RU2347585C1 - Vaccine against transmissible gastroenteritis of pigs - Google Patents
Vaccine against transmissible gastroenteritis of pigs Download PDFInfo
- Publication number
- RU2347585C1 RU2347585C1 RU2007142926/13A RU2007142926A RU2347585C1 RU 2347585 C1 RU2347585 C1 RU 2347585C1 RU 2007142926/13 A RU2007142926/13 A RU 2007142926/13A RU 2007142926 A RU2007142926 A RU 2007142926A RU 2347585 C1 RU2347585 C1 RU 2347585C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vaccine
- transmissible gastroenteritis
- tse
- pigs
- strain
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Предлагаемое изобретение относится к области биотехнологии вирусных вакцинных ветеринарных препаратов, в частности к вакцине «ОРОВАК-ТГЭ» против трансмиссивного гастроэнтерита свиней, предназначенной для пероральной иммунизации супоросных свиноматок, поросят и хряков ремонтной и основной групп.The present invention relates to the field of biotechnology of viral vaccine veterinary drugs, in particular to the vaccine "OROVAK-TSE" against transmissible gastroenteritis of pigs, intended for oral immunization of pregnant sows, pigs and boars repair and main groups.
Известна вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней, содержащая вирусный материал из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 (SU 734279, 21.12.1978).A known vaccine against transmissible gastroenteritis of pigs containing viral material from the strain Transmissible gastroenteritis VGNKI No. 5 (SU 734279, 12/21/1978).
Недостатком данной вакцины является значительная потеря ее антигенной и иммуногенной активности при производстве и последующем хранении, из-за низкой устойчивости вакцинного вируса к сублимационному высушиванию и, как следствие, к снижению ее эффективности.The disadvantage of this vaccine is a significant loss of its antigenic and immunogenic activity during production and subsequent storage, due to the low resistance of the vaccine virus to freeze-drying and, as a consequence, to a decrease in its effectiveness.
Целью изобретения является повышение эффективности вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней.The aim of the invention is to increase the effectiveness of the vaccine against transmissible gastroenteritis of pigs.
Указанная цель достигается тем, что она дополнительно содержит сахарозу, пептон ферментативный, казеин, тиомочевину, аэросил AM-1-300 и смолу КБ-4П-2 при следующем соотношении компонентов, мас.%:This goal is achieved in that it additionally contains sucrose, enzymatic peptone, casein, thiourea, Aerosil AM-1-300 and KB-4P-2 resin in the following ratio of components, wt.%:
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1.Example 1
Для получения вирусного материала из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 используют культуру СПЭВ, выращенную в роллерных условиях с образованием монослоя через 20-48 часов. Ростовую среду заменяют поддерживающей средой того же состава, но без сыворотки, с добавлением вируса. Множественность заражения составляет 1-10 ТЦД50 на 1 клетку. Инфицированную культуру инкубируют в роллерных условиях в течение 16-30 часов. Вирусный материал хранят при минус 20°С.To obtain the viral material from the Transmissible gastroenteritis strain VGNKI No. 5, a SPEV culture grown under roller conditions with the formation of a monolayer after 20-48 hours is used. The growth medium is replaced with a support medium of the same composition, but without serum, with the addition of the virus. The multiplicity of infection is 1-10 TCD 50 per 1 cell. The infected culture is incubated under roller conditions for 16-30 hours. Viral material is stored at minus 20 ° C.
Перед приготовлением вакцины "ОРОВАК-ТГЭ" компоненты вакцины: сахарозу, пептон ферментативный, казеин и тиомочевину (каждый компонент в отдельности) подвергают тепловой обработке, при температуре 90°С, а смолу КБ-4П-2 в смеси с гидрофобным аэросилом при температуре 102±2°С в течение 4 часов, с последующим их охлаждением до температуры 4±2°С. В аппарат типа РТ-1 последовательно загружают вирусный материал из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 в объеме 14-15 л; сахарозу в количестве 5,5-6,5 кг; пептон ферментативный в количестве 4-5 кг; казеин в количестве 1-1,5 кг и 0,05-0,1 кг тиомочевины. Смешение - растворение компонентов в аппарате проводят при 8000 об/мин в течение 2 минут.Полученную суспензию вакцинного полуфабриката переносят в барабан шаровой мельницы, в котором осуществляют его смешивание и обезвоживание, в соотношении 1:4, с ионнообменной смолой КБ-4П-2 с нанесенным на поверхность ее частиц гидрофобного аэросила АМ-1-300, взятого по массе в количестве 1,25-2,50%. Скорость вращения барабана 60-90 об/мин.Before preparation of the OROVAK-TSE vaccine, the vaccine components: sucrose, enzyme peptone, casein and thiourea (each component separately) are subjected to heat treatment at a temperature of 90 ° C, and KB-4P-2 resin mixed with hydrophobic aerosil at a temperature of 102 ± 2 ° C for 4 hours, followed by cooling to a temperature of 4 ± 2 ° C. In a device of type RT-1, viral material from the Transmissible gastroenteritis strain VGNKI No. 5 is sequentially loaded in a volume of 14-15 l; sucrose in an amount of 5.5-6.5 kg; enzyme peptone in an amount of 4-5 kg; casein in an amount of 1-1.5 kg and 0.05-0.1 kg of thiourea. Mixing - dissolving the components in the apparatus is carried out at 8000 rpm for 2 minutes. The resulting suspension of the vaccine semi-finished product is transferred to a ball mill drum, in which it is mixed and dehydrated, in a 1: 4 ratio, with KB-4P-2 ion exchange resin applied to the surface of its particles of hydrophobic aerosil AM-1-300, taken by weight in an amount of 1.25-2.50%. The rotation speed of the drum is 60-90 rpm.
Получают 3 состава предложенной вакцины, приведенной в таблице 1. Готовый вакцинный продукт «ОРОВАК-ТГЭ» представляет собой сыпучий порошок серо-желтого цвета. Биологическая активность препарата не ниже 6,0 lg ТЦД50/г-1. Массовая доля влаги в пределах 10-14%.Get 3 composition of the proposed vaccine are shown in table 1. The finished vaccine product “OROVAK-TSE” is a loose powder of gray-yellow color. The biological activity of the drug is not lower than 6.0 lg TCD 50 / g -1 . Mass fraction of moisture in the range of 10-14%.
Вакцину расфасовывают по 100-200 г в стерильные флаконы или двойные полиэтиленовые пакеты. Флаконы укупоривают стерильными резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, а пакеты герметично запаивают.The vaccine is packaged in 100-200 g in sterile bottles or double plastic bags. The vials are sealed with sterile rubber stoppers and wrapped in aluminum caps, and the bags are hermetically sealed.
Срок годности вакцины - 6 месяцев при условии хранения в темном помещении при температуре 2-10°С.The shelf life of the vaccine is 6 months, provided that it is stored in a dark room at a temperature of 2-10 ° C.
Пример 2.Example 2
Изучают биологическую активность 3-х образцов вакцины «ОРОВАК-ТГЭ», приготовленных по примеру 1 и хранившихся в течение 12 месяцев при температуре минус 8-12°С; 2-10°С; 18-20°С. Количественную оценку вирусной активности определяют путем титрования по ЦПЭ в клеточной линии СПЭВ. Клеточную суспензию в концентрации 4·105 клеток в см3 наносят на 96-луночные плашки по 0,01 см3 в каждую лунку. Инкубирование проводят в СО2 инкубаторе. Монослой формируется на вторые сутки. В опытах используют плашки со сплошным монослоем. Готовят 10-кратные разведения вируса с 10-1 до 10-8. На каждое разведение используют по 4 лунки, вирус вносят по 0,05 см3. Зараженную куль-туру инкубируют 5-7 дней. Титр вируса выражают в ТЦД50/см3. Результаты по изучению устойчивости вирусвакцины «ОРОВАК-ТГЭ» в зависимости от условий хранения представлены в таблице 2.The biological activity of 3 samples of the OROVAK-TSE vaccine prepared according to Example 1 and stored for 12 months at a temperature of minus 8-12 ° С is studied; 2-10 ° C; 18-20 ° C. Quantification of viral activity is determined by titration by CPE in the cell line SPEV. A cell suspension at a concentration of 4 · 10 5 cells in cm 3 is applied to 96-well plates of 0.01 cm 3 in each well. Incubation is carried out in a CO 2 incubator. A monolayer is formed on the second day. In experiments, dies with a continuous monolayer are used. Prepare 10-fold dilutions of the virus from 10 -1 to 10 -8 . For each dilution, 4 wells are used, the virus is added 0.05 cm 3 . The infected culture is incubated for 5-7 days. The virus titer is expressed in TCD 50 / cm 3 . The results of the study of the stability of the OROVAK-TSE virus vaccine depending on storage conditions are presented in table 2.
Из таблицы 2 следует, что наилучшие условия сохранности биологическоской активности вакцины обеспечивает температурный режим минус 8-12°С, при этом за 12 месяцев хранения активность снижается в среднем на 0,8 lg ТЦД50. Температура 2-10°С обеспечивает сохранность активности на высоком уровне только в течение 6 месяцев, а температура 18-20°С вызывает значительную инактивацию вируса.From table 2 it follows that the best conditions for the preservation of the biological activity of the vaccine provides a temperature regime of minus 8-12 ° C, while over 12 months of storage activity decreases on average by 0.8 lg TCD 50 . A temperature of 2-10 ° C ensures the preservation of activity at a high level only for 6 months, and a temperature of 18-20 ° C causes a significant inactivation of the virus.
Пример 3.Example 3
Исследуют безвредность 3 образцов вакцины "ОРОВАК-ТГЭ", приготовленных по примеру 1 из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5. Для контроля используют 6 подсвинков, серонегативных к вирусу ТГЭ свиней (по 2 на каждый образец). Навески вакцины массой 1 г суспендируют в 10 см3 стерильного физиологического раствора. Приготовленную суспензию вводят животным в объеме 5 см3 в область шеи или бедра.The safety of 3 samples of the OROVAK-TSE vaccine prepared according to Example 1 from the Transmissible gastroenteritis strain VGNKI No. 5 is examined. For control use 6 gilts seronegative for the TSV virus of pigs (2 for each sample). Samples of the vaccine weighing 1 g are suspended in 10 cm 3 of sterile saline. The prepared suspension is administered to animals in a volume of 5 cm 3 in the neck or thigh.
Контрольное наблюдение за животными ведут в течение 10 суток с ежедневным измерением температуры тела. Все животные остались живы. Клиническое состояние подопытных животных не отличалось от нормы и от группы контроля.Control monitoring of animals is carried out for 10 days with daily measurement of body temperature. All animals remained alive. The clinical condition of the experimental animals did not differ from the norm and from the control group.
Таким образом, исследуемые образцы вакцины безвредны.Thus, the test vaccine samples are harmless.
Пример 4.Example 4
Изучают антигенную активность 2-го опытного образца вакцины «ОРОВАК-ТГЭ», приготовленного по примеру 1 и хранившегося в течение 6 месяцев при температуре 2-10°С. Сухую вакцину смешивают с небольшим количеством (100-200 г) сухого корма, который раскладывают равномерным слоем в кормушки для скармливания животным перед утренним кормлением. Супоросным свиноматкам дозу вакцины скармливают за 10-14 дней до опороса по 10 г препарата на голову. Поросятам дозу вакцины (5 г) скармливают через 10-14 суток после отъема.The antigenic activity of the 2nd test sample of the OROVAK-TSE vaccine prepared according to Example 1 and stored for 6 months at a temperature of 2-10 ° C is studied. Dry vaccine is mixed with a small amount (100-200 g) of dry food, which is laid out in an even layer in feeding troughs for feeding animals before morning feeding. In pregnant sows, a dose of the vaccine is fed 10-14 days before farrowing, 10 g of the drug per head. A dose of vaccine (5 g) is fed to piglets 10-14 days after weaning.
Об антигенной активности судят по образованию вируснейтрализующих антител к вирусу ТГЭ у иммунизированных свиноматок на 7, 14, и 21 день после вакцинации; у иммунизированных поросят на 35 день после применения вакцины. Определение титра антител проводят в реакции нейтрализации против вируса ТГЭ, штамм «ВГНКИ-5», в разведении, соответствующему 100 ТЦД50/0,1 см3. Реакцию ставят стандартным методом, используя культуру клеток СПЭВ. Результат учитывают через 5 дней после постановки реакции. За титр нейтрализующих антител принимают наивысшее разведение сыворотки, которое полностью ингибирует цитопатический эффект вируса ТГЭ.Antigenic activity is judged by the formation of virus-neutralizing antibodies to the TSE virus in immunized sows at 7, 14, and 21 days after vaccination; in immunized piglets, 35 days after vaccine administration. Determination of antibody titer is carried out in a neutralization reaction against the TSE virus, strain "VGNKI-5", in a dilution corresponding to 100 TCD 50 / 0.1 cm 3 . The reaction is set by the standard method using cell culture SPEV. The result is taken into account 5 days after the formulation of the reaction. The highest serum dilution, which completely inhibits the cytopathic effect of the TSE virus, is taken as the neutralizing antibody titer.
Свиней считают серонегативными к вирусу ТГЭ, если их сыворотка крови в разведении 1:2 не обладала вируснейтрализующей активностью. До вакцинации в сыворотке крови подопытных животных специфические вируснейтрализующие антитела к вирусу ТГЭ отсутствовали.Pigs are considered seronegative for the TSE virus if their blood serum at a dilution of 1: 2 did not have a neutralizing activity. Before vaccination in the blood serum of experimental animals, specific neutralizing antibodies to the TSE virus were absent.
Динамика антител у животных, вакцинированных вторым опытным образцом «ОРОВАК-ТГЭ», представлена в таблице 3.The dynamics of antibodies in animals vaccinated with the second prototype "OROVAK-TSE", are presented in table 3.
Как видно из результатов таблицы 3, иммунизация вторым опытным образцом вакцины индуцирует образование вируснейтрализующих специфических антител у свиноматок на 7 день исследования, а у поросят на 35 день в титрах 1:128-256.As can be seen from the results of table 3, immunization with the second prototype vaccine induces the formation of virus-neutralizing specific antibodies in sows on day 7 of the study, and in piglets on day 35 in titers 1: 128-256.
Таким образом, антигенный компонент является активным и вакцина пригодна для применения.Thus, the antigenic component is active and the vaccine is suitable for use.
Пример 5.Example 5
Испытывают иммуногенную активность 2-го опытного образца вакцины «ОРОВАК-ТГЭ», хранившегося в течение 6 месяцев при температуре 2-10°С, приготовленного по примеру 1. Сухую вакцину с биологической активностью 6,25 lg ТЦД50/г-1 смешивают с небольшим количеством (100-200 г) сухого корма. Полученную смесь равномерным слоем расклавают в кормушки для скармливания 4 супоросным свиноматкам. Вакцину скармливают животным перед утренним кормлением в дозе 10 г на голову, в течение 3-х дней подряд, за 10-14 дней до опороса. У всех свиноматок, получивших вакцину «ОРОВАК-ТГЭ» в течение всей продолжительности опыта изменений клинических признаков не отмечено. На 10-14 день поросят отнимают от свиноматок и формируют в 4 опытные группы.The immunogenic activity of the 2nd test sample of the OROVAK-TSE vaccine, stored for 6 months at a temperature of 2-10 ° C, prepared according to Example 1, is tested. Dry vaccine with biological activity of 6.25 lg TCD 50 / g -1 is mixed with a small amount (100-200 g) of dry food. The resulting mixture is laid out in a uniform layer in feeding troughs for 4 pregnant sows. The vaccine is fed to animals before morning feeding at a dose of 10 g per head, for 3 consecutive days, 10-14 days before farrowing. In all sows treated with OROVAK-TSE vaccine, no clinical signs were observed during the entire duration of the experiment. On day 10-14, piglets are weaned and formed into 4 experimental groups.
Вакцину скармливают всем поросятам также перед утренним кормлением в дозе 5 г на голову. В качестве контроля используют поросят от не вакцинированных свиноматок, которым вакцину не скармливают.The vaccine is fed to all piglets also before morning feeding at a dose of 5 g per head. As a control, piglets are used from unvaccinated sows that are not fed the vaccine.
Эффективность иммунизации поросят контролируют через 21 день по титрам антител, выявленным в реакции нейтрализации и по результатам контрольного заражения привитых поросят культурой вирулентного штамма «Мюллер» вируса ТГЭ в дозе 1000 ЛД50/0,2 см3. У 12 опытных поросят после заражения отмечали слабость, лихорадку (40,5-41,5°С), 5 из которых на 4-5 сутки после появления сильной диареи погибли.The effectiveness of immunization of piglets is monitored after 21 days according to antibody titers detected in the neutralization reaction and according to the results of the control infection of vaccinated piglets with a culture of virulent strain “Muller” of TSE virus at a dose of 1000 LD 50 / 0.2 cm 3 . Weakness and fever (40.5-41.5 ° С) were observed in 12 experimental piglets after infection, 5 of which died on the 4-5th day after the onset of severe diarrhea.
Результаты по иммунизации поросят 2 опытным образцом вакцины «ОРОВАК-ТГЭ» представлены в таблицах 4 и 5.The results of immunization of piglets with 2 prototype vaccine "OROVAK-TSE" are presented in tables 4 and 5.
Данные таблиц 4 и 5 говорят о том, что опытный образец вакцины «ОРОВАК-ТГЭ» №2 индуцирует у всех опытных поросят выработку специфических антител в титрах 1: 32-256, тем самым обеспечивая их надежную защиту от контрольного заражения, в среднем на 84,8%. У поросят из группы контроля на вторые сутки после заражения отмечают отсутствие аппетита, жажду, слабость, лихорадку, сильную диарею - желтоватые пенистые фекалии. На 3 день после наступления комы все поросята погибли.The data in tables 4 and 5 indicate that the OROVAK-TSE vaccine prototype No. 2 induces the production of specific antibodies in titers 1: 32-256 in all experimental piglets, thereby ensuring their reliable protection against infection control, an average of 84 ,8%. In piglets from the control group, on the second day after infection, there is a lack of appetite, thirst, weakness, fever, severe diarrhea - yellowish foamy feces. On day 3 after the onset of coma, all the pigs died.
Вакцина «ОРОВАК-ТГЭ», изготовленная по технологии контактного обезвоживания, для перорального применения безвредна для свиноматок и поросят, не вызывает поствакцинальных реакций; высокоиммуногенна (защита от вируса ТГЭ на 75-100%) и экологически безопасна для обслуживающего персонала.The OROVAK-TSE vaccine manufactured using contact dehydration technology for oral administration is harmless to sows and piglets and does not cause post-vaccination reactions; highly immunogenic (protection against the TSE virus by 75-100%) and environmentally friendly for staff.
Использование вакцины «ОРОВАК-ТГЭ» для иммунизации животных позволит сократить затраты и повысить эффективность мероприятий по борьбе с трансмиссивным гастроэнтеритом свиней.The use of the OROVAK-TSE vaccine for immunizing animals will reduce costs and increase the effectiveness of measures to combat transmissible gastroenteritis in pigs.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007142926/13A RU2347585C1 (en) | 2007-11-22 | 2007-11-22 | Vaccine against transmissible gastroenteritis of pigs |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007142926/13A RU2347585C1 (en) | 2007-11-22 | 2007-11-22 | Vaccine against transmissible gastroenteritis of pigs |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2347585C1 true RU2347585C1 (en) | 2009-02-27 |
Family
ID=40529716
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2007142926/13A RU2347585C1 (en) | 2007-11-22 | 2007-11-22 | Vaccine against transmissible gastroenteritis of pigs |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2347585C1 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2463073C1 (en) * | 2011-03-21 | 2012-10-10 | Государственное научное учреждение Саратовский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ Саратовский НИВИ Россельхозакадемии) | Swine transmissible gastroenteritis vaccine and method for preparing it |
-
2007
- 2007-11-22 RU RU2007142926/13A patent/RU2347585C1/en not_active IP Right Cessation
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2463073C1 (en) * | 2011-03-21 | 2012-10-10 | Государственное научное учреждение Саратовский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ Саратовский НИВИ Россельхозакадемии) | Swine transmissible gastroenteritis vaccine and method for preparing it |
WO2012128667A3 (en) * | 2011-03-21 | 2012-11-15 | Laskavy Vladislav Nikolaevich | Vaccine against transmissible gastroenteritis in pigs and method for using said vaccine |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR100874119B1 (en) | Improved mycoplasma hyopneumoniae bacterin vaccine | |
US9827305B2 (en) | Poultry virus vaccines that are liquid stable | |
CN106999567B (en) | Method for ready-to-use PCV2/M.hyo combination vaccine | |
KR20050007402A (en) | Improved combine vaccine against mycoplasma hyopneumoniae and porcine viruses | |
BRPI0608439B1 (en) | combination vaccines comprising lawsonia intracellularis, salmonella spp and erysipelothrix rhusiopathiae, and kits | |
US20180171307A1 (en) | Pestivirus vaccines for congenital tremors | |
EP3076997B1 (en) | Swine vaccine against prrs and lawsonia intracellularis | |
RU2347585C1 (en) | Vaccine against transmissible gastroenteritis of pigs | |
US11738075B2 (en) | Method for lyophilizing live vaccine strains of Francisella tularensis | |
JP5554770B2 (en) | Vaccine for protection against Haemophilus paraswiss serotype 4 in piglets | |
RU2378017C2 (en) | Emulsion inactivated associated vaccine against cattle rednose and coronoviral infection | |
RU2761966C2 (en) | Oral vaccine against respiratory disease of ruminants containing polyvinylpyrrolidone | |
RU2452512C2 (en) | Inactivated emulsion associated vaccine for parvoviral, rheoviral, type i herpes-viral infections and viral diarrhoeia - cattle mucosal disease | |
RU2504400C1 (en) | Inactivated emulsion associated vaccine for cattle parainfluenza-3, infectious rhinotracheitis and viral diarrhoea | |
US20170072042A1 (en) | Salmonella choleraesuis-salmonella typhimurium vaccines | |
RU2546247C2 (en) | Vaccine against plague, adenovirus infections, parvovirus and coronavirus enteritis, leptospirosis and rabies of dogs | |
RU2395297C1 (en) | Inactivated combined vaccine against cattle infectious rhinotracheitis, virus diarrhoea and leptospirosis | |
US20230364213A1 (en) | Method for lyophilizing live vaccine strains of francisella tularensis | |
RU2182495C1 (en) | Viral vaccine against classic hog cholera | |
RU2043771C1 (en) | Vaccine against escherichiosis in animals | |
RU2163142C2 (en) | Inactivated emulsin-vaccine against salmonellosis in piglets | |
RU2515058C1 (en) | Associated inactivated emulsion bovine viral diarrhoea, rotavirus and coronavirus infections vaccine | |
RU2242247C2 (en) | Marked virus-vaccine against aujeszky's disease | |
RU2347584C1 (en) | Vaccine against newcastle disease | |
RU2279474C1 (en) | Strain of infection bovine rhinotracheitis (ibr) virus for production of vaccine and diagnostic preparations |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20101123 |