RU2613417C1 - Способ укрепления бельма роговицы в эксперименте - Google Patents
Способ укрепления бельма роговицы в эксперименте Download PDFInfo
- Publication number
- RU2613417C1 RU2613417C1 RU2016104639A RU2016104639A RU2613417C1 RU 2613417 C1 RU2613417 C1 RU 2613417C1 RU 2016104639 A RU2016104639 A RU 2016104639A RU 2016104639 A RU2016104639 A RU 2016104639A RU 2613417 C1 RU2613417 C1 RU 2613417C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cornea
- corneal
- medicine
- experiment
- implant
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
- A61F2/02—Prostheses implantable into the body
- A61F2/14—Eye parts, e.g. lenses, corneal implants; Implanting instruments specially adapted therefor; Artificial eyes
Landscapes
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в экспериментальной медицине в целях укрепления тканей бельма на различных этапах кератопротезирования. У экспериментальных животных производят разрез роговицы концентрично лимбу. Формируют роговичный интрастромальный карман, в который вводят имплантат в виде диска, диаметром 9-12 мм и толщиной 0,2-0,5 мм, состоящий из 4-5 мг коллагена I типа и 100-300 мкг фактора роста rhBMP-2. Способ позволяет повысить биомеханические свойства роговицы в эксперименте, создать благоприятную почву для дальнейшего кератопротезирования, что приводит к уменьшению операционных и послеоперационных осложнений при лечении ожоговых бельм роговицы. 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в экспериментальной медицине в целях укрепления тканей бельма на различных этапах кератопротезирования.
Известен способ укрепления бельма роговицы аутохрящем ушной раковины [Краснов М.М. и др. Офтальмологический журнал. 1978, №7, с. 392-394].
Известен способ укрепления бельма роговицы аутонадкостницей большеберцовой кости [Волков В.В., Ушаков Н.А. в кн. «Вопросы восстановительной офтальмологии». Л., 1972, с. 37].
Недостатками этих способов являются необходимость в предварительном заборе аутологичных тканей и возникающие сложности при моделировании имплантата, а также слабые адаптационные возможности материала и его лизис в послеоперационном периоде.
Наиболее близким аналогом является способ подготовки ожогового бельма роговицы к кератопротезированию с использованием эквивалента хрящевой ткани [Перспективы использования тканеинженерной конструкции на основе культивированных аутологичных хондроцитов на этапах подготовки бельма к кератопротезированию. / Р.А. Гундорова, Е.В. Киселева, П.В. Макаров, Ю.А. Капитонов, Т.А. Канукова. // Российский офтальмологический журнал. - 2014. - Т. 7. - №3. - С. 65-70].
Недостатком данного способа является необходимость в заборе аутологичных клеток и их последующее культивирование, что требует проведения дополнительной операции и не дает возможности приступить к лечению в кратчайшие сроки. Также не решена проблема лизиса используемого имплантата и его большая толщина, усложняющая проведение операции.
Задачей изобретения является повышение биомеханических свойств роговицы в эксперименте и стабилизация полученного функционального эффекта в течение длительного времени.
Техническим результатом, достигаемым при использовании изобретения, является создание благоприятной почвы для дальнейшего кератопротезирования, что приводит к уменьшению операционных и послеоперационных осложнений при лечении ожоговых бельм роговицы.
Технический результат достигается тем, что в способе укрепления бельма роговицы в эксперименте, включающем использование имплантата, изготовленного из коллагена, согласно изобретению, у экспериментальных животных производят разрез роговицы концентрично лимбу, затем формируют роговичный интрастромальный карман, в который вводят имплантат в виде диска, диаметром 9-12 мм и толщиной 0,2-0,5 мм, состоящий из 4-5 мг коллагена I типа и 100-300 мкг фактора роста rhBMP-2. Биодеградация коллагена активирует находящийся в нем фактор роста, под воздействием которого происходит перестройка окружающих тканей. BMP (bone morphogenetic protein) - это плейотропные ростовые факторы, принадлежащие к суперсемейству β-трансформирующего фактора роста (TGF-β).
BMP регулируют три ключевые фазы остеогенеза: хемотаксис, митоз, дифференцировку. Также BMP регулируют гематопоэз, стимулируют синтез внеклеточного матрикса, влияют на поддержание жизнеспособности клеток. Укрепление бельма с помощью фактора роста rhBMP-2 позволяет надолго повысить биомеханические характеристики роговицы, восполнить дефицит ткани в случае истонченных бельм, повысить устойчивость тканей к ишемизации.
Таким образом, предложенный способ укрепления бельма по сравнению с существующими аналогами позволяет отказаться от использования трансплантатов из аутологичных тканей и успешно препятствовать развитию осложнений, таких как протрузия кератопротеза, за счет увеличения прочностных свойств исходных тканей самого бельма, образования новой соединительной ткани и улучшения обменных процессов, протекающих в бельме.
Способ прост в исполнении, не требует дорогостоящей аппаратуры и препаратов, может быть использован в экспериментальной медицине при разработке оперативных методов лечения ожоговых бельм.
Способ осуществляется следующим образом
В 4-5 мг/мл водного раствора коллагена I типа (производство фирмы «ИМТЕК», Москва) добавляли от 100 мкг до 300 мкг фактора роста rhBMP-2. Затем полученный гидрогель разливали в лунки 24-луночного планшета по 1,0 мл. Для формирования геля полученную смесь инкубировали при +37°C в течение 30 минут. Образованные коллагеновые гидрогели, извлеченные из планшета, отмывали в 500 мл фосфатного буферного раствора Рингера-Кребса при комнатной температуре в течение 24 часов, с заменой раствора каждые 8 часов. Далее гели выкладывали на поверхность и сушили их до полного высыхания потоком воздуха при +37°C. Полученные пленки регидратировали, высушивали, получая, таким образом, имплантат в виде, например, диска диаметром 9-12 мм и толщиной 0,2-0,5 мм.
Испытание проводилось на кроликах породы шиншилла весом 2,0-2,5 кг. Под общей и капельной анестезией производился разрез роговицы протяженностью 5 мм на 3/5 ее глубины концентрично лимбу. В данной плоскости формировали роговичный интраламеллярный карман, в который вводили заявленный имплантат. На разрез накладывались швы. У животных оперировали один глаз для сохранения ориентации в окружающем пространстве.
Предложенным способом было проведено укрепление бельма роговицы на 18 кроликах-самцах породы «шиншилла» с исходной массой тела 2,0-2,5 кг. Моделирование ожогового бельма проводилось за 6 месяцев до операции, на левом глазу животных путем аппликации на роговицу кролика хлопчатобумажного диска диаметром 10 мм, пропитанного 10% NaOH в течение 7 секунд, правый глаз был контрольным.
Клиническую оценку состояния глаз животных проводили по степени воспалительной реакции, васкуляризации роговицы (Ченцова Е.В., 1996), интенсивности помутнения роговицы (Войно-Ясенецкий В.В., 1953). Наблюдаемые изменения регистрировались путем фотографирования на фотощелевой лампе фирмы «Opton» (Германия).
Результаты эксперимента оценивали на предмет морфологии и биомеханики.
Пример 1
Кролику-самцу породы шиншилла, массой 3,5 кг, оперировали правый глаз. Выполняли ретробульбарную блокаду 0,5% новокаином. Производился разрез роговицы протяженностью 5 мм на 2/3 ее глубины концентрично лимбу. В данной плоскости при помощи расслаивателя формировали роговичный интрастромальный карман «от лимба до лимба». При помощи пинцета для завязывания и шпателя вводили имплантат, в виде диска диаметром 9 мм и толщиной 0,5 мм, состоящий из 4 мг коллагена I типа и 100 мкг фактора роста rhBMP-2 в полость сформированного кармана. На разрез накладывались швы. По окончании операции производили подконъюнктивальную инъекцию гентамицина сульфата 1,0% в объеме 0,5 мл. Далее в течение одной недели инстиллировали окомистин по 1 капле 2 раза в день.
Клиническую оценку состояния глаз животных проводили по степени воспалительной реакции, васкуляризации роговицы (Ченцова Е.В., 1996), интенсивности помутнения роговицы (Войно-Ясенецкий В.В., 1953). Наблюдаемые изменения регистрировались путем фотографирования на фотощелевой лампе фирмы «Opton» (Германия).
Результаты экспериментов оценивали морфологически. Роговую оболочку вырезали по окружности лимба, а затем фиксировали ее в формалине в течение суток. Полученный диск роговицы разрезали пополам, перпендикулярно по отношению к сосудам. Оба фрагмента обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заливали в парафин. Срезы толщиной 8-10 мкм изготавливали на микротоме и окрашивали гематоксилином и эозином. Исследование срезов роговицы проводили под световым микроскопом при 16- и 40-кратном увеличении.
Для исследования биомеханических характеристик роговую оболочку вырезали по окружности, захватывая при этом участок склеры, отступая 3 мм от лимба. Для чистоты эксперимента использовали свежевыкроенные ткани животных, полученные непосредственно перед проведением исследования. Полученный диск роговицы зажимали между двух металлических пластин с отверстием в центре, соответствующем диаметру роговицы, таким образом, чтобы фиксация происходила за ткань склеры, а роговица была интактной. Готовую конструкцию опускали в физиологический раствор, чтобы препятствовать высыханию тканей во время исследования. Оценку биомеханических свойств проводили при помощи исследования тканей на прокол на разрывных машинах фирмы «Instron».
В раннем послеоперационном периоде отмечено наличие незначительного отека роговицы. Отек был слабо выражен и обусловлен, по всей видимости, наличием операционной травмы. Клинических признаков острого инфекционного поражения окружающих тканей при осмотре не обнаружено. На 9-й день отмечалось появление новообразованных сосудов эксцентрично лимбу, с последующим нарастанием их числа и увеличением калибра сосудов. На 34-й день отмечалась стойкая стабилизация клинической картины. Через 2 месяца клинически значимых изменений не отмечалось. К концу периода наблюдения (90 дней) у кролика наблюдалась васкуляризация и утолщение тканей роговицы до 0,6 мм. Гистологическое исследование области трансплантата показало его частичное разволокнение и замещение новообразованной соединительной тканью, местами в него врастают сосуды. Роговица значительно утолщена. Исследование биомеханических свойств показало повышение прочностных характеристик тканей в 4,5 раза.
Пример 2
Кролику-самцу породы шиншилла, массой 3,5 кг, оперировали правый глаз. Выполняли ретробульбарную блокаду 0,5% новокаином. Производился разрез роговицы протяженностью 5 мм на 2/3 ее глубины концентрично лимбу. В данной плоскости при помощи расслаивателя формировали роговичный интрастромальный карман «от лимба до лимба». При помощи пинцета для завязывания и шпателя вводили имплантат, в виде диска диаметром 12 мм и толщиной 0,2 мм, состоящий из 5 мг коллагена I типа и 300 мкг фактора роста rhBMP-2 в полость сформированного кармана. На разрез накладывались швы. По окончании операции производили подконъюнктивальную инъекцию гентамицина сульфата 1,0% в объеме 0,5 мл. Далее в течение одной недели инстиллировали окомистин по 1 капле 2 раза в день.
Клиническую оценку состояния глаз животных, морфологические исследования и оценку биомеханических характеристик проводили согласно примеру 1.
В раннем послеоперационном периоде отмечено наличие незначительного отека роговицы. Отек был слабо выражен и обусловлен, по всей видимости, наличием операционной травмы. Клинических признаков острого инфекционного поражения окружающих тканей при осмотре не обнаружено. На 7-й день отмечалось появление новообразованных сосудов эксцентрично лимбу, с последующим нарастанием их числа и увеличением калибра сосудов. К концу первого месяца отмечалась стойкая стабилизация клинической картины. Через 2 месяца клинически значимых изменений не отмечалось. К концу периода наблюдения (90 дней) у кролика наблюдалась васкуляризация и утолщение тканей роговицы до 0,7 мм. Гистологическое исследование области трансплантата показало его частичное разволокнение и замещение новообразованной соединительной тканью, местами в него врастают сосуды. Роговица значительно утолщена. Исследование биомеханических свойств показало повышение прочностных характеристик тканей в 4,5 раза.
Claims (1)
- Способ укрепления бельма роговицы в эксперименте, включающий использование имплантата, изготовленного из коллагена, отличающийся тем, что у экспериментальных животных производят разрез роговицы концентрично лимбу, затем формируют роговичный интрастромальный карман, в который вводят имплантат в виде диска, диаметром 9-12 мм и толщиной 0,2-0,5 мм, состоящий из 4-5 мг коллагена I типа и 100-300 мкг фактора роста rhBMP-2.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016104639A RU2613417C1 (ru) | 2016-02-11 | 2016-02-11 | Способ укрепления бельма роговицы в эксперименте |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016104639A RU2613417C1 (ru) | 2016-02-11 | 2016-02-11 | Способ укрепления бельма роговицы в эксперименте |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2613417C1 true RU2613417C1 (ru) | 2017-03-16 |
Family
ID=58458168
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016104639A RU2613417C1 (ru) | 2016-02-11 | 2016-02-11 | Способ укрепления бельма роговицы в эксперименте |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2613417C1 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2714943C1 (ru) * | 2019-06-04 | 2020-02-21 | Общество с ограниченной ответственностью фирмы "Имтек" | Искусственная роговица, представляющая собой мембрану гетерогенной жесткости на основе коллагена, и способ ее получения и применения |
RU2722718C1 (ru) * | 2019-10-21 | 2020-06-03 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Волгоградский ГАУ) | Способ лечения застарелых лейком крупного рогатого скота в полевых условиях |
RU2779361C1 (ru) * | 2021-06-03 | 2022-09-06 | Общество с ограниченной ответственностью фирмы "Имтек" | Однородная прозрачная коллагеновая мембрана, способ ее получения и ее применение для восстановления роговицы |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2126670C1 (ru) * | 1995-11-28 | 1999-02-27 | Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования | Способ лечения васкуляризированных бельм |
RU2570041C1 (ru) * | 2014-07-03 | 2015-12-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Московский научно-исследовательский институт глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ подготовки ожогового бельма роговицы к кератопротезированию |
-
2016
- 2016-02-11 RU RU2016104639A patent/RU2613417C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2126670C1 (ru) * | 1995-11-28 | 1999-02-27 | Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования | Способ лечения васкуляризированных бельм |
RU2570041C1 (ru) * | 2014-07-03 | 2015-12-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Московский научно-исследовательский институт глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ подготовки ожогового бельма роговицы к кератопротезированию |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
БЕЛЯЕВ Д.С. и др., Искусственный эквивалент аутохрящевой ткани: создание и перспективы его применения для укрепления бельма перед кератопротезированием, III НПК по офтальмологии с международным участием "Восток-Запад", сб.научных трудов, Уфа, 2012, с. 129-130. * |
ГУНДОРОВА Р.А. и др., Перспективы использования тканеинженерной конструкции на основе культивированных аутологичных хондроцитов на этапах подготовки бельма к кератопротезированию, Российский офтальмологический журнал - 2014. - Т. 7. -3. - С. 65-70. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2714943C1 (ru) * | 2019-06-04 | 2020-02-21 | Общество с ограниченной ответственностью фирмы "Имтек" | Искусственная роговица, представляющая собой мембрану гетерогенной жесткости на основе коллагена, и способ ее получения и применения |
RU2722718C1 (ru) * | 2019-10-21 | 2020-06-03 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Волгоградский ГАУ) | Способ лечения застарелых лейком крупного рогатого скота в полевых условиях |
RU2779361C1 (ru) * | 2021-06-03 | 2022-09-06 | Общество с ограниченной ответственностью фирмы "Имтек" | Однородная прозрачная коллагеновая мембрана, способ ее получения и ее применение для восстановления роговицы |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5661722B2 (ja) | 眼用デバイス及びその製造方法 | |
JP4572009B2 (ja) | 神経学的組織を修復する組成物および方法 | |
Yoshida et al. | Development and evaluation of porcine atelocollagen vitrigel membrane with a spherical curve and transplantable artificial corneal endothelial grafts | |
US20210393396A1 (en) | Dermal layer for grafting having improved graft survival rate and method for producing same | |
US20180228599A1 (en) | Tissue-derived scaffolds for corneal reconstruction | |
Andreev et al. | A new collagen scaffold for the improvement of corneal biomechanical properties in a rabbit model | |
RU2613417C1 (ru) | Способ укрепления бельма роговицы в эксперименте | |
RU2714943C1 (ru) | Искусственная роговица, представляющая собой мембрану гетерогенной жесткости на основе коллагена, и способ ее получения и применения | |
Huang et al. | An active artificial cornea with the function of inducing new corneal tissue generation in vivo—A new approach to corneal tissue engineering | |
RU2570041C1 (ru) | Способ подготовки ожогового бельма роговицы к кератопротезированию | |
JP2003126236A (ja) | 損傷された眼球組織の再生のための生分解性高分子から製造された多孔性支持体 | |
Krupala et al. | The efficacy of hyaluronic acid foam as a middle ear packing agent in experimental tympanoplasty | |
CN106075575A (zh) | 一种用于膝骨性关节炎软骨修复的复合材料及其制备方法 | |
WO2023034550A1 (en) | Functionalized, decellularized corneal extracellular matrix hydrogels for ocular tissue treatment | |
Jorge E et al. | In vivo Biocompatibility of Chitosan and Collagen–Vitrigel Membranes for Corneal Scaffolding: a Comparative Analysis | |
CN109999225B (zh) | 一种骨修复材料及其制备方法 | |
RU2655111C1 (ru) | Способ кератопротезирования при ожоговых бельмах | |
CN1253559C (zh) | 一种移植材料的制造方法 | |
Xu et al. | Azithromycin-carrying and microtubule-orientated biomimetic poly (lactic-co-glycolic acid) scaffolds for eyelid reconstruction | |
RU2671515C1 (ru) | Способ кератопротезирования при истонченных ожоговых бельмах | |
CN115067321B (zh) | 一种角膜组织中长期立体保存营养胶囊及其制备方法 | |
RU2814630C1 (ru) | Способ лечения лимбальной недостаточности с помощью трансплантации культивированных стволовых клеток в интрастромальные роговичные тоннели | |
US20230048106A1 (en) | Composition for regenerating growth plate | |
CN116570753B (zh) | 一种组织再生型生物膜组织复合物及制备方法及应用 | |
Arantrinita et al. | The effect of collagen-chitosan-natrium hyaluronate composite on neovascularization as angiogenesis reaction in rabbit corneal stroma wound (Experimental study on Oryctolagus cuniculus) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180212 |