TWI247013B

TWI247013B - A crystalline form of compound useful in thrombin inhibitors, and the process for making the same

Info

Publication number: TWI247013B
Application number: TW088114464A
Authority: TW
Inventors: Daniel Edvardsson; Lena Hedstrom; Anita Lundblad; Ursula Pettersson
Original assignee: Astra Ab
Priority date: 1998-09-03
Filing date: 1999-08-24
Publication date: 2006-01-11
Also published as: CU23015A3; ZA200101763B; WO2000014110A1; EP1107980A1; JP3493341B2; ES2192101T3; EE200100135A; US6888007B2; HRP20010132A2; BR9913464A; DK1107980T3; US20010023244A1; US6440939B2; US20060287249A1; CN1325406A; DE69905054D1; NZ524486A; NO20011083L; US20050153901A1; IS5870A

Description

1247013 五、發明說明（1) 發明領域本發明是有關藥物新穎的固體合物，及彼之製法。發明背景在藥物組合物之調和物中，藥型式是十分重要的。其重要性不之製造過程而言，也就接下來製調和物（如口服劑型，如錠劑）觀再者，在製造口服藥物組合物可提供可信賴的，可再現的及固很重要的。在製造含有抗血栓王特別重要。 ^ 活性組份之化學穩定性，固鉍: 是十分重要的因素。藥物及含波貯存一較有感知時期，而不會出大的改變（如其化學組成，密度，再者，可提供儘可能化學上純在此方面，無晶形物質會出現通常難以操作及調和，而有不被穩定及化學上不純的。精藝者應了解，若藥物可呈穩，則上述問題均可解決。因此，在製造商品上可生存且物時，無論如何儘可能提供呈實狀態形式，含彼之醫藥組物呈可合宜地操作及處理僅是就獲得商業上可生存成含有活性化合物之醫藥點而言。方面，藥物投予至病人後定的藥物血中濃度概況是成劑之組合物方面，此點 4大態穩定性及π貯架期"也之組合物，應可有效率地現活性組合物化特性上重吸濕性及溶解度）。的型式也是十分重要。重大問題。例如，此物質信賴之溶解度，且常是不定結晶形式被容易地獲得藥學上可接受的藥物組合質上結晶及穩定之形式是

1247013 五、發明說明（2) 1—~- 十分重要的。然而’應可注意到，此目標並非始終可達得到。讀實典型而言’單獨就分子結構，是無法預測化合物是何二二 . 业、w < j 口曰曰狀此’不論是如此或其鹽型均然。此點只能在實一決定。 ' 扭上進仃先前技藝國際專利案W0 9 7/ 2 349 9揭示許多化合物，其頃發現可作為凝血酶抑制劑之前藥，此凝血酶抑制劑有下列通式.

Ra〇2C-CH2-(R)Cgl -Aze-Pab-Η 其中Ra代表Η，芩基或烷基，Cgl代表環己基甘胺酸，f Aze代表S-吖丁啶-2 -羧酸及Pab-H代表4-胺甲基-啸基笨。活性凝血酶抑制劑本身揭示於先前之國際專利案 W〇 94/ 2 93 3 6 中。 '

W0 9 7/2 349 9也包括以下化合物特殊之揭示： Et02C-CH2-(R)Cgl -Aze-Pab-OH 其中Pab-ΟΗ代表4-胺甲基—苯肟。此化合物之合成過程述於W0 9 7/ 2 3 4 9 9之實例17中，其中以製備式RpLC純化，亦分離成無晶體形式。在从’〇9 7/ 2 3 4 9 9中亦未提供Et〇2C-CH2-(R)Cg卜Aze -Pab- Λ 0Η是否可呈晶體形式。再者，關於此化合物如何進行才可獲得此型式也無資针顯示。本發明之揭示令人驚言牙地’吾等發現Et〇2C-CH2-(R)Cg卜Aze-Pab-0Η可以一種以上型式被獲得，其在本質上是實質的結晶形式。：

第5頁 1247013 五、發明說明（3) 因此，依據本發明的第一方面，在此提出一 (R)Cgl -Aze-Pab-OH，或其藥學上可接受之鹽，均呈奋巧上之結晶形式（以下稱為本發明化合物）。戸、貝雖然吾等發現可以大於80%結晶形式產生Ε1:02(Ν(^ — (R)Cgl-Aze-Pab-0Η及其鹽，而吾等之"實質上之仏2 、、晶形式”包括大於1 0%(如大於20%)，較好大於30%，且承， K好大於 4 0%之結晶形式。結晶性之程度（％)可利用X-射線’ 末、、射 (XRPD)由精藝者決定。其他技術，如固態關r， 1 R，

Raman分光術，差示掃描熱量測定法（DSC)及微量#曰 ϊ:測定法，也可使用。可提及之適合的藥學上可接受鹽包括無機及有撫巧，酸性及驗性加成鹽，如鹵化氫鹽（如HBr鹽），緩酸鵾，y 磺酸鹽（如線形或分支之(^6烷礓览鹽），較好是c ^ 1、3境續酸鹽，且尤其是乙烷及曱烷磺酸鹽）及銨及胺鹽。也及甲烷磺酸鹽。可提及之鹽類之完全表列可見gerge efal J· Pharm. Sci·， 66， 1 (1977)。然而’吾等較喜本發明化合物非呈鹽型式。

本發明化合物可呈溶劑化物型（其中可包括水合物）。令人驚f牙地，吾等發現本發明化合物與在ψ 〇 9 γ / 2 3 4 9 9 的述製備之Et02C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH比較時，有較為改進之穩定性。依據本發明進一步方面，因此是提出EtOJ-CldlOCg卜 Aze-Pab-OH之穩定型式，或其藥學上可接受之鹽。所謂’穩定性π如此中所定義的包括化學穩定性及固態

第6頁 1247013 五、發明說明（4) 穩定性。 ’ 式，或於^穩定性’’吾等包括化合物或鹽，可貯於經分離型釋劑或佐:η型式下，其中與藥學上可接受之載劑，稀於正堂『1 (如在口服劑型下，如錠劑，膠囊劑等），而，，固$ ☆条件下，無顯著的化學降解或分解程度。弋於，穩定性”包括化合物或鹽’可貯於經分離型式， % 或佐叫批人彳式下，其中與藥學上可接受之載劑，稀釋劑 A^3 (如在口服劑型下，如錠劑，膠囊劑等），於正 1 I條件下’無顯著的固態轉形程度（如結晶作用，再 2曰曰 '用’固怨相之轉換，水合作用，脫水作用，溶劑化作用或去溶劑化作用）。

/正常貯存條件π之實例包括a秀在-so及5〇r之間（較好疋〇及4 〇 C間，又較好是室溫γ '如1 5 - 3 〇 °c ),壓力在約〇 · 1及2巴間（較好是大氣壓力），及5及g & %間之相對濕度 (較好10-75%)及/或曝於4 6 0 lux UV/可見光下，一段長時間（即大於或等於6個月）。在此條件下，本發明化合物可見有15%以下，較好10%以下，尤其是5%以下之化學降解/ 分解、，或固態轉形。精藝者應了解，上述的溫度，壓力及相對戒度之上下限代表正常貯存條件之極限，且這些極限的某些組合在正常貯存下將是無法經歷到的（如5 〇 ^之溫度及0. 1巴之壓力）。本發明化合物可由Et〇2C-CH2-(R)Cg卜Aze-Pab-OH或其鹽行結晶作用而有益地獲得。、依據本發明進一步方面’在此提出本發明化合物之製法

1247013 五、發明說明（5) ，其中包括結晶£1;02[：-(：112-（1〇0§卜./\2 6-？31)-0[{或其藥學上可接受之鹽。可在有或無溶劑系統下結晶化£1:02(：-(：[12-（1〇〇£卜八26-Pab-ΟΗ及其其藥學上可接受之鹽（如結晶作用可得自融解物，於超嚴苛條件下，或由昇華達成）。然而吾等較喜自、適合的溶解劑系統中行結晶作用。 . 吾等發現’將可有益地結晶Et02C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-〇H及其藥學上可接受鹽，經由結晶作用繼而溶解問題中之化合物或鹽，或較有益的是由反應溶液中萃取出之溶液中| ，此中是問題所在之化合物或鹽被形成之處，或特別有益，> 的是得自反應溶液，此中是問題所在之化合物或鹽被形成之處。 • 1 :二一- 溶劑系統可以是與異質的或貧質的，且因此可含有一種以上的有機溶劑，如醋酸烷酯（如直線或分支之Ci_6醋酸烷醋，如乙酸乙酯，乙酸異丙酯及乙酸丁酯），4氐碳（如直線或分支的匕_6)烷基醇（如乙醇，異丙醇），脂族及芳族烴（如異辛烷，正庚烷及甲苯），二烷基酮（如甲基異丁基酮），乙睛及二烷基醚（如二異丙基醚）及/或水性溶劑，如水。

也可使用上述溶劑任一者之混合物。不同的結晶形式在不同有機溶劑中於任何特定溫度下可有不同之溶解度。基於此，上述之溶劑可充作”抗溶劑" (即其中本發明化合物不易溶解之溶劑），且因此有助於結晶化過程。當結晶作用在E t〇2 C - C H2 -（ R ) C g 1 - A z e - P a b - 0 Η或其鹽被形 1247013 五、發明說明（6) 成之反應溶劑中發生，或在萃取後之溶劑中發生，則適合的溶劑包括烷基醋酸酯（如乙酸乙酯），甲笨，甲基異丁基酮，低碳烷基醇（如乙醇等）。自適合的溶劑系統中可達成本發明化合物之結晶作用，係在含有E t 〇2 C - C H2 - ( R ) C g 1 - A z e - P a b - 0 Η或其鹽之溶劑系統中行過度飽和而成，如經由冷卻，經溶劑蒸發及/或可加入抗溶劑（即其中本發明化合物不佳溶解之溶劑（如異辛烷，正庚烷，二異丙醚，甲苯）），或經由加鹽（加NaCl或三乙胺· H C 1)減低物質之溶解度。結晶溫度及結晶時間依據溶液中化合物之濃度，及所使用之溶劑系統而定。結晶作用也可在有或無本發明適合的結晶化合物晶種加 ^ ---- 入下啟動及/或達成，及/或可@由pH之調整而成。本發明化合物可製備成溶劑化物型式（此中包括水合物，如一水合物）或其他（如呈無水型式）（所謂”無水的π用於本案中也包括〃無溶劑化物〃）。為禮保可產生無水物，則發生結晶作用之溶劑必須乾燥之，於結晶過程前或之間，以將水含量減低至臨界水平之下，而在結晶作用中此應較好不可超過。溶劑可在結晶過程中乾燥，如將欲結晶之化合物及適合的有機溶劑/水性溶劑系統之混合物水含量減少（如增加所存在之有機溶劑含量及/或可形成共沸物而移去水份，並加上相繼以蒸餾 ―作用）。為確保產物一水合物，水必須存在於發生結晶作用之溶 __

1247013 五、發明說明（7) 劑中。在結晶作用中，水含量應保持在臨界水平之上。水之”臨界值水平"依以下因素而定，如溫度，欲結晶化合物溶液中之濃度，雜質概況，及所應用之溶劑系統，但也可非本發明的決定。因此，依據本發明的進一步方面，在此提出呈無水形式之本發明化合物，及呈一水合物型式之本發明化合物。結晶狀無水物之製備，則可自一種以上之有機溶劑中 (如乙酸乙酯，乙酸丁酯，乙醇，異丙醇，異辛烷，二異丙醚，水或其混合物）結晶Et02C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab_0H 而成，其已經過乾燥及/或在結晶過程中已乾燥，如此水含量可低於上述之臨界水平。因此，無水物可由實質上無水之溶劑系統中行結晶作用而產生。 . 1 =二〜一而"實質上無水"包括在溶劑系說中之水含量太低，以致對任何特定的溶劑系統及結晶條件組而言，最多造成1 0 % 一水合物之形成。相反的，結晶狀一水合物可由E t 02 C - C H2 - ( R ) C g 1 - A z e -Pab-OH自溶劑系統中結晶而成，此溶劑系統含有水，或水及一種以上有機溶劑之組合，包括可溶解水之有機溶劑 (如乙酸乙醋，乙醇，異丙醇）。結晶狀一水合物也可由物質溶解在低pH值之水溶液中 (如水或水及醇之混合物，如乙醇或異丙醇）中，繼而加入弱絵：直到ρ Η超過5至6 (在室溫下）而獲得。結晶水一水合物也可經由其他結晶形式製備（如無水型式）。為達成此是當若在結晶作用中有超出上述所謂臨界

第10頁 1247013 五、發明說明（8) =:里❼3。類似地，結晶狀無水物合A ’即將水含量降低至上丹^傷自結晶過程中而言。 ^ π水含量下，無^物或一水合物何者先結晶是和在式之力學及平衡條件有關。因此，如梦二條件下個別型所得之結晶形式依結晶過程之動力:蟄者可感知的，在某些熱動態平衡條件下（溶劑系統，溫；動態平衡而定。明化合物之濃度），一結晶形可能較另—=壓力及本發，”結晶形式也可能是動力學上有益的更穩定日日狀一水此係指結然而力學因素外，如時間，雜質概況 ........攪動，曰因此’除了動會影響所出現之形式。因此，·此中所討％ : J 2存在等也者依適當性而採用，以獲得不同的結晶形式可為精藝 (:3二合』“可由在水羅及-種以上有機溶劑 (如乙酥或異丙酵）之混合物中，洗提其他結晶形式/ 水形式）而形成。所形成之淤漿較好加有結晶形一水合^ 之晶種，以確保發生適合的轉形作用。如前述，此中有所謂臨界水含量，其和所應用之溶劑系統及溫度有關。因此，吾等發現呈一種結晶形式的本發明化合物，可麫由再結晶作用互變成其他的結晶形式。 ^ 依據本發明進一步方面，在此提出將本發明化合物之一種結晶形式轉化成另一型式之過程，其中包括自適合的溶劑系統中再結晶本發明化合物。本發明無水物之化合物，含的水量不超過3 %，較好2 %，更好1%且又更好是0. 5% (W/W)，不論此水是結合的（結晶

第11頁 1247013 五、發明說明（9) 水或其他）或未結合的。水合物則是在每莫耳£ t C - c H2 -(R)Cg卜Aze_Pab-〇H下水含量不少於〇·5莫耳。本發明較佳的化合物是呈無水型式者。依據本發明進一-步方面，在此提出水含量不超過3% (w/w)，較好2% (W/W) 之化合物’不論此水是否結合（結晶水或其他）。當本發明化合物欲呈酸性或鹼性加成鹽型式被產生時，可在達成結晶作用前於結晶混合物中加入適合的酸或鹼。另外，於鹽加入後，所有的溶劑可蒸發且所生成之鹽之結晶及/或無晶形可再溶於適合的溶劑系統中，如曱酸乙酯鲁或烷基終，如正庚醇或正辛醇，繼以攪動所生成之溶液，此係美於講生結晶作用。較值之加成鹽包括酸加成鹽。之氫溴化物及甲烷磺酸鹽〜二本發明化合物尤其是無水物，及一水合物，其製備及特性評述於下。本發明不同結晶形式之化合物（如無水物及一水合物）可利用方法容易地鑑疋’如下文所述之方法。為了確保在然其他所述結晶形下製成如此中所述之结晶形式，結晶作用較好在完全沒有此中所述其他結晶形式之晶核及/或晶種下，種以欲求結晶形式之核及/或晶種而完成。此，點特別可應用至各特異的結晶形式，其製備述於以下實例中。本發明化合物可利用精藝者熟知之技術分離，如傾析，過濾或離心。

1247013 五、發明說明（ίο) 化合物可利用標準技術乾燥。精及乾燥時間可影響溶劑化物之固態在高溫及/或減壓下發生脫水作用）成結晶一水合物後，此中存在有臨法進行乾燥，因會流失結晶水且會即若在高溫下或極低壓力下較長時流失。吾等應用如此中所述之結晶過程可產生化學純度較在第一例中所分 Aze_Pab-0H或鹽，還耍高之本發明本發明化合物進一步的純化可利達成。例如，經由自適合的溶劑系 •:二一--- 質（如乙酸乙酯，異丙醇，異辛，用於再結晶之適合溫度及時間，依濃度，及依所使用之溶劑系統而定當本發明化合物依此中所述地結化合物或鹽係在上述之化學及固態型式下。醫學製劑及醫療用途依據本發明，本發明化合物可採經頰，經肛門，經皮，經鼻，經氣任何的腸外路徑，或經由吸入方式本發明化合物於藥學上可接受之劑本發明化合物呈適於口服之型式。藝者應明白，乾燥溫度特性，如水合物（如可以及鹽類。例如，在形界濕度，低於此則應無發生固態之轉形作用，間之乾燥，結晶水將會，結果發現吾等有可能離之 Et02C-CH2-(R)Cg 卜化合物。用精藝者熟知之技術來統中再結晶，可移去雜或這些溶劑之組合）。溶液中化合物或其鹽之〇晶或再結晶，所生成之穩定性上均有所改進之口服，靜脈内，皮下，管，經支氣管，經其他，呈醫學製劑型式含有型下。然而，吾等較喜

第13頁 1247013 五、發明說明（11) 依據失調症，欲治療之病人’以及投藥路徑，化合物可以各種劑量投予（見下文）。本發明化合物可在調和成適合的醫藥調合物之前進一步的處理。例如，結晶形式可輾磨或磨粉成較小粒子。依據本發明進一步方面，此中提出含有本發明化合物並摻和藥學上可接受佐劑，稀釋劑或載劑之醫藥調和物。應用於此調和物中之本發明化合物含量，依欲治療之狀況及病人，以及所應用之化合物而定，但也可非本發明所決定。本發明化合物在投予後可在體内代謝形成具有藥理活性之化合物，因而是有用的。因此其可視為藥物，特別是作為具藥理活性化合物之前藥。特言之，本發明化合物，本|〜雖然對凝血酶是無活性，但在體内可代謝形成凝血酶之強力抑制劑，如 W0 9 7/ 2 34 9 9中所述之試驗中證明一般。本發明化合物預期可用於治療需要或欲求有凝血酶抑制之狀況，包括在 W0 97/ 2 34 9 9中所述者’其揭示已列為本案參考用。在哺乳動物患者（尤其是人類）治療及/或預防治療上，本發明化合物之適合劑量為經口投藥之2至2〇〇毫克/每天範圍，經腸外投藥之1至100毫克/每天範圍，及/或〇〇〇1 至2 0毫克/公斤，較>好〇· 01-5毫克/公斤體重每天於經口投藥，及0.0005至10宅克/公斤，較好〇〇〇5至25毫克/公斤體重在腸外投藥時。依據本發明進一步方面，此中k出需要或欲求凝血酶抑

第14頁

1247013 五、發明說明（12) 幸丨J 叫、、u 机〉兄之治療方法，此方法包括對需此治療之病人投予治療上有效劑量之本發明化合物。為避免有疑慮’所謂”治療”吾等包括狀況之治療性處理以及預防治療。本發明化合物是有可提供更易於操作之型式之優點。再者’本發明化合物具有可製成具經改善之化學及固態穩定性（包括較低的吸潮性）型式之優點。因此，化合物當貯於長時間係仍是穩定的。

本發明化合物也具有可以良好產率，較高純度，較少時間’較合宜’且在較低費用下，此乃和先前製備之Et〇2C — CHfCIOCg卜Aze-Pab-0H型式比較而言，結晶之優點。本發明由以下實例加以說明，但不予以限制，並參考所附之圖表，其中：夂圖1示出經由實例1所得之Et〇2C —CH2—(R)Cgl-Aze — pab — 0H 結晶形式之X射線粉末繞射圖。圖2示出經由實例6所得之Et02c-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH 一水合物結晶形之X射線粉末繞射圖。

圖3示出經由實例9所得之Et〇2C-CH2-(R)CghAze-Pab-OH 氫溴化物結晶形之X射線粉末繞射圖。圖4示出經由實例12所得之Et〇2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-〇H烷磺酸鹽結晶形之X射線粉末繞射圖。圖5示出經由實例14所得之Et〇2C-CH2-(R)Cg卜Aze-Pab-0 Η結晶形之X射線粉末繞射圖。一般步驟

第15頁 1247013 五、發明說明（13) X射線粉末繞射分析（X R p D )在樣品上依標準方法製備，如下列文獻所述：Giacovazzo，C· etal (1995)， Fundamentals of Crystallography, Oxford University Press; Jenkins, R. and Snyder, R. L. (1996), Introduction to X-Ray Powder Diffractometry, John Wiley & Sons, New York; Bunn, C. W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London; or Klug, Η. P. & Alexander, L. E. (1974), X-ray Diffraction Procedures, John Wiley and Sons, New York· X-射線分析利用Siemens D5000繞射計及/或 Ph i 1 ips X’ Pert MPD 進行。繞射掃描熱量測定法利用Me 111 e r DSC8 2 0儀器進行。熱 t r ：r 一 ”、重力測定分析（TGA)利用MettleYToledo TGA85 0儀器進行〇依下實例所製備之型式（當自己形成相同結晶形式之相關型式/溫度自記曲線（可供實驗誤差）中澄清出來時，顯示與下述之其他實例有”基本上，，相同的XRPD繞射型式及/ 或DSC及/或TGA溫度自記曲線。因此，DSC開始溫度可有 ±5 °C之變化（如±2 °C)，且XRPD距離數值可在最後小數位置處有± 2範圍之變化。實例1 E109C — CH9- ( R ) Cg 1 — Az e — Pab — 〇 Η 之、结晶作用 2 0 0 毫克的Et02C-CH2-(R)Cgl - Aze-Pab-0Η(無晶形；由國際專利案W0 9 7/234 9 9實例17所述方法中所得之產物經冷

第16頁 1247013 5L、發明說明（14) 凍乾燥而得）溶於二異丙基醚：異再醇混合物中（1 1:1)。最初會形成均質的溶液，令其在室溫下靜J 。過濾及乾燥（環境溫度下）可生成1 6 0毫克結晶產結晶以XRPD分析，結果示於下表（表1，其中R I千強度）且示於圖1。表1 d-值/A RI d-值/A RI d - 值 / A R I 12.0 VS 4. 42 m 3.10 w 10. 0 m 4. 22 w 3.03 w 8. 2 S 4. 1 1 m 7. 2 m 4. 06 m 6.0 m 3.99 m 5.5 m 3. 78 w 〜二 5. 0 m 3. 72 m 4. 92 s 3. 62 m 4.85 s 3. 34 w 4. 80 m 3. 1 1 w 時對

系〇 )A 單位細胞自單一結晶X -射線數據中決定。其係三斜晶的結晶，有P1對稱，Ζ=1，及以下尺寸大小：a = 5. 149( 1 ，b= 1 0. 4 6 6 ( 1 )¾，(:二 12. 317(1)&，α= 8 0.3 2 ( 1 )° ， /5= 7 9.7 8 ( 1 )° ， r=75.57(l)° ，及 V = 62 7. 2 ( 2 )A3 。溫 DSC顯示吸熱及約1 5 ◦ °C (約1 1 3焦耳/克）之外推的開始度。TGA顯示在150 °C左右，約有0· 6% (W/W)質量的減少實例2

mu

第17頁 1247013 ,-----------------1 五、發明說明（1d) A 装敌溶液中 M l〇9C7CH。-（R)Cgl -Aze-Pab-0H 結晶 70毫升的乙酸乙酿裝入140.3克Et02C~CH2-(R)Cgl - Aze -pab-OH萃取溶液（依W0 97/ 2 34 9 9所述之類似步驟合成，以乙醇為溶劑，以丙酮驟冷，濃縮所生成之溶液，並以乙酸乙酯萃取）。如此製成之溶液含有乙酸乙酯，乙醇及水 - (8. 7% W/W)。溶液以相繼蒸餾濃縮及乾燥，在2 50毫巴及 _ 6 0 °C浴溫下進行。7 0毫升的乙酸乙酯裝入最初溶液中，將之濃縮直到留下4 6克溶液為止。再於溶液中加入1 0 3毫升乙酸乙酯，其再以濃縮至留下7 0. 5克。得到類似實例3方麄法之結晶種後，將之加入且所生成之懸液在4 〇 t：下攪動3 小時，冷卻至2 0 °C歷5小時，再至5 °C歷2 · 5小時，最後至 -5 t：歷1小時。於漿再於最終溫度下攪動一夜，並濾出晶二：二·〜體，以乙酸乙酯洗滌再於4 0 °C^壓下乾燥一夜。晶體以X R P D ’ D S C及T G A分析，且顯示和依實例1所得型式所呈現的。有實質上相同的繞射型式，開始溫度及質量之減低。 H〇)C-CH9-(R)Cgl-Aze-Pab-〇H 之爯钴口曰口實例3 3.0 克的 Et02C-CH2-(R)Cg 卜 Aze-Pab-OH(粗製的；依上實 j 例2所边方法獲得）溶於49· 5毫升異丙醇及4. 5毫升純水， 6 0 C下。溶液以相繼蒸德濃縮及乾燥，在1 〇〇毫巴及6 〇 f溫中進行。溶液先濃縮，直到留下1 7 · 5克為止。再加3 〇爱升異丙醇至生成物中，且溶液濃縮直到留下2 0克為止。：再於溶液中加入1· 8克的異丙醇及Et02C-CH2-(R)Cgl-Aze-;

第18頁 1247013 五、發明說明（16) fab-ΟΗ之晶種（經下實例5之類似方法獲得）。懸浮液在4〇 C下攪動3小時，再冷卻至2 〇 °c 5小時，5 0 °C下2 · 5小時，及-5 °C下1小時。淤漿再於終溫度下攪動一夜。晶體濾出 ’以異丙醇洗滌再於4 0 t下乾燥（減壓下）一夜。晶體以XRPD，DSC及TGA分析，顯示和依上實例1所得之型式所呈現的有實質上相同的繞射型式，開始溫度，及減輕之質量。實例4 4.0 克 Et02C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-ΟΗ(粗製的；依上實例 2所述方法獲得）溶於2毫升純水，16毫升乙醇及45毫升乙酸乙酯，55 t下。溶液在25 0毫巴，55 °C浴溫下相繼蒸餾可濃縮及乾燥溶液。溶液先濃縮，直到留下3 0克為止。再加3 2毫升乙酸乙酯至生成物中' ~且濃縮溶液直到留下2 8克為止。再加額外的1 β毫升乙酸乙酯，且溶液濃縮直到留下 33克為此。在溶液中加入£：1：〇2(：一〇112_(1〇(^卜八2卜[^13一〇[{晶種（由上實例3獲得）。懸浮液在4〇 t下攪動3小時，再冷卻至2 0 °C歷5小時，至5 °C歷2 · 5小時，及至-5 t下1小時。於聚在最終溫度下攪動一夜。濾出晶體，以乙酸乙酯洗條，再於40 °C減壓下乾燥一夜。晶體以XRPD，DSC及TGA分析，且顯示與依上實例1所得之型式所呈現的有基本上相同的繞射型式，開始溫度及質量之減低。 ' 實例5 實例

3.0 克 Et02C-CH2-(R)Cg 卜 Aze-Pab-0H(粗製的；依上

第19頁 1247013

五、發明說明（Π) 2所述方法獲得）溶於55-60°C下之4 5古1 里而萨i ^ ^ , , ^ 4 · ΰ笔升純水及4 9 · 5毫升中”谷液在1〇〇爱巴及㈣浴溫下相虼燥。溶液先濃縮直到留下16克為。a、六… ,$ L 凡馬止溶液在40 Ό下攪動再加18毫升異辛烷至生成物中：广 2 ( R)Cg 1 -Aze-Pab-OH之晶種（經上實例在4〇t下授動3小時’再冷卻至15。〇下貝6例3^付）。^于液 ^ ^ ^ 7丨王153 C下6小時。淤漿於終溫攪動-仪。晶體濾出，以異丙醇：異辛烷〇:1)混合物洗滌，並在4 0 °C下及減壓下乾燥_夜。 ,晶體以XRPD ’DSC及TGA分析，且顯示與依上實例i所得 f式所呈現的’有實質上相同的繞射型式，開始溫度及減輕之質量。红MjimL-(R)cgl-Aze-Pab-0H - 物之 A 紝曰二：二―·：-—------ ’ ：- 、，·口曰日實例6 ::- 3.0 克Et02C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-0H(粗製的；依上實例 2所述方法獲得）溶於1.5毫升純水，ι〇·5毫升乙薛及“毫升乙酸乙酯，55 t下。溶液在2 50毫巴及55t浴溫下蒗餾以濃縮溶液’直到留下18克為止。再加3〇毫升溶液中，再予以濃縮直到留下21克為止。再：溶;:= 〇·9克純水及Et02C-CH2-(R)Cgl-Aze〜pab-〇H晶種（經由上實例3獲得）。懸浮液在4 0 °C下搜動3小時，再冷卻至2 〇 ^廣5 小時，再至5°C下歷2.5小時，及至-5艺下1小時。淤聚^ 終溫度下攪動又一天。晶體濾出，以乙酸乙酯洗滌，及於 40 °C減壓下（150毫巴）乾燥一夜。 ‘ 、晶體以XRPD分析，且結果表列於上（表2，其中RI代表相

第20頁 1247013 五、發明說明（18) 對強度）及於圖2 表2 d- 值/A RI d-值/A RI d - •值 / Αι RI 16 .4 S 4. 57 m 3. 47 W 13 .7 S 4. 48 m 3. 34 m 9. 4 VS 4. 27 s 3. 26 W 8. 2 W 4.21 w 3· 02 W 7. 1 m 4.11 m 2. 61 W 6. 2 m 4. 04 m 2. 42 W 5 · 5 w 3. 93 w 5. 1 m 3. 89 m 4. 98 w 3. 83 m 4. 75 s 3. 68 〜二 m 4. 68 s 3. 52 w DSC顯示吸熱，有約9 4 °C (約1 7 1焦耳/ 克）之外推的開始 :泡 /JIZL 度。晶體以K a r 1 - F i s c h e r滴定分析 ο 晶體以T G A分析’ 其顯示在8 5 t左右質量有 ^3.5°/〇 ( W/W) 之減低，相當於一水合物，，且在2 1 0 °C開始有分解作用 0 例7 5. 0 克Et〇9C-CH2_ (R)Cgl -Az e-Pab-〇H( 粗製的；依上實例 2所述方法獲得）溶於40 °C 下之45毫升異丙醇及3 0毫升純水中。溶液過濾·至澄清，再於4 0 °C減壓下蒸餾濃縮直到留下 4 5克為止。溶液以1 0 °C /小時由4 0 °C冷卻至-1 0 °C。淤漿再以於終溫度下攪動一天並濾出晶體，以異丙醇洗滌並在4 0

第21頁

1247013 五、發明說明（19) t： ( 1 5 0毫巴）下乾燥一夜。晶體以XRPD，DSC及TGA分析，且顯示與依實例6所得型式所呈現的有實質上相同的繞射型式，開始溫度及減輕的質量。實例8 2.7克£七020(^2-(1〇〇81-1\26-?313-〇[1(粗製的；依上實例 2所述方法獲得）溶於70 °C之20毫升乙醇及30毫升純水中。溶液攪動並加入Et02C-CH2-(R)Cg卜Aze-Pab-OH晶種（依上實例6方法獲得）。乙醇緩緩蒸發歷二天。晶體濾出，再以 40 °C (200毫巴）下乾燥一個週末。晶體以X R P D，D S C及T G A分析，且顯示與依實例6所得型式所呈現的有實質上相同的繞射.型式，開始溫度及質量的減低。 … HE10?C-一（ r )Cg 1 -Aze-P ab-0H · HBr 晶體實例9 7.08克£七〇2〇-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH(粗製的；依上實例2所述方法獲得）溶於4 0 °C下之2 0 0毫升異丙醇及2 · 5 2克 47% jBr中。溶液在4 0 °C及減壓下蒸發至乾。再加額外的 1 2 0宅升異丙醇至生成之殘留物中，使其水含量除去，生成的溶液蒸發至乾。無晶形物質再於環境溫度下溶於庚醇。經攪拌後，可形成晶體。淤漿攪動一夜，晶體濾出，以庚醇洗蘇再於8 0 °C及減壓下乾燥一夜。 —日日肢以0· Na〇H及〇· AgN〇3滴定分析之。依據Na〇H滴定知物質之濃度為96·6% (w/w)。依據AgN〇3滴定知Br含量

苐22頁 1247013

五、發明說明（20) 為 13· 9% (W/W)，其顯示其係單HBr鹽，有 96_ ,4% (W/W)之鹽濃度。其餘的是溶劑殘留物。晶體以XRPD分析，且結果示於下（表3，其中R I代表相對強度）且示於圖3 ο 表3 d-值/λ RI d-值/人 RI d-值/λ RI 12.0 VS 4. 35 m 3. 25 W 10.1 S 4. 17 W 3. 06 W 9.5 m 4. 07 m 2. 92 W 6. 0 m 4. 03 m 2.86 W 5. 7 s 3. 92 m 2. 71 W 5. 6 m 3. 82 m ，、二一 2. 53 W 5.2 m 3.72 〜二 w 2. 33 W 5. 1 s 3. 69 m 4. 95 s 3. 62 w 4.74 w 3. 51 w 4. 57 w 3. 48 m 4. 41 m 3.38 m DSC顯示加熱，有約1 6 6 °C之外推的開始溫度（約69焦耳/ 克）。實例1 0 8克的Et02C-CH2-(R)Cg卜Aze-Pab-OH(粗製的；依上實例 2所述獲得）溶於120毫升異丙醇及2. 9克47% HBr中，於40-5 0 °C下。該溶液蒸發至乾，可生成無晶形物質，其再溶於第23頁 1247013 五、發明說明（21) ----- 1 -辛醇中。溶液環境溫度下攪拌，之後一下子時間會發生結曰曰作闬。淤漿攪動一夜，濾出晶體，以1 一辛醇洗滌，再於80 °C及減壓下乾燥一個週末。晶體以XRPD及DSC分析，結果顯示和上實例9所得型式所呈現的有基本上相同的繞射型式，開始溫度。實例11

1 克的Et02C-CH2'(R)Cgl-Aze-Pab-OH(粗製的；依實例2 所述方法獲得）溶於45 °C下之22毫升異丙醇及0.36克47% HBr中。溶液過濾至澄清，再於減壓下蒸餾濃縮直到留下 3· 85克為止。溶液在4〇 t下攪伴，再缓緩加入6毫升甲苯。浴液加入Η B r鹽之晶種（依上實例9所述方法獲得）。當懸洋液變白，加入額外的9毫升甲毛。淤漿攪動，且溫度下降至2 0 C。於漿再次攪動一夜Γ〜晶體渡出，以甲笨洗條’ 再於4 0 °C及減壓下乾燥。晶體以X R P D及D S C分析，且顯示和由實例9所得型式所呈現的有基本上相同的繞射型式及開始溫度。 U：Et〇9C - CH9-(R)Cg 卜 Aze - Pab-OH · dSC^H 晶體實例1 2

1〇克的£1:020-〇[12-(1〇〇81-八26-?313-〇[1(粗製的；依上貫例2所述方法獲得）溶於5 0 0毫升異丙醇及2. 03克甲烷磺酸 (1當量），5 0 °C下。溶液在5 0 °C減壓下蒸發至乾，可生成無晶形固體物質。此物質1 · 5克溶於1 5毫升曱酸乙酯中’ 且溶液在環境溫度下攪動一夜。所形成之晶體濾出，以甲酸乙酯洗滌再於4 0 °C及減壓下乾燥一夜。晶體以0 · 1 Μ

苐24頁 1247013 五、發明說明（22) N a 0 Η滴定分析，一種二相之滴定。依據形成單一甲績酸鹽之推斷可估計出濃度（99. 9%)。晶體以XRP D分析，且結杲示於下（表4，其中R I代表相對強度）且示於圖4。

dm RI 4. 63 m 4. 54 m 4. 46 s 4. 15 s 4· 06 s 3. 92 s 3. 84 s 3. 74 m 3. 65 s 3. 56 s 3. 47 m 3. 39 m 3. 22 m 3. 12 m 2.95 w 表4 d-值/ A RI 12. 0 s 11.7 vs 10. 4 s 10.2 s 8.3 w 7. 8 s m s s s m s s s m d-值/ A R I 2.88 m 2.76 m 2. 74 m 2.69 w 2.65 m 2. 54 w 2. 52 w 2. 49 w 2.27 w 2. 21 w 2.04 w 2.02 w DSC顯示力口熱有約1 3 4 °C外推的開始溫度（約9 3焦耳/克實例1 3

0:\59\59S^.PTD 第25頁 1247013 五、發明說明（23) 0.3克來自上實例12第一部份之無晶形物質，溶於^毫升辛醇中。溶液在環境温度下攪動—夜。濾出所形成之晶體，以辛醇洗滌，再於40 °C及減壓下乾燥一夜。晶體以MPD及DSC分析，且顯示與由上實例12之晶形所呈現的是實質上相同的繞射型式及開始溫度。自又盤備Et(XC_CH〔 (R )C卫1—Aze-Pab-〇H進一步的結晶形< 實例1 4

〇· 0 0 29克的EDTA溶於1 6. 4克羥胺水溶液（5〇% (w/w))及 110。毫升乙醇中，再加至有加套之玻璃反應器内，保持在 32 C下。於反應内加入1丨8· 5克的甘胺酸，N-[卜環己基一2-[2-[[[[4-[氰基]笨基]甲基]二胺基]羰基]一卜吖丁啶]— 2一酮乙基]一，乙酯，（S — (R*，S〇%Et02C-CH2-(R)Cg 卜 Aze-n(h)-ch2-c6h4-cn)於醋酸丁酯（約有36% (w/w)濃度）之溶液唑過1 8小時之攪動，溶液（懸浮液是不透明的。抽出樣口口利用HPLC檢查轉化作用。反應加丨4 . 4毫升丙酮，再加 3 0 7 4升乙酸丁酯以驟冷。汽套溫度定在7 〇它，且懸浮液 t下攪動1小時以使沈澱物溶解。熱穩定浴之溫度再定在40 °C下，且溶液再攪動78小時。粒子仍存在。濾出沈澱物，濾液加至有加套之破璃反應器内，於4〇 t下攪動。可開始萃取程式。所有的萃取均在4〇它下進行。取1 1〇毫升Na2C03/NaCl (10%/i〇% (W/W))加至後應器内，溶液混合 — Μ分鐘。再停止攪動，令其分相。移去水相，再加 12.5克乙醇及另外11〇毫升的[^(：〇3/[^(：1水溶液（1〇%/1〇%

第26頁 1247013 五、發明說明（24) (W/W))，溶液攪動數分鐘，再分相。水相移去，加入125 克乙醇及110毫升Na2C03/NaCl水溶液（10%/10% (W/W))。生成的溶液攪動數分鐘，再分相。移去水相，加4克乙醇及 31毫升水至有機相，再攪動之。pH值由HC1 (8 % (W/W))之加入調至7。溶液混合，令二相分離再移出水相。含有約4 克Et02C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH之52.9 克萃取溶液，加至

圓底燒瓶中。再加4毫升3 5 : 6 5 (v / v)乙酸丁酯及乙醇之混合物於相同燒瓶内。溶劑利用丨〇〇一 2 〇〇毫巴壓力之旋轉孓匕發器蒸發，且浴溫約73 t直到留下53」克溶液為止。= 入又4耄升的上述溶劑混合物，蒸去更多之溶劑直到留 54. 74克溶液。此步驟重覆數次：力口入4毫升，溶液墓縮至留下⑼· 02克’加入4毫升，再之濃縮至留下56〇:克農，又加入4毫升，且溶液再以濃^直到留下33 43克。克溶液^以供GC分析溶劑組成，及以KaH…如滴 ΤΙ水含量為。在燒瓶内加入〇·34毫 ♦ q7 , *丨广、下之熱平衡〉谷中。溶液利用鐵弗隆輪苹f 動3小時’再冷部至㈣則小時，至51歷2 5小時及= t歷H、時。溶液再於-5 t下攪動2 +時。溶液仍 ^ '5 清的。溶液再冷卻至-20七於丨.5小時内在、=澄授動20小時。可形成非常黏稠之白色於嘴了 =二:再濾法濾出，再於150毫巴及4〇 t下乾燥。曰曰_及工過晶體以GC’XRPD，TGA，DSC 及Kar/p· XRPi)处吴干於下# r本ς F!scher滴定分析。 XRPD…下表(表5 ’其代表相對強度)及示於圖5

第27頁 1247013 五、發明說明（25) ，有約1 6 9 t：(約1 4 2焦耳/克）之外推的開質量在約170 °C左右，有約0.7% (W/W)之 DSC顯示是吸熱始溫度。TGA顯示減少。早核細胞決定自早一晶體以一射線資料。其為斜方晶系，有PSJA對稱，Z = 4，及以下尺寸大小：a = 7. 75 3 ( 1 )為， b=14.331(l)A，c = 22.276(l) ，a=/3=r=90° ，且 V=2471. 6(4)A3 。表5 RI d- 值/A RI d- -值/A RI S 4. 31 w 3. 25 w VS 4. 29 m 3. 22 V w m 4. 25 m ·，一 3. 10 w m 4. 06 w 3. 03 w v w 4. 00 V w 3. 00 V w m 3. 82 w 2. 91 w v w 3. 73 w 2. 78 w v w 3. 71 m 2. 73 w w 3. 69 w 2 . 62 V w m 3. 66 w 2. 51 V w w 3. 59 m 2 . 46 w m 3. 55 w 2. 40 w s 3. 41 w 2. 38 w m 3. 37 w 2. 34 V w w 3. 34 w 2. 29 V w d-值//\ 一 0 12. 11· 8. ^ 75 4. 52

第28頁 1247013

第29頁

Claims

K4.1Q13 山, _案號88114464 1年年（〇 η 日絛π： __ 六、申請專利範圍 1· 一種實質上結晶形式之Et02c-CH2 -（R)Cgl-Aze-Pab-OH，其係呈無水物型式，其特徵在於有一個差示掃描熱量測定曲線，在流動氮下於有小孔之閉皿中以5 °C /分之加熱速率下，可呈現吸熱且有1 5 〇它的外推的開始温度’151 °C之高峰溫度，及113焦耳/克之締合熱’繼而在190-280 °C區域是放熱；及/或有一個X-射線粉末繞射型式特徵在於有下列d -值之晶體峰：1 2. 〇，1 〇. 〇 ^ 8· 2 ’ 7. 2，6· 0，5· 5，5· 0，4· 92，4· 85，4· 80，4· 42， 4·22 ，4·11 ，4·06 ，3·99 ，3·78 ，3·72 ，3.62 ， 3:34 ， 3·11，3·10 及 3.0Α° * 2· —種實質上結晶形式2Et〇2C-CH2 -（R)Cgl-Aze-Pab-OH，其係呈無水物型式，其特徵在於有一個差示掃描熱量測定曲線，在流動氮下於有小孔之閉皿中以5 C /分之加熱速率下，可呈現吸熱且有169〇c的外推的開始溫度，1 7 0 °C之高峰溫度，及1 4 2焦耳/克之締合熱，繼而在180-280 °C區域是放熱；及/或有一個p射"線粉末繞射型式，特徵在於有下列d-值之晶體峰：1 2. 〇 ^ 1，8· 8，7· 2，6· 8，6· 6，6· 5，6· 4，6· 0，5· 8 ·，5· 6，5 3 ， 5· 2 ， 4· 75 ， 4· 52 ， 4. 39 ， 4· 31 ， 4· 29 ， 4· 25 ， · 4·06 ，4·00 ，3·82 ，3·73 ，3·71 ，3·69 ，3·66 ，3·59 ，3 55 ， 3.41 ，3·37 ，3·34 ，3·29 ，3·25 ，3·22 ， 3.10 ， · 3.03 ， 3.00 ， 2.91 ， 2.78 ， 2.73 ，2·62 ，2·51 ， 2 46 ， 2· 40，2· 38，2· 34，2· 29，2· 26 Α。 · 3 ·根據申請專利範圍第丨或2項之化合物，其水含量不超

O:\59\59804-941014.ptc 第31頁 1247013 _案號88114464_^年〖b月日修正_ 六、申請專利範圍過2% (w/w) 〇 4. 一種實質上結晶形式之Et02C-CH2 -(R)Cgl-Aze-Pab-0H，其係呈一水合物型式，其特徵在於有一個差示掃描熱量測定曲線，在流動氮下於有小孔之閉孤中以5 °C /分之加熱速率下，可呈現吸熱且有9 4 °C之外推的開始溫度，1 0 9 °C之高峰溫度，及1 7 1焦耳/克之締合熱，繼而在1 7 0 - 2 9 0 °C區是放熱；及/或一個X-射線粉末繞射型式，特徵在於有下列d -值之晶體峰：1 6. 4，1 3. 7， 9.4，8.2，7.1，6.2，5.5，5.1，4.98，4.75，4.68， 4.57 ，4.48 ，4.27 ，4.21 ，4.11 ，4.04 ，3.93 ，3.89 ， 3.83 ， 3.68 ， 3.52 ， 3.47 ， 3.34 ， 3.26 ， 3.02 ， 2.61 及 2· 42 A。 5. —種實質上結晶形式之Et02C-CH2 -（R)Cgl-Aze_Pab-OH，其係呈氫溴化物鹽型式，其特徵在於有一個差示掃描熱量測定曲線，在流動氮下於有小孔之閉孤中以5 °C /分之加熱速率下，可呈現吸熱且有1 6 6 °C之外推的開始溫度，1 67 °C之高峰溫度，及69焦耳/克之締合熱，繼而在1 7 0 - 2 2 0 °C區域是放熱；及/或一種X-射線粉末繞射型式，特徵在於有下列d -值之晶體峰：1 2. 0，1 0 . 1 ，9.5，6.0，5.7，5.6，5.2，5.1，4.95，4.74，4.57， 4.41，4.35，4」7，4.07，4.03，3.92，3.82，3.72， 3.69 ， 3.62 ， 3.51 ， 3.48 ， 3.38 ， 3.25 ， 3.06 ， 2.92 ， 2.86，2.71，2.53 及 2.33A。 6. —種實質上結晶形式之Et02C-CH2

O:\59\59804-941014.ptc 第32頁 1247013 _案號 88Π4464_^年 f〇月曰__ 六、申請專利範圍 -（R)Cgl-Aze_Pab-0H，其係呈甲烷磺酸鹽型式，其特徵在於有一個差示掃描熱量測定曲線，在有流動氮下於有小孔之閉孤中以5 °C /分之加熱速率下，可呈現吸熱並有1 3 4 °C 之外推的開始溫度，1 37 °C之高峰溫度，及93焦耳/克之締合熱，繼而在140-220 °C區域是放熱；及/或一個X-射線粉末繞射型式，特徵在於有以下d -值之晶體峰：1 2. 0， 11.7 ， 10.4 ， 10.2, 8.3 ， 7.8 ， 6.0 ， 5.6 ， 5.5 ， 5.2 ， 5. 1，5.0，4.98，4.90，4.75，4.63，4.54，4,46，4」5 ，4.06 ， 3.92 ， 3.84 ， 3.74 ， 3.65 ， 3.56 ， 3.47 ， 3.39 ， 3.22 ， 3.12 ， 2.95 ， 2.88 ， 2.76 ， 2.74 ， 2.69 ， 2.65 ， 2.54，2.52 ^ 2. 49，2.27，2.21，2.04 及 2·02Α° 7. —種用於產製如申請專利範圍第1至3項中任一項之化合物之方法，該方法包括自選自由醋酸ί旨、低碳烧基醇類、酯族及芳族烴、二烷基醚、二烷基酮、乙腈、水性溶劑及其混合物所組成之群之溶劑中將Et02C-CH2-(R)Cgl- A z e - P a b - Ο Η 結晶。 8. 根據申請專利範圍第7項之方法，其中該溶劑是實質上無水的。 9. 一種用於產製如申請專利範圍第4項之化合物之方法，該方法包括自選自由醋酸酯、低碳烷基醇類、酯族及芳族烴、二烧基醚、二烧基酮、乙腈、水性溶劑及其混合物所組成之群之溶劑中將£1:02(：-(：[12-（1〇〇8 1-八2 6-?31)-011結晶。 1 0 .根據申請專利範圍第9項之方法，其中該溶劑含有

O:\59\59804-941014.ptc 第33頁 1247013 _案號88114464 今斗年月日修正_ 六、申請專利範圍水0 1 1 . 一種用於產製如申請專利範圍第5項之化合物之方法，該方法包括自選自由醋酸酯、低碳烷基醇類、酯族及芳族烴、二烷基醚、二烷基酮、乙腈、水性溶劑及其混合物所組成之群之溶劑中，在氫溴酸的存在下將E 102 C - C H2 -（R)Cg卜Aze-Pab-0H 結晶。 1 2.根據申請專利範圍第1 1項之方法，其中該溶劑是實質上無水的。 1 3. —種用於產製如申請專利範圍第6項之化合物之方法，該方法包括自選自由醋酸酯、低碳烷基醇類、酯族及芳族烴、二烷基醚、二烷基酮、乙腈、水性溶劑及其混合物所組成之群之溶劑中，在甲烷磺酸的存在下將Et02C-CH 2-（R)Cgl—Aze — Pab-0H 結晶。 1 4.根據申請專利範圍第1 3項之方法，其中該溶劑是實質上無水的。 1 5 ·根據申請專利範圍第7、9、1 1及1 3項中任一項之方法，其中該溶劑選自由烷基醋酸酯，直線或分支的(^_6 烷基醇類，C7_12脂族烴類，C6_1()芳族烴類，二烷基醚類，二-(^_6烷基酮類，乙腈，水，及其混合物所組成之群〇 1 6.根據申請專利範圍第1 5項之方法，其中該溶劑選自由乙酸乙酯，乙酸丁酯，乙醇，異丙醇，異辛烷，正庚烷，曱苯，二異丙醚，甲基異丁基酮，乙腈，水，及其混合物所組成之群。

O:\59\59804-941014.ptc 第34頁 1247013 _案號88114464 收年（〇月日修正_ 六、申請專利範圍 1 7 ·根據申請專利範圍第1、2及4至6項中任一項之化合物，其係充作前藥使用。 1 8. —種用於凝血酶抑制之醫藥組合物，其包含如申請專利範圍第1至6項中任一項所定義之化合物，並摻和藥學上可接受之佐劑，稀釋劑或載劑。 1 9 .根據申請專利範圍第1、2及4至6項中任一項之化合物，其係用於製成藥物以治療需要或欲求凝血酶抑制之狀況0

O:\59\59804-941014.ptc 第35頁