PL215522B1 - Nowe szczepy bakteriofagów do leczenia zakazen bakteryjnych, zwlaszcza szczepami bakterii lekoopornych rodzaju Enterococcus - Google Patents
Nowe szczepy bakteriofagów do leczenia zakazen bakteryjnych, zwlaszcza szczepami bakterii lekoopornych rodzaju EnterococcusInfo
- Publication number
- PL215522B1 PL215522B1 PL386175A PL38617508A PL215522B1 PL 215522 B1 PL215522 B1 PL 215522B1 PL 386175 A PL386175 A PL 386175A PL 38617508 A PL38617508 A PL 38617508A PL 215522 B1 PL215522 B1 PL 215522B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- pcm
- phage
- strain
- enterococcus
- faecalis
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/00021—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/00032—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Virology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Ujawniono nowe szczepy bakteriofagowe i ich wykorzystanie do wytwarzania preparatów znajdujących zastosowanie w leczeniu zakażeń bakteryjnych, zwłaszcza szczepami bakterii lekoopornych rodzaju Enterococcus, szczególnie należącymi do gatunku Enterococcus faecalis.
Description
Dziedzina wynalazku
Wynalazek dotyczy nowych szczepów bakteriofagów i ich wykorzystania w leczeniu zakażeń bakteryjnych, zwłaszcza szczepami bakterii Iekoopornych rodzaju Enterococcus.
Stan techniki
Bakteriofagi (fagi) stanowią różnorodną grupę wirusów, których cykl życiowy związany jest wyłącznie z komórką bakteryjną. Bakteriofagi charakteryzują się litycznym lub Iizogennym cyklem życiowym. Jako czynniki antybakteryjne przydatne są przede wszystkim bakteriofagi lityczne, które po zakażeniu wrażliwych nań komórek bakteryjnych namnażają się w nich, powodując ich całkowite zniszczenie (lizę), a uwalniające się nowe cząsteczki fagowe atakują i niszczą następne komórki bakteryjne. Proces ten może zachodzić zarówno in vitro, jak i in vivo.
Jedną z istotnych cech bakteriofagów jest powszechnie znana wysoka swoistość ich litycznego działania. Cecha ta jest wykorzystywana m.in. w typowaniu różnych gatunków bakterii (patrz przykładowo opisy patentowe GB 2285684, US 5824468, SU 543260, oraz międzynarodowe zgłoszenia patentowe WO 0100786, WO 0109370). Inne znane zastosowania bakteriofagów obejmują: wykorzystywanie bakteriofagów jako narzędzi w biologii molekularnej przydatnych przykładowo do ekspresji i selekcji pożądanych białek (np. opis patentowy US 6027930), stosowanie fagów w środkach sterylizacyjnych i czyszczących (np. opis patentowy EP 0414304, EP 0290295, GB 2253859 oraz międzynarodowe zgłoszenia patentowe WO 9808944, WO 9003122). Zmodyfikowane fagi wykorzystano do produkcji szczepionek (np. WO 9505454). Wykorzystuje się także pewne białka pochodzenia bakteriofagowego (np. EP 0510907, US 5470573, WO 9607329). Metody izolacji bakteriofagów i otrzymywania preparatów fagowych są dobrze znane i ciągle udoskonalane (np. GB 829266, CS 192212, RU 2109055).
Na szeroką skalę fagoterapia wykorzystywana jest już od czasu Il wojny światowej w Instytucie Mikrobiologii i Wirusologii Tbilisi (Gruzja). Stosowane są tam pule różnych preparatów fagowych w leczeniu zakażeń bakteryjnych i w profilaktyce. Dostępne dane wskazują na dużą efektywność fagoterapii. Podobne badania prowadzone są od lat w Polsce, w Laboratorium Bakteriofagowym Instytutu Immunologii i Terapii Doświadczalnej Polskiej Akademii Nauk we Wrocławiu, gdzie fagoterapię zakażeń wywołanych Iekoopornymi formami bakterii i nie poddających się antybiotykoterapii prowadzi się od ponad 25 lat (patrz: Stefan Ślopek i wsp., Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 1981, 31, 293; Stefan Ślopek i wsp., Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 1983, 31, 267; Stefan Ślopek i wsp., Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 1984, 32, 317; Stefan Ślopek i wsp., Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 1985, 33, 219; Stefan Ślopek i wsp., Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 1985, 33, 241; Stefan Ślopek i wsp., Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 1987, 35, 569; Beata Weber-Dąbrowska i wsp., Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 2000, 48, 31-37; Beata Weber-Dąbrowska i wsp., Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 2000, 48, 547-551).
Zgłoszenie patentowe P-370662 dotyczy multiwalentnych szczepów bakteriofagowych, sposobów ich otrzymywania i wykorzystania w leczeniu zakażeń bakteryjnych, zwłaszcza szczepami bakterii Iekoopornych rodzajów Psedomonas i Staphylococcus.
Szczególne problemy stwarzają zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych wywoływane Iekoopornymi bakteriami, najczęściej rodzaju Enterococcus. Leczenie dostępnymi antybiotykami takich zakażeń zwłaszcza w ostatnich latach stwarza poważne problemy terapeutyczne o zasięgu światowym. Prowadzona bowiem antybiotykoterapia tych zakażeń staje się coraz mniej skuteczna gdyż olbrzymia większość szczepów bakteryjnych wykazuje oporność na wszystkie antybiotyki w tym na antybiotyk ostatniej szansy - wankomycynę. Istnieje zatem pilna potrzeba wprowadzenia do praktyki medycznej alternatywnej metody leczenia uporczywych i bardzo niebezpiecznych zakażeń bakteryjnych.
Cel wynalazku
W ostatnich latach występuje masowe szerzenie się szczepów bakteryjnych opornych na wszystkie antybiotyki w tym również na antybiotyk ostatniej szansy wankomycynę. W rezultacie leczenie zakażeń bakteryjnych wywołanych formami Iekoopornymi za pomocą antybiotyków jest bezskuteczne.
Ten stan stwarza drastyczne problemy terapeutyczne. Istnieje zatem pilna potrzeba wprowadzenia do praktyki medycznej alternatywnej metody leczenia uporczywych zakażeń bakteryjnych.
PL 215 522 B1
W związku z powyższym, celem wynalazku jest uzyskanie wieloważnych preparatów fagowych, które mogłyby być skutecznie wykorzystane do leczenia zakażeń bakteryjnych wywoływanych przez Iekooporne szczepy kliniczne bakterii rodzaju Enterococcus, w szczególności należące do gatunku Enterococcus faecalis. Nieoczekiwanie, określony powyżej cel został osiągnięty w niniejszym wynalazku.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00029.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00029 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Innym przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00030.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00030 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Innym przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00031.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00031 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Innym przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00032.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00032 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Innym przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00033.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00033 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00034.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00034 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00035.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00035 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
PL 215 522 B1
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00036.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00036 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00037.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00037 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00038.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00038 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00039.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00039 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00040.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00040 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00041.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00041 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00042.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00042 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00043
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00043 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
PL 215 522 B1
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00044.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00044 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Przedmiotem wynalazku jest szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00045.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie szczepu bakteriofaga zdeponowanego w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerem depozytowym PCM F/00045 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus. Korzystnie, zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
P r z y k ł a d 1
Fag Enterococcus faecalis 1/339/K22228
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków surowych z Portu Rzecznego we Wrocławiu na szczepie E. faecalis K 22228.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos.1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu K 22228. Następnie pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. PłytkęJnkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu K22228 i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 74 szczepów E. faecalis.
Wykazano słabododatnie reakcje lityczne faga z 3 na 30 użytych w eksperymencie szczepów
E.faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 1/339/K22228 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00029.
P r z y k ł a d 2
Fag Enterococcus faecalis 4/R26519
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków oczyszczalni Strachocin Il we Wrocławiu na szczepie E. faecalis 26519.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos. 1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu R 26519. Następnie pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu R 26519 i inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych z zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 65 szczepów E. faecalis.
Nie wykazano dodatnich reakcji litycznych izolowanego faga z 30 użytymi w badaniu szczepami
Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 4/R26519 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka
PL 215 522 B1 depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00030.
P r z y k ł a d 3
Fag Enterococcus faecalis 1/339/SI22247
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków surowych z Portu Rzecznego we Wrocławiu na szczepie E. faecalis SI22247.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos.1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu SI 22247. Następnie, pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu SI22247 i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 102 szczepów E. faecalis. Wykazano słabododatnią reakcję lityczną faga z 1 na 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 1/339/SI22247 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00031.
P r z y k ł a d 4
Fag Enterococcus faecalis 1/339/SII 22248
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków surowych z Portu Rzecznego we Wrocławiu na szczepie E. faecalis Sll 22248.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos.1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu SII 22248. Następnie, pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu SII 22248 i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 111 szczepów E. faecalis. Wykazano słabododatnią reakcję lityczną faga z 1 na 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 1/339/SII 22248 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00032.
P r z y k ł a d 5
Fag Enterococcus faecalis I/C22782
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków z Portu Rzecznego we Wrocławiu na szczepie E. faecalis C22782.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos. 1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu C22782. Następnie, pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu C22782 i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
PL 215 522 B1
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 94 szczepów E. faecalis. Wykazano dodatnie reakcje lityczne faga z 2 na 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis I/C22782 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00033.
P r z y k ł a d 6
Fag Enterococcus faecalis 2/51c
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków z Portu Rzecznego we Wrocławiu na szczepie E. faecalis 51c.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos. 1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu 51c. Następnie, pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu 51c i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga. Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 102 szczepów E. faecalis. Nie obserwowano dodatnich reakcji litycznych izolowanego faga z żadnym z 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 2/51c został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00034.
P r z y k ł a d 7
Fag Enterococcus faecalis 3/J 26271
Bakteriofag łagodny izolowany ze szczepu E. faecalis J26271.
Hodowle szczepu prowadzono przez 18 godzin bakteriofagi 37°C. Po odwirowaniu przez 30 minut przy 4,5 tys. obr/min, uzyskany supernatant sączono przez filtry przeciwbakteryjne bakteriofagi kontrolowano na obecność faga na płytkach bakteriofagi selektywnym podłożem agarowym, bakteriofagi następnie określano aktywność lityczną uzyskanego preparatu.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 105 szczepów E. faecalis. Nie obserwowano dodatnich reakcji litycznych izolowanego faga z żadnym z 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 3/J 26271 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00035.
P r z y k ł a d 8
Fag Enterococcus faecalis 5/V26556
Wirulentny, multiwalentny preparat fagowy utworzony z izolowanych fagów 1/339/K22228, 4/R26519, 1/339/SI22247, 1/339/SII22248, I/C22782, 2/51c z użyciem szczepu E. faecalis V26556.
Bakteriofagi namnożono z użyciem standardowych metod i połączono w równych objętościach.
Preparat użyto do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych.
PL 215 522 B1
Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 141 szczepów E. faecalis.
Nie stwierdzono dodatnich reakcji litycznych preparatu z żadnym z 30 użytych w badaniach szczepach Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 5/V26556 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00036.
P r z y k ł a d 9
Fag Enterococcus faecalis 6/M26588
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków surowych oczyszczalni Strachocin Il we Wrocławiu na szczepie E. faecalis M26588.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos. 1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu M26588. Następnie pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu M26588 i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 93 szczepów E. faecalis. Nie obserwowano dodatnich reakcji litycznych izolowanego faga z żadnym z 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 6/M26588 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00037.
P r z y k ł a d 10
Fag Enterococcus faecalis 7/P26589
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków surowych oczyszczalni Strachocin I we Wrocławiu na szczepie E. faecalis P26589.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos.1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu P26589. Następnie, pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu P26589 i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 95 szczepów E. faecalis. Obserwowano dodatnią reakcję lityczną izolowanego faga z 1 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 7/P26589 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00038.
P r z y k ł a d 11
Fag Enterococcus faecalis 8/V26344
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków surowych oczyszczalni Strachocin Il we Wrocławiu na szczepie E. faecalis V26344.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos. 1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu V26344. Następnie, pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki
PL 215 522 B1 z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu V26344 i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 91 szczepów E. faecalis. Nie obserwowano dodatnich reakcji litycznych izolowanego faga z żadnym z użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 8/V26344 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00039.
P r z y k ł a d 12
Fag Enterococcus faecalis 9/V26344
Bakteriofag łagodny izolowany ze szczepu E. faecalis V26344.
Hodowle szczepu prowadzono przez 18 godzin bakteriofagi 37°C. Po odwirowaniu przez 30 minut przy 4,5 tys. obr./min uzyskany supernatant sączono przez filtry przeciwbakteryjne bakteriofagi kontrolowano na obecność faga na płytkach bakteriofagi selektywnym podłożem agarowym, bakteriofagi następnie określano aktywność lityczną uzyskanego preparatu.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 113 szczepów E. faecalis. Nie obserwowano dodatnich reakcji litycznych izolowanego faga z żadnym z 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 9/V26344 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00040.
P r z y k ł a d 13
Fag Enterococcus faecalis 10/R26636
Bakteriofag łagodny izolowany ze szczepu E. faecalis R26636.
Hodowle szczepu prowadzono przez 18 godzin bakteriofagi 37°C. Po odwirowaniu przez 30 minut przy 4,5 tys. Obr./min uzyskany supernatant sączono przez filtry przeciwbakteryjne bakteriofagi kontrolowano na obecność faga na płytkach bakteriofagi selektywnym podłożem agarowym, bakteriofagi następnie określano aktywność lityczną uzyskanego preparatu.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 125 szczepów E. faecalis. Obserwowano dodatnią reakcję lityczną izolowanego faga z 1 z 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 10/R26636 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00041.
P r z y k ł a d 14
Fag Enterococcus faecalis 11/C22782
Bakteriofag łagodny izolowany ze szczepu E. faecalis C22782.
Hodowle szczepu prowadzono przez 18 godzin bakteriofagi 37°C. Po odwirowaniu przez 30 minut przy 4,5 tys. obr./min uzyskany supernatant sączono przez filtry przeciwbakteryjne bakteriofagi kontrolowano na obecność faga na płytkach bakteriofagi selektywnym podłożem agarowym, bakteriofagi następnie określano aktywność lityczną uzyskanego preparatu.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla
PL 215 522 B1
143 szczepów E. faecalis. Nie obserwowano dodatnich reakcji litycznych izolowanego faga z żadnym z 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 11/C22782 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00042.
P r z y k ł a d 15
Fag Enterococcus faecalis 12/R26636
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieku Nieciszów Il na szczepie E. faecalis R26636.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos. 1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu R26636. Następnie pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu R26636 i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 118 szczepów E. faecalis. Nie obserwowano dodatnich reakcji litycznych izolowanego faga z żadnym z 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 12/R26636 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00043.
P r z y k ł a d 16
Fag Enterococcus faecalis 13/A26696
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieku oczyszczalni Strachocin I we Wrocławiu na szczepie E. faecalis A26696.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos. 1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu A26696. Następnie, pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu A26696 i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
Izolowany bakteriofag został wykorzystany do określenia spektrum aktywności litycznej z użyciem 220 antybiotykoopornych szczepów E. faecalis izolowanych od chorych zakażeniami gruczołu krokowego oraz infekcji dróg moczowych i rodnych. Dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 119 szczepów E. faecalis. Nie obserwowano dodatnich reakcji litycznych izolowanego faga z żadnym z 30 użytych w eksperymencie szczepów Enterococcus faecium.
Szczep faga Enterococcus faecalis 13/A26696 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00044.
P r z y k ł a d 17
Fag Enterococcus faecalis 14/K24274
Bakteriofag wirulentny izolowany z doprowadzalniku ścieków surowych z pól irygowanych m. Wrocławia na szczepie E. faecalis K24274.
Izolację faga prowadzono po 1 godz. inkubacji w temp. 37°C badanej próbki ścieku w płynnym podłożu odżywczym /w stos. 1:1/ z dodatkiem 0,1 ml młodej hodowli szczepu K24274. Następnie, pobierano 0,2 ml badanej mieszaniny i nanoszono z użyciem głaszczki na powierzchnię płytki z selektywnym podłożem agarowym. Płytkę inkubowano przez 18 godz. w temp. 37°C. Linię fagową wyprowadzono z pojedynczych łysinek z użyciem ezy izolacyjnej. Łysinki przeniesiono do probówek
PL 215 522 B1 z bulionem odżywczym zawierającym 0,05 ml młodej hodowli szczepu K24274 i inkubowano przez 18 godz. w 37°C. Uzyskany Iizat fagowy wirowano przez 30 min, przy 4,5 tyś. obr/min i sączono przez filtry antybakteryjne oraz kontrolowano na obecność faga.
Szczep faga Enterococcus faecalis 14/K24274 został zdeponowany 25 czerwca 2007 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów we Wrocławiu posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów postępowania patentowego (IDA). Depozytowi patentowemu nadano numer F/00045.
Claims (3)
1. Szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Enterococcus wybrany ze szczepów zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerami depozytowymi: PCM F/00029; PCM F/00030; PCM F/00031; PCM F/00032; PCM F/00033; PCM F/00034; PCM F/00035; PCM F/00036; PCM F/00037; PCM F/00038; PCM F/00039; PCM F/00040; PCM F/00041; PCM F/00042; PCM F/00043; PCM F/00044 lub PCM F/00045.
2. Zastosowanie szczepu bakteriofaga, wybranego ze szczepów zdeponowanych w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerami depozytowymi: PCM F/00029; PCM F/00030; PCM F/00031; PCM F/00032; PCM F/00033; PCM F/00034; PCM F/00035; PCM F/00036; PCM F/00037; PCM F/00038; PCM F/00039; PCM F/00040; PCM F/00041; PCM F/00042; PCM F/00043; PCM F/00044 lub PCM F/00045 do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych służących do zwalczania bakterii należących do rodzaju Enterococcus.
3. Zastosowanie według zastrz. 2, znamienne tym, że zwalczane bakterie należą do gatunku Enterococcus faecalis.
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL386175A PL215522B1 (pl) | 2008-09-29 | 2008-09-29 | Nowe szczepy bakteriofagów do leczenia zakazen bakteryjnych, zwlaszcza szczepami bakterii lekoopornych rodzaju Enterococcus |
| ES09753232T ES2429125T3 (es) | 2008-09-29 | 2009-09-27 | Cepas novedosas de bacteriófagos para el tratamiento de infecciones bacterianas, especialmente cepas farmacorresistentes del género Enterococcus |
| EP09753232.9A EP2344642B8 (en) | 2008-09-29 | 2009-09-27 | Novel bacteriophage strains for the treatment of bacterial infections, especially drug resistant strains of the genus enterococcus |
| PCT/PL2009/050025 WO2010036132A1 (en) | 2008-09-29 | 2009-09-27 | Novel bacteriophage strains for the treatment of bacterial infections, especially drug resistant strains of the genus enterococcus |
| US13/059,513 US8440446B2 (en) | 2008-09-29 | 2009-09-27 | Bacteriophage strains for the treatment of bacterial infections, especially drug resistant strains of the genus Enterococcus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL386175A PL215522B1 (pl) | 2008-09-29 | 2008-09-29 | Nowe szczepy bakteriofagów do leczenia zakazen bakteryjnych, zwlaszcza szczepami bakterii lekoopornych rodzaju Enterococcus |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL386175A1 PL386175A1 (pl) | 2010-04-12 |
| PL215522B1 true PL215522B1 (pl) | 2013-12-31 |
Family
ID=41404327
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL386175A PL215522B1 (pl) | 2008-09-29 | 2008-09-29 | Nowe szczepy bakteriofagów do leczenia zakazen bakteryjnych, zwlaszcza szczepami bakterii lekoopornych rodzaju Enterococcus |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8440446B2 (pl) |
| EP (1) | EP2344642B8 (pl) |
| ES (1) | ES2429125T3 (pl) |
| PL (1) | PL215522B1 (pl) |
| WO (1) | WO2010036132A1 (pl) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2580248C9 (ru) | 2009-02-06 | 2018-01-17 | Текнофахе, Инвестигасао Э Десенвольвименто Эм Биотекнолохия, Са | Бактериофаг, обладащий активностью против pseudomonas aeruginosa, белки бактериофага и способы их применения |
| US9795642B2 (en) | 2013-03-25 | 2017-10-24 | Temple University—Of the Commonwealth System of Higher Education | Enterococcus faecalis bacteriophage and uses thereof |
| PL232951B1 (pl) * | 2013-06-03 | 2019-08-30 | Inst Immunologii I Terapii Doswiadczalnej Im Ludwika Hirszfelda Polskiej Akademii Nauk | Zastosowanie bakteriofaga T4 |
| KR101587113B1 (ko) * | 2014-10-29 | 2016-01-20 | 경북대학교 산학협력단 | 치주염 유발 장알균(Enterococcus faecalis)을 특이적으로 사멸시키는 신규한 박테리오파지 |
| WO2016098116A1 (en) * | 2014-12-17 | 2016-06-23 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. | Phage therapy for targeting enterococci |
| CN110129279B (zh) * | 2019-04-24 | 2022-02-18 | 昆明理工大学 | 一种粪肠球菌噬菌体及其分离、纯化、富集和应用 |
Family Cites Families (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB829266A (en) | 1957-03-20 | 1960-03-02 | Biogena | A method of manufacturing bacteriophages in solid dry form |
| SU543260A1 (ru) | 1975-07-25 | 1984-04-15 | Всесоюзный Ордена Трудового Красного Знамени Научно-Исследовательский Противочумный Институт "Микроб" | Способ получени холерных бактериофагов дл дифференциации вибрионов Эль-Тор на вирулентные и авирулентные |
| CS192212B1 (en) | 1977-04-22 | 1979-08-31 | Miloslav Mazacek | Method of producing dry form bacteriophages |
| EP0290295B1 (en) | 1987-05-07 | 1992-08-05 | Microbial Developments Limited | Antimicrobial preparations |
| WO1990003122A1 (en) | 1988-09-26 | 1990-04-05 | Microbial Developments Limited | Antimicrobial preparations |
| GB8918983D0 (en) | 1989-08-21 | 1989-10-04 | Unilever Plc | Composition for hygiene purposes |
| DE4005874A1 (de) | 1990-02-24 | 1991-11-07 | Boehringer Mannheim Gmbh | Traegergebundene rekombinante proteine, verfahren zur herstellung und verwendung als immunogene und vakzine |
| GB2253859A (en) | 1991-02-28 | 1992-09-23 | Microbial Dev Ltd | Use of bacteriophages to prevent microbial infestation |
| GB2255561B (en) | 1991-04-20 | 1995-06-21 | Agricultural & Food Res | Lysins from bacteriophages |
| WO1995005454A1 (en) | 1992-02-22 | 1995-02-23 | Cambridge Bacteriophage Technologies Ltd. | Engineered bacteriophages and vaccines containing them |
| GB9220027D0 (en) | 1992-09-22 | 1992-11-04 | Mini Agriculture & Fisheries | Method and kits for detection of bacteria |
| EP0776163A4 (en) | 1994-09-09 | 1999-11-24 | Univ Maryland | ENZYMES ENCODED BY BACTERIOPHAGES, FOR THE TREATMENT AND PREVENTION OF DENTAL CARIES AND PERIODONTOLYSIS |
| GB9500851D0 (en) | 1995-01-17 | 1995-03-08 | Bionvent International Ab | Method of selecting specific bacteriophages |
| DE19517940A1 (de) | 1995-05-18 | 1996-11-21 | Merck Patent Gmbh | Nachweis von Listerien mittels rekombinanter Bakteriophagen |
| AU3869297A (en) | 1996-08-26 | 1998-03-19 | Bio Benture Bank Co., Ltd. | Novel bacteriophage, method for screening the same, novel biobactericidal materials prepared with the use of the same, and reagent for detecting the same |
| RU2109055C1 (ru) | 1996-11-27 | 1998-04-20 | Дочернее предприятие "Биофаг" Научно-производственного объединения "Иммунопрепарат" | Способ выделения бактериофагов |
| JP2002543816A (ja) | 1999-05-13 | 2002-12-24 | エクスポネンシャル バイオセラピーズ，アイエヌシー． | バンコマイシン耐性腸球菌株に感染した患者を救済するために有用なバクテリオファージ株 |
| EP1206566A4 (en) | 1999-06-25 | 2002-07-17 | Spring Diagnosting Ltd | BACTERIOPHAGE LIBRARY FOR TYPING BACTERIA AND A SYSTEM AND METHOD FOR USING THE SAME |
| WO2001009370A2 (de) | 1999-07-30 | 2001-02-08 | Profos Ag | Nachweis und identifikation von bakterienstämmen |
-
2008
- 2008-09-29 PL PL386175A patent/PL215522B1/pl unknown
-
2009
- 2009-09-27 EP EP09753232.9A patent/EP2344642B8/en not_active Not-in-force
- 2009-09-27 ES ES09753232T patent/ES2429125T3/es active Active
- 2009-09-27 US US13/059,513 patent/US8440446B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-09-27 WO PCT/PL2009/050025 patent/WO2010036132A1/en active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2344642A1 (en) | 2011-07-20 |
| ES2429125T3 (es) | 2013-11-13 |
| PL386175A1 (pl) | 2010-04-12 |
| WO2010036132A1 (en) | 2010-04-01 |
| US20120122186A1 (en) | 2012-05-17 |
| US8440446B2 (en) | 2013-05-14 |
| EP2344642B1 (en) | 2013-07-03 |
| EP2344642B8 (en) | 2013-08-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Vukotic et al. | Characterization, antibiofilm, and depolymerizing activity of two phages active on carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii | |
| Kotay et al. | Biocontrol of biomass bulking caused by Haliscomenobacter hydrossis using a newly isolated lytic bacteriophage | |
| Sasikala et al. | Characterization of potential lytic bacteriophage against Vibrio alginolyticus and its therapeutic implications on biofilm dispersal | |
| CA2700646C (en) | Anti-staphylococcus aureus compositions comprising bacteriophage k and p68 | |
| PL215522B1 (pl) | Nowe szczepy bakteriofagów do leczenia zakazen bakteryjnych, zwlaszcza szczepami bakterii lekoopornych rodzaju Enterococcus | |
| Malik et al. | Bacteriophage cocktail and phage antibiotic synergism as promising alternatives to conventional antibiotics for the control of multi-drug-resistant uropathogenic Escherichia coli | |
| Lee et al. | Characteristics of coliphage ECP4 and potential use as a sanitizing agent for biocontrol of Escherichia coli O157: H7 | |
| Day et al. | Environmental bacteriophages of the emerging enterobacterial phytopathogen, Dickeya solani, show genomic conservation and capacity for horizontal gene transfer between their bacterial hosts | |
| Karamoddini et al. | Antibacterial Efficacy of Lytic Bacteriophages against Antibiotic‐Resistant Klebsiella Species | |
| MX2007008391A (es) | Metodo para tratar productos alimenticios. | |
| Wang et al. | Identification of a bacteriophage from an environmental multidrug-resistant E. coli isolate and its function in horizontal transfer of ARGs | |
| Deng et al. | CRISPR-Cas phage defense systems and prophages in Candidatus Accumulibacter | |
| Shehabi et al. | Characterization of antimicrobial resistance and class 1 integrons found in Escherichia coli isolates from human stools and drinking water sources in Jordan | |
| WO2009087356A1 (en) | Host range change phage | |
| Jagdale et al. | Green approach to phytopathogen: Characterization of lytic bacteriophages of Pseudomonas sp., an etiology of the bacterial blight of pomegranate | |
| Goodarzi et al. | Biological characteristics and anti-biofilm activity of a lytic phage against vancomycin-resistant Enterococcus faecium | |
| Majdani et al. | Isolation and characterization of lytic bacteriophages against Pseudomonas aeruginosa isolates from human infections in the north-west of Iran | |
| Šulčius et al. | Establishment of axenic cultures from cyanobacterium Aphanizomenon flos-aquae akinetes by micromanipulation and chemical treatment | |
| PL212258B1 (pl) | Nowe szczepy bakteriofagów do leczenia zakazen bakteryjnych, zwlaszcza szczepami bakterii lekoopornych rodzaju Stenotrophomonas | |
| Dallal et al. | Isolation of E. Coli bacteriophage from raw sewage and comparing its antibacterial effect with ceftriaxone antibiotic | |
| Pandey et al. | Antibiotic Resistance in Mesorhizobium ciceri from Eastern Uttar Pradesh, India | |
| Erol et al. | Isolation of newly isolated vb_k1 bacteriophage and investigation of susceptibility on esbl positive Klebsiella spp. strains | |
| Shi et al. | Characterization of a Novel Lytic Bacteriophage φEC14 that Infects Enterobacter cloacae Clinical Isolates. | |
| RU2717026C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 325 (500319), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов | |
| RU2717022C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 328 (500322), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов |