RU2788874C2 - Терапия рака путем комбинированного применения онколитического вируса осповакцины и ингибитора иммунной контрольной точки и фармацевтическая композиция и комбинированное лекарственное средство для применения в терапии рака - Google Patents
Терапия рака путем комбинированного применения онколитического вируса осповакцины и ингибитора иммунной контрольной точки и фармацевтическая композиция и комбинированное лекарственное средство для применения в терапии рака Download PDFInfo
- Publication number
- RU2788874C2 RU2788874C2 RU2021111399A RU2021111399A RU2788874C2 RU 2788874 C2 RU2788874 C2 RU 2788874C2 RU 2021111399 A RU2021111399 A RU 2021111399A RU 2021111399 A RU2021111399 A RU 2021111399A RU 2788874 C2 RU2788874 C2 RU 2788874C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vaccinia virus
- cancer
- polynucleotide encoding
- antibody
- pharmaceutical composition
- Prior art date
Links
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 146
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 89
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title abstract description 27
- 239000003814 drug Substances 0.000 title abstract description 17
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title abstract description 11
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 title abstract description 9
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title abstract description 6
- 229940083538 Smallpox Vaccine Drugs 0.000 title abstract 9
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 title description 19
- 230000000174 oncolytic Effects 0.000 title description 10
- 229920000023 polynucleotide Polymers 0.000 claims abstract description 183
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract description 183
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims abstract description 162
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims abstract description 162
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 claims abstract description 147
- 229940117681 Interleukin-12 Drugs 0.000 claims abstract description 139
- 102000000704 Interleukin-7 Human genes 0.000 claims abstract description 134
- 229940100994 Interleukin-7 Drugs 0.000 claims abstract description 132
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 7
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 claims description 318
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 claims description 131
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 claims description 131
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 claims description 95
- 229940121650 immune-checkpoint protein inhibitors Drugs 0.000 claims description 94
- 229940000425 combination drugs Drugs 0.000 claims description 42
- 230000002950 deficient Effects 0.000 claims description 41
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 37
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 17
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 12
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 claims description 12
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 claims description 12
- 200000000023 metastatic cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 76
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 29
- 230000000259 anti-tumor Effects 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 77
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 53
- 102100019764 PDCD1 Human genes 0.000 description 44
- 108060007796 SPATA2 Proteins 0.000 description 43
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 31
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 31
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 26
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 26
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 26
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 101710011976 PDCD1LG2 Proteins 0.000 description 17
- 102100007289 PDCD1LG2 Human genes 0.000 description 17
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 15
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 14
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 14
- 102100019451 CD80 Human genes 0.000 description 13
- 101700080477 CD80 Proteins 0.000 description 13
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 13
- 208000005017 Glioblastoma Diseases 0.000 description 13
- 206010025650 Malignant melanoma Diseases 0.000 description 13
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 13
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 13
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 13
- 208000008443 Pancreatic Carcinoma Diseases 0.000 description 13
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 13
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 13
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 13
- 208000000587 Small Cell Lung Carcinoma Diseases 0.000 description 13
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 13
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 13
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 13
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 13
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 13
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 13
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 13
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 12
- 206010017758 Gastric cancer Diseases 0.000 description 12
- 206010073071 Hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 12
- 206010038038 Rectal cancer Diseases 0.000 description 12
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 12
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 12
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 12
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 12
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 12
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 12
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 12
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 11
- 210000001744 T-Lymphocytes Anatomy 0.000 description 10
- 208000007089 Vaccinia Diseases 0.000 description 10
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- 210000001015 Abdomen Anatomy 0.000 description 8
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 8
- 108020004440 Thymidine Kinase Proteins 0.000 description 8
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 102000018358 Immunoglobulins Human genes 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulins Proteins 0.000 description 6
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 4
- 230000002238 attenuated Effects 0.000 description 4
- 108091006028 chimera Proteins 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 4
- 102100019461 CD28 Human genes 0.000 description 3
- 101700033362 CD28 Proteins 0.000 description 3
- 102100010813 EGF Human genes 0.000 description 3
- 101700033006 EGF Proteins 0.000 description 3
- 229940116977 Epidermal Growth Factor Drugs 0.000 description 3
- 108091007472 MAP kinase family Proteins 0.000 description 3
- 108090000823 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 3
- 102000004331 Mitogen-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 3
- 101710043164 Segment-4 Proteins 0.000 description 3
- 101700038759 VP1 Proteins 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 3
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 101700005460 hemA Proteins 0.000 description 3
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 3
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 230000004083 survival Effects 0.000 description 3
- 229950002916 Avelumab Drugs 0.000 description 2
- 101700047069 BTLA Proteins 0.000 description 2
- 102100009333 BTLA Human genes 0.000 description 2
- 229950009791 Durvalumab Drugs 0.000 description 2
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 2
- 108010089187 Ipilimumab Proteins 0.000 description 2
- 210000000822 Killer Cells, Natural Anatomy 0.000 description 2
- 108060004270 LAG3 Proteins 0.000 description 2
- 102100017213 LAG3 Human genes 0.000 description 2
- 206010061289 Metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108010019706 Nivolumab Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 108010080196 Programmed Cell Death 1 Receptor Proteins 0.000 description 2
- 101710010813 SERPINA3K Proteins 0.000 description 2
- 101710014947 SERPINI2 Proteins 0.000 description 2
- 101700063220 SPI1 Proteins 0.000 description 2
- 102100000439 SPI1 Human genes 0.000 description 2
- 101710010812 Serpina3l Proteins 0.000 description 2
- 102100006047 TIGIT Human genes 0.000 description 2
- 101700052319 TIGIT Proteins 0.000 description 2
- 230000003213 activating Effects 0.000 description 2
- 108010072668 atezolizumab Proteins 0.000 description 2
- 229960003852 atezolizumab Drugs 0.000 description 2
- 108010010826 avelumab Proteins 0.000 description 2
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 2
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 2
- 230000001461 cytolytic Effects 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 108010016436 durvalumab Proteins 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- -1 for example Substances 0.000 description 2
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive Effects 0.000 description 2
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- 230000001394 metastastic Effects 0.000 description 2
- 238000009126 molecular therapy Methods 0.000 description 2
- 108010045030 monoclonal antibodies Proteins 0.000 description 2
- 102000005614 monoclonal antibodies Human genes 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 2
- 108010026276 pembrolizumab Proteins 0.000 description 2
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutic aid Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000001711 protein immunostaining Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cells Anatomy 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- 208000009956 Adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000212977 Andira Species 0.000 description 1
- 210000000612 Antigen-Presenting Cells Anatomy 0.000 description 1
- 206010003816 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 B-Lymphocytes Anatomy 0.000 description 1
- 101710030462 B16R Proteins 0.000 description 1
- 108010071919 Bispecific Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 210000001072 Colon Anatomy 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N D-sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 102100010782 EGFR Human genes 0.000 description 1
- 101700039191 EGFR Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 108091007936 ERK family Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 230000035693 Fab Effects 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 210000004907 Glands Anatomy 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241001562081 Ikeda Species 0.000 description 1
- 210000000987 Immune System Anatomy 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000010782 Interleukin-7 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038498 Interleukin-7 Receptors Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 210000004185 Liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 Lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 Lymph Nodes Anatomy 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 description 1
- 241000700629 Orthopoxvirus Species 0.000 description 1
- 108091000081 Phosphotransferases Proteins 0.000 description 1
- 229950010773 Pidilizumab Drugs 0.000 description 1
- 108050006987 Poxvirus Proteins 0.000 description 1
- 102000000034 Programmed Cell Death 1 Receptor Human genes 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000000505 Ribonucleotide Reductases Human genes 0.000 description 1
- 108010041388 Ribonucleotide Reductases Proteins 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 206010041823 Squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000002784 Stomach Anatomy 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N Sucrose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)[C@@]1(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N 0.000 description 1
- 229920000401 Three prime untranslated region Polymers 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H Tricalcium phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 210000003932 Urinary Bladder Anatomy 0.000 description 1
- 101710005130 VACWR200 Proteins 0.000 description 1
- 102100015314 VSIR Human genes 0.000 description 1
- 101710036075 VSIR Proteins 0.000 description 1
- 108010012233 Vaccinia growth factor Proteins 0.000 description 1
- 208000001756 Virus Disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000004721 adaptive immunity Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 201000009596 autoimmune hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000000139 costimulatory Effects 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003596 drug target Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 231100000221 frame shift mutation induction Toxicity 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth media Substances 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating Effects 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000009114 investigational therapy Methods 0.000 description 1
- NBQNWMBBSKPBAY-UHFFFAOYSA-N iodixanol Chemical compound IC=1C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C=1N(C(=O)C)CC(O)CN(C(C)=O)C1=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C1I NBQNWMBBSKPBAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004359 iodixanol Drugs 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesions Effects 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229920001239 microRNA Polymers 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 229960000060 monoclonal antibodies Drugs 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing Effects 0.000 description 1
- 210000004882 non-tumor cells Anatomy 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogens Species 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral Effects 0.000 description 1
- 108010051812 pidilizumab Proteins 0.000 description 1
- 108091008117 polyclonal antibodies Proteins 0.000 description 1
- 230000001737 promoting Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylaxis Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000000856 sucrose gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000002485 urinary Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological Effects 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Images
Abstract
Группа изобретений относится к области фармацевтики и медицины. 1 объект представляет собой комбинированное лекарственное средство для применения в лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию, содержащую в качестве активного ингредиента вирус осповакцины, где вирус осповакцины представляет собой (1) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12), или (2) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12), и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки. 2 объект – способ лечения рака, включающий введение ингибитора иммунной контрольной точки и вируса осповакцины. Технический результат заключается в противоопухолевом эффекте и эффекте индукции полной ремиссии, проявляющемся в отношении удаленно расположенной опухоли, в которую вирус осповакцины не вводили, в случае применения вируса осповакцины в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки. 2 н. и 14 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 пр.
Description
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Область техники, к которой относится изобретение
[0001]
Настоящее изобретение относится к терапии рака путем комбинированного применения онколитического вируса осповакцины и ингибитора иммунной контрольной точки, и фармацевтической композиции и комбинированного лекарственного средства для применения в терапии рака.
Описание уровня техники
[0002]
В последнее время были разработаны различные технологии для применения вирусов в терапии рака. Вирус осповакцины известен как вирус для применения в терапии рака. Вирус осповакцины был исследован с целью разработки противораковой терапии в качестве онколитического вируса, пролиферирующего в раковых клетках, вызывая их уничтожение, в качестве вектора для доставки терапевтического гена в раковые клетки или в качестве противораковой вакцины, экспрессирующей раковый антиген и иммунорегуляторную молекулу (Expert Opinion on Biological Therapy, 2011, Vol. 11, p. 595-608)
[0003]
Согласно некоторым сообщениям, генетически модифицированный вирус осповакцины, содержащий два полинуклеотида, т.е. полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12), и смесь двух генетически модифицированных вирусов осповакцины, т.е. генетически модифицированного вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и генетически модифицированного вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, оказывают цитолитическое действие в отношении различных типов раковых клеток человека, вызывают регрессию опухоли в модели на гуманизированных мышах-опухоленосителях, полную ремиссию в модели на мышах, несущих сингенные опухоли, а также индуцируют приобретенный иммунитет для поддержания противоопухолевого эффекта (Патентный документ 1).
[0004]
С другой стороны, в последние годы проводили клинические исследования иммунотерапии рака, основанной на механизме противоопухолевого иммунного контроля в микроокружении раковой опухоли. С целью активации in vivo иммунного механизма путем ингибирования связывания PD-1 (белка программируемой клеточной смерти 1) с PD-L1 (лигандом 1 белка программируемой клеточной смерти 1), что позволяет живому организму распознавать раковые клетки как чужие клетки, элиминируя таким образом раковые клетки, антитело против PD-1, такое как ниволумаб и пембролизумаб, и антитело против PD-L1, такое как атезолизумаб, авелумаб и дурвалумаб, были одобрены Управлением по контролю качества продуктов питания и лекарственных препаратов США (FDA) в качестве терапевтических средств для лечения рака (Непатентный документ 1). Аналогичным образом, с целью активации механизма элиминации раковых клеток как чужих клеток иммунной системой in vivo, антитело против CTLA-4 (антигена цитотоксических T-лимфоцитов 4), т.е. ипилимумаб, было одобрено в качестве терапевтического средства для лечения рака (Непатентный документ 1). Иммунотерапевтические средства для лечения рака, содержащие указанные ингибиторы иммунных контрольных точек, применяют не только отдельно, но и в комбинации с существующим противоопухолевым средством или другим типом иммунотерапевтического средства для лечения рака (Непатентный документ 2). Сообщается, что онколитический вирус осповакцины, экспрессирующий иммуностимулирующую молекулу, может обладать возможностью быстрого выведения в результате сильного иммунного ответа ингибитора иммунного контрольной точки. Сильный иммунный ответ может быть нежелательным в некоторых случаях и предпочтительным в других случаях при терапии рака, опосредованной вирусом осповакцины (Непатентный документ 3).
Документы предшествующего уровня техники
Патентный документ
[0005]
Патентный документ 1: брошюра WO 2017/209053
[0006]
Непатентный документ 1: Michael A. Postow et al., The New England Journal of Medicine, 2018, Vol. 378, p. 158-168
Непатентный документ 2: Daniel S. Chen and Ira Mellman, Nature, 2017, Vol. 541, p. 321-330
Непатентный документ 3: Yuqiao Shen and John Nemunaitis, Molecular Therapy, 2005, Vol. 11, No. 2, p. 180-195
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0007]
Цель настоящего изобретения состоит в разработке терапии рака путем комбинированного применения онколитического вируса осповакцины и ингибитора иммунной контрольной точки, и фармацевтической композиции и комбинированного лекарственного средства для применения в терапии рака.
[0008]
Авторы настоящего изобретения при разработке комбинированного применения генетически модифицированного вируса осповакцины с другим типом терапии рака неожиданно обнаружили, что в случае применения вируса осповакцины, содержащего два полинуклеотида, т.е. полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки (например, антителом против PD-1 и антителом против CTLA-4), превосходный противоопухолевый эффект и превосходный эффект индукции полной ремиссии проявляется в отношении удаленно расположенной опухоли, в которую вирус осповакцины не вводили (Пример 1). Настоящее изобретение основано на этом результате.
[0009]
Согласно настоящему изобретению предлагаются следующие изобретения.
[1] Фармацевтическая композиция, включающая вирус осповакцины в качестве активного ингредиента, для применения в лечении рака, где вирус осповакцины представляет собой:
(1) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12); или
(2) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12), и предназначен к применению в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки.
[2] Фармацевтическая композиция согласно [1], где вирус осповакцины представляет собой вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12.
[3] Фармацевтическая композиция согласно [1] или [2], где вирус осповакцины является дефектным по функциям факторов роста вируса осповакцины (VGF) и O1L.
[4] Фармацевтическая композиция согласно [3], где вирус осповакцины не имеет домена SCR (короткого консенсусного повтора) во внеклеточной области B5R.
[5] Фармацевтическая композиция согласно любому из [1]-[4], где вирус осповакцины представляет собой вирус осповакцины штамма LC16mO.
[6] Фармацевтическая композиция согласно любому из [1]-[5], где ингибитор иммунной контрольной точки является антителом, выбранным из группы, состоящей из антитела против PD-1, антитела против PD-L1 и антитела против CTLA-4 или их антигенсвязывающего фрагмента.
[7] Фармацевтическая композиция согласно любому из [1]-[6], где рак представляет собой солидный рак.
[8] Фармацевтическая композиция согласно любому из [1]-[7], где рак представляет собой метастатический рак.
[9] Комбинированное лекарственное средство для применения в лечении рака, включающее: фармацевтическую композицию, включающую вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7); и фармацевтическую композицию, включающую вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12), и предназначенные для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки.
[10] Комбинированное лекарственное средство для применения в лечении рака, включающее: фармацевтическую композицию согласно любому из [1]-[8] или комбинированное лекарственное средство согласно [9]; и фармацевтическую композицию, включающую ингибитор иммунной контрольной точки.
[11] Фармацевтическая композиция, включающая ингибитор иммунной контрольной точки для применения в лечении рака, предназначенная для применения в комбинации с фармацевтической композицией согласно любому из [1]-[8] или комбинированным лекарственным средством согласно [9].
[12] Способ лечения рака, включающий введение ингибитора иммунной контрольной точки и вируса осповакцины, где вирус осповакцины представляет собой:
(1) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12); или
(2) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12).
[13] Вирус осповакцины для применения в лечении рака, где вирус осповакцины представляет собой:
(1) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12); или
(2) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12); и
предназначен для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки.
[14] Применение вируса осповакцины для получения лекарственного средства для применения в лечении рака, где вирус осповакцины представляет собой:
(1) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12); или
(2) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12); и
предназначен для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки.
[0010]
Онколитический вирус осповакцины для применения в лечении рака (в частности, онколитический вирус осповакцины, содержащий два полинуклеотида, т.е. полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12), в случае своего применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки (например, (антителом, ингибирующим связывание PD-1 и PD-L1, или антителом против CTLA-4), может дополнительно улучшать свое противоопухолевое действие.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖА
[0011]
На ФИГ. 1 показаны графики, демонстрирующие эффекты (объем опухоли и количество мышей с полной ремиссией) комбинированного применения несущего IL-12 и IL-7 вируса осповакцины и антитела против PD-1 или антитела против CTLA-4 у мышей-опухоленосителей. На каждом графике по вертикальной оси показан объем опухоли; тогда как по горизонтальной оси показано количество дней, прошедших после распределения мышей по группам в зависимости от объема массы привитых раковых клеток. На графиках условное обозначение "CR" означает полную ремиссию, а число рядом с условным обозначением означает количество (выраженное дробным отношением) мышей с полной ремиссией на 10 мышей. Кроме того, условное обозначение "IL-7/IL-12-VV" означает вирус осповакцины, несущий IL-7 и IL-12. На каждом графике линии указывают изменения объема опухоли у отдельных мышей в динамике.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
[0012]
В настоящем описании "субъект" относится к млекопитающему, в частности к человеку. Субъект может быть субъектом, имеющим рак, человеком, имеющим рак, например, человеком, имеющим метастатический рак. Субъект может быть субъектом, имеющим например, солидный рак, например, метастатический солидный рак.
[0013]
В настоящем описании, таким образом, "комбинированное применение" относится к введению множества фармацевтически активных ингредиентов одновременно или отдельно одному м тому же субъекту для лечения. При комбинированном применении множество фармацевтически активных ингредиентов могут содержаться в одной и той же композиции или отдельно в разных композициях.
[0014]
В настоящем описании "фармацевтическая композиция" относится к одной композиции, содержащей один или множество фармацевтически активных ингредиентов. "Комбинированное лекарственное средство" относится к комбинации различных фармацевтических композиций, каждая из которых содержит активный фармацевтический ингредиент.
[0015]
В настоящем описании значение "лечения" включает профилактику и терапию.
[0016]
В настоящем описании "ингибитор иммунной контрольной точки" относится к лекарственному средству, снимающему супрессию активации иммунных клеток, вызванную молекулой иммунной контрольной точки. Примеры молекулы иммунной контрольной точки включают PD-1, CTLA-4, TIM-3 (содержащий иммуноглобулиновый домен и муциновый домен белок T-клеток 3), LAG-3 (ген активации лимфоцитов 3), TIGIT (иммунорецептор T-клеток с Ig и ITIM доменами), BTLA (B- и T-лимфоцит-ассоциированный) и VISTA (супрессор активации T-клеток, содержащий иммуноглобулиновый домен V-типа). Ингибитор иммунной контрольной точки связывается, например, с молекулой иммунной контрольной точки или ее лигандом, ингибируя иммуносупрессорный сигнал, и таким образом может ингибировать функцию иммунной контрольной точки. Например, сигнал PD-1 можно ингибировать путем ингибирования связывания PD-1 с PD-L1 или PD-L2. Кроме того, сигнал CTLA-4 можно ингибировать путем ингибирования связывания CTLA-4 с CD80 или CD86 (Matthieu Collin, Expert Opinion on Therapeutic Patents, 2016, Vol. 26, p. 555-564).
[0017]
В настоящем описании "антитело" относится к иммуноглобулину, который является биомолекулой, содержащей две тяжелых цепи (H-цепи) и две легких цепи (L-цепи) стабилизированные дисульфидными связями. Тяжелая цепь состоит из вариабельной области тяжелой цепи (VH), константных областей тяжелой цепи (CH1, CH2, CH3) и шарнирной области, расположенной между CH1 и CH2. Легкая цепь состоит из вариабельной области легкой цепи (VL) и константной области легкой цепи (CL). Из них фрагмент вариабельной области (Fv), состоящий из VH и VL, непосредственно участвует в связывании с антигеном и является областью, придающей вариабельность антителу. Область, состоящая из шарнирной области, CH2 и CH3, называется Fc-областью.
[0018]
В вариабельной области область, которая непосредственно контактирует с антигеном, является, в частности, областью, обладающей большой вариабельностью, и называется определяющей комплементарность областью (CDR). Область, за границами CDR, обладающая относительно низкой вариабельностью, называется каркасной областью (FR). Каждая из вариабельных областей легкой цепи и тяжелой цепи содержит по 3 CDR-области, которые называются CDR1-CDR3 тяжелой цепи и CDR1-CDR3 легкой цепи, последовательно от N-конца.
[0019]
Антитело может быть моноклональным антителом или поликлональным антителом, и в настоящем изобретении предпочтительно может применяться моноклональное антитело. Антитело может быть любого изотипа IgG, IgM, IgA, IgD или IgE. Антитело может быть получено при иммунизации животного, не относящегося к человеку, такого как мышь, крыса, хомяк, морская свинка, кролик и курица, и может быть рекомбинантным антителом, химерным антителом, гуманизированным антителом и человеческим антителом. В настоящем документе химерное антитело относится к антителу, полученному при соединении фрагментов антител, происходящих из разных биологических видов. Гуманизированное антитело относится к антителу, полученному в результате замены CDR-областей человеческого антитела соответственно соответствующими CDR-областями антитела животного, не относящегося к человеку (например, не относящегося к человеку млекопитающего). Гуманизированное антитело является антителом, имеющим CDR-области, происходящие от не относящегося к человеку животного, и другую область антитела, полученного у человека. Человеческое антитело также называется полным человеческим антителом, при этом все отдельные части человеческого антитела состоят из аминокислотных последовательностей, кодируемых генами антитела человека. В настоящем изобретении химерное антитело может применяться в одном варианте осуществления, гуманизированное антитело - в другом варианте осуществления, и человеческое антитело (полное человеческое антитело) - в еще одном варианте осуществления.
[0020]
В настоящем описании "антигенсвязывающий фрагмент" относится к фрагменту антитела, который может связываться с антигеном. Примеры антигенсвязывающего фрагмента включают Fab, состоящий из VL, VH, CL и CH1 областей; F(ab')2, сформированный из двух Fab-фрагментов, соединенных в шарнирной области дисульфидной связью; Fv, сформированный из VL и VH, одиноцепочечное антитело, scFv, получаемое в результате соединения VL и VH искусственным полипептидным линкером; биспецифичные антитела, такие как диатело, одиноцепочечное диатело (scDb), тандемный scFv и лейциновую молния; и антитело из тяжелой цепи, такое как VHH антитело (MAbs, 2017, Vol. 9, No. 2, p. 182-212).
[0021]
Согласно настоящему изобретению один или множество вирусов осповакцины получают путем интеграции полинуклеотидов, кодирующих IL-7 и IL-12, для экспрессии и применения в комбинации с ингибитором иммунного чекпоинта. Таким образом, можно ожидать лечение рака согласно настоящему изобретению.
[0022]
Далее будет описан каждый из составляющих элементов изобретений.
[0023]
<Вирус осповакцины, который может применяться в настоящем изобретении>
Один или множество вирусов осповакцины, которые могут применяться в настоящем изобретении, могут содержать следующие (1) и (2):
(1) полинуклеотид, кодирующий IL-7, и
(2) полинуклеотид, кодирующий IL-12.
(В настоящем описании вирус осповакцины в дальнейшем будет также указан как "вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении").
В настоящем изобретении полинуклеотиды (1) и (2) могут содержаться в одном вирусе осповакцины или отдельно во множестве вирусов осповакцины.
[0024]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении содержит полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12.
[0025]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении представляет собой вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12.
[0026]
Когда полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, содержатся отдельно во множестве вирусов осповакцины, множество вирусов осповакцины могут содержаться в одной фармацевтической композиции или могут быть в форме комбинированного лекарственного средства, в котором вирусы осповакцины содержатся отдельно в разных фармацевтических композициях.
[0027]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении представляет собой вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, который предназначен для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12. В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении также является вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12, который предназначен для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7.
[0028]
Вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом, принадлежащим к роду ортопоксвирусов семейства поксвирусов. Примеры штамма вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении включают, без ограничения, штамм Lister, штамм Департамента здравоохранения Нью-Йорка (NYBH), штамм Wyeth, штамм Копенгаген, штамм Western Reserve (WR), штамм EM63, штамм Ikeda, штамм Dairen и штамм Tian Tan. Штамм Lister доступен в Американской коллекции типовых культур (ATCC VR-1549). Кроме того, в качестве вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении, могут использоваться стабильные штаммы вируса осповакцины, полученные из этих штаммов. Например, в качестве вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении может использоваться штамм LC16, штамм LC16m8 и штамм LC16mO, полученные на основе штамма Lister. Штамм LC16mO представляет собой штамм, полученный при использовании штамма LC16, который получают при субкультивировании штамма Lister, используемого в качестве исходного штамма, при низкой температуре. Штамм LC16m8 - штамм, получаемый при дальнейшем субкультивировании штамма LC16mO при низкой температуре, и представляет собой аттенуированный штамм, так как в гене B5R, кодирующем вирусный мембранный белок, присутствует мутация со сдвигом рамки считывания, в результате чего белок не экспрессируется и теряет свою функцию (Protein, Nucleic acid and Enzyme, 2003, Vol. 48, p. 1693-1700). В качестве полногеномных последовательностей штамма Lister, штамма LC16m8 и штамма LC16mO, например, соответственно известны рег. номер AY678276.1, рег. номер AY678275.1 и рег. номер AY678277.1. Таким образом, штамм LC16m8 и штамм LC16mO могут быть получены из штамма Lister в результате гомологичной рекомбинации и сайт-направленного мутагенеза, известных в уровне техники.
[0029]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины штамма LC16mO.
[0030]
В качестве вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении можно использовать аттенуированный и/или опухолесективный вирус осповакцины. В настоящем описании "аттенуированный" означает, что токсичность (например, цитолитические свойства) в отношении нормальных клеток (например, неопухолевых клеток) является низкой. В настоящем описании "опухолеселективность" означает, что токсичность (например, онколитическая способность) в отношении опухолевых клеток выше, чем в отношении нормальных клеток. В качестве вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении может использоваться генетически модифицированный вирус осповакцины, дефектный по функции заданного белка и с супрессией экспрессии заданного гена или белка (Expert Opinion on Biological Therapy, 2011, Vol. 11, p. 595-608). Например, вирус осповакцины, дефектный по функции тимидинкиназы (TK) (Cancer Gene Therapy, 1999, Vol. 6, p. 409-422), который модифицирован для повышения опухолеселективности вируса осповакцины; вирус осповакцины, дефектный по функции фактора роста вируса осповакцины (VGF) (Cancer Research, 2001, Vol. 61, p. 8751-8757); вирус осповакцины, содержащий модифицированный ген TK, модифицированный ген гемагглютинина (HA) и модифицированный ген F3 или прерванный локус F3 (WO 2005/047458); вирус осповакцины, дефектный по функциям VGF и O1L (WO 2015/076422); вирус осповакцины, полученный путем вставки последовательности-мишени микроРНК со сниженной экспрессией в раковых клетках в 3'-нетранслируемой области гена B5R (WO 2011/125469); вирус осповакцины, дефектный по функциям VGF и TK (Cancer Research, 2001, Vol. 61, p. 8751-8757); вирус осповакцины, дефектный по функциям TK, HA и F14.5L (Cancer Research, 2007, Vol. 67, p. 10038-10046); вирус осповакцины, дефектный по функциям TK и B18R (PLoS Medicine, 2007, Vol. 4, p. e353); вирус осповакцины, дефектный по функциям TK и рибонуклеотидредуктазы (PLoS Pathogens, 2010, Vol. 6, p. e1000984); вирус осповакцины, дефектный по функциям SPI-1 и SPI-2 (Cancer Research, 2005, Vol. 65, p. 9991-9998); вирус осповакцины, дефектный по функциям SPI-1, SPI-2 и TK (Gene Therapy, 2007, Vol. 14, p. 638-647); или вирус осповакцины с мутациями в областях E3L и K3L (WO 2005/007824). Также может использоваться вирус осповакцины с дефектной функцией O1L (Journal of Virology, 2012, Vol. 86, p. 2323-2336). Кроме того, может использоваться вирус осповакцины с мутацией во внеклеточной области B5R (Virology, 2004, Vol. 325, p. 425-431) или вирус осповакцины с мутацией в области A34R (Molecular Therapy, 2013, Vol. 21, p. 1024-1033), полученные для того, чтобы элиминация вируса in vivo в результате нейтрализующего действия антител против вируса осповакцины была ожидаемо ослаблена. Также может использоваться вирус осповакцины, дефектный по рецептору интерлейкина-1b (IL-1b), полученный для ожидаемой активации иммунных клеток вирусом осповакцины (WO 2005/030971). Вставка этих чужеродных генов, делеция и мутация генов могут быть выполнены, например, путем гомологичной рекомбинации и сайт-направленного мутагенеза, известных в уровне техники. В настоящем изобретении может использоваться вирус осповакцины, имеющий такие генетические модификации в комбинации. В настоящем описании "дефектный" означает, что область гена, обозначенная данным термином, является нефункциональной, включая случай, когда область гена удалена. Например, "дефектный" означает, что делеция может происходить в области, состоящей из указанной области гена, или в периферической области гена, включая указанную область гена.
[0031]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является дефектным по функции VGF. В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является дефектным по функции O1L. В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является дефектным по функциям VGF и O1L. Функции VGF и/или O1L могут быть удалены из вируса осповакцины на основе описания WO 2015/076422.
[0032]
VGF является белком, обладающим высокой гомологией с аминокислотной последовательностью эпидермального фактора роста (EGF), и связывается с рецептором эпидермального фактора роста аналогично EGF и активирует сигнальный каскад, начиная с Ras, Raf, митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK)/киназы регулируемой внеклеточными сигналами киназы (ERK) (MAPK/ERK киназы, MEK), и продолжается до ERK, способствуя делению клеток.
[0033]
O1L поддерживает активацию ERK и способствует делению клеток, вместе с VGF.
[0034]
Дефектный по функции VGF и/или O1L вирус осповакцины означает, что не экспрессируется ни ген, кодирующий VGF, ни ген, кодирующий O1L, или не экспрессируется один из них, или что, даже если гены экспрессируются, экспрессированные белки не имеют нормальной функции(й) VGF и/или O1L. Чтобы сделать вирус осповакцины дефектным по функции(ям) VGF и/или O1L, целый ген или часть гена, кодирующего VGF, и/или гена, кодирующего O1L, можно удалить. В альтернативе можно заменить, удалить, вставить или добавить нуклеотид(ы), чтобы вызвать мутацию гена, в результате которой перестанет экспрессироваться нормальный VGF и/или O1L. В альтернативе в ген(ы), кодирующий VGF, и/или ген, кодирующий O1L, может быть вставлен чужеродный ген. В настоящем изобретении, если нормальный продукт гена не экспрессируется из-за мутации гена в результате, например, замены, делеции, вставки или добавления, считается, что такой ген является дефектным.
[0035]
Является ли функция VGF и/или O1L дефектной, или нет, в вирусе осповакцины для применения в настоящем изобретении можно определить с помощью метода, известного в уровне техники; например, функциональная оценка VGF и/или O1L, подтверждение присутствия VGF или O1L иммунохимическим методом с использованием антитела против VGF или антитела против O1L и определение присутствия гена, кодирующего VGF, и гена, кодирующего O1L, с помощью полимеразной цепной реакцией (ПЦР) (Cancer Research, 2001, Vol. 61, p. 8751-8757).
[0036]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины штамма LC16mO, дефектным по функциям VGF и O1L.
[0037]
B5R (номер доступа AAA48316.1) представляет собой мембранный белок 1-го типа, присутствующий в оболочке вируса осповакцины, и имеет функцию повышения эффективности инфицирования вирусом, когда вирус инфицирует или передается в соседние клетки или другие участки в организме хозяина. Во внеклеточной области B5R присутствуют 4 структуры, называемые SCR (короткий консенсусный повтор) доменами (Journal of Virology, 1998, Vol. 72, p. 294-302). В одном варианте осуществления в вирусе осповакцины для применения в настоящем изобретении SCR домен(ы) внеклеточной области B5R удален(ы).
[0038]
Делеция домена SCR во внеклеточной области B5R вируса осповакцины включает делецию всех или части 4 SCR доменов во внеклеточной области B5R, и означает, что область гена, кодирующая часть или все 4 SCR домена во внеклеточной области B5R, не экспрессируется, или экспрессируемый белок B5R не имеет части или всех 4 SCR доменов во внеклеточной области. В варианте осуществления, в вирусе осповакцины для применения в настоящем изобретении, удалены 4 SCR домена B5R. В варианте осуществления 4 SCR домена, удаленные в вирусе осповакцины для применения в настоящем изобретении, являются областью во внеклеточной области B5R, соответствующей аминокислотам 22-237 в аминокислотной последовательности, представленной под рег. номером AAA48316.1.
[0039]
Удален ли SCR домен(ы) внеклеточной области B5R или нет в вирусе осповакцины для применения в настоящем изобретении можно определить способом, известным в уровне техники, например, путем подтверждения присутствия SCR домена(ов) с помощью иммунохимического метода при использовании антитела против SCR домена и определения присутствия гена, кодирующего SCR домен(ы), или его размера с помощью ПЦР.
[0040]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины, дефектным по функциям VGF и O1L, и не имеющим SCR домена(ов) внеклеточной области B5R.
[0041]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины штамма LC16mO, дефектным по функциям VGF и O1L и не имеющим SCR домена(ов) внеклеточной области B5R.
[0042]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, и дефектным по функциям VGF и O1L.
[0043]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины штамма LC16mO, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, и дефектным по функциям VGF и O1L.
[0044]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, дефектным по функциям VGF и O1L и не имеющим SCR домена(ов) внеклеточной области B5R.
[0045]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины штамма LC16mO, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, дефектным по функциям VGF и O1L и не имеющим SCR домена(ов) внеклеточной области B5R.
[0046]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и дефектным по функциям VGF и O1L, и предназначен для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12. В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12, и дефектным по функциям VGF и O1L, и предназначен для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7.
[0047]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины штамма LC16mO, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и дефектным по функциям VGF и O1L, и предназначен для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12. В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины штамма LC16mO, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12, и дефектным по функциям VGF и O1L, и предназначен для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7.
[0048]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, дефектным по функциям VGF и O1L, не имеющим SCR домена(ов) внеклеточной области B5R, и предназначенным для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12. В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12, дефектным по функциям VGF и O1L, не имеющим SCR домена(ов) внеклеточной области B5R и предназначенным для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7.
[0049]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины штамма LC16mO, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, дефектным по функциям VGF и O1L, не имеющим SCR домена(ов) внеклеточной области B5R, и предназначенным для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12. В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении является вирусом осповакцины штамма LC16mO, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12, дефектным по функциям VGF и O1L, не имеющим SCR домена(ов) внеклеточной области B5R и предназначенным для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7.
[0050]
IL-7 - секреторный белок, служащий в качестве агониста рецептора IL-7. Согласно некоторым сообщениям, IL-7 способствует выживанию, пролиферации и дифференцировке, например, T-клеток и B-клеток (Current Drug Targets, 2006, Vol. 7, p. 1571-1582). В настоящем изобретении IL-7 включает природный IL-7 и вариант, обладающий его функцией. В одном из вариантов осуществления IL-7 является человеческим IL-7. В настоящем изобретении человеческий IL-7 включает природный человеческий IL-7 и вариант, обладающий его функцией. В одном из вариантов осуществления человеческий IL-7 выбран из группы, состоящей из следующих (1)-(3):
(1) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, показанную под рег. номером NP_000871.1, и обладающий функцией человеческого IL-7,
(2) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, имеющей делецию, замену, вставку и/или добавление 1-10 аминокислот в аминокислотной последовательности, показанной под рег. номером NP_000871.1, и обладающий функцией человеческого IL-7, и
(3) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, обладающую идентичностью 90% или больше с аминокислотной последовательностью, показанной под рег. номером NP_000871.1, и обладающий функцией человеческого IL-7.
Функция человеческого IL-7 в настоящем документе относится к функции, ответственной за выживание, пролиферацию и дифференцировку различных иммунных клеток человека.
[0051]
В варианте осуществления человеческий IL-7, используемый в настоящем изобретении, является полипептидом, состоящим из аминокислотной последовательности, показанной под рег. номером NP_000871.1.
[0052]
IL-12 представляет собой гетеродимер, состоящий из субъединицы p40 IL-12 и α-субъединицы IL-12. Сообщается, что IL-12 обладает функцией активации и индукции дифференцировки T-клеток и NK-клеток (Cancer Immunology Immunotherapy, 2014, Vol. 63, p. 419-435). В настоящем изобретении IL-12 включает природный IL-12 и вариант, обладающий его функцией. В варианте осуществления IL-12 является человеческим IL-12. В настоящем изобретении человеческий IL-12 включает природный человеческий IL-12 и вариант, обладающий его функцией. В варианте осуществления человеческий IL-12, как комбинация субъединицы p40 человеческого IL-12 и α-субъединицы человеческого IL-12, выбран из группы, состоящей из следующих (1)-(3):
(1)
(i-1) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, показанную под рег. номером NP_002178.2, (i-2) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, имеющей делецию, замену, вставку и/или добавление 1-10 аминокислот в аминокислотной последовательности, показанной под рег. номером NP_002178.2, или (i-3) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, обладающую идентичностью 90% или больше с аминокислотной последовательностью, показанной под рег. номером NP_002178.2, и
(ii-1) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, показанную под рег. номером NP_000873.2, (ii-2) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, имеющей делецию, замену, вставку и/или добавление 1-10 аминокислот в аминокислотной последовательности, показанной под рег. номером NP_000873.2, или (ii-3) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, обладающую идентичностью 90% или больше с аминокислотной последовательностью, показанной под рег. номером NP_000873.2, и
обладающий функцией человеческого IL-12,
(2)
(i-1) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, показанной под рег. номером NP_002178.2,
(ii-1) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, показанную под рег. номером NP_000873.2,
(ii-2) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, имеющей делецию, замену, вставку и/или добавление 1-10 аминокислот в аминокислотной последовательности, показанной под рег. номером NP_000873.2, или
(ii-3) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, обладающую идентичностью 90% или больше с аминокислотной последовательностью, показанной под рег. номером NP_000873.2, и
обладающий функцией человеческого IL-12, и,
(3)
(i-1) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, показанную под рег. номером NP_002178.2, (i-2) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, имеющей делецию, замену, вставку и/или добавление 1-10 аминокислот в аминокислотной последовательности, показанной под рег. номером NP_002178, или (i-3) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, обладающую идентичностью 90% или больше с аминокислотной последовательностью, показанной под рег. номером NP_002178.2, и
(ii-1) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, показанной под рег. номером NP_000873.2, и
обладающий функцией человеческого IL-12.
Функция человеческого IL-12 в настоящем документе относится к функции активации и/или индукции дифференцировки T-клеток и NK-клеток. Субъединица p40 IL-12 и α-субъединица IL-12 могут быть непосредственно связаны друг с другом с образованием IL-12. В альтернативе субъединица p40 IL-12 и α-субъединица IL-12 могут быть связаны через линкер.
[0053]
В варианте осуществления человеческий IL-12 для применения в настоящем изобретении является полипептидом, включающим полипептид(ы), состоящий из аминокислотной последовательности, показанной под рег. номером NP_002178.2, и полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, показанной под рег. номером NP_000873.2.
[0054]
В настоящем описании "идентичность" относится к показателю идентичности, полученному в соответствии с EMBOSS Needle (Nucleic Acids Res., 2015, Vol. 43, p. W580-W584) при использовании параметров, установленных по умолчанию. Параметры являются следующими:
Штраф за введение пропуска=10
Штраф за продление пропуска=0,5
Матрица=EBLOSUM62
Штраф за окончание пропуска=нет.
[0055]
Вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении обладает онколитической активностью. Способ оценки того, обладает ли тестируемый вирус онколитической активностью или не обладает, включает способ оценки снижения выживаемости раковых клеток при добавлении вируса. Примеры раковых клеток, используемых для оценки, включают клетки злокачественной меланомы RPMI-7951 (например, ATCC HTB-66), клетки аденокарциномы легкого HCC4006 (например, ATCC CRL-2871), клетки рака легкого A549 (например, ATCC CCL-185), клетки мелкоклеточного рака легкого DMS 53 (например, ATCC CRL-2062), клетки плоскоклеточного рака легкого NCI-H226 (например, ATCC CRL-5826), клетки рака почки Caki-1 (например, ATCC HTB-46), клетки рака мочевого пузыря 647-V (например, DSMZ ACC 414), клетки рака головы и шеи Detroit 562 (например, ATCC CCL-138), клетки рака молочной железы JIMT-1 (например, DSMZ ACC 589), клетки рака молочной железы MDA-MB-231 (например, ATCC HTB-26), клетки рака пищевода OE33 (например, ECACC 96070808), глиобластому U-87MG (например, ECACC 89081402), нейробластому GOTO (например, JCRB JCRB0612), миелому RPMI 8226 (например, ATCC CCL-155), клетки рака яичника SK-OV-3 (например, ATCC HTB-77), клетки рака яичника OVMANA (например, JCRB JCRB1045), клетки рака толстой кишки RKO (например, ATCC CRL-2577), клетки рака толстой кишки HCT 116 (например, ATCC CCL-247), клетки рака поджелудочной железы BxPC-3 (например, ATCC CRL-1687), клетки рака предстательной железы LNCaP клон FGC (например, ATCC CRL-1740), клетки рака печени JHH-4 (например, JCRB JCRB0435), мезотелиому NCI-H28 (например, ATCC CRL-5820), клетки рака шейки матки SiHa (например, ATCC HTB-35) и клетки рака желудка Kato III (например, RIKEN BRC RCB2088).
[0056]
Вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении продуцирует полипептиды IL-7 и/или IL-12 в инфицированной клетке. При использовании вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении продуцируются полипептиды IL-7 и IL-12. В результате такой продукции заметно улучшается противоопухолевый эффект. Продукция IL-7 и IL-12 может быть подтверждена с помощью метода, известного в данной области, например, путем культивирования вируса осповакцины, содержащего полинуклеотиды, каждый из которых кодирует полипептид IL-7 и IL-12, введенные в него, вместе с раковыми клетками, с последующим измерением концентраций IL-7 и IL-12 в супернатанте культуры, проведением иммуноокрашивания клеток или Вестерн-блоттинга клеточного лизата или измерением концентраций IL-7 и IL-2 в клеточном лизате. Концентрации IL-7 и IL-12 могут быть определены, например, при использовании набора для ИФА IL-7 человека (Ray Biotech, Inc.) и ИФА IL-12 человека p70 DuoSet (R&D Systems, Inc.), соответственно. Иммуноокрашивание клеток или Вестерн-блоттинг лизата клеток на IL-7 и IL-12 можно проводить с использованием имеющихся в продаже антитела против IL-7 и антитела против IL-12, соответственно.
[0057]
Соответствующие полинуклеотиды, кодирующие IL-7 и IL-12, могут быть синтезированы в соответствии с методом синтеза полинуклеотидов, известным в уровне техники, на основе общедоступной информации о последовательности. После получения отдельных полинуклеотидов можно получить варианты, обладающие функциями отдельных полипептидов, путем введения мутации в заранее определенный сайт при использовании метода, известного специалистам в данной области, такого как сайт-направленный мутагенез (Current Protocols in Molecular Biology edition, 1987, John Wiley & Sons Section 8.1-8.5).
[0058]
Соответствующие полинуклеотиды, кодирующие IL-7 и IL-12, могут быть введены в вирус осповакцины с помощью гомологичной рекомбинации и сайт-направленного мутагенеза, известных в уровне техники. Например, плазмиду (также называемую трансферной векторной плазмидной ДНК) получают путем введения полинуклеотида(ов) в нуклеотидную последовательность требуемого сайта, который необходимо ввести, и могут вводить в клетки, инфицированные вирусом осповакцины. В одном варианте осуществления область, в которую нужно ввести чужеродные гены, т.е. соответствующие полинуклеотиды, кодирующие IL-7 и IL-12, представляет собой область гена, не существенную для жизненного цикла вируса осповакцины. Например, в одном варианте осуществления область(и) IL-7 и/или IL-12, вводимая в дефектный по функции VGF вирус осповакцины, может быть указана как внутренняя часть гена VGF; область(и) в дефектном по функции O1L вирусе осповакцины может быть указана как внутренняя часть гена O1L, область(и) в вирусе осповакцины, дефектном как по функции VGF, так и по функции O1L, может быть указана как внутренняя гена VGF и/или гена O1L. Как указано выше, чужеродные гены могут быть введены таким образом, чтобы они транскрибировались в таком же или противоположном направлении относительно направления транскрипции генов VGF и O1L.
[0059]
Примеры способа введения трансферной векторной плазмидной ДНК в клетки включают, без конкретного ограничения, кальций-фосфатный метод и метод электропорации.
[0060]
При введении соответствующих полинуклеотидов, кодирующих IL-7 и IL-12, в качестве чужеродных генов подходящие промоторы могут быть функционально связаны в 5'-положении от чужеродных генов. Таким образом, в вирусе осповакцины для применения в настоящем изобретении, чужеродные гены могут быть связаны с промоторами, экспрессируемыми в опухолевых клетках. Примеры этих промоторов включают PSFJ1-10, PSFJ2-16, промотор p7.5K, промотор p11K, промотор T7.10, промотор CPX, промотор HF, промотор H6 и гибридный T7 промотор.
[0061]
В варианте осуществления вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении не имеет маркерного гена для отбора по чувствительности к лекарственному средству.
[0062]
Вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении можно экспрессировать и/или пролиферировать при инфицировании клеток-хозяев вирусом осповакцины и культивировании инфицированных клеток-хозяев. Вирус осповакцины можно экспрессировать и/или пролиферировать в соответствии со способом, известным в уровне техники. Клетки-хозяева, используемые для экспрессии или пролиферации вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении специально не ограничены при условии, что вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении сможет экспрессироваться и пролиферировать в них. Примеры клеток-хозяев включают клетки животных, такие как BS-C-1, A549, RK13, HTK-143, Hep-2, MDCK, Vero, HeLa, CV-1, COS, BHK-21 и первичные клетки почек кролика. В варианте осуществления могут использоваться BS-C-1 (ATCC CCL-26), A549 (ATCC CCL-185), CV-1 (ATCC CCL-70) или RK13 (ATCC CCL-37). Условия культивирования клеток-хозяев, такие как температура, pH среды культивирования и время культивирования, подбирают соответствующим образом.
[0063]
В способе получения вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении, в дополнение к этапам инфицирования клеток-хозяев вирусом осповакцины для применения в настоящем изобретении, культивирование инфицированных клеток-хозяев и экспрессия вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении может быть дополнительно включена стадия сбора, предпочтительно очистки вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении. В качестве способа очистки может использоваться расщепление ДНК бензоназой, центрифугирование в градиенте сахарозы, центрифугирование в градиенте плотности йодиксанола, ультрафильтрация и диафильтрация.
[0064]
<Ингибитор иммунной контрольной точки, который может применяться в настоящем изобретении>
В настоящем изобретении в качестве ингибитора иммунной контрольной точки могут использоваться, например, ингибиторы чекпоинтов, которые блокируют сигнал через PD-1 или ингибиторы чекпоинтов, которые блокируют сигнал через CTLA-4. В качестве ингибитора иммунной контрольной точки может быть указано антитело, которое может нейтрализовать связывание PD-1 с PD-L1 или PD-L2, и антитело, которое может нейтрализовать связывание CTLA-4 с CD80 или CD86. Антитело, нейтрализующее связывание PD-1 с PD-L1, включает антитело против PD-1 и антитело против PD-L1, которое может нейтрализовать связывание PD-1 с PD-L1. Антитело, нейтрализующее связывание PD-1 с PD-L2, включает антитело против PD-1 и антитело против PD-L2, которое может нейтрализовать связывание PD-1 с PD-L2. Антитело, которое может нейтрализовать связывание CTLA-4 с CD80 или CD86, включает антитело против CTLA-4, нейтрализующее связывание CTLA-4 с CD80 или CD86.
[0065]
Примеры ингибиторов иммунных контрольных точек, которые могут применяться в настоящем изобретении, включают, без конкретного ограничения, антитело против PD-1, такое как ниволумаб, пембролизумаб и пидилизумаб; антитело против PD-L1, такое как атезолизумаб, дурвалумаб и авелумаб; антитело против CTLA-4, такое как ипилимумаб, антитело против TIM-3, такое как TSR-022 (WO 2016/161270) и MBG453 (WO 2015/117002); антитело против LAG-3, такое как LAG525 (US 2015/0259420A), антитело против TIGIT, такое как MAB10 (WO 2017/059095), антитело против BTLA, такое как BTLA-8.2 (The Journal of Clinical Investigation, 2010, Vol. 120: No. 1, p.157-167), и антитело против Vista, такое как JNJ-61610588 (WO 2016/207717). Примеры ингибиторов иммунных контрольных точек, которые могут применяться в настоящем изобретении, включают клетки, продуцирующие антигенсвязывающий фрагмент, связывающийся с молекулой иммунной контрольной точки или ее лигандом, вектор, экспрессирующий антигенсвязывающий фрагмент in vivo, и низкомолекулярное соединение, которое подавляет иммуносупрессорный сигнал.
[0066]
В настоящем изобретении вышеуказанный ингибитор иммунной контрольной точки может применяться в комбинации с вирусом осповакцины для применения в настоящем изобретении. Кроме того, в настоящем изобретении вышеуказанный ингибитор иммунной контрольной точки может применяться в комбинации с комбинированным лекарственным препаратом вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении.
[0067]
В варианте осуществления ингибитор иммунной контрольной точки, применяемый в настоящем изобретении, является антителом, выбранным из группы, состоящей из антитела против PD-1, антитела против PD-L1 и антитела против CTLA-4 или их антигенсвязывающего фрагмента.
[0068]
Антитело, нейтрализующее связывание между двумя белками, может быть получено путем получения антител, связывающихся с одним из двух белков, и отбора полученных антител по способности нейтрализовывать связывание между двумя белками. Например, антитело, которое может нейтрализовывать связывание PD-1 с PD-L1, может быть получено путем получения антител, связывающихся с одним из PD-1 и PD-L1, а затем отбора полученного антитела по способности нейтрализовывать связывание PD-1 с PD-L1. Также, например, антитело, которое может нейтрализовывать связывание PD-1 с PD-L2, может быть получено путем получения антител, связывающихся с одним из PD-1 и PD-L2, а затем отбора полученного антитела по способности нейтрализовывать связывание PD-1 с PD-L2. Также, например, антитело, которое может нейтрализовать связывание CTLA-4 с CD80 или CD86, может быть получено путем получения антитела, связывающегося с CTLA-4, а затем отбора полученного антитела по способности нейтрализовывать связывание CTLA-4 с CD80 или CD86. Антитело, связывающееся с белком, может быть получено, например, способом, известным специалистам в данной области. Кроме того, способность антитела нейтрализовывать связывание между двумя белками можно проверять путем иммобилизации одного из двух белков, добавления другого белка в жидкую фазу, и затем проверки, уменьшается ли связывающее количество антитела или нет. Например, к белку, содержащемуся в жидкой фазе, присоединяют метку, и если количество метки уменьшается при добавлении антитела, можно определить, что антитело может нейтрализовывать связывание между двумя белками.
[0069]
PD-1 - белок, называемый programmed cell death-1 или белок программируемой гибели клеток-1, и иногда также называемый PDCD1 или CD279. PD-1, который является мембранным белком из суперсемейства иммуноглобулинов, связывается с PD-L1 или PD-L2, подавляя активацию T-клеток. По-видимому, PD-1 препятствует развитию аутоиммунного заболевания. В раковых клетках PD-L1 экспрессируется на клеточной поверхности и негативно регулирует T-клетки. Благодаря этому раковые клетки избегают атаки T-клеток. В качестве PD-1 указан PD-1 человека (например, PD-1, имеющий аминокислотную последовательность, зарегистрированную под рег. номером NP_005009.1 в Genbank). PD-1 включает PD-1, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую аминокислотной последовательности, зарегистрированной под рег. номером NP_005009.1 в Genbank. В описании используется выражение "аминокислотная последовательность, соответствующая", включающее функционально эквивалентный PD-1, в том числе ортолог и природный PD-1, хотя аминокислотная последовательность не является полностью идентичной.
[0070]
PD-L1 - лиганд PD-1, иногда также называемый B7-H1 или CD274. PD-L1 включает, например, PD-L1 человека (например, PD-L1, имеющий аминокислотную последовательность, зарегистрированную под рег. номером NP_054862.1 в GenBank). PD-L1 включает PD-L1, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую аминокислотной последовательности, зарегистрированной под рег. номером NP_054862.1 в GenBank.
[0071]
PD-L2 - лиганд PD-1, иногда также называемый B7-DC или CD273. PD-L2 включает, например, PD-L2 человека (например, PD-L2, имеющий аминокислотную последовательность, зарегистрированную под рег. номером AAI13681.1 в GenBank). PD-L2 включает PD-L2, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую аминокислотной последовательности, зарегистрированной под рег. номером AAI13681.1.
[0072]
CTLA-4 - мембранный белок из суперсемейства иммуноглобулинов, экспрессирующийся в активированных T-клетках. CTLA-4 аналогичен CD28 и связывается с CD80 и CD86 на антигенпрезентирующих клетках. Известно, что CD28 направляет костимулирующий сигнал T-клеткам; тогда как CTLA-4 передает T-клеткам ингибиторный сигнал. CTLA-4 включает, например, CTLA-4 человека (например, CTLA-4, имеющий аминокислотную последовательность, зарегистрированную под рег. номером AAH74893.1 в GenBank). CTLA-4 включает CTLA-4, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую аминокислотной последовательности, зарегистрированной под рег. номером AAH74893.1.
[0073]
CD80 и CD86 представляют собой мембранные белки из суперсемейства иммуноглобулинов, экспрессируемые на различных гемопоэтических клетках и взаимодействующие с CD28 и CTLA-4 на поверхности T-клеток, как описано выше. CD80 включает, например, CD80 человека (например, CD80, имеющий аминокислотную последовательность, зарегистрированную под рег. номером NP_005182.1 в Genbank). CD80 включает CD80, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую аминокислотной последовательности, зарегистрированной под рег. номером NP_005182.1. CD86 включает, например, CD86 человека (например, CD86, имеющий аминокислотную последовательность, зарегистрированную под рег. номером NP_787058.4 в Genbank). CD86 включает CD86 человека (например, CD86, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую аминокислотной последовательности, зарегистрированной под рег. номером NP_787058.4 в Genbank).
[0074]
<Фармацевтическая композиция и комбинированное лекарственное средство настоящего изобретения>
Согласно настоящему изобретению может быть предложена любая из следующих фармацевтических композиций и комбинированных лекарственных средств (в дальнейшем иногда называемых "фармацевтической композицией и комбинированным лекарственным средством настоящего изобретения").
(a-1) фармацевтическая композиция для применения при лечении рака, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и ингибитор иммунной контрольной точки;
(a-2) фармацевтическая композиция для применения при лечении рака, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, и ингибитор иммунной контрольной точки;
(b-1) фармацевтическая композиция для применения при лечении рака, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и предназначенная для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12, и ингибитор иммунной контрольной точки {где, вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и ингибитор иммунной контрольной точки, может содержаться в одной фармацевтической композиции и отдельно в разных фармацевтических композициях};
(b-2) фармацевтическая композиция для применения при лечении рака, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и предназначенная для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и ингибитор иммунной контрольной точки {где вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и ингибитор иммунной контрольной точки могут содержаться в одной фармацевтической композиции и отдельно в разных фармацевтических композициях};
(b-3) фармацевтическая композиция для применения при лечении рака, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, и предназначенная для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки;
(b-4) фармацевтическая композиция для применения при лечении рака, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и предназначенная для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки;
(b-5) фармацевтическая композиция для применения при лечении рака, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и ингибитор иммунной контрольной точки, и предназначенная для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12;
(b-6) фармацевтическая композиция для применения при лечении рака, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и ингибитор иммунной контрольной точки, и предназначенная для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7;
(b-7) фармацевтическая композиция для применения при лечении рака, содержащая ингибитор иммунной контрольной точки, и предназначенная для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12;
(b-8) фармацевтическая композиция для применения при лечении рака, содержащая ингибитор иммунной контрольной точки, и предназначенная для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12 {где вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, могут содержаться в одной фармацевтической композиции и отдельно в разных фармацевтических композициях};
(c-1) комбинированное лекарственное средство для применения при лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки;
(c-2) комбинированное лекарственное средство для применения при лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки;
(c-3) комбинированное лекарственное средство для применения при лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки;
(c-4) комбинированное лекарственное средство для применения при лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и ингибитор иммунной контрольной точки и фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12;
(c-5) комбинированное лекарственное средство для применения при лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и ингибитор иммунной контрольной точки и фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7;
(d-1) комбинированное лекарственное средство для применения при лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки;
(d-2) комбинированное лекарственное средство для применения при лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки, и предназначенное для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12;
(d-3) комбинированное лекарственное средство для применения при лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки, и предназначенное для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7.
[0075]
В варианте осуществления фармацевтическая композиция настоящего изобретения является фармацевтической композицией для применения при лечении рака, содержащей вирус осповакцины в качестве активного ингредиента, в которой вирус осповакцины представляет собой:
(1) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12; или
(2) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, и
для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки.
[0076]
В варианте осуществления комбинированное лекарственное средство настоящего изобретения представляет собой комбинированное лекарственное средство для применения при лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и предназначенное для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки.
[0077]
В варианте осуществления комбинированное лекарственное средство настоящего изобретения представляет собой комбинированное лекарственное средство для применения при лечении рака, содержащее фармацевтическую композицию настоящего изобретения, содержащую вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении или комбинированном лекарственном средстве настоящего изобретения, и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки.
[0078]
В варианте осуществления фармацевтическая композиция настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию для применения при лечении рака, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки, и предназначенную для применения в комбинации с фармацевтической композицией настоящего изобретения, содержащей вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении или комбинированном лекарственном средстве настоящего изобретения.
[0079]
В фармацевтической композиции и комбинированном лекарственном средстве настоящего изобретения, в том случае, если субъектом является человек, в качестве IL-7 и IL-12 могут использоваться человеческий IL-7 и человеческий IL-12, соответственно. Если субъектом является человек, и антитело используется в качестве ингибитора иммунной контрольной точки, антитело предпочтительно является антителом против человеческого белка и может быть человеческим химерным антителом, гуманизированным антителом или человеческим антителом. Комбинированное лекарственное средство настоящего изобретения может поставляться в виде набора (также называемого "комбинированным набором"), состоящего из одной упаковки, содержащей компоненты, т.е. фармацевтические композиции.
[0080]
Фармацевтическая композиция или комбинированное лекарственное средство настоящего изобретения могут дополнительно содержать фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
[0081]
Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть изготовлена при использовании вспомогательного вещества, обычно используемого в данной области, т.е. фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества и фармацевтически приемлемого носителя, в соответствии с обычно используемым способом. Лекарственная форма фармацевтической композиции может включать, например, средство для парентерального применения, такое как средство для инъекций и инфузий, которое могут вводить внутривенно, подкожно или интратуморально. При изготовлении лекарственного препарата, например, вспомогательное вещество, носитель или добавки могут использоваться в соответствии с лекарственной формой и в фармацевтически приемлемом диапазоне. Фармацевтическая композиция и комбинированный набор настоящего изобретения могут быть представлены в виде лиофилизированного препарата. Лиофилизированный препарат может быть представлен вместе с водой для инъекций.
[0082]
Эффективная доза вируса осповакцины для применения в настоящем изобретении изменяется в зависимости от степени симптома и возраста пациента, используемой лекарственной формы препарата или титра вируса; например, в качестве эффективной дозы одного вируса, в частности, суммарной эффективной дозы двух типов вирусов, содержащихся в комбинированном наборе, или суммарной эффективной дозы двух типов вирусов, вводимых в комбинации, может использоваться бляшкообразующая единица (БОЕ) приблизительно 102-1010.
Отношение дозировок двух типов вирусов, которые могут использоваться в комбинированном наборе, составляют, например, приблизительно 1:10-10:1, приблизительно 1:5-5:1, приблизительно 1:3-3:1, приблизительно 1:2-2:1 или приблизительно 1:1.
[0083]
<Применение в профилактике или терапии рака >
Фармацевтическая композиция и комбинированное лекарственное средство настоящего изобретения могут применяться для лечения рака, например, солидного рака, например, но без ограничения, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка.
[0084]
В настоящем изобретении предложен способ лечения рака у субъекта (например, пациента), нуждающегося в этом, включающий введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей вирус осповакцины для применения в настоящем изобретении и ингибитор иммунной контрольной точки, где рак представляет собой, например, солидный рак, например, но без ограничения, рак, выбранный из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка.
[0085]
В варианте осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения рака у субъекта (например, пациента), нуждающегося в этом, включающий введение субъекту следующих (1), (2) и (3), где рак представляет собой, например, солидный рак, например, но без ограничения, рак, выбранный из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка:
(1) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7;
(2) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12; и
(3) ингибитора иммунной контрольной точки.
Вирусы осповакцины (1) и (2) и ингибитор иммунной контрольной точки (3) могут вводить субъекту в комбинации или отдельно. Когда вирусы осповакцины (1) и (2) и ингибитор иммунной контрольной точки (3) вводят отдельно, их могут вводить одновременно или последовательно. Когда вирусы осповакцины (1) и (2) и ингибитор иммунной контрольной точки (3) вводят последовательно, их могут вводить непрерывно или с перерывом. В варианте осуществления вводят вирусы осповакцины, а затем вводят ингибитор иммунной контрольной точки. Вирусы осповакцины могут вводить, например, интратуморально, внутривенно или внутрибрюшинно. Ингибитор иммунной контрольной точки могут вводить интратуморально, внутривенно или внутрибрюшинно.
[0086]
В варианте осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения рака у субъекта (например, пациента), нуждающегося в этом, включающий введение субъекту следующих (1) и (2), где рак представляет собой, например, солидный рак, например, но без ограничения, рак, выбранный из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка:
(1) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12; и
(2) ингибитора иммунной контрольной точки.
Вирус осповакцины (1) и ингибитор иммунной контрольной точки (2) могут вводить субъекту в комбинации или отдельно. Когда вирус осповакцины (1) и ингибитор иммунной контрольной точки (2) вводят отдельно, их могут вводить одновременно или последовательно. Когда вирус осповакцины (1) и ингибитор иммунной контрольной точки (2) вводят последовательно, их могут вводить непрерывно или с перерывом. В варианте осуществления вводят вирус осповакцины, а затем вводят ингибитор иммунной контрольной точки.
[0087]
В настоящем изобретении предложен вирус осповакцины и/или ингибитор иммунной контрольной точки, применяемый в настоящем изобретении для применения при лечении рака, например, солидного рака, например, но без ограничения, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка.
[0088]
В варианте осуществления настоящего изобретения предложен вирус осповакцины, выбранный из следующих (1)-(4), для применения при лечении рака, например, солидного рака, например, но без ограничения, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка.
(1) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, предназначенного для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12, и ингибитором иммунной контрольной точки;
(2) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, предназначенного для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и ингибитором иммунной контрольной точки;
(3) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, предназначенного для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки; и
(4) комбинации вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, предназначенной для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки.
[0089]
В варианте осуществления настоящего изобретения предложен ингибитор иммунной контрольной точки для применения при лечении рака, например, солидного рака, например, но без ограничения, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка, и
предназначенный для применения в комбинации с:
(1) вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12; или
(2) вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12.
[0090]
В настоящем изобретении также предложено применение вируса осповакцины, выбранного из следующих (1)-(4), для производства фармацевтической композиции или комбинированного лекарственного средства настоящего изобретения для применения при лечении рака, например, солидного рака, например, но без ограничения, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка:
(1) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, предназначенного для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12, и ингибитором иммунной контрольной точки;
(2) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, предназначенного для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и ингибитором иммунной контрольной точки;
(3) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, предназначенного для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки; и
(4) комбинации вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, предназначенной для применения в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки.
[0091]
В настоящем изобретении также предложено применение ингибитора иммунной контрольной точки для изготовления фармацевтической композиции или комбинированного лекарственного средства настоящего изобретения для применения при лечении рака, например, солидного рака, например, но без ограничения, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка, где фармацевтическая композиция или комбинированное лекарственное средство:
(1) предназначены для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12;
(2) предназначены для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12;
(3) содержат вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и предназначены для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-12; или
(4) содержат вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и предназначены для применения в комбинации с вирусом осповакцины, содержащим полинуклеотид, кодирующий IL-7.
[0092]
В настоящем изобретении также предложено применение по меньшей мере одного или всех, выбранных из группы, состоящей из вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, и иммунной контрольной точки, в производстве комбинированного лекарственного средства для применения при лечении рака, например, солидного рака, например, но без ограничения, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка, содержащего фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки.
[0093]
В настоящем изобретении также предложено применение по меньшей мере одного или всех, выбранных из группы, состоящей из вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, и ингибитора иммунной контрольной точки, для производства комбинированного лекарственного средства для применения при лечении рака, например, солидного рака, например, но без ограничения, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка, содержащего фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки.
[0094]
В настоящем описании "для профилактики" используется в том же смысле, что и "для применения в профилактике", и "для лечения" используется в том же смысле, что и "для применения в лечении".
[0095]
Фармацевтическая композиция или комбинированное лекарственное средство настоящего изобретения могут применяться в комбинации с другими различными терапевтическими средствами, эффективными при раке, например, солидном раке, например, но без ограничения, раке, выбранном из группы, состоящей из злокачественной меланомы, рака легкого, аденокарциномы легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичника, рака толстой и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка. Другие различные терапевтические средства могут быть неиммунотерапевтическими лекарственными средствами. Комбинированное применение может включать одновременное введение, раздельное и непрерывное введение, раздельное введение с требуемым интервалом времени. В случае одновременного введения фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может быть комбинированным препаратом или комбинацией отдельных препаратов.
[0096]
Рак, подлежащий лечению согласно настоящему изобретению, включает метастатические опухоли в органах, за исключением органа, содержащего первичный очаг, такого как лимфатический узел и печень. Таким образом, в настоящем изобретении субъект, имеющий метастатический рак, также включен в понятие субъект.
[0097]
<Порядок введения вируса осповакцины и ингибитора иммунной контрольной точки>
В настоящем изобретении вирус осповакцины и ингибитор иммунной контрольной точки могут вводить одновременно или непрерывно, или последовательно.
[0098]
В варианте осуществления начинают введение вируса осповакцины субъекту, имеющему рак, и после этого начинают введение ингибитора иммунной контрольной точки. В варианте осуществления начинают введение ингибитора иммунной контрольной точки субъекту, имеющему рак, и после этого начинают введение вируса осповакцины.
[0099]
В варианте осуществления завершают введение вируса осповакцины субъекту, имеющему рак, и после этого завершают введение ингибитора иммунной контрольной точки. В варианте осуществления завершают введение ингибитора иммунной контрольной точки субъекту, имеющему рак, и после этого завершают введение вируса осповакцины.
[0100]
В варианте осуществления вирус осповакцины и ингибитор иммунной контрольной точки могут вводить субъекту, имеющему рак, в соответствии со схемой применения, включающей курс введения доз. В одном варианте осуществления, по меньшей мере в одном курсе введения доз или во всех курсах введения доз, начинают введение вируса осповакцины субъекту, имеющему рак, и после этого могут начинать введение ингибитора иммунной контрольной точки. В одном варианте осуществления, по меньшей мере в одном курсе введения доз или во всех курсах введения доз, завершают введение вируса осповакцины субъекту, имеющему рак, и после этого могут начинать введение ингибитора иммунной контрольной точки. В одном варианте осуществления, по меньшей мере в одном курсе введения доз или во всех курсах введения доз, начинают введение ингибитора иммунной контрольной точки субъекту, имеющему рак, и после этого могут начинать введение вируса осповакцины. В одном из вариантов осуществления, по меньшей мере в одном курсе введения доз или во всех курсах введения доз, завершают введение ингибитора иммунной контрольной точки субъекту, имеющему рак, и после этого могут начинать введение вируса осповакцины.
[0101]
В настоящем изобретении, если вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, являются разными, вирусы осповакцины могут вводить одновременно, непрерывно или последовательно. Кроме того, в этом варианте осуществления порядок введения вируса осповакцины и ингибитора иммунной контрольной точки может быть определен в соответствии с порядком введения, указанным выше.
[0102]
Настоящее изобретение было описано в общем виде. Для дальнейшего понимания изобретения Примеры будут описаны для справки; однако они представлены только с целью иллюстрации и не ограничивают настоящее изобретение.
Примеры
[0103]
(Пример 1: Противоопухолевое действие у опухоленесущей мыши при использовании комбинации генетически модифицированного вируса осповакцины и другой противоопухолевой терапии)
[0104]
В качестве генетически модифицированного вируса осповакцины был выбран и использован вирус осповакцины (LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-IL7), содержащий полинуклеотиды, кодирующие IL-12 (IL12) и IL-7 (IL7) (далее именуемый "IL12 и IL7 интегрированный вирус осповакцины"), описанный в WO2017/209053 (Пример 2), чтобы полинуклеотиды могли экспрессироваться. В качестве терапии рака иммунотерапия рака, в частности иммунотерапия рака с применением ингибитора иммунного чекпоинта, была выбрана и использована в комбинации с вирусом осповакцины, указанным выше. В качестве ингибитора иммунного чекпоинта использовали антитело против мышиного PD-1 и антитело против мышиного CTLA-4.
[0105]
Эффект индукции полной ремиссии в результате комбинированного применения антитела против PD-1 или антитела против CTLA-4 оценивали при использовании мышей (мышей-опухоленосителей), которым подкожно пересаживали линию сингенных мышиных раковых клеток в левую и правую латеральную область живота.
[0106]
В частности, сначала в каждую левую и правую латеральную область живота мышей BALB/c (самцов возрастом 5-6 недель, Charles River Laboratories Japan, Inc.) подкожно пересаживали по 50 мкл клеток рака толстой кишки мыши CT26.WT (ATCC CRL-2638), подготовленных в PBS при плотности 1×107 клеток/мл. В день 7 после подкожной трансплантации раковых клеток диаметр опухолей измеряли штангенциркулем. Мышей делили на следующие 6 групп, чтобы средний объем опухоли (малый диаметр мм × малый диаметр мм × большой диаметр мм × 0,52) составлял от 24 до 29 мм3 на стороне введения вируса (правая латеральная область живота) и от 24 до 26 мм3 на стороне введения вируса (левая латеральная область живота: удаленно расположенная опухоль).
[0107]
Группа введения:
1) группа введения растворителя;
2) группа введения одного средства с введением только антитела против PD-1;
3) группа введения одного средства с введением только антитела против CTLA-4;
4) группа введения одного средства с введением только IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины;
5) группа комбинированного введения с введением IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины и антитела против PD-1; и
6) группа комбинированного введения с введением IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины и антитела против CTLA-4.
[0108]
В группе введения растворителя по 30 мкл растворителя (30 мМ Трис-HCl, 10% сахарозы) вводили в опухоль в правой латеральной области живота мыши в День 1, День 3 и День 6 после распределения в группы. В группе введения одного средства с введением только IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины, в группе комбинированного введения IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины и антитела против PD-1 и в группе комбинированного введения IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины и антитела против CTLA-4 по 30 мкл IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины, разведенного растворителем до концентрации 6,7×108 БОЕ/мл, вводили (2×107 БОЕ) в опухоль в правой латеральной области живота мышей в День 1, День 3 и День 6 после распределения в группы.
В группе введения одного средства с введением только антитела против PD-1, в группе введения одного средства с введением только антитела против CTLA-4, в группе комбинированного введения IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины и антитела против PD-1 и в группе комбинированного введения IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины и антитела против CTLA-4 вводили антитело против PD-1 (RMP1-14) (BE0146, Bio X Cell) разведенное в PBS до концентрации 1 мг/мл, или антитело против CTLA-4 (9D9) (BE0164, Bio X Cell), разведенное в PBS до концентрации 2 мг/мл, внутрибрюшинно в количестве 100 мкл, в День 6 и последующие дни после распределения в группы, два раза в неделю. Антитело против PD-1 (RMP1-14) может нейтрализовать связывание между PD-1 с PD-L1 и PD-1 с PD-L2, и может блокировать передачу сигнала через PD-1. Кроме того, антитело против CTLA-4 (9D9) может блокировать передачу сигнала через CTLA-4. В группе введения растворителя и в группе введения одного IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины по 100 мкл PBS вводили внутрибрюшинно, два раза в неделю, в День 6 и последующие дни после распределения в группы. Диаметр опухолей, присутствующих в левой и правой боковой области живота измеряли с помощью штангенциркуля два раза в неделю для вычисления объемов опухоли. Если при последнем обследовании, в День 37 после распределения в группы, при пальпации опухоль не обнаруживали, такой случай определяли как полную ремиссию (CR), при этом подсчитывали количество случаев полной ремиссии.
[0109]
В результате, как показано на верхних панелях ФИГ. 1, в отношении опухолей в правой латеральной области живота (сторона введения вируса), полная ремиссия была достигнута в 9 из 10 случаев в группе введения одного средства с введением только IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины; в 10 из 10 случаев в группе комбинированного введения IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины и антитела против PD-1; и в 9 из 10 случаев в группе комбинированного введения IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины и антитела против CTLA-4. Противоопухолевое действие, по-видимому, не наблюдалось в группе введения одного антитела против PD-1 и в группе введения одного антитела против CTLA-4 по сравнению с группой введения растворителя.
[0110]
В отличие от этого, как показано на нижних панелях ФИГ. 1, в отношении опухолей в левой латеральной области живота (сторона, в которую не вводили вирус), полная ремиссия была достигнута в только одном из 10 случаев в группе введения одного IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины; в 6 из 10 случаев в группе комбинированного введения IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины и антитела против PD-1; и в 4 из 10 случаев в группе комбинированного введения IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины и антитела против CTLA-4.
[0111]
На основе результатов, полученных в модели на мышах-опухоленосителях, было обнаружено, что комбинированное введение IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины с антителом против PD-1 и комбинированное введение IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины с антителом против CTLA-4 обладает превосходным противоопухолевым действием по сравнению с введением одного антитела против PD-1 и введением одного антитела против CTLA-4; и обладает высоким эффектом индукции полной ремиссии также на опухоли (удаленно расположенной опухоли), расположенной удаленно от участка введения вируса осповакцины, по сравнению с введением одного антитела против PD-1, одного антитела против CTLA-4 и одного IL12 и IL7-несущего вируса осповакцины.
[0112]
Промышленная применимость
Ожидается, что терапия рака с применением комбинации вируса осповакцины с ингибитором иммунной контрольной точки, применяемая в настоящем изобретении, и фармацевтическая композиция и комбинированное лекарственное средство, которые будут применяться для такой терапии, можно будет применять для предотвращения или лечения различных форм рака.
Claims (21)
1. Комбинированное лекарственное средство для применения в лечении рака, содержащее: фармацевтическую композицию, содержащую в качестве активного ингредиента вирус осповакцины, где вирус осповакцины представляет собой:
(1) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12); или
(2) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12),
и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор иммунной контрольной точки.
2. Комбинированное лекарственное средство по п.1, где вирус осповакцины представляет собой вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12.
3. Комбинированное лекарственное средство по п.1 или 2, где вирус осповакцины является дефектным по функциям факторов роста вируса осповакцины (VGF) и O1L.
4. Комбинированное лекарственное средство по п.3, где вирус осповакцины не имет домена SCR (короткий консенсусный повтор) во внеклеточной области B5R.
5. Комбинированное лекарственное средство по любому из пп.1-4, где вирус осповакцины является вирусом осповакцины штамма LC16mO.
6. Комбинированное лекарственное средство по любому из пп.1-5, где ингибитором иммунной контрольной точки является антитело, выбранное из группы, состоящей из антитела против PD-1, антитела против PD-L1 и антитела против CTLA-4 или их антигенсвязывающего фрагмента.
7. Комбинированное лекарственное средство по любому из пп.1-6, где рак представляет собой солидный рак.
8. Комбинированное лекарственное средство по любому из пп.1-7, где рак представляет собой метастатический рак.
9. Способ лечения рака, включающий введение ингибитора иммунной контрольной точки и вируса осповакцины, где вирус осповакцины представляет собой:
(1) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12); или
(2) вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7), и полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12).
10. Способ лечения рака по п.9, где вирус осповакцины представляет собой вирус осповакцины, включающий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12.
11. Способ лечения рака по п.9 или 10, где вирус осповакцины является дефектным по функциям факторов роста вируса осповакцины (VGF) и O1L.
12. Способ лечения рака по п.11, где вирус осповакцины не имет домена SCR (короткий консенсусный повтор) во внеклеточной области B5R.
13. Способ лечения рака по любому из пп.9-12, где вирус осповакцины является вирусом осповакцины штамма LC16mO.
14. Способ лечения рака по любому из пп.9-13, где ингибитором иммунной контрольной точки является антитело, выбранное из группы, состоящей из антитела против PD-1, антитела против PD-L1 и антитела против CTLA-4 или их антигенсвязывающего фрагмента.
15. Способ лечения рака по любому из пп.9-14, где рак представляет собой солидный рак.
16. Способ лечения рака по любому из пп.9-15, где рак представляет собой метастатический рак.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018-179632 | 2018-09-26 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2021111399A RU2021111399A (ru) | 2022-10-26 |
RU2788874C2 true RU2788874C2 (ru) | 2023-01-25 |
Family
ID=
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016205429A1 (en) * | 2015-06-15 | 2016-12-22 | New York University | Method of treatment using oncolytic viruses |
WO2017209053A1 (ja) * | 2016-05-30 | 2017-12-07 | アステラス製薬株式会社 | 新規な遺伝子組換えワクシニアウイルス |
WO2018111902A1 (en) * | 2016-12-12 | 2018-06-21 | Multivir Inc. | Methods and compositions comprising viral gene therapy and an immune checkpoint inhibitor for treatment and prevention of cancer and infectious diseases |
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016205429A1 (en) * | 2015-06-15 | 2016-12-22 | New York University | Method of treatment using oncolytic viruses |
WO2017209053A1 (ja) * | 2016-05-30 | 2017-12-07 | アステラス製薬株式会社 | 新規な遺伝子組換えワクシニアウイルス |
WO2018111902A1 (en) * | 2016-12-12 | 2018-06-21 | Multivir Inc. | Methods and compositions comprising viral gene therapy and an immune checkpoint inhibitor for treatment and prevention of cancer and infectious diseases |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
MCCLOSKEY C. W. et al. Ovarian cancer immunotherapy: preclinical models and emerging therapeutics // Cancers. - 2018. - Vol. 10. - No. 8. - Art. 244. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7077377B2 (ja) | 免疫チェックポイントモジュレーターの発現用腫瘍溶解性ウイルス | |
JP7146852B2 (ja) | 腫瘍溶解性ウイルスと免疫チェックポイントモジュレーターとの組合せ | |
TW201825511A (zh) | 表現免疫檢查點調節子的溶瘤病毒 | |
US11638730B2 (en) | Cancer therapy by combination use of oncolytic vaccinia virus and immune checkpoint inhibitor, and pharmaceutical composition and combination medicine for use in the cancer therapy | |
TW202108629A (zh) | 用於t細胞活化之抗體 | |
CN113164538A (zh) | 修饰的溶瘤病毒、其组合物和用途 | |
US20220290179A1 (en) | Genetically engineered oncolytic vaccinia viruses and methods of uses thereof | |
US20220041723A1 (en) | Novel antibodies and nucleotide sequences, and uses thereof | |
RU2788874C2 (ru) | Терапия рака путем комбинированного применения онколитического вируса осповакцины и ингибитора иммунной контрольной точки и фармацевтическая композиция и комбинированное лекарственное средство для применения в терапии рака | |
TWI817159B (zh) | 重組牛痘病毒 | |
JP7484717B2 (ja) | 腫瘍溶解性ワクシニアウイルスと免疫チェックポイント阻害剤との併用によるがん療法並びにこれに用いるための医薬組成物及び組合せ医薬 | |
CN106963950B (zh) | 用于***的联合用药物 | |
WO2023274355A1 (zh) | 改造的间充质干细胞和免疫效应细胞联合*** | |
TW202321458A (zh) | 新穎抗體組合及其用途 | |
KR20240067076A (ko) | 항체의 신규 조합 및 이의 용도 |