RU2589679C1 - Method for thrombocyte staining after exposure to modulated ultrasound - Google Patents
Method for thrombocyte staining after exposure to modulated ultrasound Download PDFInfo
- Publication number
- RU2589679C1 RU2589679C1 RU2015119788/15A RU2015119788A RU2589679C1 RU 2589679 C1 RU2589679 C1 RU 2589679C1 RU 2015119788/15 A RU2015119788/15 A RU 2015119788/15A RU 2015119788 A RU2015119788 A RU 2015119788A RU 2589679 C1 RU2589679 C1 RU 2589679C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- intensity
- staining
- blood
- ultrasound
- exposure
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к ветеринарии и медицине и может использоваться при неинвазивном исследовании крови животных, предварительно обработанной ультразвуком.The invention relates to veterinary medicine and medicine and can be used for non-invasive examination of animal blood, pre-treated with ultrasound.
Тромбоциты - красные кровяные пластинки (бляшки Бицецеро); полиморфные бесцветные клетки, образующиеся из мегакариоцитов, диаметром 2-5 мкм, живут 8-11 дней. В норме (200-400)·109/л. У новорожденных концентрация тромбоцитов такая же, как у взрослых; к 7-9 дню снижается до (164-178)·109/л; к концу второй недели - как у взрослых. Увеличение количества - тромбоцитоз, уменьшение количества -тромбоцитопения.Platelets - red blood plates (Bicecero plaques); colorless polymorphic cells formed from megakaryocytes, 2-5 microns in diameter, live 8-11 days. Normal (200-400) · 10 9 / l. In newborns, the platelet concentration is the same as in adults; by day 7-9 it decreases to (164-178) · 10 9 / l; by the end of the second week - as in adults. An increase in the number of thrombocytosis, a decrease in the number of thrombocytopenia.
Несмотря на распространение в последнее время в лабораториях счетчиков форменных элементов крови наиболее часто подсчет тромбоцитов осуществляется в окрашенных мазках крови, приготовленных с использованием трилона Б. Метод основан на подсчете количества тромбоцитов на 1000 эритроцитов, с последующим пересчетом на 1 мкл крови, исходя из количества эритроцитов в этом объеме.Despite the recent distribution in the laboratories of blood counters, platelets are most often counted in stained blood smears prepared using Trilon B. The method is based on the calculation of platelet count per 1000 red blood cells, followed by conversion to 1 μl of blood, based on the number of red blood cells in this volume.
Реактивы:Reagents:
6%-ный раствор ЭДТА (этилендиаминтетраацетат Na);6% solution of EDTA (ethylene diamine tetraacetate Na);
раствор эозин-метиленового синего по Май-Грюнвальду;May-Grunwald eosin-methylene blue solution;
раствор Романовского-Гимзы.Romanovsky-Giemsa solution.
Окраска. Кровь смешивают с 6%-ным раствором ЭДТА. Для этого реактив, взятый капилляром Панченкова до метки «75», вносят в пробирку, затем добавляют кровь, взятую тем же капилляром, до метки «0». Содержимое пробирки перемешивают и готовят тонкие мазки. Высохший мазок должен быть равномерно тонким, желтоватого цвета, достаточной величины - т.е. располагаться на 1-1,5 см от краев, занимать 2/3 длины стекла и оканчиваться «метелочкой». Толстые, густо-розового цвета мазки не используются, т.к. в них морфология клеток плохо различима.Coloring. Blood is mixed with a 6% solution of EDTA. For this, the reagent taken by the Panchenkov capillary to the mark “75” is added to the tube, then the blood taken by the same capillary is added to the mark “0”. The contents of the test tube are mixed and thin strokes are prepared. The dried smear should be uniformly thin, yellowish, of sufficient size - i.e. located 1-1.5 cm from the edges, occupy 2/3 of the length of the glass and end with a “panicle”. Thick, deep pink smears are not used, because in them the morphology of cells is poorly distinguishable.
Мазки фиксируют раствором Май-Грюнвальда 2-3 мин. Окрашивают раствором Романовского-Гимзы 30-45 мин (разведение из расчета примерно 1 капля на 1 мл дистиллированной воды должно устанавливаться опытным путем для каждой новой партии красителя).Smears are fixed with May-Grunwald solution for 2-3 minutes. Stained with Romanovsky-Giemsa solution for 30-45 min (dilution at the rate of about 1 drop per 1 ml of distilled water should be experimentally established for each new batch of dye).
Высохшие мазки микроскопируют с иммерсионным объективом, подсчитывая количество тромбоцитов в тонких местах препарата (эритроциты должны быть расположены изолированно). Тромбоциты в мазках выглядят в виде фиолетовых округлых образований размером 2-4 мкм с отчетливо видимой центрально расположенной зернистой частью - грануломером и более светлой периферической незернистой зоной - гиаломером. Подсчет производят следующим образом: в каждом поле зрения микроскопа считают число эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок до тех пор, пока не будут просчитаны не менее 1000 эритроцитов.Dry smears are microscopic with an immersion lens, counting the platelet count in thin spots of the preparation (red blood cells should be located in isolation). Platelets in smears look in the form of rounded purple formations 2-4 microns in size with a clearly visible centrally located granular part - granulomer and a lighter peripheral non-granular zone - hyalomer. The calculation is carried out as follows: in each field of view of the microscope, the number of red blood cells and platelets is counted, moving the smear until at least 1000 red blood cells are counted.
Известно приготовление мазков и подсчет количества тромбоцитов в периферической крови человека. Оснащение: смесь Никифорова, предметное и покровное стекла, марлевые салфетки, донорская кровь, капилляр, краска Романовского-Гимза, микроскоп, иммерсионное масло, счетчик 11-клавишный. Мазок готовится на обезжиренном стекле с помощью покровного или предметного стекла. Чистые стекла хранятся до употребления в смеси Никифорова (эфир со спиртом в отношении 1:1) в банке с притертой пробкой. Перед взятием крови стекла вынимают пинцетом и тщательно протирают салфеткой. На палец, обработанный спиртом, наносится капля 14%-ного раствора MgS04, через которую делается прокол скарификатором. Большим и средним пальцами левой руки берут предметное стекло за ребро и наносят каплю крови на край стекла. Правой рукой берут покровное стекло, ставят его узким краем рядом с каплей крови так, чтобы она растеклась в углу, образованном двумя стеклами. Покровным стеклом под углом 45° проводят по предметному стеклу, растягивая каплю тонким слоем. Хорошо сделанный мазок должен быть достаточно тонким, немного уже и короче предметного стекла, иметь желтоватый цвет и просвечивать. Высушивают мазок на воздухе, не подогревая. Затем фиксируют в смеси Никифорова 10 минут, после чего вынимают и сушат в вертикальном положении.It is known to prepare smears and count platelets in human peripheral blood. Equipment: a mixture of Nikiforov, slide and glass covers, gauze wipes, donated blood, capillary, Romanovsky-Giemsa paint, microscope, immersion oil, 11-key counter. A smear is prepared on defatted glass using a coverslip or slide. Clean glasses are stored until use in a mixture of Nikiforov (ether with alcohol in a ratio of 1: 1) in a jar with a ground stopper. Before blood collection, the glass is removed with tweezers and thoroughly wiped with a napkin. A drop of a 14% MgS0 4 solution is applied to the finger treated with alcohol, through which a scarifier is punctured. The thumb and middle fingers of the left hand take a glass slide by the rib and apply a drop of blood to the edge of the glass. Take the coverslip with your right hand, place it with a narrow edge next to a drop of blood so that it spreads in the corner formed by two glasses. A coverslip at an angle of 45 ° is carried out on a glass slide, stretching a drop with a thin layer. A well-made smear should be thin enough, slightly narrower and shorter than the glass slide, have a yellowish color and shine through. Dry the smear in air without heating. Then fixed in a mixture of Nikiforov 10 minutes, after which they are removed and dried in an upright position.
Высушенный мазок окрашивают краской Романовского. Необходимо отметить, что для дифференциального подсчета тромбоцитов используют концентрацию краски вдвое больше, чем для окраски мазка при подсчете лейкоцитарной формулы. Мазок покрывают тонким слоем краски и оставляют на 45 минут. Затем мазок промывают под проточной водой и сушат. Смотрят под микроскопом при увеличении 90 с иммерсионным маслом, используя окошечко по Fonio. Подсчет количества тромбоцитов производится на 1000 эритроцитов.The dried smear is stained with Romanovsky paint. It should be noted that for differential platelet counting, the concentration of ink is used twice as much as for staining a smear when counting the leukocyte formula. The smear is covered with a thin layer of paint and left for 45 minutes. Then the smear is washed under running water and dried. Look under a microscope at a magnification of 90 with immersion oil using the Fonio window. Platelet counts are performed per 1000 red blood cells.
В известных методах окраски тромбоциты отдельно окрашивают крайне редко, поскольку в таком случае остальные форменные элементы учитывать невозможно или крайне затруднительно. Одномоментной окраски форменных элементов, включая тромбоциты, без дополнительных затрат красителей в известных способах не происходит.In known staining methods, platelets alone are extremely rarely stained, since in this case it is impossible or extremely difficult to take into account the rest of the formed elements. Simultaneous staining of shaped elements, including platelets, without additional cost dyes in the known methods does not occur.
Наиболее близким аналогом заявленного изобретения является метод быстрого дифференциального окрашивания биопрепаратов ДИФФ-КВИК. Мазки фиксируют в абсолютном метаноле 15 с, выдерживают в растворах красителей в течение 10 с, промывают в забуференной воде, высушивают, микроскопируют (микроскоп «Микмед-5», объектив 100x/1,25, окуляр 10х/18) и подсчитывают процентное содержание форменных элементов крови [Н.А. Любин, Л.Б. Конова. Методические рекомендации к определению и выведению гемограммы у сельскохозяйственных и лабораторных животных при патологиях. Ульяновск, ГСХА, 2005, 113 с.].The closest analogue of the claimed invention is a method of rapid differential staining of biologics DIFF-QUIK. The smears are fixed in absolute methanol for 15 s, kept in dye solutions for 10 s, washed in buffered water, dried, microscopic (Mikmed-5 microscope, lens 100x / 1.25, eyepiece 10x / 18) and the percentage of uniform blood elements [N.A. Lyubin, L.B. Konova. Guidelines for the determination and removal of hemograms in agricultural and laboratory animals with pathologies. Ulyanovsk, State Agricultural Academy, 2005, 113 pp.].
Однако данный способ не обеспечивает глубокую и равномерную окраску тромбоцитов всех размеров, независимо от их видовой принадлежности какому-либо животному, возможность подсчета и выявления морфологических особенностей кровяных пластинок. Нами была отработана методика одновременной глубокой окраски всех форменных элементов крови, в то время как в известных способах окраски при окраске лейкоцитов невозможно всегда равномерно окрасить тромбоциты животного любого вида для изучения морфологии и диагностики изменений клеточных мембран. Найденный диапазон интенсивности ультразвука (УЗ) и времени озвучивания гарантированно обеспечивает качественную окраску тромбоцитов во всех случаях (независимо от особенностей конкретных клеток, условий взятия и хранения крови, состояния животного, наличия патологического процесса), не влияя отрицательно на окраску других форменных элементов.However, this method does not provide a deep and uniform coloration of platelets of all sizes, regardless of their species affiliation with any animal, the ability to count and identify the morphological features of blood platelets. We have developed a technique for simultaneous deep staining of all blood cells, while in the known staining methods when staining white blood cells it is impossible to uniformly stain platelets of an animal of any kind to study the morphology and diagnosis of changes in cell membranes. The found range of ultrasound (ultrasound) intensity and sonication time is guaranteed to ensure high-quality platelet staining in all cases (regardless of the characteristics of specific cells, conditions for blood collection and storage, the condition of the animal, the presence of a pathological process) without negatively affecting the color of other shaped elements.
Окрашивание ДИФФ-КВИК с УЗ позволяет хорошо визуализировать тромбоциты и может быть использовано в качестве модификации для подсчета именно тромбоцитов любого размера и вида и для одновременного изучения морфологических и цитологических особенностей всех окрашенных клеток, показывает наличие: клеточных деформаций, анизоцитоза, повреждений цитоплазматических мембран тромбоцитов, дает возможность визуализировать границы тромбоцитов.DIFF-QUIK staining with ultrasound allows you to visualize platelets well and can be used as a modification to count platelets of any size and type and to simultaneously study the morphological and cytological features of all stained cells, shows the presence of: cell deformations, anisocytosis, damage to the cytoplasmic membranes of platelets, makes it possible to visualize platelet boundaries.
Целью заявленного изобретения является разработка способа дифференциальной окраски всех клеток крови одним стандартным набором красителей в одной и той же концентрации.The aim of the claimed invention is to develop a method for differential staining of all blood cells with one standard set of dyes in the same concentration.
Техническим результатом заявленного изобретения является дифференциальная окраска всех форменных элементов крови, включая тромбоциты, после УЗ воздействия на образцы крови непосредственно до приготовления мазков, с одинаково равномерной, глубокой и быстрой окраской всех клеток крови одним стандартным набором красителей, без дополнительных средств (красителей, спиртов) и минимальной затратой времени (15-40 с). Для реализации заявляемого изобретения используются любые из отечественных ультразвуковых терапевтических генераторов с излучателями, работающих на несущих частотах 0.88 и 2.64 МГц.The technical result of the claimed invention is the differential staining of all blood cells, including platelets, after ultrasonic treatment of blood samples immediately before preparation of smears, with equally uniform, deep and fast staining of all blood cells with one standard set of dyes, without additional agents (dyes, alcohols) and minimum time consumption (15-40 s). To implement the claimed invention, any of domestic ultrasonic therapeutic generators with emitters operating at carrier frequencies of 0.88 and 2.64 MHz are used.
Указанный технический результат достигается тем, что окраску тромбоцитов проводили после ультразвукового воздействия на образцы крови in vitro бегущей УЗ волной. В зависимости от интенсивности УЗ применяли разную экспозицию. Интенсивностью 0,05 Вт/см2 обрабатывали в течение 30-40 с, интенсивностью 0,2 Вт/см2 - 20-35 с, интенсивностью 0,4 Вт/см2 - 15-30 с, интенсивностью 0,7 Вт/см2 в течение 15-20 с. Одновременно накладывали на указанные режимы любое значение из нижеперечисленных диапазонов частот модуляции: 10-30 Гц или 800 Гц, скважность 2. Несущая частота 880 кГц. Того же результата можно достичь, используя несущую частоту 2,64 МГц, интенсивность 0,4 Вт/см2, время воздействия 15-30 с, стандартные импульсные режимы, заложенные в аппаратуру. Применение модулированных воздействий снижает среднюю по пространству и времени интенсивность в 2 раза, уменьшая риск повреждения клеток. После УЗ обработки готовили мазки крови и окрашивали их дифференциальными красителями.The indicated technical result is achieved by the fact that platelet staining was performed after ultrasonic exposure of blood samples in vitro by a traveling ultrasound wave. Depending on the intensity of ultrasound, different exposures were used. The intensity of 0.05 W / cm 2 was processed for 30-40 s, the intensity of 0.2 W / cm 2 - 20-35 s, the intensity of 0.4 W / cm 2 - 15-30 s, the intensity of 0.7 W / cm 2 for 15-20 s. At the same time, any value from the following ranges of modulation frequencies was superimposed on the indicated modes: 10-30 Hz or 800 Hz, duty cycle 2. Carrier frequency 880 kHz. The same result can be achieved using a carrier frequency of 2.64 MHz, an intensity of 0.4 W / cm 2 , exposure time of 15-30 s, standard pulse modes embedded in the equipment. The use of modulated effects reduces the average in space and time intensity by 2 times, reducing the risk of cell damage. After ultrasound treatment, blood smears were prepared and stained with differential dyes.
Заявленный способ осуществляется следующим образом.The claimed method is as follows.
Воздействие ультразвуком in vitro на образцы крови осуществлялось следующим образом. Кровь брали в ветеринарной клинике из подкожной вены предплечья у кошек, собак, кроликов, яремной вены лошадей натощак в утренние часы. Образцы крови от 0,5-1,5 мл озвучивали в абсолютно одинаковых условиях. УЗ воздействие на клетки крови осуществлялось с помощью терапевтических излучателей аппаратов отечественного производства: УЗТ-1-01Ф; УЗТ-5 и УЗТ-1.02С с внешним входом для модуляции. В качестве генератора модулирующих сигналов использовали низкочастотный генератор Г3-113 или аналогичные генераторы другого типа. Озвучивание образцов крови осуществлялось бегущей импульсно модулированной УЗ волной с экспозицией, зависящей от интенсивности УЗ: при интенсивности 0,05 Вт/см2 обрабатывали в течение 30-40 с (фиг.1), при интенсивности 0,2 Вт/см2 - в течение 20-35 с, при интенсивности 0,4 Вт/см2 - в течение 15-30 с, при интенсивности 0,7 Вт/см2 в течение 15-20 с (фиг.2). Диапазон частот модуляции: 10-30 Гц или 800 Гц. Несущая частота 880 кГц. Того же результата можно достичь без модуляции, используя несущую частоту 2,64 МГц, интенсивность 0,4 Вт/см2, время воздействия 15-30 с в импульсном режиме. После УЗ обработки делали мазки крови и окрашивали по методу быстрого дифференциального окрашивания биопрепаратов ДИФФ-КВИК: мазки фиксировали в абсолютном метаноле 15 с, выдерживали в растворах красителей в течение 10 с, промывали в забуференной воде, высушивали и результат наблюдали и фиксировали под микроскопом (микроскоп «Микмед-5», объектив 100x/1,25, окуляр 10x/18) (см. фиг.1, 2).In vitro ultrasound exposure to blood samples was carried out as follows. Blood was taken in a veterinary clinic from the saphenous vein of the forearm of cats, dogs, rabbits, jugular veins of horses on an empty stomach in the morning. Blood samples from 0.5-1.5 ml were voiced under absolutely identical conditions. Ultrasound exposure to blood cells was carried out using therapeutic emitters of domestic devices: UZT-1-01F; UZT-5 and UZT-1.02C with an external input for modulation. As a modulating signal generator, a low-frequency generator G3-113 or similar generators of a different type were used. Sounding of blood samples was carried out by a traveling pulse modulated ultrasound wave with an exposure depending on the intensity of the ultrasound: at an intensity of 0.05 W / cm 2 it was processed for 30-40 s (Fig. 1), at an intensity of 0.2 W / cm 2 for 20-35 s, at an intensity of 0.4 W / cm 2 within 15-30 s, at an intensity of 0.7 W / cm 2 for 15-20 s (figure 2). The range of modulation frequencies: 10-30 Hz or 800 Hz. The carrier frequency is 880 kHz. The same result can be achieved without modulation, using a carrier frequency of 2.64 MHz, an intensity of 0.4 W / cm 2 , the exposure time of 15-30 s in a pulsed mode. After ultrasonic treatment, blood smears were made and stained according to the method of rapid differential staining of DIFF-QUIK biological products: smears were fixed in absolute methanol for 15 s, kept in dye solutions for 10 s, washed in buffered water, dried and the result was observed and recorded under a microscope (microscope) "Mikmed-5" lens 100 x / 1.25, eyepiece 10 x / 18) (see figure 1, 2).
С применением УЗ была отработана методика окраски всех форменных элементов крови, в то время как в известных способах при окраске лейкоцитов невозможно одновременно глубоко и эффективно прокрасить тромбоциты всех размеров. Найденный диапазон интенсивности, частот модуляции и времени обеспечивают окраску тромбоцитов, не влияя отрицательно на окраску других форменных элементов. У всех окрашенных клеток отчетливо видны: форма, размер, морфологические и цитологические особенности, целостность или разрушение цитоплазматической мембраны (при наличии), ядра, зернистость цитоплазмы (у гранулоцитов), анизоцитоз или клеточные деформации. Используемые параметры ультразвукового воздействия являются терапевтическими и безопасными для экспериментатора.With the use of ultrasound, a technique for staining all blood cells was developed, while in the known methods, when staining white blood cells, it is impossible to deeply and efficiently stain platelets of all sizes. The found range of intensity, modulation frequencies, and time provides the color of platelets, without negatively affecting the color of other formed elements. All stained cells are clearly visible: shape, size, morphological and cytological features, integrity or destruction of the cytoplasmic membrane (if any), nuclei, granularity of the cytoplasm (granulocytes), anisocytosis or cellular deformations. The ultrasound parameters used are therapeutic and safe for the experimenter.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015119788/15A RU2589679C1 (en) | 2015-05-26 | 2015-05-26 | Method for thrombocyte staining after exposure to modulated ultrasound |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015119788/15A RU2589679C1 (en) | 2015-05-26 | 2015-05-26 | Method for thrombocyte staining after exposure to modulated ultrasound |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2589679C1 true RU2589679C1 (en) | 2016-07-10 |
Family
ID=56371290
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015119788/15A RU2589679C1 (en) | 2015-05-26 | 2015-05-26 | Method for thrombocyte staining after exposure to modulated ultrasound |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2589679C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2699733C1 (en) * | 2018-03-30 | 2019-09-09 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина) | Method of laboratory ultrasound diagnostics of early stages of horse pregnancy |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1532548A1 (en) * | 1987-07-02 | 1989-12-30 | Научно-исследовательский кожно-венерологический институт | Method of dyeing thrombocytes for smears |
| RU2224235C2 (en) * | 2002-05-06 | 2004-02-20 | Белгородский государственный университет | Method for visualization of poultry form blood elements upon single smear |
| RU2304776C2 (en) * | 2005-02-22 | 2007-08-20 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Ставропольский государственный аграрный университет | Method for staining blood smears |
| WO2011078980A1 (en) * | 2009-12-22 | 2011-06-30 | Abbott Laboratories | A method for performing a blood count and determining the morphology of a blood smear |
| WO2011140555A2 (en) * | 2010-05-07 | 2011-11-10 | Cellscape Corporation | Automated system to create a cell smear |
-
2015
- 2015-05-26 RU RU2015119788/15A patent/RU2589679C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1532548A1 (en) * | 1987-07-02 | 1989-12-30 | Научно-исследовательский кожно-венерологический институт | Method of dyeing thrombocytes for smears |
| RU2224235C2 (en) * | 2002-05-06 | 2004-02-20 | Белгородский государственный университет | Method for visualization of poultry form blood elements upon single smear |
| RU2304776C2 (en) * | 2005-02-22 | 2007-08-20 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Ставропольский государственный аграрный университет | Method for staining blood smears |
| WO2011078980A1 (en) * | 2009-12-22 | 2011-06-30 | Abbott Laboratories | A method for performing a blood count and determining the morphology of a blood smear |
| WO2011140555A2 (en) * | 2010-05-07 | 2011-11-10 | Cellscape Corporation | Automated system to create a cell smear |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Н.А. ЛЮБИН и др. Методические рекомендации к определению и выведению гемограммы у сельскохозяйственных и лабораторных животных при патологиях. Ульяновск, ГСХА, 2005, 113с., раздел "Окраска мазка". * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2699733C1 (en) * | 2018-03-30 | 2019-09-09 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина) | Method of laboratory ultrasound diagnostics of early stages of horse pregnancy |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102373559B1 (en) | Contact-type staining-assist patch, manufacturing method thereof and staining method using the patch | |
| CN105388288B (en) | The FCM analysis kit of human respiratory pathogen, method and cell fixer | |
| RU2589680C1 (en) | Method for thrombocyte staining after ultrasonic exposure | |
| RU2589679C1 (en) | Method for thrombocyte staining after exposure to modulated ultrasound | |
| Morrell et al. | Stallion sperm viability, as measured by the Nucleocounter SP-100, is affected by extender and enhanced by Single Layer Centrifugation | |
| CN112513637B (en) | Kit for detecting biological film and method for detecting biological film | |
| CN107271241A (en) | A kind of frozen section method of Gorky's silver staining nerve fiber | |
| RU137188U1 (en) | BIOCHIP FOR DIAGNOSTICS IN THE FIELD OF MEDICINE | |
| Ramirez et al. | Protocol for controlled cortical impact in human cerebral organoids to model traumatic brain injury | |
| Fiorelli et al. | Enhanced tissue penetration of antibodies through pressurized immunohistochemistry | |
| Sinkar et al. | Utility of modified ultrafast Papanicolaou stain in cytological diagnosis | |
| Zhang et al. | 3D visualization of immune cell populations in HIV-infected tissues via clearing, immunostaining, confocal, and light sheet fluorescence microscopy | |
| Jones | Papanicolaou staining of air‐dried smears: value in rapid diagnosis | |
| Pomaville et al. | Immunohistochemical and genetic labeling of hairy and glabrous skin innervation | |
| Leavitt et al. | Isolation of live fibroblasts by fluorescence-activated cell sorting | |
| RU2490635C1 (en) | Improved method for producing dead cell preparations for fluorescent in situ hybridisation | |
| JP7153365B2 (en) | Isolated cell specimen, method for producing isolated cell specimen, and method for detecting target cells | |
| Roqué et al. | Synaptic structure quantification in cultured neurons | |
| Pijuan et al. | Live Cell Adhesion, Migration, and Invasion Assays | |
| Powell | Obtaining good quality samples for cytology | |
| CN104390824A (en) | Production method of earthworm blood cell smear | |
| Nivedhita et al. | Analysis of Papanicolaou stain on peripheral smear compared to Leishman's stain: A prospective study. | |
| HAMMED et al. | New and ModifiedStaining TechniquesforRapid Diagnosis of Hemoparasites in Blood Smears of Cows | |
| CN115541343A (en) | Transparent reagent suitable for label-free imaging and transparentizing method | |
| RU2715552C1 (en) | Method for digital microscopy of native blood |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170527 |