SK146096A3 - Adenosine derivatives, processes for their preparation, their use for the preparation of drugs, their use in therapy and pharmaceutical compositions containing them - Google Patents

Abstract

Compounds of formula (I), wherein R1 is one of a number of significances, including cycloalkyl and hydroxycycloalkyl; R2 is hydrogen, (C1-4)alkyl, amino, (C3-5)cycloalkyl or halogen with an atomic number of 9 to 35, and R3 is (C1-4)alkyl, are useful as analgesic agents. Compounds of formula (I) wherein R1 is hydroxy alkyl are new. The compounds of formula (I) may be produced by alkylation in the 2' position in the presence of tetrabutylammonium hydrogen sulfate and a non-polar solvent.

Description

Adenozínové deriváty, spôsob ich prípravy, použitie týchto derivátov na prípravu liečiv, použitie týchto derivátov pri liečení a farmaceutická kompozícia obsahujúca tieto derivátyAdenosine derivatives, process for their preparation, use of these derivatives in the preparation of medicaments, use of these derivatives in therapy and pharmaceutical composition containing these derivatives

Oblasť technikyTechnical field

Vynález sa týka adenozínových derivátov a predovšetkým nového použitia agonizujúcich činidiel receptorov Al.The invention relates to adenosine derivatives and in particular to a new use of A1 receptor agonists.

Doterajší stav technikyBACKGROUND OF THE INVENTION

V súčasnosti sú známe niektoré zlúčeniny spadajúce do všeobecného vzorca I ( pozri ďalej), ktoré vykazujú účinnosť ako antihypertezné činidlá a koronárne vazodilatátory (napríklad uverejnená britská patentová prihláška 2 226 027 A, európske patentové prihlášky EP-O-378518 a EP-0-269 574, patenty US 4, 843, 006 a 4,985,049).Currently, some compounds of formula I (see below) are known which exhibit activity as anti-hypertensive agents and coronary vasodilators (e.g., published British patent application 2,226,027 A, European patent applications EP-O-378518 and EP-0-269 574, U.S. Pat. Nos. 4,843,006 and 4,985,049).

Okrem toho je známe, že niektoré z týchto derivátov chránia vaskulárny endotel tým, že inhibujú ako agregáciu trombocytov tak i aktiváciu leukocytov. Tieto zlúčeniny taktiež znižujú hladinu lipidov v krvi. Okrem toho majú zlúčeniny všeobecného vzorca I ochranný účinok proti chorobám spôsobeným hypertenziou, akými sú kongestívne zlyhanie srdca, infarkt myokardu alebo náhla srdcová smrť alebo renálna insuficiencia ( pozri európske patentové prihlášky EP-0-387 518 a EP-0-269 574 ) .In addition, some of these derivatives are known to protect the vascular endothelium by inhibiting both platelet aggregation and leukocyte activation. These compounds also reduce blood lipid levels. In addition, the compounds of formula I have a protective effect against diseases caused by hypertension, such as congestive heart failure, myocardial infarction or sudden cardiac death or renal insufficiency (see European patent applications EP-0-387 518 and EP-0-269 574).

Tieto zlúčeniny sú taktiež známe ako liečivá na liečenie neurodegeneratívnych porúch, periférnych neuropatií, akou je diabetická neuropatia, a porúch združených s periférnymi vaskulárnymi ochoreniami alebo/a porúch združených s neutronálnou degeneráciou, hyperglyceridémia/nízke hladiny HDL cholesterolu, lipidové dysfunkcie, zvýšené hladiny voľných mastných kyselín alebo diabetes typu I alebo typu II, vrátane inzulíno-nedependentnej cukrovky, arytmií, predovšetkým paroxymálnej supraventrikulátnej tachykardie a tachykardiálne atriálne fibrilácie a ako prostriedky chrániace proti infarktu myokardu .These compounds are also known as medicaments for the treatment of neurodegenerative disorders, peripheral neuropathies such as diabetic neuropathy, and disorders associated with peripheral vascular diseases and / or disorders associated with neutronal degeneration, hyperglyceridemia / low levels of HDL cholesterol, increased lipid dysfunction, acids or type I or type II diabetes, including insulin-non-dependent diabetes, arrhythmias, in particular paroxymal supraventricular tachycardia and tachycardial atrial fibrillation, and as agents against myocardial infarction.

Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION

Predmetom vynálezu je nové použitie zlúčenín všeobecného vzorca IThe present invention provides a new use of the compounds of formula I

HNHN

v ktoromin which

R¹ znamená atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, alylovú skupinu, metalylovú skupinu, priamu alebo rozvetvenú alkinylovú skupinu obsahujúcu 3 až 7 uhlíkových atómov, cykloalkylovú skupinu obsahujúcu 3 až 8 uhlíkových atómov, hydroxycykloalkylovú skupinu obsahujúcu 4 až 8 uhlíkových atómov, fenylovú skupinu mono- alebo navzájom nezávisle di-substituovanú halogénom s atómovým číslom 9 až 35, alkylovou skupinou obsahujúcou 1 až 4 uhlíkové atómy, alkoxyskupinou obsahujúcou 1 až 4 uhlíkové atómy alebo trifluórmetylovou skupinou, alebo fenylalkylovou skupinou, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 uhlíkové atómy a fenylový kruh je nesubstituovaný alebo mono- alebo navzájom nezávisle di-substituovaný halogénom s atómovým číslom 9 až 35, aikyiovou skupinou obsahujúcou 1 až 4 uhlíkové atómy, alkoxyskupinou obsahujúcou 1 až 4 uhlíkové atómy alebo trifluórmetylovou skupinou, alkylovú skupinu obsahujúcu aspoň jednu hydroxyskupinu alebo aspoň dve fenylové skupiny, bicykloalkylovú skupinu ako endoalebo exo-bicyklo-/2,2,1/heptylovú skupinu, naftylalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 uhlíkové atómy, acenaftylenylalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 uhlíkové atómy alebo skupinu všeobecného vzorca A alebo všeobecného vzorca B (A) (B) v ktorom znamená atóm vodíka, hydroxyskupinu alebo alkoxyskupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, znamená atóm vodíka alebo hydroxyskupinu, znamená skupinu -CH -, -0-, -S- alebo priamu väzbu, znamená skupinu “(CH ) - alebo priamu väzbu, znamená celé číslo od 1 do 3, pričom prerušovaná čiara vo vzorci A znamená prípadnú väzbu,R ¹ represents a hydrogen atom, a C 1 -C 4 alkyl group, an allyl group, a methyl group, a straight or branched C 3 -C 7 alkynyl group, a C 3 -C 8 cycloalkyl group, a C 4 -C 8 hydroxycycloalkyl group , a phenyl group mono- or independently of one another substituted by halogen having an atomic number of 9 to 35, an alkyl group containing 1 to 4 carbon atoms, an alkoxy group containing 1 to 4 carbon atoms or a trifluoromethyl group, or a phenylalkyl group in which the alkyl radical contains 1 to 4 The 4 carbon atoms and the phenyl ring are unsubstituted or mono- or independently di-substituted with halogen having an atomic number of 9 to 35, an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms, an alkoxy group having 1 to 4 carbon atoms or a trifluoromethyl group, an alkyl group another containing at least one hydroxy group or at least two phenyl groups, a bicycloalkyl group such as an endo or exo-bicyclo [2.2.1] heptyl group, a naphthylalkyl group wherein the alkyl moiety contains 1 to 4 carbon atoms, an acenaphthylenylalkyl group wherein the alkyl moiety contains 1 to 4 carbon atoms or a group of formula A or formula B (A) (B) in which it represents a hydrogen atom, a hydroxy group or an alkoxy group having 1 to 4 carbon atoms, a hydrogen atom or a hydroxy group, a group -CH-, - O-, -S- or a direct bond, represents a group "(CH) - or a direct bond, represents an integer from 1 to 3, wherein the dotted line in formula A represents an optional bond,

R² znamená atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až uhlíkové atómy, amínovú skupinu, cykloalkylovú skupinu obsahujúcu 3 až 5 uhlíkových atómov alebo atóm halogénu s atómovým číslom 9 až 35 aR ² is H, alkyl of 1 to carbon atoms, amino, cycloalkyl having 3 to 5 carbon atoms or halogen of atomic number 9 to 35 and

R³ znamená alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, pri ktorých sa zistilo, že sú mimoriadne zaujímavými analgetikami, napríklad na tíšenie bolesti, napríklad akútnej alebo chronickej bolesti.R ³ represents an alkyl group containing 1 to 4 carbon atoms which have been found to be of particular interest as analgesics, for example for the alleviation of pain, for example acute or chronic pain.

Vo vyššie uvedených vzorcoch majú substituenty 2', 3',In the above formulas, the substituents have 2 ', 3',

4' a 5' tetrahydrofuránového kruhu konfiguráciu ako v adenozíne.4 'and 5' tetrahydrofuran ring configuration as in adenosine.

V jednej skupine zlúčenín všeobecného vzorca I, R¹ je iný ako hydroxycyklylová skupina. V inej skupine zlúčenín všeobecného vzorca I, R¹ znamená hydroxycyklylalkylovú skupinu obsahujúcu 4 až 8 uhlíkových atómov.In one group of compounds of formula I, R ¹ is other than hydroxycyclyl. In another group of compounds of formula I, R ¹ is a hydroxycyclylalkyl group containing 4 to 8 carbon atoms.

S výhodou je zlúčeninou všeobecného vzorca I 6-cyklohexyl-2’-O-metyladenozín, ktorý sa bude v ďalšom uvádzať ako zlúčenina M.Preferably, the compound of formula I is 6-cyclohexyl-2'-O-methyladenosine, hereinafter referred to as compound M.

A¹-Adenozínová účinnost pri výhodných zlúčeninách všeobecného vzorca I sa môže typicky stanoviť nasledujúcim spôsobom.A ¹ -Adenozínová activity of preferred compounds of formula I may typically be determined as follows.

Afinita k adenozínovým receptoromAffinity for adenosine receptors

Spôsobom, ktorý opísali H. Bruns a kol. v Molecular Pharmacology 29 (1986), str. 331-344, sa pripravia striatálne membrány ošípaných. Na označenie ako A¹ tak i A²-receptorov sa použije činidlo ³H-NECA, čo je neselektívne agonizujúce činidlo adenozínových receptorov. Hodnoty IC_so sa odvodia z vytesňovacích kriviek pri použití váženej nelineárnej metódy najmenších štvorcov upravenej pre Langmuirovu rovnicu, následne sa vypočítajú hodnoty pK_D.As described by H. Bruns et al. in Molecular Pharmacology 29 (1986), p. 331-344, porcine striatal membranes are prepared. To indicate that the A ¹ and A ² receptor antagonists are agents used ^3H-NECA, a non-selective adenosine receptor agonist. The IC _having the positive displacement are derived from the curves, using a weighted nonlinear least squares covered by the Langmuir equation, then the values calculated _D.

Tabuľkatable

Afinita adenozín-receptorových ligandov pre receptory A^x a A² Affinity of adenosine receptor ligands for A ^x and A ² receptors

A^x (Κθ,ηΜ)A ^x (Κθ, ηΜ) A² (Κθ,ηΜ)A ² (,θ, ηΜ) A¹ :A² selektivitaA ¹ : A ² selectivity n n CPA CPA 0,74 ± 0,08 0.74 ± 0.08 930 ± 110 930 ± 110 1260 1260 6 6 CV 1808 CV 1808 2460 ± 7578 2460 ± 7578 269 ± 70 269 ± 70 0,1 0.1 5 5 CGS 21680 CGS 21680 4360 ± 1080 4360 ± 1080 18,6 ± 4 18.6 ± 4 0,004 0,004 4 4 Zlúčenina M 1,5 H O ' 2 Compound M 1.5 H 2 O 2 23 ± 2 23 ± 2 24500 ± 5160 24500 ± 5160 1090 1090 5 5

CPA = cyklopentyladenozínCPA = cyclopentyladenosine

CV 1808 = 2-fenylaminoadenozín (Carbohydrates, zv. 81, 1974, ref. 91898 K)CV 1808 = 2-phenylaminoadenosine (Carbohydrates, Vol. 81, 1974, ref. 91898 K)

CGS 21680 = 2-/p-(2-karboxyetyl)fenetylamino/-5¹-N-etylkarboxamido-adenozín (Faser, J., 1989, ref. 4770/3).CGS 21680 = 2- / p- (2-carboxyethyl) phenethylamino / -5 ^1-N-ethyl carboxamide adenosine (Faser, J., 1989, ref. 4770/3).

Z literatúry je známe, že produkt CPA je potentným a vysoko selektívnym vytesňujúcim činidlom väzby k receptoru A^x a produkt CV 1808 je relatívne slabým avšak selektívnym ligandom receptora A², pričom produkt CHS 21680 vykazuje vysokú potenciu a selektivitu pre receptor A².The literature discloses that the product of the CPA is a potent and highly selective displacer of binding reagent to the receptor and the product of ^x and CV 1808 is a relatively weak but selective ^A2 receptor ligand, wherein the product of CHS 21680 shows high potency and selectivity for receptor A ^second

Zlúčenina M vykazuje vo forme 1,5-hydrátu dobrú afinitu a vysokú selektivitu pre receptor A¹ v porovnaní s receptorom A².Compound M exhibits good affinity and high selectivity for the A ¹ receptor over the A ² receptor as 1,5-hydrate.

Analgetická účinnosť zlúčenín všeobecného vzorca I bola preukázaná ich analgetickou účinnosťou pri štandardných testoch s pokusnými zvieratami, napríklad pri použití zápalových a neuropatických modelov, napríklad znížením peristentnej zápalovej mechanickej hyperanalgézie /testy a) a b)/ a perzistentnej neuropatickej terminálnej hyperanalgézie /test c)/, ktorá predstavuje chronickú neuropatickú bolesť.The analgesic activity of the compounds of formula (I) has been shown to be analgesic in standard tests in experimental animals, for example using inflammatory and neuropathic models, for example by reducing persistent inflammatory mechanical hyperanalgesia (tests a) and b) / and persistent neuropathic terminal hyperanalgesia (test c) which represents chronic neuropathic pain.

Zápalová hyperanalgéziaInflammatory hyperanalgesia

Test a)Test a)

Hyperanalgézia indukovaná Freundovým činidlomHyperanalgesia induced by Freund's reagent

Krysám sa aplikuje vnútrokíbovo do jedného kolenného kĺbu kompletné Freundovo adjuvans (100 mikrolitrov). U krysy klesá končatiny a táto zaťažiTento jav je ukazovateľom táto hyperanalgézia javí znesiteľná zaťažiteľnosť ošetrenej teľnosť je potlačená počas až 5 dní. mechanickej hyperanalgézie, pričom odozvu na podávanie NSAID a opiátov. Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa podávanú injekciou a s výhodou perorálne v dávkach od asi 3 do 60 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti zvieraťa. S účelom stanovenia reverzie hyperanalgézie sa meria schopnosť pokusného zvieraťa znášať zvýšené zaťaženie ošetrenej končatiny.Rats are injected intra-articularly into one knee joint with complete Freund's adjuvant (100 microliters). In the rat, the limbs are falling and this load is indicative of this hyperanalgesia showing the tolerable load of the treated calf is suppressed for up to 5 days. mechanical hyperanalgesia, in response to the administration of NSAIDs and opiates. The compounds of formula I are administered by injection, and preferably orally, at dosages of from about 3 to 60 micrograms per kilogram of animal body weight. In order to determine the reversion of hyperanalgesia, the ability of the test animal to withstand the increased load on the treated limb is measured.

Zlúčenina M vykazuje pri tomto teste predovšetkým zaujímavú účinnosť pri perorálnom podaní dávok od asi 3 do asi 60 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti pokusného zvieraťa pri trvaní účinku počas asi jednej hodiny. Nejestvuje tu žiaden významný rozdiel v odozve medzi dávkami 3, 30 a 60 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti, čo vedie k záveru, že maximálny účinok sa dosahuje v rozmedzí 3 až 30 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti.In this test, Compound M exhibits particularly interesting efficacy at oral dosages of from about 3 to about 60 micrograms per kilogram of body weight of the test animal for about one hour. There is no significant difference in response between doses of 3, 30 and 60 micrograms per kilogram body weight, leading to the conclusion that the maximum effect is in the range of 3 to 30 micrograms per kilogram body weight.

Test b)Test b)

Mechanická hyperanalgézia indukovaná terpentínomMechanical hyperanalgesia induced by terpentine

Lokálna intraplantárna injekcia zmesi terpentínu a parafínu do labky krysy (ľavá zadná končatina) má za následok lokálnu zápalovú odozvu a zníženie prahu znesiteľnosti pri mechanickom stimule (tlak na labku, medzná záťaž 340 g). Zlúčeniny všeobecného vzorca I sú pri tomto účinné pri dávkach od asi 1 do 100 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti podaných perorálne alebo subkutánne tri dni po vyššie uvedenej intraplantárnej injekcii, pričom sa medza znesiteľnosti mechanickej záťaže meria 1 až 3 hodiny po aplikácii účinnej zlúčeniny.Local intraplantar injection of a mixture of terpentine and paraffin into the rat paw (left hind limb) results in a local inflammatory response and a lowering of the mechanical stimulus tolerance threshold (paw pressure, payload 340 g). The compounds of formula I are effective at doses of about 1 to 100 micrograms per kilogram of body weight administered orally or subcutaneously three days after the aforementioned intraplantar injection, and the limit of mechanical load tolerance is measured 1 to 3 hours after administration of the active compound.

Zlúčenina M vykazuje významnú účinnosť v rámci tohto testu pri dávkach 30 a 60 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti pri perorálnom podaní. Morfium má pri tomto teste hodnotu ED_so rovnú 1,2 mg/kg telesnej hmotnosti pri subkutánnom podaní.Compound M exhibits significant efficacy in this test at doses of 30 and 60 micrograms per kilogram of body weight when administered orally. Morphine is the value in this test, _the ED of 1.2 mg / kg of body weight via subcutaneous administration.

Neuropatická hyperanalgéziaNeuropathic hyperanalgesia

Test c)Test c)

Neuropatická termálna hyperanalgézia (podľa metodiky Z. Seltzera a kol., Pain, 1990, 43, 205 - 518)Neuropathic thermal hyperanalgesia (according to the methodology of Z. Seltzer et al., Pain, 1990, 43, 205-518)

Unilateriálna parciálna ligácia ischiatického nervu eliminuje vlákna počas inervácie labky krysy. U krysy nastane rozvoj hyperanalgézie k mechanickým a tepelným stimulom a alodýnia čiastočne denervovanej labky, bez toho aby pritom prišlo k autotómii. Pokusné zvieratá sa umiestnia do boxu z plexiskla na tenkú sklenenú dosku a na povrch chodidla labky sa aplikujú zvyšujúce sa tepelné stimuly. Pritom sa meria reakčný čas, ktorý uplynie medzi aplikáciou tepelného stimulu a odtiahnutím labky. Zlúčeniny všeobecného vzorca I sú pri tomto teste účinné pri dávkach od asi 1 do asi 100 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti (pri subkutánnom alebo s výhodou perorálnom podaní) podaných 12 až 15 dní po uvedenej ligácii nervu Zlúčenina M je predovšetkým účinná proti termálnej hyperplázii. Zlúčenina M vykazuje významnú účinnosť pri dávkach 30 až 60 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti, pričom maximálny účinok vykazuje pri dávke 30 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti. Jej ED_so predstavuje asi 60 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti pri perorálnom podaní. Morfium má pri tomto teste hodnotu ED_so rovnú pri subkutánnom podaní asi 3 mg/kg.Unilateral partial ligation of the sciatic nerve eliminates fibers during innervation of rat paw. The rat develops hyperanalgesia to mechanical and thermal stimuli and allodynia of the partially denervated paw, without causing autotomy. The test animals are placed in a plexiglass box on a thin glass plate and increasing thermal stimuli are applied to the foot surface of the paw. The reaction time which elapses between the application of the thermal stimulus and the withdrawal of the paw is measured. The compounds of formula I are effective in doses of about 1 to about 100 micrograms per kilogram of body weight (subcutaneous or preferably oral) administered 12-15 days after said nerve ligation. Compound M is particularly effective against thermal hyperplasia. Compound M exhibits significant efficacy at doses of 30 to 60 micrograms per kilogram of body weight, with maximal effect at a dose of 30 micrograms per kilogram of body weight. It is _the ED of about 60 micrograms per kilogram of body weight on oral administration. Morphine has in this test, _the ED value equal to the subcutaneous administration of about 3 mg / kg.

Klinické testyClinical tests

Klinické testy sa môžu uskutočňovať nasledujúcim spôsobom. Pacientom trpiacom bolesťou, ktorá má formu postoperačnej alebo postherpetickej neuralgézie sa podajú zlúčeniny všeobecného vzorca I, predovšetkým zlúčeniny M, v dávke od 0,02 do 5 mg. Dá sa pozorovať utíšenie bolesti.Clinical tests can be performed as follows. Patients suffering from pain in the form of postoperative or postherpetic neuralgesia are administered compounds of formula I, in particular compound M, at a dosage of from 0.02 to 5 mg. Pain relief can be observed.

Zlúčeniny podľa vynálezu sa preto užitočné ako analgetiká, napríklad proti akútnej alebo chronickej bolesti, napríklad proti chronickej neuropatickej bolesti.The compounds of the invention are therefore useful as analgesics, for example against acute or chronic pain, for example against chronic neuropathic pain.

Predmetom vynálezu je preto skutočnosť, že je poskytnutý spôsob liečenia bolesti, ktorého podstata spočíva v tom, že sa subjektu, ktorý takéto liečenie potrebuje, podá terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I, ktorá bola definovaná vyššie.It is therefore an object of the present invention to provide a method of treating pain comprising administering to a subject in need thereof a therapeutically effective amount of a compound of formula I as defined above.

Ďalším predmetom vynálezu je použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I, ktorá bola definovaná vyššie, ako analgetika pri príprave liečiva vhodného na liečenie bolesti.A further object of the invention is the use of a compound of formula I as defined above as an analgesic in the preparation of a medicament useful in the treatment of pain.

Ďalším predmetom vynálezu je poskytnutie analgetickej kompozície, ktorej podstata spočíva v tom, že obsahuje vyššie definovanú zlúčeninu všeobecného vzorca I ako analgetikum v kombinácii s farmaceutický prijateľným nosičom alebo riedidlom.It is another object of the present invention to provide an analgesic composition comprising a compound of formula (I) as defined above as an analgesic in combination with a pharmaceutically acceptable carrier or diluent.

Farmakologické indikácie zlúčenín všeobecného vzorca I zahrňujú bolesť, napríklad akútnu bolesť spojenú s poškodením tkaniva a zápalom (napríklad postoperačná bolesť, bolesť spôsobená popáleninami, úrazy a pod.), chronickú zápalovú bolesť (napríklad pri artritíde) a chronickú neuropatickú bolesť (napríklad bolesť pri diabetickej neuropatii, herpetickej neu9 ralgii, roztrúsenej skleróze, kauzalgii, atď.).Pharmacological indications of compounds of Formula I include pain, for example, acute pain associated with tissue damage and inflammation (e.g., postoperative pain, pain caused by burns, trauma, etc.), chronic inflammatory pain (e.g., arthritis), and chronic neuropathic pain (e.g., diabetic pain). neuropathy, herpetic neu9 ralgia, multiple sclerosis, causalgia, etc.).

Dávky zlúčeniny použité v rámci vyššie uvedených indikácii budú pochopiteľne závisieť od použitej zlúčeniny, od závažnosti liečeného stavu, od stavu liečeného subjektu a od jeho telesnej hmotnosti, od spôsobu podania a od relatívnej účinnosti použitej zlúčeniny. Vo všeobecnosti sa uspokojivé výsledky pri zvieratách dosiahnu pri podaní troch denných dávok od asi 1 do asi 100 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti, napríklad 3 až 60 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti, predovšetkým 10 až 60 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti. Pri väčších cicavcoch, napríklad ľudí sa podáva denná dávka od asi 0,1 do asi 10 mg, vhodne podaná v jednotlivých dávkach od asi 0,02 do asi 5 mg, pričom takéto jednotkové dávky sa podávajú viackrát ako raz denne, napríklad dvakrát, trikrát, štyrikrát, päťkrát alebo šesťkrát denne, avšak s výhodou jedenkrát alebo dvakrát denne.The dosages of the compound used in the foregoing indications will, of course, depend upon the compound employed, the severity of the condition being treated, the condition of the subject being treated and its body weight, the route of administration, and the relative efficacy of the compound used. In general, satisfactory results in animals are obtained with three daily doses of from about 1 to about 100 micrograms per kilogram body weight, for example 3 to 60 micrograms per kilogram body weight, in particular 10 to 60 micrograms per kilogram body weight. In larger mammals, for example humans, a daily dose of about 0.1 to about 10 mg, suitably administered in single doses of about 0.02 to about 5 mg, is administered, such unit doses being administered more than once a day, for example twice, three times , four, five or six times a day, but preferably once or twice a day.

Pri vyššie uvedenom teste a) má NSAID iburpofen hodnotu ED_so rovnú asi 4 mg/kg pri perorálnom podaní, pričom indomethacin má hodnotu ED_so rovnú 13 mg/kg pri perorálnom podaní. Zlúčenina M je asi tristokrát účinnejšia. Pri zlúčenine M sa výhodné dávkové rozmedzie pohybuje od asi 0,1 mg/deň do asi 10 mg/deň, napríklad medzi 3a 30 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti pre dospelého pacienta s telesnou hmotnosťou 70 kilogramov, a to v závislosti od závažnosti liečeného stavu a početnosti podaní.In the above test a) a NSAID iburpofen ED value _of equal to about 4 mg / kg by oral administration, wherein the indomethacin is equal _{to the} value of ED 13 mg / kg by oral administration. Compound M is about three hundred times more potent. For Compound M, a preferred dosage range is from about 0.1 mg / day to about 10 mg / day, for example between 3 and 30 micrograms per kilogram body weight for an adult patient weighing 70 kilograms, depending on the severity of the condition being treated and frequency of submissions.

Pre zlúčeninu M sa preukázalo, že pri nej pri jednorázových dávkach dosahujúcich až 5 mg pri perorálnom podaní nedochádza k žiadnym závažným nepriaznivým účinkom.Compound M has been shown to have no serious adverse effects at single doses up to 5 mg when administered orally.

V prípade, že sa tu použije výraz ''farmaceutický prijateľný, potom sa tento výraz vzťahuje na materiály, ktoré sú vhodné na použitie v humánnej a veterinárnej medicíne.As used herein, the term " pharmaceutically acceptable " refers to materials that are suitable for use in human and veterinary medicine.

Zlúčeniny podľa vynálezu môžu byť formulované pre účely podania ľubovoľným vhodným spôsobom, pričom voľba výhodného spôsobu podania závisí od poruchy, ktorá sa podaním lieči a s výhodou sa zlúčenina podľa vynálezu podáva v jednotkovej dávkovej forme alebo vo forme, ktorá sa môže ľudskému pacientovi podať v jedinej dávke. S výhodou je kompozícia vhodná na perorálne, rektálne, topické, parenterálne, intravenózne alebo intramuskulárne podanie.The compounds of the invention may be formulated for administration by any suitable route, the choice of the preferred route of administration being dependent on the disorder being treated, and preferably the compound of the invention is administered in unit dosage form or in a form that can be administered to a human patient in a single dose. . Preferably, the composition is suitable for oral, rectal, topical, parenteral, intravenous or intramuscular administration.

Kompozície podľa vynálezu môžu mať formu tabliet, kapsúl, toboliek, liekoviek, práškov, granúl, pastiliek, čípkov, rekonštituovateľných práškov alebo kvapalných prípravkov, akými sú sterilné parenterálne roztoky alebo suspenzie. Uvažuje sa taktiež o topických formuláciách v prípade, v ktorom budú takéto prípravky vhodné.The compositions of the invention may take the form of tablets, capsules, capsules, vials, powders, granules, lozenges, suppositories, reconstitutable powders or liquid preparations such as sterile parenteral solutions or suspensions. Topical formulations are also contemplated where such formulations are suitable.

Pre účely dosiahnutia reprodukovateľnosti podania je výhodné, keď má kompozícia podľa vynálezu formu jednotkovej dávky.In order to achieve reproducibility of administration, it is preferred that the composition of the invention is in unit dosage form.

Jednotkovými dávkovými formami môžu byť v prípade perorálneho podania tablety a kapsule obsahujúce 0,02 až 5 mg zlúčeniny podľa vynálezu, pričom tieto tablety a kapsule môžu obsahovať konvenčné pomocné látky, akými sú spájadlá, ako napríklad sirup, akácia, želatína, sorbitol, tragant alebo polyvinylpyrolidón, plnidlá, ako napríklad laktóza, cukor, kukuričný škrob, fosforečnan vápenatý, sorbitol alebo glycín, tabletizačné mazadlá, ako napríklad stearát horečnatý, dezintegračné činidlá, ako napríklad škrob, zosieťovaný polyvinylpyrolidón, škrob-glykolát sodný alebo mikrokryštalická celulóza, alebo farmaceutická celulóza, alebo farmaceutický prijateľné zmáčadlá, ako napríklad laurylsulfát sodný.Unit dosage forms may be, for oral administration, tablets and capsules containing 0.02 to 5 mg of a compound of the invention, which tablets and capsules may contain conventional excipients such as binding agents such as syrup, acacia, gelatin, sorbitol, tragacanth, or the like. polyvinylpyrrolidone, fillers such as lactose, sugar, corn starch, calcium phosphate, sorbitol or glycine, tabletting lubricants such as magnesium stearate, disintegrating agents such as starch, cross-linked polyvinylpyrrolidone, sodium starch glycolate or microcrystalline cellulose, or pharmaceutical cellulose, or pharmaceutical or a pharmaceutically acceptable wetting agent, such as sodium lauryl sulfate.

Uvedené pevné perorálne kompozície sa môžu pripraviť konvenčnými postupmi zahrňujúcimi zmiešavanie, plnenie, tabletovanie a pod. Pre účely distribúcie účinnej látky v kompozíciách, v ktorých sa použilo veľké množstvo plnidiel, sa môžu použiť opakované zmiešavacie operácie.Said solid oral compositions may be prepared by conventional procedures including mixing, filling, tabletting and the like. Repeated blending operations may be used for the purpose of distributing the active ingredient in compositions in which a large number of fillers have been used.

Takéto operácie patria však medzi konvenčné operácie doterajšieho stavu techniky. Uvedené tablety sa môžu ovrstviť pri použití veľmi dobre známych metód v normálnej farmaceutickej praxi, pričom sa tablety pokryjú vrstvou, predovšetkým enterickým poťahom.Such operations, however, are conventional operations of the prior art. Said tablets may be coated using well known methods in normal pharmaceutical practice, the tablets being coated, in particular with an enteric coating.

Perorálne kvapalné prípravky môžu mať napríklad formu emulzií, sirupov alebo elixírov alebo môžu mať formu suchého produktu určeného na rekonštitúciu s vodou alebo iným vhodným kvapalným vehikulom bezprostredne pred vlastným podaním. Takéto kvapalné prípravky môžu obsahovať konvenčné prísady, akými sú suspendačné činidlá, napríklad sorbitol, sirup, metylcelulóza, želatína, hydroxymetylcelulóza, karboxymetylcelulóza, gél stearátu hlinitého, hydrogenované jedlé tuky, ďalej emulgačné činidlá, ako napríklad lecitín, sorbitanmonooleát alebo akácia, nevodné vehikulá (ktoré môžu zahrňovať jedlé oleje), napríklad mandľový olej, frakcionovaný kokosový olej, estery olejov, ako estery glycerínu, propylénglykol alebo etylakohol, konverzačné činidlá, ako napríklad metylalebo propyl-p-hydroxybenzoát alebo kyselina askorbová, a prípadne konvenčné ochuťovacie činidlá alebo farbivá.Oral liquid preparations may take the form of, for example, emulsions, syrups or elixirs, or may be in the form of a dry product to be reconstituted with water or other suitable liquid vehicle immediately prior to administration. Such liquid preparations may contain conventional additives such as suspending agents, for example sorbitol, syrup, methylcellulose, gelatin, hydroxymethylcellulose, carboxymethylcellulose, aluminum stearate gel, hydrogenated edible fats, emulsifying agents such as lecithin, sorbitan monooleate or acacia, may include edible oils), for example almond oil, fractionated coconut oil, oil esters such as glycerin esters, propylene glycol or ethyl alcohol, conversational agents such as methyl or propyl p-hydroxybenzoate or ascorbic acid, and optionally conventional flavoring or coloring agents.

Ďalej sú uvedené príklady pevných perorálnych kompozícií, napríklad tablety alebo kapsule.Examples of solid oral compositions such as tablets or capsules are given below.

Tablety sú vylisované z kapsulového granulátu so zodpovedajúcim množstvom účinnej látky. Na zapuzdrenie zlúčeniny M sa použili žlté kapsule veľkosti 3, pričom v nasledujúcej tabuľke sú uvedené príslušné zloženia formulácií s obsahom účinnej látky 0,1 resp. 5 mg.The tablets are compressed from a capsule granulate with a corresponding amount of active ingredient. Size 3 yellow capsules were used to encapsulate Compound M, the respective formulations of active ingredient containing 0.1% and 0.1% by weight of active ingredient, respectively. 5 mg.

Zložka component Obsah v tablete/kapsule s obsahom účinnej látky Content in tablet / capsule containing the active substance 0,1 mg 0.1 mg 5,0 mg 5.0 mg zlúčenina M compound M 0,1 0.1 5,0 5.0 mikrokryštalická celulóza microcrystalline cellulose 76,92 76,92 74,96 74.96 hydrátovaná laktóza hydrated lactose 87,63* 87.63 * 84,69* 84.69 * polyvinylpyrolidón polyvinylpyrrolidone 7,4 7.4 7,4 7.4 krospovinón krospovinón 7,4 7.4 7,4 7.4 stearát horečnatý magnesium stearate 0,925 0,925 0,925 0,925 zadržaná vlhkosť retained moisture 4,625 4,625 4,625 4,625 kapsule veľkosti 3 size 3 capsules 50 50 50 50 teoretická hmotnosť theoretical weight náplne kapsule alebo capsules or capsules tablety tablets 185 185 185 185 teoretická hmotnosť theoretical weight kapsule capsules 235 235 235 235

+) množstvo laktózy je nastavené na kompenzáciu množstva vlhkosti v účinnej látky.+) The amount of lactose is adjusted to compensate for the amount of moisture in the active ingredient.

Uvedené zlúčeniny sa môžu taktiež podať vo forme galenickej formy s regulovaným pomalým uvoľňovaním účinnej látky s účelom dosiahnutia prologovaného trvania trvania účinku účinnej látky. Na zabezpečenie takéhoto pomalého uvoľňovania účinnej látky sa môže použiť ľubovoľný konvenčný systém regulovaného uvoľňovania účinnej látky, akým sú napríklad ovrstvené pelety alebo osmotické typu push-pull.Said compounds may also be administered in the form of a controlled-release, slow-release galenic form, in order to achieve a sustained duration of action of the active ingredient. Any conventional controlled-release system, such as coated pellets or push-pull osmotic pellets, can be used to provide such slow release.

Na parenterálne podanie sa kvapalné jednotkové dávkové formy pripravia pri použití účinnej zlúčeniny a sterilného vehikula, pričom v závislosti od použitej koncentrácie môže byť účinná zlúčenina v danom vehikule buď suspendovaná alebo rozpustená. Pri príprave roztokov sa môže zlúčenina rozpustiť v polyetylénglykole alebo v etanole, zriediť vodou pre injekciu a sterilizačne prefiltrovať pre naplnením do vhodnej liekovky alebo ampule, v ktorej sa potom vzduchotesne uzatvorí, resp. zataví. S výhodou sa môžu vo vehikulu rozpustiť prísady, akými sú lokálne anestetiká a konzervačné a pufrovacie činidlá. Parenterálna suspenzia sa pripraví v podstate rovnakým spôsobom s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa účinná zlúčenina namiesto rozpustenia v tomto vehikule suspenduje, pričom sterilizácia sa môže uskutočniť sterilizačnou filtráciou. Účinná zlúčenina sa môže v tomto prípade sterilizovať vystavením účinku etylénoxidu a to ešte pred suspendovaním v sterilnom vehikule. S výhodou kompozícia obsahuje povrchovo aktívne a zmáčacie činidlo a to s účelom uľahčenia jednotnej distribúcie účinnej zlúčeniny.For parenteral administration, liquid unit dosage forms are prepared using the active compound and a sterile vehicle, and depending on the concentration used, the active compound may be either suspended or dissolved in the vehicle. In preparing solutions, the compound may be dissolved in polyethylene glycol or ethanol, diluted with water for injection, and sterilized by filtration for filling into a suitable vial or ampoule in which it is then sealed or sealed. sealed. Advantageously, additives such as local anesthetics and preservatives and buffering agents can be dissolved in the vehicle. The parenteral suspension is prepared in substantially the same manner except that the active compound is suspended instead of being dissolved in the vehicle, and sterilization may be accomplished by sterilization filtration. The active compound may in this case be sterilized by exposure to ethylene oxide prior to suspension in a sterile vehicle. Preferably, the composition comprises a surfactant and a wetting agent to facilitate uniform distribution of the active compound.

Uvedené kompozície môžu obsahovať od asi 0,1 do asi 99 % hmotnosti, s výhodou od 10 do 60 % hmotnosti účinnej látky, a to v závislosti od spôsobu podania.The compositions may contain from about 0.1 to about 99% by weight, preferably from 10 to 60% by weight of the active ingredient, depending on the route of administration.

Zlúčenina M podľa vynálezu alebo jej hydrát alebo adičný produkt s ostatnými rozpúšťadlami alebo jej soli sa môžu tiež použiť vo forme topickej formulácie v kombinácii s konvenčnými topickými pomocnými látkami.Compound M of the invention or a hydrate or addition product thereof with other solvents or salts thereof can also be used in the form of a topical formulation in combination with conventional topical excipients.

Topické formulácie môžu mať napríklad formu mastí, krémov alebo lotion, impregnovaných obväzov, gélov, gélových tyčiniek, sprejov a aerosolov, pričom tieto formulácie môžu obsahovať príslušné konvenčné prísady, akými sú konzervačné činidlá, rozpúšťadlá podporujúce penetráciu účinnej látky a utišujúce prostriedky pre masti a krémy. Tieto formulácie môžu obsahovať zlučiteľné konvenčné nosiče, akými sú krémové a masťové základy a etanol alebo oleylalkohol pre lotion.For example, topical formulations may be in the form of ointments, creams or lotions, impregnated dressings, gels, gel sticks, sprays and aerosols, which formulations may contain appropriate conventional ingredients such as preservatives, penetration enhancers and ointments and creams. . These formulations may contain compatible conventional carriers such as cream and ointment bases and ethanol or oleyl alcohol for the lotion.

Vhodné krémy, lotion, gély, masti, spreje alebo aerosólové formulácie, ktoré sa môžu použiť v prípade zlúčenín všeobecného vzorca I alebo ich hydrátov alebo adičných produktov s ostatnými rozpúšťadlami alebo ich solí, sú konvenčnými formuláciami, ktoré sú vo farmaceutickej praxi velmi dobre známe a ktoré sú napríklad opísané v štandardných farmaceutických alebo kozmetických publikáciách, akými sú napríklad Harry's Cosmeticology, publ. Leonard Hill Books, Remington's Pharmaceutical Sciences a Liekopisy Veľkej Británie a Spojených štátov amerických.Suitable creams, lotions, gels, ointments, sprays or aerosol formulations which can be used in the case of the compounds of formula I or their hydrates or addition products with other solvents or their salts are conventional formulations well known in the pharmaceutical art and such as those described in standard pharmaceutical or cosmetic publications such as Harry's Cosmeticology, publ. Leonard Hill Books, Remington's Pharmaceutical Sciences, and the Pharmacopoeia of Great Britain and the United States.

Ďalším predmetom vynálezu sú adenozínové deriváty všeobecného vzorca laA further object of the invention are adenosine derivatives of formula Ia

RR

(la) v ktorom(la) in which:

R¹’ znamená cykloalkylovú skupinu obsahujúcu 4 až 8 uhlíkových atómov a substituovanou hydroxyskupinou,R ¹ represents cycloalkyl having 4 to 8 carbon atoms and substituted by hydroxy,

R² má vyššie uvedený význam alebo s výhodou znamená atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy alebo halogén s atómovým číslom 9 až 35 aR ² is as defined above and preferably is H, alkyl of 1 to 4 carbon atoms or halogen having an atomic number of 9-35, and

R³ má vyššie uvedený význam.R ³ is as defined above.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la môžu jestvovať vo forme enantiomérov alebo vo forme diastereomérnych zmesí.The compounds of formula Ia may exist in the form of enantiomers or in the form of diastereomeric mixtures.

Vo všeobecnom vzorci la halogénom s atómovým číslom 9 až je fluór, chlór alebo bróm, alkylovou skupinou obsahujúcou 1 až 4 uhlíkové atómy je metylová skupina, etylová skupina, n-propylová skupina, i-propylová skupina, n-butylová skupina, i-butylová skupina a terc.butylová skupina a predovšetkým metylová skupina, a cykloalkylovou skupinou obsahujúcou 4 až 8 uhlíkových atómov je cyklobutylová skupina, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina, cykloheptylová skupina alebo cyklooktylová skupina a predovšetkým cyklohexylová skupina alebo cyklopentylová skupina.In the general formula Ia, halogen having an atomic number of 9 to is fluorine, chlorine or bromine, the alkyl group containing 1 to 4 carbon atoms is methyl, ethyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl a tert-butyl group, and in particular a methyl group, and a C 4 -C 8 cycloalkyl group is a cyclobutyl group, a cyclopentyl group, a cyclohexyl group, a cycloheptyl group or a cyclooctyl group, and in particular a cyclohexyl group or a cyclopentyl group.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la sa môžu pripraviť spôsobom, ktorého podstata spočíva v tom, že sa zlúčeniny všeobecného vzorca IlaCompounds of formula (Ia) can be prepared by a process comprising the preparation of compounds of formula (IIa)

(Ila) v ktorom(Ila) in which

R² a R³ majú vyššie uvedené významy aR ² and R ³ are defined as above, and

X znamená chlór alebo bróm, uvedú do reakcie so zlúčeninou všeobecného vzorca HlaX is chlorine or bromine, reacted with a compound of formula IIIa

R¹¹-NH (Hla) v ktoromR ¹¹ -NH (Hla) wherein

R¹’ má vyššie uvedený význam.R ¹ 'is as defined above.

Vyššie uvedený spôsob sa vhodne uskutočňuje zahrievaním zlúčeniny všeobecného vzorca Ila spoločne so zlúčeninou všeo16 bécného vzorca Hla v prítomnosti rozpúšťadla, akým je dioxán, pri teplote medzi asi 80 a 120 ’C, s výhodou pri teplote varu reakčnej zmesi.The above process is conveniently carried out by heating a compound of formula IIIa together with a compound of formula IIIa in the presence of a solvent such as dioxane at a temperature between about 80 and 120 ° C, preferably at the boiling point of the reaction mixture.

V zlúčeninách všeobecného vzorca Ila, ktoré sa použijú ako východiskové látky pri uvedenom spôsobe, X predovšetkým znamená chlór. Zlúčeniny všeobecného vzorca Ila, rovnako ako spôsob ich prípravy sú opísané vo zverejnenej európskej patentovej prihláške 269 574.In the compounds of formula IIIa which are used as starting materials in the process, X is in particular chlorine. Compounds of formula (IIa) as well as a process for their preparation are described in published European patent application 269 574.

Ďalší spôsob spočíva v tom, že sa prípravy zlúčenín všeobecného vzorca la zlúčeniny všeobecného vzorca IVa _1 / ^r·Another method is to prepare compounds of formula (Ia) and compounds of formula (IVa) ^.

ENEN

~\ V v ktorom R¹’, R² a R³ majú vyššie uvedené významy, uvedú do reakcie s trihydrátom tetrabutylamóniumfluridu.~ \ V wherein R ^1, R ² and R ³ are as defined above, is reacted with tetrabutylammonium fluoride trihydrate.

Vyššie uvedená reakcia sa môže uskutočniť v organickom rozpúšťadle, akým je napríklad tetrahydrofurán, pri laboratórnej teplote a za miešania. Zlúčeniny všeobecného vzorca IVa sa môžu získať reakciou zlúčenín všeobecného vzorca Ila s 1,3-di-chlór-1,1,3,3-tetraizopropyldisiloxánom v alkalickom rozpúšťadle, akým je napríklad pyridín, a reakciou takto získaných zlúčenín všeobecného vzorca VaThe above reaction can be carried out in an organic solvent such as tetrahydrofuran at room temperature and with stirring. Compounds of formula IVa can be obtained by reacting compounds of formula IIIa with 1,3-dichloro-1,1,3,3-tetraisopropyldisiloxane in an alkaline solvent such as pyridine and reacting the compounds of formula Va thus obtained

v ktorom X, R² a R³ majú vyššie uvedené významy, so zlúčeninami všeobecného vzorca Hla.wherein X, R ² and R ³ are as defined above, with compounds of Formula IIIa.

V nasledujúcich príkladoch 1 až 8 sú teploty uvedené v stupňoch Celzia nekorigovanými teplotami.In the following Examples 1 to 8, temperatures in degrees Celsius are uncorrected temperatures.

Príklady uskutočnenia vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

Príklad 1Example 1

6-[ (trans)-4-hydroxycyklohexyl]-2'-O-metyladenozín g 6-[(trans)-4-hydroxycyklohexyl]-9-purinyl-2¹-O-metyl-3’,5'-0-(1,1,3,3-tetraizopropyldisilox-l,3-diyl)-D-ribózy sa mieša počas 15 minút pri laboratórnej teplote v 2 g trihydrátu tetrabutylamóniumfluoridu v 20 ml tetrahydrofuránu. Reakčná zmes sa potom odparí do sucha a zvyšok sa eluuje na silikagéle pri použití elučnej sústavy tvorenej zmesou etylacetátu a metanolu v objemovom pomere 85 : 15. Prečistený produkt sa kryštalizuje zo zmesi metanolu a etylacetátu. Požadovaná zlúčenina kryštalizuje s jedným ekvivalentom metanolu.6- [(trans) -4-hydroxycyclohexyl] -2'-O-methyl adenosine g of 6 - [(trans) -4-hydroxycyclohexyl] -9-purinyl-2 ^1-O-methyl-3 ', 5'-0- (1,1,3,3-tetraisopropyldisilox-1,3-diyl) -D-ribose is stirred for 15 minutes at room temperature in 2 g of tetrabutylammonium fluoride trihydrate in 20 ml of tetrahydrofuran. The reaction mixture is then evaporated to dryness and the residue is eluted on silica gel, eluting with an ethyl acetate / methanol (85/15) mixture. The purified product is crystallized from a methanol / ethyl acetate mixture. The title compound crystallizes with one equivalent of methanol.

Teplota topenia: 121 - 124 ’C, [α]^2θο = -50,2 ’ (c = 1 v dimetylformamide) .Melting point: 121-124 ° C, [α] ^2θ ο = -50.2 ° (c = 1 in dimethylformamide).

Uvedená zlúčenina sa môže prekrystalizovať tiež z etanolu, pričom po odstavení na vlhkom vzduchu kryštalizuje s jedným ekvivalentom vody.Said compound can also be recrystallized from ethanol, crystallizing with one equivalent of water after standing in wet air.

Teplota topenia: 114 - 117 ‘C, [α]^2θπ = -46,9 ’ (c = 1, dimetylformamid).Melting point: 114-117 ° C, [α] ^2θ π = -46.9 ° (c = 1, dimethylformamide).

6-[ (trans)-4-hydroxycyklohexyl]-9-purinyl-2'-O-metyl-3¹,-5 ¹ -O- (1,1,3,3-tetraizopropyldisilox-l,3-diyl)-D-ribóza, použitá pri vyššie opísanom spôsobe ako východisková látka, sa môže pripraviť nasledujúcim spôsobom.6- [(trans) -4-hydroxycyclohexyl] -9-purinyl-2'-O-methyl-3 ^{1, 1} -5-O- (1,1,3,3-tetraisopropyldisilox-l, 3-diyl) - The D-ribose used as the starting material in the above-described process can be prepared as follows.

pričom sa ako a etylacetátu v g 6-chlór-9-purinyl-2'-O-metyl-3¹,5'-O-(1,1,3,3-tetraizopropyldisilox-l, 3-diyl) -D-ribózy sa mieša spolu s 1,32 g trans-4-hydroxycyklohexylamínu a 1,4 ml N-etyldiizopropylamínu v 80 ml dioxánu počas 6 hodín na olejovom kúpeli s teplotou 105 ’C. Reakčná zmes sa potom ochladí na laboratórnu teplotu, prefiltruje a filtrát sa zahustí do sucha. Pre účely prečistenia sa takto získaná zmes chrómatograŕuje na silikagéle, elučná sústava použije najskôr zmes hexánu objemovom pomere 7:3a potom zmes etylacetátu a metanolu v objemovom pomere 95 : 5. Takto prečistená olejovitá zlúčenina má hodnotu 0,3 (zmes etylacetátu a metanolu v objemovom pomere 95 : 5).using as g of ethyl acetate and 6-chloro-9-purinyl-2'-O-methyl ^3-1, 5'-O- (1,1,3,3-tetraisopropyldisilox-l, 3-diyl) -D-ribose is stirred together with 1.32 g of trans-4-hydroxycyclohexylamine and 1.4 ml of N-ethyldiisopropylamine in 80 ml of dioxane for 6 hours in a 105 ° C oil bath. The reaction mixture is then cooled to room temperature, filtered and the filtrate is concentrated to dryness. For purification, the mixture thus obtained is chromatographed on silica gel, eluting first with hexane (7: 3 v / v) and then with ethyl acetate / methanol (95: 5 v / v). The oil thus purified is 0.3 (ethyl acetate / methanol v / v). ratio 95: 5).

Príklad 2Example 2

6- [ (cis) -4-hydroxycyklohexyl ] -2 ' -O-metyladenozín6 - [(cis) -4-hydroxycyclohexyl] -2'-O-methyladenosine

Zlúčenina uvedená v názve príkladu sa získa spôsobom, ktorý je analogický so spôsobom opísaným v príklade 1, s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa namiesto trans-4-hydroxycyklohexylamínu použije cis-4-hydroxycyklohexylamín.The title compound is obtained in a manner analogous to that described in Example 1, except that cis-4-hydroxycyclohexylamine is used instead of trans-4-hydroxycyclohexylamine.

Takto získaná požadovaná zlúčenina sa kryštalizuje s polovicou ekvivalentu etylacetátu a má teplotu topenia rovné 110 až 111 ’C.The title compound is crystallized with half equivalent of ethyl acetate and has a melting point of 110-111 ° C.

[a]^2oD = -48,6 ' (c = 1 v dimetylformamide) .[α] ²⁰ D = -48.6 '(c = 1 in dimethylformamide).

Príklad 3Example 3

6-[ (1S, trans) -2-hydroxycyklopentyl]-2 ' -O-metyladenozín6 - [(1S, trans) -2-hydroxycyclopentyl] -2'-O-methyladenosine

Požadovaná zlúčenina sa získa postupom, ktorý je analogický s postupom opísaným v príklade 1, s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa namiesto trans-4-hydroxycyklohexylamínu použije 1S, trans-2-hydroxycyklopentylamín. Takto získaná požadovaná zlúčenina má formu peny.The title compound is obtained in a manner analogous to that described in Example 1 except that 1S, trans-2-hydroxycyclopentylamine is used in place of trans-4-hydroxycyclohexylamine. The title compound thus obtained is in the form of a foam.

R v zmesi etylacetátu a etanolu v objemovom pomere : 25 : 0,44 [α]^2θο = 25,5 ’ (c = 1 v dimetylformamide) .R in a mixture of ethyl acetate and ethanol in a volume ratio of: 25: 0.44 [α] ^2θ ο = 25.5 '(c = 1 in dimethylformamide).

Príklad 4Example 4

6-[ (ÍR, trans)-2-hydroxycyklopentyl]-2'-O-metyladenozín6 - [(1R, trans) -2-hydroxycyclopentyl] -2'-O-methyladenosine

Požadovaná zlúčenina sa získa spôsobom, ktorý je analogický so spôsobom opísaným v príklade 1, s tou výnimkou, že namiesto trans-4-hydroxycyklohexylamínu sa použije lR,trans-2-hydroxycyklopentylamín. Takto získaná zlúčenina má nasledujúce charakteristiky:The title compound is obtained in a manner analogous to that described in Example 1, except that 1R, trans-2-hydroxycyclopentylamine is used in place of trans-4-hydroxycyclohexylamine. The compound thus obtained has the following characteristics:

R_£: 0,44 (zmes etylacetátu a etanolu v objemovom pomere : 25).R _£ 0.44 (ethyl acetate: ethanol in the volume ratio: 25).

[^α]^2θο = -80,2 ° (c = 1 v dimetylf ormamide) .[ ^α ] ^2θ ο = -80.2 ° (c = 1 in dimethylformamide).

Príklad 5Example 5

6-[ (1S, trans) -2-hydroxycyklohexyl]-2¹ -O-metyladenozín6- [(1S, trans) -2-hydroxy-cyclohexyl] -2-methyl adenosine ¹ O

Požadovaná zlúčenina sa získa spôsobom, ktorý je analogický so spôsobom opísaným v príklade 1, s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa namiesto trans-4-hydroxycyklohexylamínu použije 1S,trans-2-hydroxycyklohexylamín. Takto získaná zlúčenina má formu peny.The title compound is obtained in a manner analogous to that described in Example 1, except that 1S, trans-2-hydroxycyclohexylamine is used instead of trans -4-hydroxycyclohexylamine. The compound thus obtained is in the form of a foam.

R_£: 0,42 (zmes etylacetátu a etanolu v objemovom pomere : 25).R _£ 0.42 (ethyl acetate: ethanol in the volume ratio: 25).

[a]^2OD = -26,2 ' (c = 1 v dimetylformamide).[α] ²⁰ D = -26.2 '(c = 1 in dimethylformamide).

Príklad 6Example 6

6- [ (trans)-4-hydroxycyklohexyl]— 2 *-O-etyladenozín6 - [(trans) -4-hydroxycyclohexyl] -2'-O-ethyladenosine

Požadovaná zlúčenina sa pripraví spôsobom, ktorý je analogický so spôsobom opísaným v príklade 5. Získa sa vo forme 0,4-hydrátu.The title compound was prepared in a manner analogous to that described in Example 5. Obtained as the 0,4-hydrate.

Teplota topenia: 98 ’C (skvapalnenie), [α]²°_ο = -58 ’ (c = 1 v dimetylformamide).Melting point: 98 ° C (liquefaction), [α] ² ° _ο = -58 ° (c = 1 in dimethylformamide).

Príklad 7Example 7

6-[ (1S,trans)-2-hydroxycyklohexyl]-2'-O-etyladenozín6 - [(1S, trans) -2-hydroxycyclohexyl] -2'-O-ethyladenosine

Požadovaná zlúčenina sa pripraví spôsobom, ktorý je analogický so spôsobom opísaným v príklade 5.The title compound was prepared in a manner analogous to that described in Example 5.

Príklad 8Example 8

6- [ (ÍR,trans)-2-hydroxycyklohexyl]-2'-O-metyladenozín6 - [(1R, trans) -2-hydroxycyclohexyl] -2'-O-methyladenosine

Požadovaná zlúčenina sa získa spôsobom, ktorý je analogický so spôsobom opísaným v príklade 1, s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa namiesto trans-4-hydroxycyklohexylamínu použije ÍR,trans-2-hydroxycyklohexylamín. Takto získaná požadovaná zlúčenina má formu peny.The title compound is obtained in a manner analogous to that described in Example 1, except that IR, trans-2-hydroxycyclohexylamine is used in place of trans -4-hydroxycyclohexylamine. The title compound thus obtained is in the form of a foam.

R_£: 0,42 (zmes etylacetátu a etanolu v objemovom pomere : 25).R _£ 0.42 (ethyl acetate: ethanol in the volume ratio: 25).

[a]^2OD = -69,25’ (c = 1 v dimetylformamide).[α] ²⁰ D = -69.25 '(c = 1 in dimethylformamide).

Zlúčeniny podľa vynálezu majú zaujímavé farmakologické vlastnosti. Môžu byť preto užitočné ako liečivá. Na tento účel sa môžu zlúčeniny podľa vynálezu použiť ako také alebo vo forme hydrátov alebo adičných produktov s organickými rozpúš21 ťadlami, akými sú napríklad metanol, etanol alebo etylacetát. Najzaujímavejšou zlúčeninou všeobecného vzorca la je zlúčenina z príklad 1, ktorá sa v ďalšom texte uvádza ako zlúčenina č.l.The compounds of the invention have interesting pharmacological properties. They may therefore be useful as pharmaceuticals. For this purpose, the compounds of the invention may be used as such or in the form of hydrates or addition products with organic solvents such as methanol, ethanol or ethyl acetate. The most interesting compound of formula (Ia) is the compound of Example 1, hereinafter referred to as Compound No. 1.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la sú zaujímavé ako analgetiká, ako to už bolo uvedené vyššie. Pokiaľ ide o ich ďalšie účinky, možno uviesť, že zlúčeniny podľa vynálezu majú antihypertenzné účinky, ako je to zrejmé z výsledkov nasledujúcich výskumov.The compounds of formula (Ia) are of interest as analgesics as mentioned above. Regarding their other effects, the compounds of the invention have antihypertensive effects, as is evident from the results of the following investigations.

Meranie väzby k adenozínovým receptorom A^x a A² v membránach z mozgovej kôry krysy alebo z kôry alebo striata mozgu ošípané j pri použití metódy podľa R. F. Brunsea, G. H. Lua a T. A.-Pugsleyea, ktorá je opísaná v Molec. Pharmacol. 29, 331 - 346 (1986).Measurement of the binding of the adenosine receptor A ^x and A ² in membranes from rat cortex or from the cortex or striatum of the brain J pigs, using the method of RF Brunsea, GH and Lua-Pugsleyea TA, as described in Molec. Pharmacol. 29, 331-346 (1986).

Ďalšie testovanie účinnosti uvedených zlúčenín sa uskutočňuje v izolovaných premývaných obličkách krysy so zameraním na nasledujúce parametre:Further testing of the efficacy of the compounds is performed in isolated, washed kidney rats, focusing on the following parameters:

sekrécia renínu, renálne hemodynamiky, inhibícia uvoľňovania noradrenalínu z nervových zakončení po elektrostimulácii renálnych nervov podľa metódy P. M. Vanhoutteho, D. Browninga, E. Coena, T. J. Verbeurena, L. Zonnekeyena a M. G. Collisa, opísané v Hypertension 4, 251 - 256 (1982), meranie krvného tlaku, srdcového rytmu, produkcie moča a aktivity renínu v plazme bdelých, NaCl-zbavených a nasýtených normotenzných alebo spontánne hypertenzných krýs s katétrom implantovaným do abdominálnej aorty a do dutej žily po intravenóznom podaní alebo po podaní vo forme infúzie alebo bolusu zlúčenín podľa vynálezu metódou J. F. M. Smotsa a J. M. Brodyho, opísanej v Am. J. Physiol. 247, R1003 - R1008 (1984).renin secretion, renal hemodynamics, inhibition of noradrenaline release from nerve endings following renostinal electrostimulation according to PM Vanhoutte, D. Browning, E. Coen, TJ Verbeuren, L. Zonnekeyen, and MG Collis, described in Hypertension 4, 251-256 (1982) , measuring blood pressure, heart rhythm, urine production and plasma renin activity in the vigilant, NaCl-depleted and saturated normotensive or spontaneously hypertensive rats with a catheter implanted into the abdominal aorta and into the hollow vein following intravenous or infusion or bolus administration of the compounds of the invention by the method of JFM Smots and JM Brody described in Am. J. Physiol. 247, R1003-R1008 (1984).

Z výsledkov uvedených výskumov sa dá odvodiť, že v rámci antihypertenznej účinnosti zlúčenín všeobecného vzorca la dochádza ako k inhibícii sekrécie renínu, tak k priamej vazodilatácii. Na rozdiel od zníženia krvného tlaku zostávajú produkcia a exkrécia elektrolytu nezmenené. Z toho vyplýva, že zlúčeniny všeobecného vzorca la sa nemusia použiť iba ako antihypertenzné činidlá, ale tiež ako činidlá spôsobujúce koronárnu vazodilatáciu. Okrem tohto chránia tieto zlúčeniny vaskulárny endotel mechanizmom inhibície agregácie trombocytov a aktivácie leukocytov. Tieto zlúčeniny taktiež znižujú hladinu lipidov v krvi.From the results of these investigations, it can be deduced that both the inhibition of renin secretion and direct vasodilation are within the antihypertensive activity of the compounds of formula Ia. Unlike lowering blood pressure, production and excretion of electrolyte remain unchanged. Accordingly, the compounds of formula (Ia) need not only be used as antihypertensive agents, but also as coronary vasodilators. In addition, these compounds protect the vascular endothelium by inhibiting platelet aggregation and leukocyte activation. These compounds also reduce blood lipid levels.

Vzhľadom na vyššie uvedené indikácie je výhodnou zlúčeninou všeobecného vzorca la zlúčenina z príkladu 1. Výhodnými indikáciami sú kardioprotektívna a analgetická indikácia.In view of the above indications, a preferred compound of Formula Ia is the compound of Example 1. Preferred indications are cardioprotective and analgesic indications.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la sú taktiež účinné pri liečení arytmií, čo jee stanovené ich agonizujúcou účinnosťou voči adenozínovému receptoru A¹, ktorá je selektívna v porovnaní s ich účinnosťou voči receptoru A², ako to bude stanovené napríklad v ďalej opísanom teste a), a napríklad ich schopnosťou prolongovat kondukciu cez atrioventrikulárny (A-V) nodus srdca, ako je to preukázané v ďalej zaradenom teste b). Uvedené zlúčeniny takto reštaurujú sínusový rytmus pri supraventrikulárnej tachykardii, predovšetkým pri paroxymálnej supraventrikulárnej tachykardii, znižujú srdcovú frekvenciu pri tachykardiálnej atriálnej fibrilácii a vracajú ventrikulárnu tachykardiu indukovanú beta-adrenergnou stimuláciou do normálneho rytmu.The compounds of formula Ia are also effective in the treatment of arrhythmias as determined by their agonist activity against the adenosine A ¹ receptor, which is selective over their activity against the A ² receptor, as determined, for example, in test a) described below, and for example their ability to prolong conduction through the atrioventricular (AV) nodus of the heart, as demonstrated in test b) below. The compounds thus restore the sinus rhythm in supraventricular tachycardia, in particular in paroxymal supraventricular tachycardia, reduce heart rate in tachycardial atrial fibrillation and return the ventricular tachycardia induced by beta-adrenergic stimulation to normal rhythm.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la napodobňujú prekondicionačný efekt, čo je mechanizmus, pri ktorom krátkodobá ischémia robí srdce odolným voči infarktu, ku ktorému by mohlo prísť v prípade následnej ischémie. Tieto zlúčeniny sa dajú použiť na ochranu srdca počas nestabilizovanej angíny, proti infarktu myokardu pri podpornej adjuvantnej terapii alebo bez nej, alebo pri ischemickej lézii u pacientov, ktorí napríklad podstupujú chirurgické implantovanie koronárneho arteriálneho by23 passu, angioplastiu, transplantáciu srdca alebo iný nesrdcový chirurgický zákrok.The compounds of formula Ia mimic the preconditioning effect, a mechanism in which short-term ischemia makes the heart resistant to a heart attack that could occur in the event of subsequent ischemia. These compounds can be used to protect the heart during unstabilized angina, against or without myocardial infarction, or in ischemic lesion in patients, for example, undergoing coronary arterial bypass surgery, angioplasty, heart transplantation or other non-cardiac surgery.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la sa dajú predovšetkým použiť pri podávaní subjektom náchylným k infarktom myokardu, napríklad ako dôsledok stanovenia diagnózy u pacientov, ktorí ešte infarkt myokardu neprekonali, alebo u pacientov, ktorí už infarkt myokardu v minulosti prekonali.In particular, the compounds of formula Ia can be used for administration to subjects susceptible to myocardial infarction, for example as a result of diagnosis in patients who have not yet had a myocardial infarction or in patients who have already had a myocardial infarction.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la ďalej znižujú hladinu inzulínu v plazme, bez toho aby ovplyvňovali glukózovú toleranciu .The compounds of formula Ia further decrease plasma insulin levels without affecting glucose tolerance.

Tieto zlúčeniny potencionalizujú účinok inzulínu pre účely zvýšenia absorpcie glukózy a znižujú lipolýzu v adipóznom tkanive, čo vedie ku zníženiu plazmových koncentrácií voľných mastných kyselín (pozri ďalej zaradený test d)). Zníženie plazmovej koncentrácie voľných mastných kyselín zasa vedie ku zníženiu hladiny triglyceridov, čo ďalej vedie ku zvýšeniu HDL cholesterolu.These compounds potentiate the effect of insulin for the purpose of increasing glucose absorption and reduce lipolysis in adipose tissue, resulting in decreased plasma concentrations of free fatty acids (see test d) below). Lowering the plasma concentration of free fatty acids in turn leads to a lowering of triglycerides, which in turn leads to an increase in HDL cholesterol.

Inzulín-šetriaci účinok alebo/a schopnosť znížiť hladinu mastných kyselín robí zlúčeniny všeobecného vzorca la spôsobilými na použitie pri liečení cukrovky typu I a cukrovky typu II, t.j. inzulíno-nedependentnej cukrovky.The insulin-sparing effect and / or the ability to lower the level of fatty acids renders the compounds of formula (Ia) suitable for use in the treatment of type I diabetes and type II diabetes, i. insulin-dependent diabetes.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la znižujú hladinu triglyceridov a voľných mastných kyselín v plazme (pozri ďalej zaradený test e) ) a zvyšujú hladinu HDL cholesterolu a sú týmto užitočné pri liečení lipidovej dysfunkcie a stavov združených so zvýšenými hladinami voľných mastných kyselín a triglyceridov a všade tam, kde sa požaduje zvýšenie HDL cholesterolu.The compounds of formula Ia lower plasma triglycerides and free fatty acids (see test e) below) and increase HDL cholesterol levels and are thus useful in the treatment of lipid dysfunction and conditions associated with elevated levels of free fatty acids and triglycerides and wherever an increase in HDL cholesterol is desired.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la vykazujú dobrú metabolickú stabilitu.The compounds of formula Ia show good metabolic stability.

Ďalším predmetom vynálezu je preto použitie zlúčenín všeobecného vzorca la na liečenie bolesti alebo na prípravu liečiv vhodných na liečenie bolesti.Therefore, a further object of the invention is the use of the compounds of formula Ia for the treatment of pain or for the preparation of medicaments suitable for the treatment of pain.

Ešte ďalším predmetom vynálezu je vyššie definovaná zlúčenina všeobecného vzorca la na použitie pri liečení bolesti.Yet another object of the invention is a compound of formula Ia as defined above for use in the treatment of pain.

Ďalším predmetom vynálezu je analgetická kompozícia, ktorej podstata spočíva v tom, že obsahuje vyššie definovanú zlúčeninu všeobecného vzorca la v kombinácii s farmaceutický prijateľným nosičom alebo riedidlom. Prihlasovateľ má v úmysle použiť zlúčeniny všeobecného vzorca la i pre indikácie, ktoré boli uvedené vyššie pre zlúčeniny všeobecného vzorca I.Another object of the invention is an analgesic composition comprising a compound of formula (Ia) as defined above in combination with a pharmaceutically acceptable carrier or diluent. The Applicant intends to use the compounds of formula Ia also for the indications mentioned above for the compounds of formula I.

Nasledujúce farmakologické testy ilustrujú vyššie uvedenú účinnosť zlúčenín všeobecného vzorca la.The following pharmacological tests illustrate the above activity of the compounds of formula Ia.

a) Afinita k adenozínovým receptorom(a) Affinity for adenosine receptors

Metódou, ktorú opísali H. Brunsen a kol. v Molecular Pharmacology 29, (1986), str. 331 - 344 sa pripravia striatálne membrány ošípaných. Na označenie ako receptorov A¹ tak i receptorov A² sa použije neselektívne agonizujúce činidlo adenozínového receptora, ktorým je Ή-NECA. Hodnoty IC_SO sú odvodené z vytesňovacích kriviek pri použití nelineárnej metódy najmenších štvorcov v súlade s Langmuirovou rovnicou, následne sa vypočítajú hodnoty pK_D.The method of H. Brunsen et al. in Molecular Pharmacology 29, (1986), p. 331-344, porcine striatal membranes are prepared. The non-selectively agonizing agent of the adenosine receptor, which is Ή-NECA, is used to label both the A ¹ and A ² receptors. IC ₅₀ values are derived from the displacement curves using a non-linear least squares method in accordance with the Langmuir equation, then the pK _D values are calculated.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la vykazujú afinitu k receptorom A¹ napríklad v rozmedzí od 1 do 500 nM.The compounds of formula la show affinity for A ¹ for example from 1 to 500 nm.

b) Arytmiab) Arrhythmia

Aktivácia adenozínového receptora A¹ znižuje výskyt napríklad paroxymálnej supraventrikulárnej tachykardie, tachykardiálnej artiálnej fibrilácie a ďalších arytmií spomalením kondukcie cez atrio-ventrikulárny (A-V) nodus srdca detegované zvýšením intervalu P-R. Použitá testovacia metóda zahrňuje zaznamenávanie zmien EKG u dospelých opíc Rhesus pri vedomí. Zlúčeniny všeobecného vzorca la sa podávajú v dávkovom rozmedzí od asi 0,1 mg/kg do asi 1000 mg/kg pri perorálnom podaní alebo v dávkovom rozmedzí od 0,03 do 30 mg/kg pri intravenóznej aplikácii v rámci testu opísaného C. Clarkom a kol. v The Pharmaceutical Journal 244, 595 - 597 (1990). Tak napríklad zlúčenina č. 1 prolonguje pri tomto teste interval P-R povrchového elektrokardiogramu (EKG), čo indikuje spomalenie kondukcie cez A V nodus pri dávkach 0,1 a 0,6 mg/kg pri perorálnom podaní. Ako už bolo uvedená vyššie, vedie takýto účinok k ukončeniu AV nodálnej recidívnej tachykardie a k zníženiu frekvencie srdca pri tachykardiálnej atriálnej fibrilácii.Activation of adenosine receptors reduces the incidence A ¹ such as paroxysmal supraventricular tachycardia, tachycardic atrial artiálnej and other arrhythmias by slowing conduction through the atrio-ventricular (AV) node of the heart detected by an increase in PR interval. The test method used involves recording ECG changes in conscious adult Rhesus monkeys. The compounds of formula Ia are administered in a dosage range of about 0.1 mg / kg to about 1000 mg / kg orally or in a dosage range of 0.03 to 30 mg / kg for intravenous administration in the test described by C. Clark and al. in The Pharmaceutical Journal 244, 595-597 (1990). For example, compound no. 1, the PR surface electrocardiogram (ECG) interval prolonged in this assay, indicating a slowing of conduction via AV nodus at doses of 0.1 and 0.6 mg / kg by oral administration. As mentioned above, such an effect results in the termination of AV nodal recurrent tachycardia and a decrease in heart rate in tachycardial atrial fibrillation.

c) Ochrana proti infarktu prekondicionačným mechanizmomc) Protection against heart attack by preconditioning mechanism

Prekondicionácia (5 minútová ischémia nasledovaná 10 minútovým zotavením) robí srdce veľmi odolným proti infarktu z následnej ischémie (30 minút) a reperfúzie (3 hodiny). Testovacia metodika je opísaná v článku G. S. Liu a kol., 1991, Circulation (84), 1, 350 - 356 a J. D. Thorntona a kol., v 1992-Circulation (85), 659 - 665. Zlúčeniny všeobecného vzorca la sa podávajú intravenózne v dávke od asi 0,01 do 10 mg/kg králikom. Pri tomto teste sú králiky, ktorým sa podalo 100 Mg/kg zlúčeniny č. 1, chránené takmer rovnako ako pri endogénnej prekondicionácii proti infarktu indukovanému 30 minútovou koronárnou oklúziou.Preconditioning (5-minute ischemia followed by 10-minute recovery) makes the heart very resistant to heart attack from subsequent ischemia (30 minutes) and reperfusion (3 hours). The test methodology is described in GS Liu et al., 1991, Circulation (84), 1, 350-356 and JD Thornton et al., In 1992-Circulation (85), 659-655. The compounds of formula Ia are administered intravenously. at a dose of about 0.01 to 10 mg / kg to rabbits. In this test, rabbits given 100 mg / kg of Compound # 1 were administered. 1, protected almost as well as in endogenous preconditioning against a heart attack induced by a 30 minute coronary occlusion.

d) Transport glukózy a lipolýza k adipocytoch krysyd) Glucose transport and lipolysis to rat adipocytes

i) Adipocyty sa izolujú z epididymálnych tukových vankúšikov normálne kŕmených krýs digesciou kolagenázou. Získané bunky (finálna koncentrácia 2 % obj./obj.) sa predinkubujú s adenozín-deaminázou (1 U/ml) a s tetovanými zlúčeninami, napríklad so zlúčeninou č. 1, a s ostatnými prísadami predpísanými na meranie transportu glukózy pri teplote 37 ’C.i) Adipocytes are isolated from epididymal fat pads of normally fed rats by collagenase digestion. The cells obtained (final concentration 2% v / v) are preincubated with adenosine deaminase (1 U / ml) and with tattooed compounds, e.g. 1, and the other ingredients prescribed for measuring glucose transport at 37 ° C.

Po 30 minútach sa potom pridá [3-³H]-glukóza (finálna koncentrácia 50 μΜ, 0,5 μθΐ/ιη1) a v inkubácii sa pokračuje počas ďalších 60 minút. Zabudovanie rádioaktivity z [3-³H]- -glukózy do bunečných lipidov (meranie transportu glukózy) sa vyhodnotí extrakciou bunečnej suspenzie (0,5 ml) 5 ml scintilačnej kvapaliny na báze toluénu a následnou kvapalinovou scintilografiou. Vo vode rozpustné metabolity a zvyšková [3-³H]-glukóza zostanú vo vodnej fáze a nedetegujú sa.After 30 minutes, [3- ³ H] -glucose (final concentration 50 μΜ, 0.5 μθΐ / ιη1) is then added and incubation continued for a further 60 minutes. Incorporation of radioactivity from [3- ³ H] -glucose into cell lipids (measurement of glucose transport) is evaluated by extracting the cell suspension (0.5 ml) with 5 ml of toluene-based scintillation fluid followed by liquid scintilography. Water-soluble metabolites and residual [3- ³ H] -glucose remain in the aqueous phase and are not detected.

Lipolýza sa meria konvenčným spôsobom. Pri jednej metóde sa bunky inkubujú s 1 μΜ izoproterenolu a bez neho, potom sa v inkubácii pokračuje počas 60 minút. Supernatant sa od buniek oddelí po predchádzajúcom odstredení cez dinonylftalát a lipolýza sa vyhodnotí enzymatickým stanovením glycerolu uvoľneného do supernatantu.Lipolysis is measured in a conventional manner. In one method, cells are incubated with and without 1 μΜ of isoproterenol, then incubated for 60 minutes. The supernatant is separated from the cells after prior centrifugation through dinonyl phthalate and the lipolysis is evaluated by enzymatic determination of glycerol released into the supernatant.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la sú pri tomto teste účinné pri koncentrácii od 0,1 do 1000 nM.Compounds of formula (Ia) are active in this assay at a concentration of from 0.1 to 1000 nM.

Zlúčenina č. 1 potlačila lipolýzu v adipocytoch krysy pri koncentráciách od 0,1 do 100 nM.Compound No. 1 suppressed lipolysis in rat adipocytes at concentrations from 0.1 to 100 nM.

V prítomnosti adenozín-deaminázy (1 U/ml) nemá zlúčenina č. 1 žiaden významný účinok na inkorporáciu rádioaktivity z [3-³H]-glukózy do bunečných lipidov pri absencii inzulínu a iba okrajový účinok v prítomnosti maximálne stimulujúcej inzulínovej koncentrácie (8 nM), avšak významne zvyšuje stimuláciu inkorporácie rádioaktivity koncentračné závislým spôsobom pri koncentráciách od 0,1 do 50 nM inzulínu. Tieto pozorovania indikujú, že uvedená zlúčenina zvyšuje citlivosť transportu glukózy na inzulín. V prítomnosti takmer maximálne účinnej koncentrácie zlúčeniny č. 1 sa hodnota EC_SO pre inzulínovú stimuláciu [3-³H]-glukózovej inkorporácie do lipidov zníži 2- až 3-krát. V prítomnosti adenozín-deaminázy a 1 μΜ izoproterenolu, 10 - 50 nM zlúčeniny č. 1 zvýši ako citlivosť, tak aj mieru odozvy na inzulín. Hodnota EC pre inzulín sa zníži až päťkrát a stimulácia pri maximálnej inzulínovej koncentrácii sa významne zvýši.In the presence of adenosine deaminase (1 U / ml), compound no. 1, no significant effect on incorporation of [3- ³ H] -glucose radioactivity into cell lipids in the absence of insulin and only a marginal effect in the presence of maximum stimulating insulin concentration (8 nM), but significantly increases stimulation of incorporation of radioactivity in a concentration dependent manner , 1 to 50 nM insulin. These observations indicate that the compound increases the sensitivity of glucose transport to insulin. In the presence of a near-maximum effective concentration of Compound # 2. 1, the EC ₅₀ value for insulin stimulation of [3- ³ H] -glucose incorporation into lipids is reduced 2 to 3 times. In the presence of adenosine deaminase and 1 μΜ of isoproterenol, 10 - 50 nM of compound no. 1 will increase both the sensitivity and the rate of insulin response. The EC value for insulin is reduced by up to five times and the stimulation at maximum insulin concentration is significantly increased.

ii) Lipidy a glukóza pri normálnych krysách v režime 18 hodinového pôstu(ii) Lipids and glucose in normal rats on an 18-hour fast

Krysy vo veku 2 až 3 mesiace s telesnou hmotnosťou asi 250 gramov sa prechovávajú v priestore s regulovanou teplotou okolia 22 ’C s režimom cyklov 12 hodín svetla a 12 hodín tmy počas sedem dní.Rats 2 to 3 months of age, weighing about 250 grams, are housed in a controlled temperature environment of 22 ° C with a 12 hour light and 12 hour dark cycle for seven days.

Potrava a voda sú pre krysy dostupné ad libitum. Po 18 hodinovom pôste sa krysám (5 jedincov v skupine) podá testovaná zlúčenina v rámci pitia v 0,5 % CMC. Pokusné zvieratá prijmú 1,0 ml/100 g telesnej hmotnosti. Tri hodiny po podaní sa krysy anestetizujú pôsobením oxidu uhličitého a odoberie sa im kardiálnou punkciou krv. Izoluje sa krvné sérum, ktoré sa použije na stanovenie glukózy, voľných mastných kyselín a beta-hydroxybutyrátu. Obsah voľných mastných kyselín sa stanoví kalorimetrickým enzymatickým stanovením pri použití acyl-COAperoxidázy, glukóza sa stanoví metódou glukózo-oxidázy (YSI model 27, Yellow Spring, Ohio) a beta-hydroxybutyrát sa stanoví enzymatickým stanovením pri použití enzýmovej väzby beta-hydroxybutyrát-dehydrogenáza (Sigma Kit 310-A, St. Louis, Mo). Zlúčeniny všeobecného vzorca la sú účinné v dávke od asi 1 do asi 5000 /ng/kg.Food and water are available ad libitum for rats. After fasting for 18 hours, rats (5 subjects per group) were dosed with 0.5% CMC of the test compound. The test animals receive 1.0 ml / 100 g body weight. Three hours after administration, the rats are anesthetized with carbon dioxide and blood is collected by cardiac puncture. Blood serum is isolated and used to determine glucose, free fatty acids, and beta-hydroxybutyrate. The free fatty acid content is determined by a calorimetric enzymatic assay using acyl-COAperoxidase, glucose determined by the glucose oxidase method (YSI model 27, Yellow Spring, Ohio) and beta-hydroxybutyrate determined by the enzymatic assay using the beta-hydroxybutyrate dehydrogenase enzyme bond ( Sigma Kit 310-A, St. Louis, Mo.). The compounds of formula Ia are effective at a dosage of from about 1 to about 5000 / ng / kg.

Dávky nevyhnutné na zníženie hladiny voľných mastných kyselín (primárny dôsledok účinku na adipocyty) predstavuje pre zlúčeninu č. 1 5 až 100 gg/kg 2 hodiny po podaní dávky. To má za následok dávkovo-dependentné zníženie beta-hydroxybutyrátu a hladiny glukózy v krvi.The dosages necessary to reduce the level of free fatty acids (the primary consequence of the effect on adipocytes) for compound no. 15 to 100 gg / kg 2 hours after dosing. This results in a dose-dependent decrease in beta-hydroxybutyrate and blood glucose levels.

ii) Účinky na inzulíno-nedependentnú cukrovku (NIDD) pri krysáchii) Effects on Insulin-Dependent Diabetes (NIDD) in Rats

V rámci tohto testu konzumujú krysy s telesnou hmotnosťou 200 až 220 g vysokotučnú diétu ad libitum. V stave nakŕmenia sa krysám injikuje do chvostovej žily 40 mg streptomycínu na kilogram telesnej hmotnosti. Po jednom týždni sa za diabetické považujú tie krysy, ktoré majú hladinu krvnej glukózy vyššiu ako 200 mg/dl a ktoré majú po pôste cez noc a podrobení sa tolerančnému testu s perorálnym podaním glukózy hladinu glukózy 40 až 80 mg/dl tri hodiny po tomto teste. O štyri dni neskôr sa tieto pokusné zvieratá použijú na účely testu v prípade, že majú hladinu krvnej glukózy vyššiu ako 180 mg/dl. Krvná glukóza sa stanovuje pri použití glukózového analyzátora YSI. Chromický skríningový test sa uskutočňuje nasledujúcim spôsobom.In this test, rats weighing 200-220 g consumed a high fat diet ad libitum. When fed, rats are injected into the tail vein with 40 mg streptomycin per kilogram of body weight. After one week, those rats having a blood glucose level greater than 200 mg / dl and having an overnight fast and undergoing an oral glucose tolerance test of 40 to 80 mg / dl three hours after the test are considered diabetic. . Four days later, these test animals are used for test purposes if they have a blood glucose level greater than 180 mg / dl. Blood glucose is determined using a YSI glucose analyzer. The chrome screening test is performed as follows.

V deň 1 sa krysám odoberie potrava o 9. hodine dopoludnia a po východiskovom odpočítaní krvnej glukózy v krvi odobranej zo špičky chvosta sa pokusným zvieratám perorálne podá buď vehikulum (kontrolná skupina zvierat) alebo testovaná zlúčenina (9 krýs na každú aplikáciu). O šesť hodín neskôr sa stanoví obsah glukózy v krvi a bezprostredne potom sa krysám opäť podá potrava.At day 1, the rats are fed at 9 am and, following a baseline count of blood glucose from the blood collected from the tail tip, the animals are orally administered either vehicle (control group) or test compound (9 rats per application). Six hours later, the blood glucose is determined and the rats are again fed immediately.

Rovnakým krysám sa podáva buď vehikulum alebo účinná látka jedenkrát denne počas 11 nasledujúcich dní. Krvná glukóza sa stanoví v hodine 0 a po šesťhodinovom pôste po podaní dávky účinnej zlúčeniny 4., 8. a 11. deň. Dávka 100 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti zlúčeniny všeobecného vzorca la, napríklad zlúčeniny č. 1, má za následok významné zníženie hladiny glukózy v krvi.The same rats are given either vehicle or drug once daily for the 11 consecutive days. Blood glucose is determined at hour 0 and after a six-hour fast after the administration of the active compound on days 4, 8 and 11. A dose of 100 micrograms per kilogram of body weight of a compound of formula Ia, e.g. 1, results in a significant reduction in blood glucose levels.

e) Dislipidémia charakterizovaná zvýšenou hladinou triglyceridov v krvnom séree) Dislipidemia characterized by elevated blood serum triglyceride levels

Niektoré štúdie preukázali pozitívnu koreláciu medzi hladinou triglyceridu v sére (a pridruženým poklesom hladiny HDL cholesterolu) a rizikom koronárneho ochorenia srdca (Grundy v Cholesterol a Atherosclerosis: Diagnosis and Treatment, Lippicott, Phipadelphia (1990)). Zníženie zvýšenej hladiny triglyceridov ako nový prístup ku zníženiu rizika koronárneho ochorenia srdca, sa najskôr objavilo v správe Helsinky Heart Study, kde sa uvádza, že po liečení gemfibrozilom sa najväčšie obmedzenie vážnych koronárnych príhod dosiahlo u pacientov s hyperlipidémiou typu IIB, pri ktorých boli všeobecne zvýšené ako LDL-cholesterol, tak aj celkové sérové triglyceridy a znížené hladiny HDL cholesterolu. Zlúčeniny všeobecného vzorca la sú účinné pri opiciach Rhesus v dávkach od asi 0,03 do 30 (napríklad v dávkach od 0,1 do 30) mg/kg pri intravenóznom podaní a v dávkach 0,1 až 100 (napríklad v dávkach 0,1 až 10) mg/kg pri perorálnom podaní. Zlúčenina č. 1 poskytuje dávkovo závislý a dlhotrvajúci pokles hladiny voľných mastných kyselín v plazme a triglyceridov v plazme u opíc Rhesus pri dávkach od 0,03 do 6 mg/kg pri intravenóznom podaní a pri dávkach 0,1 až 1,2 mg/kg pri perorálnom podaní. Reprezentačné výsledky pre zlúčeninu č. 1 pri perorálnej dávke 0,6 mg/kg poskytujú zníženie obsahu voľných mastných kyselín o asi 60 % v porovnaní s kontrolnou skupinou zvierat po 300 minútach a zníženie obsahu triglyceridov o 40 %.Some studies have shown a positive correlation between serum triglyceride (and the associated decrease in HDL cholesterol) and the risk of coronary heart disease (Grundy in Cholesterol and Atherosclerosis: Diagnosis and Treatment, Lippicott, Phipadelphia (1990)). Reduction of elevated triglyceride levels as a new approach to reducing the risk of coronary heart disease first appeared in the Helsinki Heart Study report, which reported that after treatment with gemfibrozil, the greatest reduction in serious coronary events was achieved in patients with type IIB hyperlipidemia, generally elevated both LDL-cholesterol and total serum triglycerides and lowered HDL cholesterol levels. The compounds of formula Ia are effective in Rhesus monkeys at doses of from about 0.03 to 30 (e.g., from 0.1 to 30) mg / kg by intravenous administration and at doses of 0.1 to 100 (e.g., from 0.1 to 30). 10) mg / kg for oral administration. Compound No. 1 provides a dose-dependent and long-lasting decrease in plasma free fatty acids and plasma triglycerides in Rhesus monkeys at doses from 0.03 to 6 mg / kg for intravenous administration and at doses of 0.1 to 1.2 mg / kg for oral administration . Representative results for compound no. 1 at an oral dose of 0.6 mg / kg provide a reduction in free fatty acid content of about 60% compared to a control group of animals after 300 minutes and a reduction in triglyceride content of 40%.

Zlúčeniny podľa vynálezu sú taktiež účinné pri testoch stanovujúcich stredný arteriálny krvný tlak, bradykardiu a periférnu vazodilatáciu pri anestetizovaných krysách.The compounds of the invention are also effective in tests for the determination of mean arterial blood pressure, bradycardia and peripheral vasodilation in anesthetized rats.

Tieto pokusy sa uskutočňujú na samčekoch krysy Wistar s telesnou hmotnosťou medzi 300 a 350 g pod anestéziou Pentothalom (120 mg/kg intraperitoneálne) podľa metódy Salzmanna a kol. (J. Cardiovasc. Pharmacol. 12, 451 - 460, 1988). Pokusným zvieratám sa zavedú katétre do pravej jugulárnej a pravej femorálnej žily, do ľavej komory (cez krčnú tepnu), do ľavej femorálnej artérie a aorty (cez pravú femorálnu artériu). Potom sa merajú alebo vypočítajú nasledujúce premenné veličiny: systolický a diastolický, ako aj stredný arteriálny krvný tlak (mm Kg, ľavá femorálna artéria,· Stathamov snímač krvného tlaku (tepy za minútu, z krivky krvného tlaku), miera zvýšenia tlaku v ľavej komore (dP/dt^^, mm Hg, Stathamov snímač tlaku P 23 Gb) výstup srdca (ml/min/100 telesnej hmotnosti, termodilučná metóda, pravá jugulárna žila a aorta), celková periférna rezistencia (dyn.s.cm^-s/100 g telesnej hmotnosti) a povrchový EKG. Arteriálny krvný tlak, tlak v ľavej komore, dP/dt_majt, frekvencia srdca a elektrokardiograf sa plynulé zaznamenávajú Schwarzenovým polygrafom. Uvedené parametre sa merajú 30, 20, 10 a 2 minúty pred podaním testovanej zlúčeniny do pravej femorálnej žily. Zlúčeniny všeobecného vzorca la sa injikujú v dávkach od asi 0,001 do asi 10 mg/kg telesnej hmotnosti. Zlúčenina č. 1 sa testuje v kumulatívnych dávkach 0,0003 a 0,03 mg/kg, pričom sa pre každú dávku použijú tri pokusné zvieratá. Zlúčenina č. 1 indukuje pokles krvného tlaku (ED_so = 49 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti pri intravenóznej aplikácii) a frekvencie srdca a zvýšenie systemickej vaskulárnej konduktancie.These experiments were performed on male Wistar rats weighing between 300 and 350 g under anesthesia by Pentothal (120 mg / kg intraperitoneally) according to the method of Salzmann et al. (J. Cardiovasc. Pharmacol. 12: 451-460, 1988). The test animals are administered catheters into the right jugular and right femoral veins, the left ventricle (through the carotid artery), the left femoral artery and the aorta (through the right femoral artery). Then the following variables are measured or calculated: systolic and diastolic as well as mean arterial blood pressure (mm Kg, left femoral artery, · Statham blood pressure sensor (beats per minute, from blood pressure curve), left ventricular pressure increase ( dP / dt ^^, mm Hg, Statham pressure sensor P 23 Gb) heart output (ml / min / 100 body weight, thermodilution method, right jugular vein and aorta), total peripheral resistance (dyn.s.cm ^-s / 100 The arterial blood pressure, left ventricular pressure, dP / dt _possession , heart rate and electrocardiograph are continuously recorded by Schwarzen polygraph, measured 30, 20, 10 and 2 minutes before administration of the test compound to the right. Compounds of formula Ia are injected at doses from about 0.001 to about 10 mg / kg body weight, Compound No. 1 is tested at cumulative doses of 0.0003 and 0.03 mg / kg, respectively. Three experimental animals were used for each dose. 1 induces a fall in blood pressure (ED _so = 49 micrograms per kilogram of body weight by intravenous administration), and heart rate and an increase in systemic vascular conductance.

Dávky zlúčeniny všeobecného vzorca ľa použité pri vyššie uvedených indikáciách sa budú meniť zvyčajným spôsobom v závislosti od závažnosti liečeného stavu, od telesnej hmotnosti liečeného subjektu a od relatívnej účinnosti danej hmotnosťou liečeného subjektu a od relatívnej účinnosti danej konkrétnej zlúčeniny. Všeobecným vodítkom pre voľbu vhodných jednotkových dávok môžu byt dávky 0,1 až 100 mg, ako 0,1 až 10, 0,5 až 200, 0,5 až 100 alebo 0,5 až 10, napríklad 0,1 0,5 1, 2, 3, 4 alebo 5 mg, pričom takéto jednotkové dávky sa môžu podávať viac ako jedenkrát denne, napríklad 2-, 3-, 4-, 5- alebo 6-krát denne, avšak s výhodou 1- alebo 2-krát denne tak, aby celková denná dávka pre 70 kg ťažkého cicavca, zahrňujúceho i človeka, sa pohybovala v rozmedzí od asi 0,1 do 1000 mg, napríklad pri perorálnom podaní, alebo v rozmedzí od 0,003 do 300 g pri intravenóznom podaní, t.j. v rozmedzí od asi 0,001 do 20 mg/kg/deň, ako napríklad 0,007 až 3, 0,007 až 1,4, 0,007 až 0,14 alebo 0,01 až 0,5 mg/kg/deň, predovšetkým 0,01, 0,02, 0,04, 0,05, 0,06, 0,08, 0,1 alebo 0,2 mg/kg/deň, a táto terapia môže trvať počas niekoľkých týždňov alebo niekoľkých mesiacov. Pre zlúčeninu č. 1 predstavuje výhodná dávka pre všetky indikácie podľa vynálezu 0,1 až 10 mg/deň pre 70 kg dospelého človeka. Pri výhodnú indikáciu inzulíno-nedependentnej cukrovky a pri hypertriglyceridémii predstavujú indikované dávky pre človeka 0,2 až 2 mg denne pri perorálnom podaní a pri liečení zlyhania srdca alebo iných srdcových poruchách 0,2 až 10 mg denne, predovšetkým 0,5 až 5 mg denne pri perorálnom podaní alebo 0,25 až 5 mg pri intravenóznom podaní v prípade arytmie, napríklad pri tachykardiálnej atriálnej fibrilácii.The dosages of the compound of formula (Ia) used in the above indications will vary in a conventional manner depending upon the severity of the condition being treated, the body weight of the subject being treated, and the relative efficacy of the subject's weight and the relative efficacy of the particular compound. Generally, dosages of 0.1 to 100 mg, such as 0.1 to 10, 0.5 to 200, 0.5 to 100 or 0.5 to 10, e.g. , 2, 3, 4, or 5 mg, wherein such unit doses may be administered more than once daily, for example 2-, 3-, 4-, 5- or 6 times daily, but preferably 1- or 2 times daily. such that the total daily dose for a 70 kg heavy mammal, including a human, is in the range of about 0.1 to 1000 mg, for example orally, or in the range of 0.003 to 300 g for intravenous administration, i.e. in the range of about 0.001 to 20 mg / kg / day, such as 0.007 to 3, 0.007 to 1.4, 0.007 to 0.14 or 0.01 to 0.5 mg / kg / day, especially 0.01, 0 , 02, 0.04, 0.05, 0.06, 0.08, 0.1 or 0.2 mg / kg / day, and the therapy may last for several weeks or several months. For compound no. 1 represents a preferred dose for all indications of the invention 0.1 to 10 mg / day for a 70 kg adult human. In the preferred indication of non-insulin-dependent diabetes and hypertriglyceridemia, the indicated human doses are 0.2 to 2 mg daily for oral administration and for the treatment of heart failure or other cardiac disorders 0.2 to 10 mg daily, in particular 0.5 to 5 mg daily for oral administration or 0.25 to 5 mg for intravenous administration in the event of arrhythmia, for example tachycardial atrial fibrillation.

Zlúčeniny podľa vynálezu všeobecného vzorca la sa môžu formulovať na podanie ľubovoľným spôsobom a to v závislosti od poruchy, ktorá sa lieči, a s výhodou v jednotkovej dávkovej forme alebo vo forme, ktorú si môže ľudský pacient podať sám v jedinej dávke. S výhodou sa uvádza kompozícia vhodná na perorálne, rektálne, parenterálne, intravenózne alebo intramuskulárne podanie, ako to už bolo opísané vyššie v súvislosti s použitím zlúčenín podľa vynálezu vo funkcii analgetík.The compounds of the invention of formula Ia may be formulated for administration in any desired manner depending upon the disorder being treated, and preferably in unit dosage form or in a form that the human patient can administer alone in a single dose. Preferably, a composition suitable for oral, rectal, parenteral, intravenous or intramuscular administration is disclosed, as described above in connection with the use of the compounds of the invention as analgesics.

Jednotkovými dávkovými formami na perorálne podanie môžu byť tablety alebo kapsule obsahujúce 0,05 až 20 mg zlúčeniny všeobecného vzorca la.Unit dosage forms for oral administration may be tablets or capsules containing 0.05 to 20 mg of a compound of formula Ia.

Vhodne budú zlúčeniny podľa vynálezu alebo ich hydráty alebo adičné produkty s organickými rozpúšťadlami tvoriť od asi 0,5 do asi 20 % hmotnostných, s výhodou asi 1 až asi 10 % hmotnostných, napríklad 2 až 5 % hmotnostných, z celkovej hmotnosti formulácie.Suitably, the compounds of the invention or their hydrates or organic solvent addition products will comprise from about 0.5 to about 20% by weight, preferably about 1 to about 10% by weight, for example 2 to 5% by weight, of the total weight of the formulation.

Zlúčeniny všeobecného vzorca la, v ktorom R¹' znamená hydroxycykloalkylovú skupinu obsahujúcu 4 až 8 uhlíkových atómov, sú detegované ako metabolity po podaní zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R¹ znamená cykloalkylovú skupinu obsahujúcu 4 až 8 uhlíkových atómov a R³ znamená alkylovú skupinu, teplokrvným živočíchom, napríklad krysám, psom a ľuďom.Compounds of formula Ia in which R ¹ 'is a hydroxycycloalkyl group having 4 to 8 carbon atoms are detected as metabolites upon administration of compounds of formula I wherein R ¹ is a cycloalkyl group having 4 to 8 carbon atoms and R ³ is an alkyl group , warm-blooded animals such as rats, dogs, and humans.

Podanie zlúčeniny M vedie takto k produkcii hydroxycyklohexyl-2'-O-metyladenozínu.Administration of compound M results in the production of hydroxycyclohexyl-2'-O-methyladenosine.

Ďalším predmetom vynálezu je teda spôsob podania N^e-cyk-lohexyl-2¹-O-metyladenozínu teplokrvnému živočíchovi s cieľom produkcie N⁶-hyaroxycyklohexyl-2'-O-metyladenozínu.The invention is a method of administration of N ^{-cyclohexyl-e} lohexyl-2-O-methyl adenosine ^one warm-blooded animal in order to produce ^{N6--hyaroxycyklohexyl} 2'-O-methyl adenosine.

Podľa ďalšieho predmetu vynálezu vynález poskytuje N^e-hydroxycykloalkyl-2'-O-alkyladenozín v čistej forme, napríklad s čistotou vyššou ako 95 %. Zlúčeniny, opísané ďalej v príkladoch, spĺňajú toto kritérium.In another aspect the present invention provides N--hydroxycykloalkyl ^e 2'-O-alkyl adenosines in the pure form, for example greater than 95%. The compounds described in the Examples below meet this criterion.

Ďalším predmetom vynálezu je N⁶-hydroxycykloalkyl-2'-O-alkyladenozín bez obsahu cyklohexyl-2’-O-metyladenozínu.Another object of the invention is N ⁶ -hydroxycycloalkyl-2'-O-alkyladenosine free of cyclohexyl-2'-O-methyladenosine.

Podľa ďalšieho predmetu vynálezu poskytuje vynález spôsob prípravy 2¹-O-alkyladenozínov, ktorého podstata spočíva v tom, že sa adenozín uvedie do reakcie s príslušným alkylsulfátom v prítomnosti katalyzátora fázového prechodu.In another aspect, the invention provides a process for preparing 2-O-alkyladenosines ^1, which is characterized in that adenosine is reacted with an appropriate alkyl sulphate in the presence of a phase transfer catalyst.

S výhodou je 2'-O-alkyladenozínom ľubovoľná z vyššie uvedených zlúčenín.Preferably, the 2'-O-alkyladenosine is any of the above compounds.

Podľa ďalšieho predmetu vynálezu vynález poskytuje spôsob prípravy zlúčenín všeobecného vzorca I, ktoré boli definované vyššie, ktorého podstata spočíva v tom, že sa zlúčenina všeobecného vzorca VIAccording to a further aspect of the invention there is provided a process for the preparation of the compounds of the formula I as defined above, characterized in that the compound of the formula VI

//

H OH O

(VI) uvedie do reakcie so zásaditým roztokom zlúčeniny všeobecného vzorca (R³) SO ' ' 2 4 v prítomnosti tetrabutylamóniumhydrogénsulfátu a nepolárneho rozpúšťadla, následne sa získaný produkt prečistí rekryštalizáciou .(VI) is reacted with a basic solution of a compound of formula (R ³ ) SO 4 in the presence of tetrabutylammonium hydrogen sulfate and a non-polar solvent, followed by purification by recrystallization.

V prípade, že sa to vyžaduje, môžu sa reaktívne skupiny dočasne chrániť ochrannými skupinami.If desired, reactive groups may be temporarily protected with protecting groups.

Alkylsulfátom je s výhodou dialkylsulfát, v ktorom každý alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 uhlíkové atómy.The alkylsulfate is preferably a dialkylsulfate in which each alkyl radical contains 1 to 4 carbon atoms.

Katalyzátorom fázového prechodu je s výhodou tetrabutylamóniumhydrogénsulf át .The phase transfer catalyst is preferably tetrabutylammonium hydrogen sulphate.

Reakcia s as výhodou uskutočňuje v nepolárnom rozpúšťadle, aké bude napríklad opísané ďalej.The reaction is preferably carried out in a non-polar solvent, such as will be described below.

Je definovaná skupina zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R^x znamená cykloalkylovú skupinu obsahujúcu 3 až 8 uhlíkových atómov, R³ znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy a R³ znamená alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy.The defined group of compounds of formula I, wherein R ^x represents cycloalkyl having 3 to 8 carbon atoms, R ³ is H or alkyl of 1 to 4 carbon atoms and R ³ is alkyl of 1 to 4 carbon atoms.

Až doteraz príprava zlúčenín všeobecného vzorca I typicky zahrňovala šesť reakčných stupňov, ktorými sú príprava 2', 35'-triacetylinozínu, chlorácia a hydrolýzy 6-chlór-9-5-D-ribofuranozyl-9H-purínu, ochrana 3'-0- a 5'-0-polohy tetraizopropyldisiloxánom (TIPDS-C1 ), 2'-O-alkylácia a prečistenie chromatografiou na silikagéle, deprotekcia 3'-0- a 5'-O-polohy a reakcia so zlúčeninou všeobecného vzorca a rekryštalizácia s cieľom získania zlúčeniny všeobecného vzorca I.Heretofore, the preparation of compounds of formula I typically involved six reaction steps, which are the preparation of 2 ', 35'-triacetylinosine, chlorination and hydrolysis of 6-chloro-9-5-D-ribofuranosyl-9H-purine, protection of 3'-O- and 5'-O-positions with tetraisopropyldisiloxane (TIPDS-C1), 2'-O-alkylation and purification by silica gel chromatography, deprotection of the 3'-O- and 5'-O-positions, and reaction with a compound of formula and recrystallization to give a compound of formula I.

Prihlasovateľ teraz novo zistil, že zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu pripraviť v dobrých výťažkoch a s dobrou čistotou, bez tohto aby bolo potrebné uskutočniť ochranu a deprotekciu 3'-0- a 5'-O-polohy pri použití vyššie uvedeného aisiloxánu alebo chromatografiou na silikagéle. Prihlasovateľ zistil, že východisková látka doterajšieho stavu techniky, ktorou je inozín-2',3',5'-triacetát sa môže vhodne nahradiť lipofilným inozín-2',3¹,5'-tripropionátom, ktorý umožňuje zdvojnásobiť presadenie a elimináciu nežiadúceho pyridínového rozpúšťadla.The Applicant has now found that compounds of formula I can be prepared in good yields and in good purity without the need to protect and deprotect the 3'-O- and 5'-O-position using the aisiloxane mentioned above or by silica gel chromatography . Applicant has found that the starting material of the prior art, which is inosine-2 ', 3', 5'-triacetate can be suitably replaced by a lipophilic inosine-2 ', 3 ^1, 5'-tripropionate, which allows to double the offset and the elimination of undesirable pyridine solvent.

V rámci vynálezu sa zlúčeniny všeobecného vzorca I pripravia za podmienok katalýzy fázového prechodu podľa nasledujúcej reakčnej schémy:Within the scope of the invention, the compounds of formula (I) are prepared under the phase transition catalysis conditions according to the following reaction scheme:

(R³)₂SO₄ (R ³ ) ₂ SO ₄

---------->---------->

Bu₄N‘HSOBu ₄ N'HSO

Vil kde R¹, R² a R³ majú vyššie uvedené významy.Wherein R ¹ , R ² and R ³ are as defined above.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu pripraviť reakciou zásaditého vodného roztoku zlúčeniny všeobecného vzorca VI s dialkylsulfátom, v ktorom každý alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 uhlíkové atómy, v prítomnosti tetrabutylamóniumhydrogénsulfátu a organického s vodou nemiešateľného rozpúšťadla. Zásadou použitou na prípravu uvedeného zásaditého vodného roztoku je s výhodou hydroxid alkalického kovu, akým je napríklad hydroxid sodný alebo hydroxid draselný. Rozpúšťadlom môže byť ľubovoľné s vodou nemiešateľné rozpúšťadlo, v ktorom je zlúčenina všeobecného vzorca I rozpustná, pričom týmto rozpúšťadlom je napríklad metylénchlorid alebo terc.amylalkohol. Je taktiež výhodné, ak sa reakcia uskutočňuje pri teplote z teplotného rozmedzia medzi -20 ‘C a 50 ’C, predovšetkým pri laboratórnej teplote. Reakčný čas nie je kritickým parametrom, i keď je výhodné, ak sa reakcia uskutočňuje počas asi 5 až 10 hodín, predovšetkým počas asi 7 až 8 hodín. Surová zlúčenina všeobecného vzorca I sa izoluje odparením a následným rozmiešaním zvyšku so zmesou vody a inertného rozpúšťadla, s výhodou toluénu, v objemovom pomere 1:1, pri laboratórnej teplote počas 5 až 7 hodín a filtráciou a vysušením. Čistá zlúčenina sa môže získať frakčnou kryštalizáciou, s výhodouCompounds of formula (I) may be prepared by reacting a basic aqueous solution of a compound of formula (VI) with a dialkyl sulfate in which each alkyl moiety contains 1 to 4 carbon atoms in the presence of tetrabutylammonium hydrogen sulfate and an organic water-immiscible solvent. The base used to prepare said basic aqueous solution is preferably an alkali metal hydroxide such as sodium hydroxide or potassium hydroxide. The solvent may be any water-immiscible solvent in which the compound of formula (I) is soluble, such as methylene chloride or t-amyl alcohol. It is also preferred that the reaction be carried out at a temperature from a temperature range between -20 ° C and 50 ° C, especially at room temperature. The reaction time is not a critical parameter, although it is preferred that the reaction be carried out for about 5 to 10 hours, especially for about 7 to 8 hours. The crude compound of formula (I) is isolated by evaporation and subsequent stirring of the residue with a 1: 1 by volume mixture of water and an inert solvent, preferably toluene, at room temperature for 5 to 7 hours and filtration and drying. The pure compound can be obtained by fractional crystallization, preferably

1) rekryštalizáciou z inertného rozpúšťadla, akým je toluén, rozpustením surovej zlúčeniny v tomto rozpúšťadle pri teplote 80 ’C, zahrievaním roztoku pri teplote asi 55 ’C počas približne 1 hodiny, ochladením na laboratórnu teplotu, zaočkovaním roztoku zárodočným kryštálom čistej zlúčeniny a odfiltrovaním vylúčených kryštálov,1) recrystallization from an inert solvent such as toluene by dissolving the crude compound in the solvent at 80 ° C, heating the solution at about 55 ° C for about 1 hour, cooling to room temperature, seeding the solution with a seed crystal of the pure compound and filtering off crystals

2) opakovaním kryštalizačného postupu zo stupňa 1), pričom sa však roztok zahrieva pred ochladením pri teplote 65 ’C, a2) repeating the crystallization process of step 1), but heating the solution at 65 ° C before cooling; and

3) rekryštalizáciou zo 100 % etylalkoholu rozpustením pri teplote varu pod spätným chladičom, zriedením vodou, zaočkovaním zárodočným kryštálom a následnou filtráciou a vysušením.3) recrystallization from 100% ethyl alcohol by dissolving at reflux, diluting with water, seeding with a seed crystal, followed by filtration and drying.

Značná časť zlúčenín všeobecného vzorca VI predstavuje známe zlúčeniny, ktoré sa môžu pripraviť spôsobmi opísanými v literatúre, napríklad vo vyššie uvedených patentoch US 4 843 066 a 4 585 409. Zlúčenina všeobecného vzorca VI sa môže tiež s výhodou pripraviť podľa nasledujúcej výhodnej reakčnej schémyA large proportion of the compounds of formula (VI) are known compounds which can be prepared by methods described in the literature, for example, in the aforementioned US patents 4,843,066 and 4,585,409. The compound of formula VI can also be advantageously prepared according to the following preferred reaction scheme.

kde R¹ a R² majú vyššie uvedené významy.wherein R ¹ and R ² are defined as above.

IXIX

Zlúčeniny všeobecného vzorca VI sa môžu pripraviť acyláciou inozínu všeobecného vzorca VII anhydridom kyseliny propiónovej za vzniku 2'-0-, 3'-0-, 5'-O-chránenej zlúčeniny všeobecného vzorca VIII, ďalej halogenáciou zlúčeniny všeobecného vzorca VIII tionylchloridom za vzniku medziproduktu všeobecného vzorca IX a súčasnou amináciou a hydrolýzou zlúčeniny všeobecného vzorca IX. Acylácia inozínu sa s výhodou uskutočňuje v zmesi toluénu, tributylamínu a 4-dimetylaminopyridínu pri teplote od 100 do 110 'C počas 4 až 5 hodín. Zlúčenina všeobecného vzorca VIII sa izoluje vyzrážaním heptánom. Halogenácia zlúčeniny všeobecného vzorca VIII sa s výhodou uskutočňuje v zmesi toluénu a N, N-dimetylformamidu pri teplote od asi 60 do 70 °C počas 3 až 4 hodín, pričom roztok zlúčeniny všeobecného vzorca IX sa môže ďalej použiť na premytie vodou a soľankou. Aminácia a súčasná hydrolýza medziproduktu všeobecného vzorca IX sa s výhodou uskutočňuje pridaním amínu všeobecného vzorca R¹NH_z a zahrievaním reakčnej zmesi pri teplote 100 až 110 C počas 15 až 20 hodín. Zlúčenina všeobecného vzorca VI sa izoluje filtráciou pri laboratórnej teplote a prečistí sa rekryštalizáciou.Compounds of formula (VI) may be prepared by acylating propionic anhydride inosine of formula (VII) to give a 2'-O-, 3'-O-, 5'-O-protected compound of formula (VIII), followed by halogenating the compound of formula (VIII) with thionyl chloride. IX and simultaneous amination and hydrolysis of the compound of formula IX. The inosine acylation is preferably carried out in a mixture of toluene, tributylamine and 4-dimethylaminopyridine at a temperature of from 100 to 110 ° C for 4 to 5 hours. The compound of formula (VIII) is isolated by heptane precipitation. The halogenation of the compound of formula VIII is preferably carried out in a mixture of toluene and N, N-dimethylformamide at a temperature of about 60 to 70 ° C for 3-4 hours, wherein the solution of the compound of formula IX can be further used for washing with water and brine. The amination and simultaneous hydrolysis of the intermediate of formula (IX) is preferably carried out by adding an amine of the formula R ¹ NH ₂ and heating the reaction mixture at a temperature of 100 to 110 ° C for 15 to 20 hours. The compound of formula VI is isolated by filtration at room temperature and purified by recrystallization.

Spôsob podľa vynálezu bude ilustrovaný nasledujúcimi príkladmi.The process of the invention will be illustrated by the following examples.

Spôsobový príklad 1Method Example 1

N^e-Cyklohexyl-2'-O-metyladenozín ^{N-Cyclohexyl-e} 2'-O-methyl adenosine

Stupeň AGrade A

Inozín-2',3',5’-tripropionátInosine-2 ', 3', 5'-tripropionate

Zmes 271,2 g inozínu, 966 ml tributylamínu, 3,30 g 4-dimetylaminopyridínu a 600 ml toluénu sa zahrieva pri teplote vo vnútri reakčnej zmesi 104 až 105 ’C počas 35 minút, následne sa k reakčnej zmesi pridá 453 ml anhydridu kyseliny propiónovej a to rýchlosťou, pri ktorej sa udržiava teplota vo vnútri reakčnej zmesi medzi 104 až 105 ’C . Po miešaní reakčnej zmesi pri uvedenej teplote počas ďalších 4 hodín sa zmes ochladí na teplotu 5 až 10 ’C na ľade a k takto ochladenej zmesi sa potom pridá 1000 ml heptánu. Získaná suspenzia sa mieša pri laboratórnej teplote (20 až 22 ’C) počas 30 minút, potom sa prefiltruje v Buchnerovom lieviku. Oddelený pevný podiel sa premyje celkom 450 ml heptánu v troch rovnakých podieloch s objemom 150 ml a vysuší sa pri teplote 45 až 50 ’C (3,3 kPa), pričom sa získa 425,9 g inozín-2',3',5’-tripropionátu vo forme bieleho pevného produktu.A mixture of 271.2 g of inosine, 966 ml of tributylamine, 3.30 g of 4-dimethylaminopyridine and 600 ml of toluene is heated at a temperature in the reaction mixture of 104-105 ° C for 35 minutes, followed by 453 ml of propionic anhydride. at a rate at which the temperature inside the reaction mixture is maintained at between 104 and 105 ° C. After stirring the reaction mixture at this temperature for an additional 4 hours, the mixture is cooled to 5-10 ° C on ice and then 1000 ml of heptane is added to the cooled mixture. The resulting suspension is stirred at room temperature (20-22 ° C) for 30 minutes, then filtered in a Buchner funnel. The separated solid is washed with a total of 450 ml of heptane in three equal portions of 150 ml each and dried at 45-50 ° C (3.3 kPa) to give 425.9 g of inosine-2 ', 3', 5 '. Tripropionate as a white solid.

Teplota topenia: 171 až 172 ’C, výťažok: 96,5 %.Melting point: 171-172 ° C, yield: 96.5%.

Stupeň BGrade B

N^s-CyklohexyladenozínN ^with -Cyclohexyladenosine

Zmes 270,6 g inozín-2¹,3¹,5’-tripropionátu, 240 ml N,N-dimetylformamidu a 600 ml toluénu sa zahrieva pri teplote 65 ’C počas 1 hodiny, následne sa pridá 67,84 ml tionylchloridu a to rýchlosťou, pri ktorej sa udržiava teplota vo vnútri reakčnej zmesi 62 až 65 ’C. Reakčná zmes sa mieša pri tejto teplote počas ďalších dvoch hodín a tridsiatich minút, potom sa ochladí na teplotu 10 ’C na ľade. Po pridaní 600 ml vody predchladenej na teplotu 10 až 15 ’C na ľade a to rýchlosťou, pri ktorej sa udržiava teplota nižšia ako 20 ’C, sa organická vrstva oddelí a premyje celkom 800 ml 10 % vodného roztoku chloridu sodného v štyroch rovnakých podieloch s objemom 200 ml. Organická vrstva obsahujúca surový 6-chlór-9-(2,3,5-tri-0-propionyl-B-ribofuranozyl)-9H-purín sa za miešania pridá do 620 ml cyklohexylamínu zahriateho na teplotu 105 ’C počas 2 hodín a rýchlosťou, pri ktorej sa udržiava teplota vo vnútri reakčnej zmesi 105 ’C. Po miešaní tejto zmesi pri uvedenej teplote počas ďalších 17 hodín sa reakčná zmes ochladí na laboratórnu teplotu (25 ’C) počas približne 2 hodín pri intenzívnom miešaní, následne sa prefiltruje, napríklad pri použití Buchnerovho lievika, za odsávania. Pevný podiel obsahujúci N^e-cyklohexyladenozín a cyklohexylamínhydrochlorid sa premyje celkom 460 ml toluénu v štyroch rovnakých podieloch s objemom 115 ml a prenesie sa vo vlhkom stave do päťlitrovej banky vybavenej mechanickým miešadlom. Po pridaní 2 litrov vodného nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a 2,5 litra etylacetátu sa zmes mieša až do času, kedy sa celý pevný podiel rozpustí (približne 10 až 15 minút). Organická vrstva sa oddelí a vodná vrstva sa extrahuje 1,5 1 etylacetátu a to vo dvoch podieloch s objemom 1 litra resp. 500 ml.A mixture of 270.6 g of inosine-2 ¹ , 3 ¹ , 5'-tripropionate, 240 ml of N, N-dimethylformamide and 600 ml of toluene was heated at 65 ° C for 1 hour, followed by the addition of 67.84 ml of thionyl chloride. at a rate at which the temperature within the reaction mixture was 62-65 ° C. The reaction mixture was stirred at this temperature for an additional two hours and thirty minutes, then cooled to 10 ° C on ice. After addition of 600 ml of water pre-cooled to 10-15 ° C on ice at a rate of maintaining the temperature below 20 ° C, the organic layer is separated and washed with a total of 800 ml of 10% aqueous sodium chloride solution in four equal portions. 200 ml. The organic layer containing crude 6-chloro-9- (2,3,5-tri-O-propionyl-β-ribofuranosyl) -9H-purine is added with stirring to 620 ml of cyclohexylamine heated at 105 ° C for 2 hours and at a rate of at which the temperature inside the reaction mixture is maintained at 105 ° C. After stirring the mixture at this temperature for a further 17 hours, the reaction mixture is cooled to room temperature (25 ° C) for about 2 hours with vigorous stirring, then filtered, for example using a Buchner funnel, with suction. The residue containing N ^e -cyklohexyladenozín cyklohexylamínhydrochlorid and washed with a total of 460 ml of toluene in four equal portions of 115 ml and transferred to moist the five-liter flask equipped with mechanical stirring. After addition of 2 liters of an aqueous saturated solution of sodium bicarbonate and 2.5 liters of ethyl acetate, the mixture is stirred until all the solids have dissolved (approximately 10-15 minutes). The organic layer was separated and the aqueous layer was extracted with 1.5 L of ethyl acetate in two portions of 1 L and 1 L, respectively. 500 ml.

Organické vrstvy sa spoja a odparujú sa až do času, kedy sa dosiahne odparenie asi 3 litre etylacetátu (pri teplote 40 ’C, 10 - 20 kPa). Ku zvyšku sa pridá 500 ml heptánu a získaná zmes sa mieša počas 30 minút. Pevný podiel sa oddelí pri použití Buchnerovho lievika a premyje sa celkom 300 ml heptánu v troch rovnakých podieloch s objemom 100 ml. Pevný podiel sa potom vysuší pri teplote 45 až 50 ’C (3 - 3,5 kPa) počas približne 3 hodín, pričom sa získa 148 g surového N^-cyklohexyladenozínu vo forme bieleho pevného produktu. Tento produkt sa prenesie do jednolitrovej banky s guľatým dnom vybavenej mechanickým miešadlom, následne sa do banky pridá 175 ml 95 % etanolu. Získaná suspenzia sa mieša počas 15 až 20 minút, potom sa 175 ml terc.butyletyléteru. Po päťminútovom miešaní sa suspenzia ochladí na ľade a mieša sa počas ďalších 15 minút. Táto suspenzia sa prefiltruje pri použití Buchnerovho lievika a oddelený pevný podiel sa premyje celkovo 50 ml terc.butylmetyléteru vo dvoch rovnakých podieloch s objemom 25 ml.The organic layers were combined and evaporated until about 3 liters of ethyl acetate (at 40 ° C, 10-20 kPa) were evaporated. 500 mL of heptane was added to the residue and the resulting mixture was stirred for 30 minutes. The solid was collected using a Buchner funnel and washed with a total of 300 mL of heptane in three equal portions of 100 mL. The solid is then dried at 45-50 ° C (3-3.5 kPa) for approximately 3 hours to give 148 g of crude N, -cyclohexyladenosine as a white solid. This product was transferred to a 1 L round bottom flask equipped with a mechanical stirrer, followed by the addition of 175 mL of 95% ethanol. The suspension obtained is stirred for 15 to 20 minutes, then 175 ml of tert-butyl ethyl ether are added. After stirring for five minutes, the suspension is cooled on ice and stirred for an additional 15 minutes. The suspension is filtered using a Buchner funnel and the collected solids are washed with a total of 50 ml of tert-butyl methyl ether in two equal portions of 25 ml.

Odfiltrovaný pevný podiel sa vysuší pri teplote 45 až 50 ’C (3 - 3,5 kPa) počas 14 hodín, pričom sa získa 130 g N⁶-cyklohexyladenozínu vo forme bieleho pevného produktu.The filtered solid is dried at 45-50 ° C (3-3.5 kPa) for 14 hours to give 130 g of N ⁶ -cyclohexyladenosine as a white solid.

Teplota topenia: 185 až 187 ’C, výťažok: 60,0 %.Melting point: 185-187 ° C, yield: 60.0%.

Stupeň CGrade C

N⁶-Cyklohexyl-2’-O-metyladenozínN ⁶ -Cyclohexyl-2'-O-methyladenosine

Suspenzia 94,33 g N^ä-cyklohexyladenozínu a 720 g 5 % vodného roztoku hydroxidu sodného sa mieša pri laboratórnej teplote (24 až 25 ’C) až do času, kedy sa dosiahne rozpustenie celého pevného podielu (približne 5 minút). Pomocou nálevky na pridanie reakčných zložiek sa pridá 850 ml dichlórmetánu a 5,5 g tetrabutylamóniumhydrogénsulfátu a potom ešte 61,3 g dimetylsulfátu počas 5 až 10 minút, pričom sa udržiava teplota vo vnútri reakčnej zmesi medzi 24 a 25 ’C. Nálevka sa potom premyje ďalšími 50 ml dichlórmetánu, ktorý sa potom pridá do reakčnej nádoby. Po miešaní dvojfázovej zmesi pri teplote 24 až 25 ’C (teplota vo vnútri zmesi) počas 7,5 hodiny sa organická vrstva oddelí a odparí pri teplote 40 ’C (27-29 kPa) až do času, kedy už nedestiluje žiadne rozpúšťadlo.A suspension of 94.33 g of N ^and -cyklohexyladenozínu and 720 g of 5% aqueous sodium hydroxide solution was stirred at room temperature (24-25 ° C) for a time such that a dissolve any solid (about 5 minutes). 850 ml of dichloromethane and 5.5 g of tetrabutylammonium hydrogen sulphate and then 61.3 g of dimethyl sulphate are added via the addition funnel over a period of 5 to 10 minutes, maintaining the temperature inside the reaction mixture between 24 and 25 ° C. The funnel was then washed with an additional 50 mL of dichloromethane, which was then added to the reaction vessel. After stirring the biphasic mixture at 24-25 ° C (internal temperature) for 7.5 hours, the organic layer was separated and evaporated at 40 ° C (27-29 kPa) until no more solvent was distilled.

Zvyšok sa rozpustí v 200 ml toluénu a roztok sa potom znova odparuje pri teplote 45 až 50 ’C (4 kPa) až do času, kedy už nedestiluje žiadne rozpúšťadlo.The residue is dissolved in 200 ml of toluene and the solution is then re-evaporated at 45 to 50 ° C (4 kPa) until no more solvent is distilled off.

Zmes z vyššie uvedeného surového materiálu a 2470 ml toluénu sa mieša pri laboratórnej teplote počas 10 minút a potom sa k zmesi pridá 2470 ml vody počas 22 minút. Získaná suspenzia sa mieša pri laboratórnej teplote počas ďalších 6 hodín a pevný podiel sa izoluje filtráciou, napríklad pri použití Buchnerovho lievika, za odsávania. Po premytí pevného podielu 1140 ml toluénu a celkom 285 ml vody v troch rovnakých podieloch s objemom 95 ml sa pevný podiel vysuší pri teplote 48 až 50 ’C (3,3 kPa) cez noc (14 hodín), pričom sa získa 53,0 g bieleho pevného produktu. Suspenzia tohto pevného podielu v 397 ml toluénu sa zahrieva pri teplote 80 ’C za miešania za vzniku číreho roztoku, ktorý sa ochladí na teplotu 56 ’C počas 45 minút a zaočkuje sa zárodočnými kryštálmi (10 mg) čistého produktu. Zmes sa mieša pri teplote 55 až 56 °C počas jednej hodiny. Po ďalšom jednohodinovom miešaní pri uvedenej teplote sa pevný podiel izoluje filtráciou, napríklad pri použití Buchnerovho lievika, za odsávania. Pevný podiel sa premyje celkom 75 ml toluénu v troch rovnakých podieloch s objemom 25 ml, pričom sa získa 60 g bieleho pevného produktu. Suspenzia tohto pevného podielu v 159 ml toluénu sa znova zahreje na teplotu 80 ‘C a zaočkovanie zárodočnými kryštálmi sa uskutočňuje pri teplote 65 až 66 ’C.A mixture of the above crude material and 2470 ml of toluene was stirred at room temperature for 10 minutes and then 2470 ml of water was added to the mixture for 22 minutes. The suspension obtained is stirred at room temperature for a further 6 hours and the solid is collected by filtration, for example using a Buchner funnel, with suction. After washing the solid with 1140 ml of toluene and a total of 285 ml of water in three equal portions of 95 ml each, the solid is dried at 48-50 ° C (3.3 kPa) overnight (14 hours) to give 53.0 g. g of white solid product. A suspension of this solid in 397 mL of toluene was heated at 80 ° C with stirring to give a clear solution which was cooled to 56 ° C over 45 minutes and seeded with seed crystals (10 mg) of pure product. The mixture was stirred at 55 to 56 ° C for one hour. After further stirring at this temperature for one hour, the solid is collected by filtration, for example using a Buchner funnel, with suction. The solid is washed with a total of 75 ml of toluene in three equal portions of 25 ml to give 60 g of a white solid. A suspension of this solid in 159 mL of toluene was reheated to 80 ° C and seeded at 65-66 ° C.

Po ochladení na laboratórnu teplotu počas jednej hodiny a miešaní pri uvedenej teplote počas ďalšej jednej hodiny sa pevný podiel odfiltruje a premyje 42 ml toluénu v troch rovnakých podieloch s objemom 14 ml, následne sa vysuší pri teplote 48 až 50 ’C (3,3 kPa) cez noc (14 hodín, pričom sa získa 57,7 g bieleho pevného produktu. Pevný podiel a 122 ml 100 % etanolu sa zahrievajú pri teplote varu pod spätným chladičom za miešania za vzniku číreho roztoku, následne sa k tomuto roztoku pridá 288 ml vody predhriatej na teplotu 55 ’C počas 25 minút. Zmes sa ochladí na teplotu 55 ’C a zaočkuje sa 20 mg zárodočných kryštálov čistého produktu. Táto zmes sa ochladí na laboratórnu teplotu počas jednej hodiny a mieša sa pri tejto teplote cez noc (16 hodín). Pevný podiel sa izoluje za odsávania pri použití Buchnerovho lievika a premyje sa celkom 57 ml zmesi 100 % etanolu a vody (objemovo 1 : 2,36) v troch rovnakých podieloch s objemom 19 ml. Pevný podiel sa vysuší pri laboratórnej teplote (3,8 kPa), pričom sa získa 62,2 g produktu vo forme bielej pevnej látky vo forme 1,5 hydrátu.After cooling to room temperature for one hour and stirring at that temperature for another hour, the solid is filtered and washed with 42 ml of toluene in three equal portions of 14 ml each, then dried at 48 to 50 ° C (3.3 kPa). overnight (14 hours to give 57.7 g of a white solid. The solid and 122 mL of 100% ethanol were heated to reflux with stirring to form a clear solution, followed by 288 mL of water. The mixture was cooled to 55 ° C and seeded with 20 mg of seed crystals of the pure product, which was cooled to room temperature over one hour and stirred at this temperature overnight (16 hours). Collect the solids under suction using a Buchner funnel and wash with a total of 57 ml of 100% ethanol / water (1: 2.36 by volume) in three equal portions of 19 ml. The solid was dried at room temperature (3.8 kPa) to give 62.2 g of the product as a white solid as 1.5 hydrate.

Teplota topenia: 88 až 91 ’C, výťažok: 42,5 .Melting point: 88-91 ° C, yield: 42.5.

Spôsobový príklad 2Method Example 2

Opakuje sa vyššie uvedený postup s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa použije ekvivalentné množstvo N^e-cyklopentyladenozínu, pričom sa získa N^e-cyklopentyl-2¹-O-metyladenozín.Repeat the above procedure with the exception that the an equivalent amount of N ^e -cyklopentyladenozínu to give ^{N-cyclopentyl-E} 2 ^1-O-methyl adenosine.

Spôsobový príklad 3Method Example 3

Opakujú sa reakčné stupne príkladu 1 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa v reakčnom stupni C) dichlórmetán nahradí terc.amylakoholom a po prvotnej kryštalizácii zo zmesi etanolu a vody sa produkt rekryštalizuje z etanolu a vody. Získa sa 32,1 g (výťažok približne 30 %) N^e-cyklohexyl-2¹-O-metyladenozínu, ktorý má čistotu vyššiu ako 98 %.The reaction steps of Example 1 were repeated except that in step C), dichloromethane was replaced with t-amyl alcohol, and after the first crystallization from ethanol / water, the product was recrystallized from ethanol and water. To give 32.1 g (yield about 30%) N ^o cyclohexyl-2-O-methyl adenosine ^1, having a purity greater than 98%.

Spôsob podía vynálezu je, pokiaľ ide o čas a náklady, hospodárnejší ako doteraz známe spôsoby. Spôsob podľa vynálezu poskytuje vhodnú metódu na selektívnu 2'-O-metyláciu N⁶-cyklohexyladenozínu za podmienok katalýzy fázového prechodu a metódu čistenia 2'-O-metylového derivátu. Pri spôsobe podľa vynálezu nie je potrebné použiť nákladné ochranné skupiny a chromatografiu.The method according to the invention is more economical than the known methods in terms of time and cost. The process of the invention provides a suitable method for the selective 2'-O-methylation of N ⁶ -cyclohexyladenosine under phase transition catalysis conditions and a method of purification of the 2'-O-methyl derivative. It is not necessary to use expensive protecting groups and chromatography in the process of the invention.

Claims (20)

PATENTOVÉ NÁROKYPATENT CLAIMS 1. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I iUse of a compound of formula I i R'R ' H N (DH N (D RR HO v ktoromHO in which R^{v * * * * x} znamená atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, alylovú skupinu, metalylovú skupinu, priamu alebo rozvetvenú alkinylovú skupinu obsahujúcu 3 až 7 uhlíkových atómov, cykloalkylovú skupinu obsahujúcu 3 až 8 uhlíkových atómov, hydroxycykloalkylovú skupinu, v ktorej cykloalkylový zvyšok obsahuje 4 až 8 uhlíkových atómov, fenylovú skupinu mono- alebo navzájom nezávisle di-substituovanú halogénom s atómovým číslom 9 až 35, alkylovou skupinou obsahujúcou 1 až 4 uhlíkové atómy, alkoxyskupinou obsahujúcou 1 až 4 uhlíkové atómy alebo skupinou CF₃ alebo fenylalkylovou skupinou, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 uhlíkové atómy a fenylový kruh je nesubstituovaný alebo monoalebo navzájom nezávisle di-substituovaný halogénom s atómovým číslom 9 až 35, alkylovou skupinou obsahu44 júcou 1 až 4 uhlíkové atómy, alkoxyskupinou obsahujúcou 1 až 4 uhlíkové atómy alebo skupinou CF_a, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy a obsahujúcu aspoň jednu hydroxyskupinu alebo aspoň dve fenylové skupiny, bicykloalkylovú skupinu akou je endo- alebo exo-bicyklo-/2,2,1/heptylová skupina, naftylalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 uhlíkové atómy, acenaftylenylalkylovú skupinu, v ktorej alkylový zvyšok obsahuje 1 až 4 uhlíkové atómy alebo skupinu všeobecného vzorca A alebo všeobecného vzorca B (A) (B) v ktorých znamená atóm vodíka, hydroxyskupinu alebo alkoxyskupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, znamená atóm vodíka alebo hydroxyskupinu, znamená skupinu -CH -, -0-, -S- alebo priamu väzbu, znamená skupinu ^-(^CH2)_n ^- alebo priamu väzbu, znamená celé číslo od 1 do 3, a prerušovaná čiara vo vzorci A znamená prípadnú väzbu,R ^{v * * * * X} represents a hydrogen, an alkyl of 1 to 4 carbon atoms, allyl, methallyl, a straight or branched alkynyl group having 3 to 7 carbon atoms, cycloalkyl having 3 to 8 carbon atoms, hydroxycycloalkyl group, wherein the cycloalkyl radical contains 4 to 8 carbon atoms, the phenyl group is mono- or independently di-substituted with halogen having an atomic number of 9 to 35, an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms, an alkoxy group having 1 to 4 carbon atoms or a CF ₃ group; a phenylalkyl group in which the alkyl radical contains 1 to 4 carbon atoms and the phenyl ring is unsubstituted or mono or independently di-substituted with halogen having an atomic number of 9 to 35, an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms, an alkoxy group containing 1 to 4 carbon atoms or CF _a , a a (C 1 -C 4) -alkyl group containing at least one hydroxy group or at least two phenyl groups, a bicycloalkyl group such as an endo- or exo-bicyclo [2.2.1] heptyl group, a naphthylalkyl group in which the alkyl group contains 1 to 4 carbon atoms 4 carbon atoms, an acenaphthylenylalkyl group in which the alkyl radical contains 1 to 4 carbon atoms or a group of formula A or formula B (A) (B) in which it represents a hydrogen atom, a hydroxy group or an alkoxy group containing 1 to 4 carbon atoms; hydrogen or hydroxy, means -CH-, -O-, -S- or a direct bond, means ^- ( ^CH 2) _n ^- or a direct bond, is an integer from 1 to 3, and the dotted line in formula A is optional bond R² znamená atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 ažR2 represents a hydrogen atom, an alkyl group containing 1 to ² carbon atoms; 4 uhlíkové atómy, aminoskupinu, cykloalkylovú skupinu obsahujúcu 3 až 5 uhlíkových atómov alebo atóm halogénu s atómovým číslom 9 až 35 a4 carbon atoms, an amino group, a cycloalkyl group having 3 to 5 carbon atoms or a halogen atom having an atomic number of 9 to 35, and R³ znamená alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy.R ³ represents an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms. 2. Použitie podľa nároku 1,vyznačujúce sa tým, že zlúčenina všeobecného vzorca I je zvolená z množiny zahrňujúcej 6'-hydroxycykloalkyl-2'-O-metyladenozíny, v ktorých cykloalkylový zvyšok obsahuje 4 až 8 uhlíkových atómov.Use according to claim 1, characterized in that the compound of formula I is selected from the group consisting of 6'-hydroxycycloalkyl-2'-O-methyladenosines, wherein the cycloalkyl radical contains 4 to 8 carbon atoms. 3. Použitie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že vo všeobecnom vzorci I R¹ má iný význam ako hydroxycykloalkylová skupina.Use according to claim 1, characterized in that in the general formula IR ¹ has a meaning other than a hydroxycycloalkyl group. 4. Použitie podľa nároku 3,vyznačujúce sa tým, že zlúčeninou všeobecného vzorca I je 6'-hydroxycyklohexyl-2'-O-metyladenozín.Use according to claim 3, characterized in that the compound of formula I is 6'-hydroxycyclohexyl-2'-O-methyladenosine. 5. Použitie podľa niektorého z predchádzajúcich nárokov laž 4,vyznačujúce sa tým, že je určené pri akútnej bolesti.Use according to any one of the preceding claims 1 to 4, characterized in that it is intended for acute pain. 6. Použitie podľa niektorého z predchádzajúcich nárokov laž 4,vyznačujúce sa tým, že je určené pri chronickej neuropatickej bolesti.Use according to any one of the preceding claims 1 to 4, characterized in that it is intended for chronic neuropathic pain. 7. Použitie zlúčeniny definovanej v niektorom z predchádzajúcich nárokov 1 až 4, pri liečení bolesti definovanej v niektorom z predchádzajúcich nárokov alebo spôsob liečenia bolesti definovanej v niektorom z predchádzajúcich nárokov, vyznačujúce sa tým, že sa subjektu, ktorý potrebuje takéto liečenie, podá zlúčenina podľa niektorého z predchádzajúcich nárokov 1 až4 alebo analgetická kompozícia obsahujúca zlúčeninu podľa niektorého z predchádzajúcich nárokov 1 až 4 ako analgetikum v kombinácii s farmaceutickým nosičom alebo riedidlom.Use of a compound as defined in any one of the preceding claims, in the treatment of pain as defined in any one of the preceding claims, or a method of treating the pain as defined in any one of the preceding claims, characterized in that the subject in need of such treatment or an analgesic composition comprising a compound of any one of claims 1 to 4 as an analgesic in combination with a pharmaceutical carrier or diluent. 8. Zlúčenina všeobecného vzorca la ,1'8. A compound of formula Ia, 1 ' KNKN N'N ' N'N ' N !Í >N! Í> --N .O I (la)--N .O I KOKO KOKO Oft v ktoromOft in which R¹¹ znamená cykloalkylovú skupinu obsahujúcu 4 až 8 uhlíkových atómov a substituovanou hydroxyskupinou,R ¹¹ represents a cycloalkyl group having 4 to 8 carbon atoms and substituted by a hydroxy group, R² má význam uvedený v nároku 1 aR ² is as defined in Claim 1 and R³ má význam uvedený v nároku 1.R ³ is as defined in claim 1. 9. Zlúčenina podľa nároku 8 všeobecného vzorca la, v ktorom R² znamená atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy alebo atóm halogénu s atómovým číslom od 9 doA compound according to claim 8 of the general formula Ia, in which R ² represents a hydrogen atom, an alkyl group containing 1 to 4 carbon atoms or a halogen atom having an atomic number of 9 to 35.35th 10. Zlúčenina zvolená z množiny zahrňujúcej10. A compound selected from the group consisting of 6-/ (trans)-4-hydroxycyklohexyl/-2’-O-metyladenozín,6- / (trans) -4-hydroxycyclohexyl / -2´-O-methyladenosine, 6-/ (cis)-4-hydroxycyklohexyl/-2'-O-metyladenozín,6- [(cis) -4-hydroxycyclohexyl] -2'-O-methyladenosine, 6-/( 1S,trans)-2-hydroxycyklopentyl/-2'-O-metyladenozín, 6-/( ÍR, trans )-2-hydroxycyklopentyl/-2'-O-metyladenozín, 6-/( 1S,trans)-2-hydroxycyklohexyl/-2'-O-metyladenozín, 6-/( ÍR,trans)-2-hydroxycyklohexyl/-2¹-O-metyladenozín, 6-/(trans)-4-hydroxycyklohexyl/-2'-O-etyladenozín a 6-/1S, (trans)-2-hydroxycyklohexyl/-2'-O-etyladenozín.6 - [(1S, trans) -2-hydroxycyclopentyl] -2'-O-methyladenosine, 6 - [(1R, trans) -2-hydroxycyclopentyl] -2'-O-methyladenosine, 6 - / (1S, trans) -2-hydroxycyclohexyl / -2'-O-methyladenosine, 6 - [(1R, trans) -2-hydroxycyclohexyl] -2 ^1- O-methyladenosine, 6 - [(trans) -4-hydroxycyclohexyl] -2'-O -ethyladenosine and 6- (1S, (trans) -2-hydroxycyclohexyl) -2'-O-ethyladenosine. 11. Zlúčenina podľa nároku 8, 9 alebo 10 s čistotou 95 %.A compound according to claim 8, 9 or 10 having a purity of 95%. 12. Zlúčenina podľa nároku 8, 9 alebo 10 bez obsahuA compound according to claim 8, 9 or 10 free of content N⁶-cykloalkyl-2'-O-metyladenozínu.N ⁶ -cycloalkyl-2'-O-methyladenosine. 13. Použitie zlúčenín všeobecného vzorca la podľa niektorého z nárokov 8 až 12 na prípravu liečiv vhodných na liečenie bolesti, na použitie proti vysokému krvnému tlaku, ako koronárny vazodilatátor, na inhibíciu agregácie trombocytov alebo aktivácie leukocytov, na zníženie hladiny lipidov v krvi, proti kongestívnemu zlyhaniu srdca, infarktu myokardu, náhlej kardiálnej smrti, renálnej insuficiencii, ďalej na liečenie hladiny HDL cholesterolu, lipihladiny voľných mastných kyselín alebo/a cukrovky typu I alebo typu II, arytmií alebo na ochranu proti infarktu myokardu.Use of compounds of formula Ia according to any one of claims 8 to 12 for the preparation of medicaments suitable for treating pain, for use against high blood pressure as a coronary vasodilator, for inhibiting platelet aggregation or leukocyte activation, for reducing blood lipid levels, against congestive heart failure, myocardial infarction, sudden cardiac death, renal insufficiency, for the treatment of HDL cholesterol, lipid-free fatty acids and / or type I or type II diabetes, arrhythmias or protection against myocardial infarction. hypertriglyceridémii/nízkej dovej dysfunkcie, zvýšenejhypertriglyceridemia / low dysfunction increased 14. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje terapeuticky účinné množstvo zlúčenín všeobecného vzorca a podľa niektorého z nárokov 8 až 12 v kombinácii s farmaceutický prijateľným nosičom alebo riedidlom.A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound of the formula and according to any one of claims 8 to 12 in combination with a pharmaceutically acceptable carrier or diluent. 15. Zlúčenina podía niektorého z nárokov 8 až 12 na použitie pri liečení bolesti, vysokého krvného tlaku, koronár48 nej vazokonštrikcie, agregácie trombocytov, vysokej hladiny lipidov v krvi, kongestívneho zlyhania srdca, náhlej kardiálnej smrti, renálnej insuficiencie, hypertriglyceridémie/nízkej hladiny HDL cholesterolu, lipidovej dysfunkcie, zvýšenej hladiny voľných mastných kyselín, cukrovky typu I alebo typu II, arytmií a na ochranu proti infarktu myokardu, alebo spôsob použitia takejto zlúčeniny, ktorý zahrňuje podanie zlúčeniny všeobecného vzorca la subjektu, ktorý uvedené liečenie potrebuje .A compound according to any one of claims 8 to 12 for use in the treatment of pain, high blood pressure, coronary vasoconstriction, platelet aggregation, high blood lipid levels, congestive heart failure, sudden cardiac death, renal insufficiency, hypertriglyceridemia / low HDL cholesterol , lipid dysfunction, elevated levels of free fatty acids, type I or type II diabetes, arrhythmias and for protection against myocardial infarction, or a method of using such a compound comprising administering a compound of Formula Ia to a subject in need thereof. 16. Spôsob prípravy 2'-O-alkyladenozínov, v y z n a čujú c i s a t ý m, že adenozín sa uvedie do reakcie s príslušným alkylsulfátom v prítomnosti katalyzátora fázového prechodu.16. A process for the preparation of 2'-O-alkyladenosines, wherein adenosine is reacted with an appropriate alkyl sulfate in the presence of a phase transfer catalyst. 17. Spôsob podľa nároku 16,vyznačujúci sa tým, že sa pripraví zlúčenina všeobecného vzorca I podľa nároku 1.A process according to claim 16, characterized in that a compound of formula I according to claim 1 is prepared. 18. Spôsob podľa nároku 16 alebo 17, vyznačujúci sa t ý m, že pripravenou zlúčeninou je N-cyklohexyl-2'-O-metyladenozín.The method of claim 16 or 17, wherein the compound is N-cyclohexyl-2'-O-methyladenosine. 19. Zlúčenina pripravená spôsobom podľa nároku 16, 17 alebo 18.A compound prepared by the process of claim 16, 17 or 18. 20. Spôsob podania N⁶-cyklohexyl-2'-O-metyladenozínu teplokrvnému živočíchovi s účelom produkcie N⁶-hydroxycyklohexyl-2'-O-metyladenozinu.A method of administering N ⁶ -cyclohexyl-2'-O-methyladenosine to a warm-blooded animal to produce N ⁶ -hydroxycyclohexyl-2'-O-methyladenosine.