NO137427B - Apparat til fremstilling av st¦pte byggeelementer - Google Patents
Apparat til fremstilling av st¦pte byggeelementer Download PDFInfo
- Publication number
- NO137427B NO137427B NO1870/73A NO187073A NO137427B NO 137427 B NO137427 B NO 137427B NO 1870/73 A NO1870/73 A NO 1870/73A NO 187073 A NO187073 A NO 187073A NO 137427 B NO137427 B NO 137427B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- streptokinase
- column
- phosphate buffer
- concentration
- solution
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 claims description 45
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 claims description 45
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 5
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 3
- JVIPLYCGEZUBIO-UHFFFAOYSA-N 2-(4-fluorophenyl)-1,3-dioxoisoindole-5-carboxylic acid Chemical compound O=C1C2=CC(C(=O)O)=CC=C2C(=O)N1C1=CC=C(F)C=C1 JVIPLYCGEZUBIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920001425 Diethylaminoethyl cellulose Polymers 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 4
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 3
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 2
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 206010002660 Anoxia Diseases 0.000 description 1
- 241000976983 Anoxia Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010011091 Coronary artery thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 206010011703 Cyanosis Diseases 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000605403 Homo sapiens Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000007953 anoxia Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000012461 cellulose resin Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 208000002528 coronary thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002706 hydrostatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 201000005060 thrombophlebitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000002264 triphosphate group Chemical class [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B28—WORKING CEMENT, CLAY, OR STONE
- B28B—SHAPING CLAY OR OTHER CERAMIC COMPOSITIONS; SHAPING SLAG; SHAPING MIXTURES CONTAINING CEMENTITIOUS MATERIAL, e.g. PLASTER
- B28B15/00—General arrangement or layout of plant ; Industrial outlines or plant installations
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B28—WORKING CEMENT, CLAY, OR STONE
- B28B—SHAPING CLAY OR OTHER CERAMIC COMPOSITIONS; SHAPING SLAG; SHAPING MIXTURES CONTAINING CEMENTITIOUS MATERIAL, e.g. PLASTER
- B28B23/00—Arrangements specially adapted for the production of shaped articles with elements wholly or partly embedded in the moulding material; Production of reinforced objects
- B28B23/02—Arrangements specially adapted for the production of shaped articles with elements wholly or partly embedded in the moulding material; Production of reinforced objects wherein the elements are reinforcing members
- B28B23/04—Arrangements specially adapted for the production of shaped articles with elements wholly or partly embedded in the moulding material; Production of reinforced objects wherein the elements are reinforcing members the elements being stressed
- B28B23/06—Arrangements specially adapted for the production of shaped articles with elements wholly or partly embedded in the moulding material; Production of reinforced objects wherein the elements are reinforcing members the elements being stressed for the production of elongated articles
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B28—WORKING CEMENT, CLAY, OR STONE
- B28B—SHAPING CLAY OR OTHER CERAMIC COMPOSITIONS; SHAPING SLAG; SHAPING MIXTURES CONTAINING CEMENTITIOUS MATERIAL, e.g. PLASTER
- B28B7/00—Moulds; Cores; Mandrels
- B28B7/0029—Moulds or moulding surfaces not covered by B28B7/0058 - B28B7/36 and B28B7/40 - B28B7/465, e.g. moulds assembled from several parts
- B28B7/0035—Moulds characterised by the way in which the sidewalls of the mould and the moulded article move with respect to each other during demoulding
- B28B7/0041—Moulds characterised by the way in which the sidewalls of the mould and the moulded article move with respect to each other during demoulding the sidewalls of the mould being moved only parallelly away from the sidewalls of the moulded article
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B28—WORKING CEMENT, CLAY, OR STONE
- B28B—SHAPING CLAY OR OTHER CERAMIC COMPOSITIONS; SHAPING SLAG; SHAPING MIXTURES CONTAINING CEMENTITIOUS MATERIAL, e.g. PLASTER
- B28B7/00—Moulds; Cores; Mandrels
- B28B7/10—Moulds with means incorporated therein, or carried thereby, for ejecting or detaching the moulded article
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Ceramic Engineering (AREA)
- Mechanical Engineering (AREA)
- Manufacturing & Machinery (AREA)
- Devices For Post-Treatments, Processing, Supply, Discharge, And Other Processes (AREA)
- Manufacturing Of Tubular Articles Or Embedded Moulded Articles (AREA)
- Moulds, Cores, Or Mandrels (AREA)
- Coating Apparatus (AREA)
- Panels For Use In Building Construction (AREA)
- Casting Devices For Molds (AREA)
- Road Signs Or Road Markings (AREA)
- Apparatuses And Processes For Manufacturing Resistors (AREA)
Description
Fremgangsmåte til rensing av uren streptokinase.
Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte til rensing av uren streptokinase.
Streptokinase er et fermentas]' onspro-dukt fra hemolytiske streptokokker. Det ble for noen tid siden fastslått at streptokinasen spiller en rolle ved oppløsning av blodpropper og særlig av eksudater som er rike på fibrin-bestanddeler. I avhengighet av blodproppenes natur og størrelse frembringer streptokinase, eller streptokinase i nærvær av plasminogen fra mennesker, oppløsning av disse. Imidlertid har hittil anvendelsen av. streptokinase (og av plasmin fremstillet fra plasminogen og streptokinase) vært begrenset på grunn av den kjennsgjerning at streptokinasen har vært forurenset med streptokokk-protein-bipro-dukter som frembringer giftvirkninger hos mennesker. Slike virkninger viser seg ved økning av legemstemperaturen, senkning av blodtrykket, rystelser, kuldegysninger, anoksi, cyanose og lignende.
Ved hjelp av foreliggende oppfinnelse
muliggjøres det å fjerne de forurensende proteiner fra streptokinase-preparater så at man får i høy grad ren streptokinase. Herved blir altså en i høy grad ren streptokinase tilgjengelig, hva der gjør det mulig
å behandle pasienter etter ønske med streptokinase eller med plasminogen som er aktivert med streptokinase. Slike be-handlinger er funnet å være av enestående
viktighet ved behandling av forskjellige sykdommer som tromboflebit, flebothrom-
bose, lunge-emboli, coronær trombose og lignende.
Den urene streptokinase som renses ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen, kan erholdes ved hjelp av kjente fremgangsmå-ter. I alminnelighet fremstilles den ved å anvende Streptococcus hemolyticus som podningsmiddel i et næringsmedium og la
veksten av bakteriene foregå i 8—10 timer. Etter forløpet av dette tidsrom avbrytes
fermentasjonen ved å lede kulturvæsken gjennom kjøleslanger hvorpå bakteriecel-lene fjernes ved sentrifugering eller filtre-ring. Streptokinasen kan isoleres fra kulturvæsken ved hjelp av hvilken som helst kjent metode. I alminnelighet har materialet som er isolert på denne måte, en renhet fra 15 til 60 %, bestemt ved fysikalske homogenitetsmetoder. Foreliggende oppfinnelse angår altså en fremgangsmåte til rensning av slike urene produkter.
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er karakterisert ved at en oppløsning av
uren streptokinase i en fosfatpuffer med molkonsen tras jon fra 0,005 til 0,015, fortrinnsvis 0,01, bringes i kontakt med DEAE-cellulose, hvorefter cellulosen vaskes med en fosfatpuffer hvis molkonsentrasjon ligger mellom 0,02 og 0,05, fortrinsvis 0,06, hvorved forurensninger fjernes, hvorpå streptokinasen elueres fra cellulosen med en fosfatpuffer hvis molkonsentrasjon ligger mellom 0,06 og 0,15, fortrinsvis 0,08.
Kromatograferingen kan foregå i kolonne eller chargevis. DEAE-cellulose (dietylaminoetylcellulose) vil si cellulose av den art som er beskrevet av Peterson og Sober (JACS 78:751, 1956).
Mange av forurensningene adsorberes ved den lave ionestyrke og bindes fast til harpiksen så at det erholdte streptokinase-eluat er fritt for disse stoffer. Andre forurensninger adsorberes ikke i nogen stor utstrekning og er tilstede i gjennomløpet.
Ved på riktig måte å velge fosfatpuf-ferens konsentrasjoner og den passende fraksjon, er det mulig med meget godt ut-bytte og på enkel måte å oppnå en meget ren streptokinase med høy terapeutisk ef-fektivitet og uten forurensninger som frembringer bivirkninger.
Der kan i fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen anvendes en hvilkensomhelst vanlig fosfatpuffer, men det foretrekkes å bruke natriumfosfat eller kaliumfosfat. Imidlertid kan der også med godt resultat anvendes mono-di- eller trifosfater av jordalkalimetallene, foruten sådanne fos-fater av alkalimetallene.
Ved elueringen av streptokinasen med fosfatpuffere som har en molar konsentrasjon innen det foran angitte område, er fraksjoner med en molar konsentrasjon fra 0,06 til 0,08 funnet å inneholde de største mengder streptokinase.
En meget egnet utførelsesform for fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen under anvendelse av økende konsentrasjon av fos-fatpufferen ved elueringen, er å la denne strømme gjennom en kolonne med opprin-nelig molar konsentrasjon på 0,01 og grad-vis tilføre kolonnen en fosfatpuffer med molar konsentrasjon på 0,15. På denne måte økes kontinuerlig den molare konsentrasjon av pufferen som anvendes til elueringen. Den fraksjon som går gjennom kolonnen opp til en molar konsentrasjon på 0,06, kastes vekk, mens den fraksjon som har en molar konsentrasjon over 0,06 og opp til 0,15 oppsamles. I stedet for kontinuerlig å øke den molare konsentrasjon på denne måte, er det mulig å vaske harpiksen suksessivt med adskilte pufferoppløs-ninger med økende konsentrasjon. Således kan f.eks. en første vaskning utføres med en 0,02 M oppløsning, den annen med en 0,04 M oppløsning og den tredje med en 0,06 M oppløsning, idet alle de herved erholdte vaskevæsker kastes vekk. Vaske-væskene med de derpå følgende høyere molare konsentrasjoner, nemlig 0,07 M, 0,09 og 0,15 oppsamles da de inneholder de største mengder streptokinase.
En del streptokinase vil finnes i den første eluerings-pufferoppløsning med konsentrasjon 0,06 M, følgelig kan en annen vaskning med samme molare konsentrasjon utføres og vaskevæsken oppsamles da den inneholder en betydelig mengde streptokinase. Alternativt er det mulig å fjerne forurensningene med en enkel pufferopp-løsning hvis konsentrasjon er 0,06 M og å oppsamle streptokinasen med en enkel puf-feroppløsning med konsentrasjon f.eks. 0,08 M. Herved vil imidlertid utbyttet av streptokinase bli relativt lavt.
I det følgende beskrives som eksempler noen utførelsesformer for oppfinnelsen.
Eksempel I
Dette eksempel viser rensing av urent streptokinase ved kromatografi i DEAE-celluloseharpiks fremstillet i overensstem-melse med det ovenfor anførte litteratur-sted.
Det foretrekkes å kondisjonere harpiksen før anvendelsen på følgende måte: 400 g DEAE-cellulose suspenderes i 8 liter vann og suspensjonens pH-verdi innstilles på 2 med IN saltsyre. Der-tilsettes derpå natriumklorid så at konsentrasjonen bringes på 5 %. Blandingen filtreres gjennom osteklede og vaskes med 8 liter 5 %'s natriumkloridoppløsning. Materialet suspenderes i vann og suspensjonens pH-verdi innstilles på 10,5 med IN natriumhydroxyd-oppløsning. Natriumkloridkonsentrasj onen bringes på 5 %, hvorpå blandingen filtreres og det tilbakeværende på filteret vaskes med 8 liter 5 %'s natriumkloridoppløs-ning. DEAE-cellulosen suspenderes påny og suspensjonens pH-verdi innstilles på 3 med IN saltsyre. Konsentrasjonen bringes påny til 5 % og harpiksen vaskes med 8 liter 5 %' s natriumkloridoppløsning. Derpå vaskes DEAE-cellulosen med 20 liter pyrogenfritt vann og filtreres.
DEAE-cellulosen suspenderes i 0,01 M fosfatpuffer, suspensjonen omrøres og man lar de faste stoffer bunnfelles flere ganger for å fjerne findelte bestanddeler. Det er av vesentlig betydning at findelte bestanddeler fjernes for å kunne få kolonner med en passende strømningshastighet. Den kolonne som ble anvendt i dette eksempel, har en strømningshastighet på ca. 500 ml pr. time. Det er meget fordelaktig å om-røre kolonnens innhold umiddelbart før anvendelsen for å forhindre adskillelse av de faste stoffer fra glass-overflaten.
I en kolonne med 30 cm lengde og inn-vendig diameter 52 mm anbringes DEAE-cellulose suspendert i 0,01 M fosfatpuffer. Der tilsettes DEAE-cellulose i slik mengde at der etter bunnfelning dannes en kolonne med høyde 6—7 cm.
Oppløsningen av den urene streptokinase dialyceres mot en fosfatpuffer med følgende sammensetning (konsentrasjon 0,005—0,015 M, fortrinnsvis 0,01 M): Mononatriumfosfat (NaH2P04) H20 — 27,6 g/liter Oppi. A Dinatriumfosfat (Na2HPOi) — 28,4 g pr. liter Oppi. B 16 ml av A fortynnes til 200 ml med destil-84 ml av B lert vann så at man får en fosfatpuffer med konsentrasjon 0,1 M og pH-verdi 7,5. Denne fortynnes til en fosfatkonsen-trasjon på 0,01 M.
Etter at likevekt har innstillet seg, er streptokinase-materialet ferdig til rensing. Innstillingen av likevekt kan bedømmes ved å måle oppløsningens elektriske mot-stand.
Den streptokinase som anvendes som utgangsmateriale kan fåes i handelen. I en konsentrasjon på 16° enheter/ml, eller i det hele 100 X 16e enheter oppløst i 100 ml vann, dialyseres i 16—18 timer ved 3° C mot 2 liter 0,01 M fosfatpuffer, pH-verdi 7,5. Streptokinaseoppløsningen innføres i kolonnen og elueres med fosfatpuffer. Ved en konsentrasjon av avløpet på 0,06 og 0,07 M elueres hovedparten av streptokinasen som et produkt med høy renhet, og viser seg i avløpet. Fraksjonene undersøkes på innhold av streptokinase og protein, og de en-kelte fraksjoners renhet bestemmes ved å beregne den spesifikke aktivitet (enheter streptokinase pr. gamma nitrogen). De fraksjoner som er rike på streptokinase kan lyofiliseres eller kan anvendes til over-føring av plasminogen til plasmin.
Eksempel II
Fremstilling av kolonnen: Der fremstilles en suspensjon av 1,5 g DEAE-cellulose i 30 ml 0,005 M kaliumfosfatpuffer med pH 7,0. Denne suspensjon helles i en krom-atografisk kolonne (med høyde 30 cm og indre diameter 1 cm) forsynt med en tet-ningsskive og en kapillarhevert. Man lar harpiksen bunnfelles ved sin tyngde, hvorpå man pakker den til en høyde på 15 cm ved påsetning av trykkluft (filtrert luft med et trykk ganske lite høyere enn atmosfæretrykk). Et tynt lag bomull anbringes over harpiksen i kolonnen for å beskytte denne mot mekaniske forstyrrel-ser. Denne pakning av kolonnen nedsetter strømningshastigheten gjennom denne til 10—20 ml pr. time. Anbringelse av prøven på kolonnen: Uren streptokinase med ca. 250 mg protein, oppløses i ca. 15 ml vann og den erholdte oppløsning dialyseres ved lavere tempera-tur (2—5° C) mot en 0,005 M fosfatpuffer. Den tilføres derpå kolonnen. Man lar den urene streptokinase-oppløsning perkolere gjennom kolonnen (under det samme lave trykk som ble anvendt ved pakningen av kolonnen) før tilsetning av puffer med økende ionestyrke.
Eluering fra kolonnen: Kaliumfosfatpuffer med pH-verdi 7,0 og med kontinuerlig økende konsentrasjon tilføres kolonnen. Konsentrasjonsgradienten ble erholdt ved å la 0,3 M kaliumfosfat (pH-verdi 7,0) strømme inn i en 250 ml beholder med 0,005 M puffer. Puffer-oppløsningene blan-des ved hjelp av et magnetisk røreverk. Oppløsning fra blandingsbeholderen strøm-mer gjennom kolonnen, idet strømnings-hastigheten gjennom denne bestemmer strømningshastigheten av 0,3 M kaliumfos-fatoppløsningen til 250 ml beholderen. Den hydrostatiske søyle som driver pufferen gjennom kolonnen, kan varieres ved å heve eller senke pufferbeholderen.
Hvert påfølgende 10 ml eluat ble opp-samlet separat. Undersøkelser på streptokinase-innhold i de således oppsamlede fraksjoner viser at under de angitte betin-gelser er hovedmengden av ren streptokinase i det 100. til 150. ml eluat, i hvilke fosfatkonsentrasjonen varierer fra 0,07 til 0,12 M. Ved lavere fosfatkonsentrasjoner ble forurensninger i den urene streptokinase eluert.
Eksempel III
Man går frem således som angitt i eksempel II, men under anvendelse av na-triumfosfatpuffer i stedet for kaliumfosfat-puffer. Hovedmengden av ren streptokinase er da tilstede i det 100. til 150. ml eluat, således som i eksempel II.
Claims (1)
- Fremgangsmåte til rensning av streptokinase, karakterisert ved at en oppløsning av uren streptokinase i en fosfatpuffer med molkonsentrasjon fra 0,005 til 0,015, fortrinnsvis 0,01, bringes i kontakt med dietylaminoetyl-cellulose, hvorefter cellulosen vaskes med en fosfatpuffer hvis molkonsentrasjon ligger mellom 0,02 og 0,06, fortrinnsvis 0,06] hvorved forurensninger fjernes, hvorpå streptokinasen elueres fra cellulosen med en fosfatpuffer hvis molkonsentrasjon ligger mellom 0,06 og 0,15, fortrinnsvis 0,08.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US00251358A US3832118A (en) | 1972-05-08 | 1972-05-08 | Apparatus for production of cast concrete members |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO137427B true NO137427B (no) | 1977-11-21 |
| NO137427C NO137427C (no) | 1978-03-01 |
Family
ID=22951607
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO1870/73A NO137427C (no) | 1972-05-08 | 1973-05-07 | Apparat til fremstilling av stoepte byggeelementer |
Country Status (31)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3832118A (no) |
| JP (1) | JPS5516045B2 (no) |
| AR (1) | AR198311A1 (no) |
| AT (1) | AT330638B (no) |
| AU (1) | AU464377B2 (no) |
| BE (1) | BE799248A (no) |
| BG (1) | BG27060A3 (no) |
| BR (1) | BR7303329D0 (no) |
| CA (1) | CA1000936A (no) |
| CH (1) | CH579973A5 (no) |
| CS (1) | CS168652B2 (no) |
| DD (1) | DD105152A5 (no) |
| DE (1) | DE2322542A1 (no) |
| ES (1) | ES414526A1 (no) |
| FI (1) | FI50943C (no) |
| FR (1) | FR2184316A5 (no) |
| GB (1) | GB1434797A (no) |
| IE (1) | IE37587B1 (no) |
| IL (1) | IL42129A (no) |
| IN (1) | IN139764B (no) |
| IT (1) | IT994859B (no) |
| KE (1) | KE2884A (no) |
| NL (1) | NL7306389A (no) |
| NO (1) | NO137427C (no) |
| OA (1) | OA04382A (no) |
| PL (1) | PL96612B1 (no) |
| RO (1) | RO65677A (no) |
| SE (1) | SE382008B (no) |
| SU (1) | SU615844A3 (no) |
| YU (1) | YU111673A (no) |
| ZA (1) | ZA733117B (no) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4004874A (en) * | 1974-06-19 | 1977-01-25 | Span-Deck, Inc. | Apparatus for production of cast concrete members |
| FI61281C (fi) * | 1978-10-02 | 1982-07-12 | Span Deck Inc | Betonggjutesunderlagsanlaeggning |
| US4289293A (en) * | 1978-10-02 | 1981-09-15 | Span-Deck, Inc. | Combination bed concrete casting apparatus |
| US4252293A (en) * | 1979-10-31 | 1981-02-24 | Norwalk Concrete Industries, Inc. | Hydraulic mold release mechanism for precast concrete products |
| EP0030247A1 (de) * | 1979-12-10 | 1981-06-17 | T.R.-Plast Kunststoffverarbeitung Inh. Theo Rosbach | Vorrichtung zum Ausformen von Spielbauelementen |
| DE3336655C2 (de) * | 1983-10-08 | 1995-07-27 | Karl Munte Betonwerke Gmbh | Gießform und Verfahren zur Herstellung eines Köcherfundament |
| DE69116744T2 (de) * | 1990-06-21 | 1996-10-02 | Nord Immobiliare Centro | Verfahren und Vorrichtung zum Herstellen von verstärkten Betongegenständen |
| BE1004584A3 (nl) * | 1990-08-29 | 1992-12-15 | Coussee Marc | Werkwijze en inrichting voor het gieten van t-vormige balken uit voorgespannen beton. |
| NL9002531A (nl) * | 1990-11-20 | 1992-06-16 | Schokbeton Bv | Inrichting voor het vervaardigen van voorgespannen betonnen dwarsliggers voor spoorrails, alsmede dwarsliggers vervaardigd onder toepassing van deze inrichting. |
| US5393033A (en) * | 1993-07-21 | 1995-02-28 | Wilson Concrete Company | Adjustable side form concrete mold |
| ES2155293B1 (es) * | 1997-02-04 | 2001-12-16 | Extremadura 2000 De Estructura | Procedimiento de fabricacion de placas pretensadas tipo pi por extrusion. |
| US20050183357A1 (en) * | 2004-02-10 | 2005-08-25 | The Cretex Companies, Inc. | Pre-formed concrete section |
| FR2892740A1 (fr) * | 2006-02-10 | 2007-05-04 | Conseil Service Investissement | Procede de realisation d'une poutre en beton, outillage de moulage et poutre en beton correspondante |
| US20160312466A1 (en) * | 2014-10-10 | 2016-10-27 | Norfa Enterprises Pty Ltd. | Components for masonry construction |
| US11701795B1 (en) * | 2019-02-27 | 2023-07-18 | Hamilton Form Company, Ltd. | Concrete mold form |
| CN112895116B (zh) * | 2021-01-19 | 2022-03-11 | 陕西中天建筑工业有限公司 | 一种预制板布料用辅助设备及其加工工艺 |
| CN113246285B (zh) * | 2021-05-25 | 2022-07-08 | 中交(福州)建设有限公司 | 混凝土护岸勾连块自动化流水线预制施工方法 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US1068613A (en) * | 1912-05-07 | 1913-07-29 | William J Volz | Mold for forming irregular bricks and tiles. |
| US1642947A (en) * | 1927-01-31 | 1927-09-20 | Goliath Rubber Company | Mold |
| US1770368A (en) * | 1929-04-18 | 1930-07-08 | Permold Co | Mold |
| US2916795A (en) * | 1957-05-03 | 1959-12-15 | Henderson Albert | Apparatus for molding reinforced concrete building slabs, columns and girders |
| US3132403A (en) * | 1961-06-22 | 1964-05-12 | Fmc Corp | Concrete beam molding apparatus |
| CA763876A (en) * | 1962-07-06 | 1967-07-25 | Span-Deck | Apparatus and method for forming concrete planks or slabs |
| US3168771A (en) * | 1963-01-28 | 1965-02-09 | Alfred T Nelson | Adjustable wing t form |
| US3523343A (en) * | 1967-12-05 | 1970-08-11 | Span Deck Inc | System for the production of cast concrete members |
-
1972
- 1972-05-08 US US00251358A patent/US3832118A/en not_active Expired - Lifetime
-
1973
- 1973-04-23 IN IN959/CAL/73A patent/IN139764B/en unknown
- 1973-04-25 YU YU01116/73A patent/YU111673A/xx unknown
- 1973-04-27 IL IL42129A patent/IL42129A/en unknown
- 1973-04-30 AU AU54976/73A patent/AU464377B2/en not_active Expired
- 1973-04-30 CH CH611873A patent/CH579973A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-05-01 CA CA170,182A patent/CA1000936A/en not_active Expired
- 1973-05-01 IE IE683/73A patent/IE37587B1/xx unknown
- 1973-05-01 GB GB2059173A patent/GB1434797A/en not_active Expired
- 1973-05-02 FI FI731396A patent/FI50943C/fi active
- 1973-05-04 DE DE2322542A patent/DE2322542A1/de not_active Withdrawn
- 1973-05-07 NO NO1870/73A patent/NO137427C/no unknown
- 1973-05-07 FR FR7316318A patent/FR2184316A5/fr not_active Expired
- 1973-05-07 SU SU731914244A patent/SU615844A3/ru active
- 1973-05-07 DD DD170656A patent/DD105152A5/xx unknown
- 1973-05-07 SE SE7306381A patent/SE382008B/xx unknown
- 1973-05-07 OA OA54901A patent/OA04382A/xx unknown
- 1973-05-07 AR AR247875A patent/AR198311A1/es active
- 1973-05-08 BG BG023540A patent/BG27060A3/xx unknown
- 1973-05-08 ES ES414526A patent/ES414526A1/es not_active Expired
- 1973-05-08 JP JP5151073A patent/JPS5516045B2/ja not_active Expired
- 1973-05-08 NL NL7306389A patent/NL7306389A/xx not_active Application Discontinuation
- 1973-05-08 BR BR3329/73A patent/BR7303329D0/pt unknown
- 1973-05-08 RO RO7374718A patent/RO65677A/ro unknown
- 1973-05-08 PL PL1973162408A patent/PL96612B1/pl unknown
- 1973-05-08 CS CS3280A patent/CS168652B2/cs unknown
- 1973-05-08 AT AT403973A patent/AT330638B/de not_active IP Right Cessation
- 1973-05-08 BE BE130875A patent/BE799248A/xx unknown
- 1973-05-08 IT IT23855/73A patent/IT994859B/it active
- 1973-05-08 ZA ZA733117A patent/ZA733117B/xx unknown
-
1978
- 1978-09-15 KE KE2884A patent/KE2884A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO137427B (no) | Apparat til fremstilling av st¦pte byggeelementer | |
| Gibbons et al. | Adsorbed salivary proline-rich protein 1 and statherin: receptors for type 1 fimbriae of Actinomyces viscosus T14V-J1 on apatitic surfaces | |
| EP0140386B1 (en) | Method for the purification of lpf-ha | |
| AU596159B2 (en) | Method and apparatus for separating proteins | |
| JP2538224B2 (ja) | 百日咳抗原の精製 | |
| EP0477285B1 (en) | Processes for the recovery of microbially produced chymosin | |
| DK147408B (da) | Fremgangsmaade til udvinding af thrombinagtige enzymer fra slangegifte eller slangegiftfraktioner | |
| HU219828B (hu) | Eljárás K-vitamin-függő proteinek izolálására és tisztítására | |
| Dombrose et al. | Ac-globulin (factor V): Preparation of a practical product | |
| JPS6176422A (ja) | 百日ぜきコンポ−ネントワクチンおよび百日ぜき・ジフテリア・破傷風混合ワクチンの製造方法 | |
| US3042586A (en) | Purification of streptokinase | |
| US3107203A (en) | Streptokinase purification process | |
| Lee et al. | Effect of culture conditions on the structure of Streptococcus pneumoniae type 19A (57) capsular polysaccharide | |
| US2989440A (en) | Urokinase-alpha plasminogen activator and methods of obtaining the same | |
| US3978209A (en) | Endotoxin free meningococcus polysaccharides | |
| EP0536564B1 (de) | Verfahren zur Reinigung von Streptolysin 0, intaktes Streptolysin 0 erhältlich nach diesem Verfahren und seine Verwendung | |
| US3478145A (en) | Chromatographic purification of virus with brushite modified by autoclaving | |
| US3444045A (en) | Process for purifying streptokinase | |
| US4885359A (en) | Method for the purification of LPF-HA | |
| JPS60218326A (ja) | 線維状赤血球凝集素の精製方法 | |
| Tylewska et al. | Application of percoll density gradients in studies of the adhesion of Streptococcus pyogenes to human epithelial cells | |
| CN108570098A (zh) | 一种百日咳多种抗原成分的分离纯化方法 | |
| US3368867A (en) | Chromatographic purification of influenza virus with brushite modified by autoclaving | |
| SU767121A1 (ru) | Способ выделени и очистки трипсина и химотрипсина | |
| AU2005308830A1 (en) | Purification of recombinant human factor XIII |