SK11993A3

SK11993A3 - External preparation containing cyclosporin

Info

Publication number: SK11993A3
Application number: SK11993A
Authority: SK
Inventors: Katsuo Komiya; Rie Igarashi; Mitsuko Takenaga; Akira Yanagawa; Yutaka Mizushima; Tateo Nishimura; Toshitaka Kudo; Kunio Ando
Original assignee: Ltt Inst Co Ltd
Priority date: 1991-06-27
Filing date: 1992-06-22
Publication date: 1993-07-07
Also published as: PT100622A; EP0547229A4; IE922045A1; HUT67178A; MX9203448A; JPH05310591A; CA2090417A1; US5504068A; HU9300654D0; AU2000592A; WO1993000106A1; FI930836A0; IL102236A0; FI930836A; KR930702014A; NZ243297A; EP0547229A1

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka topických prípravkov, ktoré ako hlavnú účinnú zložku obsahujú cyklosporín. Tieto topické prípravky na bázi cyklosporínu zahrňujú prípravky vo forme emulzií a v neemulznej forme.

Pod označením cyklosporín'* sa .pod týmto, popisom rozumie jediná látka alebo zmes látok, spadajúcich do skupiny cyklosporinových antibiotík, ktoré sú podrobne popísané v japonskej uverejnenej prihláške /Kokai/ Č. 2-17,127·

Doterajší stav techniky

W cyklosporín© je známe, že je inhibítorom imunity a bol v širokom merítku používaný v oblasti transplantácie, orgánov, vrátane transplantácie Íadvín. Nedávno bolo zistené, že okrem účirinosti pri transplantáciách je cyklosporín tiež účinný proti rôznym chorobám, ktoré sú spôsobené hlavne autoimunnou •reakciou. Bola už publikovaná značná časí literatúry_K v ktorej sa ozná- muje?učinnost cyklosporínu proti arthritis. Medzi autoimunitné .proti 'ktorým bol.cyklosporín použitý alebo bol návrh·? huty?na použitie,možno zahrnúí napríklad autoimunitné krvné choroby, chronickú bronchiálnu astmu, systematický erythematosus, polymyositis, systematickú sclerodermu, Wegnerov syndróm , myasthenia gravis, psoriasis vulgaris, autoimunitné črevné choroby / idiopathická ulterativní colitis, Grohnova choroba/, sarcoidosis, sclerosis multiplex, juveniálna diabetes mellitus, uveitis, psoriatickú rheumotoidnú glomerulonephritis a pod.

Ako už bolo hore uvedené, cyklosporín pripieva veíkou mierou k inhibícii odmietahia transplantovaných orgánov'a je možné ho tiež používaš k autoimunitnej terapii. Na druhej strane je však tiež známe,, že má často silný nepriaznivý účinok na íadviny pri dlhodobejšom orálnom podávaní. Je to práve toxicita cyklosporinu voči íadvinám, ktorá znemožňuje jeho širšie využitie. Je známe/ že existuje mnoho prípadov, pri ktorých dochádza k chorobným stavom na pokožke, v očiach alebo v kĺboch a v tomto prípade je možné liečbu vykonávaš pomocou topických prípravkov. V prípade chorôb,, ktoré je možné liečiš podávaním topických prípravkov, j’e výhodné vyhnúš sa systematickému podávaniu, ktoré by mohlo spôsobovaš poruchy Íadvín. Ak je ohnisko choroby abmedzené na vrstvu kože, je topické podávanie prostredníctvom epidermisu výhodnejšie než iné sposoby podávania, pretože je možné pri ňom usporíš podávané liečivo a naviac^: je možné zvýšiš jeho účinnosš lokálnym zvýšením jeho koncentrácie pri obmezení systematických vedíajších účinkov. Podávanie cyklosporinu vo forme topických prípravkov je možno označíš za jeden z najúčinnejších systémov dodávania tohto liečiva.

Spracovávaš cyklosptrin na topické prípravky, ktoré by si udržali vysoký terapeutický účinok,je však na rozdiel od spracovávania vodorozpustných alebo nízkomolekulárnych farmaceutický účinných látok, nesmierne obtiažne. Jedným z dôvodov tejto obtiažnosti je skutočnosš, že cyklosporin je veíkým cyklopeptidom, ktorého molekulová hmotnosŠ presahuje .1200,takže obtiažne pre;niká zrohovatelou vrstvou kože do ohniska choroby, ktoré je prítomné vo vrstve dermis. Salším dôvodom tejto obtiažnosti je nerozpustnosŠ cyklosporinu vo vode, pričom sú obmedzené i organické rozpúššadla, v· ktorých je možné cyklosporin rozpúššaš. Ako špecifické organické rozpúššadlá, ktoré je možné obvykle použiš, je možné uviesš nižšie alkoholy, ako je etanol alebo izopropylalkohol. Takéto nižšie alkoholy sú však pri použití v pomerne vysokých koncentráciách v topických prípravkoch príliš dráždivé na pokožku, takže bezpečné topické prípravky nie .je možné

- 3 zaistil. Keá sa naproti tomu použije nižší alkohol v topickom prípravku v pomerne nízkej koncentrácii, môže sa zhoršil schopnosť cyklosporinu rovnomerne sa v ňom dispergovať. Z týchto dôvodov nie sú k dispozícii žiadne topické prípravky s vysokým terapeutickým účinkom.

Publikované správy, ktoré sa vzťahujú ku klinickému výskumu cyklosporinových mastí sú rozporné, pretože niekde aa uvádza, že 10% cyklosporinový prípravok je farmaceutický účinný a inde, že nie je účinný, takže reprodukovateínosť takýchto prípravkov nie je zaručená, V niektorých správach je popisované špecifické zloženie cyklosporinových prípravkov, chýba;, tu však uvedenie ich farmaceutických účinkov.

Napríklad, vo zverejnenej japonskej patentovej prihláške č. 2-17,127 sú zverejnené prípravky, ktoré ako podnetné zložky obsahujú cyklosporin a mono- alebo .polynenasýtenú mastnú kyselinu alebo.nenansýtený alkohol, vždy s obsahom 12 až 24 atomov uhlíka. Mono- alebo polynenasýtené mastné kyseliny môžu napríklad obsahovať kyselinu vakcenovú,kyselinu linolovú, kyselinu linolenovú, kyselinu elaidovú, kyselinu erukovú a pod. Nenasýtené alkoholy môžu napríklad zahrňovať vakcenylalkohol, linoleylalkohol, linolenylalkohol, elaidylalkohol, erucylalkohol a pod. Ďalej je tu uvedené, že tieto prípravky sú účinné proti rôznym kožným chorobám.

V citovanej publikácii však nie sú špecifikované farmaceutické účinky týchto prípravkov a je tu len konštatovaná schopnost cyklosporinu prenikať kožou.a koncentrovať sa. V tejto publikácii napríklad vôbec nie je uvedené, v akom rozsahu je takto upravený cyklospo.rin účinný proti psoriatickým chorobám.

V literatúre sa uvádza, že cyklosporin je účinný proti rôznym kožným chorobám. Tak napríklad v Acta Derm. Venerol.dodatek'144, 136 až 138 /1989/ je uvedené, že alkoholický olejovitý gel s obsahom 10 % hmotnostných cyklosporínu je účinný proti atopicke j dermatitis.Účinnosť alkoholického olejovitého gélu s obsahom 10 % hmotnostných cyklosporínu uvádza tiež Árch. Derm;: 125, str. 570. /1989/.

Existujú správy, ktoré sa vzťahujú k dermatitis kontaktného typu, napr. Árch. Dermatol.: 125, 568 /1989/, ktoré uvádzajú, že cyklosporin, použitý pri DNGB skúške na človeku, nevykazuje žiaden účinok. V publikácii Contact Dermatitis í 19, 129>.až 132 /1988/ sú zhrnuté'referáty o troch príprav kaoh t 10% cyklosporinovom prípravku v Labrafilu / polyoxyl5-oleát, olivový olej a ethanol /, 5% cyklosporinovoum prípravku v ricínovom oleji a 5% cyklosporinovom prípravku v ricínovom oleji, obsahujúcom. 20% propylenglykolu. V tomto prehlade sa ale uvádza, že výsledky skúšania nie sú uspokojivé a že je potrebné účinnejšieho rozpúšťadla. Okrem toho, v Contact Dermatitis 20, . atr. 155 až 1'56 sa uvádza, že žiaden z troch prípravkov obsahujúcich 0,.1, 1 alebo 10 % cyklosporínu nie je vôbec účinný proti kontaktnej dermatitis.

Farmaceutický účinok cyklosporínu na psoriasis je napr. popísaný v Clin. Res.. 34 1007Ä /1986/, kde sä uvádza, že topické.podávanie cyklosporínu nie je účinné, pri liečbe psoriasis. lie je· tu však uvedené, v akej koncentrácii a vo forme, akých prípravkov bol cyklosporin skúšaný. V Lanc.et 1, 806 /1987/ sa. tiež: uvádza, že prípravok o koncentrácii cyklosporínu 2 % hmôt nosti / v masťovou základe /ja na psoriasis rovnako účinný, ako .placebo. V J. Amer. Acad. Dermatol.. 18,, 378 až 379 /1988/ sa áalej uvádza, ža 5% cyklosporinový roztok v olivovom oleji je rovnako účinný ako samotný olivový olej, ktorý sa používa v. skúšanom cyklosporinovom prípravku, ako základ. J. Amer. Acad. Dermtol... 22, 126 až 127 /1990/ konštatuje, že gel obsahujúci 10% cyklosporínu, 43% olivového oleja, 10% ethanolu, 30% poly oxyl.-5~oleátu a 7% koloidného' oxidu kremičitého nevykazuje žia den účinok na psoriasis. V Brit. J. Derm. 122_f 113 až 114 /1990/ sa uvádza, že 5% /hmotnostná/ cyklosporinová mast nie je účinná.

Správy o liečbe alopecia areata sú napríklad uvedené v Lancet 2,’803 až 804°/1986/, kde sa uvádza, že 2% olejový roztok cyklosporinového prípravku v oleji proti alopecia areata- potvrdzuje tiež publikácia Lancet 2, 971 až 972 /1986/. Na druhéý. stráne:,, Acta Dermatol Venerol. 69, 252 až 253 /1989/ uvádzajú, že 10% cyklosporinový olejovítý prípravok účinný nie je. Ďalej , J.Amer. Acad. Dermatol. 22, 251 až 253 /1989/ uvádzajú, že 5% cyklosporinový prípravok je účinný proti alopecii u mužov,

i. ked tu nie sú popísané žiadne konkrétne prípravky.

Na základe porovnania vyäie uvedených, literárnych údajov je veími obtiažne.· vyvodil záver, či cyklosporín je. alebo nie je topí cky účinný proti kožným chorobám zhora popísaným. I v takom prípade, že by sa dospelo- k záveru, že by cyklosporín mohol by£ účinný' proti kožným chorobám, bolo bý možné, doporučií jeho- užívanie v pomerne značných dávkach. Ak nie sú,cyklosporinové prípravky topícky účinné proti kožným chorobám alebo nie je ich účinok uspokojivý, je mo^né v mnohých prípadoch považoval druh zložiek prípravku- a použité dávkovanie, za nevhodné. Je možné- zhrnúí, že doposiaí nie: sú k dispozícii žiadne konvenčné topické prípravky na b-ázi cyklosporinu, ktoré by predstavovali vyriešenie problému spracovania cyklosporinu. na účinné topické prípravky.

Podstata, vynálezu

Hlavnou úlohou tohoto vynálezu je vyvinúť topický· prípravok obsahujúci cyklosporín, ktorý by účinne posobil. proti kožným chorobám a ktorý by bol vysoko bezpečný.

Ďalšeu úlohou vynálezu je vyvinúť topický prípravok, obsahujúci eyklosporin, v ktorom by bolo možné obmeziť koncetráciu nižšieho- alkoholu pri zachovaní vysokej bezpečnosti.

Ďalšou úlohou vynálezu je vyvinúť vysoko bezpečný topický prípravok obsahujúci eyklosporin, ktorý by vôbec neobsahoval žiaden nižší alkohol.

Pri práci na vynáleze bol úspešne zavŕšený výskum, orientovaný na vývoj, cyklosporinových topických prípravkov,

V '/ ktoré by mali vynikajúcu schopnosť prenikať ko'žou alebo· zrohovatelými vrstvami kože a ktoré by kožu nedráždili a boli vysoko bezpečné.

Predmetom^ynálezu je topický prípravok obsahujúci eyklosporin, ktorý sa vyznačuje tým, že obsahuje a/ eyklosporin^ b/ organické, rozpúšťadlo, v. ktorom sa má ý eyklosporin rozpustiť; c/ ester mastnejkyseliny s jedno— mocným alkoholom, ktorý je pri teplote 25°C v kvapalnom stave a ktorý celkom obsahuje 8 atómov uhlíka alebo viac, ? poťažmo alkanolamin, ktorý je pri teplote 25° c v kvapalnom .. stave; d/ olejoví tú látku, ktorá je pri 25° C v pevnom stave; ” a: e/ povrchovo' aktívnu látku, pričom množstvo cyklosporinu

Leží v rozpätí od 0:, 1 do 1 0 % hmotnostných a celkové množstvo esťeru mastnej kyseliny s jednomocným alkoholom · alebo alkanolaminu leží v rozpätí od 1 do 1 5 % hmotnostných.

Ďalším predmetom vynálezu je topický prípravok obsahujúci eyklosporin, ktorý sa vyznačuje tým, že obsahuje a/ cyklospo ;· rin; b/ nižší alkohol; c/ ester mastnej kyseliny, ktoré sú pro teplote 25 °C v kvapalnom stave alebo alkanolámin, ktorý je pri teplote 25 °G v kvapalnom stave; d/ olejovitú látku., ktorá je pri teplote: 25 °G v pevnom stave; a e/ povrchovo aktívnu' látku, pričom množstvo cyklosporinu. leží v rozpätí od 0,1 do 10 % hmo tnostných, množstvo'nižšieho alkoholu leží v rozpätí od. 2 do 15% hmotnostných a celkové množstvo esteru mastnej kyseliny alebo alkanolgmínu leží v rozpätí od 1 do.15 % hmotnostných,

Topické prípravky obsahujúce cyklosporin podía vynálezu sa svojím, zložením líáia od konvenčných topických prípravkov na bázi cyklosporinu, ktoré sú známe z literatúry a je možné š. nimi dosiahnuí vytýčených cieíov za použitia zníženého množstva- cyklosporinu,

Topické prípravky pódia vynálezu, ktoré obsahujú cyklosporin sa vyznačujú nasledujúcimi výhodami:

1/ Majú vynikajúci terapeutický účinok.

2/ Sú vysoko stále /t. j, cyklosporin sa 'z týchto topických prípravkov nevylučuje, nedochádza k žiadnej kryštalizácii cyklosporinu a. k žiadnej chemickej reakcii cyklosporinu s inými ®ložkami, ktoré sú prítomné v prípravku/

3/ íahko sa podávajú topicky.

4/ Obsahujú cyklosporin vo vysoko rovnomerne dispergovanom stave.

5/ Sú vysoko bezpečné·

Pri stanovení zloženia topických prípravkov podía. tohoto vynálezu sú významnými faktormi voíba každej zložky a^; jej množstva. Tak napríklad, keá má by£ topický prípravok

- 8používaný vo forme mastí_r je potrebné \zial á® úvaly·”· farmaceutický účinok masti, biologickú účinnosť masti a fyzikálno-chemickú stálosť masti*. Až doposiaí sa v obdobných prípadoch používal · ako maslový základ vyšších nasýtených mastných kyselín alebo takých mastných kyselín, ako je kyselín a olejová alebo kys.elina12-hydroxys.tearová. Z týchto mastných kyselín sa kyseliny laurovej, kyseliny myristovej, kyseliny palmitovej a kyseliny stearovej používalo pre tvor.bu mydiel, spolu a alkáliou, predovšetkým / hlavne. / hydroxidom draselným, pričom vzniknimydlo pomáhalo emulgovať použité liečivo..

Je potrebné zdôrazniť, žé v prípade topických prípravkov podía vynálezu obsahujúcich cyklosporin, maj.ú mastné kyseliny, či už sa v maslovom základš použijú ako· také, alebo vo forme draselných mydiel, len malý Účinok na emulgáciu cyklosporinu. Z týchto dôvodov nie je. možné za pomoci týchto látok získal topické prípravky s. vysokým farmaceutickým účinkom a okrem toho bý tieto látky mohli i zhoršoval stabilitu masti.

Nasleduje popis najlepších spôsobov prevedenia tohto vynálezu.

Topické prípravky pódia, vynálezu obsahujú cyklosporin, ako- hlavnú účinnú zložku, v množstve 0,1 až 1 0 % hmotnostných, prednostne. + až 7 % hmotnostných. Je potrebné zdôraznil, že topické prípravky podía vynálezu môžu vykazoval, vysoký terapeutický účinok i pri tak nízkej koncentrácii cyklosporinu.,

Topické prípravky podía vynálezu obsahujú organické rozpúšťadlo pre cyklosporin,. ktoré v v kvapalnom stave pri teplote okolia / 25 °C^ľ/ a ktoré je schopné rozpustil cyklos' porin. Také organické rozpúšťadlá môžu zahŕňať alifatické alkoholy a estery mastných kyselín s viacmocnými alkoholmi

Ako alifatické: alkoholy sa môžu, používal akékoívek nižšie alkoholy a vyššie, alkoholy, za predpokladu, že tieto: sú kvapalné pri teplote okolia. Použitý alkohol môže mať. priamy alebo· rozvetvený reťazec a môže byť nasýtený alebo nenasýtený· Ako' špecifické príklady takýchto alifatických alkoholov je mož né uviesť nižšie alkoholy, ako je ethanol, prcpanol, isopropylalkohol, bu tanci a pod.

a vyšäie. alkoholy, ako je cktylalkohol, nonylalkohol, decylalkohol, 2-oktyldodekanol, 2,6-dimethyl-4-heptanol, oleylalkohol e pod.. Ako organické rozpúšťadlá pre cyklo'sporin sú obvzlášť vhodné, rozvetvené: vyššie alkoholy.

Použité estery mastných kyselín s viacmocnými alkoholami je možné charakterizovať obecným vzorcom idcocnŕoE ’ kde

R¹ predstavuje a lky skupinu, s c 4 a.ž 12 atómami uhlíka, prednostne s 6 až 10 atómami uhlíka a

R^ predstavuje alkyskupinu s 2 až 4 atómami uhlíka

Akc špecifické príklady esterov mastných kyselín s viacmocnými alkoholmi je: možné uviesť propylenglykolkaprylát, prcpylenglykolkaprát, butylenglykolkaprylát, butylenglykolkapronát, glykolbutyrát a propylenglykolbutyrát.

Vyššie popísané organické, rozpúšťadlá sa môžu používať samostatne, alebo v zmesi s inými organickými rozpúšťadlami. Tieto? zmesi výhodne, obsahujú nižší alkohol v množstve od. asi 5 do asi 60 % hmotnostných, prednostne od. asi 10 dcasi 50 % hmotnostných.

Organické rozpúšťadlá sa môžu miešať s cyklosporinom v pomere približne 0,5 až 10 dielov hmotnostných, prednostne, približne 1 až 5 dielov hmotnostných na jeden diel hmotnostný cyklo sporinu. Z organických rozpúštadiét sa dáva prednosť nižším alkoholom, obzvlášť ethanolu. Nižší alkohol môže byť použitý ako' rozpúšťadlo a zároveň ako prostriedok urýchľujúci prienik cyklosporinu pokožkou.

Pre urýchlenie infúzie alebc penetrácie cyklosporinu pokožkou sa obsah nižšieho alkoholu, ktorý sa mieša s cyklosporinom, prednostne určuje tak, aby tvoril 2 % hmotnostné alebo viac, vzťahované na celkovú hmotnost* topického prípravku. Ak je koncentrácia nižšieho alkoholu vysoká, zvyšuje sa rozsah podráždenia kože do· tej miery, že. je potrebné pristúpiť na zníženie obsahu nižšieho alkoholu na hodnotu 15 % hmotnostných alebo nižš.1, vztiahnuté na celkovú hmotnost topického- prípravku. Prednostná koncentrácia nižšieho alkoholu léží v rozpätí od 3 do 6 %, vztiahnuté na celkovú hmotnosť topického prípravku a. táto koncentrácia· umožní dosiahnuť zlepšenej infúzie alebo penetrácie· cyklosporinu kožou, pro zachovaní nízkeho stupňa podráždenia.

V topických prípravkoch podía vynálezu sa prednostne používa takých organických rozpúátadiel, ktorá majú teplotu varu 160 °G alebo viac, prednostne 180 °G alebo viac: a ktoré, sú len málo prchwvé alebo odpariteíné. Takéto organické rozpúšťadlá zahŕňajú napríklad vyššie alifatické alkoholy obsahujúce 8 atómov uhlíka alebo viac- a estéry dvojmocných alkoholov s mastnými kyselinami.

Topické prípravky podía vynálezu obsahujú ester mastnej kyseliny s jednpmocným alkoholom, ktprý je pri teplote okolia v kvapalnom stave, alebo alkanolamin. Ester mastnéjkyseliny s jednomocným alkoholom môžu obsahovať 8 atómov uhlíka alebo viac, prednostne. 12 atómov uhlíka alebo viac.

Zlo.žkou jednomocného alkoholu v es téroch jednomocných alkoholov s mastnými kyselinami môže byl zbytok / zostatok / alifatického- alkoholu s priamym alebo rozvetveným reťazcom, ktorý obsahuje 1 až 22 atómov uhlíka, prednostne 2 až 18 atómov uhlíka. Zložkou mastnej kyseliny môže byl jednosytná alebo- dvoj— sytna mastná kyselinás priamym alebo rozvetveným reťazcom,, ktorá obsahuje 4 až 22 atómov uhlíka, prednostne 6 až 18 atómov uhlíka. Ako zložka jednomocného alkoholu,tak zložka mastnej kyseliny móze: obsahoval nenasýtenú väzbu. Zložka jednomocného alkoholu rnože napríklad zahrnat ethanol, propanol, isopropylal- koho!,, butanol, hexanol, oktanol, isooktanol, dodekanol,_: isododekanol, myrietylalkohol, cetylalkohol, hexadecylalkohol, 2 ethylhexylalkohol, 2 - oktyldodekanol a pod. Zložka mastnej, kyseliny môže napríklad z&ŕňaí jednosytná mastné kyseliny, ako je kyselina masová _J; oktánová kyseliny, kyselina nonanová,. kyselina: kaprylová, kyselina* kapronová, kyseline myristová, kyselina·· palmitová, kyselina- stearová, kyselina.linolová, kyselín,® linolenová a kyselina eruková a dvojs^tné mastné kyseliny, ako je kyselina jantárová, kyselina adipová, kyselina pimelová, kyselina korková, kyselina azelainová kyselina sebaková a dodekandikyselina. Ako prednostné príklady esterov mastných kyselín s jednomocnými alkoholmi je napríklad možné uviesl estery jednosýtných mastných kyselín, ako je e.thylmyristát, isopropylmyristát, isopropylpalmitát, isopropyllaurát, isopropylkaprylát, isopropylpalmitát, isopropyllaurát, amylbutyrát, oktylbutyrát. a estery dvojsytných mastných kyselín, ako je diethylsukcinát, diisopnopylsukcinát, diethyladípát, diisopropyladipát, dilsonktyladipát, diotyladipáť, didecyladipát, decylisooktyladipát, diethylazelát, diisopropylazelát, diisooktylazelát, diethylsebakát, diisopropylazelát, diisooktylazelát, diethylsebakát, disopropylsebakát, dibutylsebakát a dioktylsebakát.

Ako špecifi-Cké príklady alkanolamínov je napríklad možné uviesl diethanolamin, triethanolamin, isopropanolamin,triisopropanolamin, ďibutanolamin, tributanolamin a pod.

Ester jednomocného alkoholu s mastnou kyselinou a alkanolamín môžu byť použité pre zlepšenie schopnosti roztoku cyklosporinu v. organických rozpúšťadlách prenikať, kožou a súčasne? zaistiť homogénnu dispe-rgáciu cyklosporinu rozpusteného v organických rozpúšťadlách v olejovitej látke, ktorá sa nachádza v pevnom stave. Obsah týchto zlúčenín obyčajne kolísa od asi 1 do asi 15 % hmotnostných, prednostne od. asi 3 do asi 10 % hmotnostných vztiahnuté na celkovú hmotnosť topického prípravku. Týchto zlúčenín sa môže Šalej, používať v množstve, ktoré obvykle kolísa od asi 2 do asi 5 dielov hmotnostných, vztiahnutých na jeden hmotnostný diel organického rozpúšťadla_r poťažmo rozpúštadiel.

Topické prípravky podía vynálezu obsahujú olejovitú látku, ktorá j,e pri teplote okolia v pevnom stave. Pod výrazom v pevnom. stave sa v tomto kontexte rozumie, že táto látka môže byť nielen pevná, ale i polopevná. Ako také dlejovité látky je; možné uviesť napr. alkoholy, mastné kyseliny, estery, trigly··ridy, vosk, vazelínu a pod.. Alkohol môže zahrňovať napríklad padmitylalkohoL, stearylalkohol, eikosylalkohol, glycerín, polyglycerin apod. Mastné, kyseliny môžu napríklad zahŕňať, kyselinu palmitovú, kyselinu stearovú, kyselinu olejovú, kyselinu arachovú, kyselinu behenovú, kyselinu, montanovú, kyselinu melisovú, kyselinu. sebakovú a pod. Estery môžu zahŕňať napríklad butylstearát, hexyllaurát, myristylylmyristát, ďodecyloleát, 2-oktyldodi.ecyimyristát, hexyldecyloktanoát, cetyllaktát, glyceí'ylkapronát, glycerylkaprylát a pod. Ako tŕiglyceridy sa môžu použiť rožné látky živočíšneho- alebcr rastlinného pôvodu, ktoré sú súhrnne označované ako tuky a deje a ktoré sú obchodne, dostupné· Môže sa napríklad jednat o najrôznejšie rastlinné oleje, kravské tuky, pečeňové tuky,lanolin, loj a pod.

Prednostnými látkami tohoto typu sú rastlinné oleje,/ najmä olivový olej, olej z kamélie, sójový olej, repkový olej, kukuričný olej, ricínový olej, svetlicový olej'a pod» Taktiež sa môže použiť rybí olej, ktorý je bohatý na eikosapentadekanovú kyselinu,, ktorá v poslednej, dobe. priťahuje narastajúcu pozornosť vďaka svojmu účinku proti alergiám, a zhubným, nádorom.

Obsah olejovitej látky nie: je®b&edzený na nejakú konkrétnu hodnotu a môže byť v podstate íubovolný tak,, aby sa dosiahlo: požadovaných vlastností topického prípravku. Obyčajne; môže obsah olejovitej látky kolísal približne cxl 1 do 10 dielov hmotnostných, prednostne od asi 2 do asi 8 dielov hmotnostných, vztiahnuté na jeden diel hmotnostný súčtového· množstva organického rozpúšťadla; a esteru j.ednomocneho· alkoholu s mas.tnou kyselinou alebo alkanoylaminu, ktorý je pri. teplote miestnosti v. kvapalnom stave.

Typické prípravky podťa tohto vynálezu obsahujú tiež povrchové, aktívnu látku. Ako- povrchové aktívných látok sa môže použiť rôznych surfaktantov, akými sú anion®vé kation®vé , neion©vé alebo amfoterné povrchovo aktívne látky. S ohíadom na nízky stupeň dráždivosti na pokožku sa mó- žít. prednostne používať neiontové surfaktanty. Ako príklady neion®výcb . surfaktantov je možné uviesť surfaktanty ethyle Epoxidového typu, surfaktanty polyhydroxylového: typu, surfaktan ty polymérneho typu, a pod. Surfaktanty ethylenoxidového' typu zahŕňajú napríklad adukty ethylenoxidu s vyššími alkoholmi, adukty ethylenoxidu s. alkylfenolmi, adukty ethylenoxidu s amánami odvodenými od mastných kaselín, adukty ethylenoxidu s viacmocnými alkoholmi, blokové kopolymery ethylenoxidu a propylenoxidu a: pod. Surfaktanty polyhydroxylového typu zahŕňajú napríklad monostery glycerínu s mastnými kyselinymi, estery pentaerythritolu s mastnými kyselinami, soritanestery mastných kyselín, estery sacharózy s mastnými kyselinami, amičLy mastných kyselín s e.thanolamínom a ich alkylenoxidové adukty a pod.. Týchto surfaktantov polyhydroxylového- typu sa s výhodou môžu používal polyoxyethylensorbitanéstrov mastných kyselín, polyoxyethylenglycerylesterov jednosytých mastených kyselín, polyoxypropylenesterov jednosytých mastných kyselín sorbitanesterov mastných kyselín, polyexyethylenalkohoholetherov a pod. T ieto surfaktanty sa môžu používal samostatne alebo v zmesi s. inými surfaktantom alebo surfaktantami.

Množstvo· a pomer, v akých sa surfaktanty používajú nie sú obvzlášt omedzené a môžu sa líšit, v závislosti na požadovaných vlas.tnostiach topického prípravku. ,Obvyklé je, že. je surfaktant prítomný v množstve od asi. 5 do asi 50% hmotnostných, prednostne od. asi 20 do asi 45 % hmotnostných, vztiahnuté na celkovú hmotnost topického prípravku, v prípade, že sa jedná σ topický ? prípravok neemulživného typu ad. asi 1 do' asi 20. % hmotnostných prednostne od a&i 5 do asi 15%.hmotnostných,, vztiahnuté na celkovú hmotnosí prípravku., v prípade, že sa jedná o topický prípravok emulzívneho typu.

Topické prípravky podía tohto' vynálezu môžu poprípade obsahoval prísady, akými sú plnivá, látky usňadňujúcejrozpustenie cyklo^crinw, zahuší·*»^!^ farbiacej látky, aromatizačnej látky,, vodu, kvapalný parafín, skvalan, stabilizátory emusie, baktericidy, fungicidy a pod. Ako plnivo' prichádza v úvahu j.emno’ rozdelený prášok organického typu alebo> anorganického typu. Veíkosí Častíc plniva môže obvykle ležaí v rozpä tí od asi 0,1 do-as.i 20 um, prednostne od. asi 0,5 do asi 10 jim. Ako príklady vhodných plniv je možné uviesi oxid kremičitý oxid hlinitý, oxid titaničitý, práškové pryskyrice, práškové kremičitany, práškové íly, práškový sepiolit, práškový montmorillonit, práškovú fluorovanú síudu, práškovú hydroxyprcpyLcelulózu a pod. Akc prísadyuí-áhču j.úc.e . rozpúšťanie cyklnsporinu je možné uviesť alkylenglykoly# polyalkylenglykoly, najmä-ethylenglykoL, propylenglykol, isopropylenglykol, polyethylenglykol, polypropylenglykol a pod. Prísady usňadňujúce. rozpúšťanie, sa môžu používať v množstve očL asi 0,2 der eši 5 dielov hmotnostných, vztiahnuté na jeden diel, hmo'tnostný organického' rozpúšťadla, celkom. Alkylenglýkol slúži ako urýchLovač. infúzie- alebo· penetrácie cyklosporinu kožou.

Topické prípravky podía vynálezu je možné aplikovať vo· forme emulsie alebo inej forme, ako vo forme emulsie. Pokiaí. nemajú topické. prípravky podía vynálezu podobu emuls.ie, moiSu mať prednostne nasledujúce zloženie:

a/ cyklosporin: približne. 0,1 až 10 % hmctnostných, prednostne približne· 1 až 7 % hmotnostných;

b/ organické rozpúšťadlo: približne 1 až- 40 % hmotn.ostných, prednostne približne 2 až 20 % hmotnostných;

c/ ester jednomocného- alkoholu s‘mastnou kyselinou, ktorý je pri teplote okolia v kvapalnom stave alebo alkanolamin: približne 1 až 1 5^: % hmotnostných, prednostne približne 3 až: 1 0 % hmotnostnýchj d/ olejovítá látka, ktorá je pri teplote okolia v pevnom stave: približne 2Q až 80 % hmotnostných, prednostne približne. 35 až 60 % hmotnostných;

e/ povrchovo aktívna látka / surfaktant /: približne 5 až.. 50 % hmotnostných, prednostne približne. 20/ až 45 % hm o t n o s tný ch ;

ľ 16 f/’plnív·: O až asi 15 % hmotnostných* prednostne približne 5 až 10 % hmotnostných.

Pokiaí sa nižší alkohol používa výhradne ako organické v* A rozpúšťadlo pre topické prípravky neemulsívneho typu* môže byť nižší alkohol prítomný účelne v množstve približne 2 až 15 % hmotnostných, prednostne približne 3 až 10 % hmotnostných. V tomto prípade možé. byť surfaktant účelne. prítomný v množstve približne. 20 až 40 % hmotnostných a olejovitá látka môže byť účelne, prítomná v množstve približne 35 až 60 % hmotnostných, prednostne približne 40 až 55 % hmotnostných. Použitý surfaktant môže mať Šalej hodnotu hydrofilne- lipof’ilnej rovnováhy / HLB / v rozpätí od 8 do 25> prednostne od 9 do 12.

Topické. prípravky neemulsívneho typu je možné, vyrábal zmiešaním roztoku cyklosporinu v organickom rozpúšťadle a esťeru jednomocného alkoholu s mastnou kýselinouj, ktorý je pri teplote okolia v kvapalnom stave alebo· alkanoleminu, pričom, vzkiklá zmes, sa zmieša s olejovitou látkou a surfaktantom a k výslednej zmesi sa podía potreby pridá plnivo, kedy nasleduje homogenizácia, zmesi.

Pokiaí. majú topické. prípravky podía vynálezu podobu emulsie,. mozu mat prednostne nasledujúce zloženie:

J a/ cyklosporín: približne 0,1 až 10% hmotnostiach, prednostne približne + až 7 % hmotnostných;

b/ organické rozpúšťadlo: približne + až 20 % hmotnostných, prednostné približne 2 až 12 % hmotnostných;

^ester jednomocného alkoholu s mastnou kyselinou, ktorý je pri teplote okolia v kvapalnom stave alebo alkanolamin:’

- 17 približne. + až 15% hmotnostných, prednostne približne 3 až 10 % hmotnostných} d/ olejovitá látka, ktorá je pri teplote okolia v pevnom staver približne 10 až 35% hmotnostných, prednostne približne 15 až 30 % hmotnostných;

e/ povrchovo aktívna látka / surfaktant /: približne 1 až 20 % hmotnostných, prednostne približne 5 až 15 % hmotnostných; !

f/ plnivo: 0 až 10 % hmotnostných, prednostne približne 0,1 až 5 % hmotnostných a.

g/ sterilizovaná voda: približne 30 až 75 % hmotnostných, prednostne približne.· 40 až 50 % hmotnostných.

V

Topické prípravky vo forme emulsie. . sa môžu vyrábat tak, že: sa zmiešajú zložky a/ až f/ pri zvýšenej teplote:, za vzniku oLejoviteji zmesi,, ktorá má podobu kvapaliny / táto zmes, je 5ale.j označovaná akozme.s A”'/,, pričom sa k zmesi A pridá sterilizovaná čistá voda / táto' voda je áalej označená výrazom voda B/ za miešania pri zvýšenej teplote. Voda B sa môže pridával v množstve približne 30 až 75 % hmotnostných, vztiahnuté na celkovú hmotnosť zmesi A a. vody B. K vode B sa môže pridá? prísada napred, ú íahč í infuziu a penetráciu cyklosporinu kožou,.. činidlo upratujúce viskozitu, baktericid a vodorozpustná látka,, ako je. alkanoylamin. Prísada, u íahčw^^ca infusiu alebo pene.tráciu môže· zahrnúť napríklad alkylenglykol, ako je ethylenglykol, propylenglykol, butylenglykol a pod. Činidlo •pre úpravu viskozity môže napríklad zahrnú?, polyalkylenglykol, ako je polyethylenglykol, polypropylenglykol a pod; viacmocný alkohol, ako je glycerín a pod; vodorozpustný polymér,, ako je karboxysubstituovaný vinylový polymér a pod. Topické prípravky vo forme emulsie môžu byt typu ” olej, vo vode alebo voda v oleji Pri výrobe emulsných topických prípravkov typu olej vo vode, sa prednostne používa surfaktantov s hodnotou HLR 9 až 18 a pri výrobe topických emulsných prípravkov typu voda v oleji sa prednostne používa surfaktantov s hodnotou HLB 2 až 8. K topickým prípravkom emulsného typu sa,, podía potreby, môže pridal viskózna olejovitá látka, ako je kvapalný parafín,, glycerín, vazelína a pod.

Topické.. prípravky podía vynálezu sa môžu podával tak,, že sa aplikujú priamo na postihnuté miesto kože alebo vo forme, transdermálných náplastí a ebv&zov a pod., ktoré Sa prikladajú na postihnutémiesto niekoíkokrát za deň, napríklad jeden až trikrát denne. Počet aplikácii sa môže podía potreby zvýšiť alebo znížiť, v závislosti na rozsahu liečenej choroby.

V topických prípravkoch podía vynálezu je zmes roztoku cyklosporinu v organickom rozpúšťadle a kvapalného esteru jiednomoeného' alkoholu s mastnou kyselinou alebo alkanolaminu obsiahnutá v olejovitej látke v homogénnej disperznej podobe» i Preto je u týchto topických prípravkov tak vysoká pravdepodobnosť,, že dôjde k infúzii alebo penetrácii kožou a dostaví sa vysoký terapeutický účinok proti autoimunitným alebo alergickými chorobám kože pri púhej aplikácii týchto prípravkov na postihnutú část* kože. Topické prípravky podía vynálezu sú okrem toho málo dráždivé alebo temer nedráždivé, takže sú vysoko bezpečné.

Topické prípravky podía vynálezu sú vysoko účinné pri terapii rôznych kožných cherôb,. ako je atopická dermatitis, psoriasis, kontaktná dermatitis, alergická kontaktná dermati-tis, alopecia a. pod. Okrem tho sú účinné pri liečbe iných dermálnych chorob, ako sú popáleniny. Topické prípravky podlá vynálezu môžu'napomáhať adaptácii kožného rubu na mieste transplantácie.

Vynález je bližšie osvetlený v nasledujúcich príkladoch . prevedenia. Tieto príklady majú výhradne ilustratívny charakter a rozsah vynálezu v žiadnom ohíade neo:bae<zu-jú?>

Príklady prevedenia vynálezu

Príklad 1

Pre topický prípravok.je možné, použiš nasledujúce zložky:

cyklosporin 1% hmotnostný

95% ethanol. 3% hmotnostný isopropylmyriatát- 5% hmotnostných olivový olej., 48% hmotnostných polyoxyethylen /5/glycerylmonoatearát 35% hmotnostných jemno rozdelený oxid kremičitý / Aerosil 200 / 8% hmotnostných

Tento topický prípravok sa vyrobí tak, že sa zmieša isopropylmyristát, polyoxyethylen/5/glycerylmonostearát a olivový olej, za miešajú pri teplote 50 °C , za vzniku homogénneho roztoku, ku ktorému sa pridá roztok cyklosporinu v ethanole.·, pričom sa výsledná zmes zahrejena 30 až 35 °C a zmieša sa s aerosilom, za vzniku masti.

Príklad. 2

V pečate rovnakým epôsobom, ako v príklade 1 sa vyrobí topický prípravok, ktorý ob_Sqhuje nasledujúce zložky:

cyklosporin

95% ethanol.

i s opropylmyrištát olivový olej

1% hmotnostné

5% hmotnostných

47% hmotnostných polyoxyethylen /5/glycerylmonostearát 35% hmotnostných jemno rozdelný oxid kremičitý / Aerosil 200/-/ 7% hmotnostných

Príklad 3

V podstate rovnakým spôsobom,, ako v príklade 1 sa vyrobí topický prípravok, ktorý obsahuje nasledujúce zložky:

>:-	cyklosporin	2% hmotnostné
ti ‘λ.··-	95% ethanol '	10% hmotnostných
	L. isopropyImyrištát	5% hmotnostných
	olej- z kamélie	44% hmotnostných
> A-.V	po ly oxy e thy Le n /5/glyceryImonostearát	32% hmotnostných
	jemno rozdelený oxid
S'	kremičitý /Aerosil 200/	7% Hmotnostných

‘K * 1

Príklad. 4

Kože morčiat sa sentisuje dinitrofluorbensenom / DNFB/ ..a potom sa DNFB aplikuje opäť, Čím sa vyvoláva na koži morčiat silná alergická reakcia.

f . Účinnost topických prípravkov podía vynálezu sa pozoruje na tomto experimentálnom modele.

.-..-.Tri dni pred sensetizáciou sa samcom morčaťa Hartley σ hmotnosti 40 až 50 gr intraperitoneálne podá cyklosfósfamid v dávke. 200 mg/kg. D.o jedného·· ušného boltca. každého morča£a sa nanesie; 50jal. 1 0% roztoku DNFB v zmesi acetónu;

a. olivového oleja,. 1:1a osmy deň sa na obe strany depilovanej brušnej časti morčiat aplikuje dávka 20jil 0,5 % alebo 0,1% roztoku DNFB v zmesi acetónu a olivového^ olej'a, 4 : 1, čím sa vyvolá kontaktné dermálna alergická reakcia·

Po aplikácii DNFB, ako sitigenu, na odpovedajúcich miestach oboch brušných stráni sa na rovnaké miesto' aplikuje topický prípravok,, vyrobený podía príkladu 1, ktorý obsahuje 0,1, 1 a 10% cyklosporinu, v množstve 50yUl. Toto ošetrenie sa opakuje 2 x denne, v intervale 8’ hodín. Prvé ošetrenie topickým prípravkom sa prevedie ihneÄ po zaschnutí DNFB na vzduchu.

Alergická reakcia sa hodnotí po 24, 48 a 72 hodinách ρσ aplikácii antigénu, podía nasledujúcich kritérií:

stupeň 4 = červený opuch ^!. / stupeň=3 = červenézafarbenie .' stupeň 2 = ružovéz»far'-tenie.

stupeň 1 = zaružovelá škrvrna stupeň 0 = bez zmeny

Zistené hodnoty, .ktoré sú.uvedené v. tabulke 1, predstavujú stredné hodnoty plus/ mínus smerodajná odchýlka.

Štatistické spracovanie sa prevedie pomocou Študentovho t - testu, a za signifikantný rozdiel sa považuje rozdiel v tom prípade, že pomerná odchýlka ρ;<0'·_τ05·

Aplikácia 0,5% roztoku DNFB spôsobí najsilnejšiu alergickú reakciu v časovom rozpätí od 24 do 48 hodín po aplikácii. Pomocou. 0,1% cyklosporinovej masti sa v značnom rozsahu potlačí alergická reakcia, pričom rozdiel nie 'je signifikantný. Na druhej. strane, masí obsahujúca 1 % cyklosporinu zníži alergickú reakciu v pozoruhodnom rozsahu po 24 hodinách, pričom signifikantný rozdiel odpovedá p<0,01. Aj. po 4.8 hodinách a 72 hodinách sa alergická reakcia potlačí pri signif'ikantnom rozdiele;. Ďalej, masí obsahujúca 10 % cyklosporinu vykazuje signifikantné potlačenie alergickej reakcie, ktoré je podobné,.ako pri použití 1% cyklosporinovej. masti. Pre kontrolu sa použije, mastového základu, ktorý vôbec nepotlačí alergickú reakciu. Výsledky sú uvedené v tabuľke 1_o

Tabuíka 1

skúšobné vzorky
/%/	počet morčiat	24 hodín	48 hodín '	72 hodín ·
0	9 .	3,4	+0,2	3,4+	0,2	2,7	+	0,2
0,1	9	2.,Á.	+0,3.	2,7+	0,3^	1,8	+	0,3 ^!
v·	9	0,7	+0,3 **	1,0+	0,3**	'1,0	+	0.,3 **
0	.4	3,3	+ o M CJ	3,3+	0,3	3,3	+	0,3
10^!	4	0,8	±0,5 **	1 ,0+	0,6*	1,0	+	0,5

** p<0,01 * p<0,05

Pri nanesení 0,1 % roztoku ĽNFB sa najsilnejšia, alergická ‘ . reakcia dostaví 48 hodín po aplikácii. Pomocou 0, 1 .%cyklosporinovej masti sa v značnom rozsahu potlačí alergická reakcia pričom, rozdiel je signifikantný / p<0,01 /.

Alergická reakcia sa., podobne potlačí i po 48 hodinách a 72 hodinách. N.a druhej strane, topické prípravky obsahujúce 1% a 10 % cyklosporinu zníži alergickú reakciu v pozoruhodnom rozsahu pri signifikantnom rozdieli, podobne ako topický prípravok obsahujúci 0,1 % cyklosporinu. Prekontrolu sa použije mastového základu,

- 23 ktorý vôbec: nepotlačí alergickú reakciu. Výsledky sú uvedené v tabuíke. 2 .

Tabuíka 2

skúšobné vzorky	24 hodín	48 hodín	72 hodín
cyklom sporili -V..!./	počet morčiat
0; 0,1 1,0: 0 10	CO co co	2,1 í θ, 3^^ 0,3 + 0,2’; 0,1 + 0,1 2,0 ± 0,4 0 ±o*	>, 0+0,2.** 0,4+0,3 3,0+0. b 5+0,3*	2,5 + 0,2 0,8 + 0,2 0,1 + 0,2 2,3 + 0,3, 0,3 + 0,3*

p<0,05 p<0,01

Príklad 5

Príklad 1:

Pacient, muž, 27 ročný,, je. postihnutý atopickou dermatitis od 2 rokov, prestože. od 3 do 8 rokov u neha došlo k dočasnej remisii. Až doposiaí. boli aplikované steroidné maste, ktoré neboli príliš účinné. Za použitia 10 % cyklosporinovej masti podía vynálezu zmizlo svrbenie kože po^: 4 až 5 hodinách od aplikácie masti. Začervenalý lišaj, ktorý je charakteristický pre etopickú dersatitis úplne- zmizol, tretí deň od počiatku aplikácie, p® podávaní masti 2 x denne.

Príklad 2:

Chlapec, Sročný, je^ postihnutý atopickou dermatitis od -troch rokov a> bol mu podávaný Azeptin, Zatiden a Rizaben, ako i masti

- 24 ako· je Rinderon V, Locorten a Methaderm, pričom, nebol zaznamenaný žiaden, účinok. Aplikácia. 5% cyklosporinovej masti podľa vynálezu odstránila svrbenie na koži, do 5 hodín od topického podania a svrbenie, začervenie a vlhká erózia postihnutej časti zmizla do 24 hodín od aplikácie.

Príklad 3·:

Pacientovi / muž,52 ročný /,. postihnutému psoriatickou arthritis sa na vlhký erythrem s jasným ohraničením a odlupujúcimi sa časťami kože na povrchu aplikuje 1% cyklosporinová mast podľa vynálezu. Pomocou tejto masti sa do 24 hodín, od jej aplikácie zlepší Auspitzov jav a sčervenanie zmizne, tretí den od aplikácie masti.

Príklad 6

Pre demonštráciu účinností topických prípravkov podľa to hoto vynálezu sa vyrobí mas£ zo zložiek uvedených v tabuľke 3 a ich účinnosľ sa hodnotí v podstate rovnakým sposobom, akc v príklade 4. Tiež výsledky tohoto hodnotenia sú uvedené v tabuľke 3.

- 25 Tabuíka 3

Zložka	Obsah / % hmotnostné / ..._________- Pr>lrn S- ň______________:---------------------.
	1*	₂*	3	4	5	6	7
cyklosporin	5	5	5	5	10	5	1 0
95% ethanol isopropyl	o.	0	2	5	1 0	5	10
myristát	5	5	5	5	5	0.	3
olivový olej poly oxyethyl e. glykolmonoste	48 a. a	48	48	45	35	36	36
rát	35	35	35	35	3.5	36	36
Aerosil	5	1	5	5	5	6	6
triethanol
amin.	2	0	0	0.	0	3	2
Účinnosť	nie	nie	áno	áno	áno	áno	áno.

*P®rovnávací príklad

P® rovnávacife príklady:

Pre.porovnávacie účely sa konvenčným spôsobom vyrobia nasledujúce· topické prípravky obsahujúce, .cyklosporin:

1/ 5% / % hmotnostné / suspenzie cyklosporinu v ricínovom oleji;

II/ 5% / hmotnostné / suspenzie cyklosporinu v ricínovom oleji obsahujúcom 20 % hmotnostných propylenglykolu;

III/ masť obsahujúca 10 % hmotnostných cyklosporinu, 43 % hmotnostných olivového oleja, 10 % hmotnostných ethanolu, % hmotnostných polyoxyethylen/5/oleátu a 30 %hmotnostných koloidného oxidu kremičitého.

Topické prípravky,, vyrobené vyššie uvedeným spôsobom sa skúšajú na svoju farmateutickú účinnosť v podstate rovnakým spôsobom, ako v príklade 4. U žiadneho z nich nebola zistené aignifikantná účinnosť.

Príklad 7

Pri výrobe topického prípravku sa použijú nasledujúce zložky:

eyklosporin 95 % ethanol	5% hmotnostných 2% hmotnostné
is opropylmyristát	7% hmotnostných
olej ž kamélie	40% hmotnostných
polyoxyethylen /5/
glycerylmonostearát	41% hmotnostných
jemno rozdelený oxidkremičitý /Áerosil 200 /	5% hmotnostných

Tento topickýprípravok sa vyrobí v podstate rovnakým spôsobom,, .ako prípravok popísaný v príklade 1 ·

Príklad. 8’

V podstate rovnakým spôsobom, topický prípravok;'ktorý obsahuje ako v príklade 1 sa vyrobí nasledujúce zložky:

eyklosporin

95% ethanol

5% hmotnostných

- 27' isopropylmyristát kaméliový olej polyoxyethylen /5/ glycerylmonostearát jemno rozdelený oxid kremičitý / Aerosil 200 /

5% hmotnostných

39% hmotnostných

5% hmotnostných

Príklad 9

Topické prípravky,, vyrobené podía príkladu 7 a 8 sa šesť mesiacov skladujú pod uzatvorením pri relatívnej vlhkosti 75 % a teplote 40 °C, pričom sa meria ich obsah cyklosporinu. Ak sa nezistí žiadna podstatná zmena medzi hodnotou nameranou pred skladovaním a po ňom,. T^m. je potvrdené,, že cyklosporin je vo forme týchto prípravkov dlhodobo stály»

Príklad 10

Zimes A sa vyrobí vzájomným rozpustením-50 gr cyklosporinu, 70 gr 2-oktyldodekanolu, 30 gr isbpropylmyrištátu, 20 gr isotridecylmyristátu, 10 gr polyoxyethylen/20/ sorbitanmonooleátu, 5Ό gr pclyoxyethylen/5/glycerylnionostearátu, 10 gr scrbita». monostearátu, 30 gr cetanolu, 40 gr sebakátu a 30 gr olivového oleje: pri teplote. 80 °C. Oddelene sa vyrobí zmes B zmiešsním 30 gr propylenglykolu., 20 gr diisopropylalkoholaminu,, 2 gr karboxyvinylového polyméru, 1 gr methyl p-hydroxybenzoátu a. 1 gr propyl p-hydrcxybenz:oátu s 596 ml sterilizovanej vody a zmes sa zahreje približne na, 82 °C» KecL obe zmesi dosiahnu predom. určených teplôt ,. začne sa zmes A postupne, za intenzívneho miešania, pridávať'k. zmesi B, čím vznikne emulzia. Po skončení prídavku sa zahrievanie preruší a teplota emulzie sa za miešania a chladenia nechá poklesnúť na 6.0 až 55 °C, Potom, sa k zmesi pridá sterilizovaná voda,_: až do celkovej hmotnosti smesi 1 kg»

- 28Vzniklá zmes sa nechá stáť a odpeniť a potom sa naplní do vhodnej nádoby.

v hore uvedergj zmesi je možné polyoxye.thylén/5/glycerylmonostearát nahradiť 2,0 % hmotnostného polyoxyethylen/2/cetyle theru; sorbitanmonostearát je. možné nahradiť skvalanom SK; a cetanoľL je možné nahradiť behenylalkoholom. Okrem toho celý objem sterilizované j vody, použitej pre zmes B, je možné nahradiť kvapalným parafínom.

Príklad.11

Zmes A sa vyrobí vzájomným rozpustením 50 gr cyklosporinu, 50 gr ethanolu, 50 gr isopropylmyristátu, 50 gr polyethylenglykolu/400/, 30 gr diethylsebakátu, 80 gr olivového oleja, 30 gr polyOxyethylen/5úmonostearátu, 30 gr polye.thylenglykol/40/monostearátu ä‘20 gr sorbitanmonostearátu, pri zvýšenej, teplote. Oddelene sa vyrobí zmes B rozpustením 50 gr polyethylenglykolu, 20 gr diisopropylaminu, 10 gr karboxyvinylového polyméru, 1 gr

I methyl p-hydroxybenzoátu a 1 gr propyl p-hydroxybenzoátu a 528 mil sterilizovanej vody, pri zvýšenej teplote. Zmes A sa postupne; pridává za intenzívneho miešania k zmesi B, pričom vznikne, emulzia. Po dokončení prídavku sa celková hmotnosť zmesi doplní na 1 kg prídavkom starilizovanej vody.

V hor e uvederom.prípravku je možné; ethanol nahradiť behenylalkoholom a diisopropylalkoholamin ./.je možné nahradiť triethanolaminom.

Príklad 1 2

Zmes A sa vyrobí vzájomným rozpustením 50 gr cyklosporinu,

- 29 10 gr oktylalkoholu, 50^-gr olivového oleja,. 30 gr isopropy.lmyristátu, 25 gr isotridecylmyristátu, 20 gr polyoxyethylen/20/s.orbi.tenmono:ol.eátu,. 6Ό gr polyoxyethylen/5/glycerylmanostearátu, 20 gr sorbitaňstearátu, 30 gr cetanolu, 25 gr kyseliny, atearovej. a 35 gr diethylsebakátu, pri teplote. 80 °C.

Oddelene, sa vyrobí zmes B rozpustením. 20 gr polýethylenglykolu, 20 gr diisopropylaloholaminu, 2 gr karboxyvinylového polyméru,.

0,5 gr methyl p-hydroxybenzoátu a 0·, 5 gr propyl p-hydroxybenzoátu, v približne. 400 ml sterilnej vode a zmes sa zahreje na teplotu 82 °C alebo vyššiu. Zmes B sa postupne pridáva za intenzívneho miešania k zmesi A, pričom vznikne emulzia. Po dokončení prídavku sa zahrievanie preruší a k výslednej zmesi sa za miešania pri teplote miestnosti pridá sterilná voda, ktorou sa celková hmotnosť zmesi upraví na 1 kg. Zmes sa. nechá stáť a odpeniť a vzniklou masťou v krémovej forme sa naplní vhodná nádoba.

V ...hor· uvedenej zmesi je možné isopropylmyristát nahradiť isopropylpalmitátom.

Príklad 13

Zmes A sa vyrobí vzájomným; rozpustením 50 gr cyklosporinu, 30 gr včelieho vosku, 80 gr 2,6-dimethyl-4.-heptanolu, 30 gr olivového- oleja, 40 gr. isotridecylmyristátu,. 20 g.r polyoxyethylen /20/sobitolhexasteará'tu, 60 grpolyoxye.thylen/5/glycerylmonostearátu, 20 grpolyoxyethylenovanéh.o/60/ ztuženého ricínového oleja, 40 gr cetostearylalkoholu a 40 gr diethylsebakátu, pri 80 °C. Oddelene sa vyrobí zmes B rozpustením 30 gr polyethylenglykolu, 20 gr diisopropylalkoholaminu, 2 gr karboxyvinylovéh® polyaeru, 0,5 gr methyl p-hydroxybenzoátu a 0,5 g.r propyl p-hydroxybenzoá tu v 510; ml. sterilnej vody a' zmes, sa zahreje.· na teplotu 82 °C alebo vyššiu. Zmes B sa- postupne pridává za intenzívneho miešania k: zmesi.A, ktorá sa udržuje pri. teplote 80 ⁰ C. Po dokonče- 30 ní prídavku sa zahrievanie preruší a zmes sa za miešania ochladí, na 60 až 55 °C. Potom sa k výslednej zmesi za miešania pri teplo·te miestnosti pridá sterilná voda, zahriata na 80 °C, ktorou sa hmotnosť zmesi upraví na 1 kg. Vzniklá zmes sa nechá stáť a odpeniť a potom sa naplní do vhodnej nádoby.

V -.hore, uvedenej zmesi je možné včelí vosk nahradiť polyoxyethylenlanolyl.alkoholom alebo derivátom včelieho, vosku. Isotridecylmeristát. je možné nahradiť 0,2 % hmotnostného silikonového oleja. Polyoxyethyljen/20/sorbitanole.át je. možné, nahradiť, es térom polyoxye.thylensorbitanu a. mastnej, kyseliny. S'orbitanmonos.tearát je možné· nahradiť, skvalanom SK a sterilizovanú · vodu je možné nahradiť kvapalným'parafínom.

Príklad. 14

Vyrobí sa zmes A. .zmiešanín 50 gr cyklooporinu,. . 80 gr propylenglykolmonokaprylátu,. 30 gr isopropylmyristátu, 30 gr polyethylenglykolmonostearátu ?25 jednotiek ethyienoxidových /,. 30 gr poly ethyiengly kolu,. 20. gr isotridecylmyrištátu, 20 . gr c etanolu, 50 gr olivového oleja* 80 gr velrybieho vosku, 30 gr sorbitanmono'stearátu,. 30: gr p.olyoxyethylen/5/glycerylmonostearátu, 30 gr kyseliny stearove j, 20 gr diiisopropylalkoholaminu a 4.0 gr diethyisebakátu a zahriatím vzniklej. zmesi na 80 °C. Oddelene sa vyrobí zmes B pridaním 30 gr propyleťLglykolu,. 15 gr diisopropylalkoholaminu·, 2 gr karboxyvinylového· polyméru, 0,5 gr methyl p-hydroxybenzoátu a: 0,5 gr propyl p-hydroxybenzoátu k približne 400 ml sterilnej vody a vznikla zmes: sa zahreje na teplotu 82 °C. alebo vyššiu. Po? dokončení prídavku sa zahrievanie preruší a zmes. sa za miešania ochladí, na 60 až 55 °C· Potení sa 1c výsledne j znesi pridá sterilná voda,, zahriata na 80. °C, ktorou sa hmotnosť zmesi

- 31 upraví na 1 kg. Vzaiknutázmes sa nechá stál, a odpeniš a potom, sa naplní do> vhodnej nádoby.

Príklad 15

Zmes A sa vyrobí zmiešaním 50 gr cyklosporinu, 70 gr 2-oktyldodekanolu, 30 gr isoprenglykolu, 40: gr diethylsebakátu, 30 gr isopropylmyristátu, 30 gr isotridecylmyristátu, 60 gr veľrybieho vosku, 30 gr cetanolu, 40 gr kyseliny stearovej;, 20 gr polyethylenglykol/5/glycerylmonostearátu, 20 gr polyethylenglykol/40/monostearátu, 10 gr sorbitanmonostearátu, 50 gr olivového oleje a 1 gr propylparabenu, pričom sa vzniklá zmes zahreje ha 80 °C. Oddelene sa vyrobí zmes B pridaním 30 gr butylenglykolu, 20 gr diisopropylalkoholaminu a 1 gr netylparabenu. k 460 ml· sterilnej, vody a vzniklá zmes sa zahr®'j.e. na 82 °C aľeho vyššiu. Po dohotovení prídavku sa zahrievaní· preruší a. zmes sa za miešania ochladí na 60 až 55 °C. Potom, sa. k výslednej zmesi pridá sterilná voda., zahriata na 80 °C, ktorou, sa hmotnosť zmesi upraví na 1 kg.. Vzniklá zmes, sa nechá stáí.a odpenií a potom sa naplní do vhodnej nádoby.

Príklad 16

Roztok 50 gr cyklosporinu v 80 gr 2-oktyldodekanole sa pridá k zahriatej, zmesi 40 gr isopropylmyristátu, 370 gr olivového oleja, 378 gr polyoxyethylen/5/glycerylmonoste.arátu, 2 gr polyoxyethylen /9/ laurylethera a 10 gr sorbitanmonostearátu, pričom, sa k vzniklej zmesi pridá 70 gr aerosilu, čím sa získa topický prípravok neemulživného· typu..

-32Príklad. 17

Účinnosť krémovitej masti obsahujúcej cyklosporin, vyrobenej: v podstate rovnakým sposobom, aký je popísaný v príklade 15, sa potvrdí aplikáciou na úseky kožného transplantátu u myší.

Úseky kože desiatich samcov myší GBA päť týždňov starých sa transplantujú myším samcom G3H/HeN. o rovnakom veku. Na miesta transplantácie a ich okolie sa aplikuje približne 0,1 gr masti vyrobenej podía príkladu 12 dvakrát denne, tak dlho·, až transplantované úseky nakoniec, odpadnú. Výsledky sú uvedené v tabulke 4.

Tabuťka 4

cyklosporin ¹.	Doba transplan	Predlžujúci	Signifikantný
/ % /	tácie	účinok	rozdiel **
ŔF.......	... „. ... _6o	'>397	p <0,001 .......
i;o	31,3 ± 1,43	20?	p<0,001
0,0	15,1 + 0,78	1 00	—
.ako kontrolný

i?.·. * stredná hodnota + smerodajná odchýlka

- **. Študentov t-test y;.....y U, kontrolnej skupiny, ktorej bol aplikovaný krém bez cyklosporínu, odpadnú transplantované vzorky kože v priemere : pn 12,7 dňa od transplantácie, zatiaí čo u skupiny, ktorej, bol aplikovaný krém obsahujúci 5 % cyklosporínu, rástli všetky transplantavané úseky kože po dobu 60. dní. alebo dlhšie. U • skupiny, ktorej bol aplikovaný krém obsahujúci 1 % cyklosporínu ... sa. predĺžila doba rastu transplatovaných úsekov kože, na strednú .•hodnotu 31,3 dňa, pri signifikantnom rozdiele.

.'•í

Príklad 1 8

Ôsmim samcom morčaťa Hartley o hmotnosti približne 300 gr sa intraperitoálne podá 150 mg/kg cyklofosfamidu a 3 dni po- tom· to- intrapsritone.álnom podaní sa do jedného ušného boltc· každého morčaťa aplikuje 50 ul 10 % roztoku dinitrofluorbenzenu / DNFB’ /. Roztok DNFB sa vyrobí rozpustením predom určenéhomnožstva DNFB- v zmesi acetónu a olivevého oleja, 1 : 1.. Po 8 dňoch sa chlpy na obidvoch stranách brucha odstránia a na depilované brušné časti morčaťa sa aplikuje 20 ul 0,1 % roztoku DNFB, aby sa vyvolala, kontaktná dermálna alergia. IhneŽ potom sa na časti, na ktorých bol bol roztok DNFB aplikovaný, nanesie sa cyklosporinová masť, vyrobená v podstate sposobom popísaným v príklad 15. Cyklosporinová masť sa ňalej' aplikuje vždy po 8 hodinách. Kontrolnej skupine sa aplikuje masťový základ,, ktorý je popísaný v príklade 15, bez cyklosporinu, podía rovnakého rozvrhu.

Alergická reakcia sa hodnotí po 24 hodín, 48 hodín a 72 hodín po aplikácii roztoku DNFB, ako antigénu, a pre toto hodnotenie sa použije nasledujúca stupnica.

stupeň 4; = červený opuch stupeň 3 = červené zafarbenie: stupeň 2 = záp®l, ktorý sa prejavuje ružovýmzafarbením kože.

stupeň 1 = záp®l, ktorý sa prejavuje zmenou farby kože na svetlo ružovú stupeň 0 = bez zmeny

Výsledky sú uvedené v tabuíke 5·

- 34 T'abuíka 5

cyklosporin / % /	PrudkosX dermálnej. reakcie. / stredná hodnota + smerodajná	odchýlka
24 hodín·	48 hodín	72 hodín '

bo	0,0i 0,0^	0,3i .0,2 ,₄	o,.ii 0,1^*
0,1	0,3i 0,3	0,9i 0,2	0,7i 0,3
0,0
/ kontrolný ,	' 2,2+ 0,3**	3,1+ 0,2 **	2,4+0,2**

** p’<0,001. pri Študentovom T -teste

Pri týchto pokusoch sa najsilnejšia alergická reakcia indukuje^ v časovom rozmezí od' 24 do 48 hodín po aplikácii roztoku DNFB.: Masí obsahujúca 1,0 % cyklosporinu silno.potláča alergickú reakciu a masí obsahujúca 0,1 % cyklosporinu potláča alergickú, reakciu pri signifikantnom rozdiele?.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY εη er s p s e e s o q

1. Topický prípravok obsahujúci cyklo sporia,, vyznačujúci sa t ý mi, že obsahuje a/ cykle sporia; ...b/ organické rozpúšťadlo, v ktorou sa má cyklosporia rozpustiť; c/ ester mastnej kyseliny a jednomocným alkoholom, ktorý je pri teplote 25°C v kvapalnom stave a ktorý celkom obsahuje 8 atómov uhlíka alebo viac alebo alkanolamín, ktorý je pri teplote 25 ^GC v kvapalnom stave; d/ olejovitú látku, ktorá je pri teplote 25 °C v pevnom stave; e/ povrchovo aktívnu látku, pričom množstvo cyklosporinu leží v rozpätí od 0,1 do 10 % hmotnostných a celkové množstvo ester mastnej kyseliny alebo alkanolanínu leží približne v rozpätí od 1 do 15 % hmotnostných.

. f
2· Topický prípravok pódia nároku 1, vyznačuj úei s a t ým„'že ako organické rozpúšťadlo obsahuje alifatický alkohol, ktorý je pri teplote 25°C v kvapalnom stave·
3. Topi^ckÝ prípravok podía nároku 2, vyznačujúci a a t ý m, že ako alifatický alkohol obsahuje nižší alkohol·
4» Topický prípravok podía nároku 3, v y z n a č u j úei sa t ý m, že ako nižší alkohol obsahuje ethanol·
5· Topický prípravok podía nároku 2, v yz n a č u j úe i sa t ý m, že ako alifatický alkohol obsahuje vyšší alkohol s rozvetveným reťazcom, ktorý obsahuje 8 atómov uhlíka alebo viac.
6. Topický prípravok podía nároku 5, vyznačujúci sa t ý n, že ako vyšší alkohol obs_ahuje 2-oktyldodekanol.

- 3 6
7· Topický prípravok podía^ nároku 1, v y z n a δ u j úe i a ® t ý a, že ako organické rozpúšťadlo obsahuje mono®4$?^rmastnej kyseliny s viacmocným alkoholom* ktorý je pri teplote okolia v kvapalnom stave·
8. Topický prípravok podlá nároku 7,vyznačujúci sa tým, Že ako monpester obsahuje propylenglykolmenokapronát alebo propylenglykolmonokaprylát·
9. Topický prípravok podía niektorého z nárokov 1 až 8, vyznačujúci sa tým, Že organieké rozpúšťadlo, je prítomné v množstve-približne od 0,5 de 1Q dielov hmotnestaých, vztiahnuté na jeden diel hmotnosti cyklosporinu· ŕ
10· Topický prípravok podía niektorého z nárokov 1 až 9, vyznačujúci sa t ý a, že ako ester mastnej kyseliny s jednoročným alkoholom obsahuje ester jednosytnej mastnej kyseliny obsahujúcej 8 atómov uhlíka alebo viac*
11. Topický prípravok podía niektorého z nárokov 1 až 9, vyznačujúci sa t ý m, že ako ester mastnej kyseliny a jenomocným alkoholom ©bsahujje diester dvojsýtnej mastnej kyseliny, obsahujúci 4 atómy uhlíka alebo viac.
12. Topický prípravok podía niektorého z nárokov 1 až 9, vyznačujúci sa týnr, že ako ester mastnej kyseliny a; jednomocným alkoholom obsahuje ester kyseliny myristovej alebo diester kyseliny sebakovej.
13· Topický prípravok podía niektorého z nárokov 1 až 12, vyznačujúci sa t ý m, že ako ole jovitú látku obsahuje aspoň jednu látku zvolenú zo súboru zahrňujúceho mastné kyseliny o -teplote rozpúšťania 25°C alebo vyššej, alkoholy, estery a triglyceridy.
14. topický prípravok podía nároku 13, vyznačujúci sa t ý m, že ako triglycerid obsahuje rastlinný olej·
15. Topický prípravok podľa niektorého z nárokov 1 až 14, vyznačujúci sa t ý m, že: ako povrchovo aktívnu látku obsahuje neion ový surfaktant.
16. Topický prípravok podľa niektorého z nárokov 1 až 15, vyznačujúci s a ý ,že áalej obsahuje plniva.
17· Topický prípravok podľa niektorého z nárokov 1 až 16, vyznačujúci sa t ý , že tľale j obsahuje alkylenglykol alebo polyalkylenglykol·
18. Äpický prípravok obsahujúci cyklosporín, vyznáč u júci sa t ý a, že obsahuje a/ cyklosporín; b/ nižší alkohol; c/ ester mastnej kyseliny s jednomocným alkoholom^ ktorý obsahuje celkom 8 alebo viac atómov uhlíka a je pri teplote 25 ®C v kvapalnom stave alebo alkanolámín,ktorý je pri teplote 25 ^eC v kvapalnom stave; i/ olejovitú látku, ktorá je pri teplote 25 ®C v pevnom stave; e/ povrchovo aktívnu látku pričom množstvo cyklosporinu leží približne v rozpätí od 0,1 do 10 % hmotnostných, množstvo nižšieho alkoholu leží v rozpätí približne od 2 do 15 % hmotnostných a celkové množstvo esteru :< alebo alkanolamínu leží v rozpätí približne od 1 do 15 % hmôtnostných.
19· Topický prípravok podía nároku 18, vyznačujúci sa t ý že ak© nižší alkohol obsahuje aspoň jednu látku, zvolenú zo súboru zahrňujúceho ethanol, isopropylalkohol, propanol a isobutenol.
20. Topický prípravok pódia niektorého z nárokov 18 »ž 19, vyznač u j ú e ,i sa t ý m, Že ako ester mastnej kyseliny e jednomočným alkoholom obsahuje ester Mastnej kyseliny s .priamy® alebo rozvetveným reíazcom, obsahujúcim 8 až 24 atomov uhlíka.
21. Topický prípravok pódia niektorého z nárokov 18 až 20, vyznačujúci sa t ý m, že ako olejovitú látku obsahuje rastlinný elej.
22. Topickyprípravok pódia niektorého z nárekov 18 až 21, vyznačujúci s a t ý mi, že ako povrchovo aktívnu látku obsahuje neionvvý surfaktant·
23. Topický prípravok podía niektorého z nárokov 18 až 22, vyznačujúci sa t ý m, že cíalej obsahuje plnivo, približne v množstve ©d 5 do 10 % hmotnostných» »* ·
24. Topický prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje 0,1 až 10 % hmotnostných cyklosporínu, 2 až 15 % hmotnostnýeh ethanolu; 1 až 15 % hmotn·© tných isopropylmyristátu; 35 až 60 % hmotnostných olivového oleja alebo kaméliového oleja; 20 až 40 % hmotnostných povrchovo aktívnej látky; 5 až 10 % hmotnostných oxidu kremičitého.