TW200918528A - DNA-PK inhibitors - Google Patents

Description

200918528 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於充當DNA-ΡΚ抑制劑之化合物，其用途及合 成。 【先前技術】 DNA依賴性蛋白質激酶（DNA-ΡΚ)為在與DNA結合後活 化之核絲胺酸/蘇胺酸蛋白質激酶。生物化學及遺傳學資料 已揭示，該激酶包含稱為DNA-PKcs之大的催化次單元及稱 為Ku之調節組分。DNA-ΡΚ已展示為DNA雙鏈斷裂（DSB) 修復體系及V(D)J重組機構之關鍵組分。另外，近期研究已 在各種其他過程中涉及到DNA-ΡΚ組分，包括染色質結構之 調節及端粒維持（Smith, G. C. M.及 Jackson, S.P.，Gewe·? Z^v., 13, 916-934 (1999))。 DNA DSB視為細胞可遭遇之最致命病變。為對抗由DNA DSB造成之嚴重威脅，真核細胞已演化出若干機制以介導 其修復。在高級真核生物中，該等機制中之最主要的為DNA 非同源末端聯接（NHEJ)，亦稱為不正常重組。DNA-ΡΚ在該 路徑中起關鍵作用。DNA-ΡΚ活性增加已在活體外及活體内 證明，且與腫瘤細胞對IR及雙官能烷化劑之抗性有關 (Muller C.等人，92, 2213-2219 (1998) ’ Sirzen F·等 人，五wr. «/. Cancer，35, 11 1-116 (1999))。因此，已提出 DNA-ΡΚ活性增加為細胞及腫瘤抗性機制。因此，小分子抑 制劑對DNA-ΡΚ之抑制可在過度表現視為抗性機制之腫瘤 中證明有效性。 132905.doc 200918528 先前亦已發現PI 3-激酶抑制劑LY294002 :

〇 能夠活體外抑制DNA-PK功能（Izzard, R.A.等人，Cimcw 7?以.，59, 25 81-25 86 (1999))。在約 1 μΜ下，LY294002針對 DNA-PK之IC5Q(50%酶活性損失時之濃度）與ΡΙ 3-激酶之彼 IC5〇相同。另外，已展示，LY294002亦能夠使細胞對IR之 效應微弱敏感（Rosenzweig, K.E.等人，C/z>. Cawcer 3, 1 149-1 156 (1999))。 WO 03/024949描述適用作DNA-PK抑制劑之許多種類之 化合物，包括以下通用結構之2-胺基-咣烯-4-酮：

0 NR1R2

為一實例。該化合物顯示10-12 nM之IC5G及1.3之SER(參見 下文之方法）。 WO 2006/032869描述適用作DNA-PK抑制劑之化合物， 132905.doc 200918528

其中： 。Q表不NH-C(==0)·或-〇_，γ為視需要經取代之cN5伸烧基且 X係選自Η或硫醚或胺基。

考慮到DNA-PK參與DNA修復過程，且小分子抑制劑已展 不使培養物中之哺乳動物細胞對放射性及化學敏感，因此 應用特定DNA-PK抑制藥物將充當增強癌症化學療法及放 射性療法之功效之藥劑。亦可證明DNA_pK^p制劑適用於治 療逆轉錄病毒介導之疾病。舉例而言，已證明，DNA_pK 活性之損失嚴重抑制逆轉錄病毒整合之過程（Daniel R等 ί | I* 人 ’ 284, 644-7 (1999))。 本發明者現已發現，顯示類似或改良程度之DNA-PK抑 - 制，同時具有用作活性醫藥劑之其他適用性質，尤其改良 之溶解度及細胞功效之其他化合物。本發明之一些化合物 亦展示在水性介質及磷酸鹽緩衝溶液中之良好溶解度_增 強之溶解度可用於調配用於藉由1¥路線投藥或用於口服調 配物（例如液體及小錠劑形式）以用於兒科用途之化合物。可 增強本發明化合物之經口生物可用性。 132905.doc 200918528 【發明内容】 因此，本發明之第一態樣提供式][化合物：

其中： R1及R2獨立地選自氫、視需要經取代之 、3-2〇雜 ％ 基或C5_2Q芳基，或可連同其所連接之氮原子一起形成具有4 至8個環原子之視需要經取代之雜環； X為CH或N ; η為1或2 ; RC1及RC2獨立地選自曱基； 當X為Ν時’ Rx係選自由η及視需要經取代之Ci 7烷基、 C3_2〇雜％基、Cs.u芳基、醯基、酯、醯胺基及磺醯基組成 之群；且 當X為CH時’ RX係選自由Η及視需要經取代之cl 7烷基、 C3-2〇雜％基、C5,芳基、醯基、酯、醯胺基、磺醯基、胺 基及醚組成之群。 本發明之第二態樣提供包含第一態樣之化合物及醫藥學 上可接受之載劑或稀釋劑之組合物。 132905.doc 200918528 本發明之第三態樣提供適用於治療方法 合物。 弟態樣之化 療^^第四‘態樣提供第—態樣之化合物在製備用於治 療猎由抑制職_PK改善之疾病之藥物中的用途。本發明之 第四態樣亦提供適用於治療藉由抑制dna_pk改 之方法中的第一態樣之化合物。 '、’ 較佳在第四態樣中，與ΡΙ3·激酶及/或atm相比，第一^ 樣之化合物選擇性抑制DNA_PK之活性。選擇性為重要= 題因為對其他PI 3_激酶家族成員之抑制可 之功能損失相關之不當副作用。 彼等轉 詳。之，在本發明之第四態樣中，化合物可： ⑷用作在癌症療法中用作佐劑之藥物或用於製備在癌症 療法甲用作佐劑之藥物或用於加強腫瘤細胞以供用電離轄 射或化學治療劑進行治療；或 田 ⑻用以治療逆轉錄病毒介導之疾病，或用於製備用於治 療逆轉錄病毒介導之疾病之藥物。 本毛明之另-態樣提供如本文中所述適用於治療人類或 動物體之方法中的活性化合物，其較佳呈醫藥組合物形式。 本發明之另一態樣提供活體外或活體内抑制DNA-PK之 方法，其包含使細胞與有效量之如本文中所述之活性化合 物接觸。 定4 C"烷基：如本文中所使用，術語"Ci7烷基”係關於藉由 自具有1至7個碳原子之。丨_7烴化合物移除氫原子而獲得之 132905.doc 200918528 單價部分，其可為脂族或脂環族或其組合，且其可為飽和、 部分不飽和或完全不飽和。 飽和直鏈Cm烧基之實例包括（但*限於）甲基、乙基、正 丙基、正丁基及正戊基（戊基）。 飽和支鏈匕·7烷基之實例包括（但不限於）異丙基、異丁 基、第二丁基、第三丁基及新戊基。 飽和脂壤族C〗·7烷基（亦稱為”C3 7環烷基”）之實例包括（但 不限於）諸如環丙基、環丁基、環戊基及環己基之基團，以 及經取代基團（例如包含該等基團之基團），諸如甲基環兩 基、二曱基環丙基、曱基環丁基、二甲基環丁基、甲基環 戊基、二曱基環戊基、甲基環己基、二甲基環己基、環@ 基曱基及環己基曱基。 具有一或多個碳-碳雙鍵之不飽和Ci_7烷基（亦稱為"c27 烯基”）之實例包括（但不限於）乙烯基（ethenyI)(乙烯基 (vinyl)，-CH=CH2)、2_ 丙烯基（稀丙基，_ch_ch=ch2)、^ 丙烯基（-C(CH3)=CH2)、丁烯基、戊烯基及己烯基。 具有一或多個碳-碳參鍵之不飽和C〗·7烷基（亦稱為"C27 炔基"）之實例包括（但不限於）乙炔基（ethynyl)(乙炔基 (ethinyl))及2-丙炔基（炔丙基）。 具有一或多個碳·碳雙鍵之不飽和脂環族（碳環γη烷基 (亦稱為"CM環烯基”）之實例包括（但不限於）未經取代基 團，諸如環丙烯基、環丁烯基、環戊烯基及環己烯基；以 及經取代基團（例如包含該等基團之基團），諸如環丙烯基甲 基及環己烯基甲基。 132905.doc 12 200918528 於:二：基：如本文中所使用，術語,,C3·2。雜環基”係關 1由自c3.2Q雜環化合物之環原子移除氫原子而獲得 價部分’該化合物具有一個環或兩個或兩個以上環(例如螺 化、稠合環、橋接環），且具有3至2〇個環原子，其中 個原子為環雜原子且其中該或該等環中 環。較佳地，各環且右35 κ 7 環…各^具有3至7個被原子’其中I至4個原子為 二雜原子_。環雜原子較佳可選自由〇、N、Up組成之群。 3-2〇表不環原子，無論為碳原子還是雜原子。 具有個鼠環原子之c32〇雜環基之實例包括 :::自氮丙咬、。丫丁卜-灿…略琳(例如 咯琳、2,5-二氫吼洛）、2Η，π各或3H “比洛（異吼嘻、異 唑)、哌啶、二氫吡啶、四氫吡啶及氮呼之彼等基團。 々/、有/固氧環原子之C3·20雜環基之實例包括（但不限於） 自乳7^ &雜環了炫、氧雜環錢（四氫°夫@)、氧雜環 (二氫°夫喃）、°惡烧（四氫㈣）、二氫娘喃、派喃（C6)及 =乎之彼等基團。經取代C3.2。雜環基之實例包括呈環狀形 1Γ糖:，例如呋喃醣及哌喃醣，其包括(例如)核糖、來蘇糖、 ’唐半乳糖、蔗糖、果糖及***糖。 、具有—個硫環原子之^雜環基之實例包括（但不限於） 何生/硫雜丙環燒、環硫烧、硫雜環戊烧（四氫嗔吩）"塞烷 (四氫噻喃）及硫雜環庚烷之彼等基團。 有ji固氧娘原子之C3 2〇雜環基之實例包括（但不限於）衍 —、裒 —°惡烧及一氧雜環庚烧之彼等基團。 具有2個氮環原子之c3 2〇雜環基之實例包括（但不限於）衍 132905.doc •13· 200918528 生自咪唑啶、吡唑啶（二唑 ， 及0辰嗪之彼等基團。 米坐琳比坐琳（二氫吡唑） 具有一個氮環原子及—個 包括(但不限於)衍生自廣、子之C3-2°雜環基之實例 1… 惡。坐、二氫喔哇、四氫…、 一虱異噁唑、嗎啉、四氫嘎 虱，、似坐 團。 、—氫噁嗪及噁嗪之彼等基 具有一個氧環原子及—個炉 包括（但不限於）衍生=原子之C3·20雜環基之實例 彼等基團。 ％戊烷及噁噻咄（噻噁烷）之 :-個氮環原子及一個硫環原子之 包括（但不限於）衍生自 "π例 團。 啉、噻唑啶及硫嗎啉之彼等基 C3-2〇雜環基之其他實你 s认嫌 ㈣包括⑷不限於）嚼二噪及嗔喧嗪。 另外T有一或多個側夤其卜 虱基（~〇)之雜環基之實例包括（但 不限於）衍生自以下基團之彼等基團： Ο 5雜環族化合物’諸如呋喃酮、吡喃酮、吡咯啶酮、吡唑 綱坐琳_)、咪。坐咬酮、π塞唾酮及異喧㈣； =雜％族化合物’諸如旅咬酮、旅咬二網、派唤綱"辰嗪 "嘍秦酮及嘧。定酮（例如胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶） 及巴比妥酸（barbituric acid); 铜。雜¥族化合物，諸如經十朵、劈呤酮（例如鳥嗓吟）、苯 并心坐琳_、苯并°比喃酮（例如香豆素）； " 晨形式之-C(=0)_0_C(=0)-)，包括（但不限於）順丁 稀二酸軒、了二酸肝及戊二酸酐； 132905.doc • 14- 200918528 環狀碳酸酯（呈環形式之-0-C(=0)-0-)，諸如碳酸乙二顆及 碳酸1，2-丙二酯； 醯亞胺（呈環形式之-C(=0)-NR-C(=0)-)，包括（但不限於）丁 二醯亞胺、順丁烯二醯亞胺、鄰苯二甲醯亞胺及戊二酿亞 胺； 内酯（環狀酯，呈環形式之_〇_C(=〇)_)，包括（但不限於）卜 丙内酯、γ-丁内酯、δ-戊内酯（2-哌啶酮）及ε-己内酯；

内醯胺（環狀醯胺，呈環形式之_NR_c(=〇)_)，包括（但不限 於）β-丙内醯胺、γ_丁内醯胺（2_吡咯啶酮）、δ_戊内醯胺及^ 己内醯胺； 環狀胺基曱酸酯（呈環形式之_〇_c(=〇)_NR_)，諸如2_噁唑啶 酮； 環狀脲（呈環形式之_NR_c(=〇)_NR_)，諸如2_咪唑啶酮及嘧 啶-2,4-二酮（例如胸腺嘧啶、尿嘧啶）。 C^o芳基：如本文中所使用，術語"Cwo芳基”係關於藉 5·2〇芳知化合物之芳族環原子移除氫原子而獲得之單 價部分’該化合物具有一個環或兩個或兩個以上環(例如稠 合幻’ i具有5至20個環原+，且其中該或該等環中之至 少-者為芳族環。較佳地’各環具有5至7個環原子。 如在”碳芳基"中’環原子可全部為碳原子，在該狀況下， 基團可方便地稱為"C5_20碳芳基，，。 小具 有核雜原子之芳基(亦即C5.2。碳芳基)之實例 限於），衍生自苯（料苯基）(C6)、萘A。）、葱（Μ 非（丨4)、並四苯（C丨8)及祐（C丨6)之彼等基團。 132905.doc -15· 200918528 :稠:Γ芳基之實例包括(但不限於)衍生自… 之基團，該等稍合環中之一者不為芳族環。 二：原子可包括一或多個包括(但不限於)氧、氮及 I稱=在"雜芳基’’中。在該狀況下，基團可方便 芳基"，其〜表示環原子， 子還疋雜原子。較佳地，各環具有 至4個原子為環雜原子。 〒于具中0

Cw雜芳基之實例包括（但不限於）衍生 浠)坐，(吩)，⑷、，句，3_二外二= ^雜芳^異㈣、红錢°惡三唾之 ^ / 何生自異0惡嗪、吼口定（口丫嗪）、噠嗓〇，2-二哮）、 口 ，3_一嗓；例如胞喷咬、胸腺哺唆、尿。密咬卜比唪（14 -嗓）、二嗪、四哇及鳴二钟夫咕）之⑽芳基。 ， 包含稠合環之c52〇雜環基（其中—些為C雜芳 C,. 例包括（但不限於），衍生自’ 土 實 里心 “丁生自本并呋喃、異苯并呋喃，、 企木=吟（例如，腺嗓吟、鳥嗓吟）、苯并嘆吩、笨并味 α之C9雜環基’·衍生自啥琳、異㈣、苯并二噪、吼咬并 H㈣琳之CIQ雜環基；衍生自W、二苯㈣吩、二 雜環基；衍生自❹、二笨并娘喃、氧_ 心非秦、啡噁嗪、啡噻嗪之CM雜環基。 一 =.7烷基、C3,雜環基及^。芳基無論單獨還是為另 取代基之部分，本身可視需要經—或多個選自其自身及 下文所列之其他取代基之基團取代。 鹵基：-F、-Cl、-Br及-I。 132905.doc -16 - 200918528 羥基：-OH。 醚：-OR，其中R為醚取代基，例如Ci7烷基（亦稱為Cm 烷氧基’論述於下文）、〇：3心雜環基（亦稱為C3·2。雜環基氧基） 或C5_2〇芳基（亦稱為C5_2〇芳氧基），較佳為Ci 7烷基。

Cw烷氧基：-〇R，其中尺為〇：丨7烷基。c〗·7烷氧基之實例 包括（但不限於），_〇CH3(甲氧基）、_〇CH2CH〆乙氧基）及 -OC(CH3)3(第三 丁氧基）。 侧氧基（酮，-酮）·· =〇。具有作為取代基之側氧基卜〇)之 %狀化合物及/或基團之實例包括（但不限於），碳環化合 物，諸如環戊酮及環己酮；雜環族化合物，諸如吡喃酮、 吡咯啶酮、吡唑酮、吡唑啉酮、哌啶酮、哌啶二鲖、哌嗪 二酮及咪唑啶酮；環狀酐，包括（但不限於）順丁稀二酸酐及 丁二酸酐；環狀碳酸酯，諸如碳酸丙二酯；醯亞胺，包括（但 不限於）丁二醯亞胺及順丁烯二醯亞胺；内酯（環狀酯，呈環 形式之-0-C(=0)-)，包括（但不限於）|3_丙内酯、γ·丁内酯、δ_ 戊内酯及ε-己内酯；及内醯胺（環狀醯胺，呈環形式之 -NH-C(=0)-)，包括（但不限於）β-丙内醯胺、γ_ 丁内醯胺（2_ 11比咯啶酮）、δ-戊内醯胺及ε_己内醯胺。 亞胺基（亞胺）：=NR，其中R為亞胺基取代基，例如氫、 c】·7烷基、（：3-2〇雜環基或C5·^芳基’較佳為氫或Ci 7烷基。 酉曰基之實例包括（但不限於），=NH、=NMe、=NEt及=NPh。 曱醯基（曱醛、羧路）：_C(=0)H。 醯基（酮基）：-c(=〇)r ’其中r為醯基取代基，例如 烷基（亦稱為（：〗·7烷基醯基或Cl_7烷醯基）、^雜環基（亦稱 132905.doc -17· 200918528 為C3_2〇雜環基醯基）或c5_2()芳基（亦稱為c5-2〇芳基醯基），較 佳為Cw烷基。醯基之實例包括（但不限於），_C(=0)CH3(乙醯 基）、-C(=0)CH2CH3(丙醯基）、_c(=0)C(CH3)3( 丁醯基）及 -C(=0)Ph(苯曱醯基，苯酮）。 羧基（羧酸）：-COOH。 酿（羧酸酯、氧基羰基）：_C( = 〇)〇R，其中R為酯取代基， 例如Cw烧基、C3.2〇雜環基或c5_2G芳基，較佳為Cw烷基《酯基 之實例包括（但不限於），-C(=〇)〇CH3、-c(=o)och2ch3、 -C(=0)0C(CH3)3及-C(=0)〇Ph。 醯氧基（反向酯）：-0C(=0)R，其中尺為醯氧基取代基，例 如(^_7烷基、C3_2G雜環基或（：5心芳基，較佳為cl7烷基。醯 氧基之實例包括（但不限於）_〇C(=〇)CH3(乙醯氧基）、 -oc(=o)ch2ch3、_0C(=0)C(CH3)3、·0(：(=0)ρ1ι 及 -0C(=0)CH2Ph 〇 醯胺基（胺甲醯基、胺基羰基、羧醯胺）：_C(=〇)NRlR2，其 〇 中R及r2獨立地為胺基取代基，如對胺基所定義。醯胺基 之實例包括（但不限於），-C(=0)NH2、-C(=0)NHCH3、 -c(=o)n(ch3)2、_c(=0)NHCH2CH3&_c(=〇)N(CH2CH3)2， 以及R1及R2連同其所連接之氮原子形成雜環結構之醯胺 基，如在（例如）N-哌啶基羰基、N_嗎啉基羰基、N_硫嗎啉 基羰基及N-旅嗓基幾基中。 醯基醯胺基（醯基胺基）：_NRlc(=0)R2,其中醯胺取 代基，例如氫、Cl.7烧基、C3.20雜環基或〇㈣芳基，較佳為 氫或Cw烷基，且R2為醯基取代基，例如Cw烷基、c3_2〇雜 132905.doc -18· 200918528 環基或C5.20芳基’較佳為氫或C,_7烷基。醯基醯胺之實例包 括（但不限於），-nhc(=o)ch3、-NHC(=0)CH2CH3 及 -NHC(=0)Ph。R1及R2可一起形成環狀結構，如在（例如）丁 二醯亞胺基、順丁烯二醯亞胺基及鄰苯二醯亞胺基中：

醯基脲基：-NCRbC^CONR^CCC^R3，其中R丨及R2獨立地為 脲基取代基，例如氫、Cw烷基、C3_2()雜環基或C5-2G芳基， 較佳為氫或C〗_7烷基。R3為醯基，其如對醯基所定義。醯基 脲基之實例包括（但不限於），-NHC0NHC(0)H、 -NHCONMeC(0)H、-NHC0NEtC(0)H、-NHCONMeC(0)Me、 -NHCONEtC(0)Et、-NMeCONHC(0)Et、-NMeCONHC(0)Me、 -NMeCONHC(0)Et、-NMeC0NMeC(0)Me、-NMeC0NEtC(0)Et 及-NMeC0NHC(0)Ph。 胺基甲酸酯基：-NR^-C^CO-OR2，其tR1為胺基取代基， 其如對胺基所定義，且R2為醋基，其如對醋基所定義。胺 基甲酸酯基之實例包括（但不限於），-NH-C(0)-0-Me、 -NMe-C(0)-0-Me、-NH-C(0)-〇-Et、-NMe-C(0)-0-第三丁 基及-NH-C(0)-0-Ph。 硫醯胺基（硫胺曱醯基）：-ChSjNI^R2，其中R1及R2獨立 地為胺基取代基，其如對胺基所定義。醯胺基之實例包括 132905.doc -19- 200918528 C(=S)NHCH3、-C(=S)N(CH3)d (但不限於），-C(=s)NH2 -c(=s)nhch2ch3。 四唾基 /、有個鼠原子及一個碳原子之5員芳族環，

胺基：_NRR2,其中Rl及R2獨立地為胺基取代基，例如 广、l、Cl-7烧基（亦稱為Ci-7烧基胺基或二-C,.7院基胺基）、c3-20 G #環基或C5.2°芳基，較佳為.成基，或在，，環狀”胺基 之狀況下’ Rl及R2連同其所連接之氮原子-起形成具有4至 8個環原子之雜環。胺基之實例包括（但不限於），_NH2' -NHCH3、-NHC(CH3)2、·Ν((：Η3)2、-N(CH2CH3)2及 _NHPh。 環狀胺基之實例包括（但不限於）氮丙啶基、吖丁啶基、N_ 吡咯啶基、N-哌啶基、N_哌嗪基、N_嗎啉基及小硫嗎啉基。 亞胺基：=NR’其中R為亞胺基取代基，例如t、c"烧 基、C3_2〇雜環基或C5 ^芳基，較佳為]^或（：^烷基。 脒：-C(=NR)NR2，其中各R為脒取代基，例如氫、ci 7 烷基、Cwo雜環基或C5 2Q芳基，較佳為H*ci 7烷基。脒基 之實例為-C(=NH)NH2。 肼曱醯基（肼基羰基）：-(^(CO-NN-R1，其中Ri為胺基取代 基，其如對胺基所定義。次偶氮基之實例包括（但不限於）， -C(0)-NN-H、-C(0)-NN-Me、-C(〇)-]S[N-Et、-C(0)-NN-Ph 及-C(0)-NN-CH2-Ph。 硝基· _ N 〇 2。 132905.doc -20· 200918528 亞硝基：-NO。 疊氮基：-N3。 氰基（腈，甲腈）：-CN。 異氰基：-NC。 氰氧基：-OCN。 異氰酸酯基：-NCO。 硫氰基（氰硫基）：-SCN。 異硫氰基（異氰硫基）：-NCS。 硫氫基（硫醇、巯基）：-SH。 硫醚（硫化物）：-SR，其中R為硫醚取代基，例如Cl_7烷基 (亦稱gCw烷基硫基^(^心雜環基或C5_2〇芳基，較佳為Ci_7 烧基。c"院基硫基之實例包括（但不限於），-sch3及 -SCH2CH3。 雙硫趟：-SS-R ’其中R為雙硫醚取代基，例如cK7烷基、 C3-2〇雜環基或C5_2〇芳基’較佳為〇丨_7烧基（本文中亦稱為c1：7 烧基雙硫醚）。Cw烷基雙硫醚之實例包括（但不限於）， -SSCH3及-SSCH2CH3。 礙（磺醯基）：-S( = 〇)2R ’其中R為砜取代基，例如Ci 7烧 基、C3-2〇雜環基或C5_2〇芳基，較佳為(：1_7烷基。碾之實例包 括（但不限於），_S(=0)2CH3(甲烷磺醯基、曱磺醯基）、 -S(=0)2CF3(三氟甲磺醯基）、_s(=〇)2Ch2CH3 、 -s(=o)2c4F9(九氟甲磺醯基）、_s(=0)2Ch2CF3(三氟乙磺醯 基）、-S(=0)2Ph(苯基磺醯基）、4-曱基苯基磺醯基（曱苯磺醯 基）、4-溴苯基磺醯基（溴苯磺醯基）及4_硝基苯基（硝基苯磺 132905.doc •21 · 200918528 酿基）。 疏化物（亞確醯基、亞職）：_s(=〇)R，其中R為疏化物取 代基，例如Cl_7炫基、c3.2。雜環基扣心芳基，較佳為 烷基。銃化物之實例包括（但不限於），_s(=〇)cH3及 s(=o)ch2ch3。 項酿基氧基：.㈣从，其中以績醯基氧基取代基， 例如Cl-7烷基、C3-2。雜環基或。52〇芳基，較佳為^烷基。 續酿基氧基之實例包括（但不限於），·0δ(=0)2ϋΗ3及 -〇s(=o)2ch2ch3。 亞％醯基氧基.-OS( = 〇)R，其中R為亞磺醯基氧基取代 基，例如C!·7烷基、C3_2G雜環基或〇52()芳基，較佳為C17烷 基。亞磺醯基氧基之實例包括（但不限於），_08(=0)(:%及 -0S( = 0)CH2CH3。 ， 磧胺基· -NR^SpOhOH，其中Ri為胺基取代基，其如對 胺基所定義。磺胺基之實例包括（但不限於），_nhs(=〇)2〇h 及-n(ch3)s(=o)2oh。 亞石買醯胺基：-NR^SpCOR，其中Ri為胺基取代基，其如 對胺基所定義，且R為亞績醯胺基取代基，例如c Η烷基、 〇3·2〇雜環基或C5.2〇芳基，較佳為Cl_7烷基。亞磺醯胺基之實 例包括（但不限於），-NHS(=0)CH3及-n(ch3)s(=0)c6h5。 胺磺醯基：-spconWr2 ’其中R1及R2獨立地為胺基取代 基’其如對胺基所定義》胺磺醯基之實例包括（但不限於）， -S(=0)NH2 、 -S(=〇)NH(CH3) 、 -s(=o)n(ch3)2 、 -S(=0)NH(CH2CH3)、-S(=0)N(CH2CH3)2及-S(=〇)NHPh。 132905.doc -22- 200918528 項醯胺基：-NRhi^OhR，其中R1為胺基取代基，其如對 胺基所定義，且R為磺醯胺基取代基’例如CN7烷基、C3 % 雜環基或（：1_2〇芳基，較佳為Cw烷基。磺醯胺基之實例包括 (但不限於），-NHS(=0)2CH2及-N(CH2)S(=0)2C3H1。特定種類之 磺酿胺基為衍生自磺内醯胺之彼等基團-在該等基團中，r1 及R中之一者為C1_2〇芳基’較佳為苯基，而R1及R中之另一 者為與C1_2〇芳基連接之雙牙基團，諸如衍生自Cl 7烷基之雙牙 基團。該等基團之實例包括（但不限於）：

2,3-一氫-苯并[d]異噻唑-1,1·二氧化物-2_基1,2-二氫-苯并[C】異噻唑-2,2-二氧化物-1-基

132905.doc -23· 1 -OP(OCH2CH3)-N(i-Pr)2及-〇P(〇CH2CH2CN)-N(i-Pr)2。 2 斗二氫-2Η·苯并间[2,2]噻嗪-1.4-二氧化物·2-基 3 胺基磷酸酯基：-0P(=0)(0R1)_NR22，其中Rl及R2為胺基 磷酸酯取代基’例如-H、（視需要經取代之）Cw烷基、C3-2〇 雜環基或C1_2〇芳基，較佳為_H、Cl_7烷基或c5.2〇芳基。胺基 磷酸酯基之實例包括（但不限於），-〇P(=〇)(〇CH2CH3)_N(CH3)2、 4 亞磷醯胺酸酯基：-〇P(〇Ri)_NR22，其中Rl及R2為亞磷醯胺 酸酯取代基’例如-H、（視需要經取代之）Cw烷基、C3_2Q雜環 基或C^o芳基，較佳為_H、Cl7烷基或C5_2Q芳基。亞磷醯胺 酸酯基之實例包括（但不限於），-〇p(〇CH2CH3)_N(CH3)2、 200918528 -OP(=〇)(〇CH2CH3)-N(i-Pr)A-OP(=0)(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2。 在許多狀況下，取代基自身可經取代。舉例而言，C丨_7 烧氧基可經以下基團取代：例如Cl_7烷基（亦稱為Cl_7烷基 -c"院氧基）’例如環己基甲氧基；C3_2〇雜環基（亦稱為^心 芳基-c】-7烷氧基），例如鄰苯二甲醯亞胺基乙氧基；或C5 2〇 芳基（亦稱為C5_2〇芳基-C"烷氧基），例如苄氧基。 包括其他形式

Ο 上文亦包括該等取代基之熟知離子形式、鹽形式、溶劑 合物形式及受保護形式。舉例而言，提及羧酸卜C00H)時 亦包括其陰離子（緩酸根）形式（_coo.)、鹽或溶劑合物以及 S去之又保護形式。類似地，提及胺基時包括胺基之質子 形气（N HR R )、鹽或溶劑合物（例如鹽酸鹽）以及胺基之 習知受保護形式。類似地，提及經基時亦包括其陰離子形 式（-〇.)、鹽或溶劑合物以及經基之習知受保護形式。 異構趙、鹽、溶劑合物、受保護形式及前藥 某些化合物可以-或多種特线何異構、光學異構、對 =槿！對映異構、差向異構、立體異構、互變異構、 =異構或變旋異構形式存在，包括(位不限於)順式-及反 式-形式；E-及« 乂工’ C_、t_及卜形式；内-及外-形式；R-、 S-及内消旋-形式；D_ , 及&式，d_及丨-形式；（+)及（-)形式； 酮·、烯醇-及烯醇化物_形式； 形式;叫形式;直立及平伏形:·：式’順錯·及反錯_ 型_、俨封刑千伏形式，舟型-、椅型-、扭曲 β -及半椅型-形式；及其組合 ，，異構體"("異構形式，，)。 下文中、稱為 132905.doc -24. 200918528 應注意’除如下文對互變異構形式所論述以外，自如本 =所用之術語”異構體"明確排除結構（或構造）異構體（亦即 '、子之間的連接不同而非僅原子空間位置不同的 2舉例而言’提及甲氧基（_〇CH3)時不應視為提及纽 經基甲基（卿H)。類似地，提及鄰氯笨基時不° 見為提及其結構異構體間氯苯基。然而，提及_ = ί括屬於彼種類之結構異構形式(例如，c-院基 土及異丙基；丁基包括正丁基、異丁基、第二丁 =第三丁基，·甲氧基苯基包括鄰甲氧基苯基 本基及對甲氧基苯基）。 氧土 上述排除不適於互轡显椹取1 化物幵 Η η 式，例如，酮、稀醇及稀醇 形式，如（例如）以下互變異構對中之互 _/烯醇（說明於下文）、亞胺/烯脸m a 、構形式. 烯^、醯胺/亞胺基醇、脒/脒、 为基/肟、硫酮/烯硫醇、N_ 式硝基“）。 亞为基"工基偶亂基及確基/酸 V ,〇 rcx 酮 >=C'0H i \〆 / \ 7F /c=c\ _ 鱗化物 應注意’術語"異構體"尤其包括具有一或多個同位素取 之化合物。舉例而言，Η可為包括lH、2h⑼及 何同位素形式’· C可為包括％、13 )任 式-可為包〜。之任何同位素形==位素形 構二M:說明’否則提及特定化合物時包括所有該等異 。括其（完全或部分）外消旋混合物及其他混合物。 132905.doc •25- 200918528 該等異構形式之製備方法（例如不對稱合成）及分離方法（例 如分步結晶及層析方法）在此項技術中已知或易藉由以已 知方式改適本文中所教示之方法或已知方法而獲得。 除非另作說明’否則如下文所論述，提及特定化合物時 亦包括（例如）其離子、鹽、溶劑合物及受保護形式。

可便利或合意地製備、純化及/或處理活性化合物之相應 鹽，例如醫藥學上可接受之鹽。醫藥學上可接受之鹽之實 例論述於Berge等人，《/.户/^rm. 5W.，66, 1-19 (1977)中。 舉例而言，若化合物為陰離子性或具有可為陰離子性之 官能基（例如-COOH可為-C00·)，則其可與合適陽離子形成 鹽。合適之無機陽離子之實例包括（但不限於）鹼金屬離子 (諸如Na+及K+)、鹼土金屬陽離子（諸如c^+及 Mg2+)及其他 陽離子（諸如Al3+)。合適之有機陽離子之實例包括（但不限 於）銨離子（亦即NH/)及經取代之銨離子（例如nh3r+、 nh2r2+、NHR/、NR4+)。—些合適之經 μ _ _ 為衍生自以下各物之彼等銨離子：乙胺、二 ;、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、二己 卞基胺、本基f基胺、膽驗、甲基葡胺及三甲醇胺基甲烧， 以及諸如離胺酸及精胺酸之胺基酸。㈣四級㈣子之一 實例為n(ch3)4+。 若化合物為陽離子性或具有 、男J苟險離子性之官能基（例 -NH2可為-NH3+)，則可盘入.gj A她7 ^ ;幻了與合適陰離子形成鹽。合適之無 機陰離子之實例包括（作 ’’’、 1不限於)何生自以下無機酸之彼等 陰離子：鹽酸、氫溴酸 '氫 轧硬馱、硫酸、亞硫酸、硝酸、 132905.doc -26 - 200918528 亞硝酸、磷酸及亞磷酸。合適之有機陰離子之實例包括（但 不限於）衍生自以下有機酸之彼等陰離子：乙酸、丙酸、丁 二酸、乙醇酸、硬脂酸、棕櫊酸、乳酸、蘋果酸、雙羥萘 酸、酒石酸、檸檬酸、葡萄糖酸、抗壞血酸、順丁烯二酸、 羥基順丁烯二酸、苯基乙酸、麩胺酸、天冬胺酸、苯甲酸、 肉桂酸、丙酮酸、水楊酸、對胺基苯磺酸、2_乙醯基氧基 笨甲酸、反丁烯一酸、苯基磺酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸、 乙烷磺酸、乙烷二磺酸、草酸、泛酸、羥乙基磺酸、戊酸、 乳糖酸及葡萄糖酸。合適之聚合物陰離子之實例包括（但不 限於）衍生自以下聚合物酸之彼等陰離子：丹寧酸、羧甲基 纖維素。 可便利或合意地製備、純化及/或處理活性化合物之相應 /谷劑合物。本文以習知意義使用之術語”溶劑合物"係指溶 質（例如活性化合物、活性化合物之鹽）及溶劑之錯合物。若 /谷劑為水’則溶劑合物宜稱為水合物，例如單水合物、二 水合物、三水合物等。 可便利或合意地製備、純化及/或處理呈化學保護形式之 活性化合物。如本文所使用之術語”化學保護形式"係關於 或夕個反應性g此基焚保S蔓以免發生不期望之化學反 應，亦即呈受保護基團或保護基（亦稱為經遮蔽基團或遮蔽 基或經封端基團或封端基）的化合物。藉由保護反應性官能 基’可進行涉及其他未受保護之反應性官能基之反應而不

影響受保護基團；一般可在後續步驟中移除保護基而實質 上不影響分子之其餘部分。參見（例如），prQteetive G1>QUPS 132905.doc •27- 200918528 in Organic Synthesis (T. Green及 P. Wuts，Wiley, 1999)。 舉例而言’羥基可經保護為醚（-OR)或酯（-〇C(=0)R)，例 如保護為：第三丁基醚；苄基、二苯甲基（二苯基甲基）或三 苯曱基（三苯基甲基）醚；三甲基矽烷基或第三丁基二甲基矽 烷基醚；或乙醯酯（-〇C(=〇)CH3，-OAc)。 舉例而言，可分別將醛基或酮基保護為縮醛或縮酮，其 中羰基（>c=o)藉由與（例如）一級醇反應轉化為二醚 ...... (>C(〇R)2)。醛基或酮基易藉由在酸存在下使用大量過量之 水水解來再生。 舉例而言，胺基可經保護為（例如）醯胺或胺基甲酸酯， 例如保護為：曱基醯胺（-NHCO-CH3);苄氧基醯胺 (-NHCO-〇CH2C6H5 ’ -NH-Cbz);第三丁氧基醯胺 (-NHC0-0C(CH3)3 ’ -ΝΗ-Boc) ; 2-聯苯-2-丙氧基醯胺 (-NHCO-〇C(CH3)2C6H4C6H5 ’ -NH-Bpoc)、9-第基甲氧基醢 胺（-NH-Fm〇c)、6-硝基藜蘆基氧基醯胺（_nH-Nv〇c)、2-三甲 〇 基矽烷基乙氧基醯胺（-NH-Teoc)、2,2,2-三氣乙氧基醯胺 (-NH-Troc)、烯丙氧基醯胺（_NH_AU〇c)、2(_苯基磺醯基）乙 氧基醯胺（-ΝΗ-Psec);或在適合狀況下，保護為沁氧化物 (>NO$)。 . 舉例而言，羧酸基團可經保護為酯，例如保護為：Ci 7 烷酯（例如甲酯；第三丁酯）；Cl·7鹵烷基酯（例如三齒烷 基酯）；三Cm烷基矽烷基_Cl_7烷基酯；或烷基_CM烷 基酯（例如苄酯；硝基苄酯）；或保護為醯胺，例如甲基醯胺。 舉例而言，硫醇基可經保護為硫醚（_SR)，例如保蠖為. 132905.doc -28- 200918528 苄硫謎；乙醯胺基曱基醚（_8-(：Η2ΝΗ(：(=〇；)(：ίί3；)。 可便利或合意地製備、純化及/或處理呈前藥形式之活性 化合物。如本文中所使用之術語"前藥”係關於代謝（例如活 體内）時產生所要活性化合物之化合物。通常，前藥無活性 或活性比活性化合物弱，但可提供有利之處理、投藥或代 謝性質。 舉例而言，一些前藥為活性化合物之酯（例如生理學上可 接受之代謝不穩定酯）。在代謝期間，酯基（_c(=〇)〇R)裂解 以產生活性藥物。可藉由使（例如）母化合物中之任何羧酸基 (-C(=0)0H)酯化來形成該等酯，其中適當時，先對母化合 物中存在之任何其他反應性基團進行保護，接著需要時去 保濩。该等代謝不穩定酯之實例包括以下彼等酯：其中r 為c,_7烷基（例如，_Me、_Et); Ci_7胺基烷基（例如胺基乙基； 2-(N’N-二乙基胺基）乙基；2_(4_N_嗎啉基）乙基）；及醯氧基 -C,.7烷基（例如醯氧基甲基；醯氧基乙基；例如特戊醯氧基 甲基，乙醯氧基甲基；卜乙醯氧基乙基；丨气卜甲氧基-i—曱 基）乙基-羰氧基乙基；1_(苯甲醯氧基）乙基；異丙氧基-羰氧 基曱基；1-異丙氧基-幾氧基乙基；環己基__炭氧基曱基；卜 %己基-羰氧基乙基；環己基氧基_羰氧基甲基；丨_環己基氧 基-叛氧基乙基；（4-四氫哌喃基氧基）羰氧基甲基；1_(4_四 氮派喃基氧基）截氧基乙基；（4_四氫哌喃基）羰氧基甲基； 及1-(4四氫哌喃基）羰氧基乙基）。 同樣’ 一些前藥經酶促活化以產生活性化合物，或在進 一步化學反應後產生活性化合物之化合物。舉例而言，前 132905.doc -29· 200918528 或可為胺基酸酯衍生 藥可為糖衍生物或其他糖芽接合物， 物0 選擇性抑制 '選擇性抑制，意謂抑制—種酶達 酶更大之程度。該選擇性可藉由將抑制1酶=: 所需的化合物漠摩5。)與抑制另一種酶活性== 同-化合物之濃度叫。)比較來量測 。斤：的 革大於卜則所測試化合物在其抑制作用方面 顯示一些選擇性。 方面 本發明之化合物較佳顯示對DNA_pK超過Η 3_激酶之大 於3、10、20或50之選擇性。 本發明之化合物較佳顧+料ηχτ Α ^ 杈住顯不對DNA-PK超過ΑΤΜ之大於5、 10、50或100之選擇性。 用以#估選擇性之IC50值較佳使用w〇 〇3/〇2例9甲所述 之方法來測定，該專利以引用之方式併入本文中。 其他實施例 在一些實施例中，4 1。在其他實施例中，η為2。

X 在一些實施例中，父為Ν。在其他實施例中，乂為CH。 RC1 及 RC2 若RC1及RC2均為曱基，則rx可選自Ci4烷基及η。在一些 該等實施例中’ Rx可為Η。 在一些實施例中，RC1及rC2均為η。 132905.doc •30- 200918528

Rx 在一些實施例中，當乂為!^時，0係選自由H及視需要經 取代之C】·7烷基、C5_2〇芳基、醯基、酯、醯胺基及磺醯基組 成之群。在一些該等實施例中，RX係選自由H及視需要經 取代之Cl·7烧基及續醯基組成之群。 在一些實施例中，C!-7烷基可為Cm烷基且可（例如）選自 • 甲基、乙基及丙基。C】-7烷基之可選取代基可包括（但不限 於）C5-2()芳基（例如苯基）、C3-2〇雜環基（例如N-嗎啉基、四氫 呋喃基）、鹵基（例如氟、氣）、羥基、醚（例如Ci 7烷氧基）、 醯基（例如Cw烷基羰基）、羧基、酿（例如Ci_7烷基酯）、醯氧 基、醯胺基、醯基醯胺基、胺基、氰基及c37環烷基（例如 環丙基）。在一些該等實施例中，CM烷基上之可選取代基 可選自醚（例如C!·7烷氧基）、醯基（例如Cl_7烷基羰基）、氰基 及C3_7環烷基（例如環丙基）。 在一些實施例中，C5_2〇芳基可為Cs_7芳基，且可（例如）選 Q 自苯基及°比啶基。C5_2〇芳基之可選取代基可包括（但不限 於）C〗.7烧基（例如曱基、乙基）、C3_2〇雜環基（例如N_嗎啉 基）、鹵基（例如氟、氯）、羥基、醚（例如C"烷氧基）、醯基 (例如C〗_7烷基羰基）' 羧基、酯（例如Cw烷基酯）、醯氧基、 * 醯胺基、醯基醯胺基、胺基、氰基及Cw環烷基（例如環丙 基）。 在一些實施例中，醯基可具有作為醯基取代基之C17烷基 (例如甲基）或c3_2G雜環基（例如四氫呋喃基）。 在一些實施例中，酯基可具有作為酯取代基之c!.7烷基或 132905.dc •31 · 200918528 C!_4烧基（例如第三丁基）。 在一些實施例中，㈣基基團可具有作為縣代基之Cl.7 烧基或Cl-4烧基（例如曱基、乙基）。 在一些實施例中，當時，RX為^雜環基。❿ 可為醯基、醚或胺基。 • 在―些該等實施例中，心。雜環基為c5.7雜環基（例如N_ 嗎啉基）。 〇 、在一些該等實施例中，醯基可具有作為酿基取代基之Cl.7 烧基或C 1 _4院基（例如曱基、乙臭）。 在-些該等實施例中，基可為CN4炫基氧基(例如乙氧 基、甲氧基）。 在一些該專實施例中，胺其P 甲基胺基卜 職基胺基（例如二 取代基自身可如上所述經取代。舉例M，若所述基團 中之一者經趟基（例如Γ ^ , , I-7烷氧基）取代，則彼基團自身可經 D 絲、Cl-7烧基或醚基（例如Cl.7燒氧基）取代。 、” R1 及 R2 在式1化合物中，當R1及R2連同其所連接之氮原子—起形 成具有4至8個原子之雜環時，其可形成上文定義⑷ 最少4個環原子)之c-雜環基之部分，該雜環基必須含有 至少一個氮環原子。Rl及R2較佳連同其所連接之氮原子一 起形成具有5、6或7個原子，更佳6個環原子之雜環。、 〜具有一個氮原子之單環包括。丫丁。定、。丫丁咬、…(四 虱比嘻）、t各琳（例如3_。比p各琳、以·二氫〇比嘻卜“比略 132905.doc •32- 200918528 或3Η-η比洛（異。比哈、異嗤）、哌啶、二氫吡啶、四氫吡啶及 氮呼；具有2個氮原子之單環包括咪唑啶、吡唑啶（二唑啶）、 咪唑啉、吡唑啉（二氫吡唑）及哌嗪；具有一個氮及一個氧之 單環包括四氫噁唑、二氫噁唑、四氫異噁唑、二氫異噁唑、 嗎：、四氫嗯嗓、二氫嗯嘻及嗯嗪；具有一個氮及一個硫 之單環包括噻唑啉、噻唑啶及硫嗎琳。 較佳環為除氮外亦含有一個雜原子之彼等環，且詳言

之，較佳雜原子為氧及硫。因此，較佳基團包括氺嗎啉基°、 Ν-硫嗎啉基、噻唑啉基。無另一雜原子之較佳基團包括 吡咯啶基。 最佳基團為Ν-嗎琳基及Ν-硫嗎琳基。 如上所述，該等雜環基自身可經取代；較佳種類之取代 基為G.戍基。當雜環基為Ν·㈣基時，取代基較佳為甲基 或乙基，且更佳為曱基。唯一甲基取代基最佳在2位。 抑除上文所狀單環基團外，亦設想具有m又鍵聯之 %。基團含有氮及氧原子之該等類型之環的實例為：

u等衣刀別稱為8_氧雜_3_氮雜-雙環[3 2.1]辛-3-基、&氧 雜-3-氮雜·雙環[3 1〇]己冬基、2_氧雜_5_氮雜 庚-5-基及7-氧雜^ Α ] 乳雜~3·氮雜-雙環[4.1.0]庚-3-基。 一般合成方法 式I化合物： 132905.doc -33· 200918528

可藉由使用Buchwald反應使式1及式2之化合物偶合來合 成： Ο

CI

R1 式1 式2 Ο 該Buchwald反應需要（例如）第三丁氧化鈉之鹼及活性催价 劑之存在，該催化劑（例如）藉由-雙（二苯膦基）二茂錯 及參（二亞苄基丙酮）二鈀）之反應原位形成。 或者，X為N之式I化合物可自式3化合物：

R1 I N、 R2 式3 132905.doc •34- 200918528 藉由使其與Hal-RX偶合來獲得，其中㈣表示幽素，例如 演，且Rx為視需要經取代之Cm炫基。此可在諸如N，N,·二 異丙基乙胺之驗存在下進行。 X為N且R為〜醯基之式！化合物可藉由使式3化合物與 適當續醯基氯在驗（例如跡：異丙基乙胺）存在下反應來 獲得。 式3化合物可藉由將式4化合物去保護來獲得：

本發明之化合物之用途 本發明提供活性化合物，特定 〜σ <馬活性經取 噻吩基胺基-吭烯-4-酮》 %代一本井 如本文中所使用之術語”活性"係關於 活性之化合物，且料言之包括具有固有料卩制職-ΡΚ 物)以及該等化合物之前藥，該等前 之化合物(藥 活性或無固有活性。 河·^具不極低固有 下文實例中描述一種可用以評估 田特又化合物所提供 132905.doc •35· 200918528 之DNA-ΡΚ抑制的檢定。 本發明進一步提供一種抑制細胞内DNA-PK抑制之方 法’其包含使該細胞與有效量之活性化合物，較佳呈醫藥 學上可接受之組合物形式的活性化合物接觸。可在活體外 或活體内實施該方法。 Ο

舉例而言，可使細胞之樣本（例如來自腫瘤）在活體外生 長且使活性化合物連同具有已知療效之藥劑與該細胞接 觸，且觀察到該化合物對彼等細胞之療效之增強。 本發明進一步提供抑制DNA_PK活性之活性化合物以及 抑制DNA-PK活性之方法，其包含無論在活體外還是在活體 内’使細胞與有效量之活性化合物接觸。 亦可將活性化合物用作抑制DNA_PK之細胞培養添加 劑’(例如)以使細胞對已知活體外化學治療劑或電離賴射治 療敏感。 亦可將活性化合物用作活體外檢定之部分，（例如）以確 定候選宿主是否可能受益於使用所論述化合物之治療。 本發明進-步提供用於人類或動物體之治療方法中之活 性化合物。該方法可包含向該受檢者投與治療有效量之較 佳呈醫藥組合物形式之活性化合物。 如本文中在治療病狀之情況下所使用之術語”治療”一般 而言係關於無論人類還是動物（例如，在獸醫應用中）之 及療法，其中達成-些所要治療效 。、 展，且包括降低進展速率、中斷進展速抑制病狀進 癒病狀。亦包括作為預防措施之 改善病狀及治 ’、（亦即預防性治療）。 132905.doc -36 - 200918528 如本文中所使用之術語"治療有效量"係關於活性化合物 或包含活性化合物之物質、組合物或劑量的彼量，該量與 合理利盈/風險比相稱’有效地產生一些所要治療效應。 如本文中所使用之術語"佐劑”係關於結合已知治療方式 使用活性化合物。該等方式包括治療不同癌症類型所用之 藥物及/或電離輻射之細胞毒性方案。可與來自本發明之化 合物組合之佐劑抗癌劑的實例包括（但不限於）以下物質：烷 化劑.氮务’二氣甲基二乙胺（mechl〇rethamine)、環鱗醯 胺（cyclophosphamide)、異環磷醯胺（if0Sfamide)、美法侖 (melphalan)、苯丁酸氮芥（chlorambucil);亞硝基脲：卡莫 斯丁（carmustine)(BCNU)、洛莫司汀（l〇mustine)(CCNU)、司 莫司汀（semustine)(甲基-CCNU)、伸乙亞胺/甲基三聚氰 胺、三伸乙三聚氰胺（TEM)、三伸乙硫磷醯胺（硫替派 (thiotepa))、六曱三聚氰胺（HMM，六曱蜜胺（altretamine)); 烷基硫酸酯；白消安（busulfan);三嗪，達卡巴嗪 (dacarbazine)(DTIC);抗代謝物；葉酸類似物，甲胺喋呤 (methotrexate)、三曱曲沙（trimetrexate) ; 〇密0定類似物，5-氟尿11密咬、氟脫氧尿苷、吉西他濱（gemcitabine)、胞0密。定阿 拉伯糖苷（AraC，阿糖胞苷（cytarabine))、5-氮雜胞苷 (5-azacytidine)、2,2'-二氟脫氧胞σ密咬核苦；°票呤類似物： 6-疏基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、硫峻嘌呤（azathioprine)、2'-脫氧助間型黴素（2'-deoxycoformycin)(噴妥司汀（pentostatin))、 赤經基壬基腺 °票吟（erythrohydroxynonyladenine)(EHNA)、磷酸氟 達拉濱（fludarabine phosphate)、2-氣脫氧腺皆（克拉屈濱 132905.doc -37- 200918528 (cladribine) ’ 2-CdA);拓撲異構酶I抑制劑：喜樹驗 (camptothecin)、拓朴替康（topotecan)、伊立替康 (irinotecan)、魯比替康（rubitecan);天然產物：抗有絲*** 藥物，太平洋紫杉醇（paclitaxel)、長春花生物鹼（Vinea alkaloid)、長春花驗（vinblastine)(VLB)、長春新驗 (vincristine)、長春瑞濱（vinorelbine)、TaxotereTM(多稀紫杉 醇（docetaxel))、雌莫司汀（estramustine)、磷酸雌莫司江； 差向鬼臼毒素（epipodophylotoxin)、依託泊苷（etoposide)、 替尼泊戒（teniposide);抗生素：阿替黴素D(actimomycin D)、道諾黴素（daunomycin)(紅比黴素（rubidomycin))、阿黴 素（doxorubicin)(阿德力黴素（adriamycin))、米托蒽酿 (mitoxantrone)、伊達比星（idarubicin)、博萊黴素（bleomycins)、 普卡黴素（plicamycin)(光輝徽素（mithramycin))、絲裂黴素 C(mitomycin C)、放線菌素（dactinomycin);酶：L-天冬醯 胺酶、RNAse A ;生物反應調節劑：干擾素-a、IL-2、G-CSF、 GM-CSF ;分化劑：視黃酸衍生物；放射致敏劑：曱硝噠唑 (metronidazole)、迷索硝0坐（misonidazole)、消曱基迷索硝0坐 (desmethylmisonidazole)、D辰莫頌 α坐（pimonidazole)、依他硝吐 (etanidazole)、硝嗎乙。坐（nimorazole)、RSU 1069、E09、 RB 6145、SR4233、菸鹼醯胺、5-溴脫氡尿苷、5-碘脫氧尿 苷、溴脫氧胞嘧啶核苷；鉑配位錯合物：順鉑、卡鉑；蒽 二酮：米托蒽酿（mitoxantrone)、AQ4N取代腺、經基膝；曱 肼衍生物，N-曱肼（MIH)、丙卡巴肼（procarbazine);腎上腺 皮質抑制劑，米托坦（mitotane)(o.p'-DDD)、胺基格魯米特 132905.doc -38- 200918528 (aminoglutethimide);細胞激素：干擾素（α、β、γ)、介白素； 激素及拮抗劑：腎上腺皮質類固醇/拮抗劑，強的松 (prednisone)及等效物、***（dexamethas〇ne)、胺基格 f

魯米特；助孕素，己酸羥助孕酮、乙酸甲羥助孕酮、乙酸 曱地孕酮，***，一乙基二苯乙稀雌盼、乙快基***/ 等效物；抗***，他莫西芬（tam〇xifen);雄性激素，丙 酸睾固酮、氟羥甲睾綱/等效物；抗雄激I’氟他胺 (flutamide)、***釋放激素類似物、柳培林 (leuprohde)，非類固醇抗雄激素，氟他胺；抑制劑、 VEGF抑制劑；蛋白酶體抑制劑。 癌症 本發明提供作為治療癌症之抗癌劑或佐劑之活性化合 物。一般技術者能夠容易心單獨或組合之候選化合物能 否治療任何特定細胞類型之癌症病狀。 癌症之實例包括（但不限於） p 於）肺癌、小細胞肺癌、胃腸癌、 腸癌、結腸癌、乳癌瘤、細留 孔_卵巢癌瘤、***癌、華丸癌、 肝癌、腎癌、膀胱癌、胰腺癌、腦癌、肉瘤、骨肉瘤、卡 堡氏肉瘤（KaP。心sa_a)、黑素瘤及白血病。 可治療任何類型之細胞，句 ^ ^ (仁不限於）肺、胃腸（包括 ^ 腸、，、、σ腸）、***（乳腺）、印巢、义π # 腎ί瞥瞄、, Ρ巢刖列腺、肝（肝臟）、 腎U臟）' 膀胱、胰腺、腦及皮膚。 上文定義之抗癌治療可用作單 合物外亦勺杠羽+ . 療法或可除本發明之化 “勿外亦包括習知外科手術或放射、 學療法可白杯ΤΓ > 4 4匕學療法0該化 子縻法Τ包括以下抗腫瘤劑類別中之—或多者. 132905.doc -39- 200918528 (i) 腫瘤醫學中所用之其他抗增生性藥物/抗贅生性藥物 及其組合，諸如烷化劑（例如順鉑、奥賽力鉑（〇Xaliplatin)、 卡鉑、環磷醯胺、氮芥、美法侖、苯丁酸氮芥、白消安、 替莫唑胺（temozolamide)及亞硝基脲）；抗代謝物（例如吉西 他濱及抗葉酸製劑，諸如氟喷咬，如5 _氟尿喷σ定及喊i。定 (tegafur)、拉替曲澤（raltitrexed)、甲胺喋呤、胞嘧咬阿拉 伯糖苷及羥基脲）；抗腫瘤抗生素（例如蒽環黴素 (anthracycline)，如阿德力黴素、博萊黴素、阿黴素、道諾 黴素、表柔比星（epirubicin)、伊達比星、絲裂黴素c、放線 菌素及光輝黴素）；抗有絲***劑（例如長春花生物鹼，如長 春新驗、長春花驗、長春地辛（vin(jesine)及長春瑞賓，及紫 杉類（taxoid)，如紫杉醇（taxol)及多烯紫杉醇（tax〇tere)，及 Polo激酶抑制劑）；及拓撲異構酶抑制劑（例如表鬼臼毒素， 如依託冶芽及替尼泊武，安π丫咬（amsacrine)、拓朴替康及 喜樹鹼）； (ii) 細胞生長抑制劑，諸如抗***（例如他莫西芬、氟 維司群（fulvestrant)、托瑞米芬（t〇remifene)、雷諾昔芬 (raloxifene)、屈洛昔芬（droloxifene)及艾多昔芬（i〇d〇xyfene))、 抗雄激素（例如比卡魯胺（bicalutamide)、氣他胺、尼魯米特 (nilutamide)及乙酸環丙氯地孕酮（cypr〇ter〇ne acetate))、 LHRH拮抗劑或LHRH促效劑（例如戈舍瑞林（g〇sereiin)、亮 丙瑞林（leuprorelin)及布舍瑞林（buserelin))、孕激素（例如乙 酸曱地孕酮）、芳香酶抑制劑（例如安美達錠（anastr〇z〇le)、 來曲嗤（letrozole)、維拉吐（voraz〇ie)及依西美坦 132905.doc -40- 200918528 (exemestane))及5*還原酶抑制劑（諸如非那雄安 (finasteride))； (111)抗杈襲劑（例如c_Src激酶家族抑制劑，如‘(6氣 -2,3-亞曱基二氧基笨胺基）_7_[2_(4_甲基哌嗪_丨_基）乙氧 基]-5-四氫哌喃-4·基氧基喹唑啉（AZD〇53〇 ;國際專利申靖 案W〇 〇1/94341)及叫2-氯冬甲基苯基）-2-{6-[4-(2_經基二 - 基）哌嗪-1-基]_2-甲基嘧啶-4-基胺基}噻唑-5-曱醯胺（達沙 p 替尼（dasatinib)，BMS-354825 ; J. Med. Chem.，2004, 47 6658-6661)，及金屬蛋白酶抑制劑，如馬立馬司他 (manmastat)，尿激酶纖溶酶原活化劑受體功能抑 對肝素酶之抗體）； ^ (iv)生長因子功能之抑制劑：（例如）該等抑制劑包括生 長因子抗體及生長因子受體抗體（例如抗erbB2抗體曲妥珠 單抗（trastuzumab)[HerceptinT]、抗 EGFR 抗體帕尼單抗 (panitumumab)、抗 erbB 1 抗體西妥昔單抗（cetuximab)[Erbitux， Q C225]及 Stern 等人於 Critical reviews in oncol〇gy/haemat〇i〇gy， 2005，第54卷，第11 _29頁中所揭示之任何生長因子或生長 因子受體抗體；該等抑制劑亦包括酿胺酸激酶抑制劑，例 如表皮生長因子家族抑制劑（例如，EGFR家族酪胺酸激酶 * 抑制劑，諸如N-(3-氯-4-氟苯基）-7-f氧基-6-(3-N-嗎啉基丙 氧基）喹唑啉-4-胺（吉非替尼（gefitinib)，ZD1839)、N-(3-乙 块基本基）-6,7 -雙（2-曱氧基乙氧基）噇·ιι坐琳_4_胺（埃羅替尼 (erlotinib)，OSI 774)及 6_ 丙烯醯胺基·Ν_(3_ 氣·4_ 氟苯 基）-7-(3-Ν-嗎淋基丙氧基）-啥唆琳-4-胺（Cl 1 033)，erbB2酷 132905.doc -41 - 200918528 胺酸激酶抑制劑（諸如拉帕替尼（lapatinib))，肝細胞生長因 子家族抑制劑，血小板衍生生長因子家族抑制劑（諸如伊馬 替尼（imatinib))，絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制劑（例如Ras/Raf 信號轉導抑制劑，諸如法呢基轉移酶抑制劑，例如索拉非 尼（sorafenib)(BAY 43-9006))，經由 MEK及 /或 AKT激酶傳輸 細胞信號之抑制劑，肝細胞生長因子家族抑制劑，c-kit抑 制劑，abl激酶抑制劑，IGF受體（類胰島素生長因子）激酶抑 制劑；極光激酶抑制劑（例如AZD11 52、PH739358、VX-680、 MLN8054、R763、MP235、MP529、VX-528及 AX39459)及 細胞週期素依賴性激酶抑制劑，諸如CDK2及/或CDK4抑制 劑； (v)抗血管生成劑，諸如抑制血管内皮生長因子之效應的 彼等抗血管生成劑[例如抗血管内皮細胞生長因子抗體貝 伐單抗（bevacizumab)(Avastin)及VEGF受體路胺酸激酶抑 制劑，諸如（4-(4-溴-2-氟苯胺基）-6-曱氧基-7·(1-甲基哌啶 -4-基曱氧基）喹唑啉（ZD6474 ; WO 01/32651中之實例2)、 4-(4 -氣-2-曱基°引〇朵-5 -基氧基）-6 -甲氧基- 7- (3-0比Β各σ定-1-基 丙氧基）喹唑啉（AZD2171 ; WO 00/47212中之實例240)、凡 塔藍尼（vatalanib)(PTK787 ; WO 98/35985)及 SU11248(舒尼 替尼（sunitinib) ; WO 01/60814)，諸如彼等在國際專利申請 案 W097/22596、W0 97/30035、WO 97/32856及 WO 98/13354 中所揭示之化合物及藉由其他機制作用之化合物（例如三 叛胺基喧(linomide)，整合素avb3功能及血管生長抑素之 抑制劑）]， 132905.doc -42- 200918528 (vi) 血管破壞劑’諸如康貝他斯汀A4(Combretastatin A4)及國際專利申請案 w〇 99/02166、WO 00/40529、WO 00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434及 WO 02/08213 中 所揭示之化合物； (vii) 反義療法，例如針對上文所列之標靶之彼等反義療 法，諸如ISIS 25〇3(抗ras反義療法）；

(viii) 基因療法，包括（例如）置換異常基因（諸如異常卩53 或異常BRCA1或BRCA2)之方法、GDEPT(基因導向性酶前 藥療法）方法（諸如使用胞嘧啶脫胺酶、胸苷激酶或細菌硝基 還原酶之彼等GDEPT方法）及增加患者對化學療法或放射 療法之耐受性之方法（諸如多藥抗性基因療法及 (iX)免疫療法，包括（例如）增加患者腫瘤細胞之免疫原性 之離體及活體内方法，諸如用細胞激素（諸如介白素2、介 白素4或粒細胞巨嗟細胞群落刺激因子）轉染，減少了細胞失 能之方法，使用經轉染免疫細胞(諸如經細胞激素轉染之樹 突狀細胞）之方法，使用經細胞激素轉染之腫瘤細胞系之方 法及使用抗遺傳型抗體之方法。 投藥 可藉由任何便利之投藥路線全身性/外周性或在所要作 =將活性化合物或包含活性化合物之醫藥組合物㈣ 又心者’投樂路線包括（但不限於）經口（例如，藉由攝取）. 局部（例如包括經皮、鼻内 '經眼、經 . 如藉由使用(例如)氣溶膠(例如) 下二’ 法);經直腸;經…經腸，例如藉由二=;療 132905.doc -43- 200918528 皮内、肌肉内、靜脈内、動脈内、心臟 哪*n、鞘内、脊椎内、 囊内、囊下、眶内、腹膜内、氣管内、矣 A1 衣皮下、關節内、蛛 膜下及胸骨内注射；藉由（例如）皮下或肌一 受檢者可為真核生物、動物、脊椎動物、 曰 嘴乳動物、響 齒動物（例如天竺氣、倉鼠、大鼠、小良）、鼠類（例如小 犬類（例如狗）、貓類（例如貓）、馬類（例如 ^ 咏 •勺厂重長類動物、 猿（例如猴或類人猿）、猴（例如狨猿、狒 即）、頬人猿（例如

大獲猩、黑獲獲、獲獲、長臂猿）或人類。 調配物 雖然可能單獨投與活性化合物，但其較佳以勺人至I 種如上文所定義之活性化合物連同—或多，醫：：上 受之載劑、佐劑、賦形劑、稀釋劑、填充劑、緩衝劑、穩 定劑、防腐劑、潤滑劑或熟習此項技術者熟知之其他物^ 及視需要其他治療劑或預防劑之醫藥組合物（例如調配物 之形式存在。 因此，本發明進一步提供如上文所定義之醫藥組合物及 製造醫藥組合物之方法，其包含將至少一種如上文所定義 之活性化合物連同一或多種醫藥學上可接受之載劑、賦形 劑、緩衝劑、佐劑、穩定劑或如本文所述之其他物質混合 在一起° 如本文中所使用之術語"醫藥學上可接受"係關於在正確 醫學判斷範疇内適用於與受檢者（例如人類）之組織接觸而 無過量毒性、刺激、過敏反應或其他問題或併發症且符合 合理利益/風險比之化合物、物質、組合物及/或劑型。各載 132905.doc • 44 - 200918528 劑、賦形劑等在與調配物之其他成分相容之意義上必須亦” 可接受"。 適合之載劑、賦形劑等可見於標準醫藥學著作中，例如

Remington’s Pharmaceutical Sciences，第 18 版，Mack Publishing Company，Easton, Pa.，1990。 調配物可便利地以單位劑型提供且可藉由藥劑學技術中 熟知之任何方法來製備。該等方法包括使活性化合物與構 成一或多種輔助成分之載劑締合之步驟。一般而言，藉由 使活性化合物與液體載劑或細粉狀固體載劑或兩者均一且 緊密締合且隨後必要時使產物成型來製備調配物。 調配物可呈以下形式：液體、溶液、懸浮液、乳液、酏 劑、糖漿、錠劑、***劑、顆粒劑、散劑、膠囊、藥包（cachet)、 丸劑女瓶、栓劑、***栓劑、軟膏、凝朦、糊狀物、乳 相、噴霧劑、油霧劑（mist)、泡沫劑、洗劑、油劑、大丸劑、 舐劑或氣溶膠。 適於經口投藥（例如，藉由攝取）之調配物可以離散單元 (諸如各自含有預定量之活性化合物之膠囊、藥包或錠劑)； 散d或顆粒劑，水性液體或非水性液體中之溶液或懸浮 液’或水包油液體乳液或油包水液體乳液；大丸劑：紙劑； 或糊狀物形式提供。 户鏡別可藉由例如壓縮或模製之習知方式，視需要在一或 夕=輔助成分存在下製造。可藉由在適合機器中壓縮視需 要-、或夕種黏合劑（例如聚乙烯吡咯酮、明膠、*** "山糸糖醇、黃蓍膠、羥丙基甲基纖維素）；填充劑或豨 132905.doc 200918528 釋劑（例如乳糖、微晶纖維素、磷酸氫妈）；潤滑劑（例如硬 月曰酸鎂、滑石、矽石）；崩解劑（例如乙醇酸澱粉鈉、交聯聚 乙烯°比p各酮、交聯羧曱基纖維素鈉）；表面活性劑或分散劑 或濕潤劑（例如月桂基硫酸鈉）及防腐劑（例如對羥基苯曱酸 甲酯、對羥基笨甲酸丙酯'山梨酸）混合之呈自由流動形式 (諸如粉末或顆粒）之活性化合物來製備壓縮錢劑。可藉由在 適合機器中模製經惰性液體稀釋劑濕潤之粉末狀化合物之 (、 混合物來製造模製錠劑。錠劑可視需要經包衣或刻痕且可 經調配以便提供其中活性化合物之緩慢釋放或受控釋放， 其（例如）使用變化比例之羥丙基甲基纖維素來提供所要釋 放概況。錠劑可視需要具備腸溶衣以提供在腸部分而非胃 中之釋放。 適於局部投藥（例如經皮、鼻内、經眼、經頰及舌下）之 調配物可調配為軟膏、乳膏、懸浮液、洗劑、散劑、溶液、 糊狀物、凝膠、喷霧、氣溶膠或油。或者，調配物可包含 Q 貼片或敷料，諸如浸有活性化合物及（視需要）一或多種賦形 劑或稀釋劑之繃帶或絆創膏。 適於口中局部投藥之調配物包括於調味基質（通常為蔑 糖及***膠或黃耆膠）中包含活性化合物的含片；於諸如 明膠及甘油或蔗糖及***膠之惰性基質中包含活性化合 物的片劑；及於適合液體載劑中包含活性化合物的漱口藥。 適於對眼睛局部投藥之調配物亦包括滴眼劑，其中使活 性化合物溶解或懸浮於適合載劑（尤其活性化合物之水性 溶劑）中。 132905.doc •46· 200918528 適於經鼻投藥之調配物（其中載劑為固體）包括以吸鼻煙 气投/、（亦即藉由自保持靠近鼻之粉末容器經由鼻部 通道快速吸入）的粒徑（例如）在約20至約500微米範圍内的 粗粉。載劑為液體的適用於以(例如)鼻喷霧、滴鼻劑形式投 樂或藉由喷霧器來氣溶夥投藥之調配物包括活性化合物之 水性溶液或油性溶液。

U 適於藉由吸入投藥之調配物包括以來自加壓包裝辟助於 諸如二氯二氟甲烧、三氯氣甲烧、二氣:氣乙 :等或其他合適氣體)之氣溶膠噴霧劑形式提供之 、、於經由皮膚局部投藥之調配物包括軟膏、乳 。當調配為軟膏時’活性化合物可視需要與石壤 :::::膏基質-起使用。或者，可將活性化合物= 由礼貪基質之礼膏。若需要，則乳膏基質之水 兩個以上誠Γ醇ΓΓ 醇，亦即具有兩個或 山梨糖醇、：油及聚乙二一 ：：丁-1，3-二醇、甘露醇、 立 一醇及/、混合物。局部調配物可合 ^ 也包括增強活性化合物穿過皮膚或其他患病區域之吸收 ^參透之化合物。該等真皮渗透增強劑之實例包括 碾及相關類似物。 亞 包含乳化劑（或者 種乳化劑與脂肪 ’連同充當穩定 。亦較佳包括油 田調配為局部乳液時，油相可視需要僅 稱為礼化劑（emuIgent))或其可包含至少— 或油或與脂肪及油兩者之混合物。較佳地 劑之親脂性乳化劑一起包括親水性乳化劑 132905.doc •47- 200918528 及脂肪。乳化劑連同稃定南丨 、 4逆u穂疋剤一起或在不存在穩定劑之狀況 下組成所謂乳化蝶，且趟；查F7，丄7Z / 〇、 L ^ 1壤連同油及/或脂肪~起組成形成乳 膏调配物之油性分散相之所謂乳化軟膏基質。 適合乳化劑及乳液穩定劑包括““Ο、、—、十六 基十八基醇、十四醇、單硬脂酸甘油酿及月桂基硫酸納。 對適用於調配物之油或脂肪之選擇係基於達成所要化妝性 質’因為活性化合物在可能用於醫藥乳液調配物中之大多

數油中之溶解度可能極低。因此，乳f較佳應為具有適合 稍度以避免自管或其他容器中滲漏之不油腻、非染色且可 、 產㈤彳使用直鏈或支鏈、-元或二元烧基g旨，諸 如二異己二酸醋、硬脂酸異十六坑基酿、可可脂肪酸之丙 二醇二醋、十_異丙酿、油酸癸基酿、棕櫚酸異丙醋、 硬脂酸丁醋、棕櫚酸2_乙基己醋或稱為Cr〇dam〇i cAp之支 鏈S曰之摻口物’其中後三種醋較佳。該等醋視所需性質可 單獨或組合使用。 或者’可使用聽點脂質’諸如白軟似/或液體石壌或 其他ί廣物油。 曰適於直腸投藥之調配物可卩具有包含（例如）可可脂或水 揚酸酯之適合基質之栓劑形式提供。 適於***投藥之調配物為其中除了活性化合物外，亦可 含有該等此項技術中已知適當之載劑的***栓劑、棉塞、 乳膏、凝膠、糊狀物、泡沫劑或噴霧劑調配物形式。 適於非經腸投藥（例如藉由注射，包括皮膚、皮下、肌肉 内、靜脈内及皮内注射）之調配物包括：水性及非水性等 132905.doc -48- 200918528 張、無熱原質、無菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩衝 劑、防腐劑、穩定劑、抑菌劑及使調配物與預定受體之血 液等張的溶質；及水性及非水性無㈣浮液，^包= 浮劑及增祸劑’及脂質體或經設計使化合物乾向血液組： 或-或多個器官之其他微粒系統。適用於該等調配物之a 適等張媒劑之實例包括氣化納注射劑、林格氏溶：

(Rmger’s Solution)或乳酸鹽林格氏注射劑。通常，溶液中 活性化合物之濃度為約！ ng/mI至約1〇 _，例如㈣ ng/ml至約！ μ§/ηι卜該等調配物可以單位劑量或多劑量密封 容器安瓶及小槪）提供，且可健存於僅需要在即將使用 前添加無菌液體載劑(例如注射用水)之棒乾燥(康乾)條 ^下°可自無菌粉末、顆粒及錠劑製備即時注射溶液及懸 調配物可呈脂f體或經設計以使活性化合物乾向血 液組分或一或多個器官之其他微粒系統形式。 劑量 添，瞭解，活性化合物及包含活性化合物之組合物的適當 可在隨患者變化。最佳劑量之確定通常將涉及權衡本 考明之治療㈣療益處與任何風險或有害副作用之程度。 :斤選劑量含量將視多種因素而定，包括（但不限於）特定化合 、之活性、投藥路線、投藥時間、化合物之***速率、治 =持續時間、組合使用之其他藥物、化合物及/或物質及患 令陡別、體重、病狀、一般健康狀況及先前病史。 :合物之量及投藥路線最終將由醫生決定，但通常劑量將 乍用4位獲得達成所要效應而不引起實質傷害或有害副 132905.doc •49- 200918528 作用之局部濃度。 在整個治療過程中’活體内投藥可以單劑量連續地或間 歇地(二列如呈以適當時間間隔之分隔劑量）實現。確定最有效 之才又藥方式及投藥劑量之方法為熟f此項技術者所熟知且 將隨用於療法之調配物、療法目#、所治療之標靶細胞及 所治療之受檢者而變化。可以由主治醫生所選之劑量含量 及模式進行單次或多次投藥。 一般而言，活性化合物之適合劑量在每天每公斤受檢者 體重約100 至約250 mg之範圍内。當活性化合物為鹽、 酯、前藥或其類似物時，基於母化合物來計算所投與之量 且因此按比例增加欲使用之實際重量。 【實施方式】 實例 如本文中所述，僅提供以下實例以說明本發明且並非意 欲限制本發明之範疇。 縮寫字 為方便起見’許多化學部分使用熟知縮寫來表示，該等 縮寫包括（但不限於）甲基（Me)、乙基（Et)、正丙基（npr)、異 丙基（iPr)、正丁基（nBu)、第三丁基（tBu)、正己基（nHex)、 環己基（cHex)、苯基（Ph)、聯苯（biPh)、苄基（Bn)、萘基 (naph)、曱氧基（MeO)、乙氧基（EtO)、苯甲醯基（Bz)及乙醯 基（Ac)。 為方便起見，許多化合物使用熟知縮寫來表示，該等縮 寫包括（但不限於）曱醇（MeOH)、乙醇（EtOH)、異丙醇 132905.doc -50- 200918528 (i-PrOH)、曱基乙基酮（MEK)、乙鍵（Et20)、乙酸（AcOH)、 二氯曱烷（亞曱基氯，DCM)、三氟乙酸（TFA)、二曱基曱醯 胺（DMF)、四氫呋喃（THF)及二曱亞颯（DMSO)。 一般實驗細節 4匕學品係自 Aldrich Chemical Company 、 Lancaster Synthesis Ltd及 Acros Organics(Fisher Scientific UK Ltd)購 得。THF係自鈉/二苯甲酮新鮮蒸餾。甲醇及乙醇係自鎂/ 碘蒸餾。DCM藉由經五氧化二磷蒸餾來乾燥。丙酮藉由經 氫化鈣蒸餾來乾燥。不立即使用之所有溶劑在氮下用分子 篩（4人，3-5 mm珠粒）儲存。無水DMF係自Aldrich以 Sure Seal™瓶獲得。三乙胺藉由經氫化約蒸餾來乾燥且在氮 下用氫氧化鉀儲存。 薄層層析（TLC)係使用預塗佈於鋁板上之Merck矽膠 60F254來執行，隨後將其乾燥且使用短波（254 nm)紫外光或 藉由相繼用茚滿三酮或硫酸及香蘭素處理來觀測。’急驟'管 柱層析係在中等壓力下，使用Davisi 1石夕膠（40-63 μιη)進行。 炫點係使用Stuart Scientific SMP3設備來測定且未校 正。1Η及13C核磁共振（NMR)光譜係使用BrukerSpectrospin AC 300E 光譜儀（〗H 300 MHz 或"C 75 MHz)或 Bruker Spectrospin AC 500E 光譜儀500 MHz 或 13C 125 MHz)來 獲得。化學位移係使用殘餘溶劑峰作為内部標準，以四甲 基矽烷之低場百萬分率（δ)來報導。多重性係由s(單峰）、d(雙 峰）、t(三重峰）、q(四重奇）、m(多重蜂）、br(寬峰）或其組合 來指示。LC/MS光譜係使用以正離子或負離子電喷霧模式 132905.doc -51 - 200918528 運作之Micromass Platform儀器來獲得。分離係使用Cl8管 柱（5〇x4.6 mm ; Supelco Discovery 或 Waters Symmetry)及 0.05%曱酸及甲醇（10-90%)之15分鐘梯度溶離來達成。IR光 譜係以純樣本形式，用Bio-Rad FTS 3000MX diamond ATR 記錄β 化合物係使用定質量LC-MS系統或UV定向系統來純化。 定質量LC-MS系統 其使用 Waters ZQ 質譜儀、Waters 600 泵及 Waters 2700樣 本管理器。移動相A-於水中之0.1%甲酸，移動相B-於乙腈 中之0.1 %甲酸，流動速率20 ml/min.，梯度：經1 5分鐘，5% B至75% B，隨後經1分鐘至100% B，保持1分鐘。管柱： Phenomenex Gemini C18, 5um，110A，Axia, 20 50 mmx21.2 mm ° UV定向系統 其使用 Gilson 305及 306泵，與 Gilson 155 uv/vis偵側器、 Gilson 215注射器/收集器。移動相A-於水中之0.1%曱酸， 移動相B-於乙腈中之0.1%甲酸，流動速率6 ml/min，梯度： 10% B歷時3分鐘，隨後經16分鐘至95% B，保持5分鐘。管 柱：Hichrom ACE 5um C18. 250 mmxlO mm。 微波合成 反應使用具有機器人臂之Personal Chemistry™ Emrys Optimiser微波合成單元來進行。功率範圍在2.45 GHz下在 0-300 W之間。壓力範圍在0-20巴之間；溫度升高在 2-5°C/sec之間；溫度範圍 60-250°C。 關鍵中間物之合成 132905.doc -52- 200918528

(a) 1-溴-4-甲氧基-二苯并噻吩（b) 經0.5小時，向4-曱氧基-二苯并噻吩（a)( 16.07 g，75.00 mmol)於冰乙酸（300 mL)中之懸浮液中逐滴添加溴（4 〇8 mL，75.00 mmol)於冰乙酸（10 mL)中之溶液。再過〇 5小時 後’將反應混合物傾至水（1 L)中，且在15分鐘後，藉由過 遽收集沈澱物，且用水洗條。將固體溶於二氣甲烧（2〇〇 mL) 中且隨後用1 〇%碳酸氫鈉水溶液（1 X5〇 mL)洗滌。隨後將有 機層經MgSCU乾燥，過濾且在真空中濃縮以提供產量為 21.06 g(95°/。）呈淺黃色固體狀之卜溴_4_曱氧基_二苯并噻吩 (B) ’其在未經進一步純化之情況下使用。 (b) 1-氣-二苯并硫-4-紛（(2) 向含有卜溴-4-甲氧基'二苯并噻吩（B)(41.045 g，0.14 mol) 之燒瓶中以一份添加吡啶鹽酸鹽（〇 5〇 kg，4 35 m〇1)。將熔 融物回流48小時後，使反應混合物冷卻至室溫，且隨後傾 至水（2 L)中。藉由過濾收集沈澱之固體，將其再溶於二氯 甲烷（0_50 L)中且隨後依次用HC1水溶液（】M , 5〇 mL)、水 132905.doc .53- 200918528 (50 mL)及飽和鹽水溶液（5〇 mL)洗滌，經MgS〇4乾燥，過濾 且在真空中濃縮。藉由Si〇2急驟層析，使用二氯甲烷：己烷 (10:1)作為溶離劑進行純化產生13 47 g(41%)呈淺棕色固體 狀之1-氯-一苯并硫-4-酌·（4.40分鐘，[M-H] 233 ·4)。 (c) 二氟-甲烷磺酸卜氣―二苯并噻吩_4_基酯（D) 向1-氣-二苯并硫-4-酚（0.669 g , 2.850 mmol)於無水四氫 呋喃（18 mL)中之溶液中各以一份依次添加碳酸鉀（〇 394 g， 2·850 mmol)，接著添加冰苯基·雙（三氟甲烷磺醯胺）（1 〇2 g， 2.85 mmol)。隨後在12〇它下，使反應混合物經受微波輻射 歷時6分鐘。在該時間，隨後再次在12〇t：下，使另一量之 N-苯基-雙（三氟曱烷磺醯胺）（〇 2〇 g，〇 % mm〇1)及反應混 合物經受微波輻射歷時6分鐘。過濾粗反應混合物，且在真 空中移除溶劑。藉由Si〇2急驟層析，使用二氣曱烷：己烷 (1〇:1)作為溶離劑純化所得油產生丨〇〇 g(95%)呈透明油狀 之二氟-甲烷磺酸1-氣-二苯并噻吩_4_基酯（5.65分鐘）。 (d) 8-(1-氣-二苯并噻吩_4_基）_2_嗎啉_4_基-咣烯_4_酮（？) 向二氟-甲烷磺酸1-氯-二苯并噻吩_4_基酯（D)(〇.513 g， 1，40 mmol)及 2_嗎啉 _4_ 基 _8_(44,5,5·四曱基·[^，之]二氧硼 _ 東2-基）-咬烯-4-酮（E)(〇.625 g，1.75 mmol)於無水乙腈（18 mL)中之溶液中以一份添加碳酸鉀（〇 58〇 g，4 2〇 mm〇1)。 隨後在15 0 C下，使反應混合物經受微波輻射歷時丨〇分鐘。 過濾粗反應混合物，且在真空中移除溶劑。藉由si〇2急驟 層析使用曱醇：乙酸乙酯（2〇: 1)作為溶離劑純化所得油產生 0.535 g(84%)呈深米色固體狀之8_(1_氣_二苯并噻吩-4_ 基）-2-嗎啉-4-基·咬烯·4-酮（F)(4.91 分鐘，[m+h] 448 1)。 132905.doc -54- 200918528 實例1

氣、一本并ϋ塞吩-4 -基）-2·嗎淋-4 -基克稀

()( 2 g ’ 〇_〇7 1 mmol)於無水甲苯（2 mL)中之溶液中以 一份添加第：/ , 二丁 氧化鈉（0.026 g，0.351 mmol)，接著各以— 份依次添加所需胺（〇·286 mmol)、1，1_雙（二苯基膦基）二茂 鐵（0.002 g 〇 〇〇4 mm〇1)及參（二亞节基丙酮）二把（〇〇〇6g , (K004 mmol)。隨後在13〇°Ct，使反應混合物經受微波輻射 歷時2分鐘。經由SPE矽石筒過濾所得溶液，以二氯甲烷/ 甲醇洗滌’且隨後經受經由HPLC之純化。

R

132905.doc -55- 200918528 f lb r 0 * 98 4.13 526.6 lc °rV ★ 99 7.15 598.5 Id 广。八7〇h 0 V * 97 4.06 586.6 le 丫 〔N〕 ★ 89 4.24 540.6 If 〔。〕 N ό 1 * 92 4.19 582.6 ig v V * 93 4.18 526.5 lh V * 97 7.16 612.4 132905.doc -56- 200918528

li 6 1 * 91 6.87 596.6 ij V V * 88 11.52 540.3 lk °γΟ cN〕 it 97 5.48 596.3 11 °r\ 0 * 87 12.90 566.2 lm σ 99 6.68 515.2 In ό t ·* 88 4.22 540.3 lo ό 1 * 98 7.2 541.4 132905.doc ·57· 200918528 ip ό 1 * 98 6.74 527.3 實例2

(a) 4-[4-(2-嗎啉-4-基-4-側氧基-4H-咣稀-8-基）-二苯并。塞 吩-1-基]-哌嗪-1-甲酸第三丁酯（lc) 向8-(1-氯-二苯弁σ塞吩-4 -基）-2 -嗎琳·4-基-ρ克稀-4-酬 (F)(0_447 g，1.00 mmol)於無水 1，4-二 口惡烧（1 5 mL)中之溶液 132905.doc -58- 200918528 中以一份添加磷酸鉀（0.636 g，3.00 mmol)，接著各以一份 依次添加4,5-雙（二苯基膦基）-9,9-二甲基二苯并哌喃（0.029 g， 0.050 mmol)、乙酸l£(0.012g，0.05〇111111〇1)及1-旅嗪-曱酸 第三丁酯（0.373 g，2.00 mmol)。隨後在150°C下，使反應混 合物經受微波輻射歷時20分鐘。經由矽石柱塞過濾所得溶 液，以二氣甲烷：曱醇（10:1)之溶液溶離。在真空中移除溶 劑且藉由Si〇2急驟層析，使用二氣甲烷：甲醇（20:1增加至 5 :1)作為溶離劑純化所得油以產生〇·3 97 g(66%)呈棕色固體 狀之4-[4·(2·嗎琳_4-基_4_側氧基- 克稀-8-基）-二苯并嘆 吩-卜基]-哌嗪-1-甲酸第三丁酯（5.28分鐘，[M+H] 598.4)。 (b) 2-嗎琳-4-基-8-(1-派唤-1-基-二笨并嘆吩-4-基）-咬稀 酮（la) 向4-[4-(2-嗎琳-4-基-4-側氧基-4H-咬烯-8-基）-二苯并〇塞 吩-1-基]-哌嗪-1-甲酸第三丁酯（lc)(假定1〇〇% , i 〇〇 mm〇1) 於無水二氯曱烷（100 mL)中之溶液中以一份添加三氟乙酸 (2〇 mL)。48小時後，將反應加熱至5〇。〇,且再過3小時後， 使反應冷郃至室溫，隨後藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液中 止直至PH值達到7。隨後，用二氣曱烷（3χ15 mL)萃取反應 混合物，且將組合萃取物經MgS〇4乾燥，過濾且在真空中 移除溶劑以得到淺棕色泡泳。藉由灿2急驟層#，使用二 氯甲烧.甲醇（10:1)作為溶離劑進行純化產生產1為〇688 g(70°/。）呈淺黃色固體狀之2_嗎啉·4_基_8_(卜哌嗪_ι_基-二苯 并嘆吩-4-基）-咬婦 _4_ 酮 〇a)(rf 〇25 i〇%Me〇H)(2 86 分鐘 [M+H] 498.5)。 132905.doc -59· 200918528 (C)文庫合成（2a-g) 向2-嗎琳-4-基-8-(1-旅°秦-1-基_-笑丑17堂\^14# 签—本开噻吩_4·基）-咣烯 -4-酮（0.020 g，0.040 mmol)於益太-备田 & y ，、，、不一虱甲烷（2 mL)中之溶 液中各以一份添加N，N，·二異丙基乙胺（〇 14〇 m]L，〇 8〇〇 mmol) ’接著所需烧基溴化物（0.400 mmol)。若反應已不進 行’則將反應溫度增加至50°C，且若反應仍不進行，則添 加一份碳酸鉋（0.141 g，0.400 mmol)。一旦起始物質已耗 盡，則將反應經由SPE矽石筒過濾，以二氯甲烷/甲醇洗滌’ 且隨後經受經由HPLC之純化。

R 純度 RT [M+H]+ 2a 食 100 4.20 568.4 2b 广 〇/^〇\ * 98 4.23 600.5 2c •k 96 4.20 556.4 2d ^CN it 95 8.81 536.3 132905.doc -60- 200918528

2e 广0〜 * 96 8.85 570.4 2f * 99 4.27 540.4 2g * 100 4.30 552.4 2h * 99 8.38 568.2 2i * 97 1.44 582.3 2j / * 99 1.54 584.4 2k * 99 1.45 596.4 21 NH„ * 94 1.21 541.3 2m 〇 * 99 4.10 542.3 2n 〆〇 * 99 9.58 641.4 132905.doc -61 · 200918528 2〇 N人 Λ 92 4.38 597.3 * 實例3

文庫合成（3a-b) 向2_嗎琳-4-基-8-(1-旅唤-1-基·二苯并α塞吩_4_基）_咬烯 -心酮（la)(0.〇5〇 g ’ 0.050 mmol)於無水二氯甲烷（2 mL)中之 溶液中以一份添加Ν,Ν，-二異丙基乙胺（〇·5 mL，過量），接 著添加一份適當磺醯基氣化物（〇·050 mmol)。12小時後，將 反應混合物經由SPE矽石筒過濾，以二氯曱烧/曱醇洗滌， 且隨後經受經由HPLC之純化。 R 純度 RT [M+H】+ 3a 1 * 98 5.84 576.3 3b r it 96 4.23 590.3 132905.doc -62- 200918528 生物實例 DNA-ΡΚ抑制 為評估化合物活體外針對DNA-PK之抑制作用，使用以下 檢定來測定IC5Q值。 哺乳動物DNA-PK(500 ng/ml)係自海拉細胞核萃取物 (HeLa cell nuclear extract)分離（Gell，D,及 Jackson S.P·， 27:3494-3502 (1999))，接著利用 Q-竣脂 糖、S-瓊脂糖及肝素瓊脂糖進行層析。在30°C下，以40 μΐ 之最終體積，在含有25 mM Hepes(pH 7.4)、12.5 mM MgCh、50 mM KC1、1 mM DTT、10%甘油、0.1% NP-40 及1 mg受質GST-p5 3N66(與楚胱甘肽S-轉移酶融合之人類 野生型p53之胺基末端66個胺基酸殘基）之緩衝液中，在聚 丙烯96孔培養板中量測DNA-PK(250 ng)活性。向檢定混合 物中，添加不同濃度之抑制劑（於DMSO中，最終濃度為 1%)。培養10分鐘後，添加ATP以得到50 μΜ之最終濃度， 同時添加30 mer雙鏈DNA募核苷酸（最終濃度為0.5 ng/ml) 以啟始反應。1小時搖動後，將150 μΐ磷酸鹽緩衝鹽水（PBS) 添加至反應中且隨後將5 μΐ轉移至每孔含有45 μΐ之PBS之 96孔不透明白色培養板，其中使GSTp53N66受質與孔結合1 小時。為偵測在p53之絲胺酸第15殘基上由DNA-ΡΚ引發之 磷酸化事件，在基本ELISA程序中使用p53磷酸絲胺酸-15 抗體（Cell Signaling Technology)。隨後在 ELISA 中使用抗兔 HRP接合二級抗體（Pierce)，之後添加化學發光試劑（NEN Renaissance)以摘測信號，如經由 TopCount NXT(Packard) 132905.doc -63 - 200918528 藉由化學發光計數所量測。

Ik後使用以下等式計算各化合物之酶活性： °/〇 抑制=100 _ -平均負 cpm) x 100> 、（平均正cpm-平均負cpm) ^ 結果以ICw值（抑制5〇%之酶活性之濃度）討論於下文。該等 值在不同濃度範圍内測定，通常1〇 向下降至0.001 μΜ。 該等ICm值係用作鑑別化合物效能增加之比較值。 存活率增強比率 存活率增強比率（SER)為與未經照射對照細胞相比，在2 灰階照射後由DNA-PK抑制劑引起之細胞殺死增強的比 率。DNA-PK抑制劑以25、50、100及/或500 nM之濃度使用。 藉由Faxitron 43855D機器，以每分鐘1 Gy之劑量率傳遞輻 射。在2灰階照射下之SER自下式計算： SER_ DNA-PK存在下之細胞存活率_IR後之細胞存活率_ if照細胞之細胞存活率 X IR後DNA - PK抑制劑存在下之細胞存活率^ 細胞殺死之程度藉由標準細胞群落存活檢定來監測。簡言 之，用適當濃度之海拉細胞接種經組織培養物處理之6孔培 養板，以得到每孔100-200個群落且返回至恆溫箱以使細胞 黏附。4小時後，將化合物或媒劑對照添加至細胞。隨後， 在抑制劑存在下將細胞培養1小時，之後使用Faxitron 43 85 5D箱式X射線機，以2灰階照射。隨後，將細胞再培養 16小時，之後用缺少DNA-PK抑制劑之新鮮培養基置換培養 基。8天後，固定所形成之群落且用Giemsa( Sigma, Poole， 132905.doc ·64· 200918528 UK)染色且使用自動群落計數器（Oxford Optronics Ltd, Oxford，UK)計分。如上所述計算資料。 結果 所測試之所有化合物顯示小於0.5 μΜ2 IC5()。以下化合物 顯示小於0.05 μΜ 之IC5〇 : la、lb、Id、le、If、lg、In、 2a、2b、2c、2d、2e、2f、2g、2m、2n、2o、3a、3b。 化合物之平均IC50在下文中給出：

化合物 IC5〇 (μΜ) -___ la 0.011 -_ lb 0.008 ___lc 0.447 —_ Id 0.008 ---le 0.017 __ If 0.024 -—.ig 0.012 -----lh 0.086 -li 0.188 -I.i 0.031 _ lk 0.080 11 0.096 -_ lm 0.136 ... _ In 0.013 -__lo 0.400 -Ip 0.173 -______ 2a 0.011 _ 2b 0.004 -_ 2c 0.006 2d 0.020 ... ____ 2e 0.007 ______ 2f 0.011 -2g 0.017 ___2h 0.011 __2i 0.021 -_ 2i 0.009 ..-. _____________ 2k 0.043 21 0.007 132905.doc -65- 200918528

2m 0.003 2n 0.011 2o 0.007 3a 0.024 3b 0.021 以下化合物在100 nM下顯示1.5或更大之SER : la、lb、 Id、If、lg、1 n、2a、2b、2c、2d、2e、2f、2h、2j、21、 2m、2n、2〇 o 132905.doc 66-

Claims (1)

1. 200918528 十、申請專利範圍： 1. 一種式I化合物： Γ:

   R2 (I) 其中 R1及R2獨立地選自氫、心㈣ 環基或C5.2。芳基，或可 :-7烧基、雜 ,、有至8個環原子之視f要經取代之雜環； X為CH或N ; η為1或2 ; RC1及RC2獨立地選自Η及甲基；

   當X為Ν時，rx係選自由η及視需要經取代之Ci7烷基、 C3·2。雜環基、c5_2〇芳基 '醯基、酯、醯胺基及磺醯基組 成之群；且 當X為CH時，Rx係選自由Η及視需要經取代之CN7烷基、 C3-2〇雜環基、c5_2Q芳基、醯基、酯、醯胺基、磺醯基、 胺基及醚組成之群。 2. 如請求項1之化合物，其中η為1。 3. 如請求項之化合物，其中X為Ν。 132905.doc 200918528 4·如請求項3之化合物，其中Rx係選自由狀視需要經取代 之心-7烷基、芳基、醯基、酯及磺醯基組成之群。 5·如請求項4之化合物，其中Rx係選自由狀視需要經取代 之Cl·7烧基及績酿基組成之群。 6·如請求項1或2之化合物，其中又為（：11。 7. 如請求項6之化合物，其中rUc32〇雜環基或酿基。 8. 如請求項1至7中任一項之化合物’其中RC1及π均為H。 9·如請求項⑴中任一項之化合物，其中…及^連同其所 連接之氮原子一起形成具有6個環原子之雜環。 ι〇·如請求項9之化合物’其中R、R2it同其所連接之氮原子 -起形成選自N-嗎啉基、Ν·硫嗎啉基及噻唑啉基之基團。 U·如請求項1〇之化合物，其中R1及R2連同其所連接之氮原 子—起形成N-嗎啉基。 12,種組合物包含如請求項中任—項之化合物及 醫藥學上可接受之載劑或稀釋劑。 Β.如請求項中任—項之化合物，纟係用於治療方法。 ，種“求項1至11中任—項之化合物之用途，其係用於 製備用於治療藉由抑制DNA_PK改善之疾病的藥物。 15. 如請求们㈣中任一項之化合物，其係用於治療藉由抑 制DNA-PK改善之疾病之方法中。 16. -種活體外或活體内抑制嶋抓之方法，其包含使細胞 與有效量之如請求項中任一項之化合物接觸。 132905.doc 200918528 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式: /tv

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