WO2006033453A1

WO2006033453A1 - インターフェロン作用物質の活性増強剤

Info

Publication number: WO2006033453A1
Application number: PCT/JP2005/017907
Authority: WO
Inventors: Nobuhiro Sato; Yoshiyuki Takei; Kenichi Ikejima; Sonoko Ishizaki
Original assignee: Juntendo Educational Foundation; Ajinomoto Co., Inc.
Priority date: 2004-09-22
Filing date: 2005-09-21
Publication date: 2006-03-30
Also published as: JPWO2006033453A1

Abstract

本発明は、ＩＦＮ作用物質治療時に、ＩＦＮ作用物質の活性を増強し、及び／又はＩＦＮ作用物質の副作用を軽減する作用を有する、優れたＩＦＮ作用物質の活性増強及び／又は副作用軽減剤として、有効成分としてグリシンを含むＩＦＮ作用物質の活性増強及び／又は副作用軽減剤を提供する。さらに本発明は、ＩＦＮ作用物質の活性増強及び／又は副作用軽減剤を含有する抗ウイルス剤、ウイルス性肝炎治療剤、抗腫瘍剤、自己免疫疾患治療剤及び食品組成物などを提供する。

Description

明細書

インターフエ口ン作用物質の活性増強剤

技術分野

本発明は、インターフェロン作用物質の活性増強作用を有するインターフエ口ン作用物質の活性増強剤、インターフェロン作用物質治療の副作用を軽減する副作用軽減剤、グリシンとインターフェロン作用物質を組み合わせてなる医薬、及ぴそれらの医薬組成物に関する。背景技術

インターフェロン（以下、 I F Nとも称する）は抗ウィルス作用、細胞増殖抑制作用、免疫調節作用など多彩な生物活性を有するサイトカインであり、臨床的には、抗ウィルス剤として B型慢性肝炎及び C型慢性肝炎に、抗腫瘍剤として慢性骨髄性白血病、腎癌、多発性骨髄腫、ヘアリー細胞白血病、亜急性硬化性全脳炎、 H T L V _ 1脊髄症、皮膚悪性黒腫、膠芽腫、髄芽腫、星細胞腫などに I F N療法として使用されている。

し力し、その使用の際には、間質性肺炎、肺線維症、抑うつ、自殺企画、意識障害、痙攣、見当識障害、せん妄、錯乱、幻覚、躁状態、妄想、精神***病症状、失神、痴呆様症状、難聴、興奮、自己免疫現象、糖尿病、肝障害、腎障害、再生不良性貧血、汎血球現象、無顆粒球症、白血球減少、血小板減少、ショック、心筋症、心筋梗塞、心不全、狭心症、心室性頻脈、消化管出血、消化性潰瘍、虚血性大腸炎、脳出血、敗血症、網膜症、発熱、頭痛、頭重感、全身倦怠感、筋肉痛、悪寒、戦慄、関節痛、眠気、不安、不眠、焦燥、めまい、知覚異常、神経過敏、発疹、奪麻疹、そう痒感、顆粒球減少、リンパ球増多、好酸球増多、単球増多、 A S Tの上昇、 A L Tの上昇、 A L Pの上昇、 γ—G T Pの上昇、 L D Hの上昇、 B U Nの上昇、クレアチュンの上昇、蛋白尿、血尿、浮腫、頻脈、動悸、血圧上昇、顔面潮紅、食欲不振、.悪心、嘔吐、消化不良、胸やけ、腹部膨満感、腹痛、下痢、便秘、口内炎、 ***炎、ロ渴、脱毛、紅班、湿疹、脳波異常、麻痺、下腿痙直、四肢の痺れ、緊張亢進、無力症、肺塞栓症、肺水腫、胸膜炎、胸水、血痰、鼻炎、眩嗽、呼吸困難、喀痰増加、網膜出血、網膜微小循環障害、眼痛、注射部位反応、耳鳴り、アルブミン減少、血清総蛋白減少、体重減少、味覚異常、ほてり、胸部痛、背部痛、咽頭痛、不正出血、嗅覚障害、電解質異常、 ***減退、多汗などの副作用が報告されている（飯野四郎編著、慢性肝炎最新の治療（中外医学社） p l 54 (2001年）参照）。これらの副作用は、インターフェロン治療を受けている患者にとって大きな問題であり、治療中の患者にも、これから治療を受ける患者にも治療に対する不安を引き起こしている。よってこれらの副作用が軽減された治療剤が必要とされている。

C型肝炎ウィルス（以下、 HCVとも称する）の持続感染は、慢性肝炎を引き起こし、 20数年の経過の中で肝硬変、そして最終的には肝細胞癌発症に至る。その HC Vに対し唯一の抗 HCV治療として行われてきた I FN療法の著効率 (本発明において、著効率は I FN治療終了後 24週における血中 HCV RNA陰性化率（％) と定義する）は治療を行った全症例に対し、 20%程度、 HCVが遺伝子型 I bかつ高ウイルス量の難治性 C型慢性肝炎に限っては 10 %未満と低い。リバビリン（R i b a V i r i n、以下 R i bとも称す）は I FNと異なる作用機序で抗ウィルス活性を示す抗ゥィルス剤である。単独では H C Vに対して効果を示さないが、 I FNと R i bとの併用療法にすると、全症例に対する著効率は 50 %程度、難治性患者に対して 30 %程度に改善する（日本肝臓学会編、慢性肝炎の治療ガイド（文光堂）、 p 30、 p 34 (2004年）参照）。しかしながら、全ての治療患者に有効な治療効果を示すまでにはいまだ至っていない。よってさらに優れた効果を有する I FNの活性増強剤が必要とされているのが現状である。

また、 I FNと R i bの併用療法時には、 I FNによる副作用の他に R i による副作用発現が加わることになる。 R i bによる副作用として最も特徴的なものは溶血性貧血であるが、その程度が重篤な場合は R i bの減量もしくは投与中止が必要となる。よって、 I FN+R i b併用療法において、その抗ウィルス効果を維持したまま R i bを減量、あるいは完全に置き換えることが可能な薬剤も必要とされている。

一方グリシンは、抗炎症作用、細胞保護作用、免疫調節作用などの作用があることが知られているが（ゼット ·ッオングら（Z. Z h o n g ) , カレント ·ォピエオン 'イン ' クリニカル . 二ユートリシヨン &メタボリック · ケア（Cu r r Op i n C l i n Nu t r Me t a b C a r e.) 6, 229— 40 (2003年）参照）、 I FNの活性を増強する作用や I FNの副作用を軽減する作用を有するという報告はない。発明の開示

本発明が解決しょうとする課題は、 I FN作用物質治療時に、 I FN作用物質の活性を増強する優れた I FN作用物質の活性増強剤及び I FN作用物質の副作用を低減する副作用軽減剤を提供することである。

本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、グリシンが I F N作用物質の活性を増強するとともに、グリシン単独でも I FN様活性を示すことを見出し、本発明を完成した。

すなわち、本発明は以下の通りである。

(1) 有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質の活性増強剤。

(2) インターフェロン作用物質がインターフェロンである上記（1) に記載の増強剤。

(3) 上記（1) 又は（2) 記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする抗ウィルス剤。

(4) 上記（1) 又は（2) 記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とするウィルス性肝炎治療剤。

(5) 上記（1) 又は（2) 記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とするウィルス性肝炎に起因する肝硬変治療剤。 (6) 上記（1) 又は（2) 記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする抗腫瘍剤。

(7) 上記（1) 又は（2) 記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする自己免疫疾患治療剤。

(8) 上記（1) 又は（2) に記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする食品組成物。

(9) 有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質治療における副作用軽減剤。

(10) インターフロン作用物質治療がウィルス性肝炎に対するインターフエロン作用物質治療である上記（9) 記載の副作用軽減剤。

(1 1) ウィルス性肝炎が C型肝炎である上記（10) 記載の副作用軽減剤。

(1 2) インターフェロン作用物質治療がインターフェロン作用物質及びリバビリン作用物質の併用を含む治療である上記（9) 記載の副作用軽減剤。

(1 3) インターフェロン作用物質及び Z又はリバビリン作用物質の副作用を軽減することを特徴とする上記（12) 記載の副作用軽減剤。

(14) 上記（9) 〜（1 3) のいずれかに記載の副作用軽減剤を含有することを特徴とする食品組成物。

(1 5) 有効成分としてグリシンを含むことを特徴とする抗ウィルス剤。

( 16)有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするウィルス性肝炎治療剤。 (1 7) グリシンとインターフェロン作用物質を組み合わせてなる医薬。

(18) 抗ウィルス用である上記 (1 7) に記載の医薬。

(1 9) ウィルス性肝炎治療用である上記（1 7) に記載の医薬。

(20) ウィルス性肝炎が C型慢性肝炎である上記（1 9) に記載の医薬。 (21) 腫瘍治療用である上記（1 7) に記載の医薬。

(22) 自己免疫疾患治療用である上記（17) に記載の医薬。

(23) 有効成分としてグリシン及びインターフェロン作用物質を含むことを特徴とする医薬組成物である、上記（1 7) に記載の医薬。 (24) 有効成分としてさらにリバピリン作用物質を含むことを特徴とする医薬組成物である、上記（23) に記載の医薬。

(25) 有効成分としてグリシン及びインターフェロン作用物質をそれぞれ単味剤として組み合わせたことを特徴とする医薬用キット。

(26) 有効成分としてグリシン、インターフエ口ン作用物質及びリパビリン作用物質をそれぞれ単味剤として組み合わせたことを特徴とする医薬用キット。

(27) グリシンを有効成分とするインターフェロン誘導遺伝子発現増強剤。

(28) インターフェロン誘導遺伝子が、 PKR遺伝子又は 2— 5 AS 1遺伝子である上記（27) に記載の増強剤。

(29) グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン作用物質の活性を増強する方法。

(30) インターフェロン作用物質がインターフェロンである、上記（29) に記載の方法。

(31) グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン作用物質治療における副作用を軽減する方法。

(32) グリシンの有効量を投与することを含む、インターフロン誘導遺伝子の発現を増強する方法。

(33) インターフェロン作用物質の活性増強剤を製造するための、グリシンの使用。

(34) インターフェロン作用物質がインターフェロンである、上記（33) に記載の使用。

(35),インターフェロン作用物質治療における副作用軽減剤を製造するための、グリシンの使用。

(36) インターフェロン誘導遺伝子発現増強剤を製造するための、グリシンの使用。

(37) 有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質の活性増強剤、および該剤のィンターフェ口ン作用物質の活性増強への使用に関する説明を記載した記載物を含む商業的パッケージ。図面の簡単な説明

図 1は、グリシン投与による PBMC中の I FN誘導遺伝子（PKR) の発現上昇を示す。（平均値土標準偏差： * **P<0. 005 : t検定）

図 2は、グリシン投与による PBMC中の I FN誘導遺伝子（2— 5AS 1) の発現上昇を示す。（平均値土標準偏差： * P< 0. 05、 * *P<0. 01 : t検定）

図 3は、グリシン投与による肝臓中の I FN誘導遺伝子（PKR) の発現上昇を示す。（各群 2例の平均値）

図 4は、グリシン投与による肝臓中の I F N誘導遺伝子（ 2 _ 5 A S 1 ) の発現上昇を示す。（各群 2例の平均値）発明を実施するための最良の形態

ぐグリシン >

本発明においてグリシンは、必ずしも遊離アミノ酸として用いられる必要はなく、無機酸塩、有機酸塩、生体内で加水分解可能なエステル体などの形態で用いてもよい。また、 2以上のグリシン又は他のアミノ酸をペプチド結合させたぺプチド類の形態で用いてもよい。

くインターフェロン作用物質の活性増強剤〉

本発明の I FN作用物質の活'|~生増強剤は、グリシン単味であってもよいが、後述の製剤用担体や一般的な食品素材を含有していてもよい。

本発明における I FN作用物質としては、 I FNのほか、生体内で I FN様の作用を奏する物質であれば特に限定されない。 I FNとしては、例えば I FN— α、 I FN— ;3及び I FN— γ、 I F Nの化学修飾体などが挙げられる。 I FN 一 αには 20種類以上の亜型があるといわれており、 165〜166個のアミノ酸からなるものと 172個のアミノ酸からなるものに大きく分けられる。分子量は、 1. 7〜2. 3万の間にあり、前者は糖鎖を有するが後者は糖鎖を持たない。 I F N— αには天然型と、遺伝子組み換えによつて大腸菌で産生された遺伝子組み換え型とがあり、後者は糖鎖を持たない。天然型 I FN— a製剤には、ォーァィエフ（登録商標）、 I FN— _αモチダ、スミフエロン (登録商標）などがある（成人 1日あたり 250万〜 600万国際単位投与）。遺伝子組み換え型 I F Ν— α製剤としては、アドバフエロン（登録商標）、口フエロン（登録商標）、キャンフエロン（登録商標） Α、イントロン（登録商標） Αなどがある（成人 1日あたり 3 00万〜 1800万国際単位投与)。 I FN— ]3は 166個のアミノ酸からなり亜型は存在しない。天然型 I FN— 製剤には、フエロン（登録商標）、 I FN ]3モチダ（成人 1日あたり 100万〜 300万国際単位投与）、遺伝子組み換え型 I F N— 製剤には、ベタフエロン（登録商標）などがある（成人 1日あたり 800 万国際単位投与)。天然型 I FN— _y製剤には、オーガンマ（登録商標）（成人 1 日あたり 100万国際単位投与)、遺伝子組み換え型 I FN— γ製剤としては、ビ才ガンマ (登録商標）、ィムノマックス（登録商標）一 γなどがある（成人 1日あたり 200万〜 400万国際単位投与）。また、 I FNの化学修飾体には、インターフエロンをポリエチレングリコール（PEG) で修飾した、例えば PEG—インターフェロン一_α 2 a (ぺガシス（登録商標）（成人 1日あたり 180 μ g投与)）や PEG—インターフェロン一α 2 b (PEG— I n t r o n (登録商標）（成人 I Sあたり 1. 5 g投与)）などの製剤がある。更に、 I FN作用物質は I FN 様生物活性を惹起するものであれば良く、必ずしも上記 I FNと同一のアミノ酸配列を有するものでなくても良い。また抗体、ぺプチド、低分子であってもよい。これらのうち、 I FN製剤が好ましく、その中でも I FN— a製剤が特に好ましい。

I FN作用物質の活性増強とは I FN作用物質治療の作用を増強することをいい、その結果として得られる、 I FN作用物質治療患者の著効率改善、治療期間の短縮、 I FN作用物質投与量の減量なども含むものとする。 I FN作用物質によつて発現誘導される遺伝子には例えば P K R (二本鎖 R N A依存性プロティンキナーゼ）や 2— 5AS 1 (オリゴアデ-ル酸合成酵素 1) などがあるが、 I F N作用物質の活性増強作用はそれらの発現量を調べることで確認することが可能である。特に PKR、 2— 5 AS 1の発現誘導によって I FN生物活性の一つである抗ウィルス活性が発揮されることが知られているので、これらの遺伝子発現が増強されれば、 I FN作用物質の活性が増強されることは明らかである。

本発明において I FN作用物質治療とは、 I FN作用物質を投与することによつて疾患を治療することを指す。また、本発明における I FN作用物質治療には I FN作用物質とそれ以外の薬剤とを併用する場合も含まれ、例えば I FN作用物質と R i b作用物質の併用治療が例示される。

本明における R i b作用物質としては、 R i bのほか、 R i bの類縁体、例 X.ば V i r am i d i n e (W a t s o nり、 Cu r r e n t O i n i o n i n i n v e s t i g a t i o n a l d r u g s 2002, 3, (5) 680— 683) など、生体内でインターフェロンの抗ウィルス効果を増強する R i b様作用を奏する物質であれば特に限定されない。

本発明の I FN作用物質の活性増強剤を含有する医薬組成物は、抗ウィルス剤、ウィルス性肝炎治療剤、抗腫瘍剤、自己免疫疾患治療剤として使用できる。抗ゥィルス剤の場合、治療対象となるウィルス性疾患は、 I FN作用物質治療が行われている疾患が好ましく、例えば B型肝炎ウィルス（HBV)、 C型肝炎ウィルス (HCV), HT L V- 1ウィルスであり、特に C型肝炎ウィルス（HCV) 疾患治療であることが好ましい。ウィルス性肝炎治療剤の場合、 HB e抗原陽性でかつ DNAポリメラーゼ陽性の B型活動性肝炎のウィルス血症の改善、 C型慢性肝炎におけるウィルス血症の改善に使用でき、特に C型慢性肝炎患者の治療に有用である。さらに、ウィルス性肝炎に起因する肝硬変にも使用することができる。また、抗腫瘍剤の場合、慢性骨髄性白血病、腎癌、多発性骨髄腫、ヘアリー細胞白血病、亜急性硬化性全脳炎、 HTLV— 1脊髄症、皮膚悪性黒腫、膠芽腫、髄芽腫、星細胞腫などの治療に使用できる。さらに、自己免疫疾患治療剤の場合、多発性硬化症などの治療に使用できる。 <副作用軽減剤 >

本発明の I F N作用物質治療における副作用軽減剤は、有効成分としてグリシンを含むことを特徴とする、 I F N作用物質治療の副作用を軽減する副作用軽減剤である。

本発明の副作用軽減剤は、グリシン単独であってもよいが、後述の製剤用担体や一般的な食品素材を含有していてもよい。

I F N作用物質治療における副作用軽減とは、 I F N作用物質投与に伴って発症する間質性肺炎、肺線維症、抑うつ、自殺企画、意識障害、痙攣、見当識障害、せん妄、錯乱、幻覚、躁状態、妄想、精神***病症状、失神、痴呆様症状、難聴、興奮、自己免疫現象、糖尿病、肝障害、腎障害、再生不良性貧血、汎血球現象、無顆粒球症、白血球減少、血小板減少、ショック、心筋症、心筋梗塞、心不全、狭心症、心室性頻脈、消化管出血、消化性潰瘍、虚血性大腸炎、脳出血、敗血症、網膜症、発熱、頭痛、頭重感、全身倦怠感、筋肉痛、悪寒、戦慄、関節痛、眠気、不安、不眠、焦燥、めまい、知覚異常、神経過敏、発疹、蓴麻疹、そう痒感、顆粒球減少、リンパ球增多、好酸球増多、単球増多、 A S Tの上昇、 A L Tの上昇、 A L Pの上昇、 oz— G T Pの上昇、 L D Hの上昇、 B U Nの上昇、クレアチュンの上昇、蛋白尿、血尿、浮腫、頻脈、動悸、血圧上昇、顔面潮紅、食欲不振、悪心、嘔吐、消化不良、胸やけ、腹部膨満感、腹痛、下痢、便秘、口内炎、 ***炎、ロ渴、脱毛、紅班、湿疹、脳波異常、麻痺、下腿痙直、四肢の痺れ、緊張亢進、無力症、肺塞栓症、肺水腫、胸膜炎、胸水、血痰、鼻炎、眩嗽、呼吸困難、喀痰増加、網膜出血、網膜微小循環障害、眼痛、注射部位反応、耳鳴り、アルブミン減少、血清総蛋白減少、体重減少、味覚異常、ほてり、胸部痛、背部痛、咽頭痛、不正出血、嗅覚障害、電解質異常、 ***減退、多汗などの副作用を軽減する作用をいう。 I F N作用物質の活性が増強された結果として、 I F N作用物質の投与量の減少が可能となるなどによって、副作用が軽減される場合も含む。

本発明における I F N作用物質治療においては、前述の通り、 R i b作用物質を併用してもよいが、 R i b作用物質投与に伴う溶血性貧血、全身倦怠感、うつ、不眠などの精神症状、めまいなどの神経症状、食欲低下、吐き気などの消化器症状、筋肉痛、湿疹、搔痒感などが軽減される場合も、本発明の副作用軽減に含まれる。

く抗ウィルス剤 · ウィルス性肝炎治療剤 >

本発明において、グリシンは単独で、あるいは他の抗ウィルス剤、肝炎治療剤などと配合して、抗ウィルス剤、又はウィルス性肝炎治療剤として使用することができる。治療対象として適応するウィルス疾患としては、例えば B型肝炎ウイルス（H B V)、 C型肝炎ウィルス（H C V)、 H T L V— 1ウィルスが挙げられる。また、ウィルス性肝炎治療剤として用いる場合、 H B e抗原陽性でかつ D N Aポリメラーゼ陽性の B型活動性肝炎のウィルス血症の改善、 C型慢性肝炎におけるウィルス血症の改善に使用でき、特に C型慢性肝炎患者の治療に有用である。さらに、ウィルス性肝炎に起因する肝硬変にも使用することができる。グリシンと配合する抗ウィルス剤としては、前述の I F N作用物質、 R i b作用物質のほ力、ラミプジンなどの合成薬などが挙げられ、グリシンと配合する肝炎治療剤としては、ウルソデォキシコール酸、小柴胡湯などが挙げられる。

<医薬 ·医薬組成物 >

本発明の医薬には、グリシンと I F N作用物質を含有する医薬組成物、又はグリシンと I F N作用物質が別個に製剤化されたもののいずれもが含まれる。本発明の医薬は、 B型慢性肝炎、 C型慢性肝炎、慢性骨髄性白血病、腎癌、多発性骨髄腫、ヘアリー細胞白血病、亜急性硬化性全脳炎、 ^丁し¥— 1脊髄症、皮膚悪性黒腫、膠芽腫、髄芽腫、星細胞腫などの疾患に対して使用できる。ぐ製剤 >

本発明の医薬及び I F N作用物質の活性増強剤、副作用軽減剤、抗ウィルス剤などの薬剤は、例えば、グリシン又は（及び） I F N作用物質を自体公知の方法に従って、薬理学的に許容される担体と混合して医薬組成物、例えば注射剤、錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、カプセル剤、クリーム剤、坐剤等として、経口又は非経口（例、局所、直腸、静脈投与等）で投与することができる。本発明における医薬及び I F N作用物質の活性増強剤、副作用軽減剤は、薬理学的に許容される担体や添加剤を用いて自体公知の方法により各種製剤として製剤化することができる。製剤としては、例えば、注射剤（筋注用、静注用）、経管液剤などの液剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤などの固形剤などが挙げられる。

用いられる製剤用担体としては、例えば、乳糖、ブドウ糖、 D—マンニトール、澱粉、結晶セルロース、炭酸カルシウム、カオリン、デンプン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチノレセルロース、ポリビニルピロリドン、エタノーノレ、カノレボキシメチルセノレロース、カノレポキシメチノレセノレロースカルシウム塩、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ァセチノレセルロース、白糖、酸化チタン、安息香酸、パラォキシ安息香酸エステル、デヒドロ酢酸ナトリウム、アラビアゴム、トラガント、メチルセルロース、卵黄、界面活性剤、白糖、単シロップ、クェン酸、蒸留水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、マクロゴール、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸ナトリウム、ブドウ糖、塩化ナトリウム、フエノール、チメロサール、パラォキシ安息香酸エステル、亜硫酸水素ナトリウム等があり、製剤の形に応じて、本発明の医薬又は薬剤に含有して使用される。

<投与方法 '投与量〉

本発明の I F N作用物質の活性増強剤、副作用軽減剤、抗ウィルス剤、医薬組成物において、グリシンの投与量は患者の病態、年齢、投与方法などによって異なるが、成人の 1日量として通常 0 . 1〜5 0 g Z B程度、好ましくは 2 . 5〜 4 0 g Z日程度、より好ましくは 3〜 3 0 g /日程度とし、これを必要に応じて 1〜5回に分割して投与する。

I F N作用物質の投与量は、患者の病態、年齢、投与方法などによって異なる力成人 1日量として 1 0 0万〜 2 0 0 0万国際単位程度、あるいは成人 1日量として 2 0〜4 0 0 μ g程度とする。また R i b作用物質の投与量は、成人 1日量として 2 0 0〜 2 0 0 O m g程度とする。本発明において、グリシンと I FN作用物質及ぴ Z又は R i b作用物質は、それぞれ別々の製剤としてもよく、又は、グリシンと I F N作用物質及び又は R i b作用物質を同時に含有する医薬組成物である配合剤としてもよい。

1製剤中のグリシンの配合量は、通常 0. 02〜50 g程度、好ましくは 0. 4〜40 g程度、より好ましくは 0. 6〜30 g程度とする。

1製剤中の I FN作用物質及び Z又は R i b作用物質の配合量は、それぞれ薬剤ごとに設定する。

配合剤中のグリシンと I F N作用物質の比率はグリシン 1 gに対し、 I F N作用物質が 2 X 10⁴〜2 X 10⁸国際単位あるいは I FN作用物質が 0. ：〜 40 0 Ο μ gであり、好ましくは、グリシン 1 gに対し、 I FN作用物質が 2. 5 x 10⁴〜8 X 10⁶国際単位あるいは I FN作用物質が 0.5〜160 z gであり、より好ましくは、グリシン 1 gに対し、 I F N作用物質が 3 x l 0⁴〜7 x l 0⁶ 国際単位あるいは I FN作用物質が 0. 7〜1 30 μ gである。

さらに本発明は、グリシン及び I FN作用物質に加えて、 R i b作用物質を含有する医薬組成物の提供も可能である。本発明の医薬組成物がグリシン、 I FN 作用物質及び R i b作用物質を含む場合、医薬組成物中のグリシン、 I FN作用物質及び R i b作用物質の比率はグリシン 1 gに対し、 I F N作用物質が 2 x 1 0⁴〜2 X 10⁸国際単位あるいは I FN作用物質が 0.4〜4000 μ gであり、 R i b作用物質が 4mg〜20 gであり、好ましくは、グリシン l gに対し、 I FN作用物質が 2.5 x l 0⁴〜8 x l 0⁶国際単位あるいは I FN作用物質が 0. 5〜160 ju gであり、 R i b作用物質が 5〜 800 m gであり、より好ましくは、グリシン l gに対し、 I FN作用物質が 3 X 10⁴〜7 X 10⁶国際単位あるいは I F N作用物質が 0. 7〜130 μ β、 R i b作用物質が 7mg〜700m gである。

グリシンと、 I F N作用物質及び又は R i b作用物質がそれぞれ別々の製剤である場合、グリシンは、疾病の治療のために単独で投与するか、あるいは I F N作用物質及び/又は R i b作用物質との併用を目的として、 I FN作用物質と同時又は I F N作用物質投与の前後のいずれかに投与することができる。併用時の投与方法及び投与量は、併用する薬剤の種類や効果によって適宜決定する。グリシンと I F N作用物質及び Z又は R i b作用物質を、時間差をおいて投与する場合、時間差は投与する有効成分、剤形、投与方法により異なるが、例えば、グリシンを先に投与する場合、グリシンを投与した後 5分〜 1 4日以内、好ましくは 1 0分〜 7日以内に I F N作用物質を投与する方法が挙げられる。 I F N作用物質を先に投与する場合、 I F N作用物質を投与した後、 5分〜 1 2 0時間以內、好ましくは 1 0分〜 8 0時間以内にグリシンを投与する方法が挙げられる。上記本発明で使用する有効成分であるグリシンの投与量（摂取量）について算出する際、本発明で目的とする各種の疾患異常の治療、予防等の目的で使用される薬剤の有効成分として前記の算定範囲が決められているので、これとは別目的で、例えば通常の食生活の必要から、或いは別の疾患の治療目的で、摂取又は投与されるアミノ酸についてはこれを前記算定に含める必要はない。

例えば、通常の食生活から摂取される一日あたりのグリシンの量を前記本発明における有効成分の一日あたりの投与量から控除して算定する必要はない。 <医薬キット '食品組成物 >

また、本発明の I F N作用物質の活性増強剤又は副作用軽減剤を、例えば有効量の I F N製剤や、 R i b製剤、又は I F N製剤と R i b製剤の両方などと組み合わせて、一体包装されるような医薬用キットとすることができる。

本発明の I F N作用物質の活性増強剤及び/又は副作用軽減剤は、食品組成物に含有させることも可能である。上記医薬品組成物を参考として、食品組成物として好ましい栄養成分、添加物等の食品素材を添加して常法により作成すればよい。

<インターフエ口ン誘導遺伝子増強剤 >

さらに、本発明のインターフェロン誘導遺伝子発現増強剤とは、グリシンを有効成分とすることを特徴とするインターフエ口ン誘導遺伝子の発現を増強する増強剤である。本発明におけるインターフェロン誘導遺伝子とは、インターフェロンによって産生が誘導されるものであれば特に限定されないが、例えば P K R遺伝子及び 2 一 5 AS 1などが挙げられる。

本発明の薬剤とその用途への使用に関する説明を記載した記載物を含むパッケ一ジにおいて、記載物としては、用途■効能や投与方法などに関する説明事項を記載したいわゆる能書などが挙げられる。実施例

次に、実施例により本発明をさらに詳細に述べる。なお、以下の実施例は、本発明を説明するものであって、本発明をこれに限定するものではない。

(実施例 1 )

グリシン投与による PBMCにおける I FN誘導遺伝子（PKR、 2- 5 AS l) 発現の増強

4週齢雄 '("生 S p r a g u e— Daw l e yラット 8匹を Ch a r l e s R i v e r J a a n I n c. (Yo k o n ama, J a p a n 力、り購入し、し R F— 1飼料 (O r i e n t a l Ye a s t ; To k y o, J a a n) と水道水を自由摂取させた。またこれらの動物を金網底のケージに 1ケージ当たり 4 匹ずつ入れ飼育した。動物室は温度 23 ± 3°Cに保ち、明期を 7 ： 00〜19 ： 00とした。四塩化炭素と o l i v e o i lを 1対 1で混合した液体を 8匹のラットに週 2回 2m l Zk g (四塩化炭素換算量 lm 1 Zk g)で計 5回皮下投与し慢性肝炎を惹起させた。最終日投与の一時間後、グリシン 2 g/k g又は生理食塩水を 1 Om 1/k gで各々 4匹ずつに経口投与した。 24時間後、エーテル麻酔下において全ラットの下大静脈から 2. 5m l採血し、 PBS 2. 5ml と混和し、 L y mp h o 1 y t e— R a t (コスモバイオ社）にて末梢血単核球 (PBMC) 画分を分離した。細胞数をカウントし、 5 x l 0⁵/m lに調整した後、 lm 1 /w e 1 1ずつ 1 2 w e 1 1プレートにまき 3 7°C、 5 % C O ₂9 5 %A i rのインキュベーターで培養した。 I FN添加群には、終濃度 1 O O O I UZm 1になるよう I FN (Huma n r e c om i n a n t I F — a (C e l l S i g n a l i n g 1 e c h n o 1 o g y社)）を添加した。 3時間後、 I FN添加群及び I FN無添加群の上清を吸引し、 I SOGEN (日本ジーン）を lm l /we 1 1で添加しプロトコールの指示通り mRNAを抽出した。抽出した RNAに dNTPm i x、 O 1 i g o dT、 DTT、逆転写酵素を添加し、遺伝子増幅装置にて cDN Aを合成した。 cDNAに I FN誘導遺伝子（PKR及ぴ 2— 5 AS 1)およびコントロールとして GAP DH遺伝子の各プライマー、 SYBR g r e e n PCR M a s t e r m i (Ap p l i e d B i o s y s t ems) を添カロし、 T a qMa n PCR増幅'検出システム（AB I 7700) にて遺伝子発現量を定量した。結果は G A P D H遺伝子発現量に対する P K R遺伝子あるいは 2— 5 A S 1遺伝子の発現量の比率として表した。図 1、図 2に結果を示す。

四塩化炭素投与により慢性肝炎を誘発したモデルラットの P BMC培養時に I FNを添加することより、 I FN誘導遺伝子である PKR及び 2 _ 5 AS 1の発現誘導が認められた。また、この時ラットにグリシンをあらかじめ 2 gZk g経口投与しておくことにより、卩81^〇培養時の？1：1及び2— 5 31の発現は有意に増強された。また、 I FN非添加条件においてグリシン投与群では非投与群に比べ PKR及び 2— 5 AS 1の発現は統計学的に有意な高値を示した。

(実施例 2)

グリシン投与による肝臓の I FN誘導遺伝子（PKR、 2-5 AS 1) 発現の増強

4週齢雄性 S p r a g u e— Daw l e yラットを Ch a r l e s R i v e r J a a n I n c. (Yo k o h ama, J a a n) 力ら購入し、 C R F ― 1飼料 (O r i e n t a l Ye a s t ; To ky o， J a p a n) と水道水を自由摂取させた。またこれらの動物を金網底のケージに 1ケージ当たり 4匹ずつ入れ飼育した。動物室は温度 23±3°Cに保ち、明期を 7 ： 00〜19 ： 00 とした。四塩化炭素と o l i v e o i lを 1対 1で混合した液体をラットに週 2回 2m l k g (四塩化炭素換算量 lm l Zk g) で計 5回皮下投与し慢性肝炎を惹起させた。最終投与の翌日、各 2匹のラットにグリシン 2 g/k g又は生理食塩水を 1 Om l/k gで経口投与し、 30分後 I FNを 2 x 10⁶U/k g 尾静脈より静脈内投与した。 I F N投与 3時間後エーテル麻酔下にて肝臓を採取し、液体窒素に浸漬した。肝臓の一部に I SOGEN (曰本ジーン）を lm l添加しプロトコールの指示通り mRNAを抽出した。抽出した RNAに dNTPm i x、 O 1 i g o dT、 DTT、逆転写酵素を添加し、遺伝子増幅装置にて cD N Aを合成した。 c DNAに I FN誘導遺伝子（ P KR及び 2— 5 A S 1 ) およぴコントロールとして GAPDH遺伝子の各プライマー、 SYBR g r e e n PCR Ma s t e r m i x (Ap p l i e d B i o s y s t ems を添加し、 T a qMa n PCR増幅.検出システム（AB 1 7700) にて遺伝子発現量を定量した。結果は GAP DH遺伝子発現量に対する PKR遺伝子あるいは 2— 5 A S 1遺伝子の発現量の比率として表した。図 3、図 4に結果を示した。四塩化炭素投与により慢性肝炎を誘発したモデルラットにおいて、 I FNを静脈内投与した際の肝臓における PKR及ぴ 2— 5 AS 1の発現は、ラットにあらかじめ 2 g/k gのダリシンを経口投与しておくことにより、有意に増強された。産業上の利用可能性

本発明の I F N作用物質の活性増強剤又は I F N作用物質治療における副作用軽減剤を I FN作用物質と併用すると、 I FN作用物質による副作用を低減し、また、著効率を顕著に向上させるこどができる。そのため、 I FN作用物質の投与量を減量し、あるいは投与期間を短縮することも可能であり、副作用などのために適応できなかった患者にも適応を拡大することができる。また、副作用の軽減によって、逆に投与量を増量あるいは投与期間を延長するような投与形態の選択も可能となるため、治療方針の幅を広げることも可能である。

また、 I FN作用物質の R i b作用物質による併用治療の場合にも、本発明の I FN作用物質の活性増強剤又は副作用軽減剤を同時に使用することにより、 I FN作用物質ばかりでなく R i b作用物質の副作用をも軽減することができる。そのため、 R i b作用物質の副作用のために治療を断念又は中断せざるを得なかつた患者にも適応を広げることができる。

さらにグリシンは、単独投与によっても I FN様作用を発現することから、単に I FN作用物質の活性を増強又は副作用を軽減するに止まらず、 I FN作用物質及び/又は R i b作用物質の投与量自体を軽減し、場合によっては I FN作用物質併用治療における R i b作用物質をグリシンと置き換えることや、グリシン単独を有効成分とするウィルス性疾患治療剤とすることも可能である。

I FN作用物質や R i b作用物質がウィルス性肝炎に代表されるウィルス性疾患の重要な治療剤でありながら、副作用や著効率の点で必ずしも満足のいくものではなかった現状において、本発明の I FN作用物質治療成績をさらに向上させる上で極めて有用である。

本発明の I FN誘導遺伝子発現増強剤は、それ自体上記と同様に医薬としての使用のほか、生理学■生物化学分野における実験試薬として利用可能である。本出願は、 Θ本で出願された特願 2004-275997号を基礎としており、それらの内容は本明細書に全て包含されるものである。

Claims

請求の範囲

I . 有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質の活性増強剤。

2 . インターフエ.ロン作用物質がインターフェロンである請求項 1に記載の増強剤。

3 . 請求項 1又は 2に記載のィンターフェ口ン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする抗ウィルス剤。

4 . 請求項 1又は 2に記載のィンターフェ口ン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とするウィルス性肝炎治療剤。

5 . 請求項 1又は 2に記載のィンターフェ口ン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とするウィルス性肝炎に起因する肝硬変治療剤。

6 . 請求項 1又は 2に記載のィンターフェ口ン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする抗腫瘍剤。

7 . 請求項 1又は 2に記載のインターフェロン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする自己免疫疾患治療剤。

8 . 請求項 1又は 2に記載のィンターフェ口ン作用物質の活性増強剤を含有することを特徴とする食品組成物。

9 . 有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質治療における副作用軽減剤。

1 0 . インターフェロン作用物質治療がウィルス性肝炎に対するインターフエ口ン作用物質治療である請求項 9に記載の副作用軽減剤。

I I . ウィルス性肝炎が C型肝炎である請求項 1 0に記載の副作用軽減剤。

1 2 . インターフェロン作用物質治療がインターフェロン作用物質及ぴリバピリン作用物質の併用を含む治療である請求項 9に記載の副作用軽減剤。

1 3 . インターフエ口ン作用物質及ぴ又はリバビリン作用物質の副作用を軽減することを特徴とする請求項 1 2に記載の副作用軽減剤。

14. 請求項 9〜 13のいずれか 1項に記載の副作用軽減剤を含有することを特徴とする食品組成物。

15. 有効成分としてグリシンを含むことを特徴とする抗ウィルス剤。

16. 有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするウィルス性肝炎治療剤。

17. グリシンとインターフェロン作用物質を組み合わせてなる医薬。

18. 抗ウィルス用である請求項 1 7に記載の医薬。

1 9. ウィルス性肝炎治療用である請求項 1 7に記載の医薬。

20. ウィルス性肝炎が C型慢性肝炎である請求項 1 9に記載の医薬。

21. fl重瘍治療用である請求項 17に記載の医薬。

22. 自己免疫疾患治療用である請求項 1 7に記載の医薬。

23. 有効成分としてグリシン及びインターフェロン作用物質を含むことを特徴とする医薬組成物である、請求項 1 7に記載の医薬。

24. 有効成分としてさらにリバピリン作用物質を含むことを特徴とする医薬糸且成物である、請求項 23に記載の医薬。

25..有効成分としてのグリシン及びインターフェロン作用物質をそれぞれ単味剤として組み合わせたことを特徴とする医薬用キット。

26. 有効成分としてのグリシン、インターフェロン作用物質及ぴリバビリン作用物質をそれぞれ単味剤として組み合わせたことを特徴とする医薬用キット。

27. グリシンを有効成分とするインターフェロン誘導遺伝子発現増強剤。

28. インターフェロン誘導遺伝子が、 PKR遺伝子又は 2— 5 AS 1遺伝子である請求項 27に記載の増強剤。 .

29. グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン作用物質の活性を増強する方法。

30. インターフェロン作用物質がインターフェロンである請求項 29に記載の方法。

31. グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン作用物質治療における副作用を軽減する方法。

3 2 . グリシンの有効量を投与することを含む、インターフェロン誘導遺伝子の発現を増強する方法。

3 3 . インターフェロン作用物質の活性増強剤を製造するための、グリシンの使用。

3 4 . インターフェロン作用物質がインターフェロンである、請求項 3 3に記載の使用。

3 5 . インターフェロン作用物質治療における副作用軽減剤を製造するための、グリシンの使用。

3 6 . インターフェロン誘導遺伝子発現増強剤を製造するための、グリシンの使用。

3 7 . 有効成分としてグリシンを含むことを特徴とするインターフェロン作用物質の活性増強剤、および該剤のィンターフェ口ン作用物質の活性増強への使用に関する説明を記載した記載物を含む商業的パッケージ。