RU2793266C2 - Isoxazol as fxr receptor agonists - Google Patents
Isoxazol as fxr receptor agonists Download PDFInfo
- Publication number
- RU2793266C2 RU2793266C2 RU2021103840A RU2021103840A RU2793266C2 RU 2793266 C2 RU2793266 C2 RU 2793266C2 RU 2021103840 A RU2021103840 A RU 2021103840A RU 2021103840 A RU2021103840 A RU 2021103840A RU 2793266 C2 RU2793266 C2 RU 2793266C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- group
- alkyl
- disease
- substituted
- diseases
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Перекрестная ссылка на родственные заявкиCross-reference to related applications
Настоящая патентная заявка претендует на приоритет на основании патентной заявки Италии №102018000007265, поданной 17 июля 2018 года, полное раскрытие которой включено в настоящий документ путем ссылки.This patent application claims priority under Italian Patent Application No. 102018000007265 filed July 17, 2018, the entire disclosure of which is incorporated herein by reference.
Область техники, к которой относится изобретениеThe field of technology to which the invention belongs
Настоящее изобретение относится к производным изоксазола и к их применению, в частности, в лечении и/или профилактике FXR-опосредованных заболеваний.The present invention relates to isoxazole derivatives and their use, in particular in the treatment and/or prevention of FXR-mediated diseases.
Предпосылки создания изобретенияPrerequisites for the creation of the invention
Фарнезоидный Х-рецептор (FXR, также известный как BAR (рецептор желчных кислот), NR1H4) представляет собой лиганд-зависимый фактор транскрипции и относится к суперсемейству ядерных гормональных рецепторов.The farnesoid X receptor (FXR, also known as BAR (bile acid receptor), NR1H4) is a ligand-dependent transcription factor and belongs to the nuclear hormone receptor superfamily.
Экспрессируемый на высоком уровне в кишечно-печеночных тканях (печень и кишечник) FXR регулирует гомеостаз желчных кислот, липопротеинов, метаболизм глюкозы, регенерацию печени и нарушения работы сердечно-сосудистой системы (Мангельсдорф, Д. Дж., и др. Cell 1995, 83; 835; Форман, Б. М., и др. Cell 1995, 81, 687; Макисима, М., и др. Science 1999, 284, 1362; Парке, Д. Дж., и др. Science 1999, 284, 1365; Ван, X., и др. Mol. Cell 1999, 3, 543; Койперс, Ф., и др. Rev. Endocr. Metab. Disord. 2004, 5,319; Чжан, и др. Proc. Natl. Acad. Sci. США 2006, 103, 1006; Мацубара, Т., и др. Mol. Cell. Endocrinol. 2013, 368, 17; Клодель, Т., и др. Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2005, 25, 2020). Специфические желчные кислоты связывают и активируют FXR, причем наиболее высокоактивной из них является хенодезоксихолевая кислота (CDCA), которая представляет собой эндогенный лиганд FXR и первичную желчную кислоту, находящуюся в желчи человека.Highly expressed in enterohepatic tissues (liver and intestines), FXR regulates bile acid homeostasis, lipoproteins, glucose metabolism, liver regeneration, and cardiovascular disorders (Mangelsdorf, D.J., et al. Cell 1995, 83; 835; Forman, B. M., et al. Cell 1995, 81, 687; Makishima, M., et al. Science 1999, 284, 1362; Parke, D. J., et al. Science 1999, 284, 1365 ; Wang, X., et al. Mol. Cell 1999, 3, 543; Kuipers, F., et al. Rev. Endocr. Metab. Disord. 2004, 5,319; Zhang, et al. Proc. Natl. Acad. Sci (USA 2006, 103, 1006; Matsubara, T., et al. Mol. Cell. Endocrinol. 2013, 368, 17; Claudel, T., et al. Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2005, 25, 2020) . Specific bile acids bind and activate FXR, the most highly potent being chenodeoxycholic acid (CDCA), which is an endogenous FXR ligand and the primary bile acid found in human bile.
В последние годы появились сообщения о различных высокоактивных и селективных агонистах FXR, относящихся к классам стероидных и нестероидных химических веществ, таких как 6-ECDCA, GW4064 и фексарамин. Однако в результате проведения расширенных клинических исследований выявлены некоторые побочные эффекты, выраженные в диерегуляции в липидах сыворотки крови, наблюдаемые у пациентов с диабетом и стеатозом печени (Фиоруччи С, и др. Expert Opin. Ther. Targets 2014, 18, 1449-59).In recent years, there have been reports of various highly active and selective FXR agonists belonging to the classes of steroidal and non-steroidal chemicals such as 6-ECDCA, GW4064 and fexaramine. However, as a result of extended clinical studies, some side effects have been identified in serum lipid deregulation observed in patients with diabetes and hepatic steatosis (Fiorucci C, et al. Expert Opin. Ther. Targets 2014, 18, 1449-59).
В контексте нестероидного лиганда, GW4064 представляет собой этап в области агонистов FXR изоксазольного типа.In the context of a non-steroidal ligand, GW4064 represents a milestone in the field of isoxazole-type FXR agonists.
Действительно, GW4064 показал ограниченное кишечное всасывание (<10%) у крыс после перорального введения, демонстрируя короткий период полувыведения в конечной фазе. Кроме того, π-электронная система, широко делокализованная во фрагменте молекулы стильбена, ответственна за его неустойчивость к УФ-излучению, поэтому GW4064 потенциально токсичен для клеток. Раскрытие изобретенияIndeed, GW4064 showed limited intestinal absorption (<10%) in rats after oral administration, showing a short terminal phase half-life. In addition, the π-electron system, widely delocalized in a fragment of the stilbene molecule, is responsible for its instability to UV radiation; therefore, GW4064 is potentially toxic to cells. Disclosure of invention
Целью настоящего изобретения является идентификация новых соединений, действующих как агонисты FXR, с улучшенными фармакокинетическими свойствами по сравнению с GW4064.The aim of the present invention is to identify new compounds that act as FXR agonists with improved pharmacokinetic properties compared to GW4064.
Указанная цель достигается посредством настоящего изобретения применительно к селективным агонистам FXR, содержащим химический каркас изоксазола по пункту 1, к фармацевтической композиции по пункту 5, к применению по пунктам 6 и 7 формулы изобретения. Предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения изложены в зависимых пунктах формулы изобретения.This object is achieved by the present invention in relation to selective FXR agonists containing the isoxazole chemical backbone according to paragraph 1, to the pharmaceutical composition according to paragraph 5, to the use according to paragraphs 6 and 7 of the claims. Preferred embodiments of the present invention are set forth in the dependent claims.
Наилучший вариант осуществления изобретенияBest Mode for Carrying Out the Invention
Нижеследующие абзацы содержат определения различных химических фрагментов соединений по настоящему изобретению и предназначены для единообразного применения во всем описании и в формуле изобретения, если иное недвусмысленным образом изложенное определение не содержит более широкое определение. Термин «алкил», в контексте настоящего документа, относится к насыщенным алифатическим углеводородным группам. Этот термин включает нормальные (неразветвленные) цепи или разветвленные цепи.The following paragraphs contain definitions of various chemical moieties of the compounds of the present invention and are intended to be applied uniformly throughout the specification and in the claims, unless otherwise expressly stated definition contains a broader definition. The term "alkyl", in the context of this document, refers to saturated aliphatic hydrocarbon groups. This term includes normal (non-branched) chains or branched chains.
Неограничивающими примерами алкильных групп по настоящему изобретению являются, например, метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изо-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, н-гексил и тому подобные.Non-limiting examples of the alkyl groups of the present invention are, for example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, iso-butyl, t-butyl, n-pentyl, isopentyl, n-hexyl, and the like.
Термин «алкил», в контексте настоящего документа, относится к алкильной группе, которая сцеплена с остальной частью соединения посредством атома кислорода.The term "alkyl", in the context of this document, refers to an alkyl group that is linked to the rest of the compound through an oxygen atom.
Термин «галоген», в контексте настоящего документа, относится к фтору, хлору, брому и йоду.The term "halogen", in the context of this document, refers to fluorine, chlorine, bromine and iodine.
Если не указано иное, термин «замещенный», в контексте настоящего документа, означает, что, по меньшей мере, один атом водорода вышеуказанных групп заменен другим неводородным атомом или функциональной группой, при условии, что нормальная валентность сохраняется, и что замещение приводит к стабильному соединению.Unless otherwise indicated, the term "substituted", in the context of this document, means that at least one hydrogen atom of the above groups is replaced by another non-hydrogen atom or functional group, provided that the normal valency is maintained, and that the substitution results in a stable connection.
Термин «фармацевтически приемлемые соли» относится к солям указанных ниже соединений Формулы (I), которые сохраняют желаемую биологическую активность и признаны регуляторными органами.The term "pharmaceutically acceptable salts" refers to salts of the following compounds of Formula (I), which retain the desired biological activity and are recognized by regulatory authorities.
В контексте настоящего документа, термин «соль» относится к любой соли соединения по настоящему изобретению, полученной из неорганического или органического основания. Обычно, такие соли имеют физиологически приемлемый катион.As used herein, the term "salt" refers to any salt of a compound of the present invention derived from an inorganic or organic base. Typically, such salts have a physiologically acceptable cation.
Кроме того, соединения Формулы (I) могут образовывать соль с основанием, и эти соли включены в настоящее изобретение, поскольку они являются фармацевтически приемлемыми солями.In addition, the compounds of Formula (I) can form a salt with a base, and these salts are included in the present invention because they are pharmaceutically acceptable salts.
Соединения Формулы (I), содержащие протоны кислоты, могут быть превращены в их терапевтически активные, нетоксичные формы солей присоединения оснований, например, солей металлов или аминов, посредством обработки соответствующими органическими и неорганическими основаниями.Compounds of Formula (I) containing acidic protons may be converted into their therapeutically active, non-toxic base addition salt forms, for example metal or amine salts, by treatment with appropriate organic and inorganic bases.
Физиологически или фармацевтически приемлемые соли особенно подходят для медицинского применения из-за их большей растворимости в воде по сравнению с исходным соединением.Physiologically or pharmaceutically acceptable salts are particularly suitable for medical use due to their greater aqueous solubility compared to the parent compound.
Фармацевтически приемлемые соли также могут быть получены из других солей, включая другие фармацевтически приемлемые соли соединений Формулы (I), с использованием обычных способов.Pharmaceutically acceptable salts may also be prepared from other salts, including other pharmaceutically acceptable salts of the compounds of Formula (I), using conventional methods.
Специалистам в области органической химии будет понятно, что многие органические соединения могут образовывать комплексы с растворителями, в которых они вступают в реакцию, или из которых они осаждаются, или кристаллизуются. Эти комплексы известны как «сольваты». Например, комплекс с водой известен как «гидрат». Сольваты соединений по настоящему изобретению входят в объем настоящего изобретения. Соединения Формулы (I) могут быть легко выделены в сочетании с молекулами растворителя посредством кристаллизации или выпаривания подходящего растворителя с получением соответствующих сольватов.Those skilled in the art of organic chemistry will appreciate that many organic compounds can form complexes with solvents in which they react or from which they precipitate or crystallize. These complexes are known as "solvates". For example, a complex with water is known as a "hydrate". Solvates of the compounds of the present invention are within the scope of the present invention. Compounds of Formula (I) can be easily isolated in combination with solvent molecules by crystallization or evaporation of a suitable solvent to obtain the corresponding solvates.
Соединения Формулы (I) могут быть в кристаллической форме. В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения, кристаллические формы соединений Формулы (I) представляют собой полиморфы.The compounds of Formula (I) may be in crystalline form. In certain embodiments of the present invention, the crystalline forms of the compounds of Formula (I) are polymorphs.
Объект настоящего изобретения также включает меченые изотопами соединения, которые идентичны соединениям, приведенным в Формуле (I) и далее, но отличаются тем, что, по меньшей мере, один атом заменен атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, обычно встречающегося в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по настоящему изобретению и их фармацевтически приемлемые соли, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, такие как 2Н, 3Н, 11С, 13С, 14С, 15N, 17O, 18O.The subject matter of the present invention also includes isotopically labeled compounds which are identical to those shown in Formula (I) and below, but differ in that at least one atom is replaced by an atom having an atomic mass or mass number different from the atomic mass or mass number commonly found in nature. Examples of isotopes that may be included in the compounds of the present invention and their pharmaceutically acceptable salts include isotopes of hydrogen, carbon, nitrogen, oxygen, such as 2 H, 3 H, 11 C, 13 C, 14 C, 15 N, 17 O , 18 O.
Соединения по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений, содержащие вышеупомянутые изотопы и/или другие изотопы других атомов, входят в объем настоящего изобретения. Меченые изотопами соединения по настоящему изобретению, например, соединения, в которые включены радиоактивные изотопы, такие как 3Н, 14С, подходят для проведения анализов распределения в тканях лекарственного средства и/или субстрата. Изотопы, насыщенные тритием, то есть, 3Н, и углерод-14, то есть, 14С, особенно предпочтительны из-за простоты их получения и определения. Изотоп 11С особенно подходит для ПЭТ (позитронно-эмиссионной томографии). Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, то есть, 2Н, может дать определенные преимущества в плане терапии, обусловленные большей метаболической стабильностью, например, увеличенный период полувыведения в условиях in vivo или сниженные требования к дозировке, и, следовательно, может быть предпочтительным при некоторых обстоятельствах. Меченые изотопами соединения Формулы (I) по настоящему изобретению обычно можно получить, выполняя процедуры, раскрытые в Схемах и/или в Примерах ниже, посредством замены немеченого изотопами реагента на легкодоступный меченый изотопами реагент.Compounds of the present invention and pharmaceutically acceptable salts of said compounds containing the aforementioned isotopes and/or other isotopes of other atoms are within the scope of the present invention. Isotopically labeled compounds of the present invention, for example, compounds in which radioactive isotopes such as 3 H, 14 C are incorporated, are suitable for drug and/or substrate tissue distribution assays. Isotopes saturated with tritium, ie 3 H, and carbon-14, ie 14 C, are particularly preferred because of their ease of preparation and determination. The 11 C isotope is particularly suitable for PET (Positron Emission Tomography). In addition, substitution with heavier isotopes such as deuterium, i.e., 2 H, may provide certain therapeutic advantages due to greater metabolic stability, such as increased in vivo half-life or reduced dosage requirements, and therefore may be preferred in some circumstances. The isotopically labeled compounds of Formula (I) of the present invention can generally be prepared by following the procedures outlined in the Schemes and/or the Examples below by substituting a non-isotopically labeled reagent with a readily available isotopically labeled reagent.
Некоторые группы/заместители, включенные в настоящее изобретение, могут присутствовать в виде изомеров. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения, соединения Формулы (I) могут иметь аксиальную асимметрию и, соответственно, они могут существовать в форме оптических изомеров, таких как (R)-форма, (S)-форма и тому подобные. В объем настоящего изобретения включены все такие изомеры, включая рацематы, энантиомеры и их смеси.Some of the groups/substituents included in the present invention may be present as isomers. Accordingly, in some embodiments, implementation of the present invention, the compounds of Formula (I) may have axial asymmetry and, accordingly, they may exist in the form of optical isomers, such as (R)-form, (S)-form and the like. All such isomers are included within the scope of the present invention, including racemates, enantiomers, and mixtures thereof.
В частности, в объем настоящего изобретения включены все стереоизомерные формы, включая энантиомеры, диастереоизомеры и их смеси, включая рацематы, и общая ссылка на соединения Формулы (I) включает все стереоизомерные формы, если не указано иное.In particular, all stereoisomeric forms, including enantiomers, diastereoisomers, and mixtures thereof, including racemates, are included within the scope of the present invention, and general reference to compounds of Formula (I) includes all stereoisomeric forms unless otherwise indicated.
В общем, соединения или соли по настоящему изобретению следует интерпретировать как исключающие те соединения (если таковые имеются), которые являются настолько химически нестабильными, как сами по себе, так и в воде, что они явно не подходят для фармацевтического применения при всех путях введения, будь то перорально, парентерально или иным путем. Такие соединения известны специалисту в области химии.In general, the compounds or salts of the present invention are to be interpreted as excluding those compounds (if any) which are so chemically unstable, both on their own and in water, that they are clearly unsuitable for pharmaceutical use by all routes of administration, whether orally, parenterally or otherwise. Such compounds are known to those skilled in the art of chemistry.
Согласно первому аспекту настоящего изобретения, предложены соединения Формулы (I):According to a first aspect of the present invention, compounds of Formula (I) are provided:
или их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.or their pharmaceutically acceptable salts and solvates.
В соединениях Формулы (I):In compounds of Formula (I):
R1 и R2 независимо выбраны из группы, состоящей из Н, галогена и CF3, при условии, что R1 и R2 не являются Н одновременно;R 1 and R 2 are independently selected from the group consisting of H, halogen and CF 3 , with the proviso that R 1 and R 2 are not H at the same time;
R3 выбран из группы, состоящей из C1-С3алкила и галоген-C1-С3алкила; 11 представляет собой целое число, выбранное из 1, 2 и 3;R 3 is selected from the group consisting of C 1 -C 3 alkyl and halo-C 1 -C 3 alkyl; 11 is an integer selected from 1, 2 and 3;
R4 выбран из группы, состоящей из фенила, незамещенного или замещенного одним R5, и бифенила, незамещенного или замещенного одним R5;R 4 is selected from the group consisting of phenyl unsubstituted or substituted with one R 5 and biphenyl unsubstituted or substituted with one R 5 ;
R5 выбран из группы, состоящей из COOR6, CN, гидрокси-C1-С3алкила, SO2CH3, CF3, C1-С3алкил-О-фенила, незамещенного или замещенного одним R7, и C1-С3алкил-О-бифенила, незамещенного или замещенного одним R7;R 5 is selected from the group consisting of COOR 6 , CN, hydroxy-C 1 -C 3 alkyl, SO 2 CH 3 , CF 3 , C 1 -C 3 alkyl-O-phenyl unsubstituted or substituted with one R 7 , and C 1 -C 3 alkyl-O-biphenyl, unsubstituted or substituted with one R 7 ;
R6 выбран из группы, состоящей из Н и C1-С3алкила, аR 6 is selected from the group consisting of H and C 1 -C 3 alkyl, and
R7 выбран из группы, состоящей из COOR6, CN, гидрокси-C1-С3алкила, SO2CH3 и CF3;R 7 is selected from the group consisting of COOR 6 , CN, hydroxy-C 1 -C 3 alkyl, SO 2 CH 3 and CF 3 ;
при условии, что соединение не является 4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензойной кислотой.provided that the compound is not 4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzoic acid.
Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения, R4 выбран из группы, состоящей изAccording to one embodiment of the present invention, R4 is selected from the group consisting of
при этом, R5 является таким, как определено выше.wherein R 5 is as defined above.
Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения, R5 выбран из группы, состоящей из СООН, СООСН3, CN, -СН2ОН, SO2CH3,According to one embodiment of the present invention, R 5 is selected from the group consisting of COOH, COOCH 3 , CN, -CH 2 OH, SO 2 CH 3 ,
при этом, R7 является таким, как определено выше.wherein R 7 is as defined above.
Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения, n представляет собой 1.According to one embodiment of the present invention, n is 1.
Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения, R1 и R2 независимо выбраны из группы, состоящей из Н, О и CF3, а в предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, R1 и R2 представляют собой хлор.According to one embodiment of the present invention, R 1 and R 2 are independently selected from the group consisting of H, O and CF 3 and in a preferred embodiment of the present invention, R 1 and R 2 are chlorine.
Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения, R3 выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, изопропила и CF3.According to one embodiment of the present invention, R 3 is selected from the group consisting of methyl, ethyl, propyl, isopropyl and CF 3 .
Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения, R7 выбран из группы, состоящей из СООН, СООСН3, CN, СН2ОН, SO2CH3 и CF3.According to one embodiment of the present invention, R 7 is selected from the group consisting of COOH, COOCH 3 , CN, CH 2 OH, SO 2 CH 3 and CF 3 .
Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения, соединение Формулы (I) выбрано из группы, состоящей из:According to one embodiment of the present invention, the compound of Formula (I) is selected from the group consisting of:
Второй аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение Формулы (I), как раскрыто выше, включающее 4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензойную кислоту, и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый наполнитель.The second aspect of the present invention relates to a pharmaceutical composition containing a compound of Formula (I) as disclosed above, comprising 4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzoic acid, and, at least one pharmaceutically acceptable excipient.
Специалисту в данной области техники известен целый ряд таких соединений-наполнителей, подходящих для составления фармацевтической композиции.A person skilled in the art is aware of a number of such excipient compounds suitable for formulating a pharmaceutical composition.
Соединения по настоящему изобретению вместе с обычно используемым наполнителем могут быть помещены в форму фармацевтических композиций и их однократных дозировок, и в такой форме могут использоваться в виде твердых веществ, таких как таблетки или наполненные капсулы, или жидкостей, таких как растворы, суспензии, эмульсии, эликсиры или капсулы, наполненные ими, все предназначенные для перорального применения, или в форме стерильных растворов для инъекций для парентерального введения (включая подкожное и внутривенное применение).The compounds of the present invention, together with a commonly used excipient, may be placed in the form of pharmaceutical compositions and unit dosages thereof, and in such form may be used as solids such as tablets or filled capsules, or liquids such as solutions, suspensions, emulsions, elixirs or capsules filled with them, all intended for oral use, or in the form of sterile injectable solutions for parenteral administration (including subcutaneous and intravenous administration).
Такие фармацевтические композиции и их единичные дозированные формы могут содержать ингредиенты в обычных пропорциях, с дополнительными активными соединениями или веществами, или без них, и такие единичные дозированные формы могут содержать любое подходящее эффективное количество активного ингредиента, соизмеримое с предполагаемым диапазоном суточной дозировки, которую надлежит использовать.Such pharmaceutical compositions and their unit dosage forms may contain the ingredients in conventional proportions, with or without additional active compounds or substances, and such unit dosage forms may contain any suitable effective amount of the active ingredient commensurate with the intended daily dosage range to be used. .
Фармацевтические композиции, содержащие соединение по настоящему изобретению, могут быть получены способом, хорошо известным в фармацевтической области, и содержат, по меньшей мере, одно активное соединение. Обычно, соединения по настоящему изобретению вводят в фармацевтически эффективном количестве. Количество фактически введенного соединения, как правило, будет определять лечащий врач с учетом соответствующих обстоятельств, включая заболевание, подлежащее лечению, выбранный путь введения, фактическое введенное соединение, возраст, вес и реакцию конкретного пациента, тяжесть симптомов пациента и тому подобное.Pharmaceutical compositions containing a compound of the present invention may be prepared in a manner well known in the pharmaceutical art and contain at least one active compound. Typically, the compounds of the present invention are administered in a pharmaceutically effective amount. The amount of compound actually administered will generally be determined by the attending physician, taking into account relevant circumstances, including the disease being treated, the chosen route of administration, the actual compound administered, the age, weight and response of the particular patient, the severity of the patient's symptoms, and the like.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут вводиться различными путями, включая пероральный, ректальный, подкожный, внутривенный, внутримышечный, интраназальный и ингаляционный пути. Композиции для перорального применения могут принимать форму нерасфасованных жидких растворов или суспензий, или нерасфасованных порошков. Однако чаще всего композиции представлены в единичных дозированных формах, что способствует обеспечению точного дозирования. Термин «единичные дозированные формы» относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве стандартных дозировок для людей и других млекопитающих, причем каждая единица содержит предопределенное количество активного вещества, рассчитанное на получение желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с подходящим фармацевтическим наполнителем. Типичные единичные дозированные формы включают предварительно наполненные жидкими композициями, содержащие предварительно отмеренную дозу ампулы или шприцы, или пилюли, таблетки, капсулы, или тому подобное, если композиции представлены в твердой форме.The pharmaceutical compositions of the present invention may be administered by various routes, including oral, rectal, subcutaneous, intravenous, intramuscular, intranasal, and inhalation routes. Compositions for oral administration may take the form of bulk liquid solutions or suspensions, or bulk powders. However, most often the compositions are presented in unit dosage forms, which helps to ensure accurate dosing. The term "unit dosage form" refers to physically discrete units suitable as unit dosages for humans and other mammals, each unit containing a predetermined amount of the active agent calculated to produce the desired therapeutic effect, in combination with a suitable pharmaceutical excipient. Typical unit dosage forms include pre-filled, pre-measured ampoules or syringes containing liquid compositions, or pills, tablets, capsules, or the like when the compositions are in solid form.
Жидкие формы, подходящие для перорального введения, могут включать подходящее водное или неводное вспомогательное транспортное вещество с буферами, суспендирующими и дозируемыми агентами, красителями, ароматизаторами и тому подобным. Твердые формы могут включать, например, любой из следующих ингредиентов или соединений аналогичной природы: связующее вещество, такое как микрокристаллическая целлюлоза, трагакантовая камедь или желатин; наполнитель, такой как крахмал или лактоза, распадающееся вещество, такое как альгиновая кислота, примогель или кукурузный крахмал; лубрикант, такой как стеарат магния; глидант, такой как коллоидный диоксид кремния; подсластитель, такой как сахароза или сахарин; или ароматизирующее вещество, такое как мята перечная, метилсалицилат или апельсиновый ароматизатор.Liquid forms suitable for oral administration may include a suitable aqueous or non-aqueous carrier aid with buffers, suspending and dosing agents, coloring agents, flavoring agents, and the like. Solid forms may include, for example, any of the following ingredients or compounds of a similar nature: a binder such as microcrystalline cellulose, gum tragacanth or gelatin; an excipient such as starch or lactose, a disintegrating agent such as alginic acid, Primogel or corn starch; a lubricant such as magnesium stearate; a glidant such as colloidal silicon dioxide; a sweetener such as sucrose or saccharin; or a flavoring agent such as peppermint, methyl salicylate, or orange flavor.
Композиции для инъекций обычно основаны на стерильном физиологическом растворе для инъекций или на фосфатно-солевом буфере, или на других носителях для инъекций, известных в данной области техники.Compositions for injection are typically based on sterile injectable saline or phosphate buffered saline or other injectable vehicles known in the art.
Фармацевтические композиции могут быть в форме таблеток, пилюль, капсул, растворов, суспензий, эмульсий, порошков, суппозиториев и в виде составов с замедленным высвобождением.Pharmaceutical compositions may be in the form of tablets, pills, capsules, solutions, suspensions, emulsions, powders, suppositories, and sustained release formulations.
При желании, таблетки могут быть покрыты оболочкой, нанесенной с использованием стандартных водных или неводных методов. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения, такие композиции и препараты могут содержать, по меньшей мере, 0,1 процента активного соединения. Конечно, процентное содержание активного соединения в этих композициях может варьироваться, и оно вполне может находиться в диапазоне от, примерно, 1 процента до, примерно, 60 процентов от массы единицы. Количество активного соединения в таких терапевтически подходящих композициях таково, что будет получена терапевтически активная дозировка. Активные соединения также могут вводиться интраназально в виде, например, жидких капель или спрея.If desired, the tablets may be coated using standard aqueous or non-aqueous methods. In some embodiments, implementation of the present invention, such compositions and preparations may contain at least 0.1 percent of the active compound. Of course, the percentage of active compound in these compositions may vary and may well range from about 1 percent to about 60 percent by weight of the unit. The amount of active compound in such therapeutically suitable compositions is such that a therapeutically active dosage will be obtained. The active compounds can also be administered intranasally as, for example, liquid drops or spray.
Таблетки, пилюли, капсулы и тому подобное могут также содержать связующее вещество, такое как трагакантовая камедь, аравийская камедь, кукурузный крахмал или желатин; наполнители, такие как фосфат кальция; распадающееся вещество, такое как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновая кислота; лубрикант, такой как стеарат магния; и подсластитель, такой как сахароза, лактоза или сахарин. Когда единичная дозированная форма представляет собой капсулу, она может содержать, в дополнение к веществам вышеуказанного типа, жидкий носитель, такой как жирное масло. Различные другие вещества могут присутствовать в качестве оболочек или изменять физическую форму единицы дозирования. Например, таблетки могут быть покрыты оболочкой из шеллака, сахара или из того, и другого. Сироп или эликсир может содержать, помимо активного ингредиента, сахарозу в качестве подсластителя, метилпарабен и пропилпарабен в качестве консервантов, краситель и ароматизирующее вещество, такое как вишневый или апельсиновый ароматизатор. Чтобы предотвратить расщепление во время прохождения через верхнюю часть желудочно-кишечного тракта, композиция должна быть покрыта оболочкой из энтеросолюбильного состава.Tablets, pills, capsules and the like may also contain a binder such as gum tragacanth, gum arabic, corn starch or gelatin; fillers such as calcium phosphate; a disintegrating substance such as corn starch, potato starch, alginic acid; a lubricant such as magnesium stearate; and a sweetener such as sucrose, lactose or saccharin. When the unit dosage form is a capsule, it may contain, in addition to substances of the above type, a liquid carrier such as a fixed oil. Various other substances may be present as shells or change the physical form of the dosage unit. For example, tablets may be coated with shellac, sugar, or both. A syrup or elixir may contain, in addition to the active ingredient, sucrose as a sweetening agent, methyl paraben and propyl paraben as preservatives, a coloring agent, and a flavoring agent such as cherry or orange flavor. To prevent splitting during passage through the upper gastrointestinal tract, the composition must be coated with an enteric formulation.
Композиции для введения ингаляционным путем включают, но этим не ограничиваются, сухие порошковые композиции, состоящие из порошка соединения Формулы (I) или его соли и порошка подходящего носителя, и/или лубриканта. Композиции для введения ингаляционным путем можно вдыхать из любого подходящего устройства для ингаляции сухого порошка, известного специалисту в данной области техники.Compositions for administration by inhalation include, but are not limited to, dry powder compositions consisting of a powder of a compound of Formula (I) or a salt thereof and a powder of a suitable carrier and/or lubricant. Compositions for administration by inhalation may be inhaled from any suitable dry powder inhalation device known to those skilled in the art.
Введение композиций осуществляется по протоколу и в дозировке, достаточной для уменьшения воспаления и боли у пациента. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения, в фармацевтических композициях по настоящему изобретению активное вещество или активные вещества обычно включены в единицы дозирования. Единица дозирования может содержать от 0,1 до 1000 мг соединения Формулы (I) на единицу дозирования для ежедневного введения.The compositions are administered according to the protocol and at a dosage sufficient to reduce inflammation and pain in the patient. In some embodiments, implementation of the present invention, in the pharmaceutical compositions of the present invention, the active substance or active substances are usually included in dosage units. The dosage unit may contain from 0.1 to 1000 mg of the compound of Formula (I) per dosage unit for daily administration.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения, количество, эффективное для конкретного состава, будет зависеть от тяжести заболевания или расстройства, от предшествующей терапии, состояния здоровья индивидуума и реакции на лекарственное средство. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения, доза находится в диапазоне от 0,001% по массе до, примерно, 60% по массе состава.In some embodiments of the present invention, the amount effective for a particular formulation will depend on the severity of the disease or disorder, prior therapy, the individual's health status, and drug response. In some embodiments, implementation of the present invention, the dose is in the range from 0.001% by weight to about 60% by weight of the composition.
При применении в комбинации с, по меньшей мере, одним другим активным ингредиентом, соединение по настоящему изобретению и другой активный ингредиент могут применяться в более низких дозах, чем при применении каждого из них по отдельности.When used in combination with at least one other active ingredient, the compound of the present invention and the other active ingredient can be used at lower doses than when used alone.
Что касается составов в плане разнообразия путей введения, то способы и составы для введения лекарственных средств раскрыты в источниках Remington's Pharmaceutical Science, 17-е издание, Дженнаро, и др., изд. Mack Publishing Co., 1985, и Remington's Pharmaceutical Sciences, Дженнаро АР, под ред., 20-е издание, 2000, Williams & Wilkins Пенсильвания, США, и Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21-е издание, изд. Lippincott Williams & Wilkins, 2005; и в источнике Лойд В. Аллен и Ховард С.Ансел, Фармацевтические дозированные формы и системы доставки лекарственных средств по методу Ансела, 10-е издание, изд. Lippincott Williams & Wilkins, 2014.With respect to formulations in terms of the variety of routes of administration, methods and formulations for administering drugs are disclosed in Remington's Pharmaceutical Science, 17th edition, Gennaro, et al., ed. Mack Publishing Co., 1985, and Remington's Pharmaceutical Sciences, Gennaro AP, ed., 20th edition, 2000, Williams & Wilkins Pennsylvania, USA, and Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st edition, ed. Lippincott Williams & Wilkins, 2005; and in Loyd W. Allen and Howard S. Ansel, Ansel Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 10th edition, ed. Lippincott Williams & Wilkins, 2014.
Вышеописанные компоненты для вводимых перорально или инъекционных композиций являются просто репрезентативными.The components described above for oral or injectable compositions are merely representative.
Соединения по настоящему изобретению также могут вводиться в формах с замедленным высвобождением или из систем доставки лекарственных средств с замедленным высвобождением.The compounds of the present invention may also be administered in sustained release forms or from sustained release drug delivery systems.
Третий аспект настоящего изобретения относится к соединению Формулы (I), как раскрыто выше, включающему 4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензойную кислоту, для применения в качестве медицинского препарата.A third aspect of the present invention relates to a compound of Formula (I) as disclosed above, comprising 4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzoic acid, for use as a medical preparation .
Соединение Формулы (I), как раскрыто выше, включающее 4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензойную кислоту, можетA compound of Formula (I) as disclosed above comprising 4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzoic acid may
применяться в профилактике и/или лечении заболевания, выбранного из группы, состоящей из нарушений со стороны желудочно-кишечного тракта, заболеваний печени, нарушений работы сердечно-сосудистой системы, сосудистых заболеваний, легочных заболеваний, патологий метаболических процессов, инфекционных заболеваний, рака, нарушений функции почек, воспалительных заболеваний, включая иммунно-опосредованные, и неврологических расстройств.be used in the prevention and/or treatment of a disease selected from the group consisting of gastrointestinal disorders, liver diseases, cardiovascular disorders, vascular diseases, pulmonary diseases, metabolic pathologies, infectious diseases, cancer, dysfunction kidney, inflammatory diseases, including immune-mediated, and neurological disorders.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, иммунно-опосредованные воспалительные заболевания включают аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка, ревматоидный артрит, синдром Шегрена, склеродермия, также известная как системный склероз, спондилоартрит, васкулит, саркоидоз, средиземноморская лихорадка и другие наследственные аутовоспалительные заболевания, полимиозит и дерматомиозит, синдром Бехчета.In one embodiment of the present invention, immune-mediated inflammatory diseases include autoimmune diseases such as systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, Sjögren's syndrome, scleroderma, also known as systemic sclerosis, spondyloarthritis, vasculitis, sarcoidosis, Mediterranean fever, and other hereditary autoinflammatory diseases, polymyositis and dermatomyositis, Behçet's syndrome.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, инфекционные заболевания выбраны из группы синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД) и связанных с ним расстройств, инфекций, вызванных вирусами В и С.In one embodiment of the present invention, the infectious diseases are selected from the group of acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) and related disorders, infections caused by viruses B and C.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, неврологические расстройства включают болезнь Альцгеймера и другие формы деменции, болезнь Паркинсона и другие двигательные расстройства, боковой амиотрофический склероз и другие нарушения двигательных нейронов, рассеянный склероз и другие демиелинизирующие заболевания, ишемический инсульт, миастению и мышечную дистрофию.In one embodiment of the present invention, neurological disorders include Alzheimer's disease and other forms of dementia, Parkinson's disease and other movement disorders, amyotrophic lateral sclerosis and other motor neuron disorders, multiple sclerosis and other demyelinating diseases, ischemic stroke, myasthenia gravis, and muscular dystrophy.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, заболевания печени включают первичный билиарный цирроз (ПБЦ), церебротендинный ксантоматоз (ЦТК), первичный склерозирующий холангит (ПСХ), лекарственный холестаз, внутрипеченочный холестаз беременных, холестаз, связанный с парентеральным питанием, избыточный бактериальный рост или сепсис-ассоциированный холестаз, аутоиммунный гепатит, хронический вирусный гепатит, алкогольную болезнь печени, неалкогольную жировую болезнь печени (НАЖБП), неалкогольный стеатогепатит (НАСГ), трансплантацию печени, врожденный фиброз печени, гранулематозное поражение печени, внутри- или внепеченочные злокачественные новообразования, болезнь Вильсона, гемохроматоз и дефицит альфа-1-антитрипсина.In one embodiment of the present invention, the liver diseases include primary biliary cirrhosis (PBC), cerebrotendinal xanthomatosis (CTC), primary sclerosing cholangitis (PSC), drug-induced cholestasis, intrahepatic cholestasis of pregnancy, parenteral nutrition-related cholestasis, bacterial overgrowth, or sepsis. associated cholestasis, autoimmune hepatitis, chronic viral hepatitis, alcoholic liver disease, non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), non-alcoholic steatohepatitis (NASH), liver transplantation, congenital liver fibrosis, granulomatous liver disease, intra- or extrahepatic malignancies, Wilson's disease, hemochromatosis and alpha-1 antitrypsin deficiency.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта включают воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) (включая болезнь Крона, язвенный колит и неопределенный колит), синдром раздраженного кишечника (СРК), избыточный бактериальный рост, острый и хронический панкреатит, мальабсорбцию, постлучевой колит и микроскопический колит.In one embodiment of the present invention, gastrointestinal disorders include inflammatory bowel disease (IBD) (including Crohn's disease, ulcerative colitis and indefinite colitis), irritable bowel syndrome (IBS), bacterial overgrowth, acute and chronic pancreatitis, malabsorption , post-radiation colitis and microscopic colitis.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, нарушения функции почек включают диабетическую нефропатию, гипертензивную нефропатию, хронический гломерулонефрит, включая хронический гломерулонефрит после трансплантации, хронические интерстициальные заболевания канальцев и сосудистые заболевания почек.In one embodiment of the present invention, renal disorders include diabetic nephropathy, hypertensive nephropathy, chronic glomerulonephritis, including chronic transplant glomerulonephritis, chronic interstitial tubular disease, and renal vascular disease.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, сердечно-сосудистые заболевания включают атеросклероз, артериосклероз, дислипидемию, гиперхолестеринемию, гипертриглицеридемию, гипертензию, также известную как артериальная гипертензия, воспалительные заболевания сердца, включая миокардит и эндокардит, ишемическую болезнь сердца, стабильную стенокардию, нестабильную стенокардию, инфаркт миокарда, сердечно-сосудистые заболевания, включая ишемический инсульт.In one embodiment of the present invention, cardiovascular diseases include atherosclerosis, arteriosclerosis, dyslipidemia, hypercholesterolemia, hypertriglyceridemia, hypertension, also known as arterial hypertension, inflammatory diseases of the heart, including myocarditis and endocarditis, ischemic heart disease, stable angina, unstable angina, infarction myocardial, cardiovascular diseases, including ischemic stroke.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, сосудистые заболевания включают легочно-сердечную недостаточность, такую как легочная гипертензия, болезнь периферических артерий (БПА), также известную как периферическое сосудистое заболевание (ПСЗ), окклюзионную болезнь периферических артерий и периферическую облитерирующую артериопатию.In one embodiment of the present invention, vascular diseases include pulmonary heart disease such as pulmonary hypertension, peripheral arterial disease (PAD), also known as peripheral vascular disease (PSD), peripheral arterial occlusive disease, and peripheral arteriopathy obliterans.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, легочные заболевания включают астму, муковисцидоз, обструктивные легочные заболевания, интерстициальное легочное заболевание, включая, но этим не ограничиваясь, первичный или вторичный легочный фиброз.In one embodiment of the present invention, pulmonary diseases include asthma, cystic fibrosis, obstructive pulmonary disease, interstitial lung disease, including, but not limited to, primary or secondary pulmonary fibrosis.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, метаболическое заболевание выбрано из группы заболеваний, содержащей инсулинорезистентность, метаболический синдром, диабет I типа и II типа, гипогликемию, заболевания коры надпочечников, включая недостаточность коры надпочечников. Метаболические заболевания также включают ожирение и заболевания, связанные с бариатрической хирургией.In one embodiment of the present invention, the metabolic disease is selected from the group of diseases comprising insulin resistance, metabolic syndrome, type I and type II diabetes, hypoglycemia, adrenal cortex diseases, including adrenal insufficiency. Metabolic diseases also include obesity and diseases associated with bariatric surgery.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, рак выбран из группы, содержащей рак печени, разные виды рака желчных протоков, рак пищевода, рак поджелудочной железы, рак желудка, рак толстой и прямой кишки, рак груди, рак яичников и заболевание, связанное с резистентностью к химиотерапии.In one embodiment of the present invention, the cancer is selected from the group consisting of liver cancer, various types of bile duct cancer, esophageal cancer, pancreatic cancer, gastric cancer, colon and rectal cancer, breast cancer, ovarian cancer, and disease associated with resistance to chemotherapy.
Соединения Формулы (I), которые могут применяться в качестве медицинского препарата и для профилактики, и/или лечения вышеперечисленных заболеваний, выбраны из группы, состоящей изCompounds of Formula (I), which can be used as a medicinal product and for the prevention and/or treatment of the above diseases, are selected from the group consisting of
Дальнейшие характеристики настоящего изобретения будут вытекать из следующего описания некоторых исключительно иллюстративных и не ограничивающих примеров.Further characteristics of the present invention will follow from the following description of some purely illustrative and non-limiting examples.
В прилагаемых примерах используются следующие сокращения.The following abbreviations are used in the attached examples.
Метиленхлорид (CH2Cl2), гидроксиламин гидрохлорид (NH2OH), метиловый спирт (МеОН), карбонат калия (K2CO3), сульфат натрия (Na2SO4), N,N-Диизопропилэтиламин (DIPEA), диметилформамид (DMF), (2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат (HBTU), бромид лития (LiBr), бикарбонат натрия (NaHCO3), трифторуксусная кислота (TFA), тетрагидрофуран (THF), гидроксид лития (LiOH), соляная кислота (HCl), этилацетат (EtOAc), азот (N2), вода (H2O), час (h), комнатная температура (rt), время удерживания (tR).Methylene chloride (CH 2 Cl 2 ), hydroxylamine hydrochloride (NH 2 OH), methyl alcohol (MeOH), potassium carbonate (K 2 CO 3 ), sodium sulfate (Na 2 SO 4 ), N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA), dimethylformamide (DMF), (2-(1H-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HBTU), lithium bromide (LiBr), sodium bicarbonate (NaHCO 3 ), trifluoroacetic acid (TFA), tetrahydrofuran (THF), lithium hydroxide (LiOH), hydrochloric acid (HCl), ethyl acetate (EtOAc), nitrogen (N 2 ), water (H 2 O), hour (h), room temperature (rt), retention time (t R ).
Если не указано иное, спектры 1Н ЯМР записывали на приборе Varian Inova 400 МГц с использованием CDCl3 в качестве растворителя, а спектры 13С ЯМР записывали на приборе Varian Inova 100 МГц с использованием CDCl3 в качестве растворителя. ПримерыUnless otherwise indicated, 1 H NMR spectra were recorded on a Varian Inova 400 MHz instrument using CDCl 3 as solvent, and 13 C NMR spectra were recorded on a Varian Inova 100 MHz instrument using CDCl 3 as solvent. Examples
ПРИМЕР 1. ПОЛУЧЕНИЕ BAR2101-2105, BAR2110-2113, BAR2116, BAR2118-2120EXAMPLE 1. OBTAINING BAR2101-2105, BAR2110-2113, BAR2116, BAR2118-2120
Спирт 1 получали по многоэтапной процедуре, включающей образование оксима альдегида, хлорирование, образование изоксазола, опосредованного β-кетоэфиром, и восстановление эфира, опосредованного диизобутилалюминийгидридом, как описано ранее (Чиприани, С, и др. Sci. Rep.2017, 7, 41055). Затем ключевой промежуточный первичный спирт 1 использовали в многочисленных реакциях Мицунобу с различными фенолами (Схема 1) для получения BAR2101-BAR2103, BAR2110, BAR2113, BAR2116 и BAR2118 с высокорезультативными химическими выходами.Alcohol 1 was prepared by a multi-step procedure involving aldehyde oxime formation, chlorination, β-ketoester mediated isoxazole formation, and diisobutylaluminum hydride mediated ester reduction as previously described (Cipriani, C, et al. Sci. Rep. 2017, 7, 41055) . The key primary alcohol intermediate 1 was then used in numerous Mitsunobu reactions with various phenols (Scheme 1) to produce BAR2101-BAR2103, BAR2110, BAR2113, BAR2116, and BAR2118 in highly efficient chemical yields.
В результате восстановления LiBH4 и щелочного гидролиза на метиловых эфирах BAR2102 и BAR2110 получали соответствующие спирты BAR2104 (95% выход) и BAR2112 (количественный выход), и карбоновые кислоты BAR2105 (количественный выход), и BAR2111 (89% выход), соответственно.Reduction of LiBH 4 and alkaline hydrolysis on methyl esters BAR2102 and BAR2110 gave the corresponding alcohols BAR2104 (95% yield) and BAR2112 (quantitative yield), and carboxylic acids BAR2105 (quantitative yield) and BAR2111 (89% yield), respectively.
В результате реакции Мицунобу, проведенной на спирте 1 с метил-4'-гидрокси-[1,1'-бифенил]-3-карбоксилатом, образовался ограниченный метиловый эфир BAR2118 с выходом 68%. Восстановление и гидролиз в тех же экспериментальных условиях, что описаны выше, дали соответствующие спирт BAR2120 и карбоновую кислоту BAR2119 (83% и 64% химического выхода, соответственно).As a result of the Mitsunobu reaction carried out on alcohol 1 with methyl 4'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylate, limited methyl ester BAR2118 was formed in 68% yield. Reduction and hydrolysis under the same experimental conditions as described above gave the corresponding BAR2120 alcohol and BAR2119 carboxylic acid (83% and 64% chemical yield, respectively).
Схема 1Scheme 1
a) PPh3, DIAD, THF сухой, 0°С; b) LiBH4, МеОН сухой, THF сухой, 0°С; с) NaOH, МеОН : H2O 1:1 об/об. Общие процедурыa) PPh 3 , DIAD, THF dry, 0°C; b) LiBH 4 , MeOH dry, THF dry, 0°C; c) NaOH, MeOH : H 2 O 1:1 v/v. General procedures
Этап а) Реакция Мицунобу. К раствору PPh3 (3,5 экв.) в сухом THF при 0°С добавляли по каплям DIAD (3,5 экв). Суспензию перемешивали встряхиванием в течение 10 мин, затем добавляли раствор соединения 1 в сухом THF. Через 10 мин добавляли раствор соответствующего фенолав сухом THF. Через 3 часа, ночью, добавляли воду (10 мл), и реакционную смесь выпаривали. Затем остаток экстрагировали посредством EtOAc (3×50 мл). Комбинированные органические слои промывали раствором КОН 2,5 М и воды, сушили и выпаривали до получения желтого масла. Очистка методом флэш-хроматографии на силикагеле дала BAR2101-2103, BAR2110, BAR2113, BAR2116, BAR2118.Step a) Mitsunobu reaction. To a solution of PPh 3 (3.5 eq.) in dry THF at 0°C was added dropwise DIAD (3.5 eq.). The suspension was stirred by shaking for 10 min, then a solution of compound 1 in dry THF was added. After 10 min, a solution of the appropriate phenol with dry THF was added. After 3 hours, overnight, water (10 ml) was added and the reaction mixture was evaporated. Then the residue was extracted with EtOAc (3×50 ml). The combined organic layers were washed with a solution of 2.5 M KOH and water, dried and evaporated to a yellow oil. Purification by silica gel flash chromatography gave BAR2101-2103, BAR2110, BAR2113, BAR2116, BAR2118.
Этап b) Восстановление LiBH4. К раствору эфиров BAR2102, или BAR2110, или BAR2118 в сухом THF (25 мл) при 0°С добавляли сухой метиловый спирт (3,0 экв.) и LiBH4 (3,0 экв.). Полученную смесь перемешивали встряхиванием в течение 4-8 часов при 0°С, затем гасили добавлением 1М NaOH (2,0 экв.) и этилацетата. Органическую фазу промывали водой, сушили (Na2SO4) и концентрировали с получением неочищенного остатка, который очищали методом ВЭЖХ или колоночной хроматографии на силикагеле.Step b) Recovery of LiBH 4 . To a solution of BAR2102 or BAR2110 or BAR2118 esters in dry THF (25 ml) at 0°C was added dry methyl alcohol (3.0 eq.) and LiBH 4 (3.0 eq.). The resulting mixture was stirred with shaking for 4-8 hours at 0°C, then extinguished by adding 1M NaOH (2.0 eq.) and ethyl acetate. The organic phase was washed with water, dried (Na 2 SO 4 ) and concentrated to give a crude residue which was purified by HPLC or silica gel column chromatography.
Этап с) Щелочной гидролиз. Другую часть BAR2102, или BAR2110, или BAR2118 подвергали гидролизу посредством NaOH (5,0 экв.) в растворе МеОН : H2O 1:1 об/об (30 мл). Смесь перемешивали в течение 8 часов с обратным холодильником. Полученный раствор затем подкисляли HCl 6М и экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Собранные органические фазы промывали рассолом, сушили над безводным Na2SO4 и выпаривали при пониженном давлении с получением сложного неочищенного остатка, который подвергали очистке методом ВЭЖХ или флэш-хроматографии.Step c) Alkaline hydrolysis. Another portion of BAR2102 or BAR2110 or BAR2118 was hydrolysed with NaOH (5.0 eq.) in MeOH : H 2 O 1:1 v/v solution (30 ml). The mixture was stirred for 8 hours under reflux. The resulting solution was then acidified with HCl 6M and extracted with ethyl acetate (3×50 ml). The collected organic phases were washed with brine, dried over anhydrous Na 2 SO 4 and evaporated under reduced pressure to give a complex crude residue which was purified by HPLC or flash chromatography.
Пример 1А. Получение 3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропил-4-(феноксиметил)изоксазола (BAR2101)Example 1A. Preparation of 3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropyl-4-(phenoxymethyl)isoxazole (BAR2101)
Очистка силикагелем (гексан и 0,5% TEA) после этапа а дала BAR2101 (40%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя MeOH/H2O (82:18) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 10 мин). BAR2101 C19H17Cl2NO2 Purification with silica gel (hexane and 0.5% TEA) after step a gave BAR2101 (40%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (82:18) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 10 min). BAR2101 C 19 H 17 Cl 2 NO 2
1Н ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,39 (2Н, d, J=7,7 Гц), 7,31 (1H, t, J=7,7 Гц), 7,22 (2Н, t, J=7.8 Гц), 6,93 (1H, t, J=7,8 Гц), 6,78 (2Н, d, J=7,8 Гц), 4,72 (2Н, s), 3,33 (1H, септет, J=6.9 Гц), 1.41 (6Н, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.39 (2H, d, J=7.7 Hz), 7.31 (1H, t, J=7.7 Hz), 7.22 (2H, t, J=7.8 Hz), 6.93 (1H, t, J=7.8 Hz), 6.78 (2H, d, J=7.8 Hz), 4.72 (2H, s), 3 .33 (1H, septet, J=6.9 Hz), 1.41 (6H, d, J=6.9 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц) δ 176,3, 159,1, 158,9, 135,8 (2С), 131,2, 129,4 (2С), 128,0 (ЗС), 121,2, 114,7 (2С), 109,4, 59,2, 27,0, 20,8 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz) δ 176.3, 159.1, 158.9, 135.8 (2C), 131.2, 129.4 (2C), 128.0 (3C), 121, 2, 114.7 (2C), 109.4, 59.2, 27.0, 20.8 (2C).
Пример 2А. Получение метил 4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензоата (BAR2102)Example 2A. Preparation of methyl 4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzoate (BAR2102)
Очистка силикагелем (9:1 гексан/AcOEt и 0,5% TEA) после этапа а дала BAR2102 (82%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя MeOH/H2O (82:18) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 12 мин). BAR2102 C21H19Cl2NO4 Purification with silica gel (9:1 hexane/AcOEt and 0.5% TEA) after step a gave BAR2102 (82%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (82:18) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 12 min). BAR2102 C 21 H 19 Cl 2 NO 4
1Н ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,91 (2H, d, J=8,2 Гц), 7,39 (2H, d, J=7,6 Гц), 7,31 (1H, t, J=7,6 Гц), 6,78 (2H, d, J=8,2 Гц), 4,77 (2H, s), 3,86 (3H, s), 3,32 (1H, септет, J=6,7 Гц), 1,42 (6H, d, J=6,7 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.91 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.39 (2H, d, J=7.6 Hz), 7.31 (1H, t, J=7.6Hz), 6.78(2H, d, J=8.2Hz), 4.77(2H, s), 3.86(3H, s), 3.32(1H, septet, J=6.7 Hz), 1.42 (6H, d, J=6.7 Hz);
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,5, 166,7, 161,8, 159,0, 135,7 (2C), 131,5, 131,3 (2C), 128,1 (2C), 127,7, 123,0, 114,1 (2C), 108,8, 59,5, 51,9, 27,1, 20,8 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.5, 166.7, 161.8, 159.0, 135.7 (2C), 131.5, 131.3 (2C), 128.1 ( 2C), 127.7, 123.0, 114.1 (2C), 108.8, 59.5, 51.9, 27.1, 20.8 (2C).
Пример 3А. Получение 4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензонитрила (BAR2103)Example 3A. Preparation of 4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzonitrile (BAR2103)
Очистка силикагелем (9:1 гексан/AcOEt и 0,5% TEA) после этапа а дала BAR2103 (89%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (82:18) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 7,4 мин). BAR2103 C20H16Cl2N2O2Purification with silica gel (9:1 hexane/AcOEt and 0.5% TEA) after step a gave BAR2103 (89%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (82:18) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 7.4 min). BAR2103 C20H16Cl2N2O2
1Н ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,52 (2Н, d, J=8,5 Гц), 7,40 (2Н, d, J=7,0 Гц), 7,33 (1H, t, J=7,0 Гц), 6,81 (2Н, d, J=8,5 Гц), 4,77 (2Н, s), 3,31 (1H, септет, J=6,8 Гц), 1,42 (6Н, d, J=6,8 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.52 (2H, d, J=8.5 Hz), 7.40 (2H, d, J=7.0 Hz), 7.33 (1H, t, J=7.0 Hz), 6.81 (2H, d, J=8.5 Hz), 4.77 (2H, s), 3.31 (1H, septet, J=6.8 Hz) , 1.42 (6H, d, J=6.8 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,61, 161,3, 158,9, 135,7 (2С), 133,9 (2С), 131,4, 128,1 (2С), 127,5, 118,9, 115,2 (2С), 108,5, 104,5, 59,5, 27,1, 20,8 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.61, 161.3, 158.9, 135.7 (2C), 133.9 (2C), 131.4, 128.1 (2C), 127 .5, 118.9, 115.2 (2C), 108.5, 104.5, 59.5, 27.1, 20.8 (2C).
Пример 4А. Получение 4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)фенил)метанола (BAR2104)Example 4A. Preparation of 4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)phenyl)methanol (BAR2104)
Очистка силикагелем (100% CH2Cl2) после этапа b дала BAR2104 (95%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (70:30) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 13 мин). BAR2104 C20H19Cl2NO3 Purification with silica gel (100% CH 2 Cl 2 ) after step b gave BAR2104 (95%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (70:30) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 13 min). BAR2104 C 20 H 19 Cl 2 NO 3
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,39 (2Н, d, J=7,2 Гц), 7,32 (1H, t, J=7,2 Гц), 7,22 (2Н, d, J=7,3 Гц), 6,76 (2Н, d, J=7,3 Гц), 4,71 (2Н, s), 4,58 (2Н, s), 3,32 (1H, септет, J=6,6 Гц), 1,41 (6Н, d, J=6,6 Гц);1H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.39 (2H, d, J=7.2 Hz), 7.32 (1H, t, J=7.2 Hz), 7.22 (2H, d , J=7.3 Hz), 6.76(2H, d, J=7.3 Hz), 4.71(2H, s), 4.58(2H, s), 3.32(1H, septet , J=6.6 Hz), 1.41 (6H, d, J=6.6 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,3, 159,1, 157,8, 135,8 (2С), 133,7, 131,2, 128,5 (2С), 128,1 (2С), 127,8, 114,8 (2С), 109,4, 64,9, 59,4, 27,1, 20,7 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.3, 159.1, 157.8, 135.8 (2C), 133.7, 131.2, 128.5 (2C), 128.1 ( 2C), 127.8, 114.8 (2C), 109.4, 64.9, 59.4, 27.1, 20.7 (2C).
Пример 5АExample 5A
Получение 4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензойной кислоты (BAR2105). Очистка силикагелем (100% CH2Cl2) после этапа с дала BAR2105 (количественный выход). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/Н2О (75:25) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 9,2 мин).Preparation of 4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzoic acid (BAR2105). Purification with silica gel (100% CH 2 Cl 2 ) after step c gave BAR2105 (quantitative yield). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (75:25) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 9.2 min).
BAR2105 C20H17CI2NO4BAR2105 C20H17CI2NO4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,94 (2H, d, J=6,5 Гц), 7,37 (2H, d, J=7,0 Гц), 7,29 (1H, t, J=7,0 Гц), 6,77 (2H, d, J=6,5 Гц), 4,77 (2H, s), 3,31 (1H, септет, J=6,4 Гц), 1,41 (6H, d, J=6,4 Гц);1H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.94 (2H, d, J=6.5 Hz), 7.37 (2H, d, J=7.0 Hz), 7.29 (1H, t , J=7.0 Hz), 6.77 (2H, d, J=6.5 Hz), 4.77 (2H, s), 3.31 (1H, septet, J=6.4 Hz), 1.41 (6H, d, J=6.4 Hz);
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 177,4, 162,4, 162,3, 158,9, 135,7 (2C), 132,2 (2C), 131,3, 128,0 (2C), 127,7, 123,0, 114,2 (2C), 108,8, 59,4, 27,1, 20,8 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 177.4, 162.4, 162.3, 158.9, 135.7 (2C), 132.2 (2C), 131.3, 128.0 ( 2C), 127.7, 123.0, 114.2 (2C), 108.8, 59.4, 27.1, 20.8 (2C).
Пример 6A. Получение 3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропил-4-((4-(метилсульфонил)фенокси)метил)изоксазола (BAR2116)Example 6A. Preparation of 3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropyl-4-((4-(methylsulfonyl)phenoxy)methyl)isoxazole (BAR2116)
Очистка силикагелем (100% CH2Cl2) после этапа а дала BAR2116 (67%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (75:25) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 13,5 мин).Purification with silica gel (100% CH 2 Cl 2 ) after step a gave BAR2116 (67%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (75:25) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 13.5 min).
BAR2116 C20H19Cl2NO4SBAR2116 C 20 H 19 Cl 2 NO 4 S
1Н ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,79 (2Н, d, J=8,5 Гц), 7,40 (2Н, d, J=7,8 Гц), 7,32 (1H, t, J=7,8 Гц), 6,88 (2Н, d, J=8,5 Гц), 4,80 (2Н, s), 3,32 (1Н, септет, J=6,9 Гц), 3,0 (3Н, s), 1,43 (6Н, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.79 (2H, d, J=8.5 Hz), 7.40 (2H, d, J=7.8 Hz), 7.32 (1H, t, J=7.8 Hz), 6.88 (2H, d, J=8.5 Hz), 4.80 (2H, s), 3.32 (1H, septet, J=6.9 Hz) , 3.0 (3H, s), 1.43 (6H, d, J=6.9 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,6, 162,1, 158,9, 135,7 (2С), 132,8, 131,48, 129,5 (2С), 128,1 (2С), 127,5, 114,9 (2С), 108,5, 59,7, 44,2, 27,1, 20,8 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.6, 162.1, 158.9, 135.7 (2C), 132.8, 131.48, 129.5 (2C), 128.1 ( 2C), 127.5, 114.9 (2C), 108.5, 59.7, 44.2, 27.1, 20.8 (2C).
Пример 7А. Получение метил 3-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензоата (BAR2110)Example 7A. Preparation of methyl 3-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzoate (BAR2110)
Очистка силикагелем (8:2 гексан/AcOEt и 0,5% TEA) после этапа а дала BAR2110 (57%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (82:18) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 16,5 мин).Purification with silica gel (8:2 hexane/AcOEt and 0.5% TEA) after step a gave BAR2110 (57%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (82:18) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 16.5 min).
BAR2110 C21H19Cl2NO4 BAR2110 C 21 H 19 Cl 2 NO 4
1Н ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,60 (1H, d, J=7,8 Гц), 7,43 (1H, s), 7,38 (2Н, d, J=7,7 Гц), 7,32-7,25 (2Н, m, ovl), 6,94 (1H, d, J=8,3 Гц), 4,77 (2Н, s), 3,89 (3Н, s), 3,33 (1Н, септет, J=6,9 Гц), 1,42 (6Н, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.60 (1H, d, J=7.8 Hz), 7.43 (1H, s), 7.38 (2H, d, J=7.7 Hz), 7.32-7.25 (2H, m, ovl), 6.94 (1H, d, J=8.3 Hz), 4.77 (2H, s), 3.89 (3H, s ), 3.33 (1H, septet, J=6.9 Hz), 1.42 (6H, d, J=6.9 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 166,7, 159,1, 158,1, 135,7 (2С), 131,4, 131,2, 129,4, 128,1 (2С), 127,8, 122,5, 120,3, 114,6, 109,1, 59,5, 52,1, 27,1, 20,8 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 166.7, 159.1, 158.1, 135.7 (2C), 131.4, 131.2, 129.4, 128.1 (2C), 127.8, 122.5, 120.3, 114.6, 109.1, 59.5, 52.1, 27.1, 20.8 (2C).
Пример 8А. Получение 3-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензонитрила (BAR2113)Example 8A. Preparation of 3-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzonitrile (BAR2113)
Очистка силикагелем (9:1 гексан/AcOEt и 0,5% TEA) после этапа а дала BAR2113 (73%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (82:18) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 11,4 мин).Purification with silica gel (9:1 hexane/AcOEt and 0.5% TEA) after step a gave BAR2113 (73%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (82:18) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 11.4 min).
BAR2113 C20H16Cl2N2O2 BAR2113 C 20 H 16 Cl 2 N 2 O 2
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,40 (1H, s), 7,39 (2Н, d, J=7,8 Гц), 7,33 (1H, dd, ovl), 7,31 (1H, t, ovl), 7,21 (1H, d, J=7,7 Гц), 6,99 (1H, d, J=8,0 Гц), 4,75 (2H, s), 3,31 (1H, септет, J=6,8 Гц), 1,41 (6H, d, J=6,8 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.40 (1H, s), 7.39 (2H, d, J=7.8 Hz), 7.33 (1H, dd, ovl), 7, 31 (1H, t, ovl), 7.21 (1H, d, J=7.7 Hz), 6.99 (1H, d, J=8.0 Hz), 4.75 (2H, s), 3.31 (1H, septet, J=6.8 Hz), 1.41 (6H, d, J=6.8 Hz);
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,6, 158,9, 158,1, 135,7 (2C), 131,4, 130,4, 128,1 (2C), 127,6, 125,0, 120,0, 118,4, 117,5, 113,2, 108,6, 59,6, 27,1, 20,8 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.6, 158.9, 158.1, 135.7 (2C), 131.4, 130.4, 128.1 (2C), 127.6, 125.0, 120.0, 118.4, 117.5, 113.2, 108.6, 59.6, 27.1, 20.8 (2C).
Пример 9A. Получение 3-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)фенил)метанола (BAR2112)Example 9A. Preparation of 3-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)phenyl)methanol (BAR2112)
Очистка после этапа b методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (75:25) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 18 мин), дала BAR2112 (количественный выход).Purification after step b by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (75:25) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 18 min) gave BAR2112 (quantitative yield).
BAR2112 C20H19Cl2NO3 BAR2112 C 20 H 19 Cl 2 NO 3
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,39 (2Н, d, J=7,5 Гц), 7,30 (1H, t, J=7,5 Гц), 7,19 (1H, t, J=7,8 Гц), 6,90 (1H, d, J=7,8 Гц), 6,80 (1H, s), 6,70 (1H, d, J=7,8 Гц), 4,73 (2Н, s), 4,61 (2Н, d, J=4,1 Гц), 3,33 (1H, септет, J=6,9 Гц), 1,41 (6Н, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.39 (2H, d, J=7.5 Hz), 7.30 (1H, t, J=7.5 Hz), 7.19 (1H, t, J=7.8Hz), 6.90(1H, d, J=7.8Hz), 6.80(1H, s), 6.70(1H, d, J=7.8Hz) , 4.73 (2H, s), 4.61 (2H, d, J=4.1 Hz), 3.33 (1H, septet, J=6.9 Hz), 1.41 (6H, d, J=6.9 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,5, 159,0, 158,5, 142,5, 135,8 (2С), 131,2, 129,5, 128,1 (2С), 127,8, 119,6, 114,1, 112,8, 109,4, 65,0, 59,2, 27,1, 20,8 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.5, 159.0, 158.5, 142.5, 135.8 (2C), 131.2, 129.5, 128.1 (2C), 127.8, 119.6, 114.1, 112.8, 109.4, 65.0, 59.2, 27.1, 20.8 (2C).
Пример 10А. Получение 3-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензойной кислоты (BAR2111)Example 10A. Preparation of 3-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzoic acid (BAR2111)
Очистка после этапа с методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/Н2О (75:25) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 22,5 мин), дала BAR2111 (89%).Purification after HPLC step with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (75:25) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 22.5 min) gave BAR2111 (89%).
BAR2111 C20H17Cl2NO4 BAR2111 C 20 H 17 Cl 2 NO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,65 (1H, d, J=7,0 Гц), 7,47 (1H, s), 7,37 (2Н, d, J=7,5 Гц), 7,31-7,25 (2Н, m, ovl), 6,97 (1H, d, J=7,8 Гц), 4,77 (2Н, s), 3,32 (1Н, септет, J=7,1 Гц), 1,41 (6Н, d, J=7,1 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.65 (1H, d, J=7.0 Hz), 7.47 (1H, s), 7.37 (2H, d, J=7.5 Hz), 7.31-7.25 (2H, m, ovl), 6.97 (1H, d, J=7.8 Hz), 4.77 (2H, s), 3.32 (1H, septet , J=7.1 Hz), 1.41 (6H, d, J=7.1 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,41, 159,7, 159,1, 158,2, 135,7 (2С), 131,3, 129,5 (2С), 128,0 (2С), 127,6, 123,2, 121,0, 115,2, 109,1, 59,5, 27,1, 20,8 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.41, 159.7, 159.1, 158.2, 135.7 (2C), 131.3, 129.5 (2C), 128.0 ( 2C), 127.6, 123.2, 121.0, 115.2, 109.1, 59.5, 27.1, 20.8 (2C).
Пример 11А. Получение метил 4'-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксилата (BAR2118)Example 11A. Preparation of methyl 4'-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylate (BAR2118)
Очистка силикагелем (100% CH2CI2) после этапа а дала BAR2118 (68%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/Н2О (90:10) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 9,9 мин).Purification with silica gel (100% CH2CI2) after step a gave BAR2118 (68%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (90:10) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 9.9 min).
BAR2118 C27H23Cl2NO4 BAR2118 C 27 H 23 Cl 2 NO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,20 (1H, s), 7,98 (1H, d, J=7,7 Гц), 7,71 (1H, d, J=7,7 Гц), 7,49 (2Н, d, J=8,5 Гц), 7,48 (1H, t, J=7,7 Гц), 7,42 (2H, d, J=8,0 Гц), 7,33 (1H, dd, J=7,1, 8,0 Гц), 6,87 (2H, d, J=8,5 Гц), 4,78 (2H, s), 3,95 (3H, s), 3,36 (1H, септет, J=7,1 Гц), 1,44 (6H, d, J=7,1 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.20 (1H, s), 7.98 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.71 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.49 (2H, d, J=8.5 Hz), 7.48 (1H, t, J=7.7 Hz), 7.42 (2H, d, J=8.0 Hz) , 7.33 (1H, dd, J=7.1, 8.0 Hz), 6.87 (2H, d, J=8.5 Hz), 4.78 (2H, s), 3.95 ( 3H, s), 3.36 (1H, septet, J=7.1 Hz), 1.44 (6H, d, J=7.1 Hz);
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 167,1, 159,1, 158,1, 140,8, 135,8 (2C), 133,2, 131,2, 131,0, 130,6, 128,8, 127,8, 127,7, 128,1 (4C), 126,8, 115,1 (2C), 109,3, 59,4, 52,1, 27,1, 20,8 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 167.1, 159.1, 158.1, 140.8, 135.8 (2C), 133.2, 131.2, 131.0 , 130.6, 128.8, 127.8, 127.7, 128.1 (4C), 126.8, 115.1 (2C), 109.3, 59.4, 52.1, 27.1 , 20.8 (2C).
Пример 12A. Получение (4'-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-ил)метанола (BAR2120)Example 12A. Preparation of (4'-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-yl)methanol (BAR2120)
Очистка силикагелем (9:1 гексан/AcOEt и 0,5% TEA) после этапа b дала BAR2120 (83%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (83:17) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 8,5 мин).Purification with silica gel (9:1 hexane/AcOEt and 0.5% TEA) after step b gave BAR2120 (83%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (83:17) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 8.5 min).
BAR2120 C26H23Cl2NO3 BAR2120 C 26 H 23 Cl 2 NO 3
1H ЯМР (CD3OD, 400 МГц): δ 7,53 (1H, s), 7,52 (2Н, d, J=7,5 Гц), 7,47 (1H, t ovl), 7,46 (2Н, d, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, d, J=7,8 Гц), 7,36 (1H, t, J=7,8 Гц), 7,27 (1H, d, J=7,8 Гц), 6,84 (2Н, d, J=8,8 Гц), 4,84 (2Н, s), 4,64 (2Н, s), 3,43 (1H, септет, J=6,7 Гц), 1,42 (6Н, d, J=6,7 Гц); 1 H NMR (CD3OD, 400 MHz): δ 7.53 (1H, s), 7.52 (2H, d, J=7.5 Hz), 7.47 (1H, t ovl), 7.46 ( 2H, d, J=8.8 Hz), 7.43 (1H, d, J=7.8 Hz), 7.36 (1H, t, J=7.8 Hz), 7.27 (1H, d, J=7.8 Hz), 6.84(2H, d, J=8.8 Hz), 4.84(2H, s), 4.64(2H, s), 3.43(1H, septet, J=6.7 Hz), 1.42 (6H, d, J=6.7 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 157,8, 154,1, 141,4, 137,4, 135,8 (2С), 134,0, 131,2, 129,0, 128,1 (4С), 126,0, 125,4, 125,3, 122,8, 115,1 (2С), 109,3, 65,4, 59,4, 27,0, 20,8 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 157.8, 154.1, 141.4, 137.4, 135.8 (2C), 134.0, 131.2, 129.0 , 128.1 (4C), 126.0, 125.4, 125.3, 122.8, 115.1 (2C), 109.3, 65.4, 59.4, 27.0, 20.8 (2C).
Пример 13А. Получение 4'-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-карбоновой кислоты (BAR2119)Example 13A. Preparation of 4'-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid (BAR2119)
Очистка силикагелем (99:1 CH2Cl2/МеОН) после этапа с дала BAR2119 (64%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (83:17) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 12,5 мин).Purification with silica gel (99:1 CH 2 Cl 2 /MeOH) after step c gave BAR2119 (64%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (83:17) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 12.5 min).
BAR2119 C26H21Cl2NO4 BAR2119 C 26 H 21 Cl 2 NO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,27 (1H, s), 8,04 (1H, d, J=8,0 Гц), 7,76 (1H, d, J=7,7 Гц), 7,51 (2Н, d, J=8,2 Гц), 7,50 (1H, t, J=8,0 Гц), 7,42 (2Н, d, J=7,6 Гц), 7,33 (1H, t, J=7,6 Гц), 6,87 (2Н, d, J=8,2 Гц), 4,78 (2Н, s), 3,36 (1H, септет, J=7,1 Гц), 1,44 (6Н, d, J=7,1 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.27 (1H, s), 8.04 (1H, d, J=8.0 Hz), 7.76 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.51 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.50 (1H, t, J=8.0 Hz), 7.42 (2H, d, J=7.6 Hz) , 7.33 (1H, t, J=7.6 Hz), 6.87 (2H, d, J=8.2 Hz), 4.78 (2H, s), 3.36 (1H, septet, J=7.1 Hz), 1.44 (6H, d, J=7.1 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 164,9, 160,6, 158,1, 140,8, 135,8 (2С), 133,1, 132,1, 131,5, 131,2, 128,8, 128,3, 128,1 (4С), 127,8, 127,7, 115,1 (2С), 109,3, 59,4, 27,1, 20,8 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 164.9, 160.6, 158.1, 140.8, 135.8 (2C), 133.1, 132.1, 131.5 , 131.2, 128.8, 128.3, 128.1 (4C), 127.8, 127.7, 115.1 (2C), 109.3, 59.4, 27.1, 20.8 (2C).
ПРИМЕР 2. ПОЛУЧЕНИЕ BAR2106-2109, BAR2121-2124, BAR2139, BAR2140 И BAR2147EXAMPLE 2 OBTAINING BAR2106-2109, BAR2121-2124, BAR2139, BAR2140 AND BAR2147
BAR2104, полученный по Схеме 1, алкилировали шестью различными фенолами посредством реакции Мицунобу с получением BAR2106, BAR2107, BAR2121, BAR2122, BAR2138 и BAR2144. В результате восстановления LiBH4 и щелочного гидролиза на метиловых эфирах BAR2106, BAR2122, BAR2138 и BAR2144, образовались соответствующие спирты BAR2108, BAR2124, BAR2140, BAR2146 и кислоты BAR2109, BAR2123, BAR2139 и BAR2147, соответственно (Схема 2).BAR2104 prepared according to Scheme 1 was alkylated with six different phenols via the Mitsunobu reaction to give BAR2106, BAR2107, BAR2121, BAR2122, BAR2138 and BAR2144. Reduction of LiBH 4 and alkaline hydrolysis on methyl esters BAR2106, BAR2122, BAR2138, and BAR2144 resulted in the formation of the corresponding alcohols BAR2108, BAR2124, BAR2140, BAR2146 and acids BAR2109, BAR2123, BAR2139, and BAR2147, respectively (Scheme 2).
Схема 2Scheme 2
а) PPh3, DIAD, THF сухой, 0°С; b) LiBH4, МеОН сухой, THF сухой, 0°С; с) NaOH, МеОН : H2O 1:1 об/об.a) PPh 3 , DIAD, THF dry, 0°C; b) LiBH 4 , MeOH dry, THF dry, 0°C; c) NaOH, MeOH : H 2 O 1:1 v/v.
ПРИМЕР 2А. Получение метил 4-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)бензоата (BAR2106)EXAMPLE 2A. Preparation of methyl 4-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)benzoate (BAR2106)
Очистка силикагелем (100% CH2Cl2) после этапа а дала BAR2106 (63%). Аналитический образец BAR2106 был получен методом ВЭЖХ с фазой Phenomenex С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (85:15) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 10,4 мин). BAR2106 C28H25CI2NO5Purification with silica gel (100% CH 2 Cl 2 ) after step a gave BAR2106 (63%). Analytical sample BAR2106 was prepared by HPLC with Phenomenex C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (85:15) as eluent (flow rate 1 ml/min) (t R = 10.4 min). BAR2106 C28H25CI2NO5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,98 (2Н, d, J=8,0 Гц), 7,40 (2Н, d, J=7,7 Гц), 7,33-7,26 (3Н, m, ovl), 6,96 (2Н, d, J=8,0 Гц), 6,79 (2Н, d, J=7,7 Гц), 5,00 (2Н, s), 4,72 (2Н, s), 3,88 (3Н, s), 3,32 (1H, септет, J=6,9 Гц), 1,41 (6Н, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.98 (2H, d, J=8.0 Hz), 7.40 (2H, d, J=7.7 Hz), 7.33-7, 26 (3H, m, ovl), 6.96 (2H, d, J=8.0 Hz), 6.79 (2H, d, J=7.7 Hz), 5.00 (2H, s), 4.72(2H, s), 3.88(3H, s), 3.32(1H, septet, J=6.9Hz), 1.41(6H, d, J=6.9Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 166,8, 162,4, 159,1, 158,2, 135,7 (2С), 131,5, 131,2 (2С), 129,2 (2С), 128,8, 128,1 (2С), 127,3, 122,7, 114,9 (2С), 114,4 (2С), 109,3, 69,7, 59,4, 51,8, 27,1, 20,7 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 166.8, 162.4, 159.1, 158.2, 135.7 (2C), 131.5, 131.2 (2C), 129.2 (2C), 128.8, 128.1 (2C), 127.3, 122.7, 114.9 (2C), 114.4 (2C), 109.3, 69.7, 59, 4, 51.8, 27.1, 20.7 (2C).
ПРИМЕР 2В. Получение 4-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)бензонитрила (BAR2107)EXAMPLE 2B. Preparation of 4-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)benzonitrile (BAR2107)
Очистка силикагелем (7:3 гексан/AcOEt и 0,5% TEA) после этапа а дала BAR2107 (количественный выход). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Phenomenex С18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (87:13) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 8 мин).Purification with silica gel (7:3 hexane/AcOEt and 0.5% TEA) after step a gave BAR2107 (quantitative yield). An analytical sample was prepared by HPLC with Phenomenex C18 5 µm phase (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (87:13) as eluent (flow rate 1 ml/min) (t R = 8 min).
BAR2107 C27H22Cl2N2O3 BAR2107 C 27 H 22 Cl 2 N 2 O 3
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,58 (2Н, d, J=8,5 Гц), 7,40 (2Н, d, J=8,0 Гц), 7,32 (1H, t, J=8,4 Гц), 7,27 (2Н, d, J=8,4 Гц), 6,98 (2Н, d, J=8,5 Гц), 6,80 (2Н, d, J=8,0 Гц), 5,00 (2Н, s), 4,73 (2Н, s), 3,32 (1H, септет, J=6,9 Гц), 1,42 (6Н, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.58 (2H, d, J=8.5 Hz), 7.40 (2H, d, J=8.0 Hz), 7.32 (1H, t, J=8.4 Hz), 7.27 (2H, d, J=8.4 Hz), 6.98 (2H, d, J=8.5 Hz), 6.80 (2H, d, J=8.0 Hz), 5.00(2H, s), 4.73(2H, s), 3.32(1H, septet, J=6.9 Hz), 1.42(6H, d, J=6.9 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,1, 161,7, 158,8, 158,1, 135,5 (2С), 133,7 (2С), 131,1, 129,0 (2С), 128,1, 127,8 (2С), 127,5, 118,9, 115,3 (2С), 114,7 (2С), 109,1, 103,8, 69,7, 59,2, 26,8, 20,5 (2С), 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.1, 161.7, 158.8, 158.1, 135.5 (2C), 133.7 (2C), 131.1, 129.0 ( 2C), 128.1, 127.8 (2C), 127.5, 118.9, 115.3 (2C), 114.7 (2C), 109.1, 103.8, 69.7, 59, 2, 26.8, 20.5 (2C),
ПРИМЕР 2С. Получение (4-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)фенил)метанола (BAR2108)EXAMPLE 2C. Preparation of (4-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)phenyl)methanol (BAR2108)
Очистка после этапа b методом ВЭЖХ с фазой Phenomenex С18 (5 мкм, 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (75:25) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 24 мин), дала BAR2108 (количественный выход). BAR2108 C27H25CI2NO4Purification after step b by HPLC with Phenomenex C18 phase (5 µm, 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (75:25) as eluent (flow rate 1 ml/min) ( t R = 24 min) gave BAR2108 (quantitative yield). BAR2108 C27H25CI2NO4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,39 (2Н, d, J=7,9 Гц), 7,31 (1H, ovl), 7,28 (4Н, d, ovl), 6,94 (2Н, d, J=8,3 Гц), 6,80 (2Н, d, J=8,3 Гц), 4,96 (2Н, s), 4,72 (2Н, s), 4,62 (2Н, d, J=5,1 Гц), 3,33 (1H, септет, J=6,9 Гц), 1,41 (6Н, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.39 (2H, d, J=7.9 Hz), 7.31 (1H, ovl), 7.28 (4H, d, ovl), 6, 94 (2H, d, J=8.3 Hz), 6.80 (2H, d, J=8.3 Hz), 4.96 (2H, s), 4.72 (2H, s), 4, 62 (2H, d, J=5.1 Hz), 3.33 (1H, septet, J=6.9 Hz), 1.41 (6H, d, J=6.9 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,5, 159,3, 158,4, 158,2, 135,7 (2С), 133,7, 131,4, 129,8 (2С), 129,2 (2С), 128,8, 128,2 (2С), 128,0, 115,0 (4С), 109,5, 69,8, 64,9, 59,6, 27,3, 20,9 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.5, 159.3, 158.4, 158.2, 135.7 (2C), 133.7, 131.4, 129.8 (2C), 129.2 (2C), 128.8, 128.2 (2C), 128.0, 115.0 (4C), 109.5, 69.8, 64.9, 59.6, 27.3, 20 .9 (2C).
ПРИМЕР 2D. Получение 4-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)бензойной кислоты (BAR2109)EXAMPLE 2D. Preparation of 4-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)benzoic acid (BAR2109)
Очистка силикагелем (7:3 гексан: AcOEt) после этапа с дала BAR2109 (93%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur VP 100-5 Silica (5 мкм; 10 мм внутр. диам. × 250 мм), используя н-гексан/AcOEt (50:50) в качестве элюента (скорость потока 3 мл/мин) (tR = 15 мин).Purification with silica gel (7:3 hexane: AcOEt) after step c gave BAR2109 (93%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur VP 100-5 Silica phase (5 µm; 10 mm i.d. × 250 mm) using n-hexane/AcOEt (50:50) as eluent (flow rate 3 ml/min ) (t R = 15 min).
BAR2109 C27H23Cl2NO5 BAR2109 C 27 H 23 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,05 (2Н, d, J=8,6 Гц), 7,40 (2Н, d, J=7,89 Гц), 7,33-7,29 (3Н, m, ovl), 6,99 (2Н, d, J=8,6 Гц), 6,81 (2Н, d, J=8,4 Гц), 5,03 (2Н, s), 4,73 (2Н, s), 3,32 (1H, септет, J=6,9 Гц), 1,42 (6Н, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.05 (2H, d, J=8.6 Hz), 7.40 (2H, d, J=7.89 Hz), 7.33-7, 29 (3H, m, ovl), 6.99 (2H, d, J=8.6 Hz), 6.81 (2H, d, J=8.4 Hz), 5.03 (2H, s), 4.73 (2H, s), 3.32 (1H, septet, J=6.9 Hz), 1.42 (6H, d, J=6.9 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 163,2, 162,4, 158,9, 158,3, 135,8 (2С), 132,3, 131,2 (2С), 129,2 (2С), 128,7, 128,1 (2С), 127,8, 121,7, 114,9 (2С), 114,5 (2С), 109,3, 69,8, 59,4, 27,1, 20,8 (2С), 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 163.2, 162.4, 158.9, 158.3, 135.8 (2C), 132.3, 131.2 (2C), 129.2 (2C), 128.7, 128.1 (2C), 127.8, 121.7, 114.9 (2C), 114.5 (2C), 109.3, 69.8, 59, 4, 27.1, 20.8 (2C),
ПРИМЕР 2Е. Получение метил 3-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)бензоата (BAR2122)EXAMPLE 2E. Preparation of methyl 3-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)benzoate (BAR2122)
Очистка силикагелем (100% CH2Cl2) после этапа а дала BAR2122 (61%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя MeOH/H2O (85:15) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 18 мин).Purification with silica gel (100% CH 2 Cl 2 ) after step a gave BAR2122 (61%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (85:15) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 18 min).
BAR2122 C28H25Cl2NO5 BAR2122 C 28 H 25 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,63 (2H, d, J=7,6 Гц), 7,40 (2H, d, J=8,1 Гц), 7,33 (1H, t, J=8,1 Гц), 7,30-7,29 (3Н, m, ovl), 7,13 (1H, d, J=7,9 Гц), 6,79 (2H, d, J=8,3 Гц), 5,00 (2H, s), 4,72 (2H, s), 3,91 (3H, s), 3,32 (1H, септет, J=6,9 Гц), 1,41 (6H, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.63 (2H, d, J=7.6 Hz), 7.40 (2H, d, J=8.1 Hz), 7.33 (1H, t, J=8.1 Hz), 7.30-7.29(3H, m, ovl), 7.13(1H, d, J=7.9 Hz), 6.79(2H, d, J =8.3 Hz), 5.00 (2H, s), 4.72 (2H, s), 3.91 (3H, s), 3.32 (1H, septet, J=6.9 Hz), 1.41 (6H, d, J=6.9 Hz);
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 171,1, 169,3, 157,0, 152,9, 135,8 (2C), 131,2, 129,4, 129,2 (4C), 128,1 (2C), 122,2, 120,8, 120,2, 115,0, 114,8 (2C), 109,3, 69,8, 59,4, 52,2, 27,1, 20,7 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 171.1, 169.3, 157.0, 152.9, 135.8 (2C), 131.2, 129.4, 129.2 (4C), 128.1 (2C), 122.2, 120.8, 120.2, 115.0, 114.8 (2C), 109.3, 69.8, 59.4, 52.2, 27.1, 20.7 (2C).
ПРИМЕР 2F. Получение 3-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)бензонитрила (BAR2121)EXAMPLE 2F. Preparation of 3-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)benzonitrile (BAR2121)
Очистка силикагелем (100% CH2Cl2) после этапа а дала BAR2121 (93%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur 100-5 С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/Н2О (82:18) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 16 мин).Purification with silica gel (100% CH 2 Cl 2 ) after step a gave BAR2121 (93%). An analytical sample was prepared by HPLC with Nucleodur 100-5 C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (82:18) as eluent (flow rate 1 ml/ min) (t R = 16 min).
BAR2121 C27H22Cl2N2O3 BAR2121 C 27 H 22 Cl 2 N 2 O 3
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,40 (2Н, d, J=7,8 Гц), 7,33 (1Н, t, J=7,8 Гц), 7,29-7,23 (4Н, m, ovl), 7,16 (2Н, ovl), 6,79 (2Н, d, J=8,5 Гц), 4,97 (2Н, s), 4,72 (2Н, s), 3,32 (1H, септет, J=7,0 Гц), 1,41 (6Н, d, J=7,0 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.40 (2H, d, J=7.8 Hz), 7.33 (1H, t, J=7.8 Hz), 7.29-7, 23 (4H, m, ovl), 7.16 (2H, ovl), 6.79 (2H, d, J=8.5 Hz), 4.97 (2H, s), 4.72 (2H, s ), 3.32 (1H, septet, J=7.0 Hz), 1.41 (6H, d, J=7.0 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 163,2, 159,1, 158,3, 135,7 (2С), 131,2, 130,4, 129,7, 129,1 (2С), 128,1 (2С), 124,7, 123,9, 120,5, 118,9, 118,7, 114,9, 114,8, 114,6, 109,3, 69,9, 59,4, 27,1, 20,8 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 163.2, 159.1, 158.3, 135.7 (2C), 131.2, 130.4, 129.7, 129.1 (2C), 128.1 (2C), 124.7, 123.9, 120.5, 118.9, 118.7, 114.9, 114.8, 114.6, 109.3, 69.9 , 59.4, 27.1, 20.8 (2C).
ПРИМЕР 2G. Получение (3-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)фенил)метанола (BAR2124)EXAMPLE 2G. Preparation of (3-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)phenyl)methanol (BAR2124)
Очистка после этапа b методом ВЭЖХ с фазой Phenomenex С18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/Н2О (80:20) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 10 мин), дала BAR2124 (84%).Purification after step b by HPLC with Phenomenex C18 phase 5 µm (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (80:20) as eluent (flow rate 1 ml/min) (t R = 10 min) gave BAR2124 (84%).
BAR2124 C27H25Cl2NO4 BAR2124 C 27 H 25 Cl 2 NO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,40 (2Н, d, J=7,70 Гц), 7,33 (1H, t, J=7,70 Гц), 7,28 (2Н, d, J=8,4 Гц), 7,27 (1H, dd, ovl), 6,98 (1H, s), 6,94 (1H, d, J=7,5 Гц), 6,87 (1H, d, J=8,0 Гц), 6,78 (2H, d, J=8,4 Гц), 4,96 (2H, s), 4,72 (2H, s), 4,66 (2H, br s), 3,32 (1H, септет, J=6,9 Гц), 1,41 (6H, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.40 (2H, d, J=7.70 Hz), 7.33 (1H, t, J=7.70 Hz), 7.28 (2H, d, J=8.4Hz), 7.27(1H, dd, ovl), 6.98(1H, s), 6.94(1H, d, J=7.5Hz), 6.87( 1H, d, J=8.0 Hz), 6.78 (2H, d, J=8.4 Hz), 4.96 (2H, s), 4.72 (2H, s), 4.66 ( 2H, br s), 3.32 (1H, septet, J=6.9 Hz), 1.41 (6H, d, J=6.9 Hz);
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,3, 159,1, 158,9, 158,1, 142,5, 135,7 (2C), 131,2, 129,6, 129,0 (3C), 128,0 (2C), 123,2, 119,3, 114,8 (2C), 114,1, 113,2, 109,3, 69,6, 65,2, 59,3, 27,1, 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.3, 159.1, 158.9, 158.1, 142.5, 135.7 (2C), 131.2, 129.6, 129.0 (3C), 128.0 (2C), 123.2, 119.3, 114.8 (2C), 114.1, 113.2, 109.3, 69.6, 65.2, 59.3, 27.1,
20,8 (2C).20.8 (2C).
ПРИМЕР 2H. Получение 3-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)бензойной кислоты (BAR2123)EXAMPLE 2H. Preparation of 3-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)benzoic acid (BAR2123)
Очистка силикагелем (8:2 гексан/AcOEt) после этапа с дала BAR2123 (72%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Phenomenex С18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (80:20) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 12 мин).Purification with silica gel (8:2 hexane/AcOEt) after step c gave BAR2123 (72%). An analytical sample was prepared by HPLC with Phenomenex C18 5 µm phase (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (80:20) as eluent (flow rate 1 ml/min) (t R = 12 min).
BAR2123 C27H23Cl2NO5 BAR2123 C 27 H 23 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CD3OD, 400 МГц): δ 7,58 (1H, s), 7,57 (1H, d, J=8,0 Гц), 7,49 (2Н, d, J=7,7 Гц), 7,43 (1H, dd, J=8,0, 8,4 Гц), 7,30 (1H, t, J=7,7 Гц), 7,28 (2Н, d, J=8,6 Гц), 7,10 (1H, d, J=8,4 Гц), 6,77 (2Н, d, J=8,6 Гц), 5,00 (2Н, s), 4,81 (2Н, s), 3,41 (1H, септет, J=7,1 Гц), 1,40 (6Н, d, J=7,1 Гц); 1 H NMR (CD3OD, 400 MHz): δ 7.58 (1H, s), 7.57 (1H, d, J=8.0 Hz), 7.49 (2H, d, J=7.7 Hz ), 7.43 (1H, dd, J=8.0, 8.4 Hz), 7.30 (1H, t, J=7.7 Hz), 7.28 (2H, d, J=8, 6 Hz), 7.10 (1H, d, J=8.4 Hz), 6.77 (2H, d, J=8.6 Hz), 5.00 (2H, s), 4.81 (2H , s), 3.41 (1H, septet, J=7.1 Hz), 1.40 (6H, d, J=7.1 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,3, 169,7, 159,1, 158,6, 158,1, 135,7 (2С), 132,0 (2С), 131,2, 129,5, 129,2, 128,4, 128,0 (2С), 122,7, 120,8, 116,1, 115,3, 114,8 (2С), 109,3, 69,7, 59,3, 27,1, 20,7 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.3, 169.7, 159.1, 158.6, 158.1, 135.7 (2C), 132.0 (2C), 131.2, 129.5, 129.2, 128.4, 128.0 (2C), 122.7, 120.8, 116.1, 115.3, 114.8 (2C), 109.3, 69.7, 59.3, 27.1, 20.7 (2C).
ПРИМЕР 2I. Получение 4'-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)-[1,1'-бифенил]-3-карбоновой кислоты (BAR2139)EXAMPLE 2I. Preparation of 4'-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid (BAR2139 )
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur Sphinx C18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (95:5) и 0,1% TFA в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), дала BAR2139 (tR = 5 мин).Purification by HPLC with Nucleodur Sphinx C18 5 µm phase (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (95:5) and 0.1% TFA as eluent (flow rate 1 ml/ min) gave BAR2139 (t R = 5 min).
BAR2139 C33H27Cl2NO5 BAR2139 C 33 H 27 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,27 (1Н, br s), 8,02 (1Н, d, J=7,7 Гц), 7,78 (1H, d, J=7,7 Гц), 7,56 (2H, d, J=8,2 Гц), 7,52 (1H, t, J=7,7 Гц), 7,40 (2H, d, J=7,9 Гц), 7,32 (2H, d, J=8,2 Гц), 7,30 (1H, t, J=7,9 Гц), 6,81 (2H, d, J=8,2 Гц), 5,01 (2H, s), 4,73 (2H, s), 3,33 (1H, септет, J=7,0 Гц), 1,42 (6H, d, J=7,0 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.27 (1H, br s), 8.02 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.78 (1H, d, J=7, 7 Hz), 7.56 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.52 (1H, t, J=7.7 Hz), 7.40 (2H, d, J=7.9 Hz ), 7.32 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.30 (1H, t, J=7.9 Hz), 6.81 (2H, d, J=8.2 Hz), 5.01 (2H, s), 4.73 (2H, s), 3.33 (1H, septet, J=7.0 Hz), 1.42 (6H, d, J=7.0 Hz);
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,3, 165,3, 159,1, 158,7, 158,2, 141,1, 135,8 (2C), 132,6, 131,8, 131,3, 129,5 (2C), 129,2 (2C), 128,9, 128,4 (2C), 128,2 (2C), 128,1, 127,8, 115,3 (2C), 114,9 (2C), 109,3, 69,6, 59,6, 27,0, 20,7 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.3, 165.3, 159.1, 158.7, 158.2, 141.1, 135.8 (2C), 132.6, 131.8 , 131.3, 129.5(2C), 129.2(2C), 128.9, 128.4(2C), 128.2(2C), 128.1, 127.8, 115.3(2C ), 114.9 (2C), 109.3, 69.6, 59.6, 27.0, 20.7 (2C).
ПРИМЕР 2J. Получение (4'-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)-[1,1'-бифенил]-3-ил)метанола (BAR2140)EXAMPLE 2J. Preparation of (4'-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)-[1,1'-biphenyl]-3-yl)methanol (BAR2140)
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur Sphinx C18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (85:15) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), дала BAR2140 (tR = 12 мин).Purification by HPLC with Nucleodur Sphinx C18 5 µm phase (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (85:15) as eluent (flow rate 1 ml/min) gave BAR2140 ( t R = 12 min).
BAR2140 C33H29Cl2NO4 BAR2140 C 33 H 29 Cl 2 NO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,54-7,39 (9Н, ovl), 7,27 (2Н, d, J=7,8 Гц), 7,01, (2Н, d, J=7,9 Гц), 6,76 (2Н, d, J=8,0 Гц), 4,98 (2Н, s), 4,79 (2Н, s), 4,64 (2Н, s), 3,39 (1Н, септет, J=7,0 Гц), 1,38 (6Н, d, J=7,0 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.54-7.39 (9H, ovl), 7.27 (2H, d, J=7.8 Hz), 7.01, (2H, d, J=7.9Hz), 6.76(2H, d, J=8.0Hz), 4.98(2H, s), 4.79(2H, s), 4.64(2H, s) , 3.39 (1H, septet, J=7.0 Hz), 1.38 (6H, d, J=7.0 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 159,1, 158,4, 158,2, 141,3, 141,2, 135,8 (2С), 133,7, 131,2, 129,6, 129,2, 129,0, 128,2 (2С), 128,1 (2С), 127,8 (2С), 126,1, 125,4, 125,3, 115,1 (2С), 114,8 (2С), 109,4, 69,6, 65,3, 59,3, 27,0, 20,8 (2С), 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 159.1, 158.4, 158.2, 141.3, 141.2, 135.8 (2C), 133.7, 131.2 , 129.6, 129.2, 129.0, 128.2 (2C), 128.1 (2C), 127.8 (2C), 126.1, 125.4, 125.3, 115.1 ( 2C), 114.8 (2C), 109.4, 69.6, 65.3, 59.3, 27.0, 20.8 (2C),
ПРИМЕР 2K. Получение 4'-((4-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)-[1,1' -бифенил] -4-карбоновой кислоты (BAR2147)EXAMPLE 2K. Preparation of 4'-((4-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)-[1,1'-biphenyl]-4-carboxylic acid (BAR2147 )
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur Sphinx С18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (90:10) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин) (tR = 8 мин).Purification by HPLC with Nucleodur Sphinx C18 5 µm phase (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (90:10) as eluent (flow rate 1 ml/min) (t R = 8 min).
BAR2147 C33H27Cl2NO5 BAR2147 C 33 H 27 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,8 (2Н, d, J=8,6 Гц), 7,6 (2Н, d, J=8,6 Гц), 7,53 (2Н, d, J=8,5 Гц), 7,40 (2Н, d, J=7,9 Гц), 7,32 (3Н, ovl), 7,05 (2Н, d, J=8,5 Гц), 6,81 (2Н, d, J=8,2 Гц), 5,01 (2Н, s), 4,73 (2Н, s), 3,33 (1H, септет, J=7,0 Гц), 1,42 (6Н, d, J=7,0 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.8 (2H, d, J=8.6 Hz), 7.6 (2H, d, J=8.6 Hz), 7.53 (2H, d, J=8.5Hz), 7.40(2H, d, J=7.9Hz), 7.32(3H, ovl), 7.05(2H, d, J=8.5Hz) , 6.81 (2H, d, J=8.2 Hz), 5.01 (2H, s), 4.73 (2H, s), 3.33 (1H, septet, J=7.0 Hz) , 1.42 (6H, d, J=7.0 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,3, 169,3, 159,4, 159,1, 158,2, 145,1, 135,8 (2С), 132,6 (2С), 131,7, 131,3, 129,3, 129,1 (2С), 128,4 (2С), 128,2 (2С), 127,8, 127,1 (2С), 115,4 (2С), 114,8 (2С), 109,3, 69,8, 59,4, 27,1, 20,8 (2С), 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.3, 169.3, 159.4, 159.1, 158.2, 145.1, 135.8 (2C), 132.6 (2C), 131.7, 131.3, 129.3, 129.1(2C), 128.4(2C), 128.2(2C), 127.8, 127.1(2C), 115.4(2C) , 114.8 (2C), 109.3, 69.8, 59.4, 27.1, 20.8 (2C),
ПРИМЕР 3. ПОЛУЧЕНИЕ BAR2151, BAR2159, BAR2175, BAR2183EXAMPLE 3. OBTAINING BAR2151, BAR2159, BAR2175, BAR2183
Начав со спирта BAR2112 и выполняя далее процедуру, описанную выше в примере 2 (схема 2), в результате алкилирования четырьмя различными фенолами посредством реакции Мицунобу и гидролиза получили карбоновые кислоты BAR2151, BAR2159, BAR2175, BAR2183.Starting with the BAR2112 alcohol and following the procedure described in Example 2 above (Scheme 2), alkylation with four different phenols via Mitsunobu reaction and hydrolysis gave the carboxylic acids BAR2151, BAR2159, BAR2175, BAR2183.
Схема 3Scheme 3
a) PPh3, DIAD, Фенолы-СООСН3, THF сухой, 0°С; с) NaOH, МеОН : Н2О 1:1 об/об.a) PPh 3 , DIAD, Phenols-COOCH 3 , THF dry, 0°C; c) NaOH, MeOH: H 2 O 1:1 v/v.
ПРИМЕР 3А. Получение 4'-((3-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)-[1,1' -бифенил]-3-карбоновой кислоты (BAR2151)EXAMPLE 3A. Preparation of 4'-((3-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid (BAR2151 )
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Phenomenex С18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (80:20) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), дала BAR2151 (tR = 11 минимум).Purification by HPLC with Phenomenex C18 5 µm phase (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (80:20) as eluent (flow rate 1 ml/min) gave BAR2151 (t R = 11 minimum).
BAR2151 C33H27Cl2NO5 BAR2151 C 33 H 27 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CD3OD, 400 МГц): δ 8,27 (1H, br s), 8,02 (1H, d, J=7,8 Гц), 7,75 (1H, d, J=7,8 Гц), 7,56 (2H, d, J=8,2 Гц), 7,52 (1H, t, J=7,8 Гц), 7,40 (2H, d, J=8,0 Гц), 7,32 (1H, t, J=8,0 Гц), 7,30 (1H, t, J=7,5 Гц), 7,04 (2H, d, J=8,2 Гц), 7,00 (1H, d, J=7,5 Гц), 6,85 (1H, s), 6,80 (1Н, d, J=7,5 Гц), 5,06 (2H, s), 4,78 (2H, s), 3,33 (1H, септет, J=7,3 Гц), 1,42 (6H, d, J=7,3 Гц); 1 H NMR (CD3OD, 400 MHz): δ 8.27 (1H, br s), 8.02 (1H, d, J=7.8 Hz), 7.75 (1H, d, J=7.8 Hz), 7.56 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.52 (1H, t, J=7.8 Hz), 7.40 (2H, d, J=8.0 Hz) , 7.32 (1H, t, J=8.0 Hz), 7.30 (1H, t, J=7.5 Hz), 7.04 (2H, d, J=8.2 Hz), 7 .00 (1H, d, J=7.5 Hz), 6.85 (1H, s), 6.80 (1H, d, J=7.5 Hz), 5.06 (2H, s), 4 .78 (2H, s), 3.33 (1H, septet, J=7.3 Hz), 1.42 (6H, d, J=7.3 Hz);
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 165,5, 159,1, 158,7, 158,5, 141,0, 137,7, 135,6 (2C), 132,3, 131,8, 131,6, 131,4, 129,8, 129,5, 129,1, 128,9, 128,4 (2C), 128,2 (2C), 127,6, 120,4, 115,1 (2C), 114,5, 113,7, 109,3, 69,8, 59,3, 27,0, 20,7 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 165.5, 159.1, 158.7, 158.5, 141.0, 137.7, 135.6 (2C), 132.3 , 131.8, 131.6, 131.4, 129.8, 129.5, 129.1, 128.9, 128.4 (2C), 128.2 (2C), 127.6, 120.4 , 115.1 (2C), 114.5, 113.7, 109.3, 69.8, 59.3, 27.0, 20.7 (2C).
ПРИМЕР 3В. Получение 4'-((3-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)-[1,1' -бифенил] -4-карбоновой кислоты (BAR2159)EXAMPLE 3B. Preparation of 4'-((3-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)-[1,1'-biphenyl]-4-carboxylic acid (BAR2159 )
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur Sphinx С18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя MeOH/H2O (90:10) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), дала BAR2159 (tR = 8 мин).Purification by HPLC with Nucleodur Sphinx C18 5 µm phase (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (90:10) as eluent (flow rate 1 ml/min) gave BAR2159 ( t R = 8 min).
BAR2159 C33H27Cl2NO5 BAR2159 C 33 H 27 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,90 (2Н, d, J=7,7 Гц), 7,70 (2Н, d, J=7,7 Гц), 7,56 (2Н, d, J=8,2 Гц), 7,53 (1H, t, J=8,0 Гц), 7,40 (2Н, d, J=7,9 Гц), 7,30 (1H, t, J=7,9 Гц), 7,05 (2Н, d, J=8,2 Гц), 7,02 (1H, d, J=8,0 Гц), 6,88 (1H, s), 6,76 (1H, d, J=8,0 Гц), 5,03 (2Н, s), 4,73 (2Н, s), 3,33 (1H, септет, J=7,0 Гц), 1,42 (6Н, d, J=7,0 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.90 (2H, d, J=7.7 Hz), 7.70 (2H, d, J=7.7 Hz), 7.56 (2H, d, J=8.2Hz), 7.53(1H, t, J=8.0Hz), 7.40(2H, d, J=7.9Hz), 7.30(1H, t, J=7.9Hz), 7.05(2H, d, J=8.2Hz), 7.02(1H, d, J=8.0Hz), 6.88(1H, s), 6 .76 (1H, d, J=8.0 Hz), 5.03 (2H, s), 4.73 (2H, s), 3.33 (1H, septet, J=7.0 Hz), 1 .42 (6H, d, J=7.0 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,3, 165,3, 159,3, 159,1, 158,2, 141,1, 137,7, 135,8 (2С), 132,6, 131,5, 131,2, 129,5, 129,2 (2С), 129,1, 128,1 (2С), 128,0 (2С), 123,8 (2С), 115,4 (2С), 120,0, 114,5, 113,7, 109,3, 69,8, 59,4, 27,0, 20,7 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.3, 165.3, 159.3, 159.1, 158.2, 141.1, 137.7, 135.8 (2C), 132.6 , 131.5, 131.2, 129.5, 129.2 (2C), 129.1, 128.1 (2C), 128.0 (2C), 123.8 (2C), 115.4 (2C ), 120.0, 114.5, 113.7, 109.3, 69.8, 59.4, 27.0, 20.7 (2C).
ПРИМЕР 3С. Получение 4-((3-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)бензойной кислоты (BAR2175)EXAMPLE 3C. Preparation of 4-((3-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)benzoic acid (BAR2175)
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur Sphinx C18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (80:20) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), дала BAR2175 (tR = 13 мин).Purification by HPLC with Nucleodur Sphinx C18 5 µm phase (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (80:20) as eluent (flow rate 1 ml/min) gave BAR2175 ( t R = 13 min).
BAR2175 C27H23Cl2NO5 BAR2175 C 27 H 23 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,05 (2Н, d, J=8,7 Гц), 7,40 (2Н, d, J=7,9 Гц), 7,32 (1Н, t, J=7,9 Гц), 7,29 (1H, d, J=8,0 Гц), 7,25 (1H, t ovl), 7,0 (2Н, d, J=8,7 Гц), 6,85 (1H, s), 6,76 (1H, d, J=8,0 Гц), 5,07 (2Н, s), 4,74 (2Н, s), 3,33 (1H, септет, J=7,0 Гц), 1,44 (6Н, d, J=7,0 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.05 (2H, d, J=8.7 Hz), 7.40 (2H, d, J=7.9 Hz), 7.32 (1H, t, J=7.9 Hz), 7.29 (1H, d, J=8.0 Hz), 7.25 (1H, t ovl), 7.0 (2H, d, J=8.7 Hz ), 6.85(1H, s), 6.76(1H, d, J=8.0Hz), 5.07(2H, s), 4.74(2H, s), 3.33(1H , septet, J=7.0 Hz), 1.44 (6H, d, J=7.0 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 163,9, 159,3, 159,0, 158,5, 137,8, 135,8 (2С), 132,3 (2С), 131,5, 131,3, 129,7, 129,5, 128,0 (2С), 120,2, 114,6, 114,4 (2С), 113,6, 109,2, 69,9, 59,3, 27,0, 20,7 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 163.9, 159.3, 159.0, 158.5, 137.8, 135.8 (2C), 132.3 (2C), 131.5, 131.3, 129.7, 129.5, 128.0 (2C), 120.2, 114.6, 114.4 (2C), 113.6, 109.2, 69.9, 59.3, 27.0, 20.7 (2C).
ПРИМЕР 3D. Получение 3-((3-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)бензил)окси)бензойной кислоты (BAR2183)EXAMPLE 3D. Preparation of 3-((3-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)benzyl)oxy)benzoic acid (BAR2183)
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Nucleodur Sphinx C18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (80:20) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), дала BAR2183 (tR = 15 мин).Purification by HPLC with Nucleodur Sphinx C18 5 µm phase (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (80:20) as eluent (flow rate 1 ml/min) gave BAR2183 ( t R = 15 min).
BAR2183 C27H23Cl2NO5 BAR2183 C 27 H 23 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,72 (1H, d, J=7,5 Гц), 7,67 (1H, br s), 7,41 (1H, ovl), 7,40 (2H, d, ovl), 7,31 (1H, t, ovl), 7,30 (1H, tovl), 7,24 (1H, d, J=8,0 Гц), 7,20 (1H, d, J=8,2 Гц), 6,87 (1H, br s), 6,76 (1H, d, J=8,3 Гц), 5,04 (2H, s), 4,75 (2H, s), 3,34 (1H, септет, J=6,9 Гц), 1,42 (6H, d, J=6,9 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.72 (1H, d, J=7.5 Hz), 7.67 (1H, br s), 7.41 (1H, ovl), 7.40 (2H, d, ovl), 7.31 (1H, t, ovl), 7.30 (1H, tovl), 7.24 (1H, d, J=8.0 Hz), 7.20 (1H, d, J=8.2 Hz), 6.87 (1H, br s), 6.76 (1H, d, J=8.3 Hz), 5.04 (2H, s), 4.75 (2H , s), 3.34 (1H, septet, J=6.9 Hz), 1.42 (6H, d, J=6.9 Hz);
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,7, 165,3, 159,0, 158,9, 158,5, 137,7, 135,7 (2C), 131,3, 129,6, 129,3, 128,9, 128,4, 128,2 (2C), 120,9, 120,5, 116,1, 115,3, 114,7, 113,8, 110,1, 69,6, 59,3, 27,0, 20,5 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.7, 165.3, 159.0, 158.9, 158.5, 137.7, 135.7 (2C), 131.3, 129.6 , 129.3, 128.9, 128.4, 128.2 (2C), 120.9, 120.5, 116.1, 115.3, 114.7, 113.8, 110.1, 69, 6, 59.3, 27.0, 20.5 (2C).
ПРИМЕР 4. ПОЛУЧЕНИЕ BAR2163, BAR2171, BAR2199, BAR2207EXAMPLE 4. OBTAINING BAR2163, BAR2171, BAR2199, BAR2207
Начав со спирта BAR2120 и выполняя далее процедуру, описанную выше в примерах 2 и 3 (схема 2 или схема 3), в результате алкилирования двумя различными фенолами и щелочного гидролиза получили карбоновые кислоты BAR2163, BAR2171, BAR2199 и BAR2207 (схема 4).Starting with the BAR2120 alcohol and following the procedure described in Examples 2 and 3 above (Scheme 2 or Scheme 3), alkylation with two different phenols and alkaline hydrolysis gave the carboxylic acids BAR2163, BAR2171, BAR2199 and BAR2207 (Scheme 4).
Схема 4Scheme 4
a) PPh3, DIAD, Фенолы-СООСН3, THF сухой, 0°С; с) NaOH, МеОН : H2O 1:1 об/об.a) PPh 3 , DIAD, Phenols-COOCH 3 , THF dry, 0°C; c) NaOH, MeOH : H 2 O 1:1 v/v.
ПРИМЕР 4А. Получение 4-((4'-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-ил)метокси)бензойной кислоты (BAR2163)EXAMPLE 4A. Preparation of 4-((4'-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-yl)methoxy)benzoic acid (BAR2163 )
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Luna Polar С18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (85:15) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), дала BAR2163 (tR = 13 минимум).Purification by HPLC with Luna Polar C18 phase 5 µm (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (85:15) as eluent (flow rate 1 ml/min) gave BAR2163 ( t R = 13 minimum).
BAR2163 C33H27Cl2NO5 BAR2163 C 33 H 27 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,60 (2Н, d, J=8,8 Гц), 7,55, (1H, br s), 7,51 (1Н, d, J=7,9 Гц), 7,46 (2H, d, J=8,5 Гц), 7,42 (2H, d, J=7,9 Гц), 7,40 (1H, t, ovl), 7,35 (1H, d, J=7,5 Гц), 7,33 (1H, t, J=7,9 Гц), 7,04 (2H, d, J=8,8 Гц), 6,87 (2H, d, J=8,5 Гц), 5,16 (2H, s), 4,77 (2H, s), 3,36 (1H, септет, J=7,0 Гц), 1,44 (6H, d, J=7,2 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.60 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.55 (1H, br s), 7.51 (1H, d, J=7 .9 Hz), 7.46 (2H, d, J=8.5 Hz), 7.42 (2H, d, J=7.9 Hz), 7.40 (1H, t, ovl), 7, 35 (1H, d, J=7.5 Hz), 7.33 (1H, t, J=7.9 Hz), 7.04 (2H, d, J=8.8 Hz), 6.87 ( 2H, d, J=8.5 Hz), 5.16 (2H, s), 4.77 (2H, s), 3.36 (1H, septet, J=7.0 Hz), 1.44 ( 6H, d, J=7.2 Hz);
13C NMR (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 165,3, 160,0, 159,1, 157,9, 141,3, 136,2, 135,8 (2C), 134,0, 133,7, 131,1 (3C), 129,2, 128,2 (2C), 128,1 (2C), 127,8, 126,7, 125,8 (2C), 115,6 (2C), 115,0 (2C), 109,3, 70,3, 59,3, 27,1, 20,7 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 165.3, 160.0, 159.1, 157.9, 141.3, 136.2, 135.8 (2C), 134.0 , 133.7, 131.1(3C), 129.2, 128.2(2C), 128.1(2C), 127.8, 126.7, 125.8(2C), 115.6(2C ), 115.0 (2C), 109.3, 70.3, 59.3, 27.1, 20.7 (2C).
ПРИМЕР 4B. Получение 3-((4'-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-ил)метокси)бензойной кислоты (BAR2171)EXAMPLE 4B. Preparation of 3-((4'-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-yl)methoxy)benzoic acid (BAR2171 )
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Luna Polar С18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (85:15) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), дала BAR2171 (tR = 20 минимум).Purification by HPLC with Luna Polar C18 phase 5 µm (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (85:15) as eluent (flow rate 1 ml/min) gave BAR2171 ( t R = 20 minimum).
BAR2171 C33H27Cl2NO5 BAR2171 C 33 H 27 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,51 (1H, br s), 7,51-7,22 (12Н, ovl) 6,87 (2Н, d, J=8,4 Гц), 5,10 (2H, s), 4,78 (2Н, s), 3,36 (1H, септет, J=7,3 Гц), 1,44 (6H, d, J=7,3 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.51 (1H, br s), 7.51-7.22 (12H, ovl) 6.87 (2H, d, J=8.4 Hz), 5.10 (2H, s), 4.78 (2H, s), 3.36 (1H, septet, J=7.3 Hz), 1.44 (6H, d, J=7.3 Hz);
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,5, 165,3, 159,1, 158,7, 157,9, 141,2, 136,3, 135,8 (2C), 133,8, 131,2, 130,4, 129,2, 128,2 (2C), 128,1 (2C), 126,7, 125,8 (2C), 124,8, 120,5, 118,7, 117,8, 115,1 (2C), 113,3, 109,4, 70,4, 59,5,27,0, 20,7 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.5, 165.3, 159.1, 158.7, 157.9, 141.2, 136.3, 135.8 (2C), 133.8 , 131.2, 130.4, 129.2, 128.2 (2C), 128.1 (2C), 126.7, 125.8 (2C), 124.8, 120.5, 118.7, 117.8, 115.1(2C), 113.3, 109.4, 70.4, 59.5,27.0, 20.7(2C).
ПРИМЕР 4C. Получение 3-((4'-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)метокси)бензойной кислоты (BAR2199)EXAMPLE 4C. Preparation of 3-((4'-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methoxy)benzoic acid (BAR2199 )
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Luna Polar С18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (85:15) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), дала BAR2199 (tR = 23 минимум).Purification by HPLC with Luna Polar C18 phase 5 µm (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (85:15) as eluent (flow rate 1 ml/min) gave BAR2199 ( t R = 23 minimum).
BAR2199 C33H27Cl2NO5 BAR2199 C 33 H 27 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 7,57 (1H, br s), 7,22-7,51 (12Н, ovl) 6,87 (2Н, d, J=8,1 Гц), 5,16 (2H, s), 5,00 (2Н, s), 3,33 (1H, септет, J=7,0 Гц), 1,44 (6H, d, J=7,0 Гц); 13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,5, 169,3, 160,1, 159,3, 158,1, 141,0, 135,8 (2C), 135,6, 133,0, 131,2 (2C), 130,5 (2C), 130,1 (2C), 129,6, 128,7, 128,2 (2C), 128,1 (2C), 122,6, 119,5, 114,9 (2C), 114,4, 109,3, 70,6, 59,8, 27,0, 20,7 (2C). 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 7.57 (1H, br s), 7.22-7.51 (12H, ovl) 6.87 (2H, d, J=8.1 Hz), 5.16 (2H, s), 5.00 (2H, s), 3.33 (1H, septet, J=7.0 Hz), 1.44 (6H, d, J=7.0 Hz); 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.5, 169.3, 160.1, 159.3, 158.1, 141.0, 135.8 (2C), 135.6, 133.0 , 131.2(2C), 130.5(2C), 130.1(2C), 129.6, 128.7, 128.2(2C), 128.1(2C), 122.6, 119, 5, 114.9 (2C), 114.4, 109.3, 70.6, 59.8, 27.0, 20.7 (2C).
ПРИМЕР 4D. Получение 4-((4'-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-4-ил)метокси)бензойной кислоты (BAR2207)EXAMPLE 4D. Preparation of 4-((4'-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methoxy)benzoic acid (BAR2207 )
Очистка методом ВЭЖХ с фазой Luna Polar С18 5 мкм (4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (85:15) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), дала BAR2207 (tR = 15 минимум).Purification by HPLC with Luna Polar C18 phase 5 µm (4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (85:15) as eluent (flow rate 1 ml/min) gave BAR2207 ( t R = 15 minimum).
BAR2207 C33H27Cl2NO5 BAR2207 C 33 H 27 Cl 2 NO 5
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,02 (2Н, d, J=8,2 Гц), 7,61 (2Н, d, J=8,0 Гц), 7,47 (2Н, d, J=7,7 Гц), 7,40 (2Н, d, J=7,9 Гц), 7,39 (2Н, d, J=7,7 Гц), 7,32 (1H, t, J=7,9 Гц), 7,03 (2Н, d, J=8,0 Гц), 6,90 (2Н, d, J=8,2 Гц), 5,20 (2Н, s), 5,05 (2Н, s), 3,33 (1H, септет, J=7,0 Гц), 1,45 (6Н, d, J=7,0 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.02 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.61 (2H, d, J=8.0 Hz), 7.47 (2H, d, J=7.7 Hz), 7.40 (2H, d, J=7.9 Hz), 7.39 (2H, d, J=7.7 Hz), 7.32 (1H, t, J=7.9Hz), 7.03(2H, d, J=8.0Hz), 6.90(2H, d, J=8.2Hz), 5.20(2H, s), 5 .05 (2H, s), 3.33 (1H, septet, J=7.0 Hz), 1.45 (6H, d, J=7.0 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,3, 165,5, 159,1, 158,7, 158,5, 141,1, 135,8 (2С), 133,0, 132,6, 131,7, 131,3 (2С), 131,2, 129,2 (2С), 129,1 (2С), 128,9, 128,2 (2С), 128,0 (2С), 115,4 (2С), 114,9 (2С), 109,3, 70,5, 59,3, 27,0, 20,7 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.3, 165.5, 159.1, 158.7, 158.5, 141.1, 135.8 (2C), 133.0, 132.6 , 131.7, 131.3 (2C), 131.2, 129.2 (2C), 129.1 (2C), 128.9, 128.2 (2C), 128.0 (2C), 115, 4 (2C), 114.9 (2C), 109.3, 70.5, 59.3, 27.0, 20.7 (2C).
ПРИМЕР 5. ПОЛУЧЕНИЕ BAR2222-BAR2226, BAR2227 и BAR2228EXAMPLE 5 OBTAINING BAR2222-BAR2226, BAR2227 and BAR2228
Следуя той же процедуре, которая описана выше для синтеза карбоновой кислоты BAR2119 (схема 1 и пример 12А), и поочередно изменяя исходный материал (различные альдегиды) или различные β-кетоэфиры для образования изоксазола, были синтезированы BAR2222-BAR2226, BAR2227 и BAR2228, соответственно.Following the same procedure as described above for the synthesis of the carboxylic acid BAR2119 (Scheme 1 and Example 12A), and alternately changing the starting material (various aldehydes) or various β-ketoesters to form isoxazole, BAR2222-BAR2226, BAR2227 and BAR2228 were synthesized, respectively. .
Пример 5А. Получение 4'-((3-(2-хлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-карбоновой кислоты (BAR2222)Example 5A. Preparation of 4'-((3-(2-chlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid (BAR2222)
В результате очистки методом ВЭЖХ на колонке с фазой Nucleodur Sphinx RP C18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (80:20) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), образовался чистый BAR2222 (tR = 13,1 мин).Purification by HPLC on a Nucleodur Sphinx RP C18 phase column (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (80:20) as eluent (flow rate 1 ml/ min), pure BAR2222 was formed (t R = 13.1 min).
BAR2222 C26H22ClNO4 BAR2222 C 26 H 22 ClNO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,27 (1H, br s) 8,04 (1H, d, J=7,32 Гц), 7,75 (1H, d, J=7,32 Гц), 7,48-7,51 (5Н, m, ovl), 7,42 (1H, t, J=7,41 Гц), 7,35 (1H, t, J=7,41 Гц), 6,86 (2H, d, J=8,05 Гц), 4,84 (2H, s), 3,35 (1H, септет, J=6,93 Гц), 1,44 (6Н, d, J=6,93 Гц). 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.27 (1H, br s) 8.04 (1H, d, J=7.32 Hz), 7.75 (1H, d, J=7.32 Hz), 7.48-7.51 (5H, m, ovl), 7.42 (1H, t, J=7.41 Hz), 7.35 (1H, t, J=7.41 Hz), 6.86 (2H, d, J=8.05 Hz), 4.84 (2H, s), 3.35 (1H, septet, J=6.93 Hz), 1.44 (6H, d, J = 6.93 Hz).
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,5 (2С), 161,1, 157,6, 140,0, 133,3, 133,1, 131,7, 131,6, 130,9, 130,8, 129,7, 129,6, 128,2, 128,1(2С), 127,9, 127,8, 126,8, 114,8 (2С), 109,2, 59,4, 26,9, 20,6 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.5 (2C), 161.1, 157.6, 140.0, 133.3, 133.1, 131.7, 131.6, 130.9 , 130.8, 129.7, 129.6, 128.2, 128.1(2C), 127.9, 127.8, 126.8, 114.8(2C), 109.2, 59.4 , 26.9, 20.6 (2C).
Пример 5В. Получение 4'-((3-(2-бромфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-карбоновой кислоты (BAR2223)Example 5B. Preparation of 4'-((3-(2-bromophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid (BAR2223)
В результате очистки методом ВЭЖХ на колонке с фазой Nucleodur Sphinx RP C18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (80:20) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), образовался чистый BAR2223 (tR = 12,6 мин).Purification by HPLC on a Nucleodur Sphinx RP C18 phase column (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (80:20) as eluent (flow rate 1 ml/ min), pure BAR2223 was formed (t R = 12.6 min).
BAR2223 C26H22BrNO4 BAR2223 C 26 H 22 BrNO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,26 (1H, br s) 8,04 (1H, d, J=7,85 Гц), 7,77 (1H, d, J=7,85 Гц), 7,64 (1H, d, J=8,20 Гц), 7,53 (1Н, t, J=7,85 Гц), 7,51 (1H, t, ovl), 7,51 (2H, d, J=8,61 Гц), 7,18 (1H, t, J=8,20 Гц), 6,88 (2H, d, J=8,61 Гц), 4,79 (2H, s), 3,37 (1H, септет, J=7,07 Гц), 1,45 (6H, d, J=7,07 Гц). 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.26 (1H, br s) 8.04 (1H, d, J=7.85 Hz), 7.77 (1H, d, J=7.85 Hz), 7.64 (1H, d, J=8.20 Hz), 7.53 (1H, t, J=7.85 Hz), 7.51 (1H, t, ovl), 7.51 ( 2H, d, J=8.61Hz), 7.18(1H, t, J=8.20Hz), 6.88(2H, d, J=8.61Hz), 4.79(2H, s), 3.37 (1H, septet, J=7.07 Hz), 1.45 (6H, d, J=7.07 Hz).
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,6, 171,4, 162,6, 157,8,140,4, 133,6, 132,9, 131,8, 131,1, 130,4, 130,3, 128,5, 128,2, 128,13(2C), 128,1, 127,4, 126,2, 123,0, 115,1 (2C), 109,2, 59,6, 27,0, 20.7 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.6, 171.4, 162.6, 157.8, 140.4, 133.6, 132.9, 131.8, 131.1, 130.4, 130.3, 128.5, 128.2, 128.13(2C), 128.1, 127.4, 126.2, 123.0, 115.1(2C), 109.2, 59.6, 27.0, 20.7 (2C).
Пример 5C. Получение 4'-((5-изопропил-3-(2-трифторметил)фенил)изоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-карбоновой кислоты (BAR2224)Example 5C. Preparation of 4'-((5-isopropyl-3-(2-trifluoromethyl)phenyl)isoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid (BAR2224)
В результате очистки методом ВЭЖХ на колонке с фазой Nucleodur Sphinx RP C18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (80:20) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), образовался чистый BAR2224 (tR = 10,8 мин).Purification by HPLC on a Nucleodur Sphinx RP C18 phase column (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (80:20) as eluent (flow rate 1 ml/ min), pure BAR2224 was formed (t R = 10.8 min).
BAR2224 C27H22F3NO4 BAR2224 C 27 H 22 F 3 NO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,25 (1H, br s) 8,03 (1H, d, J=7,90 Гц), 7,81 (1H, d, J=7,66 Гц), 7,76 (1H, d, J=7,66 Гц), 7,61 (1Н, m, ovl), 7,60 (1H, m, ovl), 7,52-7,51 (4H, ovl), 6,88 (2H, d, J=8,72 Гц), 4,72 (2H, s), 3,33 (1H, септет, J=7,03 Гц), 1,44 (6H, d, J=7,03 Гц). 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.25 (1H, br s) 8.03 (1H, d, J=7.90 Hz), 7.81 (1H, d, J=7.66 Hz), 7.76 (1H, d, J=7.66 Hz), 7.61 (1H, m, ovl), 7.60 (1H, m, ovl), 7.52-7.51 (4H , ovl), 6.88 (2H, d, J=8.72 Hz), 4.72 (2H, s), 3.33 (1H, septet, J=7.03 Hz), 1.44 (6H , d, J=7.03 Hz).
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 171,0, 161,3, 158,1, 140,9, 133,1, 132,0, 131,8, 131,5, 129,9, 129,8, 129,7, 128,9, 128,4, 128,3, 128,2 (2C), 126,5, 126,4, 122,2, 115,1 (2C), 109,4, 59,1, 27,0, 20,8 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 171.0, 161.3, 158.1, 140.9, 133.1, 132.0, 131.8, 131.5, 129, 9, 129.8, 129.7, 128.9, 128.4, 128.3, 128.2 (2C), 126.5, 126.4, 122.2, 115.1 (2C), 109, 4, 59.1, 27.0, 20.8 (2C).
Пример 5D. Получение 4'-((3-(2-бром-6-хлорфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-карбоновой кислоты (BAR2225)Example 5D. Preparation of 4'-((3-(2-bromo-6-chlorophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid (BAR2225)
В результате очистки методом ВЭЖХ на колонке с фазой Nucleodur Sphinx RP C18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (80:20) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), образовался чистый BAR2225 (tR = 36,7 мин).Purification by HPLC on a Nucleodur Sphinx RP C18 phase column (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (80:20) as eluent (flow rate 1 ml/ min), pure BAR2225 was formed (t R = 36.7 min).
BAR2225 C26H21BrClNO4 BAR2225 C 26 H 21 BrClNO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,23 (1H, br s) 8,00 (1H, d, J=7,77 Гц), 7,71 (1H, d, J=7,77 Гц), 7,58 (1H, d, J=7,77 Гц), 7,44-7,46 (4H, m, ovl), 7,23 (1H, t, J=8,55 Гц), 6,85 (2H, d, J=8,73 Гц), 4,76 (2H, br s), 3,35 (1H, септет, J=7,03 Гц), 1,43 (6H, d, J=7,03 Гц). 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.23 (1H, br s) 8.00 (1H, d, J=7.77 Hz), 7.71 (1H, d, J=7.77 Hz), 7.58 (1H, d, J=7.77 Hz), 7.44-7.46 (4H, m, ovl), 7.23 (1H, t, J=8.55 Hz), 6.85 (2H, d, J=8.73 Hz), 4.76 (2H, br s), 3.35 (1H, septet, J=7.03 Hz), 1.43 (6H, d, J=7.03 Hz).
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,4, 171,7, 160,6, 158,2, 140,9, 135,7, 133,0, 131,8, 131,6, 131,2, 129,7, 128,9, 128,6, 128,4, 128,3 (2C), 128,1 (2C), 125,0, 115,2 (2C), 109,1, 59,4, 27,0, 20,7 (2C). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.4, 171.7, 160.6, 158.2, 140.9, 135.7, 133.0, 131.8, 131.6, 131, 2, 129.7, 128.9, 128.6, 128.4, 128.3(2C), 128.1(2C), 125.0, 115.2(2C), 109.1, 59.4 , 27.0, 20.7 (2C).
Пример 5E. Получение 4'-((3-(2,6-дибромфенил)-5-изопропилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-карбоновой кислоты (BAR2226)Example 5E. Preparation of 4'-((3-(2,6-dibromophenyl)-5-isopropylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid (BAR2226)
В результате очистки методом ВЭЖХ на колонке с фазой Nucleodur Sphinx RP C18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), используя МеОН/H2O (80:20) в качестве элюента (скорость потока 1 мл/мин), образовался чистый BAR2226 (tR = 13,3 мин).Purification by HPLC on a Nucleodur Sphinx RP C18 phase column (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm) using MeOH/H 2 O (80:20) as eluent (flow rate 1 ml/ min), pure BAR2226 was formed (t R = 13.3 min).
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,26 (1H, br s) 8,04 (1H, d, J=7,77 Гц), 7,77 (1H, d, J=7,77 Гц), 7,64 (2Н, d, J=8,08 Гц), 7,53 (1Н, t, J=7,77 Гц), 7,51 (2H, d, J=8,78 Гц), 7,18 (1H, t, J=8,08 Гц), 6,90 (2H, d, J=8,78 Гц), 4,79 (2H, s), 3,37 (1H, септет, J=7,03 Гц), 1,45 (6Н, d, J=7,03 Гц). 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.26 (1H, br s) 8.04 (1H, d, J=7.77 Hz), 7.77 (1H, d, J=7.77 Hz), 7.64 (2H, d, J=8.08 Hz), 7.53 (1H, t, J=7.77 Hz), 7.51 (2H, d, J=8.78 Hz) , 7.18 (1H, t, J=8.08 Hz), 6.90 (2H, d, J=8.78 Hz), 4.79 (2H, s), 3.37 (1H, septet, J=7.03 Hz), 1.45 (6H, d, J=7.03 Hz).
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 176,5, 171,4, 161,9, 158,1, 140,7, 132,8, 131,9, 131,8, 130,8, 129,7, 128,7, 128,3, 128,2, 128,2 (2С), 124,9, 124,1, 123,9, 115,0 (2С), 108,9, 59,4, 27,1, 20,8 (2С). 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 176.5, 171.4, 161.9, 158.1, 140.7, 132.8, 131.9, 131.8, 130.8, 129, 7, 128.7, 128.3, 128.2, 128.2 (2C), 124.9, 124.1, 123.9, 115.0 (2C), 108.9, 59.4, 27, 1, 20.8 (2C).
Пример 5F. Получение 4'-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-метилизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-карбоновой кислоты (BAR2227)Example 5F. Preparation of 4'-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-methylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid (BAR2227)
Очистка силикагелем после этапа с дала BAR2227 (98%). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Luna С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), с градиентным режимом буфера В от 40% до 95% за 13 мин (буфер А = 95 H2O : 5 CH3CN : 0,1 TFA; буфер В = 95 CH3CN : 5 H2O : 0,1 TFA) в качестве элюента (скорость потока 1,5 мл/мин) (tR = 13,3 мин).Purification with silica gel after step c gave BAR2227 (98%). An analytical sample was prepared by HPLC with Luna C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm), buffer B gradient from 40% to 95% in 13 min (buffer A = 95 H 2 O : 5 CH 3 CN : 0.1 TFA buffer B = 95 CH 3 CN : 5 H 2 O : 0.1 TFA) as eluent (flow rate 1.5 ml/min) (t R = 13.3 min) .
BAR2227 C24H17Cl2NO4 BAR2227 C 24 H 17 Cl 2 NO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,27 (1H, s), 8,04 (1H, d, J=7,7 Гц), 7,77 (1H, d, J=7,7 Гц), 7,51 (2H, d, J=8,2 Гц), 7,53 (1H, t, J=7,7 Гц), 7,43 (2H, d, J=8,0 Гц), 7,34 (1H, t, J=8,0 Гц), 6,89 (2H, d, J=8,2 Гц), 4,80 (2H, s), 2,59 (3H, s); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.27 (1H, s), 8.04 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.77 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.51 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.53 (1H, t, J=7.7 Hz), 7.43 (2H, d, J=8.0 Hz) , 7.34 (1H, t, J=8.0 Hz), 6.89 (2H, d, J=8.2 Hz), 4.80 (2H, s), 2.59 (3H, s) ;
13C ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 168,6, 165,4, 159,0, 158,1, 141,0, 135,8 (2C), 133,1, 131,8 (2C), 131,3, 129,0, 128,5, 128,4, 128,2 (2C), 128,1 (2C), 127,8, 115,1 (2C), 111,2, 59,7, 11,6. 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 168.6, 165.4, 159.0, 158.1, 141.0, 135.8 (2C), 133.1, 131.8 (2C), 131.3, 129.0, 128.5, 128.4, 128.2(2C), 128.1(2C), 127.8, 115.1(2C), 111.2, 59.7, 11 ,6.
Пример 5G. Получение 4'-((3-(2,6-дихлорфенил)-5-пропиллизоксазол-4-ил)метокси)-[1,1'-бифенил]-3-карбоновой кислоты (BAR2228)5G example. Preparation of 4'-((3-(2,6-dichlorophenyl)-5-propylisoxazol-4-yl)methoxy)-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid (BAR2228)
Очистка силикагелем после этапа с дала BAR2228 (количественный выход). Аналитический образец был получен методом ВЭЖХ с фазой Luna С18 (5 мкм; 4,6 мм внутр. диам. × 250 мм), с градиентным режимом буфера В от 40% до 95% за 13 мин (буфер А = 95 H2O : 5 CH3CN : 0,1 TFA; буфер В = 95 CH3CN : 5 H2O : 0,1 TFA) в качестве элюента (скорость потока 1,5 мл/мин) (tR = 14,7 мин).Purification with silica gel after step c gave BAR2228 (quantitative). An analytical sample was prepared by HPLC with Luna C18 phase (5 µm; 4.6 mm i.d. × 250 mm), buffer B gradient from 40% to 95% in 13 min (buffer A = 95 H 2 O : 5 CH 3 CN : 0.1 TFA buffer B = 95 CH 3 CN : 5 H 2 O : 0.1 TFA) as eluent (flow rate 1.5 ml/min) (t R = 14.7 min) .
BAR2228 C26H21Cl2NO4 BAR2228 C 26 H 21 Cl 2 NO 4
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц): δ 8,26 (1H, s), 8,04 (1Н, d, J=7,8 Гц), 7,76 (1H, d, J=7,8 Гц), 7,50 (2Н, d, J=8,5 Гц), 7,52 (1H, t, J=7,8 Гц), 7,42 (2Н, d, J=8,0 Гц), 7,34 (1H, t, J=8,0 Гц), 6,88 (2Н, d, J=8,5 Гц), 4,78 (2Н, s), 2,91 (2Н, t, J=7,3 Гц), 1,86 (2Н, секстет, J=7,3 Гц), 1,04 (3Н, t, J=7,3 Гц); 1 H NMR (CDCl 3 , 400 MHz): δ 8.26 (1H, s), 8.04 (1H, d, J=7.8 Hz), 7.76 (1H, d, J=7.8 Hz), 7.50 (2H, d, J=8.5 Hz), 7.52 (1H, t, J=7.8 Hz), 7.42 (2H, d, J=8.0 Hz) , 7.34 (1H, t, J=8.0 Hz), 6.88 (2H, d, J=8.5 Hz), 4.78 (2H, s), 2.91 (2H, t, J=7.3 Hz), 1.86 (2H, sextet, J=7.3 Hz), 1.04 (3H, t, J=7.3 Hz);
13С ЯМР (CDCl3, 100 МГц): δ 172,2, 165,2, 159,0, 158,1, 141,0, 135,8 (2С), 133,0, 131,9, 131,3 (2С), 129,0, 128,5, 128,4, 128,2 (2С), 128,1 (2С), 127,9, 115,1 (2С), 111,0, 59,5, 27,9, 21,1, 13,6. 13 C NMR (CDCl 3 , 100 MHz): δ 172.2, 165.2, 159.0, 158.1, 141.0, 135.8 (2C), 133.0, 131.9, 131.3 (2C), 129.0, 128.5, 128.4, 128.2 (2C), 128.1 (2C), 127.9, 115.1 (2C), 111.0, 59.5, 27 .9, 21.1, 13.6.
ПРИМЕР 6. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬEXAMPLE 6. BIOLOGICAL ACTIVITY
Биологическую активность выбранных соединений (Таблица 1) испытывали в условиях in vitro с использованием клеточной модели, трансфицированной репортерными генами, на рецепторе FXR и сравнивали с контрольным агонистом, хенодезоксихолевой кислотой (CDCA), первичной желчной кислотой, которая функционирует как эндогенный лиганд рецептора.The biological activity of selected compounds (Table 1) was tested in vitro using a cellular model transfected with reporter genes at the FXR receptor and compared with the control agonist, chenodeoxycholic acid (CDCA), a primary bile acid that functions as the receptor's endogenous ligand.
Клетки HepG2 культивировали при 37°С в среде Е-МЕМ (минимальная питательная среда с солями Эрла) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), 1% L-глютамина и 1% пенициллина/стрептомицина. Эксперименты по трансфекции проводили с использованием реагента Fugene HD (Promega) в соответствии с инструкциями производителя. Клетки высевали в 24-луночные планшеты при плотности 5×104 клеток/лунка.HepG2 cells were cultured at 37° C. in E-MEM (Minimum Earl's Salt Medium) supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS), 1% L-glutamine, and 1% penicillin/streptomycin. Transfection experiments were performed using the Fugene HD reagent (Promega) according to the manufacturer's instructions. Cells were seeded in 24-well plates at a density of 5×10 4 cells/well.
Клетки HepG2 трансфицировали 100 нг вектора pSG5-FXR, 100 нг вектора pSG5-RXR, 100 нг вектора pGL4.70 Renilla, плазмиды, кодирующей ген Renilla человека, и 200 нг репортерного вектора p(hsp27)-TK-LUC, содержащего чувствительный к FXR элемент IR1, клонированный из промотора белка теплового шока 27 (hsp27).HepG2 cells were transfected with 100 ng pSG5-FXR vector, 100 ng pSG5-RXR vector, 100 ng pGL4.70 Renilla vector, a plasmid encoding the human Renilla gene, and 200 ng p(hsp27)-TK-LUC reporter vector containing FXR-responsive an IR1 element cloned from the heat shock protein 27 (hsp27) promoter.
Через 24 часа после трансфекции, клетки стимулировали соединениями и CDCA в качестве положительного контроля. Для оценки ЕС50, были составлены кривые доза-эффект в клетках HepG2, трансфицированных, как описано выше, и обработанных увеличивающимися концентрациями соединений (0,1, 0,5, 1, 2,5, 5, 7,5, 10, 12,5, 25 и 50 мкМ) (Таблица 1). После обработки, клетки лизировали в 100 мкл лизисного буфера (25 мМ Трис-фосфата, рН 7,8; 2 мМ DTT; 10% глицерина; 1% Тритона Х-100); анализировали 10 мкл клеточного лизата каждого образца на активность люциферазы с использованием Двойной люциферазной репортерной системы анализа (Promega Italia S.r.l., Милан, Италия) в соответствии с инструкциями производителя. Люминесценцию измеряли посредством люминометра Glomax 20/20 (Promega Italia S.r.l., Милан, Италия). Активность люциферазы (Блок регистрации люциферазы, БРЛ) нормализовали с помощью активности Renilla (Блок регистрации Renilla, БРР).24 hours after transfection, cells were stimulated with compounds and CDCA as a positive control. To evaluate the EC 50 , dose-response curves were drawn in HepG2 cells transfected as described above and treated with increasing concentrations of compounds (0.1, 0.5, 1, 2.5, 5, 7.5, 10, 12 .5, 25 and 50 µM) (Table 1). After treatment, cells were lysed in 100 μl of lysis buffer (25 mM Tris-phosphate, pH 7.8; 2 mM DTT; 10% glycerol; 1% Triton X-100); 10 μl of cell lysate of each sample was analyzed for luciferase activity using the Dual Luciferase Reporter Assay System (Promega Italia Srl, Milan, Italy) according to the manufacturer's instructions. Luminescence was measured with a Glomax 20/20 luminometer (Promega Italia Srl, Milan, Italy). Luciferase activity (Luciferase Detection Unit, LRL) was normalized with Renilla activity (Renilla Registry Unit, RRR).
Активацию FXR также измеряли в бесклеточном анализе посредством технологии альфа скрининга с помощью Анализа рекрутинга коактиваторов. Акцепторные гранулы, покрытые анти-GST, использовали для захвата FXR-LBD GST-слияния, в то время как биотинилированный SRC-1 пептид был захвачен донорными гранулами стрептавидина. При освещении с длиной волн 680 нм, химическая энергия передается от донора к акцепторным гранулам через комплекс стрептавидин-донор/SRC-l-биотин/GSTFXR-LBD/анти-GST-акцептор, и вырабатывается сигнал. Анализ проводили в белых, малообъемных, 384-луночных планшетах Optiplates (PerkinElmer) с использованием конечного объема 25 мкл, содержащего конечные концентрации 10 нМ очищенного GST-меченого белка FXR-LBD, 30 нМ биотинилированного SRC-1 пептида, 20 мг/мл акцепторных гранул, покрытых анти-GST, и 10 мг/мл донорной гранулы стрептавидина (PerkinElmer). Аналитический буфер содержал 50 мМ Трис (рН 7,4), 50 мМ хлористого калия (KCl) и 1 мМ DTT. Время стимуляции 1 мкл испытуемого соединения (каждое в конечной концентрации 5 мкМ) было зафиксировано, как 30 мин при комнатной температуре. Концентрация DMSO в каждой лунке поддерживалась на уровне конечной концентрации 2%. После добавления детектирующей смеси (акцепторные и донорные гранулы), планшеты инкубировали в темноте в течение 3 часов при комнатной температуре, а затем считывали в микропланшетном анализаторе Envision (PerkinElmer).FXR activation was also measured in a cell-free assay by alpha screening technology using the Coactivator Recruitment Assay. Anti-GST coated acceptor beads were used to capture the FXR-LBD GST fusion, while the biotinylated SRC-1 peptide was captured by streptavidin donor beads. When illuminated at 680 nm, chemical energy is transferred from the donor to the acceptor beads through the streptavidin-donor/SRC-l-biotin/GSTFXR-LBD/anti-GST acceptor complex and a signal is generated. The assay was performed in white, low-volume, 384-well Optiplates (PerkinElmer) using a final volume of 25 μl containing final concentrations of 10 nM purified GST-labeled FXR-LBD protein, 30 nM biotinylated SRC-1 peptide, 20 mg/ml acceptor beads coated with anti-GST and 10 mg/ml streptavidin donor beads (PerkinElmer). The assay buffer contained 50 mM Tris (pH 7.4), 50 mM potassium chloride (KCl) and 1 mM DTT. The stimulation time for 1 µl of test compound (each at a final concentration of 5 µM) was recorded as 30 minutes at room temperature. The DMSO concentration in each well was maintained at a final concentration of 2%. After addition of the detection mixture (acceptor and donor beads), the plates were incubated in the dark for 3 hours at room temperature and then read in an Envision microplate analyzer (PerkinElmer).
В Таблице 1 представлена эффективность выбранных соединений, включенных в Формулу (I), при рекрутировании коактиватора SRC-1 в процентах от максимальной эффективности соединения относительно CDCA, установленной как 100%. Результаты выражены в виде среднего значения трех независимых измерений±стандартная ошибка. Каждый лиганд испытывали в концентрации 5 мкМ.Table 1 shows the efficacy of selected compounds included in Formula (I) in recruiting the SRC-1 coactivator as a percentage of the compound's maximum efficacy relative to CDCA, set at 100%. Results are expressed as the mean of three independent measurements ± standard error. Each ligand was tested at a concentration of 5 μM.
В Таблице 1 представлена эффективность выбранных соединений, включенных в Формулу (I), в виде значений ЕС50 (мкМ), рассчитанных в ходе анализа трансактивации на основании, по меньшей мере, трех экспериментов. Результаты выражены в виде среднего значения ± стандартная ошибка.Table 1 presents the potency of the selected compounds included in Formula (I) as EC 50 values (µM) calculated from a transactivation assay based on at least three experiments. Results are expressed as mean ± standard error.
Для исследования специфичности соединений в сравнении с PPARy, клетки HepG2 транзиентно транс фицировали посредством 200 нг репортерного вектора p(UAS)5XTKLuc, 100 нг pGL4.70 и вектора, содержащего домен связывания лиганда ядерного рецептора PPARy, клонированного выше ДНК-связывающего домена GAL4 (pSG5-PPARγLBD-GAL4DBD).To study the specificity of compounds versus PPARy, HepG2 cells were transiently transfected with 200 ng p(UAS)5XTKLuc reporter vector, 100 ng pGL4.70, and a vector containing the PPARy nuclear receptor ligand binding domain cloned upstream of the GAL4 DNA-binding domain (pSG5 -PPARγLBD-GAL4DBD).
Для исследования специфичности соединений в сравнении с GPBAR1, клетки HEK-293Т транзиентно транс фицировали посредством реагента Fugene HD (Promega) с использованием следующих векторов: pCMVSPORT6-GPBAR1 человека, pGL4.29 (Promega), репортерный вектор, содержащий сАМР-ответный элемент (CRE), клонированный выше люциферазного репортерного гена luc2P и pGL4.70.To test the specificity of compounds versus GPBAR1, HEK-293T cells were transiently transfected with the Fugene HD reagent (Promega) using the following vectors: human pCMVSPORT6-GPBAR1, pGL4.29 (Promega), cAMP Response Element (CRE) Reporter Vector ) cloned upstream of the luc2P luciferase reporter gene and pGL4.70.
Для исследования специфичности соединений в сравнении с трансактивацией, опосредованной LXRα и LXRβ, клетки HepG2 трансфицировали посредством 200 нг репортерного вектора p(UAS)5XTKLuc, 100 нг вектора, содержащего домен связывания лиганда LXRα или LXRβ, клонированного выше ДНК-связывающего домена GAL4 (то есть, pSG5-LXRαLBD-GAL4DBD или pSG5-LXRβLBD-GAL4DBD), и 100 нг pGL4.70 (Promega), вектора, кодирующего ген Renilla человека.To investigate compound specificity versus LXRα and LXRβ mediated transactivation, HepG2 cells were transfected with 200 ng p(UAS)5XTKLuc reporter vector, 100 ng vector containing LXRα or LXRβ ligand binding domain cloned upstream of the GAL4 DNA binding domain (i.e. , pSG5-LXRαLBD-GAL4DBD or pSG5-LXRβLBD-GAL4DBD), and 100 ng of pGL4.70 (Promega), a vector encoding the human Renilla gene.
Через 24 часа после трансфекции, клетки стимулировали агонистами специфических рецепторов GW3965 (10 мкМ), Росиглитазоном (500 нМ) и TLCA (10 мкМ), соответственно, или соединениями (10 мкМ).24 hours after transfection, cells were stimulated with specific receptor agonists GW3965 (10 μM), Rosiglitazone (500 nM) and TLCA (10 μM), respectively, or compounds (10 μM).
Через 18 часа после стимуляции, клеточный лизат анализировали на активность люциферазы и Renilla с использованием Двойной люциферазной репортерной системы анализа (Е1980, Promega). Люминесценцию измеряли посредством люминометра Glomax 20/20 (Promega). Активность люциферазы нормализовывали с помощью активности Renilla.18 hours after stimulation, the cell lysate was analyzed for luciferase and Renilla activity using the Dual Luciferase Reporter Assay System (E1980, Promega). Luminescence was measured with a Glomax 20/20 luminometer (Promega). Luciferase activity was normalized with Renilla activity.
Ни одно из соединений, относящихся к Формуле (I), не проявило агонистической/антагонистической активности в отношении LXRs, PPARγ и GPBAR1.None of the compounds of Formula (I) showed agonistic/antagonistic activity against LXRs, PPARγ and GPBAR1.
Выделение РНК и ОТ-ПЦР. Клетки HepG2 высевали при плотности 1×106 клеток/колба в колбе Т25. После инкубации в течение ночи, клеткам не давали питание, и затем их стимулировали в течение 18 часов 10 мкМ GW3965 или соединениями (0,1, 1 и 5 мкМ).RNA isolation and RT-PCR. HepG2 cells were seeded at a density of 1×10 6 cells/flask in a T25 flask. After overnight incubation, the cells were not fed and then stimulated for 18 hours with 10 μM GW3965 or compounds (0.1, 1 and 5 μM).
РНК целиком выделяли из клеток HepG2 или ткани печени с использованием реагента TPIzol в соответствии со спецификациями производителя (Invitrogen). Один микрограмм очищенной РНК обрабатывали ДНКазой-I и обратно транскрибировали с помощью Набора обратной транскрипции QuantiTect (Qiagen). Для ПЦР в реальном времени, 10 нг матрицы растворяли в 25 мкл, содержащих 200 нмоль/л каждого праймера, и 12,5 мкл 2 × Универсальной готовой смеси SYBR FAST (Invitrogen). Все реакции проводили в трех повторностях, и условия термоциклирования были следующими: 2 мин при 95°С, затем проводили 40 циклов при 95°С в течение 20 сек и 60°С в течение 30 сек на амплификаторе StepOnePlus (Applied Biosystems). Относительную экспрессию мРНК рассчитывали в соответствии с пороговым методом Ct. Последовательности прямого и обратного праймеров были следующими: GAPDH человека: gaaggtgaaggtcggagt (SEQ ID: 1) и catgggtggaatcatattggaa (SEQ ID: 2); SHP человека: gctgtctggagtccttctgg (SEQ ID: 3) и ccaatgatagggcgaaagaag (SEQ ID: 4); GAPDH мыши, ctgagtatgtcgtggagtctac (SEQ ID: 5) и gttggtggtgcaggatgcattg (SEQ ID: 6); SHP мыши acgatcctcttcaacccaga (SEQ ID: 7) и agggctccaagacttcacac (SEQ ID: 8); FXR мыши: agcttccagggtttcagaca (SEQ ID: 9) и cttccaacaggtctgcatga (SEQ ID: 10); BSEP мыши: gatgcttcccaagttcaagg (SEQ ID: 11) и taaagaggaaggcgatgagc (SEQ ID: 12).Whole RNA was isolated from HepG2 cells or liver tissue using the TPIzol reagent according to the manufacturer's specifications (Invitrogen). One microgram of purified RNA was treated with DNase-I and reverse transcribed using the QuantiTect Reverse Transcription Kit (Qiagen). For real-time PCR, 10 ng of the template was dissolved in 25 µl containing 200 nmol/l of each primer and 12.5 µl of 2x SYBR FAST Universal Premix (Invitrogen). All reactions were run in triplicate and the thermal cycling conditions were as follows: 2 min at 95°C followed by 40 cycles at 95°C for 20 sec and 60°C for 30 sec on a StepOnePlus cycler (Applied Biosystems). Relative mRNA expression was calculated according to the Ct threshold method. The forward and reverse primer sequences were as follows: human GAPDH: gaaggtgaaggtcggagt (SEQ ID: 1) and catgggtggaatcatattggaa (SEQ ID: 2); Human SHP: gctgtctggagtccttctgg (SEQ ID: 3) and ccaatgatagggcgaaagaag (SEQ ID: 4); Mouse GAPDH, ctgagtatgtcgtggagtctac (SEQ ID: 5) and gttggtggtgcaggatgcattg (SEQ ID: 6); mouse SHP acgatcctcttcaacccaga (SEQ ID: 7) and agggctccaagacttcacac (SEQ ID: 8); Mouse FXR: agcttccagggtttcagaca (SEQ ID: 9) and cttccaacaggtctgcatga (SEQ ID: 10); Mouse BSEP: gatgcttcccaagttcaagg (SEQ ID: 11) and taaagaggaaggcgatgagc (SEQ ID: 12).
Животные и протоколы. Самцы мышей C57BL/6N были предоставлены Jackson's Laboratory. Мышей содержали при регулируемой температуре (22°С) и световом дне (12:12-часовой цикл свет/темнота), у мышей был неограниченный доступ к стандартному корму для мышей и питьевой воде, и мышам предоставили возможность акклиматизироваться к этим условиям в течение, по меньшей мере, 5 дней перед включением в эксперимент. Протокол эксперимента был одобрен Комитетом по содержанию и использованию животных Университета Перуджи, а также министром здравоохранения Италии и Национальным институтом здравоохранения (Италия), и он соответствовал Европейскому руководству по использованию экспериментальных животных (разрешение №214/2017-PR). Общее состояние животных ежедневно контролировалось ветеринаром в виварии. Для оценки кишечного всасывания в условиях in vivo и успешной транспортировки в печень, мышам вводили 10 мг/кг BAR2109, растворенного в метилцеллюлозе, ежедневно через желудочный зонд (OS) или интраперитонеально в течение 3 дней. По окончании лечения животных умерщвляли и осуществляли сбор крови и печени для дальнейшего анализа.Animals and protocols. Male C57BL/6N mice were provided by Jackson's Laboratory. Mice were kept under controlled temperature (22°C) and daylight hours (12:12 hour light/dark cycle), mice had unlimited access to standard mouse chow and drinking water, and mice were allowed to acclimatize to these conditions for a period of at least 5 days before inclusion in the experiment. The experimental protocol was approved by the Committee for the Care and Use of Animals of the University of Perugia, as well as the Minister of Health of Italy and the National Institute of Health (Italy), and it complied with the European Guidelines for the Use of Experimental Animals (approval no. 214/2017-PR). The general condition of the animals was monitored daily by a veterinarian in the vivarium. To evaluate in vivo intestinal absorption and successful liver transport, mice were injected with 10 mg/kg of BAR2109 dissolved in methylcellulose daily by gavage (OS) or ip for 3 days. At the end of treatment, the animals were sacrificed and blood and liver were collected for further analysis.
Микросомальная стабильность. Использовали микросомы печени самцов мышей (CD-1) (Sigma-Aldrich). Все инкубации проводили в двух повторностях на встряхивающей водяной бане при температуре 37°С.Инкубационные смеси содержали 1 мкМ соединения с 1% DMSO, используемого в качестве вспомогательного транспортного вещества, микросомы печени мыши (0,3 мг микросомального белка на мл), 5 мМ MgCl2, 1 мМ NADP, 5 мМ глюкозо-6 фосфата, 0,4 ед/мл-1 глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и 50 мМ калий-фосфатного буфера (рН 7,4) в конечном объеме 0,5 мл. Аликвоты удаляли через 0, 5, 10, 20, 30 и 40 мин после добавления микросомы, и реакцию останавливали добавлением 200 мкл ацетонитрила, охлажденного до температуры льда. Через 2 часа образцы центрифугировали в течение 10 мин при 10000 об/мин, а супернатанты переносили в стандартных калибровочных кюветах для анализа LC-MS/MS. Пропранолол, известный как лекарственное средство с высоким печеночным клиренсом у грызунов, использовали в качестве соединения, контролирующего качество, для микросомальных инкубаций. Угловой коэффициент линейной регрессии полученной кривой, показывающей натуральный логарифм площади соединения в зависимости от времени инкубации (-k), использовали при преобразовании в значения t1/2 в условиях in vitro посредством t1/2=-ln(2)/k. Собственный клиренс в условиях in vitro (CLint, выраженный в мкл/мин/мг) рассчитывали по следующей формуле: Clint = объем реакции (мкл)/ t1/2(мин)/белок микросом печени (мг). Процентное содержание немодифицированного соединения рассчитывали, исходя из того, что площадь пика соединения в момент времени 0 мин составляет 100%.microsomal stability. Male mouse liver microsomes (CD-1) (Sigma-Aldrich) were used. All incubations were performed in duplicate in a shaking water bath at 37°C. Incubation mixtures contained 1 μM compound with 1% DMSO used as an auxiliary transport agent, mouse liver microsome (0.3 mg microsomal protein per ml), 5 mM MgCl 2 , 1 mM NADP, 5 mM glucose-6 phosphate, 0.4 U/ml -1 glucose-6-phosphate dehydrogenase and 50 mM potassium phosphate buffer (pH 7.4) in a final volume of 0.5 ml. Aliquots were removed at 0, 5, 10, 20, 30 and 40 minutes after microsome addition, and the reaction was stopped by adding 200 μl of ice-cold acetonitrile. After 2 hours, the samples were centrifuged for 10 min at 10,000 rpm and the supernatants were transferred into standard calibration cuvettes for LC-MS/MS analysis. Propranolol, known as a drug with high hepatic clearance in rodents, has been used as a quality control compound for microsomal incubations. The linear regression slope of the resulting curve showing the natural logarithm of joint area versus incubation time (-k) was used when converted to in vitro t 1/2 values by t 1/2= -ln(2)/k. In vitro intrinsic clearance (CL int , expressed in µl/min/mg) was calculated using the following formula: Cl int = reaction volume (µl)/t 1/2 (min)/liver microsome protein (mg). The percentage of unmodified compound was calculated assuming that the peak area of the compound at time 0 min is 100%.
Предпочтительными примерами, включенными в общую формулу, являются BAR2119 (Clint 53 мкл/мин/мг, 
Предпочтительными примерами, включенными в общую формулу, являются BAR2109 и BAR2123, индуцирующие экспрессию SHP мРНК в концентрации 5 мкМ в 6, 8 раз и 6,2 раза, соответственно (эталонное соединение GW4064 испытывали в концентрации 10 мкМ; индукция экспрессии SHP мРНК = 4,2 раза).Preferred examples included in the general formula are BAR2109 and BAR2123, which induce SHP mRNA expression at a concentration of 5 μM by 6, 8 times, and 6.2 times, respectively (reference compound GW4064 was tested at a concentration of 10 μM; induction of SHP mRNA expression = 4, 2 times).
Предпочтительным примером, включенным в общую формулу, является BAR2109, индуцирующий экспрессию SHP мРНК и BSEP мРНК в печени при введении перорально.A preferred example included in the general formula is BAR2109, which induces expression of SHP mRNA and BSEP mRNA in the liver when administered orally.
--->--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙSEQUENCE LIST
<110> БАР ФАРМАЦЕВТИКАЛС СОЩИЕТА А РЕСПОНСАБИЛИТА ЛИМИТАТА<110> BAR PHARMACEUTICALS SOCIETY A LIMIT RESPONSIBILITY
<120> ИЗОКСАЗОЛ В КАЧЕСТВЕ АГОНИСТОВ FXR-РЕЦЕПТОРА<120> ISOXAZOLE AS FXR RECEPTOR AGONIST
<130> 557-18<130> 557-18
<160> 12<160> 12
<170>BiSSAP 1.3.6<170>BiSSAP 1.3.6
<210> 1<210> 1
<211> 18<211> 18
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> прямой праймер<223> direct primer
<400> 1<400> 1
gaaggtgaaggtcggagt 18gaaggtgaaggtcggagt 18
<210> 2<210> 2
<211> 22<211> 22
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> обратный праймер<223> reverse primer
<400> 2<400> 2
catgggtggaatcatattggaa 22catgggtggaatcatattggaa 22
<210> 3<210> 3
<211> 20<211> 20
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> Прямой праймер<223> Forward primer
<400> 3<400> 3
gctgtctggagtccttctgg 20gctgtctggagtccttctgg 20
<210> 4<210> 4
<211> 21<211> 21
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> обратный праймер<223> reverse primer
<400> 4<400> 4
ccaatgatagggcgaaagaa g 21ccaatgatagggcgaaagaa g 21
<210> 5<210> 5
<211> 22<211> 22
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> Прямой праймер<223> Forward primer
<400> 5<400> 5
ctgagtatgtcgtggagtctac 22ctgagtatgtcgtggagtctac 22
<210> 6<210> 6
<211> 22<211> 22
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> обратный праймер<223> reverse primer
<400> 6<400> 6
gttggtggtgcaggatgcattg 22gttggtggtgcaggatgcattg 22
<210> 7<210> 7
<211> 20<211> 20
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> Прямой праймер<223> Forward primer
<400> 7<400> 7
acgatcctcttcaacccaga 20acgatcctcttcaacccaga 20
<210> 8<210> 8
<211> 20<211> 20
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> обратный праймер<223> reverse primer
<400> 8<400> 8
agggctccaagacttcacac 20agggctccaagacttcacac 20
<210> 9<210> 9
<211> 20<211> 20
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> прямой праймер<223> direct primer
<400> 9<400> 9
agcttccagggtttcagaca 20agcttccagggtttcagaca 20
<210> 10<210> 10
<211> 20<211> 20
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> обратный праймер<223> reverse primer
<400> 10<400> 10
cttccaacaggtctgcatga 20cttccaacaggtctgcatga 20
<210> 11<210> 11
<211> 20<211> 20
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> прямой праймер<223> direct primer
<400> 11<400> 11
gatgcttcccaagttcaagg 20gatgcttcccaagttcaagg 20
<210> 12<210> 12
<211> 20<211> 20
<212> ДНК<212> DNA
<213> Искусственная Последовательность<213> Faux Sequence
<220><220>
<223> обратный праймер<223> reverse primer
<400> 12<400> 12
taaagaggaaggcgatgagc 20taaaggaaggcgatgagc 20
<---<---
Claims (50)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT102018000007265 | 2018-07-17 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021103840A RU2021103840A (en) | 2022-08-17 |
| RU2793266C2 true RU2793266C2 (en) | 2023-03-30 |
Family
ID=
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004048349A1 (en) * | 2002-11-22 | 2004-06-10 | Smithkline Beecham Corporation | Farnesoid x receptor agonists |
| JP2007230909A (en) * | 2006-03-01 | 2007-09-13 | Univ Of Tokyo | Substituted isoxazole derivative |
| WO2012087520A1 (en) * | 2010-12-20 | 2012-06-28 | Irm Llc | Compositions and methods for modulating farnesoid x receptors |
| RU2484091C2 (en) * | 2007-12-04 | 2013-06-10 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Isoxazolo-pyridine derivatives |
| CN104045635A (en) * | 2014-06-23 | 2014-09-17 | 华东理工大学 | 3,4,5-tri-substituted isoxazole compounds and applications thereof |
| WO2017189663A1 (en) * | 2016-04-26 | 2017-11-02 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Isoxazole derivatives as fxr agonists and methods of use thereof |
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004048349A1 (en) * | 2002-11-22 | 2004-06-10 | Smithkline Beecham Corporation | Farnesoid x receptor agonists |
| JP2007230909A (en) * | 2006-03-01 | 2007-09-13 | Univ Of Tokyo | Substituted isoxazole derivative |
| RU2484091C2 (en) * | 2007-12-04 | 2013-06-10 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Isoxazolo-pyridine derivatives |
| WO2012087520A1 (en) * | 2010-12-20 | 2012-06-28 | Irm Llc | Compositions and methods for modulating farnesoid x receptors |
| CN104045635A (en) * | 2014-06-23 | 2014-09-17 | 华东理工大学 | 3,4,5-tri-substituted isoxazole compounds and applications thereof |
| WO2017189663A1 (en) * | 2016-04-26 | 2017-11-02 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Isoxazole derivatives as fxr agonists and methods of use thereof |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| MA Y. et al., Synthetic FXR Agonist GW4064 Prevents Diet-Induced Hepatic Steatosis and Insulin Resistance, PHARMACEUTICAL RESEARCH, 2013, 30(5), 1447-1457. * |
| MISAWA T. et al., Discovery and structural development of small molecules that enhance transport activity of bile salt export pump mutant associated with progressive familial intrahepatic cholestasis type 2, BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, 2012, 20(9), pp. 2940-2949. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6424231B2 (en) | Compositions and methods for modulating farnesoid X receptor | |
| ES2569718T3 (en) | New compounds that modulate the activity of FXR (NR1H4) | |
| TW201728581A (en) | Fxr receptor agonist | |
| TWI690518B (en) | Liver x receptor (lxr) modulators | |
| JP7434278B2 (en) | Deuterated derivatives of ranifibranol | |
| WO2006126514A1 (en) | Arylacetate derivative having isoxazole skeleton | |
| US20200131144A1 (en) | Amine or (thio)amide containing lxr modulators | |
| RU2793266C2 (en) | Isoxazol as fxr receptor agonists | |
| BRPI0920551B1 (en) | 1-PHENYLPYRROLE COMPOUNDS, DRUG AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION | |
| EP3823960B1 (en) | Isoxazole as fxr receptor agonists | |
| JP2023545677A (en) | FXR small molecule agonists and their preparation methods and uses | |
| WO2019224743A1 (en) | Oxadiazoles as fxr receptor antagonists | |
| WO2022029640A1 (en) | Quinoline compounds as selective and/or dual modulators of bile acid receptors and leukotriene cysteinyl receptors | |
| WO2022127699A1 (en) | THYROID HORMONE RECEPTOR β SELECTIVE AGONIST COMPOUND, PHARMACEUTICAL COMPOSITION AND USE THEREOF | |
| Wang et al. | Design, synthesis, and biological studies of novel sulfonamide derivatives as farnesoid X receptor agonists | |
| WO2023233346A1 (en) | Cholesterol derivatives and their uses | |
| CN116925059A (en) | Novel isoxazole FXR agonist, preparation method thereof and application thereof as medicine | |
| WO2020168152A2 (en) | Substituted amide compounds useful as farnesoid x receptor modulators | |
| CN114456123A (en) | FXR (FXR) regulator as well as preparation method and application thereof | |
| CN114315815A (en) | Compounds for modulating FXR activity and uses thereof | |
| JP2010195688A (en) | Amide and urea derivative having npyy5 receptor antagonism |