SU960163A1 - Process for purifying proline - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к новому способу очистки L-пролива, который широко примен етс  в органической химии, молекул рной биологии, экспериментальной медицине и пищевой промышленности. Известен способ очистки L-пролина от сопутствуквдих аминокислот селективньпи осаждением пролина в виде рейнеката, пикрата, роданилата с последующим расщеплением образовавшихс  солей и перекристаллизацией L-прблина из спиртовоэфирного раствора . Выходы составл ют 1-9,5% в пересчете на исходное количество желатина . Известен также способ выделени  L-пролина из смеси с другими аминокислотами путем последующего дезами нировани , восстановительного расщеплени , обессоливани  на катионит и кристаллизации из этанола. Выход 60-70% хроматографически однородног L-пролина. Способ предназначен дл  выделени  L-пролина из культураль .ной жидкости бактериального синтеза Недостатками обоих способов  вл  етс  сложность проведени  процесса и невысокий выход целевых продукто в Наиболее близким к предложенному  вл етс  способ очистки L-пролина/ пригодного дл  применени  в качестве пищевой добавки. Очистка пролина осуществл етс  в многостгщийном процессе при помощи хлорэндоновой кислоты - 1,4,5,6,7,7-гексахлорбицикло- (2,2,1)-5-гептен-2,3-дикарбоновой кислоты. Хлорэндонова  кислота образует с проливом нерастворимую в воде соль, что дает возможность отделить L-пролин от conyTCTBj KJiUHx органических соединений, в том числе и от других аминокислот. Полученную соль разлагают и выдел ют целевой продукт перекристаллизацией из спирта. Выход - 76-82% f 3. L-пролин (фирма Ajinoiftotoj выпускаетс  со следующими показател ми качества, %: Основное 98-100 вещество Удельное вращение (d. 84,5-36,0 4, Хлориды и 0,02 аммиак Свинец и 0,001 железоThis invention relates to a new method for the purification of L-spill, which is widely used in organic chemistry, molecular biology, experimental medicine and the food industry. A known method of purification of L-proline from concomitant amino acids by selective precipitation of proline in the form of reinecate, picrate, rhodanilate, followed by splitting of the formed salts and recrystallization of L-prbrlin from alcohol-ether solution. The yields are 1-9.5% based on the initial amount of gelatin. There is also known a method for isolating L-proline from a mixture with other amino acids by subsequent deamination, reductive digestion, desalting to a cation exchanger, and crystallization from ethanol. The output of 60-70% chromatographically homogeneous L-proline. The method is designed to isolate L-proline from the culture of a. Bacterial synthesis liquid. The disadvantages of both methods are the complexity of the process and the low yield of the desired product. The closest to the proposed method is the purification of L-proline / suitable for use as a food additive. Proline is purified in a multi-stage process with the aid of chloro-endonic acid — 1,4,5,6,7,7-hexachlorobicyclo- (2,2,1) -5-heptene-2,3-dicarboxylic acid. Chloro-endonic acid forms an insoluble salt in the water, which makes it possible to separate L-Proline from organic compounds, including from other amino acids, from the conyTCTBj KJiUHx. The resulting salt is decomposed and the desired product is isolated by recrystallization from alcohol. Yield: 76-82% f 3. L-proline (Ajinoiftotoj is manufactured with the following quality indicators,%: Main substance 98-100 Specific rotation (d. 84.5-36.0 4, Chlorides and 0.02 ammonia Lead and 0.001 iron

Однако известный способ не обес почивает достаточную чистоту конечкого продукта, продукт загр знен хлоридными ионами, так как в процессе примен етс  сол на  кислота.However, the known method does not ensure sufficient purity of the final product, the product is contaminated with chloride ions, since hydrochloric acid is used in the process.

Недостаткс1ми  вл ютс  тг1кже многчэстадийность технологического процесса (5 стадий) и использование агрессивных и  довитых реагентов: сол ной кислоты, пиридина, хлорэндоновой кислоты.The disadvantage is the multi-stage process (5 stages) and the use of aggressive and toxic chemicals: hydrochloric acid, pyridine, chlorendonic acid.

Цель Изобретени  - упрощение процесса , повышение степени чистоты и выхода целевого продукта.The purpose of the Invention is to simplify the process, increase the purity and yield of the target product.

Указанна  цель достигаетс  тем, что согласно способу очистки L-npoлина , Ь-прол1-н раствор ют в смеси водьа и этилового спирта при весовых соотношени х L-пролин;вода:этиловый спирт 1:(О,2-1,7 :3-7), добавл ют активированный уголь и выдел ют L-пралин добавлением ацетона при весовом соотнесении водно-спиртового раствора L-пролина и ацетона 1:(0,6-1,5)при температуре 18-20С с последующим охлаждением.This goal is achieved by dissolving L-prol1-n in a L-proline purification method in a mixture of water and ethyl alcohol at L-Proline weight ratios; water: ethyl alcohol 1: (O, 2-1.7: 3 -7), activated charcoal is added and L-praline is isolated by adding acetone with a weight ratio of a water-alcohol solution of L-proline and acetone 1: (0.6-1.5) at a temperature of 18-20 ° C, followed by cooling.

Положительный эффект предложенного способа очистки L-пролина заклчаетс  в упрощении процесса- (2 стадии вместо 5-ти) и повышении степени чистоты (меньшее содержание хлоридов и аммиака) и выхода (89% и 76-82% соответственно) целевого продукта .The positive effect of the proposed method for the purification of L-proline is suppressed in simplifying the process (2 stages instead of 5) and increasing the purity (lower content of chlorides and ammonia) and the yield (89% and 76-82%, respectively) of the desired product.

Пример 1. В 350 МП растворител , состо щего из 21 NVI воды и 329 мл этилового спирта, предварительно подогретого до 45°С, раствор ют при перемешивании 100 г L-пролина (содержащего 2-6% органических и неорганических примесей). После растворени  L-пролина добавл ют 8 г активированного угл  и выдерживают 10, мин при 45с. -Гор чий раствор фильтруют, фильтрат охлаждают до. 18-20°С 20-30 .мин, после чего добавл ют 20 мл ацетона, и выдерживают при 6 ч. Выпавший осадок отфильтровывают и получают 89,7 г (89,7%) L-пролина.Example 1. In 350 MP of the solvent, consisting of 21 NVI of water and 329 ml of ethyl alcohol, preheated to 45 ° C, 100 g of L-proline (containing 2-6% of organic and inorganic impurities) are dissolved with stirring. After dissolving L-proline, 8 g of activated carbon are added and incubated for 10 minutes at 45 s. The hot solution is filtered, the filtrate is cooled to. 18-20 ° C 20-30. Min, after which 20 ml of acetone are added and kept at 6 h. The precipitate is filtered off and 89.7 g (89.7%) of L-proline are obtained.

Чистота: содержание основного продукта - 99,5%. Хроматографически однородный продукт. Удельное вращение (ot) (, 5 1 н. НС1) - 51,5.Purity: content of the main product - 99.5%. Chromatographically homogeneous product. The specific rotation (ot) (, 5 1 N. HC1) - 51.5.

Содержание неорганических солей (хлоридов, сульфатов, железа, свинца , аммиачных солей) -.0,01-0,0005%The content of inorganic salts (chlorides, sulfates, iron, lead, ammonium salts) -.0.01-0,0005%

При мер 2. В 400 мл растворител , состо щего из 24 мл воды и 376 мл этилового спирта, подогретого до 40 с, раствор ют 100 г L-пролина , содержащего 2-4% органических и неорганических примесей. После растворени  L-пролина добавл ют 10 активированного угл  и выдерживают 5 мин при 40С. Осветленный раствор отфильтровывают и охлаждают до ,1.f СExample 2. In 400 ml of a solvent consisting of 24 ml of water and 376 ml of ethyl alcohol heated to 40 seconds, 100 g of L-proline containing 2-4% of organic and inorganic impurities is dissolved. After dissolving L-proline, 10 activated carbon is added and kept at 40 ° C for 5 minutes. The clarified solution is filtered and cooled to 1.f C

20 мин. Добавл ют 380мл ацетона и выдерживают йри 20 ч. Выход L -пролина - 89,5 г (89,5%). ., 20 minutes. 380 ml of acetone is added and the mixture is kept for 20 hours. The yield of L-proline is 89.5 g (89.5%). .

Чистота: содержание основного вещества - 99,0%. ХроматографическиPurity: content of the main substance - 99.0%. Chromatographically

5 однородный продукт. Удельное вращение (, 5 1н. НС1) - 51. Содер- жание неорганических солей (хлоридов, сульфатов, железа, свинца, аммиачных солей) - 0.01-0.0005%.5 homogeneous product. The specific rotation (, 5 1N. HC1) - 51. The content of inorganic salts (chlorides, sulfates, iron, lead, ammonium salts) is 0.01-0.0005%.

0 ...0 ...

Пример 3. В 100 мл растворител , содержащего17,3 мл воцы и 82,7 мл этилового спирта, подог етого до , при перемешивании рас5 твор ют 20 г L-пролина, содержащего органические и неорганические примеси (2-8%) ..После растворени  L-пролина добавл ют 0,5 г активированного угл  и выдерживают 10 мин при температуре не более . Гор чий раствор фильтруют, охлаждают 1Q мин -- ..до -18с и добавл ют 100 мл ацетона. йлдерхсивают смесь при 10 ч. Оса-доК отфильтровывают. Выход - 17,3 гExample 3. 20 g of L-proline containing organic and inorganic impurities (2–8%) was dissolved in 100 ml of a solvent containing 17.3 ml of a horseman and 82.7 ml of ethyl alcohol, which was added before stirring. After for dissolving L-proline, 0.5 g of activated carbon is added and kept for 10 minutes at a temperature not exceeding. The hot solution is filtered, cooled for 1Q min. .. to -18s and 100 ml of acetone is added. Isolate the mixture at 10 hours. Wasp-doK is filtered. Output - 17.3 g

5 (89%).5 (89%).

Чистота:содержание основного . вещества 99,7%. Хроматографически однородный продукт. Удельное враще.ние ((,5 1 н.не) - 52,4. Со .держание неорганических солей (хлоридов , сульфатов, железа, свинца , солей аммони  ) - 0,01 0 ,0005%.Purity: the content of the main. substances of 99.7%. Chromatographically homogeneous product. The specific rotation. ((, 5 1 n. Not) - 52.4. The content of inorganic salts (chlorides, sulfates, iron, lead, ammonium salts) is 0.01 0, 0005%.

I. I.

5 Технико-экономический эффект предложенного способа заключаетс  в получении L-пролина высокой степени чистоты (содержание основного вещества - 99,5-100%, удельное вращение(а ) ,5 1н.НС1) - 49,5-52,5, содержание неорганических солей (хлоридов, сульфатов, железо, свинец , аммиачных солей) -0,010 ,0005%, Хроматографически однородный продукт, с выходом 89% при значительном упрощении процесса.5 The technical and economic effect of the proposed method is to obtain high purity L-Proline (the content of the main substance is 99.5-100%, the specific rotation (a), 5 1N.НС1) is 49.5-52.5, the content of inorganic salts (chlorides, sulfates, iron, lead, ammonium salts) -0,010, 0005%, Chromatographically homogeneous product, with a yield of 89% with a significant simplification of the process.

Claims (2)

Формула изобретени Invention Formula Способ очистки L-пролина, содержащего органические и неорганические примеси, отличающийс   тем, что, с целью упрощени .процесса и повышени  степени чистотыThe method of purification of L-proline containing organic and inorganic impurities, characterized in that, in order to simplify the process and increase the degree of purity и выхода целевого продукта, L-пролин раствор ют в смеси воды и этилового спирта при весовых соотношени х L-пролина, воды и этилового спирта 1:(О,2-1,7):(3-7), добавл ют активированный уголь и выдел ют L-ПE)aпин добавлением ацетона при весовом соотношении водно-спиртового раствора L-пролина и ацетона 1:СО,6-1,5) при температуре 18-20 С с пос едующим охлаждением.and the yield of the desired product, L-proline is dissolved in a mixture of water and ethyl alcohol at a weight ratio of L-proline, water and ethyl alcohol 1: (O, 2-1.7): (3-7), activated carbon is added and isolate L-PE) apin by adding acetone at a weight ratio of a water-alcohol solution of L-proline and acetone 1: CO, 6-1.5) at a temperature of 18–20 ° C with subsequent cooling. 5960163в 5960163b Источники информации,from protein hydrolysates. - Farmaприн тыв во. внимание при экспертизе cja Polska,(1970), 8,647.Sources of information from protein hydrolysates. - Farmaprints in. attention in the examination of cja Polska, (1970), 8,647. 1, Gajewska М. Review and evalua- 639862, кл. С 07 С 99/02, 30.12.78. tion of the most irapoftant methods of . 3, Патент США №3598838, isolating proline and hydroxyproline- кл.260-326.3, 1971 (прототип).1, Gajewska M. Review and evalua- 639862, cl. C 07 C 99/02, 30.12.78. tion of the most methods of. 3, US Patent No. 3598838, isolating proline and hydroxyproline-cells 266-326.3, 1971 (prototype). 2. Авторское свидетельство СССР2. USSR author's certificate