TWI734279B - 抗α-突觸核蛋白抗體及其用途 - Google Patents

抗α-突觸核蛋白抗體及其用途 Download PDF

Info

Publication number
TWI734279B
TWI734279B TW108144018A TW108144018A TWI734279B TW I734279 B TWI734279 B TW I734279B TW 108144018 A TW108144018 A TW 108144018A TW 108144018 A TW108144018 A TW 108144018A TW I734279 B TWI734279 B TW I734279B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
seq
antibody
xaa
amino acid
synuclein
Prior art date
Application number
TW108144018A
Other languages
English (en)
Other versions
TW202039560A (zh
Inventor
強尼 尤金 克魯伊
曼蘇 盧 哈亞希
波 馬
唐鷹
吉讓 盧
Original Assignee
美商美國禮來大藥廠
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 美商美國禮來大藥廠 filed Critical 美商美國禮來大藥廠
Publication of TW202039560A publication Critical patent/TW202039560A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI734279B publication Critical patent/TWI734279B/zh

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Abstract

本發明係關於抗α-突觸核蛋白抗體及其用於治療諸如帕金森氏病之疾病之用途。

Description

抗α-突觸核蛋白抗體及其用途
本發明屬於醫學領域。更特定言之，本發明係關於結合至α-突觸核蛋白之抗體、包含此類α-突觸核蛋白抗體之組合物及使用此類α-突觸核蛋白抗體治療突觸核蛋白病之方法，該等突觸核蛋白病諸如帕金森氏病(Parkinson's disease)、多系統萎縮症及阿茲海默氏症(Alzheimer's disease)。
α-突觸核蛋白(本文中亦稱為阿爾法-突觸核蛋白)為140個胺基酸的突觸前神經元蛋白質，其在神經系統中大量表現且在生理條件下優先定位至突觸前末端。α-突觸核蛋白已與稱為「突觸核蛋白病」之多種神經退化性疾病之發病機制有關。此等疾病在神經元(例如帕金森氏病(PD)、路易體癡呆(DLB))或神經膠質(例如多系統萎縮症(MSA))中具有由聚集α-突觸核蛋白構成之胞內包涵物的病理性標誌。在PD中，在細胞體(亦即「路易體」)及神經元突起(亦即「路易神經突」)兩者中均觀察到此等α-突觸核蛋白包涵物。在阿茲海默氏症中，約一半患者具有α-突觸核蛋白與澱粉狀蛋白及滔蛋白(tau)之共病理學。
除此病理學聯繫以外，已在家族性PD中發現編碼α-突觸核蛋白之基因(SNCA )中之突變，其通常使得α突觸核蛋白具有更高聚集傾向。此外，SNCA 之雙倍複製及三倍複製與家族性PD相關，表明α-突觸核蛋白之過度表現可導致神經退化性缺陷。
α-突觸核蛋白之時間及區域擴散已與PD中之疾病症狀進展相關。另外，已報導由鈣蛋白酶及/或凋亡蛋白酶裂解產生之α-突觸核蛋白之蛋白水解N端及C端片段在PD及DLB兩者之患者之路易體提取物中上調。此外，活體外研究已顯示，α-突觸核蛋白之C端末端之逐步截短賦予形成纖維化病原性聚集體之更高固有能力(參見例如Wang等人, (2016) Proc. Nat. Acad. Sci. 113(34): 9587-9592)。綜合而言，此等觀測結果表明片段化α-突觸核蛋白具有造成疾病進展之速率提高及患者預後較差的可能性。因此，結合至α-突觸核蛋白之抗體可在治療突觸核蛋白病中具有治療功效。
α-突觸核蛋白抗體為此項技術中已知的。舉例而言，美國專利第8,609,820號揭示人類化抗α-突觸核蛋白抗體9E4及治療或實現預防患有該等疾病或具有該等疾病之風險的患者之突觸核蛋白病或路易體病之方法。然而，與α-突觸核蛋白免疫療法相關之當前策略主要採用靶向抗原決定基之抗體，使得預期抗體不結合及/或識別鈣蛋白酶及/或凋亡蛋白酶片段化物質，從而可能提供次佳功效。
因此，在此項技術中非常需要結合鈣蛋白酶及/或人類α-突觸核蛋白之凋亡蛋白酶產生物質之抗α-突觸核蛋白抗體。由本發明之抗體識別之獨特α-突觸核蛋白抗原決定基能夠使抗體結合全長及片段化α-突觸核蛋白聚集物質兩者，且可能在突觸核蛋白病(諸如PD及DLB)中賦予更大程度之疾病控制。
另外，本發明之抗體為高親和力抗體，其具有可接受特性(諸如活體內PK及免疫原性)且平衡表面靜電電位、增加熱穩定性、減少pI及/或降低與非抗原蛋白質結合。
因此，本發明提供包含重鏈(HC)及輕鏈(LC)之抗α-突觸核蛋白抗體，其中該HC包含重鏈可變區(HCVR)且該LC包含輕鏈可變區(LCVR)，且其中該HCVR包含HCDR1、HCDR2及HCDR3，且該LCVR包含LCDR1、LCDR2及LCDR3，其中該HCDR1之胺基酸序列由SEQ ID NO:1所載，該HCDR2之胺基酸序列由SEQ ID NO:2所載(AISGSGGDTYYADSVXG；其中位置16之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸)，該HCDR3之胺基酸序列由SEQ ID NO:3 (ARGYGMDV)所載，該LCDR1之胺基酸序列由SEQ ID NO:4所載(RSSQXLVHSDGNTYLM；其中位置5處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸)，該LCDR2之胺基酸序列由SEQ ID NO:5所載(YKVSXRNS；其中位置5處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸)，且該LCDR3之胺基酸序列由SEQ ID NO:6 (MQGTKQYPT)所載。在一實施例中，SEQ ID NO:2之位置16處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸。在一實施例中，SEQ ID NO:4之位置5處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸。在一實施例中，SEQ ID NO:5之位置5處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸。在一特定實施例中，SEQ ID NO:2之位置16處之Xaa為離胺酸，SEQ ID NO:4之位置5處之Xaa為絲胺酸，且SEQ ID NO:5之位置5處之Xaa為天冬醯胺。在另一特定實施例中，SEQ ID NO:2之位置16處之Xaa為麩醯胺酸，SEQ ID NO:4之位置5處之Xaa為天冬胺酸，且SEQ ID NO:5之位置5處之Xaa為天冬胺酸。
本發明亦提供包含HC及LC之抗α-突觸核蛋白抗體，其中該HC包含HCVR且該LC包含LCVR，且其中該HCVR之胺基酸序列由SEQ ID NO:7所載(XVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGDTYYADSVXGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGYGMDVWGQGTTVTVSS；其中位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸，且其中位置65處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸)，且其中該LCVR之胺基酸序列由SEQ ID NO:8所載(DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRSSQXLVHSDGNTYLMWFQQRPGQSPRRLIYKVSXRNSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQGTKQYPTFGQGTKLEIK；其中位置28處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸，且其中位置58處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸)。在一實施例中，SEQ ID NO:7之位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸。在一實施例中，SEQ ID NO:7之位置65處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸。在一實施例中，SEQ ID NO:8之位置28處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸。在一實施例中，SEQ ID NO:8之位置58處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸。在一特定實施例中，SEQ ID NO:7之位置1處之Xaa為麩胺酸，SEQ ID NO:7之位置65處之Xaa為離胺酸，SEQ ID NO:8之位置28處之Xaa為絲胺酸，且SEQ ID NO:8之位置58處之Xaa為天冬醯胺。在另一特定實施例中，SEQ ID NO:7之位置1處之Xaa為麩胺酸，SEQ ID NO:7之位置65處之Xaa為麩醯胺酸，SEQ ID NO:8之位置28處之Xaa為天冬胺酸，且SEQ ID NO:8之位置58處之Xaa為天冬胺酸。
本發明亦提供包含HC及LC之抗α-突觸核蛋白抗體，其中該HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載(XVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGDTYYADSVXGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGYGMDVWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLX；且其中位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸，其中位置65處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸，且其中位置441處之Xaa為甘胺酸或不存在，且該LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載(DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRSSQXLVHSDGNTYLMWFQQRPGQSPRRLIYKVSXRNSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQGTKQYPTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC；其中位置28處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸，且其中位置58處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸)。在一實施例中，SEQ ID NO:9之位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸。在一實施例中，SEQ ID NO:9之位置65處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸。在一實施例中，SEQ ID NO:9之位置441處之Xaa為甘胺酸或不存在。在一實施例中，SEQ ID NO:10之位置28處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸，且SEQ ID NO:10之位置58處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸。在一特定實施例中，SEQ ID NO:9之位置1處之Xaa為麩胺酸，SEQ ID NO:9之位置65處之Xaa為離胺酸，SEQ ID NO:9之位置441處之Xaa為甘胺酸，SEQ ID NO:10之位置28處之Xaa為絲胺酸，且SEQ ID NO:10之位置58處之Xaa為天冬醯胺。在另一特定實施例中，SEQ ID NO:9之位置1處之Xaa為麩胺酸，SEQ ID NO:9之位置65處之Xaa為麩醯胺酸，SEQ ID NO:9之位置441處之Xaa為甘胺酸，SEQ ID NO:10之位置28處之Xaa為天冬胺酸，且SEQ ID NO:10之位置58處之Xaa為天冬胺酸。
本發明亦提供一種醫藥組合物，其包含本發明之抗體及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。
本發明提供一種治療患有突觸核蛋白病之患者的方法，其包含向該患者投與有效量之本發明之抗體。在一實施例中，該突觸核蛋白病為PD、MSA或AD。在一特定實施例中，該突觸核蛋白病為DLB。在另一特定實施例中，該突觸核蛋白病為PD。
本發明亦提供用於治療之本發明的抗體。在一實施例中，本發明之抗體用於治療突觸核蛋白病。在一實施例中，該突觸核蛋白病為PD、MSA或AD。在一特定實施例中，該突觸核蛋白病為DLB。在另一特定實施例中，該突觸核蛋白病為PD。
本發明提供本發明之抗體在製造用於治療突觸核蛋白病之藥物中之用途。在一實施例中，該突觸核蛋白病為帕金森氏病(PD)、多系統萎縮症(MSA)、阿茲海默氏症(AD)或路易體癡呆(DLB)。
本發明亦提供包含編碼該抗體HC之聚核苷酸之DNA分子，該抗體HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載。在一實施例中，該DNA分子具有由SEQ ID NO:11所載之聚核苷酸序列。
本發明亦提供包含編碼該抗體LC之聚核苷酸的DNA分子，該抗體LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載。在一實施例中，該DNA分子具有由SEQ ID NO:12所載之聚核苷酸序列。
本發明提供一種DNA分子，其包含編碼胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載之HC的聚核苷酸，且包含編碼胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載之LC的聚核苷酸。在一實施例中，編碼該HC之聚核苷酸之序列由SEQ ID NO:11所載，且編碼該LC之聚核苷酸之序列由SEQ ID NO:12所載。
本發明亦提供一種經包含編碼該抗體HC之聚核苷酸之經DNA分子轉形之哺乳動物細胞，該抗體HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載；及包含編碼該抗體LC之聚核苷酸的DNA分子，該抗體LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載，該經轉形之哺乳動物細胞能夠表現包含兩條HC及兩條LC之抗體，其中各HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載，且各LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載。
本發明亦提供一種經DNA分子轉形之哺乳動物細胞，該DNA分子包含1)編碼該HC之聚核苷酸，該HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載，及2)編碼該LC之聚核苷酸，該LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載，該經轉形之哺乳動物細胞能夠表現包含兩條HC及兩條LC之抗體，其中各HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載，且各LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載。
本發明提供一種用於產生抗體之方法，該抗體包含兩條HC及兩條LC，其中各HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載且各LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載，且該方法包含培養經DNA分子轉形之哺乳動物細胞，該DNA分子包含編碼該抗體HC之聚核苷酸，該抗體HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載，及包含編碼該抗體LC之聚核苷酸的DNA分子，該抗體LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載，該經轉形之哺乳動物細胞能夠在使得該抗體表現之條件下表現包含兩條HC及兩條LC之抗體，其中各HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載，且各LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載，且回收表現之抗體。在一實施例中，本發明提供一種抗體，其可藉由用於產生抗體之方法獲得。
本發明提供一種用於產生抗體之方法，該抗體包含兩條HC及兩條LC，其中各HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載且各LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載，且該方法包含培養經DNA分子轉形之哺乳動物細胞，該DNA分子包含編碼該HC之聚核苷酸，該HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載，且包含編碼該LC之聚核苷酸，該LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載，該經轉形之哺乳動物細胞能夠在使得該抗體表現之條件下表現包含兩條HC及兩條LC之抗體，其中各HC之胺基酸序列由SEQ ID NO:9所載，且各LC之胺基酸序列由SEQ ID NO:10所載，且回收表現之抗體。在一實施例中，本發明提供一種抗體，其可藉由用於產生抗體之方法獲得。
本發明亦提供α-突觸核蛋白抗體，其結合SEQ ID NO:13之位置115處之殘基天冬胺酸、位置116處之甲硫胺酸、位置119處之天冬胺酸、位置126處之麩胺酸及位置128處之脯胺酸中之一或多者處之人類α-突觸核蛋白。在一實施例中，該抗體結合SEQ ID NO:13之位置115處之殘基天冬胺酸、位置116處之甲硫胺酸、位置119處之天冬胺酸、位置126處之麩胺酸及位置128處之脯胺酸中之至少兩種胺基酸。在另一實施例中，該抗體結合SEQ ID NO:13之位置115處之殘基天冬胺酸、位置116處之甲硫胺酸、位置119處之天冬胺酸、位置126處之麩胺酸及位置128處之脯胺酸中之至少三種胺基酸。在另一實施例中，該抗體結合SEQ ID NO:13之位置115處之殘基天冬胺酸、位置116處之甲硫胺酸、位置119處之天冬胺酸、位置126處之麩胺酸及位置128處之脯胺酸中之至少四種胺基酸。在另一實施例中，該抗體結合SEQ ID NO:13之位置115處之殘基天冬胺酸、位置116處之甲硫胺酸、位置119處之天冬胺酸、位置126處之麩胺酸及位置128處之脯胺酸。在一些此類實施例中，該結合藉由丙胺酸掃描測定。咸信除全長α-突觸核蛋白以外，此等抗體可更有效移除***α-突觸核蛋白。
本發明提供抑制吸收包含SEQ ID NO:13之殘基1-121之α-突觸核蛋白片段之抗體。本發明亦提供抑制吸收包含SEQ ID NO:13之殘基120-140之α-突觸核蛋白片段之抗體。在一些實施例中，抗體抑制吸收1-121及120-140片段兩者。本發明亦提供結合包含SEQ ID NO:13之殘基1-120之α-突觸核蛋白片段之抗體。本發明亦提供結合包含SEQ ID NO:13之殘基120-140之α-突觸核蛋白片段之抗體。在一實施例中，該抗體結合1-120及120-140 α-突觸核蛋白片段兩者。
本申請案根據35 U.S.C. §119(e)主張2018年12月14日申請之美國臨時申請案第62/779,505號之權益；該申請案之揭示內容以引用的方式併入本文中。
定義 如本文所用，除非另外說明，否則α-突觸核蛋白係指野生型α-突觸核蛋白，且較佳指具有由SEQ ID NO:13所載之胺基酸序列之野生型人類α-突觸核蛋白。「抗α-突觸核蛋白抗體」或「α-突觸核蛋白抗體」係指優先結合至α-突觸核蛋白之二聚形式之抗體，且當活體外或活體內投與該抗體時，會促使達成諸如至少一種顯著減少所需活動(諸如α-突觸核蛋白之聚集及防止α-突觸核蛋白聚集吸收至細胞中)之反應。
如本文所使用之術語「聚集(aggregated)」或「聚集(aggregation)」係指由大於一種α-突觸核蛋白單體構成之總成。
「接種」係指誘導胞內聚集。特定言之，接種係指將胞外α-突觸核蛋白吸收至細胞中且誘導α-突觸核蛋白之單體池以形成聚集體。
如本文所用，術語「抗體」係指具有兩條重鏈(HC)及兩條輕鏈(LC)使得重鏈及輕鏈由二硫鍵互連的經工程改造之非天然存在之多肽複合物，其中該抗體為IgG同型抗體。各重鏈由N端HCVR及重鏈恆定區構成。各輕鏈由N端LCVR及輕鏈恆定區構成。當在某些生物系統中表現時，抗體在Fc區中糖基化。典型地，在抗體Fc區中，在高度保守性N-糖基化位點發生糖基化。N-聚糖典型地附著於天冬醯胺。抗體同樣可在其他位置經糖基化。
本發明之抗體缺乏效應功能。較佳地，本發明之抗體為IgG4PAA抗體。IgG4PAA抗體為在位置(根據EU編號)228、234、235(分別為S228P、F234A、L235A)處具有絲胺酸至脯胺酸之取代基及兩種白胺酸至丙胺酸之取代基的IgG4抗體。S228P突變消除半抗體形成。已知兩種丙胺酸突變破壞與FcγRs之疏水相互作用以消除殘餘效應功能。
重鏈之恆定區含有CH1、CH2及CH3結構域。CH1出現在HCVR之後；CH1及HCVR形成抗原結合(Fab)片段之重鏈部分，其為結合一或多個抗原之抗體之部分。CH2出現在鉸鏈區之後及CH3之前。CH3出現在CH2之後且處於重鏈之羧基末端。輕鏈之恆定區含有一個結構域CL。CL出現在LCVR之後；CL及LCVR形成Fab之輕鏈部分。
本發明抗體之HCVR及LCVR區可進一步分成高度可變區，稱為互補決定區(「CDR」)，穿插有更保守之稱為構架區(「FR」)之區域。各HCVR及LCVR由三個CDR及四個FR組成，其自胺基端至羧基端按以下順序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。在此，重鏈之三個CDR稱為「HCDR1、HCDR2及HCDR3」且輕鏈之三個CDR稱為「LCDR1、LCDR2及LCDR3」。CDR含有與抗原形成特異性相互作用的大部分殘基。Kabat CDR定義(Kabat等人,Ann.NY Acad.Sci.190:382-93(1971)；Kabat等人,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第五版,美國衛生和公共服務部(U.S.Department of Health及Human Services),NIH公開案第91-3242(1991)號)係基於抗體序列變異。Chothia CDR定義(Chothia等人, 「Canonical structures for the hypervariable regions of immunoglobulins」, Journal of Molecular Biology, 196, 901-917 (1987)；Al-Lazikani等人, 「Standard conformations for the canonical structures of immunoglobulins」, Journal of Molecular Biology, 273, 927-948 (1997))係基於抗體之三維結構及CDR環之拓樸結構。除HCDR1及HCDR2之外，Chothia CDR定義與Kabat CDR定義一致。North CDR定義(North等人，「A New Clustering of Antibody CDR Loop Conformations」，Journal of Molecular Biology，406, 228-256 (2011))係基於大量晶體結構之親和力擴展叢集。出於本發明之目的，胺基酸向本發明之抗體之LCVR及HCVR區內之CDR結構域的指配係基於熟知Kabat編號規約及North編號規約。就本發明之抗體之輕鏈CDR而言，使用North CDR定義。在重鏈中HCDR1及HCDR3兩者亦使用North定義。HCDR2使用North及Kabat之混合定義。當Kabat用以界定最終位置時，North界定用以鑑別初始N末端位點。
本發明預期本發明之抗體為人類化抗體或人類抗體。在單株抗體之情形下，術語「人類」及「人類化」為一般熟習此項技術者所熟知(Weiner LJ, J. Immunother. 2006; 29: 1-9; Mallbris L等人, J. Clin. Aesthet. Dermatol. 2016; 9: 13-15)。
本發明之DNA分子為包含編碼具有本發明抗體(例如重鏈、輕鏈、可變重鏈及可變輕鏈)中至少一種多肽之胺基酸序列之多肽的非天然存在之聚核苷酸序列的DNA分子。
編碼HCVR區之經分離DNA可藉由將編碼HCVR之DNA可操作連接至編碼重鏈恆定區之另一DNA分子轉化成全長重鏈基因。人類以及其他哺乳動物重鏈恆定區基因之序列在本領域中已知。涵蓋此等區域之DNA片段可例如藉由標準PCR擴增獲得。
編碼LCVR區之經分離DNA可藉由將編碼LCVR之DNA可操作地連接至編碼輕鏈恆定區之另一DNA分子而轉化成全長輕鏈基因。人類以及其他哺乳動物輕鏈恆定區基因之序列在此項技術中已知。可藉由標準PCR擴增獲得包涵此等區之DNA片段。輕鏈恆定區可為κ或λ恆定區。較佳地，對於本發明之抗體，輕鏈恆定區為κ恆定區。
在已將序列可操作地連接至表現控制序列之後，本發明之聚核苷酸可在宿主細胞中表現。表達載體在宿主生物體中通常可以游離基因體或宿主染色體DNA之整體部分形式複製。通常，表現載體將含有選擇標記物，例如四環素、新黴素及二氫葉酸還原酶，以准許偵測經所需DNA序列轉形之細胞。
本發明之抗體容易在哺乳動物細胞中產生，哺乳動物細胞之非限制性實例包括CHO、NS0、HEK293或COS細胞。可使用此項技術中熟知之技術培養宿主細胞。
含有所關注之聚核苷酸序列(例如編碼抗體多肽之聚核苷酸及表現控制序列)之載體可藉由熟知方法轉移至宿主細胞中，該等方法視細胞宿主類型而異。
多種蛋白質純化方法可用於純化蛋白質，包括(但不限於)抗體，且此類方法為此項技術中已知。
本發明之抗體或包含其之醫藥組合物可藉由非經腸途徑投與，非經腸途徑之非限制性實例為皮下投與及靜脈內投與。本發明抗體可利用醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑，以單次或多次劑量投與患者。本發明之醫藥組合物可藉由此項技術中熟知之方法(例如Remington：The Science and Practice of Pharmacy，第22版. (2012)，A. Loyd等人，Pharmaceutical Press)製備且包含如本文所揭示之抗體，及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。
術語「治療(treating)」(或治療(treat)或「治療(treatment)」)係指減緩、中斷、遏制、緩解、中止、減少或逆轉現有症狀、病症、病狀或疾病之進展或嚴重程度。
「有效量」意謂本發明之抗α-突觸核蛋白抗體或包含此類抗體之醫藥組合物將引發由研究人員、醫生或其他臨床醫師正尋求之針對組織、系統、動物、哺乳動物或人類之生物學或醫學反應或所需治療作用的量。抗體之有效量可根據諸如個體之疾病病況、年齡、性別及體重以及抗體引發個體中期望性反應之能力的因素而變化。此類益處包括(但不限於)病理性路易體之擴散減少、運動功能改善及/或認知改善。有效量可易於由熟習此項技術者藉由使用已知技術且藉由觀測在類似情形下獲得之結果來確定。在確定用於患者之有效量時，主治診斷醫師考慮多個因素，包括(但不限於)：患者體型、年齡及一般健康狀況；所涉及之特定疾病或病症；疾病或病症之涉及程度或嚴重程度；個別患者之反應；所投與之特定化合物；投與模式；所投與之製劑之生物可用性特徵；所選擇之給藥方案；伴隨藥療之使用；及其他相關情況。
如本文所使用，術語「突觸核蛋白病」係指神經退化性疾病或神經退化性疾病家族，其特徵為神經元中α-突觸核蛋白蛋白質聚集體異常積累。例示性病況包括阿茲海默氏症(AD)、帕金森氏病(PD)、路易體癡呆(DLB)及多系統萎縮(MSA)。
實例 實例 ： 抗體表現及純化 本發明之抗α-突觸核蛋白抗體可如下表現及純化。可利用表現系統使用理想地預定之HC:LC載體比率(諸如1:3或1:2)或編碼兩者HC及LC之單一載體系統短暫或穩定地轉染任一者合適之宿主細胞(諸如HEK 293或CHO)用於分泌抗體。抗體分泌至澄清培養基內，該澄清培養基利用多種常用技術進行純化。舉例而言，培養基可施加至針對Fab片段之MabSelect®管柱(GE Healthcare)或KappaSelect管柱(GE Healthcare)上，該管柱已利用相容性緩衝液(諸如磷酸鹽緩衝鹽水(pH 7.4))平衡。可洗滌管柱以移除非特異性結合組分。
所結合的抗體可例如藉由pH梯度(諸如20 mM Tris緩衝液(pH 7.0)至10 mM檸檬酸鈉緩衝液(pH 3.0)，或磷酸鹽緩衝鹽水(pH 7.4)至100 mM甘胺酸緩衝液(pH 3.0))溶離。可諸如藉由SDS-PAGE偵測抗體溶離份且接著可進行合併。其他純化為視預期用途而選用。可使用常見技術濃縮及/或無菌過濾抗體。可藉由常見技術，包括尺寸排阻、疏水性相互作用、離子交換、多模式或羥基磷灰石層析，有效移除可溶性聚集物及多聚物。此等層析步驟之後的抗體純度在約95%至約99%之間。
預期在抗體重鏈之N端之低百分比(約1%)麩胺酸可轉化成焦麩胺酸。另外，抗體重鏈之C端之低百分比(約小於1%)甘胺酸可在轉譯後被截短(削減)。
可在例如-70℃下將產物立即冷凍或可將其冷凍乾燥。本發明之例示性人類抗體之胺基酸SEQ ID NO展示於下表1中。
表 1. 抗體 1 及抗體 2 之胺基酸序列。
抗體SEQ ID NO
抗體 HCDR1 HCDR2 HCDR3 LCDR1 LCDR2 LCDR3
抗體 1 SEQ ID NO: 1 SEQ ID NO: 2    位置16處之Xaa為離胺酸 SEQ ID NO: 3 SEQ ID NO: 4    位置5處之Xaa為絲胺酸 SEQ ID NO: 5    位置5處之Xaa為天冬醯胺 SEQ ID NO: 6
抗體 2 SEQ ID NO: 1 SEQ ID NO: 2    位置16處之Xaa為麩醯胺酸 SEQ ID NO: 3 SEQ ID NO: 4    位置5處之Xaa為天冬胺酸 SEQ ID NO: 5    位置5處之Xaa為天冬胺酸 SEQ ID NO: 6
抗體SEQ ID NO
抗體 HCVR* LCVR HC** LC  
抗體 1 SEQ ID NO: 7    位置65處之Xaa為離胺酸 SEQ ID NO: 8    位置28處之Xaa為絲胺酸；位置58處之Xaa為天冬醯胺 SEQ ID NO: 9    位置65處之Xaa為離胺酸 SEQ ID NO: 10    位置28處之Xaa為絲胺酸；位置58處之Xaa為天冬醯胺  
抗體 2 SEQ ID NO: 7；位置65處之Xaa為麩醯胺酸 SEQ ID NO: 8；位置28處之Xaa為天冬胺酸；位置58處之Xaa為天冬胺酸 SEQ ID NO: 9；位置65處之Xaa為麩醯胺酸 SEQ ID NO: 10；位置28處之Xaa為天冬胺酸；位置58處之Xaa為天冬胺酸  
*位置1之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸。 **位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸，且位置441處之Xaa為甘胺酸或不存在。
實例：對重組人類 α- 突觸核蛋白 原纖維之抗體親和力 進行酶聯免疫吸附分析(ELISA)以用於定量測定對重組人類α-突觸核蛋白原纖維之抗體親和力。藉由持續兩週振盪重組α-突觸核蛋白單體，隨後音波處理，從而產生人類α-突觸核蛋白原纖維(Polinski等人, J.帕金森氏病8(2018)303-322)。
ELISA培養盤在4℃下在PBS中以1 µg/ml塗佈重組人類α-突觸核蛋白原纖維隔夜。第二天，在室溫下將培養盤與1%酪蛋白一起培育1小時以阻斷培養盤上之非特異性結合位點。接著用0.1% PBST洗滌培養盤三次且在室溫下與經3×連續稀釋之抗體(抗體1、抗體2或比較抗體1)一起培育1小時。比較劑抗體1(C.A. 1)描述為具有如美國專利第8,609,820號(例如圖1及圖2)中所示及描述之HCDR 1-3(Hu9E4VHv3)及LCDR 1-3(Hu9E4VLv3)之抗體。培育之後，用0.1% PBST洗滌培養盤三次以移除未結合之抗體且與0.1% PBST中之偵測劑(1:1000稀釋之異型絲-抗人類κ-AP)一起在室溫下培育1小時。用0.1% PBST洗滌培養盤三次以移除未結合之偵測劑且與基板一起在室溫下培育15分鐘。接著在ELISA培養盤讀取器中在560 nm下讀取OD。基於抗體濃度及OD560讀數獲得結合曲線。抗體親和力測定為產生50%最大結合信號(EC50 )之濃度。
隨後程序基本上如上文所述，獲得以下數據。
表 2. 如藉由 ELISA 所測定之抗體對人類 α - 突觸核蛋白原纖維之結合親和力。
抗體 1 抗體 2 C.A. 1
基線 OD560 0.05464 0.05099 0.05127
最大 OD560 0.9143 0.8881 0.9715
EC50 (pg/ml) 193.30 160.60 185.60
此等數據表明本發明之抗體以高親和力結合人類α-突觸核蛋白原纖維。
實例 ： 抗體 1 及抗體 2 與單體 α - 突觸核蛋白之結合 分析抗體1及抗體2對單體人類α-突觸核蛋白(SNCA，UniProtKB P37840；SEQ ID NO:13)之結合親和力。亦測定各種物種(包括人類、食蟹獼猴、兔、大鼠及小鼠α-突觸核蛋白)之抗體1及抗體2之結合親和力。
在37℃下使用動力學排除分析(Kinexa)(Darling, R,及Brault, P.A. (2004) Assay Drug Dev. Technol., 2(6):647-657)量測單體α-突觸核蛋白結合親和力。與基於培養盤之ELISA分析中之α-突觸核蛋白之叢集本質相反，Kinexa分析由於其評估溶液中之α-突觸核蛋白之親和力之能力而尤其為生理學相關的。
將200 pM下之固定抗體濃度之獨立容器與50 µM至847 pM範圍內之單體α-突觸核蛋白之連續稀釋液混合。在37℃下培育此等樣品24至48小時以允許達成穩態平衡。在此時間期間，瓊脂糖珠粒與單體人類α-突觸核蛋白共軛且用適合之非特異性結合蛋白(通常BSA或酪蛋白)阻斷。一旦達成穩定狀態，用經塗佈之珠粒裝填較小毛細管且在管柱上注射各固定抗體/α-突觸核蛋白單體之樣品。在此步驟期間，自錯合抗體選擇性捕捉游離的未相關抗體，且隨後經由螢光標記之二級抗人類抗體偵測。對於各濃度之α-突觸核蛋白單體及所得螢光信號(與不含抗體之百分比成比例)重複此步驟，且接著繪製作為螢光信號相對於單體α-突觸核蛋白濃度之函數且整體擬合1:1結合模型以獲得KD 。報導具有技術重複(95%信賴區間)之獨立運作(n=3)。
在基本上如上文所描述進行之實驗中，獲得以下α-突觸核蛋白物種之數據：人類(uniprot寄存編號P37840)、食蟹獼猴(uniprot寄存編號P61142)、大鼠(uniprot寄存編號P37377)、兔(uniprot寄存編號G1U0V2)及小鼠(uniprot寄存編號O55042)。
表 3 ： 如在 37 ℃ 下藉由 Kinexa 所量測之與單體 α- 突觸核蛋白之結合親和力。
抗體 α- 突觸核蛋白物種 KD (nM) 95% CI (nM)
抗體1 人類 19 12.2至28.5
食蟹獼猴 19.9 13.4至25.8
兔 553.9 267.6至1080
大鼠 89 60.3至127.3
小鼠 49.7 31.6至76.1
抗體2 人類 65.6 48.1至82.1
食蟹獼猴 34.3 27.3至42.4
兔 1020 677.5至1500
大鼠 140.5 109.9至176.4
小鼠 99.3 67.2至134.9
此等數據表明抗體1及抗體2結合人類、食蟹獼猴、大鼠及小鼠α-突觸核蛋白，且在更小程度上結合兔α-突觸核蛋白。
實例 ： 抗體 1 及抗體 2 與二聚 α - 突觸核蛋白之結合 分析抗體1及抗體2對小鼠Fc(mIgG1-hAsyn100-140)上含有殘基100-140之人類α-突觸核蛋白之C端片段的親合力-替代二聚表示之結合親和力。結合親和力係使用基於Kinexa之原理的培養盤捕捉方法測定，稱為MSD-SET(Estrep等人)(2013) MAbs, 5(2): 270-278)。工程改造包含融合至小鼠Fc片段之C末端上之SEQ ID NO:13之最後40個胺基酸的人類α-突觸核蛋白之合成二聚體表示，該Fc片段由短非結構化連接子元素分離(mIgG1-hAsyn100-140)。此合成替代分子為生物化學表徵成果提供親合力-勝任人類α-突觸核蛋白聚集體替代之相對穩定且均質的表示。
將抗體(100 fM)與濃度遞增之mIgG1-hAsyn100-140(範圍介於3.67 fM至7.69 nM)在兩倍連續稀釋液中混合且使其在25℃或37℃下達到穩態平衡。在此培育時間期間，MSD Sector培養盤用單體人類α-突觸核蛋白塗佈且用阻斷試劑(亦即BSA、酪蛋白)阻斷。在穩態平衡培育數次之後，向培養盤中同時添加個別抗體/mIgG1-hAsyn 100-140混合物且培育10分鐘以捕捉游離抗體且使與在含mIgG1-hAsyn100-140之複合物中之抗體的交換最小化。在此短暫培育之後，隨後洗滌培養盤且與經生物素標記之抗人類二級抗體一起培育，隨後在MSD儀器上使用抗生蛋白鏈菌素-S-tag偵測。接著將所得MSD信號(與不含抗體成比例)繪製為mIgG1-hAsyn100-140濃度之函數且整體擬合為四個參數擬合以獲得IC50 (KD )。報告之95%信賴區間表示各自具有技術重複之N=3個獨立運行之擬合。親合力-因子為單體親和力與二聚體親和力之間的比率差，且表示單體α-突觸核蛋白與二聚α-突觸核蛋白之間的結合對抗體之選擇性。親和力值報導於表4中。
表 4 ： 二聚人類 α- 突觸核蛋白在 25 ℃ 及 37 ℃ 下之結合親和力。
25 ℃ 37 ℃
測試對象 KD (pM) 95% CI (pM) KD (pM) 95% CI (pM)
抗體1 0.12 0.11至0.14 0.97 0.85至1.11
抗體2 3.2 2.4至4.2 未測試 未測試
C.A. 1 1.5 1.1至2.1 6.5 5.5至7.7
如表4中所示，25℃數據表明抗體1相對於抗體2及C.A. 1對於二聚α-突觸核蛋白之更高親和力。在37℃下，相對於C.A. 1，抗體1對二聚α-突觸核蛋白之親和力高6.7倍(平均)。抗體1之37℃數據指示單體人類α-突觸核蛋白(KD 19 nM，參見表3)與二聚人類α-突觸核蛋白(聚集替代物；KD 0.97 pM，參見表4)之間的親合力因子(選擇性指標)為大致20,000倍。
實例 ： 吸收至 SH-SY5Y 細胞中之人類 α- 突觸核蛋白 原纖維之活體外定量 為研究藉由抗體1抑制人類α-突觸核蛋白聚集體形成之機制，測定抗體1阻斷α-突觸核蛋白原纖維之內化(吸收)之能力。
藉由持續兩週振盪重組α-突觸核蛋白單體(用胺反應性pH敏感性染料pHAb(Promega，G9841)標記)，隨後音波處理，從而產生人類α-突觸核蛋白原纖維(Polinski等人, J. 帕金森氏病8 (2018) 303-322)。將pHAb染料標記之人類α-突觸核蛋白原纖維(2 µg/ml)添加至100 µg/ml至0.097 µg/ml範圍內之連續稀釋之抗體中。接著將此混合物添加至平均25,000個SH-SY5Y細胞/孔中且在37℃下培育隔夜。
次日，洗滌細胞，與NucBlue Hoechst染料(Thermo Fisher，R37605)一起培育20分鐘，再次洗滌，且接著藉由在Cytation 5儀器(BioTek)上之高含量影像成像。pHAb染料僅在酸性pH下發螢光(亦即當內化時染料進入內吞/溶酶體路徑中)。因此，為計算每個細胞之內化強度，將來自pHAb染料之總螢光強度除以每孔細胞核數目。每個數據點重複計數至少20,000個細胞。細胞螢光強度與人類α-突觸核蛋白原纖維之內化相關，允許活細胞及pHAb值標記之人類α-突觸核蛋白吸收之定量讀數。
隨後程序基本上如上文所述，獲得以下數據。
表 5 ：用抗體處理之後原纖維內化之抑制。
抗體 / 測試物品 平均 IC50 (µg/mL) IC50 標準差 (µg/mL)
抗體1 0.45 0.017
抗體2 0.56 0.026
C.A. 1 0.44 N/A
如表5中所示，抗體1以0.45 µg/ml之平均IC50 抑制人類α-突觸核蛋白原纖維內化。抗體2以0.56 µg/ml之平均IC50 抑制人類α-突觸核蛋白原纖維內化。在類似研究中，C.A. 1之IC50 為0.44 µg/ml且對照hIgG1抗體對pHAb標記之人類α-突觸核蛋白原纖維內化無影響。此等數據表明所測試之抗體能夠抑制α-突觸核蛋白吸收。
實例 ： SHSY-5Y-A53T-myc 細胞中人類 α- 突觸核蛋白 介導之聚集體中抗體 1 抑制之活體外分析 A53T為在具有早期發作PD之較強傾向性之某些個體中發現的α-突觸核蛋白之天然存在變異體。若干研究已顯示，A53T賦予人類α-突觸核蛋白更快速之聚集表型。使用可四環素誘導以過度表現人類α-突觸核蛋白之突變A53T形式的人類SH-SY5Y-A53T-myc表現細胞來測定人類α-突觸核蛋白聚集體形成之抑制。
為量測人類α-突觸核蛋白聚集體，在生長培養基中加1 µg/ml四環素以40,000細胞/孔將SH-SY5Y-A53T-myc細胞接種至黑色CellBIND培養盤(Corning)中。第二天，移除培養基且用新鮮培養基替換，該培養基含有在60 µg/ml至0.027 µg/ml範圍內之抗α-突觸核蛋白抗體之八點稀釋曲線，其含有固定濃度為3 µg/ml之經音波處理人類α-突觸核蛋白預成型原纖維(PFFs)及1 µg/ml四環素。僅包括四環素及PFF作為聚集對照。在稀釋系列中每一濃度存在三個技術重複。
將培養盤在37℃、95%濕度下培育五天，且接著用1×更喜歡固定劑(Anatech)固定一小時。用1×DPBS洗滌培養盤兩次且用Tris緩衝鹽水+Tween-20(TBST)洗滌一次。細胞在5%牛奶(Difco)中在TBST中阻斷一小時且在4℃下在5%牛奶/TBST中以1:1000稀釋度與1 µg/mL初級抗體小鼠抗pS129及綿羊抗myc(Fisher,PA3-981)免疫染色隔夜。
接著用TBST洗滌培養盤三次，且接著在室溫下與二級抗體異型絲抗小鼠AlexaFluor647(Invitrogen，A32728)及驢抗綿羊AlexaFluor555(Invitrogen，A21436)(各在TBST中以1:1000稀釋)一起培育＞2小時。用TBST洗滌培養盤兩次，接著用DPBS洗滌兩次且接著密封。將培養盤裝載至視線儀器上以用於高含量成像及使用光點偵測器v4.0算法進行分析。處理藉由算法產生之數據以用於用Graph Pad軟體v7.0計算IC50 。
在基本上如上文所述進行之實驗中，獲得以下數據。
表 6 ： 在用抗體處理之後 SHSY-5Y-A53T-myc 細胞中之 α- 突觸核蛋白聚集體之抑制。
抗體 / 測試物品 平均 IC50 (µg/mL) IC50 標準差 (µg/mL)
抗體1 0.41 0.06
抗體2 0.40 0.15
C.A. 1 0.38 0.13
此等數據表明，本發明之抗體能夠抑制SHSY-5Y-A53T-myc細胞中之α-突觸核蛋白聚集。與表5中顯示之pHAb內化抑制數據相比，存在IC50 值非常類似之CRC曲線重疊(與表6中的0.41 µg/ml相比，表5中IC50 為0.45 µg/ml)。此等結果表明抗體1抑制人類α-突觸核蛋白原纖維誘導之聚集且可藉由抑制人類α-突觸核蛋白原纖維內化至細胞中來直接引起藉由抗體1之接種。
實例 ： 抗體 1 及 C.A. 1 對 SHSY-5Y-A53T-myc 細胞中 pHAb 標記之 1-121 及 1-140 α- 突觸核蛋白原纖維吸收之抑制之活體外分析 產生1-121(SEQ ID NO:13之胺基酸1-121)及1-140(SEQ ID NO:13)之pHAb標記之α-突觸核蛋白原纖維。用pHAb染料標記α-突觸核蛋白單體，更換緩衝液，且接著在1400 RPM下振盪兩週。在兩週結束時，在實驗之前音波處理原纖維120秒。
將抗體1及C.A. 1自100 µg/mL連續稀釋至0.1 µg/mL。以2 µg/mL將抗體與pHAb標記之α-突觸核蛋白1-121片段及全長α-突觸核蛋白組合。接著將此溶液施加至SHSY5Y細胞且培育隔夜。接著將細胞於Cytation 5上成像，臨限值為2000。
基於基本上如上所述之程序，結果表明吸收1-121 α-突觸核蛋白及全長α-突觸核蛋白pHAb原纖維。抗體1阻斷1-121 α-突觸核蛋白原纖維之吸收，而C.A. 1顯示對1-121 α-突觸核蛋白原纖維吸收之極小(若存在)作用(圖1a)。抗體1及C.A. 1在抑制全長α-突觸核蛋白吸收方面顯示類似活性(圖1b)。
此等數據表明抗體1及C.A. 1對阻斷α-突觸核蛋白原纖維內化具有不同作用。抗體1能夠劑量依賴性地阻斷細胞吸收全長及1-121原纖維兩者，而C.A. 1僅能夠阻斷1-140原纖維。此表明抗體1藉由其結合及阻斷片段化α-突觸核蛋白之內化之能力將更有效。
實例 ： 抗體 1 及抗體 2 之抗原決定基測定 . 抗原決定基之生物化學測定 抗體1及抗體2之抗原決定基藉由肽丙胺酸掃描測定。藉由OctetRed384(ForteBio)上之生物層干擾量測法來量測結合。抗生蛋白鏈菌素生物感測器(ForteBio)裝載有於0.1% BSA、0.05% PBST分析緩衝液中之SEQ ID NO:13之人類α-突觸核蛋白殘基110-133之生物素化丙胺酸突變肽中之每一者，在相同緩衝液中洗滌，且接著轉移至含有濃度為15 µg/mL之抗體溶液的孔中。使用Octet軟體用1:1擬合模型獲得響應信號及解離速率。相較於野生型肽，對丙胺酸突變肽之響應信號的損失或解離速率(Koff )的變化指示抗原決定基殘基。
在遵循基本上如上文所描述之程序進行的實驗中，抗體1及抗體2之關鍵殘基經測定在兩個獨立區(D115、M116及D119，及E126及P128)中。使用C.A. 1進行類似實驗。測定C.A. 1之抗原決定基殘基為N122及Y125，其對應於美國專利第10,081,674號中所報導之抗原決定基(參見例如圖6)。
與兩個獨立抗原決定基之結合 因為關鍵抗原決定基殘基在兩個區域(如上文所述)中，為瞭解抗體1及抗體2是否可獨立地結合至兩個區域，所以使用截短之人類α-突觸核蛋白片段1-120(SEQ ID NO:13之殘基1-120)及生物素化人類α-突觸核蛋白肽120-140(SEQ ID NO:13之殘基120-140)進行ELISA。亦測定結合全長(1-140)α-突觸核蛋白。對於α-突觸核蛋白原纖維結合，程序基本上如上文所述。遵循基本上如上文所述之程序，結合曲線顯示於圖2中。
此等數據表明抗體1及抗體2以在皮莫耳濃度範圍內之結合親和力結合至α-突觸核蛋白片段1-120及120-140兩者。抗體1對於兩個α-突觸核蛋白片段中之每一者具有類似親和力。抗體2對於α-突觸核蛋白片段1-120具有與抗體1類似之親和力，但對於α-突觸核蛋白片段120-140具有更弱親和力。對於兩個α-突觸核蛋白片段，結果展示C.A. 1缺乏定義明確之上限及下限漸近線。抗體1、抗體2及C.A. 1以類似親和力結合α-突觸核蛋白單體(1-140)。此等數據表明抗體1及抗體2可結合裂解及全長α-突觸核蛋白兩者。
α- 突觸核蛋白片段分析 為測定抗體1結合是否受已報導在帕金森氏病(Duffy等人, (2007) Am. J. Pathol. 170(5): 1725-1738及Wang等人, (2016) Proc. Nat. Acad. Sci. 113(34): 9587-9592)中上調之α-突觸核蛋白之鈣蛋白酶I及凋亡蛋白酶裂解(分別為殘基122/123及121/122)影響，使用上文針對全長單體人類α-突觸核蛋白先前所描述之相同Kinexa方法及程序分析抗體1與單體人類α-突觸核蛋白之進行性C端截短之結合。所測試之α-突觸核蛋白片段為SEQ ID NO:13之胺基酸1-140、1-121及1-115。
隨後程序基本上如上文所述，獲得以下數據。
表 7. 抗體 1 及 C.A. 1 對如在 37 ℃ 下藉由 Kinexa 所測定之單體人類 α- 突觸核蛋白之進行性 c 端 截短的結合親和力。
抗體 1 C.A. 1  
α- 突觸核蛋白片段 KD (nM) 95% CI (nM) KD (nM) 95% CI (nM)
1-140 19 12.2至28.5 87.2 60.7至105.9
1-121 11.8 7.9至16.0 ＞20,000 未計算
1-115 675 418.4至1060 未測得 未測得
此等數據表明抗體1與α-突觸核蛋白之結合不受已在帕金森氏病患者中觀測到之人類α-突觸核蛋白之鈣蛋白酶及凋亡蛋白酶裂解物質影響，而C.A. 1不能與此等片段物質接合。
實例：活體內功效 為評估本發明之抗體在活體內之藥理學功效，在接種之A53T小鼠模型中進行中和及周邊慢性研究兩者。
對於中和研究，使重組α-突觸核蛋白原纖維與本發明之抗體或C.A. 1以接近莫耳當量(抗體莫耳略微過量)預混合，使其離體複合30分鐘，且接著將混合物注射至小鼠中。在輸注後90天使動物安樂死。
周邊長期研究檢查抗體在經由腹膜內注射長期給藥時之功效。簡言之，將重組α-突觸核蛋白原纖維輸注至腦中且在原纖維輸注後16小時注射本發明之抗體或C.A. 1。每兩週投與抗體持續總計120天。
在兩個研究中，生物化學化且藉由免疫組織化學、藉由量化α-突觸核蛋白病理學之發展中之變化來評估抗體之藥理學功效。生物化學監測自來自SDS不溶性溶離份以及經磷酸129修飾(P129；在絲胺酸129處磷酸化之α-突觸核蛋白)之組織提取之寡聚α-突觸核蛋白，其為路易體形成之較佳公認標記物。免疫組織化學研究評估此等小鼠中之P129染色負荷。亦在研究結束時收集血清及CSF中之藥物濃度之PK參數，以理解穩定狀態水準之化合物。
用本發明之抗體處理可導致寡聚α-突觸核蛋白減少及P129染色減少。
序列 抗體 1 及抗體 2 HCDR1 (SEQ ID NO: 1)
Figure 02_image001
抗體 1 及抗體 2 HCDR2 (SEQ ID NO: 2)
Figure 02_image003
其中位置16處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸。
抗體 1 及抗體 2 HCDR3 (SEQ ID NO: 3)
Figure 02_image005
抗體 1 及抗體 2 LCDR1 (SEQ ID NO: 4)
Figure 02_image007
其中位置5處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸。
抗體 1 及抗體 2 LCDR2 (SEQ ID NO: 5)
Figure 02_image009
其中位置5處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸。
抗體 1 及抗體 2 LCDR3 (SEQ ID NO: 6)
Figure 02_image011
抗體 1 及抗體 2 HCVR (SEQ ID NO: 7)
Figure 02_image013
其中位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸，且其中位置65處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸。
抗體 1 及抗體 2 LCVR (SEQ ID NO: 8)
Figure 02_image015
其中位置28處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸，且其中位置58處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸。
抗體 1 及抗體 2 HC (SEQ ID NO: 9)
Figure 02_image017
且其中位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸，其中位置65處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸，且其中位置441處之Xaa為甘胺酸或不存在。
抗體 1 及抗體 2 LC (SEQ ID NO: 10)
Figure 02_image019
其中位置28處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸，且其中位置58處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸。
DNA 編碼抗體 1 HC (SEQ ID NO: 11)
Figure 02_image021
Figure 02_image023
DNA 編碼抗體 1 LC (SEQ ID NO: 12)
Figure 02_image025
人類 α- 突觸核蛋白 (SEQ ID NO: 13)
Figure 02_image027
圖 1a. α-突觸核蛋白1-121片段內化之抑制。
圖 1b. α-突觸核蛋白內化之抑制。
圖 2. 抗體與全長及α-突觸核蛋白片段之結合。
<110> 美商美國禮來大藥廠(Eli Lilly and Company)
<120> 抗α-突觸核蛋白抗體及其用途
<140> TW 108144018
<141> 2019-12-03
<150> US 62/779505
<151> 2018-12-14
<160> 13
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成構築體
<400> 1
Figure 108144018-A0305-02-0033-1
<210> 2
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成構築體
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(16)
<223> 位置16處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸。
<400> 2
Figure 108144018-A0305-02-0033-2
Figure 108144018-A0305-02-0034-3
<210> 3
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成構築體
<400> 3
Figure 108144018-A0305-02-0034-4
<210> 4
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成構築體
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> 位置5處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸。
<400> 4
Figure 108144018-A0305-02-0034-5
<210> 5
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成構築體
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> 位置5處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸。
<400> 5
Figure 108144018-A0305-02-0035-6
<210> 6
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成構築體
<400> 6
Figure 108144018-A0305-02-0035-7
<210> 7
<211> 115
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成構築體
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> 位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸。
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (65)..(65)
<223> 位置65處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸。
<400> 7
Figure 108144018-A0305-02-0035-8
Figure 108144018-A0305-02-0036-9
<210> 8
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成構築體
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (28)..(28)
<223> 位置28處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸。
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (58)..(58)
<223> 位置58處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸。
<400> 8
Figure 108144018-A0305-02-0036-10
Figure 108144018-A0305-02-0037-11
<210> 9
<211> 441
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成構築體
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(1)
<223> 位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸。
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (65)..(65)
<223> 位置65處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸。
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (441)..(441)
<223> 位置441處之Xaa為甘胺酸或不存在。
<400> 9
Figure 108144018-A0305-02-0038-12
Figure 108144018-A0305-02-0039-13
Figure 108144018-A0305-02-0040-14
<210> 10
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工構築體
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (28)..(28)
<223> 位置28處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸。
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (58)..(58)
<223> 位置58處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸。
<400> 10
Figure 108144018-A0305-02-0040-15
Figure 108144018-A0305-02-0041-16
<210> 11
<211> 1323
<212> DNA
<213> 智人
<400> 11
Figure 108144018-A0305-02-0041-17
Figure 108144018-A0305-02-0042-18
<210> 12
<211> 657
<212> DNA
<213> 智人
<400> 12
Figure 108144018-A0305-02-0042-19
Figure 108144018-A0305-02-0043-20
<210> 13
<211> 140
<212> PRT
<213> 智人
<400> 13
Figure 108144018-A0305-02-0043-21
Figure 108144018-A0305-02-0044-22

Claims (27)

  1. 一種抗α-突觸核蛋白(synuclein)抗體，其包含重鏈(HC)及輕鏈(LC)，其中該HC包含重鏈可變區(HCVR)且該LC包含輕鏈可變區(LCVR)，且其中該HCVR包含HCDR1、HCDR2及HCDR3，且該LCVR包含LCDR1、LCDR2及LCDR3，其中該HCDR1之胺基酸序列由SEQ ID NO：1所載，該HCDR2之胺基酸序列由SEQ ID N1：2所載(AISGSGGDTYYADSVXG；其中位置16處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸)，該HCDR3之胺基酸序列由SEQ ID NO：3所載，該LCDR1之胺基酸序列由SEQ ID NO：4所載(RSSQXLVHSDGNTYLM；其中位置5處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸)，該LCDR2之胺基酸序列由SEQ ID NO：5所載(YKVSXRNS；其中位置5處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸)，且該LCDR3之胺基酸序列由SEQ ID NO：6所載。
  2. 如請求項1之抗體，其中SEQ ID NO：2之位置16處之Xaa為離胺酸，SEQ ID NO：4之位置5處之Xaa為絲胺酸，且SEQ ID NO：5之位置5處之Xaa為天冬醯胺。
  3. 如請求項1之抗體，其中SEQ ID NO：2之位置16處之Xaa為麩醯胺酸，SEQ ID NO：4之位置5處之Xaa為天冬胺酸，且SEQ ID NO：5之位置5處之Xaa為天冬胺酸。
  4. 如請求項1之抗體，其中該HCVR之胺基酸序列由SEQ ID NO：7所載 (
    Figure 108144018-A0305-02-0046-23
    Figure 108144018-A0305-02-0046-24
    Figure 108144018-A0305-02-0046-25
    ；其中位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸，且其中位置65處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸)，且該LCVR之胺基酸序列由SEQ ID NO：8所載 (
    Figure 108144018-A0305-02-0046-26
    Figure 108144018-A0305-02-0046-27
    Figure 108144018-A0305-02-0046-28
    ；其中位置28處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸，且其中位置58處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸)。
  5. 如請求項4之抗體，其中SEQ ID NO：7之位置1處之Xaa為麩胺酸，SEQ ID NO：7之位置65處之Xaa為離胺酸，SEQ ID NO：8之位置28處之Xaa為絲胺酸且SEQ ID NO：8之位置58處之Xaa為天冬醯胺。
  6. 如請求項4之抗體，其中SEQ ID NO：7之位置1處之Xaa為麩胺酸，SEQ ID NO：7之位置65處之Xaa為麩醯胺酸，SEQ ID NO：8之位置28處之Xaa為天冬胺酸，且SEQ ID NO：8之位置58處之Xaa為天冬胺酸。
  7. 如請求項1或4之抗體，其中該HC之胺基酸序列係由SEQ ID NO：9所載且該LC之胺基酸序列由SEQ ID NO：10所載；且其中：a.由SEQ ID NO：9所載之胺基酸序列為
    Figure 108144018-A0305-02-0046-29
    Figure 108144018-A0305-02-0047-30
    Figure 108144018-A0305-02-0047-31
    ；且其中位置1處之Xaa為麩胺酸或焦麩胺酸，其中位置65處之Xaa為離胺酸或麩醯胺酸，且其中位置441處之Xaa為甘胺酸或不存在；且b.由SEQ ID NO：10所載之胺基酸序列為
    Figure 108144018-A0305-02-0047-32
    Figure 108144018-A0305-02-0047-33
    ；且其中位置28處之Xaa為絲胺酸或天冬胺酸，且其中位置58處之Xaa為天冬醯胺或天冬胺酸。
  8. 如請求項7之抗體，其中SEQ ID NO：9之位置1處之Xaa為麩胺酸，SEQ ID NO：9之位置65處之Xaa為離胺酸，SEQ ID NO：9之位置441處之Xaa為甘胺酸，SEQ ID NO：10之位置28處之Xaa為絲胺酸，且SEQ ID NO：10之位置58處之Xaa為天冬醯胺。
  9. 如請求項7之抗體，其中SEQ ID NO：9之位置1處之Xaa為麩胺酸，SEQ ID NO：9之位置65處之Xaa為麩醯胺酸，SEQ ID NO：9之位置441處之Xaa為甘胺酸，SEQ ID NO：10之位置28處之Xaa為天冬胺酸，且SEQ ID NO：10之位置58處之Xaa為天冬胺酸。
  10. 一種α-突觸核蛋白抗體，其結合具有SEQ ID NO：13所示胺基酸序列之人類α-突觸核蛋白之以下殘基：位置115處之天冬胺酸、位置116處之甲硫胺酸、位置119處之天冬胺酸、位置126處之麩胺酸及位置128處之脯胺酸。
  11. 如請求項1至6及10中任一項之抗體，其中該抗體結合包含SEQ ID NO：13之殘基1-120之α-突觸核蛋白片段。
  12. 如請求項1至6及10中任一項之抗體，其中該抗體結合包含SEQ ID NO：13之殘基120-140之α-突觸核蛋白片段。
  13. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至12中任一項之抗體及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。
  14. 一種如請求項1至12中任一項之抗體之用途，其用於製造用於治療患有突觸核蛋白病之患者的藥物。
  15. 如請求項14之用途，其中該突觸核蛋白病為PD、MSA或AD。
  16. 如請求項14之用途，其中該突觸核蛋白病為DLB。
  17. 如請求項14或15之用途，其中該突觸核蛋白病為PD。
  18. 一種DNA分子，其包含編碼抗體HC之聚核苷酸，該抗體HC之胺基酸序列由SEQ ID NO：9所載。
  19. 一種DNA分子，其包含編碼抗體LC之聚核苷酸，該抗體LC之胺基酸序列由SEQ ID NO：10所載。
  20. 如請求項18之DNA分子，其中編碼該HC之聚核苷酸序列由SEQ ID NO：11所載。
  21. 如請求項19之DNA分子，其中編碼該LC之聚核苷酸序列由SEQ ID NO：12所載。
  22. 一種DNA分子，其包含編碼HC之聚核苷酸，該HC之胺基酸序列由SEQ ID NO：9所載，且包含編碼LC之聚核苷酸，該LC之胺基酸序列由SEQ ID NO：10所載。
  23. 如請求項22之DNA分子，其中編碼該HC之聚核苷酸序列由SEQ ID NO：11所載，且編碼該LC之聚核苷酸序列由SEQ ID NO：12所載。
  24. 一種經如請求項18之DNA分子及如請求項19之DNA分子轉形之哺乳動物細胞，該經轉形之哺乳動物細胞能夠表現包含兩條HC及兩條LC之抗體，其中每條HC之胺基酸序列由SEQ ID NO：9所載，且每條LC之胺基酸序列由SEQ ID NO：10所載。
  25. 一種經如請求項22之DNA分子轉形之哺乳動物細胞，該經轉形之哺乳動物細胞能夠表現包含兩條HC及兩條LC之抗體，其中每條HC之胺基酸序列由SEQ ID NO：9所載，且每條LC之胺基酸序列由SEQ ID NO：10所載。
  26. 一種用於產生抗體之方法，該抗體包含兩條HC及兩條LC，其中每條HC之胺基酸序列由SEQ ID NO：9所載，且每條LC之胺基酸序列由SEQ ID NO：10所載，且該方法包含：a.在使得該抗體得以表現之條件下培養如請求項24之哺乳動物細胞或如請求項25之哺乳動物細胞，以及b.回收該表現之抗體。
  27. 一種抗體，其可藉由如請求項26之方法獲得。
TW108144018A 2018-12-14 2019-12-03 抗α-突觸核蛋白抗體及其用途 TWI734279B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862779505P 2018-12-14 2018-12-14
US62/779,505 2018-12-14

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW202039560A TW202039560A (zh) 2020-11-01
TWI734279B true TWI734279B (zh) 2021-07-21

Family

ID=69143667

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW108144018A TWI734279B (zh) 2018-12-14 2019-12-03 抗α-突觸核蛋白抗體及其用途

Country Status (13)

Country Link
US (1) US20220048982A1 (zh)
EP (1) EP3894001A2 (zh)
JP (1) JP7254931B2 (zh)
KR (1) KR20210091256A (zh)
CN (1) CN113015557A (zh)
AU (2) AU2019395325B2 (zh)
BR (1) BR112021010990A2 (zh)
CA (1) CA3122690A1 (zh)
IL (1) IL283926A (zh)
MA (1) MA54455A (zh)
MX (1) MX2021006865A (zh)
TW (1) TWI734279B (zh)
WO (1) WO2020123330A2 (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3051839A1 (en) 2017-02-17 2018-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to alpha-synuclein and uses thereof
MX2022004311A (es) 2019-10-15 2022-05-10 Lilly Co Eli Estirpes celulares de mamiferos con deficiencia de lipasa/esterasa modificadas geneticamente de manera recombinante.
CN113912715B (zh) * 2021-12-15 2022-03-01 北京凯祥弘康生物科技有限公司 一种抗α-突触核蛋白抗体及其相关产品和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011104696A1 (en) * 2010-02-26 2011-09-01 Bioarctic Neuroscience Ab Protofibril-binding antibodies and their use in therapeutic and diagnostic methods for parkinson's disease, dementia with lewy bodies and other alpha-synucleinopathies
WO2017009312A1 (en) * 2015-07-13 2017-01-19 H. Lundbeck A/S Agents, uses and methods for the treatment of synucleinopathy

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080014194A1 (en) 2003-10-31 2008-01-17 Elan Pharmaceuticals, Inc. Prevention and Treatment of Synucleinopathic and Amyloidogenic Disease
SI2723379T1 (sl) * 2011-06-23 2019-03-29 Biogen International Neuroscience Gmbh Molekule, ki se vežejo ma anti alfa-sinuklein
JP5775974B2 (ja) 2011-10-28 2015-09-09 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド アルファシヌクレインを認識するヒト化抗体
UA118441C2 (uk) 2012-10-08 2019-01-25 Протена Біосаєнсиз Лімітед Антитіло, що розпізнає альфа-синуклеїн
EP3129051A1 (en) * 2014-04-08 2017-02-15 Prothena Biosciences Limited Blood-brain barrier shuttles containing antibodies recognizing alpha-synuclein
JP2017536102A (ja) * 2014-10-16 2017-12-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗アルファ−シヌクレイン抗体及び使用方法
PE20190440A1 (es) * 2016-06-02 2019-03-27 Medimmune Ltd Anticuerpos a la alfa-sinucleina y usos de los mismos
MA46836A (fr) 2016-11-15 2019-09-25 H Lundbeck As Agents, utilisations et procédés pour le traitement d'une synucléinopathie
CA3051839A1 (en) * 2017-02-17 2018-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to alpha-synuclein and uses thereof

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011104696A1 (en) * 2010-02-26 2011-09-01 Bioarctic Neuroscience Ab Protofibril-binding antibodies and their use in therapeutic and diagnostic methods for parkinson's disease, dementia with lewy bodies and other alpha-synucleinopathies
WO2017009312A1 (en) * 2015-07-13 2017-01-19 H. Lundbeck A/S Agents, uses and methods for the treatment of synucleinopathy

Also Published As

Publication number Publication date
AU2019395325B2 (en) 2023-06-29
AU2023204008A1 (en) 2023-07-13
CN113015557A (zh) 2021-06-22
US20220048982A1 (en) 2022-02-17
TW202039560A (zh) 2020-11-01
AU2019395325A1 (en) 2021-06-24
MA54455A (fr) 2021-10-20
EP3894001A2 (en) 2021-10-20
JP2022513481A (ja) 2022-02-08
IL283926A (en) 2021-07-29
JP7254931B2 (ja) 2023-04-10
CA3122690A1 (en) 2020-06-18
KR20210091256A (ko) 2021-07-21
WO2020123330A2 (en) 2020-06-18
WO2020123330A3 (en) 2020-07-23
MX2021006865A (es) 2021-07-02
BR112021010990A2 (pt) 2021-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11739140B2 (en) Antibodies specific for hyperphosphorylated tau and methods of use thereof
JP7227312B2 (ja) 抗Ｎ３ｐＧｌｕアミロイドベータペプチド抗体およびその使用
US20190367595A1 (en) Agents, uses and methods for the treatment of synucleinopathy
JP6290212B2 (ja) タウオパチーの処置方法
AU2017264975A1 (en) Anti-PHF-tau antibodies and their uses
JP6446443B2 (ja) タウオパチーの処置方法
CN110267985B (zh) 用于治疗眼科疾病的特异性针对过度磷酸化τ蛋白的抗体
EP2542571B1 (en) Oligomer-specific amyloid beta epitope and antibodies
TWI734279B (zh) 抗α-突觸核蛋白抗體及其用途
US20210292414A1 (en) Agents, uses and methods for treatment
WO2023206609A1 (zh) 针对p-tau 217的抗体及其用途
CN111263820A (zh) 抗序列相似家族19成员a5抗体用于治疗和诊断情绪障碍的用途
US20220275077A1 (en) Il-38-specific antibodies
KR20230039734A (ko) 항-Aβ 항체
RU2812765C2 (ru) Антитела к альфа-синуклеину и варианты их применения
WO2024027771A1 (zh) 靶向FAP和TGFβ的抗体融合蛋白及其用途
NZ788350A (en) Binding molecule specific for LIF and use thereof
OA18779A (en) Antibodies Specific for Hyperphosphorylated Tau and Methods of Use Thereof.
NZ720141B2 (en) Anti-phf-tau antibodies and their uses