TW474900B - Use of mannanases as slime control agents - Google Patents

Description

474900 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（/ ) 本發明偽關於用來預防及/或去除表面生物膜的組成 物（抗-生物膜組成物），包含至少一聚甘露糖酶，視需要 可組合至少一種酶選自糖酶，蛋白酶，脂酶，糖蛋白酶 ，及使用此組成物來預防及/或去除表面生物膜的用途。 在水體糸統内撤生物附箸在固體表面很常見。通常此 現象被稱為生物污泥。生物膜積垢偽為下列過程的結果 ，渉及：1)將物質由散裝流體（bulk fluid)運輸到表面 旦繼而附著，2)生物膜内撤生物代謝作用，3)在膜表面 的流體切應力，4)表面材料及粗糙度，5)積垢控制過程。 在不同工業製程中，伴隨形成生物膜的問題有能量損 失，材質惡化及降低製程效率。能量損失意味著降低冷 卻塔的熱交換能力及增加流體分配条統及運輸工業之電 力耗損。材質惡化，傜由緊靠固體表面的生物膜所引起 ，意味箸侵蝕及腐爛。降低製效率可見於水處理。紙漿 及造紙工業，及水質資料收集。 保健事項亦涉及生物污泥，例如牙菌斑的形成，撤生物 細胞附箸於白血球組織而導致疾病，飲用水的品質，致 病生物由生物膜釋出進入工業用水条統。工業製程或控 水条統，如造紙工廠之開放或封閉式水循環糸統或冷卻 水条統。可以提供適當的撤生物生長環境，結果使得以 生物膜為人習知的粘泥，於水生条統的表面形成。特別 於冷卻水糸統中，這些生物膜沈積物可導致熱交換量減 低，損壊管線接頭及腐蝕糸統内部。據此，對於製程控 制的反面效果是可能存在的，其可降低製程的效率及損害 -3 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X29?公釐） 474900 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（ ) 1 1 産 品 的 品 質 ο 此 外 9 生 物 膜 或 粘 泥 沈 積 物 通 常 導 致 較 1 1 高的能消 耗 量 ο 因 生 物 膜 形 成 量 增 加 受 影 繼 最 大 的 是 1 例 1 | 如 製 造 紙 漿 ί 紙 張 9 木 板 及 纺 餓 品 的 工 業 製 程 〇 如 以 造 /--V 請 1 I 紙 機 械 為 例 1 有 相 當 大 量 的 水 在 循 環 % 統 内 循 環 稱 為 先 閱 讀 1 1 ”白水条統” (V I级循環或次级循璟， ^即白水I 或I I) 〇 背 1¾ 1 | 液 之 1 包 含 四 散 紙 漿 液 的 白 水 成 為 撤 生 物 生 長 的 理 想 培 養 〇 意 1 I 撇 開 工 業 化 水 體 % 統 不 談 » 生 物 膜 亦 在 其 他 環 境 中 生 事 項 1 I 再 1 成 » 如 在 保 健 項 内 可 於 超 浦1或透析 膜 上 生 成 〇 在 本 發 明 填 寫 本 的 範 圍 内 » 酶 組 成 物 可 用 來 預 防 粘 泥 且 移 除 任 何 有 生 物 頁 1 | 膜 形 成 的 % 統 〇 1 1 生 物 膜 或 粘 泥 偽 由 細 菌 所 形 成 » 待 別 是 格 蘭 氏 陰 性 細 1 I 菌 1 例 如 如 単 胞 菌 (P s e u d 〇 m on as), 不動桿菌 1 1 訂 i (A c i n e to b a c t er)及氣笋孢桿菌（Ae r 〇 b a c t e r )加上黃桿 菌 (F la V0 b a c t e r i u IB ) 9 脱 硫 弧 菌 (D e s u 1 f 0 v i b r 1 0 ), 埃 1 I 希 氏 菌 (E sc h e Γ Ρ c h ), 球衣菌（Sp ha e r 0 t i 1 u s ), 腸桿菌 I 1 (E n t e r o b a c t e r) 及 八 叠 球 菌 (S a r c I n a )ο 格蘭氏陰性菌 1 1 的 細 胞 壁 結 構 為 構 成 粘 泥 形 成 的 要 素 ο 細 胞 壁 包 含 肽 聚 I 糖 ♦ 其 由 乙 醯 胺 基 糖 類 及 胺 基 酸 所 組 成 加 上 包 含 蛋 白 1 1 質 脂 多 糖 及 脂 蛋 白 的 外 膜 9 相 反 地 格 蘭 氏 陽 性 菌 I 1 如 捍 菌 的 細 胞 壁 多 數 偽 由 呔 聚 糖 及 m 壁 酸 質 所 組 成 〇 1 | 生 物 膜 可 進 而 由 真 菌 及 酵 母 菌 所 産 生 * 如 發 穿 徽 菌 ( 1 1 Ρυ 1 1 u 1 a r i a U 1 1 u 1 £ η £ ,) 交鏈孢菌（A1 t € Γ Γ a r i a S P ) » 1 | 革 撊 菌 (L t e η Z J t € i S ) > 香 菇 (L e r t i n u s) t 多 孔 菌 (F 0 y f 〇 r u s ) 1 1 9 層 孔 m (F 〇 hi e s )， 韌革菌 -4 - (S t e r i u m ) 麴 菌 (/ S F > e r • g i 1 1 u s ) 1 1 1 1 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS〉A4規格（210X297公釐） 474900 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（；） ,梭徽菌（Fusarium)，青徽菌（Penicillium)，念珠菌 (Candida),酸母菌（Saccharomyces)及擔子.菌 (Basidomycetes)〇 一生物膜可包含多種撤生物。在一生物膜内，可能同 時發現有格蘭氏陰性菌，格蘭氏陽性菌，真菌及若有光 線，如在冷卻水塔板上，還可發現藻類。生物膜的發展 傜始於有機物質，如脂質，蛋白質，糖等於接觸表面上 集結而來。而後將徹生物吸引到此層且繼而透過外聚物 而附著。附箸的微生物而後形成個別的徹生物菌落。經 過一般時間各値菌落彼此摻雜在一起，而形成一真實的 生物膜。生物膜令逐漸増厚直至達到穩定狀態，即將徹 生物吸引到既存生物膜的作用與流動流體將徹生物帶離 生物膜的剪切力互補。 生物膜的厚度傜隨受質濃度而增加。在厚生物膜内， 某些區域可能因養分剝離而使得結構脆弱。這些脆弱點 可在生物基質内剝離産生孔洞。水流過這些孔洞的後續 作用會造成更多物質逸失而留下薄生物膜。當生物膜變 厚時，在靠近表面處會生成一層無氣區。在此區域的微 生物可以破壞表面。 一般生物膜内的撒生物偽由含量豐富的胞外生物多聚 體，稱為外被多糖（glycocalyx)所包圍。外被多糖傜被 定義為”任何多醏類，包含位在格蘭氏陰性細菌外膜表 而或格蘭氏陽性細菌呔聚糖層表面最外層的細菌表面結 構”。外被多糖可由細胞壁上排列規則的糖蛋白，稱為 -5 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7五、發明説明U ) S靥，或細胞表面纖維狀的聚_基質，莢膜所組成，其 可部份包覆於溶媒（fflenstruum)下。此契膜可為高度組 織代者。有時可見到環繞徹生物周圍的聚多糖莢膜並非 共價依附在細胞表面。將細胞小片化（pelleting)後， 可將外被多糖留在懸浮液中。 由外被多糖包覆的撤生物菌落僳藉細胞複製而形成， 所以子細胞均被包覆在同一外被多糖内。外被多糖生物 多聚體之分子間鍵結受到二價陽離子的影響。將陽離子 以EDTA螯合可有效剝離生物膜。 多位工作者已對已知之細菌外被多糖的功能繪出-- 般性結論。其具有功能 1) 將細胞黏箸於固體表面或於其他原核或具核細胞及 2) 捕捉培養基内的有機養分， 3) 莢膜可高度組織代以驅離粒子且故而可保護撤生物免 受環境的傷害。故可視外被外多糖為拮抗抗生素，抗 體及噬菌體之第一道防禦。 極少生物膜只包含徹生物物質。通常無機物會是粘泥 的一部分，如，CaC〇3，鋁，矽，鐵，鎂，銅。在造紙 廠，膜内可包含多種物質，如纖維，填充劑，松脂，松 香等。 生物性粘泥之沈積可以殺菌劑來有效控制，這些殺菌 劑的效果傜基於其能殺死在蓮作水體内的撤生物且故而 可預防粘泥生成。然而生成生物膜的細菌比浮游細菌更 能抵抗有毒劑。所以需要極高濃度的殺菌劑才能去除生 -6 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 __B7_五、發明説明（i·) 物膜。這是因為生物膜細胞生長緩慢且代謝較不活躍， 還因為它們受到外被多糖的保護，其不僅可作為離子交 換樹脂來固定有毒劑，還可為親水性/厭冰性緩衝物， 防止殺菌劑達到細胞内。此外，殺菌劑，由於其具毒性 ，需考量對生態環境的影響，故而使用時會産生相當多 問題。基於這些理由，在過去一直尋求其他方法，待別 是用酶，來去除生物膜。 雖然生物膜基質可具異質組成物，其主要傺由聚糖所 組成。去除粘泥的研究領域故而特別集中在對聚糖酶（ 糖酶）的研究。於工業水體条統中使用酶，特別是糖酶 ,來降解外被多糖及故而移除生物膜或預防粘泥形成， 已為此技術所習知。 在値別考慮工業粘泥或生物膜之組成時，基於不同的 觀點而發展出多種策略。 第一種策略偽使用溶解酶，並非作用於粘泥中所分泌 的聚糖，而作用於細胞壁内的聚耱。故而這些酶能破廣 細胞壁且殺死細胞。例如，在DE 37 41 583中，使用由 聚葡萄糖酶及蛋白酶的混合物，其具有對細胞壁内1,3-葡萄糖鍵結之溶解酶活性，已被掲示。然而，保護細菌 細胞的粘泥層可以防止此等酶達到細胞壁。 第二種策略視工業粘泥由單一聚糖組成，由一種細菌 産生。例如，於US 3,824,184及US 3,773,623掲示使用 一種可分解左聚糖的左聚糖水解酶，其由多種廣泛細菌 所産生。然而，左聚糖，僅由生長於蔗糖的細菌所産生 -7 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7五、發明説明U ) 。在考慮造紙廠或冷卻条統時，蔗糖並無相當含量，所 以左聚糖並非其生物膜重要成份。 於CA 1,274,442及W0 90/ 02794中掲示使用藻酸鹽裂 解酶，來降解主要由假單胞菌所産生的藻酸鹽。進一步 地，工業粘泥通常偽由因工業場所而異之不同撤生物族 群的産生。工業粘泥（生物膜）從未由單一外多糖組成， 因為每一種撤生物會産生其自身的典型外多糖（EPS)。 於US 4,055,467中，已掲示使用一戊聚糖酶己聚糖酶 來預防冷卻塔形成生物膜。 第三種策略像始於下列事實：多種異多糖存在於工業 粘泥中。於此技術中已知聚糖主要傺由葡萄糖，半乳糖 ,甘露糖，岩藻糖，鼠李糖，核糖，葡萄胺糖，半乳胺 糖，甘露糖醛酸，半乳糖醛酸及葡萄糖醛酸，以非常複 雜的排列方式所組成（參考L.Kenne等人，於G. Aspinall (编輯）”聚多糖”，第II冊（1983),學術出版社；I.W. Sutherland於”原核細胞之表面硝水化合物”，學術出販 社，偏移，1977，27-96)。進而，多種其他的糖成份以 較少量存在。 故而，可以假設若將多種不同的酶活性結合起來可以 對工業粘泥有所作用。然而僅瞭解粘泥内單糖成份並不 足以決定得以成功去除生物膜之酶混合物。上述單糖還 可以多種型式來鍵結。例如葡萄糖可以α-1，2, <x-l，3 ,α - 1 , 4， α - 1，6， /3 - 1，2， /3 - 1，3 , /S - 1，4 或 /3 - 1 , 6 來鐽結。基於此，毎一種鍵結方式需添加一種値別的酶 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 474900 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（7 ) 1 I 活 性 來 作 用 〇 同樣 的 I 鄰 近 的 ΒΟ 早 糖 及 其 順序或艏 別 糖 上 1 1 的 取 代 物 對 於 特定 糖 脚 的 活 性 也 很 重 要 〇 1 1 進 而 可 以 預期 地 η» 里 一 糖 酶 9 具 有 一 種可能的 活 性 來 ^\ 請 1 I 作 用 ___- 種 E P S (外多 糖 )的主要建構糖。 或即使數種糖酶 先 閱 ik 1 1 的 混 合 物 9 對 於生 物 膜 内 異 聚 糖 的 複 雜 成份並無 或 僅 有 背 1 I 之 1 有 限 的 功 效 〇 然而 t 於 此 技 術 中 已 發 現 某些複雜 的 混 合 注 意 古 1 1 物 對 於 異 聚 耱 的降 Λ73 m 有 正 面 的 作 用 〇 US 5，07 1 , 765及 爭 項 I 再 EP -A -0 388 1 15偽 關 於 使 用 鐵 維 素 酶 » α -澱粉酶及- 填 寫 本 衣 蛋 白 酶 的 混 合 物分 別 破 隳 β 及 α -1 ，4 -鍵結之葡萄糖及 頁 1 I 胞 外 蛋 白 質 〇 1 1 在 US 5 ，238 ，572 中 掲 示 一 種 選 白 半 乳 糖甘酶， 半 乳 糖 1 | m 酸 酶 * 鼠 李 糖甘 酶 9 木 糖 甘 酶 9 岩 藻 糖甘酶， 阿 拉 伯 1 訂 糖 甘 酶 及 α -¾萄糖甘酶之酶的組合物。 1 第 四 種 預 防 生物 膜 形 成 的 策 略 偽 控 制 粘泥形成 的 初 始 1 I 步 驟 亦 即 細 菌的 吸 附 9 於 ΕΡ -0 425 017掲示 撒 生 物 1 | 能 鍵 結 到 (物體）表 面 t 部 份 靠 與 第 11 型内糖W 酶 反 應 1 1 而 鍵 結 〇 此 類 型的 酶 (内- α -Ν -乙基葡萄胺糖甘酶， 内- I a -H -乙醯基半乳胺糖甘酶及内- β -Κ -乙醯基半乳糖甘 1 1 1 酶 )可以切斷於糖蛋f *3特殊的（分 子 )間糖甘鍵結C 已今 a 1 1 這 些 酶 中 某 些 亦為 裂 解 性 的 〇 i I 多 種 不 同 的 酶方 法 已 用 於 去 除 生 物 膜 或預防生 物 膜 形 1 1 成 的 技 術 中 其需 要 組 合 數 種 酶 或 巨 前為此， 只 有 1 1 種 或 少 數 酶 被 採用 這 些 僅 具 有 限 的 作 用。這些 策 略 亦 I 無 法 提 供 種 組成 物 除 9 了 去 除 或 控 制粘泥以 外 亦 1 1 1 1 1 1 準 標 家 國 國 中 用 適 度 尺 張 紙 本

S N 釐 公 474900 A7B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印裂 五、發明説明（ ) 1 1 能 預 防 細 菌 附 著 到 水 體 糸 統 的 表 面 及 有 效 地 剝 離 附 箸 的 1 1 細 菌 〇 基 於 上 述 問 題 » 本 發 明 偽 在 提 供 — 酶 組 成 物 或 酶 具 有 /-—^ 請 1 廣 效 的 作 用 〇 較 佳 地 本 組 成 物 應 可 預 防 細 菌 附 著 並 剝 離 先 閱 ik 1 1 已 附 箸 於 条 統 表 面 的 細 菌 〇 特 別 是 提 供 一 種 製 劑 t 其 分 背 面 1 | 之 1 別 只 包 含 種 酶 或 為 極 少 數 酶 的 簡 αο 早 混 合 物 〇 更 優 越 地 吉 1 I 本 組 成 物 不 包 含 任 何 殺 菌 劑 〇 此 酶 或 諸 酶 可 以 比 已 知 爭 項 1 1 再 技 術 中 酶 或 酶 混 合 物 更 少 的 份 量 來 發 生 效 用 0 預 填 寫 本 策 故 而 本 發 明 的 百 的 傺 在 提 供 種 組 成 物 或 —- 製 程 以 頁 N_^ 1 I 防 粘 泥 形 成 且 以 減 少 及 / 或 去 除 於 水 體 表 面 的 生 物 膜 > 1 1 其 避 免 傳 統 殺 菌 劑 的 缺 點 且 可 分 別 達 到 或 超 越 其 有 效 程 1 I 度 〇 1 糖 酶 訂 根 據 本 發 明 9 上 述 問 題 可 由 包 含 至 少 —- 聚 甘 露 的 1 組 成 物 (拉- 生 物 膜 組 成 物 )所解決。 1 | 在 本 發 明 範 圍 内 9 可 tact 単 獨 使 用 一 聚 甘 露 糖 酶 或 者 此 聚 1 1 甘 露 耱 酶 可 為 包 含 數 種 聚 甘 露 糖 酶 的 組 合 型 式 〇 1 I 根 據 本 發 明 9 令 人 訝 異 地 可 發 現 包 含 至 少 一 聚 甘 露 I 耱 酶 的 組 成 物 具 有 廣 效 活 性 且 可 對 多 型 不 同 微 生 物 有 作 1 1 1 用 Λ 1 1 特 別 地 » 此 酶 組 成 物 包 含 早 一 聚 甘 露 糖 酶 9 其 最 好 為 1 I 1 4- α -1 -聚甘露糖- 甘 露 糖 水 解 酶 * 可 隨 機 水 解 β (1 ,4) 1 1 鍵 9 如 於 聚 甘 露 糖 半 聚 乳 甘 露 糖 聚 萄 甘 露 糖 如 1 1 N 〇 v c h 0 Γ d i s k F W { 共應之C a m a r a s e < ， 1 I 於 本 發 明 範 圍 内 ”聚甘露糖酶’ ’傜 關 於 甘 露 糖 水 解 酶 1 1 -10- 1 ! 1 1 尺 張 紙 本 準 標 家 國 國 中 用 適 % 474900 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（9 ) ，其包含聚甘露糖甘露糖水解酶（即内聚甘露糖酶）及甘 露甘甘露糖水解酶（即外聚甘露糖酶）。此術語進而包含 甘露糖水解酶之各種可能的待化型式式，如α，/?，1， 2，1 , 3，1 , 4 , 1，6 , L , D。此意味著聚甘露糖酶適於本 發明的目的，其於涉及於至少一甘露糖糖基之鍵結處來 切斷任何含甘露耱聚糖（參考EC3.2.1.24, EC3.2.1.25 等實例如Gamanase®,聚半乳甘露耱酶，及Priraalco 聚甘露耱酶，其均為上市聚甘露糖酶。 根據本發明之較佳實施例，一酶組成物傺包含至少一 聚甘露糖酶及至少一酶選自糖酶，脂酶及糖蛋白酶。 於較佳實施例中，酶組成物可包含至少4· 102聚甘 露糖酶U/kg,如4*103lJ/kg。較佳地，組合物内的 甘露聚糖具有活性至少為4*104U/kg,較佳為4·105 IJ/kg 及更佳為 4· 106 (l/kg。 根據本發明較好舆聚甘露糖酶組合的糖酶為聚葡萄糖 酶，内耱甘酶，纖維素酶，澱粉酶，果膠酶，岩藻糖甘 酶，鼠李糖甘酶，葡萄糖澱粉酶，左聚糖酶及類同者。 稂據本發明，較佳與聚甘露糖酶組合的蛋白酶為絲胺 酸蛋白酶，金鼷蛋白酶，半胱胺酸蛋白酶及其類同者。 根據本發明，較佳與甘露聚糖酶組合的脂酶為羧酸酯水 解酶，芳族酯水解酶，甘油酯水解酶及其類同者。 根據本發明，較佳與聚甘露糖酶組合的糖蛋白酶為内 -/3 - N -乙醯葡萄胺糖甘酶D(end〇-/3 -N- acetylglucosaminiidase D)，内-糖甘酶 S, H-糖百酶 -1 1 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙乐尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 474900 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 A7 __B7_五、發明説明（I。） F及内糖甘酶Η，均可由 Boehringer Mannheim所提供。 若一或多個聚甘露糖酶，進而偽與至少一上述酶，較 佳使用一蛋白酶，若使用一能水解廣泛肽鍵之鹼（金屬） 蛋白酶（如Esperase⑮，更有利。此二種酶在組合物内 的比例聚甘露糖酶/鹼（金屬）蛋白酶可由 1/99至99/1 不等。 根據本發明實施例，該組合物進而包含至少一酶穩定 商I，一生物分散劑，一殺菌劑及/或一界面活性劑，進 而具有可去除生物膜性質的乙二醇成份，如掲示於德國 專利申請案44 45 070.2，特別地如二乙烯乙二醇或丙 烯乙二醇，為較佳添加劑。更甚者，此等物劑可與至少 一額外的酶，選自糖酶，蛋白酶，脂酶，糖蛋白酶，來 組合。 一穩定劑，如丙烯乙二醇，其他多元醇，糖，糖醇或 硼酸，可免於酶受撤生物降解，避免酶産生不可逆變性 及氧化。 生物分散劑，如十二烷基苯磺酸納，十二烷基二甲基 氣化銨，或乙氣一丙氧基嵌段聚合物，在未殺死徹生物 下，藉由改變生物膜，水體及/或受納面的表面能量， 以肋於預防粘泥形成或除去生物膜。 殺蟲酬為可以殺死存在工業水體管線内細菌的成份。 宵例有異瞎唑啉麵，亞甲基雙硫氰酸鹽，二甲基二硫胺 甲酸鈉，烷基二申苄基銨氣，聚〔氣乙烯（二甲亞胺基） 乙稀（二甲亞胺基）乙烯二氛〕，2, 2 -二漠-3-氣-丙醯 -12- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨OX297公釐） 474900 A7 B7 五、發明説明（ 胺 如 /IV 酸 過 戊 II?二 醇二 丙 J 2 I 硝 I 溴 加 添 需 無 在 可 物 成 組 一 供 提 在 傷 )o的 酸目 乙的 氣明 過發 ，本 2 然 ο 雖 粘 體厚 水層 除一 去在 或存 /己 及面 防表 預統 來条 内果 統如 条 ， 至膜 劑物 菌生 殺的 面 表 統 条 生 維 需 能 可 則 層 泥 而至 進與 要 ， 需酶 視白 ，蛋 酶糖 糖及 露酶 甘脂 聚 ， ，酶 下白 況蛋 情 ， 此酶 在糖 0 自 劑選 舖酶 殺 一 用I少 使至 要與 而 然 ο 膜 物 生 去 除 效 有 可 明 證 已 物 成 組 的 劑 菌 殺 - 少 效 ， 功的 其受 及接 -可 用 是 使性 來活 劑其 菌即 殺亦 用 ， 併擬 不比 好相 最劑 物菌 成殺 組用 酶使 之獨 明簞 發與 本可 解S 降酶 物糖 生露 可甘 且聚 毒 一 無少 物至 成含 組包 之物 明成 發組 本 ， ，内 劑圍 菌範 殺明 於發 對本 相在 但 劑 ) 散 可分 均物 型生 製 ， 粗劑 或定 化穩 酶 /V 劑 加 添 或 \ 及 酶 他 其 合 組 要 需 視 較 \—/ 劑 性 活 面 界 或 \ 及 劑 菌 殺 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 與發 ， 地本統 佳 条 成 組 所 質 物 體 钱 的 當 適 生 雒 0 可 物 體合 水組 至 ， 加態 添狀 於燥 適乾 以在 式 〇 形式 何形 任燥 為乾 可或 物體 成液 組即 明亦 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 述 上 與 要 露 視 酶 C 化 式鈍 形含 狀包 錠地 或佳 末較 粉物 呈成 ，組 備明 製發 燥本 乾然 C 隹 凊裁 冷 ，酶 物白 生蛋 徹 ， 用酶 使糖 ， 自 如選 例酶 tl C 種 在一 存少 型至 製及 粗酶 以糖 可露 亦甘 酶聚 ， 出 合現 組·表 份可 成其 以至 係 1 物為 成佳 。組較 行酶升 可糖/ %露位 , 甘單 液聚00 浮含10 懸包1- -1 · 種 ，ο 菌中呈 的例度 酶施濃 白實 蛋 一 糖 耱明露 ,發甘 酶本聚 脂於致 , 導 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 __B7 五、發明説明（a ) 50單位/升的份量來添加至水體-維生糸統。一單位（V) 傜定義為在PH7及30¾下於30分鐘内將0.2%聚甘露糖溶 液黏度減半50%所需之酶量。如果被處理的条統具有與 如上定義不同之pH與溫度條件，則可能需要調整酶的份 量以獲得處理生物膜的最佳結果。 聚甘露糖酶，如1 , 4 -/3 - D -聚甘露糖-甘露糖水解酶， 與鹼（金靨）蛋白酶的組成物傺較佳，且對於去除生物膜 及預防生物膜形成可産生協同作用。 本發明包含聚甘露糖酶的組成物，視需要與其它酶或 物劑相組合，可於水體条統不同處，或於單一地點處來 添加。也可以將含聚甘露糖酶之組成物於一處添加，且 進而將其他酶及/或添加劑，如生物分散劑，殺菌劑及 /或界面活性劑，於他處或其他多處來添入。根據本發 明，加入如上所述之單一組成物，不論以液態或乾燥型 式（比較上述），傜最佳者。 根據本發明，令人訝異地發現包含聚甘露糖酶，亦即 一單一糖酶的組成物，可用來大量控制細菌附著及於水 體-維生条統表面去除生物膜。完全意想不到地，單一 糖酶，其對甘露糖均聚物有活性，展現出對EPS,其如 上所述地傜由多種不同異聚糖所組成 的高度活性。 相較於他者，本發明的優點偽基於下列事實，亦即由 於聚甘露耱酶預防了細菌附著，而對生物活污泥發展過 程的最初始來産生干擾。相對地，其他糖酶通常偽在細 蘭附著表而後，受質（EPS)已被生成後才作用其活性。 -14- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -- I - - i-n - - - - , ^ m - -- - - --- - I ϋ— HI τ» (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 474900 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 五、發明説明（〇 ) 此外，聚甘露糖酶還可以由水體維生糸統表面移除生物 膜。 聚甘露糖酶可預防細菌附著的事實偽待別令人訝異的 ，因為EPS在撤生物附著中的角色已由多位此技術領域 文獻作者所質疑。據此背景，其已預期一糖酶對於附箸 過程本身將無作用。 · 根據本發明，更令人驚訝地發現將聚甘露糖酶與蛋白 酶組合，可以對去除粘泥與預防生物膜形成産生協作效 果。 本發明組成物偽適用於任何水體-維生条統，亦即不 論開放或封閉式工業處理一水条統而包含生成生物膜微 生物者，來預防粘泥及移除生物膜。本發明生物膜的用 途特別適用於紙廠之開放或封閉式水循環，待別是自水 -維生循環，或冷卻循環。進而，用於工業冷卻塔，貯 水塔，配水条統，紙漿及紙廠水以及保健項目之超濾與 透析膜來去除徹生物。 本發明可參考下列實施例來解釋。 實施例丄 決定Gainanase®1.5L聚甘露糖酶的活性 一單位（酶活性）像定義為PH7及30¾下，30分鐘内將 0.2%聚甘露糖溶液黏度減半50%所需酶的份量。在溫度 ，pH,離子強度及鹽組成物與下列實施例條件不同的情 況下，等量酶的活性，可能與前述定義之標準條件下所 測得之活性有所所不同。 -1 5- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900

五、發明説昧^ 下列為聚甘露糖可能的來源（此等實施例偽在於顯示 而非限制本發明）： 錡篛聚葡萄甘露糖 刺槐木豆_

Guar® 三仙膠

來自缺陷假單胞菌（Pseudomonas diminuta)@株NCTC 8545之 LPS 來自_質紫串狀酿母菌（Rhodotorula glutinis)之胞 外聚甘露糖貝克酵母聚甘露糖 在剌槐木豆顧的特例中，一檢定已如下施行： 刺槐木豆膠的儲液於托立斯缓衝液（50πΜ,ΡΗ7)中製備 。檢定中受質濃度為2000ppm。酶儲液偽在穩定化緩衝 液（1/100之52.5克CaCl?_及1.21克/升托立斯，PH7)中 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 訂 檢 此 ο 性 變 來 。鐘 質分 I ί 5 受 1 升沸 毫煮 9 藉 入份 p S. 力 剖 液一 儲有 酶 ， 升中 .毫液 T-ι 儲 將酶ο 一 備 毎 製 用 e 作bb 解(V 水計 酶度 〇 黏 鐘杜 分拉 30巴 溫阿 保以 下係 P 度 30黏 於 〇 ，止 行中 進來 内鐘 管分 試15 在沸 傜煮 定以 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

算 計 以 加 率 低 降 度 黏 % ο 量 測 下 V 見 可 果 結 0 度 黏 本 樣 之 酶 化 活 失 含 包 及 度 黏 的 水 λιο 計圖 並於 以 2_

⑪ e S 於 述 如 偽 驗 試 箸 附 K 玻 至 著 附 細 防 預 來 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2I0X297公釐） 474900 ,{φ： ；ί： 年 Η -w- Α7 Β7 五、發明説明（，7' 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 94(1976), 400-404,的方法來進行，結果可見於表1。 25ppm的Gasianase 1.5L,相較於控制組，大量地降低 營光假瞿胞菌的附箸達6 1 %，此菌存在於場地粘泥中。 進而還可觀察\到蛋白酶與聚甘露糖酶協作的效果。1 2 . 5 ppm Gamanase與12.5ppm Esperase的組成物幾乎兀全 防lh細蘭附箸。 實施例J. 以Gamanase® 1.5L去除生物膜 將包含不锈鋼部份管筒之生物污泥反應器以營光假單 胞®及分離自紙廠粘泥樣本之問題生物CDCA-5次群B來 接種。生物污泥反應器的搡作條件可見於表2。經蓮作 7 0小時後，於不銹銷部份形成了足量生物膜。將此等部 份由条統移出，外側以無菌P B S來清洗，將此等部份與 大型細菌培養皿相接觸，加入含特定濃度之酶配方的無 _ P B S .對於每一酶濃度，均有加熱失活化的控制組。 培養皿於4 0 t及5 0 r p m下保溫3或24小時。保溫後，將 該等部份清洗，乾燥，且將以活性_處理之生物膜重量 與以失活化酶處理的部份柑比較。一實驗結果示於表3 。其顯示僅有低濃度酶産生正反應。此現象亦可見於以 玻Η作附箸檢定。25ppm的Gamanase移除25%的生物膜。 實1般丄 ”斑點測試”：Gatnanase® 1.5L對固體培養基EPS産生 的影鎏 在此試驗中，使用分離自紙廠粘泥之不同細菌：肺炎 -17- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 装· 訂 474900 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 年月d‘: A 7 89· 8· l〇 B7 ··—>»___L_" ' " 11 " III I五、發明説明（4) 桿® 血清型67, Pseudomonas paucimobilis及 CDC A_5 次群B。將該等菌種接種於固體培養基上，剌激EPS生産 n在洋菜基上穿洞以置入酶，表4代表已測試之不同上市售酶之結果槪覽。 在一組實驗中，酶係在細菌生長前加入。圍繞著洞的 透明區顯示酶擴散到洋菜基内對EPS形成的抑制作用。 當使用Gamanase 1.5L(酶10)時，所有.3種®株均.壬此 結果。結果偽總結於表5。 在第二組實驗中，酶係在容允細菌生長並産生EPS後 再加入洞中。出現圍繞洞的透明區顯示酶將EPS分解。 再次地，當使用Gamanase 1.5L時，所有3種S株均呈 此結果，但對Pseudomonas paucimobilis效果更好。結 果偽示於表6。 上述實驗顯示聚甘露糖酶適於預防並降解EPS，亦即 預防細_附箸及由水體-維生条統表面去除生物膜。此 外，聚甘露糖酶較其他酶具有更佳待性。 實直例—5. 評估上市Gamanase® 1.5L的殺_活性。 此試驗的目的傜在研究正抑制反應及去除結果是否偽 基於酶配方中防腐劑或裂解酶的活性。 至於接種器，偽使用±】〇7CFU /毫升營光假單胞® (CFU /毫升表示毎毫升之_落形成單位）。此接種器偽 將生物的隔夜培養物在δΟΟΟΓΡίκ，4°C下離心5分鐘來製 備。片狀沈澱物於磷酸鹽缓衝生理食鹽水清洗兩次，且 -18" t衣— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -β 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 474900 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 條': 年月3 3二 A7 89. 8. 補九 B7 五、發明説明（·/) 再懸浮及稀釋至所需細胞濃度。加入之酶配方的濃度範 圍由100至12. 5ppm。對於每一酶濃度，亦有一組加熱-尖活化控制組來測試。在40 10及p Η 7下保溫2小時（磷 鹽緩衝生理食鹽水）。樣本傜在t = 0,l及2小時採取。結 果示於表7。由此結果無法結論酶具有殺菌活性。 曹施麗6 對分離自現場粘泥樣本之E P S的酶水解作用及以Η P L C -PAD (高性能離子交換層析；High Performance Ion-Exchange以脈衝 式安培 值偵測 器進行 Chromatography with Pulsed Amperoraetric Detection) 〇 EPS傜使用丙酮沈澱來自現場粘泥樣本分離。此EPS係 以不同上市酶來水解。水解混合物像以HPLC-PAD分析並 與酶及E P S對照組相比較。由E P S釋放的單醣濃度被計算 。出現於層析圖寡酵區的高峰以區域（area)來表示。結 果見於表8,相較於其他酶，1，4-/9 -D -聚甘露糖-甘露 糖水解酶可成功地用於水解E P S。 實施一例—7„ 1 .附箸檢定： Gamanase® (Novo Nordisk)及純聚半乳甘露糖酶（Fluka Chemicals像採用Pseudomonas putida為實施例細菌以 評估附箸檢定。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

-、1T -19- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 474900 A7 __B7 五、發明説明（β ) 酶 ％抑制率

Gamanase® 20 聚半乳甘露耱酶 19 (酶濃度·· ％ PPm) _ 2.以聚甘露糖酶處理來抑制生物污泥 在有或無聚甘露耱酶存在下，容兌生物膜發展。生物 膜重量偽以時間函數來測量。結果像示於圖2。來自P r〖ma 1 c 0 以(1.，8丨〇16(?,的？1"丨11131(：〇聚甘露糖酶^-100，作為典範 聚甘露耱酶來採用。聚甘露糖酶處理可導致對生物膜形 成的7 5 %抑制率。 3 .額外的斑點測試： a)為了評估施用聚甘露糖酶後所觀察到的細菌層透明 區是否不限於施用表5中所示的細菌，將Gamanase® 1.5L塗點於一条列其他的細菌菌株。 ——^ -f-A /v *« rfi 6tt Rte !kl· ii? f^i (μμ 齡志 q、— ^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 474900 A7 B7 五、發明説明（<?〉 錄 百 表 圖 表 及 表表表表表表表表表 的 L 元5L .5繼單1. 1影試® @ 的測se “著泥以 na附污IBa aI a aH物 G G 玻生以 對 菌 胞 單 假 光 營 外 件 條 作 操 驗 實 膜 物 生 除 去 行 ,Ε·*Β 進 性 活 酶 市 上 估 評 中 試 測 點 斑 於 用 作 制 抑 的 成 形 S P E 對 酶 市 上 以 驗 試 。死 性致 活的 解5L 降1. 的 S® ρ Θ E S 對na 酶na 市Ga 上以 量 出 釋 醏 單 的 S P E 之 離 分 泥 粘 廠 紙.5 由1 測 ® 6 偵 S c a L η p a Η B 以Ga 試 測 點 斑 的 透 之 菌 細 之 擇 選 a 機 隨 sis 種 數 對 酶 糖 露 甘 聚 同 不 I 種 兩 區 明 果 用 作 低 〇 降用 度作 黏制 的抑 膠的 豆泥 木污 槐物 刺生 對對 酶理 糖處 露酶 甘糖 乳露 半甘 聚聚 以以 1 2 圖圖 (諳先閱讀背面、V注意事磺再"寫氺頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900 A7 B7 五、發明説明（％ ) 弄1 處理方 式 相較控制組的△ % 控制組 0 2 5 ρ ρ 〇 ESP . -76 2 5ppis GAM . -6 1 12.5ppm GAM+ -93 12.5 pp m ESP. (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -22- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900 A7 B7五、發明説明Ο) 12L生物污泥測試單元的操作條件 醱酵器條件： 接種器： 營光假單胞菌LMG1794 於PBS ρΗ7内隔夜菌種+20%甘油100毫升 充氣：1巴，25% 5 0 0 r ρ η T S B : 2 0毫升/小時 稀釋水：80毫升/小時 至生物污泥單元之溢流：100毫升/小時 D = 0 . 0 5 / 小時 在配備上始（upstart)前，先將醱酵器接種 及上始充氣3小時 牛物污泥湖丨試菫元： 養分濃度（PPB): (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

MgSO 4 ·7H 2 0 2 0 CaC1 2 .2H a 〇 240 Κ2 ΗΡ〇4 ·3Η2 〇 3 NaHCO a 36 葡萄糖 338 細菌大豆脖 20 D = 0 . 8 6 / 小時 pH 7 3 0 - 3 5 °C -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900

7 7 A B 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 -2-^ 平均值 標準差 相對標準差％ 去除率： Ο 〇 私 O OT Cvo CO o o o o • · ’ · · cn CJl cn cn CS? C71 cn O 1 Gamanase 200ppm 失活者 o c=> t—* · · cn —3 o o o o cn cjt csd Od CJ1 o 2 Gamanase 200ppm 活性者 o o t—* · · 00 ◦私 CO CD Q ◦ 〇 ◦ cn ^ Ο O tS3 05 3 Gamanase 50ppm 失活者 〇 〇 H-* · CO 〇 . 〇i Ui 0 o o o 01 05 CJl 私 00 to o 4 Gamanase 50ppffi 活性者 CD O -q O cn o o o o • · · · CJ1 Ol 03 cn 4^· rc -a 5 Gamanase 25ppm 失活者 o o ΡΌ · · cn co o to CD O Q Q 私 私私 CO O) CJ1 CD Cfi 6 Gamanase 25ppi& 活性者 许兹藏挪W瘀泛€掛\书：5玫：^•姍却。 蹯藤鄉瘀$Ξppmss谢却。 96讲蓊榭，_m(w糠薛)藤商莖闺3_濉鈔鱷雌溫{9596 DJF溫渐)，蚪谢却。 运400、>Φ球3许漥彌雜邙讲薇珅羰(PH 7镟a搿，4 0 d ，蔽^!50rpm, 24*>®5δ薛) ^Gamanase® 1.5L ϋαϊ»蓊阱漥蒎)1|籀 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝.

、1T 24< 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（y) 表4 :於"斑點測試”中評估上市酶活性 酶 活性 酶 活性 酶1 彡-澱粉酶 酶10 半乳甘露糖甘酶 酶3 蛋白酶 酶11 1，3-0：-聚葡糖酶 酶4 α -澱粉酶 酶12 蛋白酶 酶5 彡-聚葡糖酶 酶13 菊糖酶 酶8 蛋白酶 酶16 蛋白酶 酶9 β -聚葡糖酶 -2 5- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900 A7 B7 五、發明説明（4) 表5 :以上市酶對EPS形成的抑制作用 -:無透明區 + :具透明區 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 酶 肺炎桿菌 CD C 假單胞菌I 酶1 - - - 酶3 - 酶 4 - - - 酶 5 - - - 酶 8 - - 酶9 - 酶10 酶11 - - - 酶12 - - - 酶13 - - - 酶16 - - -26- ^n- i —^n nn tnn (n HK^i —HI— nn m· nn n 一LeJ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 474900 .修止 年月日r u A7 89. 8. B7 五、發明説明丨<) 表6 :以上市酶對EPS的降解活性 -:無透明區 + /-:小型透明區 + :明顯透明區 + + ·.大型透明區 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 酶 肺炎桿菌 CD C 假單胞菌I 酶 1 - - - 酶 3 - - 4- -f 酶 4 - - - 酶 5 - - - 酶 8 - - 酶 9 - 酶 10 - 酶 11 - - - 酶 12 - - 酶 13 - - 酶 16 - - - -27- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇X：297公釐） 474900

7 7 A B 五、發明説明（ -a 萌建闺1 商鋰闺2 100 pp 曰ffirf5 100 ppm^ai-fb 50 . ppmai-it 50 ppm>ftsir?= 2 5 ppmffir? 2 5 PPB>ffai{rr 12.5 PPBffin5 12 . siipm^air? 蘼葙 5. 19E 27« 00« 2ΊΕ 67« 51E 38« 65E 私6M 78« 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 t = 0 CFU/蝌半

61W 51E 300W 46E 16« 9COE 7S N32« 19W 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 t = 1 φφ CFU/_ 半

Gamsase® 1.5L 3 婢 5BM嚮 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) — 50 -33 -10 -15 丨10 -35 -12 丨5 — s -33 t = 5« δζ小M丨

08« 16« 92« 70« 95« 95« 32E 35E 07 07 07 07 07 07 07 07 62E-I·07 6&ηΜ·ι·0 7 t = 2/>s CFU/_ 半 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 丨30 — 50 丨32 -16 Ί + 丨8 6 + — 39 — 9 t = 2、>« 次小颯丨 8 2 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X297公釐） 474900 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 年月 a 修- A7 B7 五、發明説明（以）

Gpm'ngtse ceref1〇 曰utwnwsB novozym23Q cerp曰ix

ArabOH

Mans 樾爾(S曰) Λ

Fuc

Man

Gs r5 10 1 12

Gic/Gal 35.4

8·44Ε ，78E 1.32E tH IH 05 1.66Ε·'·06 娴醞(01¾) 7.3- 癍苹：4 0 d , p Η 7 ,兴餺雄涵"2、>雄 EPS 酿商"350ppm SSSH^^'nloooppm _钭冰筇麥&鸛屮泓滋0¾殆ϋ- 鼐兴辊郅«ΚΜ «鼹雜鄉(ΡΡ曰)，瘀°郅兴骑斋迪丑騌 靡麵韵知E P S輝涵路3酿砘，歿浮《。 鷗鲥醞雜獼压葫，_兗到挪搿紲邻 a^§ ^^^^1 1.1^1 tan nn· . 9^^ mi ftm mu —^i·— --' 0¾-'口 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .90E·1·06 12.58- 14.99 -29- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 474900 經濟部中央標準局員工消費合作社印聚

i^rjL 年月β ^ ΑΊ ίΆ 8. 10 Β7 五、發明説明（以） 表9 : G amanase⑥1.5的斑點測試 樣本 编碼 細菌 编碼 生物鑑定 透明區 備註 3 4 7 不動桿菌靥 呈暈圈 粘泥 11 6 6 無法鑑定 + 撤量 粘泥 12 6 9 腸桿菌屬 土 無粘泥 2 5 2 5 A 肺炎桿菌 + + 粘泥 2 2 B 克氏桿茵屬 呈晕圈 徹量 粘泥 2 2 D 肺炎桿菌 + 徹量 粘泥 2 7 B 門多隆假單胞_ + + 粘泥 2 7 C 營光假單胞菌 - 無粘泥 /粘泥 2 3 A . 腸桿菌屬 + / 土 無粘泥 2 3 B 腸桿菌屬 ± / - 徹量粘泥 /粘泥 -30- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 474900 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（>9 ) Ho:兩重不同聚甘露糖酶對數種隨機選擇之細菌 之透明區效果 菌種收集物编碼 Gamanase 聚半乳甘露糖酶 Pseudomonas aeruginosa IMG 1242 + + Flavimonas oryzihabitane LMG 7040 ++ Klebsiella terriqena LMG 3203 + + Klebsiella pneumoniae type 3 NCTC 9632 - + Klebsiella oxytoca LMG 3055 +十 十 Klebsiella terricjena LMG 3222 - Klebsiella planticola LMG 3065 - • Klebsiella terriqena LMG 3207 + + + Klebsiella pneiamoniAe LMG 2095 + Klebsiella pneumoniae type 1 NCTC 9617 一 • Pseudomonas veeicularis LMG 2350 ++ Xanthomonas campestrls LMG 1459 + + Bacillus subtilus 屮 ++ Klebsiella pnetunoniae type 2 NCTC 7242 — 一 Feeudoroonae fluorescens LMG 1794 +十 + -31- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

Claims (1)

1. 474900

   、申請糊 第85 105263號「聚甘露糖酶作爲黏質控制劑之用途」專利 案 申請專利範圍 (8 9年8月修正） J 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1. 一種用來預防及/或去除表面生物膜的組成物，特徵 在於包含至少一聚甘露糖酶，更進一步之特徵在於該 組成物係以導致聚甘露糖酶濃度呈0.1〜1 000單位/ 升的份量來加入水體。 2如申請專利範圍第1項之組成物，其中該組成物包含 1,4-yS-D-聚甘露糖-甘露糖水解酶。 3. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中該組成物進而 包含至少一酶選自糖酶，蛋白酶，脂酶及糖蛋白酶。 4. 如申請專利範圍第3項之組成物，其中該組成物包含 至少一蛋白酶。 5. 如申請專利範圍第4項之組成物，其中該蛋白酶爲— 鹼性蛋白酶。 6. 如申請專利範圍第1至5項任一項之組成物，其中 該組成物包含至少一酶穩定劑，生物分散劑，殺菌劑f 及/或界面活性劑。 7. 如申請專利範圍第1至5項任一項之組成物，其中 該組成物爲液態型式》 8. 如申請專利範圍第1至5項任一項之組成物，其中 該組成物爲乾燥型式。 a如申請專利範圍第1至5項任一項之組成物’其中 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2】〇χ297公釐） 〜--- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 474900 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 該組成物用於預防及/或去除水體-維生系統表面之生 物膜。 1〇·如申請專利範圍第9項之組成物，其中該水體-維生 系統爲一開放或封閉式工業水處理系統。 11.如申請專利範圍第ίο項之組成物，其中該工業水處理 系統爲一紙廠內開放或封閉式水循環》 12·如申請專利範圍第9項之組成物，其中表面係爲超濾 或透析膜。 ia如申請專利範圍第9項之組成物，其中該組成物係以 導致聚甘露糖酶濃度呈0.1-1000單位/升的份量來加 水體。 14. 如申請專利範圍第1 0項之組成物’其中該組成物係以 導致聚甘露糖酶濃度呈〇.卜1000單位/升的份量來加 入水體。 15. 如申請專利範圍第11項之組成物，其中該組成物係以 導致聚甘露糖酶濃度呈0.1-1〇〇〇單位/升的份量來加 入水體。 16. 如申請專利範圍第12項之組成物’其中該組成物係以 導致聚甘露糖酶濃度呈0.1- 1000單位/升的份量來加 入水體。 17. 如申請專利範圍第1 3項之組成物’其中該組成物係以 導致聚甘露糖酶濃度呈〗-200單位/升的份量來加入 水體。 本紙張尺度適用中國國家操準（CNS ) A4規格（2丨OX297公董） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、va 气 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 474900 8 8 8 8 ABCD ☆、申請專利範圍 迟如申請專利範圍第14項之組成物’其中該組成物係以 導致聚甘露糖酶濃度呈1-200單位/升的份量來加入 水體。 ia如申請專利範圍第15項之組成物’其中該組成物係以 導致聚甘露糖酶濃度呈1-200單位/升的份量來加入 水體。 20.如申請專利範圍第16項之組成物，其中該組成物係以 導致聚甘露糖酶濃度呈1-200單位/升的份量來加入 水體。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八4規格（210 X 297公釐）