RU2093577C1 - Способ получения декстрана - Google Patents
Способ получения декстрана Download PDFInfo
- Publication number
- RU2093577C1 RU2093577C1 RU93051597A RU93051597A RU2093577C1 RU 2093577 C1 RU2093577 C1 RU 2093577C1 RU 93051597 A RU93051597 A RU 93051597A RU 93051597 A RU93051597 A RU 93051597A RU 2093577 C1 RU2093577 C1 RU 2093577C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dextran
- aqueous solution
- rate
- passed
- preparing
- Prior art date
Links
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
Использование: биотехнология, химическая технология, медицинская промышленность для получения препарата низкомолекулярного декстрана. Сущность изобретения: предлагается метод получения декстранов со средневесовой молекулярной массой 1000 Д. В способе частичного расщепления высокомолекулярного декстрана путем кислотного гидролиза его водного раствора в присутствии соляной кислоты при нагревании подкисленный водный раствор высокомолекулярного декстрана пропускают через сильносшитые катионитные ионообменные смолы макропористой структуры на основе сульфитированных сополимеров стирола с дивинилбензолом в H+ форме, имеющих pH 0,85 - 1,1, при температуре 85±1oC со скоростью 0,01 - 0,25 объема в час.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и химической технологии, конкретно к способу деполимеризации декстранов, а именно к способу получения декстрана со средневесовой молекулярной массой (м.м.) 1000 Д, который может быть использован в медицинской промышленности препарата, способного предотвращать случаи тяжелых анафилактических реакций при трансфузии декстрановых кровезаменителей с более высокой м.м. декстран 70, декстран 40.
За рубежом широко применяется препарат "Промит" (Швеция), представляющий собой декстран со средневесовой м.м. 1000 Д. Его получают ферментативным синтезом нативного декстрана из сахарозы с применением микроорганизмов вида. Далее нативный декстран подвергается глубокому гидролизу и фракционированию для получения продукта с требуемой м.м. (1).
Указанный препарат обладает свойствами моновалентного гаптена. Субстанция декстрана с м. м. 1000 Д реагируют лишь с индивидуальным реакционным центром декстранового антитела без образования последующих "мостовых" связей и не имеет тенденции к образованию иммунных комплексов.
Избыток моновалентного гаптена, вводимого при внутривенном влиянии, конкурирует с поливалентными гаптенами (препаратами декстрана с более высокой м.м.) в реакциях образования иммунных комплексов и препятствует возникновению анафилаксии.
Широко известен способ частичного расщепления нативного декстрана, который осуществляется путем кислотного гидролиза (2). Процесс проводят в кислой среде при температуре 85 87oC и постоянном перемешивании. Этот метод применяется для получения декстранов с м.м. 70000 и 40000 Д. Недостатком этого метода является невозможность получения низкомолекулярных декстранов с заданной молекулярной массой, т.к. при глубоком химическом гидролизе процесс неуправляем, и атаке ионами водорода в первую очередь подвергаются более доступные молекулы декстрана с малыми м.м. и в результате значительно возрастает доля ди- и моносахаров в конечном продукте гидролиза.
Описываемый способ направлен на получение декстрана с молекулярной массой ≈ 1000 Д.
Для этого в способе частичного расщепления высокомолекулярного декстрана путем кислотного гидролиза его водного раствора в присутствии соляной кислоты при нагревании подкисленный водный раствор высокомолекулярного декстрана пропускают через сильносшитые катионитные ионообменные смолы макропористой структуры на основе сульфитированных сополимеров стирола с дивинилбензолом в H+ форме, имеющих pH 0,85 1,1 при температуре 85±1oC, со скоростью 0,01 0,25 объема в час.
Способ в соответствии с изобретением заключается в следующем: стеклянную колонку (высота 600 мм, диаметр 35 мм) заполняют катионитной ионообменной смолой (объем смолы 500 мл), пропускают через нее последовательно 1 М раствор NaOH, дистиллированную воду, 1 М раствор соляной кислоты и отмывают дистиллированной водой до pH 0,85 1,1. Водный раствор высокомолекулярного декстрана с концентрацией 5 10% подкисляют соляной кислотой (pH 1,0 1,5) и пропускают через колонку с ионообменной смолой со скоростью 0,01 0,25 объема в час. Процесс частичного расщепления нативного декстрана контролируется вискозиметрически и методом гель-проникающей хроматографии на сефадексе C-15, которая фиксирует от скорости потока водного раствора исходного декстрана через катионит.
Получают растворы частично гидролизованного декстрана со средней молекулярной массой 1300 1700 Д, которые подвергают фракционированию на сефадексе C-15 на колонке, калиброванной декстраном 1000 со скоростью 150 - 220 мл в час.
Преимуществом данного способа является возможность осуществления глубокого гидролиза высокомолекулярного декстрана до декстрана с м.м. 1000 Д с выходом конечного продукта около 50%
Предлагаемый способ позволяет полностью автоматизировать процесс и осуществить его непрерывным поточным методом без использования больших количеств неорганических кислот, что значительно повышает технико-экономические показатели технологии и решает проблему экологии.
Предлагаемый способ позволяет полностью автоматизировать процесс и осуществить его непрерывным поточным методом без использования больших количеств неорганических кислот, что значительно повышает технико-экономические показатели технологии и решает проблему экологии.
Применение в качестве твердофазного катализатора ионообменных смол с размером пор от 250 до 2500 макропористой структуры с высокоразвитой удельной поверхностью (до 350 м2/г), содержащих SO3H группы, позволяет проводить процесс гидролиза с высокими скоростями и большой избирательностью по молекулярным массам вследствие высоких коэффициентов диффузии молекул декстрана в макропоры ионита.
Пример 1. Через колонку, заполненную 500 мл катионообменной макропористой смолы типа КУ-23, последовательно пропускают 1 М раствор WaOH, дистиллированную воду, 1 М раствор соляной кислоты и отмывают апирогенной водой до pH 0,85, систему термостатируют при температуре 85±1oC. Водный раствор нативного декстрана (C= 5%) подкисляют соляной кислотой до pH 1,5 и пропускают через колонку и ионообменной смолой со скоростью 0,01 0,04 колонночного объема в час.
Полученный раствор частично гидролизованного декстрана порциями по 200 мл фракционируют на колонке (диаметр 40 мм, высота 600 мм), заполненный носителем сефадекс C-15 (700 мл), со скоростью 0,32 колоночных объема в час, отбирая фракцию, соответствующую по времени выхода эталону декстран 1000, и лиофильно сушат. Выход по сухому веществу 48% Mw=1200 Д. Готовят лекарственную форму, содержащую 15% субстанции декстрана и 0,6% натрия хлорида, стерильно фильтруют, разливают и стерилизуют обычным способом.
Получают стерильный, апирогенный, прозрачный, слегка желтоватый раствор препарата, не отличающийся по физико-химическим и биологическим свойствам от препарата Промит.
Пример 2. Колонку, подготовленную описанным выше способом и отмытую апирогенной водой до pH 0,96, термостатируют при температуре 85±1oC. Водный раствор декстрана с м.м. 60000±10000 Д (C=10%) подкисляют соляной кислотой до pH 1,0 и пропускают через колонку с ионообменной смолой со скоростью 0,08 0,12 колоночного объема в час и фракционируют со скоростью 0,27 объема в час описанным выше способом. Выход по сухому веществу 53% Mw=1000 Д. Готовят лекарственную форму, содержащую 14,7% субстанции низкомолекулярного декстрана и о,6 натрия хлорида, стерильно фильтруют, разливают и стерилизуют обычным способом.
Получают стерильный, апирогенный, прозрачный, бесцветный раствор препарата, не отличающийся по физико-химическим и биологическим свойствам от шведского препарата Промит.
Пример 3. Колонку, подготовленную описанным выше способом и отмытую до pH 1,1, термостатируют при температуре 85±1oC. Водный раствор декстрана с м. м. 5000±1500 Д (C= 8%) подкисляют соляной кислотой до pH 1,2 и пропускают через колонку и ионообменной смолой со скоростью 0,18 0,25 колоночного объема в час, фракционируют со скоростью -,20 колоночного объема в час описанным выше способом. Выход по сухому веществу 49% Mw=1100 Д. Готовят лекарственную форму, содержащую 15% субстанции низкомолекулярного декстрана и 0,6% натрия хлорида, стерильно фильтруют, разливают и стерилизуют обычным способом.
Получают стерильный, апирогенный, прозрачный, бесцветный раствор препарата, не отличающийся по физико-химическим и биологическим свойствам от шведского препарата Промит.
Claims (1)
- Способ получения декстрана путем кислотного гидролиза водных растворов высокомолекулярных декстранов в присутствии соляной кислоты при нагревании, отличающийся тем, что подкисленный водный раствор высокомолекулярного декстрана пропускают через ионообменную смолу на основе сульфированного сополимера стирола с дивинилбензолом в Н+-форме, имеющей pH 0,85 1,1, со скоростью 0,01 0,25 об./ч, полученный гидролизат пропускают через колонку, заполненную носителем сефадекс С-15, со скоростью 0,2 0,32 об./ч и полученную фракцию декстрана с мол.м. 1000 Д высушивают известными методами.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU93051597A RU2093577C1 (ru) | 1993-11-04 | 1993-11-04 | Способ получения декстрана |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU93051597A RU2093577C1 (ru) | 1993-11-04 | 1993-11-04 | Способ получения декстрана |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU93051597A RU93051597A (ru) | 1997-03-27 |
RU2093577C1 true RU2093577C1 (ru) | 1997-10-20 |
Family
ID=20149140
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU93051597A RU2093577C1 (ru) | 1993-11-04 | 1993-11-04 | Способ получения декстрана |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2093577C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK172860B1 (da) * | 1998-03-25 | 1999-08-16 | Pharmacosmos Holding As | Jerndextranforbindelse til anvendelse som komponent i et terapeutisk middel til forebyggelse af eller behandling af jernman |
-
1993
- 1993-11-04 RU RU93051597A patent/RU2093577C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
1. Prescribing Information; Promit, Pharmacia AS, 1985. 2. SU, авторское свидетельство, 225378, кл. C 12P 19/04, 1973. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK172860B1 (da) * | 1998-03-25 | 1999-08-16 | Pharmacosmos Holding As | Jerndextranforbindelse til anvendelse som komponent i et terapeutisk middel til forebyggelse af eller behandling af jernman |
WO1999048533A1 (en) * | 1998-03-25 | 1999-09-30 | Pharmacosmos Holding A/S | An iron-dextran compound for use as a component in a therapeutical composition for prophylaxis or treatment of iron-deficiency, a process for producing said iron-dextran compound and use of said compound for the preparation of a parenterally administrable therapeutical composition |
EA003427B1 (ru) * | 1998-03-25 | 2003-04-24 | Фармакосмос Холдинг А/С | Железо-декстрановое соединение для применения в качестве компонента терапевтической композиции для профилактики или лечения дефицита железа, способ получения указанного железо-декстранового соединения и применение указанного соединения для изготовления терапевтической композиции для парентерального введения |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Takagi et al. | Purification and chemical properties of a flocculant produced by Paecilomyces | |
KR100757630B1 (ko) | 신규한 추출 및 단리 방법으로 수득되는 세균성 캡슐형 다당류 | |
JPH07501937A (ja) | 精製キチンデアセチラーゼ | |
WO2005056525A2 (en) | Deacetylation of n-acetylglucosamine | |
CN102558559B (zh) | 一种连续法合成小分子羟基硅油的方法 | |
Marler et al. | Structure of a polysaccharide protein complex. | |
RU2093577C1 (ru) | Способ получения декстрана | |
Tamada | Sulfation of silk fibroin by sulfuric acid and anticoagulant activity | |
Sakamoto et al. | Studies on the interaction between heparin and mouse bone collagenase | |
US4649111A (en) | Process for the preparation of 5'-ribonucleotides | |
CN100491526C (zh) | 从胰渣中提取及纯化胰蛋白酶的方法 | |
EP0673425A1 (en) | Dna encoding chitin deacetylase | |
Kato et al. | Separation of ovomucin into carbohydrate rich and poor components by chromatography on lysozyme-sepharose 4 B | |
JPH0587083B2 (ru) | ||
Ahmed et al. | Lymphoblastoid cell adhesion mediated by a dimeric and polymeric endogenous β‐galactoside‐binding lectin (galaptin) | |
CN111110857A (zh) | 一种长效缓释的聚乙二醇修饰抗肿瘤药物及其制备方法 | |
RU93018605A (ru) | Способ производства натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты из животного сырья | |
US20240254530A1 (en) | Non-animal chondroitin sulfate oligosaccharide and preparation method thereof | |
SU1571047A1 (ru) | Способ получени водорастворимых олигосахаридов | |
JP2739232B2 (ja) | 生物学的親和性を有するセルロースゲルの使用方法 | |
CN117137090B (zh) | 一种水解蛋黄粉复合物及其制备方法 | |
SU1419717A1 (ru) | Способ получени биоспецифических адсорбентов дл выделени фибронектина и коллагеназ | |
SU681837A1 (ru) | Способ иммобилизации белковых молекул | |
EP0059182B1 (en) | A process for isolating aminoacylase enzyme from a mammal kidney extract | |
JPH01250331A (ja) | グリセリンの精製法 |