NO761438L

NO761438L -

Info

Publication number: NO761438L
Application number: NO761438A
Authority: NO
Inventors: H Nakao; H Yanagisawa; B Shimizu; M Kaneko; M Nagano; S Sugawara
Original assignee: Sankyo Co
Priority date: 1975-04-30
Filing date: 1976-04-27
Publication date: 1976-11-02
Also published as: DK192576A; NL7604658A; DE2619395A1; IE43912L; HU172532B; US4126745A; AU1349576A; SE7604879L; SE427558B; FR2309233B1; PH12666A; GB1508113A; IE43912B1; CH624120A5; FR2309233A1

Description

7-metoksycefalosporinderivater og frem-

gangsmåte til fremstilling av disse.

Den foreliggende oppfinnelse vedrører 7a-metoksycefalosporinderivater som er verdifulle som antibakterielle midler, som næringsmiddelstillegg i dyrefor og i behandlingen av infeksjonssyk-dommer forårsaket av både gram-positive og gram-negative bakterier hos fjærfe og dyr, inklusivt mennesker.

I beskrivelsen benevnes cefalosporinderivater som derivater av "cefam" som har strukturen:

(J.Amer. Chem. Soc. , 8_4 , 3400 (1962)), mens de tilsvarende umettete forbindelser benevnes "cefem"-derivater, og stillingen til dobbeltbindingen angis med et tall, f.eks. 3-cefem.

Ulike 7a-metoksycefalosporinderivater er beskrevet f.eks. i allment tilgjengelige japanske patentsøknader 3286/71 og 931/72 og i J. Amer. Chem. Soc. , 94_, 1408 (1972), 94_, 1410 (1972) og 95, 2401 (1973). Men ingen av forbindelsene som er beskrevet i disse publikasjoner er blitt benyttet i praksis idet de ikke har til-strekkelig god antibakteriell aktivitet mot både gram-positive og gram-negative bakterier.

Det er nå iakttatt visse 7a-metoksycefalosporinderivater som har utmerket antibakteriell aktivitet.

Disse 7a-metoksycefalosporinderivater ifølge oppfinnelsen har den generelle formel:

hvor Y er en 2-karboksyetyltiogruppe eller en trifluormetyltiogruppe, og ikke-toksiske, farmasøytisk godtakbare salter av disse.

Disse 7a-metoksycefalosporinderivater med formelen (I) kan fremstilles ved følgende fremgangsmåter:

Fremgangsmåte ( a) :

En forbindelse med formel:

hvor X<1>er et halogenatom, fortrinnsvis et brom- eller kloratom, omsettes med en forbindelse med formelen:

Y - H (III)

hvor Y er som angitt ovenfor, eller et alkalimetallsalt, et jord-alkalimetallsalt eller et sølvsalt av denne, og den frie syre omdannes til et salt om nødvendig.

Reaksjonen utføres fortrinnsvis i et inert løsningsmiddel hvis natur ikke er kritisk forutsatt at det ikke deltar i reaksjonen .

Foretrukne løsningsmidler er dimetylsulfoksyd, dimetylformamid, aceton og vann, men dimetylformamid er mest foretrukket. Nærværet av en base akselererer reaksjonen. Eksempler på egnete baser er alkalimetallhydrogenkarbonater, f.eks. natriumhydrogenkarbonat eller kaliumhydrogenkarbonat, alkalimetallkarbonater, f.eks. natriumkarbonat eller kaliumkarbonat, samt tertiære aminer, f.eks. trietylamin, dimetylanilin, dietylanilin samt pyridin. Reaksjonen utføres fortrinnsvis ved romtemperatur eller med is-kjøling.

Den således fremstilte forbindelse med formelen (I) kan utvinnes på konvensjonell måte av reaksjonsblandingeh. F.eks. tynnes reaksjonsblandingen med vann og ekstraheres med etylacetat med pH 2. Løsningsmidlet gjenvinnes deretter fra ekstraktet, hvorved detønskete produkt oppnås og om nødvendig renses ytterligere ved kromatografi. 7 f3-haloacetamido-7ct-metoksy-3- (l-metyl-lH-tetrazol-5-yl) - tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre (II) som anvendes som utgangs-materiale ved denne fremgangsmåte kan fremstilles ved følgende rekke av reaksjoner: en ester av 7-amino-3-(1-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre, som er en kjent forbindelse, kondenseres med 4-hydroksy-3,5-di-tert-butylbenzaldehyd,

og produktet oksyderes og omsettes deretter med metanol til dannelse av en korresponderende ester av 73-(4-hydroksy-3,5-di-tert-butylbenzylidenamino)-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre. Benzylidengruppen avspaltes deretter hvorved det dannes en ester av 7g-amino-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre. Den således fremstilte 7-aminoforbindelse omsettes deretter med et haloeddiksyrehalogenid, og produktet forsåpes til slutt.

Fremgangsmåte ( b):

Et 7 g-amino-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyrederivat med formelen:

hvor- R er en beskyttet karboksylgruppe, omsettes med et acyl-halogenid med formelen: •

hvor X" er et halogenatom, fortrinnvis et brom- eller kloratom,

ogY<1>er en 2-karboksyetyltiogruppe, en beskyttet 2-karboksyetyltiogruppe eller en trifluormetyltiogruppe. Om nødvendig fjernes deretter beskyttelsesgruppen eller -gruppene til dannelse av den frie syre. Alternativt eller i tillegg kan den frie syre deretter omdannes til et salt slik at det oppnås et ikke-toksisk, farmasøytisk godtakbart salt.

Det foretrekkes at den beskyttete karboksylgruppe R kan omdannes til en fri karboksylgruppe ved behandling med en syre. Gruppen R ér fortrinnsvis en gruppe med formelen -COOR<1>, hvor R' er en beskyttelsesgruppe, f.eks. en substituert eller en usubstituert benzylgruppe, f.eks. en benzhydrylgruppe eller en p-metoksybenzylgruppe, en lavere tertiær alkylgruppe, f.eks. en teft-butylgruppe eller en tert-pentylgruppe, eller en-alkoksy-metylgruppe hvis alkoksygruppe kan være usubstituert eller ha en eller flere arylsubstituenter, f.eks. en benzyloksymetylgruppe eller en metoksymetylgruppe.

Alternativt kan karboksylgruppen i 4-stillingen i cefemsystemet være beskyttet ved dannelse av et salt, f.eks. et alkalimetallsalt, f.eks. et kalium eller natriumsalt, et aminsalt, f.eks. et diisopropylaminsalt, et dicykloheksylaminsalt, et trietylamin-salt eller et pyridinsalt, eller et kvartært ammoniumsalt,f.eks.

et trimetylbenzylammoniumsalt.

Reaksjonen mellom forbindelsen (IV) og acylhalogenidet (V) utføres fortrinnsvis i nærvær av et syrebindende middel og ved en temperatur ved eller under omgivelsestemperatur. Reaksjonen ut-føres vanligvis i et inert løsningsmiddel, f.eks. dikloretan, kloroform, metylenklorid, aceton eller tetrahydrofuran. Det syrebindende middel kan være en av basene som er beskrevet i forbindelse med fremgangsmåte (a).....

Utgangsmaterialet som anvendes i fremgangsmåte (b) ifølge oppfinnelsen, nemlig 7$-amino-7a-metoksy-3-(1-metyl—lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre, hvor 4-karboksylgruppen er beskyttet, nemlig forbindelsen med formelen (IV), kan fremstilles f.eks. ved den fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 5 i japansk patentsøknad 931/72, ved reduksjon av en ester eller et salt av 73-azido-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre i en hydrogenatmosfære og i nærvær av platinaoksyd. Alternativt kan esteren fremstilles slik som beskrevet for utgangsmaterialet som anvendes ifølge fremgangsmåte (a), men hvorved de siste trinn i reaksjonen, omsetning med et eddiksyrehalogenid og forsåpning, utelates. I dette tilfelle er den foretrukne ester benzhydrylesteren selv om andre estre eller salter kan anvendes.

Når gruppen Y i forbindelsen (I) som skal fremstilles er en 2-karboksyetyltiogruppe, foretrekkes det å beskytte karboksyetyl-tiogruppen i acylhalogenidet (V) ved hjelp av en difenylmetyl-benzhydrylgruppe.

Det således fremstilte 7 f3-acylamino-7a-metoksy-3-(1-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyrederivat kan utvinnes på konvensjonell måte av reaksjonsblandingen. F.eks. vaskes reaksjonsblandingen først med vann, hvoretter løsnings-midlet fjernes fra blandingen og om ønskelig renses produktet ytterligere ved kolonnekromatografi.

Når gruppen Y' ikke er beskyttet og gruppen R er en karbok-syl syregruppe beskyttet ved saltdannelse, kan ytterligere reak-sjon være unødvendig dersom saltet av forbindelsen (I) som derved blir fremstilt er et ønsket, ikke-toksisk, farmasøytisk godtakbart salt. Ellers er det imidlertid nødvendig å fjerne beskyttelsesgruppen i 4-stilling i cefemsystemet, og når gruppen Y<1>er en beskyttet 2-karboksyetyltiogruppe, å fjerne også denne beskyttelsesgruppe. Fjerning av beskyttelsesgruppen eller -gruppene kan utføres på konvensjonell måte, fortrinnsvis ved å omsette forbindelsen med en syre. Det er ingen spesiell begrensning når det gjelder den anvendte syre, men det foretrekkes å anvende trifluoreddiksyre eller en syre med liknende surhetsgrad. Reaksjonen kan utføres i nærvær av et løsningsmiddel eller uten løs-ningsmiddel, og det er ingen begrensning når det gjelder egen-skapene til løsningsmidlet forutsatt at dette ikke deltar i reaksjonen. Eksempler på egnete løsningsmidler er halogenerte hydrokarboner, såsom kloroform eller metylenklorid, og substituerte eller usubstituerte aromatiske hydrokarboner, såsom benzen, toluen, klorbenzen eller anisol. Av disse foretrekkes vanligvis anisol. Reaksjonstemperaturen er ikke kritisk, men det foretrekkes å ut-føre reaksjonen ved en relativt lav temperatur, f.eks. fra 0-30°C, for å oppnå det ønskete produkt med godt utbytte. Reaksjonstiden vil være avhengig av beskyttelsesgruppen, den anvendte syre, løs-ningsmidlet, dersom sådant anvendes, og reaksjonstemperaturen,

men vil vanligvis være atskillige titalls minutter. Når reaksjonen er fullført kan forbindelsen med formelen (I) som derved er dannet utvinnes på konvensjonell måte av reaksjonsblandingen. F.eks. ekstraheres reaksjonsblandingen med en vandig løsning av en svak base, f.eks. dikaliumhydrogenfosfat, hvoretter ekstraktet surgjøres og ekstraheres igjen med et egnet løsningsmiddel som deretter fjernes fra ekstraktet, hvorved det ønskete produkt oppnås.

Fremgangsmåte ( c) :

En forbindelse med formelen:

hvor A er en acetoksygruppe eller en karbamoyloksygruppe og Y er som angitt ovenfor, omsettes med 5-merkapto-l-metyl-lH-tetrazol eller med et alkalimetallsalt av denne, og om nødvendig omdan-

nes den frie syre til et salt.

Reaksjonen utføres fortrinnsvis i et egnet inert løsnings-middel, helst vann, og fortrinnsvis i nærvær av en alkalisk substans som medvirker til .å løse forbindelsen (VI) . Eksempler på egnete alkaliske substanser er alkalimetallhydroksyder, f:eks. kaliumhydroksyd eller natriumhydroksyd, alkalimetallhydrogenkarbonater, f.eks. kaliumhydrogenkarbonat eller natriumhydrogenkarbonat, samt ammoniakk. Reaksjonen utføres hensiktsmessig ved eller over romtemperatur.

Forbindelsen med formelen (VI) kan fremstilles ved å omsette en forbindelse med formelen: hvor A er som angitt ovenfor, med en forbindelse med formelen:

hvor X<11>' er et halogenatom. Alternativt kan forbindelsen med formelen (VI) fremstilles ved en fremgangsmåte som er analog med fremgangsmåten (a), ved å omsette en 3-acetoksymetyl-78-halo-acetamido-7a-metoksy-3-cefem-4-karboksylsyre eller en 3-karba-moyloksyrnety1-7 8-haloacetamido-7a-metoksy-3-cefem-4-karboksylsyre med en forbindelse med formelen Y - H, hvor Y er som angitt ovenfor.

Når forbindelsen med formelen (I) er fremstilt slik som beskrevet ovenfor i form av den frie syre, kan denne omdannes til et ikke-toksisk, farmasøytisk godtakbart salt ved konvensjonell nøytralisasjon. Eksempler på egnete salter er alkali-metallsalter, særlig natrium- eller kaliumsalter, jordalkali-metallsalter, særlig kalsiumsalter, andre metallsalter, særlig aluminiumsalter, ammoniumsalter, samt aminsalter, særlig trietyl-ammonium-ziicykloheksylammonium-, dibenzylammonium- samt N-etyl-piperidinsalter.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen har gode antibakterielle egenskaper. Særlig oppviser de aktivitet både in vitro og in vivo mot gram-positive og gram-negative bakterier, og de er derfor verdifulle som antibakterielle midler. De antibakterielle virk-ninger til forbindelsen ifølge oppfinnelsen, uttrykt som deres minste inhiberende konsentrasjon (mcg/ml), er angitt i den etter-følgende tabell. Dessuten er de minste inhiberende konsentra-sjoner for cefoksitin mot de samme bakterier angitt.

Bakteriene som forbindelsen ifølge oppfinnelsen blir prøvet mot er angitt i tabellen ovenfor med følgende koder:

IA = Staphylococcus aureus 209 P

IB = Staphylococcus aureus (CP- og PC-resistent)

IIA = Escherichia coli NIHJ

IIB = Escherichia coli 609 (CER-resistent)

III = Shigella flexneri 2a

IV = Pseudomonas aeruginosa

VA = Klebsiella pneumoniae 806

VB = Klebsiella pneumoniae 846 (CER-resistent)

VI = Proteus vulgaris.

VII = Salmonella enteritidis Gaertner

Som det fremgår av tabellen har forbindelsen ifølge oppfinnelsen utmerket antibakteriell aktivitet mot et bredt område av patogene bakterier. Disse forbindelser kan administreres oralt eller parenteralt, f.eks. i form av kapsler, tabletter eller injeksjoner, fortrinnsvis ved injeksjoner. Doseringen er avhengig av alder, sykdom og kropsvekt hos pasienten, men det foretrekkes vanligvis å administrere fra 250 til 3000 mg pr. dag for voksne i oppdelte doser, tre eller fire ganger daglig. Om nødvendig kan det imidlertid anvendes mer enn denne mengde.

Oppfinnelsen vil bli nærmere forklart ved hjelp av de etter-følgende eksempler.

Eksempel 1

7 3~( 2- karboksyetyltioacetamido)- 7a- metoksy- 3-( 1- metyl-

lH- tetrazol- 5- yl)- tiometyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre

Til en løsning av 400 mg 7B-bromacetamido-7a-metoksy-3-(1-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre i 3 ml dimetylformamid ble det tilsatt 252 mg trietylamin under omrør-

ing og kjøling med is. Det ble deretter tilsatt 0,5 ml dimetyl-formamidløsning som inneholdt 88,4 mg merkaptopropionsyre. Blandingens temperatur fikk deretter øke til romtemperatur, blandingen ble omrørt i tre timer og materialet som falt ut ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble inndampet til tørr tilstand under senk-

et trykk, og resten ble løst i aceton og renset under anvendelse av 3 preparative tynnsjiktskromatografiplater (løsningsmiddels-system: butanol/eddiksyre/vann = 4:1:1 i volum), hvorved det ble oppnådd 150 mg 78-(2-karboksyetyltioacetamido)-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiomety1-3-cefem-4-karboksylsyre, Rf-verdi = 0,31. 90 mg av denne forbindelse ble renset ytterligere ved tynnsjiktskromatografi (løsningsmiddelssystem: kloroform/ metanol/vann = 6:4:1 i volum), noe som ga 50 mg av den rene forbindelse.

Eksempel 2

7 8-( 2- karboksyetyltioacetamido)- 7a- metoksy- 3-( 1- metyl-lH- tetrazol- 5- yl)- tiometyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre

Til 15 ml av en metanolløsning som inneholdt 208,5 mg metal-lisk natrium ble det tilsatt en løsning av 3,0 g [2-(difenylmetoksy-karbonyl)-etyl] -tioeddiksyre i 6 ml metanol ved -10°C. Etter om-røring av blandingen ved -5 - 0°C i 30 minutter ble den helt i en større mengde etanol (ca tyve ganger volumet av den anvendte metanolmengde) . Natrium-[2-(difenylmetoksykarbonyl)-etyl] -tio-

acetat ble utfelt og oppsamlet på et filter, vasket med dietyleter og deretter tørket. Utbyttet var 2,58 g (80,3%).

Til en suspensjon av 3,99 g natrium-[2-(difenylmetoksykar-bonyl )-etyl]-tioacetat, som var fremstilt slik som beskrevet oven for, i 40 ml metylenklorid ble det tilsatt 2,9 ml oksalylklorid og 2 dråper dimetylformamid under kjøling med is og omrøring. Blandingen skummet sterkt. Etter omrøring av blandingen i ytterligere 1 time under kjøling med is, ble den konsentrert ved inndamping under senket trykk, hvorved det ble oppnådd 3,55 g [2-( difenylmetoksykarbonyl)-etyl]-tioacetylklorid som en gul sirup.

Til 50 ml dikloretanløsning som inneholdt 2,0 g benzhydryl-7 B-amino-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)rtiometyl-3-cefem-4-karboksylat ble det tilsatt 1,52 g N,N-dietylanilin og 30 ml av en dikloretanløsning som inneholdt 3,55 g [2-(difenylmetoksy-karbonyl)-etyl]-tioacetylklorid ved -20°C under omrøring. Blandingen ble omrørt ved fra -10 - -5°C i 1 time. Deretter ble etyl- , acetat tilsatt til blandingen som deretter ble vasket to ganger med en .vandig løsning av kaliumbisulfat, deretter to ganger med en vandig løsning av natriumbikarbonat og til slutt en gang med en mettet vandig løsning av natriumklorid. Blandingen ble deretter tørket over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble avdestil-iert fra blandingen under senket trykk, og resten ble renset ved kolonnekromatografi under anvendelse av silikagel og en blanding av benzen og etylacetat (3:1 i volum) som elueringsmiddel. Det ble oppnådd 2,4 g (utbytte 75%) benzhydryl-70-[2-(difenylmetoksy-karbonyl)-etyl]-tiacetamido-7a-metoksy-3-(1-metyl-1H-tetrazol-. 5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylat som en brun sirup.

Til 16 ml av en anisolløsning som inneholdt 1,51 g benz-hydryl-7 B-[2-@ifenylmetoksykarbonyl)-etyl]-tiacetamido-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylat ble det tilsatt 8 ml trifluoreddiksyre ved -15°C, og blandingen ble deretter omrørt ved 0°C i 1 time. Løsningsmidlet ble avdestillert, og etylacetat ble tilsatt til resten. Blandingen ble deretter ekstrahert tre ganger med 10 prosentig, vandig løsning av dikaliumhydrogenfosfat. Ekstrakten ble vasket med etylacetat, og dens pH ble regulert til 2,0 ved tilsetning av 3N-saltsyre. Det ble deretter ekstrahert fire ganger med etylacetat. De kombinerte etyl-acetatekstrakter ble vasket med vann, tørket over magnesiumsulfat og inndampet til tørr tilstand under senket trykk. Resten ble helt i dietyleter, hvorved det ønskete produkt falt ut og ble av-filtrert. Det ble oppnådd 600 mg 7B-(2-karboksyetyltiacetamido)-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre som et lysegult pulver (utbytte 66,0%). NMR-spektret for det således oppnådde produkt stemte overens med spekteret for produktet som ble oppnådd i eksempel 1.

Eksempel 3

7 B-( 2- karboksyetyltioacetamido)- 7a- metoksy- 3-( 1- metyl-lH- tetrazol- 5- yl)- tiometyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre

Til en iskjølt suspensjon av 2 g trimetylbenzylammonium-7B~amino-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylat i 30 ml dikloretan ble det under omrøring tilsatt 1,6 g N,N-dietylanilin og 30 ml av en dikloretanløsning som inneholdt 3,5 g rått [2-(difenylmetoksykarbonyl)-etyl]-tioacetyl-klorid. Blandingen ble deretter omrørt ytterligere 1 time. Den ble deretter ekstrahert med en 10 prosentig vandig løsning av dikaliumhydrogenfosfat. Ekstrakten ble vasket med etylacetat, og dens pH ble regulert til 2 ved tilsetning av 3N saltsyre. Det ble ekstrahert med etylacetat. Ekstrakten ble inndampet til tørr tilstand under senket trykk, hvorved det ble oppnådd 1 g 7B~[2-di-fenylmetoksykarbonyl)-etyl] -tioacetamido-7a-metoksy-3-(1-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre. Ved å følge den fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 2 ble difenylmetyl-beskyttelsesgruppen fjernet, hvorved det ble oppnådd 0,5 g 7$-(2-karboksyetyltioacetamido)-7a-metoksy-3-(1-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre. NMR-spekteret for dette produkt stemte overens med spekteret for produktet som ble oppnådd i eksempel 1.

Eksempel 4

7B-( 2- karboksyetyltioacetamido)- 7a- metoksy- 3-( 1- metyl-lH- tetrazol- 5- yl)- tiomety1- 3- cefem- 4- karboksylsyre.

Til 10 ml av en fosfatbufferløsning (pH 7,0) ble det tilsatt 300 mg 3-acetoksymetyl-7 B~(2-karboksyetyl)-tioacetamido-7a-metoksy-3-cefem-4-karboksylsyre, 200 mg 5-merkapto-l-metyl-lH-tetrazol samt 100 mg natriumhydrogenfosfat. Blandingen ble omrørt ved 65 - 70°C i et vannbad i 4 - 5 timer. Blandingens pH ble deretter regulert til 5,5 ved tilsetning av 10 prosentig saltsyre. Blandingen ble deretter vasket med etylacetat, og ble etter regulering av dens pH til 2,0 ble den ekstrahert med etylacetat. Ekstrakten ble deretter tørket og inndampet til tørr tilstand under .senket trykk, hvorved det ble oppnådd 100 mg 7B-(2-karboksyetyltio-acetamido) -7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre som et lysegult pulver. NMR-spektret for dette produkt stemte overens med spektret for produktet som ble oppnådd i eksempel 1.

Eksempel 5

7a- metoksy- 3-( l- metyl- lH- tetrazol- 5- yl)- tiometyl- 7 $-trifluormetyltioacetamido- 3- cefem- 4- karboksylsyre.

Til en løsning av 400 mg 7B-bromacetamido-7a-metoksy-3-(1-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre i 3 ml dimetylformamid ble det tilsatt 160 ml trietylamin etterfulgt av 200 mg sølv-trifluormetylmerkaptid under omrøring og iskjøling. Etter omrøring av blandingen i 3 timer ved romtemperatur ble en uløselig"substans (AgBr) fjernet ved filtrering, og filtratet ble inndampet til tørr tilstand under senket trykk. Resten ble tilsatt etylacetat og en 10 prosentig vandig løsning av dika.lium-hydrogenfosfat. Etter omrøring av blandingen ble det vandige sjikt fraskilt, vasket med etylacetat, og etter regulering av dets pH til 2 ved tilsetning av 10 prosentig saltsyre, ekstrahert med etylacetat. Ekstrakten ble inndampet til tørr tilstand, og resten ble løst i aceton og renset ved preparativ tynnsjikts-kromatograf i på et lag av silikagel (20 x 20 x 0,2 cm) under anvendelse av en blanding av butanol, eddiksyre og vann (4:1:1 i volum) som løsningsmiddelssystem. Det ble oppnådd 110 mg 7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-7 B-trifluormetyltioacetamido-3-cefem-4-karboksylsyre som et lysegult pulver.

Eksempel 6

7a- metoksy- 3-( l- metyl- lH- tetrazol- 5- yl)- tiometyl- 78~ trifluormetyltioacetamido- 3- cefem- 4- karboksylsyre.

En løsning av 600 mg benzhydryl-7B-amino-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-3-cefem-4-karboksylat .i 50

ml metylenklorid ble avkjølt til under 0°C ved hjelp av en fryse-blanding. 365 mg N,N-dietylanilin og deretter en løsning av 370 mg trifluormetyltioacetylklorid i 10 ml metylenklorid ble deretter tilsatt til løsningen. Blandingen ble omrørt i 30 minutter. Den ble deretter tynnet med etylacetat og etter tur vasket med en

vandig løsning av kaliumhydrogensulfat, en vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og til slutt vann. Blandingen ble deretter tørket over vannfritt magnesiumsulfat, og løsningsmidlet ble fjernet fra blandingen ved inndamping under senket trykk, hvorved det ble oppnådd benzhydryl-7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-7 B-trifluormetyltioacetamido-3-cefem-4-karboksylat. Substan-sen ble renset på to preparative tynnsjiktskromatografiplater (silikagel, 20 x 20 x 0,2 cm) under anvendelse av en blanding av benzen og etylacetat (2:1 i volum) som fremkallingsløsningsmiddel. Det ble oppnådd 150 mg av det rene produkt.

Til en løsning av 150 mg benzhydrul-7a-metoksy-3-(1-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-7B~trifluormetyltioacetamido-3-cefem-4-karboksylat, som var fremstilt slik som beskrevet ovenfor, i 2 ml anisol ble det tilsatt 1 ml trifluoreddiksyre under omrøring og kjøling med is. Etter omrøring av blandingen i 30 minutter under kjøling med is ble nesten alt løsningsmidlet fjernet ved inndamping under senket trykk. Resten ble løst i etylacetat. Etylacetat-løsningen ble deretter ekstrahert med en 10 prosentig vandig løs-ning av dikaliumhydrogenfosfat. Denne ekstrakt ble vasket med etylacetat, og dens pH ble regulert til 2 ved tilsetning av en vandig løsning av kaliumhydrogensulfat. Karboksylsyren som falt ut ble ekstrahert med etylacetat. Ekstrakten ble tørket over vannfritt magnesiumsulfat, og løsningsmidlet ble deretter fjernet ved inndamping under senket trykk, hvorved det ble oppnådd 4 0 mg 7a-metoksy-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-7 B-trifluormetyltioacetamido-3-cefem-4-karboksylsyre som et amorft pulver.

Eksempel 7

7q- metoksy- 3-( l- metyl- lH- tetrazol- 5- yl)- tiometyl- 78-trifluormetyltioacetamido- 3- cefem- 4- karboksylsyre Til 10 ml av en fosfatbufferløsning (pH 7,0) ble det tilsatt 300 mg 3-acetoksymetyl-7a-metoksy-7 8-trifluormetyltioacetamido-3-cefem-4-karboksylsyre, 200 mg 5-merkapto-l-metyl-lH-tetrazol samt 100 mg natriumbikarbonat. Blandingen ble deretter omrørt i 4 - 5 timer ved 65 - 70°C i et vannbad, og dens pH ble deretter regulert til 5,5 ved tilsetning av 10 prosentig saltsyre. Blandingen ble deretter vasket to ganger med etylacetat, og etter regulering av dens pH til 2,0 ble den ekstrahert med etylacetat. Ektrakten ble tørket og deretter inndampet til tørr tilstand under senket trykk, hvorved det ble oppnådd 70.mg 7a-metoksy-3-(1-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tiometyl-78-trifluormetyltioacetamido-3-cefem-4-karboksylsyre som lysegult pulver.

Claims

1. Fremgangsmåte til fremstilling av 7ct-metoksycefalosporinderivater som er verdifulle som antibakterielle midler og som næringsmiddelstillegg i dyrefor, karakterisert " ved at 7a-metoksycefalosporinderivater med formelen:

hvor Y er en 2-karboksyetyltiogruppe eller en trifluormetyltiogruppe, og ikke-toksiskte, farmasøytisk godtakbare salter av disse fremstilles ved:(a) at en forbindelse med formelen:

hvor X <1> er et halogenatom, omsettes med en forbindelse med formelen:

hvor Y er som angitt ovenfor, eller med et alkalimetall-, jord-alkalimetall- eller sølvsalt av denne, eller(b) at en forbindelse med formelen:

hvor R er en beskyttet karboksylgruppe, omsette med en forbindelse med formelen:

hvor X" er et halogenatom og Y <1> er en 2-karboksyetyltiogruppe, en beskyttet 2-karboksyetyltiogruppe eller en trifluormetyltiogruppe, eller(c) at en forbindelse med formelen:

hvor A er en acetoksygruppe eller en karbamoyloksygruppe og Y er som angitt ovenfor, omsettes med 5-merkapto-l-metyl-lH-tetrazol eller med et alkalimetallsalt av denne, og at om nødvendig beskyttelsesgruppen eller beskyttelsesgruppene fjernes, samt at det resulterende 7a-metoksycefalosporinderivat om nødvendig omdannes til et salt.

2. Fremgangsmåte i samsvar med krav 1, karakterisert ved at forbindelsen (II) omsettes med en forbindelse med formelen (III), eller med et alkalimetall-, jordalkali-metall- eller sølvsalt av denne, og at om nødvendig det resulterende 7a-metoksycefalosporinderivat omdannes til et salt.

3. Fremgangsmåte i samsvar med krav 2, karakterisert ved at forbindelsen med formelen (II) omsettes med forbindelsen med formelen (III) eller med et sølvsalt av denne.

4. Fremgangsmåte i samsvar med krav 2 eller 3, karakterisert ved at reaksjonen utføres i nærvær av et inert løsningsmiddel og en base.

5. Fremgangsmåte i samsvar med krav 4, karakterisert ved at basen er trietylamin.

6.F remgangsmåte i samsvar med krav 1, karakterisert ved at forbindelseen med formelen (IV) omsettes med en forbindelse med formelen (V), og at om nødvendig beskyttelsesgruppen eller -gruppene fjernes, samt at om nødvendig det resulterende 7a-metoksycefalosporinderivat omdannes til et salt.

7. Fremgangsmåte i samsvar med krav 6, karakterisert ved at Y' er en trifluormetyltiogruppe.

8. Fremgangsmåte i samsvar med krav 6 eller 7, karakterisert ved at reaksjonen utføres i nærvær av et inert løsningsmiddel og et syrebindende middel.

9.F remgangsmåte i samsvar med krav 8, karakterisert ved at det syrebindende middel er N,N-dietylanilin.

10. Fremgangsmåte i samsvar med krav 1, karakterisert ved at forbindelsen med formelen (VI) omsettes med 5-merkapto-l-metyl-lH-tetrazol eller med et alkalimetallsalt av denne, og at om nødvendig det resulterende 7a-metoksycefalosporinderivat omdannes til et salt.

11. Fremgangsmåte i samsvar med krav 10, karakterisert ved at reaksjonen utføres i nærvær av et inert løsningsmiddel og en alkalisk substans.

12.F remgangsmåte i samsvar med krav 11, karakterisert ved at den alkaliske substand er natriumhydrogenkarbonat.