RU2018141777A

RU2018141777A - Биспецифичные антитела, нацеленные на egfr и her2

Info

Publication number: RU2018141777A
Application number: RU2018141777A
Authority: RU
Inventors: Эжен ЖУКОВСКИ; Оливье Лежер; Пьер-Эммануэль ЖЕРАР; Андре ПЕЛЕГРЕН; Кристель Ларбуре
Original assignee: Биомюнё Фармасьютикалз; Инсерм (Энститю Насьональ Де Ля Сантэ Э Де Ля Решерш Медикаль); Юниверсите Де Монпелье; Энститю Режиональ Дю Кансер Де Монпелье (Икм)
Priority date: 2016-04-28
Filing date: 2017-04-28
Publication date: 2020-05-28
Also published as: KR102360742B1; JP2019516364A; EP3448890A1; CN109563166A; CN109563166B; AU2017255970A1; SG11201809316XA; CA3025689A1; JP7258556B2; WO2017186950A1; US20190153104A1; ES2952951T3; EP3448890B1; KR20190073311A

Claims

1. Биспецифичное антитело, содержащее две тяжелые цепи и четыре легкие цепи, причем каждая тяжелая цепь включает:

а. Fc-область иммуноглобулина, содержащую домены шарнир-C_H2-C_H3,

b. причем Fc-область связана с C_H1-V_H тяжелой цепи Fab антитела 1 (Ab1) через указанный шарнирный домен,

с. который, в свою очередь, связан с C_H1-V_H тяжелой цепи Fab антитела 2 (Ab2) через последовательность полипептидного линкера, причем последовательность полипептидного линкера связывает N-конец данного домена V_H тяжелой цепи Fab Ab1 с C-концом данного домена C_H1 Ab2,

а четыре легкие цепи включают легкие цепи Fab Ab1 и легкие цепи Fab Ab2, связанные с родственными им доменами тяжелой цепи;

при этом Ab1 и Ab2 неодинаковы и выбраны независимо друг от друга из группы, состоящей из цетуксимаба или его мутантных производных, с одной стороны, и трастузумаба или его мутантных производных, с другой стороны.

2. Биспецифичное антитело по п. 1, при этом Ab1 или Ab2 означает цетуксимаб или его мутантное производное, включающие:

домен V_H, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 4,

домен C_H1, включающий последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21 и SEQ ID NO: 22,

домен V_L, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 13,

домен C_L, включающий последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24 и SEQ ID NO: 25,

причем домены C_H1 и C_L связаны следующим образом:

- SEQ ID NO: 2 с SEQ ID NO: 11,

- SEQ ID NO: 5 с SEQ ID NO: 14 или SEQ ID NO: 23,

- SEQ ID NO: 20 с SEQ ID NO: 14 или SEQ ID NO: 23,

- SEQ ID NO: 21 с SEQ ID NO: 24 или SEQ ID NO: 25,

- SEQ ID NO: 22 с SEQ ID NO: 24 или SEQ ID NO: 25.

3. Биспецифичное антитело по п. 1, при этом Ab1 или Ab2 означает трастузумаб или его мутантное производное, включающие:

домен V_H, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 1,

домен V_L, включающий последовательность, состоящую из последовательности SEQ ID NO: 10,

- SEQ ID NO: 2 с SEQ ID NO: 11,

- SEQ ID NO: 5 с SEQ ID NO: 14 или SEQ ID NO: 23,

- SEQ ID NO: 20 с SEQ ID NO: 14 или SEQ ID NO: 23,

- SEQ ID NO: 21 с SEQ ID NO: 24 или SEQ ID NO: 25,

- SEQ ID NO: 22 с SEQ ID NO: 24 или SEQ ID NO: 25.

4. Биспецифичное антитело по любому из пп. 1-3, при этом домены C_H1 и C_L Ab1 имеют сочетание последовательностей, отличное от доменов C_H1 и C_L Ab2.

5. Биспецифичное антитело по любому из пп. 1-4, при этом последовательность полипептидного линкера включает, а предпочтительно состоит из SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 16 или SEQ ID NO: 34.

6. Биспецифичное антитело по любому из пп. 1-5, которое включает, а предпочтительно состоит из:

а) двух тяжелых цепей, каждая из которых включает, а предпочтительно состоит из непрерывной последовательности, содержащей в порядке от N к C:

V_H тяжелой цепи трастузумаба, включающую, а предпочтительно состоящую из SEQ ID NO: 1,

домен C_H1, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 2,

полипептидный линкер, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 16 или SEQ ID NO: 34,

V_H тяжелой цепи цетуксимаба, включающую, а предпочтительно состоящую из SEQ ID NO: 4,

домен C_H1, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 5,

шарнирный домен, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 6,

домен C_H2, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 7,

домен C_H3, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 8,

b) двух легких цепей трастузумаба, каждая из которых содержит:

домен V_L, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 10,

домен C_L, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 11,

c) двух легких цепей цетуксимаба, каждая из которых содержит:

домен C_L, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 14.

7. Биспецифичное антитело по любому из пп. 1-5, которое включает, а предпочтительно состоит из:

b) двух легких цепей трастузумаба, каждая из которых включает SEQ ID NO: 12,

c) двух легких цепей цетуксимаба, каждая из которых включает SEQ ID NO: 15.

8. Биспецифичное антитело по п. 1, содержащее по меньшей мере одну из следующих мутаций:

- мутантный константный домен C_H1 из IgG1 человека, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 20,

- мутантный константный домен C_H1 из IgG1 человека, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 21,

- мутантный константный домен C_H1 из IgG1 человека, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 22,

- мутантный константный домен каппа человека, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 23,

- мутантный константный домен каппа человека, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 24,

- мутантный константный домен каппа человека, включающий, а предпочтительно состоящий из SEQ ID NO: 25.

9. Биспецифичное антитело по п. 1, при этом домен V_H тяжелой цепи цетуксимаба состоит из SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 26 или SEQ ID NO: 27.

10. Полипептид, который включает, а предпочтительно состоит из тяжелой цепи биспецифичного антитела по любому из пп. 1-9.

11. Полинуклеотид, включающий последовательность, кодирующую полипептид по п. 10.

12. Клетка хозяина, трансфецированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид по п. 11.

13. Способ получения биспецифичного антитела по любому из пп. 1-9, который включает следующие стадии: а) культивирование в подходящей среде и условиях культивирования клеток хозяина, экспрессирующих тяжелую цепь антитела по любому из пп. 1-9 и легкую цепь антитела по любому из пп. 1-9; и b) выделение полученных антител из культуральной среды или из данных культивируемых клеток.

14. Биспецифичное антитело по любому из пп. 1-9 для применения в качестве медикамента.

15. Биспецифичное антитело по любому из пп. 1-9 для применения при лечении рака.