PL191812B1 - Materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi - Google Patents

Materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi

Info

Publication number
PL191812B1
PL191812B1 PL331175A PL33117597A PL191812B1 PL 191812 B1 PL191812 B1 PL 191812B1 PL 331175 A PL331175 A PL 331175A PL 33117597 A PL33117597 A PL 33117597A PL 191812 B1 PL191812 B1 PL 191812B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
cells
resistance
sugar beet
herbicide
imidazolinone
Prior art date
Application number
PL331175A
Other languages
English (en)
Other versions
PL331175A1 (en
Inventor
Donald Penner
Terry R. Wright
Original Assignee
Univ Michigan State
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/761,197 external-priority patent/US5859348A/en
Application filed by Univ Michigan State filed Critical Univ Michigan State
Publication of PL331175A1 publication Critical patent/PL331175A1/xx
Publication of PL191812B1 publication Critical patent/PL191812B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/102—Mutagenizing nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/88—Lyases (4.)

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

1. Materia l ro slinny z buraka cukrowego, znamienny tym, ze sk lada si e ze zmutowanych ko- mórek ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej koduj acym syntaz e, w którym nukleotydy s a zmodyfikowane z cytozyny na tymin e w pozycji 562 i z guaniny na adenin e w pozycji 337, przy czym zmutowane komórki maj a opornosc zarówno na herbicydy imidazolinonowe jak i sulfonylo- mocznikowe, a oporno sc mo ze by c przenoszona poprzez konwencjonalne krzy zowanie ro slin wytwo- rzonych z komórek. PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi.
Zgodnie z wynalazkiem można wytworzyć buraki cukrowe (Beta vulgaris L.), które są oporne zarówno na herbicydy imidazolinonowe, jak i sulfonylomocznikowe, stosowane do zwalczania chwastów. W sposobie wytwarzania oporności na herbicydy w burakach cukrowych, według wynalazku, wykorzystuje się mutację genu kodującego syntazę acetomleczanową (ALS), znaną również jako syntaza acetohydroksykwasów (AHAS), przy zastosowaniu herbicydów kolejno wobec komórek w pożywce hodowlanej.
Uprzednio opisano zmianę genetyczną genu syntazy acetomleczanowej przy zastosowaniu metod inżynierii genetycznej, jak pokazane w patentach USA Nr 5013659; 5141870 i 5378824. Ten typ modyfikacji buraków cukrowych jest przedstawiony w Przykładzie IV patentu 5378824. Wyniki te były mniej niż satysfakcjonujące przy wytwarzaniu roślin, które rozmnażały się przekazując oporność na herbicyd.
Saunders i wsp. w Crop Science 32:1357-1360 (1992) również opisują wytwarzanie buraka cukrowego (CR1-B), który jest oporny na sulfonylomoczniki, z podatnego, zdolnego do samozapylenia klonu (REL-1), poprzez selekcję zmutowanych komórek w pożywce hodowlanej zawierającej herbicyd. Wytworzono i krzyżowano różne oporne rośliny. Hart i wsp. (Weed Sci. 40: 378-383 (1992); oraz Weed Sci. 41:317-324 (1993)) scharakteryzowali dalej linię oporną i stwierdzili, że oporność była skutkiem zmienionej aktywności ALS i wykazali brak oporności krzyżowej wobec innych herbicydów hamujących ALS oraz, że była ona kodowana przez pojedynczy, częściowo dominujący gen.
Nie istnieją publikacje opisujące oporność na imidazolinon otrzymaną poprzez modyfikowanie ALS w burakach cukrowych. Nie istnieją w piśmiennictwie opisy roślin, które są oporne zarówno na herbicydy imidazolinonowe, jak i sulfonylomocznikowe. Uzyskano różne linie kukurydzy z opornością na imidazolinon, jak opisali Newhouse i wsp., Theotetical and Applied Genetics 83:65-70 (1991).
Handlowym sposobem ochrony roślin uprawnych jest stosowanie klinicznych „czynników zabezpieczających, takich jak opisane w patencie europejskim nr 375875. Metoda ta wprowadza inny związek chemiczny do gleby. Korzystną metodą jest uzyskanie buraków cukrowych, które są oporne na herbicydy imidazolinonowe i sulfonylomocznikowe.
Celem niniejszego wynalazku jest zatem dostarczenie sposobu uzyskania oporności na herbicydy imidazolinonowe i sulfonylomocznikowe w burakach cukrowych przez mutację genu syntazy acetomleczanowej kodującego taką oporność. Ponadto, celem niniejszego wynalazku jest dostarczenie buraków cukrowych, które są oporne na te herbicydy. Te i inne cele staną się bardziej oczywiste poprzez odniesienie się do następującego dalej opisu i rysunków.
Fig. 1 jest schematycznym przedstawieniem sposobu według niniejszego wynalazku wytwarzania buraków cukrowych 93R30A lub B opornych na imidazolinon i sulfonylomocznik. R = oporny; IM = imidazolinon; S = wrażliwy; SU = sulfonylomocznik; Sur = allel ALS dominujący wobec SU-R, TP-R oraz IM-S; SB = allel ALS dominujący wobec SU-R, TP-R i IM-R; TP = triazolopirymidyna. 93R30B jest SU-R i IM-R i TP-R. 93R30A (ale nie 93R30B) jest homozygotyczny wobec allela Sur (SU-R, IM-S). Był to wyjściowy materiał dla uzyskania oporności na imidazolinon.
Fig. 2 jest diagramem przedstawiającym szczegółowo kolejne etapy wytwarzania zmutowanego buraka cukrowego.
Fig. 3 jest wykresem przedstawiającym test ALS dla oporności na imazetapir 93R30B.
Fig. 4 jest wykresem pokazującym podstawienia aminokwasowe obserwowane dla typu dzikiego (wt) trzech zmutowanych buraków cukrowych (Sir-13, Sur i SB) i odpowiadające im oporności na herbicyd. Uwzględnione są jedynie reszty aminokwasowe, które opisano w piśmiennictwie, jako odpowiadające za oporność na herbicyd. W jednoliterowym kodzie aminokwasowym A = alanina, P = prolina, W = tryptofan, S = seryna oraz T = treonina. Litery w ramce oznaczają zmiany wobec sekwencji typu dzikiego.
Fig. 5A do 5D są fotografiami pokazującymi odpowiedź całej rośliny buraka cukrowego na imazetapir zastosowany powschodowo.
Fig. 6A do 6D są fotografiami pokazującymi odpowiedź całej rośliny buraka cukrowego na AC 299263 zastosowany powschodowo.
PL 191 812 B1
Fig. 7 jest fotografią pokazującą odpowiedź enzymu ALS na imazetapir in vitro.
Fig. 8 jest fotografią pokazującą odpowiedź enzymu ALS na flumetsulam in vitro.
Fig. 9A do 9D są fotografiami pokazującymi odpowiedź całej rośliny buraka cukrowego na chlorosulfuron zastosowany powschodowo.
Fig. 10 jest fotografią pokazującą odpowiedź enzymu ALS na chlorosulfuron in vitro.
Niniejszy wynalazek dotyczy materiału roślinnego z buraka cukrowego składającego się ze zmutowanych komórek ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337, przy czym zmutowane komórki maj ą oporność zarówno na herbicydy imidazolinonowe jak i sulfonylomocznikowe, a oporność może być przenoszona poprzez konwencjonalne krzyżowanie roślin wytworzonych z komórek.
Korzystnie materiałem jest materiał otrzymany z komórek wrażliwych rodzicielskiego buraka cukrowego, oznaczonego jako CR1-B, którego nasiona zdeponowano jako ATCC 97961 i mającego oporność na herbicydy sulfonylomocznikowe, ale nie mającego oporności na herbicydy imidazolinonowe, poprzez hodowanie komórek wrażliwych w pożywce hodowlanej z herbicydem imidazolinonowym w celu wyselekcjonowania zmutowanych komórek.
Korzystnie materiałem jest nasienie lub materiał wywodzący się z nasienia.
Ponadto, niniejszy wynalazek dotyczy sposobu wytwarzania oporności na herbicyd w burakach cukrowych, który obejmuje:
a) poddanie działaniu herbicydu imidazolinonowego w pożywce hodowlanej wyjściowych komórek buraka cukrowego ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562, przy czym wyjściowe komórki mają homozygotyczną cechę oporności na herbicyd sulfonylomocznikowy w pożywce hodowlanej; oraz
b) selekcjonowanie drugich komórek mających oporność na obydwa herbicydy, przy czym oporność może być przenoszona poprzez krzyżowanie roślin zawierających drugie komórki.
Korzystnie drugie komórki otrzymano z wyjściowych komórek buraka cukrowego, oznaczonego jako 93R30 (SurSur), zdeponowanego jako ATCC 97961, poprzez poddanie komórek 93R30 działaniu herbicydu imidazolinonowego.
Korzystnie drugie komórki znajdują się w depozycie nasion pod numerem ATCC 97535 (93R30B).
Niniejszy wynalazek dotyczy też sposobu uzyskiwania oporności na herbicyd w burakach, który obejmuje:
a) poddanie wyjściowych komórek buraka cukrowego działaniu herbicydu imidazolinonowego w pożywce hodowlanej, przy czym wyjściowe komórki mają homozygotyczną cechę oporności na herbicyd sulfonylomocznikowy w pożywce hodowlanej;
b) selekcjonowanie drugich komórek mających oporność na obydwa herbicydy;
c) wyhodowanie z drugich komórek pierwszej rośliny, która ma oporność na herbicydy oraz zmutowany gen syntazy acetomleczanowej kodujący syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337; oraz
d) krzyżowanie pierwszej rośliny z drugą rośliną w celu wytworzenia rośliny krzyżówkowej, która ma oporność na herbicydy.
Korzystnie w sposobie według wynalazku wyjściowe komórki w etapie (a) są otrzymane z buraka cukrowego oznaczonego jako 93R30, zdeponowanego jako ATCC 97961, poprzez poddanie komórek 93R30 działaniu herbicydu imidazolinonowego.
Korzystnie też drugie komórki znajdują się w depozycie nasion i są oznaczone jako ATCC 97535 (93R30B).
Ponadto wynalazek dotyczy sposobu zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi, który sposób obejmuje:
a) obsianie pola nasionami buraków cukrowych zawierającymi komórki ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337, przy czym zmutowane komórki mają oporność zarówno na herbicydy imidazolinonowe, jak i sulfonylomocznikowe, a oporność może być przenoszona poprzez konwencjonalne krzyżowanie roślin wytworzonych z komórek; oraz
b) zastosowanie herbicydu imidazolinonowego wobec rośliny na polu w celu kontrolowania chwastów.
PL 191 812 B1
Korzystnie roślina pochodzi z wrażliwych komórek rodzicielskiego buraka cukrowego, oznaczonego jako CR1-B, zdeponowanego jako ATCC 97961 i mającego oporność na herbicydy sulfonylomocznikowe, ale nie mającego oporności na herbicydy imidazolinonowe, poprzez hodowanie komórek wrażliwych w pożywce hodowlanej z herbicydem imidazolinonowym w celu wyselekcjonowania zmutowanych komórek.
Korzystnie roślina pochodzi z nasienia zdeponowanego jako ATCC 97535 (93R30B).
Burak cukrowy REL-1 (Regenerating, East Lansing-1) jest dostępny od Dr Josepha Saundersa, genetyka, US Department of Agriculture, East Lansing, Michigan i został ujawniony w 1987. Jest on dostępny bez opłat. REL-1 jest wrażliwy (S) na herbicydy: imidazolinon (IM-S), sulfonylomocznik (SU-S) oraz triazolopirymidynosulfonoanilid (TP-S), jak pokazano na Fig. 1.
Przy zastosowaniu hodowli kalusowych i zawiesinowych uzyskano linię, która była heterozygotyczna pod względem oporności na imidazolinon i sulfonylomocznik (IM-R i SU-R). Tę linię komórkową (nasiono) zdeponowano w American Type Culture Collection jako ATCC 97535 6 maja, 1996 zgodnie z Traktatem Budapeszteńskim i jest tu określana jako 93R30B. Linia komórkowa jest dostępna po złożeniu zapotrzebowania według nazwy i numeru. Poprzez krzyżowanie z lepszymi liniami buraka cukrowego, a w szczególności Beta vulgaris L, można wytworzyć opornego buraka niezwykle przydatnego handlowo.
Buraki cukrowe oporne na herbicydy imidazolinonowe, a w szczególności imazetapir oraz herbicydy sulfonylomocznikowe (chlorosulfuron) rozwiązują problem pozostałości w glebie po zastosowaniu tego herbicydu na obszarach upraw buraka cukrowego. Obecnie, stosuje się 40miesięczny okres spoczynkowy pomiędzy zastosowaniem takiego herbicydu i użyciem takiego pola pod uprawę buraka cukrowego. Ponadto, wysoki poziom oporności na imidazolinon i sulfonylomocznik umożliwia zastosowanie herbicydów imidazolinonowych do kontrolowania chwastów w przypadku buraków cukrowych.
W następujących przykładach przedstawiono izolację i krzyżowanie nowego buraka cukrowego 93R30B, jak zilustrowano na Fig. 1.
P r z y k ł a d l
1. Selekcja odmiany buraka cukrowego, 93R30B, opornej na imidazolinon i sulfonylomocznik
Opis materiału. Rel-1 (Regenerating East Lansing-1) jest męską płodną linią buraka cukrowego zdolną do wysokiej regeneracji, używaną do wstępnej selekcji komórek mutanta opornego na herbicydy sulfonylomocznikowe oraz używaną jako wrażliwa linia kontrolna w większości eksperymentów.
CR1-B. Ten izolat buraka cukrowego wytworzono poprzez hodowanie komórek Rel-1 na pożywce zawierającej chlorosulfuron. Odmiana ta jest oporna na sulfonylomocznik, posiada niewielką oporność na herbicyd triazolopirymidynowy, flumetsulam lecz nie jest oporna na imidazolinon. Została ona opisana przez Saundersa i wsp. (Crop Sci. 32:1357-1360) i Hart i wsp. (Weed Sci. 40:378-383 i 41:317-324). Gen opornoś ci na SU nazwano Sur. 93R30B
Ten izolat wytworzono poprzez hodowanie komórek o wysokiej zdolności do regeneracji, rośliny buraka cukrowego będącej homozygotą Sur (pochodzącej z CR1-B), na pożywce zawierającej imazetapir.
EL-49 East Lansing 49, ujawniony przez USDA w 1993.
Homozygotyczna, pod względem genu Sur, linia buraka cukrowego stosowana jako kontrola oporności na sulfonylomocznik i wrażliwości na imazetapir.
a. Jako materiał wyjściowy wybierano rośliny do selekcji somaklonalnej, w oparciu o ich zdolność do wytwarzania kalusa w obecności wysokich stężeń cytokinin (w pożywce B1) lub do regeneracji pędów z kalusa.
Przepis na pożywkę B1:
g l-1 sacharozy
100 mg l-1 mioinozytol
1, 65 g l-1 NH4NO3
1, 90 g l-1 KNO3
0, 44 g l-1 CaCl2 x 2H2O
0,37 g l-1 MgSO4 x 7H2O
0,17 g l-1 KH2PO4
6,2 mg l-1 H3BO3
16,8 mg l-1 MnSO4 x H2O
PL 191 812 B1
10, 6 mg l-1 ZnSO4 x 7H2O
0,88 mg l-1 KI
0,25 mg l-1 Na2MoO4 x 2H2O
0,025 mg l-1 CuSO4 x 5H2O
0,025 mg l-1 CoCl2 x 6H2O
37, 3 mg l-1 Na2EDTA
27,8 mg l-1 FeSO4 x 7H2O mg l-1 tiamina
0,5 mg l-1 pirydoksyna
0,5 mg l-1 kwas nikotynowy mg l-1 benzyloaminopuryna pH 5,95.
Stałą pożywkę B1 autoklawowano z 9 g l-1 agaru, do hodowli roślinnych, i uzupełniano sterylizowanym przez filtr, podstawowym roztworem herbicydu wymaganego przez schemat selekcji. Pożywkę zawierającą agar wylewano na plastikowe szalki Petri'ego 15 x 100 mm.
Płynną pożywkę B1 rozporcjowywano po 40 ml do kolb typu Erlenmeyera na 125 ml i autoklawowano, aby użyć do hodowli płynnych zawiesin.
Materiałem wyjściowym do wyselekcjonowania odmiany opornej na imidazolinon, 93R30B, był 93R30 (homozygotyczny pod względem Sur, pochodzący z CR1-B).
W szczegółach:
1. Komórki z Rel-1 (SU-S, IM-S, TP-S) umieszczano w hodowlach selekcjonujących je pod względem zdolności do wzrostu na chlorosulfuronie i regenerowano roślinę, CR1-B (opisano w Saunders i wsp. Crop Sci. 32:1357-1360 (1992)).
2. CR1-B krzyżowano z 293 (bardziej typowy burak), pokolenie F1 krzyżowano wsobnie i identyfikowano rośliny homozygotyczne pod względem SU-R, IM-S oraz TP-R. Roślina, znana jako EL-49, o takich samych cechach, była ujawniona w 1993 przez Saunders (gen nazwano Sur, a roślina była homozygotyczna pod względem tego genu).
3. Później, homozygoty pod względem genu Sur, pochodzące z CR1-B, selekcjonowano pod względem ich zdolności do regeneracji roślin z hodowli. Stosowano je jako materiał wyjściowy (np. 93R30), w hodowli, do selekcji na imazetapir.
4. Z powyższej selekcji pochodzą izolaty znane jako 93R30A i 93R30B oraz zregenerowane rośliny. Te posiadają właściwości CR1-B i IM-R. Gen odpowiedzialny za IM-R wydaje się być zmienioną formą Sur i daje identyczność z SB.
Z szybko rozwijających się liści wyjściowej rośliny (93R30) wytwarzano eksplantaty liścia w postaci krążków. Powierzchnię liści sterylizowano (etap 1) poprzez dwa kolejne 20 min. płukania 15% handlowym środkiem bielącym z 0,025% Tritonem X-100 (T-9284, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO). Liście spłukiwano dwukrotnie sterylną wodą dejonizowaną. Krążki liści wycinano przy użyciu sterylizowanego w płomieniu korkobora #3.
Krążki liści umieszczano jałowo na stałej pożywce B1 (etap 2). Krążki inkubowano w ciemności w 30°C przez 4-8 tygodni aż do wyrośnięcia z krążka liściowego kruchej, białej tkanki kalusa. Tkankę kalusa oddzielano mechanicznie szczypcami, a następnie przenoszono do 125 ml kolb Erlenmeyera (etap 3) zawierających 40 ml płynnej pożywki B1. Kolby wkładano do wytrząsarki obrotowej przy 50 Hz w niskim natężeniu światła fluoroscencyjnego (30 μΕ/m^). Po 1 tygodniu płynne hodowle przenoszono do ś wie ż ej po ż ywki B1.
Dwa tygodnie od założenia płynnej hodowli kłaczki komórek oddzielano za pomocą sita do rozdzielania komórek (Sigma CD-1) o gęstości 60 (60 mesh). Po osadzeniu się komórek około dwie trzecie objętości płynnej pożywki usuwano.
W etapie 4, komórki zawieszano ponownie w pozostawionej pożywce i 1 ml próbki rozprowadzano równomiernie na stałej pożywce B1 uzupełnionej 50 nM herbicydem, imazetapir (PURSUIT, American Cyanamid, Wayne, NJ). Płytki owinięto i inkubowano w świetle fluoroscencyjnym (5-10 μΕ/rms) przez 8-12 tygodni.
b. Przy 50 nM stężeniu imazetapiru wszystkie wrażliwe komórki ginęły. Kłaczki komórek, które przeżyły i rosły w tym stężeniu identyfikowano jako możliwe odmiany oporne. W etapie 5 kłaczki komórek (o średnicy 1-3 mm) przenoszono do świeżej, stałej pożywki B1, bez herbicydu, i pozwalano na ich wzrost w niskim natężeniu światła (10-20 μΕ/m^). Indywidualnie identyfikowano każdą przypuszczalnie oporną odmianę i hodowano osobno.
PL 191 812 B1
c. W etapie 6, biały, kruchy kalus przenoszono co 4-6 tygodni do świeżej stałej pożywki B1, dopóki nie wyrosły z niego pojedyncze pędy (lub pęd). Pędy te przenoszono do pożywki pozwalającej na hodowlę pędów (M20).
Przepis na pożywkę M20:
g l-1 sacharozy
100 mg l-1 mioinozytol
1,65 g l-1 NH4NO3
1,90 g l-1 KNO3
0,44 g l-1 CaCl2 x 2H2O
0,37 g l-1 MgSO4 x 7H2O
0,17 g l-1 KH2PO4
6,2 mg l-1 H3BO3
16,8 mg l-1 MnSO4 x H2O
10,6 mg l-1 ZnSO4 x 7H2O
0,88 mg l-1 KI
0,25 mg l-1 Na2MoO4 x 2H2O
0,025 mg l-1 CuSO4 x 5H2O
0,025 mg l-1 CoCl2 x 6H2O
37,3 mg l-1 Na2EDTA
27,8 mg l-1 FeSO4 x 7H2O mg l-1 tiamina
0,5 mg l-1 pirydoksyna
0,5 mg l-1 kwas nikotynowy
0,25 mg l-1 benzyloaminopuryna pH 5,95
Stałą pożywkę M20 autoklawowano z 9 g l-1 agaru, do hodowli roślinnych i uzupełniano, sterylizowanym przez filtr, podstawowym roztworem herbicydu wymaganego przez schemat selekcji. Pożywkę zawierającą agar wylewano na plastykowe szalki Petri'ego 20 x 100 mm.
Hodowle pędów prowadzono przy oświetleniu lampą fluorescencyjną o 10-20 μΕ/m^ i rozmnażano przez cięcie hodowli pędu ostrzem skalpela. Wybrane hodowle pędu rozmnażano i oceniano ich poziom oporności, jak opisano poniżej.
2. Poziom oporności na imidazolinon, sulfonylomocznik i triazopirymidynosulfoanilid hodowli pędu.
W etapie 7, oceniano oporność hodowli pędu na herbicyd przez umieszczenie trzech małych skrawków pędów, o podobnych wielkościach, na każdej z szalek zawierających pożywkę M20 uzupełnioną logarytmicznie wzrastającym stężeniem herbicydu imidazolinonowego, sulfonylomocznika lub triazopirymidyno-sulfonanilidu, w zakresie 1 nM do 0,1 mM. Odpowiedzi hodowli 93R30 porównywano z hodowlami pędów kontroli wrażliwej (Rel-1) i kontroli opornej na chlorosulfuron i wrażliwej na imidazolinon (EL-49). Hodowle pędu prowadzono przy natężeniu światła 20 μΕ/m^ w 25°C przez 3 tygodnie. Odpowiedź hodowli pędu określano oceniając uszkodzenie pędu i świeżą masę, 3 tygodnie po przeniesieniu na selekcyjną pożywkę. Wielkość oporności na herbicyd określano na podstawie stosunku wartości oporności do wrażliwości I50 (stężenie herbicydu wywołujące 50 procentowe uszkodzenie).
Charakterystykę oporności krzyżowej, dla każdej odmiany, określano w sposób podany powyżej, zmieniając użyty w pożywce herbicyd. Hodowla pędu 93R30B wykazywała 3600-krotny poziom oporności na imazetapir, 10000-krotny poziom oporności na chlorosulfuron i wykazywała 60-krotną oporność krzyżową na herbicyd triazolopirymidynosulfonanilidowy, flumetsulam, jak pokazano w Tabeli 1. Dla porównania, EL-49 wykazuje jedynie 3-krotny poziom oporności na imazetapir.
PL 191 812 B1
T a b e l a 1
Wielkość oporności hodowli pędu i oporność krzyżowa
Herbicyd Rodzina herbicydów6 Rel-1 93R30B EL-49
I505 (pM) I50 (pM) R/S4 I50 (pM) R/S
Imazetapir IM 0,018 64 3600X 0,053 3X
Imazametabenzometyl IM 0,80 >100 >125X 20 25X
Imazakwin IM 0,040 16 400X 0,040 1X
AC299/2631 IM 0,030 40 1400X 0,070 3X
Chlorosulfuron2 SU 0,0025 25 10000X 25 10000Χ
Flumetsulam3 TP 0,028 1,7 60X 1,1 40X
1 - Imidazolinon RAPTOR (American Cyanamid, Wayne, NJ) 2 - Sulfonylomocznik - Glean (Dupont, Wilmington, DE) 3 - Triazolopirymidynosulfoanilid (BROADSTRIKE, Dow Elanco, Indianapolis, IN).
4 - R/S = stosunek wartości oporności do wrażliwoś ci kontroli I50 dla okreś lonego testowanego herbicydu 5 - I50 jest stężeniem herbicydu wymaganym do wywołania 50% uszkodzenia w hodowli pędu 6 - Klasyfikacja rodziny herbicydów: IM, imidazolinon; SU, sulfonylomocznik oraz TP, triazolopirymidynosulfonanilid
3. Regeneracja roślin i hodowla
W etapie 8, hodowle pę du z 93R30B regenerowano w całe roś liny w podobny sposób. Dwa tygodnie po pierwszym przeniesieniu hodowli, pędy 93R30B przenoszono do 125 ml kolb Erlenmeyera zawierających 40 ml pożywki N3 pozwalającej na wytwarzanie korzeni.
Przepis na pożywkę N3:
g l-1 sacharozy
100 mg l-1 mioinozytol
1, 65 g l-1 NH4NO3
1, 90 g l-1 KNO3
0,44 g l-1 CaCl2 x 2H2O
0,37 g l-1 MgSO4 x 7H2O
0,17 g l-1 KH2PO4
6,2 mg l-1 H3BO3
16,8 mg l-1 MnSO4 x H2O
10,6 mg l-1 ZnSO4 x 7H2O
0,88 mg l-1 KI
0,25 mg l-1 Na2MoO4 x 2H2O
0,025 mg l-1 CuSO4 x 5H2O
0,025 mg l-1 CoCl2 x 6H2O
37, 3 mg l-1 Na2EDTA
27,8 mg l-1 FeSO4 x 7H2O mg l-1 tiamina
0,5 mg l-1 pirydoksyna -1
0,5 mg l-1 kwas nikotynowy mg l-1 kwasu naftalenoctowego pH 5,95
Do każdej 125 ml kolby Erlenmeyera, zawierającej po 40 ml pożywki N3, dodano 9 g l-1 agaru (0,45 g) i pożywkę autoklawowano, aby użyć do hodowli pozwalającej na ukorzenianie pędów.
Hodowle następnie umieszczano w świetle dziennym 24 godz o średnim natężeniu światła (40-60 μΕ/m^) w 25 °C. Korzenie zasadniczo tworzyły się 6-8 tygodni później.
W etapie 9, ukorzenione pędy (pokolenie R0) przenoszono do podłoża doniczkowego Baccto (Michigan Peat Co., Huston, TX) w szklarni. W etapie 10, rośliny R0 z regeneratów 93R30B krzyżowano z burakiem cukrowym o gładkich korzeniach nazwanym 293 lub z REL-1. Nasiona F1 z tych krzyżówek samozapylano i otrzymywano nasiona F2.
PL 191 812 B1
Zakładano, że oporność na imidazolinon jest dominującą lub półdominującą cechą monogeniczną. Pokolenie roślin F2, powstałe przez samozapylenie opornych na imidazolinon i sulfonylomocznik roś lin F1, powinno segregować w stosunku 1 homozygota oporna : 2 heterozygoty oporne : 1 homozygota wrażliwa zarówno na imidazolinon jak i sulfonylomocznik.
Dowody sugerują, że oporność na imidazolinon jest w 93R30B cechą dominującą. Ten wniosek pochodzi z wyniku analizy potomstwa F1, z krzyżówek pomiędzy 93R30B i wrażliwymi na herbicyd, męskimi płodnymi liniami buraka cukrowego 293 lub Rel-1, które segregują w stosunku 1:1 dla IM-R lub IM-S. Ponadto we wszystkich F2 i krzyżówkach wstecznych (BC1) testowanych do tej pory roślin, IM-R i SU-R segregują wspólnie. Sugeruje to, że te dwie oporności są ze sobą sprzężone i odpowiadają niezależ nym zmianom tego samego allelu ALS. Oporność lub wraż liwość roś lin F1 na imazetapir i chlorosulfuron określono przy użyciu nie uszkadzającego roślin testu rozrostu krążka liścia.
Protokół testu:
Protokół ten jest nie uszkadzającym roślin testem zaprojektowanym do wczesnego badania segregacji oporności buraków na herbicydy, w celu ustalenia ich statusu jako opornych lub wrażliwych, bez konieczności spryskiwania buraków po wyrośnięciu w szklarni.
1. Z rośliny ucinano nowo rozwinięty liść (przynajmniej czwarty prawdziwy liść).
2. Powierzchnię liścia sterylizowano poprzez dwa 20 min. płukania 15% handlowym środkiem bielącym z 0,025% Tritonem X-100, a następnie opłukiwano dwukrotnie sterylną wodą dejonizowaną.
3. Eksplantaty krążka liścia wycinano przy użyciu sterylizowanego w płomieniu korkobora #3.
4. Krążki liścia przenoszono do pożywki B1 nie zawierającej herbicydu, zawierającej 100 nM imazetapiru lub 100 nM chlorosulfuronu. Szalki dzielono na cztery sektory, tak, że cztery próbki można było testować na pojedynczej szalce. Cztery do pięciu krążków liści układano na każdej płytce, dla każdej próbki.
5. Szalki owijano i inkubowano w 25°C przez 4-7 dni w słabym świetle (około 10 μΕ/rms).
6. Oporne próbki identyfikowano na podstawie ich zdolności do życia i rozrostu na pożywce selekcyjnej. Wrażliwe próbki nie rozrastały się i stawały się żółte do brązowych. Wyniki porównywano z rozrostem krążków liści umieszczonych na podłożu bez herbicydu dla potwierdzenia dokładnego określenia spodziewanego poziomu rozrostu krążka.
4. Odpowiedź na imazetapir docelowego enzymu ALS
Dla częściowego oczyszczenia ALS, z szybko rozwijających się liści hodowanych w szklarni roślin buraka cukrowego, zastosowano standardowe procedury (Hart i wsp., Weed Science 40:378-383 (1992)). Ekstrakty z heterozygotycznych roślin pokolenia F1 93R30B i nasion S1 Rel-1 badano pod względem aktywności ALS, w obecności logarytmicznie wzrastających stężeń imazetapiru. Aktywność ALS określano dla ekstraktów z liści linii buraka cukrowego REl-1 i 93R30B. Rośliny hodowano w szklarniach, jak opisano powyżej, do stadium czwartego do szóstego liścia. Aktywność ALS, ze świeżych ekstraktów, określano w obecności imazetapiru i chlorosulfuronu w logarytmicznie wzrastających stężeniach. Metody i procedury były zmodyfikowane w stosunku do przedstawionych przez Ray (Plant Physiol. 75:827-831 (1984)) i Shaner i wsp. (Plant Physiol. 76:545-546 (1984)). Dziesięć gramów liści buraka cukrowego homogenizowano w 40 ml zimnego buforu do homogenizacji (0,1 M K2HPO4), pH 7,5, 1 mM pirogronianu sodu, 0,5 mM MgCl2, 0,5 mM pirofosforanu tiaminy, 10 μΜ dinukleotydu flawino-adeninowego, 10%, objętościowo, glicerolu) z 2,5 g poliwinylopirolidonu. Homogenat filtrowano przez osiem warstw gazy i wirowano przy 27 000 g przez 20 min. Supernatant zbierano i doprowadzano do 50% nasycenia przez (NH4)2SO4. Tak nasycony roztwór trzymano w 0°C przez 1 godz., następnie wirowano przy 18000 g przez 15 min., osad zawieszano w 1 ml buforu do zawieszania (0,1 M K2HPO4, pH 7,5, 20 mM pirogronian sodu, 0,5 mM MgCl2) i odsalano na kolumnie z Sephadex G-25 PD-105. Ekstrakty enzymatyczne natychmiast badano.
Aktywność ALS mierzono przez dodanie 0,2 ml preparatu enzymatycznego (rozcieńczonego 3:1 w buforze do zawieszania) do 1,3 ml buforu do reakcji (25 mM K2HPO4, pH 7,0, 0,625 mM MgCl2, 25 mM pirogronianu sodu, 0,625 mM pirofosforanu tiaminy, 1,25 μΜ dinukleotydu flawinoadeninowego i inkubowano w 35°C przez 1 godzinę. Mieszanina reakcyjna zawierała końcowe stężenie 0, 4, 40, 400, 4000, 40000, 400000 lub 4000000 nM imazetapiru lub 0, 0,9, 9, 90, 900, 9000, 90000 nM chlorosulfuronu. Reakcję hamowano przez dodanie 50 μl 6N H2SO4 i inkubowanie w 60°C przez 15 min. Procedura ta, jak opisał Westerfield (J. Biol. Chem. 16:495-502 (1945)) pozwala także na dekarboksylację produktu enzymu ALS, acetomleczanu, z wytworzeniem acetoiny. Zabarwiony
PL 191 812 B1 kompleks acetoiny wytwarza się poprzez dodanie 1 ml 2,5%, wagowo, α-naftolu i 0,25%, wagowo, kreatyny w 2,5 N NaOH i inkubację w 60°C przez 15 min.
Jako wzorzec w reakcji kolorymetrycznej stosowano handlową acetoinę. Stężenia acetoiny określano na podstawie pomiaru absorpcji mieszaniny reakcyjnej przy 530 nm. Dla każdego herbicydu doświadczenia prowadzono w trzech powtórzeniach. Stężenia białka w ekstraktach określano metodą według Bradford (Anal. Biochem. 72:248-254 (1976)) stosując albuminę surowiczą wołu dla krzywej wzorcowej.
Eksperymenty prowadzono dwukrotnie i stosując trzykrotne powtórzenia. Na Fig. 3 przedstawiono odpowiedzi ekstraktów ALS z 93R30B homozygoty i wrażliwego Rel-1. 93R30B wykazuje, na poziomie enzymu, 1750-krotny poziom oporności na imazetapir (jak określono na podstawie stosunku wartości I50 dla linii opornych i wrażliwych).
5. Liczba kopii genu ALS
W celu ustalenia liczby kopii genu obecnej we wrażliwym buraku cukrowym prowadzono analizę typu Southern. Genomowy DNA izolowano z wrażliwych roślin F3 pochodzących z wyjściowego mutanta Sir-13 i analizowano stosując powszechnie stosowane techniki (Current Protocols in Molecular Biology, J. Wiley & Sons, Nowy Jork (1991)). Podobnie analizowano genomowy DNA z handlowo dostępnej odmiany buraka cukrowego. W obu liniach buraka cukrowego wykryto pojedynczą kopię genu ALS. Dane te wskazywałyby na to, że cała aktywność enzymu ALS pochodząca z homozygotycznego typu mutanta buraka cukrowego składałaby się z opornej formy enzymu. Potwierdza to również przypuszczenie, że zmiana SB obserwowana w izolacie 93R30B jest zmienioną formą ALS allelu Sur. Potwierdzono to w sposób opisany poniżej.
6. Mutacja w genie ALS
Dla ustalenia molekularnych podstaw oporności enzymu ALS, zastosowano standardowe techniki do zsekwencjonowania dwóch obszarów genu ALS, gdzie występowały wszystkie mutacje nadające oporność na herbicydy, opisywane wcześniej (Current Protocols in Molecular Biology, J. Wiley & Sons, Nowy Jork (1991)). Gen ALS z buraka cukrowego był wcześniej zsekwencjonowany (patent USA nr 5378824) i zaprojektowano startery do łańcuchowej reakcji polimerazy (ang. Polymerase Chain Reaction, PCR) dla powielenia dwóch obszarów tego genu odpowiedzialnych za wcześniej opisane przypadki oporności na herbicydy u roślin. Porównanie otrzymanych sekwencji z buraków cukrowych SU-R IM-S TP-R (Sur), SU-R IM-R TP-R (SB) i wrażliwego (Rel-1) wykazało, że cecha oporności na herbicydy linii 93R30B wywołana jest dwiema niezależnymi mutacjami w genie ALS.
Mutacja wywołująca SU-R IM-S TP-R (Sur) jest wynikiem zamiany pojedynczego nukleotydu z cysteiny w tyminę w pozycji 562 w sekwencji nukleotydowej, w wyniku której zachodzi podstawienie proliny przez serynę w pozycji 188 sekwencji aminokwasowej ALS buraka cukrowego. Z miejscem tym związana była oporność na sulfonylomocznik w Arabidopsis thaliana (Haughn i wsp., Molecular and General Genetics 211:266-271 (1988), tytoniu (Lee i wsp., EMBO J. 7:1241-1248 (1988) oraz drożdży (patent USA nr 5378824). Nie zaobserwowano żadnych innych zmian zasad w stosunku do sekwencji nukleotydowej dzikiego typu w dwóch badanych obszarach genu ATS.
Mutacja wywołująca SU-R IM-R TP-R (SB) jest wynikiem dwóch niezależnych mutacji w sekwencji nukleotydowej ALS dających w wyniku zmiany dwóch różnych aminokwasów. Pierwsza zmiana jest identyczna z mutacją Sur, opisaną powyżej. Spodziewano się tego, ponieważ jako wyjściowy materiał do selekcji IM-R stosowano roślinę buraka cukrowego (93R30). Dodatkowo do tej punktowej mutacji obserwowano dodatkową zmianę pojedynczego nukleotydu z guaniny na adeninę w pozycji 337. Wynikiem tej drugiej mutacji jest podstawienie alaniny przez treoninę w pozycji 113 w sekwencji aminokwasowej ALS z buraka cukrowego. Miejsce to wcześniej wskazywano jako związane z opornością na imidazolinon w łopianie (Bernasconi i wsp., J. Biol. Chem. 270:17381-17385 (1995)) i opornością na sulfonylomocznik w drożdżach (patent USA nr 5378824). Nie zaobserwowano żadnych innych zmian zasad, w stosunku do sekwencji nukleotydowej typu dzikiego, w obu badanych obszarach genu ATS.
Następująca informacja pokazuje synergizm oporności na herbicyd możliwych mutacji Ala113--Thr i Pro188--Ser
Gen ALS buraka cukrowego SB, podwójny mutant, daje oporność na herbicyd, który jest kombinacją rodzin substancji chemicznych, którą ma każdy pojedynczy mutant buraka cukrowego oddzielnie (tzn. Sur lub Sir-13). Na Fig. 4 przedstawiono oporność krzyżową na podstawowe rodziny charakterystyczną dla dwóch pojedynczych mutantów (Sur i Sir-13) i podwójnego mutanta (SB). Aminokwasy przedstawione na Fig. 4 obrazują 5 ściśle konserwowanych reszt opisanych w literaturze,
PL 191 812 B1 jako zaangażowanych w oporność na herbicyd hamujący ALS w roślinach. Oddziaływanie niezależnych mutacji w enzymie podwójnego mutanta (i odpowiadających roślin) jest unikatowe. Kombinacja oporności specyficznej dla IM, obserwowanej w substytucji aminokwasowej Sir-13 (Ala113- -Thr) i oporności SU i TP obserwowanej w substytucji Sur (Pro188-Ser) daje w buraku cukrowym 93R30B (a. k. a. SB) oporność na wszystkie trzy klasy chemicznych herbicydów.
Jednakże oporność, nie jest addytywna. W zamian mutacje są synergistyczne w odniesieniu do oporności na herbicydy imidazolinonowe, imazetapir i AC 299263. Zjawisko to można zaobserwować na Fig. 5 i 6, a ilościowo w Tabeli 2.
T a b e l a 2
Odpowiedź całych roślin buraka cukrowego na herbicydy hamujące ALS powschodowo
Linia buraka cukrowego
Rel-1 Sir-13 Sur 93R30B
Herbicyd Klasa I50 (g ha-1) R/S R/S R/S
Imazetapir IMI 0,5 100X 3X 300X
AC299, 263 IMI 1,1 130X 4X >250X
Chlorosulfuron SU 0,07 1X >1000X 20X
Sulfometuron SU 0,2 1X 23X 4X
Pojedyncza mutacja w burakach cukrowych, Sur i Sir-13, wykazuje 3 i 100-krotne oporności na imazetapir; podczas gdy podwójny mutant SB wykazuje 300-krotną oporność na herbicyd, kiedy stosowany jest powschodowo na całe rośliny. Potwierdzenie tego synergizmu dostarczają obserwowane odpowiedzi enzymu ALS z każdego z mutantów na imazetapir (Fig. 7). Ponadto, synergistyczna jest oporność na herbicyd w podwójnym mutancie SB (>1000X) versus w pojedynczych mutantach, Sur (1X) i Si-13 (40X).
Podobny synergizm jest widoczny dla klasy herbicydów TP. Oporność pędów pojedynczych mutantów Sur i Sir-13 wynosi 40X i 1X odpowiednio i 60X dla podwójnego mutanta, SB. Dane dotyczące enzymu ALS potwierdzają obserwację synergizmu z 50X i 3X opornością na flumetsulam w pojedynczych mutantach Sur i Sir-13, odpowiednio, oraz 200X dla podwójnego mutanta, SB (Fig. 8). Druga mutacja obserwowana w SB faktycznie obniża oporność na chlorosulfuron (klasa herbicydów SU) obserwowaną na poziomie całej rośliny (Fig. 9). Dla chlorosulfuronu, oporność całej rośliny podwójnego mutanta SB (20X) jest zmniejszona ponad 50 razy poprzez dodanie odpowiednika mutacji Sir-13 (Ala113- Thr) (1X oporność) do genu oporności na SU, Sur (Pro188- Ser) (>1000X oporność) (Tab. 2). Przyczyna antagonizmu pomiędzy pojedynczym mutantem Sur i podwójnym mutantem SB nie jest jeszcze poznana. Na poziomie enzymu ALS, synergistyczna oporność jest także obserwowana dla chlorosulfuronu (Fig. 10).
Należy brać pod uwagę, że selekcja na oporność na imidazolinon powinna być dokonywana jako pierwsza, a następnie powinna być wykonywana selekcja na oporność na chlorosulfuron.
Powyższy opis jest jedynie ilustracją niniejszego wynalazku, a niniejszy wynalazek ograniczony jest zamieszczonymi poniżej zastrzeżeniami.
Sekwencje aminokwasowe na Fig. 4 przedstawiono jako SEK NR ID: 1,2,3 i 4.

Claims (12)

1. Materiał roślinny z buraka cukrowego, znamienny tym, że składa się ze zmutowanych komórek ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337, przy czym zmutowane komórki mają oporność zarówno na herbicydy imidazolinonowe jak i sulfonylomocznikowe, a oporność może być przenoszona poprzez konwencjonalne krzyżowanie roślin wytworzonych z komórek.
2. Materiał według zastrz. 1, który został otrzymany z komórek wrażliwych rodzicielskiego buraka cukrowego, oznaczonego jako CR1-B, którego nasiona zdeponowano jako ATCC 97961 i mającego oporność na herbicydy sulfonylomocznikowe, ale nie mającego oporności na herbicydy imidazolinonowe, poprzez hodowanie komórek wrażliwych w pożywce hodowlanej z herbicydem imidazolinonowym w celu wyselekcjonowania zmutowanych komórek.
3. Materiał roślinny według zastrz. 1, jako nasienie albo materiał wywodzący się z nasienia.
4. Sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, znamienny tym, że obejmuje:
a) poddanie działaniu herbicydu imidazolinonowego w pożywce hodowlanej wyjściowych komórek buraka cukrowego ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562, przy czym wyjściowe komórki mają homozygotyczną cechę oporności na herbicyd sulfonylomocznikowy w pożywce hodowlanej; oraz
b) selekcjonowanie drugich komórek mających oporność na obydwa herbicydy, przy czym oporność może być przenoszona poprzez krzyżowanie roślin zawierających drugie komórki.
5. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że drugie komórki otrzymano z wyjściowych komórek buraka cukrowego, oznaczonego jako 93R30 (SurSur), zdeponowanego jako ATCC 97961, poprzez poddanie komórek 93R30 działaniu herbicydu imidazolinonowego.
6. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że drugie komórki znajdują się w depozycie nasion pod numerem ATCC 97535 (93R30B).
7. Sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, znamienny tym, że obejmuje:
a) poddanie wyjściowych komórek buraka cukrowego działaniu herbicydu imidazolinonowego w pożywce hodowlanej, przy czym wyjściowe komórki mają homozygotyczną cechę oporności na herbicyd sulfonylomocznikowy w pożywce hodowlanej;
b) selekcjonowanie drugich komórek mających oporność na obydwa herbicydy;
c) wyhodowanie z drugich komórek pierwszej rośliny, która ma oporność na herbicydy oraz zmutowany gen syntazy acetomleczanowej kodujący syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337; oraz
d) krzyżowanie pierwszej rośliny z drugą rośliną w celu wytworzenia rośliny krzyżówkowej, która ma oporność na herbicydy.
8. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że wyjściowe komórki w etapie (a) są otrzymane z buraka cukrowego oznaczonego jako 93R30, zdeponowanego jako ATCC 97961, poprzez poddanie komórek 93R30 działaniu herbicydu imidazolinonowego.
9. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że drugie komórki znajdują się w depozycie nasion i są oznaczone jako ATCC 97535 (93R30B).
10. Sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi, znamienny tym, że obejmuje:
(a) obsianie pola nasionami buraków cukrowych zawierającymi komórki ze zmutowanym genem syntazy acetomleczanowej kodującym syntazę, w którym nukleotydy są zmodyfikowane z cytozyny na tyminę w pozycji 562 i z guaniny na adeninę w pozycji 337, przy czym zmutowane komórki mają oporność zarówno na herbicydy imidazolinonowe, jak i sulfonylomocznikowe, a oporność może być przenoszona poprzez konwencjonalne krzyżowanie roślin wytworzonych z komórek; oraz (b) zastosowanie herbicydu imidazolinonowego wobec rośliny na polu w celu kontrolowania chwastów.
11. Sposób według zastrz. 10, znamienny tym, że roślina pochodzi z wrażliwych komórek rodzicielskiego buraka cukrowego, oznaczonego jako CR1-B, zdeponowanego jako ATCC 97961 i mającego oporność na herbicydy sulfonylomocznikowe, ale nie mającego oporności na herbicydy
PL 191 812 B1 imidazolinonowe, poprzez hodowanie komórek wrażliwych w pożywce hodowlanej z herbicydem imidazolinonowym w celu wyselekcjonowania zmutowanych komórek.
12. Sposób według zastrz. 10, znamienny tym, że roślina pochodzi z nasienia zdeponowanego jako ATCC 97535 (93R30B).
PL331175A 1996-07-17 1997-07-08 Materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi PL191812B1 (pl)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US68353396A 1996-07-17 1996-07-17
US08/761,197 US5859348A (en) 1996-07-17 1996-12-06 Imidazolinone and sulfonyl urea herbicide resistant sugar beet plants
PCT/US1997/011834 WO1998002527A1 (en) 1996-07-17 1997-07-08 Imidazolinone herbicide resistant sugar beet plants

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL331175A1 PL331175A1 (en) 1999-06-21
PL191812B1 true PL191812B1 (pl) 2006-07-31

Family

ID=27103130

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL331175A PL191812B1 (pl) 1996-07-17 1997-07-08 Materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi

Country Status (15)

Country Link
EP (1) EP0960190B1 (pl)
JP (1) JP3842299B2 (pl)
CN (1) CN1230217A (pl)
AT (1) ATE342960T1 (pl)
AU (1) AU3596697A (pl)
BG (1) BG65035B1 (pl)
CZ (1) CZ295392B6 (pl)
DE (1) DE69736841T2 (pl)
DK (1) DK0960190T3 (pl)
EA (1) EA003297B1 (pl)
ES (1) ES2274546T3 (pl)
PL (1) PL191812B1 (pl)
SK (1) SK286030B6 (pl)
TR (1) TR199900115T2 (pl)
WO (1) WO1998002527A1 (pl)

Families Citing this family (234)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19821614A1 (de) 1998-05-14 1999-11-18 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Sulfonylharnstoff-tolerante Zuckerrübenmutanten
DE19821613A1 (de) 1998-05-14 1999-11-18 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Transgene Sulfonylharnstoff-tolerante Zuckerrübenmutanten
DE19836673A1 (de) 1998-08-13 2000-02-17 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Herbizide Mittel für tolerante oder resistente Zuckerrübenkulturen
US7019196B1 (en) 1998-11-05 2006-03-28 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Herbicide resistant rice
WO2001085970A2 (en) 2000-05-10 2001-11-15 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Resistance to acetohydroxyacid synthase-inhibiting herbicides
UA110598C2 (uk) 2006-11-10 2016-01-25 Басф Се Спосіб одержання кристалічної модифікації фіпронілу
CN101562980B (zh) 2006-11-10 2014-04-16 巴斯夫欧洲公司 锐劲特的晶型
AU2007316639B2 (en) 2006-11-10 2012-12-20 Basf Se Crystalline modification of fipronil
EP2083628A1 (en) 2006-11-10 2009-08-05 Basf Se Crystalline modification of fipronil
UA108733C2 (uk) 2006-12-12 2015-06-10 Толерантна до гербіциду рослина соняшника
BR122019020347B1 (pt) 2007-02-06 2020-08-11 Basf Se Misturas, composição pesticida e métodos para controlar fungos nocivos fitopatogênicos, para proteger plantas do ataque ou infestação pelos insetos, acarídeos ou nematódeos e para proteger semente
EP2570024A1 (en) * 2007-04-04 2013-03-20 BASF Plant Science GmbH AHAS mutants
US10017827B2 (en) 2007-04-04 2018-07-10 Nidera S.A. Herbicide-resistant sunflower plants with multiple herbicide resistant alleles of AHASL1 and methods of use
ES2636907T3 (es) 2007-04-12 2017-10-10 Basf Se Mezclas pesticidas que comprenden un compuesto de cianosulfoximina
EP2614716A1 (en) 2007-09-20 2013-07-17 Basf Se Combinations comprising a fungicidal strain and at least one additional fungicide
US8349877B2 (en) 2007-09-26 2013-01-08 Basf Se Ternary fungicidal compositions comprising boscalid and chlorothalonil
JP2011529464A (ja) 2008-07-29 2011-12-08 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 除草活性を有するピペラジン化合物
EP2183969A3 (en) 2008-10-29 2011-01-05 Basf Se Method for increasing the number of seedlings per number of sowed grains of seed
KR20110063849A (ko) 2008-10-02 2011-06-14 바스프 에스이 제초 효과를 갖는 피페라진 화합물
CN104381250B (zh) 2009-01-27 2017-04-12 巴斯夫欧洲公司 拌种方法
WO2010089244A1 (en) 2009-02-03 2010-08-12 Basf Se Method for dressing seeds
US20120021905A1 (en) 2009-02-11 2012-01-26 Basf Se Pesticidal Mixtures
WO2010092031A2 (en) 2009-02-11 2010-08-19 Basf Se Pesticidal mixtures
AR075573A1 (es) 2009-02-11 2011-04-20 Basf Se Dimethomorph como protector de plaguicidas con efectos fitotoxicos
WO2010092014A2 (en) 2009-02-11 2010-08-19 Basf Se Pesticidal mixtures
EP2395841A1 (en) 2009-02-11 2011-12-21 Basf Se Pesticidal mixtures
ES2444270T3 (es) 2009-03-04 2014-02-24 Basf Se Compuestos de 3-arilquinazolin-3-ona para combatir plagas de invertebrados
WO2010103065A1 (en) 2009-03-11 2010-09-16 Basf Se Fungicidal compositions and their use
EP2408301B1 (en) 2009-03-16 2013-05-15 Basf Se Fungicidal compositions comprising fluopyram and metrafenone
PL2408298T3 (pl) 2009-03-20 2016-12-30 Sposób traktowania roślin uprawnych kapsułkowanym pestycydem
EP2410840A2 (en) 2009-03-26 2012-02-01 Basf Se Use of synthetic and biological fungicides in combination for controlling harmful fungi
WO2010112545A1 (en) 2009-04-01 2010-10-07 Basf Se Isoxazoline compounds for combating invertebrate pests
BRPI1006773A2 (pt) 2009-04-02 2020-12-01 Basf Se uso de pelo menos um filtro uv, método para reduzir danos por queimadura solar em uma planta de colheita e composição
CN102803230A (zh) 2009-06-12 2012-11-28 巴斯夫欧洲公司 杀真菌的具有5-硫取代基的1，2，4-***衍生物
WO2019106641A2 (en) 2017-12-03 2019-06-06 Seedx Technologies Inc. Systems and methods for sorting of seeds
CN102459201A (zh) 2009-06-18 2012-05-16 巴斯夫欧洲公司 杀真菌的1，2，4-***衍生物
WO2010146115A1 (en) 2009-06-18 2010-12-23 Basf Se Triazole compounds carrying a sulfur substituent
WO2010146116A1 (en) 2009-06-18 2010-12-23 Basf Se Triazole compounds carrying a sulfur substituent
CN102803232A (zh) 2009-06-18 2012-11-28 巴斯夫欧洲公司 杀真菌的具有5-硫取代基的1,2,4-***衍生物
US20120088660A1 (en) 2009-06-18 2012-04-12 Basf Se Antifungal 1,2,4-triazolyl Derivatives
EP2443109A1 (en) 2009-06-18 2012-04-25 Basf Se Triazole compounds carrying a sulfur substituent
CN102802416A (zh) 2009-06-18 2012-11-28 巴斯夫欧洲公司 杀真菌混合物
ES2417312T3 (es) 2009-06-19 2013-08-07 Basf Se Benzoxazinonas herbicidas
WO2010149758A1 (en) 2009-06-25 2010-12-29 Basf Se Antifungal 1, 2, 4-triazolyl derivatives
EP2451804B1 (en) 2009-07-06 2014-04-30 Basf Se Pyridazine compounds for controlling invertebrate pests
WO2011003775A2 (de) 2009-07-09 2011-01-13 Basf Se Substituierte cyanobutyrate mit herbizider wirkung
WO2011003776A2 (de) 2009-07-09 2011-01-13 Basf Se Substituierte cyanobutyrate mit herbizider wirkung
WO2011006886A2 (en) 2009-07-14 2011-01-20 Basf Se Azole compounds carrying a sulfur substituent xiv
JP2013500246A (ja) 2009-07-24 2013-01-07 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 無脊椎動物系害虫防除用ピリジン誘導体化合物
KR20120107068A (ko) 2009-07-28 2012-09-28 바스프 에스이 다년생 식물의 저장 조직에서 유리 아미노산의 수준을 증가시키는 방법
BR112012001595B1 (pt) 2009-07-28 2018-06-05 Basf Se Composição de suspo-emulsão pesticida, método para preparar a composição de suspo-emulsão pesticida, uso de uma composição de suspo- emulsão, métodos para combater fungos fitopatogênicos e método para tratar sementes
MX2012001170A (es) 2009-07-30 2012-07-20 Merial Ltd Compuestos de 4-amino-tieno [2,3-d]pirimidina insecticidas y metodos para su uso.
UY32838A (es) 2009-08-14 2011-01-31 Basf Se "composición activa herbicida que comprende benzoxazinonas
CN102574817A (zh) 2009-09-24 2012-07-11 巴斯夫欧洲公司 用于抵抗无脊椎动物害虫的氨基喹唑啉化合物
KR20120106941A (ko) 2009-09-25 2012-09-27 바스프 에스이 식물에서의 암꽃의 조기낙화를 감소시키는 방법
WO2011039104A2 (en) 2009-09-29 2011-04-07 Basf Se Pesticidal mixtures
WO2011042378A1 (de) 2009-10-09 2011-04-14 Basf Se Substituierte cyanobutyrate mit herbizider wirkung
WO2011051212A1 (de) 2009-10-28 2011-05-05 Basf Se Verwendung heteroaromatischer verbindungen als herbizide
DE102010042867A1 (de) 2009-10-28 2011-06-01 Basf Se Verwendung heterozyklischer Verbindungen als Herbizide
DE102010042866A1 (de) 2009-10-30 2011-05-05 Basf Se Substituierte Thioamide mit herbizider Wirkung
WO2011051393A1 (en) 2009-11-02 2011-05-05 Basf Se Herbicidal tetrahydrophthalimides
US8329619B2 (en) 2009-11-03 2012-12-11 Basf Se Substituted quinolinones having herbicidal action
JP2013510113A (ja) 2009-11-06 2013-03-21 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア ４−ヒドロキシ安息香酸及び選択された殺有害生物剤の結晶複合体
WO2011057989A1 (en) 2009-11-11 2011-05-19 Basf Se Heterocyclic compounds having herbicidal action
WO2011057942A1 (en) 2009-11-12 2011-05-19 Basf Se Insecticidal methods using pyridine compounds
WO2011058036A1 (en) 2009-11-13 2011-05-19 Basf Se Tricyclic compounds having herbicidal action
EP2499136B1 (en) 2009-11-13 2013-12-04 Basf Se 3-(3,4-dihydro-2h-benzo[1,4]oxazin-6-yl)-1h-pyrimidin-2,4-dione compounds as herbicides
CA2780955C (en) 2009-11-17 2018-01-23 Merial Limited Fluorinated oxa or thia heteroarylalkylsulfide derivatives for combating invertebrate pests
WO2011064188A1 (en) 2009-11-27 2011-06-03 Basf Se Insecticidal methods using nitrogen-containing heteroaromatic compounds
WO2011067184A1 (de) 2009-12-01 2011-06-09 Basf Se 3- (4, 5 -dihydroisoxazol- 5 -yl) benzoylpyrazolverbindungen und ihre mischungen mit safenern
JP5780681B2 (ja) 2009-12-04 2015-09-16 メリアル リミテッド 殺有害生物性二有機硫黄化合物
WO2011069912A1 (de) 2009-12-07 2011-06-16 Basf Se Triazolverbindungen, ihre verwendung sowie sie enthaltende mittel
WO2011069955A1 (en) 2009-12-07 2011-06-16 Basf Se Sulfonimidamide compounds for combating animal pests
EA022245B1 (ru) 2009-12-08 2015-11-30 Басф Се Пестицидные смеси
WO2011069916A1 (de) 2009-12-08 2011-06-16 Basf Se Triazolverbindungen, ihre verwendung als fungizide sowie sie enthaltende mittel
WO2011069894A1 (de) 2009-12-08 2011-06-16 Basf Se Triazolverbindungen, ihre verwendung sowie sie enthaltende mittel
US8748342B2 (en) 2009-12-08 2014-06-10 Basf Se Pesticidal mixtures
BR112012014944A2 (pt) 2009-12-18 2015-09-15 Basf Se compostos de azolina substituída , composição , uso de um composto , e, métodos para controlar pragas invertebradas e para tratar , controlar , prevenir ou proteger animais contra infestação ou infecção por parasitas.
WO2011073143A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Basf Se Substituted cyanobutyrates having herbicidal action
NZ601636A (en) 2010-01-18 2013-06-28 Basf Se Use of an alkoxylate or a quaternized derivative of 2-propylheptylamine in a pesticidal composition for controlling phytopathogenic fungi or undesired insect or mite attack
CN102762543B (zh) 2010-02-01 2016-03-09 巴斯夫欧洲公司 用于防除动物害虫的取代的酮型异*唑啉化合物和衍生物
WO2011098417A1 (en) 2010-02-10 2011-08-18 Basf Se Substituted cyanobutyrates having herbicidal action
WO2011101303A2 (de) 2010-02-16 2011-08-25 Basf Se Zusammensetzung umfassend ein pestizid und ein alkoxylat von iso-heptadecylamin
WO2011110583A2 (en) 2010-03-10 2011-09-15 Basf Se Fungicidal mixtures comprising triazole derivatives
BR112012023244B1 (pt) 2010-03-17 2018-02-14 Basf Se Composição, alcoxilato de amina (A), método para controlar fungos fitopatogénicos, processo para tratar semente e uso do alcoxilato de amina (A)
US20130012389A1 (en) 2010-03-23 2013-01-10 Basf Se Substituted Pyridazines Having Herbicidal Action
AR081526A1 (es) 2010-03-23 2012-10-03 Basf Se Piridazinas sustituidas que tienen accion herbicida
WO2011117195A1 (en) 2010-03-23 2011-09-29 Basf Se Substituted pyridines having herbicidal action
JP2013522336A (ja) 2010-03-23 2013-06-13 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 除草活性を有するピリドチアジン
EP2550271A1 (en) 2010-03-23 2013-01-30 Basf Se Substituted pyridines having herbicidal action
JP2013522335A (ja) 2010-03-23 2013-06-13 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 除草活性を有するピラジノチアジン
BR112012023759B1 (pt) 2010-03-23 2018-10-09 Basf Se compostos de piridazina, método para controlar pragas invertebradas, método para proteger material de propagação de planta e material de propagação de planta
BR112012023757B1 (pt) 2010-03-23 2020-10-20 Basf Se composto de piridazina, método para controlar pragas invertebradas e método para proteger material de propagação de plantas
JP2013522347A (ja) 2010-03-23 2013-06-13 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 無脊椎有害生物を防除するためのピリダジン化合物
US20130131091A1 (en) 2010-05-24 2013-05-23 Kimihiko Goto Harmful organism control agent
ES2567266T3 (es) 2010-05-28 2016-04-21 Basf Se Mezclas de pesticidas
MX339218B (es) 2010-05-28 2016-05-17 Basf Se Mezclas de plaguicidas.
EP2582243A2 (en) 2010-06-16 2013-04-24 Basf Se Aqueous active ingredient composition
WO2012007426A1 (en) 2010-07-13 2012-01-19 Basf Se Azoline substituted isoxazoline benzamide compounds for combating animal pests
DE102011080568A1 (de) 2010-08-16 2012-02-16 Basf Se Substituierte Cyanobutyrate mit herbizider Wirkung
BR112013005382B1 (pt) 2010-09-13 2020-02-18 Basf Se Uso de um composto 3-piridila, método para controlar pragas invertebradas, método para proteger o material de propagação vegetal e/ou plantas e composição agrícola
US20130180014A1 (en) 2010-09-13 2013-07-11 Basf Se Pyridine Compounds for Controlling Invertebrate Pests III
BR112013005484B1 (pt) 2010-09-13 2018-05-15 Basf Se Método para controlar pragas invertebradas, método para proteger material de propagação de planta e composição agrícola
BR112013005950A2 (pt) 2010-09-14 2016-05-17 Basf Se composição agroquímica, método para a preparação , uso, kit de partes, método para proteger, método para controlar e semente
ES2534745T3 (es) 2010-09-14 2015-04-28 Basf Se Composición que contiene un insecticida de piripiropeno y un adyuvante
AR083646A1 (es) 2010-10-01 2013-03-13 Basf Se Compuestos de imina, composiciones veterinarias y agricolas que los contienen y su uso en el control de plagas de invertebrados
EP2621897A1 (en) 2010-10-01 2013-08-07 Basf Se Imine compounds
EP2621924B1 (en) 2010-10-01 2015-03-04 Basf Se Herbicidal benzoxazinones
SI2627183T2 (sl) 2010-10-15 2021-11-30 Bayer Intellectual Propety Gmbh Uporaba herbicidov inhibitorjev ALS za zatiranje neželene vegetacije v rastlinah beta vulgaris, tolerantnih na herbicid inhibitor ALS
UA126466C2 (uk) * 2010-10-15 2022-10-12 Баєр Інтеллекчуел Проперті Гмбх Толерантний до інгібуючого als гербіциду мутант буряка звичайного
BR112013013623A2 (pt) 2010-12-10 2016-07-12 Basf Se métodos para controlar pragas invertebradas e para proteger material de propagagação de planta e/ou as plantas, material de propagação de planta, uso de um composto da fórmula i e composto de pirazol da fórmula i
KR20130132942A (ko) 2010-12-20 2013-12-05 바스프 에스이 피라졸 화합물을 포함하는 살충 활성 혼합물
WO2012085081A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Basf Se Sulfoximinamide compounds for combating invertebrate pests ii
EP2481284A3 (en) 2011-01-27 2012-10-17 Basf Se Pesticidal mixtures
CA2825609C (en) 2011-02-28 2019-04-09 Basf Se Composition comprising a pesticide, a surfactant and an alkoxylate of 2-propylheptylamine
EP3378313A1 (en) 2011-03-23 2018-09-26 Basf Se Compositions containing polymeric, ionic compounds comprising imidazolium groups
EP2694502A1 (en) 2011-04-06 2014-02-12 Basf Se Substituted pyrimidinium compounds for combating animal pests
AR085872A1 (es) 2011-04-08 2013-10-30 Basf Se Derivados heterobiciclicos n-sustituidos utiles para combatir parasitos en plantas y/o animales, composiciones que los contienen y metodos para combatir dichas plagas
WO2013010946A2 (en) 2011-07-15 2013-01-24 Basf Se Pesticidal methods using substituted 3-pyridyl thiazole compounds and derivatives for combating animal pests i
AR087516A1 (es) 2011-08-12 2014-03-26 Basf Se Compuestos de n-tio-antranilamida y sus usos como plaguicidas
BR112014003112A2 (pt) 2011-08-12 2017-02-21 Basf Se composto da fórmula geral (i), métodos para preparar um composto da fórmula (i), composição agrícola ou veterinária, método para combater ou controlar pragas invertebradas, método para proteger o cultivo de plantas, método para a proteção de sementes, semente, usos de um composto e método para tratar um animal
KR20140051404A (ko) 2011-08-12 2014-04-30 바스프 에스이 N-티오-안트라닐아미드 화합물 및 살충제로서의 그의 용도
JP2014522874A (ja) 2011-08-12 2014-09-08 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア アントラニルアミド化合物および殺虫剤としてのその使用
JP2014522873A (ja) 2011-08-12 2014-09-08 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア アントラニルアミド化合物および殺虫剤としてのその使用
AR087515A1 (es) 2011-08-12 2014-03-26 Basf Se Compuestos de n-tio-antranilamida y sus usos como plaguicidas
CA2842857A1 (en) 2011-08-12 2013-02-21 Basf Se Aniline type compounds
WO2013024169A1 (en) 2011-08-18 2013-02-21 Basf Se Carbamoylmethoxy- and carbamoylmethylthio- and carbamoylmethylamino benzamides for combating invertebrate pests
CN103889960A (zh) 2011-08-18 2014-06-25 巴斯夫欧洲公司 用于防治无脊椎动物害虫的氨基甲酰基甲氧基-和氨基甲酰基甲硫基-及氨基甲酰基甲基氨基苯甲酰胺
US20140243197A1 (en) 2011-08-18 2014-08-28 Basf Se Carbamoylmethoxy- and carbamoylmethylthio- and carbamoylmethylamino benzamides for combating invertebrate pests
US20140213445A1 (en) 2011-09-02 2014-07-31 Basf Se Use of Pesticidal Active 3-Arylquinazolin-4-One Derivatives in Soil Application Methods
KR20140063757A (ko) 2011-09-02 2014-05-27 바스프 에스이 아릴퀴나졸리논 화합물을 포함하는 살곤충 활성 혼합물
BR112014004568A2 (pt) 2011-09-02 2017-04-04 Basf Se misturas agrícolas, método para proteger plantas de ataque, método para controlar insetos, método para a proteção de material de propagação de planta, semente, método para controlar fungos nocivos fitopagênicos, uso de uma mistura e composição agrícola
PL3628320T3 (pl) 2011-11-11 2022-07-25 Gilead Apollo, Llc Inhibitory acc i ich zastosowania
CN104039770A (zh) 2011-11-14 2014-09-10 巴斯夫欧洲公司 取代的1,2,5-噁二唑化合物及其作为除草剂的用途
WO2013072402A1 (en) 2011-11-16 2013-05-23 Basf Se Substituted 1,2,5-oxadiazole compounds and their use as herbicides ii
CA2854100A1 (en) 2011-11-18 2013-05-23 Basf Se Substituted 1,2,5-oxadiazole compounds and their use as herbicides iii
BR112014015531A8 (pt) 2011-12-21 2017-07-04 Basf Se compostos, composição agrícola ou veterinária, métodos, semente e utilização d eum composto
WO2013113789A1 (en) 2012-02-02 2013-08-08 Basf Se N-thio-anthranilamide compounds and their use as pesticides
EP2819511A1 (en) 2012-03-01 2015-01-07 Basf Se Adjuvants based on optionally alkoxylated reaction products of glycerol carbonate and alkylamines
EP2825050B1 (en) 2012-03-12 2016-02-03 Basf Se Liquid concentrate formulation containing a pyripyropene insecticide i
CA2865462C (en) 2012-03-12 2020-11-10 Basf Se Liquid concentrate formulation containing a pyripyropene insecticide ii
EP2825043B1 (en) 2012-03-12 2018-09-05 Basf Se Method for producing an aqueous suspension concentrate formulation of a pyripyropene insecticide
MX362770B (es) 2012-03-13 2019-02-08 Basf Se Formulación concentrada líquida que contiene un insecticida de piripiropeno iii.
US20150065347A1 (en) 2012-03-29 2015-03-05 Basf Se Co-crystals of dicamba and a co-crystal former b
WO2013144228A1 (en) 2012-03-29 2013-10-03 Basf Se Pesticidal methods using heterocyclic compounds and derivatives for combating animal pests
WO2013144213A1 (en) 2012-03-30 2013-10-03 Basf Se N-substituted pyridinylidene compounds and derivatives for combating animal pests
WO2013144223A1 (en) 2012-03-30 2013-10-03 Basf Se N-substituted pyrimidinylidene compounds and derivatives for combating animal pests
US20150065501A1 (en) 2012-04-03 2015-03-05 Basf Se N-substituted hetero-bicyclic furanone derivatives for combating animal
WO2013150115A1 (en) 2012-04-05 2013-10-10 Basf Se N- substituted hetero - bicyclic compounds and derivatives for combating animal pests
IN2014MN02211A (pl) 2012-04-27 2015-07-10 Basf Se
EP2855463B1 (en) 2012-04-27 2018-08-01 Basf Se Substituted n-(tetrazol-5-yl)- and n-(triazol-5-yl)arylcarboxamide compounds and their use as herbicides
JP2015519315A (ja) 2012-04-27 2015-07-09 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアＢａｓｆ Ｓｅ 置換型ｎ−（テトラゾール−５−イル）−およびｎ−（トリアゾール−５−イル）アリールカルボキサミド化合物ならびに除草剤としてのそれらの使用
EP2855447A2 (en) 2012-04-27 2015-04-08 Basf Se Substituted n-(tetrazol-5-yl)- and n-(triazol-5-yl)hetarylcarboxamide compounds and their use as herbicides
MX2014013430A (es) 2012-05-04 2015-04-14 Basf Se Compuestos que contienen pirazol sustituido y su uso como plaguicidas.
EA201401304A1 (ru) 2012-05-24 2015-08-31 Басф Се Соединения n-тиоантраниламида и их применение в качестве пестицидов
CN104640442A (zh) 2012-06-14 2015-05-20 巴斯夫欧洲公司 使用取代3-吡啶基噻唑化合物和衍生物防除动物有害物的灭害方法
ES2660132T3 (es) 2012-06-20 2018-03-20 Basf Se Compuestos de pirazol plaguicidas
AU2013279603B2 (en) 2012-06-21 2016-05-19 Basf Se Adjuvant comprising a 2-propylheptylamine alkoxylate, sugar-based surfactant, and drift-control agent and/or humectant
EP2684879A1 (en) 2012-07-09 2014-01-15 Basf Se Substituted mesoionic compounds for combating animal pests
US20150230470A1 (en) 2012-09-21 2015-08-20 Basf Se Pyrethroid Insecticide For Protecting Plants And Seed
WO2014053407A1 (en) 2012-10-01 2014-04-10 Basf Se N-thio-anthranilamide compounds and their use as pesticides
AR093771A1 (es) 2012-10-01 2015-06-24 Basf Se Metodo para controlar insectos resistentes a insecticidas
AR093828A1 (es) 2012-10-01 2015-06-24 Basf Se Mezclas activas como plaguicidas, que comprenden compuestos de antranilamida
WO2014053401A2 (en) 2012-10-01 2014-04-10 Basf Se Method of improving plant health
EP2903439A1 (en) 2012-10-01 2015-08-12 Basf Se Method of controlling ryanodine-modulator insecticide resistant insects
WO2014053404A1 (en) 2012-10-01 2014-04-10 Basf Se Pesticidally active mixtures comprising anthranilamide compounds
US9686994B2 (en) 2012-12-13 2017-06-27 Bayer Cropscience Ag Use of ALS inhibitor herbicides for control of unwanted vegetation in ALS inhibitor herbicide tolerant beta vulgaris plants
JP6276780B2 (ja) * 2012-12-13 2018-02-07 セスヴァンダーハーブ・エヌ・ブイＳＥＳＶａｎｄｅｒＨａｖｅ Ｎ．Ｖ． 除草剤抵抗性のテンサイ植物を生育する方法
US10117430B2 (en) 2012-12-14 2018-11-06 Basf Se Malononitrile compounds for controlling animal pests
AU2013366601A1 (en) 2012-12-21 2015-07-09 Basf Se Cycloclavine and derivatives thereof for controlling invertebrate pests
WO2014128136A1 (en) 2013-02-20 2014-08-28 Basf Se Anthranilamide compounds and their use as pesticides
MX2015011837A (es) 2013-03-07 2016-01-08 Basf Se Co-cristale de pirimetanil y tetracarboximida de ditiina seleccionada.
CN105324374B (zh) 2013-04-19 2018-12-04 巴斯夫欧洲公司 用于对抗动物害虫的n-取代酰基-亚氨基-吡啶化合物和衍生物
EP2994139B1 (en) 2013-05-10 2019-04-10 Gilead Apollo, LLC Acc inhibitors and uses thereof
US9765089B2 (en) 2013-05-10 2017-09-19 Gilead Apollo, Llc ACC inhibitors and uses thereof
UA116021C2 (uk) 2013-05-15 2018-01-25 Басф Се Заміщені n-(тетразол-5-іл)- й n-(триазол-5-іл)арилкарбоксамідні сполуки та їх застосування як гербіцидів
WO2014184058A1 (en) 2013-05-15 2014-11-20 Basf Se Substituted 1,2,5-oxadiazole compounds and their use as herbicides
WO2014184014A1 (en) 2013-05-15 2014-11-20 Basf Se N-(1,2,5-oxadiazol-3-yl)carboxamide compounds and their use as herbicides
WO2014184019A1 (en) 2013-05-15 2014-11-20 Basf Se N-(1,2,5-oxadiazol-3-yl)carboxamide compounds and their use as herbicides
EP2815649A1 (en) 2013-06-18 2014-12-24 Basf Se Fungicidal mixtures II comprising strobilurin-type fungicides
CN105377836B (zh) 2013-07-18 2018-04-10 巴斯夫欧洲公司 取代的n‑(1,2,4‑***‑3‑基)芳基羧酰胺化合物及其作为除草剂的用途
EP2835052A1 (en) 2013-08-07 2015-02-11 Basf Se Fungicidal mixtures comprising pyrimidine fungicides
AR097362A1 (es) 2013-08-16 2016-03-09 Cheminova As Combinación de 2-metilbifenil-3-ilmetil (z)-(1r)-cis-3-(2-cloro-3,3,3-trifluorprop-1-enil)-2, 2-dimetilciclopropanocarboxilato con por lo menos un insecticida, acaricida, nematicida y/o fungicida
WO2015040116A1 (en) 2013-09-19 2015-03-26 Basf Se N-acylimino heterocyclic compounds
WO2015052178A1 (en) 2013-10-10 2015-04-16 Basf Se 1,2,5-oxadiazole compounds and their use as herbicides
WO2015052173A1 (en) 2013-10-10 2015-04-16 Basf Se Tetrazole and triazole compounds and their use as herbicides
WO2015052153A1 (en) 2013-10-10 2015-04-16 Basf Se Substituted n-(tetrazol-5-yl)- and n-(triazol-5-yl)arylcarboxamide compounds and their use as herbicides
BR112016008555A8 (pt) 2013-10-18 2020-03-10 Basf Agrochemical Products Bv usos do composto carboxamida ativo pesticida e método de proteção de material de propagação vegetal
EP2868196A1 (en) 2013-11-05 2015-05-06 Basf Se Herbicidal compositions
EP2868197A1 (en) 2013-11-05 2015-05-06 Basf Se Herbicidal compositions
BR112016014171A2 (pt) 2013-12-18 2017-08-08 Basf Se Composto, composição agrícola, utilização de um composto, métodos para o combate ou controle das pragas, para a proteção dos vegetais e para a proteção do material de propagação dos vegetais e método de tratamento
AR100304A1 (es) 2014-02-05 2016-09-28 Basf Corp Formulación de recubrimiento de semillas
EP2907807A1 (en) 2014-02-18 2015-08-19 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
CN106455555B (zh) 2014-05-06 2021-03-12 巴斯夫欧洲公司 包含农药和羟烷基聚氧化烯二醇醚的组合物
UA119672C2 (uk) 2014-06-25 2019-07-25 Басф Агро Б.В. Пестицидні композиції
EP2962567A1 (en) 2014-07-01 2016-01-06 Basf Se Ternary mixtures comprising biopesticides and at least two chemical insecticides
WO2016008740A1 (en) 2014-07-14 2016-01-21 Basf Se Pesticidal compositions
WO2016034615A1 (en) 2014-09-02 2016-03-10 BASF Agro B.V. Aqueous insecticide formulation containing hyperbranched polymer
BR112017016841B1 (pt) 2015-02-10 2022-06-07 Basf Se Composição, método para preparar a composição, método para controlar fungos fitopatogênicos e/ou vegetação e/ou infestação de inseto indesejável ou ácaro indesejável e/ou para regular o crescimento de plantas, semente, e, uso de um éster alcoxilado.
EP3061346A1 (en) 2015-02-26 2016-08-31 Bayer CropScience AG Use of fluopyram and biological control agents to control harmful fungi
RU2723035C2 (ru) 2015-03-31 2020-06-08 Басф Се Композиция, содержащая пестицид и n,n-диметиламид изононановой кислоты
WO2016174042A1 (en) 2015-04-27 2016-11-03 BASF Agro B.V. Pesticidal compositions
PT3380479T (pt) 2015-11-25 2023-03-13 Gilead Apollo Llc Inhibidores de triazol acc e seus usos
EA201890913A1 (ru) 2015-11-25 2018-11-30 Джилид Аполло, Ллс Пиразоловые соединения в качестве ингибиторов акк и их применение
EA201890949A1 (ru) 2015-11-25 2018-12-28 Джилид Аполло, Ллс СЛОЖНОЭФИРНЫЕ ИНГИБИТОРЫ АЦЕТИЛ-КоА-КАРБОКСИЛАЗЫ И ВАРИАНТЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
WO2017102275A1 (en) 2015-12-17 2017-06-22 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
UY37137A (es) 2016-02-24 2017-09-29 Merial Inc Compuestos antiparasitarios de isoxazolina, formulaciones inyectables de acción prolongada que los comprenden, métodos y usos de los mismos
EP3426044A1 (en) 2016-03-10 2019-01-16 Basf Se Fungicidal mixtures iii comprising strobilurin-type fungicides
EP3245872A1 (en) 2016-05-20 2017-11-22 BASF Agro B.V. Pesticidal compositions
WO2017207368A1 (en) 2016-06-02 2017-12-07 BASF Agro B.V. Fungicidal compositions
BR112019014953A2 (pt) 2017-02-01 2020-04-28 Basf Se concentrado emulsionável, processo para a preparação do concentrado, emulsão, e, método para controlar fungos fitopatogênicos e/ou o crescimento indesejado de plantas e/ou a infestação indesejada de insetos ou acarídeos e/ou para regular o crescimento de plantas.
EP3630734A1 (en) 2017-05-30 2020-04-08 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
AU2018276360A1 (en) 2017-05-30 2019-12-19 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides II
AR112112A1 (es) 2017-06-20 2019-09-18 Basf Se Compuestos de benzamida y su uso como herbicidas
KR102643189B1 (ko) 2017-06-23 2024-03-04 바스프 에스이 피라졸 화합물을 포함하는 살충 혼합물
CA3066991A1 (en) 2017-07-10 2019-01-17 Basf Se Mixtures comprising an urease inhibitor (ui) and a nitrification inhibitor such as 2-(3,4-dimethyl-1h-pyrazol-1-yl)succinic acid (dmpsa) or 3,4-dimethyl pyrazolium glycolate (dmpg)
AR112342A1 (es) 2017-07-21 2019-10-16 Basf Se Compuestos de benzamida y su uso como herbicidas
US20200323204A1 (en) 2017-11-15 2020-10-15 Basf Se Tank-Mix
EP3717460A1 (en) 2017-11-29 2020-10-07 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
CN111656355B (zh) 2017-12-03 2023-08-29 种子X科技公司 种子分类的***及方法
WO2019106638A1 (en) 2017-12-03 2019-06-06 Seedx Technologies Inc. Systems and methods for sorting of seeds
WO2019122347A1 (en) 2017-12-22 2019-06-27 Basf Se N-(1,2,5-oxadiazol-3-yl)-benzamide compounds and their use as herbicides
AR114040A1 (es) 2017-12-22 2020-07-15 Basf Se Compuestos de benzamida y su uso como herbicidas
EP3508480A1 (en) 2018-01-08 2019-07-10 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
WO2019162309A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
WO2019162308A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 Basf Se Benzamide compounds and their use as herbicides
BR112021003324A2 (pt) 2018-09-19 2021-05-11 Basf Se misturas de pesticidas, composições, métodos de combate ou controle de pragas invertebradas, de proteção de plantas em crescimento e de proteção de material de propagação vegetal, uso de mistura de pesticidas e semente
AU2019348280A1 (en) 2018-09-28 2021-04-22 Basf Se Method of controlling pests by seed treatment application of a mesoionic compound or mixture thereof
EP3680223A1 (en) 2019-01-10 2020-07-15 Basf Se Mixture comprising an urease inhibitor (ui) and a nitrification inhibitor (ni) such as an ni mixture comprising 2-(3,4-dimethyl-1h-pyrazol-1-yl)succinic acid (dmpsa) and dicyandiamide (dcd)
JP2023507527A (ja) 2019-12-23 2023-02-22 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 酵素によって増強された農薬化合物の根からの取り込み
EP4090158A1 (en) 2020-01-16 2022-11-23 Basf Se Mixtures comprising nitrification inhibitors and carriers
CA3164114A1 (en) 2020-01-16 2021-07-22 Gregor Pasda Mixtures comprising a solid carrier comprising an urease inhibitor and a further solid carrier comprising a nitrification inhibitor
JP2023533007A (ja) 2020-07-06 2023-08-01 ピーアイ インダストリーズ リミテッド チエタニルオキシ化合物、その酸化物または塩を含む殺有害生物活性混合物
TW202220557A (zh) 2020-07-27 2022-06-01 印度商皮埃企業有限公司 包含吡唑並吡啶鄰氨基苯甲酰胺化合物、其氧化物或鹽的農藥活性混合物

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE100141T1 (de) * 1984-03-06 1994-01-15 Mgi Pharma Inc Herbizide resistenz in pflanzen.
US5378824A (en) * 1986-08-26 1995-01-03 E. I. Du Pont De Nemours And Company Nucleic acid fragment encoding herbicide resistant plant acetolactate synthase

Also Published As

Publication number Publication date
JP3842299B2 (ja) 2006-11-08
EP0960190A1 (en) 1999-12-01
CZ295392B6 (cs) 2005-07-13
CN1230217A (zh) 1999-09-29
ES2274546T3 (es) 2007-05-16
DK0960190T3 (da) 2007-02-19
EA003297B1 (ru) 2003-04-24
EP0960190A4 (en) 2003-03-12
DE69736841T2 (de) 2007-02-01
AU3596697A (en) 1998-02-09
WO1998002527A1 (en) 1998-01-22
TR199900115T2 (xx) 1999-04-21
SK286030B6 (sk) 2008-01-07
BG103177A (en) 1999-12-30
BG65035B1 (bg) 2006-12-29
JPH11513895A (ja) 1999-11-30
ATE342960T1 (de) 2006-11-15
CZ14599A3 (cs) 1999-08-11
EP0960190B1 (en) 2006-10-18
SK4399A3 (en) 2000-04-10
EA199900123A1 (ru) 1999-08-26
PL331175A1 (en) 1999-06-21
DE69736841D1 (de) 2006-11-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL191812B1 (pl) Materiał roślinny z buraka cukrowego składający się ze zmutowanych komórek, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym, sposób uzyskiwania oporności na herbicyd w buraku, sposób zwalczania chwastów rosnących razem z burakami cukrowymi
US5859348A (en) Imidazolinone and sulfonyl urea herbicide resistant sugar beet plants
PL191810B1 (pl) Materiał roślinny z buraka cukrowego, sposób wytwarzania oporności na herbicyd w buraku cukrowym i sposób wytwarzania krzyżówkowej rośliny buraka
BG66416B1 (bg) Устойчиви към сулфонилурея слънчогледови растения
US20170002375A1 (en) Methods and compositions to produce rice resistant to accase inhibitors
EP0472573B1 (en) Herbicide resistant maize
RU2551781C2 (ru) Устойчивые к гербицидам растения подсолнечника
JPH04311392A (ja) 耐除草剤性ａｈａｓ欠失変異体
Jansky et al. Colorado potato beetle resistance in somatic hybrids of diploid interspecific Solanum clones
JP2011511646A (ja) ヒマワリ（Ｈｅｌｉａｎｔｈｕｓａｎｎｕｕｓ）における優性早生突然変異および遺伝子
US20240132906A1 (en) Shade tolerant lettuce
Weller et al. Biotechnologies of obtaining herbicide tolerance in potato
Nelson Plant regeneration from protoplasts of Solanum tuberosum and Solanum brevidens
UA72428C2 (uk) Рослинний матеріал цукрового буряку, стійкий до імідазолінонового та сульфонілсечовинного гербіциду, спосіб надання рослинам буряку стійкості до гербіцидів та спосіб боротьби з бур'янами
Morier Chromosome location of the host response to Ptr ToxB produced by race 5 Pyrenophora tritici-repentis

Legal Events

Date Code Title Description
RECP Rectifications of patent specification