RU2148648C1 - Способ получения гетерополисахарида - Google Patents
Способ получения гетерополисахарида Download PDFInfo
- Publication number
- RU2148648C1 RU2148648C1 RU99100148/13A RU99100148A RU2148648C1 RU 2148648 C1 RU2148648 C1 RU 2148648C1 RU 99100148/13 A RU99100148/13 A RU 99100148/13A RU 99100148 A RU99100148 A RU 99100148A RU 2148648 C1 RU2148648 C1 RU 2148648C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- yeast
- heteropolysaccharide
- peptone
- culturing
- nutrient medium
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение может быть использовано для производства медицинских препаратов, косметических средств и биологически активных добавок к пище. Способ включает культивирование дрожжей Cryptococcus laurentii на питательной среде, содержащей глюкозу, пептон, сульфаты магния и железа, хлориды натрия и марганца, дрожжевой автолизат и регулятор рН, разбавление культуральной жидкости, отделение клеток дрожжей, упаривание супернатанта и осаждение гетерополисахарида. В качестве регулятора рН питательная среда содержит углекислый кальций. Способ позволяет увеличить выход целевого продукта более чем на 50%, улучшить его качество, сократить время культивирования на 24 ч. 3 табл.
Description
Изобретение относится к медицинской, косметической и пищевой промышленности и может быть использовано для производства медицинских препаратов, косметических средств и биологически активных добавок к пище.
Известны способы получения полисахаридов дрожжей рода Cryptococcus путем культивирования с использованием питательных сред, на которых в процессе биосинтеза pH среды снижается ниже 5 (1,2). При этом синтезируются два продукта: гетерополисахарид и гомополисахарид (глюкан). Биологической активностью обладает гетерополисахарид, а глюкан является побочным продуктом (3).
С целью получения только биологически активного гетерополисахарида с помощью дрожжей рода Cryptococcus, в том числе Cr.laurentii, используют способ получения путем культивирования на питательной среде, в которой присутствием буферной системы, создаваемой избытком фосфорных солей, pH поддерживается на нейтральном уровне, чем исключается синтез побочного продукта.
По этому способу дрожжи культивируют на среде следующего состава, г/л:
Глюкоза - 50
Пептон - 2,0
KH2PO4 - 3,56
Na2HPO4•2H2O - 7,22
MgSO4•7H2O - 0,5
NaCl - 0,5
CaCl2•2H2O - 0,001
MnCl2•4H2O - 0,0015
FeSO4•7H2O - 0,01
Дрожжевой автолизат (мл) - 10
Дистиллированная вода - До 1 л
(4,5).
Глюкоза - 50
Пептон - 2,0
KH2PO4 - 3,56
Na2HPO4•2H2O - 7,22
MgSO4•7H2O - 0,5
NaCl - 0,5
CaCl2•2H2O - 0,001
MnCl2•4H2O - 0,0015
FeSO4•7H2O - 0,01
Дрожжевой автолизат (мл) - 10
Дистиллированная вода - До 1 л
(4,5).
При этом длительность процесса биосинтеза составляет 120 ч. Культуральную жидкость разбавляют в 2-3 раза дистиллированной водой и отделяют клетки центрифугированием в течение 30 мин при 6000 об/мин. Супернатант концентрируют вакуум-упариванием при 40-60oC в 5 раз и осаждают гетерополисахарид 2 объемами этилового спирта. Осадок дважды промывают этиловым спиртом и сушат при температуре 37oC.
Недостатками способа являются сравнительно небольшой выход целевого продукта (6-8 г/л), длительность процесса биосинтеза (120 ч), высокая зональность продукта (28-30%).
Задачей изобретения является разработка способа получения гетерополисахарида, который обеспечивал бы повышение выхода и улучшение качества целевого продукта, сокращение времени биосинтеза.
Задача изобретения реализуется предлагаемым способом, включающим культивирование дрожжей Cr. laurentii на питательной среде, содержащей глюкозу, пептон, сульфаты магния и железа, хлориды натрия и марганца, дрожжевой автолизат и регулятор pH, разбавление культуральной жидкости, отделение клеток дрожжей, упаривание супернатанта и осаждение из него гетерополисахарида.
В качестве регулятора pH среда содержит углекислый кальций и имеет следующее соотношение компонентов, г/л:
Глюкоза - 36 - 40
Пептон - 0,4 - 0,7
CaCO3 - 1,5 - 1,8
MgSO4•7H2O - 0,45 - 0,55
NaCl - 0,45 - 0,55
MnCl2•4H2O - 0,001-0,002
FeSO4•7H2O - 0,01 - 0,02
Дрожжевой автолизат, мл - 10 - 15
Дистиллированная вода - До 1 л
Способ иллюстрируется следующими примерами (см. табл. 1).
Глюкоза - 36 - 40
Пептон - 0,4 - 0,7
CaCO3 - 1,5 - 1,8
MgSO4•7H2O - 0,45 - 0,55
NaCl - 0,45 - 0,55
MnCl2•4H2O - 0,001-0,002
FeSO4•7H2O - 0,01 - 0,02
Дрожжевой автолизат, мл - 10 - 15
Дистиллированная вода - До 1 л
Способ иллюстрируется следующими примерами (см. табл. 1).
На этих средах проводят культивирование Cr.laurentii при 24 ± 0,5oC и скорости перемешивания 220 об/мин. Культуральную жидкость разбавляют в 2-3 раза дистиллированной водой. Клетки отделяют центрифугированием в течение 30 мин при 6000 об/мин. Супернатант концентрируют вакуум-упариванием при 40-60oC в 5 раз и осаждают 2 объемами этилового спирта. Осадок гетерополисахаридов дважды промывают этиловым спиртом и сушат при 37oC.
Сравнение показателей биосинтеза и состава гетерополисахаридов приведено в табл. 2, 3.
Таким образом, по сравнению с прототипом для получения гетерополисахарида вместо фосфорных солей, используемых для регуляции pH среды и составляющих 14,5% от всех компонентов питательной среды, в ее состав введен CaCO3, составляющий в среднем 3% от всех компонентов. Количество глюкозы снижено в среднем на 24%, пептона - в среднем на 73%. При этом идет более быстрая и полная утилизация источников углеродного и азотного питания. Выход гетерополисахарида увеличился в среднем на 57%, удельная продуктивность процесса повысилась более чем в 2 раза. Продукт при том же моносахаридном составе (табл. 3) содержал значительно меньшее количество зольных веществ и имел большую относительную вязкость (табл. 2), что увеличивает возможности использования гетерополисахарида в качестве биологически активного вещества.
Литература
1. Harada T., Fukui T., Nikuni Z., Banno I., Hasegawa T. J.Agric. Chem. Soc.Japan, 1963, т. 37, N 4, с. 226-230.
1. Harada T., Fukui T., Nikuni Z., Banno I., Hasegawa T. J.Agric. Chem. Soc.Japan, 1963, т. 37, N 4, с. 226-230.
2. Елинов Н.П., Витовская Г.А. Биохимия, 1970, т. 35, N 6, с. 1187-1192.
3. Витовская Г.А. Микробиологический журнал, 1986, т. 48, N 3, с. 91-101.
4. Витовская Г.А., Ананьева Е.П., Гринберг Т.А., Буклова В.Н., Козлов А. И. Прикладная биохимия и микробиология, 1983, т. 19, N 6, с. 728-792.
5. Витовская Г.А., Самаркина Г.М., Ананьева Е.П., Синицкая И.А. Микробиология, 1989, т. 58, N 2, с. 240-245.
Claims (1)
- Способ получения гетерополисахарида путем культивирования дрожжей Cryptococcus laurentii на питательной среде, содержащей глюкозу, пептон, сульфаты магния и железа, хлориды натрия и марганца, дрожжевой автолизат и регулятор pH среды, разбавления культуральной жидкости, отделения клеток дрожжей, упаривания супернатанта и осаждения из него гетерополисахарида, отличающийся тем, что используют питательную среду, содержащую в качестве регулятора pH углекислый кальций, при следующем соотношении компонентов, г/л:
Глюкоза - 36 - 40
Пептон - 0,4 - 0,7
CaCO3 - 1,5 - 1,8
MgSO4 • 7H2O - 0,45 - 0,55
NaCl - 0,45 - 0,55
MnCl2 • 4H2O - 0,001 - 0,002
FeSO4 • 7H2O - 0,01 - 0,02
Дрожжевой автолизат(мл) - 10 - 15
Вода - До 1 л
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99100148/13A RU2148648C1 (ru) | 1999-01-05 | 1999-01-05 | Способ получения гетерополисахарида |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99100148/13A RU2148648C1 (ru) | 1999-01-05 | 1999-01-05 | Способ получения гетерополисахарида |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2148648C1 true RU2148648C1 (ru) | 2000-05-10 |
Family
ID=20214350
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU99100148/13A RU2148648C1 (ru) | 1999-01-05 | 1999-01-05 | Способ получения гетерополисахарида |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2148648C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100352914C (zh) * | 2005-08-11 | 2007-12-05 | 中国科学院植物研究所 | 酵母拮抗菌罗伦隐球酵母的真空冷冻干燥制品及其制备方法 |
-
1999
- 1999-01-05 RU RU99100148/13A patent/RU2148648C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Витовская Г.А., Ананьева Е.П., Гринберг Т.А., Буклова В.Н., Козлов А.И. Прикладная биохимия и микробиология, 1983, т. 19, N 6, с. 728 - 792. Витовская Г.А., Самаркина Г.М., Ананьева Е.П., Синицкая И.А. Микробиология, 1989, т. 58, N 2, с. 240 - 245. Елинов Н.П., Витовская Г.А. Биохимия, 1970, т. 35, N 6, с. 1187 - 1192. Витовская Г.А. Микробиологический журнал, 1986, т. 48, N 3, с. 91 - 101. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100352914C (zh) * | 2005-08-11 | 2007-12-05 | 中国科学院植物研究所 | 酵母拮抗菌罗伦隐球酵母的真空冷冻干燥制品及其制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0781339A2 (de) | Verfahren zur herstellung von polyhydroxyfettsäuren sowie rekombinante bakterienstämme zur durchführung des verfahrens | |
US5658793A (en) | Pseudomonas aeruginosa and its use in a process for the biotechnological preparation of L-rhamnose | |
US3622463A (en) | Production of extracellular glucose isomerase by streptomyces | |
CN101538599B (zh) | 提高脱氮假单胞杆菌维生素b12产量的方法 | |
JPH051718B2 (ru) | ||
RU2148648C1 (ru) | Способ получения гетерополисахарида | |
JPH03130084A (ja) | トレハロースの製造法 | |
US4245048A (en) | Process for producing coenzyme Q10 | |
JPH0823993A (ja) | ウリジン二リン酸n−アセチルグルコサミンの製造方法 | |
JP2001069975A (ja) | キトサナーゼ | |
JPH089972A (ja) | 新規デアミノノイラミニダーゼとその製造方法 | |
JPH09154589A (ja) | エリスリトールの製造方法 | |
JP4194152B2 (ja) | エリスリトールの製造方法 | |
JP4133822B2 (ja) | D−アラニンの製造方法 | |
JPH06253877A (ja) | 微生物によるセルロース性物質の製造方法 | |
JPS62289198A (ja) | ヒアルロン酸の新規製造方法 | |
JP3376859B2 (ja) | リビトールの製造方法 | |
JPH0746992A (ja) | ヒアルロン酸の製造方法 | |
JPH09292A (ja) | グルタチオン含有藻体およびグルタチオンの製造方法 | |
JP4336400B2 (ja) | 酵素誘導剤及びそれを用いる酵素製造方法 | |
JPS63141594A (ja) | ヒアルロン酸の製造方法 | |
WO2022259458A1 (ja) | (s)-3-ハロゲノ-2-メチル-1,2-プロパンジオールを製造する方法 | |
JP3601618B2 (ja) | ラミナリペンタオース生産酵素の製造方法 | |
JPH1189566A (ja) | 二糖類ホスホリラーゼの製造方法 | |
JP3935992B2 (ja) | 光学活性3−クロロラクトニトリル及びそのエステル並びにそれらの製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20060106 |