RU2347585C1 - Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней - Google Patents
Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней Download PDFInfo
- Publication number
- RU2347585C1 RU2347585C1 RU2007142926/13A RU2007142926A RU2347585C1 RU 2347585 C1 RU2347585 C1 RU 2347585C1 RU 2007142926/13 A RU2007142926/13 A RU 2007142926/13A RU 2007142926 A RU2007142926 A RU 2007142926A RU 2347585 C1 RU2347585 C1 RU 2347585C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vaccine
- transmissible gastroenteritis
- tse
- pigs
- strain
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии. Вакцина содержит вирусный материал из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 и дополнительно содержит сахарозу, пептон ферментативный, казеин, тиомочевину, аэросил AM-1-300 и смолу КБ-4П-2 при следующем соотношении компонентов, мас.%: вирусный материал из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 - 10,33-11,74, сахароза - 4,31-4,80, пептон ферментативный - 3,13-3,69, казеин - 0,78-1,11, тиомочевина - 0,04-0,70, аэросил AM-1-300 - 1,00-2,00, смола КБ-4П-2 - остальное. Вакцина обладает высокой иммуногенностью, безвредна, экологически безопасна. 5 табл.
Description
Предлагаемое изобретение относится к области биотехнологии вирусных вакцинных ветеринарных препаратов, в частности к вакцине «ОРОВАК-ТГЭ» против трансмиссивного гастроэнтерита свиней, предназначенной для пероральной иммунизации супоросных свиноматок, поросят и хряков ремонтной и основной групп.
Известна вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней, содержащая вирусный материал из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 (SU 734279, 21.12.1978).
Недостатком данной вакцины является значительная потеря ее антигенной и иммуногенной активности при производстве и последующем хранении, из-за низкой устойчивости вакцинного вируса к сублимационному высушиванию и, как следствие, к снижению ее эффективности.
Целью изобретения является повышение эффективности вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней.
Указанная цель достигается тем, что она дополнительно содержит сахарозу, пептон ферментативный, казеин, тиомочевину, аэросил AM-1-300 и смолу КБ-4П-2 при следующем соотношении компонентов, мас.%:
вирусный материал из штамма | |
Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 | 10,33-11,74 |
сахароза | 4,31-4,80 |
пептон ферментативный | 3,13-3,69 |
казеин | 0,78-1,11 |
тиомочевина | 0,04-0,70 |
аэросил АМ-1-300 | 1,00-2,00 |
смола КБ-4П-2 | остальное. |
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1.
Для получения вирусного материала из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 используют культуру СПЭВ, выращенную в роллерных условиях с образованием монослоя через 20-48 часов. Ростовую среду заменяют поддерживающей средой того же состава, но без сыворотки, с добавлением вируса. Множественность заражения составляет 1-10 ТЦД50 на 1 клетку. Инфицированную культуру инкубируют в роллерных условиях в течение 16-30 часов. Вирусный материал хранят при минус 20°С.
Перед приготовлением вакцины "ОРОВАК-ТГЭ" компоненты вакцины: сахарозу, пептон ферментативный, казеин и тиомочевину (каждый компонент в отдельности) подвергают тепловой обработке, при температуре 90°С, а смолу КБ-4П-2 в смеси с гидрофобным аэросилом при температуре 102±2°С в течение 4 часов, с последующим их охлаждением до температуры 4±2°С. В аппарат типа РТ-1 последовательно загружают вирусный материал из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 в объеме 14-15 л; сахарозу в количестве 5,5-6,5 кг; пептон ферментативный в количестве 4-5 кг; казеин в количестве 1-1,5 кг и 0,05-0,1 кг тиомочевины. Смешение - растворение компонентов в аппарате проводят при 8000 об/мин в течение 2 минут.Полученную суспензию вакцинного полуфабриката переносят в барабан шаровой мельницы, в котором осуществляют его смешивание и обезвоживание, в соотношении 1:4, с ионнообменной смолой КБ-4П-2 с нанесенным на поверхность ее частиц гидрофобного аэросила АМ-1-300, взятого по массе в количестве 1,25-2,50%. Скорость вращения барабана 60-90 об/мин.
Получают 3 состава предложенной вакцины, приведенной в таблице 1. Готовый вакцинный продукт «ОРОВАК-ТГЭ» представляет собой сыпучий порошок серо-желтого цвета. Биологическая активность препарата не ниже 6,0 lg ТЦД50/г-1. Массовая доля влаги в пределах 10-14%.
Вакцину расфасовывают по 100-200 г в стерильные флаконы или двойные полиэтиленовые пакеты. Флаконы укупоривают стерильными резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, а пакеты герметично запаивают.
Срок годности вакцины - 6 месяцев при условии хранения в темном помещении при температуре 2-10°С.
Пример 2.
Изучают биологическую активность 3-х образцов вакцины «ОРОВАК-ТГЭ», приготовленных по примеру 1 и хранившихся в течение 12 месяцев при температуре минус 8-12°С; 2-10°С; 18-20°С. Количественную оценку вирусной активности определяют путем титрования по ЦПЭ в клеточной линии СПЭВ. Клеточную суспензию в концентрации 4·105 клеток в см3 наносят на 96-луночные плашки по 0,01 см3 в каждую лунку. Инкубирование проводят в СО2 инкубаторе. Монослой формируется на вторые сутки. В опытах используют плашки со сплошным монослоем. Готовят 10-кратные разведения вируса с 10-1 до 10-8. На каждое разведение используют по 4 лунки, вирус вносят по 0,05 см3. Зараженную куль-туру инкубируют 5-7 дней. Титр вируса выражают в ТЦД50/см3. Результаты по изучению устойчивости вирусвакцины «ОРОВАК-ТГЭ» в зависимости от условий хранения представлены в таблице 2.
Из таблицы 2 следует, что наилучшие условия сохранности биологическоской активности вакцины обеспечивает температурный режим минус 8-12°С, при этом за 12 месяцев хранения активность снижается в среднем на 0,8 lg ТЦД50. Температура 2-10°С обеспечивает сохранность активности на высоком уровне только в течение 6 месяцев, а температура 18-20°С вызывает значительную инактивацию вируса.
Пример 3.
Исследуют безвредность 3 образцов вакцины "ОРОВАК-ТГЭ", приготовленных по примеру 1 из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5. Для контроля используют 6 подсвинков, серонегативных к вирусу ТГЭ свиней (по 2 на каждый образец). Навески вакцины массой 1 г суспендируют в 10 см3 стерильного физиологического раствора. Приготовленную суспензию вводят животным в объеме 5 см3 в область шеи или бедра.
Контрольное наблюдение за животными ведут в течение 10 суток с ежедневным измерением температуры тела. Все животные остались живы. Клиническое состояние подопытных животных не отличалось от нормы и от группы контроля.
Таким образом, исследуемые образцы вакцины безвредны.
Пример 4.
Изучают антигенную активность 2-го опытного образца вакцины «ОРОВАК-ТГЭ», приготовленного по примеру 1 и хранившегося в течение 6 месяцев при температуре 2-10°С. Сухую вакцину смешивают с небольшим количеством (100-200 г) сухого корма, который раскладывают равномерным слоем в кормушки для скармливания животным перед утренним кормлением. Супоросным свиноматкам дозу вакцины скармливают за 10-14 дней до опороса по 10 г препарата на голову. Поросятам дозу вакцины (5 г) скармливают через 10-14 суток после отъема.
Об антигенной активности судят по образованию вируснейтрализующих антител к вирусу ТГЭ у иммунизированных свиноматок на 7, 14, и 21 день после вакцинации; у иммунизированных поросят на 35 день после применения вакцины. Определение титра антител проводят в реакции нейтрализации против вируса ТГЭ, штамм «ВГНКИ-5», в разведении, соответствующему 100 ТЦД50/0,1 см3. Реакцию ставят стандартным методом, используя культуру клеток СПЭВ. Результат учитывают через 5 дней после постановки реакции. За титр нейтрализующих антител принимают наивысшее разведение сыворотки, которое полностью ингибирует цитопатический эффект вируса ТГЭ.
Свиней считают серонегативными к вирусу ТГЭ, если их сыворотка крови в разведении 1:2 не обладала вируснейтрализующей активностью. До вакцинации в сыворотке крови подопытных животных специфические вируснейтрализующие антитела к вирусу ТГЭ отсутствовали.
Динамика антител у животных, вакцинированных вторым опытным образцом «ОРОВАК-ТГЭ», представлена в таблице 3.
Как видно из результатов таблицы 3, иммунизация вторым опытным образцом вакцины индуцирует образование вируснейтрализующих специфических антител у свиноматок на 7 день исследования, а у поросят на 35 день в титрах 1:128-256.
Таким образом, антигенный компонент является активным и вакцина пригодна для применения.
Пример 5.
Испытывают иммуногенную активность 2-го опытного образца вакцины «ОРОВАК-ТГЭ», хранившегося в течение 6 месяцев при температуре 2-10°С, приготовленного по примеру 1. Сухую вакцину с биологической активностью 6,25 lg ТЦД50/г-1 смешивают с небольшим количеством (100-200 г) сухого корма. Полученную смесь равномерным слоем расклавают в кормушки для скармливания 4 супоросным свиноматкам. Вакцину скармливают животным перед утренним кормлением в дозе 10 г на голову, в течение 3-х дней подряд, за 10-14 дней до опороса. У всех свиноматок, получивших вакцину «ОРОВАК-ТГЭ» в течение всей продолжительности опыта изменений клинических признаков не отмечено. На 10-14 день поросят отнимают от свиноматок и формируют в 4 опытные группы.
Вакцину скармливают всем поросятам также перед утренним кормлением в дозе 5 г на голову. В качестве контроля используют поросят от не вакцинированных свиноматок, которым вакцину не скармливают.
Эффективность иммунизации поросят контролируют через 21 день по титрам антител, выявленным в реакции нейтрализации и по результатам контрольного заражения привитых поросят культурой вирулентного штамма «Мюллер» вируса ТГЭ в дозе 1000 ЛД50/0,2 см3. У 12 опытных поросят после заражения отмечали слабость, лихорадку (40,5-41,5°С), 5 из которых на 4-5 сутки после появления сильной диареи погибли.
Результаты по иммунизации поросят 2 опытным образцом вакцины «ОРОВАК-ТГЭ» представлены в таблицах 4 и 5.
Данные таблиц 4 и 5 говорят о том, что опытный образец вакцины «ОРОВАК-ТГЭ» №2 индуцирует у всех опытных поросят выработку специфических антител в титрах 1: 32-256, тем самым обеспечивая их надежную защиту от контрольного заражения, в среднем на 84,8%. У поросят из группы контроля на вторые сутки после заражения отмечают отсутствие аппетита, жажду, слабость, лихорадку, сильную диарею - желтоватые пенистые фекалии. На 3 день после наступления комы все поросята погибли.
Вакцина «ОРОВАК-ТГЭ», изготовленная по технологии контактного обезвоживания, для перорального применения безвредна для свиноматок и поросят, не вызывает поствакцинальных реакций; высокоиммуногенна (защита от вируса ТГЭ на 75-100%) и экологически безопасна для обслуживающего персонала.
Использование вакцины «ОРОВАК-ТГЭ» для иммунизации животных позволит сократить затраты и повысить эффективность мероприятий по борьбе с трансмиссивным гастроэнтеритом свиней.
Таблица 1 | ||||||||||
Компоненты: | Содержание компонентов, мас.%: | |||||||||
Состав 1 | Состав 2 | Состав 3 | ||||||||
Вирусный материал из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 | 10,33 | 11,016 | 11,74 | |||||||
Сахароза | 4,80 | 4,558 | 4,31 | |||||||
Пептон ферментативный | 3,69 | 3,419 | 3,13 | |||||||
Казеин | 1,11 | 0,950 | 0,78 | |||||||
Тиомочевина | 0,70 | 0,057 | 0,04 | |||||||
Аэросил AM-1-300 | 2,00 | 1,500 | 1,00 | |||||||
Смола КБ-4П-2 | Остальное | Остальное | Остальное | |||||||
Таблица 2 | ||||||||||
Вакцина «ОРОВАК-ТГЭ» | Биологическая активность, lg ТЦД50/г-1 | |||||||||
Вакцина после приготовления | Хранение при t (°С) в течение (мес.) | |||||||||
6 | 12 | |||||||||
минус 8-12 | 2-10 | 18-20 | минус 8-12 | 2-10 | 18-20 | |||||
Опытный образец №1 | 6,7 | 6,5 | 6,10 | 5,0 | 5,9 | 4,0 | 3,8 | |||
Опытный Образец №2 | 6,6 | 6,6 | 6,25 | 4,8 | 5,8 | 4,2 | 4,1 | |||
Опытный Образец №3 | 6,5 | 6,4 | 6,10 | 4,7 | 5,7 | 4,2 | 4,0 |
Таблица 3 | |||||||||
Вид | Сроки исследований, дни | ||||||||
Животных | До вакцинации | 7 | 14 | 21 | 35 | ||||
Свиноматки | |||||||||
№1 | 0 | 1:8 | 1:64 | 1:256 | - | ||||
№2 | 0 | 1:8 | 1:64 | 1:256 | - | ||||
Поросята | |||||||||
№1 | 0 | - | - | - | 1:256 | ||||
№2 | 0 | - | - | - | 1:128 | ||||
№3 | 0 | - | - | - | 1:128 | ||||
№4 | 0 | - | - | - | 1:256 | ||||
№5 | 0 | - | - | - | 1:256 | ||||
№6 | 0 | - | - | - | 1:128 | ||||
Таблица 4 | |||||||||
Титр вируснейтрализующих специфических антител в сыворотках крови опытных поросят | |||||||||
№ | Группа №1 | Группа №2 | Группа №3 | Группа 4 | |||||
1 | 1:256 | 1:256 | 1:256 | 1:256 | |||||
2 | 1:64 | 1:128 | 1:128 | 1:64 | |||||
3 | 1:128 | 1:128 | 1:128 | 1:64 | |||||
4 | 1:128 | 1:128 | 1:256 | 1:256 | |||||
5 | 1:128 | 1:128 | 1:128 | 1:128 | |||||
6 | 1:64 | 1:64 | 1:64 | 16128 | |||||
7 | 1:128 | 1:64 | 1:128 | 1:128 | |||||
8 | 1:64 | 1:128 | 1:64 | - | |||||
9 | - | - | 1:128 | - | |||||
10 | - | - | 1:32 | - |
Таблица 5 | ||||||
№ группы | Кол-во поросят в группе | Средний геометрический титр поствакцинальных антител | Результаты контрольного заражения | |||
Выжило | Клинически переболело | Из них пало | % выживших | |||
1 | 8 | 100 | 6 | 3 | 2 | 75 |
2 | 8 | 230 | 7 | 3 | 1 | 87,5 |
3 | 10 | 110,2 | 8 | 4 | 2 | 80 |
4 | 7 | 126,5 | 7 | 2 | 0 | 100 |
Всего | 33 | 28 | 12 | 5 | 84,8 | |
Контроль | 10 | 0 | 0 | 10 | 10 | 0 |
Claims (1)
- Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней, содержащая вирусный материал из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит сахарозу, пептон ферментативный, казеин, тиомочевину, аэросил AM-1-300 и смолу КБ-4П-2 при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Вирусный материал из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5 10,33-11,74 Сахароза 4,31-4,80 Пептон ферментативный 3,13-3,69 Казеин 0,78-1,11 Тиомочевина 0,04-0,70 Аэросил AM-1-300 1,00-2,00 Смола КБ-4П-2 Остальное
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007142926/13A RU2347585C1 (ru) | 2007-11-22 | 2007-11-22 | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2007142926/13A RU2347585C1 (ru) | 2007-11-22 | 2007-11-22 | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2347585C1 true RU2347585C1 (ru) | 2009-02-27 |
Family
ID=40529716
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2007142926/13A RU2347585C1 (ru) | 2007-11-22 | 2007-11-22 | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2347585C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2463073C1 (ru) * | 2011-03-21 | 2012-10-10 | Государственное научное учреждение Саратовский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ Саратовский НИВИ Россельхозакадемии) | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ ее применения |
-
2007
- 2007-11-22 RU RU2007142926/13A patent/RU2347585C1/ru not_active IP Right Cessation
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2463073C1 (ru) * | 2011-03-21 | 2012-10-10 | Государственное научное учреждение Саратовский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ Саратовский НИВИ Россельхозакадемии) | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ ее применения |
WO2012128667A3 (ru) * | 2011-03-21 | 2012-11-15 | Laskavy Vladislav Nikolaevich | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ её применения |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR100874119B1 (ko) | 개선된 마이코플라스마 하이오뉴모니애 박테린 백신 | |
US9827305B2 (en) | Poultry virus vaccines that are liquid stable | |
CN106999567B (zh) | 用于即用型PCV2/M.hyo组合疫苗的方法 | |
KR20050007402A (ko) | 미코플라스마 하이오뉴모니애 및 돼지 바이러스에 대한개선된 배합 백신 | |
BRPI0608439B1 (pt) | vacinas combinadas compreendendo lawsonia intracellularis, salmonella spp e erysipelothrix rhusiopathiae, e kits | |
US10633637B2 (en) | Pestivirus vaccines for congenital tremors | |
EP3076997B1 (en) | Swine vaccine against prrs and lawsonia intracellularis | |
RU2347585C1 (ru) | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней | |
US11738075B2 (en) | Method for lyophilizing live vaccine strains of Francisella tularensis | |
RU2403061C1 (ru) | Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, респираторно-синцитиальной болезни, вирусной диареи и пастереллеза крупного рогатого скота | |
JP5554770B2 (ja) | 子ブタにおけるヘモフィルス・パラスイス血清型4に対する防御のためのワクチン | |
RU2378017C2 (ru) | Ассоциированная вакцина против инфекционного ринотрахеита и коронавирусной инфекции крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная | |
RU2761966C2 (ru) | Пероральная вакцина против респираторного заболевания жвачных животных, содержащая поливинилпирролидон | |
RU2452512C2 (ru) | Вакцина ассоциированная против парвовирусной, реовирусной, герпесвирусной типа i инфекций и вирусной диареи - болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота инактивированная эмульсионная | |
RU2504400C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная | |
US20170072042A1 (en) | Salmonella choleraesuis-salmonella typhimurium vaccines | |
RU2546247C2 (ru) | Вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак | |
RU2395297C1 (ru) | Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи и лептоспироза крупного рогатого скота | |
US20230364213A1 (en) | Method for lyophilizing live vaccine strains of francisella tularensis | |
RU2182495C1 (ru) | Вирусвакцина против классической чумы свиней | |
RU2043771C1 (ru) | Вакцина против эшерихиоза животных | |
RU2163142C2 (ru) | Инактивированная эмульсин-вакцина против сальмонеллеза поросят | |
RU2515058C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против вирусной диареи, ротавирусной и коронавирусной инфекций крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная | |
RU2242247C2 (ru) | Маркированная вирусвакцина против болезни ауески | |
RU2347584C1 (ru) | Вакцина против ньюкаслской болезни |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20101123 |