NO320117B1 - Fremgangsmate for fremstilling av en arakidonsyreinneholdende olje, der oljen inneholder triglycerider, umodifisert sopptriglyceridolje og anvendelse derav. - Google Patents
Fremgangsmate for fremstilling av en arakidonsyreinneholdende olje, der oljen inneholder triglycerider, umodifisert sopptriglyceridolje og anvendelse derav. Download PDFInfo
- Publication number
- NO320117B1 NO320117B1 NO19973085A NO973085A NO320117B1 NO 320117 B1 NO320117 B1 NO 320117B1 NO 19973085 A NO19973085 A NO 19973085A NO 973085 A NO973085 A NO 973085A NO 320117 B1 NO320117 B1 NO 320117B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- ara
- oil
- arachidonic acid
- triglyceride
- amount
- Prior art date
Links
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 title claims abstract description 329
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 156
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 156
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 41
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 22
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 title claims description 9
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 title description 11
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 70
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 30
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 claims abstract description 24
- 241000907999 Mortierella alpina Species 0.000 claims abstract description 23
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 6
- 125000005457 triglyceride group Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 53
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 53
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 claims description 37
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 34
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 claims description 27
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims description 26
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 26
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 23
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 21
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 21
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 18
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 17
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 claims description 16
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical group CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 9
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 9
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 4
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 claims description 4
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 claims description 4
- 241001558147 Mortierella sp. Species 0.000 claims description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000020547 Peroxisomal disease Diseases 0.000 claims description 2
- 201000011252 Phenylketonuria Diseases 0.000 claims description 2
- 206010043118 Tardive Dyskinesia Diseases 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 claims description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 claims description 2
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 claims description 2
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 claims 2
- 125000005313 fatty acid group Chemical group 0.000 claims 2
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 claims 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 claims 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 claims 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 abstract description 97
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 31
- 239000000654 additive Substances 0.000 abstract description 9
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 abstract description 8
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 93
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 30
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 24
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 21
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 20
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 19
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 19
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 15
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 14
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 14
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 14
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 14
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 14
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 13
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 13
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 11
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 10
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 9
- 241000197220 Pythium insidiosum Species 0.000 description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 8
- 241000894007 species Species 0.000 description 8
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 7
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 7
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 7
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000001188 FEMA 4487 Substances 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 6
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 6
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 4
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 4
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 4
- 239000006453 gye - medium Substances 0.000 description 4
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 4
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 4
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 4
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 3
- 229940013317 fish oils Drugs 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- VOFUROIFQGPCGE-UHFFFAOYSA-N nile red Chemical compound C1=CC=C2C3=NC4=CC=C(N(CC)CC)C=C4OC3=CC(=O)C2=C1 VOFUROIFQGPCGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 description 3
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 2
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 150000002066 eicosanoids Chemical class 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- -1 fatty acyl triglyceride Chemical compound 0.000 description 2
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- KAQKFAOMNZTLHT-OZUDYXHBSA-N prostaglandin I2 Chemical compound O1\C(=C/CCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)[C@H](O)C[C@@H]21 KAQKFAOMNZTLHT-OZUDYXHBSA-N 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000012807 shake-flask culturing Methods 0.000 description 2
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 2
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 2
- DSNBHJFQCNUKMA-SCKDECHMSA-N thromboxane A2 Chemical compound OC(=O)CCC\C=C/C[C@@H]1[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)O[C@@H]2O[C@H]1C2 DSNBHJFQCNUKMA-SCKDECHMSA-N 0.000 description 2
- 238000001238 wet grinding Methods 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- 208000012657 Atopic disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N Isocaffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N(C)C=N2 LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000235575 Mortierella Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241001494715 Porphyridium purpureum Species 0.000 description 1
- 208000003286 Protein-Energy Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 241000206572 Rhodophyta Species 0.000 description 1
- 241000533293 Sesbania emerus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 238000003811 acetone extraction Methods 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 229960001948 caffeine Drugs 0.000 description 1
- VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N caffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1C=CN2C VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229910000366 copper(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- PYRZPBDTPRQYKG-UHFFFAOYSA-N cyclopentene-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CCCC1 PYRZPBDTPRQYKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000004332 deodorization Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 1
- DVSZKTAMJJTWFG-UHFFFAOYSA-N docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid Chemical class CCCCCCCCCC=CC=CC=CC=CC=CC=CC(O)=O DVSZKTAMJJTWFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000004626 essential fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000003804 extraction from natural source Methods 0.000 description 1
- 239000010685 fatty oil Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 235000019534 high fructose corn syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 description 1
- 230000008604 lipoprotein metabolism Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 235000020978 long-chain polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 206010026820 marasmus Diseases 0.000 description 1
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 description 1
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 230000010118 platelet activation Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000013630 prepared media Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000518 rheometry Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019190 thiamine hydrochloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011747 thiamine hydrochloride Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical group 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 230000006442 vascular tone Effects 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000037366 wrinkle cream Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6436—Fatty acid esters
- C12P7/6445—Glycerides
- C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C11/00—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions
- A23C11/02—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins
- A23C11/04—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing non-milk fats but no non-milk proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
- A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
- A23L33/12—Fatty acids or derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
- A61K31/202—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having three or more double bonds, e.g. linolenic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
- A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
- A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
- A61K31/23—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms
- A61K31/232—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms having three or more double bonds, e.g. etretinate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
- A61K8/36—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
- A61K8/361—Carboxylic acids having more than seven carbon atoms in an unbroken chain; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/92—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof
- A61K8/922—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof of vegetable origin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
- C11B1/10—Production of fats or fatty oils from raw materials by extracting
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Birds (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Pediatric Medicine (AREA)
- Psychology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
Description
Område for oppfinnelsen
Oppfinnelsen vedrører fremgangsmåte for fremstilling av
en arakidonsyreinneholdende olje, der oljen inneholder triglycerider, umodifisert sopptriglyceridolje og anvendelse derav.
Bakgrunn for oppfinnelsen
Arakidonsyre (ARA) er en langkjedet flerumettet fettsyre (PUFA) i omega-6-klassen (5, 8, 11, 14-eicosatetraen-syre, dvs. 20:4). ARA er den mest forekommende C20 PUFA i menneskekroppen. Den er svært alminnelig i organer som muskel og blodvev og spiller en hovedrolle som et strukturelt lipid hovedsakelig forbundet med fosfolipider i blod, lever, muskler og andre hovedorgansystemer. I tillegg til den primære rolle som et strukturelt lipid er også ARA den direkte forløper for flere sirkulerende eicosanoider, slik som prostaglandin E2(PGE2), prostasyklin I2 (PGI2) , tromboxan A2 (TXA2) og leuko-triener B4 (LTB4) og C4 (LTC4) . Disse eicosanoider har regula-toriske virkninger på lipoproteinmetabolisme, blodrheologi, vaskulær tonus, leucosyttfunksjon og blodplateaktivering.
Til tross for dens betydning for human metabolisme
kan ikke ARA syntetiseres de novo i mennesker. ARA syntetiseres ved elongering og avmetting av linolsyre (LOA), en essensiell fettsyre. Prosessen krever tilstedeværelse av enzymet A6-desaturase, et enzym som er tilstede i menneskekroppen i små mengder, Burre et al., Lipids, 25:354-356 (1990). På. grunn av dette må de fleste ARA tilføres gjennom kosten og dette er spesielt viktig under perioder med rask kroppsvekt, slik som i barndommen.
I løpet av de første leveår kan et barn doble eller tredoble sin vekt. Som følge av dette kreves forhøyede nivåer av ARA i den daglige kost. For å tilfredsstille dette økte behov inneholder human brystmelk store mengder ARA. Sanders et al., Am. J. Clin. Nutr., 31:805:813 (1987). ARA er den mest alminnelige C2o PUFA i brystmelk. Mange av de mødre som ammer sine barn, særlig vegetarianere, ville ha fordel av tilsetning av ARA i kosten. Mange mødre ammer imidlertid ikke sine barn, eller ammer ikke gjennom hele perioden med rask vekst av barnet, og velger isteden å benytte en morsmelkerstatning.
Ingen kommersielle morsmelkerstatninger som er kjent for søkeren inneholder ARA i triglyceridform. U.S. patent nr. 4670285 (Clandinin et al.), beskriver barns behov for fettsyrer deriblant ARA. For å tilveiebringe disse fettsyrer foreslår Clandinin et al. en blanding av eggeplomme, fiskeolje eller fosfolipider fra røde blodceller og vegetabilske oljer, som fettkomponenten i en foreslått morsmelkerstatning. Fiskeolje inneholder imidlertid store mengder av eicosapentansyre (EPA). Det er kjent at EPA senker ARA-syntese hos barn. Carlson, et al., INFORM, 1:306 (1990). Av denne grunn er det ønskelig at det var mulig å tilveiebringe ARA uten å samtidig tilføre ytterligere EPA. Dessuten inneholder eggeplommer en relativt lav konsentrasjon av ARA, slik at blandingen til Clandinin et al. ikke er økonomisk gj ennomførbar.
Ettersom ARA er til stede i animalske oljer, men ikke i vegetabilske oljer har fremstilling i kommersielle mengder forblitt et ønskelig, men vanskelig mål. Shinmen, et al., Microbiol. Biotech. 31:11-16 (1989) har beskrevet fremstillin-gen av ARA ved hjelp av en isolert sopp, Mortierella alpina, ved anvendelse av vanlig fermentering i kolbe med bevegelse.
(Se også japansk patent 1215245 til Shinmen et al.). Etter dyrking høstes organismene og tørkes og deres lipider ekstraheres fra soppbiomassen med et organisk løsningsmiddel og lipidene modifiseres kjemisk (kovalent). Lipidblandingen kan for eksempel hydrolyseres eller forandres til etylestere for så å kombineres med syklodekstrin før anvendelse som et kosttilskudd. Shinmen et al. hverken beskriver eller foreslår administrering av umodifiserte mikrobielle oljer.
Porphyridium cruentum, en rød mikroalge, kan dyrkes i dammer i store mengder og har et lipidinnhold som kan inneholde opp til 40 % ARA. Ahern, et al. Biotech. Bioeng. 25:1057-1070 (1983) . Dessverre er ARA i det vesentlige forbundet med galaktolipider, et sammensatt polart lipid som ikke er til stede i brystmelk. Dermed utgjør ikke bare den totale anvendbare ARA en fremstilt fraksjon på 1 % av biomassen, men ARA-formen er ikke egnet som en tilsetning i morsmelkerstatninger uten ytterligere modifisering.
US patent nr. 4870011 (Suzuki et al.) beskriver en fremgangsmåte for å erholde lipider, slik som Y~lin°lsyre fra soppslekten Mortierella. Y-lin°lsyren renses fra lipidblandingen i soppen.
DE 3603000A1 (Milupa) beskriver en meget flerumettet fettsyreblanding og anvendelse av denne som fettkomponenten i en morsmelkerstatning. Fettblandingen har et høyt innhold av henholdsvis ARA og docosaheksansyrer (DHA) i et forhold på 2,5:1, i tillegg til et stort innhold av kolesterol. Fettsyre-kildene er angitt å være visse typer av makroalger, fiskeoljer, organiske fettypen fra okse og gris eller høyrenset eggeplommeolje. En kilde til DHA og ARA er angitt å være makroalger av faecofytt og rhodofytt-typene. Det foreslås ikke å anvende noen mikrober som en oljekilde. Alge- og fiskeoljer omfatter også vanligvis EPA som hemmer ARA-syntese in vivo. Dessuten er ikke høyrenset eggeplommeolje en økonomisk ARA-kilde. Dessuten er det ikke gjort rede for et ARA-konsentrert additiv for supplementering til ferdig morsmelkerstatning.
WO-A 1-9213086 vedrører fremstilling av arakidonsyreinneholdende olje som i det vesentlige er fritt for EPA, imidlertid omfatter publikasjonen ikke dyrknings-manipulering av pH-betingelser for å øke ARA-innholdet i kulturen av ekstraherbar triglyceridolje.
Kyle, D. et al., "Ind. Appl. Singel Cell Oils", 1992, AOCS, Campaign, 111., s. 118-138, vedrører en triglyceridolje fra sopp inneholdende mer enn 4 0 % av en arakidonsyre og, avhengig av fermenteringstemperaturen, var EPA fraværende fra produktet. Publikasjonen beskriver imidlertid ikke anvendelse av Mortierella alpina stamme 1S-4 .
Følgelig er det et behov for en økonomisk, kommersielt gjennomførbar fremgangsmåte for fremstilling av ARA, fortrinnsvis uten samtidig fremstilling av EPA. Det er en målsetning med foreliggende oppfinnelse å tilfredsstille dette behov.
Det er også en målsetning med foreliggende oppfin-neise å tilveiebringe et additiv og en kilde for dette additiv, for anvendelse i en morsmelkerstatning slik at ARA-nivåene i formuleringen nærmer seg de samme nivåer som i human brystmelk.
En ytterligere målsetning med foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe en ARA-inneholdende soppolje for anvendelse i enterale, parenterale eller dermale produkter.
Oppsummering av oppfinnelsen
Oppfinnelsen vedrører fremgangsmåte for fremstilling av en arakidonsyreinneholdende olje, der oljen inneholder triglycerider hvori minst 25 % av fettsyrerestene er arakidonsyre (ARA) og mengden av eicosapentansyre (EPA)-restene i oljen ikke overskrider en femtedel av mengden av arakodonsyre (ARA)-restene, omfattende: (a) dyrking av Mortierella sp. i en fermentor med lufting, inneholdende kulturmedium; (b) opprettholdelse av pH mellom 5 og 6 i starten av dyrkingen; (c) opprettholdelse av pH mellom 7 og 7,5 i slutten av dyrkingen; og (d) innhøsting av biomasse fra fermentoren og utvin-ning av den arakidonsyreinneholdende olje fra biomassen.
Oppfinnelsen omfatter også umodifisert sopptriglyceridolje, betegnet ved at mer enn 50 % av fettsyrerestene er arakidonsyre (ARA)-rester til stede i triglyceridform, og hvori oljen ikke omfatter mer enn én tiendedel eidosapentansyre (EPA) i forhold til ARA. Også omfattet av oppfinnelsen er anvendelse av en umodifisert sopptriglyceridolje ifølge oppfinnelsen for å tilveiebringe triglyceridinneholdende arakidonsyre (ARA) til en morsmelkerstatning, hvor den umodifiserte sopptriglyceridoljen tilsettes til morsmelkerstatningen i en mengde som er tilstrekkelig til å tilveiebringe et arakidonsyre(ARA)-innhold tilsvarende mengden av arakidon-syre (ARA) i human brystmelk. Oppfinnelsen omfatter også anvendelse av en umodifisert sopptriglyceridolje ifølge oppfinnelsen for fremstilling av en morsmelkerstatning, som omfatter triglyceridinneholdende arakidonsyre (ARA) i en mengde som kan sammenlignes med mengden i human brystmelk, hvorved arakidon-syre (ARA) tilveiebringes ved tilføring til morsmelkerstatningen av en tilstrekkelig mengde av den umodifiserte sopp-triglyceridol jen.
Også omfattet av oppfinnelsen er anvendelse av en umodifisert sopptriglyceridolje ifølge oppfinnelsen for fremstilling av et preparat for tilveiebringelse av supplerende arakidonsyre (ARA) til et menneske med dette behov, hvorved den umodifiserte sopptriglyceridoljen formuleres i en farmasøytisk akseptabel doseform for å tilveiebringe en mengde arakidonsyre (ARA) som er effektiv til å tilveiebringe supplerende arakidonsyre (ARA) til mennesket. Oppfinnelsen omfatter videre anvendelsen av en umodifisert sopptriglyceridolje ifølge oppfinnelsen for fremstilling av et kosmetisk preparat, hvorved preparatet oljen er til stede i preparatet i en mengde som er effektiv til å understøtte opprettholdelse av hudfarge, når preparatet anvendes topisk.
Detaljert beskrivelse av foretrukne utførelsesformer
Med henholdsvis "ARA" og "EPA", som anvendt heri menes rester av hennholdsvis arakidonsyre og eicosapentansyre der restene er esterifisert med glyserol som en del av et fettacyltriglycerid eller et fosfolipid. Et preparat "mangler i det vesentlige EPA", som anvendt heri, når den resterende mengde av EPA i preparatet er mindre enn mengden som hemmer ARA-syntese når preparatet anvendes som et næringstilskudd. Med foreliggende oppfinnelse har det lykkes å tilveiebringe en økonomisk arakidonsyre (ARA)-kilde.
Med "mangler i det vesentlige", som anvendt heri, menes at EPA er til stede i en mindre mengde enn ca. én femtedel av ARA-mengden i oljen. Denne olje, en enkeltcelleolje, kan administreres direkte i en umodifisert form. Med "umodifisert", som anvendt heri, menes at de kjemiske egenskaper til fettsyrene, eller oljene ikke er blitt kovalent forandret. Dette innebærer for eksempel at en midlertidig modifisering til ARASCO eller ARA som kan reverseres etter opptak av oljen er innen rammen av foreliggende oppfinnelse.
Umodifiserte soppoljer ifølge oppfinnelsen tilveiebringer triglycerider hvor en relativt stor andel av fettsyrerestene er ARA (fortrinnsvis minst 40 % av fettsyrerestene er ARA, mer foretrukket minst 50 % av restene er ARA), og forholdet mellom ARA-restene og EPA-restene er også høy (minst 5:1, fortrinnsvis minst 20:1, vekt/vekt). En slik olje fra naturlige kilder er ikke beskrevet forut for foreliggende oppfinnelse. Mens triglycerider med en slik sammensetning kan syntetiseres kjemisk (for eksempel ved esterifisering av frie fettsyreblandinger med mye ARA eller transesterifisering med etylestere av en slik fettsyreblanding), kan modifisering av fettsyreblanding (f.eks. rensing, esterifisering, etc.) intro-dusere uønskede biprodukter. I motsetning tilveiebringer fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen triglycerider med ønsket sammensetning ved hjelp av ekstråksjon fra naturlige kilder.
Av de sopparter der fettsyrene til disse tidligere er karakterisert, er det funnet at de fleste ikke danner ARA. Weete, J. D., Fungal Lipid Biochemistry, Plenum Press, N.Y.
(1974). Av de arter som produserer ARA produserer mange, deriblant alle tidligere karakteriserte Pythium arter, signifikante mengder av eicosapentansyre (EPA) i tillegg til ARA. I Tabell 1 vises fettsyreprofilen til P. insidiosum sammen med fettsyreprofilen til andre sopparter. Det er uventet funnet at P. insidiosum produserer ARA uten forurensende produksjon av EPA. Høye EPA-nivåer i kosttilskudd resulterer i likhet med fiskeoljer i en reduksjon i evnen til å danne ARA fra linolsyre i kosten (LOA). Mens de sopparter som produserer både ARA og EPA kan anvendes i fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse, er det å foretrekke å anvende arter som ikke produserer signifikante mengder av EPA. Slike foretrukne arter omfatter Pythium insidiosum og Mortierella alpina. Begge arter er kommersielt tilgjengelige og er deponert i the American Type Culture Collective in Rockville, Maryland med respektivte aksesjonsnumre 28251 og 42430. P. insidiosum og M. alpina er anvendt som representative sopparter i denne beskrivelse. Selvfølgelig er også andre sopparter som produserer triglycerider inneholdende ARA og redusert EPA, som beskrevet heri er også omfattet av foreliggende oppfinnelse.
Étt av de betydelige problemene som overvinnes med foreliggende oppfinnelse er reduksjonen i ARA-biosyntese hos barn forårsaket av tilstedeværelsen av forhøyede mengder EPA i kosten. Dette problem kan løses ved å tilføre ARA til morsmelkerstatninger i mengder som i det vesentlige er lik det som finnes i human brystmelk. I human brystmelk er vanligvis forholdet mellom henholdsvis ARA:EPA 20:1. Foreliggende oppfinnelse omfatter spesifikt enhver mikrobiell olje som tilveiebringer en tilstrekkelig mengde av ARA for å overvinne de negative virkninger av EPA i kosten. Anvendelsen av ARA-inneholdende olje vil resultere i et ARA:EPA-forhold på fortrinnsvis minst 5:1. Mer foretrukket ville et forhold på minst ca. 10:1 og mest foretrukket ville et forhold på minst ca. 20:1 være. Det kan se ut til at jo høyere mengde av ARA det er i det endelige produkt, med hensyn til mengde av EPA, jo bedre
blir resultatet.
Ved en fremgangsmåte ifølge oppfinnelsen dyrkes soppen under egnede dyrkingsbetingelser for produksjon av ARA-inneholdende olje. Generelt er teknikker for soppdyrking godt kjent for fagfolk på området og disse teknikker kan anvendes ved foreliggende fremgangsmåte. Dyrking av en inokulerende soppmengde kan for eksempel skje i kultur i vann i ristekol-ber. Kolbene tilveiebringes med et vekstmedium, inokuleres med soppmycelium og dyrkes på en frem- og tilbakegående rister i ca. tre til fire dager.
Sammensetningen av vekstmediet kan variere, men må alltid inneholde karbon- og nitrogenkilder. En foretrukket karbonkilde er glukose i mengder som kan variere fra ca. 10-100 gram glukose pr. liter vekstmedium. Vanligvis anvendes ca. 15 gram pr. liter ved ristekolbekultur. Mengden kan variere avhengig av ønsket tetthet i den endelige kultur. Andre karbonkilder som kan anvendes omfatter melasse, maissirup med mye fruktose, hydrolysert stivelse eller enhver annen vanlig karbonkilde til lav pris anvendt ved fermenteringsprosesser. Dessuten kan laktose tilveiebringes som en karbonkilde for P. insidiosum. Mysepermeat, som inneholder mye laktose og som er en meget billig karbonkilde, kan derved anvendes som et sub-strat. Egnede mengder av disse karbonkilder kan bestemmes med letthet for fagfolk på området. Vanligvis må ytterligere karbon tilsettes i løpet av dyrkningstiden. Dette fordi organismene forbruker så mye karbon at tilsetning av alt i en sats kunne være uhåndterlig.
Nitrogen tilveiebringes vanligvis i form av gjærekstrakt, i en konsentrasjon fra ca. 2 til ca. 15 gram ekstrakt pr. liter vekstmedium. Fortrinnsvis tilsettes ca. fire gram pr. liter. Andre nitrogenkilder kan anvendes, deriblant pepton, trypton, mais bløtgjort i væske, soyamel, hydrolysert vegetabilsk protein, etc. Tilsatt mengde av disse kilder kan med letthet bestemmes av fagfolk på området. Nitrogen kan tilsettes satsvis, dvs. alt på en gang forut for dyrkning.
Etter dyrking i 3-4 dager ved en egnet temperatur, vanligvis ca. 25-30 °C, er en tilstrekkelig mengde sopp vokst til å anvendes som et inokulum i en vanlig fermenteringstank ved bevegelse (STF). Slike fermentorer er kjent for fagfolk på området og er kommersielt tilgjengelige. Fermentering kan utføres i sats, sats med tilføring eller på kontinuerlige fermenteringsmåter. Fortrinnsvis bør STF være utstyrt med en marin impeller, selv om en Rushton-turbinimpeller også kan anvendes.
Fermentoren behandles ved å tilsette de ønskede karbon- og nitrogenkilder. En 1,5 liters fermentor kan for eksempel behandles ved å blande ca. 50 gram glukose og ca. 15 gram gjærekstrakt pr. liter kranvann. Som diskutert tidligere kan andre karbon- og nitrogenkilder eller blandinger derav anvendes.
Reaktoren inneholdende næringsløsningen bør sterili-seres, for eksempel ved oppvarming forut for inokulering. Etter avkjøling til ca. 30 °C kan inokulummet tilsettes og dyrking startes. Gassutveksling utføres ved luftspredning. Luftspredningsgraden kan variere, men bør fortrinnsvis justeres fra ca. 0,5 til ca. 4,0 WM (luftvolum pr. fermentorvolum pr. minutt). Nivået av oppløst oksygen holdes fortrinnsvis på fra ca. 10 % til ca. 50 % av luftmetningsverdien til oppløsningen. Følgelig kan justeringer i spredningsgraden være krevet under dyrkingen. Bevegelse er ønskelig. Bevegelsen tilveiebringes av impelleren. Bevegelsesperiferihastigheten settes fortrinnsvis innen et nivå fra ca. 50 cm/sek til 500 cm/sek, fortrinnsvis fra ca. 100 til 200 cm/sek.
Generelt kan inokulummengden variere. Vanligvis kan fra ca. 2 volum% til ca. 10 volum% inokulum anvendes. Fortrinnsvis kan ca. 5 volum% podestoff anvendes i et fermentorså-ingsspreder (seed train).
Næringsnivåene bør kontrolleres. Når glukosenivåene synker under 5 g/l bør ytterligere glukose tilsettes. Ved en vanlig dyrkningssyklus anvendes ca. 100 gram glukose og ca. 25 gram gjærekstrakt pr. liter. Det er vanlig å redusere nitro-genmengden i løpet av dyrkingen ettersom dette fremmer ol-jeproduksjonen fra soppen. Dette gjelder særlig når M. alpina anvendes som produksjonsorganisme.
I en særlig foretrukket utførelsesform kan Mortierella alpina med høyt oljeinnhold, i tillegg til høye nivåer av
ARA, dyrkes i en fermentor ved anvendelse av meget høye næringsnivåer. Det ble uventet oppdaget at nivåene av nitrogenin-neholdende næringsstoff i overskudd av det tilveiebragt ved 15 gram/liter gjærekstrakt kan tilsettes i starten av fermenteringen så lenge som den totale mengde av karboninneholdende næringsstoff tilsatt i løpet av fermenteringen er tilsvarende høy. Den totale mengde av karbonnæringsstoff, fortrinnsvis tilført kontinuerlig eller med avbrudd i løpet av de første 24-50 % av fermenteringstiden eller i aliquoter ved flere tidspunkter i løpet av samme tidsperiode, vil fortrinnsvis tilsvare 75-300 gram glukose pr. liter kulturmedium (C:N-forhold >5:1, uttrykt som vekt/vekt glukose:gjærekstrakt). Det er særlig foretrukket at nitrogennæringsmidlet er soyamel, tilsatt i en mengde på ca. 16 gram pr. liter medium og kar-bonnæringsstof f et er innledningsvis til stede i en mengde tilsvarende ca. 80 gram glukose eller mer. Ved anvendelse av store mengder karbon- og nitrogennæringsstoffer er det ønskelig å sterilisere løsninger inneholdende de to næringsmidde1-oppløsninger separat. Det er også oppdaget at biomasseutbyttet kan økes for fermenteringer inneholdende store mengder av karbonnæringsstoffer ved å holde tilbake en del av nitrogen-næringsstof f et og tilføre det resterende nitrogennæringsstoffet kontinuerlig eller i én eller flere aliquoter i løpet av fermenteringstiden.
Av og til produserer kulturen en overskuddsmengde av skum. Eventuelt kan et antiskummende middel, slik som de kjent for fagfolk på området, for eksempel Mazu 310 eller vegetabilsk olje tilsettes for å forebygge skum.
Temperaturen i kulturen kan variere. Sopp som produserer både ARA og EPA ser ut til å produsere mindre EPA og mer ARA når de dyrkes ved høyere temperaturer. Når for eksempel Mortierella alpina dyrkes under 18 °C begynner EPA å produ-seres. Av denne grunn er det ønskelig å holde temperaturen på et nivå som induserer foretrukket produksjon av ARA.' Egnede temperaturer er vanligvis fra ca. 25 °C til ca. 30 °C.
Dyrking fortsetter fortrinnsvis inntil en ønsket biomassetetthet oppnås. En ønskelig biomasse er ca. 25 g/l av organismen. En slik biomasse oppnås vanligvis innen 48-72 timer etter inokulering. På dette tidspunkt inneholder organismene vanligvis ca. 5-40 % komplekse lipider, dvs. olje, der ca. 10-40 % er ARA eller fortrinnsvis minst 40 % er ARA-rester i triglyceridfraksjonen, mer foretrukket minst 50 % ARA i triglyceridfraksjonen, som så kan innhøstes.
Soppfermentering for produksjon av ARA ifølge oppfinnelsen kan utføres i fermenteringsmedium med pH mellom ca. 5 og 8. Utbytter av biomasse, olje og ARA fra M. alpina-kulturer kan imidlertid økes ved profilering? av pH i mediet fremfor å tillate ukontrollert økning av pH. Utbytter kan også økes ved å ha høye oksygennivåer under fermenteringen. 'Disse modifika-sjoner i fermenteringsprosedyren er spesielt effektive ved anvendelse av høye næringsnivåer i fermentoren.
Når det innledningsvise nitrogennæringsmiddelnivået overskrider ekvivalenten på ca. 15 gram gjærekstrakt pr. liter og/eller karbonnæringsmiddelnivået overskrider ekvivalenten på ca. 150 gram glukose pr. liter kan soppveksten hemmes. Denne veksthemming kan overvinnes ved tilføringssatsfermentering, for eksempel ved å dele opp næringsmidlet ved fermenteringen inn i aliquoter som tilføres regelmessig til fermentoren når noe eller alt næringsstoffet, tilført ved den tidligere aliquot, er metabolisert. Fordelen med å overvinne vekstinhibering kan oppnås ved tilføring av kun karbonnæringsstoffet (se Shinmen et al.). Det har blitt oppdaget at denne fordel også kan erholdes ved oppdeling av det totale næringsstoff i aliquoter og tilføre aliquotene i løpet av fermenteringen, eller ved tilføring av næringsstoffløsningen kontinuerlig. Det har likeledes uventet blitt oppdaget av denne fordel kan oppnås ved tilføring av nitrogennæringsstoffet kun til fermentering er der karbonnæringsstoffet innledningsvis er til stede i et høyt nivå.
Det er også uventet oppdaget av vekstinhibering kan dempes ved pH-profilering av fermenteringen eller ved opprettholdelse av høyt oksygentrykk i fermentoren, eller begge deler. Det er oppdaget at fermentering av M. alpina i høyt næringsmiddelmedium ved lav pH (pH = 5-6) resulterer i øket biomassevekt (og også øket oljeutbytte). Oljen fremstilt under disse betingelser har imidlertid lavere mengder av ARA-rester i oljen. I motsetning resulterer fermentering ved høy pH (pH = 7-7,5) i økte nivåer av ARA i oljen men dårligere vekst. En foretrukket fremgangsmåte omfatter at fermenteringsfremgangs-måten ifølge oppfinnelsen involverer pH profilering der pH er lav i løpet av den tidlige fasen av fermenteringen og høy i løpet av de senere stadier. Tidligere stadier omfatter perioder med rask (eksponentiell) vekst samtidig med at nær-ingsstoffene raskt metaboliseres; sene stadier omfatter den stasjonære fase når celledeling har stoppet, vanligvis som følge av utilstrekkelige mengder av ett eller flere nærings-stoffer og produksjonen av ARA-rik olje har øket. Profilering kan utføres ved kontroll av pH i fermentoren til nivåer som justeres i to eller flere stadier spredt utover fermenterings-perioden.
Likeledes er det oppdaget at opprettholdelse av det oppløste oksygeninnhold i mediet (D.O.) på høye nivåer (f.eks.
>40 % av luftmetningsnivå) resulterer i reduksjon av vekstin-hiberingen som følge av høye næringsmiddelnivåer og/eller økning av frigjøringen av ARA-rester i oljen. D.O. kan opprettholdes på et høyt nivå ved økning av kartrykket (presse mer luft inn i fermentortopprommet), øke bevegelsen (f.eks. øke periferihastigheten til impelleren) og øke (dvs. øke mengden av luft som passerer gjennom fermentoren i løpet av en gitt tid, vanligvis uttrykt som økning i WM, luftvolum pr. fermentorvolum pr. minutt) og/eller ved å øke 02-innholdet i overluften (sparge gas). Det er funnet at fermentering under disse betingelser øker karbonforbruket, noe som resulterer i tørre endelig biomassekonsentrasjon og større produksjon av ARA-rik olje i fermentoren. Fermenteringer hvor én eller flere av de ovennevnte modifiseringer er innført resulterer særlig i produksjon av ekstraherbare triglyceridolje med minst 40 % ARA-rester og fortrinnsvis minst 50 % ARA-rester.
I en særlig ønsket utførelsesform inneholder fer-menteringsmediet karbonnæringsstoffer ekvivalent med > 80 g/L glukose og nitrogennæringsmiddel ekvivalent med > 16 g/l gjærekstrakt og mediet justeres til pH mellom 5 og 6 etter sterilisering. Etter inokulering kontrolleres pH i mediet på eller like over det innledende nivå. Etter at karbonnæringsmiddelnivået har sunket til < 60 gram glukose ekvivalent/liter (vanligvis ca. 48 timer), forandres innstilt pH-kontroll til ca. pH > 6. På eller omkring tidspunktet for når oksygenop-ptaksgraden (og/eller karbondioksidutviklingsgraden, CER) når sitt maksimum (vanligvis etter ca. 72 timer) heves innstilt verdi til pH mellom 6,5 og 7 (vanligvis økende, f.eks. i en grad på ca. 0,1 pH-enheter pr. time). pH kontrolleres så på et nivå under ca. pH = 7-7,5 i de siste stadier av fermenteringen .
I foreliggende utførelsesform opprettholdes nivået av oppløst oksygen på et minimum (D.O.) nær eller over 40 % av luftmetningsnivået, fortrinnsvis ved regelmessig økning av kartrykket til 11 psi, økning av rystingen til ekvivalenten på ca. 300 cm/sek impellerperiferihastighet, og økning av luftingen til ca. 0,5 volumenheter luft pr. fermentorvolum pr. minutt. Etter en periode med rask vekst og høyt 02-opptak av fermentorblandingen vil vekst (og 02-opptak) synke. Risting/lufting kan reduseres ved dette punkt, så lenge som D.O. opprettholdes på et høyt nivå, vanligvis over ca. 40 % luft-metting.
Ved optimalisering av fermenteringen av M. alpina som beskrevet heri er det mulig å erholde meget store utbytter av biomasse inneholdende 20-60 % olje i biomassen, der 25-70 . vekt% av oljen er ARA-rester i triglyceridform. Biomassen (og olje) kan innhøstes som beskrevet heri. Fortrinnsvis innhøstes biomassen fra fermentoren innen 48 timer etter at maksimal produktivitet er nådd, målt som gram ARA/L/dag.
Høsting kan utføres ved hjelp av enhver egnet fremgangsmåte, f.eks. slik som filtrering, sentrifugering eller spraytørking. På grunn av lavere kostnad kan filtrering være foretrukket.
Etter innhøsting kan mycelmassen ekstraheres. Mycelmassen refererer seg til oppsamlingen av biomasse som er resultatet etter innhøsting. Massen kan være løs eller pres-set, smuldrete eller ikke-smuldrete. Restvann kan eventuelt fjernes fra massen ved vakuumtørking, fluidumsengtørking, spraytørking eller lyofilisering, før ekstraksjon. Dersom dette velges er det ønskelig å anvende upolare løsningsmidler for å ekstrahere den ARA-inneholdende olje. Ethvert upolart ekstrakt er egnet, men heksan er foretrukket.
I en foretrukken utførelsesform ekstraheres olje fra den tørkede biomasse ved hjelp av våtmaling eller filtrering med ren heksan. Løsningsmidlet tilsettes vanligvis i et forhold mellom løsningsmiddel og biomasse på ca. 5:1 (vekt/vekt). Etter våtmaling separeres de faste stoffer fra ekstraktet ved hjelp av dekantering eller sentrifugering. Det er fordelaktig å holde det løsningsmiddelinneholdende ekstrakt (miscella) anaerobt for å unngå oksidering av de umettede fettsyrerester i oljen. Løsningsmidlet fjernes fra miscella for å danne en uren soppolje.
Urent oljeekstrakt fra soppbiomasse med upolar løsningsmiddel kan være grumset, særlig når biomassen er malt, fordi maling kan frigjøre fine partikler slik som celleveg-gfragmenter og oppløselige polysakkarider. Klaring av slik grumset olje kan utføres ved oppløsning av uren olje i mer polare oppløsningsmidler, slik som aceton eller alkohol. I en foretrukket utførelsesform klares urent oljeekstrakt av soppmycelium ytterligere ved hjelp av acetonekstraksjon/presipitering. En acetonmiscelle forenes ved tilføring av aceton til grumset urent oljeekstrakt (fortrinnsvis til et nivå på ca. 20 % olje; dvs. ca. 4 volumer aceton pr. volum uren olje), blandes godt og blandingen hensettes for en periode tilstrekkelig for presipitering av de fine partikler (vanligvis ca. 1 time ved romtemperatur). Den oljeinneholdende acetonmiscelle klares ved sentrifugering og/eller filtrering og fjerning av løsningsmiddel for så å danne acetonklaret soppolje. Acetonklaret soppolje er foretrukket for ytterligere bearbeidelse
(for eksempel degummiering, bleking og luktfjerning ved hjelp av vanlige teknikker) ettersom de fine partikler (fines) fremstilt i løpet av ekstraksjon av soppbiomassen vil interferere med forbedringsprosesser dersom de ikke fjernes i acetontrin-net.
En annen foretrukken utførelsesform omfatter mot-strømsekstraksjon av tørr biomasse, noe som kan utføres ved kommersielt tilgjengelige ekstraksjonsenheter, for eksempel de produsert av Crown Ironworks (Crown Mark IV) eller French, Inc., som ikke generelt anvendes for å ekstrahere vegetabilske oljer, men som er laget for å ekstrahere skitt og jord. Selv om ekstraksjonseffektiviteten ikke er så høy uten ny maling av biomassen har motstrømsekstraksjonsprosedyren fordelen av å danne færre "småpartikler" ("fines") for derved å redusere den tekniske vanskelighet med å gjenvinne en klar, renset olje.
Alternativt kan den våte masse (som vanligvis inneholder ca. 30-50% faste stoffer) smuldres og ekstraheres direkte ved anvendelse av polare løsningsmidler, slik som etanol eller isopropylalkohol, eller overkritisk væskeekstrak-sjon med løsningsmidler slik som CO2 eller NO. Fortrinnsvis oppsmuldres massene forut for ékstraksjon. Fordelen er at foreliggende oppfinnelse tillater økonomisk anvendelse av overkritisk væskeekstraksjonsteknikker. McHugh, et al., Super-critical Fluid Extraction, Butterworth (1986). Slike teknikker er kjent for fagfolk på området og omfatter de tidligere anvendt, for eksempel for å fjerne koffein fra kaffebønner.
En foretrukket fremgangsmåte for vandig ékstraksjon omfatter blanding av mycelbiomassen med det polare løsnings-midlet av isopropylalkohol i en egnet reaksjonskjele. Slike kjeler er kjent. Anvendelsen av tre til seks deler av løs-ningsmiddel pr. del biomasse er ønskelig. Det er mest ønskelig at blandingen utføres under nitrogen eller ved tilstedeværelse av antioksidanter for å forebygge oksidering av ARA i lipidekstraktet. "Lipidekstrakt", "olje", "lipidkompleks" og "soppolje", som anvendt heri, er anvendt om hverandre.
Etter ékstraksjon kan blandingen filtreres for å fjerne biomassen fra løsningsmidlet inneholdende lipidekstraktet. På dette punkt kan biomassen gjenvinnes og anvendes som kosttilskudd. Med "kosttilskudd", som anvendt heri menes føde eller et additiv som kan blandes med vanlig føde, slik som korn, etc. som kan gis til dyr.
Løsningsmidlet separeres fra lipidekstraktet og kan også gjenvinnes for gjenanvendelse, ved fordampning til en egnet oppsamler, for å få det som er kalt "uren olje". Anvendelse av isopropylalkohol som løsningsmiddel fører til fjerning av alt restvann fra den urene olje ettersom fordampning fjerner vann/isopropylalkoholazeotropen som er dannet spon-
tant.
Ettersom den urene olje kan anvendes uten ytterligere behandling kan den også renses ytterligere. Fremgangsmåter, slik som de anvendt ved behandlingen av lecitin fra vegetabilske produkter og kjent for fagfolk på området, kan anvendes i dette ytterligere rensingstrinn. Slike prosesser modifiserer ikke kjemisk eller kovalent de ARA-inneholdende lipider eller ARA i seg selv.
Utbytter varierer, men er vanligvis ca. 5 gram ARA-inneholdende fosfolipid pr. 100 gram tørket mycelium. Når det gjelder Af. alpina kan ytterligere 10-50 gram triglycerid pr. 100 gram tørr mycelium erholdes. Enten kan den urene olje eller det rensede produkt anvendes for administrering til mennesker. Begge skal omfattes av definisjonen av ARASCO som anvendt heri.
En mest foretrukket målsetning ifølge oppfinnelsen er å tilveiebringe et additiv for anvendelse i humane morsmelkerstatninger, slik at konsentrasjonen av ARA i slike formuler-inger kommer nær opp til konsentrasjonen av ARA i human brystmelk. Tabell 2 sammenligner sammensetningen av fettsyrer i ARASCO med innholdet av disse i brystmelk og morsmelkerstatninger som mangler og inneholder ARASCO.
Det går frem at mengden av ARA til stede i morsmelkerstatningen tilsatt ARASCO ligger nær opp til ARA-nivåene i human brystmelk. Den totale fettsyresammensetning i morsmelkerstatningen er dessuten ikke signifikant forandret som følge av tilsetning av ARASCO. Mellom ca. 50 til ca. 1000 mg ARASCO pr. liter morsmelkerstatning kan anvendes. Spesifikk mengde av ARASCO som er krevet avhenger av ARA-innholdet. Dette kan variere fra ca. 10 til 70 % av fettsyrene i oljen. Vanligvis er imidlertid ARA-innholdet ca. 30-50 %. Oljen anvendt for supplering av morsmelkerstatninger inneholder minst 40 % av fettsyrerestene i form av ARA, mer foretrukket minst 50 % i form av ARA-rester. Når ARA-innholdet er ca. 30 % er en supplementeringsgrad på ca. 600 til 700 mg av ARASCO pr. liter morsmelkerstatning særlig foretrukket. En slik grad fortynner de allerede tilstedeværende fettkomponenter i barneformulerin-gen, slik som Similac® (Ross Laboratories, Columbus, Ohio) med bare én del ARASCO til femti deler av formuleringens oljer. Likeledes kan fortynningsgrader beregnes for oljer med høyere ARA-innhold. Fortrinnsvis bør ARASCO i det vesentlige være fritt for EPA.
Når Pythium insidiosum anvendes i den beskrevne prosess er den ekstraherte ARA-inneholdende olje i det vesentlige fosfolipid. Det er imidlertid oppdaget av en signifikant mengde av triglycerid med mye ARA-rester også kan utvinnes fra P. insidiosum, dyrket som beskrevet heri. Når Mortierella alpina anvendes i prosessen utgjør den ARA-inneholdende olje i det vesentlige triglycerid. Begge former av ARASCO kan anvendes som additiver til morsmelkerstatning. Den første tilveiebringer ikke bare formularen med ARA, men også med en emul-gator, dvs. fosfatidylkolin, som vanligvis tilsettes til kommersielle formularer. Oljen fra M. alpina er sannsynligvis mer økonomisk å produsere.
Den ARA-inneholdende olje ifølge oppfinnelsen kan anvendes på mange måter i tillegg til anvendelse som et additiv i morsmelkerstatning. Som kjent for fagfolk på området finnes det mange sykdomstilstander forbundet med ARA-mangel, slik som marasmus (Vajreswari, et al., Metabolism 39:799-782
(1990), atopisk sykdom (Melnik, B., Monatsschr. Kinderheilta, 138:162:166 (1990), leversykdommer, fenylketonuri, schizofreni, tardivdyskinesi eller ulike peroksisomale forstyrrel-ser. I én utførelsesform av oppfinnelsen behandles disse sykdomstilstander ved administrering av en farmasøytisk effektiv mengde av oljen ifølge foreliggende oppfinnelse. Vanligvis er den farmasøytisk effektive mengde den mengde som er krevet for å normalisere serumnivået av ARA hos pasienten. Særlig foretrukket for supplementering for behandling av slike sykdomstilstander er høy-ARA-oljene beskrevet ovenfor, særlig oljer med minst 40 % ARA eller mer foretrukket 50 % ARA-rester. Oljen kan administreres enteralt, topisk, parenteralt, dette ut fra helsepersonellets vurdering.
Innkapsling er, som kjent av fagfolk på området, en effektiv fremgangsmåte for enteral administrering. Kapsler inneholdende soppoljen kan administreres til personer som har behov for eller ønsker kosttilskudd av ARA. En slik fremgangsmåte er særlig effektiv ved administrering av ARA til gravide eller ammende kvinner.
Der for eksempel ARASCO administreres for å bekjempe ARA-svikt forbundet med sykdomstilstander, bør en farmasøytisk effektiv mengde administreres. Denne mengde kan bestemmes av fagfolk på området uten unødig eksperimentering. Vanligvis er denne mengde 0,5-2,O/dag, noe som vanligvis vil normalisere serumnivået av ARA.
En annen utførelsesform av oppfinnelsen omfatter anvendelse av en umodifisert sopptriglyceridolje ifølge oppfinnelse for fremstilling av kosmetiske preparater inneholdende ARASCO, slik som høy-ARA-oljene beskrevet heri. Kosmetiske preparater refererer seg til de forbindelser anvendt som kosmetikk. Et foretrukket eksempel på et slikt preparat er en rynkekrem. Slike kosmetiske preparater tilveiebringer en effektiv måte for topisk påføring av ARA til huden for å bistå i å opprettholde hudfarge.
Eksempel 1
Fremstilling av P. insidiosum-lipid og tilsetning til morsmelkerstatning
I en 80 liters (totalt volum) fermentor ble 51 liter kranvann, 1,2 kg glukose, 240 gram gjærekstrakt og 15 ml MAZU 210S antiskum blandet. Fermentoren ble sterilisert ved 121 °C i 45 minutter. Ytterligere 5 liter kondensvann ble tilsatt i løpet av steriliseringsprosessen. pH ble justert til 6,2 og ca. 1 liter inokulum (ved en celletetthet på 5-10 g/l) fra Phytium insidiosum (ATCC #28251) ble så tillatt. Ristehas-tigheten ble justert til 125 RPM (250 cm/sek periferihastighet) og luftingsgraden ble satt til 1 SCFM (standard kubik-kfot pr. minutt). Etter 24 timer ble luftingsgraden øket til 3 SCFM. Ved 28 timer ble ytterligere 2 liter 50 % glukosesirup (1 kg glukose) tilsatt. Ved 50 timer ble fermentoren høstet, noe som resulterte i et utbytte på ca. 2,2 kg våtvekt (ca. 15 g tørrvekt) pr. liter. Innhøstet biomasse ble trykket til en meget fast masse (50 % faststoff) på et sugefilter forut for frysetørking. Den tørkede biomasse ble malt med en morter og pistill og ekstrahert med 1 liter heksan pr. 200 gram tørr biomasse ved romtemperatur under kontinuerlig bevegelse i 2 timer. Blandingen ble så filtrert og filtratet dampet for å gi ca. 5-6 gram uren olje pr. 100 gram tørr biomasse. Biomassen ble så ekstrahert på ny med 1 liter etanol pr. 20 gram tørr biomasse i 1 time ved romtemperatur, filtrert og løsningen ble fordampet noe som ga ytterligere 22 gram uren olje pr. 100 g tørr biomasse. Den andre fraksjon var i det vesentlige fosfolipider hvor den første fraksjon inneholdt en blanding av fosfolipider og triglycerider. De kombinerte fraksjoner produ-serte en olje inneholdende ca. 30-35 % arakidonsyre og ikke påviselige EPA. Denne olje ble tilsatt dråpevis til den kommersielle morsmelkerstatning Similac (Ross Laboratories, Columbus, Ohio) i en supplementeringsgrad på 60 mg pr. liter fremstilt medium.
Eksempel 2 Fremstilling av M. alpina-lipid og tilsetning
til morsmelkerstatning
Mortierella alpina (ATCC #42430) ble dyrket i en 2 liters ristekolbe inneholdende 1 liter kranvann og 20 gram potetdekstrosemedium. Kolben ble holdt i konstant orbital ' risting ved 25 °C i syv dager. Etter innhøsting ved hjelp av sentrifugering ble biomassen-frysetørket og ga ca. 8 gram lipidrik mycelium. Mycelium ekstrahert ved anvendelse av heksan som i Eksempel 1, noe som ga ca. 2,4 gram uren olje. Oljen inneholdt ca. 23 % arakidonsyre og ble tilsatt til den kommersielle formuleringen Similac dråpevis i konsentrasjoner på 1000 mg pr. liter.
Eksempel 3 Produksjon av arakidonsyre fra M. alpina
i stor skala
Inokuleringsfermentor inneholdende GYE-medium (50 g/l dekstrose og 6 g/L Tastone 154) ble inokulert med M. alpina. Fermenteringstemperatur ble satt til 28 °C, innledende risting ved 130-160 cm/sek, innledningsvis kartrykk på 6 psi og innledningsvis ristingsgrad på 0,25 WM. pH ble justert til 5,0 forut for sterilisering og innledningsvis fermenterings-pH ble satt til 5,5 etter sterilisering. Mediet ble holdt ved pH >
5,5 med 8N NaOH. Oksygennivå ble holdt ved D.O. > 40 % ved justering av risting/lufting på følgende måte: kartrykket ble øket til 11 psi; ristingen ble økt til 175 cm/sek impellerperiferihastighet; og luftingen ble økt til 0,5 VVM. Skum ble kontrollert ved tilsetning av Dow 1520-US antiskum etter behov. (Ca. 0,1 ml/L av antiskummet bør tilsettes til mediet forut for sterilisering for å hindre skumming.)
Inokulum ble overføret fra frøfermentor til hovedfer-mentor innen 12 timer etter at pH ble hevet til over 6,0.
Hovedfermentoren inneholdt GYE-medium (50 g/L dekstrose og 6 g/L Tastone 154); glukose ble sterilisert separat og tilsatt hovedfermentoren etter sterilisering. Fermentortemperaturen ble satt til 28 °C. Innledende risting til 160 cm/sek, innledende kartrykk til 6 psi og innledende luftingsgrad til 0,15 VVM. Innledende pH ble satt til 5,5 etter sterilisering og opprettholdt ved pH > 5,5 med 8N NaOH. pH ble tillatt å stige i løpet av metningsfasen (startet ca. 24 timer etter inokulering), men ble opprettholdt under pH 6,8 med H2S04-tilsetning. Oksygennivået ble opprettholdet ved D.O. > 40 % ved sekvensiell økning av kartrykket til 11 psi, økning av risting til 175 cm/sek periferihastighet og økning av luftingen til 0,5 VVM. Skumming ble kontrollert ved tilsetning av antiskum Dow 1530-US etter behov. (Ca. 0,1 ml/L av antiskummet bør tilsettes til mediet før sterilisering for å forebygge skumming).
Kulturen ble oppsamlet hver 12 time for analyse av biomasse og fettsyre, og innhøsting startet 3-4 dager etter at pH er hevet til 6,5. Tettheten av tørr biomasse bør være > 8,5 g/L. Glukosekonsentrasjonen i buljongen bør ha sunket fra 50 g/L til < 25 g/L. Ved innhøsting bør hele kulturbuljongen føres gjennom en kurvesentrifuge for å separere mycelium fra brukt medium, og biomassen tørkes.
Eksempel 4 Forbedret utbytte av biomasse fra M. alpina -
første runde
M. Alpina ble dyrket i 20 L fermenteringstanker med bevegelse, inokulert fra ristekolbekultur, ifølge fremgangsmåten i Eksempel 3. M. alpina ble dyrket i 65 g/L glukose (Staelydex) og 6 g/L i gjærekstrakt (Tastone 154), noe som førte til produksjon av 12 g/L biomasse. Tilsetningen av ytterligere 6 g/L Tastone 154 ved 16 timer resulterte i produksjon av 18 g/L biomasse.
Eksempel 5 Forbedret utbytte av biomasse fra M. alpina-
andre runde
Forsøk ble utført i et forsøk på å øke biomassen ytterligere ved ytterligere tilsetninger av Tastone 154. Disse forsøk besto av 2 X 20 L fermenteringer med en oppholdstid på 168 timer. Ved begge disse fermenteringer var den innledende glukosekonsentrasjon på 100 g/L (til sammenligning, 65 g/L i Eksempel 4). Én fermentor mottok 3X6 g/L tilføringer av Tastone 154 og til den andre ble det tilført 4X6 g/L til-føringer. Gjærekstraktet ble laget som en konsentrert oppløs-ning, autoklavert og tilført til fermentoren til ulike tidspunkter etter sterilisering.
For å forberede inokulumet ble virksomme dyrkninger (1 ml bløtlagt mycelium) inokulert i 2 kolber, hver inneholdende 50 ml GYE-medium (100 g/L Staleydex, 6 g/L Tastone 154), og dyrket i 4 dager ved 28 °C og 150 rpm. Etter 4 dager med vekst inneholdt buljongen sammenpresset biomasse; pelletene var 2-5 mm i diameter. Veksten i disse kolber var langsommere enn forventet, antakelig som følge av den høyere konsentrasjon av glukose. Biomassen ble bløtlagt i 2 X 3 sek (sees) i en Waring-blander og 25 ml av den bløtlagte masse ble anvendt for å inokulere hver på 2 X 2,8 L Fernbach inokulumkolber, i 800 ml nettovolum. (I tidligere forsøk ble 10 ml bløtgjort masse anvendt. Mengden inokulum ble øket, på grunn av den reduserte biomassetetthet i dyrkingskolben og ettersom det var forventet at veksten kunne være langsommere i Fernbachs, som følge av høyere glukosekonsentrasjon.) Mediet i Frenbachkolbene var dekstrose (Staleydex) 100 g/L og gjærekstrakt (Tastone 154), 8 g/L. Dekstrosen og gjærekstraktet ble autoklavert separat i 40 minutter. Fermenteringsdyrkingstemperaturen ble opprettholdt ved 28 °C og risting ved fra 100 til 150 rpm.
Etter 44 timers dyrking i Fernbach-kolbene ble inokulumet overført til 2 X 20 L fermentorer. Inokulumet var i form av meget løse hyfale? aggregater og tettheten til biomassen var. ca. 5,2 g/L.
Fermentorer ved stasjonene 14 og 15, inneholdende 1,6 kg (10 %) dekstrose (Staleydex), og Mazu 204 antiskum (1,6 g, oppløst i 12,5 L R.O. H20), ble sterilisert i 45 minutter ved 122 °C. 800 ml inokulum (5%) ble så tilsatt til hver fermentor (ved 0 time). Fermentoroperasjonsparametrene var:
temperatur: 28 °C.
pH: kontrollert ved 5,5 med 2 N NaOH og 2N H2S04, lufting: 0,5 VVM,
mottrykk: 0,2 bar,
risting (innledningsvis): 80 cm/sek, og D.O.: kontrollert over 40 %.
Stasjon 14: 3X5 g/L Tastone 154
Gjærekstrakt (Tastone 154) ble oppløst til en konsentrasjon på 96 g/L og autoklavert i 1 time. Gjærekstrakttil-førsler i 3 X 1 L mengder (1,8 %) ble gjort ved 1,20 og 26 timer.
Ved 15 timer sank DO til under 40 % og risting ble øket gradvis til 175 cm/sek fra 15 til 22 timer. DO ble så kontrollert ved å endre luftstrømmen med oksygen; oksygen ble tilsatt luftstrømmen fra 23 til 72 timer. Ristingen ble ytterligere øket, start ved 36 timer for å sikre passende blanding. Ved 48 timer var ristingen øket til 200 cm/sek; ved 72 timer til 250 cm/sek; og ved 80 timer til 280 cm/sek. Ved 120 timer ble ristingen øket til 290 cm/sek for å fremme tilstrekkelig temperaturkontroll. Ved 144 timer ble ristingen redusert til 280 cm/sek.
Stasjon 15 4X6 g/L Tastone 154
Gjærekstrakt (Tastone 154) 384 g ble løst i 96 g/L og autoklavert i 1 time. Tilsetninger av gjærekstrakt i 4 X 1 L-mengder (2,4 %) ble gjort ved 0,20, 26 og 32 timer.
Ved 16 timer sank DO under 40 % og ristingen ble øket gradvis til 175 cm/sek ved 23 timer. DO ble så kontrollert å være over 4 0 % ved å forandre luftstrømmen med oksygen; oksygen ble tilsatt luftstrømmen fra 23 til 72 timer. Ristingen ble ytterligere øket, startet ved 36 timer, for å sikre tilstrekkelig blanding. Ved 48 timer hadde ristingen blitt øket til 210 cm/sek; ved 72 timer, til 260 cm/sek; og ved 80 timer til 290 cm/sek. Ved 90 timer ble ristingen redusert til 280 cm/sek og ved 144 timer ble den redusert til 260 cm/sek.
Observasjoner:
Ved inokulering var biomassen i begge fermentorene meget løse, lette, hyfeaggregater. Ved 24 timer begynte pelleter å dannes. Pelletene var små (1-3 mm), med små sentrale kjerner og store og løse i periferien. Ved 48 timer var pelletene større og klarere definert. Ved 72 timer var periferiene smalere, og tilstedeværelsen av mange løse hyfale fragmenter indikerte at pelletene var fragmenterte. Ved 168 timer var pelletkjernene 0,5 til 2 mm i diameter, periferiene var redusert der hyfene var aggregert til tykke tråder og det var mange kondenserte hyfeaggregater.
Det ble kun dannet litt skum i fermentorene i de første 24 timer. Skummengden økte så og ble kontrollert ved manuell tilsetning av antiskum når skumtoppen var større enn 2-4 cm. Skummet sank noe ved 48 timer, selv om det var sporadiske utbrudd. Begge fermentorene skummet inn i utgangs-filtrene én gang i løpet av fermenteringene. Fermenteringene krevde ca. 150 ml antiskum.
Begge fermentorer akkumulerte en betydelig mengde av dannet biomasse i topprommet. Dette er ikke et uvanlig problem ved myceliumfermentering i små fermentorer med stort over-flateområde/volumforhold. Mengden av dannet biomasse i Stasjon 15 så ut til å øke i løpet av de siste 24 timer, idet det reduserte volumnivå resulterte i betydelig spruting (væske-nivået nådde toppimpelleren). Det endelige volum i fermentorene etter 168 timer var ca. 13 L.
Mikroskopisk undersøkelse viste at det ved 72 timer var mye etterlatenskaper til stede i kulturbuljongen og at det var noe tilstedeværelse av ødelagte og atropiske soppspisser. Tilstedeværelsen av oljedråper i cytoplasma ble vist ved nilrød farging ved 168 timer. Oljedråpene var meget små og mange, i motsetning til de store oljedråper som kunne obser-veres enkelte ganger. Biomasse og oljeutbytte, sammen med karbon og nitrogenforbruk er vist i Tabell 3.
Eksempel 6 Forbedret biomasseutbytte fra M. alpina -
Tredje runde
I dette forsøk ble det forsøkt å øke mengden av erholdt produkt ytterligere ved å øke mengdene av fosfat og mineraler. Fremgangsmåten var i det vesentlige lik den i Eksempel 5, bortsett fra at dekstrose og Mazu 204 antiskum ble oppløst i 11,5 L R.O. H20, fremfor 12,5 L, for å gi plass til saltløsningene som ble tilsatt ved 30 timer. Stasjon 14 mottok ytterligere Fe, Zn og Cu; Stasjon 15 mottok ytterligere fosfat, i tillegg til Fe, Zn og Cu.
Stasjon 14: 3 X 6/L Tastone 154
Gjærekstrakt ble løst i 96 g/L, i 3 X 1 L mengder og autoklavert i 1 time. Én-liter aliquoter av gjærekstraktløs-ningen ble tilsatt ved 0,22 og 28 timer. Ved 22 og 28 timer var karbondioksidutviklingsgraden (CER, en indikasjon på den metabolske grad i fermentoren) eksponentielt økende, og fermenteringen hadde akkurat begynt å kreve base).
Salttilskuddet inneholdt:
480 mg FeCl36H20
240 mg ZnS047H20
16 mg CuS045H20
FeCl3 ble løst i 1 L 5 g/L sitronsyre. De resterende salter ble tilsatt og pH justert med NaOH til 4,5. Løsningen ble autoklavert i 1 time. Tilføringen av salter ble gjort i løpet av 30 timer.
Den innledningsvise ristingsgrad i fermentoren var 50 cm/sek, istedenfor 80 cm/sek, som opprinnelig planlagt, ettersom det innledningsvise væskenivå i fermentoren (13 L) resulterte i at toppimpelleren så vidt var nedsenket og høyere bevegeslsesgrad resulterte i signifikant mer spruting. Ved 16 timer sank D.O. under 40 % og ristingen ble gradvis øket til
175 cm/sek ved 28 timer. D.O. ble kontrollert til å være over 40 % ved å forandre luftstrømmen med oksygen. Ved 4 6 timer ble ristingen øket til 190 cm/sek for å tillate blanding. Risting ble ytterligere øket til 200 cm/sek ved 48 timer, til 220 cm/sek ved 51 timer, til 235 cm/sek ved 53 timer, til 250 cm/sek ved 56 timer, til 260 cm/sek ved 57 timer og til 280 cm/sek ved 70 timer. Selv ved denne ristingsgrad (250 rpm) var blandingen dårlig. Mens et minimumskriterium på "noe bevegelse" ble opprettholdt var omsetningen av biomassen meget langsom og enkelte områder nådde stagnasjon. Tilsetningen av noen små dråper antiskum reduserte skumtoppen og fjernet stagnerte lommer. Ved 11 timer ble ristingen redusert til 265 cm/sek og ved 120 timer ble den ytterligere redusert til 250
cm/sek.
Fermenteringen begynte å skumme omtrent ved 18 timer. Skumming ble kontrollert ved hjelp av manuell tilsetning av antiskum. Antiskum ble først tilsatt ved 20 timer. Ved 24 timer var skummingen i fermenteringen signifikant og krevde regelmessig tilsetning av antiskum. Ved 72 timer hadde skummet for det meste sunket ned. Fermenteringen krevde imidlertid tidvis tilsetning av antiskum.
Ved 24 timer hadde biomassen form av meget løse pelleter. (1-2 mm) og løse hyfeaggregater. Det var en betydelig mengde av celleetterlatenskaper. Ved 48 timer hadde biomassen form av meget løse hyfeaggregater, meget små pelleter (1-2 mm) med meget små kjerner og løse periferier og små kompakte pelleter (1-3) uten løse periferier. Ved 96 timer hadde biomassen form av kompakte, runde pelleter (1-2 mm), nålformede pelleter (mindre enn 0,5 mm) og løse hyfeaggregater. Nilrød farging ved 144 timer viste tilstedeværelse av mange, meget små oljedråper i myceliumet.
Stasjon 15: 3X6 g/L Tastone 154
Gjærekstrakt ble oppløst i 96 g/L, og autoklavert i 1 time. Gjærekstraktløsningen ble tilsatt 3 X 1 L mengder ved 0,22 og 26 timer. Ved 22 og 26 timer økte CER eksponentielt og fermenteringen begynte akkurat å kreve tilsettning av base.
En salttilføring ble laget inneholdende:
FeCl3 ble oppløst i 500 ml 5 g/L sitronsyre. De resterende salter ble tillatt og pH justert med NaOH til 4,5. KH2PO4 ble oppløst i 500 ml R.O. vann. Begge løsninger ble autoklavert i 1 time og avkjølt til 23 °C før de ble blandet og tilsatt fermentoren ved 30 timer.
Innledningsristingsgraden i fermentoren var 50 cm/sek, til forskjell fra 80 cm/sek som opprinnelig planlagt, dette på grunn av at innledningsnivået av væske i fermentoren (13 L) resulterte i at toppimpelleren bare delvis var nedsenket, og den høyere ristingsgrad resulterte i signifikant mer spruting. Ved 16 timer sank D.O. til under 40 % og ristingen ble gradvis øket til 175 cm/sek ved 27 timer. D.O. ble så kontrollert til å være over 40 % ved endring av luftstrømmen med oksygen. Ved 41 timer ble ristingen øket til 200 cm/sek, for å tillate i det minste, en minimal grad av blanding. Risting ble ytterligere øket til 220 cm/sek ved 42 timer, til 230 cm/sek ved 46 timer, til 235 cm/sek ved 51 timer og til 240 cm/sekund ved 70 timer. Ved denne ristingsgrad (410 rpm) var blandingen kun dårlig til ganske god. Et minimalt nivå av biomassebevegelser ble opprettholdt. Ved 80 timer var ristingen redusert til 205 cm/sek.
Fermenteringen begynte å skumme ved ca. 18 timer. Skummingen ble kontrollert ved manuell tilsetning av antiskum. Antiskum ble først tilsatt ved 17 timer. Ved 20 timer skummet fermenteringen betydelig og krevet regelmessig tilsetning av antiskum. Skummingen sank betydelig ved 72 timer. Fermenteringen krevet imidlertid fortsatt tidvis tilsetning av antiskum.
Ved 24 timer hadde biomassen form av meget løse pelleter (1.2 mm) og løse hyfeaggregater. Det var en betydelig mengde av cellerester. Ved 48 timer hadde biomassen form av meget løse hyfeaggregater, meget små pelleter (1-2 mm) med meget små kjerner og løse periferier, og små kompakte pelleter (1-3) uten løse periferier. Ved 96 timer hadde biomassen form av runde pelleter, 1-2 mm i diameter, mange med løse, hårete periferier og mange løse hyfefragmenter. Nilrød farging ved ved 144 timer viste tilstedeværelse av mange meget små oljedråper i enkelte mycelium og også tilstedeværelse av mange store oljedråper i andre mycelium.
Stasjon 15 var kun forskjellig fra Stasjon 14 på grunn av tilføring av fosfat, denne viste •bedre.blanding i løpet av fermenteringen ved generelt lave ristingsgrader. Stasjon 15 fremviste også en "løsere" biomassemorfologi. Biomasse og oljeutbytte i tillegg til karbonforbruk er vist i Tabell 4. Høyere glukoseforbruk (82 g/L for Stasjon 15 sammen-lignet med 64 g/L for Stasjon 14), større biomasseakkumulering og tilstedeværelse av store oljedråper i deler av mycelet viste at fermentoren inneholdt mer fosfat.
Eksempel 7 Produksjon av M. alpina biomasse inneholdende arakidonsyre i stor målestokk
En dyrkingsfermentor inneholdende GYE-medium (50 g/L dekstrose og 6 g/L Tastone 154) ble inokulert fra en fermen-teringsdyrking. En temperatur på 28 °C ble opprettholdt og innledningsvis risting ble satt til 130-160 cm/sek (ca. 43 rpm). Innledningsvis kartrykk var 6 psi og innledningsvis luftingsgrad var satt til 0,25 VVM. pH ble justert til 5,0 før sterilisering, innledningsvis pH i fermenteringen ble satt til 5,5 etter sterilisering. Oksygennivået i mediet ble opprettholdt ved D.O. > 40 % i følgende hendelsesforløp: (i)
økning av kartrykk til 11 psi, (ii) økning av risting fra 156 til 175 cm/sek impellerperiferihastighet og (iii) økning av luftingen til 0,5 VVM. Skumming ble kontrollert ved tilsetning av antiskum Dow 1520-US, ved behov. (Ca. 0,1 ml/L av antiskummet burde tilsettes til mediet forut for sterilisering for å hindre skumming). Etter inokuleringen ble dyrkingen opprettholdt ved pH > 5,5 med 8N NaOH.
Innen 12 timer etter pH økte til over 6,0 ble innholdet i dyrkingsfermentoren overført til hovedfermentoren. Hovedfermentormediet inneholdt
80 g/L dekstrose (ADM)
16 g/L soyamel med næringssoya
30 mg/L FeCl3-6H20 (Sigma/Aldrich)
1,5 mg/L ZnS04-7H20 (Sigma/Aldrich)
0,1 mg/L CuS04-5H20 (Sigma/Aldrich)
1 mg/L biotin (Sigma/Aldrich)
2 mg/L tiamin-HCl (Sigma/Aldrich)
2 mg/L pantotemisk syre (hemikalsiumsalt)
(Sigma/Aldrich) (Justert til pH 4,8-5,0 før-sterilisering)
Hovedfermentoren ble inokulert med dyrkingsfermentoren (11,8 %). Fermentortemperaturen ble holdt ved 28 °C. Innledningsvis risting ble satt til 162 cm/sek (ca. 23 rpm), innledningsvis kartrykk var 6 psi og innledningsvis luftingsgrad var 0,15 WM (ca. 300 sefh) .
Oksygennivået i mediet ble opprettholdt ved D.O. > 40 % ved i) økning av kartrykk til 11 psi, ii) økning av risting til 300 cm/sek impellertopphastighet (med økninger på ca. 30 cm/sek) og iii) økning av lufting til 0,5 VVM.
pH ble målt i henhold til følgende pH-kontrollskjema: Innledende pH ble satt til 5,5 før sterilisering. pH ble opprettholdt ved > 15,5 med 8N NaOH.
Ved 24-36 timer etter inokulering ble følgende tilsatt:
2 g/L KH2P04 (110 kg i ca. 700 L H20) .
Ved 48 timer ble pH forandret og satt til > 6,1 dersom konsentrasjonen av dekstrose var < 60 g/L.
Ved 72 timer ble pH sakte øket og satt til > 6,6 i en grad på ca. 0,1 pH-enheter pr. time.
pH ble opprettholdt under 7,3 H2S04-tilsetning dersom dette var nødvendig.
Det ble tatt prøver av fermenteringen hver 12 time for biomasse- og fettsyreanalyse, og innhøstet i starten av ca. 3 dager etter at pH var øket til > 6,6 (ca. 6 dager etter inokulering). Tettheten av tørr biomasse bør være > 24 g/l. Dekstrosekonsentrasjonen i buljongen bør ha falt fra 80 g/L til < 14 g/L.
Innhøstingen utføres ved å føre hele kulturbuljongen gjennom et roterende vakuumfilter for å separere mycelium fra bruktmedium.
Resultatene av to vanlige fermenteringsrunder i henhold til fremgangsmåten i dette eksempel er vist i Tabel-lene 5 og 6.
Claims (23)
1. Fremgangsmåte for fremstilling av en arakidonsyreinneholdende olje, der oljen inneholder triglycerider hvori minst 25 % av fettsyrerestene er arakidonsyre (ARA) og mengden av eicosapentansyre (EPA)-restene i oljen ikke overskrider en femtedel av mengden av arakodonsyre (ARA)-restene, omfattende: (a) dyrking av Mortierella sp. i en fermentor med lufting, inneholdende kulturmedium; (b) opprettholdelse av pH mellom 5 og 6 i starten av dyrkingen; (c) opprettholdelse av pH mellom 7 og 7,5 i slutten av dyrkingen; og (d) innhøsting av biomasse fra fermentoren og utvin-ning av den arakidonsyreinneholdende olje fra biomassen.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at en karbonkilde i en mengde ekvivalent med minst 80 g/L glukose og en nitrogenkilde i en mengde ekvivalent med minst 15 g/L gjærekstrakt, tilsettes til kulturmediet i løpet av fermenteringen.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at nivået av oppløst oksygen i kulturmediet i det minste er 35 % av luftmetningsnivået.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 1-3, karakterisert ved at nitrogenkilden deles i to eller flere aliquoter som tilføres til fermentoren til ulike tider, idet minst én aliquot tilføres til fermentoren på et tidspunkt som er forskjellig fra tidspunktet for tilføring av karbonkilden inn i fermentoren.
5. Fremgangsmåte ifølge ethvert av kravene 1-4, karakterisert ved at Mortierella sp. er M. alpina.
6. Fremgangsmåte ifølge ethvert av kravene 1-5, karakterisert ved at uren arakidonsyreinneholdende olje utvinnes fra biomassen ved ékstraksjon med et upolart løsningsmiddel og den urene olje klares ved ékstraksjon med et polart organisk løsningsmiddel.
7. Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at det upolare løsnings-middel er heksan.
8. Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at det polare løsningsmid-del utvelges fra gruppen bestående av aceton, ethanol og isopropylalkohol.
9. Umodifisert sopptriglyceridolje, karakterisert ved at mer enn 50 % av fettsyrerestene er arakidonsyre (ARA)-rester til stede i triglyceridform og hvori oljen ikke omfatter mer enn én tiendedel eidosapentansyre (EPA) i forhold til ARA.
10. Umodifisert sopptriglyceridolje ifølge krav 9, karakterisert ved at oljen minst omfatter 50 % arakidonsyre (ARA) i triglyceridet og i det vesentlige ikke noe eicosapentansyre (EPA).
11. Anvendelse av en umodifisert sopptriglyceridolje ifølge krav 9 eller 10 for å tilveiebringe triglyceridinneholdende arakidonsyre (ARA) til en morsmelkerstatning,
hvor den umodifiserte sopptriglyceridoljen tilsettes til morsmelkerstatningen i en mengde som er tilstrekkelig til å tilveiebringe et arakidonsyre(ARA)-innhold tilsvarende mengden av arakidonsyre (ARA) i human brystmelk.
12. Anvendelse av en umodifisert sopptriglyceridolje ifølge krav 9 eller 10 for fremstilling av en morsmelkerstatning, som omfatter triglyceridinneholdende arakidonsyre (ARA) i en mengde som kan sammenlignes med mengden i human brystmelk hvorved arakidonsyre (ARA) tilveiebringes ved tilføring til morsmelkerstatningen av en tilstrekkelig mengde av den umodifiserte sopptriglyceridoljen.
13. Anvendelse av en umodifisert sopptriglyceridolje ifølge krav 9 eller 10 for fremstilling av et preparat for tilveiebringelse av supplerende arakidonsyre (ARA) til et menneske med dette behov, hvorved den umodifiserte sopptriglyceridoljen formuleres i en farmasøytisk akseptabel doseform for å tilveiebringe en mengde arakidonsyre (ARA) som er effektiv til å tilveiebringe supplerende arakidonsyre (ARA) til mennesket.
14. Anvendelse ifølge krav 13, hvorved preparatet formuleres for å tilveiebringe 0,2-0,8 g arakidonsyre (ARA)/dag.
15. Anvendelse ifølge krav 13 eller 14, hvorved preparatet er farmakologisk akseptabelt for enteral administrering.
16. Anvendelse ifølge krav 13 eller 14, hvorved preparatet er farmakologisk akseptabelt for parenteral administrering.
17. Anvendelse ifølge krav 13 eller 14, hvorved preparatet er farmakologisk akseptabelt for topisk administrering.
18. Anvendelse ifølge ethvert av kravene 13-17, hvorved mennesket er en gravid eller ammende kvinne.
19. Anvendelse ifølge ethvert av kravene 13-17, hvorved mennesket med behov for supplerende arakidonsyre (ARA) lider av en nevrologisk forstyrrelse.
20. Anvendelse ifølge krav 19, hvorved den nevrologiske forstyrrelse er tardivdyskinesi, schizofreni eller en peroxi-somal forstyrrelse.
21. Anvendelse ifølge krav 13 eller 14, hvorved mennesket med behov for supplerende arakidonsyre (ARA) lider av en sykdomstilstand forbundet med reduserte arakidonsyre (ARA)-serumnivåer.
22. Anvendelse ifølge krav 21, hvorved sykdommen er en leversykdom, fenylketonuri eller systisk fibrose.
23. Anvendelse av en umodifisert sopptriglyceridolje ifølge krav 9 eller 10 for fremstilling av et kosmetisk preparat, hvorved preparatet oljen er til stede i preparatet i en mengde som er effektiv til å understøtte opprettholdelse av hudfarge når preparatet anvendes topisk.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US08/367,881 US5658767A (en) | 1991-01-24 | 1995-01-03 | Arachidonic acid and methods for the production and use thereof |
PCT/US1996/000182 WO1996021037A1 (en) | 1995-01-03 | 1996-01-03 | Arachidonic acid and methods for the production and use thereof |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO973085D0 NO973085D0 (no) | 1997-07-02 |
NO973085L NO973085L (no) | 1997-09-03 |
NO320117B1 true NO320117B1 (no) | 2005-10-31 |
Family
ID=23449013
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO19973085A NO320117B1 (no) | 1995-01-03 | 1997-07-02 | Fremgangsmate for fremstilling av en arakidonsyreinneholdende olje, der oljen inneholder triglycerider, umodifisert sopptriglyceridolje og anvendelse derav. |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5658767A (no) |
EP (5) | EP1342787A3 (no) |
JP (6) | JP4014219B2 (no) |
KR (6) | KR20120073363A (no) |
CN (4) | CN1175976B (no) |
AT (1) | ATE239088T1 (no) |
AU (1) | AU713567B2 (no) |
BR (1) | BR9607179B1 (no) |
CA (1) | CA2209513C (no) |
DE (2) | DE69627816T2 (no) |
DK (1) | DK0800584T3 (no) |
EA (1) | EA001036B1 (no) |
ES (1) | ES2197233T3 (no) |
FI (2) | FI117442B (no) |
HK (1) | HK1085768A1 (no) |
NO (1) | NO320117B1 (no) |
PL (1) | PL187694B1 (no) |
PT (1) | PT800584E (no) |
WO (1) | WO1996021037A1 (no) |
Families Citing this family (178)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5340742A (en) * | 1988-09-07 | 1994-08-23 | Omegatech Inc. | Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids |
US20060094089A1 (en) * | 1988-09-07 | 2006-05-04 | Martek Biosciences Corporation | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
US5583019A (en) * | 1995-01-24 | 1996-12-10 | Omegatech Inc. | Method for production of arachidonic acid |
WO1996040106A2 (en) * | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Martek Biosciences Corporation | Methods for controlling highly unsaturated fatty acid content in various tissues |
ATE315339T1 (de) † | 1996-03-26 | 2006-02-15 | Dsm Ip Assets Bv | Späte zugabe von polyungesättigten fettsäuren in einem herstellungsverfahren von säuglingsnahrung |
US6428832B2 (en) * | 1996-03-26 | 2002-08-06 | Dsm N.V. | Late addition of PUFA in infant formula preparation process |
US20030143659A1 (en) * | 1996-03-28 | 2003-07-31 | Hendrik Louis Bijl | Process for the preparation of a granular microbial biomass and isolation of a compound thereform |
JP3995290B2 (ja) | 1996-08-23 | 2007-10-24 | サントリー株式会社 | オメガ9系高度不飽和脂肪酸及びそれを含有する脂質の製造方法 |
JP3792309B2 (ja) | 1996-08-30 | 2006-07-05 | サントリー株式会社 | 不飽和脂肪酸含有油脂の製造方法 |
JP4633204B2 (ja) * | 1996-10-11 | 2011-02-16 | サントリーホールディングス株式会社 | アラキドン酸含有食用油脂およびそれを含有する食品 |
KR100653107B1 (ko) | 1996-12-27 | 2006-12-04 | 산토리 가부시키가이샤 | 불포화 지방산 또는 이를 함유하는 지질의 제조방법 |
SI0970236T1 (sl) * | 1997-02-20 | 2006-10-31 | Dsm Ip Assets Bv | Fermentativna proizvodnja dragocenih spojin v industrijskem merilu z uporabo kemicno definiranih medijev |
ES2219871T3 (es) | 1997-02-21 | 2004-12-01 | Abbott Laboratories | Procedimiento y composiciones que sirven para limitar la frecuencia de la enterocolitis necrotizante del recien nacido. |
US6080787A (en) * | 1997-02-21 | 2000-06-27 | Abbott Laboratories | Methods for reducing the incidence of necrotizing enterocolitis |
JP4127860B2 (ja) * | 1997-03-04 | 2008-07-30 | サントリー株式会社 | 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
US7745694B1 (en) | 1997-04-11 | 2010-06-29 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for synthesis of long chain polyunsaturated fatty acids in plants |
US5972664A (en) | 1997-04-11 | 1999-10-26 | Abbott Laboratories | Methods and compositions for synthesis of long chain poly-unsaturated fatty acids |
US5968809A (en) | 1997-04-11 | 1999-10-19 | Abbot Laboratories | Methods and compositions for synthesis of long chain poly-unsaturated fatty acids |
US5948413A (en) * | 1997-07-17 | 1999-09-07 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Method and vaccine for treatment of pythiosis insidiosi in humans and lower animals |
PT893064E (pt) * | 1997-07-22 | 2003-04-30 | Nestle Sa | Composicao lipidica para formulacao infantil e processo de preparacao |
GB9802561D0 (en) * | 1998-02-07 | 1998-04-01 | Zeneca Ltd | Mortierella |
US20070141181A1 (en) * | 1998-02-13 | 2007-06-21 | Nutramax Laboratories, Inc. | Use of anabolic agents, anti-catabolic agents, antioxidant agents, and analgesics for protection, treatment and repair of connective tissues in humans and animals |
US6797289B2 (en) * | 1998-02-13 | 2004-09-28 | Nutramax Laboratories, Inc. | Use of anabolic agents, anti-catabolic agents, antioxidant agents, and analgesics for protection, treatment and repair of connective tissues in humans and animals |
US6451771B1 (en) | 1999-02-12 | 2002-09-17 | Nutramax Laboratories, Inc. | Use of anabolic agents anti-catabolic agents and antioxidant agents for protection treatment and repair of connective tissues in humans and animals |
BR9911234B1 (pt) † | 1998-06-17 | 2012-01-10 | ácido araquidÈnico (ara) microbiano para uso em alimentação marinha. | |
JP2000069987A (ja) * | 1998-08-28 | 2000-03-07 | Suntory Ltd | アラキドン酸含有脂質並びにジホモ−γ−リノレン酸含有脂質の製造方法 |
WO2000020603A1 (en) * | 1998-10-05 | 2000-04-13 | Abbott Laboratories | Altered fatty acid biosynthesis in insect cells using delta five desaturase |
CA2653503A1 (en) * | 1998-10-15 | 2000-04-20 | Dsm Ip Assets B.V. | The use of ara as a supplement for a lactating woman |
US6166231A (en) * | 1998-12-15 | 2000-12-26 | Martek Biosciences Corporation | Two phase extraction of oil from biomass |
GB9901808D0 (en) * | 1999-01-27 | 1999-03-17 | Scarista Limited | Drugs for treatment of psychiatric and brain disorders |
GB9916537D0 (en) * | 1999-07-14 | 1999-09-15 | Univ Hull | Culture of microorganisms for the synthesis of a polyunsaturated fatty acid |
ATE485385T1 (de) | 2000-01-19 | 2010-11-15 | Martek Biosciences Corp | Lösungsmittelfreies extraktionsverfahren |
TR200302163T3 (tr) * | 2000-01-28 | 2004-02-23 | Martek Biosciences Corporation | Fermente edicilerde ökaryotik mikropların yüksek yoğunluklu kültürleriyle polienoik yağ asitleri içeren lipidlerin gelişmiş üretimi |
US6596302B2 (en) | 2000-04-13 | 2003-07-22 | Abbott Laboratories | Infant formulas containing long-chain polyunsaturated fatty acids and uses thereof |
EP1780283A1 (en) | 2000-04-21 | 2007-05-02 | Martek Biosciences Corporation | Trophic conversion of obligate photographic algae through metabolic engineering |
ES2291312T3 (es) | 2000-04-21 | 2008-03-01 | Martek Biosciences Corporation | Conversion trofica de algas fototroficas estrictas mediante ingenieria metabolica. |
GB0016045D0 (en) * | 2000-06-29 | 2000-08-23 | Laxdale Limited | Therapeutic combinations of fatty acids |
EP1178103A1 (en) * | 2000-08-02 | 2002-02-06 | Dsm N.V. | Purifying crude pufa oils |
EP1178118A1 (en) * | 2000-08-02 | 2002-02-06 | Dsm N.V. | Isolation of microbial oils |
GB2377455A (en) * | 2001-02-09 | 2003-01-15 | Univ Hull | Method of culturing crypthecodinium cohnii |
CA2452401C (en) * | 2001-07-02 | 2013-02-26 | Suntory Limited | Process for producing fat comprising triglyceride containing highly unsaturated fatty acid |
JP2003048831A (ja) * | 2001-08-02 | 2003-02-21 | Suntory Ltd | 脳機能の低下に起因する症状あるいは疾患の予防又は改善作用を有する組成物 |
EP1671551A1 (en) * | 2001-10-19 | 2006-06-21 | Vita Power Limited | A foodstuff supplement and method of producing same |
CA2464774C (en) | 2001-11-13 | 2010-06-22 | Metanomics Gmbh & Co. Kgaa | Method for the extraction and analysis of contents made from organic material |
EP2239028A1 (en) * | 2001-12-12 | 2010-10-13 | Martek Biosciences Corporation | Extraction and Winterization of Lipids From Oilseed and Microbial Sources |
WO2003051139A1 (en) | 2001-12-19 | 2003-06-26 | Dsm Ip Assets B.V. | Compositions with a chicken flavour, use and production thereof |
US7211656B2 (en) * | 2002-01-30 | 2007-05-01 | Abbott Laboratories | Desaturase genes, enzymes encoded thereby, and uses thereof |
JP4088097B2 (ja) * | 2002-04-26 | 2008-05-21 | サントリー株式会社 | 高度不飽和脂肪酸含有脂質の製造方法 |
US20060165735A1 (en) * | 2002-06-18 | 2006-07-27 | Abril Jesus R | Stable emulsions of oils in aqueous solutions and methods for producing same |
KR101208304B1 (ko) * | 2002-06-19 | 2012-12-05 | 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. | 다가불포화 지방산을 함유하는 미생물 오일의 제조방법 |
KR20050013584A (ko) † | 2002-06-19 | 2005-02-04 | 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. | 미생물세포와 미생물 오일용 파스퇴르살균 방법 |
US20050123924A1 (en) * | 2002-08-05 | 2005-06-09 | Ayoub Rashtchian | Compositions for in vitro amplification of nucleic acids |
DE60228707D1 (de) * | 2002-09-04 | 2008-10-16 | Nestec Sa | Verfahren zur Herstellung von einem Öl, das langkettige, mehrfach ungesättigte Fettsäuren aus Biomassen enthält, Lebensmittel, Nahrungsmittelzusammensetzung, kosmetische oder pharmazeutische Zusammensetzung, die dieses Ölenthält |
EP1537221B1 (en) * | 2002-09-13 | 2016-02-03 | Suntory Holdings Limited | Process for production of transesterified oils/fats or triglycerides |
JP4771697B2 (ja) * | 2002-09-24 | 2011-09-14 | サントリーホールディングス株式会社 | 認知能力の正常応答の低下予防、改善又は向上作用を有する組成物 |
US20040209953A1 (en) * | 2002-12-06 | 2004-10-21 | Wai Lee Theresa Siu-Ling | Glyceride compositions and methods of making and using same |
WO2004084882A1 (en) * | 2003-03-27 | 2004-10-07 | Suntory Limited | Use of arachidonic acid for normalization of infradian rhythm |
US20040219188A1 (en) * | 2003-05-02 | 2004-11-04 | Comer Gail M. | Composition and methods for nutritional management of patients with hepatic disease |
US7238482B2 (en) | 2003-05-07 | 2007-07-03 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Production of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts |
GB0311081D0 (en) * | 2003-05-14 | 2003-06-18 | Btg Internat Limted | Treatment of neurodegenerative conditions |
CA2530170A1 (en) * | 2003-06-24 | 2005-01-06 | University Of Kansas Medical Center | Infant formula |
WO2005018632A1 (en) * | 2003-08-18 | 2005-03-03 | Btg International Limited | Treatment of neurodegenerative conditions |
EP1656449B1 (en) | 2003-08-21 | 2009-05-06 | Monsanto Technology LLC | Fatty acid desaturases from primula |
EP2251429B1 (en) * | 2003-12-30 | 2017-03-01 | DSM IP Assets B.V. | Deaeration process |
SG150563A1 (en) * | 2004-03-01 | 2009-03-30 | Suntory Ltd | Process for producing phospholipid containing long chain polyunsaturated fatty acid as constituent thereof and utilization of the same |
ES2541537T3 (es) | 2004-04-16 | 2015-07-21 | Monsanto Technology, Llc | Expresión de desaturasas de ácido graso en maíz |
ES2529572T3 (es) * | 2004-04-22 | 2015-02-23 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Síntesis de ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga por células recombinantes |
JP2006083136A (ja) * | 2004-09-17 | 2006-03-30 | Suntory Ltd | ストレスに起因する脳機能の低下およびそれに伴う症状あるいは疾患の予防又は改善作用を有する組成物 |
JP4993852B2 (ja) | 2004-09-17 | 2012-08-08 | サントリーホールディングス株式会社 | ストレスに起因する行動異常を伴う症状あるいは疾患の予防又は改善作用を有する組成物 |
US7678931B2 (en) | 2004-10-22 | 2010-03-16 | Martek Biosciences Corporation | Process for preparing materials for extraction |
US7588931B2 (en) * | 2004-11-04 | 2009-09-15 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | High arachidonic acid producing strains of Yarrowia lipolytica |
EP1809118B1 (en) * | 2004-11-04 | 2017-01-04 | Monsanto Technology LLC | Seed oil compositions |
US7198937B2 (en) * | 2004-11-04 | 2007-04-03 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Mortierella alpina diacylglycerol acyltransferase for alteration of polyunsaturated fatty acids and oil content in oleaginous organisms |
GB0425932D0 (en) * | 2004-11-25 | 2004-12-29 | Btg Int Ltd | Structured phospholipids |
GB0504362D0 (en) * | 2005-03-02 | 2005-04-06 | Btg Int Ltd | Cytokine modulators |
GB0504333D0 (en) * | 2005-03-02 | 2005-04-06 | Btg Int Ltd | Treatment of cytokine dysregulation |
JP5886511B2 (ja) | 2005-06-07 | 2016-03-16 | ディーエスエム ニュートリショナル プロダクツ アーゲーDSM Nutritional Products AG | 脂質および抗酸化剤の製造のための真核微生物 |
JP5967855B2 (ja) | 2005-06-30 | 2016-08-10 | サントリーホールディングス株式会社 | 日中活動量の低下および/又はうつ症状の改善作用を有する組成物 |
US20070082063A1 (en) * | 2005-10-11 | 2007-04-12 | Douglas Bibus | Risk assessment and correction of membrane damage of the upper GI tract |
ES2470340T3 (es) | 2005-12-28 | 2014-06-23 | Advanced Bionutrition Corporation | Vehículo de administración para bacterias probi�ticas que comprende una matriz seca de polisac�ridos, sac�ridos y polioles en forma vítrea |
US8968721B2 (en) | 2005-12-28 | 2015-03-03 | Advanced Bionutrition Corporation | Delivery vehicle for probiotic bacteria comprising a dry matrix of polysaccharides, saccharides and polyols in a glass form and methods of making same |
US8277849B2 (en) | 2006-01-19 | 2012-10-02 | Solazyme, Inc. | Microalgae-derived compositions for improving the health and appearance of skin |
US20070191303A1 (en) * | 2006-01-19 | 2007-08-16 | Solazyme, Inc. | Polysaccharide compositions and methods of producing, screening, and formulating polysaccharide compositions |
US20070166266A1 (en) * | 2006-01-19 | 2007-07-19 | Solazyme, Inc. | Methods and compositions for improving the health and appearance of skin |
US20090274736A1 (en) * | 2006-01-19 | 2009-11-05 | Solazyme Inc. | Nutraceutical Compositions From Microalgae And Related Methods of Production And Administration |
US20070167396A1 (en) * | 2006-01-19 | 2007-07-19 | Solazyme, Inc. | Methods and compositions for cholesterol reduction in mammals |
US8298548B2 (en) | 2007-07-18 | 2012-10-30 | Solazyme, Inc. | Compositions for improving the health and appearance of skin |
BR122018075948B1 (pt) * | 2006-03-10 | 2023-05-16 | Monsanto Technology Llc | Métodos de produzir uma planta de soja com teor de ácidos graxos de semente alterados |
US20100086638A1 (en) * | 2006-04-03 | 2010-04-08 | Kyle David J | Feed formulations containing docosahexaenoic acid |
JP2009533064A (ja) * | 2006-04-11 | 2009-09-17 | マーテック バイオサイエンシーズ コーポレーション | 長鎖多価不飽和脂肪酸を含む食品製品、およびそれらを調製するための方法 |
JP5531324B2 (ja) * | 2006-08-01 | 2014-06-25 | ディーエスエム ニュートリショナル プロダクツ アーゲー | 油生産微生物およびその改変方法 |
US8088614B2 (en) * | 2006-11-13 | 2012-01-03 | Aurora Algae, Inc. | Methods and compositions for production and purification of biofuel from plants and microalgae |
JP5285617B2 (ja) | 2006-12-18 | 2013-09-11 | アドバンスド バイオニュートリション コーポレーション | 生きたプロバイオティクスを含む乾燥食物製品 |
KR101578498B1 (ko) * | 2006-12-28 | 2015-12-18 | 산토리 홀딩스 가부시키가이샤 | 신경 재생제 |
JP5101894B2 (ja) * | 2007-01-15 | 2012-12-19 | サントリーホールディングス株式会社 | 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
CA2675207A1 (en) * | 2007-02-12 | 2008-07-21 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Production of arachidonic acid in oilseed plants |
US20090023808A1 (en) * | 2007-06-29 | 2009-01-22 | Martek Biosciences Corporation | Production and Purification of Esters of Polyunsaturated Fatty Acids |
CN101113410B (zh) * | 2007-07-09 | 2010-05-19 | 南京工业大学 | 一种高山被孢霉及其应用 |
CN101109015B (zh) * | 2007-07-09 | 2011-05-04 | 南京工业大学 | 花生四烯酸油脂的制备方法 |
CN101153298B (zh) * | 2007-09-07 | 2010-11-24 | 武汉麦可得生物技术有限公司 | 发酵生产低神经酸、epa含量的花生四烯酸油脂的方法 |
WO2009143007A2 (en) * | 2008-05-19 | 2009-11-26 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Producing eicosapentaenoic acid (epa) from biodiesel-derived crude glycerol |
US8927522B2 (en) | 2008-10-14 | 2015-01-06 | Solazyme, Inc. | Microalgal polysaccharide compositions |
WO2010054322A1 (en) | 2008-11-07 | 2010-05-14 | Solazyme, Inc. | Cosmetic compositions comprising microalgal components |
US8940340B2 (en) * | 2009-01-22 | 2015-01-27 | Aurora Algae, Inc. | Systems and methods for maintaining the dominance of Nannochloropsis in an algae cultivation system |
US8143051B2 (en) * | 2009-02-04 | 2012-03-27 | Aurora Algae, Inc. | Systems and methods for maintaining the dominance and increasing the biomass production of nannochloropsis in an algae cultivation system |
CN108034680A (zh) * | 2009-02-25 | 2018-05-15 | V.B.医疗私人有限公司 | 发酵生产二十二碳六烯酸的改进方法 |
EP2410996B1 (en) | 2009-03-27 | 2017-08-02 | Advanced Bionutrition Corp. | Microparticulated vaccines for the oral or nasal vaccination and boostering of animals including fish |
US9187778B2 (en) | 2009-05-04 | 2015-11-17 | Aurora Algae, Inc. | Efficient light harvesting |
DK2435554T3 (en) | 2009-05-26 | 2017-10-30 | Advanced Bionutrition Corp | STABLE DRY POWDER COMPOSITION WITH BIOLOGICALLY ACTIVE MICRO-ORGANISMS AND / OR BIOACTIVE MATERIALS AND PROCEDURES FOR ITS PREPARATION |
US8865452B2 (en) * | 2009-06-15 | 2014-10-21 | Aurora Algae, Inc. | Systems and methods for extracting lipids from wet algal biomass |
US9101942B2 (en) * | 2009-06-16 | 2015-08-11 | Aurora Algae, Inc. | Clarification of suspensions |
US8769867B2 (en) * | 2009-06-16 | 2014-07-08 | Aurora Algae, Inc. | Systems, methods, and media for circulating fluid in an algae cultivation pond |
EP2272383A1 (en) | 2009-06-22 | 2011-01-12 | SBAE Industries NV | Composition Comprising Omega-7 and/or Omega-4 Fatty Acids |
US8747930B2 (en) * | 2009-06-29 | 2014-06-10 | Aurora Algae, Inc. | Siliceous particles |
US20100325948A1 (en) * | 2009-06-29 | 2010-12-30 | Mehran Parsheh | Systems, methods, and media for circulating and carbonating fluid in an algae cultivation pond |
US9480271B2 (en) | 2009-09-15 | 2016-11-01 | Monsanto Technology Llc | Soybean seed and oil compositions and methods of making same |
US8765983B2 (en) * | 2009-10-30 | 2014-07-01 | Aurora Algae, Inc. | Systems and methods for extracting lipids from and dehydrating wet algal biomass |
US8748160B2 (en) * | 2009-12-04 | 2014-06-10 | Aurora Alage, Inc. | Backward-facing step |
US9504750B2 (en) | 2010-01-28 | 2016-11-29 | Advanced Bionutrition Corporation | Stabilizing composition for biological materials |
CN102725393B (zh) | 2010-01-28 | 2015-12-02 | 先进生物营养公司 | 包含生物活性材料的干燥玻璃质组合物 |
BR112012025641A2 (pt) | 2010-04-06 | 2019-09-24 | Heliae Dev Llc | métodos e sistemas para produzir biocombustíveis. |
US8211309B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-07-03 | Heliae Development, Llc | Extraction of proteins by a two solvent method |
US8115022B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-02-14 | Heliae Development, Llc | Methods of producing biofuels, chlorophylls and carotenoids |
US8211308B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-07-03 | Heliae Development, Llc | Extraction of polar lipids by a two solvent method |
US8475660B2 (en) | 2010-04-06 | 2013-07-02 | Heliae Development, Llc | Extraction of polar lipids by a two solvent method |
US8202425B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-06-19 | Heliae Development, Llc | Extraction of neutral lipids by a two solvent method |
WO2011127127A2 (en) | 2010-04-06 | 2011-10-13 | Arizona Board Of Regents For And On Behalf Of Arizona State University | Extraction with fractionation of oil and co-products from oleaginous material |
US8313648B2 (en) | 2010-04-06 | 2012-11-20 | Heliae Development, Llc | Methods of and systems for producing biofuels from algal oil |
US8273248B1 (en) | 2010-04-06 | 2012-09-25 | Heliae Development, Llc | Extraction of neutral lipids by a two solvent method |
US8308951B1 (en) | 2010-04-06 | 2012-11-13 | Heliae Development, Llc | Extraction of proteins by a two solvent method |
WO2011133610A1 (en) | 2010-04-22 | 2011-10-27 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Method for obtaining polyunsaturated fatty acid-containing compositions from microbial biomass |
AR081558A1 (es) | 2010-06-01 | 2012-10-03 | Martek Biosciences Corp | Extraccion de lipidos de celulas y productos provenientes de ellos |
US9023625B2 (en) | 2010-06-14 | 2015-05-05 | Io-Mega Holding Corporation | Methods for production of algae derived oils |
CN101870915B (zh) * | 2010-06-30 | 2012-07-04 | 南京工业大学 | 水酶法提取花生四烯酸油脂的工艺 |
AR082682A1 (es) | 2010-08-13 | 2012-12-26 | Advanced Bionutrition Corp | Composicion estabilizadora de almacenamiento en seco para materiales biologicos |
EP2634546B1 (en) | 2010-10-29 | 2019-05-08 | Yamato Scale Co., Ltd. | Combination scale |
US9375028B2 (en) * | 2010-12-09 | 2016-06-28 | Mead Johnson Nutrition Company | Compositions and methods for nutrient delivery |
SG192107A1 (en) * | 2011-01-28 | 2013-08-30 | Amyris Inc | Gel-encapsulated microcolony screening |
JP5416861B2 (ja) * | 2011-03-03 | 2014-02-12 | 日本水産株式会社 | リパーゼによる高度不飽和脂肪酸含有油脂の製造方法 |
US8926844B2 (en) | 2011-03-29 | 2015-01-06 | Aurora Algae, Inc. | Systems and methods for processing algae cultivation fluid |
US8569530B2 (en) | 2011-04-01 | 2013-10-29 | Aurora Algae, Inc. | Conversion of saponifiable lipids into fatty esters |
US8752329B2 (en) | 2011-04-29 | 2014-06-17 | Aurora Algae, Inc. | Optimization of circulation of fluid in an algae cultivation pond |
US8365462B2 (en) | 2011-05-31 | 2013-02-05 | Heliae Development, Llc | V-Trough photobioreactor systems |
USD679965S1 (en) | 2011-06-10 | 2013-04-16 | Heliae Development, Llc | Aquaculture vessel |
USD661164S1 (en) | 2011-06-10 | 2012-06-05 | Heliae Development, Llc | Aquaculture vessel |
USD682637S1 (en) | 2011-06-10 | 2013-05-21 | Heliae Development, Llc | Aquaculture vessel |
CN102925502A (zh) * | 2011-08-10 | 2013-02-13 | 嘉必优生物工程(湖北)有限公司 | 利用高山被孢霉生产花生四烯酸油脂的工业方法 |
US9200236B2 (en) | 2011-11-17 | 2015-12-01 | Heliae Development, Llc | Omega 7 rich compositions and methods of isolating omega 7 fatty acids |
CN102703332B (zh) * | 2012-06-19 | 2013-08-07 | 南京工业大学 | 一株产花生四烯酸油脂的菌株及其应用 |
CN103667068A (zh) * | 2012-09-14 | 2014-03-26 | 罗盖特兄弟公司 | 一种由微生物(单细胞真菌高山被孢霉)产生的富含花生四烯酸的油及其制备工艺 |
CN102925503B (zh) * | 2012-09-26 | 2014-08-06 | 内蒙古金达威药业有限公司 | 利用固料培养基培养高山被孢霉制备花生四烯酸的方法 |
CN103805517B (zh) * | 2012-11-14 | 2019-03-08 | 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 | 高山被孢霉的分离的新菌株及其应用 |
PT2970926T (pt) | 2013-03-13 | 2018-03-22 | Dsm Nutritional Products Ag | Modificação genética de microrganismos |
US9651304B1 (en) | 2013-03-14 | 2017-05-16 | Green Recovery Technologies, LLC | Pretreatment of biomass prior to separation of saturated biomass |
US9266973B2 (en) | 2013-03-15 | 2016-02-23 | Aurora Algae, Inc. | Systems and methods for utilizing and recovering chitosan to process biological material |
US9597280B2 (en) | 2013-05-15 | 2017-03-21 | Terravia Holdings, Inc. | Cosmetic compositions comprising microalgal oil |
WO2015025920A1 (ja) * | 2013-08-22 | 2015-02-26 | 協和発酵バイオ株式会社 | アラキドン酸生産ポリケチドシンターゼ及びその利用 |
CN103602648B (zh) * | 2013-12-04 | 2016-03-02 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种提高纤维素酶生产水平的发酵工艺 |
CN115141859A (zh) | 2013-12-20 | 2022-10-04 | 玛拉可再生能源公司 | 从微生物中回收油的方法 |
AU2014369339B2 (en) | 2013-12-20 | 2018-10-18 | Dsm Nutritional Products Ag | Methods of recovering oil from microorganisms |
CN105939710B (zh) | 2013-12-20 | 2020-05-08 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 用于从微生物细胞获得微生物油的方法 |
EP3082793B1 (en) | 2013-12-20 | 2020-04-15 | DSM IP Assets B.V. | Processes for obtaining microbial oil from microbial cells |
MX2016008228A (es) | 2013-12-20 | 2016-11-28 | Dsm Ip Assets Bv | Procedimiento para la obtención de aceite microbiano a partir de células microbianas. |
CA2934508C (en) | 2013-12-20 | 2023-09-19 | Dsm Ip Assets B.V. | Processes for obtaining microbial oil from microbial cells |
CN106715381B (zh) | 2014-09-23 | 2021-04-20 | 约斯特化学公司 | 用于用脂肪酸强化营养产品的脂肪酸组合物和方法 |
AR104042A1 (es) | 2015-03-26 | 2017-06-21 | Mara Renewables Corp | Producción de alta densidad de biomasa y aceite utilizando glicerol en bruto |
MX2018000502A (es) | 2015-07-13 | 2018-09-07 | Mara Renewables Corp | Mejora del metabolismo de microalga de xilosa. |
DK3328215T3 (da) | 2015-07-29 | 2021-09-13 | Advanced Bionutrition Corp | Stabilt tørre probiotiske sammensætninger til særlige kostanvendelser |
US10851395B2 (en) | 2016-06-10 | 2020-12-01 | MARA Renewables Corporation | Method of making lipids with improved cold flow properties |
KR102145032B1 (ko) * | 2017-04-26 | 2020-08-14 | 주식회사 엘지생활건강 | 모르티에렐라 오일을 포함하는 화장료 조성물 |
US10513718B2 (en) | 2017-06-06 | 2019-12-24 | City University Of Hong Kong | Method of producing polyunsaturated fatty acid |
CN107418982B (zh) * | 2017-09-25 | 2020-05-08 | 嘉必优生物技术(武汉)股份有限公司 | 一种低氯丙醇微生物油脂及其制备方法 |
WO2019191544A1 (en) * | 2018-03-30 | 2019-10-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Method of obtaining a microbial oil and a method of reducing emulsion by maintaining a low concentration of carbohydrate |
CN109266698B (zh) * | 2018-05-17 | 2022-10-28 | 梁云 | 被孢霉属微生物油脂中脂肪酸组合物成分调整的方法 |
CN108410916A (zh) * | 2018-05-30 | 2018-08-17 | 湖北福星生物科技有限公司 | 花生四烯酸油脂的生产方法 |
CN110747239B (zh) * | 2019-11-26 | 2021-06-22 | 瞿瀚鹏 | 富含Sn-2位ARA的微生物油脂及其制备方法和应用 |
CN115948484A (zh) * | 2022-12-19 | 2023-04-11 | 嘉必优生物技术(武汉)股份有限公司 | 一种降低花生四烯酸油脂中氯丙醇含量的方法 |
CN117730810A (zh) * | 2024-01-24 | 2024-03-22 | 广东海洋大学 | 橄榄油在提高东风螺幼虫***率和/或存活率中的应用 |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4280379A (en) * | 1980-01-11 | 1981-07-28 | Chow Kirk K | Reversihble ratchet drive |
US4670285A (en) | 1982-08-06 | 1987-06-02 | The University Of Toronto Innovations Foundation | Infant formula |
WO1986004354A1 (en) | 1985-01-22 | 1986-07-31 | Japan As Represented By Director General Of Agency | Method for obtaining lipids from fungus bodies |
DE3603000A1 (de) * | 1986-01-31 | 1987-08-06 | Milupa Ag | Neue polyensaeure-reiche fettmischung und deren verwendung bei der herstellung von saeuglingsnahrungen |
JPS6438007A (en) * | 1987-04-28 | 1989-02-08 | Lion Corp | Skin external preparation |
JP2697834B2 (ja) * | 1988-02-02 | 1998-01-14 | サントリー株式会社 | 高度不飽和脂肪酸成分添加人工乳 |
JP2723243B2 (ja) * | 1988-02-25 | 1998-03-09 | サントリー株式会社 | 高度不飽和脂肪酸添加動物飼料 |
JPH01228486A (ja) * | 1988-03-09 | 1989-09-12 | Suntory Ltd | 奇数鎖高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
PH11992043811B1 (en) * | 1991-01-24 | 2002-08-22 | Martek Corp | Arachidonic acid and methods for the production and use thereof |
JPH05163142A (ja) * | 1991-12-17 | 1993-06-29 | Tokiwa Yakuhin Kogyo Kk | 肝障害の予防または治療用アラキドン酸含有組成物 |
JP3354608B2 (ja) * | 1992-11-16 | 2002-12-09 | サントリー株式会社 | 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
EP2140863A1 (en) * | 1993-06-09 | 2010-01-06 | Martek Biosciences Corporation | Use of docosahexaenoic acid for the manufacture of a medicament for the treatment of neurological disorders |
-
1995
- 1995-01-03 US US08/367,881 patent/US5658767A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-01-03 DE DE69627816T patent/DE69627816T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-01-03 JP JP52123196A patent/JP4014219B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1996-01-03 KR KR1020127013351A patent/KR20120073363A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-01-03 EA EA199700090A patent/EA001036B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-01-03 DE DE0800584T patent/DE800584T1/de active Pending
- 1996-01-03 WO PCT/US1996/000182 patent/WO1996021037A1/en active IP Right Grant
- 1996-01-03 KR KR1020117022075A patent/KR20110111327A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-01-03 KR KR1020147023757A patent/KR20140114068A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-01-03 CA CA002209513A patent/CA2209513C/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-01-03 EP EP03076254A patent/EP1342787A3/en not_active Withdrawn
- 1996-01-03 KR KR1020067015060A patent/KR101033741B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-01-03 AU AU48542/96A patent/AU713567B2/en not_active Expired
- 1996-01-03 CN CN961920025A patent/CN1175976B/zh not_active Expired - Lifetime
- 1996-01-03 EP EP20100179716 patent/EP2322642A3/en not_active Withdrawn
- 1996-01-03 KR KR1020087015041A patent/KR20080068761A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-01-03 CN CN2011102827937A patent/CN102399831A/zh active Pending
- 1996-01-03 AT AT96904435T patent/ATE239088T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-01-03 EP EP20100179714 patent/EP2322640A3/en not_active Withdrawn
- 1996-01-03 EP EP20100179715 patent/EP2322641A3/en not_active Withdrawn
- 1996-01-03 EP EP96904435A patent/EP0800584B1/en not_active Revoked
- 1996-01-03 PT PT96904435T patent/PT800584E/pt unknown
- 1996-01-03 ES ES96904435T patent/ES2197233T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-01-03 BR BRPI9607179-6A patent/BR9607179B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1996-01-03 DK DK96904435T patent/DK0800584T3/da active
- 1996-01-03 KR KR1020107003392A patent/KR101163298B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-01-03 CN CN200910006766.XA patent/CN101560529B/zh not_active Expired - Lifetime
- 1996-01-03 PL PL96321208A patent/PL187694B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-01-03 CN CN2005100712952A patent/CN1696300B/zh not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-07-01 FI FI972829A patent/FI117442B/fi not_active IP Right Cessation
- 1997-07-02 NO NO19973085A patent/NO320117B1/no not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-12-21 JP JP2005368593A patent/JP2006180877A/ja not_active Withdrawn
-
2006
- 2006-05-16 HK HK06105700.4A patent/HK1085768A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2006-06-26 FI FI20060617A patent/FI120648B/fi not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-06-15 JP JP2007158505A patent/JP2007319161A/ja not_active Withdrawn
-
2009
- 2009-03-30 JP JP2009080997A patent/JP2009149910A/ja not_active Withdrawn
-
2010
- 2010-03-11 JP JP2010053924A patent/JP5281026B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2013
- 2013-02-26 JP JP2013035462A patent/JP2013116123A/ja not_active Withdrawn
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
NO320117B1 (no) | Fremgangsmate for fremstilling av en arakidonsyreinneholdende olje, der oljen inneholder triglycerider, umodifisert sopptriglyceridolje og anvendelse derav. | |
EP1001034B1 (en) | Arachidonic acid and methods for the production and use thereof | |
US5374657A (en) | Microbial oil mixtures and uses thereof | |
MXPA97005078A (en) | Araquidonic acid and methods for the production and use of my |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |