WO2019026924A1 - セイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物、それを用いたうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法、およびセイヨウカボチャ植物へのうどんこ病抵抗性の付与方法 - Google Patents

セイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物、それを用いたうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法、およびセイヨウカボチャ植物へのうどんこ病抵抗性の付与方法 Download PDF

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敬太郎 阪口
浩史 浅見
信太郎 松井
彰人 加野
紗也加 小谷
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タキイ種苗株式会社
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Definitions

  • the present invention provides a powdery mildew resistant marker for a pumpkin plant, a powdery mildew resistant resistant pumpkin plant, a method for producing a powdery mildew resistant resistant pumpkin plant using the same, and a powdery mildew resistant to the pumpkin powder plant It relates to the method of giving the sex.
  • Non-patent Document 1 Non-patent Document 1
  • the present invention provides a novel powdery mildew resistant marker for a pumpkin plant of squash, a powdery mildew resistant resistant squash plant, a method of producing a powdery mildew resistant resistant squash plant using the same, and a method for producing a squash plant
  • the purpose is to provide a method for imparting mildew resistance.
  • the powdery mildew resistance marker (hereinafter also referred to as “resistance marker”) of the pumpkin plant of the present invention is a powdery mildew resistance locus on chromosome 3 (hereinafter referred to as " (Also referred to as “resistance locus”).
  • the powdery mildew-resistant European pumpkin plant (hereinafter also referred to as "resistant pumpkin plant”) of the present invention is characterized by including a powdery mildew-resistant locus on chromosome 3.
  • production method The method for producing powdery mildew-resistant European pumpkin plants according to the present invention (hereinafter also referred to as “production method”) is characterized by comprising the following steps (a) and (b): (A) Step of crossing the powdery mildew-resistant resistant pumpkin plant of the present invention with another pumpkin powder plant (b) From the pumpkin plant or its progeny obtained from the step (a), Process of selecting disease-resistant European pumpkin plants
  • the method for imparting powdery mildew resistance to a pumpkin plant according to the present invention comprises the step of introducing the powdery mildew resistant locus on chromosome 3 into a pumpkin plant. It is characterized by including.
  • the present inventors have found a novel powdery mildew resistance locus as a powdery mildew resistant marker showing resistance to powdery mildew in pumpkin plants.
  • a pumpkin plant containing the resistance marker exhibits powdery mildew resistance.
  • powdery mildew resistant European pumpkin plants can be screened conveniently.
  • the powdery mildew-resistant European pumpkin plant of the present invention can exhibit, for example, powdery mildew resistance, because it contains the above-mentioned resistance locus, for example. For this reason, since the powdery mildew-resistant European pumpkin plant of the present invention does not require conventional pesticide control, it is possible to avoid, for example, the problems of labor and cost of the pesticide application.
  • FIG. 1 is a schematic view showing relative locus positions of single nucleotide polymorphism (SNP) and the like on the third chromosome.
  • FIG. 2 is a photograph showing the evaluation criteria of the onset index of the pumpkin plant of Europe in Example 1.
  • the powdery mildew resistance marker of a pumpkin plant according to the present invention as described above, the powdery mildew resistance marker of a pumpkin plant according to the present invention is characterized by including a powdery mildew resistance locus on chromosome 3.
  • the resistance marker of the present invention is characterized by including the powdery mildew resistance locus on the above-mentioned chromosome 3, and the other constitution and conditions are not particularly limited.
  • a pumpkin plant is a plant classified as Cucurbita maxima of the pumpkin genus Cucurbita .
  • the above-mentioned pumpkin plant may be, for example, a hybrid with a closely related species.
  • Examples of the related species include Cucurbita pepo , Cucurbita moschata and the like.
  • the pathogen of powdery mildew (hereinafter referred to as "powdery mildew") is preferably exemplified by Podosphaera xanthii (also referred to as “ Sphaerotheca fuliginea "), Golovinomyces cichoracearum (also referred to as “ Erysiphe cichoracearum “), etc. Is the Podosphaera xanthii .
  • "powdery mildew resistance” is also referred to as, for example, “powdery mildew resistance”.
  • the resistance means, for example, the ability to inhibit or suppress the development and progression of a disease caused by infection of powdery mildew, and specifically, for example, the absence of a disease, the arrest of the progression of a generated disease, and the development Any of suppression (also referred to as “inhibition”) of the progression of the diseased disease may be used.
  • each chromosome in the above mentioned pumpkin plant is based on the base sequence information of the genome of Cucurbita maxima (var .: Rimu), and the base sequence information of the genome of the target pumpkin plant and the base sequence information of the genome of Rimu It can be determined by comparison.
  • the comparison can be performed with default parameters using, for example, analysis software such as BLAST, FASTA, and the like.
  • the nucleotide sequence information of Rimu genome can be obtained, for example, from the web site of Cucurbit genomics database (Cucurbit Genomics Database) (http://www.icugi.org/ or http://cucurbitgenomics.org/).
  • the resistance marker of the present invention comprises a resistance locus on the above-mentioned chromosome 3, but a squash plant having the above-mentioned resistance locus may for example be any chromosome other than the chromosome 3 in place of the chromosome 3. You may have the said resistance locus on the said 3rd chromosome on the top.
  • the pumpkin plant having the resistance locus is one of chromosome 1, chromosome 2, chromosome 4, chromosome 5, chromosome 6, chromosome 7, chromosome 8, chromosome 9, chromosome 10,
  • the resistance marker of the present invention may contain, for example, the resistance locus on the above-mentioned chromosome 3 in heterozygous form or in homozygous form.
  • said resistant pumpkin plant may comprise at least one resistance marker on a chromosome other than chromosome 3, for example one resistance locus on a chromosome other than chromosome 3.
  • two resistance loci may be included on chromosomes other than chromosome 3.
  • the resistant European pumpkin plant may contain the two resistance loci on the same chromosome or different chromosomes. May be.
  • the powdery mildew resistance locus means a quantitative trait locus or gene region that provides powdery mildew resistance.
  • the quantitative trait loci generally refer to chromosomal regions involved in the expression of quantitative traits. QTLs can be defined using molecular markers that indicate specific loci on chromosomes. Techniques for defining QTLs using said molecular markers are well known in the art.
  • the molecular marker used to define the resistance locus is not particularly limited.
  • the molecular markers include, for example, SNP markers, AFLP (amplified fragment length polymorphism) markers, restriction fragment length polymorphism (RFLP) markers, microsatellite markers, sequence-characterized amplified region (SCAR) markers, and CAPS. (Cleaved amplified polymorphic sequence) markers and the like can be mentioned.
  • SNP markers for example, one SNP may be used as the SNP marker, or a combination of two or more SNPs may be used as the SNP marker.
  • the powdery mildew resistance locus may, for example, be defined by (1) the SNP marker (hereinafter also referred to as “specified”), or (2) by a nucleotide sequence containing the SNP marker. It may be defined, (3) it may be defined by the base sequence of the field between the sites of the two said SNP markers, or it may be defined by the combination of these.
  • the combination is not particularly limited, and, for example, the following combinations can be exemplified.
  • the resistance locus may be defined by, for example, the SNP marker as described in (1) above.
  • the SNP markers are not particularly limited, and examples thereof include MSP_17500, MSP_8, and MSP_41353.
  • the following reference 1 can be referred to for these SNP analysis, for example.
  • MSP_17500, MSP_8, and MSP_41353 are SNP markers newly identified by the present inventors, and those skilled in the art can use the SNP markers based on the nucleotide sequences containing these SNP markers described later. You can specify the seat position of.
  • Reference 1 Guoyu Zhang et. Al. (2012) “A high-density genetic map for identifying genomic sequences and identifying QTLs associated with dwarf vine in pumpkin (Cucurbita maxima Duch.)”, 2005, BMC Genomics, 16: 1101
  • the MSP_17500 (hereinafter, also referred to as “SNP (a)”) is a polymorphism in which the underlined base (the 37th base of SEQ ID NO: 1) in the base sequence of SEQ ID NO: 1 below is C Indicates That is, for example, if the SNP (a) is C, the pumpkin plant is resistant to powdery mildew, and if it is a base other than C (for example, T), the pumpkin plant will be powdery mildew Indicates that it is susceptible.
  • the base sequence of SEQ ID NO: 1 can be obtained, for example, from a pumpkin plant of Europe deposited under accession number FERM BP-22336 described later.
  • the SNP (a) can also be identified, for example, from known information on a database such as the aforementioned web site.
  • SEQ ID NO: 1 5'-CTTCATATTGTTTTGTGTACACCATAAGCCAAGTA [ C ] GCCTTTCAGAAAACAAAGTAGATATTAAGCTGAACTGTCTATGAAGAACTAAAAAG-3 '
  • the MSP_8 (hereinafter, also referred to as “SNP (b)”) is a polymorphism in which the underlined base in parentheses in the nucleotide sequence of the following SEQ ID NO: 2 (59th base of SEQ ID NO: 2) is T Indicates That is, for example, if the SNP (b) is T, the pumpkin plant is resistant to powdery mildew, and if it is a base other than T (for example, G), the pumpkin plant will be powdery mildew Indicates that it is susceptible.
  • the base sequence of SEQ ID NO: 2 can be obtained, for example, from the pumpkin plant of Europe deposited under accession number FERM BP-22336 described later.
  • the SNP (b) can also be identified, for example, from known information on a database such as the aforementioned web site.
  • SEQ ID NO: 2 5'-ACATCTGAAAAAGTTGAAGCTGTTATGTGATGGAGAGATTGCAGAGTGGTTGAAAACG [T] T T G CTCCCCACCTTGCCAAACAGGTCAAA-3 '
  • the MSP_41353 (hereinafter, also referred to as “SNP (c)”) is a polymorphism in which the underlined base in bracket (the 34th base of SEQ ID NO: 3) in the base sequence of the following SEQ ID NO: 3 is C Indicates That is, for example, when the SNP (c) is C, the pumpkin plant of Europe is resistant to powdery mildew, and in the case of a base other than C (for example, in the case of T), the pumpkin plant of Europe is infected with powdery mildew Indicates that it is sex.
  • the base sequence of SEQ ID NO: 3 can be obtained, for example, from a pumpkin plant of Europe deposited under accession number FERM BP-22336 described later.
  • the SNP (c) can also be identified, for example, from known information on a database such as the aforementioned web site.
  • SEQ ID NO: 3 5'-GAGAGTGGGCAACATTTCCCCTTGAAGAAGAG [ C ] TCGTCGGCGGCGGTCATTGTGTGATTACTGGGA-3 '
  • the locus position of the SNP marker on the chromosome is not particularly limited. As shown in FIG. 1, for example, on the third chromosome of the pumpkin plant, the SNP markers are, upstream (MSP_14) to downstream (MSP_16), MSP_41353, MSP_8, and MSP_17500 in this order, as shown in FIG. I am seated.
  • MSP_16 and MSP_14 are used to indicate the locus position of MSP_17500, MSP_8, and MSP_41353 in chromosome 3 of the pumpkin plant of Europe, but one or both of them are used as SNP markers. You may In this case, in the case of the polymorphism of the European pumpkin plant deposited under Accession No.
  • FERM BP-22336 in the explanation of MSP_16 and MSP_14 described later, the European pumpkin plant is resistant to powdery mildew and Accession No. FERM BP In the case of a base other than the polymorphism of the pumpkin plant deposited at -22336, it is shown that the pumpkin plant is susceptible to powdery mildew.
  • MSP_16 and MSP_14 may be used in combination with at least one selected from the group consisting of MSP_17500, MSP_8, and MSP_41353.
  • the number of the SNP markers included in the resistance locus is not particularly limited, and may be, for example, any one or two or more, that is, two or all three of the SNP markers. .
  • the relationship between these three polymorphisms (SNP markers) and powdery mildew resistance has not been reported so far, and the powdery mildew resistance was first found by the present inventors. It is a novel polymorphism involved.
  • the combination in particular of the said SNP marker is not restrict
  • Combination of SNP (a) and SNP (b) Combination of SNP (a) and SNP (c) Combination of SNP (b) and SNP (c) Combination of SNP (a), SNP (b), and SNP (c)
  • the combinations preferred are, for example, the following combinations because they are more correlated with powdery mildew resistance.
  • the resistance locus may be defined, for example, by a base sequence including the SNP marker as shown in the above (2).
  • the resistance locus may be, for example, one consisting of the above base sequence or one containing the above base sequence.
  • the base sequence containing the SNP marker is not particularly limited, and examples thereof include polynucleotides (a), (b) and (c) described below, and the like.
  • the polynucleotides (a), (b) and (c) correspond to the nucleotide sequences containing the SNP markers of the SNP (a), SNP (b) and SNP (c), respectively.
  • the polynucleotide (a) is a base sequence containing the SNP (a), that is, MSP — 17500, and is, for example, the polynucleotide (a1), (a2) or (a3) below.
  • the polynucleotides (a2) and (a3) are polynucleotides each having the same function as the polynucleotide (a1) with respect to the powdery mildew resistance at the resistance locus.
  • the equivalent function means that, for example, a pumpkin plant having a powdery mildew resistance locus specified by the polynucleotide (a2) or (a3) exhibits powdery mildew resistance.
  • the underlined base (C) enclosed in parentheses in SEQ ID NO: 1 is a base corresponding to the polymorphism of the SNP (a).
  • the polynucleotide (a1) can be obtained, for example, from a pumpkin plant deposited under accession number FERM BP-22336 described later.
  • the one or several are, for example, 1 to 18, 1 to 12, 1 to 8, 1 to 4, 1 to 3, 1 or 2 .
  • a numerical range of the number of bases such as the number of bases is, for example, a disclosure of all positive integers belonging to the range. That is, for example, the description “1 to 5” means all disclosures of “1, 2, 3, 4, 5” (the same applies hereinafter).
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 89% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97% or more, 98% or more, 99% or more It is above.
  • the identity can be determined by aligning two base sequences (the same applies hereinafter). Specifically, the identity can be calculated by default parameters using, for example, analysis software such as BLAST and FASTA (the same applies hereinafter).
  • the polynucleotide (b) is a base sequence containing the SNP (b), that is, MSP_8, and is, for example, the polynucleotide (b1), (b2) or (b3) below.
  • the polynucleotides (b2) and (b3) are polynucleotides each having the same function as the polynucleotide (b1) with respect to the powdery mildew resistance at the resistance locus.
  • the equivalent function means that, for example, a pumpkin plant having a powdery mildew resistance locus specified by the polynucleotide of (b2) or (b3) exhibits powdery mildew resistance.
  • the 59th base (T) of (b1) is conserved
  • a polynucleotide consisting of a nucleotide sequence in which one or several bases are deleted, substituted, inserted and / or added in the nucleotide sequence of (b1) (b3) the 59th nucleotide (T) of (b1) A polynucleotide comprising a base sequence having 80% or more identity to the base sequence of (b1).
  • the underlined base (T) enclosed in parentheses in SEQ ID NO: 2 is a base corresponding to the polymorphism of the SNP (b).
  • the polynucleotide of (b1) can be obtained, for example, from a pumpkin plant deposited under the accession number FERM BP-22336 described later.
  • the one or several is, for example, 1 to 17, 1 to 13, 1 to 8, 1 to 4, 1 to 3, 1 or 2 .
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 89% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97% or more, 98% or more, 99% or more It is above.
  • polynucleotides (b2) and (b3) it is preferable that at least one of the 60th base (T) and the 62nd base (G) shown by the underline of the above (b1) is conserved.
  • the description of the polynucleotides of (b2) and (b3) can be used as the one or more and identity, respectively.
  • the polynucleotide of (c) is a base sequence including the SNP (c), that is, MSP — 41353, and is, for example, a polynucleotide of the following (c1), (c2), or (c3).
  • the polynucleotides (c2) and (c3) are polynucleotides each having the same function as the polynucleotide (c1) with respect to the powdery mildew resistance at the resistance locus.
  • the equivalent function means that, for example, a squash plant having the powdery mildew resistance locus specified by the polynucleotide (c2) or (c3) exhibits powdery mildew resistance.
  • (C) The following polynucleotide (c1), (c2) or (c3): (c1) polynucleotide consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 3 (c2): The 34th base (C) of (c1) is conserved A polynucleotide consisting of a nucleotide sequence in which one or several bases are deleted, substituted, inserted and / or added in the nucleotide sequence of (c1) (c3) a 34th nucleotide (C) of (c1) A polynucleotide comprising a base sequence having at least 80% identity to the base sequence of (c1).
  • the underlined base (C) enclosed in parentheses in SEQ ID NO: 3 is a base corresponding to the polymorphism of the SNP (c).
  • the polynucleotide of (c1) can be obtained, for example, from a pumpkin plant deposited under the accession number FERM BP-22336 described later.
  • the one or several is, for example, 1 to 13, 1 to 6, 1 to 3, 1 or 2.
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 89% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97% or more, 98% or more, 99% or more It is above.
  • the number of base sequences including the SNP marker, which the resistance locus has is not particularly limited.
  • any one of the polynucleotides (a), (b) and (c), or It may be two or more, that is, two or all three.
  • the combination in particular of the base sequence containing the said SNP marker is not restrict
  • Combination of Polynucleotides of (a) and (b) Combination of Polynucleotides of (a) and (c) Combination of Polynucleotides of (b) and (c) Above (a), (b), and ( The combination of polynucleotides of c)
  • the base sequence containing the SNP marker includes, for example, a base sequence containing MSP_16 described below (polynucleotide consisting of the base sequence of SEQ ID NO: 4) and a base sequence containing MSP_14 (polynucleotide consisting of the base sequence of SEQ ID NO: 5) At least one may be used.
  • the polymorphisms or underlined bases of each polynucleotide are preserved, and in the base sequence of each polynucleotide, one or several bases are deleted, substituted, inserted and / or / or deleted.
  • a polynucleotide consisting of an added base sequence, or a base indicated by polymorphism or underlining of each polynucleotide is conserved, and consists of a base sequence having 80% or more identity to the base sequence of each polynucleotide It may be a polynucleotide.
  • the descriptions of the (a2) and (a3) can be used.
  • Each of the polynucleotides may be used, for example, in combination with at least one selected from the group consisting of the polynucleotides of (a), (b), and (c).
  • the resistance locus is defined, for example, by the base sequence of the region between the two SNP marker sites, as shown in (3) above. It may be done.
  • the base sequence of the region between the sites of the two SNP markers is not particularly limited, and, for example, between the sites of two SNP markers selected from the group consisting of MSP_16, MSP_17500, MSP_8, MSP_41353, and MSP_14 in the chromosome.
  • the nucleotide sequence of the region of and the like can be mentioned.
  • the base sequence of the region between the sites of the two SNP markers is, for example, of the corresponding two SNP markers in a pumpkin plant (hereinafter also referred to as “deposited line”) deposited under accession number FERM BP-22336 described later Reference can be made to the base sequence of the region between the sites.
  • the nucleotide sequence of the deposited strain the nucleotide sequence of the region between the two SNP marker sites completely or partially matches, for example, the nucleotide sequence of the deposited strain.
  • a squash plant having a resistance locus specified by the base sequence of the region between the two SNP marker sites is, for example, udon. This disease resistance should be shown.
  • the partial identity can be defined, for example, by the identity to the nucleotide sequence of the deposited strain.
  • the identity is, for example, 80% or more, 85% or more, 89% or more, 90% or more, 95% or more, 96% or more, 97% or more, 98% or more, 99% or more.
  • the resistance locus may be, for example, in a region between the sites of the two SNP markers.
  • the MSP_16 (hereinafter, also referred to as “SNP (d)”) represents, for example, polymorphism of the underlined base in brackets in SEQ ID NO: 4.
  • SNP (d) represents a polymorphism that is G in a pumpkin plant deposited under accession number FERM BP-22336 described later
  • the SNP (d) may be, for example, a base other than G, that is, A , T or C may be used.
  • the base sequence of SEQ ID NO: 4 can be obtained, for example, from a pumpkin plant of Europe deposited under accession number FERM BP-22336 described later.
  • the SNP (d) can be identified, for example, also from known information on a database such as the aforementioned web site.
  • SEQ ID NO: 4 5'-ATGAGGAATGATTACGTTTGGAA ACTTTGCAGGTTGTGGGAGT [ G ] CTGGTTGGCAAGCCCCTGAACAACTTCTT-3 '
  • the MSP_14 (hereinafter, also referred to as “SNP (e)”) represents, for example, polymorphism of the underlined base in brackets in SEQ ID NO: 5.
  • SNP (e) represents a polymorphism that is C in a pumpkin plant deposited under accession number FERM BP-22336 described later
  • the SNP (e) may be, for example, a base other than C, that is, A , T or G may be used.
  • the base sequence of SEQ ID NO: 5 can be obtained, for example, from the pumpkin plant of Europe deposited under accession number FERM BP-22336 described later.
  • the SNP (e) can also be identified, for example, from known information on a database such as the aforementioned web site.
  • the upstream end and the downstream end can be identified by the sites of the two SNP markers.
  • the region may be, for example, between the sites of the two SNP markers, and may or may not include both or one of the sites of the two SNP markers, for example.
  • the upstream end and the downstream end of the region become the site of the SNP marker, but the upstream end and the downstream side
  • the base with the end may be, for example, an underlined part in the above-mentioned base sequence, or another base.
  • the two SNP markers that define the region are not particularly limited, and, for example, the following combinations can be exemplified.
  • the resistance locus is defined by the base sequence of the region between the two SNP markers
  • the resistance locus further includes the SNP marker which is positioned on the area in the base sequence of the region. It is preferable to have Specifically, the resistance locus preferably has at least one SNP marker selected from the group consisting of, for example, MSP — 17500, MSP — 8 and MSP — 41353 in the base sequence of the region.
  • the SNP marker located on the region may be, for example, one or both of the two SNP marker sites defining the region on the chromosome, or the two SNPs defining the region. It may be a SNP marker which is located between the sites of markers. The former is also referred to as the SNP marker at the end of the region, and the latter is also referred to as the SNP marker inside the region.
  • the SNP marker located in the region may be, for example, both a SNP marker at the end of the region and a SNP marker inside the region.
  • SNP markers inside the region include SNP markers located between the site of the SNP marker on the upstream side defining the region and the site of the SNP marker on the downstream side, for example, It can be suitably determined based on the locus position of the SNP marker shown in FIG.
  • the number of SNP markers between the sites of the two SNP markers may be, for example, one or more, and as a specific example, all the SNP markers located between the sites of the SNP markers that define the region is there.
  • the combination of the base sequence of the region between the sites of the two SNP markers and the SNP marker in the base sequence of the region is not particularly limited, and examples thereof include the following conditions (i) and (ii).
  • Condition (i) Contains the base sequence of the region between the sites of SNP (a) and SNP (c) in the chromosome, and Condition (ii) having at least one SNP marker or SNP (b) selected from the group consisting of SNP (a), SNP (b), and SNP (c) in the base sequence of the above region Includes the base sequence of the region between the sites of SNP (d) and SNP (e) in the chromosome, and In the base sequence of the above region, it has at least one SNP marker or SNP (b) selected from the group consisting of SNP (a), SNP (b), and SNP (c)
  • the resistance locus is, for example, a powdery mildew-resistant locus on chromosome 3 of the pumpkin plant of Europe deposited under accession number FERM BP-22336 described later.
  • powdery mildew resistance marker of the present invention for example, powdery mildew resistance can be imparted to a pumpkin plant.
  • the degree of resistance to powdery mildew of the pumpkin plant of the present invention is evaluated by evaluating the incidence index of the pumpkin plant according to the method of Example 1 described later and expressing it by the incidence calculated from the incidence index.
  • the description of Example 1 to be described later can be used for the calculation of the onset degree by this method, and for example, the onset degree of less than 2 can be set as the disease resistance, and the onset degree of 2 or more can be set as the susceptibility.
  • the degree of disease may be, for example, the degree of disease of one squash plant, or the average disease degree of two or more squash plants. , The latter is preferred.
  • the number of pumpkin plants used to determine the powdery mildew resistance is not particularly limited, and may be, for example, a number that allows statistical testing with powdery mildew-afflicted pumpkin plants. As a specific example, there are 5 to 20 strains and 5 strains.
  • the powdery mildew-resistant European pumpkin plant of the present invention is characterized by having a powdery mildew-resistant locus on chromosome 3.
  • the powdery mildew-resistant European pumpkin plant of the present invention is characterized by having a powdery mildew-resistant locus on chromosome 3, and the other constitution and conditions are not particularly limited. Since the powdery mildew resistant resistant pumpkin plant of the present invention has the powdery mildew resistant marker of the present invention including the powdery mildew resistant locus, for example, powdery mildew of the above-mentioned powdery mildew of the present invention Descriptions of disease resistance markers can be used. In the present invention, the powdery mildew resistance locus on the chromosome 3 can be read, for example, as the powdery mildew resistance marker of the present invention.
  • the powdery mildew resistant European pumpkin plant of the present invention is resistant to powdery mildew.
  • the powdery mildew resistance is provided by the powdery mildew resistant locus on chromosome 3 as described above.
  • the powdery mildew-resistant European pumpkin plant of the present invention has the resistance locus on chromosome 3, but, for example, in place of chromosome 3, the chromosome 3 may be replaced with any chromosome other than chromosome 3. It may have the above powdery mildew resistance locus.
  • the pumpkin plant having the resistance locus is one of chromosome 1, chromosome 2, chromosome 4, chromosome 5, chromosome 6, chromosome 7, chromosome 8, chromosome 9, chromosome 10,
  • the resistant pumpkin plant of the present invention may, for example, contain one or two or more of the above-mentioned resistant loci, and specifically, in one pair of chromosomes, one chromosome is the resistant gene.
  • the latter may be preferred because it may contain a locus (heterozygous), and both chromosomes may contain the resistance locus (homozygous), but powdery mildew resistance is further improved.
  • the resistant locus of the resistant pumpkin plant of the present invention can use, for example, the description of the powdery mildew resistance locus in the powdery mildew resistance marker of the pumpkin plant of the present invention.
  • An example of the resistant pumpkin plant of the present invention is a pumpkin plant ( Cucurbita maxima ) or its progeny line deposited under accession number FERM BP-22336.
  • the progeny line has, for example, the resistance locus.
  • Type of deposit International Deposit Depository Name: National Institute of Technology and Evaluation Product Base for Patent Organisms Depository Address: Japan ⁇ 292-0818 Kazusa, Kisarazu City, Chiba Pref. 2-5-8 Room 120 Accession No .: FERM BP- 22336 Display for identification: Takii 10 Date of receipt: June 1, 2017
  • the resistant pumpkin plants of the present invention can also be produced, for example, by introducing the resistant locus into a pumpkin plant.
  • the method for introducing the resistant locus into the pumpkin plant is not particularly limited, and examples thereof include hybridization with the resistant pumpkin plant or embryo culture, and conventionally known genetic engineering techniques.
  • the aforementioned resistance locus to be introduced can be exemplified by the aforementioned resistance locus.
  • the resistant European pumpkin plant When introduced by crossing with the resistant European pumpkin plant, the resistant European pumpkin plant preferably contains, for example, the resistant locus homozygously.
  • the characteristics other than powdery mildew resistance, for example, the traits, ecological characteristics, etc., of the resistant European pumpkin plant of the present invention are not particularly limited.
  • the resistant Asiatic pumpkin plants of the present invention may also have other resistances.
  • the term "plant” may mean any of a plant individual representing a whole plant and a part of the plant individual.
  • the part of the individual plant includes, for example, an organ, a tissue, a cell, a vegetative propagation body and the like, and may be any.
  • the organs include petals, corollas, flowers, leaves, seeds, fruits, stems, roots and the like.
  • the tissue is, for example, part of the organ.
  • the part of the plant may be, for example, one type of organ, tissue and / or cell, or two or more types of organ, tissue and / or cell.
  • the manufacturing method can also be referred to, for example, as a breeding method.
  • the powdery mildew resistance locus can be referred to as the resistance marker of the present invention, and the description thereof can be used.
  • the method for producing powdery mildew resistant European pumpkin plants of the present invention is characterized by including the following steps (a) and (b) as described above.
  • the production method of the present invention is characterized by using the powdery mildew-resistant Europe pumpkin plant of the present invention as a parent, and the other steps and conditions are not limited at all.
  • the production method of the present invention can use, for example, the description of the above-mentioned resistant marker of the present invention, resistant pumpkin plant and the like.
  • the powdery mildew-resistant European pumpkin plant used as the first parent may be the resistant European pumpkin plant of the present invention.
  • the aforementioned resistant pumpkin plants are preferably, for example, the pumpkin plants or their progeny lines deposited under the accession number FERM BP-22336 as described above.
  • powdery mildew-resistant European pumpkin plants used as a first parent can also be obtained, for example, by the screening method of the present invention described later.
  • the powdery mildew-resistant horseradish pumpkin plant can be prepared, for example, from the test horseradish pumpkin plant (also referred to as "candidate horseradish pumpkin plant") by the following (x) process prior to the (a) process. You may select and prepare.
  • (X) a step of selecting the powdery mildew-resistant European pumpkin plant of the present invention from the test European pumpkin plants
  • the selection of the powdery mildew-resistant European pumpkin plant can be said to be selection of a European pumpkin plant having the powdery mildew-resistant locus.
  • the said (x) process can be performed by the following (x1) process and (x2) process, for example.
  • (X1) a detection step of detecting the presence or absence of the powdery mildew resistance locus on the chromosome of the test pumpkin plant
  • (x2) the test compound squash plant due to the presence of the powdery mildew resistance locus Selection Process for Selection of Powdery Mildew-Resistant European pumpkin Plants
  • the selection in the step (x) is, for example, the selection of a pumpkin plant having the resistance locus, specifically, the resistance locus of the test pumpkin plant to be tested.
  • the resistant European pumpkin plant can be selected by detecting In the step (x2), for example, when the resistance locus is present in one of the chromosomes of a pair of chromosomes, the test pumpkin plant may be selected as the resistant pumpkin plant.
  • the test pumpkin plant may be selected as the resistant America pumpkin plant, but the latter is preferred.
  • the detection of the resistance locus in the step (x1) defines the powdery mildew resistance locus, for example, as described in the powdery mildew resistance marker of the present invention, (1) the SNP A marker, (2) a base sequence including the SNP marker, (3) a base sequence of a region between the sites of the two SNP markers, and a combination thereof can be used for detection.
  • the selection in the step (x) has a powdery mildew resistance locus identified by at least one SNP marker selected from the group consisting of, for example, MSP_17500, MSP_8, and MSP_41353. It is a selection of the European pumpkin plant.
  • the selected SNP marker is not particularly limited, and, for example, the description of “(1) Identification by SNP marker” in the powdery mildew resistance marker of the present invention can be used.
  • step (x) Identification by Base Sequence Containing SNP Marker
  • the selection in the step (x) is carried out, for example, by at least one polynucleotide selected from the group consisting of the above (a), (b) and (c) It is a selection of a pumpkin plant having a powdery mildew resistance locus to be treated.
  • the description of “(2) Identification by base sequence including SNP marker” in the resistance marker of the present invention can be incorporated.
  • the selection in the step (x) is selected, for example, from the group consisting of MSP_16, MSP_17500, MSP_8, MSP_41353, and MSP_14 in the chromosome. It is a selection of a squash plant having a powdery mildew resistance locus including a nucleotide sequence of a region between two SNP marker sites.
  • the base sequence of the region between the two SNP marker sites is, for example, the description of “(3) Identification of the region between the two SNP marker sites by the base sequence” in the powdery mildew resistance marker of the present invention. It can be used.
  • the selection in the step (x) may be carried out, for example, at a powdery mildew resistance locus having at least one SNP marker selected from the group consisting of MSP_17500, MSP_8, and MSP_41353 in the base sequence of the region.
  • a powdery mildew resistance locus having at least one SNP marker selected from the group consisting of MSP_17500, MSP_8, and MSP_41353 in the base sequence of the region.
  • the selection in the step (x) may be, for example, selection of a squash plant having a powdery mildew resistance locus satisfying the conditions (i) or (ii).
  • the chromosome that detects the presence or absence of the powdery mildew resistance locus is preferably chromosome 3.
  • the pumpkin plant used as the other parent in the step (a) is not particularly limited, and may be, for example, a pumpkin plant with or without resistance to known powdery mildew, or other resistance It may be a pumpkin plant with or without sex, or it may be a powdery mildew resistant resistant pumpkin plant of the present invention.
  • the method for crossing the powdery mildew-resistant resistant pumpkin plant with the other pumpkin leaf plant is not particularly limited, and a known method can be adopted.
  • the target for selecting powdery mildew-resistant pumpkin plants may be, for example, the pumpkin plants obtained from the step (a), and further, the progeny obtained from the pumpkin plants. It may be a strain.
  • the subject may be, for example, a F1 squash plant obtained by the crossing in the step (a) or a progeny line.
  • the progeny line may be, for example, an inbred progeny or a backcrossed progeny of the F1 squash plant of F1 obtained by the hybridization in the step (a), or the squash plant of the F1 and the other squash plant of It may be a European pumpkin plant obtained by crossing.
  • step (b) selection of powdery mildew resistant European pumpkin plants can be carried out, for example, by directly or indirectly confirming powdery mildew resistance.
  • the direct confirmation can be carried out, for example, by evaluating powdery mildew resistance of the obtained F 1 pumpkin plant or progeny lines thereof according to the degree of onset as described above. .
  • powdery mildew can be inoculated to the above-mentioned F1 pumpkin plant or its progeny lines, and powdery mildew resistance can be confirmed by evaluation based on the degree of disease.
  • the above mentioned pumpkin plants of the F1 having a degree of disease of less than 2 or a progeny line thereof can be selected as powdery mildew-resistant US pumpkin plants.
  • the selection by the indirect confirmation can be performed, for example, by the following steps (b1) and (b2).
  • B1 a detection step of detecting the presence or absence of a powdery mildew resistance locus on a chromosome of the pumpkin plant or progeny lines obtained from the step (a)
  • B2) the powdery mildew resistance gene locus A selection process of selecting a squash plant or its progeny obtained by the step (a) as a powdery mildew-resistant
  • Selection by indirect confirmation of powdery mildew-resistant pumpkin plants in the step (b) is, for example, the same as the method described in the step (x), and the presence or absence of the powdery mildew-resistant locus Detection can be performed more specifically by detection of the presence or absence of the powdery mildew resistance locus using the molecular marker.
  • the powdery mildew-resistant European pumpkin plant selected in the step (b) is further grown.
  • the above-mentioned pumpkin plants or progeny lines for which the powdery mildew resistance has been confirmed can be selected as powdery mildew-resistant pumpkin plants.
  • the production method of the present invention may further include a seeding step of collecting seeds from the progeny lines obtained by crossing.
  • the production method of the present invention may include, for example, only the step (a).
  • the screening method for powdery mildew resistant pumpkin plants of the present invention produces a powdery mildew resistant resistant pumpkin plant by hybridization.
  • the screening method of the present invention is characterized in that it comprises a step of selecting a squash plant having a powdery mildew resistance locus on chromosome 3 as a powdery mildew resistance marker from a test pumpkin plant. , And other steps and conditions are not limited at all.
  • the powdery mildew resistant marker of the present invention can provide a powdery mildew resistant parent.
  • the screening method of the present invention can use, for example, the description of the above-mentioned resistance marker of the present invention, the resistant Asia pumpkin plant, the production method and the like.
  • step (x) in the method for producing a powdery mildew-resistant European pumpkin plant of the present invention can be used.
  • the method for imparting powdery mildew resistance to a pumpkin plant of the present invention introduces a powdery mildew resistant locus on chromosome 3 into a pumpkin plant for European purposes And an introduction step.
  • the application method of the present invention is characterized in that it comprises an introducing step of introducing a powdery mildew resistance locus on chromosome 3 into a squash plant, and the other steps and conditions are not particularly limited.
  • the powdery mildew resistance locus on the chromosome 3 that is, by introducing the powdery mildew resistance marker of the present invention, powdery mildew resistance to the squash plant of the present invention is achieved.
  • the method of the present invention can be applied, for example, to the description of the above-mentioned resistance marker of the present invention, the resistant Asia pumpkin plant, the production method, the screening method and the like.
  • the method for introducing the powdery mildew resistance locus on the chromosome 3 is not particularly limited.
  • Examples of the introduction method include hybridization or embryo culture with the resistant Asia pumpkin plant, and conventionally known genetic engineering techniques.
  • the aforementioned resistance locus to be introduced can be exemplified by the aforementioned resistance locus.
  • the resistant European pumpkin plant When introduced by crossing with the resistant European pumpkin plant, the resistant European pumpkin plant preferably contains, for example, the resistant locus homozygously.
  • Example 1 The new powdery mildew-resistant European pumpkin plant was confirmed to be resistant to powdery mildew, and analysis of the inheritance pattern of the powdery mildew resistant locus and the novel powdery mildew resistant gene locus The identification of
  • polymorphisms MSP_14 and MSP_16 in the vicinity of the peak value were designed as SNP markers.
  • 93 lines By crossing the parent line with a fixed line (hereinafter also referred to as “diseasable line”) of a powdery mildew-diseased European pumpkin plant owned by Takii Seed Co., Ltd., an F2 separated population of 93 individuals (hereinafter referred to as (Also referred to as “93 lines”).
  • the powdery mildew fungus ( Podosphaera xanthii ) used in the pumpkin field of Hunan City, Shiga Prefecture was derived from a naturally occurring powdery mildew diseased European pumpkin plant.
  • the powdery mildew was confirmed to be a pathogen capable of infecting the diseased European pumpkin plant by the following inoculation test.
  • the powdery mildew was cultured on a European pumpkin plant (Ebisu, Takii Seed Co., Ltd.) grown in a separated greenhouse. After collecting the conidia by scraping off the fungal flora of the powdery mildew fungus on the leaves of the above-mentioned pumpkin plant, adjust the collected conidia to 1.0 ⁇ 10 4 / ml with sterile water A spore suspension was prepared and used for inoculation. In addition, as a pumpkin plant to be used for the inoculation, a seedling in which two true leaves were expanded was used. Using a hand spray, 2 mL of the above-mentioned conidia suspension was uniformly sprayed on the entire strain of one individual pumpkin plant. After spraying, the pumpkin plants were grown for 14 days in a greenhouse under natural light at 15-25 ° C., 60-80% humidity. And about the pumpkin squash plant which grew, the onset investigation was performed as follows.
  • the disease incidence survey was conducted by evaluating the incidence index according to the following criteria.
  • a representative example of individuals with a disease incidence index of 0 to 4 is shown in the photograph of FIG. 2 as an evaluation standard of the disease incidence index.
  • white is a place where sporulation is observed.
  • Outbreak index 0 No symptom
  • Outbreak index 1 Indistinct sporulation is observed in several places on inoculated leaves (less than 5% of the area of the table of inoculated leaves)
  • Outbreak index 2 clear sporulation is seen, but limited (more than 5% and less than 25% of the area of the table of inoculated leaves)
  • Incidence index 3 clear sporulation is observed and observed in some places of inoculated leaves (more than 25% and less than 50% of the area of the table of inoculated leaves)
  • Outbreak index 4 clear sporulation is observed and most of the inoculated leaves are covered (more than 50% of the surface area of the inoculated leaves)
  • Disease severity (N) [(0 ⁇ n 0 ) + (1 ⁇ n 1 ) + (2 ⁇ n 2 ) + (3 ⁇ n 3 ) + (4 ⁇ n 4 )] / number of surveyed individuals
  • “ 0 , 1 , 2 , 3 , 4 ” indicates the disease onset index
  • “n 0 , n 1 , n 2 , n 3 , n 4 ” indicate the onset index 0, the onset index 1, and the onset index 2 respectively.
  • the DNA was extracted from the 93 strains, and the polymorphism of MSP_16 was analyzed.
  • Example 2 We identified novel powdery mildew resistance loci for novel powdery mildew resistant European pumpkin plants.
  • BC1 strain was obtained by crossing the parent strain with the diseased strain.
  • the BC1 strain was further backcrossed three times with the diseased European pumpkin plant to obtain a BC4 strain.
  • a squash plant was selected which contained MSP_16 and MSP_14 in heterozygous form.
  • the polymorphisms MSP_17500, MSP_8, and MSP_41353 in the vicinity of the peak value of the QTL of Example 1 were newly designed as SNP markers. Then, polymorphic bases corresponding to MSP_16, MSP_17500, MSP_8, MSP_41353, and MSP_14 were identified for the 93 and BC4 lines. As a result, it was found that the distance between MSP_16 and MSP_14 in the chromosome 3 was 1.6 cM from the difference in polymorphism of SNP markers in the 93 strain and the BC4 strain.
  • MSP — 17500, MSP — 8 and MSP — 41353 are resistant homozygous (A) or heterozygous (H)
  • individuals exhibiting resistance in selfed progeny were obtained. From these results, it was possible to confirm that, among the SNP markers, MSP_17500, MSP_8, and MSP_41353 are SNP markers that show high correlation with powdery mildew resistance. Also, the high correlation with MSP_17500, MSP_8, and MSP_41353 indicates that the region between the regions containing the SNP marker, MSP_16 and MSP_14, shows high correlation with powdery mildew resistance. .
  • Example 3 With respect to the resistance locus possessed by the novel powdery mildew resistant European pumpkin plant, it was confirmed that it was not possessed by other European pumpkin plants.
  • the BC4 strain was further obtained by backcrossing twice with the diseased strain for the BC4 strain.
  • a squash plant was selected which contained MSP_41353 in a heterozygous form.
  • the BC6 strain was self-fertilized to obtain a self-fertile progeny BC6F1 strain.
  • the BC6F1 strain was further self-fertilized twice in the same manner to obtain a self-fertile progeny BC6F3 strain.
  • a squash plant was selected which contained MSP_41353 in a resistant homozygous form (selected BC6F3 line).
  • the selected BC6F3 strain was deposited under Accession No. FERM BP-22336.
  • the selected BC6F3 strain is also referred to as a deposited strain.
  • polymorphic bases corresponding to MSP_16, MSP_17500, MSP_8, MSP_41353, and MSP_14 were identified for each pumpkin plant containing the above-mentioned deposited line. These results are shown in Table 3 below.
  • A indicates that the SNP marker is carried in a resistant homozygous form
  • B indicates that the SNP marker is carried in a susceptible homozygous form.
  • A is indicated by hatching.
  • the deposited strain was resistant to powdery mildew and was resistant homozygous for all the SNP markers MSP_16, MSP_17500, MSP_8, MSP_41353, and MSP_14.
  • squash plants of the present invention are susceptible to powdery mildew and possess all the SNP markers MSP_16, MSP_17500, MSP_8, MSP_41353, and MSP_14 in the diseased homozygous form.
  • the deposited strain has a significantly reduced incidence compared to PI 135370, PI 137866, PI 165027, PI 166046, PI 458673, and PI 458675, which are known as powdery mildew resistant pumpkin plants.
  • PI 135370, PI 137866, PI 165027, PI 166046, PI 458673, and PI 458675 which are known as powdery mildew resistant pumpkin plants.
  • polymorphic bases corresponding to MSP_16, MSP_17500, MSP_8, MSP_41353, and MSP_14 were identified for each pumpkin plant of the following Table 4 including the above-mentioned deposited strain.
  • each European pumpkin plant except the above-mentioned deposited strain is susceptible to powdery mildew.
  • A indicates that the SNP marker is carried in a resistant homozygous form
  • B indicates that the SNP marker is carried in a susceptible homozygous form.
  • A is indicated by hatching.
  • the deposited strain possessed resistant homozygous forms for all the SNP markers of MSP_16, MSP_17500, MSP_8, MSP_41353, and MSP_14.
  • the pumpkin plants of Europe retained all the SNP markers of MSP_16, MSP_17500, MSP_8, MSP_41353 and MSP_14 in the diseased homozygous form. From these results, it was found that the resistance locus can be identified by MSP_17500, MSP_8, MSP_41353.
  • the powdery mildew resistance marker of the pumpkin plant of the present invention for example, powdery mildew resistant European pumpkin plants can be screened conveniently.
  • the powdery mildew-resistant European pumpkin plant of the present invention can exhibit, for example, powdery mildew resistance, because it contains the above-mentioned resistance locus, for example.
  • the powdery mildew-resistant European pumpkin plant of the present invention does not require conventional pesticide control, it is possible to avoid, for example, the problems of labor and cost of the pesticide application. For this reason, the present invention is extremely useful, for example, in the field of agriculture such as breeding.

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Abstract

新たなセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物、およびそれを用いたうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法を提供する。　本発明のセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカーは、第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を含むことを特徴とする。

Description

セイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物、それを用いたうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法、およびセイヨウカボチャ植物へのうどんこ病抵抗性の付与方法
　本発明は、セイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物、それを用いたうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法、およびセイヨウカボチャ植物へのうどんこ病抵抗性の付与方法に関する。
　カボチャ植物の栽培において、うどんこ病による病害は、世界中のカボチャ栽培において頻発する病害であり、世界的に深刻な問題となっている。うどんこ病の病原菌に感染した植物体は、葉や茎に白い粉状の病斑が発生する。その後、葉の枯死等により、生育の減退が生じ、その結果、果実の減収が生じる。また、カボチャ属植物には、複数のうどんこ病菌により感染が生じることが知られている（非特許文献１）。
　さらに、前記カボチャ属植物のうちセイヨウカボチャ植物では、これまでに十分なうどんこ病抵抗性を示す品種は育成されておらず、うどんこ病抵抗性品種の育種が求められている。
　そこで、本発明は、新たなセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物、それを用いたうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法、およびセイヨウカボチャ植物へのうどんこ病抵抗性の付与方法の提供を目的とする。
　前記目的を達成するために、本発明のセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー（以下、「抵抗性マーカー」ともいう）は、第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座（以下、「抵抗性遺伝子座」ともいう）を含むことを特徴とする。
　本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物（以下、「抵抗性カボチャ植物」ともいう）は、第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を含むことを特徴とする。
　本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法（以下、「製造方法」ともいう）は、下記（ａ）および（ｂ）工程を含むことを特徴とする。
（ａ）前記本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物と、他のセイヨウカボチャ植物とを交雑する工程
（ｂ）前記（ａ）工程より得られたセイヨウカボチャ植物またはその後代系統から、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を選抜する工程
　本発明のセイヨウカボチャ植物へのうどんこ病抵抗性の付与方法（以下、「付与方法」ともいう）は、第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を、セイヨウカボチャ植物に導入する導入工程を含むことを特徴とする。
　本発明者らは、鋭意研究の結果、セイヨウカボチャ植物について、うどんこ病抵抗性を示すうどんこ病抵抗性マーカーとして、新規のうどんこ病抵抗性遺伝子座を見出した。また、前記抵抗性マーカーを含むセイヨウカボチャ植物は、うどんこ病抵抗性を示す。このため、本発明のセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカーによれば、例えば、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を簡便にスクリーニングできる。また、本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、例えば、前記抵抗性遺伝子座を含むため、例えば、うどんこ病抵抗性を示すことが可能である。このため、本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、従来のような農薬による防除が不要であるため、例えば、前記農薬散布の労力および費用の問題も回避できる。
図１は、第３染色体におけるＳＮＰ（single　nucleotide　polymorphism）等の相対的な座乗位置を示す模式図である。 図２は、実施例１におけるセイヨウカボチャ植物の発病指数の評価基準を示す写真である。
１．セイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー
　本発明のセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカーは、前述のように、第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を含むことを特徴とする。本発明の抵抗性マーカーは、前記第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を含むことが特徴であり、その他の構成および条件は、特に制限されない。
　本発明において、「セイヨウカボチャ植物」は、カボチャ属CucurbitaのCucurbita maximaに分類される植物である。前記セイヨウカボチャ植物は、例えば、近縁種との交雑種でもよい。前記近縁種は、例えば、Cucurbita pepo、Cucurbita moschata等があげられる。
　本発明において、前記うどんこ病の病原菌（以下、「うどんこ病菌」ともいう）は、Podosphaera xanthii（「Sphaerotheca fuliginea」ともいう）、Golovinomyces cichoracearum（「Erysiphe cichoracearum」ともいう）等があげられ、好ましくは、Podosphaera xanthiiである。
　本発明において、「うどんこ病抵抗性」は、例えば、「うどんこ病耐性」ともいう。前記抵抗性は、例えば、うどんこ病菌の感染による病害の発生および進行に対する阻害能または抑制能を意味し、具体的に、例えば、病害の未発生、発生した病害の進行の停止、および、発生した病害の進行の抑制（「阻害」ともいう）等のいずれでもよい。
　前記セイヨウカボチャ植物は、第１～２０染色体を有する。前記セイヨウカボチャ植物における各染色体は、例えば、Cucurbita maxima (品種名：Rimu)のゲノムの塩基配列情報に基づき、対象のセイヨウカボチャ植物のゲノムの塩基配列情報と、Rimuのゲノムの塩基配列情報とを比較することにより、決定できる。前記比較は、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡ等の解析ソフトウェアを用いて、デフォルトのパラメータで実施できる。Rimuのゲノムの塩基配列情報は、例えば、ウリ科ゲノムデータベース（Cucurbit Genomics Database）のwebサイト（http://www.icugi.org/またはhttp://cucurbitgenomics.org/）から入手可能である。
　本発明の抵抗性マーカーは、前記第３染色体上の抵抗性遺伝子座を含むが、前記抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物は、例えば、第３染色体に代えて、第３染色体以外のどの染色体上に、前記第３染色体上の前記抵抗性遺伝子座を有してもよい。つまり、前記抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物は、第１染色体、第２染色体、第４染色体、第５染色体、第６染色体、第７染色体、第８染色体、第９染色体、第１０染色体、第１１染色体、第１２染色体、第１３染色体、第１４染色体、第１５染色体、第１６染色体、第１７染色体、第１８染色体、第１９染色体、および第２０染色体のいずれかの染色体上に、前記第３染色体上の前記抵抗性遺伝子座を有してもよい。
　本発明の抵抗性マーカーは、例えば、前記第３染色体上の抵抗性遺伝子座をヘテロ接合型で含んでもよいし、ホモ接合型で含んでもよい。後者の場合、前記抵抗性セイヨウカボチャ植物は、少なくとも一方の抵抗性マーカーを第３染色体以外の染色体上に含んでもよく、例えば、１つの抵抗性遺伝子座を第３染色体以外の染色体上に含んでもよいし、２つの抵抗性遺伝子座を第３染色体以外の染色体上に含んでもよい。２つの抵抗性遺伝子座を第３染色体以外の染色体上に含む場合、前記抵抗性セイヨウカボチャ植物は、例えば、前記２つの抵抗性遺伝子座を同じ染色体上に含んでもよいし、異なる染色体上に含んでもよい。
　うどんこ病抵抗性遺伝子座とは、うどんこ病抵抗性を供与する量的形質遺伝子座または遺伝子領域を意味する。前記量的形質遺伝子座（Quantitative　Traits　Loci；QTL）は、一般に、量的形質の発現に関与する染色体領域を意味する。ＱＴＬは、染色体上の特定の座を示す分子マーカーを使用して規定できる。前記分子マーカーを使用してＱＴＬを規定する技術は、当該技術分野において周知である。
　本発明において、前記抵抗性遺伝子座の規定に使用する分子マーカーは、特に制限されない。前記分子マーカーは、例えば、ＳＮＰマーカー、ＡＦＬＰ（分子増幅断片長多型、amplified fragment length polymorphism）マーカー、ＲＦＬＰ（restriction fragment length polymorphism）マーカー、マイクロサテライトマーカー、ＳＣＡＲ（sequence-characterized amplified region）マーカーおよびＣＡＰＳ（cleaved amplified polymorphic　sequence）マーカー等があげられる。本発明において、前記ＳＮＰマーカーは、例えば、１個のＳＮＰを前記ＳＮＰマーカーとしてもよいし、２個以上のＳＮＰの組合せを前記ＳＮＰマーカーとしてもよい。
　本発明において、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座は、例えば、（１）前記ＳＮＰマーカーによって規定（以下、「特定」ともいう）されてもよいし、（２）前記ＳＮＰマーカーを含む塩基配列によって規定されてもよいし、（３）２つの前記ＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列によって規定されてもよいし、これらの組合せにより規定されてもよい。前記組合せによって規定する場合、前記組合せは、特に制限されず、例えば、以下の組合せが例示できる。
前記（１）および前記（２）の組合せ
前記（１）および前記（３）の組合せ
前記（２）および前記（３）の組合せ
前記（１）、前記（２）および前記（３）の組合せ
（１）ＳＮＰマーカーによる特定
　前記抵抗性遺伝子座は、前記（１）に示すように、例えば、前記ＳＮＰマーカーによって規定されてもよい。前記ＳＮＰマーカーは、特に制限されず、例えば、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３等があげられる。なお、これらのＳＮＰ解析は、例えば、下記参考文献１を参照できる。また、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３は、本発明者らが新たに同定したＳＮＰマーカーであり、当該技術分野における当業者であれば、後述するこれらのＳＮＰマーカーを含む塩基配列に基づき、前記ＳＮＰマーカーの座乗位置を特定できる。
参考文献１：Guoyu Zhang et.al. （2012） “A high-density genetic map for anchoring genome sequences and identifying QTLs associated with dwarf vine in pumpkin (Cucurbita maxima Duch.)”, 2005, BMC Genomics, 16:1101
　前記ＭＳＰ＿１７５００（以下、「ＳＮＰ（ａ）」ともいう）は、下記配列番号１の塩基配列における、かっこで囲んだ下線部の塩基（配列番号１の３７番目の塩基）が、Ｃである多型を示す。つまり、例えば、前記ＳＮＰ（ａ）が、Ｃの場合、セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病抵抗性であり、Ｃ以外の塩基の場合（例えば、Ｔの場合）、セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病罹病性であることを示す。また、前記配列番号１の塩基配列は、例えば、後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物から得ることができる。前記ＳＮＰ（ａ）は、例えば、前述のwebサイト等のデータベース上の公知の情報からも特定できる。
配列番号１
5’-CTTCATATTGTTTTGTGGTACACCATAAGCCAAGTA[C]GCCTTTCAGAAAACAAAGTAGATATTATAGCCTGACTGTCTATGAAGAACTAAAAAG-3’
　前記ＭＳＰ＿８（以下、「ＳＮＰ（ｂ）」ともいう）は、下記配列番号２の塩基配列における、かっこで囲んだ下線部の塩基（配列番号２の５９番目の塩基）が、Ｔである多型を示す。つまり、例えば、前記ＳＮＰ（ｂ）が、Ｔの場合、セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病抵抗性であり、Ｔ以外の塩基の場合（例えば、Ｇの場合）、セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病罹病性であることを示す。また、前記配列番号２の塩基配列は、例えば、後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物から得ることができる。前記ＳＮＰ（ｂ）は、例えば、前述のwebサイト等のデータベース上の公知の情報からも特定できる。
配列番号２
5’-ACATCTGAAAAAGTTGAAGCTGTTATGTGATGGAGAGATTGCAGAGTGGTTGAAAACG[T]TTGCTCCCCACCTTGCCAAACAGGTCAAA-3’
　前記ＭＳＰ＿４１３５３（以下、「ＳＮＰ（ｃ）」ともいう）は、下記配列番号３の塩基配列における、かっこで囲んだ下線部の塩基（配列番号３の３４番目の塩基）が、Ｃである多型を示す。つまり、例えば、前記ＳＮＰ（ｃ）が、Ｃ場合、セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病抵抗性であり、Ｃ以外の塩基の場合（例えば、Ｔの場合）、セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病罹病性であることを示す。また、前記配列番号３の塩基配列は、例えば、後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物から得ることができる。前記ＳＮＰ（ｃ）は、例えば、前述のwebサイト等のデータベース上の公知の情報からも特定できる。
配列番号３
5’-GAGAGTGGGCAACAATTTCCCCTTGAAGAAGAG[C]TCGTCGGCGGCGGTCATTGTGTGATTACTGGGA-3’
　前記染色体における前記ＳＮＰマーカーの座乗位置は、特に制限されない。前記ＳＮＰマーカーは、図１に示すように、例えば、セイヨウカボチャ植物の第３染色体上において、上流側（ＭＳＰ＿１４側）から下流側（ＭＳＰ＿１６側）にかけて、ＭＳＰ＿４１３５３、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿１７５００が、この順序で座乗している。なお、図１において、ＭＳＰ＿１６およびＭＳＰ＿１４は、セイヨウカボチャ植物の第３染色体におけるＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３の座乗位置を示すのに使用しているが、いずれか一つまたは両者をＳＮＰマーカーとして使用してもよい。この場合、後述する、ＭＳＰ＿１６およびＭＳＰ＿１４の説明において、受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物の多型である場合、セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病抵抗性であり、受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物の多型以外の塩基の場合、セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病罹病性であることを示す。ＭＳＰ＿１６およびＭＳＰ＿１４の少なくとも一方をＳＮＰマーカーとして使用する場合、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３からなる群からなる群から選択された少なくとも一つと組合せて用いてもよい。
　前記抵抗性遺伝子座が有する前記ＳＮＰマーカーの個数は、特に制限されず、例えば、前記ＳＮＰマーカーのうち、いずれか１個、または２個以上、すなわち、２個または３個全てであってもよい。なお、これら３種類の多型（ＳＮＰマーカー）とうどんこ病抵抗性との関連性は、これまでに報告されておらず、本発明者らにより初めて見出された、うどんこ病抵抗性に関与する新規の多型である。
　前記ＳＮＰマーカーの組合せは、特に制限されず、例えば、以下の組合せが例示できる。
ＳＮＰ（ａ）およびＳＮＰ（ｂ）の組合せ
ＳＮＰ（ａ）およびＳＮＰ（ｃ）の組合せ
ＳＮＰ（ｂ）およびＳＮＰ（ｃ）の組合せ
ＳＮＰ（ａ）、ＳＮＰ（ｂ）、およびＳＮＰ（ｃ）の組合せ
前記組合せのうち、うどんこ病抵抗性との相関性がより高いことから、好ましくは、例えば、以下の組合せである。
ＳＮＰ（ａ）、ＳＮＰ（ｂ）、およびＳＮＰ（ｃ）の組合せ
（２）ＳＮＰマーカーを含む塩基配列による特定
　前記抵抗性遺伝子座は、前記（２）に示すように、例えば、前記ＳＮＰマーカーを含む塩基配列によって規定されてもよい。前記抵抗性遺伝子座は、例えば、前記塩基配列からなるものでもよいし、前記塩基配列を含むものでもよい。
　前記ＳＮＰマーカーを含む塩基配列は、特に制限されず、例えば、後述する（ａ）、（ｂ）および（ｃ）のポリヌクレオチド等があげられる。前記（ａ）、（ｂ）および（ｃ）のポリヌクレオチドは、それぞれ、前記ＳＮＰ（ａ）、ＳＮＰ（ｂ）およびＳＮＰ（ｃ）のＳＮＰマーカーを含む塩基配列に相当する。
　前記（ａ）のポリヌクレオチドは、前記ＳＮＰ（ａ）、すなわち、ＭＳＰ＿１７５００を含む塩基配列であり、例えば、下記（ａ１）、（ａ２）、または（ａ３）のポリヌクレオチドである。前記（ａ２）および（ａ３）のポリヌクレオチドは、それぞれ、前記抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ａ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチドである。前記同等の機能は、例えば、前記（ａ２）または（ａ３）のポリヌクレオチドで特定されるうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物が、うどんこ病抵抗性を示すことを意味する。
（ａ）　下記（ａ１）、（ａ２）、または（ａ３）のポリヌクレオチド
（ａ１）配列番号１の塩基配列からなるポリヌクレオチド
（ａ２）前記（ａ１）の３７番目の塩基（Ｃ）が保存され、前記（ａ１）の塩基配列において、１もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および／または付加された塩基配列からなるポリヌクレオチド
（ａ３）前記（ａ１）の３７番目の塩基（Ｃ）が保存され、前記（ａ１）の塩基配列に対して、８０％以上の同一性を有する塩基配列からなるポリヌクレオチド
　前記（ａ１）のポリヌクレオチドにおいて、配列番号１におけるかっこで囲んだ下線部の塩基（Ｃ）が、前記ＳＮＰ（ａ）の多型に対応する塩基である。また、前記（ａ１）のポリヌクレオチドは、例えば、後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物から得ることができる。
　前記（ａ２）のポリヌクレオチドにおいて、前記１もしくは数個は、例えば、１～１８個、１～１２個、１～８個、１～４個、１～３個、１個または２個である。本発明において、塩基数等の個数の数値範囲は、例えば、その範囲に属する正の整数を全て開示するものである。つまり、例えば、「１～５個」との記載は、「１、２、３、４、５個」の全ての開示を意味する（以下、同様）。
　前記（ａ３）のポリヌクレオチドにおいて、前記同一性は、例えば、８０％以上、８５％以上、８９％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。前記同一性は、２つの塩基配列をアライメントすることによって求めることができる（以下、同様）。具体的には、前記同一性は、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡ等の解析ソフトウェアを用いて、デフォルトのパラメータにより算出できる（以下、同様）。
　前記（ｂ）のポリヌクレオチドは、前記ＳＮＰ（ｂ）、すなわち、ＭＳＰ＿８を含む塩基配列であり、例えば、下記（ｂ１）、（ｂ２）、または（ｂ３）のポリヌクレオチドである。前記（ｂ２）および（ｂ３）のポリヌクレオチドは、それぞれ、前記抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ｂ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチドである。前記同等の機能は、例えば、前記（ｂ２）または（ｂ３）のポリヌクレオチドで特定されるうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物が、うどんこ病抵抗性を示すことを意味する。
（ｂ）　下記（ｂ１）、（ｂ２）、または（ｂ３）のポリヌクレオチド
（ｂ１）配列番号２の塩基配列からなるポリヌクレオチド
（ｂ２）前記（ｂ１）の５９番目の塩基（Ｔ）が保存され、前記（ｂ１）の塩基配列において、１もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および／または付加された塩基配列からなるポリヌクレオチド
（ｂ３）前記（ｂ１）の５９番目の塩基（Ｔ）が保存され、前記（ｂ１）の塩基配列に対して、８０％以上の同一性を有する塩基配列からなるポリヌクレオチド
　前記（ｂ１）のポリヌクレオチドにおいて、配列番号２におけるかっこで囲んだ下線部の塩基（Ｔ）が、前記ＳＮＰ（ｂ）の多型に対応する塩基である。また、前記（ｂ１）のポリヌクレオチドは、例えば、後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物から得ることができる。
　前記（ｂ２）のポリヌクレオチドにおいて、前記１もしくは数個は、例えば、１～１７個、１～１３個、１～８個、１～４個、１～３個、１個または２個である。
　前記（ｂ３）のポリヌクレオチドにおいて、前記同一性は、例えば、８０％以上、８５％以上、８９％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。
　前記（ｂ２）および（ｂ３）のポリヌクレオチドにおいて、前記（ｂ１）の下線で示す６０番目の塩基（Ｔ）および６２番目の塩基（Ｇ）の少なくとも一方が保存されていることが好ましい。この場合、前記１もしくは数個および同一性は、それぞれ、前記（ｂ２）および（ｂ３）のポリヌクレオチドの説明を援用できる。
　前記（ｃ）のポリヌクレオチドは、前記ＳＮＰ（ｃ）、すなわち、ＭＳＰ＿４１３５３を含む塩基配列であり、例えば、下記（ｃ１）、（ｃ２）、または（ｃ３）のポリヌクレオチドである。前記（ｃ２）および（ｃ３）のポリヌクレオチドは、それぞれ、前記抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ｃ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチドである。前記同等の機能は、例えば、前記（ｃ２）または（ｃ３）のポリヌクレオチドで特定されるうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物が、うどんこ病抵抗性を示すことを意味する。
（ｃ）　下記（ｃ１）、（ｃ２）、または（ｃ３）のポリヌクレオチド
（ｃ１）配列番号３の塩基配列からなるポリヌクレオチド
（ｃ２）前記（ｃ１）の３４番目の塩基（Ｃ）が保存され、前記（ｃ１）の塩基配列において、１もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および／または付加された塩基配列からなるポリヌクレオチド
（ｃ３）前記（ｃ１）の３４番目の塩基（Ｃ）が保存され、前記（ｃ１）の塩基配列に対して８０％以上の同一性を有する塩基配列からなるポリヌクレオチド
　前記（ｃ１）のポリヌクレオチドにおいて、配列番号３におけるかっこで囲んだ下線部のの塩基（Ｃ）が、前記ＳＮＰ（ｃ）の多型に対応する塩基である。また、前記（ｃ１）のポリヌクレオチドは、例えば、後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物から得ることができる。
　前記（ｃ２）のポリヌクレオチドにおいて、前記１もしくは数個は、例えば、１～１３個、１～６個、１～３個、１個または２個である。
　前記（ｃ３）のポリヌクレオチドにおいて、前記同一性は、例えば、８０％以上、８５％以上、８９％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。
　前記抵抗性遺伝子座が有する、前記ＳＮＰマーカーを含む塩基配列の個数は、特に制限されず、例えば、前記（ａ）、（ｂ）および（ｃ）のポリヌクレオチドのうち、いずれか１個、または２個以上、すなわち、２個または３個全てであってもよい。
　前記ＳＮＰマーカーを含む塩基配列の組合せは、特に制限されず、例えば、以下の組合せが例示できる。
前記（ａ）および（ｂ）のポリヌクレオチドの組合せ
前記（ａ）および（ｃ）のポリヌクレオチドの組合せ
前記（ｂ）および（ｃ）のポリヌクレオチドの組合せ
前記（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）のポリヌクレオチドの組合せ
前記組合せのうち、うどんこ病抵抗性との相関性がより高いことから、好ましくは、例えば、以下の組合せである。
前記（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）のポリヌクレオチドの組合せ
　前記ＳＮＰマーカーを含む塩基配列としては、例えば、後述のＭＳＰ＿１６を含む塩基配列（配列番号４の塩基配列からなるポリヌクレオチド）およびＭＳＰ＿１４を含む塩基配列（配列番号５の塩基配列からなるポリヌクレオチド）の少なくとも一方を用いてもよい。この場合、各ポリヌクレオチドは、例えば、各ポリヌクレオチドの多型または下線で示す塩基が保存され、前記各ポリヌクレオチドの塩基配列において、１もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および／または付加された塩基配列からなるポリヌクレオチド、または、前記各ポリヌクレオチドの多型または下線で示す塩基が保存され、前記各ポリヌクレオチドの塩基配列に対して８０％以上の同一性を有する塩基配列からなるポリヌクレオチドであってもよい。前記１もしくは数個および同一性は、例えば、前記（ａ２）および（ａ３）の説明を援用できる。前記各ポリヌクレオチドは、例えば、前記（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）のポリヌクレオチドからなる群から選択された少なくとも一つと組合せて用いてもよい。
（３）２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列による特定
　前記抵抗性遺伝子座は、前記（３）に示すように、例えば、前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列によって規定されてもよい。前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列は、特に制限されず、例えば、前記染色体における、ＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４からなる群から選択された２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列等があげられる。前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列は、例えば、後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物（以下、「寄託系統」ともいう）における対応する２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列を参照できる。前記寄託系統の塩基配列を参照する場合、前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列は、例えば、前記寄託系統の塩基配列と完全または部分的に一致する。後者の場合、前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列は、例えば、前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列で特定される抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物が、うどんこ病抵抗性を示せばよい。前記部分的な一致は、例えば、前記寄託系統の塩基配列に対する同一性により規定できる。前記同一性は、例えば、８０％以上、８５％以上、８９％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上である。前記抵抗性遺伝子座が前記（３）で特定される場合、前記抵抗性遺伝子座は、例えば、前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域に座乗しているということもできる。
　前記ＭＳＰ＿１６（以下、「ＳＮＰ（ｄ）」ともいう）は、例えば、配列番号４におけるかっこで囲んだ下線部の塩基の多型を示す。後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物において、前記ＳＮＰ（ｄ）は、Ｇである多型を示すが、前記ＳＮＰ（ｄ）は、例えば、Ｇ以外の塩基、すなわち、Ａ、Ｔ、またはＣでもよい。また、前記配列番号４の塩基配列は、例えば、後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物から得ることができる。前記ＳＮＰ（ｄ）は、例えば、前述のwebサイト等のデータベース上の公知の情報からも特定できる。
配列番号４
5’-ATGAGGAATGATTACGTTTGGAAACTTTGCAGGTTGTGGGAGT[G]CTGGTTGGCAAGCCCCTGAACAACTTCTT-3’
　前記ＭＳＰ＿１４（以下、「ＳＮＰ（ｅ）」ともいう）は、例えば、配列番号５におけるかっこで囲んだ下線部の塩基の多型を示す。後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物において、前記ＳＮＰ（ｅ）は、Ｃである多型を示すが、前記ＳＮＰ（ｅ）は、例えば、Ｃ以外の塩基、すなわち、Ａ、Ｔ、またはＧでもよい。また、前記配列番号５の塩基配列は、例えば、後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物から得ることができる。前記ＳＮＰ（ｅ）は、例えば、前述のwebサイト等のデータベース上の公知の情報からも特定できる。
配列番号５
5’-ATTGTCACTAGAATTTGGCCAAACACTAAGTACCTGGATGTGATTGTGAC[C]GGAGCCATGGCTCAGTACATACCCACCTTGGAACTTTACAGTGGAGGGTTACCCATGGCTTGCACTATG-3’
　前記領域は、前述のように、例えば、前記２つのＳＮＰマーカーの部位によって、上流側端部と下流側端部とを特定できる。前記領域は、例えば、前記２つのＳＮＰマーカーの部位間であればよく、例えば、前記２つのＳＮＰマーカーの部位の両方または一方を含んでもよいし、含まなくてもよい。また、前記領域が、前記ＳＮＰマーカーの部位を含む場合、前記領域の前記上流側端部と前記下流側端部とは、前記ＳＮＰマーカーの部位となるが、前記上流側端部と前記下流側端部との塩基は、例えば、前述した塩基配列における下線部の塩基でもよいし、それ以外の塩基でもよい。
　前記領域を規定する前記２つのＳＮＰマーカーは、特に制限されず、例えば、以下の組合せが例示できる。
ＳＮＰ（ａ）および（ｃ）の組合せ
ＳＮＰ（ａ）および（ｅ）の組合せ
ＳＮＰ（ｃ）および（ｄ）の組合せ
ＳＮＰ（ｄ）および（ｅ）の組合せ
　前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列によって、前記抵抗性遺伝子座を規定する場合、前記抵抗性遺伝子座は、さらに、前記領域の塩基配列において、前記領域に座乗する前記ＳＮＰマーカーを有することが好ましい。具体的には、前記抵抗性遺伝子座は、前記領域の塩基配列において、例えば、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３からなる群から選択された少なくとも１つのＳＮＰマーカーを有することが好ましい。
　前記領域に座乗する前記ＳＮＰマーカーは、例えば、前記染色体上において、前記領域を規定する前記２つのＳＮＰマーカーの部位のうち一方または両方の部位でもよいし、前記領域を規定する前記２つのＳＮＰマーカーの部位間に座乗するＳＮＰマーカーでもよい。前者を、前記領域の末端のＳＮＰマーカーともいい、後者を、前記領域の内部のＳＮＰマーカーともいう。前記領域に座乗する前記ＳＮＰマーカーは、例えば、前記領域の末端のＳＮＰマーカーおよび前記領域の内部のＳＮＰマーカーの両方であってもよい。
　前記領域の内部のＳＮＰマーカーは、例えば、前記領域を規定する上流側の前記ＳＮＰマーカーの部位と下流側の前記ＳＮＰマーカーの部位との間に座乗しているＳＮＰマーカーがあげられ、例えば、図１に示す前記ＳＮＰマーカーの座乗位置に基づき、適宜決定できる。前記２つのＳＮＰマーカーの部位間における前記ＳＮＰマーカーの個数は、例えば、１個以上であればよく、具体例としては、前記領域を規定するＳＮＰマーカーの部位間に座乗する全てのＳＮＰマーカーである。
　前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列と前記領域の塩基配列における前記ＳＮＰマーカーとの組合せは、特に制限されず、例えば、下記条件（ｉ）または（ii）があげられる。
条件（ｉ）
前記染色体における、ＳＮＰ（ａ）およびＳＮＰ（ｃ）の部位間の領域の塩基配列を含み、且つ、
前記領域の塩基配列において、ＳＮＰ（ａ）、ＳＮＰ（ｂ）、およびＳＮＰ（ｃ）からなる群から選択された少なくとも一つのＳＮＰマーカーまたはＳＮＰ（ｂ）を有する
条件（ii）
前記染色体における、ＳＮＰ（ｄ）およびＳＮＰ（ｅ）の部位間の領域の塩基配列を含み、且つ、
前記領域の塩基配列において、ＳＮＰ（ａ）、ＳＮＰ（ｂ）、およびＳＮＰ（ｃ）からなる群から選択された少なくとも一つのＳＮＰマーカーまたはＳＮＰ（ｂ）を有する
　前記抵抗性遺伝子座は、例えば、後述する受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物の第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座である。
　本発明のうどんこ病抵抗性マーカーによれば、例えば、セイヨウカボチャ植物に対して、うどんこ病抵抗性を付与することができる。本発明において、セイヨウカボチャ植物の前記うどんこ病抵抗性の程度は、後述する実施例１の方法に準じて、セイヨウカボチャ植物の発病指数を評価し、前記発病指数から算出する発病度により表わすことができる。この方法による前記発病度の算出は、後述する実施例１の説明を援用でき、例えば、発病度２未満を耐病性、発病度２以上を罹病性と設定できる。前記発病度により前記うどんこ病抵抗性を判断する場合、前記発病度は、例えば、１株のセイヨウカボチャ植物の発病度でもよいし、２株以上のセイヨウカボチャ植物の平均の発病度でもよいが、後者が好ましい。後者の場合、前記うどんこ病抵抗性の判断に使用するセイヨウカボチャ植物の数は、特に制限されず、例えば、うどんこ病罹病性セイヨウカボチャ植物との統計学的な検定が可能な数であり、具体例として、５～２０株、５株である。
２．うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物
　本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、前述のように、第３染色体上にうどんこ病抵抗性遺伝子座を有することを特徴とする。本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、第３染色体上にうどんこ病抵抗性遺伝子座を有することが特徴であり、その他の構成および条件は、特に制限されない。本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座を含む前記本発明のうどんこ病抵抗性マーカーを有することから、例えば、前記本発明のセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカーの説明を援用できる。本発明において、前記第３染色体上の前記うどんこ病抵抗性遺伝子座は、例えば、本発明のうどんこ病抵抗性マーカーと読み替え可能である。
　本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病に抵抗性を示す。
　本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物において、前記うどんこ病抵抗性は、前述のように、第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座によってもたらされる。本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、前記抵抗性遺伝子座を第３染色体上に有するが、例えば、第３染色体に代えて、第３染色体以外のどの染色体上に、前記第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を有してもよい。つまり、前記抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物は、第１染色体、第２染色体、第４染色体、第５染色体、第６染色体、第７染色体、第８染色体、第９染色体、第１０染色体、第１１染色体、第１２染色体、第１３染色体、第１４染色体、第１５染色体、第１６染色体、第１７染色体、第１８染色体、第１９染色体、および第２０染色体のいずれかの染色体上に、前記第３染色体上の前記抵抗性遺伝子座を有してもよい。
　本発明の抵抗性セイヨウカボチャ植物は、例えば、前記抵抗性遺伝子座を１つ含んでもよいし、２つ以上含んでもよく、具体例として、１対の染色体において、一方の染色体が前記抵抗性遺伝子座を含んでもよく（ヘテロ接合型）、両方の染色体が前記抵抗性遺伝子座を含んでもよいが（ホモ接合型）、うどんこ病抵抗性がより向上することから、後者が好ましい。
　本発明の抵抗性セイヨウカボチャ植物において、前記抵抗性遺伝子座は、例えば、前記本発明のセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカーにおけるうどんこ病抵抗性遺伝子座の説明を援用できる。
　本発明の抵抗性セイヨウカボチャ植物は、一例として、受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物（Cucurbita maxima）またはその後代系統があげられる。前記後代系統は、例えば、前記抵抗性遺伝子座を有する。寄託の情報を以下に示す。
寄託の種類：国際寄託
寄託機関名：独立行政法人製品評価技術基盤機構　特許生物寄託センター
あて名：日本国　〒２９２－０８１８　千葉県木更津市かずさ鎌足２－５－８　１２０号室
受託番号：ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６
識別のための表示：Ｔａｋｉｉ１０
受領日：２０１７年６月１日
　本発明の抵抗性セイヨウカボチャ植物は、例えば、セイヨウカボチャ植物に、前記抵抗性遺伝子座を導入することによっても製造できる。前記セイヨウカボチャ植物への前記抵抗性遺伝子座の導入方法は、特に制限されず、例えば、前記抵抗性セイヨウカボチャ植物と交雑または胚培養、従来公知の遺伝子工学的手法があげられる。導入する前記抵抗性遺伝子座は、前述の抵抗性遺伝子座が例示できる。前記抵抗性セイヨウカボチャ植物との交雑により導入する場合、前記抵抗性セイヨウカボチャ植物は、例えば、前記抵抗性遺伝子座をホモ接合型で含むことが好ましい。
　本発明の抵抗性セイヨウカボチャ植物について、うどんこ病抵抗性以外の特徴、例えば、形質的、生態的特徴等は、特に限定されない。
　本発明の抵抗性セイヨウカボチャ植物は、さらに、他の抵抗性を有してもよい。
　本発明において、「植物体」は、植物全体を示す植物個体および前記植物個体の部分のいずれの意味であってもよい。前記植物個体の部分は、例えば、器官、組織、細胞または栄養繁殖体等があげられ、いずれでもよい。前記器官は、例えば、花弁、花冠、花、葉、種子、果実、茎、根等があげられる。前記組織は、例えば、前記器官の部分である。前記植物体の部分は、例えば、一種類の器官、組織および／または細胞でもよいし、二種類以上の器官、組織および／または細胞でもよい。
３．うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法
　つぎに、本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法について説明する。なお、以下の方法は、例示であって、本発明は、これらの方法に制限されない。本発明において、製造方法は、例えば、育成方法ということもできる。また、本発明において、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座は、前記本発明の抵抗性マーカーと言いかえることができ、その説明を援用できる。
　本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法は、前述のように、下記（ａ）および（ｂ）工程を含むことを特徴とする。
（ａ）本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物と、他のセイヨウカボチャ植物とを交雑する工程
（ｂ）前記（ａ）工程より得られたセイヨウカボチャ植物またはその後代系統から、うどんこ病抵抗性を備えるセイヨウカボチャ植物を選抜する工程
　本発明の製造方法は、前記本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を親として使用することが特徴であって、その他の工程および条件は、何ら制限されない。本発明の製造方法は、例えば、前記本発明の抵抗性マーカー、抵抗性セイヨウカボチャ植物等の説明を援用できる。
　前記（ａ）工程において、第一の親として使用するうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、前記本発明の抵抗性セイヨウカボチャ植物であればよい。前記抵抗性セイヨウカボチャ植物は、例えば、前述のような受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託されたセイヨウカボチャ植物またはその後代系統が好ましい。前記（ａ）工程において、第一の親として使用するうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、例えば、後述する本発明のスクリーニング方法により得ることもできる。このため、前記うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、例えば、前記（ａ）工程に先立って、例えば、被検セイヨウカボチャ植物（「候補セイヨウカボチャ植物」ともいう）から、下記（ｘ）工程により選抜して準備してもよい。
（ｘ）被検セイヨウカボチャ植物から、前記本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を選抜する工程
　前記（ｘ）工程において、前記うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の選抜は、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物の選抜ということができる。このため、前記（ｘ）工程は、例えば、下記（ｘ１）工程および（ｘ２）工程により行うことができる。
（ｘ１）前記被検セイヨウカボチャ植物の染色体上における、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座の有無を検出する検出工程
（ｘ２）前記うどんこ病抵抗性遺伝子座の存在により、前記被検セイヨウカボチャ植物を、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物として選抜する選抜工程
　前記（ｘ）工程における前記選抜は、前述のように、例えば、前記抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物の選抜であり、具体的には、前記被検セイヨウカボチャ植物について、前記抵抗性遺伝子座を検出することによって、前記抵抗性セイヨウカボチャ植物を選抜できる。前記（ｘ２）工程において、例えば、一対の染色体における一方の染色体において前記抵抗性遺伝子座が存在する場合に、前記被検セイヨウカボチャ植物を、前記抵抗性セイヨウカボチャ植物として選抜してもよいし、一対の染色体における両方の染色体において前記抵抗性遺伝子座が存在する場合、前記被検セイヨウカボチャ植物を、前記抵抗性セイヨウカボチャ植物として選抜してもよいが、後者が好ましい。前記（ｘ１）工程における前記抵抗性遺伝子座の検出は、例えば、前記本発明のうどんこ病抵抗性マーカーにおいて説明したように、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座を規定する、（１）前記ＳＮＰマーカー、（２）前記ＳＮＰマーカーを含む塩基配列、（３）前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列、およびこれらの組合せを用いて検出できる。
　前記（ｘ）工程における前記選抜について、以下の具体例をあげるが、本発明は、これらには限定されない。また、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座に関しては、前記本発明のうどんこ病抵抗性マーカーにおける説明を援用できる。
（１）ＳＮＰマーカーによる特定
　前記（ｘ）工程における前記選抜は、例えば、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３からなる群から選択された少なくとも一つのＳＮＰマーカーで特定されるうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物の選抜である。前記選択されるＳＮＰマーカーは、特に制限されず、例えば、前記本発明のうどんこ病抵抗性マーカーにおける「（１）ＳＮＰマーカーによる特定」の説明を援用できる。
（２）ＳＮＰマーカーを含む塩基配列による特定
　前記（ｘ）工程における前記選抜は、例えば、前記（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）からなる群から選択された少なくとも一つのポリヌクレオチドで特定されるうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物の選抜である。前記（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）のポリヌクレオチドは、例えば、前記本発明の抵抗性マーカーにおける「（２）ＳＮＰマーカーを含む塩基配列による特定」の説明を援用できる。
（３）２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列による特定
　前記（ｘ）工程における前記選抜は、例えば、前記染色体における、ＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４からなる群から選択された２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列を含むうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物の選抜である。前記２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列は、例えば、前記本発明のうどんこ病抵抗性マーカーにおける「（３）２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列による特定」の説明を援用できる。
　具体例として、前記（ｘ）工程における前記選抜は、例えば、前記領域の塩基配列において、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３からなる群から選択された少なくとも一つのＳＮＰマーカーを有するうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物の選抜があげられる。
　また、前記（ｘ）工程における前記選抜は、例えば、前記条件（ｉ）または（ii）を満たすうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物の選抜でもよい。
　前記うどんこ病抵抗性遺伝子座の有無を検出する染色体は、好ましくは、第３染色体である。
　また、前記（ａ）工程において、他方の親として使用するセイヨウカボチャ植物は、特に制限されず、例えば、既知のうどんこ病抵抗性を有するまたは有さないセイヨウカボチャ植物でもよいし、他の抵抗性を有するまたは有さないセイヨウカボチャ植物でもよいし、前記本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物でもよい。
　前記（ａ）工程において、前記うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物と前記他のセイヨウカボチャ植物との交雑方法は、特に制限されず、公知の方法が採用できる。
　前記（ｂ）工程において、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を選抜する対象は、例えば、前記（ａ）工程より得られたセイヨウカボチャ植物でもよいし、さらに、そのセイヨウカボチャ植物から得られた後代系統でもよい。具体的に、前記対象は、例えば、前記（ａ）工程の交雑によって得られたＦ１のセイヨウカボチャ植物でもよいし、その後代系統でもよい。前記後代系統は、例えば、前記（ａ）工程の交雑によって得られたＦ１のセイヨウカボチャ植物の自殖交雑後代または戻し交雑後代でもよいし、前記Ｆ１のセイヨウカボチャ植物と他のセイヨウカボチャ植物とを交雑することによって得られたセイヨウカボチャ植物であってもよい。
　前記（ｂ）工程において、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の選抜は、例えば、うどんこ病抵抗性を、直接的または間接的に確認することにより行うことができる。
　前記（ｂ）工程において、前記直接的な確認は、得られた前記Ｆ１のセイヨウカボチャ植物またはその後代系統について、例えば、うどんこ病抵抗性を、前述のような発病度によって評価することで行える。具体的には、例えば、前記Ｆ１のセイヨウカボチャ植物またはその後代系統に対して、例えば、うどんこ病菌を接種して、うどんこ病抵抗性を、前記発病度によって評価することで確認できる。この場合、例えば、２未満の発病度を示す前記Ｆ１のセイヨウカボチャ植物またはその後代系統を、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物として選抜できる。
　また、前記（ｂ）工程において、前記間接的な確認による選抜は、例えば、下記（ｂ１）および（ｂ２）工程によって行うことができる。
（ｂ１）前記（ａ）工程より得られたセイヨウカボチャ植物またはその後代系統について、染色体上における、うどんこ病抵抗性遺伝子座の有無を検出する検出工程
（ｂ２）前記うどんこ病抵抗性遺伝子座の存在により、前記（ａ）工程により得られたセイヨウカボチャ植物またはその後代系統を、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物として選抜する選抜工程
　前記（ｂ）工程におけるうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の間接的な確認による選抜は、例えば、前記（ｘ）工程において説明した方法と同様であり、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座の有無の検出によって、より具体的には、前記分子マーカーを使用した前記うどんこ病抵抗性遺伝子座の有無の検出によって、行うことができる。
　本発明の製造方法は、前記（ｂ）工程において選抜されたうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を、さらに育成することが好ましい。
　このように、前記うどんこ病抵抗性が確認された前記セイヨウカボチャ植物またはその後代系統を、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物として選抜できる。
　本発明の製造方法は、さらに、交雑により得られた前記後代系統から、種子を採取する採種工程を含んでもよい。
　本発明の製造方法は、例えば、前記（ａ）工程のみを含んでもよい。
４．うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物のスクリーニング方法
　本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物のスクリーニング方法（以下、「スクリーニング方法」ともいう。）は、交雑によりうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を生産するための親として、被検セイヨウカボチャ植物から、セイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカーとして第３染色体上にうどんこ病抵抗性遺伝子座を含むセイヨウカボチャ植物を選抜する工程を含むことを特徴とする。
　本発明のスクリーニング方法は、被検セイヨウカボチャ植物から、うどんこ病抵抗性マーカーとして第３染色体上にうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するセイヨウカボチャ植物を選抜する工程を含むことが特徴であって、その他の工程および条件は、何ら制限されない。本発明のスクリーニング方法によれば、前記本発明のうどんこ病抵抗性マーカーによって、うどんこ病抵抗性の親を得ることができる。本発明のスクリーニング方法は、例えば、前記本発明の抵抗性マーカー、抵抗性セイヨウカボチャ植物および製造方法等の説明を援用できる。
　前記親の選抜は、例えば、前記本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法における前記（ｘ）工程の説明を援用できる。
５．セイヨウカボチャ植物へのうどんこ病抵抗性の付与方法
　本発明のセイヨウカボチャ植物へのうどんこ病抵抗性の付与方法は、第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を、セイヨウカボチャ植物に導入する導入工程を含むことを特徴とする。本発明の付与方法は、第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を、セイヨウカボチャ植物に導入する導入工程を含むことが特徴であり、その他の工程および条件は、特に制限されない。本発明の付与方法によれば、前記第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座、すなわち、前記本発明のうどんこ病抵抗性マーカーを導入することにより、セイヨウカボチャ植物にうどんこ病抵抗性を付与することができる。本発明の付与方法は、例えば、前記本発明の抵抗性マーカー、抵抗性セイヨウカボチャ植物、製造方法およびスクリーニング方法等の説明を援用できる。
　前記導入工程において、前記第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座の導入方法は、特に制限されない。前記導入方法は、例えば、前記抵抗性セイヨウカボチャ植物と交雑または胚培養、従来公知の遺伝子工学的手法があげられる。導入する前記抵抗性遺伝子座は、前述の抵抗性遺伝子座が例示できる。前記抵抗性セイヨウカボチャ植物との交雑により導入する場合、前記抵抗性セイヨウカボチャ植物は、例えば、前記抵抗性遺伝子座をホモ接合型で含むことが好ましい。
　以下、実施例を用いて本発明を詳細に説明するが、本発明は実施例に記載された態様に限定されるものではない。
［実施例１］
　新規なうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物について、うどんこ病菌に対し抵抗性を示すことを確認し、また、うどんこ病抵抗性遺伝子座の遺伝様式の解析および新規なうどんこ病抵抗性遺伝子座の特定を行なった。
　うどんこ病抵抗性を示す新規セイヨウカボチャ植物を開発するために、タキイ種苗株式会社農場で継代育種により採取された大量のセイヨウカボチャ系統の種子について、育種を行い、うどんこ病抵抗性の試験を行った。その結果、うどんこ病抵抗性を示す、新規のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ系統（Cucurbita maxima）を得た。以下、このうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を親系統という。
　また、別途、うどんこ病抵抗性系統と、うどんこ病罹病性系統とを交雑することにより得られたＦ２集団を作製し、そのＤＮＡを抽出した。そして、前記ＤＮＡについて、Sequence-Based Genotyping（Keygene社）を行い、ソフトウェア（Carte Blanche、Keygene社）を用いた連鎖地図の作製、およびソフトウェア（QTL cartographer、NC STATE University製）を用いた連鎖解析をおこなった。この結果、第３染色体上に、CIM(composite interval mapping)で算出されるＬＯＤ値のピーク値が２５．８を示すＱＴＬを１つ検出した。
　そして、前記ピーク値の近傍における多型であるＭＳＰ＿１４およびＭＳＰ＿１６をＳＮＰマーカーとして設計した。
　前記親系統と、タキイ種苗株式会社が所有するうどんこ病罹病性セイヨウカボチャ植物の固定系統（以下、「罹病性系統」ともいう）とを交雑することによって、９３個体のＦ２分離集団（以下、「９３系統」ともいう。）を生産した。
　前記９３系統に対し、うどんこ病菌を用いて接種試験を行なった。うどんこ病菌の接種試験は、以下のように行った。
　うどんこ病菌（Podosphaera xanthii）は、滋賀県湖南市のカボチャ圃場において、自然発病したうどんこ病罹病セイヨウカボチャ植物に由来するものを使用した。前記うどんこ病菌は、下記の接種試験により、前記罹病性セイヨウカボチャ植物に感染可能な病原菌であることを確認した。
　まず、前記うどんこ病菌は、隔離した温室内で生育させたセイヨウカボチャ植物（えびす、タキイ種苗株式会社）上で培養した。前記セイヨウカボチャ植物の葉上の前記うどんこ病菌の菌叢を掻き取ることにより分生子を回収後、回収した分生胞子を１．０×１０４個／ｍＬになるように殺菌水で調整することにより胞子懸濁液を調製し、これを接種に供試した。また、前記接種に供試するセイヨウカボチャ植物は、本葉２枚が展開した幼苗を用いた。ハンドスプレーを用い、前記分生子懸濁液２ｍＬを前記セイヨウカボチャ植物１個体の株全体に均一に噴霧した。前記噴霧後、前記セイヨウカボチャ植物を、１５－２５℃、湿度６０－８０％、自然光下の温室内で１４日間生育した。そして、生育したセイヨウカボチャ植物について、以下のように発病調査を行った。
　発病調査は、発病指数を、以下の基準にしたがって評価することにより実施した。また、発病指数の評価基準として発病指数０～４の個体の代表例を図２の写真に示す。なお、図２において、白色が、胞子形成が見られる箇所である。
発病指数０：病徴なし
発病指数１：不明瞭な胞子形成が接種葉に数か所で観察される（接種葉の表の面積の５％以下）
発病指数２：明確な胞子形成がみられるが、限定的である（接種葉の表の面積の５％を超え２５％以下）
発病指数３：明確な胞子形成がみられ、接種葉の所々に観察される（接種葉の表の面積の２５％を超え５０％以下）
発病指数４：明確な胞子形成がみられ、接種葉のほとんどが覆われている（接種葉の表の面積の５０％を超える）
　そして、各個体について、それぞれ、前記基準に従って発病指数を調査し、下記式より、各系統の発病度を求めた。
発病度（Ｎ）＝［（０×ｎ０）＋（１×ｎ１）＋（２×ｎ２）＋（３×ｎ３）＋（４×ｎ４）］／調査個体数
前記式において、「０、１、２、３、４」は、それぞれ発病指数を示し、「ｎ０、ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４」は、それぞれ、発病指数０、発病指数１、発病指数２、発病指数３、発病指数４の個体数を示す。
　また、前記９３系統について、そのＤＮＡを抽出し、ＭＳＰ＿１６の多型を解析した。
　これらの結果を、下記表１に示す。下記表１に示すように、ＭＳＰ＿１６について、抵抗性のホモ接合型（Ａ）またはヘテロ接合型（Ｈ）では、発病度が２未満であるのに対し、罹病性のホモ接合型（Ｂ）では、発病度が２以上であった。これらの結果から、本発明の抵抗性セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病菌に対して有効であることがわかった。また、前記９３系統の発病指数と、その個体の出現頻度との関係から、前記親系統のうどんこ病抵抗性の遺伝様式は、１因子の不完全優性であることがわかった。さらに、ＭＳＰ＿１６が、前記第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座のマーカーとして使用できることがわかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
［実施例２］
　新規なうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物について、新規なうどんこ病抵抗性遺伝子座の特定を行った。
　前記親系統と、前記罹病性系統と交雑することで、戻し交雑後代ＢＣ１系統を得た。前記ＢＣ１系統について、さらに、前記罹病性セイヨウカボチャ植物と３回戻し交雑することにより、ＢＣ４系統を得た。なお、各戻し交雑後代について、ＭＳＰ＿１６およびＭＳＰ＿１４をヘテロ接合型で含むセイヨウカボチャ植物を選抜した。
　前記実施例１のＱＴＬの前記ピーク値の近傍における多型であるＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３を新たにＳＮＰマーカーとして設計した。そして、前記９３系統およびＢＣ４系統について、ＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４に対応する多型の塩基を特定した。この結果、前記９３系統およびＢＣ４系統におけるＳＮＰマーカーの多型の違いから、前記第３染色体において、ＭＳＰ＿１６とＭＳＰ＿１４との距離は、１．６ｃＭであることがわかった。
　つぎに、前記９３系統およびＢＣ４系統において、前記ＳＮＰマーカーの遺伝子型が互いに異なる６個体（以下、「６系統」ともいう）について選抜した。そして、前記６系統を自殖し、自殖後代を得た。そして、前記自殖後代について、前記実施例１と同様に接種試験を実施した。この結果を下記表２に示す。下記表２において、Ａは、前記ＳＮＰマーカーを抵抗性のホモ接合で保有することを示し、Ｈは、前記ＳＮＰマーカーをヘテロ接合で保有することを示し、Ｂは、前記ＳＮＰマーカーを罹病性のホモ接合で保有することを示す。また、下記表２において、ＡおよびＨは、網掛けで示している。下記表２に示すように、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３が、抵抗性のホモ接合（Ａ）またはヘテロ接合（Ｈ）である個体においては、自殖後代において抵抗性を示す個体が得られた。これらの結果から、前記ＳＮＰマーカーの中でも、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３が、うどんこ病抵抗性と高い相関性を示すＳＮＰマーカーであることが確認できた。また、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３と高い相関性を示すことから、前記ＳＮＰマーカーを含む領域であるＭＳＰ＿１６およびＭＳＰ＿１４の部位間の領域が、うどんこ病抵抗性と高い相関性を示すことがわかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
［実施例３］
　新規なうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物が有する抵抗性遺伝子座について、他のセイヨウカボチャ植物が有していないことを確認した。
　前記ＢＣ４系統について、さらに、前記罹病性系統と２回戻し交雑することにより、ＢＣ６系統を得た。なお、各戻し交雑後代について、ＭＳＰ＿４１３５３をヘテロ接合型で含むセイヨウカボチャ植物を選抜した。つぎに、前記ＢＣ６系統を、自殖させることにより自殖後代ＢＣ６Ｆ１系統を得た。前記ＢＣ６Ｆ１系統について、さらに、同様に２回自殖させ、自殖後代ＢＣ６Ｆ３系統を得た。前記ＢＣ６Ｆ３系統について、ＭＳＰ＿４１３５３を抵抗性のホモ接合型で含むセイヨウカボチャ植物を選抜した（選抜ＢＣ６Ｆ３系統）。前記選抜ＢＣ６Ｆ３系統は、受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で寄託した。以下、選抜ＢＣ６Ｆ３系統を、寄託系統ともいう。
　つぎに、前記寄託系統を含む下記表３の各セイヨウカボチャ植物（ｎ＝５）について、前記実施例１と同様にして、発病度を算出した。また、前記寄託系統を含む各セイヨウカボチャ植物について、ＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４に対応する多型の塩基を特定した。これらの結果を下記表３に示す。下記表３において、Ａは、前記ＳＮＰマーカーを抵抗性のホモ接合型で保有することを示し、Ｂは、前記ＳＮＰマーカーを罹病性のホモ接合型で保有することを示す。また、下記表３において、Ａは、網掛けで示している。下記表３に示すように、寄託系統は、うどんこ病抵抗性を示し、かつＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４の全てのＳＮＰマーカーについて、抵抗性のホモ接合型で保有していた。これに対し、前記寄託系統を除くセイヨウカボチャ植物は、うどんこ病罹病性を示し、かつＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４の全てのＳＮＰマーカーについて、罹病性のホモ接合型で保有していた。また、前記寄託系統は、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物として知られているPI 135370、PI 137866、PI 165027、PI 166046、PI 458673、およびPI 458675と比較して、発病度が大幅に低下していることから、これらの品種が有するうどんこ病抵抗性遺伝子座とは異なる、新規の抵抗性遺伝子座を有することがわかった。これらの結果から、本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物が保有する抵抗性遺伝子座が、新規の抵抗性遺伝子座であること、ならびに前記抵抗性遺伝子座がＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３で特定できることがわかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
　つぎに、前記寄託系統を含む下記表４の各セイヨウカボチャ植物について、ＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４に対応する多型の塩基を特定した。なお、前記寄託系統を除く各セイヨウカボチャ植物は、うどんこ病に対して罹病性であることが知られている。下記表４において、Ａは、前記ＳＮＰマーカーを抵抗性のホモ接合型で保有することを示し、Ｂは、前記ＳＮＰマーカーを罹病性のホモ接合型で保有することを示す。また、下記表４において、Ａは、網掛けで示している。下記表４に示すように、寄託系統は、ＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４の全てのＳＮＰマーカーについて、抵抗性のホモ接合型で保有していた。これに対し、前記寄託系統を除くセイヨウカボチャ植物は、ＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４の全てのＳＮＰマーカーについて、罹病性のホモ接合型で保有していた。これらの結果から、前記抵抗性遺伝子座を、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３で特定できることがわかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
　以上、実施形態および実施例を参照して本発明を説明したが、本発明は、上記実施形態および実施例に限定されるものではない。本発明の構成や詳細には、本発明のスコープ内で当業者が理解し得る様々な変更をすることができる。
　この出願は、２０１７年７月３１日に出願された日本出願特願２０１７―１４７６４７を基礎とする優先権を主張し、その開示のすべてをここに取り込む。
　以上のように、本発明のセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカーによれば、例えば、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を簡便にスクリーニングできる。また、本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、例えば、前記抵抗性遺伝子座を含むため、例えば、うどんこ病抵抗性を示すことが可能である。このため、本発明のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物は、従来のような農薬による防除が不要であるため、例えば、前記農薬散布の労力および費用の問題も回避できる。このため、本発明は、例えば、育種等の農業分野において極めて有用である。

Claims (18)

  1. 第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を含むことを特徴とする、セイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー。
  2. 前記うどんこ病抵抗性遺伝子座が、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３からなる群から選択された少なくとも１つのＳＮＰマーカーで特定される、請求項１記載のセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー。
  3. 前記うどんこ病抵抗性遺伝子座が、下記（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）からなる群から選択された少なくとも１つのポリヌクレオチドで特定される、請求項１または２記載のセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー。
    （ａ）　下記（ａ１）または（ａ３）のポリヌクレオチド
    （ａ１）配列番号１の塩基配列からなるポリヌクレオチド
    （ａ３）前記（ａ１）の３７番目の塩基（Ｃ）が保存され、前記（ａ１）の塩基配列に対して、９５％以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ａ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチド
    （ｂ）　下記（ｂ１）または（ｂ３）のポリヌクレオチド
    （ｂ１）配列番号２の塩基配列からなるポリヌクレオチド
    （ｂ３）前記（ｂ１）の５９番目の塩基（Ｔ）が保存され、前記（ｂ１）の塩基配列に対して、９５％以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ｂ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチド
    （ｃ）　下記（ｃ１）または（ｃ３）のポリヌクレオチド
    （ｃ１）配列番号３の塩基配列からなるポリヌクレオチド
    （ｃ３）前記（ｃ１）の３４番目の塩基（Ｃ）が保存され、前記（ｃ１）の塩基配列に対して９５％以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ｃ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチド
  4. 前記うどんこ病抵抗性遺伝子座が、前記染色体における、ＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４からなる群から選択された２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載のセイヨウカボチャ植物のうどんこ病抵抗性マーカー。
  5. 第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を含むことを特徴とする、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物。
  6. 前記うどんこ病抵抗性遺伝子座が、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３からなる群から選択された少なくとも１つのＳＮＰマーカーで特定される、請求項５記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物。
  7. 前記うどんこ病抵抗性遺伝子座が、下記（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）からなる群から選択された少なくとも１つのポリヌクレオチドで特定される、請求項５または６記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物。
    （ａ）　下記（ａ１）または（ａ３）のポリヌクレオチド
    （ａ１）配列番号１の塩基配列からなるポリヌクレオチド
    （ａ３）前記（ａ１）の３７番目の塩基（Ｃ）が保存され、前記（ａ１）の塩基配列に対して、９５％以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ａ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチド
    （ｂ）　下記（ｂ１）または（ｂ３）のポリヌクレオチド
    （ｂ１）配列番号２の塩基配列からなるポリヌクレオチド
    （ｂ３）前記（ｂ１）の５９番目の塩基（Ｔ）が保存され、前記（ｂ１）の塩基配列に対して、９５％以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ｂ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチド
    （ｃ）　下記（ｃ１）または（ｃ３）のポリヌクレオチド
    （ｃ１）配列番号３の塩基配列からなるポリヌクレオチド
    （ｃ３）前記（ｃ１）の３４番目の塩基（Ｃ）が保存され、前記（ｃ１）の塩基配列に対して９５％以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ｃ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチド
  8. 前記抵抗性遺伝子座が、前記染色体における、ＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８３、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４からなる群から選択された２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列を含む、請求項５から７のいずれか一項に記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物。
  9. 前記うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物が、受託番号ＦＥＲＭ　ＢＰ－２２３３６で特定されるセイヨウカボチャ植物またはその後代系統である、請求項５から８のいずれか一項に記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物。
  10. 前記うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物が、植物体またはその部分である、請求項５から９のいずれか一項に記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物。
  11. 前記うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物が、種子である、請求項５から１０のいずれか一項に記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物。
  12. 下記（ａ）および（ｂ）工程を含むことを特徴とする、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法。
    （ａ）請求項５から１１のいずれか一項に記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物と、他のセイヨウカボチャ植物とを交雑する工程
    （ｂ）前記（ａ）工程より得られたセイヨウカボチャ植物またはその後代系統から、うどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を選抜する工程
  13. 前記（ａ）工程に先立って、下記（ｘ）工程を含む、請求項１２記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法。
    （ｘ）被検セイヨウカボチャ植物から、請求項５から１１のいずれか一項に記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物を選抜する工程
  14. 前記（ｘ）工程における前記選抜が、第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を含むうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の選抜である、請求項１３記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法。
  15. 前記（ｘ）工程における前記選抜が、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、およびＭＳＰ＿４１３５３からなる群から選択された少なくとも１つのＳＮＰマーカーで特定されるうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の選抜である、請求項１４記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法。
  16. 前記（ｘ）工程における前記選抜が、下記（ａ）、（ｂ）、および（ｃ）からなる群から選択された少なくとも１つのポリヌクレオチドで特定されるうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の選抜である、請求項１４または１５記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法。
    （ａ）　下記（ａ１）または（ａ３）のポリヌクレオチド
    （ａ１）配列番号１の塩基配列からなるポリヌクレオチド
    （ａ３）前記（ａ１）の３７番目の塩基（Ｃ）が保存され、前記（ａ１）の塩基配列に対して、９５％以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ａ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチド
    （ｂ）　下記（ｂ１）または（ｂ３）のポリヌクレオチド
    （ｂ１）配列番号２の塩基配列からなるポリヌクレオチド
    （ｂ３）前記（ｂ１）の５９番目の塩基（Ｔ）が保存され、前記（ｂ１）の塩基配列に対して、９５％以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ｂ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチド
    （ｃ）　下記（ｃ１）または（ｃ３）のポリヌクレオチド
    （ｃ１）配列番号３の塩基配列からなるポリヌクレオチド
    （ｃ３）前記（ｃ１）の３４番目の塩基（Ｃ）が保存され、前記（ｃ１）の塩基配列に対して９５％以上の同一性を有する塩基配列からなり、前記うどんこ病抵抗性遺伝子座において、前記うどんこ病抵抗性に関して前記（ｃ１）のポリヌクレオチドと同等の機能を有するポリヌクレオチド
  17. 前記（ｘ）工程における前記選抜が、前記染色体における、ＭＳＰ＿１６、ＭＳＰ＿１７５００、ＭＳＰ＿８、ＭＳＰ＿４１３５３、およびＭＳＰ＿１４からなる群から選択された２つのＳＮＰマーカーの部位間の領域の塩基配列を含むうどんこ病抵抗性遺伝子座を有するうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の選抜である、請求項１４から１６のいずれか一項に記載のうどんこ病抵抗性セイヨウカボチャ植物の製造方法。
  18. 第３染色体上のうどんこ病抵抗性遺伝子座を、セイヨウカボチャ植物に導入する導入工程を含むことを特徴とする、セイヨウカボチャ植物へのうどんこ病抵抗性の付与方法。
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