NO328030B1 - Sammensetninger og anvendelse derav for fremstilling av medikamenter for stimulering av neurittvekst. - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse angår farmasøytiske sammensetninger for å stimulere veksten av neuritter i nerveceller. Sammensetningene omfatter en neurotrofisk mengde av en forbindelse som angitt i krav 1 samt en neurotrofisk faktor så som nervevekstfaktor (NGF) samt et farmasøytisk akseptabelt bæremiddel. Oppfinnelsen omfatter også anvendelse av slike sammensetninger for fremstilling av medikamenter som angitt i krav 10. Sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse samt medikamentene kan bli benyttet for å fremme reparasjonen av neuronal skade forårsaket av sykdom eller fysiske traumer.

BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN

Neurologiske sykdommer er assosiert med død eller skade på nerveceller. Tapet av dopaminergiske neuroner i substansia nigra er den etiologiske årsak for Parkinsons sykdom. Selv om den molekylære mekanisme for neurodegenerering i Alzheimers sykdom enda er usikker, er det klart at hjerneinflam-mas jon og avleiring av beta-amyloidprotein og andre slike stoffer kan inhibere overlevelsen av neuroner og hemme vekst av neuritter benyttet for kommunikasjon mellom neuroner. I pasienter som lider av hjerneiskemi eller rygg-margsskader blir utstrakt neuronal celledød observert. For tiden finnes ingen tilfredsstillende behandlinger for disse sykdommer.

Typisk behandling av neuronale sykdommer involverer medikamenter som er i stand til å inhibere neuronal celledød. En nyere metode involverer det å fremme nerveregenerering ved å fremme neurittvekst.

Neurittutvekst, som er kritisk for overlevelsen av neuroner, blir stimulert in vitro med nervevekstfaktor (NGF). For eksempel viser Glial cellelinje-avledet neurotrofisk faktor (GDNF) neurotrofisk aktivitet både in vivo og in vitro, og blir for tiden undersøkt for behandlingen av Parkinsons sykdom. Insulin og insulinlignende vekstfaktorer har vist seg å stimulere vekst av neuritter i rottefeokromocytoma PC12-celler og i dyrkede sympatetiske og sensoriske neuroner [Recio-Pinto et al., J. Neurosci., 6, s. 1211-1219 (1986). Insulin og insulinlignende vekstfaktorer stimulerer også regenereringen av skadede motoriske nerver in vivo og in vitro [Near et al., PNAS, s 89, 11716-11720 (1992); og Edbladh et al., Brain Res., 641, s. 76-82 (1994)]. På lignende måte stimulerer fibroblast vekstfaktor (FGF) neural proliferasjon [D. Gospodarowicz et al., Cell Piffer., 19, s. 1(1986)] og vekst [M.A. Walter et al., Lymphokine Cytokine Res., 12, s. 135 (1993)].

Det finnes imidlertid alvorlige ulemper assosiert med bru-ken av nervevekstfaktorer for å behandle neurologiske sykdommer. De krysser ikke lett blod-hjernebarrieren. De er ustabile i plasma. De har også dårlige medikamentavleve-ringsegenskaper.

Nylig har små molekyler blitt vist å stimulere neurittutvekst in vivo. I individer som lider av en neurologisk sykdom, beskytter denne stimulering av neurittutvekst neuroner fra ytterligere nedbrytning og akselererer regenereringen av nerveceller. For eksempel har østrogen blitt vist å fremme veksten av aksoner og dendritter, hvilket er neuritter sendt ut av nerveceller for å kommunisere med hverandre i en utviklende eller skadet voksen hjerne [(C. Dominique Toran-Allerand et al., J. Steroid Biochem. Mol, biol., 56, s. 169-178 (1996); og B. S. McEwen et al., Brain Res. Dev. Brain. Res., 87, s. 91-95 (1995)]. Utviklingen av Alzheimers sykdom blir forsinket i kvinner som tar østrogen. Østrogen blir antatt å kompletere NGF og andre neuro-trofiner og derved hjelpe neuroner til å differensiere og overleve.

Tacrolimus, et immunosuppresivt medikament, har vist seg å virke synergistisk med NGF ved stimulering av neurittutvekst i PC12-celler så vel som sensoriske ganglier [Lyons et al., PNAS, 91, s. 3191-3195 (1994)]. Denne forbindelse har også vist seg å være neurobeskyttende i fokal cerebral iskemi [J. Sharkey og S. P. Butcher, Nature, 371, s. 336-339 (1994)] og å øke hastigheten av aksonal regenerering i skadede sjiatiske nerver [Gold et al., J. Neurosci., 15, s. 7509-16 (1995)].

Fra US patent 5.543.423 er det kjent forbindelser som kan anvendes for å opprettholde, øke eller gjenopprette multimedikamentresistens. Fra ZA 9.604.852 er det kjent en sammensetning som består av en neurotrofisk mengde av en forbindelse som binder til FK-506-bindende protein, en neurotrofisk faktor og et farmasøytisk akseptabelt bæremiddel.

Selv om en mengde nevrologiske degenerative sykdommer kan bli behandlet ved å stimulere neurittvekst, finnes det re-lativt få midler som er kjent for å ha disse egenskaper. Således eksisterer det et stort behov for nye farmasøytiske akseptable forbindelser og sammensetninger som har egenskapen å stimulere neurittutvekst i pasienter.

OPPSUMMERING AV OPPFINNELSEN.

Søkerne har løst det ovennevnte problem ved å oppdage at forbindelser oppfunnet av en av søkerne for bruk ved re-versering av multimedikamentresistens tidligere også over-raskende og uventet har neurotrofisk aktivitet. Disse aminosyrederivater er beskrevet i amerikansk patent 5,543,-423.

Disse forbindelser stimulerer neurittutvekst i nærvær av eksogen eller endogen NGF. Sammensetningene beskrevet heri omfatter en forbindelse fra typen beskrevet ovenfor samt en neuronal vekstfaktor. Stimulering av neurittutvekst beskrevet heri benytter de ovennevnte aminosyrederivater i kombinasjon med en neuronal vekstfaktor. Dette er anvendelig ved behandling av nerveskade forårsaket av forskjellige neurologiske sykdommer og fysiske traumer samt også ved ex vivo nerveregenerering.

DETALJERT BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN.

Foreliggende oppfinnelse fremskaffer farmasøytiske sammensetninger som omfatter tre komponenter. Den første komponent er en forbindelse som har formel (I):

samt farmasøytiske akseptable derivater derav, hvor

Ri, B og D uavhengig av hverandre er: hydrogen, Ar, (Cl-C6), rett eller forgrenet alkyl, (C2-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, (C5-C7) cykloalkylsubstituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C5-C7) cykloalkyl substituert (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, (C5-C7) cykloalkenylsubstituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C5-C7) cykloalkenylsubstituert (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, Ar-substituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, eller Ar-substituert (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl;

forutsatt at Ri ikke er hydrogen eller (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl; og

hvor enhver av CH2-gruppene i nevnte alkylkjeden i Rlr B, og D eventuelt er erstattet med 0, S, SO, S02 og NR;

hvor R er hydrogen, (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C3-C4) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, eller (C1-C4) brodannende alkyl hvor en bro blir dannet mellom nitrogenet og et karbonatom av nevnte alkylkjede for å danne en ring, og hvor nevnte ring eventuelt er kondensert til Ar;

hvor hver Ar uavhengig av hverandre er valgt fra fenyl, 1-

naftyl, 2-naftyl, indenyl, azulenyl, fluorenyl og antrace-nyl, 2-furyl, 3-furyl, 2-tienyl, 3-tienyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, pyrrolyl, oksazolyl, tiazolyl, imidazolyl, pyrazolyl, 2-pyrazolinyl, pyrazolidinyl, isoksazolyl, isotriazolyl, 1,2,3-oksadiazolyl, 1,2,3-triazolyl, 1,3,4-tiadiazolyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, 1,3,5-triazinyl, 1,3,5-tritianyl, indolizinyl, indolyl, isoindolyl, 3H-indolyl, indolinyl, benzo[b]furanyl, benzo[b]tio-fenyl, lH-indazolyl, benzimidazolyl, benztiazolyl, pyrinyl, 4H-kinolizinyl, kinolinyl, 1,2,3,4-tetrahydroisokinolinyl, isokinolinyl, 1,2,3,4-tetrahydrokinolinyl, cinnolinyl, ftalazinyl, kinazolinyl, kinoksalinyl, 1,8-naftyridinyl, pteridinyl, karbazolyl, acridinyl, fenazinyl, fenotiazinyl eller fenoksazinyl; og

hvor hver Ar eventuelt og uavhengig av hverandre er substituert med en til tre substituenter uavhengig valgt fra hydrogen, halogen, hydroksyl, nitro, -S03H, trifluormetyl, trifluormetoksy, (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, 0-((C1-C6) rett eller forgrenet alkyl), 0-benzyl, 0-fenyl, 1,2-metylendioksy, -NR5R.6, karboksyl, N-(C1-C6 rett eller forgrenet alkyl eller C3-C5 rett eller forgrenet alkenyl) kraboksamid, N,N-di-((C1-C6) rett eller forgrenet alkyl eller (C3-C5) rett eller forgrenet alkenyl), karboksamid, morfolinyl, piperidinyl, 0-M, CH2-(CH2) q-M, 0-(CH2)q-M, (CH2)q-0-M, og CH=CH-M;

hvor R5 og R6 uavhengig av hverandre er valgt fra gruppen omfattende hydrogen, (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C2-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, benzyl eller R5 og R$ blir tatt sammen for å danne en 5-7-ledet heterocyklisk ring;

M er valgt fra gruppen omfattende 4-metoksyfenyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, pyrazyl, kinolyl, 3,5-dimetyl-isoksazoyl, 2-metyltioazoyl, tiazolyl, 2-tienyl, 3-tienyl, 4-tienyl og pyrimidyl; og

q er 0-2;

J er valgt fra gruppen omfattende (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, Ar-substituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, Ar-substituert (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl eller cykloheksylmetyl;

K er valgt fra gruppen omfattende (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, Ar-substituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C2-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, og Ar-substituert (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl; eller

J og K blir tatt sammen med nitrogenet og karbonatomene til hvilket de respektivt er bundet for å danne en 5-7-ledet heterocyklisk ring som kan inneholde et heteroatom valgt fra 0, S, SO og S02;

X er valgt fra gruppen omfattende Ar, -0R2, og -N(R3)R4;

hvor R2 har samme definisjon som Ri;

R3 og R4 har uavhengig av hverandre de samme definisjoner som B og D; eller R3 og R4 blir tatt sammen for å danne en 5-7-ledet heterocyklisk alifatisk eller aromatisk ring; og m er 0 eller 1;

b) en neurotrofisk faktor; og

c) et farmasøytisk akseptabelt bæremiddel.

Fortrinnsvis er B og D uavhengige av hverandre valgt fra H,

3-Pyr- (CH2)3-, 4-Pyr-(CH2) 2-, 3-Im- (CH2) 2-, og Ph-(CH2)2-. Ri er fortrinnsvis valgt fra CH3-, PhCH2-, 4-Cl-PhCH2-, 4-F-PhCH2-, 4-PyCH2-, og 1H-Im-CH2-.

Foretrukne Ar-grupper ifølge foreliggende oppfinnelse er fenyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, imidazolyl, indolyl, isoindolyl, kinolinyl, isokinolinyl, 1,2,3,4-tetrahydroisokinolinyl og 1,2,3,4-tetrahydrokinolinyl.

Foretrukne Ar-substituenter er halogen, hydroksyl, nitro, -S03H, trifluormetyl, (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, 0-((Cl-C6) rett eller forgrenet alkyl) og -NR5R6.

Forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse innbefatter alle optiske og racemiske isomerer.

Et "farmasøytisk akseptabel derivat", som benyttet heri be-tegner ethvert farmasøytisk akseptabelt salt, ester, eller salt av slik ester, av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse eller enhver annen forbindelse som, ved administrasjon til en pasient, er i stand til å gi en forbindelse ifølge den foreliggende oppfinnelse, som er særpreget ved egenskapen å fremme eller forsterke neurittutvekst.

I henhold til en foretrukket utførelsesform, omfatter de farmasøytiske sammensetningene ifølge den foreliggende oppfinnelse en forbindelse som har formel (II):

samt farmasøytisk akseptable derivater derav, hvor J og K uavhengig av hverandre valgt fra (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, eller Ar-substituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl; og w er 1 eller 2.

En annen foretrukket farmasøytisk sammensetning ifølge foreliggende oppfinnelse omfatter en forbindelse av formel (I), hvor minst en av B eller D er representert av formelen _ (CH2) r-Z- (CH2) s-AR, hvor hver Z uavhengig av hverandre valgt fra 0, S, SO, S02 eller NR; og R er valgt fra hydrogen, (C1-C4) rett eller forgrenet alkyl, (C3-C4) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, og (C1-C4) brodannende alkyl hvor en bro dannet mellom nitrogenet og Ar-gruppen.

En annen foretrukket utførelsesform av disse sammensetningene omfatter en forbindelse av formel (III):

samt farmasøytiske akseptable derivater derav, hvor J og K uavhengig av hverandre valgt fra (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, eller Ar-substituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl; og w er 1 eller 2.

Tabell I gir eksempler på foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen.

Dersom farmasøytiske akseptable salter av forbindelsene blir benyttet, er disse salter fortrinnsvis avledet fra uorganiske eller organiske syrer og baser. Innbefattet blant slike syresalter er de følgende: acetat, adipat, al-ginat, aspartat, benzoat, benzensulfonat, bisulfat, buty-rat, citrat, kamforat, kamfersulfonat, cyklopentapropionat, diglukonat, dodecylsulfat, etansulfonat, fumarat, glu-koheptanoat, glyserofosfat, hemisulfat, heptanoat, heksa-noat, hydroklorid, hydrobromid, hydrojodid, 2-hydroksy-etansulfonat, laktat, maleat, metansulfonat, 2-naftalen-sulfonat, nikotinat, oksalat, pamoat, pektinat, persulfat, 3-fenyl-propionat, pikrat, pivalat, propionat, sukkinat, tartrat, tiocyanat, tosylat og undekanoat. Basesalter innbefatter ammoniumsalter, alkalimetallsalter, så som natrium og kaliumsalter, jordalkalimetallsalter, så som kalsium og magnesiumsalter, salter med organiske baser, så som dicy-kloheksylaminsalter, N-metyl-D-glukamin, og salter med aminosyrer så som arginin, lysin, og så videre. I tillegg kan de basiske nitrogen-inneholdende grupper bli kvater-nisert med slike midler som lave alkylhalider, så som metyl, etyl, propyl og butylklorid, bromider og jodider; dialkylsulfater, så som dimetyl, dietyl, dibutyl og dia-mylsulfater, lang kjedede halider så som decyl, lauryl, myristyl og stearylklorider, bromider og jodider, aralkyl-halider, så som benzyl og fenetylbromider samt andre. Vann eller olje-oppløselige eller dispergerbare produkter blir derved fremstilt.

Forbindelsene benyttet i sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også bli modifisert ved å tilføye passende funksjonsgrupper for å øke selektive biologiske egenskaper. Slike modifikasjoner er kjent innen faget og innbefatter slike som øker biologisk penetrering i et gitt biologisk system (for eksempel blod, lymfatisk system, sentral nervesystem), øker oral tilgjengelighet, øker oppløselighet, for å tillate administrasjon ved injeksjon, endrer metabolisme og endrer utskillings-hastighet.

Den andre komponent i hver av de farmasøytiske sammensetninger beskrevet ovenfor er en neurotrofisk faktor. Uttrykket "neurotrofisk faktor", som benyttet heri, refererer til forbindelser som er i stand til å stimulere utvekst eller proliferasjon av nervevever. Som benyttet i foreliggende søknad utelukker uttrykket "neurotrofisk faktor" forbindelsene beskrevet heri.

Flere neurotrofiske faktorer har blitt identifisert innen faget og enhver av disse faktorer kan bli benyttet i sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse. Disse neurotrofiske faktorer innbefatter, men er ikke begrenset til, nerve vekstfaktor (NGF), insulin vekstfaktor (IGF-1) og dets aktive avkortede derivater så som gIGF-1, sur og basisk fibroblast vekstfaktor (henholdsvis aFGF og bFGF), blodplatet-avledede vekstfaktorer (PDGF), hjerne-avledet neurotrofisk faktor (BDNF), ciliære neurotrofiske faktorer (CNTF), glial cellelinje-avledet neurotrofisk faktor (GD-NF), neurotrofin-3 (NT-3) og neurotrofin 4/5 (NT-4/5). Den mest foretrukne neurotrofiske faktor i sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse er NGF.

Den tredje komponent av de farmasøytiske akseptable sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse er et far-masøytisk akseptabelt bæremateriale. Farmasøytiske akseptable bærematerialer som kan bli benyttet i disse farma-søytiske sammensetningene innbefatter, men er ikke begrenset til ion-utbyttere, alumina, aluminumstearat, lekitin, serumproteiner, så som human serum albumin, buffer substanser så som fosfater, glysin, sorbinsyre, kaliumsorbat, partielle glyseridblandinger av mettede vegetabilske fettsyrer, vann, salter eller elektrolytter, så som protamin-sulfat, dinatriumhydrogenfosfat, kaliumhydrogenfosfat, natriumklorid, sinksalter, kollodial silika, magnesiumtri-silikat, polyvinylpyrrolidon, cellulose-baserte substanser, polyetylenglykol, natriumkarboksymetylcellulose, polyakry-later, vokser, polyetylen-polyoksypropylen-blokkpolymerer, polyetylenglykol og ullfett.

Sammensetingene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli administrert oralt, parenteralt, ved inhalering spray, topisk, rektalt, nasalt, bukkalt, vaginalt eller via en implantert reservoir. Uttrykket "parenteral" som benyttet heri innbefatter subkutan, intravenøs, intramuskulær, intra-artikulær, intra-synovial, intrasternal, intratekal, intrahepatisk, intralesjonal og intrakranial injeksjon eller infusjonsteknikker. Fortrinnsvis blir de sammensetningene administrert oralt, intraperitonealt eller intravenøs.

Sterile injiserbare former av sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse kan være vandige eller oleaginøse suspensjoner. Disse suspensjoner kan bli formulert i henhold til teknikker kjent innen faget ved å bruke egnede dispergerende eller fuktende midler og suspensjonsmidler. Det sterile injiserbare preparat kan også være en steril inji-serbar oppløsning eller suspensjon i et ikke-toksisk parenteralt-akseptabelt fortynningsmiddel eller oppløsnings-middel, for eksempel som en oppløsning i 1,3-butandiol. Blant de akseptable vehikler og oppløsningmidler som kan bli benyttet er vann, Ringers' oppløsning og isotonna-triumkloridoppløsning. I tillegg blir sterile, fikserte oljer konvenjonell benyttet som et oppløsningsmiddel eller suspenderend medium. For dette formål kan enhver type fik-sert olje bli benyttet innbefattende syntetisk mono- eller di-glyserider. Fettsyrer, så som oleinsyre og dets glyse-rid-derivater er anvendelige ved fremstilling av injiserbare former, og likeledes naturlige farmasøytiske akseptable oljer, så som olivenolje eller lakserolje, spesielt i sine polyoksyetylerte versjoner. Disse oljeoppløsninger eller suspensjoner kan også inneholde et langkjedet alkohol-fortynningsmiddel eller dispergeringsmiddel, så som Ph. Heiv eller lignende alkohol.

De farmasøytiske sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli administrert oralt i enhver oral akseptabel doseringsform innbefattende, men ikke begrenset til kapsler, tabletter, vandige suspensjoner eller oppløs-ninger. I tillfellet med tabletter for oral bruk, innbefatter bæremidler som vanligvis blir benyttet laktose og maisstivelse. Smøremidler så som magnesiumstearat, blir også typisk tilsatt. For oral administrasjon i en kapsel-form, innbefatter anvendelige fortynningsmidler laktose og tørket maisstivelse. Når de vandige suspensjoner er nød-vendige for oral bruk, blir den aktive bestanddel kombinert med emulgerende og suspenderende midler. Om ønsket kan visse søtende, smakssettende eller fargende midler også bli tilsatt.

Alternativt kan de farmasøytiske sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse bli administrert i form av suppo-sitorier for rektal administrasjon. Disse kan bli fremstilt ved å blande midlet med en egnet ikke-irriterende eksipient som er fast ved romtemperatur men flytende ved rektal tem-peratur og vil følgelig smelte i rektum å frigjøre medika-mentet. Slike materialer innbefatter kokosmør, bivoks og polyetylenglykoler.

De farmasøytiske sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også bli administrert topisk, spesielt når målet for behandlingen innbefatter områder eller organer som lett er tilgjengelige ved topisk applikasjon, innbefattende sykdommer i øye, huden eller den nedre tarmkanal. Passende topiske formuleringene blir lett fremstilt for hvert av disse områder eller organer.

Topisk applikasjon for den nedre tarmkanal kan bli utført i en rektal suppositoriums formulering (se ovenfor) eller i en passende klyster-formulering. Topisk transdermale plas-tere kan også bli benyttet.

For topiske applikasjoner kan de farmasøytiske sammensetninger bli formulert i en egnet salve inneholdende den aktive komponent suspendert eller oppløst i et eller flere bærematerialer. Bærematerialer for topisk administrasjon av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse innbefatter, men er ikke begrenset til mineralolje, flytende petrolatum, hvitt petrolatum, propylenglykol, polyoksyetylen, polyoksypropylenforbindelse, emulgeringsvoks og vann. Alternativt kan de farmasøytiske sammensetningene bli formulert i en passende lotion eller krem inneholdende de aktive komponenter suspendert eller oppløst i ett eller flere farmasøytiske akseptable bærematerialer. Passende bærematerialer innbefatter, men er ikke begrenset til mineralolje, sorbitanmonostearat, polysorbate 60, cetyl-voksestere, cetearylalkohol, 2-oktyldodekanol, benzylalkohol og vann.

For oftalmisk bruk kan de farmasøytiske sammensetninger bli formulert som mikroniserte suspensjoner i isoton, pH-justert steril saline, eller, fortrinnsvis som oppløsninger i isoton, pH-justert steril saline, enten med eller uten et preserveringsmiddel så som benzylalkoniumklorid. Alternativt kan for optalmisk bruk de farmasøytiske sammensetninger bli formulert i en salve så som petrolatum.

De farmasøytiske sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også bli administrert med nasal aerosol eller inhalering. Slike sammensetningene blir fremstilt i henhold til teknikker som er velkjent innen faget med farmasøytisk formulering og kan bli fremstilt som oppløsninger i saline, ved å benytte benzylalkohol eller andre egnede preser-veringsmidler, absorpsjons fremmende midler for å øke bio-tilgjengelighet, fluorkarboner, og/eller andre konven-sjonelle solubiliserende eller dispergerende midler.

Mengden av både forbindelsen og den neurotrofiske faktor som kan bli kombinert med bærematerialene for å danne en enkel doseringsform vil variere avhengig av den behandlede organisme, og den spesielle administrasjonsmetode. De to aktive bestanddeler av de farmasøytiske sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse virker synergistisk til å stimulere neurittutvekst. Følgelig vil mengden av neurotrofisk faktor i slike sammensetninger være mindre enn hva som er nødvendig i en monoterapi som benytter kun den ene faktor. Foretrukket bør sammensetningene bli formulert slik at en dosering på mellom 0,01-100 mg per kilo kroppsvekt per dag av forbindelsen blir administrert og en dosering på mellom 0,01-100 ^g/kg kroppsvekt per dag av den neurotrofiske faktor kan bli administrert til en pasient som mottar disse sammensetningene.

Det bør også bli forstått at en spesiell doserings- og behandlingsmetode for enhver spesiell pasient vil avhenge av en mengde faktorer, innbefattende aktiviteten av den spesielle forbindelse som anvendes, alderen, kroppsvekt, generell helse, kjønn, diett, admininstrasjonstid, eks-kresjonstid, medikament kombinasjon, og vurderingen fra den behandlede lege samt alvorligheten av den spesielle sykdom som blir behandlet. Mengden av aktive bestanddeler vil også avhenge av den spesielle forbindelse og den neurotrofiske faktor i sammensetningen.

I et annet aspekt av foreliggende oppfinnelse kan sammensetningene bli benyttet for å stimulere nervevekst ex vivo. For dette aspekt kan forbindelsene beskrevet ovenfor bli tilført direkte til nervecellene i kultur. Dette aspekt av oppfinnelsen er anvendelig for ex vivo nerveregenerering.

I henhold til en alternativ utførelsesform omfatter metoden for å stimulere neurittutvekst det ytterligere trinn å behandle ex vivo nerveceller i kultur med en neurotrofisk faktor, så som dem inneholdt i de farmasøytiske sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse beskrevet ovenfor.

Sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli benyttet for å behandle nerveskade forårsaket av en mengde sykdommer eller fysiske traumer. Disse innbefatter, men er ikke begrenset til Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, ALS, multiple skleroser, slag og iskjemi assosiert med slag, neural paropati, andre neurale degenerative sykdommer, motorisk neurone sykdommer, sciatisk sammenpressing, perifer neuropati, spesielt neuropati assosiert med diabetisk, ryggmargskader og fasiell nervesammenpressing.

For at oppfinnelsen beskrevet heri skal bli mer fullstendig forstått blir de følgende eksempler gitt.

Eksempler

Generelle metoder

Magnetisk protonkjerneresonans (<1>H NMR) spektrum ble ned-tegnet ved 500 MHZ på en Bruker AMX 500. Kjemiske skift blir angitt i deler per million (8) i forhold til Me4Si (8 0,0). Analytisk høy effekt væskekromatografi ble utført på enten en Waters 600E eller en Hewlett Packard 1050 væske-kromatograf .

Eksempel 1

1, 5- Di( pyridin- 4- yl)- pent- 1, 4- dien- 3- on ( forbindelse 1): Til en oppløsning av 1,3-acetondikarboksylsyre (21,0 g, 0,144 mmol) i absolutt etanol (200 ml) ble det tilsatt dråpevis 4-pyridinkarboksaldehyd (30,8 g, 0,288 mmol). Gassutvikling inntraff gjennom hele tilsetningen. Etter

omrøring ved romtemperatur i to timer ble reaksjonsblandingen behandlet med konsentrert saltsyre (100 ml) og oppvarmet til 80°C hvorved et gult presipitat sakte dannet seg. Ytterligere 500 ml etanol ble tilsatt for å tillate omrøring av suspensjonen. Etter en time ved 80°C ble pre-sipitatet samlet ved filtrering, vasket med etanol og tør-ket under vakuum for å gi det ønskede produkt som et gult fast stoff. Det resulterende dihydrokloridsalt ble omkry-stallisert fra metylenklorid for å gi ren forbindelse 1.

Eksempel 2

1, 5- Di( pyridin- 4- yl)- pentan- 3- on ( forbindelse 2):

Til en oppslemming av forbindelse 1 (21,3 g, 67,4 mmol) i 1,4-dioksan (40 ml) ble det tilsatt trietylamin (48,1 ml, 0,346 mol), maursyre (6,54 ml, 0,145 mol) og 10% palladium på karbon (0,7 g) og den resulterende blanding ble oppvarmet til tilbakeløp. Etter omrøring ved tilbakeløp i en time ble reaksjonsblandingen avkjølt til romtemperatur filtrert og konsentrert in vacuo. Det resulterende residuet ble kromatografert over silikagel (eluering med 5% metanol/metylenklorid) for å gi det ønskede materiale. Eksempel 3 ( 4- Flurobenzyl)-( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2-( pyridin- 4- yl)-etyl) propyl) amin ( forbindelse 3): Til en flaske utstyrt med en Dean-Stark felle ble det tilsatt forbindelse 2 (12,46 g, 51,91 mmol), 4-fluorbenzylamin (5,93 ml, 51,91 mmol) og benzen (50 ml) og den resulterende blanding ble oppvarmet til tilbakeløp. Etter oppsamling av 930 vann, ble reaksjonsblandingen avkjølt og konsentrert. Residuet ble tatt opp i etanol (50 ml) og tilsatt til en oppslemming av natriumborhydrid (2,96 g, 77,8 mmol) i etanol (50 ml) og blandingen ble oppvarmet til 80°C og omrørt i 1 time. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og konsentrert. Residuet ble tatt opp i vann, surgjort til pH 3,0 med 6N-saltsyre. Den vandige fase ble vasket med etylacetat

(2X). Den vandige fase ble gjort basisk med natriumhydroksid til en pH på 10 og produktet ble ekstrahert med metylenklorid (2X). De organiske faser ble slått sammen, vasket med saltlake, tørket over vannfri magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert in vacuo. Kromatografi av residuet over silikagel (eluering med 5% metanol/metylenklorid) ga forbindelse 3.

Eksempel 4

( S)- N-( 4- Fluorbenzyl)- 2-( N- metyl- N- tert- butylkarbamo- yl)-amino- 3- fenyl- N-( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2-( pyridin- 4- yl)-etyl) propyl) propionamid ( forbindelse 4):

Til en oppløsning av forbindelse 3 (550 mg, 1,66 mmol) og (L)-BOC-N-metyl-fenylalanin (700 mg, 2,5 mmol) i metylenklorid (4,0 ml) inneholdende diisopropyletylamin (300 ^1, 1,72 mmol) ble det tilsatt (3-dimetylaminopropyl)-3-etyl-karbodiimidhydroklorid (480 mg, 2,5 mmol) og reaksjonsblandingen ble tillatt omrørt i 48 timer. Reaskjons-blandingen ble fortynnet med etylacetat og vann. Lagene ble avskilt og den vandige fase ble reekstrahert med etylacetat. De organiske fasene ble slått sammen, vasket med mettet natriumbikarbonat, vann og saltlake, tørket over vannfri magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert in vacuo. Kromatografi av residuet over silikalgel (eluering med 5% metanol/metylenklorid) ga forbindelse (4). Eksempel 5 ( S)- N-( 4- Fluorbenzyl)- 2- metylamino- 3- fenyl- N-( 3-( pyridin- 4-yl)- 1-( 2-( pyridin- 4- yl)- etyl) propyl) propionamid ( forbindelse 5) : Forbindelse 4 ble oppløst i metylenklorid (10 ml) og behandlet med trifluoreddiksyre (4,0 ml). Etter omrøring hvor romtemperatur i 1,5 time, ble reaksjonsblandingen konsentrert in vacuo. Residuet ble nøytralisert med mettet ka-liumkarbonat og ekstrahert med etylacetat (2X). Ekstraktene ble slått sammen, vasket med vann, tørket over vannfri magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert in vacuo for å gi forbindelse 5.

Eksempel 6

( S)- N-( 4- Fluorbenzyl)- 2-( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- tri- metoksyfenyl) acetyl) amino)- 3- fenyl- N-( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2-( pyridin- 4- yl)- etyl) propyl) propionamid ( forbindelse 6):

Til en oppløsning av forbindelse 5 (500 mg, 0,98 mmol) og 3,4,5-trimetoksybenzyolmaursyre (294 mg, 1,22 mmol) i metylenklorid (4,0 ml) inneholdende N,N-dimetyl-formamid (0,4 ml) ble det tilsatt (3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbod-dimidhydroklorid (235 mg, 1,22 mmol) og reaksjonsblandingen ble omrørt i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med etylacetat og vann. Lagene ble avskilt og den vandige fase reekstrahert med etylacetat. De organiske faser ble slått sammen, vasket med mettet natriumbikarbonat, vann og saltlake, tørket over vannfri magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert in vacuo. Residuet ble kromatografert på silikagel (eluering med 5% metanol/metylenklorid) for å gi det ønskede produkt. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDC13) 5 8, 48-8, 44 (m) , 8,38 (dd), 7, 36-7, 33 (m) , 7,28-7,18 (m) , 7,13-7,02 (m) , 6, 97-6, 87 (m) , 6,58 (d) , 6,00 (dt), 5,81 (t), 4,97 (br, s), 4,81 (d), 4,23-4,16 (m), 3,93 (s), 3,90 (s), 3,85 (s), 3,76 (s) , 3,59 (dd), 3,28 (dd), 3,20 (s), 3,15 (s), 3, 04-2, 96 (m) , 3,02 (s) , 3,01 (s) , 2,94 (dd), 2,63 (dt), 2,53-2,37 (m), 1,92-1,78 (m), 1,72-1,62 (m), 1, 52-1, 42 (m) . Eksempel 7 ( S)- N- Benzyl- 2-( metyl)-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl)-acetyl) amino)- 3- fenyl- N-( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2- pyridin- 4-yl- etyl) propyl) propionamid ( forbindelse 7): Forbindelse 7 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 3-6, ved å erstatte 4-fluorbenzylamin med benzyl-amin. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDCI3) 5

8,48 (dd), 8,53 (dd), 8,43 (dd), 8,35 (dd), 7,38 (d) , 7,30-7,18 (m) , 7,17-7,02 (m) , 6,93 (s) , 6,89 (d) , 6,54 (d) , 6,03 (dd), 5,86 (t), 5,08 (br,d), 4,88 (d) , 4,32-4,18 (m) , 3,95 (s), 3,89 (s), 3,86 (s), 3,73 (s), 3,63 (dd), 3,23-3,19 (m) , 3,09 (dd), 3,05 (s) , 3,03 (s) , 2,97 (dd), 2,63 (dt) , 2,57-2,37 (m), 2,24 (dt), 2,06 (m), 1,95-1,76 (m), 1,74-1,63 (m), 1,54-1,44 (m).

Eksempel 8

( S)- N-( 4- Klorbenzyl)- 2-( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl) acetyl) amino)- 3- fenyl- N-( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2-pyridin- 4- yl- etyl) propyl) propionamid ( forbindelse 8):

Forbindelse 8 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 3-6, ved å erstatte 4-fluorbenzylamin med 4-klorbenzylamin. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDC13) 5 8, 48 (dd), 8,45 (dd), 8,40 (dd), 7,69 (d) , 7,31-7,14 (m) , 7,12 (s) , 7,08-7, 03 (m) , 6,98 (s) , 6,94-6,91 (m) , 6,85 (d) , 6,02 (dd), 5,79 (t) , 4,99 (br d) , 4,83 (d) , 4,22-4,16 (m), 3,96 (m), 3,91 (s) , 3,88 (s) , 3,87 (s) , 3,81 (s), 3,78 (s), 3,61 (dd), 3,33 (dd), 3,21 (s), 3,17 (s), 3,04 (s), 3,03 (s), 3, 03-3,00 (m) , 2,95 (dd), 2,65 (dt) , 2,56-2,40 (m), 2,28 (dt), 1,90-1,80 (m), 1,75-1,66 (m), 1,52-1,43 (m). Eksempel 9 ( S)- N- Benzyl- 3-( 4- klorfenyl)- 2-( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl) acetyl) amino)- N-( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2-( pyridin- 4- yl)- etyl) propyl) propionamid ( forbindelse 9): Forbindelse 9 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 3-6, ved å erstatte 4-fluorbenzylamin med ben-zylamin og (L)-BOC-N-metylfenylalanin med (L)-BOC-N-metyl-4-klorfenylalanin. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDCI3) 5 8, 48 (dd), 8,45 (dt) , 8,38 (dd), 7,32-6,87 (m) , 6,58 (d) , 5,94 (dd), 5,78 (t) , 5,05 (brd), 4,83 (d) , 4,26 (dd), 4,15 (m), 3,97 (s), 3,89 (s), 3,86 (s), 3,75 (s), 3,57 (dd), 3,20 (s), 3,15 (s), 3,15-3,09 (m), 3,05-

2,96 (m) , 3,01 (s) , 3,00 (s) , 2,91 (dd), 2, 65-2, 38 (m) , 2,26 (dt), 1,94-1,47 (m).

Eksempel 10

( S)- 2-( Metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl) acetyl)-amino)- 3- fenyl- N-( 4- fenylbutyl)- N-[( pyridin- 4- yl)- metyl]-propionamid ( forbindelse 10): Forbindelse 10 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 3-6, ved å erstatte 4-fluorbenzylamin med 4-fenylbutylamin og forbindelse 2 med 4-pyridinkarboksaldehyd. <1>R NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDC13) 8 8,46 (dd), 8,42 (dd), 7,30-7,23 (m) , 7,18-7,11 (m), 7,11 (s), 7,10 (s), 6,90 (d), 6,77 (d), 5,88 (t), 5,60 (dd), 4,85 (d), 4,50 (d) , 4,28 (d) , 3,93 (s) , 3,83 (s) , 3,81 (s) , 3,80 (s), 3,65-3,50 (m), 3,37 (m), 3,20-3,15 (m), 3,08-3,06 (m), 3,06 (s), 3,05 (s), 2,92 (dd), 2,60 (m), 2,54 (m), 1, 60-1, 48 (m) , 1, 38-1, 28 (m) .

Eksempel 11

1, 7- Di( pyridin- 4- yl)- heptan- 4- on ( forbindelse 11):

Til en oppløsning av 1,7-di(pyridin-4-yl)-heptan-4-ol (4,1 g, 15,2 mmol) i metylenklorid (50 ml) ved 0°C, ble det tilsatt kaliumbromid (180 mg) og 2,2,6,6-tetrametyl-l-piperi-dinyloksy, fri radikal (71 mg). Til den resulterende blanding ble det tilsatt dråpevis en oppløsning av natrium bikarbonat (510 mg) i natriumhypokloritt (65 ml). Etter at tilsetningen var fullstendig ble reaksjonsblandingen varmet til romtemperatur og omrørt i 30 minutter. Blandingen ble fortynnet med etylacetat og vann. Lagene ble avskilt og det vandig lag reekstrahert med etylacetat. De organiske faser ble slått sammen, vasket med vann og saltlake, tørket over vannfri magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert in vacuo. Kromatografi av residuet over silikagel (eluering med 5% metanol/metylenklorid) ga forbindelse 11. Eksempel 12 ( S)- N- Benzyl- 2-( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl)-acetyl) amino)- 3- fenyl- N-( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2-( pyridin- 4-yl)- propyl) butyl) propionamid ( forbindelse 12): Forbindelse 12 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 3-6, ved å erstatte 4-fluorbenzylamin med ben-zylamin og forbindelse 2 med forbindelse 11. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDC13) 8 8,43-8,38 (m), 8,30 (m) , 8,16 (m) , 7, 53-7,45 (m) , 7,34 (m) , 7,32 (m) , 7,26-7,22 (m), 7,19-7,07 (m), 7,00-6,83 (m), 5,89 (dd), 5,72 (t), 4,90 (d), 4,72 (d) , 4,10 (d) , 4,00 (d) , 3,93 (s) , 3,91 (s), 3,85 (s), 3,74 (s) , 3,52 (dd), 3,16-3,10 (m) , 3,04 (s), 2,99 (dd), 2,93 (s), 2,84 (dd), 2, 67-2, 38 (m) , 2,30 (m) , 2,22 (m) , 1,63-1,12 (m) , 0,94 (m) .

Eksempel 13

Metyl-( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2-( pyridin- 4- yl)- etyl)- propyl)-amin ( forbindelse 13): Til en oppslemming av metylaminhydroklorid (1,7 g, 25,4 mmol) og natriumacetat (2,5 g, 30,48 mmol) i metanol (20 ml) ble det tilsatt en oppløsning av forbindelse 2 (1,21 g, 5,08 mmol) i metanol (5 ml). Den resulterende blanding ble behandlet med en oppløsning av natriumcyanoborhydrid (370 mg, 6,09 mmol) i metanol (5 ml) og oppvarmet til 80°C. Etter 1 time ved 80°C ble reaksjonsblandingen avkjølt til romtemperatur og konsentrert in vacuo. Residuet ble tatt opp i metylenklorid og 2N-natriumhydroksid. Lagene ble adskilt og den organiske fasen ble vasket med saltlake, tør-ket over vannfri magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert in vacuo for å gi forbindelse 13. Eksempel 14 ( S)- N- Metyl- 2( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl) ace-tyl) amino)- 3- fenyl- N-( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2-( pyridin- 4- yl)-etyl) propyl) propionamid ( forbindelse 14): Forbindelse 14 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 4-6, ved å erstatte forbindelse 3 med forbindelse 13. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDC13) 5 8,50-8,46 (m), 8,37 (d), 7,32-7,26 (m), 7,21-7,16 (m), 7,10-7,06 (m) , 6,97 (dd), 6,93 (d) , 5,93 (d) , 5,54 (t) , 4,72 (br,s), 4,17 (m) , 3,94 (s) , 3,92 (s) , 3,84 (s) , 3,82 (s), 3,51 (dd), 3,38 (dd), 3,29 (s) , 3,11 (dd), 3,06 (s) , 3,00 (s), 2,97 (dd), 2,86 (s), 2,82 8s), 2,49 (m), 2,37-2,23 (m) , 2,17-1,98 (m), 1,85-1, 55 (m) . Eksempel 15 ( S)- N- Metyl- 2-( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl)-acetyl) amino- 3- fenyl- N-( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2-( pyridin- 4-yl)- propyl) butyl) propionamid ( forbindelse 15): Forbindelse 15 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 13 og 14, ved å erstatte forbindelse 2 med forbindelse 11. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDCI3) 5 8, 44-8, 38 (m) , 8, 37-8, 30 (m) , 7, 50-7, 43 (m) , 7,38-7,08 (m) , 7,04 (s) , 7, 03-6, 98 (m) , 6, 90-6, 86 (m) , 5,83 (dd), 5,74 (t) 4,75 (t), 4,65 (m), 3,94-3,93 (m), 3,92 (s), 3,90 (s), 3,84 (s), 3,83 (s) , 3,44 (dd), 3,32 (dd), 3,20 (s), 3,01 (dd), 2,95 (s), 2,91 (s) , 2,87 (dd), 2,59 (s) , 2, 58-2, 37 (m) , 1, 68-1, 00 (m) . Eksempel 16 ( S)- 4- Metyl- 2-( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl) ace-tyl) amino) pentanoinsyrebenzyl( 3-( pyridin- 4- yl)- 1-( 2-( pyridin- 4- yl) etyl) propyl) amid ( forbindelse 16): Forbindelse 16 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 3-6, ved å erstatte 4-fluorbenzylamin med ben-zylamin og (L)-BOC-N-metylfenylalanin med (S)-BOC-N-metyl-leucin. Eksempel 17 ( S)- 4- Metyl- 2-( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl) ace-tyl) amino) pentanoinsyre 4- fluorbenzyl( 3- pyridin- 4- yl- l-( 2-pyridin- 4- yl- etyl) propyl) amid ( forbindelse 17): Forbindelse 17 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 4-6, ved å erstatte (L)-Boc-N-metylfenylalamin med (S)-Boc-N-metylleucin. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDC13) 8 8, 48 (m) , 8,45 (d) , 7,32 (m) , 7,18 (s), 7,12 (s), 7,09-6, 92 (m) , 6,84 (d) , 5,72 (dd), 5,48 (dd), 4,99 (br d) , 4,68 (d) , 4,42 (d) , 4,36 (d) , 4,29 (m) , 3,94 (s), 3,91 (s), 3,87 (s) , 3,83 (s) , 2,96 (s) , 2,92 (s) , 2,69 (dt), 2,62-2,55 (m), 2,52-2,44 (m), 2,12-1,73 (m), 1, 63-1, 57 (m) , 1,48-1, 39 (m) , 1,23 (m) , 1,03 (t) , 0,90 (d) , 0, 60 (d) . Eksempel 18 ( S)- 4- Metyl- 2-( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl) ace-tyl) amino) pentanoinsyre 4- klorbenzyl( 3- pyridin- 4- yl- l-( 2-pyridin- 4- yl- etyl) propyl) amid ( forbindelse 18): Forbindelse 18 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 3-6, ved å erstatte 4-fluorbenzylamin med 4-klor-benzylamin og (L)-Boc-N-metylfenylalanin med (S)-Boc-N-metylleucin. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDCI3) 5 8, 50 (m) , 8,47 (d) , 7,38 (d) , 7, 30-7, 26 (m) , 7,19 (s), 7,13 (s), 7,10 (d) , 7,04 (d) , 6,98 (d) , 6,84 (d) , 5,73 (dd), 5,47 (dd), 5,03 (br d) , 4,69 (d) , 4,42 (d) , 4,36 (d) , 4,31 (m) , 3,95 (s) , 3,93 (s) , 3,88 (s) , 3,84 (s) , 2,97 (s) , 2,94 (s), 2,70 (dt), 2,63-2,43 (m), 2,12-1,56 (m), 1,48-1,40 (m) , 1,25 (m) , 1,04 (t) , 0,91 (d) , 0,70 (d) . Eksempel 19 ( S)- N-( 4- fluorbenzyl)- 3-( 4- klorfenyl)- 2-( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl) acetyl) amino)- N-( 3- pyridin- 4- yl- l-( 2- pyridin- 4- yl- etyl) propyl) propion- amid ( forbindelse 19): Forbindelse ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 4-6, ved å erstatte (L)-Boc-N-metylfenylalanin med (L) -Boc-N-metyl-4-klorfenylalanin. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDC13) 5 8, 49-8, 41 (m) , 7,34 (s), 7,28-7, 20 (m) , 7,10-6,90 (m) , 6,64 (d) , 5,92 (dd), 5,74 (t), 4,95 (br d) , 4,74 (d) , 4,24-4,13 (m) , 3,94 (s) , 3,90 (s), 3,86 (s), 3,77 (s) , 3,54 (dd), 3,23-3,17 (m) , 2,99 (s), 2,98 (s), 2,90 (d) , 2,63 (dt) , 2,59-2, 37 (m) , 2,28 (dt), 1,94-1,70 (m), 1,57-1,47 (m). Eksempel 20 ( 4- Klorbenzyl)-( 3- imidazol- l- yl- propyl) amin ( forbindelse 20) : Til en oppløsning av 1-(3-amino-propyl)imidazol (2,1 g, 16,8 mmol), diisopropyl-etylamin (3,5 ml, 20,0 mmol) og 4-N,N-dimetyl-aminopyridin (200 mg, 1,7 mmol) i metylenklorid (15 ml) ble det ved 0°C tilsatt dråpevis 4-klorbenzoyl-klo-rid (2,1 ml, 16,8 mmol). Reaksjonsblandingen ble så tillatt å varme seg til romtemperatur. Etter 5 timer ble reaksjonsblandingen fortynnet med metylenklorid, vasket med 1N-natriumhydroksid, saltlake, tørket over vannfri magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert in vacuo for å gi et hvitt fast stoff. Dette materiale ble vasket med dietyleter for å gi N-(3-imidazol-l-yl-propyl)-4-klorbenzamid. Til en oppslemming av det ovennevnte amid (1,58 g, 6,0 mmol) i tetra-hydrofuran (30 ml) ble det sakte tilsatt litiumaluminum-hydrid (456 mg, 12,0 mmol) hvorpå reaksjonen ble eksoterm. Blandingen ble oppvarmet til 80°C, omrørt i 1 time, avkjølt til 0°C og stoppet ved tilsetning av vann (0,5 ml), 15% natriumhydroksid (0,5 ml) og ytterligere 1,5 ml vann. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med etylacetat, tørket over vannfri magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert in vacuo for å gi forbindelse 20. Eksempel 21 ( S)- N-( 4- klorbenzyl)- N-( 3- imidazol- l- yl- propyl)- 2-( metyl-( 2- okso- 2-( 3, 4, 5- trimetoksyfenyl) acetyl) amino)- 3- fenylpro-pionamid ( forbindelse 21): Forbindelse 21 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 4-6, ved å erstatte forbindelse 3 med forbindelse 20. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDC13) 8,48 (m) , 7,44 (br s) , 7,37 (br s) , 7,30-7,16 (m) , 7,10-7,02 (m) , 6,95 (d) , 6,83 (m) , 5,78 (t) , 5,72 (t) , 4,77 (d) , 4,57 (d) , 4,26 (dd), 3,94 (s), 3,93 (s), 3,88-3, 77 (m) , 3,80 (s), 3,48 (dt), 3, 42-3, 33 (m) , 3,19-3,14 (m) , 3,13 (s), 3,12 (s), 3,13-2,97 (m), 2,89 (t), 2,80 (m), 2,74 (t), 2,65 (m) , 2, 08-1, 98 (m), 1,90 (m), 1,80-1, 60 (m) .

Eksempel 22

N-( lH- Imidazol- 2- yl- metyl)- N-( 1- fenetyl- 3- fenyl- propyl) amin ( forbindelse 22): Til en oppløsning av 1,5-Difenylpentan-3-on (5,26 g, 22,1 mmol), ammoniumacetat (8,52 g, 110,5 mmol) og natriumacetat (9,06 g, 110,5 mmol) i metanol (80 ml) ble det tilsatt en oppløsning av natriumcyanoborhydrid (1,67 g, 26,52 mmol) i metanol (20 ml) og reaksjonsblandingen ble oppvarmet til tilbakeløp. Etter omrøring ved tilbakeløp i 30 minutter, ble reaksjonsblandingen avkjølt og konsentrert til tørrhet. Residuet ble fordelt mellom metylenklorid og 2N-natriumhydroksid. Den organiske fasen ble adskilt, vasket med saltlake, tørket over vannfri magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert in vacuo. Kromatografi av residuet på silikagel (eluering med 2-5% metanol/metylenklorid) ga N-(1-fenetyl-3-fenyl-propyl)amin. Til en oppløsning av det ovennevnte amin (2,1 g, 8,82 mmol) i etanol (50 ml), ble det tilsatt 2-imidazol-karboksaldehyd (813 mg, 8,47 mmol) og reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 50°C. Etter omrøring i 2 timer, ble den resulterende homogene oppløsning behandlet med natriumborhydrid (400 mg, 10,58 mmol) og ble omrørt over natten. Reaksjonsblandingen ble konsentrert til tørr-het og residuet ble fordelt mellom metylenklorid og 2N-natriumhydroksid. Den organiske fase ble avskilt, vasket med saltlake, tørket over vannfri magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert in vacuo. Kromatografi av residuet på silikagel (eluering med 5% metanol/metylenklorid) ga forbindelse 22.

Eksempel 23

( S)- N-( lH- Imidazol- 2- yl- metyl)- 2-( metyl- 2- okso- 2-( 3, 4, 5-trimetoksyfenyl) acetyl) amino)- N-( 1- fenetyl- 3- fenyl- propyl) 3- fenyl- propionamid ( forbindelse 23): Forbindelse 23 ble fremstilt i henhold til protokolene av eksempler 4-6, ved å erstatte forbindelse 3 med forbindelse 22. <1>H NMR som en blanding av rotomerer (500 MHz, CDC13) 5 7, 40-7, 00 (m) , 6, 95-6, 87 (m) , 5,95 (t) , 5,69 (t) , 4,66 (d) , 4,46 (d) , 4,12 (m) , 3,94 (s) , 3,92 (s) , 3,82 (s) , 3,81 (s) , 3,80 (s), 3,47 (s), 3,43 (dd), 3,34 (dd), 3,22 (s) , 3,15 (s), 3,03 (dd), 3,00 (s), 2,60 (dt), 2,45-2,22 (m), 1,80-1, 78 (m) .

Eksempel 24

For direkte å bestemme den neurotrofiske aktivitet av forbindelser beskrevet i foreliggende oppfinnelse ble neurittutvekst assayet utført med feokromocytoma PC12-celler som beskrevet av Lyons et al. (1994).

PC12-celler blir holdt ved 37 grader og 5% C02 i Dulbeccos' modifisert Eagles medium (DMEM) supplementert med 10% varme-inaktivert hesteserum, 5% varme-inaktivert fetal bovinserum (FBS), og 1% glutamat. Cellene blir så belagt ved 10<5> per brønn i 96 brønners plater belagt med 5 ^g/cm<2 >rottehale kollagen og tillatt å feste seg over natten. Mediumet erstattes derpå med DMEM, 2% varme-inaktivert hesteserum, 1% glutamat, 1-5 ng/ml NGF (Sigma) og va-rierende konsentrasjoner av forbindelse (0,1 nM-10 nM). Bakgrunns kontrollkulturen administreres med 105 ng/ml NGF alene uten forbindelse. Positive kontrollkulturer administreres med høy konsentrasjon av NGF (50 ng/ml). Forbindelsene som er beskrevet i foreliggende oppfinnelse forårsaker en signifikant økning i neurittutvekst i forhold til bakgrunns kontrollkulturer.

Claims (25)

1. Farmasøytisk akseptabel sammensetning omfattende: a) en neurotrofisk mengde av en forbindelse som har formel (I) : samt farmasøytiske akseptable derivater derav, hvor: Ri, B og D uavhengig av hverandre er: hydrogen, Ar, (Cl-C6), rett eller forgrenet alkyl, (C2-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, (C5-C7) cykloalkylsubstituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C5-C7) cykloalkyl substituert (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, (C5-C7) cykloalkenylsubstituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C5-C7) cykloalkenylsubstituert (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, Ar-substituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, eller Ar-substituert (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl; forutsatt at Ri ikke er hydrogen eller (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl; og hvor enhver av CH2~gruppene i nevnte alkylkjeden i Ri, B, og D eventuelt er erstattet med 0, S, SO, SO2 og NR; hvor R er hydrogen, (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C3-C4) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, eller (C1-C4) brodannende alkyl hvor en bro blir dannet mellom nitrogenet og et karbonatom av nevnte alkylkjede for å danne en ring, og hvor nevnte ring eventuelt er kondensert til Ar; hvor hver Ar uavhengig av hverandre er valgt fra fenyl, 1-naftyl, 2-naftyl, indenyl, azulenyl, fluorenyl og antrace-nyl, 2-furyl, 3-furyl, 2-tienyl, 3-tienyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, pyrrolyl, oksazolyl, tiazolyl, imidazolyl, pyrazolyl, 2-pyrazolinyl, pyrazolidinyl, isoksazolyl, isotriazolyl, 1,2,3-oksadiazolyl, 1,2,3-triazolyl, 1,3,4-tiadiazolyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, 1,3,5-triazinyl, 1,3,5-tritianyl, indolizinyl, indolyl, isoindolyl, 3H-indolyl, indolinyl, benzo[b]furanyl, benzo[b]tio-fenyl, lH-indazolyl, benzimidazolyl, benztiazolyl, pyrinyl, 4H-kinolizinyl, kinolinyl, 1,2,3,4-tetrahydroisokinolinyl, isokinolinyl, 1,2,3,4-tetrahydrokinolinyl, cinnolinyl, ftalazinyl, kinazolinyl, kinoksalinyl, 1,8-naftyridinyl, pteridinyl, karbazolyl, acridinyl, fenazinyl, fenotiazinyl eller fenoksazinyl; og hvor hver Ar eventuelt og uavhengig av hverandre er substituert med en til tre substituenter uavhengig valgt fra hydrogen, halogen, hydroksyl, nitro, -S03H, trifluormetyl, trifluormetoksy, (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, 0-((C1-C6) rett eller forgrenet alkyl), 0-benzyl, 0-fenyl, 1,2-metylendioksy, -NR5R.6, karboksyl, N-(C1-C6 rett eller forgrenet alkyl eller C3-C5 rett eller forgrenet alkenyl) kraboksamid, N,N-di-((C1-C6) rett eller forgrenet alkyl eller (C3-C5) rett eller forgrenet alkenyl), karboksamid, morfolinyl, piperidinyl, 0-M, CH2-(CH2) q-M, 0-(CH2)q-M, (CH2)q-0-M, og CH=CH-M; hvor R5 og R6 uavhengig av hverandre er valgt fra gruppen omfattende hydrogen, (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C2-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, benzyl eller R5 og R$ blir tatt sammen for å danne en 5-7-ledet heterocyklisk ring; M er valgt fra gruppen omfattende 4-metoksyfenyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, pyrazyl, kinolyl, 3,5-dimetyl-isoksazoyl, 2-metyltioazoyl, tiazolyl, 2-tienyl, 3-tienyl, 4-tienyl og pyrimidyl; og q er 0-2; J er valgt fra gruppen omfattende (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, Ar-substituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, Ar-substituert (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl eller cykloheksylmetyl; K er valgt fra gruppen omfattende (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, Ar-substituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, (C2-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, og Ar-substituert (C3-C6) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl; eller J og K blir tatt sammen med nitrogenet og karbonatomene til hvilket de respektivt er bundet for å danne en 5-7-ledet heterocyklisk ring som kan inneholde et heteroatom valgt fra 0, S, SO og S02; X er valgt fra gruppen omfattende Ar, -0R2, og -N(R3)R4; hvor R2 har samme definisjon som Ri; R3 og R4 har uavhengig av hverandre de samme definisjoner som B og D; eller R3 og R4 blir tatt sammen for å danne en 5-7-ledet heterocyklisk alifatisk eller aromatisk ring; og m er 0 eller 1; b) en neurotrofisk faktor; og c) et farmasøytisk akseptabelt bæremiddel.

2. Farmasøytisk akseptabel sammensetning ifølge krav 1, hvor nevnte forbindelse har formel: hvor: J og K er avhengig (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, eller Ar-substituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl; og w er 1 eller 2.

3. Farmasøytisk akseptabel sammensetning ifølge krav 1, hvor minst en av B eller D uavhengig av hverandre er representert av formelen - (CH2) r-(Z) - (CH2) S-Ar, hvor: r er 1-4; s er 0-1; og hvor Z er uavhengig av hverandre valgt fra gruppen omfattende 0, S, SO, S02 og NR; hvor R er valgt fra gruppen omfattende hydrogen, (C1-C4) rett eller forgrenet alkyl, (C3-C4) rett eller forgrenet alkenyl eller alkynyl, og (C1-C4) brodannende alkyl hvor en bro dannes mellom nitrogenet og Ar-gruppen.

4. Farmasøytisk akseptabel sammensetning ifølge krav 3, hvor nevnte forbindelse har formel: hvor: J og K er uavhengig av hverandre (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, eller Ar-substituert (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl.

5. Farmasøytisk akseptabel sammensetning ifølge krav 1, hvor: hver Ar er uavhengig av hverandre valgt fra fenyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, imidazolyl, indolyl, isoindolyl, kinolinyl, isokinolinyl, 1,2,3,4-tetrahydroisokinolinyl, eller 1,2,3,4-tetrahydrokinolinyl; hver Ar inneholder eventuelt og uavhengig av hverandre en til tre substituenter som uavhengig av hverandre valgt fra hydroksyl, nitro, trifluormetyl, (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, 0-((Cl-C6) rett eller forgrenet alkyl), halogen, S03H, eller -NR3R4.

6. Farmasøytisk akseptabel sammensetning ifølge krav 2, hvor nevnte forbindelse er valgt enhver av forbindelsene 6-10, 12, 16-19, 21 eller 23, som definert i tabell I neden-for :

7. Farmasøytisk akseptabel sammensetning ifølge krav 6, hvor nevnte forbindelse er valgt fra gruppen bestående av: (S)-N-Metyl-2-(metyl-(2-okso-2-(3,4,5-trimetoksyfenyl)ace-tyl) amino)-3-fenyl-N-(3-pyridin-4-yl-l-(2-pyridin-4-yl-etyl)propyl)propionamid (forbindelse 7); (S)-N-Metyl-2-(metyl-(2-okso-2-(3,4,5-trimetoksyfenyl) acetyl)amino)-3-fenyl-N-(3-pyridin-3-yl-l-(2-pyridin-3-yl-propyl)butyl)propionamid (forbindelse 8); (S)-N-Metyl-2-(metyl-(2-okso-2-(3,4,5-trimetoksyfenyl) acetyl)amino)-3-(4-klor-fenyl)-N-(3-pyridin-4-yl-l-(2-pyridin-4-yl-etyl)propyl)propionamid og (S)-N-Metyl-2-(metyl-(2-okso-2-(3,4,5-trimetoksyfenyl) acetyl)amino)-3-(4-klor-fenyl)-N-(3-pyridin-3-yl-l-(2-pyridin-3-yl-propyl)butyl)propionamid.

8. Farmasøytisk akseptabel sammensetning ifølge krav 1, hvor nevnte neurotrofisk faktor er valgt fra nervevekst faktor (NGF), insulin vekstfaktor (IGF) og aktive avkortede derivater derav, sur fibroblast vekstfaktor (aFGF), basisk fibroblast vekstfaktor (bFGF), blodplateavledet vekstfaktor (PDGF), hjerneavledet neurotrofisk faktor (BDNF), siliær neurotrofiske faktorer (CNTF), glial celleavledet neurotrofisk faktor (GDNF), neurotrofin-3 (NT-3) og neurotrofin 4/5 (NT-4/5).

9. Farmasøytisk akseptabel sammensetning ifølge krav 8, hvor nevnte neurotrofisk faktor er nerve vekstfaktor (NGF).

10. Anvendelse av en neurotrofisk mengde av en forbindelse av formel I for fremstilling av et medikament for stimulering av neurittvekst hos en pasient eller i en ex vivo ner-vecelle, hvor nevnte forbindelse av formel (I) har struktu-ren : Ri, B, D, J, K, X og m er som definert i krav 1.

11. Anvendelse ifølge krav 10, hvor nevnte forbindelse har formel: hvor: J, K og w er som definert i krav 2.

12. Anvendelse ifølge krav 10, hvor minst en av B eller D uavhengig av hverandre er representert av formelen - (CH2) r-(Z) - (CH2) s-Ar, hvor: r, s og Z er som definert i krav 3.

13. Anvendelse ifølge krav 12, hvor nevnte forbindelse har formelen: hvor: K er som definert i krav 4.

14. Anvendelse ifølge krav 10, hvor: hver Ar uavhengig av hverandre er valgt fra fenyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, imidazolyl, indolyl, isoindoyl, kinolinyl, isokinolinyl, 1,2,3,4-tetrahydroisokinolinyl, eller 1,2,3,4-tetrahydrokinolinyl: og hver Ar inneholder eventuelt og uavhengig av hverandre en til tre substituenter uavhengig valgt fra hydroksyl, nitro, trifluormetyl, (C1-C6) rett eller forgrenet alkyl, 0-((Cl-C6) rett eller forgrenet alkyl), halogen, SO3H, eller - NR3R4.

15. Anvendelse ifølge krav 11, hvor nevnte forbindelse er valgt fra enhver av forbindelsene 6-10, 12, 16-19, 21 eller 23, som definert i tabell I.

16. Anvendelse ifølge krav 15, hvor nevnte forbindelse er valgt fra gruppen bestående av: (S)-N-Metyl-2-(metyl-(2-okso-2-(3,4,5-trimetoksyfenyl)ace-tyl) amino)-3-fenyl-N-(3-pyridin-4-yl-l-(2-pyridin-4-yl-etyl)propyl)propionamid (forbindelse 7); (S)-N-Metyl-2-(metyl-(2-okso-2-(3,4,5-trimetoksyfenyl)ace-tyl) amino)-3-fenyl-N-(3-pyridin-3-yl-l-(2-pyridin-3-yl-propyl)butyl)propionamid (forbindelse 8); (S)-N-Metyl-2-(metyl-(2-okso-2-(3,4,5-trimetoksyfenyl)ace-tyl) amino)-3-(4-klor-fenyl)-N-(3-pyridin-4-yl-l-(2-pyridin-4-yl-etyl)propyl)propionamid og (S)-N-Metyl-2-(metyl-(2-okso-2-(3,4,5-trimetoksyfenyl)ace-tyl) amino)-3-(4-klor-fenyl)-N-(3-pyridin-3-yl-l-(2-pyridin-3-yl-propyl)butyl)propionamid.

17. Anvendelse ifølge ethvert av kravene 10-16, hvor nevnte pasient lider av Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, ALS, multiple sklerose, slag og iskjemi assosiert med slag, neural paropati, andre neurale degenerative sykdommer, motorisk neuron sykdommer, sciatisk sammenpressing, periferi neuropati, diabetisk neuropati, ryggmarg skade eller fasiell nervesammenpressing.

18. Anvendelse ifølge krav 17, hvor nevnte medikamnet ytterligere omfatter en neurotrofisk faktor.

19. Anvendelse ifølge krav 18, hvor nevnte neurotrofiske faktor er valgt fra nervevekst faktor (NGF), insulin vekstfaktor (IGF) og aktive avkortede derivater derav, sur fibroblast vekstfaktor (aFGF), basisk fibroblast vekstfaktor (bFGF), blodplatet-avledet vekstfaktor (PDGF), hjerneavledet neurotrofisk faktor (BDNF), siliær neurotrofisk faktorer (CNTF), glial celleavledet neurotrofisk faktor (GDNF), neurotrofin-3 (NT-3) og neurotrofin 4/5 (NT-4/5).

20. Anvendelse ifølge krav 19, hvor nevnte neurotrofiske faktor er nerve vekstfaktor (NGF).

21. Anvendelse ifølge ethvert av kravene 17-20, hvor nevnte pasient lider av diabetes-assosiert periferneuro-pati.

22. Anvendelse ifølge ethvert av kravene 10-16, hvor nevnte medikament anvendes for å stimulere ex vivo nerveregenerering.

23. Anvendelse ifølge krav 22, hvor nevnte medikament ytterligere omfatter en neurotrofisk faktor.

24. Anvendelse ifølge krav 23, hvor nevnte neurotrofisk faktor er valgt fra nervevekst faktor (NGF), insulin vekstfaktor (IGF) og aktive avkortede derivater derav, sur fibroblast vekstfaktor (aFGF), basisk fibroblast vekstfaktor (bFGF), blodplateavledet vekstfaktor (PDGF), hjerneavledet neurotrofisk faktor (BDNF), siliær neurotrofiske faktorer (CNTF), glial celleavledet neurotrofisk faktor (GDNF), neurotrofin-3 (NT-3) og neurotrofin 4/5 (NT-4/5).

25. Anvendelse ifølge krav 24, hvor nevnte neurotrofiske faktor er nervevekstfaktor (NGF).