uma quantidade segura e eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável a um paciente em necessidade do mesmo.

[00151] Em uma modalidade, a mutação de PI3Kδ resulta na substituição de ácido glutâmico no lugar da lisina. Em uma outra modalidade, a mutação de PI3Kδ resulta na substituição de ácido glutâmico no lugar da lisina no códon 1021 (E1021K).

[00152] Em uma modalidade, a mutação de PI3Kδ resulta em uma mutação de sentido errado de par de base único m.3256G>A no mRNA (em que o número de nucleotídeo está fundamentado nos dados de sequência no GenBank: NM_005026).

[00153] Em uma modalidade, a mutação de PI3Kδ é c.3061G>A.

Composições

[00154] Os compostos da fórmula (I) e sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis normalmente, mas não necessariamente, serão formulados em composições farmacêuticas antes da administração a um paciente.

[00155] Consequentemente, em um aspecto a invenção é direcionada às composições farmacêuticas compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[00156] Em um outro aspecto a invenção está direcionada às composições farmacêuticas compreendendo 0,05 a 1000 mg de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável e 0,1 a 2 g de um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[00157] Em um outro aspecto a invenção está direcionada a uma composição farmacêutica para o tratamento ou profilaxia de um distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável.

[00158] As composições farmacêuticas da invenção podem ser preparadas e embaladas na forma a granel em que uma quantidade segura e eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável pode ser extraída e depois dada ao paciente tal como com pós ou xaropes. Alternativamente, as composições farmacêuticas da invenção podem ser preparadas e embaladas na forma de dosagem unitária em que cada unidade fisicamente separada contém um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável. Quando preparadas na forma de dosagem unitária, as composições farmacêuticas da invenção tipicamente podem conter, por exemplo, de 0,5 mg a 1 g, ou de 1 mg a 700 mg, ou de 5 mg a 100 mg de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável.

[00159] As composições farmacêuticas da invenção tipicamente contêm um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável.

[00160] Como aqui usado, “excipiente farmaceuticamente aceitável” significa um material, composição ou veículo farmaceuticamente aceitáveis envolvidos em dar forma ou consistência à composição farmacêutica. Cada excipiente deve ser compatível com os outros ingredientes da composição farmacêutica quando misturada tal que as interações que substancialmente reduziriam a eficácia do composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável quando administrados a um paciente e interações que resultariam em composições farmacêuticas que não são farmaceuticamente aceitáveis são evitadas. Além disso, cada excipiente naturalmente deve ser farmaceuticamente aceitável por exemplo de pureza suficientemente alta.

[00161] O composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável e o excipiente ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis tipicamente serão formulados em uma forma de dosagem adaptada para a administração ao paciente pela via desejada de administração. Por exemplo, as formas de dosagem incluem aquelas adaptadas para (1) administração oral tal como tabletes, cápsulas, capsuletas, pílulas, pastilhas, pós, xaropes, elixires, suspensões, soluções, emulsões, sachês, e comprimidos; (2) a administração parenteral tais como soluções, suspensões, e pós estéreis para a reconstituição; (3) administração transdérmica tal como emplastros transdérmicos; (4) administração retal tal como supositórios; (5) inalação tais como aerossóis, soluções, e pós secos; e (6) administração tópica tais como cremes, unguentos, loções, soluções, pastas, pulverizações, espumas e géis.

[00162] Os excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados variarão dependendo da forma de dosagem particular escolhida. Além disso, excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados podem ser escolhidos para uma função particular que eles podem servir na composição. Por exemplo, certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos quanto à sua capacidade para facilitar a produção de formas de dosagem uniformes. Certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos quanto à sua capacidade para facilitar a produção de formas de dosagem estáveis. Certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos quanto à sua capacidade para facilitar o carregamento ou transporte do composto ou compostos da fórmula (I) ou sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis uma vez administrados ao paciente de um órgão, ou porção do corpo, para um outro órgão, ou porção do corpo. Certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos quanto à sua capacidade para realçar a colaboração do paciente.

[00163] Os excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem os seguintes tipos de excipientes: diluentes, enchedores, aglutinantes, desintegrantes, lubrificantes, glidantes, agentes de granulação, agentes de revestimento, agentes de umectação, solventes, cossolventes, agentes de suspensão, emulsificantes, adoçantes, agentes flavorizantes, agentes mascaradores de sabor, agentes corantes, agentes antiaglomerante, umectantes, agentes queladores, plasticizantes, agentes que aumentam a viscosidade, antioxidantes, preservantes, estabilizantes, tensoativos, e agentes tamponizante. O técnico habilitado avaliará que certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem servir para mais do que uma função e pode servir para funções alternativas dependendo de quanto do excipiente está presente na formulação e quais outros excipientes estão presentes na formulação.

[00164] Os técnicos habilitados possuem o conhecimento e a habilidade na técnica para permitir que eles selecionem os excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados em quantidades apropriadas para o uso na invenção. Além disso, existem vários recursos que são disponíveis para o técnico habilitado que descrevem excipientes farmaceuticamente aceitáveis e podem ser úteis na seleção de excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados. Os exemplos incluem Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited), e The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press).

[00165] As composições farmacêuticas da invenção são preparadas usando técnicas e métodos conhecidos por aqueles habilitados na técnica. Alguns dos métodos habitualmente usados na técnica são descritos em Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company).

[00166] Consequentemente, em um outro aspecto a invenção está direcionada ao processo para a preparação de uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis que compreende misturar os ingredientes. Uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável pode ser preparado, por exemplo, misturando-se na temperatura ambiente e pressão atmosférica.

[00167] Em uma modalidade, os compostos da fórmula (I) ou sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis serão formulados para a administração oral. Em uma outra modalidade, os compostos da fórmula (I) ou sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis serão formulados para administração inalada. Em uma outra modalidade, os compostos da fórmula (I) ou sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis serão formulados para administração intranasal.

[00168] Em um aspecto, a invenção está direcionada a uma forma de dosagem oral sólida tal como um tablete ou cápsula compreendendo uma quantidade segura e eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável e um diluente ou enchedor. Os diluentes e enchedores adequados incluem lactose, sacarose, dextrose, manitol, sorbitol, amido (por exemplo amido de milho, amido de batata, e amido pré- gelatinizado), celulose e seus derivados (por exemplo celulose microcristalina), sulfato de cálcio, e fosfato de cálcio dibásico. A forma de dosagem oral sólida pode compreender adicionalmente um aglutinante. Os aglutinantes adequados incluem amido (por exemplo amido de milho, amido de batata, e amido pré-gelatinizado), gelatina, acácia, alginato de sódio, ácido algínico, tragacanto, goma guar, povidona, e celulose e seus derivados (por exemplo celulose microcristalina). A forma de dosagem sólida oral pode compreender adicionalmente um desintegrante. Os desintegrantes adequados incluem crospovidona, amido glicolato de sódio, croscarmelose, ácido algínico, e carboximetil celulose sódica. A forma de dosagem oral sólida pode compreender adicionalmente um lubrificante. Os lubrificantes adequados incluem ácido esteárico, estearato de magnésio, estearato de cálcio e talco.

[00169] Onde apropriado, as formulações unitárias de dosagem para a administração oral podem ser microencapsuladas. A composição também pode ser preparada para prolongar ou sustentar a liberação como por exemplo revestindo-se ou embutindo-se material particulado em polímeros, cera ou similares.

[00170] Os compostos da fórmula (I) ou sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis também podem ser ligados com polímeros solúveis como carreadores de fármaco alvejáveis. Tais polímeros podem incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, poli- hidróxipropilmetacrilamidafenol, poli-hidróxietilaspartamidafenol, ou resíduos de palmitoíla substituídos com polietileno-óxidopolilisina. Além disso, os compostos da fórmula (I) ou sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis podem ser ligados a uma classe de polímeros biodegradáveis úteis na obtenção de liberação controlada de um fármaco, por exemplo, ácido polilático, poli-épsilon caprolactona, ácido poli-hidróxi butírico, poliortoésteres, poliacetais, polidiidropiranos, policianoacrilatos e copolímeros de bloco reticulados ou anfipáticos de hidrogéis.

[00171] Em um outro aspecto, a invenção está direcionada a uma forma de dosagem oral líquida. Os líquidos orais tais como solução, xaropes e elixires podem ser preparados na forma de dosagem unitária de modo que uma dada quantidade contenha uma quantidade predeterminada de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável. Os xaropes podem ser preparados dissolvendo-se o composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável em uma solução aquosa adequadamente aromatizada, enquanto que os elixires são preparados através do uso de um veículo alcoólico não tóxico. As suspensões podem ser formuladas dispersando-se o composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável em um veículo não tóxico. Solubilizantes e emulsificantes tais como álcoois isoestearílicos etoxilados e éteres de polióxi etileno sorbitol, preservantes, aditivos de sabor, tais como óleo de hortelã ou adoçantes naturais ou sacarina ou outros adoçantes artificiais, e similares também podem ser adicionados.

[00172] Em um outro aspecto, a invenção está direcionada a uma forma de dosagem adaptada para a administração a um paciente pela inalação, por exemplo como um pó seco, um aerossol, uma suspensão, ou uma composição de solução. Em uma modalidade, a invenção está direcionada a uma forma de dosagem adaptada para a administração a um paciente pela inalação como um pó seco. Em uma outra modalidade, a invenção está direcionada a uma forma de dosagem adaptada para a administração a um paciente pela inalação via um nebulizador.

[00173] As composições de pó seco para a liberação ao pulmão pela inalação tipicamente compreendem um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável como um pó finamente dividido junto com um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis como pós finamente divididos. Os excipientes farmaceuticamente aceitáveis particularmente adaptados para o uso em pós secos são conhecidos por aqueles habilitados na técnica e incluem lactose, amido, manitol, e mono-, di-, e polissacarídeos. O pó finamente dividido pode ser preparado, por exemplo, pela micronização e moagem. Geralmente, o composto reduzido no tamanho (por exemplo micronizado) pode ser definido por um valor D50 de cerca de 1 a cerca de 10 mícrons (por exemplo como medido usando a difração a laser).

[00174] O pó seco pode ser administrado ao paciente via um inalador de pó seco com reservatório (RDPI) tendo um reservatório adequado para armazenar (doses não medidas) múltiplas de medicamento na forma de pó seco. Os RDPIs tipicamente incluem um meio para medir cada dose de medicamento do poço para uma posição de liberação. Por exemplo, o meio de medição pode compreender um copo de medição, que é móvel de uma primeira posição onde o copo pode ser cheio com medicamento do reservatório para uma segunda posição onde a dose de medicamento medida é feita disponível para o paciente para inalação.

[00175] Alternativamente, o pó seco pode ser apresentado em cápsulas (por exemplo gelatina ou plástico), cartuchos, ou embalagens bolha para o uso em um inalador de pó seco de dose múltipla (MDPI). Os MDPIs são inaladores em que o medicamento está compreendido dentro de uma embalagem de dose múltipla contendo (ou de outro modo carregando) doses múltiplas definidas (ou partes das mesmas) de medicamento. Quando o pó seco é apresentado como uma embalagem bolha, o mesmo compreende bolhas múltiplas para contenção do medicamento na forma de pó seco. As bolhas são tipicamente dispostas na maneira regular para facilidade de liberação do medicamento a partir dela. Por exemplo, as bolhas podem estar dispostas em uma maneira geralmente circular em uma embalagem bolha na forma de disco, ou as bolhas podem ser alongadas na forma, por exemplo compreendendo uma tira ou uma fita. Cada cápsula, cartucho, ou bolha pode, por exemplo, conter entre 20 μ g e 10 mg do composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável.

[00176] Aerossóis podem ser formados colocando-se em suspensão ou dissolvendo-se um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável em um propelente liquefeito. Os propelentes adequados include halocarbonetos, hidrocarbonetos, e outros gases liquefeitos. Os propelentes representativos incluem: triclorofluorometano (propelente 11), diclorofluorometano (propelente 12), diclorotetrafluoroetano (propelente 114), tetrafluoroetano (HFA-134a), 1,1-difluoroetano (HFA- 152a), difluorometano (HFA-32), pentafluoroetano (HFA-12), heptafluoropropano (HFA-227a), perfluoropropano, perfluorobutano, perfluoropentano, butano, isobutano e pentano. Os aerossóis compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável tipicamente será administrado a um paciente via um inalador de dose medida (MDI). Tais dispositivos são conhecidos por aqueles habilitados na técnica.

[00177] O aerossol pode conter excipientes farmaceuticamente aceitáveis adicionais tipicamente usados com MDIs tais como tensoativos, lubrificantes, cossolventes e outros excipientes para melhorar a estabilidade física da formulação, para melhorar o desempenho da válvula, para melhorar a solubilidade ou para melhorar o sabor.

[00178] É assim provido como um outro aspecto da invenção uma formulação farmacêutica aerossol compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável e um fluorocarboneto ou clorofluorocarboneto contendo hidrogênio como propelente, opcionalmente em combinação com um tensoativo e/ou um co-solvente.

[00179] De acordo com um outro aspecto da invenção, é provido uma formulação farmacêutica aerossol em que o propelente é selecionado a partir de 1,1,1,2-tetrafluoroetano, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro-n-propano e misturas dos mesmos.

[00180] As formulações da invenção podem ser tamponadas pela adição de agentes tamponizante adequados.

[00181] As cápsulas e cartuchos para o uso em um inalador ou insuflador, por exemplo de gelatina, podem ser formuladas contendo uma mistura em pó para inalação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável e uma base em pó adequada tal como lactose ou amido. Cada cápsula ou cartucho pode geralmente conter de 20 μ g a 10 mg do composto da fórmula (I) ou sal do mesmo farmaceuticamente aceitável. Alternativamente, o composto da fórmula (I) ou sal do mesmo farmaceuticamente aceitável pode ser apresentado sem excipientes tais como lactose.

[00182] A proporção do composto ativo da fórmula (I) ou sal do mesmo farmaceuticamente aceitável nas composições locais de acordo com a invenção depende do tipo exato da formulação a ser preparada, mas geralmente estará dentro da faixa de 0,001 a 10% em peso. Geralmente, para a maior parte dos tipos de preparações, a proporção usada estará dentro da faixa de 0,005 a 1%, por exemplo de 0,01 a 0,5%. Entretanto, em pós para inalação ou insuflação a proporção usada normalmente estará dentro da faixa de 0,1 a 5%.

[00183] As formulações aerossol são preferivelmente dispostas de modo que cada dose medida ou “soprada” de aerossol contém de 20 μg a 10 mg, preferivelmente de 20 μ g a 2000 μ g, mais preferivelmente de cerca de 20 μ g a 500 μ g de um composto da fórmula (I). A administração pode ser uma vez ao dia ou várias vezes ao dia, por exemplo 2, 3, 4 ou 8 vezes, dando por exemplo 1, 2 ou 3 doses de cada vez. A dose diária global com um aerossol estará dentro da faixa de 100 μ g a 10 mg, preferivelmente de 200 μ g a 2000 μ g. A dose diária global e a dose medida liberada pelas cápsulas e cartuchos em um inalador ou insuflador geralmente será o dobro daquela liberada com formulações aerossóis.

[00184] No caso de formulações aerossóis em suspensão, o tamanho da partícula do fármaco particulado (por exemplo, micronizado) deve ser tal como para permitir a inalação de substancialmente todo o fármaco dentro dos pulmões na administração da formulação aerossol e assim será menor do que 100 mícrons, desejavelmente menor do que 20 mícrons, e em particular na faixa de 1 a 10 mícrons, tal como de 1 a 5 mícrons, mais preferivelmente de 2 a 3 mícrons.

[00185] As formulações da invenção podem ser preparadas pela dispersão ou dissolução do medicamento e um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável no propelente selecionado em um recipiente apropriado, por exemplo, com a ajuda de sonicação ou um misturador de alto cisalhamento. O processo é desejavelmente realizado sob condições de umidade controlada.

[00186] A estabilidade química e física e a aceitabilidade farmacêutica das formulações aerossóis de acordo com a invenção podem ser determinadas pelas técnicas bem conhecidas por aqueles habilitados na técnica. Assim, por exemplo, a estabilidade química dos componentes pode ser determinada pelo ensaio de HPLC, por exemplo, depois da armazenagem prolongada do produto. Os dados de estabilidade física podem ser obtidos a partir de outras técnicas analíticas convencionais tais como, por exemplo, pelo teste de vazamento, pelo ensaio de liberação da válvula (pesos de lance médios por atuação), pelos ensaios de reprodutibilidade de dose (ingrediente ativo por atuação) e análise de distribuição da pulverização.

[00187] A estabilidade das formulações aerossóis em suspensão de acordo com a invenção pode ser medida pelas técnicas convencionais, por exemplo, medindo-se a distribuição de tamanho na floculação usando um instrumento de dispersão de luz traseira ou medindo-se a distribuição do tamanho da partícula pelo impacto em cascata ou pelo processo analítico do “impingidor gêmeo”. Como aqui usado referência ao ensaio do “impingidor gêmeo” significa “Determinação da deposição da dose emitida em inalações pressurizada usando o aparelho A” como definido na British Pharmacopaeia 1988, páginas A204-207, Apêndice XVII C. Tal técnica permite que a “fração respirável” das formulações aerossol seja calculada. Um método usado para calcular a “fração respirável” é por referência à “fração de partícula fina” que é a quantidade de ingrediente ativo coletada na câmara de impingimento inferior por atuação expressa como uma porcentagem da quantidade total de ingrediente ativo liberada por atuação usando o método do impingidor gêmeo descrito acima.

[00188] O termo “inalador de dose medida” ou MDI significa uma unidade compreendendo uma lata, uma tampa presa cobrindo a lata e uma válvula de medição da formulação situada na tampa. O sistema MDI inclui um dispositivo de canalização adequado. Os dispositivos de canalização adequados compreendem por exemplo, um atuador de válvula e uma passagem cilíndrica ou tipo cone através da qual o medicamento pode ser liberado da lata cheia via a válvula de medição para o nariz ou boca de um paciente tal como um atuador de bocal.

[00189] Os tubos de MDI geralmente compreendem um recipiente capaz de suportar a pressão de vapor do propelente usado tal como uma garrafa de plástico ou de vidro revestido com plástico ou preferivelmente uma lata de metal, por exemplo, alumínio ou uma liga do mesmo que pode opcionalmente ser anodizada, revestida com verniz e/ou revestida com plástico (por exemplo WO96/32099 aqui incorporada por referência em que parte ou todas das superfícies internas são revestidas com um ou mais polímeros de fluorocarboneto opcionalmente em combinação com um ou mais polímeros não fluorocarboneto), recipiente este que é fechado com uma válvula de medição. A tampa pode ser presa sobre a lata via soldagem ultrassônica, montagem aparafusada ou dobrada. Os MDIs aqui descritos podem ser preparados pelos métodos da técnica (por exemplo ver Byron, acima e WO96/32099). Preferivelmente o tubo é montado com uma montagem de tampa, em que uma válvula de medição de fármaco está situada na tampa, e a dita tampa é dobrada no lugar.

[00190] Em uma modalidade da invenção a superfície interna metálica da lata é revestida com um fluoropolímero, mais preferivelmente misturado com um não fluoropolímero. Em uma outra modalidade da invenção a superfície interna metálica da lata é revestida com uma mistura polimérica de politetrafluoroetileno (PTFE) e polietersulfona (PES). Em uma outra modalidade da invenção o todo da superfície interna metálica da lata é revestido com uma mistura polimérica de politetrafluoroetileno (PTFE) e polietersulfona (PES).

[00191] As válvulas de medição são designadas para liberar uma quantidade medida da formulação por atuação e incorpora uma gaxeta para prevenir vazamento de propelente através da válvula. A gaxeta pode compreender qualquer material elastomérico adequado tal como, por exemplo, polietileno de baixa densidade, clorobutila, bromobutila, EPDM, borrachas de butadieno-acrilonitrila pretas e brancas, borracha butílica e neoprene. As válvulas adequadas são comercialmente disponíveis de fabricantes bem conhecidos na indústria de aerossol, por exemplo, da Valois, França (por exemplo DF10, DF30, DF60), Bespak plc, UK (por exemplo BK300, BK357) e 3M-Neotechnic Ltd, UK (por exemplo Spraymiser®).

[00192] Em várias modalidades, os MDIs também podem ser usados em conjunção com outras estruturas tais como, sem limitação, embalagens com envoltório para armazenagem e contendo os MDIs, incluindo aqueles descritos nas Patentes norte-americanas Nos. 6.119.853, 6.179.118, 6.315.112, 6.352.152, 6.390.291, e 6.679.374, assim como unidades contadoras de dose tais como, mas não limitadas àquelas descritas nas Patentes norte-americanas Nos. 6.360.739 e 6.431.168.

[00193] Os métodos e maquinaria de fabricação a granel convencionais bem conhecidas por aqueles habilitados na técnica da fabricação farmacêutica de aerossol podem ser utilizados para a preparação de lotes de grande escala para a produção de tubos cheios. Assim, por exemplo, em um método de fabricação a granel para preparar formulações aerossóis em suspensão uma válvula de medição é dobrada sobre uma lata de alumínio para formar um tubo vazio. O medicamento particulado é adicionado a um vaso de carga e propelente liquefeito junto com os excipientes opcionais é enchido sob pressão através do vaso de carga dentro de um vaso de fabricação. A suspensão de fármaco é misturada antes da recirculação para uma máquina de enchimento e uma alíquota da suspensão do fármaco é depois enchida através da válvula de medição dentro do tubo. Em um exemplo o método de fabricação a granel para preparar formulações de solução aerossol uma válvula de medição é dobrada sobre uma lata de alumínio para formar um tubo vazio. O propelente liquefeito junto com os excipientes opcionais e o medicamento dissolvido é enchido sob pressão através do vaso de carga dentro de um vaso de fabricação.

[00194] Em um processo alternativo, uma alíquota da formulação liquefeita é adicionada a um tubo aberto sob condições que são suficientemente frias para garantir que a formulação não vaporize, e depois uma válvula de medição dobrada sobre o tubo.

[00195] Tipicamente, em lotes preparados para o uso farmacêutico, cada tubo cheio é checado quanto ao peso, codificado com um número de lote e embalado em uma bandeja para armazenagem antes da liberação para o teste.

[00196] Suspensões e soluções compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável também podem ser administradas a um paciente via um nebulizador. O solvente ou agente de suspensão utilizados para a nebulização podem ser qualquer líquido farmaceuticamente aceitável tal como água, solução salina aquosa, álcoois ou glicóis, por exemplo, etanol, álcool isopropílico, glicerol, propileno glicol, polietileno glicol, etc. ou misturas dos mesmos. As soluções salinas utilizam sais que demonstram pouca ou nenhuma atividade farmacológica depois da administração. Tanto os sais orgânicos, tais como sais de halógeno de metal alcalino ou amônio, por exemplo, cloreto de sódio, cloreto de potássio ou sais orgânicos, tais como os sais de potássio, sódio e amônio ou ácidos orgânicos, por exemplo, ácido ascórbico, ácido cítrico, ácido acético, ácido tartárico, etc. podem ser usados para este propósito.

[00197] Outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser adicionados à suspensão ou solução. O composto da fórmula (I) ou sal do mesmo farmaceuticamente aceitável pode ser estabilizado pela adição de um ácido inorgânico, por exemplo, ácido clorídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico e/ou ácido fosfórico; um ácido orgânico, por exemplo, ácido ascórbico, ácido cítrico, ácido acético, e ácido tartárico, etc., um agente complexante tal como EDTA ou ácido cítrico e sais dos mesmos; ou um antioxidante tal como vitamina E ou ácido ascórbico. Estes podem ser usados sozinhos ou juntos para estabilizar o composto da fórmula (I) ou sal do mesmo farmaceuticamente aceitável. Preservantes podem ser adicionados tais como cloreto de benzalcônio ou ácido benzoico e sais dos mesmos. Tensoativos podem ser adicionados particularmente para melhorar a estabilidade física de suspensões. Estes incluem lecitina, dioctilsulfossuccinato de dissódio, ácido oleico e ésteres de sorbitano.

[00198] Em um outro aspecto, a invenção está direcionada a uma forma de dosagem adaptada para a administração intranasal.

[00199] As formulações para a administração ao nariz podem incluir formulações de aerossol pressurizadas e formulações aquosas administradas ao nariz pela bomba pressurizada. As formulações que não são pressurizadas e adaptadas para serem administradas topicamente à cavidade nasal são de interesse particular. As formulações adequadas contêm água como o diluente ou carreador para este propósito. As formulações aquosas para a administração aos pulmões ou nariz podem ser providas com excipientes convencionais tais como agentes tamponizante, agentes modificadores de tonicidade e os semelhantes. As formulações aquosas também podem ser administradas ao nariz pela nebulização.

[00200] Os compostos da fórmula (I) ou sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis podem ser formulados como uma formulação de fluido para a liberação a partir de um dispensador, por exemplo um dispensador de fluido tendo um bocal de dispensa ou orifício de dispensa através dos quais uma dose medida da formulação fluida é dispensada na aplicação de uma força aplicada pelo usuário a um mecanismo de bomba do dispensador de fluido. Tais dispensadores de fluido são geralmente providos com um reservatório de doses múltiplas medidas da formulação de fluido, as doses sendo dispensáveis nas atuações de bomba sequenciais. O bocal ou orifício de dispensa pode ser configurado para a inserção nas narinas do usuário para a dispensa de pulverização da formulação fluida dentro da cavidade nasal. Um dispensador de fluido do tipo mencionado acima é descrito e ilustrado na WO05/044354, o conteúdo inteiro da qual é por meio deste aqui incorporado por referência. O dispensador tem uma caixa que aloja um dispositivo de descarga de fluido tendo uma bomba de compressão montada sobre um recipiente para conter uma formulação fluida. A caixa tem pelo menos uma alavanca lateral operável pelo dedo que é movível para dentro com respeito à caixa para ressaltar o recipiente para cima no caixa para fazer com que a bomba comprima e bombeie uma dose medida da formulação para fora de uma haste da bomba através de um bocal nasal da caixa. Em uma modalidade, o dispensador de fluido é do tipo geral ilustrado nas Figuras 30 a 40 da WO05/044354.

[00201] As composições farmacêuticas adaptadas para a administração intranasal em que o carreador é um sólido incluem um pó grosso tendo um tamanho de partícula por exemplo na faixa de 20 a 500 mícrons que é administrado pela inalação rápida através da passagem nasal de um recipiente do pó mantido próximo ao nariz. As composições adequadas em que o carreador é um líquido, para a administração como uma pulverização nasal ou como gotas nasais, incluem soluções aquosas ou oleosas do composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável.

[00202] As composições farmacêuticas adaptadas para a administração transdérmica podem ser apresentadas como emplastros separados pretendidos para permanecer em contato íntimo com a epiderme do paciente durante um período prolongado de tempo. Por exemplo, o ingrediente ativo pode ser liberado do emplastro pela iontoforese como geralmente descrito em Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).

[00203] As composições farmacêuticas adaptadas para a administração tópica podem ser formuladas como unguentos, cremes, suspensões, loções, pós, soluções, pastas, géis, pulverizações, aerossóis ou óleos.

[00204] Unguentos, cremes e géis, por exemplo, podem ser formulados com uma base aquosa ou oleosa com a adição de espessantes adequados e/ou agente formador de gel e/ou solventes. Tais bases podem assim, por exemplo, incluir água e/ou um óleo tal como parafina líquida ou um óleo vegetal tal como óleo de amendoim ou óleo de mamona, ou um solvente tal como polietileno glicol. Agentes espessantes e agentes formadores de gel que podem ser usados de acordo com a natureza da base incluem parafina mole, estearato de alumínio, álcool cetoestearílico, polietileno glicóis, lanolina, cera de abelha, carboxipolimetileno e derivados de celulose, e/ou monoestearato de glicerila e/ou agentes emulsificantes não iônicos.

[00205] Loções podem ser formuladas com uma base aquosa ou base oleosa e no geral também conterá um ou mais agentes emulsificantes, agentes estabilizantes, agentes dispersantes, agentes de suspensão ou agentes espessantes.

[00206] Pós para a aplicação externa podem ser formados com a ajuda de qualquer base de pó adequada, por exemplo, talco, lactose ou amido. Gotas podem ser formuladas com uma base aquosa ou não aquosa também compreendendo um ou mais agentes dispersantes, agentes solubilizantes, agentes de suspensão ou preservantes.

[00207] As preparações tópicas podem ser administradas por uma ou mais aplicações por dia à área afetada; curativos oclusivos de áreas sobre a pele podem ser vantajosamente usados. A liberação contínua ou prolongada pode ser obtida por um sistema de reservatório adesivo.

[00208] Para os tratamentos do olho ou outros tecidos externos, por exemplo boca e pele, as composições podem ser aplicadas como um unguento tópico ou creme. Quando formulado em um unguento, o composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável pode ser utilizado com uma base de unguento parafínica ou uma miscível em água. Alternativamente, o composto da fórmula (I) ou sal do mesmo farmaceuticamente aceitável pode ser formulado em um creme com uma base de creme de óleo em água ou uma base de água em óleo.

[00209] As composições farmacêuticas adaptadas para a administração parenteral incluem soluções de injeção estéril aquosas e não aquosas que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostatos e solutos que tornam a formulação isotônica com o sangue do receptor pretendido; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes. As composições podem ser apresentadas em recipientes de dose unitária ou dose múltipla, por exemplo ampolas e frascos selados, e podem ser armazenados em uma condição seca por congelamento (liofilizada) requerendo apenas a adição do carreador líquido estéril, por exemplo água para injeções, imediatamente antes do uso. As soluções e suspensões de injeção extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós estéreis, grânulos e tabletes.

[00210] O composto e formulações farmacêuticas de acordo com a invenção podem ser usados em combinação com ou incluem um ou mais outros agentes terapêuticos, por exemplo selecionado a partir de agentes anti- inflamatórios, agentes anticolinérgicos, agonistas do adrenorreceptor β2, antagonistas de leucotrieno (tais como montelukast, zafirlukast ou pranlukast), agentes anti-infecciosos, anti-histaminas, imunoterapia de antígeno, corticosteroides (tais como propionato de fluticasona, furoato de fluticasona, diproprionato de beclometasona, budesonida, ciclesonida, furoato de mometasona, triancinolona ou flunisolida), inibidores de iNOS, inibidores da triptase, inibidores de IKK2, inibidores de p38, inibidores de Syk, inibidores de elastase, antagonistas da beta-2 integrina, agonistas de adenosina a2a, antagonistas de quimiocina tais como antagonistas de CCR3 ou antagonistas de CCR4, inibidores da liberação de mediador (tais como cromoglicato de sódio), inibidores da 5-lipoxigenase (zyflo), antagonistas de DP1, antagonistas de DP2, inibidores de PDE4, inibidores da PI3-cinase, inibidores da PI4-cinase, inibidores de ITK, inibidores de LP (lisofosfatídico), inibidores de FLAP (proteína ativadora da 5-lipoxigenase) (tal como 3-(3- (terc-butiltio)-1-(4-(6-etoxipiridin-3-il)benzil)-5-((5-metilpiridin-2-il)metóxi)- 1H-indol-2-il)-2,2-dimetilpropanoato de sódio), DMARDs (fármacos anti- reumáticos modificadores de doença) (tais como metotrexato, leflunomida ou azatioprina), terapia de anticorpo monoclonal (tal como anti-TSLP, anti-IgE, anti-TNF, anti-IL-5, anti-IL-6, anti-IL-12 ou anti-IL-1), terapias de receptor (tais como etanercept), e/ou imunoterapias de antígeno não específicas (tais como interferon ou outras citocinas/quimiocinas, moduladores do receptor de citocina/quimiocina, agonistas ou antagonistas de citocina, ou agonistas de TLR).

[00211] A invenção provê assim, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um ou mais outros agentes terapeuticamente ativos, por exemplo selecionados a partir de um agente anti- inflamatório, um agente anticolinérgico, um agonista do adrenorreceptor β2, um antagonista de leucotrieno, um agente anti-infeccioso, uma anti-histamina, imunoterapia de antígeno, um corticosteroide, um inibidor de iNOS, um inibidor de triptase, um inibidor de IKK2, um inibidor de p38, um inibidor de Syk, um inibidor de elastase, um antagonista da beta-2 integrina, um agonista de adenosina a2a, um antagonista de quimiocina, um inibidor da liberação de mediador, um inibidor da 5-lipoxigenase, um antagonista de DP1, um antagonista de DP2, um inibidor de PDE4, um inibidor da PI3-cinase, um inibidor da PI4-cinase, um inibidor de ITK, um inibidor de LP (lisofosfatídico), um inibidor de FLAP (proteína ativadora da 5-lipoxigenase), um DMARD, terapia de anticorpo monoclonal, terapia de receptor, e/ou imunoterapia não específica de antígeno.

[00212] Em uma modalidade, a invenção abrange um método de tratar um distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase compreendendo administrar uma quantidade segura e eficaz de uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um ou mais agentes terapeuticamente ativos.

[00213] Certos compostos da invenção podem apresentar seletividade para PI3Kδ em relação a outras PI3-cinases. A invenção provê assim, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável que seja seletivo para PI3Kδ junto com um composto ou sal do mesmo farmaceuticamente aceitável que seja seletivo para uma outra PI3-cinase, por exemplo PI3KY.

[00214] Uma modalidade da invenção abrange combinações compreendendo um ou dois outros agentes terapêuticos.

[00215] Estará claro para uma pessoa habilitada na técnica que, onde apropriado, o(s) outro(s) ingrediente(s) terapêutico(s) pode(m) ser usado(s) na forma de sais, por exemplo como sais de metal alcalino ou amina ou como sais de adição de ácido, ou pró-fármacos, ou como ésteres, por exemplo ésteres de alquila inferior, ou como solvatos, por exemplo hidratos para aperfeiçoar a atividade e/ou estabilidade e/ou características físicas, tais como solubilidade, do ingrediente terapêutico. Estará claro também que, onde apropriado, os ingredientes terapêuticos podem ser usados na forma opticamente pura.

[00216] Em uma modalidade, a invenção abrange uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um agonista de β2-adrenoreceptor.

[00217] Os exemplos de agonistas de β2-adrenoreceptor incluem salmeterol (que pode ser um racemato ou um enantiômero único tal como o enantiômero R), salbutamol (que pode ser um racemato ou um enantiômero único tal como o enantiômero R), formoterol (que pode ser um racemato ou um diastereômero único tal como o diastereômero R,R), salmefamol, fenoterol carmoterol, etanterol, naminterol, clenbuterol, pirbuterol, flerbuterol, reproterol, bambuterol, indacaterol, terbutalina e sais dos mesmos, por exemplo o sal de xinafoato (1-hidróxi-2-naftalenocarboxilato) de salmeterol, o sal de sulfato ou base livre de salbutamol ou o sal de fumarato de formoterol. Em uma modalidade, agonistas do adrenorreceptor β2 de longa ação, por exemplo, compostos que proveem broncodilatação eficaz durante cerca de 12 horas ou mais longo, são preferidos.

[00218] Outros agonistas de adrenorreceptor β2 incluem aqueles descritos na WO 02/066422, WO 02/070490, WO 02/076933, WO 03/024439, WO 03/072539, WO 03/091204, WO 04/016578, WO 2004/022547, WO 2004/037807, WO 2004/037773, WO 2004/037768, WO 2004/039762, WO 2004/039766, WO 01/42193 e WO 03/042160.

[00219] Os exemplos de agonistas do adrenorreceptor β2 incluem: 3-(4-{[6-({(2R)-2-hidróxi-2-[4-hidróxi-3-(hidroximetil)fenil]- etil}amino)hexil]óxi}butil)benzenossulfonamida; 3-(3-{[7-({(2R)-2-hidróxi-2-[4-hidróxi-3-hidroximetil)fenil]- etil}amino)heptil]óxi}propil)benzenossulfonamida; 4-{(1R)-2-[(6-{2-[(2,6-diclorobenzil)óxi]etóxi}hexil)amino]- 1-hidroxietil}-2-(hidroximetil)fenol; 4-{(1R)-2-[(6-{4-[3-(ciclopentilsulfonil)fenil]butóxi}hexil)- amino]-1-hidroxietil}-2-(hidroximetil)fenol; N-[2-hidroxila-5-[(1R)-1-hidróxi-2-[[2-4-[[(2R)-2-hidróxi-2- feniletil]amino]fenil]etil]amino]etil]fenil]formamida; N-2{2-[4-(3-fenil-4-metoxifenil)aminofenil]etil}-2-hidróxi-2- (8-hidróxi-2(1H)-quinolino-5-il)etilamina; e 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propóxi)-fenilamino]- fenil}-etilamino)-1-hidróxi-etil]-8-hidróxi-1H-quinolin-2-ona.

[00220] O agonista do adrenorreceptor β2 pode estar na forma de um sal formado com um ácido farmaceuticamente aceitável selecionado a partir de ácido sulfúrico, clorídrico, fumárico, hidroxinaftoico (por exemplo 1- ou 3- hidróxi-2-naftoico), cinâmico, cinâmico substituído, trifenilacético, sulfâmico, sulfanílico, naftalenoacrílico, benzoico, 4-metoxibenzoico, 2- ou 4-hidróxi- benzoico, 4-clorobenzoico e 4-fenilbenzoico.

[00221] Em uma modalidade, a invenção abrange uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um antagonista de leucotrieno. Os antagonistas de leucotrieno adequados incluem, por exemplo, montelukast.

[00222] Os agentes anti-inflamatórios adequados incluem corticosteroides. Os corticosteroides adequados que podem ser usados em combinação com os compostos da fórmula (I) ou sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis são aqueles corticosteroides orais e inalados e seus pró-fármacos que têm atividade anti-inflamatória. Os exemplos incluem metil prednisolona, prednisolona, dexametasona, propionato de fluticasona, éster S-fluorometílico do ácido 6α,9α-difluoro-11β-hidr0xi-16α-metil-17α- [(4-metil-1,3-tiazol-5-carbonil)-0xi]-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17β- carbotioico, éster S-fluorometílico do ácido 6α,9α-difluoro-17α-[(2-furanil- carbonil)óxi]-11 β-hidr0xi-16α-metil-3-oxo-androsta-1,4-dieno- 17β- carbotioico (furoato de fluticasona), éster S-(2-oxo-tetraidro-furan-3S-ílico) do ácido 6α,9α-difluoro-11β-hidr0xi-16α-metil-3-oxo-17α-propionil0xi- androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico, éster S-cianometílico do ácido 6α,9α- difluoro-11e-hidróxi-16a-metil-3-oxo-17a-(2,2,3,3-tetrametilciclopropil- carbonil)0xi-androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico e éster S-fluorometílico do ácido 6α,9α-difluoro-11 β-hidr0xi-16α-metil- 17α-(1 -metilciclopropil- carbonil)0xi-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico, ésteres de beclometasona (por exemplo o éster de 17-propionato ou o éster de 17,21- dipropionato), budesonida, flunisolida, ésteres de mometasona (por exemplo furoato de mometasona), triancinolona acetonida, rofleponida, ciclesonida (16α,17-[ [(R )-ciclo-hexilmetileno]bis(óxi)] -11 β,21-di-hidr0xi-pregna-1,4- dieno-3,20-diona), propionato de butixocort, RPR-106541, e ST-126. Os corticosteroides preferidos incluem propionato de fluticasona, éster S- fluorometílico do ácido 6a,9a-difluoro-11e-hidróxi-16a-metil-17a-[(4-metil- 1,3-tiazol-5-carbonil)óxi]-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17e-carbotioico, éster S - fluorometílico do ácido 6a,9a-difluoro-17a-[(2-furanilcarbonil)óxi]-11e- hidróxi-16a-metil-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17e-carbotioico, éster S-ciano- metílico do ácido 6α,9α-difluoro-11β-hidr0xi-16α-metil-3-oxo-17α-(2,2,3,3- tetrametilciclopropilcarbonil)óxi-androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico e éster S -fluorometílico do ácido 6α,9α-difluoro-11β-hidr0xi-16α-metil-17α-(1- metilciclopropilcarbonil)0xi-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico. Em uma modalidade o corticosteroide é o éster S-fluorometílico do ácido 6α,9α- difluoro-17 a-[(2-furanilcarbonil)-óxi] -11 β-hidr0xi-16α-metil-3-oxo- androsta-1,4-dieno-17β-carbotioico.

[00223] Os exemplos de corticosteroides podem incluir aqueles descritos na WO2002/088167, WO2002/100879, WO2002/12265, WO2002/12266, WO2005/005451, WO2005/005452, WO2006/072599 e WO2006/072600.

[00224] Os compostos não esteroidais tendo agonismo ao glicocorticoide que pode possuir seletividade para a transrepressão em relação à transativação e que podem ser úteis em terapia de combinação incluem aqueles abrangidos nas seguintes patentes: WO03/082827, WO98/54159, WO04/005229, WO04/009017, WO04/018429, WO03/104195, WO03/082787, WO03/082280, WO03/059899, WO03/101932, WO02/02565, WO01/16128, WO00/66590, WO03/086294, WO04/026248, WO03/061651 e WO03/08277. Outros compostos não esteroidais são abrangidos na: WO2006/000401, WO2006/000398 e WO2006/015870.

[00225] Os exemplos de agentes anti-inflamatórios incluem fármacos anti-inflamatórios não esteroidais (NSAID’s).

[00226] Os exemplos de NSAID’s incluem cromoglicato de sódio, nedocromil sódico, inibidores da fosfodiesterase (PDE) (por exemplo, teofilina, inibidores de PDE4 ou inibidores de PDE3/PDE4 mistos), antagonistas de leucotrieno, inibidores da síntese de leucotrieno (por exemplo montelukast), triptase e inibidores da elastase, antagonistas da beta-2 integrina e agonistas ou antagonistas do receptor de adenosina (por exemplo agonistas de adenosina 2a), antagonistas de citocina, ou inibidores da síntese de citocina, ou inibidores da 5-lipoxigenase.

[00227] Em uma modalidade, a invenção provê o uso dos compostos da fórmula (I) em combinação com um inibidor da fosfodiesterase 4 (PDE4), especialmente no caso de uma formulação adaptada para inalação. O inibidor específico de PDE4 útil neste aspecto da invenção pode ser qualquer composto que seja conhecido inibir a enzima PDE4 ou que é descoberto atuar como um inibidor de PDE4, e que são apenas inibidores de PDE4, não compostos que inibem outros membros da família PDE, tais como PDE3 e PDE5, assim como PDE4.

[00228] Os compostos incluem o ácido cis-4-ciano-4-(3-ciclopentilóxi- 4-metoxifenil)ciclo-hexan-1-carboxílico, 2-carbometóxi-4-ciano-4-(3-ciclo- propilmetóxi-4-difluorometoxifenil)ciclo-hexan-1-ona e cis-[4-ciano-4-(3- ciclopropilmetóxi-4-difluorometoxifenil)ciclo-hexan-1-ol]. Também, o ácido cis-4-ciano-4-[3-(ciclopentilóxi)-4-metoxifenil]ciclo-hexano-1-carboxílico (também conhecido como cilomilast) e seus sais, ésteres, pró-fármacos ou formas físicas, que são descritos na patente U.S. 5.552.438 concedida em 03 de setembro, 1996; esta patente e os compostos que ela descreve são aqui incorporados integralmente por referência.

[00229] Outros compostos incluem AWD-12-281 da Elbion (Hofgen, N. et al. 15th EFMC Int Symp Med Chem (6 a 10 de setembro, Edinburgh) 1998, Abst P.98; referência CAS No. 247584020-9); um derivado de 9- benziladenina nomeado NCS-613 (INSERM); D-4418 da Chiroscience e Schering-Plough; um inibidor da benzodiazepina PDE4 identificado como CI1018 (PD-168787) e atribuído à Pfizer; um derivado de benzodioxol descrito pela Kyowa Hakko na WO99/16766; K-34 da Kyowa Hakko; V-11294A da Napp (Landells, L. J. et al. Eur Resp J [Annu Cong Eur Resp Soc (19 a 23 de setembro, Geneva) 1998] 1998, 12 (Supl. 28): Abst P2393); roflumilast (referência CAS No 162401-32-3) e uma ftalazinona (WO99/47505, a descrição da qual é por meio deste incorporada por referência) da Byk- Gulden; Pumafentrina, (-)-p-[(4aR*,10bS*)-9-etóxi-1,2,3,4,4a,10b-hexa- hidro-8-metóxi-2-metilbenzo[c][1,6]naftiridin-6-il]-N,N-di-iso- propilbenzamida que é um inibidor de PDE3/PDE4 misto que foi preparado e publicado pela Byk-Gulden, agora Altana; arofilina sob desenvolvimento pela Almirall-Prodesfarma; VM554/A565 da Vernalis; ou T-440 (Tanabe Seiyaku; Fuji, K. et al. J Pharmacol Exp Ther, 1998, 284(1): 162), e T2585.

[00230] Outros compostos são descritos no pedido de patente internacional publicado WO04/024728 (Glaxo Group Ltd), WO04/056823 (Glaxo Group Ltd) e WO04/103998 (Glaxo Group Ltd) (por exemplo Exemplos 399 ou 544 descritos no mesmo). Outros compostos também são descritos na WO2005/058892, WO2005/090348, WO2005/090353, e WO2005/090354, todas no nome da Glaxo Group Limited.

[00231] Os exemplos de agentes anticolinérgico são aqueles compostos que atuam como antagonistas nos receptores muscarínicos, em particular aqueles compostos que são antagonistas dos receptores de M1 ou M3, antagonistas duais dos receptores de M1/M3 ou M2/M3 ou pan-antagonistas dos receptores de M1/M2/M3. Os compostos exemplares para a administração via inalação incluem ipratrópio (por exemplo, como o brometo, CAS 2225424-6, vendido sob o nome Atrovent), oxitrópio (por exemplo, como o brometo, CAS 30286-75-0) e tiotrópio (por exemplo, como o brometo, CAS 136310-93-5, vendido sob o nome Spiriva). Também de interesse são revatropato (por exemplo, como o bromidreto, CAS 262586-79-8) e LAS- 34273 que é descrito na WO01/04118. Os compostos exemplares para a administração oral incluem pirenzepina (CAS 28797-61-7), darifenacina (CAS 133099-04-4, ou CAS 133099-07-7 para o bromidreto vendido sob o nome Enablex), oxibutinina (CAS 5633-20-5, vendido sob o nome Ditropan), terodilina (CAS 15793-40-5), tolterodina (CAS 124937-51-5, ou CAS 124937-52-6 para o tartarato, vendido sob o nome Detrol), otilônio (por exemplo, como o brometo, CAS 26095-59-0, vendido sob o nome Spasmomen), cloreto de tróspio (CAS 10405-02-4) e solifenacina (CAS 242478-37-1, ou CAS 242478-38-2 para o succinato também conhecido como YM-905 e vendido sob o nome Vesicare).

[00232] Os compostos adicionais são descritos na WO 2005/037280, WO 2005/046586 e WO 2005/104745, aqui incorporados por referência. As presentes combinações incluem, mas não são limitadas a: Iodeto de (3-endo)-3-(2,2-di-2-tieniletenil)-8,8-dimetil-8- azoniabiciclo[3,2,1]octano; Brometo de (3-endo)-3-(2-ciano-2,2-difeniletil)-8,8-dimetil-8- azoniabiciclo[3,2,1]octano; Brometo de 4-[hidróxi(difenil)metil]-1-{2-[(fenilmetil)óxi]- etil}-1-azoniabiciclo[2,2,2]octano; e Brometo de (1R,5S)-3-(2-ciano-2,2-difeniletil)-8-metil-8-{2- [(fenilmetil)óxi]etil}-8-azoniabiciclo[3,2,1]octano.

[00233] Outros agentes anticolinérgico incluem compostos que são descritos no pedido de patente US 60/487981 incluindo, por exemplo: Brometo de (3-endo)-3-(2,2-di-2-tieniletenil)-8,8-dimetil-8- azoniabiciclo[3,2,1]octano; Brometo de (3-endo)-3-(2,2-difeniletenil)-8,8-dimetil-8- azoniabiciclo[3,2,1]octano; 4-metilbenzenossulfonato de (3-endo)-3-(2,2-difeniletenil)- 8,8-dimetil-8-azoniabiciclo[3,2,1]octano; Brometo de (3-endo)-8,8-dimetil-3-[2-fenil-2-(2-tienil)etenil]- 8-azoniabiciclo[3,2,1]octano; e/ou Brometo de (3-endo)-8,8-dimetil-3-[2-fenil-2-(2-piridinil)- etenil]-8-azoniabiciclo[3,2,1]octano.

[00234] Outros agentes anticolinérgicos incluem compostos que são descritos no pedido de patente US 60/511009 incluindo, por exemplo: Iodeto de (endo)-3-(2-metóxi-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8- dimetil-8-azônia-biciclo[3,2,1]octano; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2-difenil- propionitrila; (endo)-8-metil-3-(2,2,2-trifenil-etil)-8-aza- biciclo[3,2,1]octano; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2-difenil- propionamida; Ácido 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2- difenil-propiônico; Iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8- azônia-biciclo[3,2,1]octano; Brometo de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8- azônia-biciclo[3,2,1]octano; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2-difenil- propan-1-ol; N-benzil-3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2- difenil-propionamida; Iodeto de (endo)-3-(2-carbamoil-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil- 8-azônia-biciclo[3,2,1]octano; 1-benzil-3-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2- difenil-propil]-ureia; 1-etil-3-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2- difenil-propil]-ureia; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2-difenil- propil]-acetamida; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2-difenil- propil]-benzamida; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2-di-tiofen-2- il-propionitrila; Iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8-dimetil- 8-azônia-biciclo[3,2,1]octano; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2-difenil- propil]-benzenossulfonamida; [3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2-difenil- propil]-ureia; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3,2,1]oct-3-il)-2,2-difenil- propil]-metanossulfonamida; e/ou brometo de (endo)-3-{2,2-difenil-3-[(1-fenil-metanoil)- amino]-propil}-8,8-dimetil-8-azônia-biciclo[3,2,1]octano.

[00235] Outros compostos incluem: Iodeto de (endo)-3-(2-metóxi-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8- dimetil-8-azônia-biciclo[3,2,1]octano; Iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8-azônia- biciclo[3,2,1]octano; Brometo de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8- azônia-biciclo[3,2,1]octano; Iodeto de (endo)-3-(2-carbamoil-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil- 8-azônia-biciclo[3,2,1]octano; Iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8-dimetil- 8-azônia-biciclo[3,2,1]octano; e/ou Brometo de (endo)-3-{2,2-difenil-3-[(1-fenil-metanoil)- amino]-propil}-8,8-dimetil-8-azônia-biciclo[3,2,1]octano.

[00236] Em uma modalidade a invenção provê uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um antagonista de H1. Os exemplos de antagonistas de H1 incluem, sem limitação, amelexanox, astemizol, azatadina, azelastina, acrivastina, bromfeniramina, cetirizina, levocetirizina, efletirizina, clorfeniramina, clemastina, ciclizina, carebastina, cipro- heptadina, carbinoxamina, descarboetoxiloratadina, doxilamina, dimetindeno, ebastina, epinastina, efletirizina, fexofenadina, hidroxizina, cetotifeno, loratadina, levocabastina, mizolastina, mequitazina, mianserina, noberastina, meclizina, norastemizol, olopatadina, picumast, pirilamina, prometazina, terfenadina, tripelenamina, temelastina, trimeprazina e triprolidina, particularmente cetirizina, levocetirizina, efletirizina e fexofenadina. Em uma outra modalidade a invenção provê uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um antagonista de H3 (e/ou agonista inverso). Os exemplos de antagonistas de H3 incluem, por exemplo, aqueles compostos descritos na WO2004/035556 e na WO2006/045416. Outros antagonistas do receptor de histamina que podem ser usados em combinação com os compostos da presente invenção incluem antagonistas (e/ou agonistas inversos) do receptor de H4, por exemplo, os compostos descritos em Jablonowski et al., J. Med. Chem. 46: 3957-3960 (2003).

[00237] Em uma modalidade a invenção provê uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um agente anti-infeccioso. O agente anti-infeccioso pode ser um antibiótico, um antiviral ou um antifúngico. Os exemplos de antibióticos adequados podem incluir amoxicilina/clavulanato, flucloxacilina, cefalexina, cefixima, eritromicina, ciprofloxacina e tobramicina. Os exemplos de antivirais adequados podem incluir oseltamivir, zanamivir e ribavirina. Os exemplos de antifúngicos adequados podem incluir fluconazol e itraconazol.

[00238] Em uma modalidade a combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um agente anti-infeccioso pode ser administrado pela inalação. Os exemplos de agentes anti-infecciosos particularmente adequados para a inalação incluem aqueles que podem ser inalados ou nebulizados, por exemplo, antibióticos tais como tobramicina ou ciprofloxacina, e antivirais tais como zanamivir ou ribavirina.

[00239] Em uma modalidade a invenção provê uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um agente anti-infeccioso que tem uma duração compatível de ação com o composto da fórmula (I). Pelo termo “duração compatível de ação” como aqui usado, é intencionado que a duração de ação é tal que ambos os compostos podem ser administrados para tratar um paciente particular, por exemplo, eles podem ser administrados o mesmo número de vezes cada dia tal como uma vez ao dia ou 2, 3, 4 ou 8 vezes.

[00240] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um inibidor de PDE4.

[00241] A invenção provê assim, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um agonista de adrenorreceptor β2.

[00242] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um antagonista de leucotrieno.

[00243] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um corticosteroide.

[00244] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um agonista GR não esteroidal.

[00245] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um anticolinérgico.

[00246] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com uma anti-histamina.

[00247] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um inibidor de PDE4 e um agonista de adrenorreceptor β2.

[00248] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um anticolinérgico e um inibidor de PDE-4.

[00249] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma combinação compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um agente anti-infeccioso.

[00250] As combinações aludidas acima podem ser convenientemente apresentadas para o uso na forma de uma composição farmacêutica e assim composições farmacêuticas compreendendo uma combinação como definidas acima junto com um diluente ou carreador farmaceuticamente aceitáveis representam um outro aspecto da invenção.

[00251] Os compostos individuais de tais combinações podem ser administrados sequencial ou simultaneamente em formulações farmacêuticas separadas ou combinadas. Em uma modalidade, os compostos individuais serão administrados simultaneamente em uma formulação farmacêutica combinada. As doses apropriadas de agentes terapêuticos conhecidos serão facilmente avaliadas por aqueles habilitados na técnica.

[00252] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um outro agente terapeuticamente ativo.

[00253] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um inibidor de PDE4.

[00254] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um agonista de adrenorreceptor β2.

[00255] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um antagonista de leucotrieno.

[00256] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um corticosteroide.

[00257] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um agonista GR não esteroidal.

[00258] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um anticolinérgico.

[00259] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com uma anti-histamina.

[00260] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um inibidor de PDE4 e um agonista de adrenorreceptor β2.

[00261] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um anticolinérgico e um inibidor de PDE4.

[00262] A invenção assim provê, em um outro aspecto, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um composto da fórmula (I) ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável junto com um agente anti-infeccioso.

[00263] A invenção será agora ilustrada por via dos seguintes exemplos não limitantes.

EXEMPLOS

[00264] Os seguintes exemplos ilustram a invenção. Estes exemplos não são intencionados limitar o escopo da presente invenção, mas ao invés prover orientação para o técnico habilitado para preparar e usar os compostos, composições, e métodos da presente invenção. Embora modalidades particulares da presente invenção sejam descritas, o técnico habilitado avaliará que várias mudanças e modificações podem ser feitas sem divergir do espírito e escopo da invenção.

[00265] Os nomes dos Exemplos foram obtidos usando um programa de nomeação de composto que casa a estrutura ao nome (por exemplo ACD/Name Batch v 9.0).

[00266] Quando o nome de um fornecedor comercial é dado depois do nome de um composto ou um reagente, isto significa que o composto é obtenível de um fornecedor comercial, tal como o fornecedor comercial mencionado. Se não aqui aludido o composto ou reagente podem ser adquiridos de um fornecedor padrão tal como Sigma Aldrich, Lancaster, Fluorochem, TCI etc.

Métodos Gerais LCMS (Espectrometria de Massa com Cromatografia Líquida)

[00267] A análise de LCMS foi realizada usando um dos seguintes métodos listados abaixo. Método de LCMS A

[00268] A análise de UPLC foi conduzida em uma coluna Acquity UPLC CSH C18 (50 mm x 2,1 mm d.i. 1,7 μm de diâmetro de empacotamento) a 40°C.

[00269] Os solventes utilizados foram: A = 0,1% v/v de solução de ácido fórmico em água. B = 0,1% v/v de solução de ácido fórmico em MeCN.

[00270] O gradiente utilizado foi:

[00271] A detecção de UV foi um sinal somado de comprimento de onda de 210 nm a 350 nm. Volume de injeção: 0,5 μL Condições de MS MS: Waters ZQ Modo de ionização: Eletropulverização Positiva e Negativa de Varredura Alternada Faixa de varredura: 100 a 1000 AMU Tempo de varredura: 0,27 s Demora Intervarredura: 0,10 s Método de LCMS B

[00272] A análise de UPLC foi conduzida em uma coluna Acquity UPLC CSH C18 (50 mm x 2,1 mm i.d. 1,7 μm de diâmetro de empacotamento) a 40°C.

[00273] Os solventes utilizados foram: A = 10 mM de bicarbonato de amônio em água ajustados ao pH 10 com solução de amônia. B = MeCN.

[00274] O gradiente utilizado foi:

[00275] A detecção de UV foi um sinal somado de comprimento de onda de 210 nm a 350 nm. Volume de injeção: 0,3 μL Condições de MS MS: Waters ZQ Modo de ionização: Eletropulverização Positiva e Negativa de Varredura Alternada Faixa de varredura: 100 a 1000 AMU Tempo de varredura: 0,27 s Demora Intervarredura: 0,10 s Método de LCMS C

[00276] A HPLC analítica foi conduzida em uma coluna X-Select CSH C18 XP (30 mm x 4,6 mm i.d. 2,5 μm de diâmetro de empacotamento) a 40°C.

[00277] Os solventes utilizados foram: A = 0,1% de amônia em água. B = 0,1% de amônia em MeCN.

[00278] O gradiente utilizado foi:

[00279] Os espectros de massa (MS) foram registrados em um espectrômetro de massa Waters ZQ usando modos de ionização positiva de eletropulverização ou ionização negativa de eletropulverização. Método de LCMS D

[00280] A HPLC analítica foi conduzida em uma coluna X-Select CSH C18 XP (30 mm x 4,6 mm i.d. 2,5 μm de diâmetro de empacotamento) a 40°C.

[00281] Os solventes utilizados foram: A = 0,1% de ácido fórmico em água. B = 0,1% de ácido fórmico em MeCN.

[00282] O gradiente utilizado foi:

[00283] Os espectros de massa (MS) foram registrados em um espectrômetro de massa Waters ZQ usando modos de ionização positiva de eletropulverização ou ionização negativa de eletropulverização. Método de LCMS E

[00284] A HPLC analítica foi conduzida em uma coluna X-Select CSH C18 XP (30 mm x 4,6 mm i.d. 2,5 μm de diâmetro de empacotamento) a 40°C.

[00285] Os solventes utilizados foram: A = 0,1% de ácido fórmico em água. B = 0,1% de ácido fórmico em MeCN.

[00286] O gradiente utilizado foi:

[00287] Os espectros de massa (MS) foram registrados em um espectrômetro de massa Waters ZQ usando modos de ionização positiva de eletropulverização ou ionização negativa de eletropulverização. Método de LCMS F

[00288] A HPLC analítica foi conduzida em uma XSelect CSH C18 (150 mm x 3,0 mm i.d. 2,5 μm de diâmetro de empacotamento) a 35°C.

[00289] Os solventes utilizados foram: A = 5 mM de bicarbonato de amônio em água. B = MeCN.

[00290] O gradiente utilizado foi: UV: 190 nm a 400 nm. Método de espectrometria de massa: MS: Detector de Massa Agilent SQD - 6130 Modo de ionização: Ionização de Eletropulverização (ESI) Comutação de Polaridade: Positivo/Negativo Faixa de varredura: 100-1000 Tamanho da Etapa: 0,10 Largura de pico: 0,080 min Método de LCMS G

[00291] A HPLC analítica foi conduzida em uma Acquity BEH C18 (50 mm x 2,1 mm i.d. 1,7 μm de diâmetro de empacotamento) a 35°C.

[00292] Os solventes utilizados foram: A = 0,05% de ácido fórmico em água. B = 0,05% de ácido fórmico em MeCN.

[00293] O gradiente utilizado foi: UV: 190 nm a 400 nm. Método de espectrometria de massa: MS: Detector de Massa Waters SQD - 3100 Modo de ionização: Ionização de Eletropulverização (ESI) Comutação de Polaridade: Positivo/Negativo Faixa de varredura: 100-1000 Tempo de varredura: 0,5 (s) Demora Intervarredura: 0,1 (s) Método de LCMS H

[00294] A HPLC analítica foi conduzida em uma Xbridge C18 (50 mm x 4,6 mm i.d. 2,5 μm de diâmetro de empacotamento) a 35°C.

[00295] Os solventes utilizados foram: A = 5 mM de bicarbonato de amônio em água (pH 10). B = MeCN.

[00296] O gradiente utilizado foi: Método de espectrometria de massa: MS: Waters TQD - Quattro micro API Modo de ionização: Ionização de Eletropulverização (ESI) Comutação de Polaridade: Positivo/Negativo Faixa de varredura: 100-1000 Tempo de varredura: 0,5 s Demora Intervarredura: 0,1 s Método de LCMS I

[00297] A HPLC analítica foi conduzida em uma Acquity BEH C18 (100 mm x 2,1mm i.d. 1,7 μm de diâmetro de empacotamento) a 50°C.

[00298] Os solventes utilizados foram: A = 0,1% TFA em água. B = 0,1% TFA em MeCN.

[00299] O gradiente utilizado foi: Método de espectrometria de massa: MS: Detector de Massa Waters SQD - 3100 Modo de ionização: Ionização de Eletropulverização (ESI) Comutação de Polaridade: Positivo/Negativo Faixa de varredura: 100-1000 Tempo de varredura: 0,5 s Demora Intervarredura: 0,1 s HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa

[00300] Os métodos para a HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa usada para a purificação de compostos são descritos abaixo: Coluna, condições e eluente da HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa Método A

[00301] Coluna: Coluna Xselect CSH C18 (150 mm x 30 mm i.d. 5 μm de diâmetro de empacotamento) na temperatura ambiente.

[00302] Os solventes utilizados foram: A = 10 mM de bicarbonato de amônio ajustados ao pH 10 com amônia em água. B = MeCN. Volume de injeção: 1 mL A detecção DAD foi de 210 nm a 350 nm. Condições de MS MS: Waters ZQ Modo de ionização: Eletropulverização Positiva/Negativa de Varredura Alternada Faixa de varredura: 100 a 1000 AMU Tempo de varredura: 0,50 s Demora Intervarredura: 0,2 s Método B

[00303] Coluna: Coluna Xselect CSH C18 (150 mm x 30 mm i.d. 5 μm de diâmetro de empacotamento) na temperatura ambiente.

[00304] Os solventes utilizados foram: A = 0,1% v/v de solução de ácido fórmico em água B = 0,1% v/v de solução de ácido fórmico em MeCN. Volume de injeção: 1 mL A detecção DAD foi de 210 nm a 350 nm. Condições de MS MS: Waters ZQ Modo de ionização: Eletropulverização Positiva/Negativa de Varredura Alternada Faixa de varredura: 100 a 1000 AMU Tempo de varredura: 0,50 s Demora Intervarredura: 0,2 s Método C

[00305] Coluna: Coluna Xselect CSH C18 (150 mm x 30 mm i.d. 5 μm de diâmetro de empacotamento) na temperatura ambiente.

[00306] Os solventes utilizados foram: A = 10 mM de bicarbonato de amônio em água ajustados ao pH 10 com amônia. B = MeCN. Volume de injeção: 3 mL A detecção de UV foi para um comprimento de onda de sinal a 254 nm. Condições de MS MS: Waters ZQ Modo de ionização: Eletropulverização Positiva/Negativa de Varredura Alternada Faixa de varredura: 100 a 1000 AMU Tempo de varredura: 0,50 s Demora Intervarredura: 0,2 s Coluna, condições e eluente da HPLC Preparativa

[00307] Os métodos para a HPLC Preparativa usados para a purificação de compostos são descritos abaixo: Método A: Coluna: Kromosil Fenil C18 (150 mm x 25 mm, 10 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 10 mM de bicarbonato de amônio (aquoso). Fase Móvel B: MeCN.

[00308] O gradiente utilizado foi: Método B: Coluna: Kromo Fenil hexil (150 mm x 30 mm, 5 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 10 mM de bicarbonato de amônio (aquoso). Fase Móvel B: MeCN.

[00309] A coluna foi eluída com 35% de solvente B em uma taxa de fluxo de 25 mL/min. Método C: Coluna: Xbridge C18 (250 mm x 30 mm, 5 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 10 mM de bicarbonato de amônio (aquoso) Fase Móvel B: MeCN:MeOH.

[00310] O gradiente utilizado foi: Método D: Coluna: Sunfire C18 (250 mm x 30 mm, 5 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 10 mM de bicarbonato de amônio (aquoso). Fase Móvel B: MeCN.

[00311] O gradiente utilizado foi: Método E: Coluna: Xbridge C18 (150 mm x 19 mm, 5 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 0,1% de ácido fórmico em água. Fase Móvel B: MeCN.

[00312] O gradiente utilizado foi: Método F: Coluna: Xbridge C18 (150 mm x 19 mm, 5 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 10 mM de bicarbonato de amônio (aquoso) Fase Móvel B: MeCN.

[00313] O gradiente utilizado foi: Método G: Coluna: Kinetex Fenil hexil (150 mm x 30 mm, 10 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 10 mM de bicarbonato de amônio (aquoso). Fase Móvel B: MeCN.

[00314] O gradiente utilizado foi: Método H: Coluna: Sunfire C18 (250 mm x 30 mm, 10 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 10 mM de bicarbonato de amônio (aquoso). Fase Móvel B: MeCN.

[00315] O gradiente utilizado foi: Método I: Coluna: Xbridge C18 (250 mm x 30 mm, 10 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 10 mM de bicarbonato de amônio (aquoso). Fase Móvel B: MeCN.

[00316] O gradiente utilizado foi: Método J: Coluna: Kinetex C-8 (150 mm x 30 mm, 10 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 10 mM de bicarbonato de amônio (aquoso). Fase Móvel B: MeCN.

[00317] O gradiente utilizado foi: Método K: Coluna: Fenomenex LUNA C18 (250 mm x 21,2 mm, 5 μm de diâmetro de empacotamento). Fase Móvel A: 10 mM de bicarbonato de amônio (aquoso). Fase Móvel B: MeCN.

[00318] O gradiente utilizado foi: Intermediário 1 N-(2-Bromopiridin-4-il)-2,5-dicloropiridino-3-sulfonamida

[00319] A uma solução de 2-bromopiridin-4-amina (75 g, 433 mmol) em piridina (750 mL) agitada sob nitrogênio a 0°C foi adicionado cloreto de 2,5-dicloropiridino-3-sulfonila (128 g, 520 mmol) às porções. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 16 h. Depois deste tempo, piridina foi evaporada sob pressão reduzida para obter um resíduo bruto que foi vertido em água gelada. O sólido resultante foi o sólido foi dissolvido em EtOAc (2 L) e a camada orgânica foi lavada com solução a 10% de EDTA (2 L). A fase orgânica foi secada em Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir o composto do título (120 g) como um sólido marrom. LCMS (Método G) Rt = 2,16 min, [M + H]+ = 381,9/383,9/385,9. Intermediário 2 N-(2-Bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00320] Solução de metóxido de sódio (30% p/p, 600 mL, 157 mmol) foi adicionada às gotas ao sólido N-(2-bromopiridin-4-il)-2,5-dicloropiridino- 3-sulfonamida (60 g, 157 mmol) agitado sob nitrogênio na temperatura ambiente. A mistura de reação foi depois agitada a 80°C por 1 h, depois esfriada até 0°C e extinta com solução a 20% do ácido cítrico (2 L). O sólido resultante foi coletado pela filtração e secado para produzir o composto do título (50 g) como um sólido marrom. LCMS (Método G) Rt = 2,31 min, [M + H]+ = 377,9/379,9 Intermediário 3 1-(3-Fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)-4- isopropilpiperazina Método A

[00321] A uma solução de 4-bromo-3-fluorobenzaldeído (100 g, 493 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (150 g, 591 mmol) em 1,4-dioxano (1000 mL) foi adicionado acetato de potássio (121 g, 1231 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada com argônio por 30 min depois aduto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (20,11 g, 24,63 mmol) foi adicionado. A mistura de reação resultante foi agitada a 100°C por 3 h. A mistura de reação foi deixada resfriar até a temperatura ambiente, depois filtrada através de celite e lavada com 10% de MeOH/DCM (2 L). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo bruto (140 g) como um líquido preto. O composto bruto acima (140 g), sulfato de sódio (80 g, 560 mmol) e 1-isopropilpiperazina (0,042 L, 280 mmol) em DCM (1,5 L) foram agitados por 30 min, depois triacetoxi-boro-hidreto de sódio (178 g, 840 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente por 4 h. A mistura de reação foi diluída com DCM (3 L) e extinta com solução aquosa de NaHCO3 (3 L). A camada orgânica foi separada, lavada com água (2 L), secada em Na2SO4 anidro, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter um resíduo bruto (180 g) como um líquido marrom. O composto bruto (180g) foi pré-absorvido em Florisil (250 g, 100 a 200 malhas) e purificado pela cromatografia de coluna de fase normal em Florisil (100 a 200 malhas, 2,5 kg) eluindo com hexano inicialmente, depois 5% de MeOH em DCM. As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (150 g) como um líquido amarelo claro.1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 7,56-7,61 (m, 1H), 7,13 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,04 (d, J=10,3 Hz, 1H), 3,46 (s, 2H), 2,54-2,63 (m, 1H), 2,29-2,46 (m, 8H), 1,29 (s, 12H), 0,94 (d, J=6,58 Hz, 6H). Método B

[00322] Carregar 4-bromo-3-fluorobenzaldeído (150,0 g), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (205,7 g) e 1,4- dioxano (1,5 L) em um vaso de reação, carregar KOAc (181,6 g) no vaso de reação, desgaseificar o vaso de reação com N2 três vezes, adicionar Pd(dppf)Cl2 (27,1 g) no vaso de reação, ajustar o vaso de reação de 90 a 100°C, de 90 a 100°C por 2 horas. Checar a reação com TLC até o desaparecimento de 4-bromo-3-fluorobenzaldeído (Fase móvel: acetato de etila a 10% em n-heptano, Rf = 0,6). Esfriar a mistura de reação de 20~25°C depois trocar o solvente para acetato de etila (1,5 L), filtrar a mistura através de celite (150,0 g), lavar o filtrado com água (300 ml x 3), combinar a fase orgânica e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (243,3 g) como óleo preto. O produto foi usado diretamente para a etapa seguinte.

[00323] Carregar 3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzaldeído (243,3 g), 1-isopropilpiperazina (103,9 g) e DCM (2,4 L) em um vaso de reação, agitar a mistura de reação de 20 a 30°C por 15 a 30 min, carregar NaBH(OAc)3 (410,5 g) no vaso de reação. Ajustar o vaso de reação para 20 a 30°C, agitar o vaso de reação de 20 a 30°C por 2 horas. Trocar o solvente de reação para acetato de etila e lavar com solução aq. a 5% de NaHCO3. Separar a fase orgânica e concentrar sob pressão reduzida para dar o composto do título (210 g, 78%th (porcentagem limite) para duas etapas) como óleo marrom. Método C

[00324] 4-bromo-3-fluorobenzaldeído (18,8 kg, 92,6 mol) foi dissolvido em 2-metiltetra-hidrofurano (86 kg) a cerca de 20°C. O acetato de potássio (23 kg) e 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (28,5 kg) foram adicionados em sequência e a reação foi agitada por 1 h a cerca de 25°C. O nitrato foi borbulhado através da mistura por 3 h a cerca de 25°C antes [1,1‘-Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) (0,7 kg) foi adicionado. O nitrato foi borbulhado através da mistura por um adicional de 3 h antes a mistura foi agitada por 7 h a cerca de 80°C. A temperatura foi reduzida até 25°C e água (95 kg) foi adicionada. Depois de agitar por 3 h a camada aquosa foi descartada. A camada orgânica concentrada para 18,8 a 37,6 L sob pressão reduzida enquanto se mantém a temperatura abaixo de 45°C. O 2-metiltetra-hidrofurano (136 kg) foi adicionado em duas porções durante a etapa de concentração. Depois da conclusão da etapa de concentração, 2-metiltetra-hidrofurano adicional (86 kg) foi adicionado.

[00325] 1-isopropilpiperazina (13,7 kg) foi adicionado à mistura em 3 h a cerca de 25°C, antes a mistura foi agitada por 1 h. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (50,8 kg) foi adicionado em porções e a mistura de reação foi agitada por 4,5 h a cerca de 28°C. Água (61 kg) foi adicionada em 5 h a cerca de 28°C e a mistura resultante foi agitada por 2 h. A solução aquosa a 30% de hidróxido de sódio (54 kg) foi adicionada até que o pH atingisse 7,0. A camada aquosa foi descartada, antes a camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa de 5% de bicarbonato de sódio e cloreto de sódio a 10% (76 kg). Finalmente, 151,8 kg de uma solução do composto do título (31,1 kg) em 2-metiltetra-hidrofurano foram obtidos em 93%th de rendimento. Intermediário 4 5-Cloro-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)- 2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00326] Uma mistura de N-(2-bromopiridin-4-il)-5-cloro-2- metoxipiridino-3-sulfonamida (35 g, 92 mmol), 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)-4-isopropilpiperazina (bruta) (56,9 g, 157 mmol) e Na2CO3 (39,2 g, 370 mmol) em isopropanol (300 mL) / água (150 mL) foi desgaseificada usando argônio por 20 min e aduto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (3,77 g, 4,62 mmol) foi depois adicionado. A mistura de reação foi mais uma vez desgaseificada por 30 min sob uma atmosfera de argônio e 'depois agitada sob argônio a 90°C por 3 h. A mistura de reação foi filtrada através de celite e o leito de celite foi lavado com 10% de MeOH em DCM (2 x 200 mL). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter um resíduo bruto que foi acidificado até o pH 1-2 com HCl 1 M (100 mL) e lavado com EtOAc (2 x 500 mL). A mistura foi agitada por 10 min e a camada orgânica foi separada. A fase aquosa foi ajustada até o pH 8-9 usando solução de amônia a 25% em água e o produto foi extraído com 0% de MeOH em DCM (2 x 1000 mL). Todos os extratos orgânicos foram combinados, secados em Na2SO4 anidro e filtrados. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir o composto do título (17,5 g) como um sólido branco. LCMS (Método I) Rt = 2,77 min, [M + H]+ = 534,3 Intermediário 5 N-(2-(4-((4-(terc-Butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-5- cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00327] Um frasco foi carregado com N-(2-bromopiridin-4-il)-5-cloro- 2-metoxipiridino-3-sulfonamida (2230 mg, 5,89 mmol), ácido (4-((4-(terc- butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)borônico (2600 mg, 8,84 mmol), carbonato de sódio (2498 mg, 23,57 mmol) e PdCl2(dppf) (431 mg, 0,589 mmol) em água (15 mL) e EtOH (15 mL). O frasco foi selado e a mistura de reação foi aquecida termicamente ao refluxo por 30 min. A mistura de reação foi filtrada em celite e a almofada de celite foi lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água 4:1 (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10):MeOH (25 mL) e eluído em uma coluna em gel de sílica C18 de fase reversa usando um gradiente de 5% a 55% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (3060 mg) como um sólido marrom amarelado. LCMS (Método B) Rt = 0,81 min, [M + H]+ = 548,1. Intermediário 6 Ácido (4-((4-(terc-butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)borônico

[00328] Ácido (2-fluoro-4-formilfenil)borônico (4996 mg, 29,8 mmol) e 1-(terc-butil)piperazina (4232 mg, 29,8 mmol) em DCM (70 mL) foram agitados por 30 min antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (7584 mg, 35,8 mmol). A solução resultante foi agitada por 18 h. A reação foi aquecida até 40°C e agitada com peneiras moleculares por 1 h. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (7584 mg, 35,8 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada por um adicional de 21 h. A mistura de reação foi depois concentrada sob pressão reduzida e eluída em uma coluna em gel de sílica C18 de fase reversa usando um gradiente de 0% a 20% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (5243 mg) como um sólido amarelo. LCMS (Método B) Rt = 0,64 min, [M + H]+ = 295,4. Intermediário 7 5-Cloro-N-(2-(4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metoxipiridino-3-sulfonamida

[00329] N-(2-Bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (390 mg, 1,030 mmol), 1-isopropil-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzil)piperazina (709 mg, 2,060 mmol) e complexo de cloreto de 2’-(dimetilamino)-2-bifenil-paládio (II) dinorbornilfosfina (57,7 mg, 0,103 mmol) e fosfato de tripotássio (656 mg, 3,09 mmol) foram adicionados a um frasco de micro-ondas e dissolvidos em EtOH (7 ml) e água (3 mL). O vaso de reação foi selado e aquecido em um Initiator Biotage até 130°C por 10 min. A mistura de reação foi filtrada através de celite, lavada com MeOH e concentrada a vácuo. Os resíduos foram dissolvidos em MeOH:DMSO 1:1 e purificados pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método C). O solvente foi evaporado a vácuo e o produto secado adicionalmente sob uma corrente de nitrogênio no aparelho de sopro Radleys para produzir o composto do título (255 mg). LCMS (Método B) Rt = 0,77 min, [M + H]+ = 516,5. Intermediário 8 1-Isopropil-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)piperazina

[00330] A uma suspensão de 2-(4-(bromometil)fenil)-4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (2 g, 6,73 mmol) e carbonato de potássio (1,210 g, 8,75 mmol) em DMF (20 mL) agitada na temperatura ambiente foi adicionada 1-isopropilpiperazina (1,349 mL, 9,43 mmol) às gotas. A mistura de reação foi aquecida até 80°C. Depois de 1 h, a reação foi esfriada e concentrada a vácuo. A mistura de reação foi dissolvida em EtOAc (100 mL), lavada com água (100 mL), a fase orgânica separada e a fase aquosa reextraída com EtOAc (2 x 100 mL). As fases orgânicas foram combinadas, secadas usando uma frita hidrofóbica e evaporadas a vácuo para produzir o composto do título (2,525 g) como um óleo marrom/alaranjado. LCMS (Método A) Rt = 0,62 min, [M + H]+ = 345,2. Intermediário 9

[00331] 5-Cloro-N-(2-(4-((dimetilamino)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metoxipiridino-3-sulfonamida

[00332] N-(2-Bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (665 mg, 1,229 mmol), N,N-dimetil-1-(4-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)metanamina (642 mg, 2,459 mmol), fosfato de tripotássio (783 mg, 3,69 mmol) e complexo de cloreto de 2’-(dimetilamino)- 2-bifenil-paládio (II) dinorbornilfosfina (34,5 mg, 0,061 mmol) foram adicionados a um frasco de micro-ondas e dissolvidos em EtOH (7 mL) e água (3 mL). O vaso de reação foi selado e aquecido em um Initiator Biotage até 130°C por 30 min. A reação foi esfriada e a mistura de reação foi filtrada através de celite, lavada com MeOH e concentrada a vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método C). O solvente foi evaporado a vácuo e o produto secado adicionalmente sob uma corrente de nitrogênio no aparelho de sopro Radleys para produzir o composto do título (104 mg). LCMS (Método B) Rt = 0,73 min, [M + H]+ = 433,4. Intermediário 10 N,N-Dimetil-1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)- metanamina

[00333] O cloridreto de dimetila (11,83 g, 145 mmol) e carbonato de potássio (27,9 g, 202 mmol) foram agitados juntos em acetona (250 mL) na temperatura ambiente por 10 min. Uma solução de 2-(4-(bromometil)fenil)- 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (5 g, 16,84 mmol) em acetona (50 mL) foi adicionada às gotas à mistura de reação em 20 min, e a mistura de reação foi deixada agitar por 66 h na temperatura ambiente. O solvente foi removido a vácuo e o resíduo foi diluído com água (60 mL) e extraído com EtOAc (5 x 100 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas usando uma frita hidrofóbica e o solvente foi removido a vácuo para produzir o composto do título (2,89 g). LCMS (Método B) Rt = 1,25 min, [M + H]+ = 262,5. Intermediário 11 5-Cloro-N-(2-(3-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)- 2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00334] Um frasco foi carregado com N-(2-bromopiridin-4-il)-5-cloro- 2-metoxipiridino-3-sulfonamida (0,98 g, 2,59 mmol), ácido (3-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)borônico (2,33 g, 4,16 mmol), fosfato de tripotássio (1,06 g, 4,99 mmol) e Paladaciclo XPhos (0,19 g, 0,257 mmol) em EtOH 4:1:água (12,5 mL). O vaso de reação foi selado e aquecido termicamente até 130°C durante a noite. A reação foi interrompida, a mistura de reação filtrada através de celite, lavada com MeOH (60 mL) e o solvente removido a vácuo. O resíduo foi carregado em DMSO e purificado pela cromatografia de coluna (C18) de fase reversa eluindo com um gradiente de 0 a 40% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e evaporadas a vácuo para produzir o composto do título (598 mg) como um sólido off-white. LCMS (Método A) Rt = 0,59 min, [M + H]+ = 534,4. Intermediário 12 Ácido (3-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)borônico

[00335] A uma suspensão de ácido 3-fluoro-4-formilfenil)borônico (1,05 g, 6,25 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionada 1-isopropilpiperazina (0,92 mL, 6,43 mmol) e a solução resultante foi deixada agitar por 1 h, tempo no qual triacetoxiboro-hidreto de sódio (2,01 g, 9,48 mmol) foi adicionado às porções em 5 min. A mistura foi deixada agitar por 4 h depois concentrada a vácuo para produzir o produto do título (3,91 g) como uma goma amarela. LCMS (Método B) Rt = 0,66 min, [M + H]+ = 281,4. Intermediário 13 N-(2-(4-((4-(terc-Butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-5-cloro-2- metoxipiridino-3 - sulfonamida

[00336] Um frasco de micro-ondas foi carregado com N-(2- bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (340 mg, 0,898 mmol), 1-(terc-butil)-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-benzil) piperazina (482 mg, 1,345 mmol), PdCl2(dppf) (66 mg, 0,090 mmol), Na2CO3 (295 mg, 2,78 mmol), 1,4-dioxano (4 mL) e água (1 mL). O frasco foi selado e a mistura de reação foi aquecida a 100°C por 30 min no sistema de microondas Biotage. A mistura de reação foi filtrada em celite e a almofada de celite foi lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em DCM:MeOH 1:4 (~ 5 mL) e carregado em um samplet, que foi secado sob um alto vácuo por 1 h. O samplet foi depois carregado em um cartucho de sílica de fase reversa C18 e eluído com um gradiente de 15% a 55% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações coletadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (360 mg) como um sólido marrom. LCMS (Método B) Rt = 0,80 min, [M + H]+ = 530,3. Intermediário 14 1-(terc-Butil)-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil) piperazina

[00337] Uma mistura de 2-(4-(bromometil)fenil)-4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolano (0,5 g, 1,684 mmol) e carbonato de sódio (0,232 g, 2,189 mmol) em acetona (4 mL) foi tratada às gotas com uma solução de 1-(terc- butil)piperazina (0,239 g, 1,684 mmol) em acetona (1 mL). A mistura de reação foi agitada por 24 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e particionada entre solução de NaCl saturada:água 2:1 (30 mL) e EtOAc (50 mL). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída adicionalmente com EtOAc (50 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas usando uma frita hidrofóbica e concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (482 mg) como um sólido amarelo claro que solidificou durante a noite. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 7,62 (d, J=8,0 Hz, 2H), 7,29 (d, J=8,0 Hz, 2H), 3,44 (s, 2H), 2,49 (br. s, 4H), 2,34 (br. s., 4H), 1,27-1,30 (m, 12H), 0,98 (s, 9H). Intermediário 15 5-Cloro-N-(2-(4-((4-ciclobutilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metoxipiridino-3 - sulfonamida

[00338] Um frasco de micro-ondas foi carregado com N-(2- bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (267 mg, 0,705 mmol), 1-ciclobutil-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil) - piperazina (377 mg, 1,058 mmol), PdCl2(dppf) (52 mg, 0,071 mmol), Na2CO3 (233 mg, 2,198 mmol), 1,4-dioxano (4 mL) e água (1 mL). O frasco foi selado e a mistura de reação foi aquecida a 100°C por 30 min no sistema de microondas Biotage. A mistura de reação foi filtrada em celite e a almofada de celite foi lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em DCM:MeOH 1:4 (~ 5 mL), carregado em um samplet, que foi secado sob um alto vácuo por 1 h. O samplet foi depois carregado em um cartucho de sílica de fase reversa C18 e eluído com um gradiente de 15% a 55% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações coletadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (207 mg) como um sólido marrom. LCMS (Método B) Rt = 0,83 min, [M + H]+ = 528,3. Intermediário 16 1-Ciclobutil-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)- piperazina

[00339] Uma mistura de 2-(4-(bromometil)fenil)-4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolano (0,5 g, 1,684 mmol) e carbonato de sódio (0,589 g, 5,56 mmol) em acetona (4 mL) foi tratada às gotas com uma solução de 1- ciclobutilpiperazina, dicloridreto (0,359 g, 1,684 mmol) em acetona (1 mL). A mistura de reação foi agitada por 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e particionada entre solução de NaCl saturada:água 2:1 (50 mL) e EtOAc (60 mL). A camada aquosa foi extraída adicionalmente com EtOAc (50 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas usando uma frita hidrofóbica e concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (377 mg) como um sólido off-white. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 7,62 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,29 (d, J=8,1 Hz, 2H), 3,46 (s, 2H), 2,61-2,73 (m, 1H), 2,11-2,45 (m, 8H), 1,87-1,97 (m, 2H), 1,67-1,81 (m, 2H), 1,56-1,66 (m, 2H), 1,28 (s, 12H). Intermediário 17 5-Cloro-N-(2-(2,6-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00340] Um frasco de micro-ondas foi carregado com N-(2- bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (200 mg, 0,528 mmol), 1-(3,5-difluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil) - 4-isopropilpiperazina (300 mg, 0,789 mmol), PdCl2(dppf) (40 mg, 0,055 mmol), Na2CO3 (192 mg, 1,812 mmol), 1,4-dioxano (4 mL) e água (1 mL). O frasco foi selado e a mistura de reação foi aquecida a 100°C por 30 min em um sistema de micro-ondas biotage. Uma outra porção de PdCl2(dppf) (40 mg, 0,055 mmol) foi adicionada, o frasco foi selado e a mistura de reação foi aquecida a 130°C por 45 min em um sistema de micro-ondas biotage. As porções adicionais de PdCl2(dppf) (40 mg, 0,055 mmol) e 1-(3,5-difluoro-4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)-4-isopropilpiperazina (200 mg) foram adicionadas, o frasco foi selado e a mistura de reação foi aquecida a 150°C por 2 h em um sistema de micro-ondas biotage. A mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela cromatografia de sílica de fase reversa C18 eluindo com um gradiente de 5% a 85% de MeCN (contendo ácido fórmico a 0,1%) em água (contendo ácido fórmico a 0,1%). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o produto bruto (37 mg, provavelmente na forma de ácido fórmico) como um vidro amarelo.

[00341] A reação foi repetida para obter mais material: um frasco de micro-ondas foi carregado com N-(2-bromopiridin-4-il)-5-cloro-2- metoxipiridino-3-sulfonamida (200 mg, 0,528 mmol), 1-(3,5-difluoro-4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)-4-isopropilpiperazina (300 mg, 0,789 mmol), PdCl2(dppf) (40 mg, 0,055 mmol), Na2CO3 (192 mg, 1,812 mmol), 1,4-dioxano (4 mL) e água (1 mL). O frasco foi selado e a mistura de reação foi aquecida a 150°C por 120 min em um sistema de micro-ondas biotage. A mistura de reação foi filtrada em celite e lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Os resíduos foram purificados pela cromatografia de sílica de fase reversa C18 eluindo com um gradiente de 5% a 85% de MeCN (contendo ácido fórmico a 0,1%) em água (contendo ácido fórmico a 0,1%). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o produto bruto (54 mg, provavelmente sal de ácido fórmico).

[00342] Os produtos brutos combinados foram purificados pela cromatografia em sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 5% a 85% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10) para produzir, depois da concentração das frações desejadas sob pressão reduzida, o composto do título (75 mg) como um sólido off-white. LCMS (Método A) Rt = 0,63 min, [M + H]+ = 552,4. Intermediário 18 1-(3,5-Difluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)-4-isopropilpiperazina

[00343] 3,5-Difluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzaldeído (1 g, 3,73 mmol) e 1-isopropilpiperazina (0,534 mL, 3,73 mmol) foram agitados em DCM (20 mL) e ácido acético (0,200 mL) por 10 min na temperatura ambiente. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,186 g, 5,60 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 72 h na temperatura ambiente sob uma atmosfera de nitrogênio. O solvente foi removido a vácuo e o resíduo foi diluído com água (30 mL) e basificado até o pH 14 usando solução de NaOH 2 M. A fase aquosa foi extraída com DCM (3 x 30 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas usando uma frita hidrofóbica e o solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi tentado ser triturado com DCM (30 mL), mas nenhum precipitado foi formado. O solvente foi removido a vácuo para produzir o composto do título (1,220 g) como um óleo amarelo claro. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ (ppm) 6,86 (d, J=8,3 Hz, 2H), 3,46 (s, 2H), 2,61-2,71 (m, 1H), 2,41-2,60 (m, 8H), 1,38 (s, 12H), 1,05 (d, J=6,6 Hz, 6H). Intermediário 19 N-(2-(4-((4-(sec-Butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-5-cloro-2- metoxipiridino-3 – sulfonamida

[00344] 1-(sec-Butil)-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzil)piperazina (885 mg, 2,469 mmol), N-(2-bromopiridin-4-il)-5-cloro- 2-metoxipiridino-3-sulfonamida (850 mg, 2,245 mmol), Paladaciclo XPhos (166 mg, 0,224 mmol) e carbonato de sódio (952 mg, 8,98 mmol) foram adicionados a um frasco de micro-ondas seguidos por EtOH (6 mL) e água (2 mL). O frasco foi selado e aquecido até 100°C por 30 min em um aparelho de micro-ondas. A mistura de reação foi depois concentrada a vácuo e particionada entre EtOAc (200 mL) e hidrogeno carbonato de sódio aquoso saturado (200 mL), a fase aquosa foi separada e extraída com mais EtOAc (200 mL). As frações orgânicas combinadas foram depois passadas através de uma frita hidrofóbica e concentradas a vácuo para dar uma goma laranja. O resíduo (dissolvido em DMSO (~ 3 mL)) foi purificado pela cromatografia em sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 5% a 45% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10) para produzir, depois da concentração das frações desejadas sob pressão reduzida, o composto do título (591 mg). LCMS (Método B) Rt = 0,90 min, [M + H]+ = 530,4. Intermediário 20 1-(sec-Butil)-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)- piperazina

[00345] 1-(sec-Butil)piperazina (disponível da Fluorochem, 620 μl, 4,20 mmol) foi dissolvida em acetona (20 mL), carbonato de potássio (1,117 g, 8,08 mmol) foi adicionado e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente por 10 min. 2-(4-(Bromometil)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolano (1,2 g, 4,04 mmol) em acetona (20 mL) foi adicionado às gotas e a mistura de reação continuou a agitar na temperatura ambiente por um adicional de 90 min. A mistura de reação foi depois concentrada a vácuo e particionada entre EtOAc (100 mL) e NaCl aquoso (100 mL), a fase aquosa foi separada, extraída com mais EtOAc (100 mL), os extratos orgânicos combinados foram secados usando uma frita hidrofóbica e concentrados a vácuo para produzir o composto do título (1,715 g, usando o bruto na reação seguinte). LCMS (Método B) Rt = 1,49 min, [M + H]+ = 359,3, 65% a/a, e Rt = 0,82 min, [M + H]+ = 277,1, 32% a/a, correspondendo ao ácido borônico percursor (acreditado ser formado na LCMS pela hidrólise). Intermediário 21 5-Cloro-N-(2-(2-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metoxipiridino-3-sulfonamida

[00346] N-(2-Bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (153 mg, 0,404 mmol), ácido (2-fluoro-4-(pirrolidin-1- ilmetil)fenil)borônico (117 mg, 0,525 mmol), carbonato de sódio (168 mg, 1,585 mmol) e Paladaciclo XPhos (30 mg, 0,041 mmol) foram adicionados a um frasco de micro-ondas seguidos por EtOH (3 mL) e água (1 mL). O frasco foi selado e aquecido em um micro-ondas biotage até 100°C por 30 min. As porções adicionais do ácido (2-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)-borônico (117 mg, 0,525 mmol) e Paladaciclo XPhos (30 mg, 0,041 mmol) foram adicionados e a mistura de reação aquecida no micro-ondas a 100°C por 45 min. A mistura de reação foi concentrada a vácuo e purificada pela cromatografia em sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 20% a 40% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (102 mg) como uma goma incolor. LCMS (Método A) Rt = 0,55 min, [M + H]+ = 477,3. Intermediário 22 Ácido (2-Fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)borônico

[00347] A uma suspensão do ácido (2-fluoro-4-formilfenil)borônico (3,3 g, 19,65 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionada na temperatura ambiente pirrolidina (1,640 mL, 19,65 mmol). Triacetoxiboro-hidreto de sódio (5,00 g, 23,58 mmol) foi depois adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente por 18 h. O produto bruto foi filtrado em uma almofada pequena de sílica, eluindo com DCM-MeOH (85:1). O filtrado foi evaporado até a secura para produzir o composto do título (1,1 g) como um óleo amarelo. LCMS (Método C) Rt = 1,04 min, [M + H]+ = 224,2. Intermediário 23 5-Cloro-N-(2-(3-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metoxipiridino-3-sulfonamida

[00348] 1-(2-Fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzil)pirrolidina (184 mg, 0,602 mmol), N-(2-bromopiridin-4-il)-5-cloro- 2-metoxipiridino-3-sulfonamida (152 mg, 0,401 mmol), carbonato de sódio (172 mg, 1,623 mmol) e PdCl2(dppf) (42 mg, 0,051 mmol) foram adicionados a um frasco de micro-ondas seguidos por dioxano (4 mL) e água (1 mL). O frasco foi selado e aquecido em um micro-ondas biotage até 100°C por 30 min. Uma outra porção de N-(2-bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino- 3-sulfonamida (60 mg, 0,158 mmol) foi adicionada e o frasco foi selado e aquecido em um micro-ondas biotage até 100°C por 15 min. A mistura de reação foi concentrada a vácuo e purificada pela cromatografia em sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 20% a 40% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (84 mg) como uma goma incolor. LCMS (Método A) Rt = 0,58 min, [M + H]+ = 477,3. Intermediário 24 1-(2-Fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)pirrolidina

[00349] 1-(4-Bromo-2-fluorobenzil)pirrolidina (3,4 g, 13,17 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (3,68 g, 14,49 mmol), o acetato de potássio (2,6 g, 26,5 mmol) e PdCl2(dppf) (0,080 g, 0,109 mmol) foram selados dentro de um frasco de micro-ondas. 1,4-Dioxano (20 mL) foi adicionado e a mistura de reação foi evacuada e purgada 5 vezes com nitrogênio. A mistura de reação foi aquecida até 100°C sob uma atmosfera de nitrogênio por 6 h. A mistura de reação foi deixada para atingir temperatura ambiente. Água foi adicionada e o produto foi extraído com DCM (3 x 100 mL). A fase orgânica foi secada em Na2SO4, filtrada e evaporada até a secura. O produto foi purificado pela cromatografia em gel de sílica eluindo com um gradiente de 0 a 5% de MeOH em DCM. As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo. A trituração do resíduo em pentano produziu o composto do título (800 mg) como um pó creme. LCMS (Método D) Rt = 1,64 min, [M + H]+ = 306,3. Intermediário 25 1-(4-Bromo-2-fluorobenzil)pirrolidina

[00350] Pirrolidina (1,4 g, 19,68 mmol) e carbonato de potássio (5,16 g, 37,3 mmol) foram misturados em acetona (100 mL) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 15 min. Uma solução de 4-bromo-1- (bromometil)-2-fluorobenzeno (4 g, 14,93 mmol) em acetona (25 mL) foi adicionado às gotas em 20 min. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 1 h. O solvente foi removido a vácuo, vertido em água (300 mL), e o produto foi extraído com DCM (2 x 100 mL). A fase orgânica foi secada em Na2SO4, separada por filtração e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado pela cromatografia de sílica eluindo com um gradiente de 0 a 5% de MeOH em DCM. As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (3,4 g) como um óleo amarelo. LCMS (Método D) Rt = 0,96 min, [M + H]+ = 258,0/260,0. Intermediário 26 5-Cloro-N-(2-(3,5-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00351] N-(2-Bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (150 mg, 0,396 mmol), ácido (3,5-difluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)borônico (154 mg, 0,515 mmol), carbonato de sódio (168 mg, 1,585 mmol) e Paladaciclo XPhos (29 mg, 0,039 mmol) foram adicionados a um frasco de micro-ondas seguidos por EtOH (3 mL) e água (1 mL). O frasco foi selado e aquecido em um micro-ondas biotage até 100°C por 30 min. As porções adicionais do ácido (3,5-difluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)borônico (154 mg, 0,515 mmol), Paladaciclo XPhos (29 mg, 0,039 mmol) e EtOH (3 mL) foram adicionadas. O frasco foi selado e aquecido em um micro-ondas biotage 100°C por 30 min. A mistura de reação foi depois concentrada a vácuo e purificada pela cromatografia de sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 25% a 45% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (102 mg) como um sólido branco. LCMS (Método A) Rt = 0,66 min, [M + H]+ = 552,5. Intermediário 27 Ácido (3,5-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)borônico

[00352] A uma suspensão do ácido (3,5-difluoro-4- formilfenil)borônico (3 g, 16,14 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionada na temperatura ambiente 1-isopropilpiperazina (2,069 g, 16,14 mmol). Triacetoxiboro-hidreto de sódio (4,10 g, 19,36 mmol) foi depois adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente por 18 h. A mistura de reação foi filtrada em uma almofada pequena de sílica, eluindo com DCM-MeOH (85:15). O solvente foi evaporado até a secura para produzir o composto do título (1,4 g) como um óleo amarelo. LCMS (Método E) Rt = 1,35 min, [M + H]+ = 299,1. Intermediário 28 5-Cloro-2-metóxi-N-(2-(4-((4-(oxetan-3-il)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin- 4-il)piridino-3-sulfonamida

[00353] Um frasco de micro-ondas foi carregado com N-(2- bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (98 mg, 0,259 mmol), 1-(oxetan-3-il)-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzil)piperazina (138 mg, 0,385 mmol), PdCl2(dppf) (20 mg, 0,027 mmol) e carbonato de sódio (119 mg, 1,123 mmol) em 1,4-dioxano 4:1:água (1,25 mL). O vaso de reação foi selado e aquecido em um Micro-onda Initiator Biotage até 130°C por 30 min. Depois de esfriar, a mistura de reação foi filtrada através de celite, o sólido lavado com MeOH (40 mL) e o filtrado concentrado a vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (2 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). O solvente foi evaporado a vácuo para produzir o composto do título (89 mg) como um sólido branco. LCMS (Método A) Rt = 0,52 min, [M + H]+ = 530,4. Intermediário 29 1-(Oxetan-3-il)-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)- piperazina

[00354] A uma solução agitada de 1-(oxetan-3-il)piperazina (152 mg, 1,069 mmol) em acetona (5 mL) foi adicionado carbonato de potássio (265 mg, 1,917 mmol) e a mistura deixada por 15 min quando 2-(4- (bromometil)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (200 mg, 0,673 mmol) foi adicionado. Depois de 2 h, a reação foi interrompida, o solvente removido a vácuo, a mistura redissolvida em EtOAc (20 mL), particionada com água (20 mL) e basificada até o pH 9 com hidrogeno carbonato de sódio aquoso. A camada orgânica foi isolada, o aquoso foi reextraída com EtOAc (20 mL), os orgânicos foram combinados, filtrados usando uma frita hidrofóbica e o solvente removido a vácuo para produzir o composto do título (219 mg) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm) 7,62 (d, J=8,0 Hz, 2H), 7,30 (d, J=8,0 Hz, 2H), 4,50 (t, J=6,3 Hz, 2H), 4,40 (t, J=6,3 Hz, 2H), 3,48 (s, 2H), 3,34-3,42 (m, 1H), 2,16-2,45 (m, 8H), 1,29 (s, 12H). Intermediário 30 5-Cloro-N-(2-(2,3-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00355] Ácido (2,3-Difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)borônico (409 mg, cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (525 mg, 1,387 mmol), carbonato de sódio (419 mg, 3,95 mmol) e Paladaciclo XPhos (101 mg, 0,137 mmol) foram adicionados a um frasco de micro-ondas seguidos por EtOH (3 mL) e água (1 mL). O frasco foi selado e aquecido em um micro-ondas a 100°C por 1 h. MeOH (20 mL) foi adicionado e a solução foi filtrada através de celite seguida pela elução com MeOH (20 mL). O solvente foi evaporado a vácuo e o resíduo purificado pela cromatografia de sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 20% a 55% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (359 mg) como uma goma amarela clara. LCMS (Método B) Rt = 0,81 min, [M + H]+ = 552,5. Intermediário 31 Ácido (2,3-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)borônico

[00356] 1-(4-Bromo-2,3-difluorobenzil)-4-isopropilpiperazina (804 mg, 2,413 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (735 mg, 2,90 mmol), o acetato de potássio (592 mg, 6,03 mmol), PdCl2(dppf) (88 mg, 0,121 mmol) e 1,4-dioxano (4 mL) foram adicionados a um frasco de micro-ondas. O frasco foi selado, aquecido no instrumento de micro-ondas até 100°C por 3 h. MeOH (10 mL) foi adicionado e a mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com MeOH (30 mL). O solvente foi evaporado e o resíduo purificado pela cromatografia de sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 5% a 60% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (409 mg) como um óleo amarelo.1H RMN (400 MHz, CDCl3) includes δ (ppm) 7,38-7,48 (m, 1H), 7,10-7,21 (m, 1H), 3,64 (t, J=1,7 Hz, 2H), 2,63-2,71 (m, 1H), 2,56 (br. s., 8H), 1,06 (dd, J=1,1, 6,5 Hz, 6H). Intermediário 32 1-(4-Bromo-2,3-difluorobenzil)-4-isopropilpiperazina

[00357] 1-Isopropilpiperazina (0,65 mL, 4,54 mmol) e 4-bromo-2,3- difluorobenzaldeído (1 g, 4,52 mmol) foram dissolvidos em DCM (10 mL) e agitados ao ar na temperatura ambiente por 15 min. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,439 g, 6,79 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada por 2 h. A mistura de reação foi deixada repousar durante o final de semana. Hidrogeno carbonato de sódio aquoso saturado (20 mL) foi depois adicionado e a fase aquosa foi separada e extraída com DCM (3 x 20 mL). As soluções orgânicas combinadas foram secadas em sulfato de sódio, filtradas e concentradas a vácuo. O produto bruto foi purificado pela cromatografia de sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 40% a 95% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (804 mg) como um sólido amarelo claro. LCMS (Método A) Rt = 0,59 min, [M + H]+ = 333,3 / 335,3. Intermediário 33 5-Cloro-N-(2-(2-fluoro-4-((4-(oxetan-3-il)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00358] A uma solução agitada de 5-cloro-N-(2-(2-fluoro-4- formilfenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (102 mg, 0,242 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionada 1-(oxetan-3-il)piperazina (42 mg, 0,295 mmol) em DCM (2 mL) e 3 gotas do ácido acético. A reação foi deixada agitar por 1 h, quando triacetoxiboro-hidreto de sódio (84 mg, 0,396 mmol) foi adicionado em uma porção. Depois de 4 h, o solvente foi removido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (2 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). O solvente foi secado sob uma corrente de nitrogênio no aparelho de sopro Radleys para produzir o composto do título (68 mg) como um sólido branco. LCMS (Método A) Rt = 0,54 min, [M + H]+ = 548,4. Intermediário 34 5-Cloro-N-(2-(2-fluoro-4-formilfenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida

[00359] Um frasco de micro-ondas foi equipado com N-(2- bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (500 mg, 1,321 mmol), ácido (2-fluoro-4-formilfenil)borônico (444 mg, 2,64 mmol), fosfato de tripotássio (841 mg, 3,96 mmol) e complexo de cloreto de 2'- (dimetilamino)-2-bifenilil-paládio (II) dinorbornilfosfina (74,0 mg, 0,132 mmol) em EtOH 3:1:água (1,3 mL). O vaso de reação foi selado e aquecido em um Micro-onda Initiator Biotage até 120°C por 20 min. Depois de esfriar a reação, a mistura de reação foi filtrada através de celite, lavada através de celite com MeOH (20 mL) e o solvente removido a vácuo para produzir o produto bruto como um óleo marrom. A amostra foi pré-absorvida em florosil e purificada pela cromatografia de sílica eluindo com um gradiente de 0 até 10% de MeOH em DCM. As frações apropriadas foram combinadas e evaporadas a vácuo para produzir o composto do título (331 mg) como um sólido amarelo. LCMS (Método A) Rt = 0,98 min, [M + H]+ = 422,3. Intermediário 35 5-Cloro-N-(2-(4-((4-ciclobutilpiperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)- 2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00360] A uma solução agitada de 5-cloro-N-(2-(2-fluoro-4- formilfenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (103 mg, 0,244 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado dicloridreto de 1-ciclobutil-piperazina (disponível da Key Organics, 60 mg, 0,281 mmol) em DCM (2 mL) e 3 gotas do ácido acético. A reação foi deixada agitar por 1 h, quando triacetoxiboro- hidreto de sódio (85 mg, 0,401 mmol) foi adicionado em uma porção. Depois de 4 h, uma porção adicional de dicloridreto de 1-ciclobutilpiperazina (60 mg, 0,281 mmol) foi adicionada e a reação foi deixada agitar durante a noite. O solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (2 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). O solvente foi evaporado a vácuo para produzir o composto do título (61 mg) como um sólido off-white. LCMS (Método A) Rt = 0,60 min, [M + H]+ = 546,3. Intermediário 36 5-Cloro-N-(2-(2,5-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00361] N-(2-Bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (450 mg, 1,188 mmol), carbonato de sódio (520 mg, 4,91 mmol), PdCl2(dppf) (89 mg, 0,122 mmol) e 1-(2,5-difluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)-4-isopropilpiperazina (615 mg, 1,617 mmol) foram colocados em suspensão em EtOH (3 mL) e água (3 mL). A mistura de reação foi aquecida a 100°C sob uma atmosfera de nitrogênio por 1 h. A mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e foi diretamente purificada pela cromatografia em sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 5% a 60% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (519 mg) como um sólido off-white. LCMS (Método A) Rt = 0,63 min, [M + H]+ = 552,2. Intermediário 37 1-(2,5-Difluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)-4- isopropilpiperazina

[00362] 1-(4-Bromo-2,5-difluorobenzil)-4-isopropilpiperazina (1,38 g, 4,14 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,23 g, 4,84 mmol), PdCl2(dppf) (0,152 g, 0,207 mmol), o acetato de potássio (1,02 g, 10,39 mmol) e 1,4-dioxano (8 mL) foram adicionados a um frasco de microondas. O frasco foi selado aquecido termicamente até 100°C por 3 h. A mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e foi filtrada através de uma almofada de celite, lavando o celite com MeOH (2 x 10 mL). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo purificado pela cromatografia na fase reversa (C18 sílica) eluindo com um gradiente de 0 a 50% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10) para produzir, depois da concentração das frações desejadas sob pressão reduzida, o composto do título (620 mg) como um óleo amarelo. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ (ppm) 7,32-7,39 (m, 1H), 7,07-7,15 (m, 1H), 3,57 (s, 2H), 2,63-2,71 (m, 1H), 2,56 (br. s., 8H), 1,36 (s, 12H), 1,05 (d, J=6,6 Hz, 6H) Intermediário 38 1-(4-Bromo-2,5-difluorobenzil)-4-isopropilpiperazina

[00363] 4-Bromo-2,5-difluorobenzaldeído (disponível da Fluorochem, 1 g, 4,52 mmol) e 1-isopropilpiperazina (0,65 mL, 4,54 mmol) em DCM (12 mL) foram agitados por 15 min antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,2 g, 5,66 mmol). A solução resultante foi agitada por 15 h. Hidrogeno carbonato de sódio aquoso saturado (30 mL) foi depois adicionado e a fase aquosa foi separada e extraída com DCM (30 mL). A fase orgânica foi secada (frita hidrofóbica) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo (óleo amarelo) conteve adicionalmente um pouco de sólido (presumido ser inorgânico) de modo que o mesmo foi dissolvido em EtOAC (50 mL) e foi lavado com água (2 x 50 mL). A fase orgânica foi secada (frita hidrofóbica) e foi concentrada sob pressão reduzida para produzir o composto do título (1,38 g) como um óleo amarelo. LCMS (Método A) Rt = 0,57 min, [M + H]+ = 333,3/335,3. Intermediário 39 N-(2-(2-Fluoro-4-formilfenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3- sulfonamida

[00364] Um frasco foi carregado com N-(2-cloropiridin-4-il)-2-metóxi- 5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (2809 mg, 7,30 mmol), ácido (2-fluoro-4- formilfenil)borônico (2494 mg, 14,85 mmol), carbonato de sódio (3100 mg, 29,2 mmol) e Paladaciclo XPhos (520 mg, 0,704 mmol) em água (8 mL) e 1,4-dioxano (24 mL). O frasco foi selado e a mistura de reação foi aquecida a 120°C por 60 min termicamente. A mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi pré-absorvido em florisil e purificado pela cromatografia em gel de sílica eluindo com um gradiente de 0 a 50% de EtOAc:EtOH 3:1 em ciclo- hexano. As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido na quantidade mínima de MeOH e sonicado. o precipitado foi coletado pela filtração e secado para produzir o composto do título (874 mg) como um sólido amarelo. LCMS (Método A) Rt = 0,87 min, [M + H]+ = 473,3. Intermediário 40 N-(2-Cloropiridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00365] Um frasco foi carregado com morfolina (8,10 mL, 93 mmol), 2-isobutirilciclo-hexanono (1,558 mL, 9,26 mmol), iodeto de cobre (I) (588 mg, 3,09 mmol), carbonato de potássio (6398 mg, 46,3 mmol), 5-bromo-N-(2- cloropiridin-4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (5843 mg, 15,43 mmol) e DMSO (60 mL). O frasco foi selado, colocado sob vácuo depois fluxado com nitrogênio (10 times), aquecido até 110°C e deixado agitar por 18 h. A reação foi esfriada e a mistura de reação adicionada à água (200 mL), acidificada até o pH 1 com HCl aquoso (4 M), extraída com EtOAc (200 mL) e a camada orgânica foi separada. A camada aquosa foi reajustada até o pH 1 com HCl aquoso (4 M) e reextraída com EtOAc (2 x 200 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, filtradas usando uma frita hidrofóbica e concentradas sob pressão reduzida para produzir o produto bruto como um óleo marrom que solidificou. O resíduo foi diluído com MeOH (30 mL) e sonicado. O precipitado castanho foi coletado pela filtração, lavado com MeOH (5 mL), e secado para produzir o composto do título (3373 mg) como um sólido castanho. LCMS (Método A) Rt = 0,89 min, [M + H]+ = 385,0. Intermediário 41 5-Bromo- N-(2-cloropiridin-4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00366] Um frasco de fundo redondo foi carregado com 5-bromo-2- cloro-N-(2-cloropiridin-4-il)piridino-3-sulfonamida (8 g, 20,89 mmol). Metóxido de sódio em MeOH (0,5 M, 200 mL, 100 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi colocado sob vácuo depois fluxado com nitrogênio, selada, e aquecida a 100°C por 6 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e o pH da mistura foi ajustado até o pH 7 com HCl aquoso (4 M). O resíduo foi particionado entre água (100 mL) e EtOAc (200 mL). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi reextraída com EtOAc (200 mL). O pH da camada aquosa foi depois ajustado até 6 com HCl aquoso (4 M) e reextraída com EtOAc (200 mL). O pH da camada aquosa foi depois ajustado até 4 com HCl aquoso (4 M), e reextraída com EtOAc (200 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas usando uma frita hidrofóbica, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi depois dissolvido na quantidade mínima de MeOH e sonicada. O precipitado foi coletado pela filtração e secado para produzir o composto do título (6,531 g) como um sólido castanho. LCMS (Método A) Rt = 1,06 min, [M + H]+ = 379,9. Intermediário 42 5-Bromo-2-cloro-N-(2-cloropiridin-4-il)piridino-3-sulfonamida

[00367] A uma solução de cloreto de 5-bromo-2-cloropiridino-3- sulfonila (disponível da Enamina, 13,73 g, 47,2 mmol) em piridina (50 mL, 618 mmol) foi adicionada às porções 2-cloropiridin-4-amina (6,7 g, 52,1 mmol). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi tratado com MeOH (50 mL) e a mistura foi sonicado. O precipitado marrom foi coletado pela filtração, lavado com MeOH (5 mL), secado, pois dissolvido em MeCN e concentrado sob pressão reduzida para produzir o composto do título (15,44 g) como um sólido marrom. LCMS (Método A) Rt = 0,64 min, [M + H]+ = 383,8. Intermediário 43 4-(3-fluoro-4-(4-(2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamido)piridin-2- il)benzil)piperazino-1-carboxilato de terc-butila, sal de ácido fórmico

[00368] Um frasco foi carregado com 4-(4-(4-(5-cloro-2- metoxipiridino-3-sulfonamido)piridin-2-il)-3-fluorobenzil)piperazino-1- carboxilato de terc-butil (1428 mg, 2,412 mmol), morfolina (0,5 mL, 5,72 mmol), terc-butóxido de sódio (1415 mg, 14,72 mmol), Pd(OAc)2 (69 mg, 0,307 mmol), RuPhos (234 mg, 0,501 mmol) e tolueno (15 mL). O frasco foi selado, aquecido termicamente até 90°C e deixado agitar por 30 min. A mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água 16:3:1 (contendo ácido fórmico a 0,1%):MeOH:DMSO (20 mL) e eluído em uma coluna em gel de sílica com fase reversa C18 com um gradiente de 5% a 30% de MeCN (contendo ácido fórmico a 0,1%) em água (contendo ácido fórmico a 0,1%). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (1,128 g) como um sólido marrom escuro. LCMS (Método A) Rt = 0,66 min, [M + H]+ = 643,2. Intermediário 44 4-(4-(4-(5-cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamido)piridin-2-il)-3- fluorobenzil)piperazino-1-carboxilato de terc-butila

[00369] Piperazino-1-carboxilato de terc-butila (904 mg, 4,85 mmol) e ácido (2-fluoro-4-formilfenil)borônico (799 mg, 4,76 mmol) em DCM (20 mL) foram agitados por 15 min antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1350 mg, 6,37 mmol). A solução resultante foi agitada por 45 min. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. Carbonato de sódio (1341 mg, 12,66 mmol), PdCl2(dppf) (72 mg, 0,098 mmol), N-(2- bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (1199 mg, 3,17 mmol), EtOH (10 mL) e água (10 mL) foram adicionados ao resíduo, e a reação foi aquecida ao refluxo (100°C) por 1,5 h. A mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água 13:4:2 (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10):MeOH:DMSO (19 mL) e eluído em uma coluna em gel de sílica com fase reversa C18 com um gradiente de 15% a 70% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (1,428 g) como um sólido marrom. LCMS (Método B) Rt = 0,96 min, [M + H]+ = 594,3. Intermediário 45 5-Cloro-2-(dimetilamino)-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)feml)piridin-4-il)piridino-3 - sulfonamida

[00370] A uma suspensão agitada de 5-cloro-2-(dimetilamino)-N-(2-(2- fluoro-4-formilfenil)piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida (50 mg, 0,115 mmol) em MeOH (2 mL) e ácido acético (0,2 mL) foi adicionada 1- isopropilpiperazina (29,5 mg, 0,230 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada por 2 h na temperatura ambiente e 2- picolineborano (18,40 mg, 0,172 mmol) foi depois adicionado. A mistura de reação foi deixada agitar por 16 h a 50°C. O solvente de reação foi evaporado para se obter um resíduo bruto (90 mg). A reação foi repetida para obter mais material: a uma suspensão agitada de 5-cloro-2-(dimetilamino)-N-(2-(2- fluoro-4-formilfenil)piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida (450 mg, 1,035 mmol) em MeOH (6 mL) e ácido acético (0,5 mL) foi adicionada 1- isopropilpiperazina (265 mg, 2,070 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada por 2 h na temperatura ambiente e 2- picolineborano (166 mg, 1,552 mmol) foi depois adicionado. A mistura de reação foi deixada agitar por 16 h a 50°C. O solvente de reação foi evaporado para se obter um resíduo bruto (1,1 g). Ambos os resíduos (90 mg e 1,1 g) foram combinados e purificados pela HPLC preparativa (Método G). As frações coletadas foram evaporadas para produzir o composto do título (500 mg) como sólido off-white. LCMS (Método G) Rt = 1,64 min, [M + H]+ = 547,2. Intermediário 46 5-Cloro-2-(dimetilamino)-N-(2-(2-fluoro-4-formilfenil)piridin-4-il)piridino-3- sulfonamida

[00371] A uma solução agitada de N-(2-bromopiridin-4-il)-5-cloro-2- (dimetilamino)piridino-3-sulfonamida (2 g, 5,11 mmol) em 1,4-dioxano (20 mL) e água (6 mL) foram adicionados ácido (2-fluoro-4-formilfenil)borônico (0,943 g, 5,62 mmol) e K3PO4 (2,71 g, 12,77 mmol) depois a mistura de reação foi desgaseificada por 30 min. À mistura de reação foi adicionado pré- catalisador Xphos de 2a geração (0,201 g, 0,255 mmol) e a mistura foi mais uma vez desgaseificada por 15 min e depois aquecida a 110°C por 16 h. A mistura de reação foi filtrada através de celite, lavada com 10% de MeOH/DCM e o solvente evaporado para se obter um resíduo bruto. O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna em gel de sílica (100 a 200 μm), eluindo com 40% de EtOAc em n-hexano. As frações desejadas foram evaporadas para produzir o composto do título (1 g) como sólido marrom. LCMS (Método G) Rt = 2,14 min, [M + H]+ = 435,1. Intermediário 47 N-(2-Bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-(dimetilamino)piridino-3-sulfonamida

[00372] A uma solução de N-(2-bromopiridin-4-il)-2,5-dicloropiridino- 3-sulfonamida (13 g, 33,9 mmol) em EtOH (50 mL) foi adicionada dimetilamina (85 mL, 170 mmol), e a reação foi agitada por 16 h a 100°C em tubo selado. A mistura de reação foi evaporada para se obter um composto bruto (17 g), que foi purificado pela cromatografia de coluna em gel de sílica (100 a 200 μm) eluindo com 5% de MeOH em DCM. As frações desejadas foram evaporadas frações de coluna desejadas para produzir o composto do título (6 g) como sólido marrom. LCMS (Método G) Rt = 2,29 min, [M + H]+ = 391,0/393,0. Intermediário 48 N-(2-(4-((4-(terc-Butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-5- cloro-2-(dimetilamino)piridino-3-sulfonamida

[00373] A uma suspensão agitada de 5-cloro-2-(dimetilamino)-N-(2-(2- fluoro-4-formilfenil)piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida (50 mg, 0,115 mmol) em MeOH (2 mL) e ácido acético (0,2 mL) foi adicionada 1-(terc- butil)piperazina (32,7 mg, 0,230 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada por 2 h na temperatura ambiente depois 2- picolinoborano (18,40 mg, 0,172 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi deixada agitar por 16 h a 50°C. O solvente de reação foi evaporado para produzir um resíduo bruto (86 mg) como goma amarela. A reação foi repetida para obter mais material: a uma suspensão agitada de 5-cloro-2- (dimetilamino)-N-(2-(2-fluoro-4-formilfenil)piridin-4-il)piridino-3- sulfonamida (450 mg, 1,035 mmol) em MeOH (6 mL) e ácido acético (0,5 mL) foi adicionada 1-(terc-butil)piperazina (294 mg, 2,070 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada por 2 h na temperatura ambiente depois 2-picolinoborano (166 mg, 1,552 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi deixada agitar por 16 h a 50°C. O solvente de reação foi evaporado para se obter um resíduo bruto (1,2 g). Ambos os resíduos brutos foram combinados e purificados pela HPLC preparativa (Método I). As frações desejadas foram evaporadas para produzir o composto do título (350 mg) como um sólido off-white. LCMS (Método G) Rt = 1,70 min, [M + H]+ = 561,3. Intermediário 49 5-Cloro-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)- 2-metóxi-N-metilpiridino-3 - sulfonamida

[00374] N-(2-Bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metóxi-N-metilpiridino-3- sulfonamida (660 mg, 1,681 mmol) foi dissolvida em EtOH (6 mL) e água (2,0 mL). A esta foram adicionados ácido (2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin- 1-il)metil)fenil)borônico (706 mg, 2,52 mmol), carbonato de sódio (713 mg, 6,72 mmol) e [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) (37,0 mg, 0,050 mmol) e a mistura de reação aquecida até 100°C por 2 h. A mistura de reação foi depois concentrada a vácuo e particionada entre EtOAc (50 mL) e água (50 mL), o pH foi ajustado até ~ 10 com NaOH 1 M. A fase aquosa foi depois separada e extraída com mais EtOAc (50 mL), os extratos orgânicos combinados foram secados passando-se através de uma frita hidrofóbica e concentradas a vácuo para dar uma goma laranja. A goma laranja foi purificada pela cromatografia de coluna C18 da fase reversa, eluindo com um gradiente de 50% a 75% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (300 mg) como uma goma marrom. LCMS (Método B) Rt = 1,34 min, [M + H]+ = 548,1. Intermediário 50 Ácido (2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)borônico

[00375] Ácido (2-fluoro-4-formilfenil)borônico (8,15 g, 48,5 mmol) e 1-isopropilpiperazina (6,94 mL, 48,5 mmol) em DCM (100 mL) foram agitados por 15 min antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (12,34 g, 58,2 mmol). A solução resultante foi agitada por 2 h. A mistura de reação foi depois concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado pela cromatografia em sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 0 a 20% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (11,7 g) como um sólido amarelo. LCMS (Método B) Rt = 0,56min, [M + H]+ = 281,3. Intermediário 51 N- (2-Bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metóxi-N-metilpiridino-3- sulfonamida

[00376] N-(2-Bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (1,4 g, 3,70 mmol) foi dissolvida em DMF anidro (10 mL), a esta foram adicionado carbonato de potássio (0,613 g, 4,44 mmol) e iodometano (0,277 mL, 4,44 mmol) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente por 18 h. Mais iodometano (0,277 mL, 4,44 mmol) foi adicionado e a mistura de reação continuou a agitar na temperatura ambiente por 3 h. A mistura de reação foi depois concentrada a vácuo e particionada entre EtOAc (200 mL) e NH4Cl aquoso saturado (200 mL). A fase aquosa foi separada e extraída com mais EtOAc (200 mL), os extratos orgânicos combinados foram depois concentrados a vácuo e purificados pela cromatografia de sílica eluindo com um gradiente de 0 a 50% EtOAc em ciclo hexano para produzir o composto do título (960 mg). LCMS (Método B) Rt = 1,16 min, [M + H]+ = 391,9/393,9/395,9. Intermediário 52 5-Cloro-N-etil-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin- 4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00377] Carbonato de potássio (0,548 g, 3,96 mmol) e iodoetano (0,320 mL, 3,96 mmol) foram adicionados a uma solução de N-(2- bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (1 g, 2,64 mmol) em DMF anidro (10 mL) colocado em um frasco. O frasco foi selado e agitado na temperatura ambiente por 18 h. Mais iodoetano (0,107 mL, 1,321 mmol) foi adicionado e a mistura de reação continuou a agitar por 18 h. A mistura de reação foi depois concentrada a vácuo e particionada entre EtOAc (100 mL) e NaCl aquoso saturado (100 mL). A fase aquosa foi separada e extraída com mais EtOAc (100 mL), as soluções orgânicas combinadas foram depois concentradas a vácuo para produzir um óleo marrom (1,079 g). Este óleo marrom (1,079 g, 2,65 mmol), ácido (2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin- 1-il)metil)fenil)borônico (1,115 g, 3,98 mmol), [1,1'- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) (0,058 g, 0,080 mmol) e carbonato de sódio (1,125 g, 10,61 mmol) foram dissolvidos em EtOH (15 mL) e água (5 mL) e a mistura de reação foi aquecida até 100°C por 4 h. As porções adicionais de [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]-dicloropaládio (II) (0,058 g, 0,080 mmol) e ácido (2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)borônico (0,743 g, 2,65 mmol) foram adicionados e a mistura de reação agitada a 100°C por 18 h. A mistura de reação foi depois concentrada a vácuo e particionada entre EtOAc (100 mL) e bicarbonato de sódio aquoso saturado (100 mL), a fase aquosa foi separada e extraída com mais EtOAc (100 mL). As soluções orgânicas combinadas foram concentradas a vácuo e purificadas pela troca iônica de NH2 SPE, eluindo com um gradiente de 0 até 100% de EtOAc em ciclo-hexano. As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (785 mg) como um óleo laranja. LCMS (Método B) Rt = 1,39 min, [M + H]+ = 562,1. Intermediário 53 (2-bromopiridin-4-il)carbamato de terc-butila

[00378] Carregar 2-bromopiridin-4-amina (100,0 g), Et3N (64,8 g) e DCM (1,0 L) no vaso de reação, agitar a mistura de reação de 20 a 30°C por 15 a 30 min. Carregar DMAP (3,5 g) no vaso de reação, adicionar (Boc)2O (416,3 g) às gotas no vaso de reação. Agitar o vaso de reação de 20 a 30°C por 16 h, checar a reação com HPLC. Lavar a mistura de reação com água (2 L). Separar a fase orgânica e concentrar sob pressão reduzida para dar o produto bruto como sólido amarelo. Empastar o sólido obtido com MeOH (300,0 mL) de 20 a 30°C por 30 min, depois filtrar para se obter o composto do título (171,2 g) como sólido off-while. Intermediário 54 Cloreto de 5-bromo-2-cloropiridino-3-sulfonila Método A

[00379] Etapa A: Carregar água (2,1 L) em um primeiro vaso de reação, ajustar a temperatura para -5 a 0°C. Carregar SOCl2 (550,0 g) ao vaso de reação lentamente de -5 a 0°C, agitar a solução de 0 a 5°C por 18 h. Adicionar CuCl (1,34 g) ao vaso de reação e ajustar a temperatura a cerca de - 15°C.

[00380] Etapa B: Carregar 5-bromo-2-cloropiridin-3-amina (140,0 g) e HCl concentrado (1,4 L) em um segundo vaso de reação, ajustar a temperatura a cerca de -15°C. Adicionar NaNO2 (84,2 g) ao vaso de reação lentamente para manter a temperatura a cerca de -5°C, agitar a mistura em torno de -5°C por 15 a 30 min.

[00381] Transferir a mistura no segundo vaso de reação para o primeiro vaso de reação lentamente e manter a temperatura do primeiro vaso de reação em torno de -10°C. Agitar a mistura resultante no primeiro vaso de reação a -10°C por 2 h. Filtrar a mistura e coletar o sólido. Secar o sólido sob pressão reduzida de 45 a 55°C por 18 h para dar o produto bruto (159,2 g) como sólido amarelo claro.

[00382] Purificação: Tratar o produto bruto (320 g) com EtOAc (700 mL). Agitar a mistura por 5 min. Filtrar a mistura e lavar o sólido (sal inorgânico) com EtOAc (100 mL). Concentrar o filtrado sob pressão reduzida a cerca de 300 mL. Adicionar n-heptano (300 mL) à mistura e concentrado. Secar o produto sob pressão reduzida de 35 a 40°C por 18 h para dar o composto do título (292 g) como sólido laranja. Método B

[00383] No vaso 1, cloreto de tionila (110,0 kg) foi adicionado na água (430 kg) a cerca de 0°C. A mistura foi agitada a cerca de 3°C por 7 h antes que o cloreto de cobre (I) (0,27 kg) fosse adicionado a cerca de 3°C.

[00384] No vaso 2, 5-bromo-2-cloropiridin-3-amina (28,2 kg, 136 Mol) foi misturado com 35% solução aquosa de ácido clorídrico (202 kg) a cerca de 5°C. Uma solução de nitrito de sódio (8,5 a 14,1 kg) em água (19,7 a 25,4 kg) foi depois adicionada a cerca de -10°C.

[00385] A solução no vaso 2 foi adicionada à solução no vaso 1 enquanto se mantém a temperatura a cerca de -7°C. A mistura de reação foi agitada por 2 h a cerca de -2°C. O produto sólido foi isolado pela filtração e secado a vácuo a cerca de 23°C por 18 h. 30,9 kg do composto do título foram obtidos em 66%th de rendimento e 84,3% de ensaio. Intermediário 55 (2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)carbamato de terc-butila

[00386] Carregar (2-bromopiridin-4-il)carbamato de terc-butila (187,3 g), 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)-4- isopropilpiperazina (200,0 g), Na2CO3 (212,8 g), IPA (1,4 L) e água (470 mL) em um vaso de reação, desgaseificar o vaso de reação com N2 três vezes. Carregar PdCl2(dppf) (18,4 g) no vaso de reação, ajustar o vaso de reação de 80 a 90°C, agitar a mistura de reação de 80 a 90°C por 18 h. Checar a reação com HPLC. Esfriar a mistura de reação para 20 a 30°C, filtrar através de celite (200,0 g) e concentrar o filtrado sob pressão reduzida para remover mais do IPA. Carregar DCM (1,0 L) no resíduo e agitar por 15 a 30 min. Separar a fase orgânica e lavar com água (2 x 1,0 L), a solução em DCM do composto do título foi armazenada de 20 a 30°C e diretamente usada para a etapa seguinte. Intermediário 56 2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-amina Método A

[00387] Carregar (2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)- fenil)piridin-4-il)carbamato de terc-butila (318,2 g, em DCM) e HCl 2 N (3,0 L) em um vaso de reação. Agitar a mistura de reação de 20 a 30°C por 18 h. Checar a reação com HPLC até o desaparecimento de (2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)carbamato de terc-butila. Separar a camada aquosa e lavar com EtOAc (2 x 1,0 L). Ajustar o pH até 9 a 10 com amônia aquosa, depois extrair com EtOAc (2 x 1,0 L). Combinar a fase orgânica lavar com água (2 x 1,0 L). Separar a camada orgânica e concentrar para se obter o composto do título (161,6 g) como um óleo preto. Método B

[00388] 2-Bromopiridin-4-amina (11,5 kg) e uma solução de 1-(3- fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzil)-4- isopropilpiperazina em 2-metiltetra-hidrofurano (145,4 kg de solução, contendo 29,8 kg / 82,3 Mol de 1-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzil)-4-isopropilpiperazina) foram dissolvidos em 2- metiltetra-hidrofurano (cerca de 53 kg). Carbonato de sódio (35,0 kg) e água (75 kg) foram adicionados. O nitrato foi borbulhado através da mistura por 3 h a cerca de 25°C. [1,1‘-Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloro-paládio (II) (1,36 kg) foi adicionado, antes nitrogênio foi borbulhado através da mistura por 3 h a cerca de 25°C. A mistura foi agitada por 16 h a cerca de 73°C. A temperatura foi reduzida a cerca de 33°C e água (89 kg) foi adicionada. A mistura resultante foi agitada por 2 h antes da camada aquosa ser descartada. A camada orgânica foi filtrada através de uma coluna de gel de sílica cintilante (3 kg). Água (60 kg) foi adicionada à camada orgânica. A solução aquosa a 20% de ácido cítrico (110 kg) foi adicionada ao pH = 4 a 6. A camada orgânica foi descartada e n-heptano (60 kg) foi adicionado à camada aquosa. A solução aquosa a 30% de hidróxido de sódio (51 kg) foi adicionada a 10°C, ajustada o pH = 8 a 9. A temperatura foi ajustada a cerca de 8°C e a solução foi semeada com 2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-amina (0,10 kg). A suspensão resultante foi agitada por 2 h. A solução aquosa a 30% de hidróxido de sódio (15 kg) foi adicionada para ajustar o pH = 10 a 11. A suspensão foi adicionalmente envelhecida por 15 h a cerca de 8°C. O produto sólido foi isolado pela filtração, antes sendo dissolvido em acetona (262,0 kg) a cerca de 40°C. A solução resultante foi concentrada até 30 L sob pressão reduzida, mantendo a temperatura abaixo de 35°C. Água (65 kg) foi adicionada em 3 h a cerca de 8°C e a suspensão foi agitada por 2 h. Água (45 kg) foi adicionada em 3,5 h a cerca de 8°C antes que a suspensão fosse envelhecida por 6 h a 4°C. O produto sólido foi coletado pela filtração e secado por 48 h a cerca de 28°C sob pressão reduzida. Finalmente, 20,1 kg do composto do título foram obtidos em 76%th de rendimento. Intermediário 57 5-Bromo-2-cloro-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida Método A

[00389] Carregar 2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)- fenil)piridin-4-amina (65,6 g) e DCM (656 mL) em um vaso de reação sob atmosfera de N2. Adicionar cloreto de 5-bromo-2-cloropiridino-3-sulfonila (87,4 g) na solução às porções. Agitar a mistura de 15 a 25°C por 15 min. Adicionar Et3N (83,2 mL) à mistura lentamente em 15 min. A mistura resultante foi agitada de 15 a 25°C por 16 h. Cloreto de 5-bromo-2- cloropiridino-3-sulfonila adicional (29,1 g) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por mais 20 h antes de extinguir com solução aquosa de Na2CO3 (15%, 300 mL). A camada orgânica foi separada e lavada com HCl 2 N (600 mL). Descartar a camada orgânica. A camada aquosa foi basificada até o pH=10 com solução aquosa de amônia, lavada com de DCM (600 mL), e separada. A camada orgânica concentrada sob pressão reduzida para dar o produto bruto (105 g) como espuma amarela, com o composto 2-(2-fluoro-4- ((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-amina e subproduto de bis- sulfonila como impurezas. Método B

[00390] 2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4- amina (14,8 kg corrigidos pelo ensaio, 45,1 Mol) foi dissolvida em diclorometano (160 kg). A solução foi concentrada de 44, a 59,2 L sob pressão reduzida, mantendo a temperatura abaixo de 50°C. Diclorometano (326 kg) foi adicionado em duas porções durante a etapa de concentração. Cloreto de 5-bromo-2-cloropiridino-3-sulfonila (24,6 kg corrigidos pelo ensaio) e trietilamina (18,2 kg) foram adicionados enquanto se mantém a temperatura dos conteúdos abaixo de 30°C. A mistura de reação foi agitada por 5 h a cerca de 25°C. Solução aquosa a 5% de bicarbonato de sódio (74 kg - calculados de água 1,3 a 1,4 em peso e 7% de bicarbonato de sódio 3,6 a 3,7 em peso) foi adicionada e a mistura foi agitada por 20 h a cerca de 23°C. A fase aquosa foi descartada. A solução aquosa a 2,5% de bicarbonato de sódio (74 kg - calculados de água 3,1 a 3,2 em peso e 7% de bicarbonato de sódio 1,8 a 1,9 em peso) foi adicionada na fase orgânica e a mistura resultante foi agitada por 20 h a 23°C. A fase aquosa foi descartada. A camada orgânica concentrada de 29,6 a 44,4 L. Metanol (322 kg) foi adicionado em três porções durante a concentração de modo a deslocar diclorometano. Finalmente, uma solução do composto do título em metanol (contendo 18 kg do composto do título corrigidos pelo ensaio) foi obtida com 73,8% de pureza. Intermediário 58 5-Bromo-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)- 2-metoxipiridino-3-sulfonamida Método A

[00391] Carregar 5-bromo-2-cloro-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropil- piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida (38 g) e MeOH (304 mL) em um vaso de reação. Adicionar NaOMe (17,6 g) à solução às porções. Agitar a mistura resultante a 70°C por 3 h. Esfriar a mistura de reação de 15 a 25°C. Concentrar a mistura de reação até ~ 150 mL. Diluir a mistura com DCM (200 mL) e extrair com água (400 mL). Separar a camada aquosa e ajustar o pH a cerca de 3 com HCl 2 N. Adicionar DCM (300 mL) à solução aquosa. Ajustar adicionalmente o pH desta mistura a cerca de 10 com solução aquosa de amônia. Separar a camada orgânica e lavar a camada aquosa com DCM (2 x 150 mL). Combinar as camadas orgânicas e concentrar até a secura sob pressão reduzida para dar o composto do título (81,0 g) como espuma amarela clara. Método B

[00392] A uma solução de 5-bromo-2-cloro-N-(2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida em metanol (18 kg, 30,9 Mol) foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio em metanol (26,0 kg, 1,4 a 1,5 em peso), mantendo a temperatura abaixo de 30°C. A mistura foi agitada por 14 h a cerca de 67°C. A mistura de reação foi concentrada de 36 a 54 L sob pressão reduzida, mantendo a temperatura abaixo de 50°C. Diclorometano (113 kg) e água de processo (280 kg) foram adicionados. As duas camadas foram separadas e a camada orgânica foi descartada. À camada aquosa foram adicionados diclorometano (105 kg) e ácido clorídrico aquoso 2 N (48 kg), ajustar o pH a cerca de 4. A solução aquosa a 25% de amônia (3 kg) foi adicionada a 25°C até que o pH fosse ajustado a cerca de 7,8. As duas camadas foram separadas e a camada aquosa foi descartada. À camada orgânica foi adicionado éter terc-butil metílico (45 kg). A mistura foi semeada com 5-bromo-N-(2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (0,199 kg) antes de ser agitada por 16 h a 33°C. Éter terc-butil metílico (180 kg) foi adicionado durante a concentração a um volume de 72 a 90 L. A suspensão resultante foi envelhecida por 2,5 h a 3°C antes que o sólido fosse isolado pela centrifugação. O produto sólido foi secado a vácuo a cerca de 38°C para produzir 18,8 kg do composto do título em 70%th de rendimento. Intermediário 59 Rac-5-Cloro-N-(2-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)-2- fluorofenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida

[00393] A uma solução de 5-cloro-N-(2-(2-fluoro-4-formilfenil)piridin- 4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (200 mg, 0,474 mmol), rac-(2R,6S)-2,6- dimetilmorfolina (82 mg, 0,711 mmol) em MeOH (0,2 mL) e ácido acético (5 mL) sob nitrogênio foi adicionado 2-picolinoborano (75 mg, 0,711 mmol) às porções em um minuto a 0°C. Depois de agitar por 16 h a 50°C, a mistura foi extinta com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (5 mL) e extraída com DCM (2 x 10 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (10 mL), secados em sulfato de sódio, filtrados e concentrados a vácuo para produzir o composto do título (150 mg) como um sólido marrom. LCMS (Método G) Rt = 1,57 min, [M + H]+ = 519,1/521,0. Intermediário 60 Rac-5-Cloro-N-(2-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)-2-fluorofenil) piridin-4-il)-2-etoxipiridino-3-sulfonamida

[00394] Uma solução de 5-cloro-2-etóxi-N-(2-(2-fluoro-4- formilfenil)piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida (900 mg, 2,065 mmol), rac- (2R,6S)-2,6-dimetilmorfolina (238 mg, 2,065 mmol) em MeOH (10 mL) e ácido acético (0,1 mL) foi agitada por 15 min. 2-Picolinoborano (331 mg, 3,10 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 50°C por 16 h. A mistura foi extinta com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (20 mL) e extraída com DCM (60 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura (30 mL), secada em sulfato de sódio, filtrada e concentrada a vácuo para produzir o composto do título (350 mg) como um sólido marrom. LCMS (Método G) Rt = 1,70 min, [M + H]+ = 535,2. Intermediário 61 5-Cloro-2-etóxi-N-(2-(2-fluoro-4-formilfenil)piridin-4-il)piridino-3- sulfonamida e

[00395] Uma solução agitada de N-(2-bromopiridin-4-il)-5-cloro-2- etoxipiridino-3-sulfonamida (900 mg, 2,292 mmol), ácido (2-fluoro-4- formilfenil)borônico (462 mg, 2,75 mmol) e Na2CO3 (972 mg, 9,17 mmol) em isopropanol (10 mL) água (3,33 mL) em um tubo selado foi desgaseificada com argônio por 15 min na temperatura ambiente. Aduto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (94 mg, 0,115 mmol) foi adicionado e a mistura foi desgaseificada mais uma vez usando argônio por 10 min. A mistura de reação foi aquecida no tubo selado a 90°C por 4 h. A mistura foi filtrada através de celite, lavada com 10% de MeOH/DCM (50 mL) e o solvente removido a vácuo. O resíduo foi triturado com éter dietílico (2 x 20 mL) para produzir o produto bruto (900 mg). O produto foi usado diretamente para a etapa seguinte. Intermediário 62 N-(2-bromopiridin-4-il)-5-cloro-2-etoxipiridino-3-sulfonamida

[00396] A uma solução agitada de N-(2-bromopiridin-4-il)-2,5- dicloropiridino-3-sulfonamida (1 g, 2,61 mmol) em etanol (10 mL) sob nitrogênio na temperatura ambiente etóxido de sódio (10 mL, 2,61 mmol) foi adicionado às gotas. A mistura de reação foi agitada a 80°C por 1 h depois esfriada até temperatura ambiente e concentrada a vácuo. O resíduo coletado em a solução aquosa a 10% de ácido cítrico (50 mL) e o precipitado resultante foi isolado pela filtração para produzir o composto do título (0,9 g) como um sólido marrom. LCMS (Método G) Rt = 2,29 min, [M + H]+ = 391,9/393,9. Exemplo 1 N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida Método A

[00397] Um tubo selado de 1 L foi carregado com 5-cloro-N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino- 3-sulfonamida (20 g, 37,4 mmol), terc-butóxido de sódio (10,80 g, 112 mmol) e morfolina (6,53 mL, 74,9 mmol) em tolueno seco (400 mL). A mistura de reação acima foi desgaseificada usando argônio por 30 min e 2-diciclo- hexilfosfino-2‘,6‘-di-isopropoxibifenila (1,748 g, 3,74 mmol) foi adicionada seguida por Pd(OAc)2 (0,420 g, 1,872 mmol). A mistura de reação resultante foi agitada a 90°C por 3 h. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente depois diluída com EtOAc (1 L) e filtrada através de celite. O leito de celite foi lavado com um excesso de EtOAc (500 mL) e os filtrados foram combinados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água (500 mL) e o pH ajustado de 2 a 3 usando HCl 1 M (50 mL). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 500 mL). Depois da separação, a camada aquosa foi ajustada até 8 a 9 usando solução aquosa de amônia (25%) depois extraída com 10% de MeOH em DCM (2 x 500 mL). Os extratos orgânicos foram combinados, secados em sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para produzir o composto do título (19 g) como uma espuma branca amarelada.

[00398] O produto (19 g) foi purificado adicionalmente pela cromatografia em gel de sílica usando o instrumento GRACE REVELERIS. O material foi dividido em dois lotes (10 g e 9 g). Purificação-1 (10 g, lote-1): o composto bruto (10 g) foi pré-absorvido em gel de sílica (10 g, 100 a 200 malhas) e purificado usando um cartucho de sílica de 120 g eluindo com 6% de MeOH em DCM (contendo 0,1% de NH3 (aquoso)). As frações desejadas foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida para produzir 7,5 g de uma espuma branca amarelada. Purificação-2 (9 g bruto, lote-2): O composto bruto (9 g) foi purificado usando o mesmo método exato para produzir 7 g como uma espuma branca amarelada. Os dois lotes (7,5 g e 7 g) foram combinados e dissolvidos em MeOH (150 mL) para obter uma solução clara, que foi agitada por 30 min. O sólido branco que cristalizou a partir da solução foi coletado pela filtração, lavado com éter dietílico (100 mL) e secado para produzir o composto do título (12 g) como um sólido branco. LCMS (Método F) Rt = 3,47 min, [M + H]+ = 584,8 1H RMN para N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida: 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) ppm 1,00 (d, J=6,6 Hz, 6 H), 2,39 - 2,47 (m, 4 H), 2,53 - 2,58 (m, 4 H), 2,70 - 2,75 (m, 1 H), 3,04 - 3,08 (m, 4 H), 3,52 (s, 2 H), 3,71 - 3,76 (m, 4 H), 3,83 (s, 3 H), 6,97 (dd, J=5,6, 1,7 Hz, 1 H), 7,20 (d, J=11,0 Hz, 1 H), 7,21 - 7,23 (m, 1 H), 7,39 (br s, 1 H), 7,77 (t, J=8,2 Hz, 1 H), 7,84 (d, J=3,0 Hz, 1 H), 8,03 (d, J=3,0 Hz, 1 H), 8,32 (br d, J=5,6 Hz, 1 H), 11,01 (br s, 1 H). Método B

[00399] Carregar 5-bromo-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (80 g), morfolina (24,1 mL), NaOtBu (26,6 g) e tolueno (800 mL) a um frasco. Purgar a mistura com N2 3 vezes antes de adicionar Pd2(dba)3 (2,6 g) e Johnphos (3,3 g). Agitar a mistura a 80°C por 1 h. Esfriar a mistura de reação de 0 a 20°C antes de condensar até ~ 300 mL. Diluir a mistura com EtOAc (300 mL) e lavar com água (600 mL). Separar a camada aquosa e acidificar até o pH = 3 a 4 com HCl 2 N. Lavar a solução aquosa com EtOAc (2 x 300 mL). Ajustar o pH da a solução aquosa até 7 a 8 com amônia aquosa. Lavar a solução com DCM/MeOH (10/1, 2 x 400 mL). Combinar as camadas orgânicas e concentrar para dar 54 g do produto bruto como espuma amarela. A recristalização deste produto bruto com MeOH/MeCN (1/3, 8 volumes) para dar 31 g do produto com 92,9% de pureza. Outra recristalização com MeOH/DCM (7/3, 6 volumes) e secada sob pressão reduzida de a 40 a 45°C por 18 h para dar o composto do título (22 g) como sólido branco com 98,9% de pureza. Método C

[00400] Em um vaso contendo 5-bromo-N-(2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (16,0 kg corrigidos pelo ensaio, 27,7 Mol) foram adicionados tolueno (65,0 kg), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (0,60 kg), (2- Bifenil)di-terc-butilfosfina (0,77 kg) e terc-butóxido de sódio (5,8 kg) em sequência. Morfolina (5,4 kg) foi adicionada a 25°C. A mistura de reação foi agitada por 1,5 h a cerca de 83°C antes que a água (48,7 kg) fosse adicionada a cerca de 25°C. Tetraidrofurano (6,5 kg) foi adicionado e a mistura resultante foi filtrada. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi descartada. À camada aquosa, tetraidrofurano (100 kg), tolueno (46,0 kg) e cloreto de sódio (8,0 kg) foram adicionados. N-Acetil-L-cisteina (9,9 kg) foi adicionada a cerca de 25°C, ajustar o pH a cerca de 7,8. A mistura foi agitada por 4 h a cerca de 25°C antes que as duas camadas fossem separadas. A camada aquosa foi extraída duas vezes com tetraidrofurano (2 x 100 kg) e duas vezes com tolueno (2 x 40,0 kg). As quatro camadas orgânicas foram combinadas.

[00401] 1° ciclo para remover resíduos de Paládio e 1a cristalização: à camada orgânica combinada foi adicionado silicatiol (1,7 kg). A mistura foi agitada por 16 h a cerca de 48°C antes de ser filtrada. A solução resultante foi circulada através de um cartucho CUNO a cerca de 48°C por 16 h antes que o tetraidrofurano (16 kg) fosse adicionado. Metanol (195 kg) foi adicionado em três porções sob concentração a vácuo de 48 a 64 L para remover o tetraidrofurano. A solução foi aquecida a cerca de 63°C, agitada por 4 h depois esfriada a cerca de 3°C em 3 h, antes de ser agitada por 8 h. O sólido foi isolado pela filtração.

[00402] 2° ciclo para remover Resíduos de Paládio e 2a cristalização: o sólido úmido foi dissolvido em tetraidrofurano (210 kg) a cerca de 60°C. A temperatura foi reduzida a cerca de 25°C e silicatiol (1,6 kg) foi adicionado. A mistura foi agitada a cerca de 48°C por 16 h antes de ser filtrada. A solução resultante foi circulada através de um cartucho CUNO a cerca de 48°C por 16 h antes que o tetraidrofurano (16 kg) fosse adicionado. Metanol (194 kg) foi adicionado em três porções sob concentração a vácuo de 48 a 64 L para remover o tetraidrofurano. A solução foi aquecida a cerca de 63°C, agitada por 3,5 h, antes de ser esfriada a cerca de 3°C e agitada por 8 h. O sólido foi isolado pela centrifugação e lavado com metanol (24 kg).

[00403] 3° ciclo para remover Resíduos de Paládio e 3a cristalização: o sólido úmido foi dissolvido em tetraidrofurano (210,0 kg) a cerca de 60°C. A temperatura foi reduzida a cerca de 25°C e silicatiol (1,8 kg) foi adicionado. A mistura foi agitada a cerca de 48°C por 19,5 h antes de ser filtrada. A solução resultante foi circulada através de um cartucho CUNO a cerca de 48°C por 16 h antes que o tetraidrofurano (16 kg) fosse adicionado. Metanol (201 kg) foi adicionado em três porções sob concentração a vácuo de 48 a 64 L para remover o tetraidrofurano. A solução foi aquecida a cerca de 63°C e agitada por 3 h, antes de ser esfriada a cerca de 3°C e sagitada por 8 h. O sólido foi isolado pela centrifugação e lavado com metanol (24 kg).

[00404] O produto sólido foi secado por 36 h a cerca de 48°C sob pressão reduzida para produzir 10,2 kg do composto do título em 96,0% de ensaio e 61%th de rendimento. Método D

[00405] Em um primeiro vaso, N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropil- piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3- sulfonamida grau intermediário (8,0 kg corrigidos pelo ensaio, 13,7 Mol) foi dissolvido em sulfóxido de dimetila (53,6 kg) a cerca de 73°C. A solução resultante foi transferida para um segundo vaso.

[00406] No segundo vaso contendo a solução de sulfóxido de dimetila foi adicionado álcool de isopropila (20 kg) a cerca de 72°C. A mistura foi resfriada a cerca de 41°C em 0,5 h. A mistura foi resfriada, semeada com N- (2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)-piridin-4-il)-2-metóxi- 5-morfolinopiridino-3-sulfonamida autêntica (0,17 kg, 0,01 a 0,03 em peso) e a suspensão resultante foi agitada por 18 h a cerca de 41°C. Álcool de isopropila (104,0 kg) foi adicionado em 20 h a cerca de 41°C e a suspensão foi agitada por 3 h. A mistura foi resfriada a cerca de 5°C em 8 h e envelhecida por 8 h. O sólido foi isolado pela centrifugação e lavado com álcool de isopropila (16,0 kg).

[00407] O produto sólido foi secado por 36 h a cerca de 41°C sob pressão reduzida para produzir 6,3 kg do composto do título. Exemplo 2 N-(2-(4-((4-(terc-Butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00408] Um frasco de fundo redondo foi carregado com N-(2-(4-((4- (terc-butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-5-cloro-2- metoxipiridino-3-sulfonamida (3060 mg, 5,58 mmol), morfolina (1 mL, 11,43 mmol), terc-butóxido de sódio (3425 mg, 35,6 mmol), Pd(OAc)2 (127 mg, 0,566 mmol), RuPhos (523 mg, 1,121 mmol) e tolueno (40 mL). O sistema foi selado, termicamente aquecido sob uma atmosfera de nitrogênio até 90°C e agitado por 30 min. A mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água 23:3 (contendo ácido fórmico a 0,1%):MeOH e eluído em uma coluna em gel de sílica com fase reversa C18 usando um 5% a 25% de gradiente de MeCN (contendo ácido fórmico a 0,1%) em água (contendo ácido fórmico a 0,1%). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em DMSO (8 x 3 mL), e repurificado pela cromatografia em uma coluna C18 Sunfire eluindo com um gradiente de 5% a 25% de MeCN (contendo ácido fórmico a 0,1%) em água (contendo ácido fórmico a 0,1%). As frações impuras foram combinadas, concentradas sob pressão reduzida, depois repurificadas pela cromatografia usando uma coluna C18 Sunfire e eluindo com um gradiente de MeCN/água (com modificador de ácido fórmico). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida. Os resíduos puros das purificações foram combinados e eluídos em uma coluna em gel de sílica com fase reversa C18 usando um gradiente de 5% a 55% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido na quantidade mínima de MeOH e um sólido branco cristalizou. O sólido foi coletado pela filtração e secado para produzir o composto do título (972 mg) como um sólido branco. LCMS (Método A) Rt = 0,52 min, [M + H]+ = 599,4. Exemplo 3 N-(2-(4-((4-Isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00409] A um frasco de micro-ondas foi adicionado 5-cloro-N-(2-(4- ((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (45 mg, 0,087 mmol), morfolina (0,015 mL, 0,174 mmol) e terc- butóxido de sódio (25,1 mg, 0,262 mmol), bis[tris(2-metilfenil) fosfino]paládio (6,24 mg, 8,72 μmol), BrettPhos (9,36 mg, 0,017 mmol) e tetraidrofurano (1 mL). O vaso de reação foi selado, purgado com nitrogênio e aquecido em um Initiator Biotage até 100°C por 30 min. Depois de esfriar a reação, a mistura de reação foi filtrada através de celite e concentrada a vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). O solvente foi evaporado a vácuo e o produto secado adicionalmente sob uma corrente de nitrogênio no aparelho de sopro Radleys para produzir o composto do título (12 mg). LCMS (Método B) Rt = 0,68 min, [M + H]+ = 567,6. Exemplo 4 N-(2-(4-((Dimetilamino)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00410] Um frasco de micro-ondas foi carregado com 5-cloro-N-(2-(4- ((dimetilamino)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (100 mg, 0,231 mmol), morfolina (0,040 mL, 0,462 mmol) e DavePhos (13,64 mg, 0,035 mmol), terc-butóxido de sódio (133 mg, 1,386 mmol), Pd2(dba)3 (10,58 mg, 0,012 mmol) e tetraidrofurano (4 mL). O vaso de reação foi selado e aquecido em um Initiator Biotage até 120°C por 30 min. Depois de esfriar a reação, a mistura de reação foi filtrada através de celite e concentrada a vácuo para produzir o produto bruto. O resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). O solvente foi evaporado a vácuo para dar o produto bruto (69 mg). O produto foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 e repurificado pela cromatografia em gel de sílica de fase reversa C18 usando um sistema de solvente de MeCN:H2O (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10) (cromatografia realizada para remover o ácido fórmico residual da primeira purificação). O solvente foi evaporado a vácuo para produzir o composto do título (22 mg). LCMS (Método A) Rt = 0,43 min, [M + H]+ = 484,1. Exemplo 5 N-(2-(3-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00411] Um frasco foi carregado com 5-cloro-N-(2-(3-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (49 mg, 0,092 mmol), morfolina (0,017 mL, 0,194 mmol), Pd(OAc)2 (2,5 mg, 0,011 mmol), terc-butóxido de sódio (52 mg, 0,541 mmol) e RuPhos (9 mg, 0,019 mmol) em tolueno (1 mL). O vaso de reação foi selado e aquecido termicamente até 90°C durante a noite. A reação foi interrompida, o solvente removido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). O solvente foi secado sob uma corrente de nitrogênio no aparelho de sopro Radleys para dar o produto bruto, presumido como sal fórmico. A amostra foi dissolvida em MeOH e purificada pela cromatografia de coluna (C18) de fase reversa eluindo com um gradiente de 0 a 40% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e evaporadas a vácuo para produzir o composto do título (15,4 mg). LCMS (Método A) Rt = 0,52 min, [M + H]+ = 585,3. Exemplo 6 N-(2-(4-((4-(terc-Butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00412] Um frasco foi carregado com N-(2-(4-((4-(terc-butil)- piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (100 mg, 0,189 mmol), morfolina (0,04 mL, 0,464 mmol), terc- butóxido de sódio (109 mg, 1,132 mmol), Pd(OAc)2 (4,24 mg, 0,019 mmol), RuPhos (17,61 mg, 0,038 mmol), e tolueno (5 mL). O frasco foi aquecido a 90°C termicamente por 2 h. A mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH (2 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida, depois o resíduo foi dissolvido em MeOH (2 x 1 mL) e repurificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (41 mg) como um sólido branco. LCMS (Método A) Rt = 0,50 min, [M + H]+ = 581,6. Exemplo 7 N-(2-(4-((4-Ciclobutilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00413] Um frasco foi carregado com 5-cloro-N-(2-(4-((4- ciclobutilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (103,5 mg, 0,196 mmol), morfolina (0,04 mL, 0,464 mmol), terc- butóxido de sódio (113 mg, 1,176 mmol), Pd(OAc)2 (4,40 mg, 0,020 mmol), RuPhos (18,29 mg, 0,039 mmol), e tolueno (5 mL). O frasco foi aquecido a 90°C termicamente por 2 h. A mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH (2 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida, depois o resíduo foi dissolvido em MeOH (1 x 1 mL) e repurificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida para produzir o composto do título (47 mg) como um sólido de cor creme. LCMS (Método A) Rt = 0,50 min, [M + H]+ = 579,6. Exemplo 8 N-(2-(2,6-Difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00414] Um frasco foi carregado com 5-cloro-N-(2-(2,6-difluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (70 mg, 0,127 mmol), morfolina (0,03 mL, 0,348 mmol), terc- butóxido de sódio (73 mg, 0,760 mmol), Pd(OAc)2 (3 mg, 0,013 mmol), RuPhos (12 mg, 0,026 mmol), e tolueno (4 mL). O frasco foi aquecido a 90°C termicamente por 2,5 h e deixado repousar na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH (2 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). As frações desejadas foram concentradas sob nitrogênio purificado, depois o resíduo foi purificado pela cromatografia em sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 5% a 85% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10) para produzir, depois da concentração das frações desejadas sob pressão reduzida, o composto do título (32 mg) como um sólido branco. LCMS (Método A) Rt = 0,57 min, [M + H]+ = 603,5. Exemplo 9 N-(2-(4-((4-(sec-Butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00415] Morfolina (0,066 mL, 0,755 mmol), N-(2-(4-((4-(sec- butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-5-cloro-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (200 mg, 0,377 mmol), terc-butóxido de sódio (218 mg, 2,264 mmol), Pd(OAc)2 (8,47 mg, 0,038 mmol) e RuPhos (35,2 mg, 0,075 mmol) foram adicionados a um frasco seguido por tolueno (2 mL). O frasco foi selado e aquecido até 90°C por 18 h. A mistura de reação foi depois concentrada a vácuo, o resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (3 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). As frações desejadas foram concentradas a vácuo, o produto bruto foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (2 x 1 mL) e repurificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). As frações desejadas foram concentradas a vácuo para produzir o composto do título (109,6 mg). LCMS (Método B) Rt = 0,82 min, [M + H]+ = 581,7. Exemplo 10 N-(2-(2-Fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00416] Um frasco de micro-ondas foi carregado com 5-cloro-N-(2-(2- fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (309 mg, 0,648 mmol), morfolina (0,113 mL, 1,296 mmol), terc- butóxido de sódio (375 mg, 3,90 mmol), Pd(OAc)2 (16 mg, 0,071 mmol), RuPhos (60,5 mg, 0,130 mmol) e tolueno (5 mL). O sistema foi selado, termicamente aquecido sob uma atmosfera de nitrogênio até 90°C e deixado agitar por 30 min. A mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em DMSO (4 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi depois dissolvido em DMSO (1 mL) e repurificado pela cromatografia em sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 5% a 55% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido na quantidade mínima de MeOH, o precipitado que se formou foi coletado pela filtração e secado para produzir o composto do título (82 mg) como um sólido branco. LCMS (Método A) Rt = 0,47 min, [M + H]+ = 528,2. Exemplo 11 N-(2-(3-Fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00417] 5-Cloro-N-(2-(3-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4- il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (39 mg, 0,082 mmol), terc-butóxido de sódio (47,1 mg, 0,491 mmol), Pd(OAc)2 (1,836 mg, 8,18 μmol), RuPhos (7,63 mg, 0,016 mmol), morfolina (0,019 mL, 0,221 mmol) e tolueno (2 mL) foram adicionados a um frasco. O frasco foi selado e aquecido a 90°C por 3 h. As porções adicionais de acetato de paládio (5 mg, 0,022 mmol) e RuPhos (8 mg, 0,017 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 90°C por 1,5 h. MeOH (6 mL) foi adicionado e a mistura de reação filtrada através de celite e lavada com MeOH (6 mL). O solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi dissolvido em DMSO (1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). As frações desejadas foram evaporadas soprando-se com nitrogênio. O resíduo foi repurificado pela cromatografia em sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 5% a 80% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (10 mg) como um sólido branco. LCMS (Método A) Rt = 0,52 min, [M + H]+ = 528,5. Exemplo 12 N-(2-(3,5-Difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00418] 5-Cloro-N-(2-(3,5-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)- metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (50 mg, 0,091 mmol), terc-butóxido de sódio (51 mg, 0,531 mmol), Pd(OAc)2 (5 mg, 0,022 mmol), RuPhos (9 mg, 0,019 mmol), morfolina (0,021 mL, 0,245 mmol) e tolueno (2 mL) foram adicionados a um frasco. O frasco foi selado e aquecido a 90°C por 2,5 h. O solvente foi evaporado e o resíduo disolvido em DMSO (1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). As frações desejadas foram evaporadas soprando-se com nitrogênio. O resíduo foi repurificado pela cromatografia em sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 5% a 80% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (22 mg) como um sólido branco. LCMS (Método A) Rt = 0,60 min, [M + H]+ = 603,5. Exemplo 13 2-Metóxi-5-morfolino-N-(2-(4-((4-(oxetan-3-il)piperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida

[00419] Um frasco foi carregado com 5-cloro-2-metóxi-N-(2-(4-((4- (oxetan-3-il)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida (90 mg, 0,170 mmol), morfolina (30 μL, 0,348 μmol), terc-butóxido de sódio (82 mg, 0,849 mmol), Pd(OAc)2 (4 mg, 0,018 mmol) e RuPhos (16 mg, 0,034 mmol) em tolueno (1 mL). O frasco foi selado e aquecido até 90°C por 6 h. A reação foi esfriada, filtrada através de celite, o sólido lavado através com MeOH (30 mL) e o filtrado evaporado a vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (2 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). O solvente foi removido sob uma corrente de nitrogênio no aparelho de sopro Radleys para dar o produto requerido, presumido como o sal de ácido fórmico. O resíduo foi dissolvido em DMSO e repurificado pela cromatografia de sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 0 a 50% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e evaporadas a vácuo para produzir o composto do título (19 mg). LCMS (Método A) Rt = 0,46 min, [M + H]+ = 581,5. Exemplo 14 N-(2-(2,3-Difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00420] 5-Cloro-N-(2-(2,3-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (160 mg, 0,290 mmol), morfolina (0,068 mL, 0,783 mmol), terc-butóxido de sódio (167 mg, 1,739 mmol), Pd(OAc)2 (13,01 mg, 0,058 mmol), RuPhos (27,0 mg, 0,058 mmol) e tolueno (2 mL) foram adicionados a um frasco. O frasco foi selado e aquecido termicamente até 90°C por 3 h. A mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com MeOH (40 mL). O filtrado foi concentrado e o resíduo foi disolvido em DMSO (1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). As frações desejadas foram evaporadas soprando-se com nitrogênio. O resíduo foi repurificado pela cromatografia de sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 0 a 80% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para produzir o composto do título (24 mg) como um sólido amarelo claro. LCMS (Método A) Rt = 0,57 min, [M + H]+ = 603,6. Exemplo 15 N-(2-(2-Fluoro-4-((4-(oxetan-3-il)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida, 3 sal de ácido fórmico

[00421] Um frasco foi carregado com 5-cloro-N-(2-(2-fluoro-4-((4- (oxetan-3-il)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (51 mg, 0,093 mmol), morfolina (0,020 mL, 0,229 mmol), terc- butóxido de sódio (53 mg, 0,551 mmol), Pd(OAc)2 (2,2 mg, 9,80 μmol) e RuPhos (9 mg, 0,019 mmol) e tolueno (2 mL). O frasco foi selado, aquecido até 90°C por 2 h. As porções adicionais de morfolina (0,020 mL, 0,229 mmol), Pd(OAc)2 (2,2 mg, 9,80 μmol) e RuPhos (9 mg, 0,019 mmol) foram adicionados e a reação agitada durante a noite. O solvente foi removido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). O solvente foi secado sob uma corrente de nitrogênio no aparelho de sopro Radleys para produzir o composto do título (15 mg) como um sólido off- white. LCMS (Método B) Rt = 0,60 min, [M + H]+ = 599,6. Exemplo 16 N-(2-(4-((4-Ciclobutilpiperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida, 2,5 sal de ácido fórmico

[00422] Um frasco foi carregado com 5-cloro-N-(2-(4-((4- ciclobutilpiperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (48 mg, 0,088 mmol), morfolina (0,020 mL, 0,229 mmol), terc- butóxido de sódio (51 mg, 0,531 mmol), Pd(OAc)2 (2,0 mg, 8,91 μmol) e RuPhos (8,6 mg, 0,018 mmol) em tolueno (2 mL). O frasco foi selado, aquecido até 90°C por 2 h. O solvente foi removido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). O solvente foi secado sob uma corrente de nitrogênio no aparelho de sopro Radleys para produzir o composto do título (12 mg), como um sólido off-white. LCMS (Método B) Rt = 0,74 min, [M + H]+ = 597,5. Exemplo 17 N-(2-(2,5-Difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00423] Uma mistura de 5-cloro-N-(2-(2,5-difluoro-4-((4-isopropil- piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3-sulfonamida (516 mg, 0,935 mmol), morfolina (0,164 mL, 1,869 mmol), terc-butóxido de sódio (539 mg, 5,61 mmol), Pd(OAc)2 (20,99 mg, 0,093 mmol), RuPhos (87 mg, 0,187 mmol) e tolueno (5 mL) foi termicamente aquecido até 90°C sob uma atmosfera de nitrogênio por 3 h. A mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente, filtrada através de celite e lavada com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela coluna em gel de sílica com fase reversa C18 eluindo com um gradiente de 5% a 25% de MeCN (contendo ácido fórmico a 0,1%) em água (contendo ácido fórmico a 0,1%). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi repurificado pela cromatografia preparativa de fase reversa usando uma coluna C18 Sunfire eluindo com um gradiente de 5% a 35% de MeCN (contendo ácido fórmico a 0,1%) em água (contendo ácido fórmico a 0,1%). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida e o resíduo foi repurificado pela cromatografia de sílica C18 de fase reversa eluindo com um gradiente de 5% a 55% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações coletadas foram concentradas sob pressão reduzida e secadas em estufa (40°C) por 72 h para produzir o composto do título (139 mg) como um sólido off-white. LCMS (Método A) Rt = 0,57 min, [M + H]+ = 603,4. Exemplo 18 N-(2-(2-Fluoro-4-((4-(2-metóxietil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida, 1,2 sal de ácido fórmico

[00424] A uma suspensão agitada de N-(2-(2-fluoro-4-formilfenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (40 mg, 0,085 mmol) em MeOH (0,45 mL) e ácido acético (0,05 mL), foi adicionada 1-(2- metóxietil)piperazina (14,42 mg, 0,100 mmol). A solução resultante foi agitada por 30 min quando 2-picolinoborano (13,58 mg, 0,127 mmol) foi adicionado e a solução agitada a 50°C durante a noite. Depois de esfriar, o solvente foi removido soprando-se com nitrogênio. O resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). O solvente foi secado sob uma corrente de nitrogênio no aparelho de sopro Radleys para produzir o composto do título (29,2 mg). LCMS (Método A) Rt = 0,51 min, [M + H]+ = 601,1.

[00425] Similarmente foram preparados: Exemplo 22 N-(2-(2-Fluoro-4-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1- il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00426] A uma solução agitada de N-(2-(2-fluoro-4-formilfenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (99 mg, 0,210 mmol) em MeOH (1 mL) e ácido acético (0,1 mL) foi adicionado 2- (piperidin-4-il)propan-2-ol (34 mg, 0,237 mmol) e a reação deixada agitar na temperatura ambiente por 30 min, quando 2-picolinoborano (32 mg, 0,299 mmol) foi adicionado em um carregador. Depois de agitar durante o final de semana, o solvente foi removido a vácuo e o resíduo dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (2 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). O solvente foi evaporado a vácuo para produzir o composto do título (82 mg) como um sólido branco. LCMS (Método B) Rt = 0,69 min, [M + H]+ = 600,2. Exemplo 23 N-(2-(4-(((cis)-2,6-Dimetilmorfolino)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00427] A uma solução de ácido (4-(bromometil)fenil)borônico (1 g, 4,65 mmol), em 2-metiltetra-hidrofurano (15 mL) foi adicionada (cis)-2,6- dimetilmorfolina (0,536 g, 4,65 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 2 h. A mistura de reação foi filtrada através de celite, lavada com EtOAc (50 mL) e o filtrado foi evaporado até ácido (4-(((cis)-2,6-dimetilmorfolino)metil)fenil)borônico bruto (1,6 g).

[00428] A uma solução agitada de N-(2-cloropiridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida (250 mg, 0,650 mmol) em 1,4-dioxano (8 mL) e água (2 mL), foi adicionada um porção do ácido (4-(((cis)-2,6- dimetilmorfolino)metil)fenil)borônico bruto (405 mg), K3PO4 (344 mg, 1,624 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada por 30 min na temperatura ambiente. Pré-catalisador Xphos de 2a geração (51,1 mg, 0,065 mmol) foi adicionado na temperatura ambiente e a mistura de reação foi desgaseificada mais uma vez por 30 min na temperatura ambiente. O tubo selado foi agitado por 18 h a 110°C. A mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com EtOAc (100 mL). O filtrado foi evaporado e o resíduo (500 mg) foi purificado pela HPLC preparativa (Método B). As frações coletadas foram liofilizadas para produzir o composto do título (54 mg) como um sólido branco. LCMS (Método G) Rt = 1,40 min, [M + H]+ = 554,3. Exemplo 24 2-Metóxi-5-morfolino-N-(2-(4-(morfolinometil)fenil)piridin-4-il)piridino-3- sulfonamida

[00429] A uma solução de ácido (4-(bromometil)fenil)borônico (1 g, 4,65 mmol), em 2-metiltetra-hidrofurano (15 mL) foi adicionada morfolina (0,405 g, 4,65 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 2 h. A mistura de reação foi filtrada em celite, lavada com EtOAc (50 mL) e o filtrado foi evaporado para produzir ácido (4-(morfolinometil)fenil)borônico bruto (1,5 g).

[00430] A uma solução agitada de N-(2-cloropiridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida (250 mg, 0,650 mmol) em 1,4-dioxano (8 mL) e água (2 mL), foi adicionada uma porção de ácido (4- (morfolinometil)fenil)borônico bruto (359 mg, 1,624 mmol), K3PO4 (344 mg, 1,624 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada por 30 min na temperatura ambiente. Pré-catalisado Xphos de 2a geração (25,5 mg, 0,032 mmol) foi adicionado na temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada mais uma vez por 30 min na temperatura ambiente. O tubo selado foi agitado por 18 h a 110°C. A mistura de reação foi filtrada através de celite, lavada com EtOAc (100 mL) e o filtrado foi evaporado. O resíduo (400 mg) foi purificado pela HPLC preparativa (Método C). As frações coletadas foram liofilizadas para produzir o composto do título (116 mg) como um sólido branco. LCMS (Método G) Rt = 1,29 min, [M + H]+ = 526,3. Exemplo 25 N-(2-(2-Fluoro-4-(piperazin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00431] Um frasco de fundo redondo foi carregado com 4-(3-fluoro-4- (4-(2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamido)piridin-2-il)benzil)- piperazino-1-carboxilato de terc-butila (1128 mg, 1,755 mmol) e DCM (10 mL). O ácido trifluoroacético (1,5 mL, 19,60 mmol) foi depois adicionado, o vaso foi selado e a reação foi agitada na temperatura ambiente por 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em DMSO:água 4:9 (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10) e eluído em uma coluna em gel de sílica com fase reversa C18 usando um gradiente de 5% a 95% de MeCN (contendo 0,1% de NH3) em água (com um modificador de bicarbonato de amônio ajustado até o pH 10). As frações desejadas foram concentradas sob pressão reduzida, dissolvidas na quantidade mínima de DCM:MeOH 50:50 e o precipitado que formou foi coletado pela filtração e secado para produzir o composto do título (763 mg) como um sólido branco. LCMS (Método A) Rt = 0,45 min, [M + H]+ = 543,3. Exemplo 26 2-(Dimetilamino)-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00432] Um frasco foi carregado com morfolina (0,064 mL, 0,731 mmol), terc-butóxido de sódio (176 mg, 1,828 mmol) e 5-cloro-2- (dimetilamino)-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida (200 mg, 0,366 mmol) em tetraidrofurano seco (10 mL). A mistura de reação foi desgaseificada usando argônio por 30 min e 2'-(diciclo-hexilfosfino)-N,N-dimetil-[1,1'-bifenil]-2-amina (23,02 mg, 0,058 mmol) foi adicionada seguida por Pd2(dba)3 (16,74 mg, 0,018 mmol). O vaso de reação foi selado e aquecido em micro-ondas Anton Parr até 120°C por 40 min. A mistura de reação foi filtrada através de celite, lavada com 10% de MeOH/DCM (10 mL) e o filtrado foi evaporado. O resíduo (350 mg) foi purificado pela HPLC preparativa (Método F). As frações coletadas foram liofilizadas para produzir o composto do título (97 mg) como sólido amarelo claro. LCMS (Método H) Rt = 2,96 min, [M + H]+ = 598,3. Exemplo 27 N-(2-(4-((4-(terc-Butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-2- (dimetilamino)-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00433] Um tubo selado foi carregado com morfolina (0,078 mL, 0,891 mmol), terc-butóxido de sódio (214 mg, 2,228 mmol) e N-(2-(4-((4-(terc- butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-5-cloro-2- (dimetilamino)piridino-3-sulfonamida (250 mg, 0,446 mmol) em tetraidrofurano seco (10 mL). A mistura de reação foi desgaseificada usando argônio por 30 min e 2'-(diciclo-hexilfosfino)-N,N-dimetil-[1,1'-bifenil]-2- amina (28,1 mg, 0,071 mmol) foi adicionada seguida por Pd2(dba)3 (20,40 mg, 0,022 mmol). A mistura de reação resultante foi agitada a 120°C por 40 min. A mistura de reação foi filtrada, lavada com 10% de MeOH/DCM (10 mL) e o filtrado foi evaporado. O resíduo (450 mg) foi purificado pela HPLC preparativa (Método H). As frações desejadas foram liofilizadas para produzir o composto do título (50 mg) como um sólido amarelo claro. LCMS (Método H) Rt = 3,11 min, [M + H]+ = 612,3. Exemplo 28 N-(2-(4-((4-(terc-Butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-2- metóxi-N-metil-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00434] N-(2-(4-((4-(terc-Butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (100 mg, 0,167 mmol) foi dissolvida em DMF (2 mL) e foi tratada com carbonato de potássio (27,7 mg, 0,200 mmol). 10 min depois, iodometano (0,013 mL, 0,200 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 18 h. A mistura de reação foi depois concentrada a vácuo, o resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (1 mL) e purificada pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). O solvente foi secado sob uma corrente de nitrogênio no aparelho de sopro Radleys para produzir o composto do título (42,3 mg). LCMS (Método B) Rt = 1,25 min, [M + H]+ = 613,2. Exemplo 29 N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-N-metil-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00435] 5-Cloro-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)- fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-N-metilpiridino-3-sulfonamida (150 mg, 0,274 mmol), terc-butóxido de sódio (132 mg, 1,368 mmol), morfolina (0,048 mL, 0,547 mmol), Pd2(dba)3 (12,53 mg, 0,014 mmol) e Davephos (16,16 mg, 0,041 mmol) foram adicionados a um frasco de micro-ondas seguido por tetraidrofurano (5 mL). O frasco foi selado e aquecido até 120°C por 30 min no aparelho de micro-ondas. O mesmo procedimento foi repetido (na mesma escala exata) para produzir mais material bruto. As misturas de reação das duas reações foram combinadas e concentradas a vácuo, o resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (3 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). O solvente foi concentrado a vácuo e o resíduo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 2 x 1 mL e repurificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). O solvente foi concentrado a vácuo para dar uma goma amarela que foi transferida a um frasco e deixada na estufa a vácuo por 2 h para produzir o composto do título (98,7 mg) como um sólido amarelo. LCMS (Método B) Rt = 1,20 min, [M + H]+ = 599,2. Exemplo 30 N-Etil-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00436] Morfolina (0,243 mL, 2,79 mmol), 5-cloro-N-etil-N-(2-(2- fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi- piridino-3-sulfonamida (785 mg, 1,397 mmol), Davephos (82 mg, 0,209 mmol), terc-butóxido de sódio (671 mg, 6,98 mmol) e Pd2(dba)3 (63,9 mg, 0,070 mmol) foram adicionados ao frasco de micro-ondas seguido por tetraidrofurano (12 mL). O frasco foi selado e aquecido até 120°C por 30 min em um aparelho de micro-ondas. A mistura de reação foi depois concentrada a vácuo e particionada entre EtOAc (150 mL) e bicarbonato de sódio aquoso saturado (150 mL), a fase aquosa foi separada e extraída com mais EtOAc (150 mL). Os extratos orgânicos combinados foram depois secados através de uma frita hidrofóbica e concentrados a vácuo para dar um óleo laranja. O óleo foi purificado pela troca iônica de NH2 SPE (50 g) eluindo com um gradiente de 0 a 25% de EtOAc em ciclo-hexano. As frações apropriadas foram combinadas e concentradas a vácuo para dar um óleo amarelo. O óleo amarelo foi depois dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (3 x 1 mL) e purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método B). O solvente foi concentrado a vácuo para dar um sólido off-white. O sólido foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (1 mL) e repurificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A). O solvente foi concentrado a vácuo para produzir o composto do título (222,4 mg) como um sólido amarelo claro. LCMS (Método B) Rt = 1,25 min, [M + H]+ = 613,4. Exemplo 31 N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolino-N-propilpiridino-3-sulfonamida

[00437] N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (50 mg, 0,086 mmol) foi dissolvida em DMF (1 mL). A esta foi adicionado carbonato de potássio (20 mg, 0,145 mmol) e 1-iodopropano (13 μl, 0,133 mmol). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente sob uma atmosfera de nitrogênio por 4 h. Uma outra porção de 1-iodopropano (130 μl, 1,33 mmol) foi adicionada e a reação foi agitada na temperatura ambiente por 16,5 h. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc (10 mL) e água (10 mL). O extrato orgânico foi secado (frita hidrofóbica) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A) para produzir o composto do título (34 mg) como um sólido marrom claro. LCMS (Método B) Rt = 1,32 min, [M + H]+ = 627,4. Exemplo 32 N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-N- isopropil-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00438] N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (100 mg, 0,171 mmol) foi dissolvida em DMF (1 mL). A esta foi adicionado carbonato de potássio (100 mg, 0,724 mmol) e 2-iodopropano (0,1 mL, 1,0 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 60°C por 15,5 h. Uma outra porção de 2- iodopropano (0,1 mL, 1,0 mmol) foi adicionada e a mistura de reação aquecida a 60°C por 9 h. As porções adicionais de carbonato de potássio (100 mg, 0,724 mmol) e 2-iodopropano (0,5 mL, 5,0 mmol) foram adicionadas e a mistura de reação foi aquecida a 60°C por 15 h. A mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente, particionada entre EtOAc (20 mL) e água (20 mL). O extrato orgânico foi secado (frita hidrofóbica) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A) para produzir o composto do título (39 mg) como um sólido off-white. LCMS (Método B) Rt = 1,29 min, [M + H]+ = 627,4. Exemplo 33 2-(N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamido)acetato de etila

[00439] N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (50 mg, 0,086 mmol) foi dissolvida em DMF (1 mL). A esta foi adicionado carbonato de potássio (20 mg, 0,145 mmol) e 2-cloroacetato de etila (0,014 mL, 0,128 mmol). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 4 h. Uma outra porção de 2-cloroacetato de etila (0,14 mL, 1,28 mmol) foi adicionada e a reação foi agitada na temperatura ambiente por 18 h. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc (10 mL) e água (10 mL). O extrato orgânico foi secado (frita hidrofóbica) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A) para produzir o composto do título (28 mg) como um sólido off- white. LCMS (Método B) Rt = 1,23 min, [M + H]+ = 671,4. Exemplo 34 Pivalato de (N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin - 4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamido)metila

[00440] N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (50 mg, 0,086 mmol) foi dissolvida em DMF (1 mL). A esta foi adicionado carbonato de potássio (20 mg, 0,145 mmol) e pivalato de clorometila (0,018 mL, 0,128 mmol). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente sob uma atmosfera de nitrogênio por 4 h. Uma outra porção de pivalato de clorometila (0,180 mL, 1,28 mmol) foi adicionada e a reação foi agitada na temperatura ambiente por 18 h. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc (10 mL) e água (10 mL). O extrato orgânico foi secado (frita hidrofóbica) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pela HPLC Preparativa Automatizada Direcionada à Massa (Método A) para produzir o composto do título (32 mg) como um sólido off-white. LCMS (Método B) Rt = 1,39 min, [M + H]+ = 699,5.

[00441] Um composto adicional que foi preparado é: Exemplo 35 N-(2-(5-Cloro-2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)- 2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida LCMS (Método G) Rt = 1,60 min, [M + H]+ = 619,6.

[00442] O Exemplo 35 pode ser preparado pelo seguinte método:

[00443] A uma solução agitada de N-(2-cloropiridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida (50 mg, 0,130 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) e água (3 mL), foi adicionado ácido (5-cloro-2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)borônico (300 mg, 0,954 mmol), K3PO4 (69 mg, 0,326 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada por 30 min na temperatura ambiente. Pré-catalisado Xphos de 2a geração (10 mg, 0,013 mmol) foi adicionado na temperatura ambiente e a mistura de reação foi desgaseificada mais uma vez por 30 min na temperatura ambiente. O tubo selado foi agitado por 18 h a 110°C. A mistura de reação foi filtrada através de celite, lavada com EtOAc (100 mL) e o filtrado foi concentrado a vácuo para produzir 300 mg resíduo bruto.

[00444] A reação foi repetida em larga escala:

[00445] A uma solução agitada de N-(2-cloropiridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida (250 mg, 0,650 mmol) em 1,4-dioxano (30 mL) e água (6 mL), foi adicionado ácido (5-cloro-2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)borônico (1635 mg, 5,20 mmol), K3PO4 (344 mg, 1,624 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi desgaseificada por 30 min na temperatura ambiente. Pré-catalisado Xphos de 2a geração (51 mg, 0,065 mmol) foi adicionado na temperatura ambiente e a mistura de reação foi desgaseificada mais uma vez por 30 min na temperatura ambiente. O tubo selado foi agitado por 18 h a 110°C. A mistura de reação foi filtrada através de celite, lavada com EtOAc (300 mL) e o filtrado foi concentrado a vácuo para produzir 2,5 g de resíduo bruto.

[00446] Os resíduos brutos combinados (2,8 g) foram purificados pela HPLC preparativa (Método J). As frações coletadas foram liofilizadas para produzir o composto do título (40 mg) como um sólido branco. LCMS (Método G) Rt = 1,60 min, [M + H]+ = 619,6. Exemplo 36 Rac-N-(2-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)- 2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida

[00447] Uma solução de rac-5-cloro-N-(2-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetil- morfolino)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-2-metoxipiridino-3- sulfonamida (0,150 g, 0,288 mmol) e terc-butóxido de sódio (0,083 g, 0,864 mmol) em tolueno anidro (5 mL) foi desgaseificada usando argônio por 15 min. 2- Diciclo-hexilfosfino-2‘,6‘-di-isopropoxibifenila (0,013 g, 0,029 mmol), Pd(OAc)2 (0,003 g, 0,014 mmol) e morfolina (0,050 mL, 0,576 mmol) foram adicionados e a mistura foi desgaseificada usando argônio por um adicional de 15 min. A mistura de reação foi depois agitada em tubo selado a 90°C por 6 h. A mistura foi filtrada através de celite, lavada com EtOAc (2 x 50 mL) e o solvente removido a vácuo para produzir material bruto como um sólido marrom. A reação foi repetida em uma escala de 0,08 g e os lotes brutos combinados foram purificados pela HPLC preparativa (Método K). As frações coletadas foram concentradas a vácuo para produzir o composto do título (48 mg) como um sólido off-white. LCMS (Método G) Rt = 1,48 min, [M + H]+ = 572,2. Exemplo 37 Rac-N-(2-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)- 2-etóxi- 5-morfolinopiridino-3- sulfonamida

[00448] Uma solução de rac-5-cloro-N-(2-(4-(((2S,6R)-2,6- dimetilmorfolino)metil)-2-fluorofenil)piridin-4-il)-2-etoxipiridino-3- sulfonamida (300 mg, 0,561 mmol) e terc-butóxido de sódio (162 mg, 1,682 mmol) em tolueno anidro (5 mL) foi desgaseificada usando argônio por 15 min. 2-Diciclo-hexilfosfino-2‘,6‘-di-isopropoxibifenila (26 mg, 0,056 mmol), Pd(OAc)2 (6 mg, 0,028 mmol) e morfolina (0,098 mL, 1,121 mmol) foram adicionados e a mistura foi desgaseificada usando argônio por um adicional de 5 min. A mistura de reação foi depois agitada em um tubo selado a 90°C por 6 h. A mistura foi extinta com água (30 mL) e a fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 30 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 mL), secados em sulfato de sódio, filtrados e concentrados a vácuo. O material bruto foi triturado com éter dietílico (2 x 20 mL) para produzir o composto do título (58 mg) como um sólido amarelo claro. LCMS (Método G) Rt = 1,58 min, [M + H]+ = 586,2.

POLIMORFO EXPERIMENTAL Difração de Raio X em pó (XRPD)

[00449] Os dados foram adquiridos em um difratômetro de pó PANalytical X’Pert Pro, modelo PW3040/60 usando um detector X’Celerator. As condições de aquisição foram: radiação: Cu Kα, tensão de gerador: 40 kV, corrente do gerador: 45 mA, ângulo inicial: 2,0° 2θ, ângulo final: 40,0° 2θ, tamanho da etapa: 0,0167° 2θ, tempo por etapa: 31,75 segundos. A amostra foi preparada montando-se uns poucos miligramas de amostra sobre uma placa de bolacha de silício (fundo zero), resultando em uma camada fina de pó. N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (anidrato - Forma 1) Método A

[00450] A N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida como a Forma 1 de anidrato é preparada pelas seguintes etapas: 1. dissolver 8 kg líquidos de N-(2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino- 3-sulfonamida (hidrato - Forma 3) em 6 vol (53,5 kg) DMSO a 70,6°C em um vaso de reação (R1 usado para dissolução). 2. filtração de polimento. 3. usar 0,32 vol (2,8 Kg) de DMSO para lavar R1 e o tubo. 4. garantir que a solução foi clara no segundo vaso de reação (Usando R2 para cristalização). 5. adicionar 3,18 vol (20 Kg) de IPA para R2 acima 68°C. 6. esfriar até 40 a 42°C em 0,5 horas. 7. semear (2,1%) (170 g) com semente micronizada. 8. manter por 27 horas de 40 a 42°C. 9. adicionar 16,55 vol (104 Kg) de IPA para R2 em 20 horas. 10. manter por 3 horas de a 40 a 42°C. 11. esfriar a cerca de 4 a 5°C in 8 horas. 12. manter por 13,5 horas de 4 a 5°C. 13. centrifugar a suspensão e lavar R2 e torta com 2,55 vol de IPA para obter 8,86 Kg de sólidos úmidos. 14. secar sob vácuo a 40°C por 36 horas para obter 6,46 Kg de sólidos, depois de peneirar, 6,44 Kg de sólidos foram obtidos. Método B N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida como a Forma 1 de anidrato é preparada agitando-se uma suspensão de N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropil- piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3- sulfonamida (hidrato - Forma 3) em um de vários solventes tais como 1- butanol, 2-metóxietanol, nitrometano, acetonitrila, acetato de metila ou 4- metil-2-pentanona sob ciclagem da temperatura entre 40 e 5°C por quatro dias.

[00451] Os dados de difração de raio X em pó (XRPD) são mostrados na Figura 1.

[00452] Os picos característicos para a forma de estado sólido são resumidos na Tabela 1 com espaçamentos de retícula calculados. As posições de pico foram medidas usando o software Highscore. Tabela 1 N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)-piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (hidrato - Forma 1) Método A

[00453] N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (mistura de formas) é empastada em água por aproximadamente 7 dias na presença de semente. Conversão da Forma 1 para hidrato é monitorada por FT-Raman e XRPD. Os sólidos são filtrados e lavados com água para dar a Forma 1 de hidrato. Método B

[00454] N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida como a Forma 1 de hidrato é preparada agitando-se uma suspensão de N-(2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolino- piridino-3-sulfonamida (hidrato - Forma 3) em um de vários solventes tais como acetonitrila/5% vol de água, acetona/5% vol de água, THF/5% vol de água, 2-propanol/5% vol de água, acetonitrila/10% vol de água ou acetona/10% de água sob ciclagem da temperatura entre 40 e 5°C por quatro dias.

[00455] A Forma 1 de hidrato é o hidrato de 1,5 equivalentes.

[00456] Os dados de difração de raio X em pó (XRPD) são mostrados na Figura 2.

[00457] Os picos característicos para a forma de estado sólido são resumidos na Tabela 2 com espaçamentos de retícula calculados. As posições de pico foram medidas usando software Highscore. Tabela 2 N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (anidrato - Forma 2) Método A

[00458] IPA é adicionado a uma solução de N-(2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolino- piridino-3-sulfonamida (cerca de 1 g) em DMSO (cerca de 5,9 ml) até a composição tenha aproximadamente 60% v/v IPA. A solução turva é agitada a 30°C para dar uma pasta fluida espessa dentro de 50 minutes. A pasta fluida é agitada durante o final de semana e a Forma 2 de anidrato é isolada pela filtração. Método B

[00459] N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida como a Forma 2 de anidrato é preparada agitando-se uma suspensão de N-(2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolino- piridino-3-sulfonamida (hidrato - Forma 3) em um de vários solventes tais como 1-propanol, sulfóxido de dimetila, acetona, 2-butanona, clorofórmio ou THF sob ciclagem da temperatura entre 40 e 5°C por quatro dias.

[00460] Os dados de difração de raio X em pó (XRPD) são mostrados na Figura 3.

[00461] Os picos característicos para a forma de estado sólido são resumidos na Tabela 3 com espaçamentos de retícula calculados. As posições de pico foram medidas usando software Highscore. Tabela 3 N-(2-(2-Fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida (hidrato - Forma 3)

[00462] As frações puras contendo N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropil- piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3- sulfonamida obtidas pela cromatografia são concentradas e os sólidos colocados em suspensão em DCM. O solvente é removido a vácuo e o sólido secado a cerca de 43 a 44°C por 24 horas para dar N-(2-(2-fluoro-4-((4- isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolino- piridino-3-sulfonamida como a Forma 3 de hidrato.

[00463] A Forma 3 de hidrato é o hidrato de 0,225 equivalentes.

[00464] Os dados de difração de raio X em pó (XRPD) são mostrados na Figura 4.

[00465] Os picos característicos para a forma de estado sólido são resumidos na Tabela 4 com espaçamentos de retícula calculados. As posições de pico foram medidas usando software Highscore. Tabela 4

DADOS BIOLÓGICOS Ensaio HTRF de PI3K

[00466] A ligação de compostos ao PI3K-alfa/beta/delta/gama é determinada pelos ensaios de fluorescência resolvida com o tempo homogênea (HTRF) como segue;

[00467] Em resumo, o composto sólido é dissolvido em 100% de DMSO em uma concentração de 2 mM. As diluições são preparadas em 100% de DMSO usando uma diluição escalonada em série de 1 em 4. As diluições são transferidas para placas de ensaio Greiner pretas de baixo volume garantindo que a concentração de DMSO fosse constante através da placa a 1% (0,1 μl/poço).

[00468] O Tampão de Reação de PI3K (contém 50 mM de HEPES pH 7,0 (NaOH), 150 mM de NaCl, 10 mM de MgCl2, 2,3 mM de colato de sódio, 10 μM de CHAPS completado em água milliQ). DTT fresco é adicionado em uma concentração final de 1 mM no dia de uso. Wortmanina em uma concentração suficiente para produzir 100% de inibição (8.33e-6 M) é adicionada à coluna 18 das placas de composto.

[00469] Soluções de enzima: 1X Tampão de ensaio de PI3K contendo: • 550 pM de enzima PI3K-Alfa (275 pM de concentração final do ensaio) • 800 pM de enzima PI3K-Beta (400 pM concentração final do ensaio) • 3 nM de enzima PI3K-Delta (1,5 nM de concentração final do ensaio) • 10 nM de enzima PI3K-Gama (5 nM de concentração final do ensaio)

[00470] Estas concentrações são ideais para se obter um sinal:fundo entre 1,5 e 4,5. A solução de enzima é adicionada às colunas 1 a 24 (3 μl/poço) e as placas são incubadas durante 15 minutos na temperatura ambiente.

[00471] Solução de substrato: 1X Tampão de Ensaio de PI3K contendo: • PI3K-Alfa: 500 μM de ATP, 20 μM de PIP2 e 120 nM de biotina-PIP3. (As concentrações finais do ensaio são 250 μM de ATP, 10 μM de PIP2 (ambos em Km) e 40 nM de biotina-PIP3) • PI3K-Beta: 800 μM de ATP, 20 μM de PIP2 e 120 nM de biotina-PIP3. (As concentrações finais do ensaio são 400 μM de ATP, 10 μM de PIP2 (ambos em Km) e 40 nM de biotina-PIP3) • PI3K-Delta: 160 μM de ATP, 20 μM de PIP2 e 120 nM de biotina-PIP3. (As concentrações finais do ensaio são 80 μM de ATP, 10 μM de PIP2 (ambos em Km) e 40 nM de biotina-PIP3) • PI3K-Gama: 30 μM de ATP, 20 μM de PIP2 e 120 nM de biotina-PIP3. (As concentrações finais do ensaio são 15 μM de ATP, 10 μM de PIP2 (ambos em Km) e 40 nM de biotina-PIP3)

[00472] Isto é adicionado a todos os poços e as placas são incubadas por 1 hora na temperatura ambiente.

[00473] Solução de Detecção: Tampão de Detecção de PI3K (contém 50 mM de HEPES pH 7,0 (HCl), 150 mM de NaCl, 2,3 mM de colato de sódio, 10 μM de CHAPS, 240 mM de fluoreto de potássio) contendo 2 mM de DTT (2X concentração final), 90 nM de GRP-1 domínio PH, 300 nM de Estreptavidina-APC e 24 nM de Európio-anti-GST (6X concentrações finais)

[00474] Isto é misturado deixado na temperatura ambiente (protegido da luz).

[00475] Solução STOP: Tampão STOP de PI3K (contém 50 mM de HEPES pH 7,0 (HCl), 150 mM de NaCl, 2,3 mM de colato de sódio, 10 μM de CHAPS, 150 mM de EDTA).

[00476] A solução de detecção é diluída 1:1 com solução STOP e adicionada a todos os poços (3 μl/poço). As placas são cobertas e incubadas sobre a bancada durante 45 a 60 minutos.

[00477] As placas são lidas em um PerkinElmer Envision, medindo TR-FRET entre o complexo formado entre o domínio PH rotulado com GST e PIP3 biotinilado que tanto recruta fluoróforos (anti-GST rotulado com Európio & Strep-APC respectivamente). Na presença de um inibidor, este complexo é rompido pela ação competitiva de PIP3 não biotinilado (formado no ensaio pela fosforilação de PIP2 pela cinase & ATP). A partir disto, a razão de aceitador/doador foi calculada (Xex = 317 nm, Xem doador = 615 nm, em aceitador = 665 nm) e usando para a análise de dados.

[00478] Os compostos e sais dos Exemplos 1 a 37 foram testados nos ensaios de PI3K Alfa, Beta, Delta e/ou Gama acima ou ensaios similares e foram descobertos ter uma pIC50 média no ensaio de PI3K Delta de pelo menos 5 ou maior. Os Exemplos 1 a 3, 5 a 9, 12 a 19, 21 a 27 e 35 a 37 foram descobertos ter uma pIC50 média no ensaio de PI3K Delta de pelo menos 8,5 ou maior. Por exemplo, o Exemplo 1 foi descoberto ter uma pIC50 média no ensaio de PI3K Delta de 9.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de que é da fórmula (I): em que R1 é alcóxi C1-6 ou -N(alquila C1-6)2; R2 é hidrogênio ou alquila C1-6 opcionalmente substituído por - C(O)Oalquila C1-6 ou -OC(O)alquila C1-6; R3, R4, R5 e R6 são, cada um, independentemente selecionados a partir de hidrogênio e halógeno; R7 e R8 são, cada um, independentemente alquila C1-6, ou R7 e R8, juntos com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, são ligados para formar uma heterociclila de 5 ou 6 membros em que a heterociclila de 5 ou 6 membros opcionalmente contém um átomo de nitrogênio adicional e é opcionalmente substituído por cicloalquila C3-6, heterociclila de 4 a 6 membros contendo um ou dois heteroátomos independentemente selecionados a partir de oxigênio e nitrogênio, ou alquila C1-6 em que o alquila C1-6 é opcionalmente substituído por hidróxi ou alcóxi C1-6, ou R7 e R8, juntos com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, são ligados para formar uma heterociclila de 5 ou 6 membros em que a heterociclila de 5 ou 6 membros contém um átomo de oxigênio e é opcionalmente substituído por um ou dois substituintes independentemente selecionados a partir de alquila C1-6; ou um sal do mesmo.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um sal do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é alcóxi C1-6.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal do mesmo, caracterizado pelo fato de que R2 é hidrogênio.

4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um sal do mesmo, caracterizado pelo fato de que R3, R4, R5 e R6 são, cada um, independentemente selecionados a partir de hidrogênio e flúor.

5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, ou um sal do mesmo, caracterizado pelo fato de que R7 e R8, junto com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, são ligados para formar uma heterociclila de 5 ou 6 membros em que a heterociclila de 5 ou 6 membros opcionalmente contém um átomo de nitrogênio adicional e é opcionalmente substituído por cicloalquila C3-6, heterociclila de 4 a 6 membros contendo um ou dois heteroátomos independentemente selecionados a partir de oxigênio e nitrogênio, ou alquila C1-6 em que o alquila C1-6 é opcionalmente substituído por hidróxi ou alcóxi C1-6.

6. Composto, caracterizado pelo fato de que é: N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(TERC-butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((dimetilamino)metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5- morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(3-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(TERC-butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)- 2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-ciclobutilpiperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2,6-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(SEC-butil)piperazin-1-il)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(3-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(3,5-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; 2-metóxi-5-morfolino-N-(2-(4-((4-(oxetan-3-il)piperazin-1-il)- metil)fenil)piridin-4-il)piridino-3-sulfonamida; N-(2-(2,3-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-(oxetan-3-il)piperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-ciclobutilpiperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2,5-difluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-(2-metoxietil)piperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((3-metilpirrolidin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((2-metilpirrolidin-1-il)metil)fenil)piridin-4- il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-(piperidin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1-il)- metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-(((CIS)-2,6-dimetilmorfolino)metil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; 2-metóxi-5-morfolino-N-(2-(4-(morfolinometil)fenil)piridin-4- il)piridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-(piperazin-1-ilmetil)fenil)piridin-4-il)-2- metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; 2-(dimetilamino)-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)- metil)fenil)piridin-4-il)-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(TERC-butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)- piridin-4-il)-2-(dimetilamino)-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-((4-(TERC-butil)piperazin-1-il)metil)-2-fluorofenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-N-metil-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-N-metil-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-etil-N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolino-N-propilpiridino-3-sulfonamida; N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-N-isopropil-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; 2-(N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)fenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamido)acetato de etila; Pivalato de (N-(2-(2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)- metil)fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamido)metila; ou N-(2-(5-cloro-2-fluoro-4-((4-isopropilpiperazin-1-il)metil)- fenil)piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)-2-fluorofenil)- piridin-4-il)-2-metóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; N-(2-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)-2-fluorofenil)- piridin-4-il)-2-etóxi-5-morfolinopiridino-3-sulfonamida; ou um sal dos mesmos.

7. Composto, caracterizado pelo fato de que é: ou um sal do mesmo.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 7, caracterizado pelo fato de que está na forma de um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável.

9. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

10. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável, caracterizado pelo fato de que é para manufatura de um medicamento para uso em terapia médica.

11. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou um sal do mesmo farmaceuticamente aceitável, caracterizado pelo fato de que é para fabricação de um medicamento para o tratamento de um distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase.

12. Uso de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase é uma doença respiratória, uma ciliopatia, uma infecção bacteriana ou exacerbação bacteriana de uma condição respiratória ou dano pulmonar, uma infecção viral ou exacerbação viral de uma condição respiratória ou dano pulmonar, uma infecção respiratória não viral, uma doença alérgica, uma doença autoimune, um distúrbio inflamatório, diabete, uma doença cardiovascular, uma malignidade hematológica, uma doença neurodegenerativa, pancreatite, insuficiência de órgão múltiplo, doença renal, agregação de plaqueta, câncer, motilidade espermática, rejeição a transplante, rejeição a enxerto, lesão pulmonar, dor, doença fibrótica, depressão ou um distúrbio psicótico.

13. Uso de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase é uma doença respiratória.

14. Uso de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase é asma.

15. Uso de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o distúrbio mediado pela atividade inadequada da PI3 cinase é COPD.