TW202404638A - 抗tspan8-抗cd3雙特異性抗體之與pd-1訊息抑制劑之組合在癌治療的用途 - Google Patents
抗tspan8-抗cd3雙特異性抗體之與pd-1訊息抑制劑之組合在癌治療的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- TW202404638A TW202404638A TW112113569A TW112113569A TW202404638A TW 202404638 A TW202404638 A TW 202404638A TW 112113569 A TW112113569 A TW 112113569A TW 112113569 A TW112113569 A TW 112113569A TW 202404638 A TW202404638 A TW 202404638A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- amino acid
- antibody
- tspan8
- seq
- acid sequence
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 129
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 102
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 101
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 46
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 123
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 62
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 326
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 253
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 161
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 145
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 139
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 claims description 135
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 99
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims description 93
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 80
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 34
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 32
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 32
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 32
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 claims description 21
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 claims description 21
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 18
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 17
- 229950009791 durvalumab Drugs 0.000 claims description 17
- 229960003852 atezolizumab Drugs 0.000 claims description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 16
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 14
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 9
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 9
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 8
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 claims description 8
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 210000003236 esophagogastric junction Anatomy 0.000 claims description 8
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 8
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 7
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 7
- 201000009036 biliary tract cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 208000020790 biliary tract neoplasm Diseases 0.000 claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 7
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 6
- 229950002916 avelumab Drugs 0.000 claims description 6
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims description 6
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 229950010773 pidilizumab Drugs 0.000 claims description 5
- 229950007213 spartalizumab Drugs 0.000 claims description 3
- 229940121420 cemiplimab Drugs 0.000 claims description 2
- 102100023990 60S ribosomal protein L17 Human genes 0.000 claims 13
- 102100032802 Tetraspanin-8 Human genes 0.000 abstract description 20
- 101000847107 Homo sapiens Tetraspanin-8 Proteins 0.000 abstract description 11
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 235
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 224
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 124
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 97
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 43
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 20
- 101710151636 Tetraspanin-8 Proteins 0.000 description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 18
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 15
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 15
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 description 14
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 14
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 12
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 12
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 12
- 108700030875 Programmed Cell Death 1 Ligand 2 Proteins 0.000 description 12
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 12
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 12
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 12
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 11
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 11
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 11
- 101100407308 Mus musculus Pdcd1lg2 gene Proteins 0.000 description 11
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 11
- 102000054699 human TSPAN8 Human genes 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 8
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 8
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 8
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 8
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 101001117317 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 6
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 6
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 4
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- NPWMTBZSRRLQNJ-VKHMYHEASA-N (3s)-3-aminopiperidine-2,6-dione Chemical compound N[C@H]1CCC(=O)NC1=O NPWMTBZSRRLQNJ-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 3
- 101001002657 Homo sapiens Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- 102000037982 Immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 3
- 108091008036 Immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 3
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 230000009920 chelation Effects 0.000 description 3
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000017188 evasion or tolerance of host immune response Effects 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000014828 interferon-gamma production Effects 0.000 description 3
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N (2s)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-aminoacetyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HKZAAJSTFUZYTO-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- YXHLJMWYDTXDHS-IRFLANFNSA-N 7-aminoactinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=C(N)C=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 YXHLJMWYDTXDHS-IRFLANFNSA-N 0.000 description 2
- 108700012813 7-aminoactinomycin D Proteins 0.000 description 2
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101001117312 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000611936 Homo sapiens Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 2
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 2
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 2
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 229960000106 biosimilars Drugs 0.000 description 2
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N geneticin Chemical compound O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(C)O)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N 0.000 description 2
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000048776 human CD274 Human genes 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000000111 isothermal titration calorimetry Methods 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 238000012762 unpaired Student’s t-test Methods 0.000 description 2
- QWVUOVZJBNQSNS-UHFFFAOYSA-N (+-)-Tropan-3endo,6exo-diol Natural products C1C(O)CC2C(O)CC1N2C QWVUOVZJBNQSNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C(CN1CC2=C(CC1)NN=N2)=O HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)-N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C(=O)NCCC(N1CC2=C(CC1)NN=N2)=O VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]ethanone Chemical compound C1CN(CC2=NNN=C21)CC(=O)N3CCN(CC3)C4=CN=C(N=C4)NCC5=CC(=CC=C5)OC(F)(F)F LDXJRKWFNNFDSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]propan-1-one Chemical compound N1N=NC=2CN(CCC=21)CCC(=O)N1CCN(CC1)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DEXFNLNNUZKHNO-UHFFFAOYSA-N 6-[3-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperidin-1-yl]-3-oxopropyl]-3H-1,3-benzoxazol-2-one Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1CCN(CC1)C(CCC1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1)=O DEXFNLNNUZKHNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 1
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 238000012815 AlphaLISA Methods 0.000 description 1
- 201000003076 Angiosarcoma Diseases 0.000 description 1
- FXWALQSAZZPDOT-NMUGVGKYSA-N Arg-Thr-Cys-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N FXWALQSAZZPDOT-NMUGVGKYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 229920001342 Bakelite® Polymers 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000016289 Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 1
- 108010067225 Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000005243 Chondrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- QBXVXKRWOVBUDB-GRKNLSHJSA-N ClC=1C(=CC(=C(CN2[C@H](C[C@H](C2)O)C(=O)O)C1)OCC1=CC(=CC=C1)C#N)OCC1=C(C(=CC=C1)C1=CC2=C(OCCO2)C=C1)C Chemical compound ClC=1C(=CC(=C(CN2[C@H](C[C@H](C2)O)C(=O)O)C1)OCC1=CC(=CC=C1)C#N)OCC1=C(C(=CC=C1)C1=CC2=C(OCCO2)C=C1)C QBXVXKRWOVBUDB-GRKNLSHJSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 102000018651 Epithelial Cell Adhesion Molecule Human genes 0.000 description 1
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 description 1
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000010915 Glioblastoma multiforme Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 239000012515 MabSelect SuRe Substances 0.000 description 1
- 208000000172 Medulloblastoma Diseases 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 101100519207 Mus musculus Pdcd1 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- NIPNSKYNPDTRPC-UHFFFAOYSA-N N-[2-oxo-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 NIPNSKYNPDTRPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CCNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 201000008199 Pleuropulmonary blastoma Diseases 0.000 description 1
- 101710094000 Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 101710184528 Scaffolding protein Proteins 0.000 description 1
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000021712 Soft tissue sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 208000031673 T-Cell Cutaneous Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 description 1
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000043977 Tetraspanins Human genes 0.000 description 1
- 108700031126 Tetraspanins Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 208000008383 Wilms tumor Diseases 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 229930189065 blasticidin Natural products 0.000 description 1
- 229960003008 blinatumomab Drugs 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 229960000419 catumaxomab Drugs 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000009087 cell motility Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 201000007241 cutaneous T cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000008713 feedback mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 201000010175 gallbladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036252 glycation Effects 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006359 hepatoblastoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005931 immune cell recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000037451 immune surveillance Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 208000022013 kidney Wilms tumor Diseases 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 208000003849 large cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000011061 large intestine cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000010859 live-cell imaging Methods 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 201000009020 malignant peripheral nerve sheath tumor Diseases 0.000 description 1
- 208000026037 malignant tumor of neck Diseases 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 201000005962 mycosis fungoides Diseases 0.000 description 1
- 201000008026 nephroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 208000029974 neurofibrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013630 prepared media Substances 0.000 description 1
- 208000025638 primary cutaneous T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000002314 small intestine cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 238000002849 thermal shift Methods 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 238000011277 treatment modality Methods 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 230000002476 tumorcidal effect Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010576 undifferentiated carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010046885 vaginal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000013139 vaginal neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Immunology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本發明之課題,為提供為了治療對象之癌,而與PD-1訊息抑制劑組合來使用的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體或含有該雙特異性抗體之醫藥組成物,或提供包含將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑投予至對象的癌之治療方法。
抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑之組合,係有用於表現TSPAN8之癌之治療。
Description
本發明係關於抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之與PD-1訊息抑制劑之組合在癌治療的用途。
四跨膜蛋白8(Tetraspanin-8;TSPAN8)為屬於四跨膜蛋白家族的4次膜貫通蛋白質,具有小細胞外環狀域(small extracellular loop;SEL)與大細胞外環狀域(large extracellular loop;LEL)2個細胞外環狀域區域,及3個細胞質結構域,作為支架蛋白質,形成具有各種各樣之膜貫通蛋白質及細胞質蛋白質的分子團簇。已知TSPAN8對於細胞接著、細胞運動性、細胞之活化及增殖等有相關,於胃癌、胰臟癌、大腸癌、肝癌等觀察到高表現,有報告TSPAN8表現亢進與癌的進展或轉移之相關性等(非專利文獻1)。使用了抗TSPAN8抗體之以癌的診斷或治療為目標的研究正在進行(專利文獻1及2以及非專利文獻1及2)。
分化抗原群3(Cluster of Differentiation 3;CD3),為藉由於T細胞表面與T細胞受體(T cell receptor;TCR)形成複合體而對T細胞傳達活化訊息之蛋白質。CD3為由gamma(γ)、delta(δ)、epsilon(ε)、zeta(ζ)及eta(η)鏈之5種次單元所構成的複合體,各次單元形成εγ、εδ、ζζ之3種二聚體。CD3於正常T細胞及腫瘤性T細胞均有表現,故作為T細胞之標記使用,又,有報告各種以癌治療為目的之作為包含各種抗癌相關抗原(Tumor Associate Antigen;TAA)抗體與抗CD3抗體之雙特性抗體的醫藥品之應用(非專利文獻3)。
作為能夠以低的抗體濃度得到癌細胞選擇性的細胞毒性活性之創新的方法,報告有由各種抗體形式所構成的雙特異性T細胞徵召抗體(bispecific T-cell-recruiting antibodies),該等抗體對於T細胞媒介性免疫療法的效果正不斷被探討(非專利文獻4)。雙特異性T細胞徵召抗體,為包含抗癌細胞表面所表現之TAA的抗體,與結合於T細胞的抗體之雙特異性抗體。結合於T細胞的抗體,多使用抗CD3抗體。包含抗TAA與抗CD3抗體之分子的雙特異性T細胞徵召抗體,會使標的癌細胞與細胞毒性T細胞(Cytotoxic T Lymphocyte;CTL)之物理距離接近,藉由抗CD3抗體而活化CTL,並藉由CTL之細胞毒性活性殺死癌細胞(Redirected T Cell Cytotoxicity;RTCC)。作為抗CD3-抗上皮細胞接著分子(Epithelial Cell Adhesion Molecule;EpCAM)雙特異性抗體之卡妥索單抗(catumaxomab)或作為抗CD3-抗CD19(Cluster of Differentiation 19)雙特異性抗體之百利妥單抗(blinatumomab)已被確認在臨床的效果(Int.J.Cancer,2010;Vol.127:p.2209-2221、N.Engl.J.Med.,2017;Vol.376:p.836-847),目前,各種抗TAA之雙特異性T細胞徵召抗體的研究開發正在進行。
Programmed cell death-1(PD-1;亦稱為PDCD1或CD279)為屬於免疫球蛋白超家族之50~55kDa之I型膜貫通蛋白質(Int.Immunol.,1996;Vol.8:p.765-772)。PD-1於T細胞中伴隨持續活化而誘導表現,但藉由鍵結於作為配位子之Programmed death-ligand 1(PD-L1;亦稱為PDCD1LG1、B7-H1或CD274)或Programmed death-ligand 2(PD-L2;亦稱為PDCD1LG2、B7-DC或CD273),將T細胞之活化控制為抑制性(Annu.Rev.Immunol.,2008;Vol.26:p.677-704)。一般而言,如此之T細胞活化控制機構,係稱為免疫檢查點,已知為用以不引起過剩之免疫反應的負回饋機構之一。
於癌發生初期,T細胞等之免疫細胞藉由以免疫監視機構所進行的抗腫瘤免疫反應將癌排除。另一方面,癌係於癌微小環境中直接或間接地抑制免疫細胞藉以獲得免疫逃避機構。作為直接的活化T細胞抑制機構,已知有PD-1/PD-L1或PD-L2(以下稱「PD-1訊息」)路徑、CTLA-4/CD80或CD86路徑等之免疫檢查點機構。於癌之腫瘤微小環境內,有確認到於T細胞之PD-1表現及於腫瘤之PD-L1表現(Nat.Med.,2002;Vol.8:p.793-800),據認癌係藉由該PD-1訊息之活化而顯示免疫逃避。
於複數種小鼠荷癌模式中有報告藉由以阻礙PD-1訊息造成解除免疫逃避機構,而顯示抗腫瘤作用(非專利文獻5~7)。進一步地,作為PD-1訊息藥劑,納武利尤單抗(nivolumab)、帕博利珠單抗(pembrolizumab)等之抗PD-1抗體等之PD-1訊息抑制劑的開發係在戮力地進行,於黑色素瘤、肺癌、淋巴瘤等達成甚大的成果。又,於抗體以外,亦實施核酸醫藥/低分子藥等作為PD-1訊息抑制劑之研究(非專利文獻8)。
作為間接性的活化T細胞抑制機構,已知有癌細胞所致之控制性T細胞或源自骨髓之控制細胞的誘導,及免疫抑制性之液性因子(IL-10、TGF-β、吲哚胺2,3-二氧酶(IDO)等)的產生,以此等液性因子為標的之藥劑的開發正在進行(J.Hematol.Oncol.,2021;Vol.14:p.55-74、BioDrugs,2018;Vol.32:p.311-317)。
為了提高於癌患者之治療的有效性,複數種癌免疫藥之併用療法,或癌免疫藥與既存抗癌劑之併用試驗係在戮力地進行(非專利文獻9及10)。例如,抗PD-1抗體與其他之免疫檢查點阻礙抗體、抗癌劑、分子標的藥、放射線治療、癌疫苗、腫瘤溶解性病毒的併用試驗正在被實施。
但是,至目前為止,以抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑的併用而進行之癌之治療方法尚未被報告。
[先前技術文獻]
[專利文獻]
[專利文獻1]國際公開第2012/010696號
[專利文獻2]國際公開第2015/130115號
[非專利文獻]
[非專利文獻1]Biomolecules,2020;10:p.383
[非專利文獻2]Cancers,2019;11:p.179
[非專利文獻3]Pharmacology and Therapeutics,2018;182:p.161-175
[非專利文獻4]mAbs,2017;9:p.182-212
[非專利文獻5]Scientific Reports,2021;11:p.21087-21099
[非專利文獻6]Nature Communications,2017;8:p.14572-14582
[非專利文獻7]Journal for Immunotherapy of Cancer,2019;7:p.37-52
[非專利文獻8]Molecules,2019;24:p.2071-2100
[非專利文獻9]Cancer Discovery,2021;11:p.1368-1397
[非專利文獻10]Moledular Medicine Reports,2021;23:p.362-377
[發明所欲解決之課題]
本發明之課題,為提供為了治療作為對象之癌,而與PD-1訊息抑制劑組合來使用的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體或含有該雙特異性抗體之醫藥組成物,或提供包含將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑投予至對象的癌之治療方法。
[用以解決課題之手段]
本發明者等人,以用於TSPAN8表現癌之治療的抗體或醫藥組成物之創造為目的,基於抗TSPAN8抗體的16B11.1之序列,製作了抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體(實施例1)。將該抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗PD-1抗體,對移植了TSPAN8表現癌細胞之小鼠投予後,確認到相較於單獨投予抗PD-1抗體的情況,顯示出顯著的抗腫瘤作用(實施例3)。由此結果,暗示了抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑之組合,有用於TSPAN8表現癌之治療。又,該抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體的併用,相較於抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體、抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體單獨的情況,於in vitro促進T細胞之活化及T細胞之干擾素-γ產生,顯示細胞毒性活性(實施例2)。
亦即本發明關於以下之[1]~[92]。
[1]一種醫藥組成物,其係含有抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體的用以治療對象之癌的醫藥組成物,
該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:
(a)由包含抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段及包含抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域的輕鏈所構成的抗TSPAN8抗體之Fab區域、
(b)包含抗CD3抗體之重鏈可變區域及抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域,以及
(c)由連結於(a)之Fab區域之重鏈片段的第一Fc多胜肽及連結於(b)之抗CD3scFv區域的第二Fc多胜肽所構成的Fc區域,
該醫藥組成物係與PD-1訊息抑制劑組合來使用。
[2]如[1]之醫藥組成物,其中抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3;抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3。
[3]如[1]或[2]之醫藥組成物,其中抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域係由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成,抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域係由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成。
[4]如[1]~[3]中任一項之醫藥組成物,其中抗TSPAN8抗體之Fab區域,係由:由序列編號4之胺基酸編號1至219之胺基酸序列所構成的重鏈片段及由序列編號6之胺基酸序列所構成的輕鏈所構成。
[5]如[1]~[4]中任一項之醫藥組成物,其中抗CD3抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3;抗CD3抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3。
[6]如[1]~[5]中任一項之醫藥組成物,其中抗CD3抗體之重鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成,抗CD3抗體之輕鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成。
[7]如[1]~[6]中任一項之醫藥組成物,其中抗CD3scFv區域,係由序列編號8之胺基酸編號1至254之胺基酸序列所構成。
[8]如[1]~[7]中任一項之醫藥組成物,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3的重鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈;含有包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3的輕鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之重鏈可變區域,以及包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
[9]如[1]~[8]中任一項之醫藥組成物,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成的重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈、含有由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成的輕鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之重鏈可變區域,及由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
[10]如[1]~[9]中任一項之醫藥組成物,其包含含有選自由LALA變異(L234A及L235A)、N297G變異,及Knobs into holes(Knobs into holes)變異(此處,前述變異位置為遵照人類Igγ1恆定區域中之EU指標的胺基酸位置)所成之群的1或2種以上之變異的Fc區域。
[11]如[1]~[9]中任一項之醫藥組成物,其包含含有LALA變異、N297G變異,及Knobs into holes變異的Fc區域。
[12]如[10]或[11]之醫藥組成物,其中Knobs into holes變異,為形成Fc區域之1個Fc多胜肽中之T366W變異,以及形成Fc區域之另1個Fc多胜肽中之T366S、L368A及Y407V變異(此處,前述變異位置為遵照人類Igγ1恆定區域中之EU指標的胺基酸位置)。
[13]一種醫藥組成物,其係含有抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體的用以治療對象之癌的醫藥組成物,
該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,係由:由序列編號4之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之重鏈、由序列編號6之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之輕鏈,及由序列編號8之胺基酸序列所構成的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽所構成,
該醫藥組成物係與PD-1訊息抑制劑組合來使用。
[14]如[1]~[13]中任一項之醫藥組成物,其含有經轉譯後修飾之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體作為有效成分。
[15]如[1]~[14]中任一項之醫藥組成物,其係與PD-1訊息抑制劑同時地、連續地或逐次地投予至對象。
[16]如[1]~[14]中任一項之醫藥組成物,其係將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑(i)於相同之醫藥組成物中含有,且同時投予至對象,或(ii)於不同的醫藥組成物中含有,且同時地、連續地或逐次地投予至對象。
[17]如[1]~[16]中任一項之醫藥組成物,其中癌為原發性、轉移性或腹膜散播性之固體癌。
[18]如[17]之醫藥組成物,其中癌為食道癌、大腸癌、胰臟癌、胃癌、胃食道接合部癌、肝癌、膽道癌,或攝護腺癌。
[19]如[1]~[18]中任一項之醫藥組成物,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體,或抗PD-L2抗體,或此等之抗原結合片段。
[20]如[19]之醫藥組成物,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體。
[21]如[20]之醫藥組成物,其中抗PD-1抗體為納武利尤單抗、帕博利珠單抗、匹地利珠單抗(pidilizumab)、斯帕他珠單抗(spartalizumab),或西米普利單抗(cemiplimab)。
[22]如[19]之醫藥組成物,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-L1抗體。
[23]如[22]之醫藥組成物,其中抗PD-L1抗體為阿特珠單抗(atezolizumab)、度伐利尤單抗(durvalumab),或阿維魯單抗(avelumab)。
[24]一種雙特異性抗體,其係用以治療對象之癌的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,
該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:
(a)由包含抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段及包含抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域的輕鏈所構成的抗TSPAN8抗體之Fab區域、
(b)包含抗CD3抗體之重鏈可變區域及抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域,以及
(c)由連結於(a)之Fab區域之重鏈片段的第一Fc多胜肽及連結於(b)之抗CD3scFv區域的第二Fc多胜肽所構成的Fc區域,
該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體係與PD-1訊息抑制劑組合來使用。
[25]如[24]之雙特異性抗體,其中抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3;抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3。
[26]如[24]或[25]之雙特異性抗體,其中抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域係由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成,抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域係由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成。
[27]如[24]~[26]中任一項之雙特異性抗體,其中抗TSPAN8抗體之Fab區域,係由:由序列編號4之胺基酸編號1至219之胺基酸序列所構成的重鏈片段及由序列編號6之胺基酸序列所構成的輕鏈所構成。
[28]如[24]~[27]中任一項之雙特異性抗體,其中抗CD3抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3;抗CD3抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3。
[29]如[24]~[28]中任一項之雙特異性抗體,其中抗CD3抗體之重鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成,抗CD3抗體之輕鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成。
[30]如[24]~[29]中任一項之雙特異性抗體,其中抗CD3scFv區域,係由序列編號8之胺基酸編號1至254之胺基酸序列所構成。
[31]如[24]~[30]中任一項之雙特異性抗體,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3的重鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈;含有包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3的輕鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之重鏈可變區域,以及包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
[32]如[24]~[31]中任一項之雙特異性抗體,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成的重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈、含有由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成的輕鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之重鏈可變區域,及由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
[33]如[24]~[32]中任一項之雙特異性抗體,其包含含有選自由LALA變異(L234A及L235A)、N297G變異,及Knobs into holes(Knobs into holes)變異(此處,前述變異位置為遵照人類Igγ1恆定區域中之EU指標的胺基酸位置)所成之群的1或2種以上之變異的Fc區域。
[34]如[24]~[32]中任一項之雙特異性抗體,其包含含有LALA變異、N297G變異,及Knobs into holes變異的Fc區域。
[35]如[33]或[34]之雙特異性抗體,其中Knobs into holes變異,為形成Fc區域之1個Fc多胜肽中之T366W變異,以及形成Fc區域之另1個Fc多胜肽中之T366S、L368A及Y407V變異(此處,前述變異位置為遵照人類Igγ1恆定區域中之EU指標的胺基酸位置)。
[36]一種雙特異性抗體,其係用以治療對象之癌的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,
該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,係由:由序列編號4之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之重鏈、由序列編號6之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之輕鏈,及由序列編號8之胺基酸序列所構成的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽所構成,
該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體係與PD-1訊息抑制劑組合來使用。
[37]如[24]~[36]中任一項之雙特異性抗體,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體係經轉譯後修飾。
[38]如[24]~[37]中任一項之雙特異性抗體,其係與PD-1訊息抑制劑同時地、連續地或逐次地投予至對象。
[39]如[24]~[37]中任一項之雙特異性抗體,其係將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑(i)於相同之醫藥組成物中含有,且同時投予至對象,或(ii)於不同的醫藥組成物中含有,且同時地、連續地或逐次地投予至對象。
[40]如[24]~[39]中任一項之雙特異性抗體,其中癌為原發性、轉移性或腹膜散播性之固體癌。
[41]如[40]之雙特異性抗體,其中癌為食道癌、大腸癌、胰臟癌、胃癌、胃食道接合部癌、肝癌、膽道癌,或攝護腺癌。
[42]如[24]~[41]中任一項之雙特異性抗體,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體,或抗PD-L2抗體,或此等之抗原結合片段。
[43]如[42]之雙特異性抗體,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體。
[44]如[43]之雙特異性抗體,其中抗PD-1抗體為納武利尤單抗、帕博利珠單抗、匹地利珠單抗、斯帕他珠單抗,或西米普利單抗。
[45]如[42]之雙特異性抗體,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-L1抗體。
[46]如[45]之雙特異性抗體,其中抗PD-L1抗體為阿特珠單抗、度伐利尤單抗,或阿維魯單抗。
[47]一種包含將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑投予至對象的癌之治療方法,
該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:
(a)由包含抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段及包含抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域的輕鏈所構成的抗TSPAN8抗體之Fab區域、
(b)包含抗CD3抗體之重鏈可變區域及抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域,以及
(c)由連結於(a)之Fab區域之重鏈片段的第一Fc多胜肽及連結於(b)之抗CD3scFv區域的第二Fc多胜肽所構成的Fc區域。
[48]如[47]之方法,其中抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3;抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3。
[49]如[47]或[48]之方法,其中抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域係由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成,抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域係由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成。
[50]如[47]~[49]中任一項之方法,其中抗TSPAN8抗體之Fab區域,係由:由序列編號4之胺基酸編號1至219之胺基酸序列所構成的重鏈片段及由序列編號6之胺基酸序列所構成的輕鏈所構成。
[51]如[47]~[50]中任一項之方法,其中抗CD3抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3;抗CD3抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3。
[52]如[47]~[51]中任一項之方法,其中抗CD3抗體之重鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成,抗CD3抗體之輕鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成。
[53]如[47]~[52]中任一項之方法,其中抗CD3scFv區域,係由序列編號8之胺基酸編號1至254之胺基酸序列所構成。
[54]如[47]~[53]中任一項之方法,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3的重鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈;含有包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3的輕鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之重鏈可變區域,以及包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
[55]如[47]~[54]中任一項之方法,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成的重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈、含有由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成的輕鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之重鏈可變區域,及由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
[56]如[47]~[55]中任一項之方法,其中包含含有選自由LALA變異(L234A及L235A)、N297G變異,及Knobs into holes(Knobs into holes)變異(此處,前述變異位置為遵照人類Igγ1恆定區域中之EU指標的胺基酸位置)所成之群的1或2種以上之變異的Fc區域。
[57]如[47]~[55]中任一項之方法,其中包含含有LALA變異、N297G變異,及Knobs into holes變異的Fc區域。
[58]如[56]或[57]之方法,其中Knobs into holes變異,為形成Fc區域之1個Fc多胜肽中之T366W變異,以及形成Fc區域之另1個Fc多胜肽中之T366S、L368A及Y407V變異(此處,前述變異位置為遵照人類Igγ1恆定區域中之EU指標的胺基酸位置)。
[59]一種包含將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑投予至對象的癌之治療方法,
該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,係由:由序列編號4之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之重鏈、由序列編號6之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之輕鏈,及由序列編號8之胺基酸序列所構成的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽所構成。
[60]如[47]~[59]中任一項之方法,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體係經轉譯後修飾。
[61]如[47]~[60]中任一項之方法,其中將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑同時地、連續地或逐次地投予至對象。
[62]如[47]~[60]中任一項之方法,其中將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑(i)於相同之醫藥組成物中含有,且同時投予至對象,或(ii)於不同的醫藥組成物中含有,且同時地、連續地或逐次地投予至對象。
[63]如[47]~[62]中任一項之方法,其中癌為原發性、轉移性或腹膜散播性之固體癌。
[64]如[63]之方法,其中癌為食道癌、大腸癌、胰臟癌、胃癌、胃食道接合部癌、肝癌、膽道癌,或攝護腺癌。
[65]如[47]~[64]中任一項之方法,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體,或抗PD-L2抗體,或此等之抗原結合片段。
[66]如[65]之方法,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體。
[67]如[66]之方法,其中抗PD-1抗體為納武利尤單抗、帕博利珠單抗、匹地利珠單抗、斯帕他珠單抗,或西米普利單抗。
[68]如[65]之方法,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-L1抗體。
[69]如[68]之方法,其中抗PD-L1抗體為阿特珠單抗、度伐利尤單抗或阿維魯單抗。
[70]一種抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之用途,其係用於製造為了治療對象之癌而與PD-1訊息抑制劑組合來使用的醫藥組成物,
該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:
(a)由包含抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段及包含抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域的輕鏈所構成的抗TSPAN8抗體之Fab區域、
(b)包含抗CD3抗體之重鏈可變區域及抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域,以及
(c)由連結於(a)之Fab區域之重鏈片段的第一Fc多胜肽及連結於(b)之抗CD3scFv區域的第二Fc多胜肽所構成的Fc區域。
[71]如[70]之用途,其中抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3;抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3。
[72]如[70]或[71]之用途,其中抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域係由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成,抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域係由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成。
[73]如[70]~[72]中任一項之用途,其中抗TSPAN8抗體之Fab區域係由:由序列編號4之胺基酸編號1至219之胺基酸序列所構成的重鏈片段及由序列編號6之胺基酸序列所構成的輕鏈所構成。
[74]如[70]~[73]中任一項之用途,其中抗CD3抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3;抗CD3抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3。
[75]如[70]~[74]中任一項之用途,其中抗CD3抗體之重鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成,抗CD3抗體之輕鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成。
[76]如[70]~[75]中任一項之用途,其中抗CD3scFv區域,係由序列編號8之胺基酸編號1至254之胺基酸序列所構成。
[77]如[70]~[76]中任一項之用途,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3的重鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈;含有包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3的輕鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之重鏈可變區域,以及包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
[78]如[70]~[77]中任一項之用途,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成的重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈、含有由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成的輕鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之重鏈可變區域,及由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
[79]如[70]~[78]中任一項之用途,其中包含含有選自由LALA變異(L234A及L235A)、N297G變異,及Knobs into holes(Knobs into holes)變異(此處,前述變異位置為遵照人類Igγ1恆定區域中之EU指標的胺基酸位置)所成之群的1或2種以上之變異的Fc區域。
[80]如[70]~[78]中任一項之用途,其中包含含有LALA變異、N297G變異,及Knobs into holes變異的Fc區域。
[81]如[79]或[80]之用途,其中Knobs into holes變異,為形成Fc區域之1個Fc多胜肽中之T366W變異,以及形成Fc區域之另1個Fc多胜肽中之T366S、L368A及Y407V變異(此處,前述變異位置為遵照人類Igγ1恆定區域中之EU指標的胺基酸位置)。
[82]一種抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之用途,其係用於製造為了治療對象之癌而與PD-1訊息抑制劑組合來使用的醫藥組成物,
該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,係由:由序列編號4之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之重鏈、由序列編號6之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之輕鏈,及由序列編號8之胺基酸序列所構成的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽所構成。
[83]如[70]~[82]中任一項之用途,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體係經轉譯後修飾。
[84]如[70]~[83]中任一項之用途,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體係與PD-1訊息抑制劑同時地、連續地或逐次地投予至對象。
[85]如[70]~[83]中任一項之用途,其中將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑(i)於相同之醫藥組成物中含有,且同時投予至對象,或(ii)於不同的醫藥組成物中含有,且同時地、連續地或逐次地投予至對象。
[86]如[70]~[85]中任一項之用途,其中癌為原發性、轉移性或腹膜散播性之固體癌。
[87]如[86]之用途,其中癌為食道癌、大腸癌、胰臟癌、胃癌、胃食道接合部癌、肝癌、膽道癌,或攝護腺癌。
[88]如[70]~[87]中任一項之用途,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體,或抗PD-L2抗體,或此等之抗原結合片段。
[89]如[88]之用途,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體。
[90]如[89]之用途,其中抗PD-1抗體為納武利尤單抗、帕博利珠單抗、匹地利珠單抗、斯帕他珠單抗,或西米普利單抗。
[91]如[88]之用途,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-L1抗體。
[92]如[91]之用途,其中抗PD-L1抗體為阿特珠單抗、度伐利尤單抗,或阿維魯單抗。
[發明之效果]
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,結合於癌抗原之TSPAN8與T細胞表面分子之CD3兩者,藉由使癌細胞與T細胞之物理距離接近,增強T細胞所致之癌細胞殺死作用。本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑之組合,相較於PD-1訊息抑制劑之單獨投予,造成顯著的抗腫瘤作用。因而,本發明提供一種抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之用途,其係於癌治療中與PD-1訊息抑制劑組合所用。
以下詳述本發明。
本說明書之用語,於以下只要未特別定義,則係以該技術領域中具有通常知識者一般所使用的意義使用。
抗體(或免疫球蛋白)係指由具有單一序列之重鏈2條,與具有單一序列之輕鏈2條所構成的以具有左右對稱Y字型之結構的4條鏈結構為基本結構之糖蛋白質。抗體中存在有IgG、IgM、IgA、IgD及IgE之5種類型。抗體分子之基本結構係各類型共通地,係分子量5萬~7萬之重鏈2條與2萬~3萬之輕鏈2條藉由雙硫鍵及非共價鍵而鍵結,而形成由分子量15萬~19萬之Y字型的4條鏈結構所構成的抗體分子。重鏈通常由包含約440個之胺基酸的多胜肽鏈所構成,各類型係具有特徵性結構,對應於IgG、IgM、IgA、IgD、IgE,分別稱為Igγ、Igμ、Igα、Igδ、Igε。進一步地,於IgG係存在有IgG1、IgG2、IgG3、IgG4之次類型,各自所對應的重鏈係稱為Igγ1、Igγ2、Igγ3、Igγ4。輕鏈通常由包含約220個之胺基酸的多胜肽鏈所構成,已知有λ型與κ型2種,分別稱為Igλ、Igκ。前述2種之輕鏈,不管與何種重鏈均可成對。
抗體分子之鏈內雙硫鍵,於重鏈存在有4個(於Igμ、Igε存在有5個)、於輕鏈存在有2個,每100~110個胺基酸殘基係成為1個環狀域。該等之立體結構在各環狀域間係類似,稱為結構單位或結構域。不管重鏈、輕鏈的位於N末端之結構域均稱為可變區域,即使由同種動物之同一類型(或次類型)所產生的抗體亦具有多樣的胺基酸序列,已知與抗體及抗原之結合特異性結合相關。較可變區域更下游之C末端側的結構域之胺基酸序列,於各類型或次類型係大致恆定,而稱為恆定區域。重鏈從N末端向C末端係具有重鏈可變區域(VH)及重鏈恆定區域(CH)。CH進一步從N末端側起分為CH1結構域、CH2結構域、CH3結構域之3個結構域。輕鏈從N末端向C末端係具有輕鏈可變區域(VL)及輕鏈恆定區域(CL)。
存在於VH及VL之3個互補性決定區域(CDR)之胺基酸序列其變化非常大,有助於可變區域之可變性。CDR為由各自於重鏈與輕鏈之N末端以CDR1、CDR2、CDR3之順序存在的約5~10個胺基酸殘基所構成的區域,其形成抗原結合部位。另一方面,可變區域之CDR以外的部分係稱為框架區域(FR),由FR1~4所構成,胺基酸序列之變化較少。
若將抗體以蛋白質分解酵素之木瓜酶處理,可得到3個抗體片段。N末端側之2個片段稱為Fab(抗原結合片段、Fragment,antigen binding)區域。本說明書中,「Fab區域」係指由重鏈之VH與CH1結構域及輕鏈(VL與CL)所構成的區域,以該Fab區域所構成的前端部分之抗原結合部位與抗原結合。本說明書中,「重鏈片段」係指由構成Fab區域的重鏈之VH與CH1結構域所構成的片段。又,將C末端側之片段稱為Fc(可結晶化片段、Fragment,crystallizable)區域。本說明書中,「Fc多胜肽」係指由重鏈之CH2結構域及CH3結構域所構成的多胜肽,「Fc區域」係指由2個Fc多胜肽所構成的複合體。
本說明書中,「絞鏈區域」或「絞鏈」係指存在於重鏈之CH1結構域與CH2結構域之間的可動性高的胜肽區域,重鏈片段與Fc多胜肽係以稱為絞鏈區域的部分連結。又,抗體之2條之重鏈係於絞鏈區域進行雙硫鍵結。
本說明書中,「抗原」係以一般所用之意義使用,特別是作為表示抗體或抗原結合片段等之抗原結合蛋白質可特異性結合之分子或分子的一部分之用語使用。抗原可為蛋白質、核酸等之分子。1個抗原亦有時具有可與不同抗體等相互作用之1個或其以上之抗原決定位。
本說明書中,「抗原結合片段」係指包含具有源自抗體之抗原結合活性的至少1個多胜肽鏈之分子。代表性的抗原結合片段,可列舉單鏈可變區域片段(scFv)、Fab片段、Fab’片段、F(ab’)
2片段。scFv為由經連接子連結的VH與VL所構成的一價之抗原結合片段。Fab片段為由包含輕鏈,與重鏈之VH、CH1結構域之片段所構成的一價之抗原結合片段。Fab’片段為由包含輕鏈,與重鏈之VH、CH1結構域與絞鏈區域之一部分之片段所構成的一價之抗原結合片段,該絞鏈區域的部分包含構成重鏈間雙硫鍵之半胱胺酸殘基。F(ab’)
2片段,為Fab’片段經雙硫鍵連結的二價分子。「一價」意指含1個抗原結合部位、「二價」意指含2個抗原結合部位。
本說明書中,「scFv區域」係指含有包含經連接子連結之VH與VL的一價之抗原結合片段的區域。
本說明書中,「雙特異性抗體」係指可對2個不同抗原特異性結合的抗體。「抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體」意指具有對TSPAN8之結合活性及對CD3之結合活性的雙特異性抗體。
本說明書中,只要文脈上無特別限定,「抗體」係作為包含完全長之抗體、抗原結合片段,及所有結構之雙特異性抗體的用語而使用。
本說明書中,「人類抗體」表示具有人類免疫球蛋白胺基酸序列之抗體。本說明書中「人源化抗體」表示CDR以外之胺基酸殘基之一部分、大部分或全部,經源自人類免疫球蛋白分子之胺基酸殘基取代的抗體。人源化之方法不特別限制,例如可參照美國專利第5225539號、美國專利第6180370號等來製作人源化抗體。
本說明書中使用的抗體之胺基酸殘基編號,可藉由指定Kabat編號或EU指標(Kabat等人、Sequences of Proteins of Immunological Interest,5th Ed,1991,NIH Publication No.91-3242),而遵照該等之編號系統來規定。
本說明書中,「第一」或「第二」係於部分之各種類存在2個以上時為了方便區別而使用。如此用語之使用只要未明確敘述,則不意圖賦予特定之順序或意義。
本說明書中,「連結」或「經連結」意指複數之成分(例如Fab區域及Fc多胜肽),直接或透過一或複數之仲介物(例如胜肽連接子)而結合。本說明書中「胜肽連接子」或「連接子」,意指用以連結可變區域間的可藉由基因工程導入之1個以上的任意之胺基酸殘基。本發明使用之胜肽連接子的長度不特別限定,所屬技術領域中具有通常知識者可依目標而適當選擇。
本說明書中「同一性」意指使用EMBOSS Needle(Nucleic Acids Res.,2015;Vol.43:pW580-W584),藉由預設所準備的參數而得之Identity之值。前述參數係如以下所述。
Gap Open Penalty=10
Gap Extend Penalty=0.5
Matrix=EBLOSUM62
End Gap Penalty=false
本說明書中,「類似物」意指於抗體與Fab區域中具備相同之胺基酸序列,可與抗原特異性結合,但於Fc區域包含不同胺基酸序列之抗體。
本說明書中,「對象」意指以疾病之預防或治療為必要的人類或其他動物。於1個實施形態中,對象係以疾病之預防或治療為必要的人類。於1個實施形態中,對象為具有癌的人類。
本說明書中,「治療」意指以回復、緩和、改善、抑制或延遲疾病之症狀、病狀、與疾病相關的生化學徵兆之進行、發病、嚴重化或復發為目的而對於對象所進行之某種治療介入(intervention)、處置,或有效成分對於對象之投予。
本說明書中,「有效成分」意指疾病之預防或治療所用的醫藥組成物、醫藥品等中所含的物質當中,顯示出某種生理活性者。於1個實施形態中,有效成分為抗體、低分子化合物、核酸、融合蛋白質、胜肽。於1個實施形態中,有效成分為抗體。於1個實施形態中,有效成分為雙特異性抗體。
本說明書中,「醫藥組成物」係指包含有效成分及藥學上容許的賦形劑(例如包含藥劑用賦形劑或藥劑用乘載體等但不限於此),以對象之治療為目的而處方之藥劑。
本說明書中,「併用」、「組合」或「組合使用」意指為了疾病之預防或治療,對同一對象,將複數種之有效成分同時、連續地或逐次地投予。該複數種之有效成分,可於同一醫藥組成物中含有、亦可於不同的醫藥組成物中分別含有。本說明書中,「同時」意指將複數種有效成分於其中一方之投予期間內並行投予,「連續地」意指於其中一方的有效成分之投予結束後緊接著進行另一方之有效成分的投予,「逐次地」意指將複數種有效成分依據投予排程依序投予。
本說明書中,藥劑之「有效量」係指為了對投予其之細胞或組織造成生理學的變化所必要之藥劑量。
本說明書中,「PD-1訊息抑制劑」意指解除PD-1所致之免疫細胞活化抑制的藥劑。PD-1訊息抑制劑,可藉由結合於PD-1或其配位子PD-L1或PD-L2,阻礙免疫抑制訊息,來阻礙PD-1所致之免疫檢查點之功能。PD-1訊息抑制劑,只要具有阻斷PD-1訊息之效果,則不管何種物質皆可,例如可為抗體、低分子化合物、核酸(可包含DNA或RNA,或天然或人工之核酸)、融合蛋白質、胜肽等。例如,抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體或抗PD-L2抗體,可藉由阻礙PD-1與PD-L1或PD-L2之結合,來阻礙PD-1訊息(Expert Opinion on Therapeutic Patents,2016;Vol.26:p.555-564)。
本發明係關於以下之(1)~(4):
(1)一種醫藥組成物,其含有為了治療對象之癌,而與PD-1訊息抑制劑組合使用的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體(本說明書中亦稱為「本發明之醫藥組成物」);
(2)為了治療對象之癌,而與PD-1訊息抑制劑組合使用的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體(本說明書中亦稱為「用於本發明之併用的雙特異性抗體」);
(3)包含將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑投予至對象的癌之治療方法(本說明書中亦稱為「本發明之治療方法」);或
(4)一種抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之用途,其係用於製造為了治療對象之癌而與PD-1訊息抑制劑組合來使用的醫藥組成物(本說明書中亦稱為「本發明之雙特異性抗體之用途」)。
<本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體>
本發明中使用的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體(本說明書中亦稱為「本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體」),係由以下(a)~(c)之結構所構成:
一種雙特異性抗體,其包含
(a)由包含抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段及包含抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域的輕鏈所構成的抗TSPAN8抗體之Fab區域、
(b)包含抗CD3抗體之重鏈可變區域及輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域,以及
(c)由連結於(a)之Fab區域之重鏈片段的第一Fc多胜肽及連結於(b)之抗CD3scFv區域的第二Fc多胜肽所構成的Fc區域。
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,具有包含第一抗體之1個Fab區域、第二抗體之scFv區域,及1個Fc區域之結構。如此之結構之抗體,亦稱為「開瓶器(Bottle-opener)型」或「三重F(triple F)型」(國際公開第2017/218707號)。
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含由含有抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段,及含有抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域的輕鏈所構成的抗TSPAN8抗體之Fab區域。
於1個實施形態中,抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3;抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3。
於1個實施形態中,抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域係由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成,抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域係由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成。
抗TSPAN8抗體之重鏈片段之CH1結構域所由來的重鏈恆定區域,係不管Igγ、Igμ、Igα、Igδ或Igε之何種恆定區域均可選擇。作為Igγ,例如可由Igγ1、Igγ2、Igγ3或Igγ4選擇。於1個實施形態中,抗TSPAN8抗體之重鏈片段,包含源自人類Igγ1恆定區域之CH1結構域。
抗TSPAN8抗體之輕鏈之CL,係不管Igλ或Igκ之何種恆定區域均可選擇。於1個實施形態中,抗TSPAN8抗體之輕鏈,包含人類Igκ恆定區域之CL。
於1個實施形態中,抗TSPAN8抗體之Fab區域,係由:由序列編號4之胺基酸編號1至219之胺基酸序列所構成的重鏈片段及由序列編號6之胺基酸序列所構成的輕鏈所構成。
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,作為scFv區域,包含:包含抗CD3抗體之重鏈可變區域及輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域。本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體中,亦可使用該領域中公知的抗CD3scFv區域或基於該領域中公知的抗CD3抗體之重鏈可變區域及輕鏈可變區域的序列資訊所製作之抗CD3scFv區域。公知的抗CD3抗體,已知有OKT3、UTCH1、L2K、TR66等之殖株,該等之序列係作為雙特異性抗體使用(Pharmacol.Ther.,2018;Vol.182:p.161-175)。
於1個實施形態中,抗CD3抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3,抗CD3抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3。
於1個實施形態中,抗CD3抗體之重鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成,抗CD3抗體之輕鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成。
抗CD3scFv區域中,連結抗CD3抗體之重鏈可變區域與輕鏈可變區域之胜肽連接子的種類及長度不特別限定,可由所屬技術領域中具有通常知識者適當選擇。於1個實施形態中,胜肽連接子之長度為5個胺基酸以上。上限不特別限定,通常為30個胺基酸以下。胜肽連接子之長度,為5個胺基酸以上30個胺基酸以下,較佳為5個胺基酸以上20個胺基酸以下、特佳為15個胺基酸以上20個胺基酸以下。作為胜肽連接子,例如可使用甘胺酸-絲胺酸連接子(GS連接子),或甘胺酸-離胺酸-脯胺酸-甘胺酸-絲胺酸連接子(GKPGS連接子)。如此之連接子例如可列舉以下者。
Ser
Gly-Ser
Gly-Gly-Ser
Ser-Gly-Gly
Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號9)
Ser-Gly-Gly-Gly(序列編號10)
Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號11)
Ser-Gly-Gly-Gly-Gly(序列編號12)
Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號13)
Ser-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly(序列編號14)
Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號15)
Ser-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly(序列編號16)
(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)
n(Ser-Gly-Gly-Gly-Gly)
nGly-Lys-Pro-Gly-Ser(序列編號17)
(Gly-Lys-Pro-Gly-Ser)
n上述n表示1以上之整數。胜肽連接子之長度或序列可由所屬技術領域中具有通常知識者依目的適當選擇。
於1個實施形態中,抗CD3scFv區域中,連結抗CD3抗體之重鏈可變區域與輕鏈可變區域之胜肽連接子具有Gly-Lys-Pro-Gly-Ser(GKPGS;序列編號17)之胺基酸序列。於1個實施形態中,連結抗CD3抗體之重鏈可變區域與輕鏈可變區域之胜肽連接子具有(Gly-Lys-Pro-Gly-Ser)n之胺基酸序列。於1個實施形態中,連結抗CD3抗體之重鏈可變區域與輕鏈可變區域之胜肽連接子具有(Gly-Lys-Pro-Gly-Ser)
4之胺基酸序列。
於1個實施形態中,抗CD3scFv區域係由序列編號8之胺基酸編號1至254之胺基酸序列所構成。
於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3之重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈;含有包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3的輕鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之重鏈可變區域,以及包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成的重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈、含有由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成的輕鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之重鏈可變區域,及由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體中,構成Fc區域之第一Fc多胜肽及第二Fc多胜肽所由來的重鏈恆定區域,係不管Igγ、Igμ、Igα、Igδ或Igε的何種恆定區域均可選擇。作為Igγ,例如可由Igγ1、Igγ2、Igγ3或Igγ4中選擇。於1個實施形態中,第一Fc多胜肽及第二Fc多胜肽,為源自人類Igγ1恆定區域之Fc多胜肽。
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體中之Fc區域,亦可包含降低抗體依賴性細胞毒性活性(ADCC)或補體依賴性毒性活性(CDC)之變異。L234A係指人類Igγ1恆定區域中遵照EU指標的胺基酸234位之白胺酸取代為丙胺酸。L235A係指人類Igγ1恆定區域中遵照EU指標的胺基酸235位之白胺酸取代為丙胺酸。人類Igγ1恆定區域L234A及L235A之胺基酸變異係稱為「LALA變異」。已知該變異會降低抗體之抗體依賴性細胞毒性活性或補體依賴性毒性活性(Mol.Immunol.,1992;Vol.29:p.633-639、J.Immunol.,2000;Vol.164:p.4178-4184)。
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體中之Fc區域,亦可進一步包含基於其他公知技術之變異。例如,Fc區域亦可包含人類Igγ1恆定區域中遵照EU指標的N297G變異(Protein cell,2018;Vol.9:p.63-73)或基於Knobs into holes技術之變異(以下亦稱「Knobs into holes變異」)。Knobs into holes技術,為藉由將一方之重鏈之CH3區域所存在的胺基酸側鏈取代為更大之側鏈(knob;突起),且將另一方之重鏈之CH3區域所存在的胺基酸側鏈取代為更小的側鏈(hole;空隙),而將突起配置於空隙內,而用於促進重鏈之異二聚體化,可有效率地取得目標之異二聚體化抗體分子的技術(Nature,1994;Vol.372:p.379-383、Nature Biotech.,1998;Vol.16:p.677-681、J.Mol.Biol.,1997;Vol.270:p.26-35、Proc.Natl.Acad.Sci.USA,2013;Vol.110:p.E2987-E2996)。
於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含含有LALA變異之Fc區域。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含含有N297G變異之Fc區域。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含含有Knobs into holes變異之Fc區域。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含含有選自由LALA變異、N297G變異及Knobs into holes變異所成之群的1或2種以上之變異的Fc區域。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含含有LALA變異、N297G變異,及Knobs into holes變異的Fc區域。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體中所含的Knobs into holes變異,為形成其Fc區域之1個Fc多胜肽中的T366W變異,以及形成其Fc區域之另1個Fc多胜肽中的T366S、L368A及Y407V變異(參照國際公開第1998/050431號)。
於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含由:由序列編號4之胺基酸編號235至451之胺基酸序列所構成的第一Fc多胜肽及由序列編號8之胺基酸編號270至486之胺基酸序列所構成的第二Fc多胜肽所構成的Fc區域。
再者,本說明書中,LALA變異、N297G變異、Knobs into holes變異等之胺基酸變異之記載,為基於人類Igγ1恆定區域中遵照EU指標的胺基酸位置者。例如,如前述,L234A係指人類Igγ1恆定區域中遵照EU指標的胺基酸234位之白胺酸取代為丙胺酸。
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體中,「抗TSPAN8抗體之重鏈」,意指含有抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段與Fc多胜肽(第一Fc多胜肽)經連結而得的多胜肽,亦包含含有抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段與第一Fc多胜肽透過絞鏈區域連結而得的多胜肽。
又,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體中,抗CD3scFv區域與Fc多胜肽(第二Fc多胜肽)係經連結,特別是亦可透過絞鏈區域而連結。
於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含含有抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段與第一Fc多胜肽透過絞鏈區域連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽透過絞鏈區域連結而得的多胜肽。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含含有抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段與第一Fc多胜肽透過絞鏈區域連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈、抗TSPAN8抗體之輕鏈,及抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽透過絞鏈區域連結而得的多胜肽。
於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3之重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽透過絞鏈區域連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈;含有包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3的輕鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之重鏈可變區域,以及包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽透過絞鏈區域連結而得的多胜肽。
於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成的重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽透過絞鏈區域連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈、含有由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成的輕鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之重鏈可變區域,及由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽透過絞鏈區域連結而得的多胜肽。
於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,為由:由序列編號4之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之重鏈、由序列編號6之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之輕鏈,及由序列編號8之胺基酸序列所構成的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽所構成的雙特異性抗體。
本說明書中「轉譯後修飾」,當使抗體於細胞內表現的情況時,係指抗體於轉譯後受到修飾。轉譯後修飾之例子,可列舉重鏈N末端之麩醯胺或麩胺酸之焦麩胺醯化(pyroglutamylation)、醣基化(glycosylation)、氧化、去醯胺化、糖化等之修飾,或藉由將重鏈C末端之離胺酸以羧肽酶切斷所致的離胺酸缺失。已知於各種之抗體中,會產生如此之轉譯後修飾(J.Pharm.Sci.,2008;Vol.97:p.2426-2447)。
於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,亦可經轉譯後修飾。於1個實施形態中,轉譯後修飾為重鏈可變區域N末端之焦麩胺醯化及/或重鏈C末端離胺酸缺失。於本領域中已知以N末端之焦麩胺醯化或C末端離胺酸缺失所進行的轉譯後修飾不會對抗體之活性造成影響(Analytical Biochemistry,2006;Vol.348:p.24-39)。
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,係結合於人類TSPAN8(基因編號:NM_004616.2)及人類CD3εδ複合蛋白(CD3ε基因編號:NM_000733.3、CD3δ基因編號:NM_000732.4或NM_001040651.1)。是否結合於人類TSPAN8及人類CD3εδ複合蛋白,可使用公知的結合活性測定方法來確認。作為測定結合活性之方法,例如可列舉Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay(ELISA)法、流式細胞分析法等之方法。
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,只要是所屬技術領域中具有通常知識者,即可基於本說明書所揭示之抗TSPAN8抗體及抗CD3scFv區域之重鏈可變區域及輕鏈可變區域的序列資訊等,以該領域中公知之方法來製作。又,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之抗CD3scFv區域,只要是所屬技術領域中具有通常知識者,即可基於公知的抗CD3抗體之重鏈可變區域及輕鏈可變區域之序列資訊等,以該領域中公知之方法來製作。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,為人源化抗體或人類抗體。人源化抗體之製作時,亦可使用所屬技術領域中具有通常知識者週知之方法,適當導入回復突變(Bioinformatics,2015;Vol.31:p.434-435)。本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體不特別限定,例如可遵照國際公開第2022/102768號記載之方法來製造。國際公開第2022/102768號記載之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之製作方法(包含<本發明之雙特異性抗體之多核苷酸>、<本發明之雙特異性抗體之表現載體>、<本發明之經轉形之宿主細胞>、<本發明之生產雙特異性抗體之方法>及實施例但不限於此),係藉由參照而援用(Incorporation by Reference)於本說明書中。
<本發明之醫藥組成物>
本發明提供含有為了治療對象之癌,而與PD-1訊息抑制劑組合使用的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之醫藥組成物(本發明之醫藥組成物)。本發明之醫藥組成物,為含有本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體的用以治療對象之癌的醫藥組成物,係與PD-1訊息抑制劑組合來使用。於1個實施形態中,本發明之醫藥組成物,為使用於治療對象之癌的方法中之醫藥組成物,該治療方法,包含將該醫藥組成物與PD-1訊息抑制劑投予至對象。本發明之醫藥組成物,係使用前述本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體而製造,含有本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體及藥學上容許的賦形劑。本發明之醫藥組成物中所含的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,可具有前述<本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體>之項目中記載之分子結構、胜肽連接子、變異、轉譯後修飾等。本發明之醫藥組成物,可使用該領域中通常使用的賦形劑亦即藥劑用賦形劑或藥劑用乘載體等,藉由通常使用之方法來調製。此等醫藥組成物之劑型的例子,例如可列舉注射劑、點滴用劑等之非經口劑,可藉由靜脈內投予、皮下投予、腹腔內投予等來進行投予。於製劑化時,可於藥學上容許的範圍,使用因應此等劑型的賦形劑、乘載體、添加劑等。
本發明之醫藥組成物中,可含有本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之轉譯後修飾體。例如,含有受到C末端離胺酸之缺失或N末端之焦麩胺醯化的兩者或一者之抗體等的醫藥組成物亦包含於本發明之醫藥組成物中。
於1個實施形態中,本發明之醫藥組成物,為含有以下記載之本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體及/或該抗體之轉譯後修飾體的醫藥組成物:
一種雙特異性抗體,其包含:含有包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3之重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈;含有包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3的輕鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3之抗CD3抗體之重鏈可變區域,及包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3之抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
於1個實施形態中,本發明之醫藥組成物,為含有以下記載之本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體及/或該抗體之轉譯後修飾體的醫藥組成物:
一種雙特異性抗體,其包含:含有由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成的重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈、含有由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成的輕鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成的重鏈可變區域及由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成的輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
於1個實施形態中,本發明之醫藥組成物,為含有包含由序列編號4之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之重鏈、由序列編號6之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之輕鏈,及由序列編號8之胺基酸序列所構成的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體及/或該抗體之轉譯後修飾體的醫藥組成物。
本發明之醫藥組成物之製劑化時,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之添加量,係依患者之症狀的程度或年齡、所使用之製劑的劑型,或抗體之結合力價等而異,例如,以對人類之投予量換算計,可使用0.0001mg/kg~1000mg/kg左右之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體於製劑中。於1個實施形態中,於製劑化時本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之添加量,以對人類之投予量換算計,為0.0001mg/kg~1000mg/kg之範圍。於1個實施形態中,於製劑化時本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之添加量,以對人類之投予量換算計,為0.001mg/kg~100mg/kg之範圍。於1個實施形態中,於製劑化時本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之添加量,以對人類之投予量換算計,為0.01mg/kg~10mg/kg之範圍。於1個實施形態中,於製劑化時本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之添加量,以對人類之投予量換算計,較佳為0.01mg/kg~10mg/kg之範圍。
<PD-1訊息抑制劑>
本發明中,PD-1訊息抑制劑,為了治療對象之癌,係與本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體或本發明之醫藥組成物組合來使用。
該PD-1訊息抑制劑之作用機轉及治療性工具(treatment modality),只要會阻斷PD-1訊息則不特別限定。作為作用機轉,例如可為阻礙與PD-1訊息相關之分子間的結合、PD-1訊息分子之表現量降低(例如阻礙蛋白質之生成或誘導分解等)等之作用機轉。作為治療性工具,例如可為抗體、低分子化合物、核酸(可包含DNA或RNA、天然或人工之核酸)、融合蛋白質、胜肽、其他之治療性工具。
PD-1訊息抑制劑,可藉由測定PD-1及PD-L1或PD-L2之2種蛋白質的結合阻礙作用、以PD-1訊息分子之表現量等為指標的表現降低作用等之方法來取得。例如,PD-1與PD-L1或PD-L2之結合抑制劑,可於得到結合於PD-1及PD-L1或PD-L2之任一者的抑制劑之後,以阻礙PD-1與PD-L1或PD-L2之結合的能力來篩選所得之抑制劑。抑制劑對蛋白質之結合,例如可使用流式細胞分析法(FCM)、ELISA法、表面電漿子共振法(SPR)、熱位移分析法(TSA)、等溫滴定量熱法(ITC)等之所屬技術領域中具有通常知識者週知之方法來評價。又,例如,降低PD-1、PD-L1或PD-L2等之PD-1訊息分子的表現量之抑制劑,能夠以細胞中之PD-1、PD-L1或PD-L2等之蛋白質量為指標來取得。PD-1訊息之阻礙作用,可藉由T細胞增殖干擾素-γ釋出及報導基因分析等之作用來確認。降低某蛋白質之表現量的抑制劑之作用,例如可使用ELISA法、定量PCR法、in situ hybridization法、活細胞造影法等之所屬技術領域中具有通常知識者週知之方法來確認。
PD-1訊息抑制劑,例如可列舉抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體、抗PD-L2抗體等之阻礙PD-1訊息之抗體。如此之抗體,可為人源化抗體、嵌合體抗體、小鼠抗體、人類抗體,以及該等之抗原結合片段。公知的抗PD-1抗體並不限定,例如係有美國專利第8008449號、美國專利第6808710號、美國專利第7488802號、美國專利第8168757號及美國專利第8354509號,以及國際公開第2006/121168號及國際公開第2012/145493號記載的抗體。公知的抗PD-L1抗體並不限定,例如係有國際公開第2007/005874號、國際公開第2010/077634號、國際公開第2011/066389號、國際公開第2013/079174號及美國專利第8217149號記載的抗體。於1個實施形態中,本發明中使用的PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體或抗PD-L2抗體,或此等之抗原結合片段。於1個實施形態中,本發明中使用的PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體或抗PD-L2抗體。於1個實施形態中,抗PD-1抗體可為納武利尤單抗、帕博利珠單抗、匹地利珠單抗、斯帕他珠單抗、西米普利單抗等之抗PD-1抗體。於1個實施形態中,抗PD-L1抗體可為阿特珠單抗、度伐利尤單抗、阿維魯單抗等之抗PD-L1抗體。
作為PD-1訊息抑制劑,例如亦可列舉AMP-224(國際公開第2010/027827號及國際公開第2011/066342號)、BMS-1166(Oncotarget,2017;Vol.8:p.72167-72181)等之阻礙PD-1對PD-L1之結合的融合蛋白質或低分子化合物。各種PD-1訊息抑制劑在該技術領域中為公知(非專利文獻8)。
本發明之於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑可(i)含於相同之醫藥組成物中而同時投予至對象,或亦可(ii)含於不同的醫藥組成物中,且同時、連續地或逐次地投予至對象。
於1個實施形態中,本發明之醫藥組成物,為用以治療對象之癌的醫藥組成物,含有本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑。於1個實施形態中,本發明之醫藥組成物,係與含有PD-1訊息抑制劑之別的醫藥組成物組合來使用。於1個實施形態中,本發明之醫藥組成物,為用以治療對象之癌的醫藥組成物之組合(本說明書中亦稱為「本發明之組合醫藥」),該組合,包含含有本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體的醫藥組成物與含有PD-1訊息抑制劑的醫藥組成物。於1個實施形態中,本發明之組合醫藥,為使用於治療對象之癌的方法之醫藥組成物的組合,該治療方法,包含將含有本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體的醫藥組成物與含有PD-1訊息抑制劑的醫藥組成物投予至對象。
<用於本發明之併用的雙特異性抗體及本發明之雙特異性抗體之用途>
又,本發明提供為了治療對象之癌,而與PD-1訊息抑制劑組合使用的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體(用於本發明之併用的雙特異性抗體)。於1個實施形態中,用於本發明之併用的雙特異性抗體,為使用於治療對象之癌的方法之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,該治療方法,包含將該雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑投予至對象。又,本發明提供一種抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之用途,其係用於製造為了治療對象之癌而與PD-1訊息抑制劑組合來使用的醫藥組成物(本發明之雙特異性抗體之用途)。本發明之雙特異性抗體之用途,為一種抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之用途,其係用於製造用以治療對象之癌的醫藥組成物,該醫藥組成物,係為了治療對象之癌,而與PD-1訊息抑制劑組合來使用。於1個實施形態中,本發明之雙特異性抗體之用途,為一種抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之用途,其係用於製造使用於治療對象之癌的方法之醫藥組成物,該治療方法,包含將該醫藥組成物與PD-1訊息抑制劑投予至對象。用於本發明之併用的雙特異性抗體及本發明之雙特異性抗體之用途中使用的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,可具有前述<本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體>之項目中記載之分子結構、胜肽連接子、變異、轉譯後修飾等。
<本發明之治療方法>
本發明提供包含將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑投予至對象的癌之治療方法(本發明之治療方法)。本發明之治療方法中使用的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,可具有前述<本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體>之項目中記載之分子結構、胜肽連接子、變異、轉譯後修飾等。
於1個實施形態中,本發明之治療方法中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體係與PD-1訊息抑制劑同時地、連續地或逐次地投予至對象。
於1個實施形態中,本發明之治療方法中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑係(i)含於相同之醫藥組成物中而同時投予至對象,或(ii)含於不同的醫藥組成物中,且同時、連續地或逐次地投予至對象。
於1個實施形態中,本發明之治療方法中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑係(i)含於相同之醫藥組成物中而同時投予至對象,或(ii)含於不同的醫藥組成物中,且同日投予至對象。
於1個實施形態中,本發明之治療方法中,係(a)對於對象投予本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體結束後,開始投予PD-1訊息抑制劑,或(b)對於對象投予PD-1訊息抑制劑結束後,開始投予本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體。
於1個實施形態中,本發明之治療方法,為對於對象遵照包含投予循環之投予計畫,而進行本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑之投予之逐次的使用。於1個實施形態中,本發明之治療方法,係於至少1個投予循環或全部的投予循環中,開始對於對象之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之投予,之後開始PD-1訊息抑制劑之投予。於1個實施形態中,本發明之治療方法,係於至少1個投予循環或全部的投予循環中,開始對於對象之PD-1訊息抑制劑之投予,之後開始抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體或醫藥組成物之投予。
<治療用途>
藉由本發明之醫藥組成物或治療方法等所治療之癌,可為固體癌或血癌之任意者。藉由本發明所治療之癌,可為原發性、轉移性或腹膜散播性之任意者。藉由本發明所治療之癌不特別限定,例如可列舉胃癌、肺癌;急性淋巴母細胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、B細胞淋巴瘤、多發性骨髓瘤、T細胞淋巴瘤等之血癌;骨髓化生不良症候群、腺癌、扁平上皮癌、腺扁平上皮癌、未分化癌、大細胞癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、中皮瘤、皮膚癌、皮膚T細胞淋巴瘤、乳癌、攝護腺癌、膀胱癌、***癌、頸部癌、頭頸部癌、子宮癌、子宮頸癌、肝癌、膽囊癌、膽管癌、膽道癌、腎臟癌、胰臟癌、結腸癌、大腸癌、直腸癌、小腸癌、胃食道接合部癌、食道癌、睪丸癌、卵巢癌、腦腫瘤等之固體癌,以及骨組織、軟骨組織、脂肪組織、肌肉組織、血管組織及造血組織之癌,以及軟骨肉瘤、伊文氏肉瘤、惡性血管內皮瘤、惡性神經鞘瘤、骨肉瘤、軟組織肉瘤等之肉瘤,或神經膠質母細胞瘤、多形性神經膠質母細胞瘤、肝母細胞瘤、髓母細胞瘤、腎母細胞瘤、神經母細胞瘤、胰臟母細胞瘤、胸膜肺母細胞瘤、網膜母細胞瘤等之母細胞瘤等。
於1個實施形態中,本發明所治療之對象之癌,為食道癌、大腸癌、胰臟癌、胃癌、胃食道接合部癌、肝癌、膽道癌、攝護腺癌。於1個實施形態中,較佳為食道癌、大腸癌、胰臟癌、胃癌、胃食道接合部癌。
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體或PD-1訊息抑制劑對於對象之投予量,係依對象之症狀之程度或年齡、所使用之抗體、醫藥組成物、抑制劑等之劑型,或有效成分之活性強度等而異,例如可使用0.0001mg/kg~1000mg/kg左右。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之對於對象之投予量為0.0001mg/kg~1000mg/kg。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之對於對象之投予量為0.001mg/kg~100mg/kg。於1個實施形態中,本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之對於對象之投予量為0.01mg/kg~10mg/kg。
於此提供為了對本發明更加理解所參照的特定實施例,但此等係以例示為目的者,不限定本發明。
[實施例]
[實施例1:抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之製作]
[實施例1-1:抗TSPAN8抗體之雙特異性抗體載體製作]
為了使用於抗TSPAN8抗體之雙特異性抗體,係於序列編號2之16B11.1之重鏈(16B11.1_HC)導入變異來製作序列編號4記載之16B11.1_HC_H。
具體而言,係對序列編號2導入以下之3種變異。(1)胺基酸編號238及239(EU指標:234及235)之白胺酸(L)取代為丙胺酸(A)的LALA變異(L234A及L235A)、(2)胺基酸編號370、372及411(EU指標:366、368及407)之胺基酸分別由蘇胺酸(T)取代為絲胺酸(S)、由L取代為A、由酪胺酸(Y)取代為纈胺酸(V)之Knobs into holes(Knobs into holes)變異、(3)胺基酸編號301(EU指標:297)之胺基酸由天門冬醯胺(N)取代為甘胺酸(G)之變異。所設計之16B11.1_HC_H之重鏈胺基酸序列示於序列編號4。將編碼序列編號4之16B11.1_HC_H的多核苷酸導入於pcDNA3.4-TOPO載體(Thermo Fisher scientific公司)。所製作之載體稱為pcDNA3.4-16B11.1_HC_H。
又,設計於16B11.1之輕鏈可變區域之C末側連結有人類κ鏈之恆定區域胺基酸序列(序列編號6之胺基酸編號108至213之序列)的多胜肽(序列編號6)。將編碼所設計之多胜肽的多核苷酸導入於pcDNA3.4 TOPO載體。所製作之輕鏈載體稱為pcDNA3.4-16B11_LC。
[實施例1-2:抗人類CD3抗體之雙特異性抗體載體製作]
基於日本專利第5686953號記載之小鼠抗CD3抗體之重鏈可變區域及輕鏈可變區域之序列,根據文獻(Front Biosci.,2008;Vol.13:p.1619-1633)記載之方法設計人源化抗CD3抗體之序列。使用MOLSIS Inc.公司提供的整合計算化學系統MOE,解析立體結構資訊(PDB Code:5FCS),對框架區域內導入回復突變。設計抗CD3scFv-Fc成為依序配置重鏈可變區域(序列編號8 胺基酸編號1至125)、連接子(序列編號8 胺基酸編號126至145)、輕鏈可變區域(序列編號8 胺基酸編號146至254)、絞鏈(序列編號8 胺基酸編號255至269)、CH2結構域(序列編號8 胺基酸編號270至379)及CH3結構域(序列編號8 胺基酸編號380至486)。進一步地,對於序列編號8,導入(1)將相當於胺基酸編號44與胺基酸編號247之胺基酸取代為半胱胺酸(C)之變異、(2)將胺基酸編號259(EU指標:220)之胺基酸由C取代為S之變異、(3)將胺基酸編號273及274(EU指標:234及235)之胺基酸由L取代為A之LALA變異、(4)將胺基酸編號405(EU指標:366)之胺基酸由T取代為色胺酸(W)之Knobs into holes變異、(5)將胺基酸編號336(EU指標:297)之胺基酸由N取代為G之變異。為了導入此等之變異,係合成編碼包含各自之變異點的胺基酸序列之多核苷酸,***pcDNA3.1(+)載體(Thermo Fisher scientific公司、V79020)。所製作之載體稱為pcDNA3.1-m7_scFV_K。所製作之抗CD3scFv-Fc之鹼基序列示於序列編號7、胺基酸序列示於序列編號8。
[實施例1-3:抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之製作]
為了製作由抗TSPAN8抗體之Fab區域、抗CD3scFv區域及Fc區域所構成的雙特異性抗體,係將pcDNA3.4-16B11.1_HC_H、pcDNA3.4-16B11_LC、pcDNA3.1-m7_scFV_K遵照常規方法對ExpiCHO-S細胞(Thermo Fischer Scientific公司、A29127)轉染。將培養上清液使用MabSelect SuRe(Cytiva公司、17-5438-02)純化,進一步使用凝膠過濾管柱HiLoad(註冊商標)26/600 Superdex(註冊商標) 200pg(Cytiva公司、28-9893-36)純化,藉以得到純度95%以上之純化抗體。將所得之抗體稱為抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體。
[實施例2:抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體之in vitro併用效果]
[實施例2-1:Expanded PanT細胞之調製]
將於RPMI 1640(Thermo Fisher Scientific公司、11875-119)中分別添加有終濃度10%之FBS(Cytiva公司、SH30084.03)、1%之盤尼西林/鏈黴素(Thermo Fisher Scientific公司、15070-063)、1%之MEM 非必需胺基酸(Merck公司、M7145)、1%之丙酮酸鈉(Merck公司、S8636)、1%之GlutaMAX I(Thermo Fisher Scientific公司、35050-061)、1%之HEPES(Thermo Fisher Scientific公司、15630-080)者稱為「效應物培養基(effector medium)」。將經磷酸鹽緩衝液(PBS)稀釋為終濃度3μg/mL的抗CD3抗體(BioLegend公司、317315)添加於組織培養用微培養盤24孔(IWAKI、3820-024)(以下稱「24孔盤」),使抗CD3抗體固相化。使用PanT 細胞單離套組-人類(Miltenyi Biotec公司、130-096-535),根據廠商實驗指南,從人類末梢血單核細胞(human peripheral blood mononuclear cells)(LONZA公司、CC-2702)將PanT細胞(含CD4T細胞及CD8T細胞兩者,以下稱「PanT細胞」)予以單離。將經單離的PanT細胞離心分離,去除上清液後懸浮於效應物培養基。於前述將抗CD3抗體固相化而得的24孔盤中,播種經懸浮的PanT細胞為1.5x10
6cells/孔。進一步添加終濃度10ng/mL之人類IL-2(PeproTech公司、200-02)及終濃度1μg/mL之抗CD28抗體(BioLegend公司、302923),將全量以效應物培養基調整為1mL/孔。於37℃、5% CO
2培養箱中進行培養。2日後回收PanT細胞,將回收的PanT細胞懸浮於效應物培養基,播種於組織培養用微培養盤6孔(IWAKI、3810-006)(以下稱「6孔盤」)。進一步添加終濃度10ng/mL之人類IL-2,於37℃、5% CO
2培養箱中進行培養。每2日或3日添加終濃度10ng/mL之人類IL-2同時重複繼代。自培養開始起10日後,將細胞全量回收,進行離心分離,去除上清液後,再懸浮於Bambanker(GC Lymphotec公司、CS-02-001),分取於管中,於-80℃冷凍保存。此處將經冷凍保存之PanT細胞於本說明書中稱為「Expanded PanT細胞」。
[實施例2-2:安定表現人類TSPAN8-GFP之RKO細胞之製作]
人類大腸癌細胞株之RKO細胞,係由American Type Culture Collection(ATCC、CRL-2577)獲得。RKO細胞係於分別含有終濃度10%之FBS、終濃度1%之盤尼西林/鏈黴素之RPMI-1640培養基(Merck公司、R8758)(以下稱「培養基」)中,於37℃、5%CO
2之條件下培養。
為了製作表現TSPAN8與GFP之融合蛋白質的細胞,係將從TSPAN8(Myc-DDK-tagged)-人類四跨膜蛋白8(TSPAN8)(ORIGENE公司、RC202694)使用限制酵素切斷而得的編碼含人類TSPAN8之多胜肽的多核苷酸次選殖入pCMV6-AC-GFP載體(ORIGENE公司、PS100010)(以下稱「人類TSPAN8-GFP表現載體」)。將所製作之人類TSPAN8-GFP表現載體使用Lipofectamine 3000(Thermo Fisher Scientific公司、L3000008),根據廠商推薦的實驗指南對RKO細胞進行脂質轉染。於添加有終濃度600μg/mL之Geneticin 選擇用抗生素(Thermo Fisher Scientific公司、10131-027)的培養基進行選擇培養。使用MACS Cell Separation(Miltenyi Biotec公司)進行細胞之分取,取得安定表現人類TSPAN8-GFP之RKO細胞殖株(以下稱「RKO_hTSPAN8-GFP細胞」)。
[實施例2-3:於in vitro癌細胞增殖抑制作用中,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體之併用效果]
以RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統來評價抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體所致對癌細胞增殖抑制之併用效果。於半量型(half area)96孔微培養盤(Greiner Bio-One公司、675090)(以下稱「半量型培養盤」)中,將以培養基所調製的RKO_hTSPAN8-GFP細胞以10
4個/孔進行播種,於37℃、5% CO
2培養箱中培養。3小時後,將以培養基所調製的Expanded PanT細胞於培養中之半量型培養盤中以3×10
4個/孔進行播種。使用實施例1-3所取得的抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體,及抗人類PD-1抗體之納武利尤單抗、帕博利珠單抗或抗人類PD-L1抗體之阿特珠單抗類似物、度伐利尤單抗類似物作為被試驗抗體。納武利尤單抗係基於國際公開第2014/055648號記載之納武利尤單抗之重鏈完全長及輕鏈完全長之胺基酸序列(序列編號17及18)而設計。帕博利珠單抗係基於國際公開第2008/156712號記載之帕博利珠單抗之重鏈完全長及輕鏈完全長之胺基酸序列(序列編號31及36)而設計。從所設計的序列,根據國際公開第2021/241616號之實施例11記載之方法取得納武利尤單抗及帕博利珠單抗。作為納武利尤單抗及帕博利珠單抗之同型控制組(isotype control),係使用RecombiMAb 人類 IgG4 (S228P)同型控制組,抗雞蛋溶菌酶(Bio X Cell公司、BE0349)。作為阿特珠單抗類似物、度伐利尤單抗類似物及該等之同型控制組,係分別使用人類 PD-L1/B7-H1(Research Grade Atezolizumab Biosimilar)抗體(R & D systems公司、MAB10348)、人類 PD-L1/B7-H1(Research Grade Durvalumab Biosimilar)抗體(R & D systems公司、MAB10355)及經Ultra-LEAF純化的人類IgG1同型控制組重組抗體(BioLegend公司、403502)。藉由培養基,以終濃度0或10μg/mL調製抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體、以終濃度1μg/mL調製同型控制組、納武利尤單抗、帕博利珠單抗、阿特珠單抗類似物或度伐利尤單抗類似物,添加至半量型培養盤。添加後,將半量型培養盤於37℃、5% CO
2培養箱進行培養。3日後,回收上清液之一部分,作為干擾素-γ產生測定用而於-80℃保存。將懸浮細胞以含10% FBS之PBS回收至PP培養盤96V(住友Bakelite股份有限公司、MS-3396P)(以下稱「V底微培養盤」)後,將殘留於半量型培養盤的接著細胞以BD Phosflow Fix Buffer I(Becton, Dickinson and Company公司、557870)固定後,以Infinite M200PRO(TECAN公司)測定GFP之螢光強度,將減去背景之值作為細胞增殖之指標。將4次獨立測試的結果示於圖1及圖2。如圖1及圖2所示,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體於RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中,會阻礙RKO_hTSPAN8-GFP細胞之增殖。抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與納武利尤單抗或帕博利珠單抗之併用所致之RKO_hTSPAN8-GFP細胞增殖阻礙作用,係較抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體、納武利尤單抗或帕博利珠單抗單劑更強(圖1)。同樣地,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與阿特珠單抗類似物或度伐利尤單抗類似物之併用所致之RKO_hTSPAN8-GFP細胞增殖阻礙作用,係較抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體、阿特珠單抗類似物或度伐利尤單抗類似物單劑更強(圖2)。
[實施例2-4.抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體之併用於in vitro T細胞活化之效果]
將實施例2-3中回收於V底微培養盤之懸浮細胞以540×g 5分鐘進行離心分離後,去除上清液,以20μL/孔添加於autoMACS 電泳緩衝液(Miltenyi Biotec公司、130-091-221)中添加有40分之1量的人類 BD Fc Block(Becton, Dickinson and Company公司、564220)而得的液體。對各自的孔各添加10μL/孔的經autoMACS 電泳緩衝液稀釋之PE 抗人類CD4 抗體(BioLegend公司、 317410)、APC-H7 小鼠抗人類CD8(Becton, Dickinson and Company公司、560179)、BV421 小鼠抗人類CD45(Becton, Dickinson and Company公司、563879)、APC 抗人類CD25 (BioLegend公司、302610),於4℃靜置1小時。以autoMACS 電泳緩衝液洗淨1次後,再懸浮於含1/200量之7-AAD 溶液(Becton, Dickinson and Company公司、559925)的autoMACS 電泳緩衝液,使用CytoFLEX S(Beckman Coulter公司)藉由流式細胞分析法測定各種抗體之結合。數據解析係以FlowJo(Becton, Dickinson and Company公司)進行。解析CD45陽性(免疫細胞之指標)且7-AAD陰性(活細胞之指標)之區分中的CD4或CD8陽性細胞。將CD4或CD8陽性細胞之活化標記的CD25之表現量,以抗CD25之螢光標識抗體的APC 抗人類CD25之平均螢光強度來表示。3次獨立測試的結果示於圖3-1、3-2、4-1、4-2。抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體於RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中,會誘導CD4T細胞(圖3-1、圖4-1)及CD8T細胞(圖3-2、圖4-2)之CD25表現。抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與納武利尤單抗或帕博利珠單抗之併用所致之CD4T細胞(圖3-1)及CD8T細胞(圖3-2)中的CD25之表現,係較抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體、納武利尤單抗或帕博利珠單抗單劑更高。同樣地,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與阿特珠單抗類似物或度伐利尤單抗類似物之併用所致之CD4T細胞(圖4-1)及CD8T細胞(圖4-2)中的CD25之表現,係較抗TSPAN8 (16B11)-抗CD3雙特異性抗體、阿特珠單抗類似物或度伐利尤單抗類似物單劑更高。由此結果,顯示抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體之併用,相較於各自的單劑,更顯著地活化CD4T細胞及CD8T細胞。
[實施例2-5.抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體之併用於in vitro 干擾素-γ產生量的效果]
針對實施例2-3中回收的上清液,使用AlphaLISA 干擾素-γ測定套組(Perkin Elmer公司、AL217F),根據廠商推薦的實驗指南,測定上清液中之干擾素-γ產生量。圖5顯示抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與納武利尤單抗或帕博利珠單抗之併用作用、圖6顯示抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與阿特珠單抗類似物或度伐利尤單抗類似物之併用作用。如圖5及6所示,藉由抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體的添加,於RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中檢測出干擾素-γ的產生。抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與納武利尤單抗或帕博利珠單抗之併用所致之干擾素-γ的產生量,係較抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體、納武利尤單抗或帕博利珠單抗單劑更多(圖5)。再者,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體非存在下之納武利尤單抗或帕博利珠單抗單劑所致之干擾素-γ的產生量為檢測極限以下。同樣地,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與阿特珠單抗類似物或度伐利尤單抗類似物之併用所致之干擾素-γ的產生量,係較抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體、阿特珠單抗類似物或度伐利尤單抗類似物單劑更多(圖6)。再者,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體非存在下之阿特珠單抗類似物或度伐利尤單抗類似物單劑所致之干擾素-γ的產生量為檢測極限以下。由此結果,顯示出抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體之併用,相較於各自的單劑,更顯著地促進T細胞中之干擾素-γ的產生。
[實施例3:抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗小鼠PD-1抗體之in vivo併用效果]
使用經移植表現人類TSPAN8之B16-F10細胞的B-hCD3E小鼠(人類CD3ε細胞外結構域敲入(knock in)小鼠)來進行抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗小鼠PD-1抗體之in vivo抗腫瘤作用的探討。
[實施例3-1:人類TSPAN8表現B16-F10細胞之構築]
小鼠黑色素瘤細胞株之B16-F10細胞,係由American Type Culture Collection(ATCC、CRL-6475)獲得。以添加有終濃度10%FBS與終濃度1%之盤尼西林/鏈黴素的Dulbecco改良Eagle培養基(SIGMA公司、D6429)(以下將調製後之培養基稱為「Eagle培養基」)於37℃、5%CO
2之條件下培養。從TSPAN8(Myc-DDK-tagged)-人類四跨膜蛋白8(TSPAN8)(ORIGENE公司、RC202694),將編碼包含人類TSPAN8之多胜肽的多核苷酸予以次選殖(subclone)入pMONO-blasti-mcs載體(InvivoGen公司、pmonob-mcs)。將該載體藉由電穿孔導入於B16-F10細胞。藉由以添加有終濃度10μg/mL之殺稻瘟菌素(blasticidin)(InvivoGen公司、ant-bl-1)的Eagle培養基進行選擇培養及使用了FACS Aria II細胞分類器(Becton, Dickinson and Company公司)之表現細胞的分取,來取得安定表現人類TSPAN8之B16-F10細胞殖株(表現人類TSPAN8之B16-F10細胞)。
[實施例3-2:抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗小鼠PD-1抗體之於in vivo抗腫瘤作用之併用效果]
獲得B-hCD3E雌性小鼠(C57BL/6-CD3e
tm2(CD3e)/Bcgen;Biocytogen公司、110008)。將表現人類TSPAN8之B16-F10細胞懸浮於Matrigel(註冊商標)Basement Membrane Matrix(Corning Inc.公司、356237),調製1×10
7個/mL之細胞懸浮液。對7〜8週齡小鼠之側面的皮下將細胞懸浮液各接種1×10
6細胞/100μL。細胞接種5日後,使用測徑器(Mitutoyo公司、CD-15AXR)測定腫瘤直徑。腫瘤體積[mm
3]之計算係使用下式。
(腫瘤長軸之長度[mm])×(腫瘤短軸之長度[mm])
2×0.5
以腫瘤體積成為各群均等的方式將小鼠分群(n=8),開始投予被試驗藥劑。將投予初日定義為第0日。以下敘明對進行過試驗之4個群組所投予的被試驗藥劑、投予量、投予排程等之詳情。
(1)群組1:PBS投予群
於第0日與第7日將PBS以10mL/kg進行靜脈內投予。
(2)群組2:抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體投予群
於第0日與第7日將調製為0.1mg/mL之抗TSPAN8 (16B11)-抗CD3雙特異性抗體以1mg/kg進行靜脈內投予。
(3)群組3:抗小鼠PD-1抗體投予群
於第0、3、7及10日將調製為1mg/mL之抗小鼠PD-1抗體(Bio X Cell、BE0146)以10mg/kg進行腹腔內投予。
(4)群組4:抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體及抗小鼠PD-1抗體之併用投予群
於第0日與第7日將調製為0.1mg/mL之抗TSPAN8 (16B11)-抗CD3雙特異性抗體以1mg/kg進行靜脈內投予,於第0、3、7、10日將調製為1mg/mL之抗小鼠PD-1抗體以10mg/kg進行腹腔內投予。
於各群組之第3、6、10、13日評價腫瘤體積(圖7-1)。群組1之第10、13日、群組2及群組3之第13日係以n=7進行解析(因各產生1例死亡例所致)。將群組2及群組3之第13日的腫瘤體積與群組4之第13日的腫瘤體積藉由unpaired Student’s t檢定予以比較(圖7-2)。
如圖7-2所示,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗小鼠PD-1抗體之併用群的腫瘤體積,較抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體單劑群及抗小鼠PD-1抗體單劑群的腫瘤體積具顯著意義地更小。此結果顯示於人類之癌的治療中,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗PD-1抗體之併用,係有較單劑之治療得到更高效果的可能性。
[產業上之利用可能性]
本發明之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑之併用所進行之癌之治療方法,被期待有用於癌之治療。
[序列表非關鍵詞文字]
序列編號2為16B11.1之重鏈之胺基酸序列,序列編號1所示之鹼基序列,為編碼序列編號2所示之16B11.1之重鏈之胺基酸序列的鹼基序列。序列編號4為含有16B11.1之重鏈可變區域的重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的多胜肽之胺基酸序列,序列編號3所示之鹼基序列,為編碼序列編號4所示之含有16B11.1之重鏈可變區域的重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的多胜肽之胺基酸序列的鹼基序列。序列編號6之序列為16B11.1之輕鏈之胺基酸序列,序列編號5表示之鹼基序列,為編碼序列編號6所示之16B11.1之輕鏈胺基酸序列的鹼基序列。序列編號8為抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽之胺基酸序列,序列編號7所示之鹼基序列,為編碼序列編號8所示之抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽之胺基酸序列的鹼基序列。序列編號9~17為發明之詳細說明所記載的各種連接子之胺基酸序列。
[圖1]圖1為以癌細胞增殖抑制來表示於在人類大腸癌細胞株中穩定表現TSPAN8-GFP的RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗人類PD-1抗體之併用效果。圖之縱軸表示被驗抗體、橫軸表示細胞增殖之指標的GFP之螢光強度。各長條表示螢光強度之平均值。誤差槓表示標準誤差。
[圖2]圖2為以癌細胞增殖抑制來表示於在人類大腸癌細胞株中穩定表現TSPAN8-GFP的RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗人類PD-L1抗體之併用效果。圖之縱軸表示被驗抗體、橫軸表示細胞增殖之指標的GFP之螢光強度。各長條表示螢光強度之平均值。誤差槓表示標準誤差。
[圖3-1]圖3-1表示於在人類大腸癌細胞株中穩定表現TSPAN8-GFP的RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗人類PD-1抗體之併用所致之CD4T細胞之活化。圖之縱軸表示被驗抗體、橫軸表示對於CD4T細胞之活化標記的CD25而言,螢光標識抗體之平均螢光強度。各長條表示平均螢光強度之平均值。誤差槓表示標準誤差。
[圖3-2]圖3-2表示於在人類大腸癌細胞株中穩定表現TSPAN8-GFP的RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗人類PD-1抗體之併用所致之CD8T細胞之活化。圖之縱軸表示被驗抗體、橫軸表示對於CD8T細胞之活化標記的CD25而言,螢光標識抗體之平均螢光強度。各長條表示平均螢光強度之平均值。誤差槓表示標準誤差。
[圖4-1]圖4-1表示於在人類大腸癌細胞株中穩定表現TSPAN8-GFP的RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗人類PD-L1抗體之併用所致之CD4T細胞之活化。圖之縱軸表示被驗抗體、橫軸表示對於CD4T細胞之活化標記的CD25而言,螢光標識抗體之平均螢光強度。各長條表示平均螢光強度之平均值。誤差槓表示標準誤差。
[圖4-2]圖4-2表示於在人類大腸癌細胞株中穩定表現TSPAN8-GFP的RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗人類PD-L1抗體之併用所致之CD8T細胞之活化。圖之縱軸表示被驗抗體、橫軸表示對於CD8T細胞之活化標記的CD25而言,螢光標識抗體之平均螢光強度。各長條表示平均螢光強度之平均值。誤差槓表示標準誤差。
[圖5]圖5為以干擾素-γ產生量來表示於在人類大腸癌細胞株中穩定表現TSPAN8-GFP的RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗人類PD-1抗體之併用效果。圖之縱軸表示被驗抗體、橫軸表示干擾素-γ產生量之平均值。誤差槓表示標準誤差。
[圖6]圖6為以干擾素-γ產生量來表示於在人類大腸癌細胞株中穩定表現TSPAN8-GFP的人類RKO_hTSPAN8-GFP細胞與Expanded PanT細胞之共培養系統中,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗人類PD-L1抗體之併用效果。圖之縱軸表示被驗抗體、橫軸表示干擾素-γ產生量之平均值。誤差槓表示標準誤差。
[圖7-1]圖7-1為以於抗體投予開始後之各日數的腫瘤體積之平均值來表示B-hCD3E小鼠模式中,對於人類TSPAN8表現B16-F10細胞之腫瘤增殖而言,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗小鼠PD-1抗體的併用效果。誤差槓表示腫瘤體積之標準誤差。圖之縱軸表示腫瘤體積,橫軸表示被驗抗體投予開始日起的日數。
[圖7-2]圖7-2為以投予開始13日後之各個體的腫瘤體積來表示B-hCD3E小鼠模式中,對於人類TSPAN8表現B16-F10細胞之腫瘤增殖而言,抗TSPAN8(16B11)-抗CD3雙特異性抗體與抗小鼠PD-1抗體之併用效果。誤差槓表示腫瘤體積之標準誤差。圖之縱軸表示腫瘤體積,橫軸表示被驗抗體。橫線表示平均值與標準誤差。顯著性值P值,係藉由unpaired Student’s t檢定,且藉由將併用群之腫瘤體積與抗TSPAN8(16B11)-抗CD3單劑投予群或抗小鼠PD-1單劑投予群之腫瘤體積進行比較而求得。圖中之*與**,分別表示P值小於顯著水準0.05及0.01之群。
TW202404638A_112113569_SEQL.xml
Claims (29)
- 一種醫藥組成物,其係含有抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體的用以治療對象之癌的醫藥組成物, 該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含: (a)由包含抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段及包含抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域的輕鏈所構成的抗TSPAN8抗體之Fab區域、 (b)包含抗CD3抗體之重鏈可變區域及抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域,以及 (c)由連結於(a)之Fab區域之重鏈片段的第一Fc多胜肽及連結於(b)之抗CD3scFv區域的第二Fc多胜肽所構成的Fc區域, 該醫藥組成物係與PD-1訊息抑制劑組合來使用。
- 如請求項1之醫藥組成物,其中抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3;抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3。
- 如請求項1或2之醫藥組成物,其中抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域係由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成,抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域係由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成。
- 如請求項1~3中任一項之醫藥組成物,其中抗TSPAN8抗體之Fab區域,係由:由序列編號4之胺基酸編號1至219之胺基酸序列所構成的重鏈片段及由序列編號6之胺基酸序列所構成的輕鏈所構成。
- 如請求項1~4中任一項之醫藥組成物,其中抗CD3抗體之重鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3;抗CD3抗體之輕鏈可變區域,包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3。
- 如請求項1~5中任一項之醫藥組成物,其中抗CD3抗體之重鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成,抗CD3抗體之輕鏈可變區域係由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成。
- 如請求項1~6中任一項之醫藥組成物,其中抗CD3scFv區域,係由序列編號8之胺基酸編號1至254之胺基酸序列所構成。
- 如請求項1~7中任一項之醫藥組成物,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有包含由序列編號4之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號4之胺基酸編號50至66之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號4之胺基酸編號99至110之胺基酸序列所構成的CDR3的重鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈;含有包含由序列編號6之胺基酸編號24至34之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號6之胺基酸編號50至56之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號6之胺基酸編號89至96之胺基酸序列所構成的CDR3的輕鏈可變區域之抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有包含由序列編號8之胺基酸編號31至35之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號50至68之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號101至114之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之重鏈可變區域,以及包含由序列編號8之胺基酸編號168至181之胺基酸序列所構成的CDR1、由序列編號8之胺基酸編號197至203之胺基酸序列所構成的CDR2,及由序列編號8之胺基酸編號236至244之胺基酸序列所構成的CDR3的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
- 如請求項1~8中任一項之醫藥組成物,其中抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含:含有由序列編號4之胺基酸編號1至121之胺基酸序列所構成的重鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之重鏈片段與第一Fc多胜肽經連結而得的抗TSPAN8抗體之重鏈、含有由序列編號6之胺基酸編號1至107之胺基酸序列所構成的輕鏈可變區域的抗TSPAN8抗體之輕鏈,以及含有由序列編號8之胺基酸編號1至125之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之重鏈可變區域,及由序列編號8之胺基酸編號146至254之胺基酸序列所構成的抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽。
- 如請求項1~9中任一項之醫藥組成物,其包含含有選自由LALA變異(L234A及L235A)、N297G變異,及Knobs into holes(Knobs into holes)變異(此處,前述變異位置為遵照人類Igγ1恆定區域中之EU指標的胺基酸位置)所成之群的1或2種以上之變異的Fc區域。
- 如請求項1~9中任一項之醫藥組成物,其包含含有LALA變異、N297G變異,及Knobs into holes變異的Fc區域。
- 如請求項10或11之醫藥組成物,其中Knobs into holes變異,為形成Fc區域之1個Fc多胜肽中之T366W變異,以及形成Fc區域之另1個Fc多胜肽中之T366S、L368A及Y407V變異(此處,前述變異位置為遵照人類Igγ1恆定區域中之EU指標的胺基酸位置)。
- 一種醫藥組成物,其係含有抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體的用以治療對象之癌的醫藥組成物, 該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,係由:由序列編號4之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之重鏈、由序列編號6之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之輕鏈,及由序列編號8之胺基酸序列所構成的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽所構成, 該醫藥組成物係與PD-1訊息抑制劑組合來使用。
- 如請求項1~13中任一項之醫藥組成物,其含有經轉譯後修飾之抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體作為有效成分。
- 如請求項1~14中任一項之醫藥組成物,其係與PD-1訊息抑制劑同時地、連續地或逐次地投予至對象。
- 如請求項1~14中任一項之醫藥組成物,其係將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑(i)於相同之醫藥組成物中含有,且同時投予至對象,或(ii)於不同的醫藥組成物中含有,且同時地、連續地或逐次地投予至對象。
- 如請求項1~16中任一項之醫藥組成物,其中癌為原發性、轉移性或腹膜散播性之固體癌。
- 如請求項17之醫藥組成物,其中癌為食道癌、大腸癌、胰臟癌、胃癌、胃食道接合部癌、肝癌、膽道癌,或攝護腺癌。
- 如請求項1~18中任一項之醫藥組成物,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體,或抗PD-L2抗體,或此等之抗原結合片段。
- 如請求項19之醫藥組成物,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-1抗體。
- 如請求項20之醫藥組成物,其中抗PD-1抗體為納武利尤單抗(nivolumab)、帕博利珠單抗(pembrolizumab)、匹地利珠單抗(pidilizumab)、斯帕他珠單抗(spartalizumab),或西米普利單抗(cemiplimab)。
- 如請求項19之醫藥組成物,其中PD-1訊息抑制劑為抗PD-L1抗體。
- 如請求項22之醫藥組成物,其中抗PD-L1抗體為阿特珠單抗(atezolizumab)、度伐利尤單抗(durvalumab),或阿維魯單抗(avelumab)。
- 一種雙特異性抗體,其係用以治療對象之癌的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體, 該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含: (a)由包含抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段及包含抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域的輕鏈所構成的抗TSPAN8抗體之Fab區域、 (b)包含抗CD3抗體之重鏈可變區域及抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域,以及 (c)由連結於(a)之Fab區域之重鏈片段的第一Fc多胜肽及連結於(b)之抗CD3scFv區域的第二Fc多胜肽所構成的Fc區域, 該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體係與PD-1訊息抑制劑組合來使用。
- 一種雙特異性抗體,其係用以治療對象之癌的抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體, 該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,係由:由序列編號4之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之重鏈、由序列編號6之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之輕鏈,及由序列編號8之胺基酸序列所構成的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽所構成, 該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體係與PD-1訊息抑制劑組合來使用。
- 一種包含將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑投予至對象的癌之治療方法, 該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含: (a)由包含抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段及包含抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域的輕鏈所構成的抗TSPAN8抗體之Fab區域、 (b)包含抗CD3抗體之重鏈可變區域及抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域,以及 (c)由連結於(a)之Fab區域之重鏈片段的第一Fc多胜肽及連結於(b)之抗CD3scFv區域的第二Fc多胜肽所構成的Fc區域。
- 一種包含將抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體與PD-1訊息抑制劑投予至對象的癌之治療方法, 該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,係由:由序列編號4之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之重鏈、由序列編號6之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之輕鏈,及由序列編號8之胺基酸序列所構成的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽所構成。
- 一種抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之用途,其係用於製造為了治療對象之癌而與PD-1訊息抑制劑組合來使用的醫藥組成物, 該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,包含: (a)由包含抗TSPAN8抗體之重鏈可變區域的重鏈片段及包含抗TSPAN8抗體之輕鏈可變區域的輕鏈所構成的抗TSPAN8抗體之Fab區域、 (b)包含抗CD3抗體之重鏈可變區域及抗CD3抗體之輕鏈可變區域的抗CD3scFv區域,以及 (c)由連結於(a)之Fab區域之重鏈片段的第一Fc多胜肽及連結於(b)之抗CD3scFv區域的第二Fc多胜肽所構成的Fc區域。
- 一種抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體之用途,其係用於製造為了治療對象之癌而與PD-1訊息抑制劑組合來使用的醫藥組成物, 該抗TSPAN8-抗CD3雙特異性抗體,係由:由序列編號4之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之重鏈、由序列編號6之胺基酸序列所構成的抗TSPAN8抗體之輕鏈,及由序列編號8之胺基酸序列所構成的抗CD3scFv區域與第二Fc多胜肽經連結而得的多胜肽所構成。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022066085 | 2022-04-13 | ||
JP2022-066085 | 2022-04-13 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW202404638A true TW202404638A (zh) | 2024-02-01 |
Family
ID=88329842
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW112113569A TW202404638A (zh) | 2022-04-13 | 2023-04-12 | 抗tspan8-抗cd3雙特異性抗體之與pd-1訊息抑制劑之組合在癌治療的用途 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
TW (1) | TW202404638A (zh) |
WO (1) | WO2023199927A1 (zh) |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5490714B2 (ja) * | 2007-11-28 | 2014-05-14 | メディミューン,エルエルシー | タンパク質製剤 |
US9850303B2 (en) * | 2013-03-15 | 2017-12-26 | The Translational Genomics Research Institute | Hybridoma clones and monoclonal antibodies to tetraspanin 8 |
IL292510A (en) * | 2013-11-05 | 2022-06-01 | Cognate Bioservices Inc | Combinations of checkpoint inhibitors and cancer drugs |
EP3305322A4 (en) * | 2015-06-05 | 2018-12-26 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Combined use of immune activators |
US10870701B2 (en) * | 2016-03-15 | 2020-12-22 | Generon (Shanghai) Corporation Ltd. | Multispecific fab fusion proteins and use thereof |
US11952422B2 (en) * | 2017-12-05 | 2024-04-09 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule comprising altered antibody variable region binding CD3 and CD137 |
CN116635071A (zh) * | 2020-11-16 | 2023-08-22 | 安斯泰来制药株式会社 | 抗tspan8-抗cd3双特异性抗体和抗tspan8抗体 |
-
2023
- 2023-04-12 TW TW112113569A patent/TW202404638A/zh unknown
- 2023-04-12 WO PCT/JP2023/014792 patent/WO2023199927A1/ja unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2023199927A1 (ja) | 2023-10-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20220041746A1 (en) | Anti-cd38 antibodies and methods of use | |
CA3069254C (en) | Checkpoint inhibitor bispecific antibodies | |
US11377477B2 (en) | PD-1 targeted IL-15/IL-15RALPHA fc fusion proteins and uses in combination therapies thereof | |
US20230295336A1 (en) | Multispecific polypeptide constructs having constrained cd3 binding and related methods and uses | |
JP5851419B2 (ja) | ヘテロダイマー結合タンパク質およびその使用 | |
JP6702893B2 (ja) | 多重特異的抗原結合タンパク質 | |
JP6822849B2 (ja) | 多重特異的NKp46結合タンパク質 | |
CN115380047A (zh) | Cd28单结构域抗体及其多价和多特异性构建体 | |
JP7353576B2 (ja) | Cd33、nkg2d、及びcd16に結合する多重特異性結合タンパク質、ならびにその使用方法 | |
CA3115082A1 (en) | B7h3 single domain antibodies and therapeutic compositions thereof | |
TW202012441A (zh) | Nk細胞接合抗體融合構築體 | |
US20210340273A1 (en) | 5t4 single domain antibodies and therapeutic compositions thereof | |
CA3115089A1 (en) | Dll3 single domain antibodies and therapeutic compositions thereof | |
JP2022552183A (ja) | 特性が改善されたpd-1標的化il-15/il-15rαfc融合タンパク質 | |
KR20220083770A (ko) | Nkg2d, cd16 및 flt3에 결합하는 단백질 | |
CA3130754A1 (en) | Multifunctional molecules that bind to t cell related cancer cells and uses thereof | |
US20220403037A1 (en) | Anti-ccr8 antibodies and uses thereof | |
WO2022224997A1 (ja) | 抗cldn4-抗cd137二重特異性抗体 | |
US20220089722A1 (en) | Heterodimeric fusion protein | |
US20240010748A1 (en) | Bispecific antibody for claudin 18a2 and cd3 and application of bispecific antibody | |
TW202404638A (zh) | 抗tspan8-抗cd3雙特異性抗體之與pd-1訊息抑制劑之組合在癌治療的用途 | |
WO2024085166A1 (ja) | がん治療におけるpd-1シグナル阻害剤との組み合わせによる抗cldn4-抗cd137二重特異性抗体の使用 | |
TW202426503A (zh) | 癌症治療中與pd-1訊息抑制劑組合之抗cldn4-抗cd137雙特異性抗體的用途 | |
WO2023219121A1 (ja) | 抗taa-抗cd3多重特異性抗体 | |
CA3233075A1 (en) | Interleukin-2 mutant and fusion protein thereof |