SU574471A1 - Штамп плесневого гриба -т-продуцент целлолитических ферментов - Google Patents

Description

1

Изобретение относитс  к микробиологии, в частности к новым штаммам плесневого гриба , используемого дл  гидролиза целлюлозосодержащих растительных субстратов при силосовании грубых кормов в производстве спирта, а также дл  получепи  сахаристых растворов из отходов пищевой и деревообрабатывающей промышленности.

Известны различные штаммы плесневых грибов, примен емых дл  гидролиза целлюлозосодержащих растительных субстратов, например , штамм Trichoderma veride Ген-К-910-продуцент целлолитических ферме тов I.

Наиболее близок к изобретению известный штамм плесневого гриба Trichoderma lignorum 6с-24, используемый дл  биосинтеза целлолитических ферментов 2.

Известные штаммы обладают невыгодной активностью целлолитических ферментов и обильным конидиеобразованием, что приводит к загр знению окружающей среды и ухудшает услови  работы.

Цель изобретени  - получение штамма с повышенной активностью целлолитических ферментов и слабым конидиеобразованием, обеспечивающим, следовательно, увеличение выхода конечных продуктов гидролиза.

Штамм плесневого гриба Trichoderma specics Т-продуцент целлолитических ферментов выделен из иочвы и хранитс  в коллекции культур Всесоюзного научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов под номером ЦМПА1Р-83.

Активность целлолитических ферментов штамма стабилизирована при длительном культивировании на агаризованной среде с таурином (2-аминоэтансульфонова  кислота) с концентрацией 0,001%.

Штамм Trichoderma species Т-продуцент целлолитических ферментов культивируетс  в поверхиостиых услови х на стерильной, твердой , увлажненной до 64-65% питательной среде.

Активность целлюлозы Сгфермента в готовой культуре составл ет 400-500 ед/г сухой культуры.

Активность целлюлозы d определ ют по гидролизу фильтровальной бумаги по известной методике.

В готовой культуре за 48-60 ч роста конидии почти отсутствуют.

Морфологические признаки. Мицелий бесцветный , распростертый. Растет дерновинкой или паутинообразно. Дерновннки подушковидные , выпуклые, сначала белые, потом желтозеленые и темно-зеленые. Конидиеносцы в виде боковых ответвлений гиф воздушного мицели , большей частью вильчато- или тройчаторазветвленные , бесцветные. Стеригмы бутылевидные или конусовидные, слегка изогнутые , расположенные мзтовками по 2-3 или одиночные размером 6,5-13,5x3,5-4 мкм. Конидии овально-шаровидные в диаметре 3,5-5,0 (5,5) мкм, собранные в головки, в массе белые, желто-зеленые или темно-зелеиые .

Культуральные признаки. Синтетическа  среда Чапека с сахарозой. Посевы уколом. Через 7 суток роста при температуре 28- 30°С колонии распростертые, рост неоднородный , иногда дерновинкой. Диаметр колоний 9-10 см. Вначале развиваетс  бесцветный стел гцийс  мицелий. Воздушный мицелий тонкий, слегка приподн тый, бесцветный. Конидии в виде зеленых и белых подушечек, расположенных в центре. Среда окрашиваетс  в  рко-желтый цвет, образует желтый пигмент , который диффундирует в среду.

Сусло-агар (4,8 баллинга + 1 % измельченной фильтровальной бумаги). Колонии распростертые , через 4-5 суток роста при температуре 28-30°С до 70 мм. Воздушный мицелий прижатый, ииогда паутииистый, рост неоднородный, иногда дерновинкой. На 5-6-е сутки роста по кра м по вл ютс  конидии, доход щне до центра колонии, вначале светлые, затем с зеленоватым оттенком. Обратна  сторона агара окрашена в  рко-желтый цвет. Образует желтый пигмент, который диффундирует в среду.

Среда состава, %: измельченна  фильтровальна  бумага-1; (NH4)2SO4 - 0,15; NaNOs -0,15; КН2Р04 -0,15; MgSO4-7H20- 0,05; 10%-ный экстракт пшеничных отрубей 300 мл; водопроводна  вода до 1 л плюс 2% агара. Посев уколом. Колонии распростертые, мицелий иногда паутинистый, иногда дерновинкой . Конидии по вл ютс  на 4-5-е сутки по кра м, затем разрастаютс  но всей колонии . Обратна  сторона окрашена в слабожелтый цвет.

Синтетическа  среда Чапека с крахмалом (среда Гаузе-1). Посев уколом. Через 10- 12 суток роста при 28-30°С диаметр колоний 4-5 мм, в месте укола на 12-15-е сутки образуютс  конидии в виде редких белых или бледно-зеленых с желтоватым оттенком нодушечек . Среда окрашиваетс  в интенсивно-желтый цвет.

Ломтики картофел . Посев штрихом. Через 14-15 суток роста при 28-30°С колони  закрывает всю поверхность ломтика - сплошпа  кочковата  дерновинка, окрашенна  в светло-зеленый цвет с отдельными участками темно-зеленого или светло-желтого цвета, конидиеобразование обильное, субстрат с обратной стороны интенсивно окрашен в  рко-желтый цвет.

Физиологические признаки. Отношение к источникам углерода. Ассимилирует глюкозу, галактозу, лактозу, мальтозу, ксилозу, маннозу , сахарозу, глицерин.

Клетчатку гидролизует до глюкозы, крахмал гидролизует очень слабо.

Отношение к источнику азота. Питраты восстанавливает к 30-ти суткам инкубировани .

Желатину не разжижает за 30 ч инкубации.

Молоко пептонизирует очень слабо при рН

Claims (2)

1.Авторское свидетельство СССР №399522, кл. С 12D 13/10, 1971.

2.Авторское свидетельство СССР № 482494, кл. С I2D 13/10, 1975.