SK150596A3 - Agonists and antagonists of human interleukin-10 - Google Patents
Agonists and antagonists of human interleukin-10 Download PDFInfo
- Publication number
- SK150596A3 SK150596A3 SK1505-96A SK150596A SK150596A3 SK 150596 A3 SK150596 A3 SK 150596A3 SK 150596 A SK150596 A SK 150596A SK 150596 A3 SK150596 A3 SK 150596A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- human
- agonist
- agonists
- amino acid
- amino
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/5428—IL-10
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Oblasť technikyTechnical field
Tento vynález sa týka agonistov ľudského interleukínu-10, spôsobu ich prípravy a použitia. Títo agonisti sa tvoria substitúciou alebo deléciou karboxy- alebo aminokouca aminokyselín v dospelom ľudskom interleukíne-10.The present invention relates to human interleukin-10 agonists, to a process for their preparation and use. These agonists are formed by substitution or deletion of carboxy- or amino-amino acids in adult human interleukin-10.
Doterajší stav technikyBACKGROUND OF THE INVENTION
Interleukín-10 (IL-10) je cytokín schopný sprostredkovávať množstvo pôsobení alebo účinkov. IL-10 bol izolovaný ako z myšacích, tak aj z ľudských buniek a je zapojený do riadenia imunitnej odpovede rôznych tried alebo súborov CD4+ T pomocných (Th) buniek. Tieto Th bunky môžu byť rozdelené na rôzne súbory, ktoré sa odbšujú svojimi profilmi tvorby cytokínov. Dva z týchto súborov sa nazývajú Thl a Th2 bunky.Interleukin-10 (IL-10) is a cytokine capable of mediating a number of actions or effects. IL-10 has been isolated from both murine and human cells and is involved in controlling the immune response of various classes or sets of CD4 + T helper (Th) cells. These Th cells can be subdivided into a variety of sets, which deplete their cytokine production profiles. Two of these pools are called Th1 and Th2 cells.
Klony T buniek Thl tvoria interleukín-2 (IL-2) a gama interferón (IFN-γ), zatiaľ čo klony T buniek Th2 secemujú IL-10, interleukín-4 (IL-4) a interleukín-5 (IL-5), všeobecne po aktivácii antigénmi a lektínmi. Obe triedy Th bunkových klonov produkujú cytokíny, ako je nádorový nekrózový faktor-α (TNF'-a), interleukín-3 (IL-3) a faktor stimulácie kolónií granulocytov-makrofágov (GM-CSF). Tretia kategória Th buniek (ThO) tvorí súčasne IL-2, IFN-γ, IL-4, IL-5, TNF-α, IL-3 a GM-CSF.Th1 T cell clones consist of interleukin-2 (IL-2) and gamma interferon (IFN-γ), whereas Th2 T cell clones secrete IL-10, interleukin-4 (IL-4) and interleukin-5 (IL-5) , generally after activation by antigens and lectins. Both classes of Th cell clones produce cytokines such as tumor necrosis factor-α (TNF'-α), interleukin-3 (IL-3) and granulocyte-macrophage colony stimulation factor (GM-CSF). The third category of Th cells (ThO) consists simultaneously of IL-2, IFN-γ, IL-4, IL-5, TNF-α, IL-3 and GM-CSF.
Rozdielne typy produkcie cytokínov Thl a Th2 bunkami sčasti odrážajú ich úlohy v odpovedi na rôzne patogény. Thl bunky sú napríklad zapojené v úspešných bunkových odpovediach na množstvo intercelulámych patogénov. Sú zapojené aj v hypersenzitívnych reakciách oneskoreného typu. Th2 bunky sú spojené s humorálnymi odpoveďami, ktoré sú charakterizované tvorbou protilátok. Vo väčšine situácií vyvinie imunitný systém Th odpoveď, ktorá je na elimináciu konkrétneho antigénu alebo patogénu najúčinnejšia, ale nie je tomu tak vždy.Different types of Th1 and Th2 cytokine production by cells partly reflect their roles in response to various pathogens. For example, Th1 cells are involved in successful cellular responses to a variety of intercellular pathogens. They are also involved in delayed-type hypersensitivity reactions. Th2 cells are associated with humoral responses that are characterized by antibody production. In most situations, the immune system develops a Th response that is most effective in eliminating a particular antigen or pathogen, but not always.
Napríklad: leishmanióza je charakterizovaná defektnou odpoveďou Thl. Tento defekt môže byť demonštrovaný použitím in vitro testov, ako je test opísaný Clericim et al. [J. Clin. Invest. 84:1983 (1989)]. Použitím jedného takéhoto in vitro testu bolo ukázané, že defekt Thl odpovede možno pripísať endogénnym hladinám IL-10, pretože funkciu Thl možno napraviť pridaním neutralizujúcich protilátok proti IL-10.For example: leishmaniasis is characterized by a defective Thl response. This defect can be demonstrated using in vitro assays, such as the assay described by Clerici et al. [J. Clin. Invest. 84: 1983 (1989)]. Using one such in vitro assay, it has been shown that a Th1 response defect can be attributed to endogenous levels of IL-10, since Th1 function can be corrected by the addition of neutralizing antibodies against IL-10.
Pretože leishmanióza a iné choroby sú charakterizované defektnou odpoveďou Thl, ktorú možno pripísať nenáležitému pôsobeniu endogénneho IL-10, nastáva potreba agonistov a antagonistov IL-10 na liečbu takýchto chorôb.Since leishmaniasis and other diseases are characterized by a defective Th1 response attributable to the inappropriate action of endogenous IL-10, there is a need for IL-10 agonists and antagonists to treat such diseases.
Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION
Podstatou tohto vynálezu je agonista ľudského IL-10, ktorý zahŕňa dospelý ľudský IL-10 modifikovaný deléciou jedného až jedenástich aminotermálnych aminokyselinových zvyškov.The present invention provides a human IL-10 agonist that includes adult human IL-10 modified by deletion of one to eleven amino-terminal amino acid residues.
Riešenie sa týka tiež nukleových kyselín kódujúcich týchto agonistov, rekombinantných vektorov a transformovaných hostiteľských buniek obsahujúcich takéto nukleové kyseliny, spôsobu prípravy agonistov a ich použitia.The invention also relates to nucleic acids encoding these agonists, recombinant vectors, and transformed host cells containing such nucleic acids, to a method of preparing agonists and to their use.
Výraz “dospelý ľudský IL-10“ je definovaný ako bielkovina bez zavádzacej sekvencie, ktorá (a) má aminokyselinovú sekvenciu v podstate zhodnú so sekvenciou IV definovanou tu nižšieThe term "adult human IL-10" is defined as a protein without a leader sequence (a) having an amino acid sequence substantially identical to sequence IV as defined herein below
Ser Pro Gly Gin Gly Thr Gin Ser Glu Asn Ser Cys Thr His Phe ProSer Gly Gin Gly Thr Gin Ser Glu Asn Ser Cys Thr His Phe Pro
5 10 155 10 15
Gly Asn Leu Pro Asn Met Leu Arg Asp Leu Arg Asp /da Phe Ser ArgGly Asn Leu For Asn Met
25 3025 30
Val Lys Thr Phe Phe Gin Met Lys Asp Gin Leu Asp Asn Leu Leu LeuVal Lys Thr Phe Phe Gin Met
40 4540 45
Lys Glu Ser Leu Leu Glu Asp Phe Lys Gly Tyr Leu Gly Cys Gin AlaLys Glu Ser Phu Leu Glu Asp Phe
55 6055 60
Leu Ser Glu Met íle Gin Phe Tyr Leu Glu Glu Val Met Pro Gin AlaLeu Ser Glu Met I Gin Phe Tyr Leu Glu Glu Val Met Pro Gin Ala
70 75 8070
Glu Asn Gin Asp Pro Asp íle Lys Ala His Val Asn Ser Leu Gly GluGlu Asn Gin Asp For Asp Lys Ala His Val Asn Ser Leu Gly Glu
90 9590 95
Asn Leu Lys Thr Leu Arg Leu Arg Leu Arg Arg Cys His Arg Phe LeuAsn Leu Lys Thr Arg Leu Arg Arg Leu Arg Arg Arg Cys His Arg Phe Leu
100 105 110100 105 110
Pro Cys Glu Asn Lys Ser Lys Ala Val Glu Gin Val Lys Asn Ala PheFor Cys Glu Asn Lys Ser Lys Ala Glu Gin Val Lys Asn Ala Phe
115 120 125115 120 125
Asn Lys Leu Gin Glu Lys Gly íle Tyr Lys Ala Met Ser Glu Phe AspAsn Lys Leu Gin Glu Lys Gly White Tyr Lys Ala Met Ser Glu Phe Asp
130 135 140 íle Phe He Asn Tyr íle Glu Ala Tyr Met Thr Met Lys íle Arg Asn 145 150 155 160 (IV), a (b) má biologickú aktivitu, ktorá je bežná u natívneho IL-10. Toto zahŕňa prirodzené alelické varianty a iné varianty, majúce jednu alebo viac konzervatívnych aminokyselinových substitúcií [ Grantham, Science 185: 862 (1974) ], ktoré v podstate nenarúšajú biologickú aktivitu. Takéto konzervatívne substitúcie zahŕňajú skupiny synonymných aminokyselín, napr. ako je opísané v U.S. patente číslo 5 017 691 Leeho et al.130 135 140 Phe He Asn Tyr Glu Ala Tyr Met Thr Met Lys Arg Asn 145 150 155 160 (IV), and (b) has the biological activity common to native IL-10. This includes natural allelic variants and other variants having one or more conservative amino acid substitutions [Grantham, Science 185: 862 (1974)] that do not substantially impair biological activity. Such conservative substitutions include groups of synonymous amino acids, e.g. as described in U.S. Pat. No. 5,017,691 to Lee et al.
Môžu byť tiež uskutočňované viac alebo menej rozsiahle delécie. Deletovaných môže byť jeden alebo viac aminokyselinových zvyškov, zahŕňajúcich asi 12 karboxyterminálnych zvyškov. Výhodne sa deletuje asi 8 terminálnych zvyškov, výhodnejšie 3 alebo 4 terminálne zvyšky.More or less extensive deletions may also be performed. One or more amino acid residues may be deleted, including about 12 carboxyterminal residues. Preferably, about 8 terminal residues are deleted, more preferably 3 or 4 terminal residues.
Prekvapujúco bolo zistené, že môže byť deletovaných až 11 aminokyselinových zvyškov z aminokonca dospelého ľudského IL-10. Tieto skrátené varianty, ktoré môžu mať v porovnaní so samotným IL-10 odlišné farmakokinetické vlastnosti, majú biologickú aktivitu dospelého ľudského IL-10, ako bolo zmerané pomocou testu stimulácie MC/9 žírnych buniek. Preto sú užitočné pri liečbe všetkých indikácií vnímavých na liečbu samotným IL-10. Užitočné sú tiež aj na niektoré iné účely, napr. na afmitné čistenie.Surprisingly, it has been found that up to 11 amino acid residues can be deleted from the amino terminus of adult human IL-10. These truncated variants, which may have different pharmacokinetic properties compared to IL-10 alone, have adult human IL-10 biological activity as measured by the MC / 9 mast cell stimulation assay. Therefore, they are useful in the treatment of all indications susceptible to treatment with IL-10 alone. They are also useful for some other purposes, e.g. for affinity purification.
Pretože majú biologickú aktivitu ľudského IL-10, ale majú skrátenú aminokyselinovú sekvenciu, odkazuje sa tu na tieto varianty tiež ako na “agonistov ľudského IL-10“.Because they have the biological activity of human IL-10 but have a shortened amino acid sequence, these variants are also referred to herein as "human IL-10 agonists".
Všeobecne sa prijíma, že cysteŕnový zvyšok v polohe 12 je esenciálny pre biologickú aktivitu. Skutočne : deléciou prvých 12 zvyškov, včítane tohto cysteínového zvyšku, vznikla varianta, ktorá nemala žiadnu biologickú aktivitu. Preto sú delécie v aminokonci obmedzené na deléciu jedného alebo viacerých z prvých 11 zvyškov.It is generally accepted that the cysteine residue at position 12 is essential for biological activity. Indeed, deletion of the first 12 residues, including this cysteine residue, resulted in a variant that had no biological activity. Therefore, amino-terminal deletions are limited to the deletion of one or more of the first 11 residues.
Nukleové kyseliny, kódujúce agonistov IL-10, sú tiež súčasťou tohto vynálezu.Odbomíci vedia, že v dôsledku degenerácie genetického kódu existuje mnoho rôznych nukleových kyselín, ktoré môžu kódovať každého agonistu a antagonistu. Konkrétne použité kodóny môžu byť vybrané na základe pohodlnej konštrukcie a optimálnej expresie v prokaryotických a eukaryolických systémoch.Nucleic acids encoding IL-10 agonists are also part of the present invention. Those of skill in the art will recognize that due to the degeneracy of the genetic code, there are many different nucleic acids that can encode each agonist and antagonist. In particular, the codons used may be selected based on convenient construction and optimal expression in prokaryotic and eukaryolic systems.
Výhodne sa nukleové kyseliny, kódujúce agonistov, pripravujú použitím polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) [Saiki etal., Science 239: 487 (1988)], ako je to podané v príklade Daughertyho et al. [Nucleic Acid Res. 19: 2471 (1991)], na modifikáciu cDNK kódujúcej ľudský IL-10. Takáto cDNK je dobre známa v odbore a možno ju pripravovať použitím štandardných metód opísaných napr. v publikácii medzinárodnej patentovej prihlášky číslo WO 91/00349. Klony obsahujúce sekvencie kódujúce ľudský IL-10 sú tiež deponované v American Type Culture Collection (ATCC), Rockville, Maryland, pod číslami 68191 a 68192.Preferably, agonist-encoding nucleic acids are prepared using a polymerase chain reaction (PCR) [Saiki et al., Science 239: 487 (1988)], as exemplified by Daugherty et al. [Nucleic Acid Res. 19: 2471 (1991)], to modify the cDNK encoding human IL-10. Such cDNK is well known in the art and can be prepared using standard methods described e.g. in International Patent Application Publication No. WO 91/00349. Clones containing sequences encoding human IL-10 are also deposited at the American Type Culture Collection (ATCC), Rockville, Maryland, under numbers 68191 and 68192.
Alternatívne môže byť DNK modifikovaná použitím dobre známych techník riadenej mutagenézy. Viď napr. Gillman et al., Gene 8: 81 (1979), Roberts et al., Náture 328: 731 (1987) alebo Innis (ed.), 1990, PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications, Academic Press, New York, N Y.Alternatively, the DNA may be modified using well-known directed mutagenesis techniques. See e.g. Gillman et al., Gene 8: 81 (1979), Roberts et al., Nature 328: 731 (1987) or Innis (ed.), 1990, PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications, Academic Press, New York, N Y.
Nukleové kyseliny podľa tohto vynálezu môžu byť tiež syntetizované chemicky použitím napr. fosfoamidovej metódy na pevnej fáze podľa Matteucciho et al. [J. Am. Chem. Soc. 103: 3185 (1981)], metódy Yoo et al. [J. biol. Chem. 764: 17078 (1989)] alebo iných dobre známych metód.The nucleic acids of the invention can also be synthesized chemically using e.g. the solid phase phosphoamide method of Matteucci et al. [J. Am. Chem. Soc. 103: 3185 (1981)], the methods of Yoo et al. [J. Biol. Chem. 764: 17078 (1989)] or other well known methods.
Rekombinantné vektory, obsahujúce tieto nukleové kyseliny, sú tiež súčasťou tohto vynálezu, ako aj hostiteľské bunky transformované týmito vektormi a spôsob prípravy agonistov.Recombinant vectors containing these nucleic acids are also part of this invention as well as host cells transformed with these vectors and a method for preparing agonists.
Inzercia DNK, kódujúcej jedného z agonistov, do jedného z množstva známych vektorov expresie, sa ľahko uskutoční, ak konce tejto DNK, tak aj vektora, obsahujú kompatibilné reštrikčné miesta. Pokiaľ toto nie je možné uskutočniť, môže byť potrebné modifikovať zakončenia týchto DNK a/alebo vektora spätnou digesciou prečnievajúcich úsekov jednovláknovej DNK, vytvorených Štiepením reštrikčnou endonukleázou, na vytvorenie tupého konca alebo na dosiahnutie toho istého výsledku zaplnením jednovláknových zakončení náležitou DNK polymerázou.Insertion of the DNA encoding one of the agonists into one of a variety of known expression vectors is readily accomplished if the ends of the DNA and the vector contain compatible restriction sites. If this is not possible, it may be necessary to modify the ends of these DNAs and / or the vector by back-digging the overlapping regions of the single-stranded DNA created by restriction endonuclease digestion to create a blunt end or to achieve the same result by filling the single-stranded ends with the appropriate DNA polymerase.
Alternatívne, akékoľvek žiadané miesto môže byť vytvorené ligáciou nukleotidových sekvencii (spojok) na tieto zakončenia. Tieto spojky môžu obsahovať špecifické oligonukleotidové sekvencie, ktoré definujú žiadané reštrikčné miesto. Štiepený vektor a fragmenty DNK môžu byť , ak je to potrebné, modifikované aj homopolymémym predĺžením alebo PCR.Alternatively, any desired site can be generated by ligating nucleotide sequences (linkers) to these termini. These linkers may contain specific oligonucleotide sequences that define the desired restriction site. The cleaved vector and DNA fragments can, if necessary, be modified by homopolymeric extension or PCR.
Agonisti môžu byť chemicky syntetizovaní vhodnou metódou, ako je syntéza výhradne na pevnej fáze, metódami čiastočne na pevnej fáze, kondenzáciou fragmentov alebo klasickou syntézou v roztoku. Chemicky syntetizované polypeptidy sú výhodne pripravované peptidovou syntézou na pevnej fáze, napr. ako je opísaná Merrifieldom [ J. Am. Chem. Soc. 85: 2149 (1963), Science 232: 341 (1986) ] a Athertonom et al., (Solid Phase Peptíde Synthesis: A Practical Approach, 1989, IRL Press, Oxford ).Agonists can be chemically synthesized by a suitable method, such as solely solid phase synthesis, partially solid phase methods, fragment condensation, or classical solution synthesis. Chemically synthesized polypeptides are preferably prepared by solid phase peptide synthesis, e.g. as described by Merrifield [J. Am. Chem. Soc. 85: 2149 (1963), Science 232: 341 (1986)] and Atherton et al., (Solid Phase Peptide Synthesis: A Practical Approach, 1989, IRL Press, Oxford).
Akýmkoľvek spôsobom pripravených agonistov možno čistiť použitím HPLC, gélovej filtrácie, ionomeničovej a partičnej chromatografie, protiprúdového delenia alebo iných dobre známych spôsobov.Any agonist prepared by any method can be purified using HPLC, gel filtration, ion exchange and partition chromatography, countercurrent separation or other well known methods.
Farmaceutické prostriedky môžu byť pripravené zmiešaním jedného alebo viacerých agonistov IL-10 alebo ich farmaceutický prijateľných solí s farmaceutický prijateľným nosičom.The pharmaceutical compositions may be prepared by admixing one or more IL-10 agonists or pharmaceutically acceptable salts thereof with a pharmaceutically acceptable carrier.
Vhodnými farmaceutickými nosičmi môžu byť akékoľvek kompatibilné netoxické látky, ktoré sú vhodné na podávanie prostriedkov podľa vynálezu pacientovi.Suitable pharmaceutical carriers can be any compatible non-toxic substances which are suitable for administering the compositions of the invention to a patient.
Nosič môže obsahovať vodu, alkohol, tuky, vosky a inertné tuhé látky. Do farmaceutického prostriedku môže byť tiež začlenené farmaceutický prijateľné adjuvans ( pufŕačné činidlo, dispergačné činidlo ). Všeobecne sú prostriedky užitočné na parenterálne podávanie takýchto liekov, dobre známe, napr. Remington 's Pharmaceutical Science, 18. vydanie (Mack Publishing Company, Easton, P A, 1990). Balenie po jednotlivých dávkach je často výhodné, napr. v sterilnej forme.The carrier may comprise water, alcohol, fats, waxes, and inert solids. A pharmaceutically acceptable adjuvant (buffering agent, dispersing agent) may also be incorporated into the pharmaceutical composition. In general, compositions useful for parenteral administration of such drugs are well known, e.g. Remington's Pharmaceutical Science, 18th Edition (Mack Publishing Company, Easton, P.A., 1990). Single-dose packaging is often preferred, e.g. in sterile form.
Podávanie agonistov je výhodne parenterálne, pomocou intraperitoneálnych, intravenóznych, subkutánnych alebo intramuskulámych injekcií alebo infúzií alebo pomocou akéhokoľvek iného prijateľného systémového spôsobu. Alternatívne môže byť agonista podávaný implantovateľným alebo injikovateľným systémom dodávania lieku, [ viď napr. Urquhart et al., Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 24: 199 (1984), Lewis, ed., Controlled Release of Pesticides and Pharmaceuticals, 1981, Plénum Press, New York, New York, U.S. patenty číslo 3 773 991 a 3 270 960 ]. Možno uskutočňovať aj orálné podávanie, podávaním dobre známych prípravkov, ktoré chránia agonistu pred gastrointestinálnymi proteázami.Viď tiež Langer, Science 249: 1527 (1990).The administration of the agonists is preferably parenterally, by intraperitoneal, intravenous, subcutaneous or intramuscular injection or infusion, or any other acceptable systemic route. Alternatively, the agonist may be administered by an implantable or injectable drug delivery system. Urquhart et al., Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 24: 199 (1984), Lewis, ed., Controlled Release of Pesticides and Pharmaceuticals, 1981, Plenum Press, New York, New York, U.S. Pat. U.S. Patent Nos. 3,773,991 and 3,270,960]. Oral administration may also be accomplished by administering well known formulations that protect the agonist from gastrointestinal proteases. See also Langer, Science 249: 1527 (1990).
Agonisti môžu byť podávaní aj štandardnými technikami génovej terapie, včítane napr. priamej injekcie nukleovej kyseliny do tkanív, použitia rekombinantných vírusových vektorov alebo lipozómov a implantácie transfekovaných buniek. Viď napr. Rosenberg, J. Clin. Oncol. 10: (1992).Agonists can also be administered by standard gene therapy techniques, including e.g. direct injection of nucleic acid into tissues, use of recombinant viral vectors or liposomes, and implantation of transfected cells. See e.g. Rosenberg, J. Clin. Oncol. 10: 1992.
Agonisti môžu byť podávaní samotní alebo v kombinácii s jedným alebo s viacerými inými činidlami bežne používanými na liečenie stavov charakterizovaných defektnou Th odpoveďou. Inzulín, cyklosporin, prednizón alebo azatioprm môžu byť podávané spolu s agonistom, napr. ak sa používajú ako náhrada za IL-10 na liečbu alebo prevenciu od inzulínu závislého diabetes mellitus ( viď súčasne podanú U.S. prihlášku číslo 07/955 523 z l.októbra 1992 ).Agonists may be administered alone or in combination with one or more other agents commonly used to treat conditions characterized by a defective Th response. Insulin, cyclosporin, prednisone or azathioprm may be administered together with an agonist, e.g. when used as a replacement for IL-10 for the treatment or prevention of insulin dependent diabetes mellitus (see co-pending U.S. application Ser. No. 07 / 955,523, Oct. 1, 1992).
Toto spoločné podávanie jedného alebo viacerých činidiel môže byť súbežné (spolu s) alebo postupné (pred alebo po) vzhľadom na podanie agonistu alebo antagonistu. Všetky podávané činidlá musí mať pacient v dostatočných hladinách, aby boli farmaceutický účinné. Typicky: pokiaľ sa druhé činidlo podá počas asi polčasu prvého činidla, považuje sa podanie týchto dvoch činidiel za spoločné.The co-administration of one or more agents may be concurrent (together with) or sequential (before or after) with respect to administration of the agonist or antagonist. All agents administered must have the patient at sufficient levels to be pharmaceutically effective. Typically, when the second agent is administered for about half-life of the first agent, administration of the two agents is considered to be common.
Stanovenie príslušného dávkovania agonistu pre konkrétnu situáciu spadá pod znalosti v odbore. Všeobecne sa liečba začína menšími dávkami ako je optimum. Potom sa dávkovanie zvyšuje s malými odchýlkami, kým sa nedosiahne optimálny účinok pri daných podmienkach. Ak je to žiadúce, môže byť vhodné rozdeliť celkovú dennú dávku a podávať ju po častiach.Determination of the appropriate agonist dosage for a particular situation is within the skill of the art. Generally, treatment is initiated at lower doses than optimal. Thereafter, the dosage is increased with slight variations until the optimum effect under the conditions is achieved. If desired, it may be appropriate to divide the total daily dose and administer it in portions.
Účinným množstvom je dávka, ktorá vedie k preukázateľnému zlepšeniu jedného alebo viacerých klinických parametrov alebo k štatisticky významnému zlepšeniu odpovede v jednej alebo vo viacerých známych Th funkciách; niektoré z nich, ako tvorba ĽL-2, sú opísané vyššie. Táto odpoveď môže byť meraná in vitro pri použití krvných buniek odobraných pacientovi, napr. ako je opísané v Clerici et al., ako vyššie. Takýto in vitro test možno uskutočniť pred začiatkom liečby na poskytnutie základnej referenčnej hodnoty, s ktorou sa môže zlepšená odpoveď porovnávať.An effective amount is a dose that results in a demonstrable improvement in one or more clinical parameters or in a statistically significant improvement in response in one or more known Th functions; some of them, such as IL-2 formation, are described above. This response can be measured in vitro using blood cells taken from a patient, e.g. as described in Clerici et al., supra. Such an in vitro assay may be performed prior to initiation of treatment to provide a baseline reference with which an improved response can be compared.
Skutočné množstvo a počet dávok agonistov a ich farmaceutický prijateľných solí konkrétnemu pacientovi, je regulované podľa posúdenia ošetrujúceho lekára, s prihliadnutím na také faktory, ako je vek, stav a veľkosť pacienta a stupeň symptómu(ov), ktorý sa lieči.The actual amount and number of doses of agonists and their pharmaceutically acceptable salts to a particular patient is regulated at the discretion of the attending physician, taking into account factors such as the age, condition and size of the patient and the degree of symptom (s) being treated.
Príklady uskutočnenia vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Tento vynález môže byť vysvetlený nasledujúcimi príkladmi. Pokiaľ nie je špecifikované inak, percentá udané nižšie pre tuhé látky v tuhých látkach, kvapaliny v kvapalinách resp. tuhé látky v kvapalinách, sú založené na pomeroch hmotnosť/hmotnosť, objem/objem, resp. hmotnosť/objem.The present invention can be explained by the following examples. Unless otherwise specified, the percentages given below for solids in solids, liquids in liquids, respectively. solids in liquids are based on the weight / weight, volume / volume, resp. weight / volume.
Reagencie a všeobecné metódyReagents and general methods
Reštrikčné endonukleázy boli získané od Boehringer Mannheim (Indianopobs, IN ), zatiaľ čo súprava na ligáciu DNK bola obstaraná od Takara Biochem., Inc. (Berkley, CA). Taq polymeráza a Pfu polymeráza boli získané zo Stratagene (La Jóba, CA). Rekombinantný ľudský IL-10 ( hIL-10 ) bol pripravený štandardným spôsobom v bunkách vaječníkov čínskeho škrečka ( CHO ), ako je to v podstate opísané v Tsujimoto et al. [ J. Biochem. 106: 23 (1989)]. Médium na tkanivové kultúry, fetálne bovinné sérum a glutamín boli získané od Gibco-BRL (Gaithesburg, MD). Oligonukleotidové priméry boli syntetizované štandardm/mi metódami použitím DNK syntetizátora Applied Biosystems 380A, 380B alebo 394 (Foster City, CA).Restriction endonucleases were obtained from Boehringer Mannheim (Indianopobs, IN), while the DNA ligation kit was purchased from Takara Biochem., Inc. (Berkley, CA). Taq polymerase and Pfu polymerase were obtained from Stratagene (La Joba, CA). Recombinant human IL-10 (hIL-10) was prepared in a standard manner in Chinese hamster ovary (CHO) cells, essentially as described in Tsujimoto et al. [J. Biochem. 106: 23 (1989)]. Tissue culture medium, fetal bovine serum and glutamine were obtained from Gibco-BRL (Gaithesburg, MD). Oligonucleotide primers were synthesized by standard methods using an Applied Biosystems 380A, 380B or 394 DNA synthesizer (Foster City, CA).
Štandardné metódy rekombinantnej DNK sa uskutočôovab v podstate tak, ako ich opisuje Sambrook et al. n Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2. vydanie, 1989, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Plainview, New York.Standard recombinant DNA methods are performed essentially as described by Sambrook et al. n Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, 1989, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Plainview, New York.
Transfekciatransfection
Transientná expresia sa uskutočňovala nasledovne. Bunky COS ( ATCC CRL 1651 ) bob udržiavané v Dulbeccovom modifikovanom Eaglovom médiu ( DMEM ) doplnenom 10 % fetálnym bo vinným sérom, 6 mM glutamínom a penicilínom/streptomycínom. Transfekcia sa uskutočnila elektroporáciou s použitím Bio-Rad GENE PULSERr ( Richmond, CA ).Transient expression was performed as follows. COS (ATCC CRL 1651) bob cells maintained in Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) supplemented with 10% fetal bovine serum, 6 mM glutamine and penicillin / streptomycin. By electroporation using a Bio-Rad Gene Pulser R (Richmond, CA).
Bunky bob uvoľnené z kultivačných misiek pôsobením trypsínu-EDTA a suspendované v čerstvom kultivačnom médiu. Asi 5 x 106 buniek v objeme 250 μΐ bolo zmiešaných s 5 pg plazmidovej DNK a potom elektroporovaných pri napätí nastavenom na 0,2 V a kapacite nastavenej na 960 mFD:Bob cells released from the culture dishes by trypsin-EDTA treatment and suspended in fresh culture medium. About 5 x 10 6 cells in a volume of 250 μΐ were mixed with 5 µg of plasmid DNA and then electroporated at a voltage set at 0.2 V and a capacity set at 960 mFD:
Po elektroporácii bob bunky prenesené do 10 cm kultivačných misiek a kultivované v 5 % CO2 pri 37 °C počas 6 hodín v 10 ml sérum obsahujúceho DMEM. Keď sa bunky prichytib na misky, médium bolo odstránené odsatím a nahradené bezsérovým médiom. Po 72 hodinách bolo kondicionované médium zobrané na analýzu.After electroporation, the bob cells were transferred to 10 cm culture dishes and cultured in 5% CO 2 at 37 ° C for 6 hours in 10 ml serum containing DMEM. When cells were attached to the dishes, the medium was removed by aspiration and replaced with serum-free medium. After 72 hours, the conditioned medium was collected for analysis.
Aminoterminálna modifikáciaAminoterminal modification
Na vytvorenie N-koncových variantov ľudského IL-10 boli pomocou PCR syntetizované modifikované cDNK fragmenty zodpovedajúce Pstl/Bglll oblasti hIL-10 cDNA divého typu, s použitím páru primérov bez DNK templátu. Výsledné fragmenty bob použité na náhradu zodpovedajúcej oblasti hIL-10 DNK divého typu vo vektore pSV. Šport. Takto bob vytvorené varianty, v ktorých bolo z N-konca hIL-10 divého typu deletovaných 7 (variant ΝΔ7), 10 (variant ΝΔ10), 11 (variant ΝΔ11) a 12 (variant ΝΔ12) aminokyselín. Páry primérov, použité na vytvorenie každého variantu s následnými číslami sekvencií definujúcimi ich sekvencie, bob nasledovné:To generate N-terminal variants of human IL-10, modified cDNK fragments corresponding to the PstI / BglII region of the hIL-10 wild-type cDNA were synthesized by PCR using a primer pair without a DNA template. The resulting bob fragments used to replace the corresponding region of the hIL-10 wild-type DNA in the pSV vector. Sports. Thus, variants were generated in which 7 (variant ΝΔ7), 10 (variant ΝΔ10), 11 (variant ΝΔ11) and 12 (variant ΝΔ12) amino acids were deleted from the N-terminus of wild-type hIL-10. The primer pairs used to generate each variant with consecutive sequence numbers defining their sequences, are as follows:
GACGACGGTG GCTGCAGCCG CCACCATGCA CAGCTCAGCA CTGCTCTGTT GCCTGGTCCT 60 CCTGACTGGG GTGAGGGCCT CTGAGAACAG C 91 (XI)GACGACGGTG GCTGCAGCCG CCACCATGCA CAGCTCAGCA CTGCTCTGTT GCCTGGTCCT 60 CCTGACTGGG GTGAGGGCCT CTGAGAACAG C 91 (XI)
GGCATCTCGG AGATCTCGAA GCATGTTAGG CAGGTTGCCT GGGAAGTGGG TGCAGCTGTT 60 CTCAGAGGCC CTCACCCCAG TCAGGAGGAC 90 (ΧΠ)GGCATCTCGG AGATCTCGAA GCATGTTAGG CAGGTTGCCT GGGAAGTGGG TGCAGCTGTT 61 CTCAGAGGCC CTCACCCCAG TCAGGAGGAC 90 (ΧΠ)
GACGACGGTG GCTGCAGCCG CCACCATGCA CAGCTCAGCA CTGCTCTGTT GCCTGGTCCT 60 CCTGÁCTGGG GTGAGGGCCA GC 82 (ΧΙΠ)GACGACGGTG GCTGCAGCCG CCACCATGCA CAGCTCAGCA CTGCTCTGTT GCCTGGTCCT 60 CCTGATCTGGG GTGAGGGCCA GC 82 (ΧΙΠ)
GGCATCTCGG AGATCTCGAA GCATGTTAGG CAGGTTGCCT GGGAAGTGGG TGCAGCTGTT 60 CCTCACCCCA GTCAGGAGGA C 81 (XIV)GGCATCTCGG AGATCTCGAA GCATGTTAGG CAGGTTGCCTGGGAAGTGGG TGCAGCTGTT 60 CCTCACCCCA GTCAGGAGGA C 81 (XIV)
GACGACGGTG GCTGCAGCCG CCACCATGCA CAGCTCAGCA CTGCTCTGTT GCCTGGTCCT 60 CCTGÁCTGGG GTGAGGGCCT GC 82 (XV)GACGACGGTG GCTGCAGCCG CCACCATGCA CAGCTCAGCA CTGCTCTGTT GCCTGGTCCT 60 CCTGATCTGGG GTGAGGGCCT GC 82 (XV)
GGCATCTCGG AGATCTCGAA GCATGTTAGG CAGGTTGCCT GGGAAGTGGG TGCAGCTGTT 60 CACCCCAGTC AGGAGGAC 78 (xvi)GGCATCTCGG AGATCTCGAA GCATGTTAGG GAGGTTGCCT GGGAAGTGGG TGCAGCTGTT 60 CACCCCAGTC AGGAGGAC 78 (xvi)
GACGACGGTG GCTGCAGCCG CCACCATGCA CAGCTCAGCA CTGCTCTGTT GCCTGGTCCT 60 CCTGÁCTGGG GTGAGGGCCA C 81 (XVII)GACGACGGTG GCTGCAGCCG CCACCATGCA CAGCTCAGCA CTGCTCTGTT GCCTGGTCCT 60 CCTGATCTGGG GTGAGGGCCA C 81 (XVII)
GGCATCTCGG AGATCTCGAA GCATGTTAGG CAGGTTGCCT GGGAAGTGGG TGCAGCTGTT 60 CCCAGTCAGG AGGAC 75 (xvni).GGCATCTCGG AGATCTCGAA GCATGTTAGG CAGGTTGCCT GGGAAGTGGG TGCAGCTGTT 60 CCCAGTCAGG AGGAC 75 (xin).
PCR sa uskutočňovala s použitím 10 pmol každého priméru z uvedených primérových párov, ako je to opísané vyššie pre syntézu C-tenninálnych mutantných antagonistov. PCR zmes bola spracovaná extrakciou fenolom-CHCb, zrazením etanolom a potom postupne digerovaná Bgffl. a Psň. Produkty reštrikčnej digescie boli podrobené elektroforéze v agarovom géli tak, ako je to opísané vyššie a DNK fragmenty majúce očakávané veľkosti boli vyrezané z gélu a získané extrakciou fenolom-CHCb a vyzrážaním etanolom.PCR was performed using 10 pmoles of each primer of the indicated primer pairs, as described above for the synthesis of C-terminal mutant antagonists. The PCR mixture was worked up by phenol-CHCl3 extraction, ethanol precipitation and then sequentially digested with Bgffl. and Song. The restriction digestion products were subjected to agarose gel electrophoresis as described above, and DNA fragments having the expected sizes were excised from the gel and obtained by phenol-CHCl3 extraction and ethanol precipitation.
Po získaní z gélu boli Psň! Bglň reštrikčné fragmenty hIL-10 variantov použité na náhradu zodpovedajúcej oblasti hIL-10 DNK divého typu vo pSV. Šport vektore po vyštiepení tejto oblasti Psň/ Bgňl digesciou a ligáciu nahrádzajúceho fragmentu. hlL10 mutantnej cDNK vo vektore založenom na pSV.Sport boli namnožené, overené a použité tak, ako je to opísané vyššie.After getting out of the gel they were Song! Bgl I restriction fragments of the hIL-10 variants used to replace the corresponding region of the hIL-10 wild-type DNA in pSV. Sport of the vector after digestion of this Ps / Bgl I region by digestion and ligation of the replacement fragment. The hIL10 mutant cDNKs in the pSV.Sport-based vector were propagated, verified and used as described above.
Výsledné varianty ΝΔ7, ΝΔ10, ΝΔ11 resp. ΝΔ12 mali amonikyselinové sekvencie definované zvyškami 8 - 160, 11 - 160, 12 - 160 resp. 13 - 160 sekvencie IV, vyššie.The resulting variants ΝΔ7, ΝΔ10, ΝΔ11 resp. ΝΔ12 had the amino acid sequences defined by residues 8-160, 11-160, 12-160, respectively. 13-160 of sequence IV, supra.
Metabolické označovanieMetabolic labeling
COS bunky boli transfekované tak, ako je to opísané vyššie, vektorom expresie pSV.Sport, ktorý nesie cDNK inzerty kódujúce ľudský IL-10; antagonistami K157E, CA3 alebo ΟΔ4; alebo variantmi agonistov ΝΔ7, ΝΔ10, ΝΔ11 alebo ΝΔ12. Bunky bob potom inkubované v 10 cm kultivačných miskách v 5 % CO2 pri 37 °C počas 48 až 72 hodín v sérum obsahujúcom kultivačnom médiu. Po tejto inkubách bob kultivačné misky dvakrát premyté fosfátovým soľným pufrom (PBS) a inkubované v 5 % CO2 pri 37 °C po dobu 30 minút s 8 ml/misku média DMEM bez metionínu a doplneného dialyzovaným FBS a glutamínom. Médium bolo z každej misky odstránené odsatím a <3 ŕ nahradené 500 μΐ média bez metionínu a obsahujúceho 250-300 pCi S-metionínu (DuPont NEN, Boston, MA; špecifická aktivita 43.3 mCi/ml).COS cells were transfected as described above with the pSV.Sport expression vector carrying cDNK inserts encoding human IL-10; K157E, CA3 or ΟΔ4 antagonists; or agonist variants of ΝΔ7, ΝΔ10, ΝΔ11 or ΝΔ12. The bob cells are then incubated in 10 cm culture dishes in 5% CO 2 at 37 ° C for 48-72 hours in serum containing culture medium. After this incubation, the bean culture plates were washed twice with phosphate salt buffer (PBS) and incubated in 5% CO 2 at 37 ° C for 30 minutes with 8 ml / dish of DMEM without methionine and supplemented with dialyzed FBS and glutamine. Media was removed from each well by aspiration and <3 µ replaced by 500 µΐ of methionine-free medium containing 250-300 µCi S-methionine (DuPont NEN, Boston, MA; specific activity 43.3 mCi / ml).
Bunky bob inkubované v 5 % CO2 pri 37 °C 5 hodín, potom sa do misiek pridalo 10 μΐ zo zásobného roztoku 1,5 mg/ml L- metionínu a vykonala sa 30 minútová inkubácia. Označené kondicionované médium bolo odobrané a podrobené elektroforéze na polyakrylamidovom géli s dodecylsulfátom sodným [SDS PAGE; Laemmli, Náture 227\ 680 (1970)] v 10 až 20 % géloch pri neredukujúcich podmienkach a gély bob vysušené a autorádiografované použitím štandardných metód a filmu Kodak XAR.Bob cells incubated in 5% CO 2 at 37 ° C for 5 hours, then 10 μΐ of a 1.5 mg / ml L-methionine stock solution was added to the dishes and incubated for 30 minutes. The labeled conditioned medium was collected and subjected to sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis [SDS PAGE; Laemmli, Nature 227/680 (1970)] in 10 to 20% non-reducing gels and bob gels dried and autoradiographed using standard methods and Kodak XAR film.
Autorádiografia ukázala rôzne značkované pruhy pre ľudský EL-10; antagonistov K157E, ΟΔ3 a ΟΔ4; a pre agonistov ΝΔ7 a ΝΔ10, ktorí všetci migrovab so zdanlivými molekulovými hmotnosťami asi 16 až 18 kilodaltonov. Pri identických podmienkach transfekcie a kultivovania buniek boli všetci traja antagonisti, karboxyterminálm mutanti ľudského IL-10, exprimovaní na trocha zníženej úrovni asi 2 až 4 krát menej ako IL-10. Expresia aminoterminálneho agonistového variantu ΝΔ7 bola porovnateľná s IL-10, zatiaľ čo ΝΔ10 variant bol exprimovaný na úrovni asi štyrikrát nižšej ako IL-10. Expresia variantov ΝΔ11 a ΝΔ12 bola príliš nízka na to, aby bola detegovaná touto metódou.Autoradiography showed various labeled bands for human EL-10; K157E, ΟΔ3 and ΟΔ4 antagonists; and agon7 and ΝΔ10 agonists, all of whom migrovabs with apparent molecular weights of about 16 to 18 kilodaltons. Under identical cell transfection and culture conditions, all three antagonists, carboxyterminal mutants of human IL-10, were expressed at a slightly reduced level of about 2-4 fold less than IL-10. The ot7 amino-terminal agonist variant expression was comparable to IL-10, while the ΝΔ10 variant was expressed at a level about four-fold lower than IL-10. The expression of variants ΝΔ11 and ΝΔ12 was too low to be detected by this method.
Claims (10)
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US9894393A | 1993-07-26 | 1993-07-26 | |
PCT/US1994/008052 WO1995003411A1 (en) | 1993-07-26 | 1994-07-22 | Agonists and antagonists of human interleukin-10 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SK150596A3 true SK150596A3 (en) | 1997-04-09 |
Family
ID=22271670
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SK1505-96A SK150596A3 (en) | 1993-07-26 | 1994-07-22 | Agonists and antagonists of human interleukin-10 |
SK83-96A SK8396A3 (en) | 1993-07-26 | 1994-07-22 | Antagonists and agonists of human interleukin-10 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SK83-96A SK8396A3 (en) | 1993-07-26 | 1994-07-22 | Antagonists and agonists of human interleukin-10 |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0711346A1 (en) |
JP (1) | JPH08507930A (en) |
KR (1) | KR960704041A (en) |
CN (1) | CN1127529A (en) |
AU (1) | AU681178B2 (en) |
CA (1) | CA2168110A1 (en) |
CZ (1) | CZ23396A3 (en) |
FI (1) | FI960353A (en) |
HU (1) | HUT73463A (en) |
IL (1) | IL110413A0 (en) |
NO (1) | NO960309D0 (en) |
NZ (1) | NZ269663A (en) |
PL (1) | PL312718A1 (en) |
SG (1) | SG43798A1 (en) |
SK (2) | SK150596A3 (en) |
WO (1) | WO1995003411A1 (en) |
ZA (1) | ZA945434B (en) |
Families Citing this family (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SK283096B6 (en) | 1994-07-05 | 2003-02-04 | Steeno Research Group A/S | Immunomodulators |
GB2304047A (en) | 1995-08-09 | 1997-03-12 | Univ Manchester | Pharmaceutical compositions containing cytokines |
AUPN481295A0 (en) * | 1995-08-16 | 1995-09-07 | Medvet Science Pty. Ltd. | Agonists of haemopoietic growth factors |
WO1997026278A1 (en) | 1996-01-18 | 1997-07-24 | Steeno Research Group A/S | Synthetic il-10 analogues |
DE19851675A1 (en) * | 1998-11-10 | 2000-05-11 | Bayer Ag | Human interleukin-10 mutant proteins |
EP1283722A1 (en) | 2000-03-31 | 2003-02-19 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Combined use of anti-cytokine antibodies or antagonists and anti-cd20 for the treatment of b cell lymphoma |
ES2367891T3 (en) | 2000-09-29 | 2011-11-10 | Schering Corporation | INTERLEUCINA-10 PEGILADA. |
US7261882B2 (en) | 2003-06-23 | 2007-08-28 | Reagents Of The University Of Colorado | Methods for treating neuropathic pain by administering IL-10 polypeptides |
EP1712241A1 (en) | 2005-04-15 | 2006-10-18 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Composition for treating cancer adapted for intra-tumoral administration and uses thereof |
EP1885863B1 (en) | 2005-05-31 | 2014-11-19 | The Regents of the University of Colorado, a body corporate | Methods for delivering genes |
NZ597098A (en) | 2006-09-28 | 2013-05-31 | Merck Sharp & Dohme | Use of pegylated il-10 to treat cancer |
WO2010040105A2 (en) | 2008-10-02 | 2010-04-08 | Trubion Pharmaceuticals, Inc. | Cd86 antagonist multi-target binding proteins |
AU2009333325B2 (en) | 2008-12-17 | 2014-07-10 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Mono- and di-peg IL-10 production; and uses |
CN108129574A (en) | 2011-11-08 | 2018-06-08 | Umc乌德勒支控股有限公司 | Fusion protein including interleukin 10 and interleukin-4 |
JP2016519108A (en) | 2013-04-18 | 2016-06-30 | アルモ・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッド | Method for using interleukin-10 for the treatment of diseases and disorders |
WO2014176373A2 (en) * | 2013-04-24 | 2014-10-30 | Armo Biosciences, Inc. | Interleukin-10 compositions and uses thereof |
US9823255B2 (en) | 2013-06-17 | 2017-11-21 | Armo Biosciences, Inc. | Method for assessing protein identity and stability |
CN105658232A (en) | 2013-08-30 | 2016-06-08 | 阿尔莫生物科技股份有限公司 | Methods of using interleukin-10 for treating diseases and disorders |
ES2862139T3 (en) | 2013-11-11 | 2021-10-07 | Armo Biosciences Inc | Procedures for the use of Interleukin 10 for the treatment of diseases and disorders |
WO2015187295A2 (en) | 2014-06-02 | 2015-12-10 | Armo Biosciences, Inc. | Methods of lowering serum cholesterol |
EP3206713A4 (en) | 2014-10-14 | 2018-06-27 | Armo Biosciences, Inc. | Interleukin-15 compositions and uses thereof |
US10143726B2 (en) | 2014-10-22 | 2018-12-04 | Armo Biosciences, Inc. | Methods of using interleukin-10 for treating diseases and disorders |
WO2016126615A1 (en) | 2015-02-03 | 2016-08-11 | Armo Biosciences, Inc. | Methods of using interleukin-10 for treating diseases and disorders |
KR20180020141A (en) | 2015-05-28 | 2018-02-27 | 아르모 바이오사이언시스 인코포레이티드 | PEGylated interleukin-10 for cancer treatment |
MX2018002298A (en) | 2015-08-25 | 2018-07-06 | Armo Biosciences Inc | Methods of using interleukin-10 for treating diseases and disorders. |
GB2600564B (en) | 2019-04-19 | 2024-02-28 | Synerkine Pharma B V | A fusion protein comprising IL13 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH01113229A (en) * | 1987-10-27 | 1989-05-01 | Inahata Kenkyusho:Kk | Porous material of honeycomb structure |
IL94878A (en) * | 1989-06-28 | 2003-01-12 | Schering Corp | Cytokine synthesis inhibitory factor, antagonists thereof and methods of using same |
CA2115060C (en) * | 1991-08-06 | 2003-05-06 | Rene De Waal Malefyt | Use of interleukin-10 analogs or antagonists to treat endotoxin- or superantigen induced toxicity |
-
1994
- 1994-07-22 WO PCT/US1994/008052 patent/WO1995003411A1/en not_active Application Discontinuation
- 1994-07-22 SK SK1505-96A patent/SK150596A3/en unknown
- 1994-07-22 NZ NZ269663A patent/NZ269663A/en unknown
- 1994-07-22 CA CA002168110A patent/CA2168110A1/en not_active Abandoned
- 1994-07-22 EP EP94923956A patent/EP0711346A1/en not_active Withdrawn
- 1994-07-22 SK SK83-96A patent/SK8396A3/en unknown
- 1994-07-22 KR KR1019960700358A patent/KR960704041A/en not_active Application Discontinuation
- 1994-07-22 CZ CZ96233A patent/CZ23396A3/en unknown
- 1994-07-22 PL PL94312718A patent/PL312718A1/en unknown
- 1994-07-22 HU HU9503983A patent/HUT73463A/en unknown
- 1994-07-22 CN CN94192880A patent/CN1127529A/en active Pending
- 1994-07-22 IL IL11041394A patent/IL110413A0/en unknown
- 1994-07-22 AU AU73996/94A patent/AU681178B2/en not_active Ceased
- 1994-07-22 ZA ZA945434A patent/ZA945434B/en unknown
- 1994-07-22 JP JP7505238A patent/JPH08507930A/en active Pending
- 1994-07-22 SG SG1996000969A patent/SG43798A1/en unknown
-
1996
- 1996-01-25 NO NO960309A patent/NO960309D0/en unknown
- 1996-01-26 FI FI960353A patent/FI960353A/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU681178B2 (en) | 1997-08-21 |
SG43798A1 (en) | 1997-11-14 |
IL110413A0 (en) | 1994-10-21 |
HUT73463A (en) | 1996-08-28 |
WO1995003411A1 (en) | 1995-02-02 |
ZA945434B (en) | 1995-01-23 |
CZ23396A3 (en) | 1996-05-15 |
CA2168110A1 (en) | 1995-02-02 |
CN1127529A (en) | 1996-07-24 |
NO960309L (en) | 1996-01-25 |
FI960353A0 (en) | 1996-01-26 |
NO960309D0 (en) | 1996-01-25 |
SK8396A3 (en) | 1997-03-05 |
PL312718A1 (en) | 1996-05-13 |
AU7399694A (en) | 1995-02-20 |
FI960353A (en) | 1996-01-26 |
JPH08507930A (en) | 1996-08-27 |
NZ269663A (en) | 1997-09-22 |
EP0711346A1 (en) | 1996-05-15 |
HU9503983D0 (en) | 1996-03-28 |
KR960704041A (en) | 1996-08-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SK150596A3 (en) | Agonists and antagonists of human interleukin-10 | |
JP7087047B2 (en) | Modified interleukin-7 protein and its use | |
DK173279B1 (en) | Recombinant IL-6, method for its preparation and vector for use in this preparation as well as its use | |
KR970005050B1 (en) | A mammalian cytokine il-11 | |
EP0815245B1 (en) | Bioactive il-12 fusion proteins | |
US7374912B2 (en) | Nucleic acids encoding chimeric interleukin-6 soluble receptor/ligand protein, analogs thereof and uses thereof | |
Karp et al. | Cytokine secretion by genetically modified nonimmunogenic murine fibrosarcoma. Tumor inhibition by IL-2 but not tumor necrosis factor. | |
JP2002514887A (en) | Method of secreting thrombopoietin polypeptide | |
EP3964531A1 (en) | Protein molecule and use thereof | |
US6171824B1 (en) | Hybrid cytokines | |
CZ283049B6 (en) | Bcrf1 protein of epstein-barr virus being capable of inhibiting synthesis of gamma-interferon, expression vector for synthesis thereof and pharmaceutical composition in which the protein is comprised | |
AU682581B2 (en) | Compositions and methods using unbound MPL receptor for stimulating platelet production | |
US20220213160A1 (en) | Protein heterodimer and use thereof | |
PT97445B (en) | PROCESS FOR THE PREPARATION OF TRUNCATED AND SOLULE RANGE INTERFERENCE RECEPTORS | |
US20030004314A1 (en) | T-cell selective interleukin-4 agonists | |
KR20050035151A (en) | Use of gp130 activators in diabetic neuropathy | |
US6348191B1 (en) | Production and use of IL-6 | |
CA2495480A1 (en) | Interferon and immunoglobulin fc fragment hybrid |