PL124349B1 - Process for preparing maytansinol - Google Patents
Process for preparing maytansinolInfo
- Publication number
- PL124349B1 PL124349B1 PL1977221358A PL22135877A PL124349B1 PL 124349 B1 PL124349 B1 PL 124349B1 PL 1977221358 A PL1977221358 A PL 1977221358A PL 22135877 A PL22135877 A PL 22135877A PL 124349 B1 PL124349 B1 PL 124349B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- parts
- volume
- antibiotic
- strain
- ethyl acetate
- Prior art date
Links
- QWPXBEHQFHACTK-KZVYIGENSA-N (10e,12e)-86-chloro-12,14,4-trihydroxy-85,14-dimethoxy-33,2,7,10-tetramethyl-15,16-dihydro-14h-7-aza-1(6,4)-oxazina-3(2,3)-oxirana-8(1,3)-benzenacyclotetradecaphane-10,12-dien-6-one Chemical compound CN1C(=O)CC(O)C2(C)OC2C(C)C(OC(=O)N2)CC2(O)C(OC)\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 QWPXBEHQFHACTK-KZVYIGENSA-N 0.000 title claims description 9
- QWPXBEHQFHACTK-UHFFFAOYSA-N Maytansinol Natural products CN1C(=O)CC(O)C2(C)OC2C(C)C(OC(=O)N2)CC2(O)C(OC)C=CC=C(C)CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 QWPXBEHQFHACTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 8
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 31
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 19
- -1 lithium aluminum hydride Chemical compound 0.000 claims description 8
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 7
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 6
- 239000012280 lithium aluminium hydride Substances 0.000 claims description 5
- 229910052987 metal hydride Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 150000004681 metal hydrides Chemical class 0.000 claims description 5
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 64
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 17
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 17
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 14
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 14
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 9
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 8
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 7
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 7
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000187654 Nocardia Species 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- MQYZCKOGTWYJAZ-UHFFFAOYSA-N ansamitocin P1 Natural products CN1C(=O)CC(OC(C)=O)C2(C)OC2C(C)C(OC(=O)N2)CC2(O)C(OC)C=CC=C(C)CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 MQYZCKOGTWYJAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 5
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OPQNCARIZFLNLF-UHFFFAOYSA-N ansamitocin P-3 Natural products CN1C(=O)CC(OC(=O)C(C)C)C2(C)OC2C(C)C(OC(=O)N2)CC2(O)C(OC)C=CC=C(C)CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 OPQNCARIZFLNLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OPQNCARIZFLNLF-JBHFWYGFSA-N ansamitocin P3 Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@H](OC(=O)N1)[C@@H](C)[C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)C(C)C)CC(=O)N1C)\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 OPQNCARIZFLNLF-JBHFWYGFSA-N 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- RJIVUFYDGYNSNE-UHFFFAOYSA-N maytanbutine Natural products CN1C(=O)CC(OC(=O)C(C)N(C)C(=O)C(C)C)C2(C)OC2C(C)C(OC(=O)N2)CC2(O)C(OC)C=CC=C(C)CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 RJIVUFYDGYNSNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 4
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol Chemical compound OC.CCOC(C)=O UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N (2R,6R)-form-2.6-Diaminoheptanedioic acid Natural products OC(=O)C(N)CCCC(N)C(O)=O GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NOIRDLRUNWIUMX-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3,7-dihydropurin-6-one;6-amino-1h-pyrimidin-2-one Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1.O=C1NC(N)=NC2=C1NC=N2 NOIRDLRUNWIUMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 2
- 244000241257 Cucumis melo Species 0.000 description 2
- 235000015510 Cucumis melo subsp melo Nutrition 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical class OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000545439 Putterlickia verrucosa Species 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 241000248418 Tetrahymena pyriformis Species 0.000 description 2
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N [4,6-bis(cyanoamino)-1,3,5-triazin-2-yl]cyanamide Chemical compound N#CNC1=NC(NC#N)=NC(NC#N)=N1 FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N meso-2,6-diaminopimelic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCC[C@@H]([NH3+])C([O-])=O GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CDVZCUKHEYPEQS-SNQKNWKTSA-N (2r,3s,4r)-2,3,4,5-tetrahydroxypentanal;(2r,3s,4s)-2,3,4,5-tetrahydroxypentanal Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O CDVZCUKHEYPEQS-SNQKNWKTSA-N 0.000 description 1
- MHCRPWBXXYZBSP-LGDQNDJISA-N (2s)-2-aminobutanedioic acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O MHCRPWBXXYZBSP-LGDQNDJISA-N 0.000 description 1
- XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazole-2-carbaldehyde Chemical compound O=CC1=NC=CN1 XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HXWLJBVVXXBZCM-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydroxypropyl nitrate Chemical compound OCC(O)CO[N+]([O-])=O HXWLJBVVXXBZCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 3-Methylbutanoic acid Natural products CC(C)CC([O-])=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- BGEJBAMYTJMJPW-UHFFFAOYSA-N Ansamitocin P4 Natural products CN1C(=O)CC(OC(=O)CC(C)C)C2(C)OC2C(C)C(OC(=O)N2)CC2(O)C(OC)C=CC=C(C)CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 BGEJBAMYTJMJPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- CJIMGHJTKSSCHA-CULVAAHOSA-N C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)CO Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)CO CJIMGHJTKSSCHA-CULVAAHOSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical class [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 239000004593 Epoxy Chemical group 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 1
- 238000001321 HNCO Methods 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical class C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- OWIKHYCFFJSOEH-UHFFFAOYSA-N Isocyanic acid Chemical compound N=C=O OWIKHYCFFJSOEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229910010084 LiAlH4 Inorganic materials 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical class [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000544912 Melanoides Species 0.000 description 1
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WLKHTIAFMSHJLG-UHFFFAOYSA-N O3-butyryl-maytansinol Natural products CC1C2OC2(C)C(OC(=O)CCC)CC(=O)N(C)C(C(=C(OC)C=2)Cl)=CC=2CC(C)=CC=CC(OC)C2(O)NC(=O)OC1C2 WLKHTIAFMSHJLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical class [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Chemical class CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940072049 amyl acetate Drugs 0.000 description 1
- PGMYKACGEOXYJE-UHFFFAOYSA-N anhydrous amyl acetate Natural products CCCCCOC(C)=O PGMYKACGEOXYJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N beta-methyl-butyric acid Natural products CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical class OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Chemical class 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Chemical class 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- OLOZVPHKXALCRI-UHFFFAOYSA-L calcium malate Chemical compound [Ca+2].[O-]C(=O)C(O)CC([O-])=O OLOZVPHKXALCRI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001362 calcium malate Substances 0.000 description 1
- 229940016114 calcium malate Drugs 0.000 description 1
- 235000011038 calcium malates Nutrition 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Chemical group 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 230000020176 deacylation Effects 0.000 description 1
- 238000005947 deacylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N diphosphonate Chemical compound O=P(=O)OP(=O)=O YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-M heptanoate Chemical compound CCCCCCC([O-])=O MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 150000002634 lipophilic molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Chemical class 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical class [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- RJIVUFYDGYNSNE-IZKDVACGSA-N maytanbutine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@H](OC(=O)N1)[C@@H](C)[C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(=O)C(C)C)CC(=O)N1C)\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 RJIVUFYDGYNSNE-IZKDVACGSA-N 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229940043265 methyl isobutyl ketone Drugs 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentoxide Inorganic materials O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Chemical class 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000007639 printing Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D491/18—Bridged systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D498/18—Bridged systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/188—Heterocyclic compound containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen atoms and oxygen atoms as the only ring heteroatoms
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarza¬ nia maytansinolu stanowiacego antybiotyk C— —15003—PO o wzorze 1.Znany z Journal of the America Chemical So- ciety tom 97, 5294—5295 (1975) sposób wytwarza¬ nia maytansinolu polega na traktowaniu maytan- butiny, czyli zwiazku o wzorze ogólnym 2, w któ¬ rym R oznacza grupe o wzorze —O—CO—CH/ /CH3/—N/CH3/—CO—CH/CH3/2, wodorkiem litowo- glinowym w suchym czterowodorofuranie, w tem¬ peraturze —23°C w ciagu 3 godzin. Wydajnosc reakcji wynosi 40%.Sposób ten ma wiec wady polegajace na dosc niskiej wydajnosci, koniecznosci prowadzenia reak¬ cji w znacznie obnizonej temperaturze a ponadto na malej dostepnosci zwiazku wyjsciowego. May- tanbutine otrzymuje sie przez ekstrakcje Putter- lickia verrucosa alkoholem, co opisano równiez we wspomnianym artykule. Wydajnosc ekstrakcji may- tanbutiny jest bardzo niska i w najlepszym przy¬ padku wynosi tylko 4,5 mg/kg surowca. Surowiec ten, czyli roslina znana jako Putterlickia verrucosa wymaga dluzszego czasu najpierw na wzrost a na¬ stepnie na obróbke, która doprowadza do otrzy¬ mania substancji nadajacej sie do ekstrakcji, taka jak rozdrabnianie, suszenie i spulchnianie.Wspomniane wady powoduja, ze znany sposób wytwarzania maytansinolu z- maytanbutiny otrzy¬ manej przez ekstrakcje nie nadaje sie do stosowa¬ nia w przemysle. 10 15 20 30 Sposobem wedlug wynalazku zwiazek o wzorze 1, czyli antybiotyk C^15003—PO, wytwarza sie przez poddanie redukcyjnej hydrolizie antybiotyk C—'15003 o ogólnym wzorze 2, w którym R ozna¬ cza ugrupowanie o wzorze —CO—CH/CHj/a, —COCH2CH2—CH3 lub —CO—CH*—CH/CH3/2.Termin„antybiotyk C—-15003" oznacza wiec zwia¬ zek o ogólnym wzorze 2, w którym R oznacza jed¬ no, dwa lub trzy sposród wymienionych wyzej ugrupowan. Zwiazek, w którym R oznacza grupe —CO—CH/CH3/2 okresla sie nazwa „antybiotyk C—15003 P—3" lub w skrócie symbolem C^15003 P—3, zwiazek w którym R oznacza grupe —CO— —/CH2/2—CH3 okresla sie nazwa „antybiotyk C— —15003 P—3" lub w skrócie symbolem C—15003 P—3*, a zwiazek, w którym R oznacza grupe —CO—CHj-^CH/CH3/2 okresla sie nazwa „anty¬ biotyk C^15003 P—4" lub w skrócie symbolem C—115003 P—4. Zwiazek, w którym R oznacza atom wodoru, czyli zwiazek o wzorze i, okresla sie nazwa „antybiotyk C—15003—PO" lub w skrócie symbolem C—'15003 P—0.Sposób wedlug wynalazku rózni sie tym od zna¬ nego sposobu wytwarzania tego antybiotyku, ze stosuje sie nowy zwiazek wyjsciowy, który zosta¬ nie opisany dokladniej w dalszym ciagu opisu, dostepny bez ograniczen w wiekszej ilosci a po¬ nadto, ze przebiega ze znacznie wyzsza wydajno¬ scia i w nie tak surowych warunkach jak znany proces. 124349124 349 3 Antybiotyk C—15003 jest nowym produktem otrzymanym w procesie hodowli szczepu gatunku Nocardia, który wytwarza ten antybiotyk w brze¬ czce hodowlanej. Szczep gatunku Nocardia wy¬ odrebniono z gleby w wyniku przeprowadzenia badan skriningowych szeregu próbek róznych gleb i stwierdzenia, ze pewne mikroorganizmy nalezace do gatunku Nocardia wykazuja zdolnosc wytwa¬ rzania nowego antybiotyku, w procesie hodowli tych mikroorganizmów w odpowiednim srodowis¬ ku; Jako przyklad szczepu mikroorganizmu wytwa¬ rzajacego antybiotyk C^15003 mozna wymienic szczep actinomycete C—1$003, wyizolowany z gle¬ by i innych- materialów w ramach poszukiwan skriningowych mikroorganizmu wytwarzajacych ^antybiotyki, i ""TroerobiologicznaJ charakterystyke szczepu C—15003 okreslono sposobami analogicznymi do zaproponowanowanych przez Schirlinga i Gottieba (International Journal of Systematic Bacteriology 16, 313—340 (1966)). Wyniki obserwacji prowadzo¬ nych w temperaturze 28°C w ciagu 21 dni sa na¬ stepujace: 1) Charakterystyka morfologiczna Grzybnia wegetatywna rozprzestrzenia sie do¬ brze i (rozwija w rozgalezienia, zarówno na agarze jak i w pozywce plynnej. Wiele sposród strzepków ma srednice 0,8 do 1,2 jun, a w pewnych przy¬ padkach moga one dzielic sie na fragmenty przy¬ pominajace bakterie paleczkowe lub na krótkie odgalezienia. Szczep daje dobre wzrosty na róz¬ nych pozywkach taksonomicznych, z grzybnia po¬ wietrzna nalozona na grzybnie wegetatywna, choc czesto przyjmuje postac tworów podobnych do ko- remii (50—200 X 200^1000 jun), na których naste¬ puje dalszy wzrost powietrzny. Grzybnia powietrz¬ na czesto jest falista, a czasami napotyka sie kon¬ figuracje proste lub w postaci luznej spirali.Mikroskopowe badania starszych hodowli wyka¬ zuja, ze jedynie w nielicznych przypadkach komór¬ ki koridalne wystepuja w lancuchach, natomiast zawiesiny komórkowe uzyskane z powierzchni ta¬ kich hodowli wykazuja w badaniach mikroskopo¬ wych wiele tworów w ksztalcie wydluzonej elipsoi¬ dy (0,8-^1,2 (im X 4,8—6,8 Jim) i elipsoidalnych (0,8-^1,2 i|im X 1,0—2,0 ^m), przypominajacych ar- trOspory Obserwacje pod mikroskopem elektronowym wy¬ kazuja, ze powierzchnia powyzszych tworów jest gladka. 2) Skladniki komórek Szczep hodowano na wstrzasarce, w zmodyfiko¬ wanej pozywce ISP nr 1, w temperaturze 28°C, w ciagu 66 do 90 godzin. Po zakonczeniu hodowli komórki zbierano i przemywano. Sposobem B. Bec¬ kera i innych (Applied Microbiology 12, 421 (1964)) i sposobem M. P. Lechebaliera (Journal of Labo- ratory and Clinical Medicins 71, 934 (1968)) cale komórki badano na obecnosc kwasu dwuaminopi- melinowego i udzial cukrów. Stwierdzono, ze kwas dwuaminopimelinowy jest w konfiguracji mezo i znaleziono plamy odpowiadajace galaktozie i ara- binozie. 5 3) Charakterystyka na pozywkach taksonomicz¬ nych Szczep wykazal stosunkowo dobry wzrost na róznych pozywkach, z grzybnia wegetatywna bez¬ barwna do jasnozóltej w poczatkowych fazach ho- 10 dowli i jasnozóltawobrazowa do zóltawobrazowej w fazach pózniejszych. W róznych pozywkach tak¬ sonomicznych szczep produkuje rozpuszczalne pig¬ menty, zólte do zóltawobrazowych. Grzybnia po¬ wietrzna jest proszkowata i zwykle daje umiarko- 15 wany wzrost, barwy bialej do zóltej lub jasnozól- tawobrazowej. Charakterystyke szczepu w róznych pozywkach taksonomicznych przedstawiono w ta¬ blicy 1. 30 Tablica 1 . Charakterystyka hodowlana szczepu C—15003 na pozywkach taksonomicznych A) Agar sacharozowo-azotanowy: Wzrost (G): bujny, barwa jasnozólta, melonowa 25 (3 ia) * do bursztynowej (3 lc) * tworza sie ciala podobne do koremii Grzybnia powietrzna (AM): skapa, barwy bialej Rozpuszczalny pigment (SP): brak lub jasnozólta- wobrazowy 30 B) Agar glicerynowo-azotanowy: G. umiarkowany, barwy kosci sloniowej (2 ca) *, tworza sie ciala podobne do koremii AM: umiarkowana, barwy bialej SP: brak 35 C) Agar glukozowo-asparaginowy: G: umiarkowany, barwa jasnej nogietki (3 pa) * do jasnozóltej (2 pa) * AM: skapa, barwy bialej SP: jasnozólty (2 pa) * 40 D) Agar glicerynowo-asparaginowy: G: umiarkowany, barwy kosci sloniowej (2 ca)*, tworza sie ciala podobne do koremii AM: skapa, barwy bialej SP: brak 45 E) Agar skrobiowy: G: umiarkowany, barwy kosci sloniowej (2 ca)* do pszenicznej (2 ca)*, tworza sie ciala podob¬ ne do koremii AM: obfita, barwy kosci sloniowej (2 ca)* 50 SP: brak F) Agar odzywczy: G: umiarkowany, barwy kosci sloniowej (2 ca) * do zólcieni kolonialnej (2 ga) *, tworza sie ciala podobne do koremii 55 AM: skapa, barwy bialej SP: brak G) Agar z jablczanem wapnia: G: umiarkowany, barwy kosci sloniowej (2 ca)* do pszenicznej (2 ea) *, tworza sie ciala podobne 60 do koremii AM: umiarkowana, barwy bialej do kosci slonio¬ wej (2 ca)* SP: brak H) Agar z ekstraktem z drozdzy i z ekstraktem 85 slodowym:5 124 349 6 G: umiarkowany, barwy bursztynowej (3 lc) * do jasnozóltej (3 la)*, tworza sie ciala podobne do koremii I) Agar z maka owsiana: G: umiarkowany, barwy kosci sloniowej (2 ca)* do zólcieni kolonialnej (2 ga) *, tworza sie ciala podobne do koremii AM: skapa, barwy bialej do jasnozóltej SP: brak J) Agar z peptonem, ekstraktem z drozdzy i ze¬ lazem: G; umiarkowany, barwy zólcieni kolonialnej (2 ga) * AM: brak SP: zólcien kolonialna (2 ga) * K) Agar tyrozynowy: G: umiarkowany, barwy kosci sloniowej (2 ca)* do jasnozóltej melonowej (3 ea)*, tworza sie ciala podobne do koremii AM: umiarkowana, barwy bialej do kosci slonio¬ wej {2 ca) * SP: wielbladzi (3 ie)* Oznaczenie barw wedlug Color Harmony Manu¬ al, wydanie czwarte (Container Corporation of America, 1958) 4) Charakterystyka fizjologiczna Charakterystyke fizjologiczna szczepu przedsta¬ wiono w tablicy II.Zakres temperatury wzrostu: 12—38°C. Dobry wzrost powietrzny na agarze (ISP nr 2) wystepuje w zakresie temperatur 20—35°C.Tablica II Fizjologiczna charakterystyka szczepu C-15003 zakres temperatury dla wzrostu zakres temperatury dla wzrostu powietrznego uplynnianie zelatyny: hydroliza skrobi: redukcja azotanów: peptonizacja mleka: koagulacja mleka: rozklad kazeiny wytwarzanie pigmentów melanoi- dowych: rozklad tyrozyny: rozklad ksantyny: rozklad hipoksantyny: tolerancja na lizozym: tolerancja na chlorek sodu: 12—38°C 20—35°C dodatnie dodatnia dodatnia dodatnia ujemna dodatni ujemne (agar z peptonem, ekstrak¬ tem z drozdzy i zelazem) dodatnie (agar ty¬ rozynowy) dodatni ujemny ujemny dodatnia 2% 5) Utylizacja zródel wegla Utylizacje róznych zródel wegla badano stosujac pozywke opisana przez Pridhama i Gottlieba (Jour¬ nal of Bacteriology 56, 107 (1948)) i pozywke pod¬ stawowa o tym samym skladzie + 0,lV© ekstraktu z drozdzy.Uzyskane wyniki przedstawione w tablicy III. 5 T a b 1 i c a III Utylizacja zródel wegla przez szczep nr C-15Ó03 Zródlo wegla D-ksyloza L-arabinoza D-glukoza D-galaktoza D-fruktoza L-ramnoza D-mannoza sacharoza rafinoza i-inozytol D-mannitol ] gliceryna skrobia rozpuszczalna laktoza maltoza trehaloza j ' kontrola j Wzrost . + ++* + + - \ + + + + + ¦ + + + + + + + + : + ¦++ + + + + + + ± -± — — ++ -M- — ± + -h ~ ± — + + + 1 * pozywka podstawowa + 0,1% ekstraktu z drozdzy Skala ocen: + + + wzrost obfity, + + wzrost 4o- bry, + wzrost, + wzrost slaby, — brak wzrostu 6) Dalsza charakterystyka Komórki zbierano sposobem opisanym w 2), a 35 DNA preparowano sposobem analogicznym do opi¬ sanego przez J. Marmura i innych (Journal of Mo- lecular Biology, 3„ 208, 1961). Zawartosc G—C (guanina-cytozyna) w DNA wynosi okolo 71 mol%.Wybarwianie Grama grzybni wegetatywnej szcze- 40 Pu 3est dodatnie.Powyzsza charakterystyke szczepu nr C-15003 po¬ równano z opisanymi w dzielach S. A. Waksmana „The Actinomycetes" tom 2 (The Williams and Wilkins Co., 1961) i R. E. Buchanana i N. E. Gib- 45 bonsa „Bergey^ Manual of Determinative. Bacterio- logy" wydanie ósme, 1974 oraz w innej literaturze.Chociaz sadzono, ze szczep C—(15003 nalezy do grupy III rodzaju Nocardia to z faktu, ze opisana charakterystyka nie odpowiada zadnemu ze zna- 50 nych szczepów wynika, ze szczep C—(15003 jest mikroorganizmem nowego gatunku.Szczep C^15003 zdeponowano w Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology (FEBM) z numerem 3992 i w In- 55 stitute for Fermentation, Osaka (IFO) z numerem IFO 13726 oraz w The American Type Culture Collection (ATCC), Meryland, USA, z numerem 31281.Jak wspomniano, szczep C—15003 jest nowym 60 gatunkiem rodzaju Nocardia. Jest on podatny, jak ogólnie mikroorganizmy, na zmiany i mutacje, spontaniczne lub nastepujace pod wplywem czyn¬ ników mutagennych.Przykladowo, wiele wariantów szczepu, uzyski- -65 walnych przez napromieniowanie promieniami rent-124 349 7 8 genowskimi, promieniami swiatlem nadfioletowym itp., izolacje pojedynczych komórek, hodowle w pozywkach zawierajacych rózne chemikalia lub innymi zabiegami mutagennymi, jak równiez spon¬ taniczne mutanty szczepu winny byc uwazane nie za inne gatunki mikroorganizmów lecz za szczep C—(15003, a zdolne do wtywarzania antybiotyków C-^15003- P-3, P-3' i/lub P-4 moga byc stosowane w sposobie wedlug wynalazku jako ten szczep.Przykladowo, poddajac szczep C—45003 róznym za¬ biegom mutagennym uzyskuje sie mutanty prawie nie majace zdolnosci wytwarzania rozpuszczalnych pigmentów, mutanty z grzybnia substratowa bez¬ barwna, zóltawozielona, czerwonawobrazowa lub pomaranczowo-czerwona, mutanty, których strzep¬ ki latwo rozdzielaja sie na elementy paleczkowe lub krótkie, rozgalezione fragmenty oraz mutanty z obfita grzybnia powietrzna barwy bialej lub nie wytwarzajace grzybni powietrznej.Jako pozywke do hodowli szczepu wytwarzaja¬ cego antybiotyk C—(15003 mozna stosowac jaka¬ kolwiek pozywke plynna lub stala, zawierajaca skladniki odzywcze utylizowane przez szczep. W ce¬ lu uzyskania wysokiej wydajnosci korzystnie jest stosowac pozywke plynna.Pozywka zawiera zródla wegla i azotu asymilo- wane i metabolizowane przez szczep, skladniki nie¬ organiczne, sladowe Skladniki odzywcze itp. Jako przyklady zródel wegla mozna wymienic glukoze, laktoze, sacharoze, maltoze, dekstryne, skrobie, gli¬ ceryne, mannit, sorbit, itp., tluszcze i oleje (np. olej sojowy, olej smakowy, olej kurzy, itp.) i inne.Zródlem azotu moze byc. np. ekstrakt miesny, su¬ szone drozdze, maka sojowa, namok kukurydziany, pepton, kazeina, maka z nasienia bawelny, odpa¬ dowa melasa, mocznik, sole amonowe (np. siarczan amonu, chlorek amonu, azotan amonu, octan amo¬ nu itp.) i inne.Pozywka moze ponadto zawierac sole sodu, po¬ tasu, wapnia, magnezu, zelaza, manganu, cynku, kobaltu, niklu itp., sole kwasu fosforowego, kwasu borowego itp. oraz sole kwasów organicznych, jak octany i propioniany. Do pozywki mozna równiez dodac róznych aminokwasów, jak np. kwas gluta¬ minowy, kwas asparaginowy, alanina, glicyna, li¬ zyna, metionina, prolina itp., peptydów, np. dwu- peptydów, trójpeptydów itp., witamin, np. B^ Ba, kwasu nikotynowego, Bu, C, E itp., kwasów nukle¬ inowych, np. puryny, pirymidyny i ich pochod¬ nych itp. W celu doprowadzenia pH do pozadanej wartosci mozna do pozywki dodac nieorganicznych lub organicznych kwasów, zasad, buforów itp.Jako czynniki przeciwdzialajace pienieniu mozna stosowac w pozywce odpowiednie ilosci olejów, tluszczów, srodków powierzchniowo czynnych itp.Hodowle mozna prowadzic stacjonarnie, na wstrzasarce, podpowierzchniowo aerobowo i w in¬ nych warunkach. W celu uzyskania wysokiej wy¬ dajnosci korzystnie jest oczywiscie prowadzic ho¬ dowle podpowierzchniowo aerobowo.Warunki hodowli sa oczywiscie zalezne od wlas¬ ciwosci fizycznych i skladu pozywki, szczepu, spo¬ sobu hodowli i innych czynników, jednak zwykle korzystnie jest prowadzic inkubacje w temperatu¬ rze 20 do 35°C, przy poczatkowej wartosci pH 7,0 lub zblizonej.Szczególnie pozadana jest temperatura od 23 do 30°C w przejsciowym etapie hodowli, z poczatko¬ wa wartoscia pH 6,5 do 7,5. Czas inkubacji rów¬ niez jest zmienny, w zaleznosci od wyzej wymie¬ nionych czynników. Zaleca sie prowadzic inkuba¬ cje do uzyskania maksymalnej wartosci miana po¬ zadanego antybiotyku. W przypadku hodowli na wstrzasarce lub podpowierzchniowej hodowli aero- bowej, czas inkubacji wynosi zwykle od okolo 48 do 144 godzin.Aktywnosc antybiotyku oznacza sie stosujac jako organizm testowy Tetrahymena pyriformis. W. Po¬ wyzszy organizm hoduje sie na pozywce testowej (20 g proteozy-peptonu (Difco), 1 g ekstraktu z drozdzy (Difco), 2 g glukozy, 1000 ml wody desty¬ lowanej i 10 ml 1 M buforu fosforanowego (pH 7,0) w temperaturze 28°C, w ciagu 44 do 48 godzin, a aktywnosc antybiotyku oznacza metoda seryj¬ nych rozcienczen, mierzac metnosc hodowli oraz technika chromatografii cienkowarstwowej (TLC), co zostanie opisane dalej.Nowy antybiotyk C—15003 P-3, P-3' i/lub P-4 jest wytwarzany i akumuluje sie w brzeczce ho¬ dowlanej zarówno pozakomórkowo jak i wewnatrz- komórkowo.Powyzsze substancje wykrywa sie równiez chro¬ matografia cienkowarstwowa. Przez saczenie lub wirowanie brzeczke fermentacyjna rozdziela sie na komórki i ciecz, a ciecz ekstrahuje w stosunku 1 :1 octanem etylu. Komórki zalewa sie w stosun¬ ku 1 :1 70*/o wodnym acetonem, miesza sie w cia¬ gu godziny w temperaturze 20°C i odsacza zawie¬ sine. Z przesaczu odpedza sie aceton, a otrzymany roztwór wodny ekstrahuje octanem etylu.Kazdy z ekstraktów zateza sie do 1/100 objetosci poczatkowej i poddaje chromatografii cienkowar¬ stwowej na plytkach z zelem krzemionkowym (Merck, RFN, Kieselgal 60 F254, warstwa grubosci 0,25 mm, wymiary plyty 20X20, uklad rozpusz¬ czalników chloroform-metanol 9 :1). Aktywnosc okresla sie na podstawie intensywnosci plam wy¬ krywanych przez napromieniowanie swiatlem nad¬ fioletowym 2537 A.Poniewaz C^15003 P-3, P-3' i/lub P-4, wytwo¬ rzone w ten sposób w brzeczce fermentacyjnej sa zwiazkami lipofilowymi i obojetnymi, mozna je dogodnie odzyskac metodami wyodrebniania i oczy¬ szczania zwykle stosowanymi do odzyskiwania ta¬ kich metabolików. Przykladowo, mozna zastoso¬ wac sposoby czyniace uzytek z róznicy rozpusz¬ czalnosci antybiotyku i zanieczyszczen, frakcjono¬ wanie wykorzystujace róznice w powinowactwie adsorpcyjnym na róznych adsorbentach, jak wegiel aktywny, makroporowate zywice niejonowe, zel krzemionkowy, tlenek glinu itp., usuwanie zanie¬ czyszczen za pomoca zywic jonitowych itp*, od¬ dzielnie lub w odpowiedniej kombinacji lub po¬ wtórzeniach.Poniewaz, jak wspomniano, C—15003 P-3, P-3' i P-4 wystepuja zarówno w plynie jak i w komór¬ kach, antybiotyk wyodrebnia sie i oczyszcza za pomoca adsorbentu, jezeli takowy jest stosowany, badz to bezposrednio badz tez po ekstrakcji roz- 10 15 20 25 30 35 40 50 55 609 124 349 10 puszczalnikiem w przypadku plynu lub po eks¬ trakcji rozpuszczalnikiem w przypadku komórek.Ekstrakcje rozpuszczalnikiem mozna przeprowa¬ dzic np. (1) z brzeczki hodowlanej przed oddziele¬ niem komórek (2) z komórek i plynu uzyskanego przez saczenie, wirowanie lub innymi sposobami.Niezalezna ekstrakcje plynu i komórek mozna ko¬ rzystnie przeprowadzic nizej opisanym sposobem.Rozpuszczalnikami odpowiednimi do ekstrakcji plynu sa nie mieszajace sie z woda rozpuszczalniki organiczne, jak estry kwasów tluszczowych, np. octan etylu i octan amylu, alkohole, -np. butanol, chlorowcowane weglowodory, np. chloroform i ke¬ tony, np. keton metyloizobutylowy.Ekstrakcje przeprowadza sie przy odczynie bli¬ skim obojetnemu, korzystnie plyn hodowlany do¬ prowadzony do pH 7 ekstrahuje sie octanem ety¬ lu. Ekstrakt przemywa sie woda i zateza pod zmniejszonym cisnieniem. Do koncentratu dodaje sie niepolarnego rozpuszczalnika, jak eter naftowy lub heksan, uzyskujac surowy produkt I, zawiera¬ jacy zwiazek czynny. Poniewaz w chromatografii cienkowarstwowej wykrywa sie szereg plam ppza odpowiadajacymi antybiotykowi C—15003, produkt 1 poddaje sie oczyszczaniu. Uzyteczne sa rutyno¬ we procedury, zwlaszcza chromatografia adsorp- cyjna na takich, zwykle stosowanych adsorbentach, jak zel krzemionkowy, makropórowate niejonowe zywice adsorpcyjne itp.Najkorzystniejszym adsorbentem do oczyszczania surowego produktu I jest zel krzemionkowy. Chro- matogram mozna rozwijac poczatkowo eterem naf¬ towym i heksanem, a elucje antybiotyku C—U5003 prowadzic dodajac rozpuszczalnika polarnego, jak octan etylu, aceton, etanol, lub metanol. W typo¬ wym procesie z zastosowaniem jako nosnika zelu krzemionkowego (Merck, RFN, 0,05—0,2 mm) chro¬ matografie kolumnowa prowadzi sie mieszanina heksanu z octanem etylu o wzrastajacym stezeniu drugiego skladnika. Eluat zbiera sie i bada chro¬ matografia cienkowarstwowa, a frakcje zawiera¬ jace C—15003 laczy i zateza pod zmniejszonym cisnieniem. Do koncentratu dodaje sie eteru naf¬ towego lub heksanu, uzyskujac surowy produkt II.Poniewaz produkt ten nadal zawiera zanieczysz¬ czenia, oczyszcza sie go dalej, np. na drugiej ko¬ lumnie z zelem krzemionkowym, stosujac inny uklad rozpuszczalników.Stosowany do tego celu uklad rozwijajacy moze skladac sie z chlorowcowanego weglowodoru, jak dwuchlorometan lub chloroform, z dodatkiem roz¬ puszczalnika polarnego, jak alkohol, np. etanol lub metanol, ketonu, np. acetonu lub ketonu metylo- etylowego itp. W powyzszy sposób wyodrebnia sie antybiotyk C^15003. Kolejnosc ukladów rozpusz¬ czalników dla pierwszej i drugiej kolumny mozna odwrócic, a jezeli to jest konieczne, lacznie z po¬ wyzszymi ukladami mozna uzyc innych, zwyklych rozpuszczalników organicznych.W przypadku oczyszczania surowego produktu II za pomoca makropórowatej zywicy adsorpcyjnej, elucje antybiotyku C—15003 przeprowadza sie mie¬ szanina wody z nizszym alkoholem, nizszym keto¬ nem lub estrem. Nizszym alkpholem moze byc np. metanol, etanol, propanol lub butanol, a nizszym ketonem, np. aceton lub keton metyloetylowy.Estrem moze byc np. octan etylu.W typowej procedurze, surowy produkt II roz¬ puszcza sie w 60°/o wodnym metanolu i adsorbuje na kolumnie z sorbentem Diaion HP-10 (Mitsu¬ bishi Kasei K.K.). Kolumne przemywa sie lOPh wodnym metanolem, a nastepnie eluuje 90p/o wod¬ nym metanolem, uzyskujac antybiotyk C—15Ó03.W kazdym z wyzej opisanych procesów frakcje zawierajace antybiotyk C—15003 laczy sie i odpa¬ rowuje pod zmniejszonym cisnieniem. Do suchego produktu dodaje sie 5 do 8 objetosci octanu etylu i pozostawia mieszanine w spoczynku, co powo¬ duje wydzielenie krysztalów antybiotyku C—15003.Krysztaly te zawieraja C^15003 P-3, P-3' i P-4.Zwiazki oddziela sie od siebie stosujac adsorbent, jak wyzej wspomniane. Frakcjonowana elucje mo¬ zna przeprowadzic np. stosujac zel krzemionkowy lub makroporowata niejonowa zywice i wyzej po¬ dane rozpuszczalniki. Jezeli stosuje sie np. zel krzemionkowy, to rozwijanie prowadzi sie heksa¬ nem, octanem etylu lub mieszanina chloroform- -metanol, uzyskujac kolejno C—15003 P-4, P-3' i P-3. Po analizie chromatografia cienkowarstwowa, frakcje zawierajace C—15003 P-4, P-3' i P-3 zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem, a do koncen¬ tratu dodaje octanu etylu.W ten sposób odpowiednie zwiazki uzyskuje sie w postaci krysztalów. Przy stosowaniu jako adsor¬ bentu makroporowatej zywicy niejonowej, elucje prowadzi sie gradientowo, stosujac mieszanine al¬ koholu, ketonu lub estru z woda, o zmiennym udziale skladników. Przykladowo, elucje gradiento¬ wa z zastosowaniem 60Vo wodnego metanolu i 95% wodnego metanolu z dodatkiem 5°/o chlorku sodu, uzyskuje sie C^15O03 P-3, P-3' i P-4 w wyzej po¬ danej kolejnosci. Po zebraniu i detekcji z zasto¬ sowaniem chromatografii cienkowarstwowej, kazda z grup aktywnych frakcji odparowuje sie pod zmniejszonym cisnieniem i krystalizuje z octanu etylu. Wydzielone krysztaly zawieraja octan etylu jako rozpuszczalnik krystalizacji, a po suszeniu nad pieciotlenkiem fosforu w temperaturze 70°C w ciagu 8 godzin wykazuja wlasciwosci fizyczne i chemiczne przedstawione w tablicy IV.Na podstawie wyzej podanego wzoru sumarycz¬ nego i dalej przedstawionej aktywnosci przeciw- mikrobowej i przeciwnowotworowej, porównano antybiotyk C^15003 ze znanymi grupami antybio¬ tyków.W literaturze nie znaleziono wyraznej grupy podobnej do antybiotyku C—15003, jednak poszu¬ kiwanie substancji o absorpcji w nadfiolecie po¬ dobnej do wykazanej przez C-^15003 posród zwiaz¬ ków pochodzenia roslinnego i innych organicz¬ nych zwiazków pochodzenia naturalnego dopro¬ wadzilo do grupy maytanacyny, a na podstawie wzorów sumarycznych przyjeto, ze antybiotyk C— —15003 nalezy do zwiazków z grupy maytanacy¬ ny, zawierajacych dwa atomy azotu. Maytariacy- na zostala otrzymana jako skladnik roslinny i opi¬ sana we wspomnianym poprzednio Journal of Ame- 10 10 20 25 30 35 40 45 50 55 6011 124 349 Tablica IV 12 1 l Temperatura topnienia (°C) Skrecalnosc wlasciwa [a] 1 Analiza elementarna Znaleziono (•/#) 1 Analiza elementarna Obliczono (%) 1 Widmo absorpcji w nadfiolecie nm Oe) (w metanolu) 1 Widmo absorpcji w podczer- 1 wieni (cm-1) KBr 1 Widmo magnetycznego rezo- 1 nansu jadrowego (ppm) ioo mhz w coch 1 Widmo masowe (m/e) Rozpuszczalnosc ] Reakcje barwne Antybiotyk C—15003 | P-3 C3»H43C1N209=635,169 2 190—192 -136° ±10° (6=0,375 CHC13) C 60,06 H 7,04 N 4,33 Cl 5,37 C 60,51 H 6,82 N 4,41 Cl 5,58 233 (30250), 240 (prze¬ giecie, 28450), 252 (27640), 280 (5750) 288 (5700) 1740, 1730, 1670, 1580, 1445, 1385, 1340, 1255, 1180, 1150, 1100, 1080, 1038 1.27 (d) (3H) 1.28 (d) (3H) 573, 485, 470, 450 P-3' C3jH43ClN209=635,169 3 182^185 -134° ± 10° (6=0,11 CHCI3) 60,09 7,02 4,34 5,99 60,51 6,82 4,41 5,58 233 (30155), 240 (prze¬ giecie 2850) 252 (27600), 280 (5750) 288 (5700) 1740, 1730, 1670, 1580, 1445, 1385, 1340, 1255, 1180, 1150, 1100, 1080, 1038 •1,06 (t) (3H) 573, 485, 470, 450 P-4 C33H45ClNi09=649,196 | 4 | 177^180 | -142° ±10° (6=0,522 CHCI3) 1 60,65 7,05 4,25 5,23 | 61,05 6,99 4,32 5,46 | 233 (29900), 240 (prze¬ giecie 28240) 252 (27590), 280 (5712), 288 (5680) | 1740, 1730, 1670, 1580, 1445, 1385, 1340, 1255, 1180, 1150, 1100, 1080, 1038 | 1,03 (d) (6H) 587, 485, 470, 450 | Nierozpuszczalny w eterze naftowym, heksanie i wodzie, slabo roz¬ puszczalny w benzenie i eterze, rozpuszczalny w chloroformie, octa¬ nie etylu, acetonie, etanolu, metanolu, pirydynie, czterowodorofuranie i dwumetylosulfotlenku Dragendorfa: dodatnia Beilstaina: dodatnia dodatnia dodatnia | dodatnia dodatnia | rican Chemical Society 97, 5294 (1975). Widmo masowe maytanacyny jest nastepujace: M+—(a) M+—(a+b) 485—CH3 485—Cl 545 485 470 450 (a) = H2O + HNCO (b) = R—COOH Obecnosc pasm m/s 485, 470 i 450 w widmach masowych C^15003 P—3, P—3' i P—4 przekonuje, ze powyzsze zwiazki maja szkieletowa strukture identyczna jak maytanacyna, a od maytanacyny rózni je rodnik acylowy w polozeniu 3. Z po¬ wyzszego wynika, ze antybiotyk C—15003 jest no¬ wym zwiazkiem. Przy degradacji C^15003 P—3, P—3* i P—4 zasadami i analizie chromatografia gazowa uwolnionych kwasów karboksylowych zna¬ leziono odpowiednio kwas izomaslowy, maslowy i izowalerianowy.Antybiotyki C—15003 P—3, P—3' i P-4 sa no¬ wymi zwiazkami uzytecznymi jako zwiazki wyj¬ sciowe do wytwarzania sposobem wedlug wyna¬ lazku innych farmaceutycznie uzytecznych zwiaz¬ ków. W drodze deacylacji uzyskuje sie z nich P—15003 P—O, czyli matytansinol posiadajacy gru¬ pe wodorotlenowa w polozeniu 3. Poniewaz rod¬ nik acylowy znajduje sie w polozeniu {3 w stosun- 45 50 55 ku do grupy karbonylowej, z dobrym wynikiem mozna stosowac konwencjonalne reakcje reduk¬ cyjnej hydrolizy.W reakcji redukcji stosuje sie kompleksowy wo¬ dorek metalu, np. wodorek litowoglinowy, LiAlH4, w niskiej temperaturze, przy czym wiazanie O- -estrowe w polozeniu 3, bez naruszenia innych grup funkcyjnych, np. karbonylowej, epoksydowej, podwójnego wiazania wegiel-wegiel itp., ulega hy- drolitycznemu rozszczepieniu, przy czym uzyskuje sie maytansinol. Wlasciwosci fizyczne i chemiczne tak uzyskanego maytansinolu sa zgodne z danymi podanymi przez Kupchana i innych w The Jour¬ nal of American Chemical Society 97, 5294—5295 (1975).Sposób wedlug wynalazku jest zilustrowany po¬ nizszymi przykladami. Jezeli nie zaznaczono ina¬ czej, „czesci" oznaczaja czesci wagowe, stosunek miedzy „czesciami objetosciowymi" odpowiada stosunkowi miedzy „gramami" a mililitrami", a „•/o" odnosi sie do „wagi/objetosc".Przyklad I. Hodowla szczegu Nocardia C— —15003 (IFO/13726, FERM 3992, ATCC 31281) na agarze z ekstraktem z drozdzy i ekstraktem slo-13 124 349 14 dowym szczepi sie fermentor o objetosci 200 cze¬ sci, zawierajacy 40 czesci objetosciowych pozywki hodowli posiewowej (2% glukozy, 3% skrobi roz¬ puszczalnej, li% surowej maki sojowej, 1% mamoku kukurydzianego, 0,5% poliptodonu, 0,3% NaCl, 0,5% CaCOs, pH 7,0).Zaszczepiona pozywke inkubuje sie w tempera¬ turze Z8°C w ciagu 48 godzin, otrzymujac inoku¬ lum. 0,5 czesci objetosciowych tak otrzymanego inokulum przenosi sie do fermentora o pojemnosci 200 czysci objetosciowych, zawierajacych 40 cze¬ sci abgetosciowych pozywki fermentacyijnaj, zlozo¬ nej z 5% dekstryny, 3% namoku kukurydzianego, 0,1% polipeptonu i 0,5% CaC03 (pH 7,0) i w tem¬ peraturze 28°C, w ciagu 90 godzin prowadzi ler- mentacje, otrzymujac inokulum (hodowle posie- wowa).Z oznaczenia metoda seryjnych rozcienczen, z za¬ stosowaniem jako organizmu testowego Tetrahy- mena pyriformis i antybiotyku C—15003 P—3 ja¬ ko standardu, miano hodowli wynosi 25 jjun/mL Przyklad II. 10 czesci objetosciowycn inoku¬ lum (posiewu) otrzymanego w przykladzie I prze¬ nosi sie do iermentora o objetosci 2000 czesci, za¬ wierajacego 500 czesci objetosciowycn pozywki no- dowli posiewowej (jak powyzsza) i inkuouje w temperaturze 28°C w ciagu 48 godzin. 500 czesci objetosciowych otrzymanej hodowli przenosi sie do tanku z nierdzewnej stali o pojemnosci 50 000 czesci objetosciowych, zawierajacego 30 000 czesci objetosciowycn pozywki hodowli posiewowej i pro¬ wadzi fermentacje w temperaturze 28°C, przy na¬ powietrzeniu (30 000 czesci objetosciowycn/minuta), mieszaniu (280 obrotów/minuta/l/2DT), pod we¬ wnetrznym cisnieniem 0,9d0665X102 kPa uzyskujac hodowle posiewowa.Hodowla ta posiewa sie zbiornik z nierdzewnej stali o pojemnosci 200 000 czesci objetosciowych, zawierajacy 100 000 czesci objetosciowycn pozywki fermentacyjnej, podobnej do stosowanej w przy¬ kladzie I, stosujac inokulum w objetosci 10% po¬ zywki. Zaszczepiona pozywke inkubuje sie w tem¬ peraturze 28°C, przy napowietrzaniu (100 000 czesci objetosciowych/minuta), mieszaniu (200 obrotów/mi¬ nuta (1/2DT)), pod wewnetrznym cisnieniem 0,980665X102 kPa, w ciagu 90 godzin. Z oznaczenia sposobem opisanym w przykladzie I, miano ho¬ dowli wynosi 25 ng/ml.Przyklad III. 95 000 czesci objetosciowycn ho¬ dowli otrzymanej w przykladzie II zadaje sie 2000 czesci sorbentu Hyflo-supercel (R) (Jones and Man- ville Products, USA). Po dokladnym wymieszaniu ^aczy sie na filtrze cisnieniowym, uzyskujac 85 000 czesci objetosciowych przesaczu i 32 000 czesci wil¬ gotnych komórek. Przesacz (85 000 czesci objetos¬ ciowych) miesza sie i ekstrahuje 30 000 czesci octa¬ nu etylu. Powyzszy zabieg powtarza sie. Ekstrakty laczy sie, dwukrotnie przemywa 30 000 czesci obje¬ tosciowych wody, suszy dodatkiem 500 czesci bez¬ wodnego siarczanu sodu i pod zmniejszonym cis¬ nieniem zateza do 200 czesci objetosciowych. Do koncentratu dodaje sie eteru naftowego i odsacza wytracony osad (53 czesci). Powyzszy surowy pro¬ dukt I miesza sie z 100 czesciami objetosciowymi octanu etylu i odsacza czesci nierozpuszczone.Przesacz miesza sie z 10 czesciami zelu krzemion¬ kowego (Merck, RFN, 0,05—0,2 mm) i pod zmniej¬ szonym cisnieniem odpedza octan etylu. Pozosta¬ losc nanosi sie na góre kolumny z zelem krze- 5 mionkowym (400 czesci objetosciowych). Elucje prowadzi sie 500 czesciami objetosciowymi heksa¬ nu, 500 czesciami objetosciowymi mieszaniny hek- san-octan etylu (3 :1), 500 czesciami objetosciowy¬ mi mieszaniny heksan-octan etylu (1 :1), 500 czes- 10 ciami objetosciowymi mieszaniny heksan-octan ety¬ lu (1 :3), 500 czesciami objetosciowymi octanu ety¬ lu, 1000 czesci objetosciowych mieszaniny octan etylu-metanol (50 :1) i 1000 czesci objetosciowych mieszaniny octan etylu-metanol (25:1), zbierajac 15 wyciek frakcjami po 100 czesci objetosciowych.Z kazdej frakcji I czesc objetosciowa odpar - wuje sie do sucha, a do pozostalosci dodaje 0,1 czesci objetosciowej octanu etylu. Wytracona mie¬ szanine nanosi sie na plyte szklana, powleczona 20 warstwa zelu krzemionkowego (Merck, RFN, 60 F254, 0,25 mm, 20X20), w odleglosci 2,5 cm od dol¬ nej krawedzi i na dlugosci okolo 17 cm rozwija ukladem rozpuszczalników octan etylu-metanol (19 :1). Po rozwinieciu przeprowadza sie detekcje 25 w swietle nadfioletowym (2537 nm).Frakcje czynne nr 23—28 o Rf 0,6—0,65 zbiera sie i odparowuje pod zmniejszonym cisnieniem do objetosci po okolo 20 czesci objetosciowych. Do koncentratów dodaje sie po 150 czesci objetoscio- 30 wych eteru naftowego, otrzymujac 15 czesci suro¬ wego produktu II.Przyklad IV. Przy mieszaniu, 32 000 czesci wilgotnych komórek uzyskanych w przykladzie III ekstrahuje sie 50 000 czesci objetosciowych 70% 35 wodnego acetonu i saczenia powtarza sie. Przesa¬ cze laczy sie i pod zmniejszonym cisnieniem od¬ pedza z nich aceton. Uzyskany uklad wodny prze¬ puszcza sie przez kolumne z 5000 czesci objetos¬ ciowych sorbentu Diaion HP-10 (Mitsubishi Kasei 40 K.K.).Kolumne przemywa sie 2000 czesci objetoscio¬ wych wody i 50% wodnego metanolu, a nastepnie eluuje 15 000 czesci objetosciowych wodnego meta¬ nolu. Wyciek odparowuje sie pod zmniejszonym 45 cisnieniem do 3000 czesci objetosciowych i wstrza¬ sa z 3000 czesci objetosciowych octanu etylu. Po¬ wyzsza procedure powtarza sie. Ekstrakty orga¬ niczne laczy sie, przemywa woda, suszy dodaniem bezwodnego siarczanu sodu i pod zmniejszonym 5Q cisnieniem odparowuje do 200 czesci objetoscio¬ wych. Po dodaniu eteru naftowego odsacza sie wytracony osad (28 czesci). Powyzszy produkt oczyszcza sie na kolumnie z zelem krzemionko¬ wym, otrzymujac 8,0 czesci surowego produktu II. 55 Przyklad V. W 10 czesciach objetosciowych octanu etylu rozpuszcza sie 1,5 czesci surowego produktu II otrzymanego w przykladzie III, a roz¬ twór dokladnie miesza z 4 czesciami zelu krze¬ mionkowego (Merck, RFN, 0,05—0,2 mm). Pod 60 zmniejszonym cisnieniem odpedza sie octan etylu.Pozostalosc nanosi sie na góre kolumny z 300 czes¬ ciami objetosciowymi zelu krzemionkowego, po czym przemywa kolumne wpierw 500 czesciami objetosciowymi chloroformu, a nastepnie eluuje 65 kolejno 500 czesciami objetosciowymi mieszaniny124349 17 znaleziono: C 59,65%, H 6,58%, N 5,02%, Cl 6,91%, wartosci obliczone dla CjsHstCINjOs: C 59,52%, H 6,60%, N 4,96%, Cl 6,27%. Absorpcja w podczer¬ wieni: 1715, 1670, 1580 cm"1.Widmo w nadfiolecie (nm): 232 (32750), 244 (prze¬ giecie, 30850), 252 (31650), 281 (5750), 288 (5700).Wlasciwosci produktu sa identyczne z wlasci¬ wosciami maytansinolu.Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania maytansinolu o wzorze 1, znamienny tym, ze poddaje sie redukcyjnej hydro- 18 lizie antybiotyk C—15003 o wozrze 2, w którym R oznacza ugrupowania o wzorze —CO—CH/CH3/2, —COCI^CH^CHs lub —CO—CH»—CH/CH3/2. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze redukcyjna hydrolize przeprowadza sie za pomoca kompleksowego wodorku metalu. 3. Sposób wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze jako kompleksowy wodorek metalu stosuje sie wo- 10 dorek litowoglinowy.HO K^O?"* H0 ^Jn^IP^ ch, CKO CH3 CHji Wzórl X CH, o 9-Rir 124 349 Drukarnia Narodowa, Zaklad Nr 6. 308/84 Cena 100 zl PL PL PL
Claims (3)
1.Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania maytansinolu o wzorze 1, znamienny tym, ze poddaje sie redukcyjnej hydro- 18 lizie antybiotyk C—15003 o wozrze 2, w którym R oznacza ugrupowania o wzorze —CO—CH/CH3/2, —COCI^CH^CHs lub —CO—CH»—CH/CH3/2.
2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze redukcyjna hydrolize przeprowadza sie za pomoca kompleksowego wodorku metalu.
3. Sposób wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze jako kompleksowy wodorek metalu stosuje sie wo- 10 dorek litowoglinowy. HO K^O?"* H0 ^Jn^IP^ ch, CKO CH3 CHji Wzórl X CH, o 9-Rir 124 349 Drukarnia Narodowa, Zaklad Nr 6. 308/84 Cena 100 zl PL PL PL
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP52037166A JPS6034556B2 (ja) | 1977-03-31 | 1977-03-31 | 抗生物質c−15003 |
US05/811,448 US4162940A (en) | 1977-03-31 | 1977-06-29 | Method for producing Antibiotic C-15003 by culturing nocardia |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
PL124349B1 true PL124349B1 (en) | 1983-01-31 |
Family
ID=26376254
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PL1977201541A PL122289B1 (en) | 1977-03-31 | 1977-10-15 | Process for preparing novel antibiotic |
PL1977221358A PL124349B1 (en) | 1977-03-31 | 1977-10-15 | Process for preparing maytansinol |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PL1977201541A PL122289B1 (en) | 1977-03-31 | 1977-10-15 | Process for preparing novel antibiotic |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
CA (1) | CA1107212A (pl) |
CS (1) | CS214749B2 (pl) |
DE (1) | DE2746209A1 (pl) |
DK (1) | DK458877A (pl) |
ES (2) | ES463207A1 (pl) |
GB (1) | GB1586688A (pl) |
GR (1) | GR66051B (pl) |
HU (1) | HU178359B (pl) |
IE (1) | IE46064B1 (pl) |
IT (1) | IT1094308B (pl) |
NL (1) | NL188102C (pl) |
PH (2) | PH13381A (pl) |
PL (2) | PL122289B1 (pl) |
PT (1) | PT67854B (pl) |
SE (2) | SE442873B (pl) |
YU (2) | YU245377A (pl) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5562090A (en) * | 1978-10-27 | 1980-05-10 | Takeda Chem Ind Ltd | Novel maytansinoid compound and its preparation |
JPS55102583A (en) * | 1979-01-31 | 1980-08-05 | Takeda Chem Ind Ltd | 20-acyloxy-20-demethylmaytansinoid compound |
JPS5645483A (en) * | 1979-09-19 | 1981-04-25 | Takeda Chem Ind Ltd | C-15003phm and its preparation |
DE19940131B4 (de) * | 1998-08-24 | 2004-12-02 | Pfefferle, Christoph, Dr. | Verfahren und Vorrichtung zur Gewinnung von biologisch aktiven Substanzen |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1336399A (en) * | 1971-06-24 | 1973-11-07 | Lepetit Spa | 3-formylrifamycin sv derivatives |
DE2241418A1 (de) * | 1972-08-23 | 1974-03-07 | S Morris Kupchan | Antileukaemische ansamakrolide |
-
1977
- 1977-10-04 PH PH20297A patent/PH13381A/en unknown
- 1977-10-11 GR GR54548A patent/GR66051B/el unknown
- 1977-10-12 YU YU02453/77A patent/YU245377A/xx unknown
- 1977-10-13 NL NLAANVRAGE7711274,A patent/NL188102C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-10-13 SE SE7711542A patent/SE442873B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-10-13 HU HU77TA1459A patent/HU178359B/hu unknown
- 1977-10-13 CS CS776678A patent/CS214749B2/cs unknown
- 1977-10-14 CA CA288,731A patent/CA1107212A/en not_active Expired
- 1977-10-14 DK DK458877A patent/DK458877A/da not_active Application Discontinuation
- 1977-10-14 ES ES463207A patent/ES463207A1/es not_active Expired
- 1977-10-14 GB GB42822/77A patent/GB1586688A/en not_active Expired
- 1977-10-14 IE IE2101/77A patent/IE46064B1/en unknown
- 1977-10-14 DE DE19772746209 patent/DE2746209A1/de active Granted
- 1977-10-15 PL PL1977201541A patent/PL122289B1/pl unknown
- 1977-10-15 PL PL1977221358A patent/PL124349B1/pl unknown
-
1978
- 1978-03-30 PT PT67854A patent/PT67854B/pt unknown
- 1978-03-30 IT IT21818/78A patent/IT1094308B/it active
- 1978-07-31 ES ES472230A patent/ES472230A1/es not_active Expired
-
1979
- 1979-02-20 PH PH22216A patent/PH15985A/en unknown
-
1982
- 1982-08-17 YU YU01785/82A patent/YU178582A/xx unknown
-
1983
- 1983-05-03 SE SE8302517A patent/SE446004B/sv not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
SE8302517D0 (sv) | 1983-05-03 |
PH15985A (en) | 1983-05-18 |
PH13381A (en) | 1980-03-25 |
CA1107212A (en) | 1981-08-18 |
PT67854B (en) | 1980-05-05 |
NL188102C (nl) | 1992-04-01 |
SE8302517L (sv) | 1983-05-03 |
SE7711542L (sv) | 1978-10-01 |
DE2746209C2 (pl) | 1990-10-31 |
SE446004B (sv) | 1986-08-04 |
PL122289B1 (en) | 1982-07-31 |
NL188102B (nl) | 1991-11-01 |
PT67854A (en) | 1978-04-01 |
YU245377A (en) | 1983-01-21 |
DK458877A (da) | 1978-10-01 |
DE2746209A1 (de) | 1978-10-19 |
IE46064B1 (en) | 1983-02-09 |
GB1586688A (en) | 1981-03-25 |
PL201541A1 (pl) | 1978-10-09 |
ES472230A1 (es) | 1979-04-01 |
IT7821818A0 (it) | 1978-03-30 |
IT1094308B (it) | 1985-07-26 |
NL7711274A (nl) | 1978-10-03 |
IE46064L (en) | 1978-09-30 |
YU178582A (en) | 1984-08-31 |
GR66051B (pl) | 1981-01-14 |
CS214749B2 (en) | 1982-05-28 |
SE442873B (sv) | 1986-02-03 |
ES463207A1 (es) | 1979-01-01 |
HU178359B (en) | 1982-04-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4151042A (en) | Method for producing maytansinol and its derivatives | |
CA1131144A (en) | Antibiotic c-15003 pnd | |
US4225494A (en) | Maytansinol esters | |
JPS6253158B2 (pl) | ||
EP0031430B1 (en) | A method for the production of antibiotic c-15003 p-3 | |
US4421688A (en) | Macbecin derivatives | |
US4228239A (en) | Method for producing antibiotic C-15003 P-3 | |
CA1092999A (en) | Method for producing maytansinol and its derivatives | |
PL124349B1 (en) | Process for preparing maytansinol | |
US4229533A (en) | Method for producing antibiotic C-15003 P-4 | |
US4202968A (en) | New tunicamine derivatives and their preparation | |
EP0206138B1 (en) | Anthracycline compounds, a process for their preparation and their use as medicaments | |
SU741804A3 (ru) | Способ получени антибиотика | |
US5109133A (en) | Antibiotic trienomycins and their production | |
IE64227B1 (en) | Ws-9326a ws-9326b and their derivatives | |
GB2042502A (en) | Antibiotics c-14482 b1,b2 and b3 | |
GB1592264A (en) | Treatment of tumor-carrying animal with antibiotic c-15003 | |
JPS6210048A (ja) | 新規生理活性物質mh435 | |
KR810000510B1 (ko) | 메이탄시노올 유도체의 제조방법 | |
EP0167935B1 (en) | Anthracycline derivatives, a process for the production thereof, a pharmaceutical composition containing the same and their use as medicaments | |
CA1121814A (en) | Antibiotic c-15003 | |
EP0191399B1 (en) | Benz[a]anthraquinone compounds, a microbial process for their preparation and their use as medicaments | |
EP0025713B1 (en) | An anthracycline antibiotic and a pharmaceutical composition containing the same | |
EP0205981B1 (en) | A novel anti-tumor and antimicrobial compound, its microbiological preparation and its use as medicament | |
JP2795489B2 (ja) | 新規物質dc115a化合物 |