RU1522494C - Способ получения инактивированной вакцины гриппа - Google Patents
Способ получения инактивированной вакцины гриппа Download PDFInfo
- Publication number
- RU1522494C RU1522494C SU4264036A RU1522494C RU 1522494 C RU1522494 C RU 1522494C SU 4264036 A SU4264036 A SU 4264036A RU 1522494 C RU1522494 C RU 1522494C
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- ovalbumin
- content
- eluate
- concentrated
- mcg
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицинской биотехнологии, в частности к получению вакцины гриппа. Целью изобретения является повышение качества вакцины за счет уменьшения содержания в ней овальбумина. Для этого вирус гриппа концентрируют и очищают поэтапно сначала методом сорбцин-элюции на куриных эритроцитах, при этом объем уменьшается в 10 раз, содержание овальбумина в элюате составляет 40 - 50 мкг/мл. Полученный элюат далее концентрируют и очищают методом ультрафильтрации в сочетании с диафильтрацией на полых волокнах ВПУ-100. Объем уменьшается в 5 раз, концентрация овальбумина после ультрафильтрации составляет 4 - 5 мкг/мл. Полученный концентрированный элюат подвергают ультрацентрифугированию в градиенте плотности сахарозы в режиме рециркуляции при скорости протока 7 - 8 л/ч. В результате получают уменьшенный еще в 30 раз объем концентрата с содержанием овальбумина 0,1 мкг/мл и гемагглютинина 10 - 20 мг/мл.
Description
Изобретение относится к медицинской биотехнологии, в частности к получению вакцин гриппа.
Целью изобретения является повышение качества вакцины за счет уменьшения содержания в ней овальбумина.
С этой целью вируссодержащий материал, частично очищенный и сконцентрированный с помощью сорбции - элюции на куриных эритроцитах, дополнительно очищают и концентрируют методом ультрафильтрации в сочетании с диафильтрацией на полых волокнах ВПУ-100, а ультрацентрифугирование проводят в режиме рециркуляции при скорости протока 7-8 л/ч.
П р и м е р. Вируссодержащую аллантоисную жидкость с титром 1:640 в количестве 450 л добавляют в куриные эритроциты и оставляют на сутки при 4оС для полной сорбции вируса. Затем надосадочную жидкость сливают, а осадок эритроцитов заливают физиологическим раствором и оставляют на 24 ч при 4оС. Надосадочную жидкость снова сливают, а осадок 3 раза промывают, добавляя охлажденный физиологический раствор в соотношении 1:1 и центрифугируя при скорости 2500 об/мин.
Затем к осадку отмытых эритроцитов с адсорбированным на них вирусом добавляют физиологический раствор в соотношении 1:10 к объему исходной аллантоисной жидкости и помещают их в водяную баню при 38оС на 3 ч, после чего взвесь эритроцитов центрифугируют при 2500 об/мин. Надосадочную жидкость, содержащую основную часть вируса, отделяют. Аналогично проводят повторное элюирование. Таким образом получают 50 л элюата с титром 1:5120 и содержанием овальбумина 40 мкг/мл.
Ультрафильтрацию ведут на полых волокнах ВПУ-100. Вход и выход колонки с полыми волокнами подключают к бутыли с элюатом. Таким образом, процесс ведется в режиме рециркуляции. 50 л элюата концентрируют до 5 л и далее ведут диафильтрацию, добавляя физиологический раствор так, чтобы объем элюата оставался постоянно 5 л, объем физиологического раствора на диафильтрацию составляет 50 л. Затем вирус смывают с волокон сначала физиологическим раствором, а затем 0,3 М раствором NaCl. Получают 10 л концентрированного элюата с титром 1:25000 и содержанием овальбумина 4 мкг/мл.
Полученный концентрированный элюат центрифугируют в градиенте плотности сахарозы в проточном роторе ультрацентрифуги SCР60Y "Хитачи" в режиме рециркуляции.
Рециркуляция осуществляется следующим образом. Концентрированный элюат из бутыли поступает на вход проточного ротора SRP 35 СТ ультрацентрифуги SCP60Y "Хитачи", пройдя через ротор, жидкость, содержащая некоторое остаточное количество вируса, снова поступает в ту же бутыль. Процесс продолжается до тех пор пока жидкость, содержащаяся в бутыли, не станет прозрачной. Получают 300 мл концентрата с титром 1:800000 и содержанием овальбумина 0,1 мкг/мл.
Claims (1)
- СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНАКТИВИРОВАННОЙ ВАКЦИНЫ ГРИППА путем сорбции вируса гриппа на куриных эритроцитах из инфицированной им аллантоисной жидкости, двукратной экстракции его физиологическим раствором, проточного центрифугирования в градиенте плотности сахарозы, отделения суспензии, обработки ее эфиром, отбора водной фазы, содержащей целевой продукт, с последующей ее стерилизацией и инактивацией, отличающийся тем, что, с целью повышения качества вакцины за счет уменьшения содержания в ней овальбумина, перед проточным центрифугированием, которое проводят в режиме рециркуляции при скорости протока 7 - 8 л/г в течение 3 ч, экстракт подвергают ультрафильтрации в режиме рециркуляции, затем проводят диафильтрацию на полых волокнах ВПУ-100 общей площадью 10 м2 в течение 2 ч при скорости протока жидкости через модуль 6 л/мин, целевой продукт элюируют с мембран 0,3 М раствором хлористого натрия.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU4264036 RU1522494C (ru) | 1987-06-16 | 1987-06-16 | Способ получения инактивированной вакцины гриппа |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU4264036 RU1522494C (ru) | 1987-06-16 | 1987-06-16 | Способ получения инактивированной вакцины гриппа |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU1522494C true RU1522494C (ru) | 1994-11-15 |
Family
ID=30440713
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU4264036 RU1522494C (ru) | 1987-06-16 | 1987-06-16 | Способ получения инактивированной вакцины гриппа |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU1522494C (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0854729A4 (en) * | 1995-09-18 | 2000-02-02 | Us Army Med Res Mat Command | IMPROVED METHOD FOR PRODUCING NON-COVALENTLY COMPLEX AND MULTIVALENT VACCINALS AGAINST PROTEASOME SUB-UNITS |
US6207439B1 (en) * | 1997-03-25 | 2001-03-27 | Center For Disease Control | Purification of Japanese encephalitis virus |
-
1987
- 1987-06-16 RU SU4264036 patent/RU1522494C/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Вакцина гриппозная химическая адсорбированная убитая жидкая (АГХ-вакцина). ТУ 42.14.258-81 (разработана в Уфимском НИИВС им.И.И.Мечникова). * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0854729A4 (en) * | 1995-09-18 | 2000-02-02 | Us Army Med Res Mat Command | IMPROVED METHOD FOR PRODUCING NON-COVALENTLY COMPLEX AND MULTIVALENT VACCINALS AGAINST PROTEASOME SUB-UNITS |
CZ298460B6 (cs) * | 1995-09-18 | 2007-10-10 | United States Army Medical Research Materiel Command (Usamrmc) | Zlepšené zpusoby výroby nekovalentne komplexovaných a multivalentních proteosomových podjednotkových vakcin |
US6207439B1 (en) * | 1997-03-25 | 2001-03-27 | Center For Disease Control | Purification of Japanese encephalitis virus |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP3297433B2 (ja) | ウイルスで汚染された薬理組成物中のウイルスの不活性化方法 | |
US11013794B2 (en) | Method for preparing foot-and-mouth disease vaccines | |
EP0440483B1 (en) | Process for purifying immune serum globulins | |
CN104491855B (zh) | 一种大规模制备高产率、高纯度、高安全的***全病毒颗粒标记疫苗的方法及其产品 | |
CN111920944B (zh) | 一种流感病毒亚单位疫苗原液制备方法 | |
EP0168234B1 (en) | Purification process for hepatitis surface antigen and product thereof | |
US3105012A (en) | Antigen products and means for producing the same | |
DK145347B (da) | Fremgangsmaade til rensning af hepatitis b antigen | |
JPH0331691B2 (ru) | ||
RU1522494C (ru) | Способ получения инактивированной вакцины гриппа | |
US4695454A (en) | Process for preparing hepatitis B surface antigen containing particles in novel forms which are highly immunogenic | |
CN112225799B (zh) | 自动化分离***快速提取covid-19患者康复期血浆的方法 | |
CN112010968B (zh) | 快速提取covid-19患者康复期血浆用于制备免疫球蛋白g的方法 | |
JPS59101426A (ja) | B型肝炎感染予防用ワクチンの製造方法 | |
EP0138167A1 (en) | Method for purification of HBs antigen | |
US4071619A (en) | Method of producing vaccines | |
CN115010804A (zh) | 一种在线分离高纯度免疫球蛋白的生产方法及设备 | |
CN212247001U (zh) | 一种病毒密度梯度离心纯化装置 | |
CN112375142A (zh) | 静注新型冠状病毒人免疫球蛋白的制备方法 | |
CN112500477A (zh) | 一种快速从血浆提取人免疫球蛋白的方法 | |
US3478145A (en) | Chromatographic purification of virus with brushite modified by autoclaving | |
CN111471658A (zh) | 一种病毒纯化方法及经由该方法制备得到的二联灭活疫苗 | |
US4407949A (en) | Meningitis vaccine | |
EP0159749A1 (en) | Activated hepatitis B surface antigen product | |
CN111848783B (zh) | 一种人纤维蛋白原的制备方法 |