SU543260A1 - Способ получени холерных бактериофагов дл дифференциации вибрионов Эль-Тор на вирулентные и авирулентные - Google Patents

Abstract

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХОЛЕРНЫХ БАКТЕРИОФАГОВ ДЛЯ даФФЕРЕНЦИАЦИИВИБРИОНОВ ЭЛЬ-ТОР НА ВИРУЛЕНТНЫЕ И АВИРУЛЕНТНЫЕ, отличающи.йс  тем, что холерные диагностические монофаги ХДФ-З, 4 и 5 культивируют на микробных штаммах в питательном бульоне Мартена, инкубацию ведут до наступлени  лизиса и образовавшийс  фаголизат обезвреживают.2. Способ ПОП.1, отличающийс  тем, что холерные диагностические монофаги и микробные штаммы берут в соотношении 0,1:1,0 - - 0,05:1,0.

Description

СП

4

э

о Изобретение относитс  к микробиол гической промьшшеннйсти и может найти применение, при изготовлении препа ратов -бактериофагов. Способы получени  холерных бактериофагов дл  дифференциации вибрионов Эль-Тор на вирулентные и авирулентные в литературе не описаны. Дл  получени  холерньгх бактериофа гов дл  дифференциации вибрионов Эль-Тор на вирулентные и авирулентные по предлагаемому способу холерные диагностические монофаги ХДФ 3, 4 и 5 культивируют на микробных штаммах в питательном бульоне Мартен инкубацию ведут до наступлени  лизиса и образовавшийс  фаголизат обезврежимают; хлореные диагностические монофаги и микробные штаммы берут в соотношении О,1:t - 0,05 :1. Способ осуществл ют следующим образом . Посев маточного фага провод т в п догнетую до 36 С питательную среду при плотности IlO - 2-10 микробньгх тел на Г мл среды при оптимальной мн жественности заражени  0,1 - 0,05. Посевы инкубируют при 37°С - монофага ХДФ-3 и ХДФ-5 3-4 ч, монофага ХДФ-4 5-6 ч до наступлени  лизиса на З+.или . Фаголизат немедленно обевреживают фильтрацией через бакте риальные фарфоровые фильтры при 300-350 мм рт.ст. Препарат прове р ют на стерильность общеприн тыми методами j разрабо.танными ГИСК им. Л.Г.Тарасевича. Препараты монофагов ХДФ-3, 4 и 5 должны отвечать следующим стандартам: концентраци  фаговьж частиц в 1 мл препарата иаждого монофага не ниже 10 и выше-, при этом условии ДРТ будет составл ть 10 и выше.. Каждый монофаг. должен быть чистым серотипом и нейтрализоватьс  на 100% гомологичной антифаговой сывороткой за 15 мин. Определение специфичности препарата монофагов  вл етс  важным эле-ментом его технологии. Установлено, что дл  этой цели необходимо примен ть 20 типичных эталонных штаммов вибрионов Эль-Тор, хран щихс  в высушенном лиофильным методом состо нии, из которых 10 штаммов вибрионов серотипа Инаба и 10 штаммов вибрионов серотипй Огава. В свою очередь, кажда  группа представлена п тью вирулентными штаммами, выделенными от больных или вибриононосителей, чувствительными ко всем трем (ХДФ-3, ХДФ-4 и ХДф-5) монофагам в ДРТ, холероренными и-не гемолитичными в тесте Грейга с 2%-ной. взвесью эритроцитов барана и п тьюавирулентными штаммами , выделенными из объектов внешней среды вне эпидсезона, устойчивыми ко всем трем монофагам ХДФ-3, 4 и 5, нехолерогенными и гемолитич.ными в тесте Грейга. Б зависимости от условий каждый препарат монофага, разведенньй до ДРТ, должен быть литически активен ко всем 10 вирулентным эталонным штаммам вибриона Эль-Тор обоих серотипов и полностью инактивным ко всем 10 невирулентньи эталонным штаммам. Схемы дифференциации вибрионов Эль-Тор на вирулентные и авирулент- . ные с помощью монофагов ХДФ-3, 4 и 5, приведены в таблице,где + i положительные эффекты (Лизис фагом)j -ютеутствие лизиса.

Вирулентные

Огава

Авирулентные

Огава

+ +

+

+

+ (-) + (-)

.И-)

Вирулентность определ ют с привлечением дополнительных тестов

Продолжение таблицы

+ {-)

Claims (2)

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХОЛЕРНЫХ БАКТЕРИОФАГОВ ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ

ВИБРИОНОВ ЭЛЬ-ТОР НА ВИРУЛЕНТНЫЕ И АВИРУЛЕНТНЫЕ, отличающи.йся тем, что холерные диагностические монофаги ХДФ-3, 4 и 5 культивируют на микробных штаммах в питательном бульоне Мартена, инкубацию ведут до наступления лизиса и образовавшийся фаголизат обезвреживают.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что холерные диагностические монофаги и микробные штаммы берут в соотношении 0,1:1,0 - 0,05:1,0.