TWI676684B - 乳酸桿菌、使用其製備色素之方法、乳酸桿菌培養物與包括其之色素組成物 - Google Patents

乳酸桿菌、使用其製備色素之方法、乳酸桿菌培養物與包括其之色素組成物 Download PDF

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Abstract

本申請案提出一種製備色素之方法，包括將短乳酸桿菌培養於含梔子萃取物之培養基質中進行發酵產生培養液，以製備黃色色素、綠色色素、藍色色素或其組合。透過此方法，可生產多種顏色之天然色素，且能夠不經純化、分離步驟而直接添加於食品中。

Description

乳酸桿菌、使用其製備色素之方法、乳酸桿菌培養 物與包括其之色素組成物
本發明關於一種生產色素的方法，特別是關於一種透過乳酸桿菌製備天然色素的方法。
近年來不斷地傳出食品添加物可能造成人體健康危害。其中，經常出現在食品中的「色素」，雖然使食品看來較為可口，但若不當使用卻可能造成傷害。許多研究顯示食用合成色素具有高風險，例如英國食品標準局委託南安普敦大學進行的研究發現，食用黃色4號(tartrazine)、食用黃色5號(sunset yellow)、食用紅色6號(ponceau 4R)、食用紅色40號(allura red)及酸性紅(carmoisine)等常用於飲料的合成色素，可能刺激青少年產生過動傾向。因此，消費者對食用合成色素的安全性產生疑慮，逐漸減少選擇添加合成色素的產品，而愈來愈多的食品製造商亦順應此趨勢，選擇使用天然著色食材或天然色素為產品增添色彩，故著色食材或天然色素的使用量節節上升。
雖然天然色素有上述優點，但天然色素的應用仍因下列原因而受 到限制：
(1)現有天然之梔子藍色素生產以溶劑提取法為主，其中使用有機溶劑，其溶劑毒性及安全性對於消費者而言仍有疑慮。
(2)現有天然色素安定性較差，且藍色色素的選擇性較少。
有鑒於上述先前技術的問題，本發明的目的就是在提供一種製備色素之方法，其以一般公認為安全的(GRAS，Generally Recognized As Safe)的乳酸桿菌與天然之梔子萃取物共同發酵製得天然色素。
根據本發明之一目的，提出一種短乳酸桿菌(Lactobacillus brevis)，其於民國106年4月11日寄存於中華民國食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，寄存編號為BCRC 910772。
根據本發明之另一目的，提出一種乾酪乳酸桿菌(Lactobacillus casei)，其於民國106年4月11日寄存於中華民國食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，寄存編號為BCRC 910773。
根據本發明之又一目的，提出一種製備色素之方法，包括將前述短乳酸桿菌(Lactobacillus brevis)或前述乾酪乳酸桿菌(Lactobacillus casei)培養於含梔子萃取物之培養基質中進行發酵產生培養液，以製備黃色色素、綠色色素、藍色色素或其組合。
較佳地，培養基質之pH值可為3~8。
較佳地，連續收取培養液以依序製備黃色色素、綠色色素或藍色色素。
較佳地，於培養液之OD400/OD590比值大於或等於10時，收取培養液以製備黃色色素。
較佳地，於培養液之OD400/OD590比值大於1及小於10時，收取培養液以製備綠色色素。
較佳地，於該培養液之OD400/OD590比值小於或等於1時，收取培養液以製備藍色色素。
較佳地，培養基質可更包括0.1~5wt%之碳源及0.1~3wt%之氮源，以該培養基質的重量為基礎。
較佳地，碳源可包括蔗糖、葡萄糖、乳糖、果糖或其組合。
較佳地，氮源可包括蛋白腖、大豆蛋白腖、酵母萃取物、麥芽精或其組合。
較佳地，可於25~37℃培養短乳酸桿菌或乾酪乳酸桿菌。
較佳地，可於非厭氧環境培養短乳酸桿菌或乾酪乳酸桿菌。
較佳地，梔子萃取物可為梔子果實之水萃物。
較佳地，所述方法可更包括自培養短乳酸桿菌或乾酪乳酸桿菌後之培養基質中去除短乳酸桿菌或乾酪乳酸桿菌。在一較佳實施例中，可透過離心或過濾去除短乳酸桿菌或乾酪乳酸桿菌。
較佳地，所述方法可更包括濃縮及乾燥培養短乳酸桿菌或乾酪乳酸桿菌後之培養基質。
根據本發明之再一目的，提出一種乳酸桿菌培養物，可藉由前述的方法所製得。
根據本發明之再一目的，提出一種色素組成物，其可包含有前述 之乳酸桿菌培養物，以及選擇性的載劑。
總的來說，本發明至少提供下列優點：
(1)根據本發明一實施例之方法係利用GRAS微生物及天然之梔子萃取物進行發酵，較無食品安全之疑慮，食用安全性高。
(2)利用單一株微生物及梔子萃取物，即可在同一批次之培養液中分別生產至少黃色、綠色及藍色三種天然色素，可因此減少培養槽的數量。根據本發明一實施例之方法所生產的天然色素可不經純化、分離步驟而直接添加於食物中，亦可用於生產多種不同色彩之乳酸菌相關產品，進而降低生產成本。
本發明的上述以及其它目的、特徵與優點，在參照以下的詳細說明與較佳實施例和隨文檢附的圖式後，將變得明顯。
圖1係根據本發明一實施例將菌株編號361、697、190、944、011及331乳酸桿菌培養於篩選平板之平板顏色變化情形。
圖2係根據本發明一實施例將菌株編號361及697乳酸桿菌潛力菌株分別培養於篩選平板3或6天之平板顏色變化情形。
圖3係根據本發明一實施例將菌株編號361乳酸桿菌培養1、3或6天所產生之發酵液顏色變化情形。
圖4係根據本發明一實施例將菌株編號361乳酸桿菌培養不同時間而製備的黃色、綠色及藍色乾燥乳酸桿菌培養物。
在以下的詳細描述中，為了解釋本發明，提供了許多具體細節，以便能徹底理解所揭露的實施方式。然而，顯而易見的是，一個或多個的實施方 式可以在沒有所述具體細節的情況下實現。在其它情況中，為了簡化附圖，習知的結構和流程將以示意性的方式顯示。
本發明之各個具體實例的細節說明如後。本發明之其他特徵將會經由以下各個具體實例中的詳細說明及申請專利範圍而清楚呈現。
無須進一步的闡述，咸相信本發明所屬技術領域中具有通常知識者基於前述說明即可利用本發明至最廣的程度。因此，可以理解以下的說明僅僅是作為例示說明之用，而非以任何方式限制其餘的揭露內容。
除非另有說明，否則此處使用之全部技術和科學名詞與本發明所屬技術領域中具有通常知識者通常所瞭解的意義相同。
此處所使用的冠詞「一」係指該冠詞的一或一個以上(即，至少一個)的文法受詞。
根據本發明之一實施例，提供一種製備天然色素之方法，包括將短乳酸桿菌(Lactobacillus brevis)或乾酪乳酸桿菌(Lactobacillus casei)培養於含梔子萃取物之培養基質中進行發酵，以形成培養液；及依培養液之OD400/OD590比值收取培養液。在一較佳實施例中，所述短乳酸桿菌係於民國106年4月11日寄存於中華民國食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，寄存編號為BCRC 910772且於西元2017年4月11日寄存於德國國家微生物菌種保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH；DSMZ)，寄存編號為DSM 32477。在另一較佳實施例中，所述乾酪乳酸桿菌係於民國106年4月11日寄存於中華民國食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，寄存編號為BCRC 910773且於西元2017年4月11日寄存於德國國家微生物菌種保藏中心，寄存編號為DSM 32478。
在一實施態樣中，梔子萃取物可為梔子果實之水萃物。在一較佳實施態樣中，梔子萃取物係透過以下方法所製備：將梔子果實去殼後，取100克的梔子果實加入300mL的純水進行萃取二次後，接著將水萃液進行濃縮及乾燥，製成橙黃色膏狀之水溶性梔子萃取物，而所述萃取物即可作為乳酸桿菌之培養基質之組成分之一。在一實施例中，濃縮、乾燥的方法可包括冷凍乾燥法、減壓蒸餾法或透析法等自水萃液中除去部分溶劑(例如水)的方法。本發明所屬技術領域中具有通常知識者亦可採用其他可萃取梔子色素的方法，不以此為限。
乳酸桿菌菌株篩選
首先，篩選可以在含梔子萃取物的培養基質平板上產生不同顏色菌落的菌株。
在一實施例中，將如表1所示之菌株編號361、697、190、944、011及331之6株乳酸桿菌菌株，以接種環接種至含有MRS培養基及0.5wt%梔子萃取物之篩選平板(如表2所示)，於37℃下靜置培養3天，並每天觀察菌落顏色變化。請參照圖1，其係根據本發明一實施例將菌株編號361、697、190、944、011及331乳酸桿菌培養於篩選平板之平板顏色變化結果。值得注意的是，培養菌株標號361與697二株菌株之篩選平板明顯變藍，表示該二株菌株具有產生藍色色素的潛力。
在另一實施例中，將前述菌株編號361及697的二株乳酸桿菌菌株，以接種環接種至篩選平板，於37℃下靜置培養，其中第1~3天於培養箱中靜置培養，而第4~6天則置於厭氧罐培養，並每天觀察菌落顏色變化。請參照圖2，其係根據本發明一實施例將菌株編號361及697乳酸桿菌潛力菌株分別培養於篩選 平板3或6天之平板顏色變化情形。如圖2所示，接種有菌株編號361及697二株乳酸桿菌的篩選平板於培養第3天時皆明顯變藍。而培養至第6天時，接種菌株編號361之篩選平板的藍色明顯較接種菌株編號697之篩選平板更深，這就表示在所篩選的乳酸桿菌菌株中，二株菌皆可用於生產藍色色素，但菌株編號361之菌株藍色色素的產量較菌株編號697之菌株更佳。
彩色乳酸菌株的培養條件
在以下實施例中，進一步探討各培養因子對乳酸桿菌的色彩變化之影響。
在本實施例中，培養基質組成及培養條件設計如表3所示。其中，以蔗糖、葡萄糖、乳糖、果糖或其組合作為碳源；及以蛋白腖、大豆蛋白腖、酵母萃取物、麥芽精或其組合作為氮源，培養乳酸桿菌。詳細地說，將菌株編號361之乳酸桿菌自儲存於-80℃之甘油保存管解凍後，於MRS篩選平板培養基上厭氧培養兩天，接著移植至另一個MRS篩選平板培養基再厭氧培養兩天。進一步，以10mL無菌水清洗菌體，並將菌液之濃度稀釋為OD600約3.0左右，作為液態培養之種菌。在12組試驗組之培養基質中皆添加1wt%梔子萃取物(以培養基質的重量為基礎)，並以1%之種菌接種量接種前述種菌。種菌接種後置於如表3所示之不同溫度及非厭氧/厭氧環境下靜置培養，並在培養7天後，將發酵樣品以10000rpm之轉速離心，取上清液以分光光度計偵測OD400及OD590吸光值，並且觀察OD400/OD590比值與顏色變化之關係。
結果如表3所示，培養液之OD400/OD590比值大於或等於10以上，發酵液顏色呈現為黃色，培養液之OD400/OD590比值大於1及小於10之間發酵液顏色呈現為綠色，培養液之OD400/OD590比值小於或等於1發酵液顏色則呈現為藍 色。也就是說，在本發明所述之方法中，可以根據培養基質組成及培養條件的不同，而產生不同顏色的乳酸桿菌培養液，無需添加不同受質或菌株。在本實施例中，經統計分析，菌株編號361之乳酸桿菌於溫度為30℃，在非厭氧環境下靜置發酵，並以蔗糖為碳源，以酵母萃取物、大豆蛋白腖及麥芽精為氮源，較容易產生藍色乳酸桿菌培養液。
在另一實施例中，進一步探討培養基質之起始酸鹼值對乳酸桿菌培養液之色彩變化的影響。其中，培養基質之起始pH值可為3、4、5、6、7或8。
相似地，將菌株編號361之乳酸桿菌自儲存於-80℃之甘油保存管解凍後，於MRS篩選平板培養基上厭氧培養兩天，接著移植至另一個MRS篩選平板培養基再厭氧培養兩天。進一步，以10mL無菌水清洗菌體，並將菌液之濃度稀釋為OD600約3.0左右，作為液態培養之種菌。在本實施例中，培養基質之組成為：蔗糖1wt%、大豆蛋白腖3wt%、酵母萃取物1wt%及梔子萃取物1wt%，以培養基質的重量為基礎。接著，在一實施態樣中，將前述培養基質之起始pH 值分別調整為4、5、6、7及8。在各不同pH值培養基質之實驗組分別以1%之種菌接種量接種前述種菌，並且將接種後之培養基質置於30℃之非厭氧環境下靜置培養。在培養4天後，將經發酵之培養液以10000rpm之轉速離心，取上清液以分光光度計偵測OD400及OD590值，並且觀察OD400/OD590比值與顏色變化之關係。
在本實施例中，菌株編號361之乳酸桿菌於不同起始pH值之培養基質中，分別培養4天後培養液的OD400/OD590比值與顏色變化的關係如表4所示。當培養基質之起始pH為4時，培養液之OD400/OD590比值大於或等於10者顯示為黃色培養液；當培養基質之起始pH為7或8時，OD400/OD590比值大於1及小於10者顯示為綠色培養液；當培養基質之起始pH為5或6時，OD400/OD590比值小於或等於1者則顯示為藍色培養液。這就表示，可以透過調控培養基質之起始pH值，而可控制乳酸桿菌的發酵而獲得不同顏色之乳酸桿菌培養液。
在又一實施例中，探討培養基質之組成與乳酸桿菌發酵時間對乳酸菌桿菌培養液的色彩變化之影響。
簡言之，將菌株編號361之乳酸桿菌自儲存於-80℃之甘油保存管解凍後，於MRS篩選平板培養基上厭氧培養兩天，接著移植至另一個MRS篩選平板培養基再厭氧培養兩天。進一步，以10mL無菌水清洗菌體，並將菌液之濃度稀釋為OD600約3.0左右，作為液態培養之種菌。
在本實施例中，如表5所示，調整8組試驗培養基質之碳源與氮源的組成比例。其中，各試驗組中皆添加1wt%梔子萃取物(以培養基質的重量為基礎)，並且培養基質之起始pH值皆調整至6。以1%之種菌接種量接種前述種菌，並且將接種後之培養基質置於30℃之非厭氧環境下靜置培養。在培養所述種菌3及6天後，將經發酵之培養液以10000rpm之轉速離心，取上清液以分光光度計偵測OD400及OD590值，並且觀察OD400/OD590比值與顏色變化之關係。結果如表5所示，當乳酸桿菌培養液培養至第3天時，第1、2、4及6組之培養基質發酵產生之乳酸桿菌培養液呈現綠色，而第3、5、7及8組之培養基質發酵產生之乳酸桿菌培養液呈黃色。然而，當乳酸桿菌培養液培養至第6天時，8組之乳酸桿菌培養液皆呈藍色。也就是說，在本發明之實施例中，透過調整乳酸桿菌的培養基組成份比例，可影響乳酸菌的代謝能力，加速轉化梔子萃取物變成綠色或藍色。
在又一實施例中，進一步探討培養基質之組成與乳酸桿菌發酵時間對乳酸菌桿菌培養液的色彩變化之影響。
簡言之，將菌株編號361之乳酸桿菌自儲存於-80℃之甘油保存管 解凍後，於MRS篩選平板培養基上厭氧培養兩天，接著移植至另一個MRS篩選平板培養基再厭氧培養兩天。進一步，以10mL無菌水清洗菌體，並將菌液之濃度稀釋為OD600約3.0左右，作為液態培養之種菌。
在本實施例中，培養基質之組成為：蔗糖5wt%、大豆蛋白腖1wt%、酵母萃取物3wt%及梔子萃取物1wt%，以培養基質的重量為基礎。接著，將培養基質之起始pH值皆調整至6。分別以1%之種菌接種量接種前述種菌，並且將接種後之培養基質置於30℃之非厭氧環境下靜置培養1、3及6天後，觀察其色素變化之情形。
請參見圖3，係根據本發明一實施例將菌株編號361乳酸桿菌分別培養1、3或6天所產生之發酵液顏色變化情形。如圖3及表6所示，培養第1天時OD400/OD590比值大於或等於10者發酵液呈現黃色，培養第3天時OD400/OD590比值大於1及小於10者發酵液呈現綠色，培養第6天時OD400/OD590其比值小於或等於1者發酵液呈現藍色。因此，以同一菌株及同一培養基培養乳酸桿菌，亦可以在不同的培養時間收取不同顏色的乳酸桿菌。本發明所屬技術領域中具有通常知識者應可理解，可依需求來安排收取培養液之次數及每次之收取量。例如，可一次收取所有培養液，亦可分2次或3次收取培養液，應不以此為限。
換句話說，根據本發明之一實施例，可透過乳酸桿菌對梔子萃取物的代謝作用，使發酵液逐漸由黃色變綠色，再進一步變成藍色。而在前段所述組成及pH值之培養基質培養下，可在同一批次或同一培養液中連續收取不同顏色的色素，例如在培養1天時收取培養液以製備黃色色素，在培養3天時收取培養液以製備綠色色素，且在培養6天時收取培養液以製備藍色色素。本發明所屬技術領域中具有通常知識者可視培養基質之組成及起始pH值或者培養液的 OD400/OD590比值而調整培養液收取的時間，應不以此為限。表6乳酸桿菌培養不同時間所產生之色素以分光光度計測得之OD400/OD590比值
在本發明之一實施例中，可將乳酸桿菌之培養液直接製成不同顏色之乳酸桿菌粉，例如黃色、綠色或藍色乳酸桿菌粉。
簡言之，首先將菌株編號361之乳酸桿菌自儲存於-80℃之甘油保存管解凍後，於MRS篩選平板培養基上厭氧培養兩天，接著移植至另一個MRS篩選平板培養基再厭氧培養兩天。進一步，以10mL無菌水清洗菌體，並將菌液之濃度稀釋為OD600約3.0左右，作為液態培養之種菌。
在本實施例中，培養基質之組成為：蔗糖5wt%、大豆蛋白腖1wt%、酵母萃取物3wt%及梔子萃取物1wt%，以培養基質的重量為基礎，並且將培養基質之起始pH值皆調整至6。接著，分別以1%之種菌接種量接種前述種菌，並且將接種後之培養基質置於30℃之非厭氧環境下靜置培養。分別培養1、3及6天後，將不同顏色乳酸桿菌培養液分別添加10wt%糊精，以培養液的重量為基礎。接著，將所述添加糊精之培養液進行冷凍乾燥後，將其研磨後分別製成黃色、綠色及藍色乳酸桿菌粉，如圖4所示。在本實施例中，將培養液乾燥的方法以冷凍乾燥法為例，亦可使用包括減壓蒸餾法或透析法等本發明所屬技術領域中具有通常知識者所熟知之能夠除去部分溶劑(例如水)的任何方法，不以此為限。
將前述不同顏色之乳酸桿菌粉分別溶於100倍的純水後，離心取 上清液並以分光光度計分別偵測OD400及OD590，以觀察OD400/OD590比值，其結果如表7所示。由此可知，根據本發明一實施例之製備色素的方法確實可以利用單純之培養基質，而透過乳酸桿菌培養條件的調控製備出不同顏色之色素及色素組成物。
在一實施例中，提出一種具有不同顏色之乳酸桿菌培養物，其是藉由前述的方法所製得。所述顏色包括黃色、綠色或藍色。
因此，在另一實施例中，提供一種色素組成物，其包含有如前述乳酸桿菌培養物，以及選擇性的載劑。所述組成物可應用於，包括但不限於，醫藥品或食品等領域中。
依據本發明的色素組成物可利用本發明所屬技術領域中具有通常知識者所詳知的技術，而製造成一適合於非經腸道地、局部地或口服地使用的劑型。
較佳地，所述色素組成物能夠製成適於口服(oral administration)的劑型，包括但不限於：溶液(solution)、懸浮液(suspension)、乳劑(emulsion)、粉末(powder)、錠劑(tablet)、丸劑(pill)、糖漿(syrup)、***錠(lozenge)、片劑(troche)、口香糖(chewing gum)、膠囊(capsule)、濃漿(slurry)以及類似之物。
如本文中所用的，術語「載劑」可指一種當投藥時不會在投予之個體內造成過敏性反應或其它非所欲之效用的載劑。在本申請案中，載劑可包含一或多種選自於下列的試劑：溶劑(solvent)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤滑劑(lubricant)或其類似之物。
於是，所述乳酸桿菌培養物或包含其之色素組成物，可以作為食品添加物(food additive)，而藉由習知方法於原料製備時被添加，或是配製成供人類與非人類動物攝食的食品產品。
根據本發明之實施例，食品產品的種類包括但不限於：奶粉(milk powder)、飲料(beverages)、甜點(confectionery)、糖果(candies)、發酵食品(fermented foods)、動物飼料(animal feeds)、健康食品(health foods)、膳食補充品(dietary supplements)、果凍(jellys)、嬰兒配方(infant formulas)、沙拉醬(dressings)、蛋黃醬(mayonnaise)、塗醬(spreads)、鮮乳油(creams)、醬料(sauces)、布丁(puddings)、冰淇淋(ice-cream)、烘培產品(bakery products)、蕃茄醬(ketchup)、芥末(mustard)、保鮮劑(antistaling agent)、生物製劑(biocontrol agnet,BCA)或拮抗酵母菌(antagonisitic yeast)等。
綜上所述，根據本發明一實施例之方法係利用GRAS微生物及天然之梔子萃取物進行發酵，無食品安全之疑慮，食用安全性高。並且，將單純乳酸桿菌與含梔子萃取物之培養基質共同培養，即可透過調控培養時間及培養條件便可生產至少黃色、綠色及藍色三種天然色素。而該天然色素可不經純化、分 離步驟而能夠直接添加於食物中，亦可用於生產多種顏色之乳酸桿菌相關產品，例如黃色、藍色或綠色優酪乳或優格等，進而降低生產成本且可增加食用的樂趣。
以上所述僅為示例性，而非為限制性。任何未脫離本發明的精神與範疇，而對其進行的等效修改或變更，均應包含於申請專利範圍所界定的範圍中。
【生物材料寄存】 國內寄存資訊
TW中華民國，食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，民國106 年4月11日，寄存編號為BCRC 910772。
TW中華民國，食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，民國106年4月11日，寄存編號為BCRC 910773。
國外寄存資訊
DE德國，國家微生物菌種保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH；DSMZ)，西元2017年4月11日，寄存編號為DSM 32477。
DE德國，國家微生物菌種保藏中心，西元2017年4月11日，寄存編號為DSM 32478。

Claims (18)

  1. 一種短乳酸桿菌(Lactobacillus brevis)，其於民國106年4月11日寄存於中華民國食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，寄存編號為BCRC 910772。
  2. 一種製備色素之方法，其包括：將如申請專利範圍第1項所述之短乳酸桿菌(Lactobacillus brevis)培養於含一梔子萃取物之一培養基質中進行發酵產生一培養液，以製備一黃色色素、一綠色色素、一藍色色素或其組合。
  3. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中該培養基質之一pH值為3~8。
  4. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中連續收取該培養液以依序製備該黃色色素、該綠色色素或該藍色色素。
  5. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中於該培養液之OD400/OD590比值大於或等於10時，收取該培養液以製備該黃色色素。
  6. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中於該培養液之OD400/OD590比值大於1及小於10時，收取該培養液以製備該綠色色素。
  7. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中於該培養液之OD400/OD590比值小於或等於1時，收取該培養液以製備該藍色色素。
  8. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中該培養基質更包括0.1~5wt%之碳源及0.1~3wt%之氮源，以該培養基質的重量為基礎。
  9. 如申請專利範圍第8項所述之方法，其中該碳源包括蔗糖、葡萄糖、乳糖、果糖或其組合。
  10. 如申請專利範圍第8項所述之方法，其中該氮源包括蛋白腖、大豆蛋白腖、酵母萃取物、麥芽精或其組合。
  11. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中於25~37℃培養該短乳酸桿菌。
  12. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中於一非厭氧環境培養該短乳酸桿菌。
  13. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中該梔子萃取物係一梔子果實之水萃物。
  14. 如申請專利範圍第2項所述之方法，更包括自培養該短乳酸桿菌後之該培養基質中去除該短乳酸桿菌。
  15. 如申請專利範圍第14項中所述之方法，其中透過離心或過濾去除該短乳酸桿菌。
  16. 如申請專利範圍第2項所述之方法，更包括濃縮及乾燥培養該短乳酸桿菌後之該培養基質。
  17. 一種乳酸桿菌培養物，其是藉由如申請專利範圍第2至16項中任一項的方法所製得。
  18. 一種色素組成物，其包含有一如申請專利範圍第17項的乳酸桿菌培養物，以及一選擇性的載劑。
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