MXPA04005630A

MXPA04005630A - 6h-dibenzo[c,h]cromenos sustituidos como agentes estrogenicos.

Info

Publication number: MXPA04005630A
Application number: MXPA04005630A
Authority: MX
Inventors: Todd Cohn Stephen
Original assignee: Wyeth Corp
Priority date: 2001-12-13
Filing date: 2002-12-12
Publication date: 2004-12-06
Also published as: CA2470105C; DE60204482T2; ES2240856T3; CN100429210C; EP1453820B1; CN1602307A; TW200301107A; US20030176491A1; ATE296818T1; AR037814A1; HK1069171A1; BR0214918A; WO2003051863A1; US6723747B2; DE60204482D1; PT1453820E; JP2005538925A; EP1453820A1; CA2470105A1; AU2002357184A1

Abstract

Esta invencion proporciona moduladores del receptor estrogeno de formula (I), que tiene la estructura, en donde R1, R2, R3, R4, R5, R6 y R7 son como se definen en la especificacion, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.

Description

6H-DIBENZ0[c,h] CROMENOS SUSTITUIDOS COMO AGENTES ESTROGENICOS ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a 6H-dibenzo [c , h] crómenos sustituidos, que son útiles como agentes estrogénicos . Los efectos pleiotrópicos de estrogenos en tejidos mamíferos han sido bien documentados, y se aprecia ahora que los estrogenos afectan muchos sistemas de órganos [Mendelsohn and Karas, New England Journal of Medicine 340: 1801-1811 (1999), Epperson, et al., Psychosomatic Medicine 61: 676-697 (1999) , Crandall, Journal of Womens Health & Gender Based Medicine 8: 1155-1166 (1999), Monk and Brodaty, Dementia & Geriatric Cognitive Disorders 11: 1-10 (2000), Hurn and Macrae, Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism 20: 631-652 (2000), Calvin, Maturitas 34: 195-210 (2000), Finking, et al., Zeitschriff fur Kardiologie 89: 442-453 (2000), Brincat, Maturitas 35: 107-117 (2000), Al-Azzawi, Postgraduate Medical Journal 77: 292-304 (2001)]. Los estrogenos pueden ejercer efectos sobre los tejidos de varias maneras y el metabolismo de acción mejor caracterizado es su interacción con los receptores estrogénicos que conducen a alteraciones en la transcripción génica. Los receptores de estrogenos son factores de transcripción activados por ligando y pertenecen a la superfamilia del receptor de la hormona nuclear. Otros miembros de esta familia incluyen la progesterona , andrógeno, REF. : 155805 glucocorticoide y receptores mineralocorticoides. En la unión del ligando, estos receptores dimerizan y pueden activar la transcripción génica ya sea uniendo directamente a secuencias específicas en el ADN (conocido como elementos de respuesta) o interactuando con otros factores de transcripción (tal como API) , que en cambio se une directamente a secuencias de ADN específico [Moggs and Orphanides, E BO Reports 2: 775-7.81 (2001), Hall, et al., Journal of Biological Chemistry 276: 36869-36872 (2001), McDonnell, Principies of Molecular Regulation. P351-361 (2000)]. Una clase de proteínas "correguladoras" también puede interactuar con el receptor de unión de ligando y modular además su actividad transcripcional [McKenna, et al., Endocrine Reviews 20: 321-344 (1999) ] . También se ha mostrado que los receptores de estrógenos pueden suprimir la transcripción mediada por NFKB de una manera dependiente e independiente de ligando [Quaedackers , et al., Endocrinology 142: 1156-1166 (2001), Bhat, et al., Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology 67: 233-240 (1998), Pelzer, et al., Biochemical & Biophysical Research Communications 286: 1153-7 (2001)]. Los receptores de estrógenos también pueden activarse por fosforilación. Esta fosforilación se menciona por factores de crecimiento tales como EGF y causa cambios en la transcripción génica en ausencia del ligando [Moggs and Orphanides, EMBO Reports 2: 775-781 (2001), Hall, et al., Journal of Biological Chemistry 276: 36869-36872 (2001)].

Un medio menos caracterizado mediante el cual los estrógenos pueden afectar a las células es por medio de un receptor llamado de membrana. La existencia del receptor es controvertida, pero se ha documentado bien que los estrógenos pueden provocar respuestas no genómicas muy rápidas de las células. La entidad molecular responsable de la transducción no se ha aislado definitivamente, pero hay evidencia de sugerir que se relaciona al menos con las formas nucleares de los receptores de estrógeno [Levin, Journal of Applied Physiology 91: 1860-1867 (2001), Levin, Trends in Endocrinology & Metabolism 10: 374-377 (1999)] . Dos receptores de estrógenos se han descubierto hasta la fecha. El primer receptor de estrógeno se clonó aproximadamente hace 15 años y se refiere ahora como ERa [Green, et al., Nature 320: 134-9 (1986)]. La segunda forma del receptor de estrógeno se encontró comparativamente recientemente y se llama ??¾ß [Kuiper, et al., Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 93: 5925-5930 (1996)]. El trabajo previo sobre ERp enfocado en la definición de su afinidad para una variedad de ligandos y de hecho, se observaron algunas diferencias con ERa. La distribución de tejido de ERß ha sido bien mapeada en el roedor y no es coincidente con EROÍ. Los tejidos tales como el útero de ratón y rata expresan predominantemente ERa, mientras que el pulmón de ratón y rata expresan predominantemente ??^ß [Couse, et al., Endocrinology 138: 4613-4621 (1997), Kuiper, et al., Endocrinology 138: 863-870 (1997)] . Aun dentro del mismo órgano, la distribución de ERa y ER pueden compartimentarse . Por ejemplo, en el ovario de ratón, ???ß se expresa altamente en las células de granulosa y ERa se restringe a las células tecales y estromales [Sar and Welsch, Endocrinology 140; 963-971 (1999) , Fitzpatrick, et al., Endocrinology 140; 2581-2591 (1999)]. Sin embargo, hay ejemplos donde los receptores se coexpresan y hay evidencia de estudios in vitro de que ERa y ERß pueden formar heterodímeros [Cowley, et al., Journal of Biological Chemistry 272:19858-19862 (1997)]. Se han descrito un gran número de compuestos que imitan o bloquean la actividad de 17ß-estradiol . Los compuestos que tienen aproximadamen e los mismos efectos biológicos que el 17 -estradiol , el estrógeno endógeno más potente, se refieren como "agonistas del receptor de estrógeno". Aquellos que, cuando se dan en combinación con 17 ß-estradiol , bloquean sus efectos se llaman "antagonistas del receptor de estrógeno" . En realidad hay una serie continua entre la actividad del agonista del receptor de estrógeno y el antagonista del receptor de estrógeno y de hecho algunos compuestos se comportan como agonistas del receptor de estrógeno en algunos tejidos y antagonistas del receptor de estrógeno en otros. Estos compuestos con actividad mezclada se llaman moduladores del receptor de estrógeno selectivo (SERMS; por sus siglas en inglés) y son agentes terapéuticamente útiles (por ejemplo EVISTA) [McDonnell, Journal of the Society for Gynecologic Investigation 7: S10-S15 (2000), Goldstein, et al., Human Reproduction Update 6: 212-224 (2000)]. La razón precisa porque el mismo compuesto puede tener efectos específicos celulares no se ha elucidado, pero se han sugerido las diferencias en la conformación del receptor y/o en el medio de proteínas correguladoras. Se ha conocido durante algún tiempo que los receptores de estrógenos adoptan diferentes conformaciones cuando unen a ligandos. Sin embargo, la consecuencia y sutilidad de estos cambios se ha revelado sólo recientemente. Las tres estructuras dimensionales de ERa y ER se han resuelto por co-cristalización con varios ligandos y muestran claramente el reposicionamiento de hélice 12 en presencia de un antagonista del receptor de estrógeno que impide estéricamente las secuencias de proteínas requeridas para la interacción de la proteína correguladora del receptor [Pike, et al., Embo 18: 4608-4618 (1999), Shiau, et al., Cell 95: 927-937 (1998)]. Además, la técnica de despliegue del fago se ha usado para identificar péptidos que interactúan con los receptores de estrógenos en presencia de diferentes ligandos [Paige, et al., Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 96: 3999-4004 (1999)]. Por ejemplo, un péptido se identificó que se distinguió entre ERo¡ unido al 17 ß-estradiol de los agonistas del receptor de estrógeno total y dietilestilbesterol. Un péptido diferente se mostró que se distinguía entre clomifeno unido a EROÍ y ER . Estos datos indican que cada ligando coloca potencialmente el receptor en una conformación única e impredecible que tiene probablemente actividades biológicas distintas. Como se mencionó anteriormente, los estrógenos afectan una panoplia de procesos biológicos. Además, cuando se han descrito diferencias de género (por ejemplo frecuencias de enfermedades, respuestas a estímulos, etc) , es posible que la explicación involucre la diferencia en los niveles de estrógenos entre machos y hembras. DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención proporciona un compuesto estrogénico de fórmula I que tiene la estructura, R2 se seleccionan cada uno, independientemente, de hidrógeno, hidroxilo, alquilo de 1-6 átomos de carbono, alquenilo de 2-7 átomos de carbono, alquinilo de 2-7 átomos de carbono, alcoxi de 1-6 átomos de carbono o halógeno; en donde los radicales alquilo o alquenilo .de Ri o R2 pueden sustituirse opcionalmente con hidroxilo, -CN, halógeno, trifluoroalquilo, trifluoroalcoxi , -N02, o fenilo; y con la condición de que al menos uno de Ri o R2 sea hidroxilo; R4, R5, R6 y R7 son cada uno, independientemente, hidrógeno, alquilo de 1-6 átomos de carbono, halógeno, alcoxi de 1-6 átomos de carbono, -CN, alquenilo de 2-7 átomos de carbono, alquinilo de 2-7 átomos de carbono, -CHO, fenilo, o un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que tiene 1 a 4 heteroátomos seleccionados de 0, N o S; en donde los radicales alquilo o alquenilo de R4, Rs, R6 o R7 pueden sustituirse opcionalmente con hidroxilo, CN, halógeno, trifluoroalquilo , trifluoroalcoxi , -N02 o fenilo; en donde el radical fenilo de R4 o R5 puede ser opcionalmente mono-, di- o tri-sustituido con alquilo de 1-6 átomos de carbono, alquenilo de 2-7 átomos de carbono, halógeno, hidroxilo, alcoxi de 1-6 átomos de carbono, -CN, -N02, amino, alquilamino de 1-6 átomos de carbono, dialquilamino de 1-6 átomos de carbono por grupo alquilo, tio, alquiltio de 1-6 átomos de carbono, alquilsulfinilo de 1-6 átomos de carbono, alquilsulfonilo de 1-6 átomos de carbono, alcoxicarbonilo de 2-7 átomos de carbono, alquilcarbonilo de 2-7 átomos de carbono o benzoilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Las sales farmacéuticamente aceptables pueden formarse de ácidos orgánicos e inorgánicos, por ejemplo, acético, propiónico, láctico, cítrico, tartárico, succínico, fumárico, maleico, malónico, mandélico, málico, itálico, clorhídrico, bromhídrico, fosfórico, nítrico, sulfúrico, metansulfónico, naftalensulfónico, bencensulfónico , toluensul fónico, canforsulfónico y los auxiliares aceptables similarmente conocidos cuando un compuesto de esta invención contiene un radical básico. Las sales también pueden formarse de bases orgánicas e inorgánicas, tales como sales de metales alcalinos (por ejemplo, sodio, litio o potasio) sales de metales alcalinotérreos , sales de amonio, sales de alquilamonio que contienen 1-6 átomos de carbono o sales de dialquilamonio que contienen 1-6 átomos de carbono en cada grupo alquilo y sales de trialquilamonio que contienen 1-6 átomos de carbono en cada grupo alquilo, cuando un compuesto de esta invención contiene un radical ácido. Los términos alquilo y alquenilo como un grupo o parte de un grupo, (por ejemplo, alcoxi, alquiltio alquilcarbonilo) , incluyen radicales de cadena ramificada y lineal, por ejemplo, de 1-6 y 2-7 átomos de carbono respectivamente. Ejemplos incluyen metilo, etilo, propilo, butilo, isopropilo, sec-butilo, ter-butilo, vinilo, alilo, 1-metil vinilo y similares. Cuando los radicales alquilo o alquenilo se sustituyen, pueden ser típicamente mono-, di-, tri o persustituidos . Ejemplos de un sustituyente halógeno incluyen 1 -bromovinilo, 1-fluorovinilo, 1 , 2 -difluorovinilo , 2 , 2 -difluorovinilo, 1 , 2 , 2 -trifluorovinilo, 1,2-dibromo etano, 1,2-difluoro-etano, 1-fluoro-2-bromo etano, CF2CF3, CF2CF2CF3 y similares. El término halógeno incluye bromo, cloro, flúor y yodo. Los anillos heterocíclicos de 5-6 miembros preferidos incluyen furano, tiofeno, pirrol, isopirrol, pirazol, imidazol, triazol, ditiol, oxatiol, isoxazol, oxazol, tiazol, isotiazolem, oxadiazol, furazano, oxatriazol, dioxazol, oxatiazol, tetrazol, pirano, piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, triazina, oxazina, oxatiazina u oxadiazina. Se prefiere más que el anillo heterocíclico sea furano o tiofeno. Como se usa de acuerdo con esta invención, el término "proporcionar", con respecto a proporcionar un compuesto o sustancia cubierto por esta invención, significa ya sea administrar directamente tal compuesto o sustancia o administrar un profármaco, derivado o análogo que formará la cantidad efectiva del compuesto o sustancia dentro del cuerpo.

En algunas modalidades R6 y R7 son cada uno, independientemente, hidrógeno o halógeno, por ejemplo R6 es hidrógeno o flúor. R4 y R5 pueden seleccionarse cada uno por ejemplo, independientemente, de hidrógeno, alquilo de 1-6 átomos de carbono, alcoxi de 1-6 átomos de carbono, halógeno, alquenilo de 2-7 átomos de carbono, -CN, furilo y tienilo. En algunas modalidades R4 no es hidrógeno, por ejemplo, R4 se selecciona, por ejemplo de ciano, cloro, bromo, metilo, etilo, propilo, butilo, metoxi, vinilo, tien-2-ilo y tien-3-ilo. Ejemplos de R5 son hidrógeno y halógeno, por ejemplo, cloro. Ejemplos de R2 y R3 son cada uno, independientemente, hidrógeno, halógeno por ejemplo, cloro o hidroxilo. Ejemplos de Rx son hidrógeno, hidroxilo y halógeno, por ejemplo, cloro. En algunas modalidades solo uno de Ri y R2 es hidroxi . Ejemplos de R3 son hidrógeno y halógeno, tal como cloro, por ejemplo, en la posición 4. De los compuestos de esta invención, se prefiere que R6 y R7 sean cada uno, independientemente, hidrógeno o halógeno; y R4 y R5 sean, independientemente, hidrógeno, alquilo de 1-6 átomos de carbono, alcoxi de 1-6 átomos de carbono, halógeno, alquenilo de 2-7 átomos de carbono, -CN, furilo o tienilo. Se prefiere más que Rx, R2 y R3 sean cada uno, independientemente, hidrógeno, halógeno o hidroxilo; y aún más preferido que R4 no sea hidrógeno. También se proporcionan procesos para preparar los compuestos de esta invención. Por lo tanto, esta invención proporciona un proceso para preparar un compuesto de fórmula I que comprende uno de los siguientes: a) des-alquilar un compuesto de fórmula II: en donde R es un grupo alquilo de 1 a 6 átomos de carbono y Ri/ ¾Í R3, ^f RSJ 6 y ? son como se definen en la presente, para dar un compuesto de fórmula I; o b) des-acilar un compuesto de fórmula III: en donde R' es un grupo acilo, por ejemplo, alcanoilo de 2-7 átomos de carbono tal como acetilo, R11 es Ri o un grupo aciloxi, por ejemplo, alcanoilo de 2-7 átomos de carbono tal como acetilo, R12 es R2 o un grupo aciloxi, por ejemplo, alcanoilo de 2-7 átomos de carbono tal como acetilo y R3, R,,, R5, R6, R7, son como se definen en la presente, para dar un compuesto correspondiente de fórmula I; o c) hacer reaccionar un compuesto 12-bromo de fórmula IV: protegido conforme sea necesario, en donde Ri, R2, R3, s> 6 y R7 son como se definen anteriormente, con un derivado reactivo apropiado de fórmula: R4-L en donde R4 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 7 átomos de carbono o un anillo heterociclico de 5 ó 6 miembros que tiene 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, o S, y en donde L es un grupo saliente apropiado, por ejemplo, L es un ácido borónico (tal como ácido butil borónico o ácido 2-tiofen borónico) o derivado de butilestaño (tal como aliltributilestaño) ; y retirar cualesquiera grupos protectores, para dar un compuesto correspondiente de fórmula (I) ; o d) halogenar un compuesto de fórmula I: como se define en la reivindicación 1 protegido si es necesario, y en donde al menos uno de Ri, R2, R3, F y R5 es hidrógeno, con un agente de halogenación, por ejemplo, N-bromosuccinimida, N-cloro-succinimida seguido si es necesario por desprotección, para dar un compuesto de fórmula I, en donde al menos uno de Ri, R2, R3 y F es hidrógeno; o e) nitrilar (es decir, introducir CN) un compuesto de fórmula I: I como se define en la presente, protegido conforme sea necesario, y en donde R4 es bromo, con un agente de nitrilación, por ejemplo, cianuro de zinc, seguido si es necesario por desprotección, para dar un compuesto de fórmula I en donde R4 es ciano; o f) convertir un compuesto básico de fórmula I a una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o viceversa. Los reactivos usados en la preparación de los compuestos de esta invención pueden obtenerse ya sea comercialmente o pueden prepararse mediante los procedimientos estándares descritos en la literatura. En cualquiera de las reacciones descritas en la presente, los grupos o sitios de sustituyentes reactivos pueden protegerse antes de la reacción que se lleva a cabo y retirarse el grupo protector posteriormente. En el proceso a) anterior en donde cualquiera de Ri y R2 es también alcoxi entonces este grupo puede desalquilarse en la misma reacción para dar un compuesto correspondiente de fórmula I, en donde Rx y/o R2 es hidroxi . La preparación de varios ejemplos representativos de esta invención de acuerdo con los procesos anteriores se describen en los siguientes Esquemas de reacción 1-10.

Esquema de reacción 1 Esquema de reacción 2 Esquema de reacción 3 Esquema de reacción 5 Esquema de reacción 6 25 1m Esquema de reacción 7 Esquema de reacción 8 Esquema de reacción 9 32 1u: R,=OH, R2=H Esquema de reacción 10 1y: X=CI Y=H u_ X=H ?=a Los procedimientos de prueba farmacológicos estándares son fácilmente disponibles para determinar el perfil de actividad de un compuesto de prueba dado. Lo siguiente resume brevemente varios procedimientos de prueba representativos y puede incluir datos para los compuestos representativos de la invención. Todas las pruebas excepto la prueba de unión de radioligando, pueden usarse para detectar la actividad del agonista o antagonista del receptor de estrógeno de los compuestos. En general, la actividad del agonista del receptor de estrógeno se mide comparando la actividad del compuestos con un estrógeno de referencia (por ejemplo 17 ß-estradiol , 17a-etinilo, 17 ß-estradiol , estrona, dietil-estilbesterol, etc) . La actividad del antagonista del receptor de estrógeno se mide en general co-tratando el compuesto de prueba con el estrógeno de referencia y comparando el resultado con el obtenido con el estrógeno de referencia solo. Los procedimientos de prueba farmacológica estándares para SERMs también se describen en las patentes US 4,418,068 y 5,998,402 que se incorporan en la presente por referencia. Evaluación de las afinidades de unión a ERot y ERft Ejemplos representativos de la invención se evaluaron por su capacidad para completar con 17p-estradiol para ERa y ??¾ß en una prueba de unión de radioligando convencional . Este procedimiento de prueba proporciona la metodología para determinar las afinidades de unión relativas para los receptores ERa o ER . El procedimiento usado se describe brevemente a continuación. Preparación de los extractos del receptor para la caracterización de la selectividad de unión. Los dominios de unión del ligando, definidos convenientemente en la presente como toda la dirección 3' a 5' de la secuencia del dominio de unión de ADN, se obtuvieron por PCR usando ADNc de longitud total como moldes y cebadores que contuvieron los sitios de restricción apropiados para la subclonación mientras que se mantenía el marco de lectura apropiado para la expresión. Estos moldes contuvieron los aminoácidos M250- 595 de ERa humano [Green, et al., Nature 320: 134-9 (1986)] y M214-Q530 de ??ß humano [Ogawa, et al., Biochemical & Biophysical Research Communications 243: 122-6 (1998)]. ERp humano se clonó en pET15b (Novagen, Madison WI) como un fragmento Ncol-BamHl que porta una marca C terminal Flag. ER humano se clonó como para ERß humano excepto que se adicionó una marca N terminal His. Las secuencias de todas las construcciones usadas se verificaron por secuenciacion completa de ambas hebras. Células BL21 (DE3) se usaron para expresar las proteínas humanas. Típicamente se usó un cultivo de 10 mL durante toda la noche para inocular un cultivo de 1 L de medio LB que contiene 100 pg/mL de ampicilina. Después de la incubación durante toda la noche a 37°C, se adicionó IPTG a una concentración final de 1 mM y la incubación procedió a 25°C durante 2 horas. Las células se cosecharon por centrifugación (1500 x g) y las pelotillas se lavaron con y se resuspendieron en 100 mL de Tris-Cl 50 mM (pH 7.4), NaCl 150 mM. Las células se lisaron pasando dos veces a través de una prensa French a 82.73 MPa (12000 psi) . El lisado se clarificó por centrifugación a 12,000 x g durante 30 minutos a 4°C y se almacenó a -70°C. Evaluación de extractos para la unión específica de [3H] -estradiol . Solución salina amortiguada con fosfato de Dulbecco (Gibco, concentración final lx) suplementado con EDTA lmM se usó como el amortiguador de prueba. Para optimizar la cantidad de receptor a usar en la prueba, [3H] -17 ß-estradiol (New England Nuclear; concentración final = 2 nM) ± dietilestilbestrol 0.6 µ? y 100 pL de varias diluciones de lisado de E. coli se adicionaron a cada pozo de una placa de microtitulación enmascarada de alta unión (EG&G Wallac) . El volumen de prueba final fue de 120 yL y la concentración de DMSO fue = 1%. Después de la incubación a temperatura ambiente durante 5-18 horas, el material no unido se aspiró y la placa se lavó tres veces con aproximadamente 300 \iL de amortiguador de prueba. Después del lavado, 135 µ?, de cóctel de centelleo (Optiphase Supermix, EG&G Wallac) se adicionó a los pozos y la placa se selló y se agitó durante al menos 5 minutos para mezclar el centelleante con amortiguador de lavado residual. La radioactividad unida se evaluó por conteo de centelleo líquido (EG&G Wallac Microbeta Plus) . Después de determinar la dilución de cada preparación de receptor que proporcionó la unión específica máxima, la prueba se optimizó además estimando el IC50 del 17 ß - es t adiol no marcado usando varias diluciones de la preparación del receptor. Una dilución de trabajo final para cada preparación del receptor se eligió, para la cual el IC50 de 17 -estradiol no marcado fue de 2-4 nM.

Procedimiento de prueba de competición de unión de ligando. Los compuestos de prueba se solubilizaron inicialmente en DMSO y la concentración final de DMSO en la prueba de unión fue =1%. Ocho diluciones de cada compuesto de prueba se usaron como un competidor no marcado para [3H] -?7ß-estradiol . Típicamente, un grupo de diluciones del compuesto sería probado simultáneamente en ERa y ER humanos. Los resultados se graficaron como DPM medido vs . concentración del compuesto de prueba. Para la calibración de la curva de dosis-respuesta, un modelo logístico de cuatro parámetros en los datos transformados, ponderados se ajustó y el IC50 se definió como la concentración del compuesto que disminuye la unión de [3H] -estradiol máxima por 50%. Las afinidades para ERa y ??ß (como se midieron por IC50) para los ejemplos representativos de la invención se muestran en la Tabla (1) .

Tabla 1: Afinidades de unión ER de compuestos representativos de la invención E emplo ER-ß IC50 (nM) ER-OÍ IC50 (nM) la 3.3 74 Ib 1.8 20 le 79.7 460 Id 1.8 107 le 19 1231 lf 3.5 156 ig 2.7 74 lh 0.90 26 li 1.1 17 lj 2.0 77 lk 2.0 27 11 16 147 lm 0.27 10.4 ln 2.7 102 lo 2.3 81 lp 2.9 44 iq 29.2 154 Ir 48.3 217 ls 3.0 71 . lt 11 160 Tabla 1: Afinidades de unión ER de compuestos representativos de la invención Ejemplo ER-ß IC50 (nM) ER-a IC50 (nM) lu 1.4 17 lv 0.9 4.5 lw 1.4 10 lx 1.5 86 iy 0.65 17.6 lz 0.8 10 Los resultados obtenidos en el procedimiento de prueba farmacológico estándar descrito anteriormente demuestran que los compuestos de esta invención unen los subtipos del receptor de estrógeno. Los IC5oS son en general inferiores para ER , lo que indica que estos compuestos son preferentemente ligandos selectivos de ERß, pero aún se consideran activos a ERa. Los compuestos de esta invención exhibirán un intervalo de actividad basado, al menos parcialmente, en sus perfiles de selectividad de afinidad del receptor. Dado que los compuestos de la invención unen ER-ß con mayor afinidad que ER-a, serán útiles en el tratamiento o inhibición de enfermedades que pueden modularse por vía de ER-ß. Adicionalmente, dado que cada complejo del ligando receptor es único y de esta manera su interacción con varias proteínas correguladoras es única, los compuestos de esta invención presentarán actividades diferentes e impredecibles dependiendo del contexto celular. Por ejemplo, en algunos tipos celulares, es posible para un compuesto comportarse como un agonista del receptor de estrógeno, mientras que en otros tejidos, un antagonista del receptor de estrógeno. Los compuestos con tal actividad se han referido a menudo como SERMs (Moduladores selectivos del receptor de estrógeno) . Sin embargo, a diferencia de muchos estrógenos, muchos de los SERMs no causan aumentos en el peso húmero uterino. Estos compuestos son antiestrogénicos en el útero y pueden antagonizar completamente los efectos tróficos de los agonistas del receptor de estrógeno en el tejido uterino. Estos compuestos, sin embargo, actúan como agonistas del receptor de estrógeno en los sistemas óseo, cardiovascular y nervioso central. Debido a esta naturaleza selectiva del tejido de estos compuestos, son útiles en el tratamiento o inhibición en un estado de enfermedad o síndrome de mamífero que son causados o asociados con una deficiencia de estrógenos (en ciertos tejidos tales como óseo y cardiovascular) o un exceso de estrógeno (en el útero o glándulas mamarias) . Además, los compuestos de esta invención también tienen el potencial de comportarse como agonistas del receptor de estrógeno en un tipo de receptor mientras que se comportan como antagonistas del receptor de estrógeno en el otro. Por ejemplo, se ha demostrado que los compuestos pueden antagonizar la acción de 173-estradiol por vía de ??? mientras que exhiben actividad agonista del receptor de estrógeno con ERa [Sun, et al., Endocrinology 140: 800-804 (1999)] . Tal actividad de ERSAA (Antagonista agonista selectivo del receptor de estrógeno) proporciona actividad estrogénica farmacológicamente distinta dentro de esta serie de compuestos . Regulación de ARNm de metalotioneina II Los estrogenos que actúan por medio de ??ß, pero no de ERa pueden sobrerregular los niveles de ARNm de metalotioneina II en células Saos-2 como se describe por Harris [Endocrinology 142: 645-652 (2001)] . Los resultados de este procedimiento de prueba pueden combinarse con los resultados del procedimiento de prueba descrito posteriormente (procedimiento de prueba del reportero ERE) para generar un perfil de selectividad para los compuestos de esta invención (ver también WO 00/37681) . Evaluación del compuesto de prueba usando un procedimiento de prueba del informador ERE en células de cáncer de mama MCF-7 Soluciones patrón de los compuestos de prueba (usualmente 0.1 M) se preparan en DMSO y después se diluyen 10 a 100 veces con DMSO para hacer soluciones de trabajo de 1 ó 10 mM. Los patrones DMSO se almacenan ya sea a 4°C (0.1 M) o -20°C (<0.1 M) . Las células MCF-7 se pasan dos veces por semana con el medio de crecimiento [medio D-MEM/F-12 que contiene 10% (v/v) de suero fetal de bovino inactivado por calor, 1% (v/v) de Penicilina-Estreptomicina y glutaMax-1 2 mM] . Las células se mantienen en matraces venteados a 37 °C dentro de una incubadora de 5% de C02/95% de aire humidificado . Un día antes del tratamiento, las células se colocan en placas con el medio de crecimiento a 25,000 células/pozo en placas de 96 pozos y se incuban a 37°C durante toda la noche. Las células se infectan durante 2 h a 37°C con 50 µ?/???? de una dilución 1:10 de adenovirus 5-ERE-tk-luciferasa en medio experimental [medio D-MEM/F-12 sin rojo de fenol que contiene 10% (v/v) de suero fetal de bovino despojado de carbón natural inactivado por calor, 1% (v/v) de Penicilina-Estreptomicina, glutaMax-1 2 mM, piruvato de sodio 1 mM] . Los pozos después se lavan una vez con 150 µ? de medio experimental. Finalmente, las células se tratan durante 24 h a 37°C en replicados de 8 pozos/tratamiento con 150 µ?/???? de vehículo (=0.1% v/v de DMSO) o el compuesto se diluye =1000 veces en medio experimental. La selección inicial de los compuestos de prueba se hace a una dosis única de 1 µ? que se prueba sola (modo agonista del receptor de estrógeno) o en combinación con 17ß-estradiol 0.1 nM (EC8o; modo antagonista del receptor de estrógeno) . Cada placa de 96 pozos también incluye un grupo de control de vehículo (DMSO al 0.1% v/v) y un grupo de control de agonista del receptor de estrógeno (ya sea 17ß-estradiol 0.1 ó 1 nM) . Los experimentos de repuesta a la dosis se realizan en los modos de agonista del receptor de estrógeno y/o antagonista del receptor de estrógeno en los compuestos activos en incrementos logarítmicos de 10"14 a 10"5 . De estas curvas de repuesta a la dosis, se generan los valores EC50 e IC50( respectivamente. El pozo final en cada grupo de tratamiento contiene 5 µ? de ICI-182,780 3xl0"5 (concentración final 10"5) como un control de antagonista del receptor de estrógeno. Después del tratamiento, las células se lisaron en un agitador durante 15 min con 25 µ?/???? de reactivo de lisis de cultivo celular IX (Promega Corporation) . Los lisados celulares (20 /iL) se transfieren a una placa luminometro de 96 pozos, y la actividad de luciferasa se mide en un luminometro MicroLumat LB 96 P (EG & G Berthold) usando 100 L/pozo de sustrato de luciferasa (Promega Corporation) . Antes de la inyección del sustrato, se hace una medición del medio de 1 segundo para cada pozo. Después de la inyección del sustrato, se mide la actividad de luciferasa durante 10 segundos después de 1 segundo de retraso. Los datos se transfieren desde el luminometro hasta una computadora personal Macintosh y se analizan usando los elementos de programación JMP (SAS Institute) ; este programa sustrae la lectura del medio de la medición de luciferasa para cada pozo y después determina la media y la desviación estándar de cada tratamiento . Los datos de luciferasa se transforman por logaritmos y se usa el estimador M de Huber para ponderar de manera descendente las observaciones transformadas exteriores. Los elementos de programación JMP se usan para analizar los datos transformados y ponderados para ANOVA de un sentido (prueba de Dunnett) . Los tratamientos del compuestos se comparan con los resultados de control del vehículo en el modo de agonista del receptor de estrógeno, o los resultados de control del agonista del receptor de estrógeno positivo (??ß-estradiol 0.1 nM) en el modo antagonista del receptor de estrógeno. Para el experimento de dosis única inicial, si los resultados de tratamiento del compuesto son significativamente diferentes del control apropiado (p<0.05), entonces los resultados se reportan como el por ciento con relación al control de 17 -estradiol (es decir, ((compuesto - control de vehículo) / (control de 17ß-estradiol - control de vehículo) ) x 100] . Los elementos de programación JMP también se usan para determinar los valores EC50 e/o IC50 de las curvas de dosis-respuesta no lineales. Evaluación de la actividad uterotrófica La actividad uterotrófica de un compuesto de prueba puede medirse de acuerdo con los siguientes procedimientos de prueba farmacológica estándares. Procedimiento 1: ratas Sprague-Dawley sexualmente inmaduras (18 días de edad) se obt ienen de Taconic y se les proporciona acceso sin restricción a una dieta basada en caseína (Purina Mills 5K96C) y agua. En el día 19, 20 y 21 las ratas se dosificaron subcutáneamente con 17a-etinil-17$-estradiol (0.06 µg/rata/día) , compuesto de prueba o vehículo (50% de DMSO/50% de PBS de Dulbecco) . Para verificar el antagonista del receptor de estrógeno, los compuestos se coadministran con 17a-etinil-17 -estradiol (0.06 µg/rata/día) . Hay seis ratas/grupo y se someten a eutanasia aproximadamente 24 horas después de la última inyección por asfixia con C02 y neumotorax. Los úteros se retiran y se pesan después de quitar la grasa asociada y exprimir cualquier fluido intestinal. Una muestra de tejido también puede congelarse rápidamente para el análisis de la expresión de genes (por ejemplo factor de complemento 3 ARNm) . Procedimiento 2: ratones 129 SvE sexualmente inmaduras (18 días de edad) se obtuvieron de Taconic y se les proporcionó acceso sin restricción a una dieta basada en caseína (Purina Mills 5K96C) y agua. En el día 22, 23, 24 y 25 los ratones se dosificaron subcutáneamente con compuesto o vehículo (aceite de maíz) . Hubo seis ratones/grupo y se sometieron a eutanasia aproximadamente 6 horas después de la última inyección por asfixia con C02 y neumotorax. Los úteros se retiraron y se pesaron después de quitar la grasa asociada y exprimir cualquier fluido intestinal. Los siguientes resultados (Tabla (2)) se obtuvieron para los compuestos representativos de la invención.

Evaluación de osteoporosis y modulación de lipidos (cardioprotección) Ratas Sprague-Dawley hembras, operadas por ovariectomía o estimuladas, se obtienen 1 día después de la cirugía de Taconic Farms (peso promedio 240-275 g) . Se alojan 3 ó 4 ratas/caja en un cuarto en un horario 12/12 (luz/oscuridad) y se abastecen con alimento (comida para rata Purina 5K96C) y agua ad libitum. El tratamiento para todos los estudios comienza el día 1 después de la llegada y las ratas se dosifican 7 días por semana como se indica durante 6 semanas. Un grupo de ratas operadas por estimulación de edades iguales que no reciben ningún tratamiento sirven como un grupo de control repleto de estrógeno, intacto para cada estudio . Todos los compuestos de prueba se preparan en un vehículo de 50% de DMSO (JT Baker, Phi 11 ipsburg , NJ) /solución salina de fosfato de Dulbecco lx (GibcoBRL, Grand Island, NY) a concentraciones definidas de modo que el volumen de tratamiento es 0.1 mL/100 g de peso corporal. Se disuelve 17ß-estradiol en aceite de maíz (20 g/mL) y se libera subcutáneamente, 0.1 mL/rata. Todas las dosificaciones se ajustan a intervalos de tres semanas de acuerdo con mediciones del peso corporal promedio del grupo y se dan subcutáneamente. Cinco semanas después del inicio del tratamiento y una semana antes del término del estudio, cada rata se evalúa para la densidad mineral ósea (BMD, por sus siglas en inglés) . La densidad total y trabecular de la tibia proximal se evalúan en ratas anestesiadas usando un XCT-960M (pQCT; Stratec Medizintechnik, Pforzheim, Alemania) . Las mediciones se realizan como sigue: Quince minutos antes de la exploración, cada rata se anestesia con una inyección intraperitoneal de 45 mg/kg de cetamina, 8.5 mg/kg de xilazina y 1.5 mg/kg de acepromazina . El miembro trasero derecho se pasa a través de un tubo de policarbonato con un diámetro de 25 mm y se une con cinta a un marco de acrílico con la articulación del tobillo a un ángulo de 90° y la articulación de la rodilla a 180°. El tubo de policarbonato se fija a una plataforma de deslizamiento que la mantiene perpendicular a la abertura del pQCT . La plataforma se ajusta de modo que el extremo distal del fémur y el extremo proximal de la tibia está en el campo de exploración. Una vista de exploración bidimensional se corre para una longitud de 10 mm y una resolución lineal de 0.2 mm . Después de que se despliega la vista de exploración en el monitor, el extremo proximal de la tibia se localiza. La exploración de pQCT se inicia a 3.4 mm distal de este punto. La exploración de pQCT es de 1 mm de espesor, tiene un tamaño de voxel (píxel tridimensional) de 0.140 mm y consiste de 145 proyecciones a través del corte. Después de que se completa la exploración de pQCT, la imagen se despliega en el monitor. Se representa una región de interés que incluye la tibia pero que excluye el peroné. El tejido suave se retira matemáticamente usando un algoritmo iterativo. La densidad del hueso restante (densidad total) se reporta en mg/cm3. El 55% exterior del hueso se desprende matemáticamente en una espiral concéntrica. La densidad del hueso restante (densidad Trabecular) se reporta en mg/cm3. Una semana después de la evaluación de BMD las ratas se someten a eutanasia por asfixia con C02 y neumotorax y la sangre se colecta para la determinación de colesterol . Los úteros también se retiran y se pesan después de quitar la grasa asociada y se expresa cualquier fluido luminal . El colesterol total se determina usando un analizador clínico Hitachi 911 de Boehringer-Mannheim usando el kit Colesterol/HP . Las estadísticas se compararon usando análisis de variancia de un sentido con la prueba de Dunnel . Evaluación de la actividad antioxidante Aortas de porcino se obtienen de un matadero, lavadas, transportadas en PBS congelado, y se cosechan las células endoteliales aórticas. Para cosechar las células, los vasos intercostales de la aorta se atan y un extremo de la aorta se sujeta. 0.2% de colagenasa fresca, filtrada estéril (Sigma Type I) se coloca en el vaso y el otro extremo del vaso después se sujeta para formar un sistema cerrado. La aorta se incuba a 37°C durante 15-20 minutos, después de lo cual la solución de colagenasa se colecta y se centrifuga durante 5 minutos a 2000 x g. Cada gránulo se suspende en 7 mL de medio de cultivo celular endotelial que consiste de medio DME /F12 de Ham sin rojo de fenol suplementado con FBS despojado de carbón natural (5%) , NuSerum (5%) , L-glutamina (4 mM) , penicilina-estreptomicina (1000 U/ml , 100 µ9/t?1) y gentamicina (75 g/ml) , se siembra en cajas petri de 100 mm y se incuba a 37°C en C02 al 5%. Después de 20 minutos, las células se enjuagan con PBS y se adiciona medio fresco, esto se repitió otra vez a 24 horas. Las células son confluentes después de aproximadamente 1 semana. Las células endoteliales se alimentan rutinariamente dos veces por semana y, cuando son confluentes, se tripnizan y se siembran a una relación 1:7. La oxidación mediada celular de 12.5 g/mL de LDL se deja proceder en presencia del compuesto que será evaluado (5 µ?) durante 4 horas a 37°C. Los resultados se expresan como en por ciento de inhibición del proceso oxidante como se mide por el método TBARS (sustancias reactivas de ácido tiobarbitúrico) para análisis de aldehidos libres [Yagi, Biochemical Medicine 15: 212-6 (1976)] . Procedimiento de prueba farmacológica estándar de regulación de AR m del receptor de progesterona Este procedimiento de prueba puede usarse para evaluar la actividad estrogénica o antiestrogénica de los compuestos de esta invención [Shughrue, et al., Endocrinology 138: 5476-5484 (1997)] . Los datos para los compuestos representativos de la invención se muestran en la Tabla (3) .

Tabla 3. Efecto de los compuestos representativos de la invención sobre la regulación de ARNm de progeste.rona en el área preóptica del cerebro de rata Compuesto (10 mg/kg) ARNm del receptor de progesterona (unidades arbitrarias; media ± desviación estándar Vehículo 189.2±27.2 Ejemplo Id 403.9±19.1 Vehículo 4.3±1.5 Ejemplo li 57.5±14.0 Procedimiento de prueba de sofoco de calor de rata El efecto de los compuestos de prueba en sofocos de calor puede evaluarse en un procedimiento de prueba farmacológica estándar el cual mide la capacidad de un compuesto de prueba de embotar el aumento en la temperatura de la piel de la cola que se presenta conforme las ratas adictas a morfina se retiran con perspicacia del fármaco usando naloxona [Merchenthaler, et al., Maturitas 30: 307-16 (1998)]. También puede usarse para detectar la actividad antagonista del receptor de estrógeno co-dosificando el compuesto de prueba con el estrógeno de referencia.

Evaluación de la función vasomotora en anillos aórticos aislados de ratas Ratas Sprague-Dawley (240-260 gramos) se dividen en 4 grupos . 1. Sin ovariectomía normal (intactas) 2. Tratadas con vehículo sometidas a ovariectomía (ovex) 3. Tratadas con 17p-estradiol sometidas a ovariectomía (1 mg/día) 4. animales con ovariectomía tratados con el compuesto de prueba (varias dosis) . Los animales se someten a ovariectomía aproximadamente 3 semanas antes del tratamiento. Cada animal recibe ya sea sulfato de 17-ß estradiol (mg/kg/día) o el compuesto de prueba suspendido en agua destilada, desionizada con 1% de tween-80 por lavado gástrico. Los animales tratados con el vehículo recibieron un volumen aproximado del vehículo usado en los grupos tratados con el fármaco. Los animales se someten a eutanasia por inhalación de C02 y exanguinación . Las aortas torácicas se retiran rápidamente y se colocan en solución fisiológica a 37°C con la siguiente composición (mM) : NaCl (54.7), KCl (5.0), NaHC03 (25.0), MgCl2 2H20 (2.5), D-glucosa (11.8) y CaCl2 (0.2) gasificado con C02-02, 95%/5% para un pH final de 7.4. La adventicia se retira de la superficie exterior y el vaso se corta en anillos de 2-3 mm de ancho. Los anillos se suspenden en un baño de tejido de 10 mL con un extremo unido al fondo del baño y el otro a un transductor de fuerza. Una tensión en reposo de 1 gramo se coloca en los anillos. Los anillos se equilibran durante 1 hora, las señales se adquieren y se analizan . Después del equilibrio, los anillos se exponen a concentraciones aumentadas de fenilefrina (10~8 a 10"4 M) y se registra la tensión. Los baños después se enjuagan 3 veces con amortiguador fresco. Después del lavado, se adiciona L-NA E 200 mM al baño de tejido y se equilibra durante 30 minutos . Después se repite la curva de respuesta de concentración de fenilefrina. Evaluación de la actividad cardioprotectora Ratones C57/B1J deficientes de apolipoproteína E (apo E KO) se obtienen de Taconic Farms . Todos los procedimientos animales se realizan bajo conformidad estricta a las guías IACUC. Ratones apo E KO hembras con ovariectomía , 4-7 semanas de edad, se alojan en cajas de zapatos y se les permite el libre acceso a alimento y agua. Los animales se clasifican al azar por peso en grupo (n=12-15 ratones por grupo) . Los animales se dosifican con los compuestos de prueba o estrógeno (sulfato de 17 -estradiol a 1 mg/kg/día) en la dieta usando un protocolo de dosificación preciso, donde la cantidad de dieta consumida se mide semanalmente , y por lo tanto se ajusta la dosis, con base en el peso del animal. La dieta usada es una dieta de estilo Western (57U5) que se prepara por Purina y contiene 0.50% de colesterol, 20% de manteca de cerdo y 25 IU/KG Vitamina E. Los animales se dosifican/alimentan usando este paradigma durante un periodo de 12 semanas. Los animales de control se alimentan con la dieta estilo Western y no reciben el compuesto. Al final del periodo de estudio, los animales se someten a eutanasia y se obtienen las muestras de plasma. Los corazones se inundan in situ, primero con solución salina y después con solución de formalina al 10% amortiguada neutra. Para la determinación de los lípidos de plasma y lipoproteínas , el colesterol total y los triglicéridos se determinan usando los métodos enzimáticos con los kits comercialmente disponibles de Boehringer Mannheim y Wako Biochemicals , respectivamente y se analizan usando el Analizador Hitachi 911 de Boehringer Mannheim. La separación y cuantificación de las lipoproteínas en plasma se realizaron usando el fraccionamiento de tamaño FPLC. De manera breve, 50-100 mL de suero se filtra y se inyecta en columnas de Superóse 12 y Superóse 6 conectadas en serie y se eluyen a una velocidad de flujo constante con EDTA sódica 1 mM y NaCl 0.15M. Las áreas de cada curva que representan VLDL, LDL y HDL se integran usando los elementos de programación Waters Millennium , y cada fracción de lipoproteína se cuantifica multiplicando el valor de Colesterol total por el área porcentual relativa de cada pico del cromatograma respectivo. Para la cuantificación de la aterosclerosis aórtica, las aortas se aislan cuidadosamente y se colocan en formalina fijada durante 48-72 horas antes del manejo. Las lesiones ateroscleróticas se identifican usando teñido Oil Red O. Los vasos se retienen brevemente, y después se representan usando un microscopio Nikon SMU800 ajustado con un sistema de cámara de video Sony 3CCD en acuerdo con la utilidad de configuración IMAQ (National Instrument) como los elementos de programación de captura de la imagen. Las lesiones se cuantifican de frente a lo largo del arco aórtico usando un paquete de elementos de programación de utilidad de umbral especial (Coleman Technologies) . La verificación de la lesión automatizada se realiza en los vasos usando la función de umbral del programa, específicamente en la región contenida dentro del arco aórtico del borde proximal del tronco bronquiocefálico al extremo distal de la arteria subclavicular izquierda. Los datos de aterosclerosis aórtica se expresan como el por ciento de la complicación de la lesión estrictamente dentro de esta área luminal definida. Evaluación de mejoramiento de cognición Ratas con ovariectomía (n=50) se habitúan a un laberinto de brazos radial de 8 brazos durante periodos de 10 minutos en cada uno de 5 días consecutivos. Los animales se privan de agua antes de la habituación y la prueba. Una alícuota de 100 µ? de agua colocada en los extremos de cada brazo sirve como refuerzo. La adquisición de una tarea de cambio de ganancia en el laberinto de brazo radial se realiza dejando que el animal tenga acceso a un brazo con cebo. Después de beber, el animal sale del brazo y vuelve a entrar al compartimiento central, donde tiene acceso ahora al brazo previamente visitado o a un nuevo brazo. Se registra una respuesta correcta cuando el animal elige entrar a un nuevo brazo. A cada animal se da 5 pruebas por día durante 3 días. Después de la última prueba de adquisición, los animales se asignan a uno de los siguientes 4 grupos: 1. Controles negativos: inyectados con vehículo de 10% de DMSO/aceite de ajonjolí una vez al día durante 6 días (1 mL/kg, SC) . 2. Controles positivos: inyectado con benzoato de 17 -estradiol durante 2 días y se prueban 4 días después de la segunda inyección (benzoato de 17 -estradiol a 10 g/0.1 mL por rata) . 3. Estradiol: 17p-estradiol será inyectado diariamente durante 6 días (20 µg/kg, SC) 4. Compuesto de prueba: inyectado diariamente durante 6 días (dosis variadas) . Todas las inyecciones comenzarán después de la prueba en el último día de adquisición. La última inyección para los grupos 1, 3 y 4 se llevará a cabo 2 horas antes de la prueba para la memoria de trabajo. La prueba para la memoria de trabajo es una tarea sin competición a la muestra retrasada (DNMS, por sus siglas en inglés) que utiliza retrasos de 15, 30 ó 60 segundos. Esta tarea es una variación de la tarea de adquisición en la que la rata se coloca en la arena central y se deja entrar a un brazo cuanto antes. Un segundo brazo se abre una vez que la rata atraviesa la mitad del camino del primer brazo y nuevamente se requiere que la rata elija este brazo. Cuando ha viajado a la mitad del camino de este segundo brazo, ambas puertas se cierran y el retraso se inicia. Una vez que el retraso ha expirado, ambas de las dos puertas originales, y una tercera nueva puerta, se abren simultáneamente. Una respuesta correcta se registra cuando el animal viaja a la mitad del camino del tercer nuevo brazo. Una respuesta incorrecta se registra cuando el animal viaja a la mitad del camino ya sea del primer o segundo brazos. Cada animal recibirá 5 pruebas en cada uno de los tres intervalos de retraso para un total de 15 pruebas por animal . Evaluación del efecto en pleuritis. La capacidad de reducir los síntomas de la pleuritis inducida experimentalmente en ratas puede evaluarse de acuerdo con el procedimiento de Cuzzocrea [Endocrinology 141 : 1455-63 (2000) ] . Evaluación de la protección contra citotoxicidad inducida por glutamato (neuroprotección) La actividad neuroprotectora de los compuestos de esta invención puede evaluarse en un procedimiento de prueba farmacológica estándar in vi tro usando estimulación cpn glutamato [Zaulyanov, et al., Cellular & Molecular Neurobiology 19: 705-18 (1999); Prokai, et al., Journal of Medicinal Chemistry 44 : 110-4 (2001)]. Evaluación en el procedimiento de prueba del primordio terminal mamario Los estrógenos se requieren para la elongación ductal completa y ramificación de los conductos mamarios y el desarrollo subsecuente de los primordios terminales lóbulo-alveolares bajo la influencia de progesterona . En este procedimiento de prueba, la actividad mamotrófica de los compuestos seleccionados de la invención se evaluó de acuerdo con el siguiente procedimiento de prueba farmacológica estándar. Ratas Sprague-Dawley de veintiocho días (Taconic, Farms, Germantown, NY) se sometieron a ovariectomía y reposaron durante nueve días. Los animales se alojaron bajo un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas y se alimentaron con dieta 5K96 de roedor del laboratorio Purina a base de caseína (Purina, Richmond, IN) y se les dejó libre acceso a agua. Las ratas después se dosificaron subcutáneamente durante seis días con vehículo (50% de DMSO (JT Baker, Phillipsburg, NJ)/50% de solución salina amortiguada con fosfato de Dulbecco (GibcoBRL, Grand Island, MY) , 17p-estradiol (0.1 mg/kg) o el compuesto de prueba (20 mg/kg) . Durante los tres días finales, las ratas también se dosificaron subcutáneamente con progesterona (30 mg/kg) . En el séptimo día, las ratas se sometieron a eutanasia y se extirpó una almohadilla de grasa mamaria. Esta almohadilla de grasa se analizó para ARNm de caseína cinasa II como un marcador de la proliferación de primordio terminal. El ARNm de caseína cinasa II se analizó por RT-PCR en tiempo real. De manera breve, el ARN se aisló de acuerdo con Trizol (GibcoBRL, Grand Island, NY) de acuerdo con las direcciones del fabricante. Las muestras se trataron con ADNse I usando el kit libre de ADN (Ambion) y los niveles de ARNm de caseína cinasa se midieron por RT-PCR en tiempo real usando el procedimiento Taqman Gold (PE Applied Biosystems) . Un total de 50 ng de ARN se analizó en triplicado usando el par cebador de caseína cinasa II específico (cebador 5', CACACGGATGGCGCATACT; cebador 3', CTCGGGATGCACCATGAAG) y la sonda acostumbrada (TAMRA-CGGCACTGGTTTCCCTCACATGCT-FAM) . Los niveles de ARNm de caseína cinasa II se normalizaron a ARN ribosomal 18s contenido dentro de cada muestra de reacción usando los cebadores y la sonda suministrada por PE Applied Biosystems.

Se obtuvieron los siguientes resultados para un ejemplo de la invención (Tabla (4)).

Evaluación en el procedimiento de prueba farmacológica estándar en la rata HLA para enfermedad de intestino in lama orio Los compuestos representativos de la invención se evaluaron en el procedimiento de prueba farmacológica estándar en la rata HLA que emula la enfermedad de intestino inflamatorio en humanos. Lo siguiente describe brevemente el procedimiento usado y los resultados obtenidos. Ratas HLA-B27 macho se obtuvieron de Taconic y se les proporcionó acceso sin restricción al alimento (dieta 5001 PMI Lab) y agua. Las ratas se dosificaron una vez por día (oralmente) con el vehículo (2% de tween-80/0.5% de raetilcelulosa) o Ejemplo Id (10 mg/kg) durante 26 días. La calidad de la defecación se observó diariamente y se' clasificó de acuerdo con la siguiente escala: Diarrea = 3; defecación suave = 2; defecación normal = 1. La Tabla (5) muestra que la calidad de la defecación mejoró después de la dosificación con el Ejemplo Id. Al final del estudio, el suero se colectó y almacenó a -70°C. Una sección del colon se preparó para análisis histológico y un segmento adicional se analizó para la actividad de mieloperoxidasa . Tabla 5: Evaluación del carácter de defecación de ratas HLA tratadas oralmente con vehículo o un compuesto representativo de la invención. El valor reportado es el registro promedio del grupo. Día Vehículo · Ejemplo Id 1 1 1 2 1 1 3 1 1 4 1.25 1 5 2.5 1.5 6 2.75 1.25 7 2.75 1.25 8 2.75 1 9 3 1.25 Tabla 5: Evaluación del carácter de defecación de ratas HLA tratadas oralmente con vehículo o un compuesto representativo de la invención. El valor reportado es el registro promedio del grupo. Día Vehículo Ejemplo Id 10 3 1 11 2.75 1.25 12 2.75 1.25 13 2.75 1.25 14 2.75 1.25 15 2.75 1 16 3 1 17 2.75 1 18 2.75 1 19 2.75 1 20 ND ND 21 ND ND 22 3 1 23 3 1 24 3 1 25 3 1 26 3 1 ND: No determinado 3 = diarrea; 2 = defecación suave; 1 = defecación normal Análisis histológico. El tejido colónico se sumergió en 10% de formalina amortiguada neutra. Cada espécimen de colon se separó en cuatro muestras para la evaluación. Los tejidos fijados con formalina se procesaron en un procesador de infiltración a vacio Tissue Tek (Miles, Inc; West Haven, Connecticut) para fijarse con parafina. Las muestras se seccionaron a 5 um y después se tiñeron con hematoxilina y eosina (H&E) para las evaluaciones histológicas a ciegas usando una escala modificada después de Boughton-Smith. Después de gue se completaron los registros, las muestras no se cegaron y los datos se tabularon y analizaron por el modelo lineal ANOVA con comparaciones de media múltiples. Las secciones del tejido colónico se evaluaron para varios indicadores de la enfermedad y se dieron registros relativos. Como se muestra en la Tabla (6), Ejemplo Id es efectivo en la reducción de las diferentes mediciones de la lesión del tejido.

Tabla 6: Registro histológico de la severidad de la enfermedad en el colon de animales tratados oralmente durante 4 semanas con un compuesto representativo de la invención. Media + SD Grupo Ulceración Inflamación Profundidad Fibrosis Registro (0-2) (0-3) de la (0-2) total lesión (0- 2) Vehículo 1.44±0.66 2.88±0.14 1.56±0.63 1.06+0.32 6.9411.51 Ejemplo Id 0.19+0.13* 1.38+0.43* 0.19+0.13* 0.13+0.14* 1.88+0.14* *sig < vehículo Evaluación en dos modelos de artritis Prueba de rata Lewis de artritis inducida por adyuvante. Sesenta ratas Lewis, hembra, de 12 semanas de edad, se alojan de acuerdo con los procedimientos de operación de instalaciones estándares. Reciben un régimen estándar de alimento y agua ad libitum. Cada animal se identifica mediante una tarjeta de caja que indica el grupo de proyecto y el número de animal . Cada número de rata se marca con marcador de tinta indeleble en la cola. Al menos 10-21 días antes del estudio se anestesian y se someten a ovariectomía por las técnicas quirúrgicas asépticas estándares . Se usa para inducir la artritis Adyuvant -Complete de Freund (Sigma Immuno Chemicals, St . Louis, MO) , conteniendo cada mL 1 mg de Mycobacterium tuberculosis inactivada por calor y secada, 0.85 mL de aceite mineral y 0.15 mL de monooleato de manida Lote No. 084H8800. Los siguientes son ejemplos de dos procedimientos de prueba. Procedimiento de la prueba de inhibición: Treinta ratas se inyectan intradérmicamente con 0.1 mL de Adyuvant -Complete de Freund en la base de la cola. Los animales se clasifican al azar en cuatro grupos, conteniendo cada grupo seis ratas. Cada día, los grupos reciben el vehículo (50% de DMSO (JT Baker, Phillipsburg, NJ) /solución salina de fosfato de Dulbecco lx (GibcoBRL, Grand Island, NY) ) o el compuesto de prueba (10 mg/kg, administrado subcutáneamente) . Todas las ratas comienzan el tratamiento en el día 1. Los datos para un compuesto representativo de la invención se muestran en la Tabla (7) . Procedimiento de la prueba de tratamiento: Treinta ratas se inyectan intradérmicamente con 0.1 mL de Adyuvant - Complete de Freund en la base de la cola. Los animales se clasifican al azar en cuatro grupos, conteniendo cada grupo seis ratas. Cada día, los grupos reciben el vehículo (50% de DMSO (JT Baker, Phi 11 ipsburg , NJ) /solución salina de fosfato de Dulbecco lx (GibcoBRL, Grand Island, NY) ) o el compuesto de prueba (10 mg/kg, administrado subcutáneamente) . Todas las ratas comienzan el tratamiento en el día 8 después de la inyección de adyuvante. Los datos para un compuesto representativo de la invención se muestran en las Tablas (8) , (9) y (10) . El análisis estadístico se realizó usando Abacus Concepts Super ANOVA . (Abacus Concepts, Inc. Berkeley, CA) . Todos los parámetros de interés se sometieron a análisis de Varianza con la prueba nueva de Duncan post-hoc entre grupos. Los datos se expresan completamente como la media + desviación estándar (SD) y las diferencias se consideraron significativas si p<0.05. El grado de severidad de artritis se moni orea diariamente en términos de los siguientes índices de enfermedad: eritema de patas traseras, hinchazón de patas traseras, sensibilidad de las articulaciones y movimientos y postura. Una escala de enteros de 0 a 3 se usa para cuantificar el nivel de eritema (0 = pata normal, 1 = eritema moderado, 2 = eritema moderado, 3 = eritema severo) e hinchazón (0 = para normal, 1 = hinchazón suave, 2 hinchazón moderada, 3 = hinchazón severa de la pata trasera) . El registro máximo por día es 12. Al final del estudio las ratas se sometieron a eutanasia con C02, los miembros traseros se retiraron en la necropsia y se fijaron en formalina amortiguada al 10% y las articulaciones tarsales se descalcificaron y fijaron en parafina. Las secciones histológicas se tiñen con Hematoxilina y Eosina o Safranina 0 - colorante Fast Green. Los portaobjetos se codifican de modo que el examinador no se percata de los grupos de tratamiento. El tejido sinovial de las articulaciones tarsales se evalúa con base en hiperplasia sinovial, infiltración de células inflamatorias y formación de pannus [Poole and Coombs, International Archives of Allergy & Applied Immunology 54: 97-113 (1977)] como se representa a continuación.

Categoría Grado 1. Células de recubrimiento sinovial a. sin cambio 0 b. Células alargadas, ligeramente espesadas 1 c. Células alargadas, aumento en números, 2 moderadamente espesadas. Sin vello presente d. Células alargadas, espesadas. Vello presente 3 2. Fibroplasia a. Sin cambio 0 b. Fibroplasia presente bajo células de 1 recubrimiento c. áreas pequeñas de tejido areolar reemplazado 2 por tejido fibroso d. Reemplazamiento del tejido areolar por tejido 3 fibroso Categoría Grado 3. Células inflamatorias a. Ocasionalmente observadas, dispersadas en toda 0 la selección b. Células presentes en número pequeño en o justo 1 bajo la capa celular de recubrimiento y/o alrededor de los vasos sanguíneos. c. Podría estar presente colección focal pequeña 2 de células d. Números grandes de células pres.entes en 3 cápsula y en o bajo capas celulares de recubrimiento. A menudo se observan focos grandes 2. Pannus a. No detectable 0 b. detectable 1 Además, el cartílago articular y óseo se evalúa usando el sistema gradiente histológico de Mankin [Mankin, et al., Journal of Bone & Joint Surgery - American Volume 53: 523-37 (1971)] como se muestra a continuación.

Categoría Grado 1. Estructura a . Normal 0 b. Irregularidad superficial 1 c . Pannus e irregularidad superficial 2 d. Divididos a la zona transicional 3 e . Divididos a la zona radial 4 f . Divididos a la zona calcificada 5 g- Desorganización total 6 2. Células a . Normal 0 b. Hipercelularidad difusa 1 c . Clonación 2 d. Hipocelularidad 3 3. Teñido de Safranina-0 a . Normal 0 b. Reducción ligera 1 c . Reducción modesta 2 d. Reducción severa 3 e . No se observó colorante 4 4. Integridad de la línea de la marea alta a . Intacta 0 b. Cruzada por vasos sanguíneos 1 Tabla 7. Evaluación de la inflamación de la articulación de ratas Lewis: protocolo de inhibición Día Vehículo Ejemplo Id 1 0.00 0.00 2 0.00 0.00 3 4.50 2.66 4 5.50 1.83 5 9.33 2.66 6 10.50 2.16 7 10.60 2.00 8 11.00 1.66 9 11.50 2.00 10 11.33 2.00 11 10.83 1.66 12 10.83 1.66 13 11.00 2.16 14 11.00 2.00 15 11.00 2.00 16 11.00 1.00 17 10.50 1.33 Tabla 8. Evaluación de la inflamación de la articulación de ratas Lewis: protocolo de tratamiento Día Vehículo Ejemplo Id 1 10.83 11.33 2 11.00 11.15 3 10.83 11.33 4 11.33 9.83 5 11.50 8.83 6 11.50 7.83 7 11.50 6.16 8 ¦ 11.50 5.00 9 11.00 4.33 10 11.00 2.66 11 10.66 1.83 12 10.66 1.83 13 10.50 2.66 14 9.83 2.66 15 8.10 2.00 16 7.35 2.00 17 6.50 1.50 Tabla 9: Registro histológico de sinovitis en las articulaciones tarsales de ratas Lewis (media 1 DE) : Protocolo de tratamiento Grupo Estructura Fibroplasia Células Pannus (0- Registro de sinovial (0-3) inflamatorias 1) sinovitis (0-3) (0-3) total (0- 10) Vehículo 2.58+0.38 1.75±0.42 2.92±0.20 1.00±0.69 8.2511.57 Ejemplo Id 1.75+0.52* 0.75±0.42* 1.33+0.41* 0.08±0.20* 3.92+1.36* (10 mg/kg) *sig<vehículo Evaluación en el modelo de artritis de rata HLA- B27. Se evaluaron compuestos representativos de la invención en el procedimiento de prueba farmacológica estándar de rata HLA-B27 que emula la artritis en humanos. Lo siguiente describe brevemente el procedimiento usado y los resultados obtenidos. Ratas HLA-B27 macho (8-10 semanas de edad) se obtuvieron de Taconic y se les proporcionó acceso sin restricción a un alimento (dieta 5001 de PMI Lab) y agua. Las ratas se dosificaron oralmente una vez al día con el vehículo (2% de tween-80/0.5% de metilcelulosa ) o el compuesto de prueba (10 mg/kg) durante 26 días. Los registros de las articulaciones y la histología se evaluaron como se describió anteriormente para el modelo de rata Lewis de artritis inducida por adyuvante. Los resultados para un compuesto representativo de la invención se muestran en la Tabla (11).

Tabla 11: Evaluación de la inflamación de la articulación de ratas HLA del estudio 2. Día Vehículo Ejemplo Id 1 0 0 2 0 0 3 0 0 4 0 0 5 0 0 6 0 0 7 0 0 8 2.5 2 9 3.75 1.25 10 2.75 1 Tabla 11: Evaluación de la inflamación de la articulación de ratas HLA del estudio 2. Día Vehículo Ejemplo Id 11 3.5 0 12 1.25 0.5 13 1.25 0.25 14 1.25 0 15 5.25 0.25 16 4.5 1 17 3.5 1 18 3.75 0.5 19 5.5 0.75 22 3.25 0.25 23 6.5 2 24 6.5 2 25 6.25 2 26 7 1.75 Evaluación en modelos in vivo de carcinogénesis La capacidad de los compuestos de esta invención para tratar e inhibir varios padecimientos malignos o hiperprolí fieos puede evaluarse en los procedimientos de prueba farmacológica estándar que son fácilmente disponibles en la literatura e incluyen los siguientes dos procedimientos.

Cáncer de mama. Se obtienen ratones nu/un (desnudos) atímicos con ovariectomía de Charles River Laboratories (Wilmington, MA) . Un día antes de la inyección celular tumoral , los animales se implantaron con los gránulos de liberación con el tiempo que contienen 0.36-1.7 mg de 17 -estradiol (60 ó 90 días de liberación, Innovative Research of America, Sarasota, FL) o un placebo. El gránulo se introduce subcutáneamente dentro de la región intracapular usando un trocar de precisión de calibre 10. Subsecuentemente, los ratones se inyectan subcutáneamente dentro del tejido mamario con lxlO7 células MCF-7 ó lxlO7 células BG-1. Las células se mezclan con un volumen igual de matrigel, una penetración de la matriz membranal de basamento para mejorar el establecimiento tumoral. Los compuestos de prueba pueden evaluarse ya sea dosificando un día después de la implantación celular tumoral (régimen de inhibición) o después de que los tumores han alcanzado un cierto tamaño (régimen de tratamiento) . Los compuestos se administran ya sea intraperitoneal u oralmente en un vehículo de 1% de tween-80 en solución salina cada día. El tamaño del tumor se evalúa cada tres o siete días. Cáncer de colon. La capacidad de tratar o inhibir el cáncer de colon puede evaluarse en el procedimiento de prueba de Smirnoff (Oncology Research 11: 255-64 (1999)].

Evaluación de la neuroprotección en dos procedimientos de prueba in vivo Isquemia transiente global en jerbo de Mongolía. El efecto de los compuestos de prueba en la prevención o tratamiento de daño cerebral en respuesta a la depravación/reperfusión de oxígeno puede medirse usando el siguiente procedimiento de prueba. Jerbos de Mongolia hembras (60-80 g; Charles River Laboratories, Kingston, NY) se alojan en las instalaciones del cuidado animal de Wyeth-Ayerst (certificado AAALAC) con un fotoperiodo de 12 horas de luz, 12 horas de oscuridad y libre acceso a agua de la llave y una dieta de caseína baja en estrógenos (Purina; Richmond, IN) . Después de la aclimatación (3-5 días) , los jerbos se anestesian con isoflurano (mezcla al 2-3% con 02) , se someten a ovariectomía (Día 0) . Comenzando a la siguiente mañana (Día 1) , los jerbos se tratan subcutáneamente cada día con el vehículo (10% de ETOH/aceite de maíz) , 17 -estradiol (1 mg/kg, se) o un compuesto experimental. En el día 6, los jerbos (n=4 - 5/grupo) se anestesian con isoflurano, las arterias carótidas comunes se visualizan por vía de una incisión en el cuello de la línea media y ambas arterias se obstruyen simultáneamente durante 5 minutos con sujetadores de microaneurismo no traumático. Después de la obstrucción, los sujetadores se retiran para dejar la reperfusión cerebral y la incisión en el cuello cerrada con sujetadores para heridas. Todos los animales se someten a ayuno durante toda la noche antes de la cirugía de isquemia global, una etapa que facilita el daño isquémico consistente. En el día 12, los jerbos se exponen a una dosis letal de C02, y los cerebros se congelan con hielo seco y se almacenan a -80 °C. Los protocolos de los animales usados para estos estudios se revisan y aprueban por el Radnor/Collegeville Animal Care and Use Committee (RACUC/CACUC) en Wyeth-Ayerst Research. El grado de protección neuronal se evalúa por el análisis de hibridación in situ de neurogranina ARNm. De forma breve, se colectan secciones de criostato coronal de 20 µt? en portaobjetos recubiertos de gelatina, se secan y se almacenan a -80°C. En el tiempo de procesamiento, las cajas de los portaobjetos disecados se calientan a temperatura ambiente, los portaobjetos se post-fijan en paraformaldehído al 4%, se tratan con anhídrido acético y después se deslipidan y se deshidratan con cloroformo y etanol . Los portaobjetos montados de sección procesada después se hibridan con 200 µ? (6xl06 DPM/portaobj eto) de una ribosonda antisentido o sentido (control) para neurogranina (NG-241 marcado con 35S-UTP; bases 99-340) , en una mezcla de hibridación de formamida al 50% y se incuban durante toda la noche a 55 °C en una cámara de portaobjetos humidificada sin deslizamiento de la cubierta. A la siguiente mañana, los portaobjetos se colectan en anaqueles, se sumergen en 2xSSC (NaCl 0.3 M, citrato de sodio 0.03 M; pH 7.0)/DTT 10 mM, se tratan con Rnasa A (20 µ9/??1) y se lavan (2 x 30 min) a 67°C en SSC 0. lx para retirar la marca no específica. Después de la deshidratación, los portaobjetos se exponen a la película de rayos X Biomax (BMR-1; Kodak) durante toda la noche. El nivel de la señal de hibridación de neurogranina se usa para verificar cuantitativamente el grado de pérdida neuronal en la región CAI después del daño y evaluar la eficacia de 17 ß - estradiol y los compuestos experimentales. La neurogranina ARNm se selecciona para estos estudios debido a que se expresa altamente en las neuronas hipocampales incluyendo CAI, pero está ausente en glia y otros tipos celulares presentes en esta región del cerebro. Por lo tanto, la medición de la cantidad de neurogranina ARNm presente representa las neuronas de supervivencia. Las mediciones de la densidad óptica relativa de la señal de hibridación de neurogranina se obtienen de los autorradiogramas de película con un sistema de análisis de imagen basado en computadora (C-Imaging Inc., Pittsburg, PA) . Los resultados de 6 secciones (40 µp? aparte) por animal se promedian y se evalúan estadísticamente. Los valores numéricos se reportan como la media + SEM. Se usa análisis de varianza de un sentido para probar las diferencias en el nivel de neurogranina ARNm y todas las declaraciones de no diferencia en la sección de resultados implican que p>0.05. Oclusión de la arteria cerebral media en ratones. La neuroprotección puede evaluarse de acuerdo con los procedimientos de prueba descritos por Dubal [ver, Dubal, et al . , Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 98: 1952-1957 (2001), Dubal, et al., Journal of Neuroscience 19: 6385-6393 (1999)]. Procedimiento de prueba farmacológica estándar de inhibición de la ovulación. El procedimiento de prueba se usa para determinar si los compuestos de prueba pueden inhibir o cambiar el tiempo de ovulación. También puede usarse para determinar el número de ovocitos ovulados [Lundeen, et al., J Steroid Biochem Mol Biol . 78: 137-143 (2001)]. Con base en los resultados obtenidos en los procedimientos de prueba farmacológica estándar, los compuestos de esta invención son moduladores del receptor estrógeno útiles en el tratamiento o inhibición de las condiciones, trastornos o estados de enfermedad que son al menos parcialmente mediados por una deficiencia o exceso de estrógenos, o que pueden tratarse o inhibirse por medio del uso de un agente estrogénico. Los compuestos de esta invención son particularmente útiles en el tratamiento de un paciente pero-menopáusico, menopáusico o post-menopáusico en el que los niveles de estrógenos endógenos producidos se disminuyen ampliamente. La menopausia se define generalmente como el periodo menstrual natural final y se caracteriza por el cese de la función ovariana, conduciendo a la disminución sustancial de estrógeno circulante en la corriente sanguínea. Como se usa en la presente, la menopausia también incluye las condiciones de producción de estrógeno disminuida que puede ser quirúrgicamente, químicamente o causarse por un estado de enfermedad que conduce a la disminución prematura o cese de la función ovariana. Los compuestos de esta invención también son útiles para inhibir o tratar otros efectos de la privación de estrógenos que incluyen, bochornos, atrofia vaginal o vulvar, vaginitis atrófica, sequedad vaginal, prurito, dispareunia, disuria, orinación frecuente, incontinencia urinaria, infecciones del tracto urinario. Otros usos del tracto reproductivo incluyen el tratamiento o inhibición de sangrado uterino disfuncional. Los compuestos también son útiles en el tratamiento o inhibición de endometriosis . Los compuestos de esta invención también son activos en el cerebro y por lo tanto, son útiles para inhibir o tratar enfermedad de Alzheimer, declinación cognitiva, libido disminuido, demencia senil, trastornos neurodegenerativos, depresión, ansiedad, insomnio, esquizofrenia e infertilidad. Los compuestos de esta invención también son útiles para tratar o inhibir el crecimiento de tejido anormal benigno o maligno que incluyen, glomerulosclerosis, hipertrofia prostética, leiomiomas uterinos, cáncer de mama, escleroderma , fibromatosis , cáncer endometrial, síndrome de ovario poliquístico, pólipos endometriales , enfermedad de mama benigna, adenomicosis , cáncer de ovario, melanoma, cáncer de próstata, cánceres de colon, cánceres del SNC, tales como glioma o astioblastoma. Los compuestos de esta invención son cardioprotectores y son antioxidantes, y son útiles para disminuir los niveles de colesterol, triglicéridos , Lp(a) y LDL; inhibir o tratar hipercolesteremia , hiperlipidemia, enfermedad cardiovascular, aterosclerosis , enfermedad vascular periférica, restenosis y vasospasmo e inhibir el daño de la pared vascular de los eventos celulares que conduce al daño vascular mediado inmune. Los compuestos de esta invención también son útiles en el tratamiento de trastornos asociados con inflamación o enfermedades autoinmunes, que incluyen enfermedad de intestino inflamatorio (enfermedad de Crohn, colitis ulcerante, colitis indeterminada) , artritis (artritis reumatoide, espondiloartropatías , osteoartritis) , pleurisia, daño por isquemia/reperfusión (por ejemplo choque, rechazo de transplante, infarto del miocardio, etc.), asma, arteritis de células gigantes, cistitis intersticial por prostatitis, uveitis, psoriasis, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico y sepsis. Los compuestos de esta invención también son útiles en el tratamiento o inhibición de trastornos oculares que incluyen cataratas, uveitis y degeneración macular y en el tratamiento de condiciones de la piel tales co.mo enve ecimiento, alopecia y acné. Los compuestos de esta invención también son útiles en el tratamiento o inhibición de trastornos metabólicos tales como diabetes de tipo II, de metabolismo de lípidos, apetito (por ejemplo anorexia nervosa y bulimia) . Los compuestos de esta invención también son útiles en el tratamiento o inhibición de trastornos de sangrado tales como telangiectasia hemorrágica hereditaria, sangrado uterino disfuncional y combatir el choque hemorrágico. Los compuestos de esta invención son útiles en estados de enfermedades donde la amenorrea es ventajosa, tales como leucemia, ablaciones endometriales , enfermedad renal crónica o hepática o enfermedades o trastornos de coagulación. Los compuestos de esta invención pueden usarse como un agente anticonceptivo, particularmente cuando se combina con una progestina. Cuando se administran para el tratamiento o inhibición de un estado de enfermedad o trastorno particular, se entiende que la dosificación efectiva puede variar dependiendo del compuesto particular utilizado, el modo de administración, la condición y la severidad de la misma, de la condición que es tratada, así como de varios factores físicos relacionados con el ser individual tratado. La administración efectiva de los compuestos de esta invención puede darse en una dosis oral de aproximadamente 0.1 mg/d£a„ a aproximadamente 1,000 mg/día. Preferentemente, la administración será de aproximadamente 10 mg/día a aproximadamente 600 mg/día, más preferentemente de aproximadamente 50 mg/día a aproximadamente 600 mg/día, en una dosis simple o en dos o más dosis divididas. Las dosificaciones diarias proyectadas se espera que varían con la ruta de administración. Tales dosis pueden administrarse en cualquier manera útil para dirigir los compuestos activos en la presente a la corriente sanguínea del destinatario, incluyendo oralmente, por vía de implantes, parenteralmente (incluyendo inyecciones intravenosa, intraperitoneal , intraarticularmente y subcutáneas), rectal, intranasal , tópica, ocular (por vía de gotas oculares) , vaginal y transdérmicamente . Las formulaciones orales que contienen los compuestos activos de esta invención pueden comprender cualesquiera formas orales convencionalmente usadas, que incluyen tabletas, cápsulas, formas bucales, trociscos, pastillas y líquidos orales, suspensiones o soluciones. Las cápsulas pueden contener mezclas del o los compuestos activos con rellenadores inertes y/o diluyentes tales como los almidones farmacéuticamente aceptables (por ejemplo almidón de maíz, papa o tapioca), azúcares, agentes edulcorantes artificiales, celulosas pulverizadas, tales como celulosas cristalina y microcristalina, harinas, gelatinas, gomas, etc. Las formulaciones, de tabletas útiles pueden fabricarse por los métodos de compresión, granulación húmeda o granulación seca convencionales y utilizan los diluyentes farmacéuticamente aceptables, agentes aglomerantes, lubricantes, desintegrantes, agentes de modificadores superficiales (incluyendo surfactantes) , agentes de suspensión o estabilización, que incluyen, pero no se limitan a, estearato de magnesio, ácido esteárico, talco, lauril sulfato de sodio, celulosa microcristalina, carboximetilcelulosa cálcica, polivinilpirrolidona, gelatina, ácido algínico, goma acacia, goma xantana, citrato de sodio, silicatos complejos, carbonato de calcio, glicina, dextrina, sacarosa, sorbitol, fosfato dicálcico, sulfato de calcio, lactosa, caolín, manitol, cloruro de sodio, talco, almidones secos y azúcar pulverizada. Los agentes de modificación superficiales preferidos incluyen agentes de modificación superficiales no iónicos y aniónicos. Ejemplos representativos de los agentes de modificación de superficie incluyen, pero no se limitan a, poloxamer 188, cloruro de benzalconio, estearato de calcio, alcohol cetosterílico, cera emulsificante de ceto acrogol , ésteres de sorbitan, dióxido de silicio coloidal, fosfatos, dodecilsulfato de sodio, silicato de magnesio y aluminio y trietanolamina . Las formulaciones orales en la presente pueden utilizar formulaciones de liberación con el tiempo o de retraso estándares para alterar la absorción del o los compuestos activos. La formulación oral también puede consistir de la administración del ingrediente activo en agua o un jugo de fruta, que contiene solubilizantes o emulsificantes apropiados conforme sean necesarios. En algunos casos puede ser deseado administrar los compuestos directamente a las vías en la forma de un aerosol . Los compuestos de esta invención también pueden administrarse parenteral o intraperitonealmente . Las soluciones o suspensiones de estos compuestos activos como una base libre o sal farmacológicamente aceptable pueden prepararse en agua apropiadamente mezclados con un surfactante tal como hidroxi-propilcelulosa. Las dispersiones también pueden prepararse en glicerol, polietilen glicoles líquidos y mezclas de los mismos en aceites. Bajo las condiciones ordinarias de almacenamiento y uso, estas preparaciones contienen un conservador para inhibir el crecimiento de microorganismos. Las formas f rmacéuticas apropiadas para el uso inyectable incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles y polvos estériles para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables estériles. En todos los casos, la forma debe ser estéril y debe ser fluida al grado que exista la capacidad de inyectase con jeringa fácilmente. Debe ser estable bajo las condiciones de manufactura y almacenamiento y debe preservarse contra la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. El vehículo puede ser un solvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, prcpilen glicol y polietilen glicol líquido) , mezclas apropiadas de los mismos y aceites vegetales. Para los propósitos de esta descripción, las administraciones transdérmicas se entiende que incluyen todas las administraciones a través de la superficie del cuerpo y los recubrimientos internos de los paso corporales incluyendo tejidos de la mucosa y epiteliales. Tales administraciones pueden llevarse a cabo usando los presentes compuestos, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en lociones, cremas, espumas, parches, suspensiones, soluciones y supositorios (rectal y vaginal) . La administración transdérmica puede realizarse por medio del uso de un parche transdérmico que contiene el compuesto activo y un vehículo que es inerte al compuesto activo, no es tóxico para la piel y permite la liberación del agente para la absorción sistémica dentro de la corriente sanguínea por vía de la piel. El vehículo puede tomar cualquier número de formas, tales como cremas y ungüentos, pastas, geles y dispositivos oclusivos. Las cremas y ungüentos pueden ser emulsiones líquidas viscosas o semisólidas del tipo aceite en agua o agua en aceite. Las pastas comprendidas de polvos absorbentes dispersos en petróleo y petróleo hidrofílico que contienen el ingrediente activo también pueden ser apropiadas. Una variedad de dispositivos oclusivos pueden usarse para liberar el ingrediente activo dentro de la corriente sanguínea tales como una membrana semi-permeable que cubre un depósito que contiene el ingrediente activo con o sin un vehículo o una matriz que contiene el ingrediente activo. Otros dispositivos oclusivos se conocen en la literatura. Las formulaciones de supositorios pueden hacerse de los materiales tradicionales, que incluyen manteca de cacao, con o sin la adición de ceras para alterar el punto de fusión del supositorio y glicerina. También pueden usarse bases de supositorios solubles en agua, tales como polietilen glicoles de diferentes pesos moleculares. Se describe a continuación la preparación de los ejemplos representativos de esta invención. Intermediario 2 6 -Metoxi - 1-naftol Una mezcla de 6-metoxi-l-tetralona (20.84 g, 118.3 mmol) , 10% de Pd/C (10.1 g) y p-cimeno (500 mL) se calentó a reflujo durante 60 horas. La suspensión se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de Celita. El sólido se lavó con acetato de etilo hasta UV claro y la solución orgánica combinada se extrajo con hidróxido de sodio 1N (3x200 mL) . Las capas acuosas combinadas se hicieron ácidas con HCl 6N y se extrajeron con acetato de etilo (3x 300 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se filtraron. La evaporación del solvente y la purificación en una columna de sílice (25% de acetato de etilo-hexanos) produjo 17.02 g (83%) del compuesto de título como un sólido café claro. Una muestra analítica se preparó por purificación en una segunda columna de sílice (40-60% de diclorometano-hexanos) para producir un sólido blanco: pf 73-75°C; JH RMN (DMSO-d6): d 3.85 (3H, s) , 6.70-6.74 (1H, m) , 7.06 (1H, dd, J = 2.34 Hz, J = 9.15 Hz) , 7.20-7.27 (3H, m) , 8.02 (1H, d, J = 9.12 Hz) , 10.01 (1H, s) ; EM (ESI) m/z 174 (M-H) ". Análisis para CnHio02 : Calculado: C: 75.84 H: 5.79 Encontrado: C: 75.56 H: 5.39 Intermediario 5 1- [ (2-bromo-5-metoxibencil) oxi] -6-metoxinaftaleno A una solución de 6-metoxinaftol (12.9 g, 74.1 mmol) , alcohol 5-metoxi-2 -bromo-bencílico (17.7 g, 81.6 mmol) y trifenilfosfina (31.1 g, 119 mmol) en THF (400 mL) se adicionó lentamente a una solución de DEAD (20.6 g, 119 mmol) en THF (50 mL) . La solución se agitó durante toda la noche, se concentró sobre sílice y se purificó por columna de sílice (10% de acetato de etilo - hexanos) para producir 16.38 (59%) del conpuesto de título como un sólido blanco: pf 83-84°C; XH RMN (CDC13) : d 3.78 (3H, s), 3.92 (3H, s) , 5.25 (2H, s) , 6.75-6.77 (2H, m) , 7.12 (1H, d, J = 2.44 Hz), 7.15 (1H, dd, J = 2.44 Hz, J = 9.28 Hz) , 7.24 (1H, d, J = 2.93 Hz) , 7.32-7.36 (2H, m) , 7.48 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 8.27 (1H, d, J = 9.23 Hz) ; EM (ESI) m/z 373/375 ( [M+H] +) ; Análisis para Ci9HiBr03 : Calculado: C: 61.14 H: 4.59 Encontrado: C: 60.97 H: 4.49 Intermediario 6 1- [ (2-bromo-5-metoxibencil) oxi] naftaleno Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 1-naftol (5.7 g, 39.6 mmol) con alcohol 5 -metoxi-2 -bromobencílico como se describe para el intermediario 5 para producir 5.94 g (44%) de un sólido blanco: pf 74-75°C; ¾ RMN (CDC13) : d 3.78 (3H, s) , 5.28 (2H, s), 6.77 (1H, dd, J = 2.93 Hz, J = 8.79 Hz) , 6.88 (1H, d, J = 7.69 Hz) , 7.27 (1H, d, J = 3.30 Hz) , 7.36-7.39 (1H, m) , 7.47-7.53 (4H, m) , 7.81-7.83 (1H, m) , 8.37-8.39 (1H, m) ; EM (ESI) m/z 343/345 ( [M+H]+) ; Análisis para Ci8Hi5Br02 : Calculado: C: 62.99 H: 4.41 Encontrado: C: 63.19 H: 4.30 Intermediario 8 4 -bromo- 2 - fluoro- 5 -metilfenol A una solución de 2-fluoro- 5-metilfenol (20.27 g, 160.7 mmol) en acetonitrilo (500 mL) a 0°C se adicionó NBS (30.0 g, 168.7 mmol) . La mezcla se agitó durante 1 hora a 0°C. La solución resultante se depuró del solvente y se filtró a través de una columna de sílice corta con diclorometano para producir 29.6 g (90%) de un sólido anaranjado aceitoso. Una muestra analítica se preparó por purificación de columna de sílice (5% de acetato de etilo -hexanos) para producir el compuesto de título como un sólido blanco: pf 44-46°C; XH R N (D SO-d6) : d 2.22 (3H, s), 6.93 (1H, d, J = 9.28 Hz) , 7.40 (1H, d, J = 10.74 Hz) , 10.05 (1H, s) ; E (ESI) m/z 203/205 ( [M+H] +) ; Análisis para C7H6BrFO: Calculado: C: 41.01 H: 2.95 Encontrado: C: 40.69 H: 2.80 Intermediario 9 1-bromo- 5 - fluoro-4 -metoxi - 2 -metilbenceno A una mezcla de 4-bromo-5-metilfenol (29.6 g, 144.2 mmol) y carbonato de potasio (30.0 g, 218 mmol) en acetona (500 mL) se adicionó yodometano (69.0 g, 486 mmol). La suspensión resultante se agitó a reflujo durante 4 horas. La mezcla de reacción se enfrió a TA, se vertió en HCl (250 mL de solución 1N) y se extrajo con acetato de etilo (3x 250 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución de bicarbonato de sodio, se secaron sobre sulfato de sodio y se filtraron. La evaporación del solvente y la purificación sobre columna de sílice (5% de acetato de etilo - hexanos) produjo 29.50 g (93%) del compuesto de título como un aceite claro, incoloro: 1H RM (CDC13) : d 2.33 (3H, s), 3.85 (3H, s) , 6.82 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 7.23 (1H, d, J = 10.25 Hz) ; EM m/z; Análisis para CBH8BrFO-0.3 H20: Calculado: C: 42.81 H: 3.86 Encontrado: C: 42.38 H: 3.44 Intermediario 11 1- [ (2-Bromo-4-fluoro- 5-metoxibencil) oxi] -6-metoxinaftaleno Una mezcla de 1 -bromo- 5 - fluoro- 4 -metoxi-2 -metilbenceno (29.50 g, 134.7 mmol) , NBS (25.18 g, 141.4 mmol) y peróxido de benzoilo (8.14 g, 33.7 mmol) en tetracloruro de carbono (500 mL) se agitó a reflujo durante 1 hora. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de sílice con diclorometano . La evaporación del solvente produjo el intermediario bromuro de bencilo. Este sólido amarillo claro se combinó con 6-metoxi - 1 -naftol (23.4 g, 134.7 mmol) y carbonato de potasio (37.2 g, 269 mmol) en acetona (500 mL) y se agitó a reflujo durante 12 horas. La mezcla de reacción enfriada se filtró a través de sílice con acetona, se depuró del solvente y se purificó por cromatografía de columna de sílice (10% - 30% de acetato de etilo - hexanos) seguido de trituración con acetato de etilo para producir 20.3 g (39%) del compuesto de título como un sólido blanco: pf 138-142°C; 1H RM (CDC13) : d 3.85 (3H, s), 3.92 (3H, s) , 5.22 (2H, s) , 7.75 (1H, dd, J = 2.07 Hz, J = 6.50 Hz) , 7.12-7.17 (2H, m) , 7.25-7.38 (4H, m) , 8.22 (1H, d, J = 8.80 Hz); EM (ESI) m/z 391/393 ( [M+H] +) ; Análisis, para Ci9H16BrF03 : Calculado: C: 58.33 H: 4.12 Encontrado: C: 58.15 H: 3.98 Intermediario 12 2, 8-Dimetoxi-6H-dibenzo [c,h] cromeno Método A Una mezcla de 1- [ (2-bromo-5-metoxibencil) oxi] -6-metoxinaftaleno (13.03 g, 34.93 mmol) , acetato de sodio (10.3 g, 105 mmol) y diclorobis (trifenil-fosfina) -paladio (II) (3.68 g, 5.25 mmol) en DMA (600 mL) se agitó 12 horas a 120°C. La mezcla de reacción se vertió en 1500 mL de agua. El producto sólido crudo se colectó por filtración y se purificó por cromatografía de sílice (5%-10% de acetato de etilo-hexanos) para producir 5.76 g (56%) del compuesto de título como un sólido blanco: pf 175-178°C; LH RMN (CDC13) : d 3.85 (3H, s) , 3.92 (3H, s) , 5.25 (2H, s) , 6.75 (1H, d, J = 2.20 Hz), 6.93 (1H, dd, J = 2.56 Hz, J = 8.42 Hz) , 7.10 (1H, d, J = 2.56 Hz) , 7.13 (1H, dd, J = 2.56 Hz, J = 9.15 Hz) , 7.41 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 7.63 (1H, d, J = 8.42 Hz) , 7.74 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 8.14 (1H, d, J = 9.15 Hz) ; EM (ESI) m/z 293 ( [M+H] +) ; Análisis para Ci9Hi603 : Calculado: C: 78.06 H: 5.52 Encontrado: C: 78.01 H: 5.41 Intermediario 13 8-Metoxi- 6H-dibenzo [c,h] cromeno Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 1- [ (2-bromo-5-metoxibencil) -oxi] af aleno (3.05 g, 8.89 mmol) de acuerdo con el método A para producir 0.94 g (40%) de un sólido blanco: pf 128-130°C; XH RMN (DMSO-d6) : d 3.82 (3H, s) , 5.31 (2H, s) , 6.96-7.02 (2H, m) , 7.47-7.53 (2H, m) , 7.60 (1H, d, J = 8.55 Hz) , 7.82 (1H, d, J = 8.48 Hz) , 7.86-7.91 (1H, m) , 7.94 (1H, d, J = 8.65 Hz) , 8.12-8.15 (1H, m) ; EM (ESI) m/z 263 ([M+H]+) ; Análisis para C18H1402: Calculado: C: 82.42 H: 5.38 Encontrado: C: 81.98 H: 5.07 Intermediario 14 9-Fluoro-2 , 8 -dimetoxi - 6H-dibenzo [c , h] cromeno Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 1- [ (2-bromo-4-fluoro-5-metoxibencil) -oxi] -6-metoxinaftaleno (10.3 g, 26.3 mmol) de acuerdo con el método A para producir 4.51 g (55%) de un sólido blanco: pf 201-206°C; 1H RMN (CDC13) : d 3.93 (3H, s), 3.94 (3H, s) , 5.23 (2H, s), 6.84 (1H, d, J = 8.24 Hz) , 7.11-7.13 (2H, m) , 7.40-7.443 (2H, m) , 7.64 (1H, d, J = 8.60 Hz) , 8.11-8.13 (1H, m) ; EM (ESI) m/z 311 ( [M+H] +) ; Análisis para C19H15F03 : Calculado: C: 73.54 H: 4.87 Encontrado: C: 73.84 H: 4.60 Ejemplo la 6H-Dibenzo [c,h] cromeno-2 , 8-diol Método D A piridinio HCl (11 g) a 190°C se adicionó 2,8-dimetoxi-H-dibenzo- [c, h] -cromeno (2.48 g, 8.49 mmol) . La solución resultante se agitó a 190°C durante 3 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se colocó en agua (400 mL) . El producto sólido se colectó por filtración y se purificó sobre una columna de sílice para producir 2.09 g (93%) de un sólido amarillo claro. Este material se purificó además por CLA.R de fase inversa preparativa para producir el compuesto de título como un sólido blanco: pf 248-252°C (d) ; XH RMN (DMSO-ds) : d 5.19 (2H, s) , 6.70 (1H, d, J = 2.44 Hz) , 6.80 (1H, dd, J = 2.44 Hz, J = 8.30 Hz), 7.04 (1H, dd, J = 2.44 Hz, J = 8.79 Hz) , 7.08 (1H, d, J = 2.44 Hz) , 7.34 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 7.62 (1H, d, J = 8.30 Hz), 7.76 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 7.96 ( 1H, d, J = 9.28 Hz) , 9.63 (1H, S) , 9.78 (1H, S) ; EM (ESI) m/z 265 ([M+H]+); EM (ESI) m/z 263 ( [M-H] ") ; Análisis para C17Hi2F03 «0.1 H20; Calculado: C: 76.74 H: 4.62 Encontrado: C: 76.57 H: 4.25 Ejemplo Ib 9-Fluoro-6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 9-fluoro-2 , 8-dimetoxi-H-dibenzo [c, h] cromeno (1.29 g, 4.16 mmol) con piridinio HCl (30 g) de acuerdo con el método D para producir 1.01 g (86%) de un sólido de color canela. Este material se purificó adicionalmente por CLAR de fase inversa preparativa para producir el compuesto de título como un sólido blanco: pf 230-231°C (dec) ; XH RMN (DMS0-d6) : d 5.19 (2H( s) , 6.89 (1H, d, J = 8.73 Hz) , 7.04-7.10 (2H, m) , 7.35 (1H, d, J = 8.65 Hz) , 7.64 (1H, d, J = 12.48 Hz) , 7.77 (1H, d, J = 8.75 Hz) , 7.97 (1H, d, J = 8.90 Hz) , 9.89 (1H, bs) , 10.01 (1H, bs); EM (ESI) /z 283 ( [M+HJ +) ; EM (ESI) m/z 281 ( [M-H] ") ; Análisis para C17HHFO3 -0.75 H20; Calculado: C: 69.03 H: 4.26 Encontrado: C: 69.34 H: 3.70 Ejemplo le 6H-Dibenzo [c, h] cromen- 8-0I Método D Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 8 -metoxi -H-dibenzo [c , h] cromeno (0.73 g, 2.79 mmol) con piridinio HCl (10 g) de acuerdo con el método D para producir 0.63 g (91%) de un sólido blanco: pf 192-194°C; 1H RMN (DMSO-d6) : d 5.25 (2H, s), 6.73 (1H, bs), 6.83 (1H, dd, J = 2.38 Hz, J = 8.40 Hz) , 7.45-7.52 (2H, m) , 7.58 (1H, d, J = 8.58 Hz) , 7.70 (1H, d, J = 8.34 Hz) , 7.84-7.93 (2H, m) , 8.10-8.12 (1H, m) , 9.73 (1H, s) ; EM (ESI) /n/z 247 ( [M+H] ") ; Análisis para Ci7H1202 : Calculado: C: 82.24 H: 4.87 Encontrado: C: 81.85 H: 4.86 Intermediario 15 12 -Bromo- 2 , 8 -dimetoxi- 6H-dibenzo [c, h] cromeno Método B A una mezcla de 2 , 8-dimetoxi-H-dibenzo [c, h] cromeno (1.97 g, 6.75 mmol) en acetonitrilo (70 mL) a 0°C se adicionó NBS (1.44 g, 8.10 mmol) . La mezcla se agitó a 0°C durante 15 minutos, se vertió en 300 mL de agua y se extrajo con acetato de etilo (3x 150 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron sobre sulfato de sodio y se filtraron. La evaporación del solvente y purificación por cromatografía en sílice produjo un sólido blanco que se recristalizó a partir de 50 mL de isopropanol para producir 1.77 g (71%) del compuesto de título como un sólido cristalino blanco: pf 96-98°C; XH RMN (CDC13) : d 3.86 (3H, s) , 3.98 (3H, s) , 5.24 (2H, s) , 6.74 (1H, d, J = 2.444 Hz) , 6.93 (1H, dd, J = 2.68 Hz, J = 8.54 Hz) , 7.15 (1H, dd, J = 2.44 Hz, J = 9.28 Hz) , 7.43 (1H, d, J = 2.41 Hz) , 7.59 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 8.04 (1H, s) , 8.16 (1H, d, J = 9.28 Hz) ; EM m/z; Análisis para Ci9H15Br03 : Calculado: C: 61.47 H: 4.07 Encontrado: C: 61.66 H: 3.89 Intermediario 16 12 -Bromo- 9- fluoro-2, 8-dimetoxi-6H-dibenzo [c,h] cromeno Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 9-fluoro-2 , 8-dimetoxi-H-dibenzo [c, h] cromeno (1.47 g, 4.74 mraol) con NBS (1.01 g, 5.69 mmol) de acuerdo con el método B para producir 1.14 g (62%) de un sólido de color canela: pf 139-143°C; 1H RMN (CDC13) : d 3.98 (3H, s), 3.98 (3H( s) , 5.22 (2H, s) , 6.78 (1H, d, J = 8.24 Hz) , 7.16 (1H, dd, J = 2.56 Hz, J = 9.15 Hz) , 7.37 (1H, d, J = 12.08 Hz) , 7.43 (1H, d, J = 2.56 Hz) , 7.92 (1H, s) , 8.14 (1H, dd, J = 0.37 Hz, J = 9.15 Hz) ; EM (ESI) m/z 387/389 ( [ +H] +) ; Análisis para Ci9Hi4F03 : Calculado: C: 58.63 H: 3.63 Encontrado: C: 58.82 H: 3.58 Intermediario 17 2, 8-Dimetoxi-6H-dibenzo [c,h] cromen-12 -carbonitrilo Método C Una mezcla de 12 -bromo-2 , 8-dimetoxi -H-dibenzo [c,h] cromeno (8.33 g, 22.45 mmol), cianuro de zinc (3.15 g, 26.9 mmol) y tetracis (trifenilfosfina) aladio (0) (1.30 g, 1.12 mmol) en DMF (100 mL) se agitó a 120°C durante toda la noche. La mezcla de reacción enfriada se vertió en solución de cloruro de amonio (600 mL de solución 1N) y se extrajo con acetato de etilo (4x 300 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución de cloruro de amonio, se filtraron a través de un tapón de sílice, se depuraron del solvente, y se purificaron sobre una columna de sílice (40%-60% de diclorometano-hexanos) para producir un sólido amarillo. Este sólido se trituró con acetato de etilo para producir 5.43 g (76%) del compuesto de título como un sólido amarillo, pf 161-165°C; XH RMN (CDC13) : d 3.86 (3H, s), 3.98 (3H, s) , 5.32 (2H, s) , 6.73 (1H, d, J = 2.56 Hz) , 6.96 (1H, dd, J = 2.56 Hz, J = 8.42 Hz) , 7.19 (1H, dd, J = 2.56 Hz, J = 9.15 Hz) , 7.37 (1H, d, J = 2.20 Hz) , 7.60 (1H, d, J = 8.42 Hz) , 8.16 (1H, s) , 8.18 (1H, d, J = 9.52 Hz) ; E (ESI) m/z 317 ([M+H]+); Análisis para C2oHi5 03 : Calculado: C: 75.70 H: 4.76 N: 4.41 . Encontrado: C: 75.53 H: 4.48 N: 4.32 Intermediario 18 9-Fluoro-2 , 8-dimetoxi-6H-dibenzo [c,h] cromen- 12 -carbonitrilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 9-fluoro-2 , 8-dimetoxi-H-dibenzo [c, h] cromeno (0.99 g, 2.55 mmol) con cianuro de zinc (0.45 g, 3.8 mmol) de acuerdo con el método C para producir 0.55 g (64%) de un sólido blanco: pf > 220°C; XH RMN (CDC13) : d 3.92 (3H, s) , 3.97 (3H, s) , 5.29 (2H, s) , 6.77 (1H, d, J = 8.05 Hz) , 7.19 (1H, dd, J = 2.47 Hz, J = 9.24 Hz) , 7.36-7.39 (2H, m) , 8.04 (1H, s) , 8.17 (1H, d, J = 9.15 Hz) ; EM m/z; Análisis para C2oH14F 03 · 0.1H20 : Calculado: C: 71.25 H: 4.25 N: 4.16 Encontrado: C: 70.87 H: 3.91 N: 4.31. Ejemplo ld 2 , 8-Dihidroxi- 6H-dibenzo [c , h] cromeno-12 -carbc itrilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 2 , 8 -dimetoxi-H-dibenzo [c , h] -cromeno-12 -carbonitrilo (5.43 g, 17.1 mmol) con piridinio HCl (50 g) de acuerdo con el Método D para proporcionar 3.43 g (69%) de un sólido amarillo: pf > 250°C; XH RMN (DMSO-d6) : d 5.34 (2H, s), 6.71 (1H, d, J = 2.36 Hz) , 6.82 (1H, dd, J = 2.48 Hz, J = 8.41 Hz) , 7.19 (1H, dd, J = 2.32 Hz , J = 9.11 Hz) , 7.30 (1H, d, J = 2.36 Hz) , 7.78 (1H, d, J = 8.56 Hz) , 8.11 (1H, d, J = 9.14 Hz) , 8.50 (1H, s) , 9.81 (1H, s) , 10.46 (1H, bs) ; EM (ESI) m/z 288 ( [M-H] " ) ; Análisis para CiBHn 03 · 0.25H20 : Calculado: C: 73.59 H .- 3.95 N: 4.77 Encontrado: C: 73.69 H: 3.84 N: 4.53. Ejemplo le 9-fluoro-2, 8-dihidroxi-6H-dibenzo [c,h] cromeno-12 -carbonitrilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 9-fluoro-2, 8 -dimetoxi-H-dibenzo [c,h] -cromeno-12-carbonitrilo (0.40 g, 1.19 mmol) con piridinio HCl (15 g) de acuerdo con el Método D para proporcionar 0.32 g (88%) de un sólido blanco: pf > 250°C; 1H RMN (DMSO-d6) : d 5.29 (2H, s) , 6.86 (1H, d, J = 8.69 Hz) , 7.16 (1H, dd, J = 2.32 Hz, J = 9.15 Hz) , 7.28 (1H, d, J = 2.32 Hz) , 7.80 (1H, d, J = 12.40 Hz) , 8.08 (1H, d, J = 9.04 Hz) , 8.49 (1H, s) , 10.16 (1H, s) , 10.4 (1H, s) ; EM (ESI) m/z 306 ([M-H]") ; Análisis para Ci8H10FNO3 · 0.3H20 : Calculado: C: 69.14 H: 3.42 N: 4.48 Encontrado: C: 68.91 H: 3.10 N: 4.30. Ejemplo lf l-Cloro-2, 8-dihidroxi- 6H-dibenzo [c,h] cromeno- 12 -carbonitrilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 2 , 8 -dihidroxi-H-dibenzo [c, h] -cromeno- 12 -carbonitrilo (0.20 g, 0.70 mmol) con NCS (0.11 g, 0.83 mmol) en THF (10 mL) a temperatura ambiente durante toda la noche de acuerdo con el Método B para proporcionar 0.10 g (45%) de un sólido amarillo: pf > 250°C; XH RMN (DMSO-d6) : d 5.34 (2H, s) , 6.72 (1H, d, J = 2.35 Hz) , 6.83 (1H, dd, J = 2.43 Hz, J = 8.44 Hz), 7.37 (1H, d, J = 9.22 Hz) , 7.84 (1H, d, J = 8.57 Hz) , 8.14 (1H, d, J = 9.20 Hz) , 8.53 (1H, s) , 9.87 (1H, s) , 1.12 (1H, bs) ; EM (ESI) m/z 322/324 ([M-H]") ; Análisis para CiBHi0ClNO3 · 0.75H20 : Calculado: C: 64.11 H: 3.44 N: 4.33 Encontrado: C: 64.45 H: 3.05 N: 4.03.

Ejemplo lg 1-Cloro- 6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar H-dibenzo [c, h] cromeno-2, 8-diol (0.218 g, 0.83 mmol) con NCS (0.13 g, 0.99 mmol) en THF (10 mL) de acuerdo con el método B para producir 0.17 g (67%) del compuesto de título junto con 0.025 g (10%) del isómero 12-cloro-H,-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol . Estos isómeros se separaron por CLAR preparativa, pf 216-218°C; ¾ RMN (DMSO-d6) : d 5.24 (2H, s) , 6.72 (1H, d, J = 2.29 Hz) , 6.82 (1H, dd, J = 2.40 Hz, J = 8.39 Hz) , 7.25 (1H, d, J = 9.11 Hz) , 7.67 (2H, d, J = 8.69 Hz) , 7.94-7.99 (2H, m) , 9.72 (1H, bs) , 10.50 (1H, bs) ; EM (ESI) m/z 297/299 ( [M-H] ") ; Análisis para C17H Cl03 · 0.25H20 : Calculado: C: 67.34 H: 3.82 Encontrado: C: 67.25 H: 3.89. Intermediario 19 Acetato de 2- (acetiloxi) -6H-dibenzo [c,h] cromen- 8 -ilo Método E Una mezcla de H-dibenzo [c , h] cromeno-2 , 8-diol (1.82 g, 6.49 mmol) , piridina (25 mL) y anhídrido acético (25 mL) se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente y se vertió en agua (300 mL) . El producto sólido blanco se colectó por filtración, se lavó con agua y se secó bajo vacío a 105°C para producir 2.11 g (88%) del compuesto de título como un sólido blanco: pf 172-173°C; lE RMN (DMSO-d6) : d 2.31 (3H, s) , 2.34 (3H, s) , 5.36 (2H, s) , 7.17 (1H, d, J = 2.44 Hz) , 7.21 (1H, dd, J = 2.43 Hz, J = 8.29 Hz) , 7.21 (1H, dd, J = 2.44 Hz, J = 9.28 Hz) , 7.63 (1H, d, J = 8.30 Hz) , 7.68 (1H, d, J = 2.44 Hz) , 7.94 (1H, d, J = 8.30 Hz) , 8.04 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 8.18 (1H, d, J = 9.28 Hz) ; EM (ESI) m/z 349 ( [ +H]+) ; Análisis para C2iH1605: Calculado: C: 72.41 H: 4.63 Encontrado: C: 72.20 H: 4.67. Intermediario 20 Acetato de 2- (acetiloxi) -9-fluoro-6H-dibenzo [c,h] cromen- 8 -ilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 9-fluoro-H-dibenzo [c, h] -cromeno-2 , 8-diol (0.84 g, 2.98 mmol) con piridina (10 mL) y anhídrido acético (10 mL) de acuerdo con el método E para producir 0.93 g (86%) de un sólido blanco: pf 206-212°C; XH RMN (DMSO-d6) : d 2.30 (3H, s) , 2.33 (3H, s) , 5.30 (2H, s), 7.28-7.32 (2H, m) , 7.59 (1H, d, J = 8.61 Hz) , 7.64 (1H, d, J = 2.38 Hz) , 7.92 (1H, d, J = 11.54 Hz) , 8.01 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 8.15 (1H, d, J = 9.16 Hz) ; EM (ESI) m/z 367 ( [M+H] +) ; Análisis para C2iHi5F05 : Calculado: C : 68.85 H : 4.13 Encontrado: C: 68.41 H: 4.06.

Intermediario 21 Acetato de 2 - (acetiloxi) -12-bromo- 6H-dibenzo [c , h] cromen- 8-ilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar acetato de 2- (acetiloxi) -H-dibenzo [c, h] -cromen-8-ilo (1.63 g, 4.68 mmol) con NBS (1.00 g, 5.62 mmol) en acetonitrilo (100 mL) a temperatura ambiente de acuerdo con el método B para producir 2.00 g (rendimiento cuantitativo) de un sólido blanco: pf 192-194°C; XH RMN (CDC13) : d 2.33 (3H, s) , 2.38 (3H, s) , 5.28 (2H, s) , 6.99 (1H, d, J = 2.20 Hz) , 7.14 (1H, dd, J = 2.34 Hz, J = 8.42 Hz) , 7.29 (1H, dd, J = 2.26 Hz, J = 9.11 Hz) , 7.69 (1H, d, J = 8.47 Hz) , 7.86 (1H, d, J = 2.17 Hz) , 8.09 (1H, s) , 8.28 (1H, d, J = 9.05 Hz) ; EM m/z; Análisis para C2iHi5Br05 : Calculado: C: 59.04 H: 3.54 Encontrado: C: 58.95 H: 3.43. Intermediario 22 Acetato de 2- (acetiloxi) -12 -cloro-6H-dibenzo [c,h] cromen-8-ilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar acetato de 2- (acetiloxi) -H-dibenzo [c, h] cromen-8-ilo (0.26 g, 0.75 mmol) con NCS (0.12 g, 0.90 mmol) en acetonitrilo (10 mL) a reflujo durante 3 horas de acuerdo con el método B para producir 0.24 g (84%) de un sólido blanco: pf 183-184°C; ¾ RMN (CDC13): d 2.33 (3H, s), 2.38 (3H, s), 5.28 (2H, s) , 6.99 (1H, d, J = 2.27 Hz) , 7.14 (l'H, dd, J = 2.34 Hz, J = 8.42 Hz) , 7.30 (1H, dd, J = 2.27 Hz, J = 9.07 Hz) , 7.68 (1H, d, J = 8.49 Hz) , 7.88-7.89 (2H, m) , 8.29 (1H, d, J = 9.06 Hz) ; EM m/z; Análisis para C21H15C105 ? .1H20 : Calculado: C: 65.58 H: 3.98 Encontrado: C: 65.37 H: 3.55. Intermediario 23 Acetato de 2- (acetiloxi) -12-bromo-9-fluoro-6H- dibenzo [c,h] cromen- 8 -ilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar acetato de 2 - (acetiloxi )- 9-fluoro-H-dibenzo [c,h] cromen-8-ilo (0.47 g, 1.28 mmol) con NBS (0.27 g, 1.54 mmol) en acetonitrilo (25 mL) a temperatura ambiente durante toda la noche de acuerdo con el método B para producir 0.57 g (rendimiento cuantitativo) de un sólido blanco. Se obtuvo una muestra analítica por titulación con acetato de etilo para producir el compuesto de título como un sólido blanco: pf 190-193°C; XH RMN (D SO-d6) : d 2.36 (3H, s) , 2.37 (3H, s) , 5.34 (2H, s), 7.34 (1H, d, J = 7.69 Hz) , 7.46 (1H, dd, J = 2.23 Hz, J = 9.05 Hz) , 7.81 (1H, d, J = 2.18 Hz) , 8.09 (1H, d, J = 11.65 Hz) , 8.28 (1H, d, J = 9.08 Hz) , 8.47 (1H, s) ; EM (ESI) m/z 462/464 ( [M+NH4] +) ; Análisis para C2iHi4BrF05 : Calculado: C: 56.65 H: 3.17 Encontrado: C: 56.59 H: 3.16.

Intermediario 24 Acetato de 2- (acetiloxi) -12-cloro-9-fluoro-6H- dibenzo [c , h] cromen- 8 - ilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar acetato de 2- (acetiloxi) -9-fluoro-H-dibenzo [c,h] cromen-8-ilo (0.47 g, 1.28 mmol) con NCS (0.21 g, 1.54 mmol) en acetonitrilo (15 mL) a reflujo durante 4 horas de acuerdo con el método B para producir 0.55 g (rendimiento cuantitativo) de un sólido amarillo. Se obtuvo una muestra analítica por titulación con acetato de etilo para producir el compuesto de título como un sólido blanco: pf 194-198°C; XH RMN (DMSO-dg) : d 2.36 (3H, s), 2.37 (3H, s) , 5.37 (2H, s) , 7.34 (1H, d, J = 7.66 Hz) , 7.48 (1H, dd, J = 2.16 Hz , J = 9.06 Hz) , 7.85 (1H, d, J = 2.07 Hz) , 8.08 (1H, d, J = 11.61 Hz) , 8.28 (1H, d, J = 9.10 Hz) , 8.32 (1H, s) ; EM (ESI) m/z 399/401 ( [M-H] ") ; Análisis para C2iH14ClF05: Calculado: C : 62.93 H: 3.52 Encontrado: C: 62.53 H: 3.53. Ejemplo lh 12 -Bromo- 6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol Método F Una solución de acetato de 2- (acetiloxi) -12-bromo-H-dibenzo [c, h] cromen-8-ilo (1.40 g, 3.28 mmol) en metóxido de sodio (40 mL de 1N en metanol) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La solución se vertió en 100 mL de HCl 1N y se extrajo con acetato de etilo (3x 100 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución e bicarbonato de sodio, se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y se filtraron. La evaporación del solvente y purificación por cromatografía de sílice (40% de acetato de etilo - hexanos) proporcionó 0.91 g (81%) del compuesto de título como un sólido blanco: pf 178-180°C (descompone) , descolora arriba de 160°C; 1H RMN (DMS0-d6) : d 5.23 (2H, s) , 6.71 (1H, d, J = 2.32 Hz) , 6.80 (1H, dd, J = 2.43 Hz, J = 8.39 Hz) , 7.12 (1H, dd, J = 2.32 Hz, J = 9.03 Hz) , 7.34 (1H, d, J = 2.28 Hz) , 7.58 (1H, d, J = 8.53 Hz) , 8.04 (1H, d, J = 9.07 Hz) , 8.14 (1H, s) , 9.73 (1H, bs) , 10.20 (1H, bs) ; EM (ESI) m/z 341/343 ([M-H]") ; Análisis para CivHuBrOa : Calculado: C: 59.50 H: 3.23 Encontrado: C: 59.33 H: 3.26. Ejemplo li 12-Cloro-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar acetato de 2- (acetiloxi) -12-cloro-H-dibenzo [c, h] cromen-8-ilo (0.18 g, 0.47 mmol) con solución de metóxido de sodio (75 mL de 1N en metanol) de acuerdo con el método F para producir 0.13 g (93%) de un sólido de color canela. Este material se purificó adicionalmente por CLAR preparativa de fase inversa para producir el compuesto de título como un sólido rosa claro, pf 212-216°C (d) ; XH RMN (D SO-d6) : d 5.23 (2H, s), 6.71 (1H, d, J = 2.33 Hz) , 6.80 (1H, dd, J = 2.44 Hz, J = 8.39 Hz) , 7.14 (1H, dd, J = 2.34 Hz, J = 9.09 Hz) , 7.35 (1H, d, J = 2.31 Hz) , 7.68 (1H, d, J = 8.54 Hz) , 7.98 (1H, s) , 8.05 (1H, d, J = 9.07 Hz) , 9.74 (1H, bs) , 10.19 (1H, bs); EM (ESI) m/z 299/301 ([ +H]+) ; E (ESJ) /z 297/299 ( [M-H] ") ; Análisis para Ci7HnC103 ¦ 0.1H20 Calculado: C: 67.94 H: 3.76 Encontrado: C: 67.77 H: 3.67. Ejemplo lj 12 -Bromo- 9 -fluoro-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar acetato de 2- (acetiloxi) -12-bromo-9-fluoro-H-dibenzo [c, h] cromen-8-ilo (0.48 g, 1.08 mmol) con solución de metóxido de sodio (40 mL de 1N en metanol) de acuerdo con el método F. La purificación por CLAR preparativa de fase inversa produjo 0.20 g (53%) del compuesto de título como un sólido blanco: pf 194-197°C; ¾ RMN (DMSO-d6) : d 5.22 (2H, s), 6.89 (1H, d, J = 8.68 Hz) , 7.13 (1H, dd, J = 2.31 Hz, J = 9.05 Hz) , 7.35 (1H, d, J = 2.27 Hz) , 7.75 (1H, D, J = 12.46 Hz) , 8.04 (1H, d, J = 9.06 Hz) , 8.19 (1H, s) , 10.21 (2H, bs) ; EM (ESI) m/z 359/361 ([M-H]") ; Análisis para Ci7H10BrO3 · 0.75H20 : Calculado: C: 54.50 H: 3.09 Encontrado: C: 54.85 H: 2.89. Ejemplo lk 12-Cloro-9-fluoro-6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar acetato de 2- (acetiloxi) -12-cloro-9-fluoro-H-dibenzo [c, h] cromen-8-ilo (0.44 g, 1.10 mmol) con solución de metóxido de sodio (40 mL de 1N en metanol) de acuerdo con el método F, para producir 0.30 g (86%) de un sólido color canela. Este material se purificó adicionalmente por CLAR preparativa de fase inversa para producir el compuesto de título como un sólido blanco: pf 215-220°C (dec) ; H RM (DMSO-dg) : d 5.22 (2H, s) , 6.89 (1H, d, J = 8.68 Hz), 7.15 (1H, dd, J = 2.22 Hz, J = 9.05 Hz) , 7.35 (1H, d, J = 2.13 Hz) , 7.74 (1H, d, J = 12.42 Hz) , 8.03-8.06 (2H, m) , 10.21 (2H, bs) ; EM (ESI ) m/z 315/317 ( [M-H] ") ; Análisis para C17H10ClFO3 · 0.25H20 : Calculado: C: 63.57 H: 3.29 Encontrado: C: 63.22 H: 3.27. Ejemplo 11 12 -Metoxi-6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol Una mezcla de acetato de 2- (acetiloxi) -12-metoxi-H-dibenzo [c,h] cromen-8-ilo (2.06, 6.00 mmol), CuBr (0.86 g, 6.00 mmol), metóxido de sodio (15 mL de 25% en metanol) y D F (30 mL) se calentó a reflujo durante 3 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en solución de HCl (200 mL de 2N) y se extrajo con acetato de etilo (3x 250 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución de bicarbonato de sodio, se secaron sobre sulfato de sodio y se filtraron. La evaporación del solvente y purificación por cromatografía de columna de sílice (40% de acetato de etilo -hexanos) produjo 1.11 g (63%) del compuesto de título como un sólido de color canela: pf 224°C (d) ; ? RMN (DMS0-d6) : d 3.98 (3H, s) , 5.12 (2H, s) , 6.70 (1H, d, J = 2.47 Hz) , 6.81 (1H, dd, J = 2.47 Hz, J = 8.24 Hz) , 7.05 (1H, dd, J = 2.47 Hz, J = 9.06 Hz) , 7.18 (1H, s) , 7.35 (1H, d, J = 2.47 Hz) , 7.68 (1H, dd, J = 8.51 Hz) , 7.92 (1H, d, J = 9.06 Hz) , 9.63 (1H, s) , 9.80 (1H, s) ; EM (ESI) m/z 293 ( [M-H] " ; EM (ESI) m/z 295 ( [M+H] +) ; Análisis para C18Hi404 · 0.3H20 : Calculado: C: 72.14 H: 4.90 Encontrado: C: 71.88 H: 4.74. Intermediario 25 Acetato de 2- (acetiloxi) - 12 -metoxi - 6H-dibenzo [c,h] cromen-8- ilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 12 -metoxi -H-dibenzo [c , h] -cromeno-2 , 8 -diol (1.11 g, 3.78 mmol) con piridina y anhídrido acético de acuerdo con el método E para producir 1.11 g (78%) de un sólido amarillo claro: pf 126-134°C; ¾ RMN (DMSO-de) : d 2.31 (3H, s), 2.33 (3H, S) , 4.05 (3H, s) , 5.28 (2H, s) , 7.16 (1H, d, J = 2.32 Hz) , 7.22 (1H, dd, J = 2.44 Hz, J = 8.34 Hz) , 7.35 (1H, dd, J = 2.32 Hz, J = 9.04 Hz) , 7.42 (1H, s) , 7.80 (1H, m) , 8.01 (1H, d, J = 8.58 Hz) , 8.14 (1H, dd, J = 0.35 Hz, J = 9.04 Hz) ; Análisis para C29Hi806 · 0.25H20 : Calculado: C: 69.01 H: 4.87 Encontrado: C: 69.08 H: 4.88. Ejemplo lm ll-Cloro-12-metoxi-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol El compuesto de título se preparó haciendo reaccionar acetato de 2- (acetiloxi) -12-metoxi-H-dibenzo [c, h] cromen-8-ilo (0.41 g, 1.08 mmol) con NCS (0.17 g, 1.30 mmol) en acetonitrilo (10 mL) de acuerdo con el método B seguido de desacilación de acuerdo con el método F para producir 0.050 g (14%) de un sólido rosa: pf descolora >230°C; *? RMN (DMS0-d6): d 3.87 (3H, s), 5.06 (2H, s), 6.80 (1H, d, J = 2.35 Hz) , 6.84 (1H, dd, J = 2.55 Hz, J = 8.63 Hz) , 7.11 (1H, dd, J = 2.34 Hz, J = 9.06 Hz) , 7.23 (1H, d, J = 2.30 Hz) , 8.01 (1H, d, J = 9.05 Hz) , 8.11 (1H, d, J = 8.60 Hz) , 9.81 (1H, bs) , 10.14 (1H, bs) ; EM (ESI) m/z 329/331 ([M+H]+); EM (ESI ) m/z 327/329 ( [M-H] ") ; Análisis para Ci8Hi3C104 · 0.25H20 : Calculado: C : 64.87 H : 4.08 Encontrado: C: 64.90 H: 4.09.

Ejemplo ln 12-Metil-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol Una mezcla de 12 -bromo-H-dibenzo [c , h] cromeno-2 , 8 -diol (3.05 g, 8.89 mmol) , tetrametilestaño (2.39 g, 13.3 mmol) y diclorobis (tri-O-tolilfosfina) paladio (II) (0.70 g, 0.9 mmol) en DMF (100 mL) se agitaron a 80°C bajo nitrógeno durante 16 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua (250 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3x 250 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución de cloruro de amonio (50 mL) , se secaron sobre sulfato de sodio y se filtraron. La evaporación del solvente y la purificación por cromatografía de columna de sílice (40% de acetato de etilo - hexanos) produjo 2.28 g (92%) de un sólido café claro. Una muestra se purificó adicionalmente por CLAR preparativa de fase inversa para producir el compuesto de título como un sólido casi blanco: pf 220-224°C (d) ; XH RM (Acetona-ds) : d 2.56 (3H, s), 5.20 (2H, s) , 6.78 (1H, d, J = 2.74 Hz) , 6.89 (1H, dd, J = 2.74 Hz, J = 8.24 Hz) , 7.12 (1H, dd, J = 2.47 Hz, J = 9.06 Hz) , 7.25 (1H, d, J = 2.20 Hz) , 7.64-7.66 (2H, m) , 8.09 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 8.46 (1H, s) , 8.60 (1H, s) ; EM (ESI) m/z 279 ([M+H]+); EM (ESI) m/z 277 ([M-H]"); Análisis para Ci8H1403 « 0.30H2O : Calculado: C: 76.20 H: 5.19 Encontrado: C: 75.90 H: 4.75.

Ejemplo lo 12-Vinil-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol A una mezcla de 12 -bromo-H-dibenzo [c , h] cromeno-2 , 8-diol (0.63 g, 1.84 mmol) y diclorobis (tri -o-tolilfosfina) aladio ( II) (0.07 g, 0.09 mmol) en dietoxietano (10 mL) se adicionó tributilvinilestaño (0.87 g, 2.76 mmol) . A mezcla se agitó durante 12 horas a 110°C. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en solución de cloruro de amonio (100 mL de 1N) y se extrajo con acetato de etilo (3x 200 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución de cloruro de amonio (100 mL) , se secaron sobre sulfato de sodio y se filtraron. La evaporación del solvente y purificación por cromatografía en columna de sílice (30% de acetato de etilo - hexanos) proporcionó 0.40 g (75%) del compuesto de título como un sólido amarillo claro: pf > 220°C; H RM (DMS0-d6): d 5.20 (2H, s), 5.40 (1H, dd, J = 1.65 Hz, J = 10.99 Hz) , 5.87 (1H, dd, J = 1.65 Hz, J = 17.58 Hz) , 6.71 (1H, d, J = 2.75 Hz) , 6.81 (1H, dd, J = 2.47 Hz, J = 8.51 Hz) , 7.08 (1H, dd, J = 2.47 Hz, J = 9.06 Hz) , 7.26-7.31 (2H, m) , 7.72 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 7.94 (1H, s) , 8.01 (1H, d, J = 9.34 Hz) , 9.63 (1H, s) , 9.85 (1H, s) ; EM (ESI) m/z 291 ([M+H]+); EM (ESI) m/z 289 ( [M-H] " ) ; Análisis para Ci9H1403 · 0.25H20 : Calculado: C: 77.41 H: 4.96 Encontrado: C: 77.34 H: 4.77.

Ejemplo lp 12-Etil-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2 , 8-diol A una solución de 12 -vinil -H-dibenzo [c , h] cromeno-2, 8-diol (0.19 g, 0.66 mmol) en acetato de etilo (30 mL) se adicionó paladio sobre carbón natural (0.23 g) . El matraz se ajustó con un balón relleno con hidrógeno y la suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La reacción se filtró a través de Celita y se purificó por cromatografía de columna de sílice (40% de acetato de etilo - hexanos) para proporcionar 0.11 g (58%) de un sólido café claro que se purificó además por CLAR preparativa de fase inversa para producir el compuesto de título como un sólido púrpura claro: pf 184-192°C; XH RMN (DMSO-d : d 1.31 (3H, t, J = 7.48 Hz) , 2.89-2.95 (2H, m) , 5.16 (2H, s) , 6.69 (1H, d, J = 2.55 Hz) , 6.80 (1H, dd, J = 2.49 Hz, J = 8.40 Hz) , 7.04 (1H, dd, J = 2.32 Hz, J = 9.04 Hz) , 7.20 (1H, d, J = 2.21 Hz) , 7.61-7.63 (2H, m) , 8.00 (1H, d, J = 9.04 Hz) , 9.58 (1H, s) , 9.74 (1H, s) ; EM (ESI) m/z 291 ( [M-H] ') ; Análisis para Ci9Hi603 · 0.10H2O : Calculado: C: 77.59 H: 5.55 Encontrado: C: 77.37 H: 5.58. Ejemplo lq 12-Tien-3-il-6H-dibenzo [c,h] -cromeno-2, 8-diol Método G Una mezcla de 12 -bromo-H-dibenzo [c , h] cromeno-2 , 8 -. diol (0.51 g, 1.49 mmol), ácido 3-tiofen borónico (0.38 g, 3 mmol), tetracis (trifenilfosfina) paladio (0.17 g, 0.15 mmol) , solución de carbonato de sodio (1.5 mL de 2N) , agua (1 mL y DME (5 mL) se agitó durante toda la noche a 85°C. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua (100 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3-x 200 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio y se filtraron. La evaporación del solvente y purificación en sílice (40% de acetato de etilo -hexanos) proporcionó 0.43 g (84%) de un sólido de color canela. Este material se purificó además por CLAR preparativa de fase inversa para producir el compuesto de título como un sólido de color canela: pf 179-182°C; XH RMN (DMSO-ds) : d 5.23 (2H, s) , 6.72 (1H, d, J = 2.38 Hz) , 6.78 (1H, dd, J = 2.38 Hz, J = 8.33 Hz) , 7.06 (1H, dd, J = 2.38 Hz, J = 8.92 Hz) , 7.21 (1H, d, J = 2.38 Hz) , 7.63-7.67 (2H, m) , 7.72-7.73 (2H, m) , 8.05 (1H, d, J = 8.93 Hz) , 9.63 (1H, s) , 9.75 (1H, s) ; EM (ESI) m/z 345 ( [M-H] " ) ; Análisis para C2iH1403S · 0.25C2H3N · H20 : Calculado: C: 70.62 H: 4.34 : 0.96 Encontrado: C: 70.34 H: 4.41 N: 1.39. Intermediario 26 12-Tien-2-il-2, 8-dimetoxi-6H-dibenzo [c,h] cromeno Una mezcla de 12-bromo-2 , 8 -dimetoxi-H-dibenzo [c,h] cromeno (0.53 g, 1.43 mmol) , ácido 2-tiofen borónico (0.2 g, 1.57 mmol) , tetracis (trifenilfosfina) paladio (0.08 g, 0.07 mmol), solución de carbonato de sodio (2 mL de 2N) , agua (1 mL, y DME, 20 mL) se hizo reaccionar durante toda la noche a 85 °C de acuerdo con el método G para producir 0.48 g (90%) de un sólido de color canela: pf 110-112°C; ¾ RM (DMSO-ds) : d 3.80 (3H, s) , 3.81 (3H, s), 5.33 (2H, s) , 6.95-6.99 (2H, m) , 7.22-7.27 (2H, m) , 7.39-7.40 (1H, m) , 7.48 (1H, d, J = 2.44 Hz) , 7.70 (1H, dd, J = 0.98 Hz, J = 5.37 Hz) , 7.76 (1H, d, J = 8.3 Hz) , 7.92 (1H, s), 8.16 (1H, d, J = 9.28 Hz) ; EM (ESI) m/z 345 ([M-H]"); Análisis para C23H18O3S : Calculado: C: 73.77 H: 4.85 Encontrado: C: 74.43 H: 4.78. Ejemplo Ir 12-Tien-2-il-6H-dibenzo [c,h] cromen- 2, 8-diol Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar el intermediario 26 y piridinio HCl (2.85 g) de acuerdo con el Método D para proporcionar 0.3 g (88%) de un sólido amarillo verduzco claro: pf 191-193°C; H RMN (DMSO-ds) : d 5.25 (2H, s), 6.72 (1H, d, J = 2.75 Hz) , 6.80 (1H, dd, J = 2.75 Hz, J = 8.24 Hz) , 7.90 (1H, dd, J = 2.20 Hz, J = 9.06 Hz) , 7.24-7.29 (2H, m) , 7.37 (1H, d, J - 2.20 Hz) , 7.65-7.68 (2H, m) , 7.79 (1H, s) , 8.07 (1H, d, J = 8.79 Hz) , 9.66 (1H, bs) , 9.85 (1H, bs) ; HRMS calculado para C23Hi803S+H (M+l) 375.10495 observado 375.10497 Análisis para C2iH1403S · 0.65H20 : Calculado: C: 70.43 H: 4.30 Encontrado: C: 70.02 H: 3.85.

Ejemplo ls 12 -Butil-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 12 -bromo-H-dibenzo [c , h] cromeno-2 , 8 -diol (1.07 g, 3.12 mmol) con ácido butil borónico (0.46 g, 4.55 mmol ) de acuerdo con el método G para producir 0.12 g (12%) de un sólido amarillo claro que se purificó adicionalmente por CLAR preparativa de fase inversa para producir un sólido púrpura claro: pf 118-121°C; E RM (DMSO-d6) : d 0.96 (3H, t, J = 7.30 Hz) , 1.38-1.47 (2H, m) , 1.62-1.69 (2H, m) , 2.90 (2H, t, J = 7.59 Hz) , 5.16 (2H, s) , 6.69 (1H, d, J = 2.09 Hz) , 6.80 (1H, dd, J = 2.38 Hz, J = 8.39 Hz) , 7.04 (1H, dd, J = 2.20 Hz, J=9.04 Hz) , 7.20 (1H, d, J=2.09 Hz) , 7.60-7.62 (2H, m) , 7.99 (1H, d, J=9.04 Hz) , 9.58 (1H, s) , 9.73 (1H, s) ; EM (ESI) m/z 321 ([M+H]+); EM (ESI) m/z 319 ( [M-H] ,") ; Análisis para C21H20O3 · 0.10H2O : Calculado: C: 78.29 H: 6.32 Encontrado: C: 78.13 H: 6.30. Intermediario 27 8-Dimetoxi-12 -propenil-6H-dibenzo [c, h] cromeno Una mezcla de 12-bromo-2 , 8 -dimetoxi-6H-dibenzo [c , h] cromeno (1.4 g, 3.78 mmoles) , aliltributilestaño (1.76 mi, 5.68 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio (II) (133 mg, 0.19 mmoles) en m-xileno (38 mi) se calentó a 130 °C con agitación durante 1 h. La CCF y CL-EM indicaron que la reacción no se completó. La mezcla se filtró a través de celita y se adicionó catalizador fresco de diclorobis (trifenilfosfina) paladio (II) (133 mg, 0.16 mmoles) en la reacción y la mezcla se calentó a 130°C durante 2 h. La CCF y CL-EM indicaron que la reacción aún no se completó. Por lo tanto, la filtración y adición de catalizador fresco se repitió dos veces más. La mezcla se filtró a través de celita, se depuró del solvente y se purificó por cromatografía de sílice (20%-40% de diclorometano-hexano) para proporcionar 0.84 g (67%) del compuesto de título como un sólido amarillento: 1H RM (DMSO-d6) : d 2.02 (3H, dd, J = 6.57 Hz, J = 1.73 Hz), 3.86 (3H, s), 3.96 (3H, s), 5.24 (2H, s) , 6.17-6.18 (1H, m) , 6.75 (1H, d, J = 2.52 Hz) , 6.94 (1H, dd, J = 8.57 Hz, J = 2.61 Hz) , 7.01 (1H, J = 15.43 Hz, J = 1.54 Hz) , 7.14 (1H, dd, J = 9.14 Hz, J = 2.52 Hz) , 7.31 (1H, d, J = 2.44 Hz) , 7.69 (1H, d, J = 8.57 Hz) , 7.81 (1H, s) , 8.17 (1H, d, J = 9.16 Hz) ; EM (ESI) m/z 333 ( [M+H] +) . Intermediario 28 2, 8-Dimetoxi-12-propil-6H-dibenzo [c,h] cromeno Una mezcla de 2 , 8 -dimetoxi-12 -propenil - 6H-dibenzo [c,h] cromeno (460 mg, 1.38 mmoles) y paladio (92 mg, 10% sobre carbono activado) en 36 mi de acetato de etilo se agitó bajo un balón de hidrógeno a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Celita y se concentró para dar 430 mg (94%) del compuesto de título como un sólido café claro. La muestra analítica se obtuvo por purificación adicional con CLAR preparativa de fase inversa: pf 88-90°C; XH RMN (DMSO-d6) : d 1.01 (3H, t, J = 7.31 Hz) , 1.68-1.80 (2H, m) , 2.98 (2H, t, J = 7.29 Hz) , 3.81 (3H, s) , 3.91 (3H, s) , 5.25 (2H, s) , 6.93 (1H, d, J = 2.53 Hz) , 6.98 (1H, dd, J = 8.46 Hz, J = 2.04 Hz) , 7.17 (1H, dd, J = 9.20 Hz, J = 2.38 Hz) , 7.28 (1H, d, J = 2.36 Hz) , 7.72 (1H, s) , 7.77 (1H, d, J = 8.57 Hz) , 8.08 (1H, d, J = 9.14 Hz) ; EM (ESI) m/z 335 (M+H+) . Análisis para C22H22O3 : Calculado: C: 79.02 H: 6.63 Encontrado: C: 78.48 H: 6.75. Ejemplo lt 12-Propil-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2 , 8-diol A una mezcla de 2 , 8 -dimetoxi- 12 -propil - 6H-dibenzo [c, h] cromeno (220 mg, 0.658 mmoles) en CH2C12 (33 mL) a 0°C se adicionó lentamente tribromuro de boro (3.95 mi de solución 1N de CH2C12 3.95 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 3 h. Se inyectaron 4 mi de agua en la mezcla con agitación en un baño de hielo-agua. CH2C12 en la mezcla se retiró bajo presión reducida. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (x3) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio y se depuró el solvente para dar 120 mg (60%) del compuesto de título como sólido blanco. La muestra analítica se obtuvo por purificación con cromatografía de columna de sílice (20%-30% de acetato de etilo-hexano) y después la recristalización con acetato de etilo - hexano: pf 86-95°C; 1H RMN (DMSO-d6) : d 1.00 (3H, t, J = 7.24 Hz), 1.63-1.76 (2H, m) , 2.87 (2H, t, J = 7.22 Hz) , 5.16 (2H, s) , 6.69 (1H, d, J = 2.28 Hz) , 6.79 (1H, dd, J = 8.39 Hz, J = 2.28 Hz) , 7.03 (1H, dd, J = 9.02 Hz, J = 2.18 Hz) , 7.20 (1H, d, J = 2.10 Hz) , 7.60 (1H, s) , 7.62 (1H, d, J = 7.85 Hz) , 7.99 (1H, d, J = 9.01 Hz) , 9.61 (1H, s) , 7.76 (1H, s); E (ESI) m/z 305 (M-H~ ) ; HRMS: calculado para C2oHi803, 306.1256; encontrado (ESI), 305.11827. Análisis para C2oHi803 : Calculado: C: 78.41 H: 5.92 Encontrado: C: 72.79 H: 6.62. Intermediario 30 5- etoxi- 1-naftol En un matraz de 2000 mi una mezcla de 5-metoxi-l-tetralona (30.0 g, 170.2 mmol) y 10% de Pd/C (40 g) en 1000 mi de p-cimeno se colocó a reflujo y se monitoreó por CL-EM hasta que no estuvo presente material iniciador (aproximadamente 24 h) . La mezcla después se enfrió a temperatura ambiente y se pasó a través de un tapón de gel de sílice/celita y se concentró bajo vacío a 26.6 g (90%) de un sólido casi blanco: XH RMN (400 MHz, DMSO-d6) : d 3.90 (3H, s) , 6.83 (1H, appd, J = 7.5 Hz) , 6.89 (1H, appd, J = 7.7 Hz) , 7.24 (1H, appt) , 7.30 (1H, appt)( 7.54 (1H, appd, J = 8.5 Hz) , 7.65 (1H, d, J = 8.5 Hz) , 9.98 (1H, s) . Intermediario 31 1- [ (2 -bromo- 5 -metoxibencil) oxi] - 5 -metoxinaftaleno A una mezcla de 5-metoxi-l-naftol (26.0 g, 149 mmol) , trifenilfosfina (43.3 g, 165 mmol), (2-bromo-5-metoxifenil) metanol (36.0 g, 166 mmol) y THF (500 ml) se adicionó DEAD (28.7 g en 50 ml de THF, 165 mmol) gota a gota. La reacción después se agitó durante toda la noche, se concentró, se disolvió en una cantidad mínima de éter y se enfrió a aproximadamente -30°C para formar un precipitado blanco (PPh30 y DEAD reducido) que se filtró. El filtrado se concentró y se disolvió en una cantidad mínima de diclorometano y se enfrió a -30°C. El precipitado se filtró en un tapón de sílice y el filtrado se concentró a 28.7 g (51.5%) de sólido blanco, pf 120-121°C; XH RM (300 MHz, DMSO-d6) : d 3.77 (3H, s), 3.96 (3H, s), 5.26 (2H, s) , 6.94 (1H, dd, J = 8.8 Hz, 3.1 Hz) , 7.01 (1H, d, J = 7.6 Hz) , 7.11 (1H, d, J = 7.6 Hz) , 7.28 (1H, d, J = 3.1 Hz) , 7.42 (2H, m) , 7.61 (1H, d, J = 8.8 Hz) , 7.75 (2H, appd); EM m/z 373/275 (patrón Br) (M+H+) . Análisis para Ci9H17Br03 : Calculado: C: 61.14 H: 4.59 Encontrado: C: 60.86 H: 4.42.

Intermediario 32 1, 8-Dimetoxi-6H-dibenzo [c, h] cromeno A un matraz de recuperación de 2000 mi se adicionó 1- [ (2 -bromo-5-metoxibencil) oxi] -5-metoxinaftaleno (3.0 g, 8.03 mmol) , acetato de potasio (2.4 g anhídrido, 24.10 mmol) , PdCl2(PPh3)2 (1.12 g, 1.60 mmol) y N, N-dimetilacetamida (500 mi 99%) . El matraz se purgó con nitrógeno, se calentó a 130°C durante 12 h y se concentró bajo alto vacío. Los sólidos oscuros después se disolvieron en éter/CH2Cl2 (1/1 300 mi) y se pasó a través de un tapón de gel de sílice/celita . La evaporación bajo presión reducida proporcionó 2.32 g (99%) de producto como un sólido de color canela, pf 166-167°C; 1H RMN (300 Hz, DMSO-dg) : d 3.82 (3H, s) , 3.97 (3H, s) , 5.30 (2H, s) , 6.98 (3H, m) , 7.42 (1H, t, J = 8.1 Hz) , 7.69 (1H, d, J = 8.5 Hz) , 7.81 (2H, appd, J = 8.6 Hz) , 7.91 (1H, d, J = 8.9 Hz) ; EM m/z 293 (M+H+) . Análisis para Ci9HiS03 : Calculado: C: 78.06 H: 5.52 Encontrado: C: 77.67 H: 5.28. Ejemplo lu 6H-dibenzo [c, h] cromeno-1, 8-diol Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 1 , 8-dimetoxi-6H-dibenzo [c, h] -cromeno (1.0 g, 3.42 mmol) con clorhidrato de piridina (5.0 g, 43.3 mmol) de acuerdo con el método D para producir 0.93 g (99%) de espuma blanca, pf 213-214°C; XH RMN (300 MHz, DMSO-d6) : d 5.21 (2H, s) , 6.72 (1H, d, J = 1.9 Hz) , 6.82 (2H, m) , 7.27 (1H, t, J = 7.9 Hz), 7.54 (1H, d, J = 8.3 Hz) , 7.68 (1H, d, J = 8.4 Hz) , 7.78 (2H, brs), 9.72 (1H, s) , 10.09 (1H, s) ; EM /z 263 (M-H+) ; Análisis para C17H1203 : Calculado: C: 77.26 H: 4.58 Encontrado: C: 76.62 H: 4.42. Intermediario 33 Acetato de 1- (acetiloxi) -6H-dibenzo [c, h] cromen-8-ilo Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 6H-dibenzo [c , h] -cromeno- 1 , 8-diol (1.5 g, 5.68 mmol) , anhídrido acético (25 mi) y piridina (25 mi) de acuerdo con el método E para producir 1.88 g (95%) del producto como un sólido blanco, pf 142-143°C; ¾ RMN (300 MHz, DMSO-ds) : d 2.31 (3H, s) , 2.47 (3H, s) , 5.38 (2H, s) , 7.18 (1H, d, J = 2.0 Hz) , 7.22 (1H, dd, J = 8.4 Hz, 2.3 Hz) , 7.33 (1H, d, J = 7.1 Hz) , 7.55 (1H, t, J = 8.0 Hz) , 7.60 (1H, d, J = 8.9 Hz) , 7.95 (1H, d, J = 8.4 Hz) , 8.06 (2H, appt) ; EM m/z 349 (M+H+) ; Análisis para C2iHi605 : Calculado: C: 72.41 H: 4.63 Encontrado: C: 72.06 H: 4.72. Ejemplo lv 12 -Cloro- 6H-dibenzo [c,h] cromeno-1, 8-diol El compuesto de título se preparó haciendo reaccionar acetato de 1- (acetiloxi) -6H-dibenzo [c , h] -cromen- 8-ilo (360 mg, 1.03 mmol) con NCS (210 mg, 1.57 mmol) y DMF anhidra (20 mi) de acuerdo con el método B durante 2.0 h a temperatura ambiente, seguido de calentamiento a 100°C durante 1 h. La reacción se concentró bajo presión reducida y los sólidos se disolvieron en MeOH (30 mL) . Se burbujeó NH3 durante 0.5 h mientras que el acetato de monitoreó por CL-EM. La reacción se concentró hasta un sedimento oscuro, se disolvió en EtOAc y se pasó a través de un tapón de sílice para producir 200 mg de espuma (65%) . Se produjo una muestra analítica por cromatografía de sílice (EtOAc : hexanos 1:1). pf -185°C dec; ¾ RMN (400 MHz , DMSO-d6) : d 5.23 (2H, s), 6.72 (1H, d, J = 2.3 Hz) , 6.81 (1H, dd, J = 8.6 Hz, 2.6 Hz), 6.92 (1H, dd, J = 7.5 Hz, J = 1.0 Hz) , 7.33 (1H, appt) , 7.62 (1H, dd, J = 8.5 Hz, 1.0 Hz) , 7.69 (1H, d, J = 8.6 Hz) , 7.79 (1H, s) , 9.78 (1H, s) , 10.11 (1H, s) ; E m/z 297/399 (patrón Cl) (M-H+) ; Análisis para Ci7HnC103 : Calculado: C: 68.35 H: 3.71 Encontrado: C: 67.85 H: 3.61. Ejemplo lw 12 -Bromo-6H-dibenzo [c,h] -cromeno-1, 8-diol Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar acetato de 1- (acetiloxi) -6H-dibenzo- [c, h] cromen-Silo (510 mg, 1.46 mmol), NBS (315 mg, 1.77 mmol) y DMF anhidra (30 mi) a temperatura ambiente durante 1.5 horas de acuerdo con el método B. La reacción se concentró bajo presión reducida, se disolvió en MeOH (30 mi) , y NH3 se burbujeó durante 1.5 h mientras que la remoción de acetato se monitoreó por CL-E . La reacción se concentró hasta un sedimento oscuro y se purificó por cromatografía de sílice (EtOAc : hexanos 1:1) para dar 340 mg (68%) del producto como un sólido de color canela. Pf se descompone encima de 130°C; XH R N (400 MHz , DMSO-d6) : d 5.23 (2H, s), 6.72 (1H, d, J = 1.9 Hz) , 6.81 (1H, dd, J = 8.2 Hz, 2.5 Hz) , 6.92 (1H, dd, J = 7.7 Hz, J = 1.1 Hz) , 7.33 (1H, t, J = 8.0), 7.64 (1H, dd, J = 8.5 Hz, 1.1 Hz) , 7.68 (1H, d, J = 8.5 Hz) , 8.01 (1H, s) , 9.78 (1H, s) , 10.15 (1H, s) ; E m/z 341/343 (patrón Br) (M-H+) ; Análisis para Ci7HnBr03 : Calculado: C: 59.50 H: 3.23 Encontrado: C : 59.23 H: 3.34. Ej emplo lx 1, 8-Dihidroxi-6H-dibenzo [c,h] cromeno-12 -carbonitrilo En un matraz de 10 mi se adicionó bromuro (165 mg, 0.48 mmol) , Pd(PPh3) (28 mg, 0.024 mmol) , cianuro de zinc (68 mg, 0.58 mmol) y DMF (5 mi) . La mezcla se calentó a 120°C durante 12 h después de lo cual no se llevó a cabo la reacción. Después se adicionó cianuro de cobre (43 mg, 0.48 mmol) y la reacción se completó en 1 h por CL-EM. Después de que se enfrió la reacción, se diluyó con EtOAc, se pasó a través de un tapón de sílice, se concentró y se purificó por CLAR de fase inversa preparativa (agua/CH3CN 0.1% de TFA) y se concentró bajo presión reducida hasta un sólido blanco. Los sólidos se secaron en pistola de secado (100°C durante toda la noche) para producir 30 mg de producto (21%) como un sólido blanco. Pf se decanta encima de 260°C; 1H RMN (300 MHz , DMSO-d6) : d 2.06 (2H, m) , 2.60 (2H, t, J = 6.5 Hz) , 2.99 (2H, t, J = 5.9 Hz) , 6.87 (2H, d, J = 8.6 Hz) , 7.57 (4H, m),, 7.86 (1H, d, J = 8.7 Hz) , 9.74 (1H, s) ; EM m/z 237 (M-H+) ; Análisis para i5Hi402 : Calculado: C: 80.65 H : 5.92 Encontrado: C: 79.04 H: 5.60. Ejemplo ly y Ejemplo lz 2-Cloro-6H-dibenzo [c,h] cromeno-1, 8-diol (Ej . ly) y 4-cloro-6H-dibenzo [c,h] cromeno-1, 8-diol (Ej . lz) Se preparó el compuesto de título haciendo reaccionar 6H-dibenzo [c , h] cromeno- 1 , 8-diol (150 mg, 0.57 mmol) , NCS (84 mg, 0.63 mmol) y THF (8 mi) durante 3 h a temperatura ambiente y durante 5 h a 60°C de acuerdo con el método B. La reacción se purificó por CLAR preparativa para proporcionar 35 mg del compuesto 2 -cloro y 10 mg del compuesto -cloro (27% global) . Compuesto 2-cloro: pf 181-182°C dec . ; ¾ RMN (300 MHz , DMSO-d6) : d 5.24 (2H, s) , 6.72 (1H, d, J = 2.3 Hz), 6.83 (1H, dd, J = 8.4 Hz, 2.4 Hz) , 7.40 (1H, d, J = 9.0 Hz) , 7.61 (1H, d, J = 9.0 Hz) , 7.71 (1H, d, J = 8.5 Hz) , 7.64 (1H, d, J = 8.9), 7.91 (1H, d, J = 9.0 Hz) , 9.77 (1H, s) , 10.01 (1H, s) ; HRMS Exacto: 297.03239 (M-H+) Encontrado: 297.03240 (0.02 ppm) ; Análisis para C17HnCl03 : Calculado: C: 68.35 H: 3.71 Encontrado: C: 67.66 H: 3.68. Compuesto 4-cloro: pf; H RM (300 MHz , DMSO-ds) : d 5.14 (2H, s) , 6.73 (1H, d, J = 2.4 Hz) , 6.77 (1H, d, J = 8.2 Hz), 6.84 (1H, dd, J = 8.5 Hz, 2.5 Hz), 7.31 (1H, d, J = 8.2 Hz) , 7.70 (1H, d, J = 8.5 Hz) , 7.87 (2H, appq) , 9.78 (1H, s) , 9.77 (1H, s) , 10.40 (1H, s) HRMS Exacto: 297.03239 (M-H+) Encontrado: 297.03236 (-0.11 ppm) ; Análisis para Ci7Hi:LC103 : Calculado: C: 68.35 H: 3.71 Encontrado: C: 66.12 H: 3.57. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Un compuesto de fórmula I que tiene la estructura
I caracterizado porque: Ri y R2 se seleccionan cada uno, independientemente, de hidrógeno, hidroxilo, alquilo de 1-6 átomos de carbono, alquenilo de 2-7 átomos de carbono, alquinilo de 2-7 átomos de carbono, alcoxi de 1-6 átomos de carbono o halógeno; en donde los radicales alquilo o alquenilo de Ri o R2 pueden sustituirse opcionalmente con hidroxilo, - CN, halógeno, trifluoroalquilo, trifluoroalcoxi , -N02, o fenilo; y con la condición de que al menos uno de Ri o R2 sea hidroxilo; R3, Re, R5, R6 y R7 son cada uno, independientemente, hidrógeno, alquilo de 1-6 átomos de carbono, halógeno, alcoxi de 1-6 átomos de carbono, -CN, alquenilo de 2-7 átomos de carbono, alquinilo de 2-7 átomos de carbono, - CHO, fenilo, o un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que tiene 1 a 4 heteroátomos seleccionados de 0, N o S en donde los radicales alquilo o alquenilo de R3, R4, R5/ R6 o R7 pueden sustituirse opcionalmente con hidroxilo, - CN, halógeno, trifluoroalquilo, trifluoroalcoxi , -N02 o fenilo; en donde el radical fenilo de R4 o R5 puede ser opcionalmente mono-, di- o tri-sustituido con un sustituyente , el mismo o diferente, seleccionado de alquilo de 1-6 átomos de carbono, alquenilo de 2-7 átomos de carbono, halógeno, hidroxilo, alcoxi de 1-6 átomos de carbono, -CN, -N02, amino, alquilamino de 1-6 átomos de carbono, dialquilamino de 1-6 átomos de carbono por grupo alquilo, tío, alquiltio de 1-6 átomos de carbono, alquilsulfinilo de 1-6 átomos de carbono, alquilsulfonilo de 1-6 átomos de carbono, alcoxicarbonilo de 2-7 átomos de carbono, alquilcarbonilo de 2-7 átomos de carbono o benzoilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. 2. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque Rs y R7 son cada uno, independientemente, hidrógeno o halógeno. 3. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, caracterizado porque
R6 es hidrógeno o flúor.
4. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque R y R5 son cada uno, independientemente, hidrógeno, alquilo de 1-6 átomos de carbono, alcoxi de 1-6 átomos de carbono, halógeno, alquenilo de 2-7 átomos de carbono, -CN, furilo o tienilo.
5. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque R4 no es hidrógeno .
6. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque R4 se selecciona de ciano, cloro, bromo, metilo, etilo, propilo, butilo, metoxi, vinilo, tien-2-ilo y tien-3-ilo.
7. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque R5 es hidrógeno o halógeno.
8. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque R2 y 3 son cada uno, independientemente, hidrógeno, halógeno o hidroxilo .
9. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque R2 es hidroxilo o halógeno.
10. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque R2 es hidroxi .
11. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, caracterizado porque R3 es hidrógeno o halógeno.
12. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, caracterizado porque Rx es hidrógeno, hidroxilo o halógeno.
13. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es uno de los siguientes : a) 6H-Dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol; b) 9-Fluoro-6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol ; c) 2, 8-Dihidroxi-6H-dibenzo [c,h] cromeno-12-carbonitrilo; d) 9-Fluoro-2 , 8-dihidroxi-6H-dibenzo [c, h] cromeno-12-carbonitrilo; e) l-Cloro-2, 8-dihidroxi-6H-dibenzo [c,h] cromeno-12-carbonitrilo; f ) l-Cloro-6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol ; g) 12-Bromo-6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol ; h) 12-Cloro-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2 , 8-diol ; i) 12-Bromo-9-fluoro-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol; j ) 12-Cloro-9-fluoro-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2 , 8-diol ; k) 12-Metoxi-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol; 1) ll-Cloro-12-metoxi-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol; m) 12-Metil-6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol ; n) 12-Vinil-6H-dibenzo [c,h] cromeno-2, 8-diol; o) 12-Etil -6H-dibenzo [c , h] cromeno-2 , 8 -diol ; p) 12-Tien-3-il-6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol ; q) 12 -Tien-2-il-6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol ; r) 12-Butil-6H-dibenzo [c, h] cromeno-2 , 8-diol ; s) 12 -Propil - 6H-dibenzo [c , h] cromeno-2 , 8 -diol ; t) 6H-dibenzo [c, h] cromeno- 1, 8-diol ; u) 12 -Cloro-6H-dibenzo [c , h] cromeno-1 , 8 -diol ; v) 12 -Bromo-6H-dibenzo [c, h] cromeno-1, 8-diol ; w) 1, 8-Dihidroxi-6H-dibenzo[c,h] cromeno- 12-carbonitrilo; x) 2-Cloro-6H-dibenzo [c,h] cromeno-1, 8-diol; y) 4 -Cloro-6H-dibenzo [c,h] cromeno-1, 8-diol; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
14. Un compuesto, caracterizado porque es 6H-Dibenzo [c,h] cromen- 8 -ol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
15. Un método para el tratamiento o inhibición de prostatitis o cistitis intersticial en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
16. Un método para el tratamiento o inhibición de enfermedad de intestino inflamatorio, enfermedad de Crohn, proctitis ulcerativa o colitis en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
17. Un método para el tratamiento o inhibición de hipertrofia prostética, leiomiomas uterinos, cáncer de mama, cáncer endometrial, síndrome de ovario poliquístico, pólipos endometriales , enfermedad de mama benigna, adenomicosis , cáncer de ovario, melanoma, cáncer de próstata, cáncer de colon, glioma o astioblastoma en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
18. Un método para disminuir los niveles de colesterol, triglicéridos, Lp(a) o LDL; inhibir o tratar hipercolesteremia; hiperlipidemia ; enfermedad cardiovascular; aterosclerosis ; hipertensión; enfermedad vascular periférica; restenosis o vasospasmo; e inhibir el daño de la pared vascular de los eventos celulares que conduce al daño vascular mediado inmune en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
19. Un método para proporcionar mejoramiento de cognición o neuroprotección; o tratar o inhibir demencias seniles, enfermedad de Alzheimer, declinación cognitiva, choque, ansiedad o trastornos neurodegenerativos en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
20. Un método para el tratamiento o inhibición de estados de enfermedades inducidas por radicales libres en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
21. Un método para el tratamiento o inhibición de atrofia vaginal o vulvar, vaginitis atrófica, sequedad vaginal, prurito, dispareunia, disuria, orinación frecuente, incontinencia urinaria, infecciones del tracto urinario en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
22. Un método para el tratamiento o inhibición de síntomas vasomotores en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad ,.5 con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
23. Un método para inhibir la concepción en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de 0 un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
24. Un método para tratar o inhibir artritis en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque 5 comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
25. Un método de conformidad con la reivindicación 0 24, caracterizado porque la artritis es artritis reumatoide, osteoartritis o espondiloartropatías .
26. Un método para tratar o inhibir hinchazón o erosión de articulaciones; o tratar o inhibir daño de articulaciones secundario a procedimientos artroscópicos o 5 quirúrgicos en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
27. Un método para tratar o inhibir psoriasis o dermatitis en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
28. Un método para tratar o inhibir isquemia, daño por reperfusión, asma, pleuritis, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico, uveitis, sepsis, choque hemorrágico, degeneración macular o diabetes de tipo II en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
29. Un método para tratar o inhibir endometriosis en un mamífero en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende proporcionar al mamífero una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
30. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto de fórmula I de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéutico.
31. Un proceso para preparar un compuesto de fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque comprende uno de los siguientes: a) des-alquilar un compuesto de fórmula II: en donde R es un grupo alquilo de 1 a 6 átomos de carbono y Ri, 2 R3/ R / 5Í R6 y 7 son como se definen en la reivindicación 1, para dar un compuesto de fórmula I; o b) des-acilar un compuesto de fórmula III: 1 en donde R' es un grupo acilo, por ejemplo, alcanoilo de 2-7 átomos de carbono tal como acetilo, Ru es Rx o un grupo aciloxi, por ejemplo, alcanoilo de 2-7 átomos de carbono tal como acetilo, R12 es R2 o un grupo aciloxi, por ejemplo, alcanoilo de 2-7 átomos de carbono tal como acetilo y R3, R4, R5, R6, R7 son como se definen en la reivindicación 1, para dar un compuesto de fórmula I; o c) hacer reaccionar un compuesto 12-bromo de fórmula IV: protegido conforme sea necesario, en donde Ri, R2, 3 Rs, ^6 y R7 son como se definen en la reivindicación 1, con un derivado reactivo de fórmula: R4-L por ejemplo, en donde L es un ácido borónico o derivado de butilestaño y donde R4 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 7 átomos de carbono o un anillo heterocí clico de 5 ó 6 miembros que tiene 1 a 4 heteroátomos seleccionados de 0, N o S; y retirar cualesquiera grupos protectores, para dar un compuesto correspondiente de fórmula (I); o d) halogenar un compuesto de fórmula I: I como se define en la reivindicación 1 protegido si es necesario, y en donde al menos uno de Ri, R2 , R3 , 4 y R5 es hidrógeno, con un agente de halogenación seguido si es necesario por desprotección, para dar un compuesto de fórmula I, en donde al menos uno de Ri, R2 , R3 y R4 es hidrógeno; o e) nitrilar un compuesto de fórmula I: I como se define en la reivindicación 1, protegido conforme sea necesario, y en donde R-j es bromo, con un agente de nitrilación, por ejemplo, cianuro de zinc, seguido si es necesario por desprotección, para dar un compuesto de fórmula I en donde R4 es ciano; o f) convertir un compuesto básico de fórmula I a una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o viceversa.