UA120423C2 - Комбінація інгібітора mek та інгібітора erk для застосування в лікуванні гіперпроліферативних захворювань - Google Patents

Комбінація інгібітора mek та інгібітора erk для застосування в лікуванні гіперпроліферативних захворювань Download PDF

Info

Publication number
UA120423C2
UA120423C2 UAA201603616A UAA201603616A UA120423C2 UA 120423 C2 UA120423 C2 UA 120423C2 UA A201603616 A UAA201603616 A UA A201603616A UA A201603616 A UAA201603616 A UA A201603616A UA 120423 C2 UA120423 C2 UA 120423C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
cancer
shi
shk
still
che
Prior art date
Application number
UAA201603616A
Other languages
English (en)
Inventor
Марсія Белвін
Марсия БЕЛВИН
Джон Моффет
Джон Моффэт
Марк Мьорчант
Марк Мёрчант
Original Assignee
Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг filed Critical Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг
Publication of UA120423C2 publication Critical patent/UA120423C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/397—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having four-membered rings, e.g. azetidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Згідно з винаходом запропоновані комбінації, що містять інгібітор МЕK (такий як GDC-0973 або GDC-0623) або його фармацевтично прийнятну сіль та інгібітор ERK (такий як GDC-0994). Дані комбінації особливо корисні для лікування гіперпроліферативних розладів, таких як рак.

Description

Згідно з винаходом запропоновані комбінації, що містять інгібітор МЕК (такий як 0060-0973 або а,ОС-0623) або його фармацевтично прийнятну сіль та інгібітор ЕВК (такий як 00-0994). Дані комбінації особливо корисні для лікування гіперпроліферативних розладів, таких як рак.
Область винаходу
Винахід, загалом, належить до фармацевтичних комбінацій інгібіторів МЕК (МЕКІ) та інгібітора ЕКК (ЕККІ) з активністю проти гіперпроліферативних розладів, таких як рак. Винахід також належить до способів застосування даних сполук для лікування ссавців.
Попередній рівень техніки
Шлях КАЗ/КАР/МЕК/ЕКК активується при більше ніж 30 95 людських ракових захворювань, найчастіше за допомогою мутації у онкогені К-газ5 і також за допомогою мутацій у ВКАРК. Отже, цей шлях привернув значний інтерес як терапевтична мішень для лікування ракового захворювання |Р.). Вобеп5 апа С.У. Оег, Опсодепе 2007 26:3291-310). Спроби безпосередньої спрямованої дії на КАЗ до теперішнього часу не були успішними, але недавні клінічні випробування з інгібіторами ВЕАРЕ і мітогенактивованої кінази, регульованої позаклітинним сигналом (МЕК) свідчили про те, що спрямована дія на дані ефектори КА5, що діють нижче, має потенціал у лікуванні ракових захворювань, що мають онкогенні мутації в даному шляху
ІНапепу еї аї., Ст. Оріп. Опсої. 2010 22:178-83). Незважаючи на те, що клінічні відповіді і протипухлинна активність можуть бути вражаючими, зокрема для інгібіторів ВКАЕ при меланомі з мутацією ВЕАБЕ, у більшості пацієнтів, кінець кінцем, розвивалася клінічна резистентність і прогресуюче захворювання |Ріапепу, вище; О.В. БоОЇй апа М. Козеп, М. ЕпоіІ. У. Мей. 2011 364:772-4)|. У доклінічних дослідженнях були ідентифіковані численні механізми набутої стійкості до інгібіторів ВЕАЕ, що включають перемикання між ізоформами КАБ |У. МПапеима еї аї., Сапсег
Сеї! 2010 18:683-95), підвищуючу регуляцію сигналізації ЕТК або МКАЗ |К. Ма?лагіап еї аї., Майшге 2010 468:973-7| і реактивацію сигналізації мітогенактивованої кінази (МАРК) через активацію
СОТ |С.М. Хдопаппеззеп еї аї., Маїшге 2010 468:968-72| або активуючу мутацію МЕК кінази (М.
МУадіє єї аї., У. Сііп. Опсої. 2011 29:3085-96|Ї. Аналогічно, у доклінічних дослідженнях були ідентифіковані відмінні механізми, за допомогою яких клітина набуває резистентності до інгібування МЕК, що включають ампліфікацію мутантного ВКАБЕ (Е.В. Согсоггап еї аї., 5сі. Зідпаї 2011 З:га84), що підвищує регуляцію З5ТАТЗ |В. БОаї еї аЇ.,, Сапсег Ке5. 2011 71:3658-68) або мутації в алостеричній кишені МЕК, які можуть безпосередньо пов'язувати інгібітори з активністю МЕК кінази |Н. Умапао еї аї., Сапсег Ке5. 2011 71:5535-45; С.М. Етегу евї а!., Ргос. Маї.
Асад. 5сі. ОБА 2009 106:20411-6). Мутації МЕК були описані у зразках пухлин від пацієнтів, яких
Зо лікували інгібіторами МЕК (Етега, вище) або ВКАЕ (У/адіє, вище), демонструючи клінічну релевантність. У той час, як порівняно з інгібіторами КАБ і МЕК були описані селективні інгібітори ЕКК 1/2 (кіназа 1/2, регульована позаклітинним сигналом), і вони в даний час знаходяться у клінічній розробці, ідентифікація і розробка низькомолекулярних інгібіторів проти
ЕРК 1/2, які діють безпосередньо нижче МЕК, запізнилася.
Короткий виклад суті винаходу
Винахід, загалом, належить до синергічних комбінацій інгібіторів МЕК та інгібіторів ЕКК з протираковою активністю, які, при введенні у комбінації, інгібують ріст ракових клітин. Комбінації і способи за винаходом можуть бути корисними у лікуванні гіперпроліферативних розладів, таких як рак. Дані композиції можуть інгібувати ріст пухлини у ссавців і можуть бути корисними для лікування пацієнтів-людей з раковим захворюванням.
В одному аспекті винахід включає спосіб лікування гіперпроліферативного розладу, що включає введення ссавцю терапевтичної комбінації у вигляді об'єднаної композиції або введення по черзі, де терапевтична комбінація містить терапевтично ефективну кількість сполуки МЕКі і терапевтично ефективну кількість ЕККі. В одному аспекті даного винаходу інгібітор ЕКК вибраний з (5)-1-(1-(4-хлор-3-фторфеніл)-2-гідроксиетил)-4-(2-(1-метил-1 Н- піразол-5-іл)ламіно)піримідин-4-іл)упіридин-2(1Н)-ону (Іа, 00-0994), 4-(3- (етилдиметилсиліл)метил)-(1,2,4Ігриазолої|4,3-а|піридин-7-іл)-М-(1-метил-1 Н-піразол-5- іл)упіримідин-2-аміну (Іб), (5)-4-(3-(2-(4-хлорфеніл)-2-метоксиетил)-І(1,2,4)гриазоло|4,3-
Б|Іпіридазин-7-іл)-М-(1-метил-1 Н-піразол-5-ілупіримідин-2-аміну (Ів) або (5)-М-(1-метил-1 Н- піразол-5-іл)-4-(3-(2-метилбутил)-П1,2,З|Ігриазоло|1,5-а|піридин-б-іл)піримідин-2-аміну (Іг), і інгібітор МЕК є кобіметінібом (І, 0500-0973) або 5-(2-фтор-4-йодфеніл)аміно)-М-(2- гідроксиетокси)імідазо(1,5-а|піридин-6-карбоксамід (Па, 5ОС-0623). В іншому аспекті винаходу інгібітор МЕК є (І), і інгібітор ЕКК є СОС-0994 (Іа).
І Е
« ІФ:
І МН о
У - Е МН
М снеОон Е (Іа) ФП)
В іншому аспекті винаходу запропонований спосіб лікування гіперпроліферативного захворювання або розладу, модульованого кіназами КАБ/КАБ/МЕК/ЕКК, що включає введення ссавцю, який цього потребує, ефективних кількостей сполуки Формули Іа-Іг і сполуки Формули ЇЇ або Па. Сполуки Формули Іа-Іг і І або Па можуть бути спільно приготовані для введення у комбінації у вигляді фармацевтичної композиції, або вони можуть бути введені окремо по черзі (послідовно) у вигляді терапевтичної комбінації.
В іншому аспекті винаходу запропоновані способи лікування гіперпроліферативного розладу, що включають введення ссавцю, який цього потребує, ефективних кількостей сполуки
Формули Іа-Іг, сполуки Формули ІІ (5300-0973) або Па та іншого хіміотерапевтичного агента.
Інший аспект винаходу включає вироби або набори, які містять сполуку Формули |а-їг і сполуку формули ЇЇ (50С-0973) або Іа, контейнер і, можливо, листок-вкладиш в упаковці або етикетку, на яких вказано лікування.
Інший аспект винаходу включає спосіб визначення сполук, які підлягають застосуванню у комбінації для лікування раку, що включає: а) введення терапевтичної комбінації МЕКІ і ЕККІ до лінії пухлинних клітин з мутацією Кгах іп міїго і б) вимірювання синергічного або несинергічного ефекту.
Короткий опис графічних матеріалів
На Фіг. 1 показана проліферація клітин Аб549 недрібноклітинного раку легені (М5СІ С) при дозуванні 50С-0994, Іб, Ів або Іг і 5600-0973 індивідуально або при дозуванні ЗОС-0994, Іб, Ів або Іг у поєднанні з 5ОС-0973 з використанням протоколу у Прикладі 6. Клітини інкубували з зазначеною максимальною концентрацією лікарського засобу з використанням серії З-кратного розведення. Життєздатність клітин визначали з використанням аналізу СепТйег-с(ю Ф (Сто).
На Фіг. 2 показана проліферація клітин і ступінь апоптозу у клітин Аб549 недрібноклітинного раку легені (МЗС С) при дозуванні дозами 5ОС-0994, Іб, Ів або Іг і 50С-0973 індивідуально або при дозуванні дозами 50ОС-0994, |б, Ів або Іг у поєднанні з 50С-0973. Проліферацію клітин визначали з використанням аналізу Вга4О0. Апоптоз вимірювали з використанням аналізу писЕГІЗА.
На Фіг. З показані фармакодинамічні наслідки лікування комбінацією інгібіторів МЕК і ЕРК,
Зо одних або у комбінації. Фосфорилювання КЗК допомогою ЕКК інгібується. Прогресування клітинного циклу значущо знижується, що підтверджується зменшенням цикліну 01 і збільшенням р27. Посилена загибель клітин (апоптоз) підтверджується підвищеними рівнями розщепленого РАКР.
Фіг. 4 Поверхня надлишку за Бліссом, що описує інгібування синтезу ДНК в асинхронних експоненціально зростаючих клітинах А549, визначене за допомогою обробки клітин у 384- лункових планшетах зазначеними концентраціями кожного лікарського засобу протягом 48 год.
Для останніх 2 год. обробки клітини обробляли 1 мкМ 5-етиніл-2'--дезоксиуридину (ЕІ) для мічення знову синтезованої ДНК. Клітини потім фіксували і пермеабілізували додаванням 2 95 параформальдегіду і 0,02 95 Тийоп Х-100 у ростове середовище на тридцять хвилин, з подальшим флуоресцентним міченням включеного ЕДО за допомогою АїІеха-Рісог 635 азиду згідно з інструкціями виробників (І йе Тесппоіодієєх, Ецдепе, ОК) або контрастного забарвлювання ДНК з використанням Ноесйпв5і 33342.
Зображення флуоресцентної мікроскопії отримували багатопараметричною системою візуалізації Регкіп ЕІтег Орега. Частку клітин, мічених Ед, по відношенню до загального числа клітин визначали з використанням програми аналізу зображень Асареїіа.
Для визначення можливих взаємодій між обробками лікарським засобом, спостережувану відповідь для кожної пари концентрацій порівнювали з очікуваною відповіддю для двох невзаємодіючих агентів на основі адитивності за Бліссом (Разо-Ра-Еь-Ра"'бь, де Ра і Еь є частковими ефектами агентів а і Б). Різниця між спостережуваним і прогнозованим частковим ефектом називається надлишком за Бліссом.
Фіг. 5. Обробка клітин МЗСІ С комбінаціями інгібіторів МЕКі (5300-0973) і ЕРКі (50С-0994). 19/29 протестованих ліній клітин демонструють певний комбінований ефект при використанні
ЕКК плюс МЕК. Усі лінії, які не є мутантами О61Н Кга5, демонструють певну чутливість до комбінації. Не спостерігали комбінованих ефектів у двох лініях у панелі з мутацією Вгаї.
На Фіг. 6 показаний графік змінення середнього об'єму пухлини з часом у самок мишей
Тасопіс пи/пи (голі) з ксенотрансплантатами пухлини - недрібноклітинного раку легені (МЗС С)
МСІ-Н2122, яким щодобово дозували: носій МСТ (0,5 95 метилцелюлоза/0,2 95 Тмеєп 80), 60 мг/кг Формули Іа (50С-0994) і 5 мг/кг Формули ІІ (5350-0973) (Фіг. ба) або щодобово дозували 60 мг/кг Формули Іа (50С-0994) і 15 мг/кг кожні три доби (030, тобто, переривчасте дозування)
Формули І! (5000-0973) (Фіг. 6б). Дозування мишам здійснювали пероральним зондовим харчуванням. Фармакодинамічні маркери підтверджують ослаблений ріст клітин (Фіг. бв і бг), що підтверджується зменшенням рівнів цикліну О1 їі Кіб7 і підвищеним апоптозом (Фіг. бд), який доводиться збільшенням розщепленої каспази З у ксенорентгенографічному аналізі МЗС С
Нг122 КВА5Б.
На Фіг. 7 показаний графік змінення середнього об'єму пухлини з часом у самок мишей
Тасопіс пи/пи (голі) з ксенотрансплантатами пухлини - недрібноклітинного раку легені (МЗС С)
МСІ-Н2122, яким щодобово дозували: носій МСТ (0,5 965 метилцелюлоза/0,2 95 Гмуєеп 80), 100 мг/кг 50С-0994 і 5 мг/кг 50С-0973 (Фіг. 7а), щодобово дозували 100 мг/кг 50С-0994 і 4 мг/кг 2000-0973 (Фіг. 76) або щодобово дозували 100 мг/кг з0С-0994 і 15 мг/кг кожні три доби (2030, тобто, переривчасте дозування) С50С-0973 (Фіг. 7в). Дозування мишам здійснювали пероральним зондовим харчуванням.
На Фіг. 8 показаний графік змінення середнього об'єму пухлини з часом у самок мишей
Тасопіс пи/пи (голі) з ксенотрансплантатами пухлини - недрібноклітинного раку легені (МЗС С)
А549, яким щодобово дозували: носій МСТ (0,5 96 метилцелюлоза/0,2 95 Тм/ееп 80), 60 мг/кг
Формули 50С-0994 і 5 мг/кг 50С-0973 (Фіг. ва) або щодоби дозували 60 мг/кг Формули СОС- 0994 і 15 мг/кг кожні три доби (030, тобто, переривчасте дозування) 50ОС-0973 (фіг. 86).
Дозування мишам здійснювали пероральним зондовим харчуванням.
На Фіг. 9 показано узагальнення ефективності 5З0С-0994 ії (5500-0973 у дослідженні ефективності комбінації варіюючих доз у лінії клітин колоректального раку, вираженої як відсоток інгібування росту пухлини. Ділянки з сірим фоном показують найкращу ефективність для схеми, яку переносять. Ділянки з чорним фоном показують непереносиму комбінацію.
Зо Дозування здійснювали щодобовим (00) пероральним зондовим харчуванням (РО).
На Фіг. 10 описана надійна протипухлинна активність кобіметінібу і 50С-0994 у моделях
СЕМ з мутацією ККА5 аденокарциноми протоки підшлункової залози (РОАС) МУ.
Моделі СЕМ з мутацією ККА5, що мають пухлину, обробляли носієм, ЗОС-0973 (5 мг/кг, РО, 00), а0б-0994 (60 мг/кг, РО, ОО) або комбінацією 50С-0973 і 50С-0994. На Фіг. 10а показані каскадні діаграми, що описують відсоткове змінення об'єму пухлини від початкового рівня, основане на ультразвуковій візуалізації (доба 0, доба 7) у моделі РОАС після 7-добової обробки носієм (чорний, п дорівнює 8), кобіметінібом (зелений, п дорівнює 8), 5000-0994 (синій, п дорівнює 8) і комбінацією (червоний, п дорівнює 9). Фіг. 106 - графік Каплана-Майєра загальної виживаності з моделі РОАС від когорт обробки носієм (чорний, п дорівнює 13), гемцитабіном (помаранчевий, п дорівнює 10), ІІб (зелений, п дорівнює 9), 50ОС-0994 (синій, п дорівнює 8) і комбінацією 50С-0994 ії 5000-0973 (червоний, п дорівнює 13). Ефект обробки комбінацією є значущим відносно носія, "р менше 0,0001, і гемцитабіну, "р дорівнює 0,0159, логранговий критерій.
Фіг. 11а. Життєздатність ліній клітин, що походять від ККА5БУ!20, р1іб/19й. РОХ-СРЕЕ, у присутності 50С-0973, 1000-0994 і комбінацій 5000-0994 і 5090-0973, зумовлена посиленим придушенням шляху МАРК.
Фіг. 116. РО (фармакодинамічні) маркери у лініях клітин, що походять від ККА5У2О, ріб/1огйРОХ-СРЕЕ, у присутності ЗЮОС-0973, 0С-0994 і комбінацій 50С-0994 і 50С-0973.
Фіг. 12. Активність росту клітин під час розвитку, яка спостерігається при використанні комбінацій 30С-0994 і численних інгібіторів МЕК.
Фіг. 13. Оцінка синергічного інгібування синтезу ДНК. Експоненціально зростаючі клітини
НСТІ116 (А, Б) ї А549 (В, Г) обробляли зазначеними концентраціями 50С-0994 і 3500-0973 протягом 47 годин перед додаванням 5-етиніл-2'і-дезоксиуридину (ЕаІО) протягом 60 хв, з подальшою фіксацією параформальдегідом і міченням ДНК, що містить Ед, АїІеха Ріног 647 азидом (Пе Тесппоїодієз, Мадізоп УМІ). Загальну кількість ядер, мічених Ноеспві 33542, і частку ядер, мічених ЕдО, визначали автоматизованою флуоресцентною мікроскопією та аналізом зображень з використанням приладу Регкіп ЕІтег Орега і програми АсареїПа.
А, В, Графіки-ізоболограми. Лінії з'єднують точки рівного інгібування синтезу ДНК, що досягається за допомогою різних комбінацій двох лікарських засобів. Товста пунктирна бо діагональна лінія показує очікувану ізоболу 50 95-вого інгібування, якщо комбінації сполук демонстрували просту адитивність згідно моделі (Гоемжме М.Сеагу, Опаегеїапаїпуд зупегду. Ат. «у.
Рпузіої. Епдостіпої. Меїаб. 2012. доі:10.1152/а)репдо.00308.20121.
Б, Г, Матриця доз аналізу синергії, що демонструє: 1 - спостережуване відсоткове змінення частки клітин, позитивних щодо ЕдИ, відносно контролів, оброблених ОМ5О, 2 - прогнозований ефект комбінацій лікарського засобу на основі моделі адитивності І оєуге, застосовуваної до кривих доза-відповідь для одного агента, З - відмінність між спостережуваними даними і прогнозованими адитивними ефектами, числа, менші за нуль, показували більше інгібування синтезу ДНК, ніж очікувалося для адитивних лікарських засобів.
Дані аналізували з використанням модуля Сотрошипа Зупегду Ехіепзіоп програми Сепедаїа зогеепег (Сепедаїа Ас, Базель).
Докладний опис винаходу
Визначення
Мається на увазі, що слова "містити", "що містить", "включати", "що включає" і "включає", при використанні в даному описі винаходу і формулі винаходу, позначають присутність викладених характеристик, цілих чисел, компонентів або стадій, але вони не виключають присутності або додавання однієї або більше ніж однієї характеристики, цілого числа, компонента, стадії або їх груп.
Терміни "лікувати" і "лікування" належать до терапевтичного лікування, де метою є попередження або уповільнення (ослаблення) небажаної фізіологічної зміни або розладу, такого як ріст, розвиток або поширення ракового захворювання. Для мети даного винаходу корисні або бажані клінічні результати включають полегшення симптомів, зменшення ступеня захворювання, стабілізований (тобто такий, що не погіршується) стан захворювання, затримку або уповільнення прогресування захворювання, зменшення інтенсивності або тимчасове полегшення хворобливого стану і ремісію (або часткову, або повну), або яка спостерігається, або не спостерігається, але не обмежуються ними. "Лікування" також може означати продовження виживання у порівнянні з очікуваним виживанням при відсутності отримання лікування. Ті, що потребують лікування, включають тих, які вже мають стан або розлад, наприклад, пацієнта з раковим захворюванням.
Термін "інгібувати" означає зменшувати або знижувати активність, функцію і/або кількість
Зо порівняно з контролем.
Фраза "терапевтично ефективна кількість" означає кількість, яка (і) лікує конкретне захворювання, стан або розлад, (ії) послаблює, зменшує інтенсивність або усуває один або більше ніж один симптом конкретного захворювання, стану або розладу, або (ії) попереджає або затримує початок одного або більше ніж одного симптому конкретного захворювання, стану або розладу, описаних в даному документі. У разі ракового захворювання терапевтично ефективна кількість може зменшувати число ракових клітин; зменшувати розмір пухлини; інгібувати (наприклад, деякою мірою сповільнювати або краще зупиняти) інфільтрацію ракових клітин у периферичні органи; інгібувати (наприклад, деякою мірою сповільнювати або краще зупиняти) розвиток метастазів пухлини; деякою мірою інгібувати ріст пухлини; і/або деякою міроюі полегшувати один або більше ніж один симптом, асоційований з раковим захворюванням. Залежно від ступеня, в якому комбінація може попереджувати ріст і/або убивати існуючі ракові клітини, вона може бути цитостатичною і/або цитотоксичною. Для терапії раку ефективність можна вимірювати, наприклад, оцінюванням часу до прогресування захворювання (ТТР) і/або визначенням частоти відповіді (КК).
Крім надання покращеного лікування для даного гіперпроліферативного розладу, введення певних комбінацій за винаходом може покращувати якість життя для пацієнта порівняно з якістю життя, яку має той самий пацієнт, що отримує інше лікування. Наприклад, введення комбінації пацієнту може забезпечувати покращену якість життя порівняно з якістю життя, яку мав би той самий пацієнт, якби він отримував лише один з індивідуальних агентів в якості терапії.
Наприклад, комбінована терапія комбінацією, описаною у даному документі, може зменшувати необхідну дозу терапевтичних агентів. Комбінована терапія також може зменшувати або усувати потребу в застосуванні хіміотерапевтичних агентів і побічні ефекти, асоційовані з хіміотерапевтичними агентами у високій дозі (наприклад, нудота, блювання, втрата волосся, висип, знижений апетит, втрата маси і т.д.). Комбінація також може викликати зменшення пухлинної маси і асоційованих небажаних явищ, таких як біль, дисфункція органу, втрата маси і т.д. Відповідно, в одному аспекті винаходу запропонована комбінація для терапевтичного застосування для поліпшення якості життя пацієнта, якого лікують від гіперпроліферативного розладу агентом, описаним у даному документі.
Терміни "рак" і "раковий" відносяться до або описують фізіологічний стан у ссавців, який бо типово характеризується нерегульованим ростом клітин. "Пухлина" містить одну або більше ніж одну ракову клітину. Приклади ракового захворювання включають карциному, лімфому, бластому, саркому і лейкозні або лімфоїдні злоякісні захворювання, але не обмежуються ними.
Конкретніші приклади таких ракових захворювань включають плоскоклітинний рак (наприклад, епітеліальний плоскоклітинний рак), рак легені, включаючи дрібноклітинний рак легені, недрібноклітинний рак легені ("М5СІ С"), аденокарциному легені і плоскоклітинну карциному легені, рак очеревини, печінково-клітинний рак, рак шлунково-кишкового тракту або шлунка, включаючи шлунково-кишковий рак, рак підшлункової залози, гліобластому, рак шийки матки, рак яєчника, рак печінки, рак сечового міхура, гепатому, рак молочної залози, рак товстої кишки, рак прямої кишки, колоректальний рак, карциному ендометрію або матки, карциному слинної залози, рак нирки або нирковий рак, рак передміхурової залози, рак вульви, рак щитовидної залози, карциному печінки, карциному ануса, саркому пеніса, а також рак голови і шиї. Рак шлунково-кишкового тракту в тому вигляді, в якому цей термін використовується в даному документі, включає рак шлунка, який може розвиватися в будь-якій частині шлунка і може поширюватися по всьому шлунку і в інші органи, зокрема, у стравохід, легені, лімфатичні вузли і в печінку.
Термін "ссавець" включає людей, мишей, щурів, морських свинок, мавп, собак, кішок, коней, корів, свиней, овець і свійську птицю, але не обмежується ними. Термін "пацієнт" відноситься до ссавця і, в одному втіленні, пацієнт є людиною чоловічої або людиною жіночої статі.
Термін "синергічний" у тому вигляді, в якому він використовується в даному документі, відноситься до терапевтичної комбінації, яка є ефективнішою, ніж адитивні ефекти двох або більше ніж двох окремих агентів. Визначення синергічної взаємодії може бути основане на результатах, отриманих з аналізів, відомих у даній області. Результати цих аналізів можна аналізувати з використанням комбінованого способу Чоу (Спо) і Талалея (Таїаїау) і аналізу доза-ефект програмою СаїісибЗуп для того, щоб отримати показник адитивності |Спои апа
Таїаіау, Адм. Еплуте Веаші. 1984 22:27-55|. Комбінації, запропоновані в даному документі, можна аналізувати з використанням стандартної програми для кількісного вимірювання синергії, адитивності і антагонізму серед протиракових агентів. Типовою програмою є програма, описана
ІСпои і Таіаіау у "Мем/ Амепиез іп ОемеІортепіа! Сапсег СпетоїПегару, » Асадетіс Ргез5, 1987, розділ 2). Значення показника адитивності менші ніж 0,8 вказують на синергію, значення більші ніж 1,2 вказують на антагонізм, і значення від 0,8 до 1,2 вказують на адитивні ефекти.
Комбінована терапія може забезпечувати "синергію" і виявлятися "синергічною", тобто ефект, якого досягають при спільному застосуванні активних інгредієнтів, більше, ніж сума ефектів, які виникають через роздільне застосування сполук. Синергічний ефект може досягатися, коли активні інгредієнти: (1) спільно готують у вигляді препарату і вводять або доставляють одночасно в комбінованій стандартній лікарській формі; (2) доставляють по черзі або паралельно у вигляді окремих композицій; або (3) за допомогою якоїсь іншої схеми. При доставці у терапії по черзі синергічний ефект може досягатися, коли сполуки вводяться або доставляються послідовно, наприклад, за допомогою різних ін'єкцій в окремих шприцях.
Загалом, під час терапії по черзі, ефективне дозування кожного активного інгредієнта вводиться послідовно, тобто серійно, тоді як під час комбінованої терапії ефективні дозування двох або більше ніж двох активних інгредієнтів вводяться спільно. Комбіновані ефекти оцінювали як з використанням моделі незалежності Блісса, так і моделі найефективнішого одиночного агента (НЗА) ІГепаг єї аІ. 2007, МоІесшаг бЗузієт»5 Віоіоду 3:80). Бали за Бліссом кількісно оцінюють ступінь потенціювання від одиночних агентів, і позитивний бал за Бліссом (більший ніж 0) свідчить про більше ніж просту адитивність. Сукупний позитивний бал за Бліссом, більший ніж 250, вважається сильною синергією, яку спостерігають у межах протестованих концентраційних інтервалів. Бал Н5БА (більший ніж 0) свідчить про ефект комбінації, більший, ніж максимальні відповіді на одиночні агенти у відповідних концентраціях.
Способи вимірювання ТО (інгібування росту пухлини) відомі в даній області. В одному типовому способі вимірюються середні об'єми пухлин і порівнюються у пацієнта до і після лікування. Об'єми пухлин можна вимірювати у двох вимірах (довжина і ширина) з використанням будь-якого способу, відомого в даній області, наприклад, циркулів ОйгасСаї ІМ (компанія Егей У. Роу/ег) або за допомогою РЕТ (позитронно-емісійна томографія), або якимось іншим способом. Можна використовувати наступну формулу: об'єм пухлини (мм) - (довжина х ширина?) х 0,5. Вимірювання об'ємів пухлини протягом багатьох періодів часу можна робити з використанням підходу за змішаним моделюванням лінійних змішаних ефектів (І МЕ) ГРіпнеїго еї аІ. 20091. У даному підході можуть розглядатися і повторні вимірювання (і багато пацієнтів). Для апроксимації нелінійного профілю до ходу змінення об'єму пухлини у часі при кожному рівні дози можна використовувати поліноміальні криві кубічної регресії. Ці нелінійні профілі можна бо потім пов'язувати з дозою в межах змішаної моделі. Інгібування росту пухлини залежно від відсотка вмісту носія можна обчислювати як відсоток площі під апроксимованою кривою (АС) на добу у зв'язку з носієм, використовуючи наступну формулу: о ТО ») Е- джен /
АД са доба
При використанні цієї формули значення ТІ 100 95 вказує на стаз пухлини, більше ніж приблизно 1 95, але менше, ніж приблизно 100 95 вказує на інгібування росту пухлини, і більше ніж приблизно 100 95 вказує на регресію пухлини.
Інгібітори МЕК ! Е но М (в) сх що
Мн о г й
М (Фін! М
Со х/
Е МН М
Е
(П) (Па)
Даний винахід належить до інгібіторів МЕК і їх застосування у комбінованій терапії з інгібіторами НЕКЗ та інгібіторами ЕСЕК (рецептор епідермального чинника росту). Інгібітори
МАК всебічно розглядалися в оглядах (5. Ргісе, Риїайме АїПШовіегіс МЕКІ! апа МЕКЗ2 іппірйогв,
Ехреп Оріп. Тнег. Раїепів, 2008 18(6):603; 9.1. Т"шйо, МЕК Іппірбіюгв: а раїепі геміем 2008-2010
Ехрегі Оріп. Тег. Раїепів5 2011 21 (7):1045). Краще інгібітор МЕК міг би бути обраний з 50ОС- 0973 (кобіметініб), 5600-0623, А2О6244 (селуметініб), А2О8330, ВАМ 86-9766 (рефаметініб), а5К-1120212 (траметініб), АКЕУ-162, М5С1936369, МК162, ТАК7З3 і РО-325901. Найкраще інгібітор МЕК є 50С-0973 (кобіметініб) або ЗОС-0623.
Кобіметініб (5300-0973, також званий в даному документі "Сполука ІІ") являє собою перорально доступний потужний і високоселективний інгібітор МЕКІ і МЕК2 центральних компонентів шляху КАЗ/КАБН, і має протипухлинну активність одного агента у багатьох моделях людського раку. 56ОС-0973 має хімічну назву ІЗ,4-дифтор-2-К2-фтор-4-йодфеніл)аміно|фенілі|(3- гідрокси-3-(25)-2-піперидиніл|-1-азетидиніл|метанон. Кобіметініб має наступний реєстраційний номер СА5 (Хімічна реферативна служба): 934660-93-2. 2000-0623 (також званий в даному документі "Сполука Па") являє собою перорально доступний, потужний і високоселективний інгібітор МЕКІ і МЕК2 центральних компонентів шляху КАЗ/КАК, і має протипухлинну активність одного агента у багатьох моделях людського раку. 60С-0623 має хімічну назву 5-(2-фтор-4-йодфеніл)аміно|-М-(2-гідроксиетокси)-імідазо|1,5- а|піридин-6-карбоксамід і має наступний реєстраційний номер САЗ 1168091-68-6.
Інгібітори ЕВК
Інгібітори ЕКНК використовуються для лікування ракових захворювань і
Зо гіперпроліферативних захворювань. Сполуки Іа-Іг інгібують фосфорилювання ЕКК'І і ЕРК?2 і мають протипухлинну активність одного агента у багатьох моделях людського раку. ЕКК є єдиним відомим субстратом для МЕКІ1 і МЕК2. Фосфорилювання ЕКК приводить до транслокації в ядро, де вона фосфорилює ядерні мішені і регулює різні клітинні процеси, такі як проліферація, диференціація і прогресія клітинного циклу |У.Г. Мар еї аіІ., Снет. Мед. Спет. 2011 6:38)
Наводився огляд інгібіторів ЕКК ГК. ВигКнага еї а!., Сигг. Тор. Мед. Спет. 2009 9(8):678-6891.
Також були розкриті піразольні та індазольні інгібітори ЕКК (0. Раїг"ах еї аїІ., УМО2012094313;
С.М ЗПіррв, «г. еї аі., УУМО2012087772; С.М ЗПіррв, «г. еї аі., МО2012036997 апа У. Оепо еї аї.,
МО2012030685; А.М. Агопом ві аї., У. Мед. Спет. 2009 52:6362-681І.
Неон ФІ 7 но. А я
Ме. б ту М г м ни В са
Мм'сх ; Е М
М Сснон М ва в па) Мор) З ме
Ме "що І ноя с М, Ноч зи ми де Що Я : я ме-н М ооме мент а Ме ще а ЩЕ ; ! ЕЕ цві Її ; їі
С
Незважаючи на недавні успіхи у профілюванні людських пухлин і конструюванні низько- і високомолекулярних лікарських засобів, що приводять до відкриття спрямовано діючих терапевтичних засобів, які змінили історію захворювань, проти яких вони були спочатку розроблені, загальні показники успіху спрямовано діючих агентів у онкології, проте, все ще досить низькі, що може частково пояснюватися гетерогенністю багатьох ракових захворювань, а також складними шляхами, у яких задіяні мішені, які включають численні надлишкові шляхи і взаємний вплив серед багатьох молекулярних шляхів.
Одним підходом до вирішення даної проблеми є лікування пухлин комбінацією спрямовано діючих агентів або комбінаціями спрямовано діючих агентів і хіміотерапевтичних агентів. Це слугує які спроба досягнення спрямованої дії на багато шляхів, які незалежно і спільно керують проліферацією в багатьох пухлинах і зазвичай активуються в пухлинах цілим рядом геномних подій. Даний підхід має подвійну користь: він має потенціал збільшувати початкову частоту відповіді пухлини у пухлинах, керованих багатьма онкогенними подіями, а також знижувати частоти набутої резистентності, яка могла б відбуватися при використанні кожного агента поодинці. Це зумовлено інгібуванням активації компенсаторних шляхів, що в такому випадку продовжило б активність комбінації порівняно з активністю, що спостерігається під впливом кожного агента поодинці.
Комбінована обробка мутантних клітин К-газх інгібіторами МЕК і ЕКК інгібувала розростання резистентних клітин, тоді як обробка клітин з набутою резистентністю до інгібітора МЕК інгібітором ЕКЕК ефективно блокувала проліферацію ІС Наїгімав55ййои еї аїЇ., МоЇ. Сапсег Тег. 2012 11:1143-1154Ї. У даному документі автори винаходу продемонстрували, що одночасне інгібування двох кіназ у тому самому шляху приводило до поліпшеного інгібування клітини.
Комбінація 50ОС-0994 і 5000-0973 приводила до синергічного пригнічення росту клітин
М5ОСІ С КАВАЗ А549 (фіг. 5). Комбінація МЕКі та ЕККі приводила до уповільнення клітинного циклу (знижені рівні цикліну О1 і підвищені рівні р27) і до посилення апоптозу (підвищені рівні розщепленого РАКР та рівні в аналізі писЕГ ІЗА) (Фіг. 2 і 3). Спільне введення двох агентів приводило до синергічного зменшення проліферації клітин, виміряної за зниженим синтезом
ДНК (Фіг. 4). Цей інгібуючий ефект також спостерігали іп мімо у ксенотрансплантатах з клітинами
Зо МЗСІ С Н2122 (що також демонструвало значуще зменшення проліферації клітин і збільшення апоптозу) (Фіг. бв-бд) і МЗСІС АБ5Б49 (фіг. ба і 6б, і 7а, 76 і 7в). Синергія також була продемонстрована в моделі СЕММ (гранулоцити-еритроцити-макрофаги-мегакаріоцити) аденокарциноми протоки підшлункової залози з мутацією ККА5 (Фіг. 10а і 106), в якій були очевидними ті самі фармакодинамічні маркери (Фіг. 11аї 1156).
Синергію спостерігали з усіма інгібіторами МЕКі, спільно введеними з ОС -0994 (Фіг. 12) і з усіма ЕККІі, спільно введеними з ЗОС-0973 (Фіг. 1).
Відповідно до одного аспекту винаходу запропоновано спосіб лікування раку у пацієнта, що потребує цього, з використанням комбінованої терапії, що включає введення інгібітора МЕК та інгібітора ЕКК, або фармацевтично прийнятної солі одного з них.
В одному втіленні інгібітор МЕК комбінованої терапії є одним з 50С-0973 або 50С-0623. аоро-0973 ії 5600-0623 є потужними і високоселективними низькомолекулярними алостеричними інгібіторами МЕК 1/2, кіназ, які активують ЕКК 1/2. Інгібування МЕК 1/2 є стратегією контролю росту пухлин, які є залежними від порушеної сигналізації у шляху МЕК/ЕКК. Доклінічні дослідження продемонстрували, що обидва інгібітора ефективні в інгібуванні росту пухлинних клітин, що мають активуючі мутації В-КАБР, які асоційовані з багатьма типами пухлин, причому 200-0973 демонструє більшу активність в даній моделі. Доклінічні дослідження продемонстрували, що обидва інгібітора ефективні в інгібуванні росту пухлинних клітин, що мають активуючі мутації Ках, які асоційовані з багатьма типами пухлин, причому 50ОС-0623 демонструє більшу активність в даній моделі. Введення інгібітора МЕК об'єднують з інгібітором
ЕРК. У конкретному втіленні інгібітор ЕКК вибраний з Іа, Іб, Ів або Іг.
Ця комбінована терапія також слугувала б для попередження або затримки прояву вродженої або набутої резистентності, приписуваної до активації шляху КАБ/КАР/МЕК/ЕКК, що спостерігається при інгібуванні МЕК, і для попередження або затримки прояву вродженої або набутої резистентності, опосередкованої активацією шляху КАБ.
Дану комбінацію можна використовувати в комбінації з хіміотерапевтичними агентами для лікування гіперпроліферативного захворювання або розладу, що включає пухлини, ракові захворювання і тканину новоутворення, поряд з передзлоякісними і ненеопластичними або незлоякісними гіперпроліферативними розладами.
У деяких втіленнях комбінацію об'єднують у схемі дозування у вигляді комбінованої терапії з іншою сполукою, яка має антипроліферативні властивості, або яка є корисною для лікування гіперпроліферативного розладу. Додаткова сполука схеми дозування переважно має додаткові активності по відношенню до комбінації, і такі, що вони не здійснюють шкідливого впливу одна на одну. Такі сполуки можуть вводитися в кількостях, ефективних для наміченої мети.
В одному втіленні терапевтична комбінація вводиться схемою дозування, в якій терапевтично ефективна кількість сполуки-інгібітора МЕК (такого як З6ОС-0973 або СОС-0623) або його фармацевтично прийнятної солі вводиться в інтервалі від одного разу на добу протягом трьох тижнів до одного разу кожні три доби (230) протягом трьох тижнів, і терапевтично ефективна кількість сполуки формули Іа-іІг - один раз на добу протягом трьох тижнів.
Комбіновану терапію можна вводити у вигляді одночасної або послідовної схеми. При введенні послідовно цю комбінацію можна вводити у двох або більше ніж двох введеннях.
Об'єднане введення включає спільне введення з використанням роздільної композиції і послідовне введення в будь-якому порядку, при якому переважно має місце період, коли обидва (або усі) активні агенти одночасно надають їх біологічні активності.
В одному втіленні винаходу гіперпроліферативний розлад є раком.
В іншому втіленні винаходу при раковому захворюванні експресується мутантний ККАЗ.
В іншому втіленні даного винаходу МЕКІі є 50С-0973 (І).
В іншому втіленні даного винаходу МЕКІі є 50ОС-0623 (Па).
В іншому втіленні даного винаходу МЕКІі є 5К-1120212 (траметініб).
В іншому втіленні даного винаходу МЕКІі є А2О-6244 (селуметініб).
В іншому втіленні даного винаходу МЕКІ є ВАМ 86-9766 (рефаметініб).
В іншому втіленні даного винаходу ЕККІі є сполукою формули Іа.
В іншому втіленні даного винаходу ЕККі є сполукою формули Іб.
В іншому втіленні даного винаходу ЕККІі є сполукою формули Ів.
В іншому втіленні даного винаходу ЕККІі є сполукою формули Іг.
В іншому втіленні даного винаходу запропонований спосіб лікування ракового захворювання комбінацією МЕКІ і ЕККІі, де зазначене ракове захворювання або гіперпроліферативний розлад вибрано з групи, що складається з наступних: аденома, рак сечового міхура, рак мозку, рак молочної залози, рак товстої кишки, епідермальна карцинома, фолікулярна карцинома, рак сечостатевого тракту, гліобластома, лімфогрануломатоз, ракові захворювання голови і шиї, гептома, кератоакантома, рак нирки, крупноклітинна карцинома, лейкози, аденокарцинома легені, рак легені, лімфоїдні розлади, меланома і немеланомний рак шкіри, мієлодиспластичний синдром, нейробластома, неходжкінська лімфома, рак яєчника, папілярна карцинома, рак підшлункової залози, рак передміхурової залози, рак прямої кишки, саркома, дрібноклітинна карцинома, рак яєчка, тетракарциноми, рак щитовидної залози і недиференційована карцинома.
В іншому втіленні даного винаходу запропонований спосіб лікування ракового захворювання комбінацією МЕКІ і ЕККІ, де зазначене ракове захворювання вибрано з групи, що складається з наступних: колоректальний рак, рак легені, мезотеліома, рак молочної залози, рак підшлункової залози, гліома, рак шлунка, рак нирки, рак яєчника, рак ендометрію, рак сечового міхура та рак бо голови і шиї.
В іншому втіленні даного винаходу запропонований спосіб лікування ракового захворювання комбінацією МЕКІ ІІ ії ЕККІі Іа, де зазначене ракове захворювання або гіперпроліферативний розлад вибрано з групи, що складається з наступних: аденома, рак сечового міхура, рак мозку, рак молочної залози, рак товстої кишки, епідермальна карцинома, фолікулярна карцинома, рак сечостатевого тракту, гліобластома, лімфогрануломатоз, ракові захворювання голови і шиї, гептома, кератоакантома, рак нирки, крупноклітинна карцинома, лейкози, аденокарцинома легені, рак легені, лімфоїдні розлади, меланома і немеланомний рак шкіри, мієлодиспластичний синдром, нейробластома, неходжкінська лімфома, рак яєчника, папілярна карцинома, рак підшлункової залози, рак передміхурової залози, рак прямої кишки, саркома, дрібноклітинна карцинома, рак яєчка, тетракарциноми, рак щитовидної залози і недиференційована карцинома.
В іншому втіленні даного винаходу запропонований спосіб лікування ракового захворювання комбінацією МЕКі ІП ії ЕККі Іа, де зазначене ракове захворювання вибрано з групи, що складається з наступних: колоректальний рак, рак легені, мезотеліома, рак молочної залози, рак підшлункової залози, гліома, рак шлунка, рак нирки, рак яєчника, рак ендометрію, рак сечового міхура та рак голови і шиї.
В іншому втіленні даного винаходу запропонований спосіб лікування ракового захворювання комбінацією МЕКІі Па і ЕККІ Іа, де зазначене ракове захворювання або гіперпроліферативне захворювання вибрано з групи, що складається з наступних: аденома, рак сечового міхура, рак мозку, рак молочної залози, рак товстої кишки, епідермальна карцинома, фолікулярна карцинома, рак сечостатевого тракту, гліобластома, лімфогрануломатоз, ракові захворювання голови і шиї, гептома, кератоакантома, рак нирки, крупноклітинна карцинома, лейкози, аденокарцинома легені, рак легені, лімфоїдні розлади, меланома і немеланомний рак шкіри, мієлодиспластичний синдром, нейробластома, неходжкінська лімфома, рак яєчника, папілярна карцинома, рак підшлункової залози, рак передміхурової залози, рак прямої кишки, саркома, дрібноклітинна карцинома, рак яєчка, тетракарциноми, рак щитовидної залози і недиференційована карцинома.
В іншому втіленні даного винаходу запропонований спосіб лікування ракового захворювання комбінацією МЕКі Па і ЕККі Іа, де зазначене ракове захворювання вибрано з групи, що
Зо складається з наступних: колоректальний рак, рак легені, мезотеліома, рак молочної залози, рак підшлункової залози, гліома, рак шлунка, рак нирки, рак яєчника, рак ендометрію, рак сечового міхура та рак голови і шиї.
В іншому втіленні запропонований спосіб лікування раку комбінацією ІІ або Па і а, які вводяться супутньо.
В іншому втіленні запропонований спосіб лікування раку комбінацією І або Іа і Іа, які вводяться послідовно.
В іншому втіленні даного винаходу запропонована композиція для лікування раку, що містить 50С-0973 (ІІ) або 50С-0623 (Па), або їх фармацевтично прийнятну сіль, та інгібітор
ЕРК, обраний з Іа, ІС, Ів або Іг, або їх фармацевтично прийнятної солі для лікування раку.
В іншому втіленні даного винаходу запропонована композиція для лікування раку, що містить 50С-0973 (ІІ) або його фармацевтично прийнятну сіль, і інгібітор ЕКК, обраний з Іа, Іб,
Ів або Іг, або їх фармацевтично прийнятної солі для лікування раку.
В іншому втіленні даного винаходу запропонована композиція для лікування раку, що містить ЄОС-0973 (ІІ) або 50С-0623 (Па), або їх фармацевтично прийнятну сіль, і інгібітор ЕКК, обраний з Іа, Іб, Ів або Іг, або їх фармацевтично прийнятної солі для лікування ракового захворювання, де зазначене ракове захворювання вибрано з групи, що складається з наступних: колоректальний рак, рак легені, мезотеліома, рак молочної залози, рак підшлункової залози, гліома, рак шлунка, рак нирки, рак яєчника, рак ендометрію, рак сечового міхура та рак голови і шиї.
В іншому втіленні даного винаходу запропонована композиція для лікування раку, що містить 50С-0973 (ІІ) або його фармацевтично прийнятну сіль, і інгібітор ЕКК, обраний з Іа, Іб,
Ів або Іг, або їх фармацевтично прийнятної солі для лікування ракового захворювання, де зазначене ракове захворювання вибрано з групи, що складається з наступних: колоректальний рак, рак легені, мезотеліома, рак молочної залози, рак підшлункової залози, гліома, рак шлунка, рак нирки, рак яєчника, рак ендометрію, рак сечового міхура та рак голови і шиї.
В іншому втіленні даного винаходу запропоновано застосування МЕКі формули ІІ і інгібітора
ЕКК формули а для виготовлення лікарського засобу для лікування раку або гіперпроліферативного захворювання.
В іншому втіленні даного винаходу запропоновано застосування МЕКі формули ІІ і інгібітора бо ЕКК формули Іа для виготовлення лікарського засобу для лікування раку.
В іншому втіленні даного винаходу запропоновано набір, що містить 6ОС-0973 або 50С- 0623, або їх фармацевтично прийнятну сіль, 5300-0994 або його фармацевтично прийнятну сіль, контейнер і листок-вкладиш в упаковці або етикетку, на яких зазначено, що введення 5ОсС- 0973 або 50С-0623, або їх фармацевтично прийнятної солі і 50С-0994 призначене для лікування раку.
В іншому втіленні даного винаходу запропонований продукт, що містить 5000-0973 або 2ОС-0623, або їх фармацевтично прийнятну сіль, і 5000-0994 або його фармацевтично прийнятну сіль, у вигляді комбінованого препарату для окремого, одночасного або послідовного застосування в лікуванні раку.
В іншому втіленні даного винаходу запропонована комбінація ЗОС-0973 або СОС-0623, або їх фармацевтично прийнятної солі та інгібітора ЕКК для терапевтичного лікування раку.
В іншому втіленні винаходу запропонований спосіб лікування раку або гіперпроліферативного захворювання, де кожний з 0500-0973 або його фармацевтично прийнятної солі, або 5ОС-0623, або його фармацевтично прийнятної солі і 530С-0994 вводиться в кількості від приблизно 1 мг до приблизно 1000 мг на стандартну лікарську форму.
В іншому втіленні даного винаходу запропонований спосіб лікування раку або гіперпроліферативного захворювання, в якому 50С-0973 або його фармацевтично прийнятна сіль вводиться в дозі бО мг на добу 1-21 28-добового циклу, і 5500-0994 або його фармацевтично прийнятна сіль вводиться в кількості від приблизно 1 мг до приблизно 1000 мг на стандартну лікарську форму.
В іншому втіленні даного винаходу запропонований спосіб лікування ракового або гіперпроліферативного захворювання комбінацією 50ОС-0973 і 5000-0994, в якому 50С-0973 вводиться один раз або двічі на добу протягом трьох тижнів чотиритижневого циклу в дозі від З мг/кг до 7,5 мг/кг, ії (3300-0994 вводиться один раз або двічі на добу протягом трьох тижнів чотиритижневого циклу в дозі від 25 мг/кг до 75 мг/кг.
Фармацевтичні композиции
Фармацевтичні композиції або препарати за даним винаходом включають комбінації, описані в даному документі.
Сполука або її фармацевтично прийнятна сіль також можуть існувати в різних таутомерних
Зо формах, і усі такі форми охоплені в межах обсягу винаходу. Термін "таутомер" або "таутомерна форма" відноситься до структурних ізомерів різних енергій, які взаємно перетворюються через малий енергетичний бар'єр. Наприклад, протонні таутомери (також відомі як прототропні таутомери) включають взаємоперетворення через міграцію протона, такі як кето-енольні та імін- енамінні ізомеризації. Валентні таутомери включають взаємоперетворення за допомогою реорганізації деяких зв'язуючих електронів.
Фармацевтичні композиції охоплюють і об'ємну композицію, і індивідуальні одиниці дозування, що складаються з більше ніж одного (наприклад, двох) фармацевтично активних агентів, поряд з будь-якими фармацевтично неактивними ексципієнтами, розріджувачами, носіями або ковзними речовинами. Об'ємна композиція і кожна індивідуальна одиниця дозування може містити фіксовані кількості вищезгаданих фармацевтично активних агентів.
Об'ємна композиція є речовиною, яку ще не було перетворено на індивідуальні одиниці дозування. Ілюстративною одиницею дозування є пероральна одиниця дозування, така як таблетки, пігулки, капсули і т.п. Аналогічним чином, також мається на увазі, що описаний в даному документі спосіб лікування пацієнта шляхом введення фармацевтичної композиції за даним винаходом охоплює введення об'ємної композиції та індивідуальних одиниць дозування.
Фармацевтично прийнятні солі сполук готують згідно зі стандартною фармацевтичною практикою для застосування у терапевтичній комбінації для терапевтичного лікування гіперпроліферативних розладів (таких як рак, таких як потрійний негативний рак молочної залози) у ссавців, включаючи людину (таких як люди чоловічої і жіночої статі). Згідно з винаходом запропонована фармацевтична композиція, що містить комбінацію, як описано в даному документі, у асоціації з одним або більше ніж одним фармацевтично прийнятним носієм, ковзною речовиною, розріджувачем або ексципієнтом.
Відповідні носії, розріджувачі і ексципієнти добре відомі фахівцям в даній області і включають такі речовини, як вуглеводи, воски, водорозчинні та/або набухаючі полімери, гідрофільні або гідрофобні речовини, желатин, масла, розчинники, воду і т.п. Конкретний використовуваний носій, розріджувач або ексципієнт буде залежати від засобів і мети, для якої застосовується сполука за даним винаходом. Розчинники зазвичай вибирають на основі розчинників, відомих фахівцям в даній області як безпечні (КАБ), такі, що підлягають введенню ссавцю. Загалом, безпечними розчинниками є нетоксичні водні розчинники, такі як 60 вода та інші нетоксичні розчинники, які розчинні у воді або змішуються з водою. Відповідні водні розчинники включають воду, етанол, пропіленгліколь, поліеєтиленгліколі (наприклад, РЕС 400,
РЕС 300) і т.д., та їх суміші. Композиції також можуть включати один або більше ніж один буфер, стабілізуючий агент, поверхнево-активну речовину, зволожувач, змащувальний агент, емульгатор, суспендувальний агент, консервант, антиоксидант, агент, що забезпечує непрозорість, ковзну речовину, допоміжну речовину для переробки, барвник, підсолоджувач, ароматизуючу добавку, коригент та інші відомі добавки для забезпечення привабливого вигляду лікарського засобу (тобто сполуки за даним винаходом або її фармацевтичної композиції) або сприяння у виготовленні фармацевтичного продукту (тобто лікарського засобу).
Фармацевтична композиція (або препарат) для введення може бути упакована безліччю способів, залежно від способу, використовуваного для введення лікарського засобу. Загалом, розповсюджуваний виріб включає контейнер, що містить вміщену у нього фармацевтичну композицію у відповідній формі. Відповідні контейнери добре відомі фахівцям в даній області і включають такі матеріали, як бутлі (пластмасові та скляні), пакетики, ампули, пластмасові мішки, металеві циліндри і т.п. Контейнер також може включати блок, що оберігає від невмілого поводження, для запобігання необережного доступу до вмісту упаковки. Крім того, контейнер має етикетку, накладену на нього, на якій описано вміст контейнера. Етикетка також може включати відповідні попередження.
Фармацевтичні композиції будуть дозуватися і вводитися способом, наприклад, у кількостях, концентраціях, схемах, курсі, носіях та шляху введення, що узгоджуються з належною медичною практикою. Чинники для розгляду в даному контексті включають конкретний розлад, який лікують, конкретного ссавця, якого лікують, клінічний стан індивідуального пацієнта, причину розладу, місце доставки агента, спосіб введення, схему введення та інші чинники, відомі практикуючим лікарям. "Терапевтично ефективна кількість", що підлягає введенню, буде визначатися такими міркуваннями, і являє собою мінімальну кількість, необхідну для попередження, зменшення інтенсивності або лікування розладу, опосередкованого чинником згортання. Така кількість переважно менша за кількість, яка є токсичною для господаря або робить господаря значно чутливішим до кровотечі.
Композиції комбінацій, які підходять для перорального введення, можна отримувати у вигляді дискретних одиниць, таких як пігулки, тверді або м'які, наприклад, желатинові капсули, крохмальні облатки, коржі, льодяники, водні або масляні суспензії, дисперговні порошки або гранули, емульсії, сиропи або еліксири, причому кожний містить задану кількість 50С-0973 і а,ОС-0623 або її фармацевтично прийнятної солі; та інгібітор ЕКК формули Іа-Іг. Кількість СОС- 0973 або 50С-0623 і Іа-Іг або їх фармацевтично прийнятної солі може бути приготовлена у пігулці, капсулі, розчині або суспензії у вигляді об'єднаної композиції. Як альтернатива, дана комбінація може бути приготовлена окремо в пігулці, капсулі, розчині або суспензії для введення по черзі.
Композиції можуть бути отримані відповідно до будь-якого способу, відомого в області виготовлення фармацевтичних композицій, і такі композиції можуть містити один або більше ніж один агент, що включає підсолоджувачі, коригенти, барвники і консерванти, для отримання препарату з привабливим смаком. Пресовані таблетки можна отримувати пресуванням у відповідній машині активного інгредієнта у формі, що має вільну сипкість, такій як порошок або гранули, можливо у суміші зі зв'язувальною речовиною, мастилом, інертним розріджувачем, консервантом, поверхнево-активною речовиною або диспергуючим агентом. Відлиті таблетки можна робити шляхом відливання у відповідній машині суміші порошкового активного інгредієнта, зволоженого інертним рідким розріджувачем. Таблетки, можливо, можна покривати або наносити на них риски і можливо готувати так, щоб забезпечувати повільне або контрольоване вивільнення з них активного інгредієнта. Ексципієнти таблеток фармацевтичної композиції можуть включати: наповнювач (або розріджувач) для збільшення насипного об'єму порошкового лікарського засобу, з якого складається таблетка; розпушувачі для стимулювання розпаду таблетки на маленькі фрагменти, ідеально - індивідуальні частинки лікарського засобу, при її ковтанні і стимулювання швидкого розчинення і поглинання лікарського засобу; зв'язувальну речовину для забезпечення утворення гранул і таблеток з необхідною механічною міцністю і збереження цілісної таблетки після її пресування, запобігаючи її розпаду на порошки, що її складають, під час пакування, доставки і звичайного поводження з нею; ковзну речовину для поліпшення сипкості порошку, з якого складається таблетка, під час виробництва; змащувальну речовину для забезпечення того, щоб порошок, який таблетують, не прилипав до обладнання, використовуваного для пресування таблетки під час виготовлення. Вони покращують сипкість порошкових сумішей крізь преси та мінімізують тертя і розпад, коли готові таблетки викидаються з обладнання; протиадгезивний засіб з функцією, аналогічною функції 60 ковзної речовини, що зменшує прилипання між порошком, з якого складається таблетка, і машиною, яка використовується для виштамповування форми таблетки під час виготовлення; коригент, включений до таблеток для надання їм більш приємного смаку або для маскування неприємного смаку, і барвник для допомоги у ідентифікації та дотриманні пацієнтом схеми і режиму лікування.
Прийнятними є таблетки, що містять активний інгредієнт у суміші з нетоксичним фармацевтично прийнятним ексципієнтом, який підходить для виготовлення таблеток. Даними ексципієнтами можуть бути, наприклад, інертні розріджувачі, такі як карбонат кальцію або натрію, лактоза, фосфат кальцію або натрію; гранулятори і розпушувачі, такі як кукурудзяний крохмаль або альгінова кислота; зв'язувальні агенти, такі як крохмаль, желатин або аравійська камедь; і змащувальні агенти, такі як стеарат магнію, стеаринова кислота або тальк. Таблетки можуть бути непокритими або можуть бути покриті за допомогою відомих методик, що включають мікроїнкапсулювання для затримки розпаду і поглинання в шлунково-кишковому тракті і, за допомогою цього, забезпечення тривалої дії протягом більш тривалого періоду.
Наприклад, може бути використана речовина, що забезпечує затримку вивільнення у часі, така як гліцерилмоностеарат або гліцерилдистеарат, одна або з воском.
Масляна фаза емульсій за даним винаходом може бути складена з відомих інгредієнтів відомим способом, що включає отримання суміші щонайменше одного емульгатора з жиром або маслом, або як з жиром, так і з маслом. Переважно гідрофільний емульгатор включений разом з ліпофільним емульгатором, який діє як стабілізатор. Спільно емульгатор(ри) з або без стабілізатора(рів) складають емульгуючий віск, і цей віск разом з маслом і жиром складають емульгуючу основу мазі, яка утворює масляну дисперсную фазу композицій у вигляді крему.
Емульгатори і стабілізатори емульсій, що підходять для застосування у композиції, включають
ТмжеепФ 60, брапФ 80, цетостеариловий спирт, бензиловий спирт, міристиловий спирт, гліцерилмоностеарат і лаурилсульфат натрію.
Водні суспензії фармацевтичних композицій містять активні речовини в суміші з відповідними ексципієнтами для виготовлення водних суспензій. Такі ексципієнти включають суспендувальний агент, такий як натрію карбоксиметилцелюлоза, кроскармелоза, повідон, метилцелюлоза, гідроксипропілметилцелюлоза, альгінат натрію, полівінілпіролідон, трагакантова камедь і аравійська камедь, і диспергуючий агент або зволожувач, такий як
Зо фосфатид (наприклад, лецитин), що зустрічається у природі, продукт конденсації алкіленоксиду з жирною кислотою (наприклад, поліоксіетиленстеарат), продукт конденсації етиленоксиду з довголанцюговим аліфатичним спиртом (наприклад, гептадекаетиленоксицетанол), продукт конденсації етиленоксиду з частковим складним ефіром, що походить з жирної кислоти і ангідриду гекситолу (наприклад, поліоксіетиленсорбітану моноолеат). Водна суспензія також може містити один або більше ніж один консервант, такий як етил- або н-пропіл-п- гідроксибензоат, один або більше ніж один барвник, один або більше ніж один коригент і один або більше ніж один підсолоджувач, такий як сахароза або сахарин.
Кількість(ті) активного(них) інгредієнта(тів), яку (які) можна об'єднувати з речовиною-носієм з отриманням однієї лікарської форми, буде варіювати, залежно від господаря, якого лікують, і конкретного способу введення. Наприклад, композиція з регульованим у часі вивільненням, призначена для перорального введення людині, може містити приблизно від ї7 до 1000 мг активної речовини, приготованої з відповідною і зручною кількістю речовини-носія, яка може варіювати від приблизно 5 до приблизно 9595 від повних композицій (мас./мабс.).
Фармацевтичну композицію можна приготувати так, щоб вона давала легко вимірні кількості для введення. Наприклад, водний розчин, призначений для внутрішньовенної інфузії, може містити від приблизно З до 500 мкг активного інгредієнта на мілілітр розчину для того, щоб могла відбуватися інфузія відповідного об'єму зі швидкістю приблизно 30 мл/год.
Вироби
В іншому втіленні винаходу запропоновано виріб або "набір", що містить корисну комбінацію для лікування захворювань і розладів, описаних вище. В одному втіленні набір містить контейнер і комбінацію, описану в даному документі.
Цей набір може додатково містити етикетку або листок-вкладиш в упаковці, на або асоційований з контейнером. Термін "листок-вкладиш в упаковці" використовується для назви інструкцій, які традиційно включають у наявні в продажу упаковки терапевтичних продуктів, які містять інформацію про показання, застосування, дозування, введення, протипоказання і/або попередження щодо застосування таких терапевтичних продуктів. Відповідні контейнери включають, наприклад, бутлі, флакони, шприци, блістерну упаковку і т.д. Контейнер може бути створений з цілого ряду матеріалів, таких як скло або пластмаса. Контейнер може вміщати комбінацію або її препарат, яка є ефективною для лікування стану, і може мати стерильний порт бо доступу (наприклад, контейнер може бути мішком з внутрішньовенним розчином або флаконом,
що має пробку, проникну підшкірною ін'єкційною голкою). На етикетці або листку-вкладиші в упаковці вказано, що композиція використовується для лікування обраного стану, такого як рак.
В одному втіленні на етикетці або листках-вкладишах в упаковці вказано, що композицію, що містить комбінацію, можна використовувати для лікування розладу, що виникає через ненормальний ріст клітин. На етикетці або листку-вкладиші в упаковці також може бути зазначено, що композицію можна використовувати для лікування інших розладів. Як альтернативу або додатково, виріб може додатково містити другий контейнер, що містить фармацевтично прийнятний буфер, такий як бактеріостатична вода для ін'єкції (ВЕУМІ), фосфатно-сольовий буферний розчин, розчин Рінгера та розчин декстрози. Він може додатково включати інші матеріали, бажані з комерційної або користувацької точки зору, включаючи інші буфери, розріджувачі, фільтри, голки і шприци.
Цей набір може додатково містити вказівки для введення комбінації і, за її наявності, другої фармацевтичної композиції. Наприклад, якщо набір містить першу композицію, яка містить 2ОС-0973 або 5500-0623 або їх фармацевтично прийнятну сіль, і другу фармацевтичну композицію, що містить інгібітор ЕКК, або його фармацевтично прийнятну сіль, цей набір може додатково містити вказівки для одночасного, послідовного або роздільного введення першої і другої фармацевтичних композицій пацієнту, який цього потребує.
В іншому втіленні набори підходять для доставки твердих пероральних форм комбінації, таких як таблетки або капсули. Такий набір переважно включає цілий ряд одиничних дозувань.
Такі набори можуть включати картку, на якій є дозування, зазначені у порядку їх наміченого застосування. Прикладом такого набору є "блістерна упаковка". Блистерні упаковки добре відомі в пакувальній промисловості і широко використовуються для пакування фармацевтичних стандартних лікарських форм. Якщо це бажано, може бути надана пам'ятка, наприклад, у вигляді чисел, літер або інших позначок, або зі вставкою календаря, з позначенням діб у схемі лікування, в які можна вводити дозування.
Відповідно до одного втілення набір може містити: (а) перший контейнер з 5300-0973 або а,ОС-0623, (6) другий контейнер з інгібітором ЕКК, або його фармацевтично прийнятною сіллю, що міститься у ньому, і (в) третій контейнер з третьою фармацевтичною композицією, що міститься у ньому, де третя фармацевтична композиція містить іншу сполуку з
Зо антигіперпроліферативною активністю. Як альтернативу або додатково цей набір може містити третій контейнер, що містить фармацевтично прийнятний буфер, такий як бактеріостатична вода для ін'єкції (ВУМЕЇ), фосфатно-сольовий буферний розчин, розчин Рінгера та розчин декстрози. Він може додатково включати інші матеріали, бажані з комерційної або користувацької точки зору, включаючи інші буфери, розріджувачі, фільтри, голки і шприци.
Коли набір містить композицію 50С-0973 або 50ОС-0623, або її фармацевтично прийнятну сіль і інгібітор ЕКК, або його фармацевтично прийнятну сіль, цей набір може включати контейнер для уміщення окремих композицій, такий як розділений бутель або розділений пакет з фольги, однак, окремі композиції також можуть міститися в одному, нерозділеному контейнері.
Типово цей набір містить вказівки для введення окремих компонентів. Форма набору є особливо корисною, коли окремі компоненти переважно вводяться в різних лікарських формах (наприклад, пероральній і парентеральній), вводяться з різними інтервалами дозування, або, коли, згідно з виписаним лікарем рецептом, бажане титрування індивідуальних компонентів комбінації.
Фраза "фармацевтично прийнятна сіль" у тому вигляді, в якому вона використовується в даному документі, відноситься до фармацевтично прийнятних органічних або неорганічних солей сполуки за даним винаходом. Типові солі включають сульфатні, цитратні, ацетатні, оксалатні, хлоридні, бромідні, йодідні, нітратні, бісульфатні, фосфатні, кислі фосфатні, ізонікотинатні, лактатні, саліцилатні, кислі цитратні, тартратні, олеатні, танатні, пантотенатні, бітартратні, аскорбатні, сукцинатні, малеатні, гентизінатні, фумаратні, глюконатні, глюкуронатні, сахаратні, форміатні, бензоатні, глутаматні, метансульфонатні "мезилатні", етансульфонатні, бензолсульфонатні, п-толуолсульфонатні і памоатні (тобто 1,1'-метилен-біс-(2-гідрокси-3- нафтоатні)) солі, але не обмежуються ними. Фармацевтично прийнятна сіль може мати включення іншої молекули, такої як ацетатний іон, сукцинатний іон або інший протиіїон. Протиіїон може бути будь-яким органічним або неорганічним угрупованням, яке стабілізує заряд на батьківській сполуці. Крім того, фармацевтично прийнятна сіль може мати більше ніж один заряджений атом у її структурі. Приклади, коли багато заряджених атомів є частиною фармацевтично прийнятної солі, можуть мати численні протиїони. Отже, фармацевтично прийнятна сіль може мати один або більше ніж один заряджений атом і/або один або більше ніж один протиїон. 60 Довідковий приклад 1
(5)-(3,4-дифтор-2-(2-фтор-4-йодфеніл)аміно)феніл)(3-гідрокси-3-(піперидин-2-іл)азетидин- 1- іл)уметанон (5300-0973) міне)
М он
Е Мн
Е
Сполуку, вказану в заголовку, можна отримувати, як описано К. 0. Кісе, еї аІ., АС5 Меа.
Снет. І ей. 2012 3:416-421 у Прикладі 22 УМО2007044515 або, як альтернативу, як описано К. 0.
Вісе єї а!., Моме! Сатрохатіде-Вазей АПозієгіс МЕК іпнпібіогв: Обізсомегу апа Оріїтігайоп Енкопв5 їоулага ХІ 518 (4060-0973), Мед. Спет. І ей. 2012 3:416.
Довідковий приклад 2 5-К2-фтор-4-йодфеніл)аміно|-М-(2-гідроксиетокси)-імідазо|/1,5-а|Іпіридин-6-карбоксамід
Н
НО диМ в) ц Е
М оо
М о,
М
Сполуку, вказану в заголовку, можна отримувати, як описано у Прикладі 5 ММО2009085983.
Довідковий приклад З (5)-1-(1-(4-хлор-3-фторфеніл)-2-гідроксиетил)-4-(2-(1-метил-1 Н-піразол-4- іл)аміно)піримідин-4-іл)піридин-2(1Н)-он
Ше:
Її о) сі ню хх бу ХМ Е -й сноон ме 4-(2-(метилтіо)піримідин-4-іл)/піридин-2(1Н)-он
Стадія 1: суспензію 4-бром-2-(метилтіо)піримідину (7,00 г, 34,1 ммоль), 2-фторпіридин-4- ілборонової кислоти (5,05 г, 35,8 ммоль), МагСОз (10,9 г, 102 ммоль) і Ра(аррОсСіІ» СНесі» (1,40 г, 1,71 ммоль) у діоксані/н2го (100 мл; 1:1) нагрівали до 852С під балоном з Аг протягом 2 год.
Реакційну суміш охолоджували до КТ (кімнатна температура) і концентрували. Залишок розбавляли етилацетатом (200 мл) і водою (100 мл). Шари розділяли, і водний шар екстрагували етилацетатом (1Х). Органічні сполуки сушили, фільтрували і концентрували.
Неочищений продукт очищали за допомогою колонкової хроматографії, елююючи гексанами/етилацетатом (3:1), з отриманням 4-(2-фторпіридин-4-іл)-2-(метилтіо)піримідину (6,83 г, 90 95) у вигляді твердої речовини. "Н ЯМР (400 МГц, (СОз)25О) б 8.85 (й, 9У-5,2 Гц, 1Н), 8.46 (а, 9-5,2 Гц, 1Н), 8.11 (т, 1Н), 7.96 (й, 9-5,2 Гц, 1Н), 7.92 (5, 1Н), 2.62 (5, ЗН); т/: (ХІАТ-поз.) (хімічна іонізація при атмосферному тиску в режимі визначення позитивних іонів) М--1-2221.
Стадія 2: суспензію 4-(2-фторпіридин-4-іл)-2-(метилтіо)пиримідину (6,83 г, 30,9 ммоль) у2 н.
Зо НС (100 мл) нагрівали до температури флегмоутворення протягом 2 годин. Реакційну суміш охолоджували до кімнатної температури і поміщали у баню з льодом. рН підводили приблизно до 7 2 н. МаоОонН (приблизно 100 мл). Тверді речовини, що утворювалися, збирали фільтруванням, промивали водою і сушили з отриманням 4-(2-(метилтіо)піримідин-4-іл)піридин- 2(1Н)-ону (5,07 г) у вигляді твердої речовини. Цю речовину поміщали у муфту установки ЗохПпіеї і приєднували до 1-літрової колби, завантаженої етилацетатом (500 мл). Речовину безперервно екстрагували протягом З діб. Білий осад, що утворювався з шару етилацетату збирали фільтруванням (3,3 г, вихід 49 95). "Н ЯМР (400 МГц, (СОз3)2590) б 11.85 (г, 5, 1Н), 8.75 (й, 9У-5,0
Гц, 1), 7.79 (а, 9-5,0 Гу, 1Н), 7.54 (й, 9-7,0 Гу, 1Н), 7.13 (5, 1Н), 6.86 (а, 9-7,0 Гц, 1Н), 2.58 (5,
ЗН); т/2 (ХІАТ-поз.) Ма1-220,0. (8)-2-(трет-бутилдиметилсилілокси)-1-(4-хлор-3-фторфеніл) етилметансульфонат
Стадія 1: гідрид натрію (8,549 г, 213,7 ммоль, 60 9о-ва суспензія в мінеральному маслі) додавали частинами у холодний (02) розчин 4-хлор-3-фторбензальдегіду (26,07 г, 164,4 ммоль) і метилтрифенілфосфонію броміду (70,48 г, 197,3 ммоль) у ТНЕ (тетрагідрофуран) (400 мл). Реакційній суміші давали нагрітися до КТ протягом ночі. Тверді речовини видаляли фільтруванням, і осад на фільтрі промивали ефіром. Фільтрат концентрували (водна баня з температурою приблизно 20 С), і залишок суспендували у гексанах і перемішували протягом 30 хвилин. Тверді речовини (головним чином РРІзО) видаляли фільтруванням, і осад на фільтрі промивали гексанами. Фільтрат концентрували, і неочищений продукт очищали колонковою хроматографією, елююючи гексанами/етилацетатом (25:11) з отриманням 1-хлор-2-фтор-4- вінілбензолу (12,1 г, 47 95) у вигляді масла. "Н ЯМР (400 МГц, (СОСІ») б 7.33 (т, 1Н), 7.18 (т, 1Н), 7.10 (т, 1Н), 6.63 (т, 1Н), 5.74 (а, 9-17,4 Гу, 1Н), 5.32 (а, У-10,8 Гц, 1Н).
Стадія 2: 1-хлор-2-фтор-4-вінілбензол (12,1 г, 77,3 ммоль) додавали у холодний (0 с) розчин АО-тіх-рД (108 г, 139 ммоль) у Ї-ВИОН/Н2О (600 мл, 1:1), і давали даній суміші нагрітися до КТ протягом ночі. Наступної доби реакційну суміш поміщали у баню з льодом і гасили твердим Ма»5Оз (114 г). Цю суміш перемішували протягом 1 год. і потім екстрагували етилацетатом (3 х 500 мл). Об'єднані органічні сполуки сушили, фільтрували і концентрували з отриманням (К)-1-(4-хлор-3-фторфеніл)етан-1,2-діолу у вигляді масла. Неочищений продукт використовували на наступній стадії без очищення.
Стадія 3: імідазол (13,1 г, 193 ммоль) додавали у холодний (0 С) розчин (К)-1-(4-хлор-3- фторфеніл)етан-1,2-діолу (14,7 г, 77,1 ммоль) у ОСМ (дихлорметан) (100 мл), з подальшим додаванням ТВЗСЇ (12,8 г, 84,8 ммоль). Реакційну суміш перемішували при 0 "С протягом 1 години і потім гасили водою (50 мл). Шари розділяли, і органічні сполуки сушили, фільтрували і концентрували. Неочищений продукт очищали колонковою хроматографією, елююючи гексанами/етилацетатом (100:1) з отриманням (К)-2-(трет-бутилдиметилсилілокси)-1-(4-хлор-3- фторфеніл)етанолу (11,0 г, 47 95 за два етапи). "Н ЯМР (400 МГц, (СОСІв) б 7.36 (т, 1Н), 7.20 (т, 1Н), 7.08 (т, 1Н), 4.71 (т, 1Н), 3.75 (т, 1Н), 3.49 (т, 1Н), 2.96 (й, 9У-2,6 Гц, 1Н), 0.90 (5, 9Н), 0.07 (5, ЗН), 0.06 (5, ЗН).
Стадія 4: триетиламін (2,09 мл, 15,0 ммоль) додавали у холодний (0 "С) розчин (К)-2-(трет- бутилдиметилсилілокси)-1-(4-хлор-3-фторфеніл)етанолу (3,05 г, 10,0 ммоль) УОСМ (100 мл), з
Зо подальшим додаванням метансульфонілхлориду (0,929 мл, 12,0 ммоль). Реакційну суміш перемішували при 0 "С протягом 30 хвилин і потім гасили водою (50 мл). Шари розділяли, і органічний шар промивали насиченою МанНсСоО»з, сушили, фільтрували і концентрували з отриманням неочищеного продукту. Неочищений продукт очищали за допомогою колонкової хроматографії елююючи гексанами/етилацетатом (25:11) з отриманням /(Н)-2-(трет- бутилдиметилсилілокси)-1-(4-хлор-3-фторфеніл)етилметансульфонату (3,80 г, 99 95) у вигляді масла. "Н ЯМР (400 МГц, (СОСІ») б 7.42 (т, 1Н), 7.20 (т, 1Н), 7.12 (т, 1Н), 5.50 (т, 1Н), 3.91 (т, 1Н), 3.80 (т, 1Н), 2.98 (5, ЗН), 0.88 (5, 9Н), 0.05 (5, ЗН), 0.04 (5, ЗН). (5)-1-(2-(трет-бутилдиметилсилілокси)-1-(4-хлор-3-фторфеніл)етил)-4-(2- (метилсульфоніл)пиримідин-4-іл)піридин-2(1 Н)-он
Стадія 1: 1,0 М КНМОЗ5 (біс (триметилсиліл)амід калію) (5,09 мл, 5,09 ммоль) у вигляді розчину в ТНЕ додавали у холодну (0 "С) суспензію 4-(2-(метилтіо)піримідин-4-іл)упіридин-2(1Н)- ону (0,93 г, 4,24 ммоль) у ТНЕ (тетрагідрофуран) (20 мл). Реакційну суміш перемішували при
ОС протягом 10 хвилин перед додаванням (К)-2-(трет-бутилдиметилсилілокси)-1-(4-хлор-3- фторфеніл)етилметансульфонату (2,44 г, 6,36 ммоль) у вигляді розчину в ТНЕ (5 мл). Реакційну суміш нагрівали до температури флегмоутворення протягом 30 год. і потім охолоджували до КТ та концентрували. Залишок відбирали у етилацетат (200 мл) і промивали водою. Органічні речовини сушили, фільтрували і концентрували. Неочищений продукт очищали за допомогою колонкової хроматографії, елююючи гексанами/етилацетатом (4:1) з отриманням (5)-1-(2-(трет- бутилдиметилсилілокси)-1-(4-хлор-3-фторфеніл)етил)-4-(2-(метилтіо)піримідин-4-іл)піридин- 2(1Н)-ону (1,35 г, 63 95) у вигляді твердої речовини. "Н ЯМР (400 МГц, СОС») б 8.66 (а, У-5,0 Гц, 1Н), 7.43 (т, 2Н), 7.34 (а, 9У-5,0 Гу, 1Н), 7.32-7.28 (т, 2Н), 7.16 (т, 1Н), 6.85 (т, 1Н), 6.24 (т, 1Н), 4.35 (т, 1Н), 4.23 (т, 1Н), 2.65 (5, ЗН), 0.88 (5, 9Н), 0.03 (5, ЗН), -0.03 (5, ЗН); т/2 (ХІАТ-поз.)
М-А-1-506,1, 508,1.
Стадія 2: ТтСРВА (мета-хлорпербензойна кислота) (7,1 г, 29 ммоль) додавали у холодний (07) розчин (5)-1-(2-(трет-бутилдиметилсилілокси)-1-(4-хлор-3-фторфеніл)етил)-4-(2- (метилтіо)піримідин-4-іл)піридин-2(1Н)-ону (5,8 г, 11 ммоль) у ОСМ (100 мл), і перемішували цю суміш протягом 2 годин. Реакційну суміш промивали насиченим Маг52Оз (1Х), МанНсСоОз (1Х), сушили, фільтрували і упарювали. Неочищений продукт очищали за допомогою колонкової хроматографії елююючи гексанами/(етилацетатом (1:11) з отриманням /(5)-1-(2-(трет- бо бутилдиметилсилілокси)-1-(4-хлор-3-фторфеніл)етил)-4-(2-(метилсульфоніл)піримідин-4-
іл)упіридин-2(1Н)-ону (5,5 г, 89 95) у вигляді твердої речовини. "Н ЯМР (400 МГц, СОСІ») б 9.06 (а, 9-5,2 Гу, 1Н), 7.91 (а, 9У-5,4 Гц, 1Н), 7.55 (а, 9-7,4 Гц, 1Н), 7.43 (т, 1Н), 7.32 (й, 9-24 Гу, 1Н), 7.27 (т, 1Н), 7.15 (т, 1Н), 6.93 (т, 1Н), 6.22 (т, 1Н), 4.35 (т, 1Н), 4.24 (т, 1Н), 3.45 (5, ЗН), 0.88 (5, 9Н), 0.03 (5, ЗН), -0.03 (5, ЗН); т/2 (ХІАТ-поз.) М-1-538,1, 540,0.
Довідковий приклад 4 4-ІЗ-(етил(диметил)силіл|метил/д|-(1,2,4Ігриазолої|4,3-а|піридин-7-іл|-М-(2-метилпіразол-3- іл)упіримідин-2-амін
Ем ван
Месовімеє же Ме ВСНІССЬК
НО ставі 77 За: В х ТМ стадія 1 стадія 2 Се вен Що нм екерятчих Месм. 5-7 КЗ пк Ха еру менту хи чн стадія 5 ме-н з, не й Ме
Ме мех ; ве ни захо 5 що стадія З др; Х х КІМН: стадія є | де: Х « МНС ОЮСНІВІМеІ 2-(етилдиметилсиліл)оцтова кислота (4)
У розчин ТНЕ (40 мл) і ІА (діїзопропіламід літію) (8,8 мл, 17,5 ммоль), охолоджений до мінус 78"С, повільно додавали триметилсилілацетат (2,0 г, 15,1 ммоль). Цю суміш перемішували при мінус 78 "С протягом 2 год. Додавали хлор(етил)удиметилсилан (2,1 г, 17,5 ммоль), і розчин, що утворювався, перемішували протягом 2 год. Суміш гасили розсолом (10 мл), потім повільно додавали НСІ (10 мл, 1 н.), ії розчин, що утворювався, екстрагували
МТВЕ (метил-трет-бутиловий ефір) (З х 20 мл). Об'єднані екстракти сушили, концентрували і залишок очищали 5іОго-хроматографією, елююючи ЕАс/гексаном (1:10) з отриманням 1,0 г (45 у) 2-«етилдиметилсиліл)оцтової кислоти у вигляді безбарвного масла. "Н ЯМР (400 МГц,
СОсІ») 6-1.80 (5, 1 Н), 0.84 (І, 9У-8,0 Гц, ЗН), 0.50 (д, 9У-8,0 Гц, 2Н), 0.00 (5, 6Н). (24)-2--етилдиметилсиліл)-ІМ'-(4-(2-((1-метил-1 Н-піразол-5-іл)аміно)піримідин-4-іл)піридин- 2(1Н)-іліден)ацетогідразид (7)
До 2-хлор-1-метилпіридин-1-ію (1,36 г, 5,3 ммоль) у ОСМ (10 мл) додавали (2)-4-(2- гідразоно-1,2-дигідропіридин-4-іл)-М-(1-метил-1 Н-піразол-5-іл)піримідин-2-амін (1,3 г, 4,6 ммоль) і 2-«етилдиметилсиліл)уоцтову кислоту (0,67 г, 4, ммоль) з подальшим додаванням трибутиламіну (1,96 г, 10,6 ммоль). Цю суміш перемішували при 60-80 "С протягом 1 год. Суміш концентрували, очищали на колонці 5іО», елююючи ЕАс, потім ОСМ/Меон (101), з отриманням (2)-2-(етилдиметилсиліл)-М'-(4-(2-(1-метил-1 Н-піразол-5-іл)аміно)піримідин-4- іл)піридин-2(1Н)-іліден)ацетогідразиду (1,1 г, 44 Фо) у вигляді жовтої твердої речовини. 4-(3-(етилдиметилсиліл)метил)-І1,2,4|гриазоло|4,3-а|піридин-7-іл)-М-(1-метил-1 Н-піразол-5- іл)упіримідин-2-амін (ЗМТ 0379 285-1)
Зо Колбу завантажували (2)-2-«етилдиметилсиліл)-М'-(4-(2-((1-метил-1 Н-піразол-5- іл)аміно)піримідин-4-іл)піридин-2(1Н)-іліден)ацетогідразидом (7) (500 мг, 1,22 ммоль) і 1,2- дибромтетрахлоретаном (793 мг, 2,44 ммоль), потім додавали СНЗСМ (20 мл), з подальшим порційним додаванням РРІЗ (798 мг, 3,0 ммоль). Цю суміш перемішували при 5-7 "С протягом 1 години, потім додавали краплинами ТЕА (триетиламін) (1,0 мл), і суміш, що утворювалася, перемішували при 5-7 "С протягом 2 годин. Суміш фільтрували, фільтрат концентрували, очищали 5іОго-хроматографією, елююючи ЕАс, потім МеОон/ОСМ (1:20), з отриманням неочищеної речовини (200 мг), яку промивали Е(ОАс і Меон (три рази) з отриманням 4-(3- (етилдиметилсиліл)метил)-(1,2,4Ігриазолої|4,3-а|піридин-7-іл)-М-(1-метил-1 Н-піразол-5- іл)упіримідин-2-аміну (ЗМТ 0379 285-1) (73 мг, 15 95) у вигляді білої твердої речовини. "Н ЯМР (400 МГц, ОМ5О-ав) 6 - 9.58 (5, 1Н), 8.60 (й, 9У-5,2 Гу, 1Н), 8.56 (а, 9У-7,6 Гц, 1Н), 8.50 (5, 1Н), 7.68 (й, 9-5,2 Гц, 1Н), 7.59 (й, У-7,6 Гу, 1Н), 7.40 (5, 1Н), 6.31 (5, 1Н), 3.71 (5, ЗН), 2.60 (5, 2Н), 0.88 (І, 9У-8,0 Гц, ЗН), 0.58 (ї, 9У-8,0 Гц, 2Н), 0.05 (5, 6Н); МС (масспектрометрія) (МАНІ: - 392,19.
Довідковий приклад 5
4-(З3-(2-метилбутил)триазоло(1,5-а|піридин-б-іл|-М-(2-метилпіразол-З3-іл)/піримідин-2-амін х Ме ме за ян т ке
Її оме- ж 7 ЕЕ і м "м ви куюмет дош сля? Мао ме М. «Ме я ся й: Х кі Що ро п ше яв: Кк х МН» да: ех Ду Ме
Не тс стадія З і. чн з дв: ун В йи менту р Си те
Ще і ЕК а» Ме
М ж рр орчх стадія 5 м ен с
Ме що Ме 1-(5-бромпіридин-2-іл)-3-метилпентан-1-он
Розчин 2,5-дибромпіридину (3,72 г, 15,8 ммоль) у толуолі (30 мл) охолоджували до мінус 40 С ії додавали краплинами н-Виг і (6,32 мл, 15,8 ммоль). Цю суміш перемішували при мінус 40"С протягом 1 години, і потім додавали краплинами розчин М-метокси-М, З- диметилпентанаміду (2,1 г, 13,2 ммоль, САБКМ (реєстраційний номер САБЗ 1051483-44-3) і толуолу (5 мл). Суміш перемішували протягом ще 2 годин, потім гасили водним МНАСІ (водн.) і екстрагували ЕТОАс (2 х 50 мл). Органічну фазу сушили, концентрували і очищали на 5102 колонці, елююючи Е(ОАс/гексаном (1:10) з отриманням сполуки, зазначеної у заголовку (2 г, 59 95) у вигляді жовтого масла.
І"Н ЯМР (400 МГц, мМеон-аз) 5: 8.75 (а, 9-2,0 Гц, 1Н), 8.13 (да, 9У-8,4, 2,4 Гц, 1Н), 7.92 (а, 928,4 Гц, 1Н), 3.17-3.12 (т, 1Н), 2.98-2.92 (т, 1Н), 2.02-2.00 (т, 1Н), 1.41-1.21 (т, 2Н), 0.93-0.89 (т, 6Н). (2)-5-бром-2(1-гідразоно-3-метилпентил)піридин 1-(-5-Бромпіридин-2-іл)-3-метилпентан-1-он (2,0 г, 6,2 ммоль) розчиняли у Мен (50 мл) і додавали МНеМН» (5 мл). Цю суміш перемішували при температурі флегмоутворення протягом 4 годин. Додавали 2 н. Маон (5 мл) і НгО (20 мл), і суміш, що утворювалася, екстрагували
ЕЮОАс (3 х 50 мл). Органічну фазу сушили (Ма»5О»4), фільтрували і концентрували. Залишок використовували безпосередньо на наступній стадії без подальшого очищення: МС (МяНіІ" - 269,7. б-бром-3-(2-метилбутил)-І(1,2,3)гриазоло|1,5-а|піридин
До розчину неочищеного (7)-5-бром-2-(1-гідразоно-З3-метилпентил)піридину (1,9. г, 7,1 ммоль) у СНСІз (30 мл) додавали активний МпО» (З г, 35,3 ммоль). Цю суміш нагрівали до температури флегмоутворення і перемішували протягом 16 годин. Суміш фільтрували, фільтрат концентрували і очищали 5іО2-хроматографією з отриманням 1,6 г сполуки, зазначеної у заголовку: МС |М'НІ: - 267,7. 3-(2-метилбутил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-діоксаборолан-2-іл)-(1,2,З|гриазолої|1,5- а|піридин:
Зо Розчин /6-бром-3-(2-метилбутил)-П1,2,З|Ігриазоло|1,5-а)йпіридину (0,8 г, З ммоль), 4,4,А445,5,5,5'-октаметил-2,2/-6і(1,3,2-діоксаборолану) (838 мг, 3,3 ммоль), КОАс (294 мг, 9 ммоль) і Ра(аррО)СІ» (329 мг, 0,45 ммоль) у діоксані (30 мл) нагрівали при 1007 з перемішуванням під Ма протягом З год. Потім неочищений продукт використовували на наступній стадії без подальшого очищення: МС (МАНІ - 233, 7.
М-(1-Метил-1Н-піразол-5-іл)-4-(3-(2-метилбутил)-1,2,3|Ігриазоло|1,5-а|піридин-6- іл)упіримідин-2-амін (ЗМТ 0379 260):
До продукту - неочищеного складного ефіру боронової кислоти, додавали 4-хлор-М-(1- метил-1Н-піразол-5-іл)піримідин-2-амін (755 мг, 3,6 ммоль), Ра (аррОсіг (329 мг, 0,45 ммоль) і
С52бОз (2,9 г, 9 ммоль) і воду - Н2О (5 мл). Цю суміш перемішували при 100 "С протягом 4 годин. Суміш фільтрували. Фільтрат концентрували і очищали на 5іО2-колонці, за допомогою колонки з силікагелем, з подальшим очищенням перед-ВЕРХ (високоефективна рідинна хроматографія) з утворенням сполуки, зазначеної у заголовку (250 мг). "Н ЯМР (400 МГц, мМеон-а»з) 6: 9.58 (5, 1Н), 8.54 (й, 9-5,2 Гц, 1Н), 8.00-7.90 (т, 2Н), 7.50-7.47 (т, 2Н), 6.36 (й, 9-2
Гц, 1Н), 3.77 (5, ЗН), 3.03-2.99 (т, 1Н), 2.87-2.81 (т, 1Н), 1.91 (т, 1Н), 1.46-1.42 (т, 1Н), 1.28-1.24 (т, 1Н), 0.98-0.91 (т, 6Н); МС (Мен: - 362,9. (5)-енантіомер отримували за допомогою ЗЕС (надкритична рідинна хроматографія) на хіральній підкладці.
ІН ЯМР (400 МГц, МеонІ-аз) 6: 9.58 (5, 1Н), 8.53 (й, 9-5,2 Гц, 1Н), 8.00-7.90 (т, 2Н), 7.50-7.46 (т, 2Н), 6.36 (й, 9-2 Гц, 1Н), 3.77 (5, ЗН), 3.05-2.99 (т, 1Н), 2.87-2.81 (т, 1Н), 1.91 (т, 1Н), 1.46- 1.27 (т, 1Н), 1.26-1.24 (т, 1Н), 0.98-0.91 (т, 6Н).
Довідковий приклад 6 4-І3-(2-(4-хлорфеніл)-2-метокси-етилі-(1,2,4Ігриазолої|4,3-б|піридазин- 7-іл|-М-(2- метилпіразол-з3-іл)піримідин-2-амін
М", стадія З Мч 0 стадія2 ве 00 стадія З о жан но чия ме СМ ото хх М Ме: нг Мої н мем Н неон
МЕ МЕ
Оомей
М о М ше дети мн ние са: З - ль - ни Ох а --- - «и 3 ме що МО стдяб І. о єтадін 8
Й ЩІ й: М тоже М
МЕ Ме : 4а: В СНАВН стадія З СУ Я: еВ ее
Х в : М
МН са пе м ду - 4 хпорфенія
Ме. МИ
МЕ ч ТЕН
Аг
Стадія 1: 2-(1-метил-1 Н-піразол-5-іл)аміно)піримідин-4(ЗН)-он (6)
Суміш 2-(метилтіо)піримідин-4(ЗН)-ону (10 г, 70 ммоль, САБКМ 5751-20-2) та 1-метил-1Н- піразол-5-аміну (10 г, 103 ммоль) у МезССО»Н (50 г) нагрівали до 160 "С протягом 48 год. Цій суміші давали охолодитися до 40-50"С, і додавали ЮОСМ (30 мл). Після перемішування протягом 10 хв розчин розбавляли н-гексаном (200 мл), що приводило до утворення червоної суспензії. Суміші давали постояти протягом 0,5 год., після чого декантували верхню прозору органічну фазу. Червону суспензію розчиняли у ОСМ (50 мл) і концентрували при зниженому тиску з отриманням неочищеного продукту 2 (16,5 г), який використовували на наступній стадії без будь-якого очищення.
Стадія 2: 4-хлор-М-(1-метил-1Н-піразол-5-іл)піримідин-2-амін (7)
До розчину 2-(1-метил-1Н-піразол-5-ілламіно)піримідин-4(ЗН)-ону (16,5 г, неочищений) у
МесмМм (200 мл) додавали РОСІз (30 мл, 0,33 моль). Цю суміш нагрівали до температури флегмоутворення протягом 15 хв. Суміш гасили льодом-водою (100 г), ї рН доводили до 10 порошком МагСОз. Суміш екстрагували ЕЮАс (3 х 100 мл), сушили (Маг5О»4), фільтрували і концентрували при зниженому тиску з отриманням неочищеного продукту. Неочищений продукт очищали 5іОг-хроматографією, елююючи петролейним ефіром/ЕюЮАс (1:1) з отриманням 7,5 г (51 95 за 2 стадії) сполуки, зазначеної у заголовку. ІН ЯМР (Меон-а», 400 МГ) 6: 8.30 (й, 9-52,
Зо 1Н), 7.42 (а, 90-1,6, 1Н), 6.90 (а, 9-5,2, 1Н), 6.28 (0, 9-1,6, 1Н), 3.72 (5, ЗН).
Стадія 3: 2-бензил-5-(2-((1-метил-1 Н-піразол-5-іл)аміно)піримідин-4-іл)піридазин-З(2Н)-он (9)
До розчину 4-хлор-М-(1-метил-1Н-піразол-5-іл)/піримідин-2-аміну (25,0 г, 119 ммоль) у діоксані (300 мл) додавали МезопопМез (46,9 г, 143,11 ммоль) і РА(РРІз)4 (13,8 г, 11,93 ммоль), цю суміш нагрівали при 125 "С в атмосфері Мо протягом З год. До зазначеного вище розчину додавали 2-бензил-5-йодпіридазин-З(2Н)-он З (44,7 г, 143,1 ммоль, САБЕМ 825633-93-0), І ІСІ (101 г, 238,5 ммоль), Си! (11,4 г, 59,6 ммоль) і РЯА(РРПз)4 (13,8 г, 11,93 ммоль). Цю суміш нагрівали при 125 "С в атмосфері М2 протягом 16 год. Суміш охолоджували до КТ і фільтрували через Сеїйе?т. Осад на фільтрі промивали ОСМ (3 х 200 мл). Розчини, об'єднані з ОСМ,
концентрували, очищали ЗіОг-хроматографією, елююючи градієнтом Меон/ОсСМмМ (1-5 925 Меон) з отриманням сполуки г (34 г, 84 95) у вигляді жовтої твердої речовини.
Стадія 4: 5-(2-(1-метил-1Н-піразол-5-іл)аміно)піримідин-4-іл)піридазин-З(2Н)-он (10)
До розчину безводного толуолу (500 мл) і 2-бензил-5-(2-(1-метил-1 Н-піразол-5- іл)аміно)піримідин-4-іл)піридазин-З(2Н)-ону (34 г, 94,6 ммоль) додавали АЇСіз (63 г, 473 ммоль).
Цю суміш нагрівали при 120 "С в атмосфері Ме протягом 1 год. Суміш охолоджували до КТ, і верхній прозорий шар декантували. Тверду речовину, що залишалася, додавали у крижану воду (200 г) і перемішували при КТ доти, поки початкова тверда речовина не розпадалася і не з'являлася жовта тверда речовина. Тверду речовину фільтрували і промивали крижаною водою (3 х 100 мл). Після сушіння отримували приблизно 35 г неочищеного жовтого твердого продукту.
Стадія 5: 4-(б-хлорпіридазин-4-іл)-М-(1-метил-1 Н-піразол-5-іл)піримідин-2-амін
До перемішуваного РОСіз (200 мл) додавали 5-(2-(1-метил-1 Н-піразол-5-іл)аміно)піримідин- 4-іл)піридазин-З(2Н)-он (10) (35 г неочищеної сполуки, 0,13 моль) при КТ. Цю суміш нагрівали при 80 С протягом 2 год. Суміш концентрували насухо, розчиняли СНСіз (200 мл) і потім виливали у крижану воду (500 г) з перемішуванням. Суміш, що утворювалася, доводили приблизно до рН8. Цю суміш екстрагували ОСМ (5 х 300 мл). Об'єднаний органічний шар концентрували і очищали 5іОго-хроматографією, елююючи градієнтом петролейного ефіру/ЕІЮАс (від 1 до 50 95 ЕІОАс) з отриманням 13 г (47 95 за два етапи) сполуки, зазначеної у заголовку, у вигляді жовтої твердої речовини. "Н ЯМР (0М50-ав, 400 МГц) 56: 9.80 (5, 1Н), 9.74 (5, 1Н), 8.70 (0, 9-48, 1Н), 8.44 (в, 1Н), 7.72 (9, 9-52, 1Н), 7.38 (5, 1Н), 6.29 (5, 1Н), 3.68 (5, ЗН).
Стадія 6: 4-(3-(2-(4-хлорфеніл)-2-метоксиетил)-(1,2,4)гриазоло|4,3-б|піридазин-7-іл)-М-(1- метил-1Н-піразол-5-іл)піримідин-2-амін
До перемішуваного розчину 4-(6б-хлорпіридазин-4-іл)-М-(1-метил-1 Н-піразол-5-іл)піримідин-2- аміну (200 мг, 0,758 ммоль) в ІРА (3 мл) додавали 3-(4-хлорфеніл)-3-метоксипропангідразид (200 мг, 0,834 ммоль) і метансульфонову кислоту (1,2 мг, 1,6 ммоль). Реакційну суміш перемішували при 100 "С протягом З год. Розчинник випарювали насухо і очищали препаративною ВЕРХ (ЕА) з отриманням 40 мг (795) бажаного продукту. "Н ЯМР (400 МГц,
Меон-а»з) 6: 9.24 (5, 1Н), 8.88 (5, 1Н), 8.63 (а, 9-5,2, 1Н), 7.63 (а, 9-52, 1Н), 7.51 (а, 90-20, 1Н),
Коо) 7.36 (5, 4Н), 6.39 (5, 1Н), 4.63 (5, 1Н), 3.82 (5, ЗН), 3.81-3.74 (т, 1Н), 3.59-3.54 (т, 1Н), 3.20 (5, зн); МО Мен - 461,9.
Розділення енантіомера (К)-4-(3-(2-(4-хлорфеніл)-2-метоксиетил)-1,2,4)гриазолої|4,3-
Б|піридазин-7-іл)-М-(1-метил-1 Н-піразол-5-іл)піримідин-2-аміну здійснювали 5ЕС з отриманням бажаного продукту (13,8 мг). "Н ЯМР (400 МГц, ОМ50-ав) 6: 9.70 (5, 1Н), 9.19 (5, 1Н), 9.00 (а, 9-21 Н), 8.67 (й, 9-48, 1Н), 7.23 (0, 9-48, 1Н), 7.42-7.35 (т, 4Н), 6.33 (5, 1Н), 4.93-4.89 (т, 2Н), 3.73 (5, ЗН), 3.72-3.64 (т, 1Н), 3.50-3.44 (т, 1Н), 3.10 (5, ЗН)); МО ІМаНІ" - 461,9.
Біологічний приклад 1
Культура клітин і аналізи життєздатності
Для СеїТйегсІо (Рготеда): клітини Аб549 переносили на планшет у нормальне ростове середовище (Козугеї! Рагк Метогіа! Іпзійше 1640 (КРМІ 1640) з 1095 фетальної телячої сироватки, 2 мМ/л глутаміном і 100 одиницями/мл пеніциліну і стрептоміцину) у кількості 1500 клітин на лунку у 384-лунковий чорний планшет з прозорим дном. Наступної доби сполуки серійно розводили 1:2, починаючи з зазначених концентрацій, потім додавали до клітин у чотириразових повторностях. Через 9бгодин після додавання сполуки додавали люмінісцентний реактив для визначення життєздатності клітин СеПТйег-сїо згідно з протоколом виробника.
Для ЕПІЗА на ВгаШ (Коспе): клітини А549 переносили на планшет у нормальне ростове середовище в кількості 3000 клітин на лунку у 96-лунковий чорний планшет з прозорим дном.
Наступної доби додавали сполуку у потрійний повторності у зазначених концентраціях на основі результатів СТО. Через 48 і 72 години після додавання сполуки проводили хемілюмінісцентний
ЕІ5А для визначення проліферації клітин з ВгаШ згідно з протоколом виробника.
Для писЕЇГ І5А для визначення загибелі клітин (Коспе): клітини А549 переносили на планшет у нормальне ростове середовище в кількості 3000 клітин на лунку у 9б-лунковий чорний планшет з прозорим дном. Наступної доби додавали сполуку у потрійний повторності в зазначених концентраціях на основі результатів СТО. Через 48 і 72 години після додавання сполуки проводили ЕГІБАРИЗ: для визначення загибелі клітин згідно з протоколом виробника.
Біологічний приклад 2
Моделі ксенотрансплантатів пухлини
Клітини МСІ-Н520.Х1 ії ЕВСІ, які культивували, видаляли з культури, суспендували у бо буферизованому сольовому розчині Хенкса (НВЗ5), змішаному 1:1 з Маїгіде! (ВО Віозсіепсев,
США), і підшкірно імплантували у правий бік наївних самок голих мишей МСЕ. (Тасопіс Раптв,
Нидзоп, МУ). Мишей з пухлинами середнього об'єму приблизно 250 мм3 групували у когорти обробки по 10 мишей в кожній. Миші отримували тільки 5 95-ву сахарозу або 5 95-ву сахарозу плюс 1 мг/мл доксицикліну (Сіопіесп, Моипіайп Мем, СА) для контрольної когорти і когорти нокдауну відповідно. Усі бутелі з водою міняли З рази на тиждень. Протягом дослідження вимірювання мас тіла і об'єму пухлини (отриманого за вимірюваннями довжини і ширини циркулем) здійснювали двічі на тиждень. Усі експериментальні методики відповідали керівним принципам Американського фізіологічного товариства і були схвалені інституціональним комітетом з догляду та використання тварин Сепепіеспй. Об'єми пухлин обчислювали за формулою: об'єм пухлини-0,5-(а:ре), де "а" є найбільшим діаметром пухлини, і "Б" є перпендикулярним діаметром пухлини. Результати за об'ємом пухлини представлені як середні об'єми пухлини плюс/мінус стандартна похибка середнього (ЗЕМ). Відсоток інгібування росту (95
ІМН) у кінці дослідження (ЕОБ5) обчислювали як: 95 ІМН-10О9|Носій ЕО5 - Обробка ЕО5)(Носій
ЕОЗ5)). Аналіз даних і отримання значень р з використанням І-критерію Даннета здійснювали з використанням програми УМР (ЗА5 Іпзійше, Сагу, МС).
Іа отримували у вигляді розчину в різних концентраціях (виражених у вигляді еквівалентів вільної основи) у 40 96 РЕС400 (поліетиленгліколь 400)/60 95 (10 95 НР-Д-СО (гідроксипропіл-Д- циклодекстрин))|. Контроль у вигляді носія був 40 95 РЕС400/60 95 (10 95 НР-ВД-СО) або МСТ. ІІ отримували у вигляді суспензії в різних концентраціях у метилцелюлозі- Гуееп (МСТ). Дозовані розчини Іа, Ії ї контролю у вигляді носія отримували один раз на тиждень протягом трьох тижнів.
Ці композиції добре перемішували на вихровій мішалці перед дозуванням. Дослідні зразки зберігали у холодильнику з установкою для підтримування температурного інтервалу 4 "0-7 76.
Біологічний приклад З
Моделі генетично модифікованих мишей
Автори винаходу отримували мишей з наступних організацій: миші Кгаві5і-с120 були отримані від Тайлера Джекса (Туїег Часк5) (Массачусетський технологічний інститут), миші р1іб/р19"1 були отримані від Антона Бернса (Апіоп Вегп5) (МКІ, Нідерланди), миші розпил були отримані від Ехеїїхів, Іпс., і миші Рах1-Сте були отримані від Енді Лові (Апау ГГ ому) (Університет
Огайо). Для експериментальних когорт використовували рівне число самців і самок тварин,
Зо дозування починалося після підтвердження пухлинної маси або за допомогою ультразвукової візуалізації для РЮАС, або мікроСтТ (комп'ютерна мікротомографія) для моделі М5СЇІ с.
Дозування і спостереження за тваринами здійснювали відповідно до інструкцій Інституційного комітету з догляду та використання тварин (ПАСИОС) у Сепепіесі!, Іпс. Усі вибрані схеми дозування добре переносилися у СЕММ. Неїінвазивну візуалізацію і оцінку загального виживання проводили, як описано раніше в (5іпдап:2010пм). У моделях СЕМ кобіметініб та Іа дозували в дозуванні 5 мг/кг і 60 мг/кг за допомогою перорального зондового харчування (РО), щодоби (00).
Статистичні аналізи даних, показаних у вигляді оцінок виживання Каплана-Майєра, і наборів даних з візуалізації проводили, як описано раніше (М. Зіпой еї аї., Маїиге Віотесппої., 2010, 28(6):585-593). Зразки пухлини моделі СЕМ відбирали і зберігали у ЕМАЇ агег (Оіадеп, Маіепсіа,
СА). Загальну РНК екстрагували набором КМеазу Ріи5 Міпі (Оіадеп), слідуючи інструкціям виробників. Якість РНК визначали з використанням Мапоагор (Тпегто Зсіепіййс, Ууактат, МА).
Характеристики, розкриті у наведеному вище описі або у наступній формулі винаходу, виражені в їх конкретних формах або у показниках середніх значень для здійснення розкритої функції, або спосіб, або процес отримання розкритого результату, згідно з обставинами, можуть використовуватися для здійснення винаходу в його різних формах окремо або в будь-якій комбінації таких характеристик.
Вищеописаний винахід був описаний в деяких подробицях за допомогою ілюстрації та прикладу з метою ясності і розуміння. Фахівцю в даній області буде очевидно, що можуть втілюватися на практиці зміни і модифікації, що знаходяться в межах обсягу доданої формули винаходу. Отже, слід розуміти, що наведений вище опис призначений для того, щоб бути ілюстративним, а не обмежуючим. Отже, обсяг винаходу слід визначати не з посиланням на наведений вище опис, але, натомість, він повинен визначатися з посиланням на наступну додану формулу винаходу, поряд з повним обсягом еквівалентів, яким дає право така формула винаходу.
Патенти, опубліковані заявки і наукова література, на яку дається посилання в даному документі, встановлюють знання фахівців в даній області і, тим самим, є включеними за допомогою посилання у всій їхній повноті тією мірою, як коли б кожна була конкретно і індивідуально вказана як включена за допомогою посилання. Будь-який конфлікт між будь-яким 60 посиланням, процитованим в даному документі, і конкретними ідеями даних описів винаходу повинен бути вирішений на користь останніх.
Таким чином, будь-який конфлікт між зрозумілим в даній області визначенням слова або фрази і визначенням слова або фрази, конкретно викладеним в даному описі винаходу, повинен бути вирішений на користь останнього.

Claims (12)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Спосіб лікування гіперпроліферативного розладу, що включає введення ссавцю, який цього потребує, терапевтично ефективної кількості комбінації інгібітора МЕК |(мітогенактивована кіназа, регульована позаклітинним сигналом) або фармацевтично прийнятної солі та інгібітора ЕВК (кіназа, регульована позаклітинним сигналом), або фармацевтично прийнятної солі, або у вигляді об'єднаної композиції, або по черзі, в якому інгібітор МЕК являє собою кобіметиніб, інгібітор ЕВК являє собою (5)-1-(1-(4-хлор-3-фторфеніл)-2-гідроксіетил)-4-(2-(1-метил-1Н- піразол-5-ілламіно)піримідин-4-іл)упіридин-2(1Н)-он, а гіперпроліферативний розлад являє собою ракове захворювання.
2. Спосіб за п. 1, в якому зазначене ракове захворювання вибрано з групи, що складається з наступних: аденома, рак сечового міхура, рак мозку, рак молочної залози, рак товстої кишки, епідермальна карцинома, фолікулярна карцинома, рак сечостатевого тракту, гліобластома, лімфогрануломатоз, ракові захворювання голови і шиї, гептома, кератоакантома, рак нирки, крупноклітинна карцинома, лейкози, аденокарцинома легені, рак легені, лімфоїдні розлади, меланома і немеланомний рак шкіри, мієлодиспластичний синдром, нейробластома, неходжкінська лімфома, рак яєчника, папілярна карцинома, рак підшлункової залози, рак передміхурової залози, рак прямої кишки, саркома, дрібноклітинна карцинома, рак яєчка, тетракарциноми, рак щитовидної залози і недиференційована карцинома.
3. Спосіб за п. 2, в якому зазначене ракове захворювання вибрано з групи, що складається з наступних: колоректальний рак, рак легені, мезотеліома, рак молочної залози, рак передміхурової залози, гліома, рак шлунка, рак нирки, рак яєчника, рак ендометрія, рак сечового міхура та рак голови і шиї.
4. Спосіб за п. 3, в якому ракове захворювання вибрано з групи, що складається з наступних: колоректальний рак, недрібноклітинний рак легені, рак підшлункової залози або меланома. Зо
5. Застосування комбінації інгібітора МЕК або його фармацевтично прийнятної солі з інгібітором ЕВК, або його фармацевтично прийнятною сіллю для одержання лікарського засобу для лікування гіперпроліферативного розладу, в якому інгібітор МЕК являє собою кобіметиніб, інгібітор ЕВК являє собою (5)-1-(1-(4-хлор-3-фторфеніл)-2-гідроксіетил)-4-(2-(1-метил-1Н- піразол-5-ілламіно)піримідин-4-іл)упіридин-2(1Н)-он, а гіперпроліферативний розлад являє собою ракове захворювання.
6. Застосування комбінації інгібітора МЕК або його фармацевтично прийнятної солі з інгібітором ЕВК, або його фармацевтично прийнятною сіллю для лікування гіперпроліферативного розладу, в якому інгібітор МЕК являє собою кобіметиніб, інгібітор ЕВК являє собою (5)-1-(1-(4- хлор-3-фторфеніл)-2-гідроксіетил)-4-(2-((1-метил-1Н-піразол-5-іл)аміно)піримідин-4-іл)піридин- 2(1Н)-он, а гіперпроліферативний розлад являє собою ракове захворювання.
7. Застосування за п. 5 або 6, в якому рак являє собою ракове захворювання ссавця.
8. Застосування за п. 7, в якому ссавець являє собою людину.
9. Застосування за будь-яким з пп. 5-8, в якому зазначене ракове захворювання вибране з групи, що складається з наступних: аденома, рак сечового міхура, рак мозку, рак молочної залози, рак товстої кишки, епідермальна карцинома, фолікулярна карцинома, рак сечостатевого тракту, гліобластома, лімфогранулематоз, ракові захворювання голови і шиї, гептома, кератоакантома, рак нирки, крупноклітинна карцинома, лейкози, аденокарцинома легені, рак легені, лімфоїдні розлади, меланома і немеланомний рак шкіри, мієлодиспластичний синдром, нейробластома, неходжкінська лімфома, рак яєчника, папілярна карцинома, рак підшлункової залози, рак передміхурової залози, рак прямої кишки, саркома, дрібноклітинна карцинома, рак яєчка, тетракарциноми, рак щитовидної залози і недиференційована карцинома.
10. Застосування за будь-яким з пп. 5-9, в якому зазначене ракове захворювання вибране з групи, що складається з наступних: колоректальний рак, рак легені, мезотеліома, рак молочної залози, рак підшлункової залози, гліома, рак шлунка, рак нирки, рак яєчника, рак ендометрія, рак сечового міхура та рак голови і шиї.
11. Застосування за будь-яким з пп. 5-10, в якому ракове захворювання вибране з групи, що складається з наступних: колоректальний рак, недрібноклітинний рак легені, рак підшлункової залози або меланома.
12. Набір для лікування ракового захворювання, що містить кобіметиніб або його бо фармацевтично прийнятну сіль ії (5)-1-(1-(4-хлор-3-фторфеніл)-2-гідроксіетил)-4-(2-(1-метил-
1Н-піразол-5-іл)аміно)піримідин-4-іл)упіридин-2(1Н)-он, або його фармацевтично прийнятну сіль, контейнер і листок-вкладиш в упаковці або етикетку, причому на вкладиші зазначено, що введення кобіметинібу ії (5)-1-(1-(4-хлор-3-фторфеніл)-2-гідроксіетил)-4-(2-(1-метил-1Н-піразол- Б-іл)аміно)піримідин-4-іл)упіридин-2(1Н)-ону служить для лікування ракового захворювання. КЕ ж щі пох заз ХУ Шео--н КАХ не ние р Ж сі їх не ри І се т б а с Ей ЙО, росі х нео і ВЕ ж ч пр к Еш ше ще пе - КУ ШИ Ше» | ень ач п шин ОТ На и і В ї Е: ук К Кк 1 Н 3 ї З Ії сь СІ Е сс Н Фе. 1 : З : о о ше не МЕ Же | я Ах са ще 1 «чі ж Ро Ін нн МИ - шк о ЕЕГ Фрези МАО Я 010
-Е. и ХЕ ЩА Щі Ше одн МИНЕ ПИШНЕ Я Се: Би г ЖЕ ре СЕ й НЕ НИ ЖК с шум. рж ее я ух ЕН чу и ше я ШЕ ще: ее й 18 ха КВ роб І НИ сх ї г ї З хо м сл ки і Ше що ЕЕ КОРОБ і З Би | ШО хх шая; МНЕ НИ зн кВ Щи ! б лиш и 15 с кв ! Фе ши шк ши ши нши ш е о ше ше ев ше ши ши ши їн в ! се ши: ши ши ши ши ши ие че чо юю чо Зоо Фо от о і -оож- є Фк є -- воша Са (5 о плн енеяомавн (ЦО Уч еневомаюн -я-- Меси -- р шк ще ч- ші о ш пиши що іш - Ф ГЕ г ! ба г 2 с що ш ж до Є ш 5 я ЕвалА ме кої їу її сх ЕІ Ва Е і ї- ж Е ва, ще: тя Роз іо : ! Фо о го ав бо МИ ж шен Ж Те реш. х шила не Пе ни ни ми Й НИ ТУ ші ще У ів маш ще Шо ан А а ВЕ щ Ї Е Е сс: Й і Ге З і Н щі щік Й Е га о бе 1 ор Фе яд ж Бе є ФО І й. З б КГ ж ШЕ ж о ав А ся НИШЕШЕІ и ше ШІ ій ВУ п : їж с ет | и ; 15 | ще ек шк о я за дя 5 За єму ши Фо я КИ ши м й ни ни и НЕ: в шишки ШЕ: ши ще ше г о Ж | ше Шк ШИ в що а аю 18 Ши ШшШИ | Но ОВК НЕ с содою шо чо ст о сош о Фо ж ос ю ся впнапоаніош (912) плтч еневомсон внаанема) гру вневойан
Пролюіфверація і загибель юитин: комеінації МЕКИ СПО ОЗ7ТО я ЕК У АБЯВ
З. пн нн зі й Хоть птЕєНТИНтИними вкц, яв тод Па ах Ес доку г я Н -к дк с І КОЮ рджеур шк: нини Гоа СВО, 43 Ок ж КЕ. і оч 53 МО КА г жу КЗ сини ІОНИ У Ж з ВЕ и ЕНН т при ДЯ 3 КИ З С КО кеЕ. їй Н З ОБ ще КЕ ТЕ пиининнифрнну рин ві ше ї З КІ КЕ ке І Я їй ПоМІ Я в-Я ДОВ ен і ех я шиє феннноя ш у БЕ і ТЕ т - КЗ З КІ А се Як «І ЖЕ - й БІБІК Ше ШЕ "7 сш З Ж ККУ р 3 щих НІ Ще я ЗА З ги Я ВЕ Ох й БЕ То що й ШЕ БЕ ї ЕЕ пан о ни ИН НН с НН А НН НЕ а г ЕОМ Ку нн оо і ем а по рови песЕвіжА, ЗктОд Е3 А: дк ка а а а м м а і і ШК я - Ї оо 6 ОХ ЕС : Е З Сас есло, нй її Бо ВЕ) оф Кт КТ нях хннннналннналнннннннннно ще пес: ЯЙ ї сих с Як і Я Во 5 р М 5 в З шин я З З у : х й Ше - ШИ Ше йо Х ЖК, пн У Ї г дк за З че КУ у р А: щ ЗРО пуху пн не у СВ: НЯ 0 А еще в І й се З М. г ше (У о х х: с я - ее й ї б. Сх де З З КУ Що о ШЕ ЕЕ ТЕБЕ В НЯ НН ш они ще Кк БИ Б я х а мч: У х ГУ: ше І І І и и тож ше сх се х щ З ще В 5 що Гу жи и М Сян в ие ВЕ ее: В и НН НН НЯ КІ ГУ ЕК М й с 3 та Гожя - Га Ко т т т що. ща дО Го
Пропіферація і загибель клітин: комбінації МЕКИООСОТ о ЕКК у Ба Ви, г? год ун а й І У | ї бесее сети Ж Ге. ря Кі в і щи Ка КЕ ї
В. Ще о г : і ка т ОО Ммер ОЯ, й Де. ш ЕК: КІ че в І МІ В і ЗШ 5 й ї ЩШ г вто и. не о нини М вин -- ї" є о МК Кк й КУ і ик нн ни шко кшщ НЕ
Я. и Ин ШІ її і І РЕМ НК ДІ МІ МЕ щі НК ШК НО Я я с МЕ: г : ЗЕ пав й. сук кв ря сім екв вч Ярі нм зе сн: МНЕ Шк УНН в'є 55 їв її хх му х ще що щ сх ОКО г Що ЯписгіІзА, Ти тод ох ення 5 я ва Мбовхтою о 00000 я-ь ше тік уночі нн сах мисок я Кия Ж що гу З тт ЖЕ з кв Кк зр Моя 5 ЯН тт Й ка Я мк 00 ВД ши ши і то Ек ся Ще Е як З: Ки Ще. Ж з ва ----42 ВЕ -К4 8 5 ЩЕ ще (НК ха щ Гоя -МНХ У з ї І з ГУ те ЗШ - ІЗ З У СН І їй ї г У Ще Ой и і З ну З ДЕШЩКОХ. І р І гі та З ощш -нана и щ ді 5 ЕВ: КЕ ; МЖК -к АЗК ЕЕ Я Ки ї 3 Б СКД З З т як х. а г т Є : - хх ; Боб кА сн НЕ НО ж В с НЕ з Не ши Ше НН р -к т ї-. їх» ге ух ай йе - - « ще що б г о ; і інн нн
-Анапіз РО нвармакодинаміка): комбінації МЕКІ ОС С-0973) Я ЕКК у А549, 24 год. сх 873 994 497 БАЗ 028 994 497 541 (028 - «З -а ІЗ осей 3 - СК ках Ка ин о на НІ (ТЗБ9ЗАУЗВМЯ чі: п. зи шия шо СЕЗОВАУКО ни кни нан Я й нн нн ння не ЯН А ни ІІ а аа и щщ Ж ЕСБО їмкмо кокі шиснаавашниниешщенН сосоот3 0125 но Но о МЕН Но нн ОМСОВОЯ х ТЕ п що 05780497 з 0155 ШЕ о о В о ВН ИН Кеплер пд МОТО 5 : НК ооо Ж віє ЗВ ЗВ ЯН з: Я; ЯКУ звів ні ЯН Я ЧО чанх Як не Гоожу тек ян н нежн СКРАНЕ сонета тво о ран В юннюнннюююююююютннннтккжютюткпннкккнтютккенкекктконнктенн АктинЙйсдевНн іван онов вовни
Фіг. З.
й ООН У й ше : й Ь опишу ен З В в 2 М ско ЩЕ ех т : зн й : " Е і Ї ща : / Ко й Ж | | | іч о Я і Е - й че | ! і г й я а. | І. о і З . о. ге с) ! Ж ! с - Я : і а а о: : і с ж і ; | Е- с со їЕ й й Щ ї Є. Б с ри о. ХО ДНЯХ с ї. Е Б с о й іо Е ЕЕ с є ! с ооо. ОВ із 4 іо і Ї 'й о в їй о с а ії с За с - і с х с же чаю З М с с НЯ у і о. ЕК с ДИ /
шо. | я. Ї ш- й ашха Е ее о си С КК г чна Е З Кос ХУ с - не с ; 5 | г фі і. о о. - є : "г СЕ З о. з З 4 - ї І й й ко ї : КЕ с о. с З М с ш МК ХУ с ОКХ с ях ХК й 7 Й ь п с о і Я, г Ш ен о с шу Щ . о З ЗО с Б сх Х ДЕ с Я ї п о с і З пв- с і й с Кн г 0 ' ща ї с с і й :
с с. у, с ее З (і 2І3 і с -- о. і - ! ОО с - . / Ех п І - Іі їх і Ії М о. хх с і . о о. о. з с Ф і ж 4 с с й ї пе і ш Е с ЗХ ОХ ОХ З СКК і о. з с! !
о о. ЗО ЗУ с і й Її с і В о. гі ; с КК КК ХЕ З . |і те 4 ї с ОК ОКХ ОХ КОКО і Хе : ! с - ї с ОО. З ХУ і Й Я п о. і ІЗ о с С се ККУ Зх Бі реч дом й ; п о і к Б ше :
с о. і Ж щ- : , с З КО о /і ще Я. і ! с Х і не ! І : я Ті РЕ і і ; її / ча З 5 і 0 '/ й В ; і Ф-НГ Гн т З ; ' ні : ; 1 у і - й Я ! ї і З ; і і дах
І.
- Б я Е ящовиенною 00000111 в 5 | ! н- ОАЛННОМ. | ш не | | м ЄІННОМ -5 ш око овном, ЕЕ бен ВСВНЧОМ | ше
Шин Ве о ВШ
Ши ША ши ши
Ман с Я щи ШОН ВЕ те стен юю 19
Шішіннинна о ШЩ
Дн в и в Й
ЕЕ дн | еоЄІНОМ ши ше ще
Шшшшишешинии й о 0 ШИ й внш Ім ни ще
«ннеяхоцні 9, -
масі МСіНОІ22 Щеадоби МЕКІі Ж Щеодоби ЕККІі і-й» Носій ПМСТІ І1-ан СОС-О97З (Я мою, РО, СО) 1-6 СОС ВО мог, РО, СО) СОС 5 мою, РО, СОЮ я СОС 0 мг, РО, СО що : Ж Е ж Я во: ей їж ї «є г 4 я ще о 4004 до Я | нн ї | дит ве. дже зв - ше ШІ ЩИЩИЙ ра ! ши шк ЩЕ о ! о 5 10 15 20 і ст. в я за я Й З г: міш кт вон шве "ийж « ЩЙ Шев нин их ШИ ЕД пишння ак о 51005030 ; Доба ;
Фіг. БА мас е чсСІнгі22 Періодично МЕКІ ж Щодоби ЕККІі а Несій (МСТ) вки ЗАС О9ИЗ 15 мекг, РО, ОЗ0) нд СДС ЛОВИНВО мок, РО, ОСІ я ОВС 5 мок, РО, ОЗ0) СОСЮВИВО мок, РО, ОЮ) 8003 р А і | р ж . а в 4004 х Е ра дю ! де | ради - одн дні т г 200 СЕ Е Пд ня рення, о й но о 75 2 З п А НН ж Ж 103 В ут тити ко 5 т я5 020 Доба
Фіг. 8Б
ІНС ймуногістохімня) демонструє ефекти комбінації на пухлинні маркери проліферації і апоптозу їз Ксенотрансплантат МОСС ССС 00 КнАЗНОАЇ 0 сос-0973 5 мож ОВ о е бОС-0994 80 мог Циклін 01 Іо ШЕ ШИ в 15 зв ЖК аа й й в . ШЕ, в з 2 29 ; се: ЩІ т ща м МЕМ ЕЕНК МЕК ЕКНК
Фіг. 68 Зо
ІНС демонструє ефекти комбінації на пухлинні маркери проліферації іапоптозу о Ксенотрансппантат МОСС ССС 01 соС-0973 5 мок СЮ ее БОС-О9ВЯ ВО мкг Кв Е шен з За- шк ше
З 1.0 ! о ще йо 204 7 до 0 Я «
її. і щі . ск Ж 40 . в шк ї-
о. У МЕК БЕК МЕК - ЕК
Фіг. ОГ
ІНС демонструє ефекти комбінації на пухлинні маркери проліферації і апоптозу Ге; Ксенотрансппантат Ме о КАБ НІ 122 С БОС 0973 5 мік О0 о е 0ОС-0994 60 мг/кг Розщеплена каспаза З Ш о що що що ЕЕ їх ! ге Е: я :
Ж. А ! с і | ! - ! 2 10- о в І В. 5 ІД п Яннннренноюнаоньнново ронньнонісно ранньою У МЕК ЕНК ОО МЕК я ЕКК
Фіг. 6Д
МОН Щодоби МЕКІі (2600-0973) я Щодоби ЕККІ (350-994 я СС ПО мок РО СГ ев СГЛСаНа мок РО ОГІ "а ОС ВО ГОЮ мок, РО. ОВ я СОС ГО мою РО ОХ ї вові ; ооо - й М ЕК Тож Ше й р жах нт нен ВВЕ Ух щ Ж Е- МЕ одна дея З х денно Й а 5 МЕ ІБ ке ши: Й що ж Не ад. Е і же: М НЕ 5 йт 15 20 Доба Мт
Фіг. 7А мСі-нНгї 2 Щедоби МЕКІ (50ОС.0623 Щеодоби ЕК (ЗОС-п9О4) -- НОСІ МС «а СОСНИ ОВ м РО ОГО. а ОСОБОВА мон, РО СЯ і ООСОоюзИм РОЮ ЯЕоаля: т. «, рі щ ЩО І І К КІ і ЕЕ ак М оо - "ж ХМ . 00 ри 5 к Сон Вели о себто ща | В лей ся 2 т й 500015 020 є ЩО диня и шен чакр ше ПИШИ Фо 243 І ЕК Не о ТВ о доба Ше й
Фіг. 7Б
МСьнОї2а Періодично МЕКІ (502-097) я Щодоби ЕККІ (2300-0994) ГМо- НосмМеї хе СПОСО ОО мою, РО, С) за БОС 00735 мак РОСОЮ А СОС НОВ мкг, РОСОЮ 1 АвОСТЛ дома ОО. ї вОгН о шо 800: Кк щі їх і що в і г щ о де ї ЖК д-Я я - Ж г: й с-З , До шк: І їЕ си са в ятне, 0 їй 1 18 в ел по Оз Е ше: зей с: ік шк Я Є зді Ши бе і й в а в ча 8 020 Доба
Фіг. 76
МЗС доао Щедоби 0С-0973) Щодоби Б5ОС.0994) (9- Носій «(МСТІ іа сроовтзбмюРО СЮ) і-нан СІК КК МИ РО НАС ! о сОсоютз(мРО СЮ СПОСО м РОЮ щ- 000- е ЩЕ що во. р Ж ! ві сх с З В й ї зе 500 Й і - р - «Ю- й І чи КЕ : р зла сВ Це 5 10 15 я же НИШЯ см: Ж нн Ві и дет о з в. шк 3 з- х 4 В, ник ананннни мо винні мне они: ання спочинку ; Лоба ;
Фіг. ЗА
МЗсСсЕС дБА Періюдично 5500-0973) ж Щодоби 0С.-0994) я НосйІМСТт 00000 де СОС мох, РО, ОЗ) я СОС ЛОВАЦВО мок, РО, СЮ) «ке СОС Иа мог, РО, СЗЕВ СЕС С мон РО СВ Я : ж яра. ЖК, й «- ВО: й Ж ! ре) ве Ї | рай Б00- ке: рсяя ! и - 400. ди Б щ ай | - плидлвлиий зд ник св о 5 10 15 о «в 104 че кто я 10035: 20 ; Доба кн в,
Фіг. Б шо тп їм Же . т я їх - г |» те не у Ж ех ж б'яю БЮ кт вод Оса ВЕК Ба б. оо кова гц В Є ОО Її» ЕК ЧЕ и Ку
З. сф -- З С; ст у г 14 ет ще ас Б, шов Бон щ кава Рош ж т ОО Щеня Ба б м С о Ж сожевов ох « ка удехше д 8 ЧТ ЖОВ с я ше Ен Б Ба о ОО а ок Якою кор о Б ха р оф й в ОБУ бе о вв кю т (З « Ж Ж ОО » Ж ь с їй ж КИ и я ть зн БОЇ в ! щи ше ше Ши не я в ок щі Фі і й 2 3 т м і о Н х ІЗ Я і и с ши ее хх х ЖЕ х "Же ши Ше ШО Ша і Го | З ї ІЗ ооо товневвя нн ооо йо ВОВК МЕ З ж ше ше чи ще ще ше ще ВО ши ши шо и ШИ -- в о о в ФО | шен несе а А і ай ШИН м ше маш що ши ше ре ке о Ше яко ; ! я - и ши ша ше пе ше роя ше шк ще х г: | -шж : ! нн нів зни (Фу; ж ще ше Шин 5. Б м і о Ж ! паї в шо ой шо їй а ак 1 З з і СЯ жає ' ЛЯ: ШК х к я ож 00 х ох бл до а - Е ої ши. - г 2 нн: ниви нн шви шини нн ин ни шини шин ще и лиш ни ши шин и шк -у Ше ш Б З ох | не ВШ Я ШИ В Ше о іа : Е: : т Ком и вон шк че Б-Я М ни о ШЕ с ШЕ ; ж ел я Ес и РН СН М НС бо желе ше и Ше и ел Ше Фу х т Боже ! шк | М що ен рення : нин зем пня мин нин о вк ж шо що Ше Ше ши ще дм юю | ше) т ювз юю вм т шили нини шишок о ще: Е 5 ши ши Ше ши ше ще "и ши ши | | ше 8 Е | ше нини ни пишних нини ви ши ноя т: що КЕ ШО Ф с щ шо Її вів вк (ек зн В ж ши и пон я и нн а Не ! : М: зл ї чу Же, С. с ІЗ : Е ! ї я - т-- | і шк ник вин нн пн нн ккнкяннннннкфеннссе НИ ЗИ гееененрнкнн, сенси На ІЗ Я Е с ш'Єх г Не є-і | су чЗ ю а же з І Я І: тА -- ПЕ Е. (вм сві ши НН СВО
Обробка кобіметінібйом я ЕККІ моделі СЕМ РОДС з мутацією КА ВА ПВ ККАБ НО, вів О Р рук СВК) ВОЮ че 00
Ж. І , У З що С шЕшЕЕ ОО ЦИЙ НА/В з й й п - В і ше Б шь са ї. Я зо ЗИ, яв я, ев в п ЕЕ | С З й АС МІЙ ше ще Дт девонт з ШЕ ; що ; Носій Коб СІ-ОЗОЯ 0 Комен.
Фіг. ОА
Обробка кобіметінібом їж ЕЕКІ моделі ЗЕМ РАС з мутацією ККА5 Зо ун В й ек ее Гемцитабін 3 ї ХУ : с. оце Я ши еба Кобіметініб І ш ЩА. -ейщ СЦІС-0954 | щі в «йе Кобе-дпо-0983 ХЕ їх З ї х. кн кв ж жк га їх, міх | с Ясен ї у | щі З | ЩІ ШИ. Ше Кі : Я о бя 0 щі Е х Ї у Дек Ф В : Кз | ШЕ ; шо ї- : щі ше о : ; . Я- 5 . її | СЕ: ї о у сети г я 924 о, ще шк ші І шщ. як ї ще зх се Ї г 0 с а В 10 Час (тижні Обробка Медіана виживання Носій (п - 3) Б МЕКЕКкОоСіматінюів - У 4 ЕВКНОСРЛС ОА п - В 2.5 МЕК - ЕК - 1 аа . Гемцитаєтніійп - 10 кі х
Фіг. ЛОБ вою не ! МИХ ; Е кре. лазав ; КАВОЮ ВОАС порох - Є пла» ! т ний Кобіметінію З восові сані -Я- врода ле ЛК ; Ши Здя ое-йдн-- КОбіметіній я Е ! "в шах сро-бове Е КЕ: - ; шик - Йчх !
х К. зе Ж як «З : ке 5 КЗ | я Е 200063 ши їх . ж о. й че ц . маша Зростаюча конц. дози
Фіг. 11А б Ех т - ож ге що їх ШК Й Бо С с с ку срой с се с- в 85 ав ай с, ген 4тод й «Є а : щ де с с НИК Обробка б ай ба Р МЕКМО С кан як со КН ша о ОО В'ЕНКАМЯ ес» зве Й не зак вроовякК жк со век І сзвовав 00 Циклін Б1 фен шення о ввідштеттття ш- о ЗАРОН зро
Фіг. 116 ді шк «т ШО (5 : -ооьк Ж : У о 0 пото з х 9) пнннлтлтлТлтлтТлт/тЇиишишшм ам: | п зна ами- ля Шо я БІ с и Мк «а вах. й гля ї ке «й Н ! ши Шк й м ШИ зу шк ШЕ ШИ о: ті : І! і еї ря г : Е (З е- датків й З | С т » ай 5 0 у а в ме БОНН; 5 г» вх рда ж ши ШЕ Не М, со Я ІК 00 є | оц й я ди є Ки а в Шоу НЯ ; ; ї і Кк ;
г. ю м С о ге ЕЕ Ї | ї Кз З що | | ж ! ! 2 | | : й Я Е У жан щ о що що м ща Ц га У га : - С Сак ве чЗ е- і сеї ї- У ся З т зе ех че В . р ние ех Не Б б б Ще ГЕ: «7 що и Гу ; я Ко Її - Ше п парами кожи Еш и: ге. ії пи о ; з с Й ре я ГІ Ге а МК: и ! св са ; па Ще | я оо а ше М Я ж яю Й Й ей | ї 7 Е А ж ШК 4 | х Ще. г ! Мо | Би о ши ше я ж к- ше к-ш се оз в що с Г39 іо ї- Не: - (3) Ци ВНИХ (здали ЧЕНО і лі янкатеян ДДВЕТУВНЕТЬ ОК ОЄДО
НЕ. си шен рен ВО 0 ш о хі | шнннннюи ТВО лише жнннни БО ОЗ З ад | р- «ооо и у сн ЗО ЕІ ерогї І с З же теп ОО І ще 1- пе Й ок чДь Мн р ни яння и в тн» 0 паб 004 пов 0080 ол вро-0973 мкм!
Фіг. 13А нСтТі16 85, ння ре не пеня ЗК їі І яння ВО ше и фан. ТО че 5 | дл тнє КЗ дей ца Е | яежекєсся НОВ - и і ! кл че 3 | рі | Ме о а Кен ОО сх фен ше Кк Е; спктяннн, скнннкнння А АК М х: ра х ЩЕ ши й що АК що йод? о0ж ов 008 0002 сос-п975 мкм!
Фіг. 13Б
Ефект А, 00 000-00-00 иа и ЯЮ чіиззй и лу ; /. ни НН ни / в / 0001 1001 и-99 / а ДУ В3 5 лава ШІ 8 а 83 «Дня Я, «і З ее г Я: Я: і ях НЕ: р шшшшш у // За / ща / і / /. ні 0о. 28-36 КІВ вв ВВ иа Й и во ИИ и-93 й -98 пенен е асан лі Г/Л Д / /4 і ! де - ша: ка В с знане вис к-знн нн ж клин зи; фунти на ооо - 5 же Би спиш / м ли ше У я са 05 415 | 1-88 ще-Вао лавр кози Ах ЩЕ Е: З | й Моя ее ШИ ЖИ "и/или, ий М, КД т в 4 Й ях ) дош є. є. КЕ КУ Е й . ї о 0-18 я 0-74 и 7 ав А и а9 й тра З Я пн ло ШУ Е Зк і і ЩЕ щи З зе їх у хи оояулх ж зар й З і і ; 03 0 | 4 шум ки ок З ШИЯ, М, ДИВ я и ! | ки НИ У пики жений т Я ї и жи а у і : Її Е й і 4 ДЕ: КО - ; : д ях очка і ах й | 0 -й др а 778 шу уд ШИ ВИДИ, я Е ди п за и ро РИ ій ПА Її шишшши -5 МО МОВ «в д-аДт 442-740 ио4 МИ 8 10 Ії З ик с ФМ окон Мі Й іі як 6 Я «190; ! З о Е що АВК е х й "БІК рий ЩО ГД! Р х ч ек З зт КЕ що є) іа ЗВ піз па 1; Ві 3 375Е-3 оо обоз 0125 0312 1 З 125 ОС-ОЗУЗ (МЕМ
Фіг. 1365 -1
Модель В 8080, - ВО нн В «Дан а НІ Ли я 190 й А КА ш жи ре " й Кк Ж ЗИ їй Ї х з евансннння ЦІ зом ям У ЗА ЕК я в т фе ста вну т. ногами З - З : Я че пе Ї й " и ака НН З Ж 8 Е Де Е Е х Є З а ї ай ох Б. пише А В ж у меш ак мс и -взите ва ВИ ій л, 100 й шк ше не соя Ши сі // ; /, / І о ес и и ем и ий 4 фе 5 в и ва. й 0-8 я 00 і і й сб а а нен ШИЯ : жк й Е ж 03 8 009 | 4 5 ай таВо 75 ТВ, я ;-100 и / | Мини / «Ух ишишшшш 5 0 Б НІ ! | і і Он НЕ у о с нн ШИРИНИ ШАНИ га ВН ши: ши ни нн не КІ ше ж ий пай З і ІА ИЙ и с я АН й 4 й у ї г з г Ще у Що г У ще Ти Де х ОЙ 5 тах В ЯК В : | -З ДЕ жд -й. і КОХ ВВ і мишки Я ЕК 5 Кк в о КК Я З З Ж г й ке, я ншш шиш ши с ии ва кі у 1-00 в я дення не ДИ КИ Мой І: Б Я сих Га С и й МОВ чи К: Н х: ОО ще І шк р зва у Ве т еВ Що Зх ї 0 12563 ЗТщЕ.3 03 бо 025 03 Е 3125 -5Ис-о5У мкм
Фіг. 135- 2
Надлишок Й В ще ДЕ кас ше: ше ШИН с и ми ня КН НИЄ З й ; і р ННЯ ДІЙ | : се Е сш я ка. м ик нн і ТИВ С В: НН ГЕ ШЕ їз -- ШІ де а ка ДНІ В З 03, ж ШК и ин ки З ке ни Шо у ше ше: г, | нний са | М вх ом. оо-4 довший В 12 й | ОН ПАНИ і і 0 1 20Б-3 З 7ОЕ-3 003 поз 01955 0319 1 ал25 5ОС-0975 МКМ)
Фіг. 1556 - З
Шасі й ХЕ дк УТ ЗЕ ? ще ше М о ОО ЇХ ; яв ще в о Е рероаттттнх Пт а Є я ХЕ ТЕКИ МКТУНК МЕМЯ і Е. КАМ ОКОХ НА ОКО «ТО СО «МОМ Око Поу ке ке: с КО щІй КНУ ОО КАК де ри ОКХ АЮ КО СІЙ їж Душетеих КО З КО в МІНА я вно КО Ж я МК ее ой ; ЕЛЕ, ша. ООН Жов п о о у с жити в КЕКВ НК у Й Бе З ТО я о ШИ тт мли ФК нні і щщ. Б 5 ОД і й йо в че ДЕ ОВК рес й Я Ми г КК УВК ХУ ЕЕ я і лих ев -й. й пд ; Кі ї Ше І се 0 ща ки у ок рек Я си ОВК КМУ ЛЯ СТО НЯ МЕ й А, ї і Ки дн СА Бе во В КТ вАЕ КЕ ; ; й У чі МОЗ СО ВХ, С Мас КК УК У Ти ЦК тіки нки У Її ЕК вет емо ес вк й . дян й ПЕ І а ИН НО с її - Зх с -е а у оо же - бю с Сад тека ВО о УК КО ОК Зо НЕ ВУ: з ОО КЕН т ої і Бей роя окт ПО 5 о пе ій ПОЗ ОЙ Ох Я й я Є КК Ух а ох ИМЯ ОХ АКА ни ДИКО Ко ой У ! ув, 2-4 Кк а у о о : Б г. ї , й ки севавиевя ОУН | и а ЗО: МО Я Е; ери ТК я Ох і 5 й Я КО ОН гине ди я Сх п ї Кееся уко Ка шк пня дек Ж ДЯ! урн Ве кину ї осн в СОЯ 5 Ве «КТ а: й У Я жк х І Ванна А я ща ГЕНИ -ВЯ ЛІ. З ме а Її ЗІ Ат, Затия ох за МО осв АХ ДОА й І ЩЕ й Ко ВН М Уа пк КЕ сх о ДОКИ х ЕК З Ж Я що і ! х та лі куки дея не Ох Ки г / Бе ВО - у | ше нн АБО: а у МеВ й» У
- . ок Ся, «Б о І 5 ями Сн си Я Жені гл МЕ; " ; Я о ПЕ ке Во о Бан а СЕ ОА Ко Е, я ч г ВОК но Ко ї о гіх В о ЄМ оку о кофе ї гу Я ех ит єю ее Оу ООН ак ЕК ди ще КК: ЗХ ІКЖКИКО Мем КК ХО ЗККЮХ фехомо в | ринок о еВ до НН. о РОШЕН у Й піні о КО який ЕК ЛЕЗО я УК ж а ек ММ Ка ГоКАЖЯ З па | и НИКА рани й: КОКО Ка ІК С С щу ЕЕ п г ей як ди ту рин а. ворення щем Б та ин ще Ь ї Киян дя Кк: Бак ОВ УК 6 Бо ще ТУ т ї я Мокра Ех У ос КК ооо ОО ОКО Ко ХО ГК ; ик за ву З а щу ший 0. Б с ши Я «Те я и нення г | в Ки по Ж ши а Вані СОНЯ и ДНУ В 01, | а еще о ві лив ил ва
М. Я «5 Х би з ева КУКИ ККЗ З пн й й й у гл Ше Я Ше» дики иниь сеї в Й у я; ; І о - рий ей о В АК ВК ОК й ; ЖЕ І: ; МЛК а де БА ВЕУ | я я ї З же Ед х -й Кї: Мн п пет Ї Фоссосюєююююсюсь і дак Ки: се: Я дея МК ке зви ма соску шини шини ЕД А 8 БИ и ЯК : З Мине СК В сах с ке зва а МЛ -В4 Б я ОВ -ї8 С ня Ко я о сфе Мою и - ї 07 ж прий Я их ВК ія В За пн Бе З Я бо М Її З и кар По жуню к-й о; Усе Моб, о З бек Ве - ЗК од виду ки Я соофоостой ООКеНоЯ же у | нини ит Поне ве нн п сей ши Я Е С ВН ДК ух. Ка ях СТЕК КМ о: іх чу ЩИХ: ! в хе св п й, ОВУ я ов жа х М й о у , уко Я Х и є. "НА МТ, ЗК ОнеИ Се В же УОЗ ФУ: З ЕФ Її Я ж иОННО ще ЕМ хе МЕЧ и КА КЕ "В УК,
4. |! « Ї |; соЖеетюм в я СН ВОК Бе Б "ШК са «В ; рий ЖОИ В уко Ех же: Сич м 5 а -3 Я ї З А КУ й кл, «5 бух кре че ОККО В, п, Р. Е З Я й Ко ек я ши я ща / я | їх Кох «КО мив Кк І ж ж ОКУ ї. й ! ) Ме юн ж «ва ке КЕ її ке 5 й ях, 5 Я ї" я Ки си ; ДЕ Кт, кб У ОО Ї й Я, г вв ай й ; З ) режи Киктх У ж че НКУ щх і і є Ей Її со Х Би с екс, АК ак НА Ук ВН ВУ З Ї а х дя Ге и й ік, якодікя С З ОБОХ Ж ; вх ї сш ше ИН я кре нвеок сну, Її кю І ї ії «й М; ий Уся ВК що пек ОК: я Ж У Є; г
Її. | Бити ж. я ок сн ших ян шини Я пн г не Кох «БЕ РОК Е Я Б іонні рііжкнк й пиииижажижа Мн йно в НН ак я Б ох 4 Е Є нені. В ши нн - СИ Ки не Во ин ї г пот оБЕЗ Од нання ми чи дея я тя и ОНА АИЯ пе ЕЙ я пою: У, ж - . вань ви кь ек й К З і с ОГО І а: во а й х ЩЕ ве р г. ї пл їз 5 шк ни З 4 МЕ ах й скжжжийх, щі 7 в шнтнннннтя (МКМ)
іг. 13Гг- 1 нин петтиттр моде пера СИМ дель за зе Ж, З тк Те АЮ. р КЕ я о кий ря код МА, СУ ЕНН ки Мч Ес, «вв ик піни тест тре З АВ ОН ДОН ех а ЕНН, Кк -; НЕ Я и АНЯ Я МК ПОС с сю лке ще Я щу іх я й ев вай пови - шк г вх и з евтесінднні я пк и А повен пе ТЕ ши зе ря що ли с, зу Ко «дО жа ИЙ я вра г ПІК ні р нонісняст г не ТЕ Ач ще С Й ва я Кі ; ее потугу В ПЕДА о ит ких з ІД ЕХ Я ТЕО ои дО -В4 А - преаат ОБЛ ОЯ ко КО за у - аби Шойех ге ОН «В ББН по Тит, ПІВ бе йо дай теж п Й й Шо В Я жк і липи Іо в я ей и ВК ок, і, й Я ЕК Бог т КН Я ти у ав ост «й ; ов АЛІ ОО «пику кни ! КЕ "Я у Ж ї » овен оюну й є СЕ УК МУ. хе Км Ей 5 / РА: зві Як Ле св івана ук ци й Як порно, ; ВВ єства дек оне ОО зи «ВЕ й ОА за жи Ки ших ех ТУ шо Я У я ЛЕ й є 7 Х й - Е ши Ок й Яд ей ек му ОЕМ о Й К; СХ й я З ов й Я -ї4 пд ше -ї і зн З; й В Е; ; вих ШИН у, щи я пло пи ве й как и ху: К; ; ; ша ня й Бен я ША Ну ке НН ще з зай в З : ки анна ж с ЩЕДН пі -84 і г ДР ЯЩЕ щі Е З рення сини КВ о ; Е ж й - х -18 ук в Ди ЗСУ ддчнн Кох й й Її Ех ре БТ КУ якою я що Ки. секр я й 7, й ще ; ки вих Ні ИЙ З ж шк древо НЕ с ї Га и їж й; Зх Не НИЙ. З й і М в ше нн а го ЗИ и ЖЕ й | «ЛУ КЕ 4 Й Бен и Пт у МЕНА» я Я В КА ТЕ с 1 1 ИН ВОХ ОН: І Б ? ше за ж З з Е ї З ой ст і ма цх ПО ХВО: г Марно х Р я З док пи в що. і ка ж і; я я ик ях Зх ЗОНІ ТЕ ; х З у и. Х гу «і ПІНИ пк Я т й з Е КЕ кзмаанк ак З Кк , у Ка в ТК СУК й ОШЕЗ туї Е ; ЕІ Я і оч бро си я й Беж НИ я. : -і ЖЕ: З е -й р унів» рода Ка ОН Е - г. ЕК з і. бу ; Ек КЕ ШЕ Я); й : ; м «а є Мини ху я ДЕ ЯК Ж й й я. М. Я -х ШУ пк УК: ку й ау х ї К Кк. Х ки См я БУВ -ОВ Е Кк ; вах звовова мами З а я у рови и ря с н В й Ї а; ли в: Ух І Є ЕЗЖЕМ БЕ Б, с; г; : Є. ОЗ в Ї У де дк НО і ном. й г: КУ й й І до Ше Ек КОКО зи ях Ж. : ; Й і З лай Я. сві З в ее (се що й К ї КЕ й ; жк і рих ОТ КО ; ЖЕ ; і З й ши й «5 вже в. х ї реч й З Су и ГКІ ЧК КО: ї у ї. КБ адкляй па ; рен я Ва ту Я Н БЕ Кі | я : З Я: З рокі оідхе мк Со БОКУ - пе ЕКО З ля Кай дай, пий БМВ ОК Й ; Я А й. й : - нини жа ЗК пу як я ше ! я в ях 0 0 ШИ : Я ж ; вх ти я Я УК МО ; . - а: ОЇ жд пря «Аг ЗОН КК й й по фаоданя Й з с ї ; ТЕН Но і БЕ ям су Ка ЩЕ. ду ших о я КК г, А У ех КУ: й З К 7 ІК п дже ОД не сн ; ЕЕ: ; Е ОХ о; дих зі хай КМ КО соожноах и З У с 4 о х ря й ее ; Не г ие с СЕЛА КОКО й ; п ! - ик мМ Мик ши ЕК є ЗО ГЕ: 4 і й ПИ ПІ сх Й о ча У пе Кк . - ще лих: хх а ке « я її З те я 5 ви рай ж ких і у пні с Є і І ; Е ФОН и й жи я що тр с ВК Ме Е Ж р я є. оееесееедедеечех сок, ак, ий, дя «а ОЙ -у ХЖОХ Я З ї: ; нан У зн зн г попи пиия Ян й ; мини ; м 4 ВЕ ще ососео ев орей пд текнх Карел ОЙ -а й Ї з Я Й "ВК я я ас ксоютн Ка Ми " й ї Ко і пін алое тенімня ЕКО ; З ; же ВІ: й АРХ МУК Е. Е - о ос тжй Мох ШІ хх с-о0973 (МКМ) СЕ І 13г-2 тя
UAA201603616A 2013-09-05 2014-09-04 Комбінація інгібітора mek та інгібітора erk для застосування в лікуванні гіперпроліферативних захворювань UA120423C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361874206P 2013-09-05 2013-09-05
PCT/EP2014/068776 WO2015032840A1 (en) 2013-09-05 2014-09-04 Combination of a mek inhibitor and an erk inhibitor for use in treatment of hyperproliferative diseases

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA120423C2 true UA120423C2 (uk) 2019-12-10

Family

ID=51492945

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201603616A UA120423C2 (uk) 2013-09-05 2014-09-04 Комбінація інгібітора mek та інгібітора erk для застосування в лікуванні гіперпроліферативних захворювань

Country Status (21)

Country Link
US (1) US9532987B2 (uk)
EP (1) EP3041471A1 (uk)
JP (2) JP2016531139A (uk)
KR (1) KR20160048807A (uk)
CN (1) CN105517548B (uk)
AR (1) AR097556A1 (uk)
AU (1) AU2014317119B2 (uk)
CA (1) CA2916619A1 (uk)
CL (1) CL2016000042A1 (uk)
EA (1) EA034872B1 (uk)
HK (1) HK1218072A1 (uk)
IL (1) IL243251B (uk)
MA (1) MA38827A1 (uk)
MX (1) MX370417B (uk)
PE (1) PE20160529A1 (uk)
PH (1) PH12016500270A1 (uk)
SG (1) SG11201600989VA (uk)
TW (1) TW201605477A (uk)
UA (1) UA120423C2 (uk)
WO (1) WO2015032840A1 (uk)
ZA (1) ZA201600091B (uk)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT2820009T (pt) * 2012-03-01 2018-04-12 Array Biopharma Inc Inibidores de serina/treonina quinases
BR112016012844B1 (pt) 2013-12-06 2023-01-10 Genentech, Inc Composto e composições farmacêuticas
EP3089980B1 (en) * 2013-12-30 2018-01-31 Array Biopharma, Inc. Serine/threonine kinase inhibitors
WO2016162325A1 (en) 2015-04-07 2016-10-13 Astrazeneca Ab Substituted 3,4-dihydropyrrolo[1,2-a]pyrazin-1 (2h)-one derivatives as kinase inhibitors
WO2017080980A1 (en) 2015-11-09 2017-05-18 Astrazeneca Ab Dihydropyrrolopyrazinone derivatives useful in the treatment of cancer
ES2780650T3 (es) 2015-11-09 2020-08-26 Astrazeneca Ab Derivados de dihidroimidazopirazinona usados en el tratamiento del cáncer
CN105330643B (zh) 2015-12-09 2017-12-05 苏州明锐医药科技有限公司 卡比替尼的制备方法
CA3018406A1 (en) * 2016-04-15 2017-10-19 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for cancer
KR20190039951A (ko) * 2016-08-23 2019-04-16 제넨테크, 인크. 췌장암의 치료를 위한 병용요법
NZ754020A (en) 2016-11-25 2022-11-25 Genuv Inc Composition for promoting differentiation of and protecting neural stem cells and method for inducing neural regeneration using same
JP2019019094A (ja) * 2017-07-19 2019-02-07 学校法人福岡大学 変異ｋｒａｓ関連シグナル阻害用組成物
AU2018329925A1 (en) 2017-09-08 2020-03-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Diagnostic and therapeutic methods for cancer
US11395823B2 (en) 2018-01-09 2022-07-26 Duke University Topical administration of MEK inhibiting agents for the treatment of skin disorders
WO2019158579A1 (en) 2018-02-13 2019-08-22 Vib Vzw Targeting minimal residual disease in cancer with rxr antagonists
US20220265584A1 (en) * 2019-07-11 2022-08-25 Emory University Combination Therapies for Managing Cancer

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA025871B9 (ru) 2005-10-07 2017-08-31 Экселиксис, Инк. Ингибиторы mek и способы их применения
AU2007286807B2 (en) 2006-08-21 2013-03-21 Genentech, Inc. Aza-benzothiophenyl compounds and methods of use
ES2376771T3 (es) 2006-08-21 2012-03-16 Genentech, Inc. Compuestos aza-benzofuranilo y métodos de utilización
ATE511509T1 (de) 2006-11-30 2011-06-15 Genentech Inc Azaindolylverbindungen und anwendungsverfahren
ES2703723T3 (es) 2006-12-14 2019-03-12 Exelixis Inc Métodos para usar inhibidores de MEK
EP2164850B1 (en) 2007-06-12 2016-01-13 Genentech, Inc. N-substituted azaindoles and methods of use
AU2008343062B2 (en) 2007-12-19 2013-03-07 Genentech, Inc. 8-Anilinoimidazopyridines and their use as anti-cancer and/or anti-inflammatory agents
PL2222675T3 (pl) 2007-12-19 2014-02-28 Genentech Inc 5-anilinoimidazopirydyny i sposoby zastosowania
KR20100099185A (ko) 2007-12-21 2010-09-10 제넨테크, 인크. 아자인돌리진 및 이용 방법
BRPI0910175A2 (pt) 2008-07-01 2017-03-21 Genentech Inc composto de fórmula i e ii, composição farmacêutica, método de inibição do crescimento de células anormais ou de tratamento de um distúrbio hiperproliferativo em um mamífero e método de tratamento de uma doença inflamatória em um mamífero
MX2010014565A (es) 2008-07-01 2011-03-04 Genentech Inc Isoindolona y metodos de uso.
SG10201402917XA (en) 2009-08-24 2014-08-28 Genentech Inc Determining sensitivity of cells to b-raf inhibitor treatment by detecting kras mutation and rtk expression levels
US20110086837A1 (en) 2009-10-12 2011-04-14 Genentech, Inc. Combinations of a pi3k inhibitor and a mek inhibitor
KR101923364B1 (ko) 2010-11-23 2018-11-30 애브비 인코포레이티드 아폽토시스­유도제의 염 및 결정형
MX339873B (es) 2011-02-28 2016-06-15 Genentech Inc Inhibidores de serina/treonina cinasa.
WO2012145503A1 (en) 2011-04-21 2012-10-26 Novartis Ag Pharmaceutical combinations
WO2013020062A1 (en) 2011-08-04 2013-02-07 Array Biopharma Inc. Quinazoline compounds as serine/threonine kinase inhibitors
PT2820009T (pt) 2012-03-01 2018-04-12 Array Biopharma Inc Inibidores de serina/treonina quinases
US20130267517A1 (en) 2012-03-31 2013-10-10 Hoffmann-La Roche Inc. Novel 4-methyl-dihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
CN104363908B (zh) 2012-05-30 2017-12-22 霍夫曼-拉罗奇有限公司 吡咯烷基杂环类
SI2884979T1 (sl) 2012-08-17 2019-10-30 Hoffmann La Roche Kombinirana zdravljenja melanoma, ki vključujejo dajanje kobimetiniba in vemurafeniba
CA2882750A1 (en) 2012-08-27 2014-03-06 Jim Blake Serine/threonine kinase inhibitors for the treatment of hyperproliferative|diseases
KR102204520B1 (ko) 2012-10-12 2021-01-20 엑셀리시스, 인코포레이티드 암의 치료에 사용하기 위한 화합물의 신규 제조 방법
KR20150068956A (ko) 2012-10-16 2015-06-22 에프. 호프만-라 로슈 아게 세린/트레오닌 키나아제 억제제
BR112016012844B1 (pt) 2013-12-06 2023-01-10 Genentech, Inc Composto e composições farmacêuticas
EP3089980B1 (en) 2013-12-30 2018-01-31 Array Biopharma, Inc. Serine/threonine kinase inhibitors
BR112016015235A2 (pt) 2013-12-30 2017-08-08 Genentech Inc Composto, composição farmacêutica, método de inibição da atividade da proteína quinase erk e método de tratamento
RU2684102C2 (ru) 2014-04-09 2019-04-04 Дженентек, Инк. Способ получения лекарственных средств

Also Published As

Publication number Publication date
PE20160529A1 (es) 2016-05-21
MX370417B (es) 2019-12-10
MX2016002857A (es) 2016-06-22
CN105517548B (zh) 2020-01-21
US20150111869A1 (en) 2015-04-23
PH12016500270A1 (en) 2016-05-16
MA38827A1 (fr) 2017-10-31
AU2014317119A1 (en) 2016-03-03
JP2019031517A (ja) 2019-02-28
JP2016531139A (ja) 2016-10-06
AU2014317119B2 (en) 2019-12-05
EP3041471A1 (en) 2016-07-13
EA201690513A1 (ru) 2016-07-29
WO2015032840A1 (en) 2015-03-12
ZA201600091B (en) 2017-04-26
US9532987B2 (en) 2017-01-03
CL2016000042A1 (es) 2016-08-05
TW201605477A (zh) 2016-02-16
AR097556A1 (es) 2016-03-23
SG11201600989VA (en) 2016-03-30
IL243251B (en) 2019-02-28
KR20160048807A (ko) 2016-05-04
EA034872B1 (ru) 2020-03-31
HK1218072A1 (zh) 2017-02-03
CA2916619A1 (en) 2015-03-12
CN105517548A (zh) 2016-04-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA120423C2 (uk) Комбінація інгібітора mek та інгібітора erk для застосування в лікуванні гіперпроліферативних захворювань
CN111107851B (zh) 组合及其用于治疗癌症的用途
JP6889101B2 (ja) グルタミナーゼ阻害剤の結晶形態
JP2021517116A (ja) 併用療法
CN105899491A (zh) 用于抑制shp2活性的1-哒嗪-/三嗪-3-基-哌(-嗪)/啶/吡咯烷衍生物及其组合物
JP6240658B2 (ja) 抗がん活性を有する６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン誘導体と他の抗腫瘍化合物との組み合わせ
CN108495628A (zh) 苯并噻吩基选择性***受体下调剂
US20190388423A1 (en) Combination of a 6-oxo-1,6-dihydro-pyridazine derivative having anti-cancer activity with an EGFR inhibitor
ES2945865T3 (es) Combinación de un derivado de 6-oxo-1,6-dihidropiridazina que tiene actividad anticancerígena con un derivado de quinazolina
CA2887628C (en) Combination of a 6-oxo-1,6-dihydro-pyridazine derivative having anti-cancer activity with a mek inhibitor
TW202021592A (zh) 組合療法
US20140323477A1 (en) Serine/threonine kinase inhibitors