MXPA03010635A - Derivados de tri- y tetraazaacenaftileno como antagonistas del receptor de crf. - Google Patents

Abstract

Se describen antagonistas de receptor de CRF los cuales tienen utilidad en el tratamiento de diversos desordenes que incluyen el tratamiento de desordenes que manifiestan hipersecrecion de CRF en animales homeotermicos tales como apoplejia; los antagonistas receptores de CRF de esta invencion tienen la siguiente estructura de formula (I): (ver formula). que incluye estereoisomeros, precursores y sales farmaceuticamente aceptables de los mismos, R1, R2, R4, R5, R6, A, X e Y son como se definen en la presente; se proporcionan composiciones que contienen un antagonista de receptor de CRF combinado con un vehiculo farmaceuticamente aceptable, asi como metodos para uso de los mismos.

Description

DERIVADOS DE TRI- Y TETRAAZAACENAFTILENO COMO ANTAGONISTAS DEL RECEPTOR DE CRF CAMPO TECNICO Esta invención se relaciona generalmente con antagonistas receptores de factor de liberación de corticotropina (CRF) y con métodos para tratar desórdenes por administración de tales antagonistas a animales homeotérmicos en necesidad de los mismos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION El primer factor de liberación de corticotropina (CRF) se aisló de hipotálamos ovinos y se identificó como un péptido de 41 aminoácidos (Vale et al., Science 213? 394-1397, 1981 ). Posteriormente se aislaron secuencias de CRF humano y de rata y se determinó que son idénticos aunque con diferencias al CRF ovino en 7 de los 41 residuos aminoácidos (Rivier et al., Proc. Nati Acad. Sci. USA 80:4851 , 1983; Shibahara et al., EMBO J. 2:775, 1983). Se ha encontrado que CRF produce alteraciones profundas en la función de los sistemas endocrino, nervioso e inmunológico. Se considera que CRF es el principal regulador fisiológico de la liberación, basal y bajo estrés, de la hormona adenocorticotrópica (ACTH"), ß-endorfina y otros péptidos derivados de pro-opiomelanocortina ("POMC") de la adenohipófisis (Vale et ai., Science 213? 394-1397, 1981 ). Brevemente, se considera que CRF inicia sus efectos biológicos al unirse a un receptor en membrana plasmática el cual se ha encontrado que está distribuido en el cerebro (DeSouza et al., Science 224:1449-1451, 1984), hipófisis (DeSouza et al., Method Enzymol. 124:560, 1986; Wynn et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 110:602-608, 1983), suprarrenales (Udelsman et al., Nature 379:147-150, 1986) y bazo (Webster, E.L., and E.B. DeSouza, Endocrínology 722:609-617, 1988). El receptor CRF se acopla a una proteína que se une a GTP (Perrin et al., Endocrínology 8:1171-1 179, 1986) .la cual media el incremento, estimulado por CRF, en la producción ¡ntracelular de AMPc (Bilezikjian, L.M., y W.W. Vale, Endocrínology 3:657-662, 1983). El receptor para CRF se ha clonado de rata (Perrin et al., Endo 733(6):3058-3061 , 1993) y de cerebro humano (Chen et al., PNAS 90(19):8967-8971 , 1993; Vita et al., FEBS 335(1):1-5, 1993). Este receptor es una proteína de 415 aminoácidos constituida de siete dominios que abarcan la membrana. Una comparación de la identidad entre las secuencias de rata y de humano muestra un alto grado de homología (97%), a nivel de aminoácidos. Además de su papel en la estimulación de la producción de ACTH y POMC, el CRF se considera que coordina también muchas otras respuestas endocrinas autónomas y de comportamiento a estrés, y puede estar involucrado en la patofisiología de desórdenes afectivos. Además, se considera que CRF es un intermediario clave en la comunicación entre los sistemas inmunológico, nervioso central, endocrino y cardiovascular (Crofford et al., J. Clin. Invest. 90:2555-2564, 1992; Sapolsky et al., Science 238:522-524, 1987; Tilders et al., Regul. Peptides 5:77-84, 1982). En general, CRF parece ser uno de los neurotransmisores fundamentales del sistema nervioso central y juega un papel básico en la integración de la respuesta total del cuerpo al estrés. La administración de CRF directamente al cerebro induce respuestas de comportamiento, sicológicas y endocrinas idénticas a las observadas para un mamífero expuesto a un ambiente de tensión o estrés. Por ejemplo, la inyección intracerebroventricular de CRF resulta en activación en el comportamiento (Sutton et al., Nature 297:331 , 1982), activación persistente del electroencefalograma (Ehlers et al., Brain Res. 278:332, 1983), estimulación de la vía simpáticosuprarrenomedular (Brown et al., Endocrinology 110:928, 1982), un incremento en la frecuencia cardíaca y la presión sanguínea (Fisher et al., Endocrinology 110:2222, 1982), un incremento en el consumo de oxígeno (Brown et al., Life Sciences 30:207, 1982), alteración de la actividad gastrointestinal (Williams et al., Am. J. Physioi. 253:G582, 1987), supresión del consumo de alimentos (Levine et ai., Neurophamacology 22:337, 1983), modificación del comportamiento sexual (Sirinathsinghji et al., Nature 305:232, 1983), y deterioro de la función inmunológica (Irwin et al., Am. J. Physioi. 255:R744, 1988). Además, los datos clínicos sugieren que se puede secretar en exceso CRF en el cerebro cuando se presenta depresión, desórdenes relacionados con la ansiedad y anorexia nerviosa (DeSouza, Ann. Reports in Med. Chem. 25:215-223, 1990). En consecuencia, los datos clínicos sugieren que los antagonistas receptores de CRF pueden representar medicamentos antidepresores y/o ansiolíticos novedosos que pueden ser útiles en el tratamiento de desórdenes neuropiquiátricos que manifiesten hipersecreción de CRF. Los primeros antagonistas receptores de CRF fueron péptidos (véase, por ejemplo, Rivier et al., Patente de los E.U.A. No. 4,605,642; Rivier et al., Science 224:889, 1984). Aunque estos péptidos establecieron que los antagonistas receptores de CRF pueden atenuar las respuestas farmacológicas a CRF, los antagonistas del receptor de CRF peptídicos adolecen de los inconvenientes habituales de las sustancias terapéuticas peptídicas que incluyen una falta de estabilidad y actividad oral limitada. Más recientemente se han reportado moléculas pequeñas antagonistas de receptor de CRF. Por ejemplo, se han reportado derivados de 4-tio-5-oxo-3-pirazoiina sustituidos (Abreu et al., Patente de E.U.A. No. 5,063,245) y derivados de 2-aminotiazol sustituidos (Courtemanche et al., Patente Australiana No. AU-A-41399/93) como antagonistas receptores de CRF. Se ha encontrado que estos derivados particulares son eficaces para inhibir la unión de CRF a su receptor en un intervalo de 1-10 pm y un intervalo de 0.1-10 pm, respectivamente. Debido a la importancia fisiológica de CRF, permanece como un objetivo deseable el desarrollo de moléculas pequeñas biológicamente activas que tengan actividad significativa de unión a receptor de CRF y las cuales puedan antagonizar con el receptor de CRF. Tales antagonistas de receptor de CRF pueden ser útiles en el tratamiento de condiciones endocrinas, psiquiátricas y neurológicas o enfermedades que incluyen desórdenes relacionados con el estrés en general. Aunque se han hecho estudios importantes hacia la obtención de la regulación de CRF mediante la administración de antagonistas de receptor de CRF, aún permanece la necesidad en la técnica de moléculas pequeñas antagonistas receptores de CRF. También existe la necesidad de composiciones farmacéuticas que contengan tales antagonistas receptores de CRF así como métodos que se relacionen con el uso de los mismos para tratar, por ejemplo, desórdenes relacionados con el estrés. La presente invención satisface estas necesidades y proporciona otras ventajas relacionadas.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Brevemente, esta invención se relaciona generalmente con antagonistas receptores de CRF, y de manera más específica con antagonistas receptores de CRF que tienen la siguiente estructura general (I): (I) que incluye estereoisómeros, precursores (prodrogas o promedicamentos) y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R-i , R2, R4, R5, R6, A, X e Y son como se definen en lo siguiente. Los antagonistas receptores de CRF de esta invención tienen utilidad sobre una amplia gama de aplicaciones terapéuticas y se pueden utilizar para tratar diversos desórdenes o enfermedades que incluyen desórdenes relacionados con estrés. Tales métodos incluyen la administración de una cantidad eficaz de un antagonista receptor de CRF de esta invención, preferiblemente en forma de una composición farmacéutica a un animal que la necesite. En consecuencia, en otra modalidad, se describen composiciones farmacéuticas que contienen uno o más antagonistas de receptor de CRF de esta invención combinados con un vehículo y/o diluyente farmacéuticamente aceptable. Estos y otros aspectos de la invención serán evidentes ante la referencia a la siguiente descripción detallada. Para este fin, las diversas referencias que se establecen en la presente, las cuales describen con mayor detalle ciertos procedimientos, compuestos y/o composiciones se incorporan en la presente como referencia en su totalidad.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION La presente invención se relaciona generalmente con compuestos útiles como antagonistas del receptor de factor de liberación de corticotropina (CRF). En una primera modalidad, los antagonistas de receptor de CRF de esta invención tienen la siguiente estructura (I): (i) que incluye estereoisómeros, precursores y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en los que: A es un enlace o C=(Z); X es nitrógeno o CR3; Y es .N=, -N(R7)-, -C(R8)= o -O-; z es O, S o NR9; R-i es alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido; R2 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, halo, ciano o haloalquilo; R3 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, halo o haloalquilo; f¾ es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, C(0)Ri, arilo, arilo sustituido, eterociclo o heterociclo sustituido; R5 es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioaiquilo, C(0)R , NR10Rn o ciano; R5 es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioaiquilo, C(0)Ri, NR-10R11 o ciano; R7 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido C(0)Ri, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido; R8 es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioaiquilo, C(0)alquilo, NR10Rn o ciano; R9 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido; y R-io y R11 son iguales o diferentes y son independientemente hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido. Como se utilizan en la presente, los términos anteriores tienen los siguientes significados: El término "alquilo" significa un hidrocarburo alifático de cadena recta o ramificada, no cíclico o cíclico, insaturado o saturado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, mientras que el término "alquilo inferior" tiene el mismo significado que alquilo, pero contiene de 1 a 6 átomos de carbono. Las cadenas alquilo rectas saturadas representativas incluyen metilo, etilo, n-propilo, n-butilo, n-pentilo, n-hexilo y similares; mientras que los grupos alquilo ramificados saturados incluyen isopropilo, sec-butilo, isobutilo, terbutilo, isopentilo y similares. Los grupos alquilo cíclicos saturados representativos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, -CH2ciclopropilo, -CH2ciclobutilo, -CH2ciclopentilo, -CH2ciclohexilo y similares; mientras que los grupos alquilo cíclicos insaturados incluyen ciclopentenilo y ciclohexenilo y similares. Los grupos alquilo cíclicos también se denominan como "anillos homocíclicos" e incluyen anillos di y poli-homocíclicos tales como decalina y adamantilo. Los grupos alquilo insaturados contienen por lo menos un enlace doble o triple entre átomos de carbono adyacentes (denominados como "alquenilo" o "alquinilo", respectivamente). Los grupos a!quenilo de cadena recta y ramificada representativos incluyen etilenilo, propilenilo, 1-butenilo, 2-butenilo, isobutilenilo, 1-pentilo, 2-pentenilo, 3-metil-1-butenilo, 2-metil-2-butenilo, 2,3-dimetil-2-butenilo y similares; mientras que los alquinilos de cadena recta y ramificada representativos incluyen acetilenilo, propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo, 1-pentinilo, 2-pentinilo, 3-metil-1 -butinüo y similares. El término "arilo" significa una porción carbocíclica aromática tal como fenilo o naftilo. El término "arilalquilo" significa un alquilo que tiene por lo menos un alquilo con átomos de hidrógeno sustituidos con una porción arilo, tal como bencilo, -CH2-(1- ó 2-naftilo), -(CH2)2fenilo, -(CH2)3fen¡lo, -CH(fenilo)2 y similares. El término "heteroarilo" significa un anillo heterociclo aromático de 5 a 10 miembros y que tienen un heteroátomo que se selecciona de nitrógeno, oxígeno y azufre, y que contiene por lo menos 1 átomo de carbono que incluye sistemas de anillos monocíclicos y bicíclicos. Los heteroarilos representativos incluyen (pero no se limitan a) furilo, benzofuranilo, tiofeniio, benzotiofenilo, pirrolilo, indolilo, isoindolilo, azaindolilo, piridilo, quinolinilo, isoquinolinilo, oxazolilo, isooxazolilo, benzoxazolilo, pirazolilo, imidazolilo, bencimidazolilo, tiazolilo, benzotiazolilo, isotiazolilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, triazinilo, cinolinilo, ftalacinilo y quinazolinilo. El término "heteroarilalquilo" significa un alquilo que tiene por lo menos un alquilo con átomos de hidrógeno sustituidos con una porción heteroarilo tal como -CH2piridinilo, -C bpirimidinilo y similares. El término "heterociclo" (también denominado en la presente como un "anillo heterociclo") significa un anillo heterociclo monociclo de 5 a 7 miembros o policíclico de 7 a 14 miembros el cual está saturado, insaturado o es aromático, y el cual contiene de 1 a 4 heteroátomos que se seleccionan independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre, y en donde los heteroátomos de nitrógeno y azufre opcionalmente pueden estar oxidados y el heteroátomo de nitrógeno opcionalmente puede estar cuaternizado, incluyendo anillos bicíclicos en los cuales cualquiera de los heterociclos anteriores está fusionado a un anillo de benceno así como anillos heterocíclicos tricíclicos (y superiores). El heterociclo puede estar unido vía cualquier heteroátomo o átomo de carbono. Los heterociclos incluyen heteroarilos como se define en lo anterior. Por lo tanto, además de los heteroarilos aromáticos incluidos en lo anterior, los heterociclos también incluyen (pero no se limitan a) morfolinilo, pirrolidinonilo, pirrolidinilo, piperidinilo, hidantoinilo, valerolactamilo, oxiranilo, oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidiniio, tetrahidrotiofenilo, tetrahidrotiopiranilo, tetrahidropirimidiniio, tetrahidrotiofenilo, tetrahidrotiopiranilo y similares. El término "heterocicloalquilo" significa un alquilo que tiene por lo menos un alquilo con átomos de hidrógeno sustituidos con un heterociclo, tal como -CH2morfolinilo y similares. El término "cicloalquilo" significa un anillo carbocíclico saturado o insaturado (pero no aromático) que contiene 3 a 8 átomos de carbono, tal como ciclopentano, ciclohexano, cicloheptano, ciclohexeno y similares. El término "cicloalquilcicloalquilo" significa un anillo cicloalquilo fusionado a un anillo cicloalquilo, tal como decalina. El término "cicloalquilarilo" significa un anillo cicloalquilo fusionado a un arilo, tal como tetralina. El término "cicloalquilheterociclo" significa un anillo cicloalquilo fusionado a un anillo heterociclo. El término "sustituido" como se utiliza en la presente, significa cualquiera de los grupos anteriores (por ejemplo alquilo, arilo, arialquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterociclo, heterocicloalquilo, etc.), en donde por lo menos un átomo de hidrógeno está sustituido con un sustituyente. En el caso de un sustituyente ceto ("-C(=0)-") se reemplazan o sustituyen dos átomos de hidrógeno. Cuando se sustituyen, los "sustituyentes" dentro del contexto de esta invención incluyen halógeno, hidroxi, ciano, nitro, amino, alquilamino, dialquilamino, alquilo, alcoxi, alquiltio, haloalquilo, arilo, arilo sustituido, arilaiquilo, arilalquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heteroarilalquilo, heteroarilalquilo sustituido, heterociclo, heterociclo sustituido, heterocicloalquilo, heterocicloalquilo sustituido, -NRaRb, -NRaC(=0)Rb, -C(=0)NRaRb, -OC(=0)NRaRb, -SH, -SRa, -SORa, -S(=0)2Ra, -0S(=O)2Ra, -S(=0)2ORa, en donde Ra y Rb son iguales o diferentes e independientemente es un hidrógeno, alquilo, haloalquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, arilalquilo, arilalquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heteroarilalquilo, heteroarilalquilo sustituido, heterociclo, heterociclo sustituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo sustituido. El término "halógeno" significa fluoro, cloro, bromo y yodo. El término "haloalquilo" significa un alquilo que tiene por lo menos un átomo de hidrógeno sustituido con halógeno, tal como trifluorometilo y similar. El término "alcoxi" significa una porción alquilo unida a través de un puente de oxígeno (es decir, -O-alquilo) tal como metoxi, etoxi y similares.

El término "alquiltio" significa una porción alquilo unida a través de un puente de azufre (es decir, -S-alquilo) tal como metiltio, etiltio y similares. El término "alquilsulfonilo" significa una porción alquilo unida a través de un puente sulfonilo (es decir -S02-alquilo) tal como metiisulfonilo, etilsulfonilo y similares. Los términos "alquilamino" y "dialquilamino" significan una o dos porciones alquilo unidas a través de un puente de nitrógeno (es decir, -N-alquilo) tal como metilamino, etilamino, dimetilamino, dietilamino y similares. El término "hidroxialquilo" significa un alquilo sustituido con por lo menos un grupo hidroxilo. El término "mono- o di(cicloalquil)metilo" representa un grupo metilo sustituido con uno o dos grupos cicioalquilo, tal como ciclopropilmetilo, diciclopropilmetilo y similares. El término "alquilcarbonilalquilo" representa un alquilo sustituido con un grupo -C(=0)alquilo. El término "alquilcarboniloxialquilo" representa un alquilo sustituido con un grupo -C(=0)alquilo o un grupo -OC(=0)alquilo. El término "alquiloxialquilo" representa un alquilo sustituido con un grupo -O-alquilo. El término "alquiltioalquilo" representa un alquilo sustituido con un grupo -S-alquilo. El término "mono- o di(alquil)amino" representa un amino sustituido con un alquilo o con dos alquilos, respectivamente.

El término "mono- o di(alquil)aminoalquilo" representa un alquilo sustituido con un mono- o di(alquil)amino. En base en los sustituyentes A, X e Y, los compuestos representativos de esta invención incluyen las siguientes estructuras (II) a (XII): (XI) (Xla) (Xlb) (XII) en modalidades más específicas de esta invención, los grupos R-i representativos de esta invención incluyen (pero no se limitan a) 2,4-diclorofenilo, 2,4-dimetilfenilo, 2-cloro-4-metilfenilo, 2-metil-4-clorofenilo, 2,4,6-trimetilfenilo, 2-cloro-4-metoxifenilo, 2-metil-4-metoxifenilo, 2,4-dimetoxifenilo, 2-trifluorometil-4-clorofenilo, 3-metoxi-4-clorofenílo, 2,5-dimetoxi-4-clorofenilo, 2-metoxi-4-triclorometilfenilo, 2-metoxi-4-isopropilfenilo, 2-metoxi-4-trifluorometilfenilo, 2-metoxi-4-isopropilfenilo, 2-metoxi-4-metilfenilo; 4-metil-6-dimetilaminopiridin-3-ilo, 4-dimetilamino-6-metilpiridin-3-ilo, 6-dimetilaminopiridin-3-ilo y 4-dimetilam¡nopiridin-3-ilo. De manera similar, los grupos f¾ representativos incluyen hidrógeno y alquilo tal como metilo y etilo, mientras que los grupos R3 representativos incluyen hidrógeno, halógeno tal como cloro, flúor y bromo, alquilo tal como metilo y etilo, o haloalquilo tal como trifluorometilo.

Los compuestos preferidos de acuerdo con la invención son: 7-metil-1-(1-propilbutil)-5-[4-(1 ,1 ,2-trifluoroetil)-2-tr¡fluorometilfenil]-1 ,2,2a,3,4,5-hexah!dro-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftileno (5-1-1 ); 3.metil-4-[7-metil-1-(1-propilbutil)-3,4-dihidro-1 H-1 ,5,6,8-tetraazaacenaft¡len-5-il]-benzonitrilo (5-1 -2); 4- [1 -(1-etilpropil)-7-metil-3,4-dihidro-1 H-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftilen-5-il]-3-metilbenzonitr¡lo (5-1-3); 3-cloro-4-[7-met¡l-1-(1-propilbutil)-3,4-dih¡dro-1 H-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftilen-5-il]-benzonitrilo (5-1 -4); 3-cloro-4-[1-(1-etilpropil)-7-metil-3,4-dihidro-1 H-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftilen-5-il]-benzonitrilo (5-1-5); 5- (2,4-bistrifluorometilfenil)-1 -(1-etilpropil)-7-metil-1 ,3,4,5-tetrahidro-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftileno (5-1-6); 5-(2,4-bistrifluorometilfenil)-7-metil-1 -(1 -propilbut¡l)-1 ,3,4,5-tetrahidro-1 ,5,6,-triaazaacenaftileno (6-1-1 ). Los compuestos de la presente invención se pueden utilizar generalmente como la base libre. De manera alternativa, los compuestos de esta invención se pueden utilizar en forma de sales de adición de ácido. Las sales de adición de ácido de los compuestos amino de base libre de la presente invención se pueden preparar por métodos bien conocidos en la técnica, y se pueden formar a partir de ácidos orgánicos e inorgánicos. Los ácidos orgánicos adecuados incluyen los ácidos maleico, málico, fumárico, benzoico, ascórbico, succínico, metansulfónico, p- toluensulfónico, acético, oxálico, propiónico, tartárico, salicílico, cítrico, glucónico, láctico, mandélico, cinnámico, aspártico, esteárico, palmítico, glicólico, glutámico y bencensulfónico. Los ácidos inorgánicos adecuados incluyen a los ácidos clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico y nítrico. De esta manera, el término "sal farmacéuticamente aceptable" de estructura (I) se pretende que abarque cualquiera y la totalidad de las formas de sal aceptables. En general, los compuestos de estructura (I) se pueden elaborar de acuerdo con las técnicas de síntesis orgánica conocida por los expertos en este campo así como por los métodos representativos que se establecen en los ejemplos. En particular, los compuestos de fórmula (Xla) se pueden preparar de acuerdo con el siguiente Esquema 1 , a partir de compuestos (XIII) en los cuales el grupo hidroxi está protegido convenientemente con un grupo protector adecuado (Pg) cuya preparación se describe en los siguientes ejemplos: ESQUEMA 1 (XVI) (XVII) (XVIII) en el cual: la etapa a establece una separación oxidativa de un enlace doble, por ejemplo por ozonización seguido por tratamiento reductor; la etapa b indica la conversión del grupo hidroxi en un grupo saliente, tal como mesilato; la etapa c indica la alquilación con un derivado de anilina adecuado R1 H2 en condiciones básicas fuertes, seguido por una ciclización intramolecular "in situ"; la etapa d indica la desprotección del grupo protector hidroxi (por ejemplo Et3N - 3HF en DMR a temperatura ambiente (ta.) durante la noche); la etapa e indica la conversión del grupo hidroxi en un grupo saliente tal como mesilato; la etapa f indica la reacción con una amina adecuada R NH2 por calentamiento; la etapa g indica la deshidrogenación por oxidación con el agente oxidante adecuado (por ejemplo DDQ). Los compuestos iniciales (XIII) se pueden preparar convenientemente de acuerdo con el siguiente Esquema 2.

(XXIII) (XXIV) (XIII) en el cual la etapa a' indica la reacción con una amidina adecuada y ciclización intramolecular en condiciones básicas (es decir, MeONa, tolueno en reflujo); la etapa b' indica la cloración (de una manera similar a la descrita en Wayne G. C. et al., J. Prakt. Chem., (2000), 342(5), 504-7); la etapa c' indica la alilación con yoduro de alilo a 0°C en condiciones básicas (por ejemplo LiHMDS); la etapa d' indica la reducción del grupo éster con un agente reductor adecuado, por ejemplo DIBA1-H, en condiciones habituales (CH2CI2, 0°C hasta la ta.); la etapa e' indica la desprotección del grupo hidroxi, preferiblemente con t-BuPh2SiCI (TBP) en DMF con DMAP como catalizador (0°C hasta la ta.). Los compuestos de fórmula (XI b) se pueden preparar convenientemente de acuerdo con el siguiente Esquema 3, a partir de los compuestos de fórmula (XXV): ESQUEMA 3 (XXV) (XXVI) (XXVII) (XXVIII) (XXXII) (XI b) en el cual: la etapa a" indica la homologación de un átomo de carbono por reacción de Wittig con el iluro adecuado en presencia de una base orgánica como n-BuL¡. La reacción se lleva a cabo en un solvente aprótico tal como acetonitrilo o un éter tal como tetrahidrofurano; la etapa b" indica la hidrólisis habitual en condiciones ácidas (por ejemplo HCI en THF) del enoléter (XXVI); la etapa c" indica la reducción del grupo aldehido por un agente reductor adecuado (por ejemplo NaBH4); la etapa d" indica la desprotección del grupo hidroxi, preferiblemente con t-BuMe2SiCl (TBS), en DMF con ¡midazol y DMAP como catalizador (de 0°C hasta ta.); la etapa e" indica la reacción de Buchwald asistida por microondas con un derivado de anilina adecuado F^NI^; la etapa f" indica la desprotección del grupo protector hidroxi (por ejemplo Et3N - 3HF en DMF a t.a. durante la noche); la etapa g" indica la conversión del grupo hidroxi en un grupo saliente, tal como mesilato; la etapa h" indica la ciclización intramolecular en condiciones básicas. De manera alternativa, los compuestos finales (Xlb) se pueden obtener a partir de los compuestos (XXXI) por ciclización intramolecular, por ejemplo por mesilación del grupo hidroxi en condiciones básicas (es decir Et3N) seguido por ciclización in situ (etapa ¡"). En una modalidad preferida de la invención, los compuestos (Xla) y (Xlb), R3, R5, R6 y R8 son hidrógeno. Los ejemplos de un grupo protector hidroxi adecuado incluye trihidrocarbilsililéteres tales como trimetilsilil o terbutildimetilsililéter. Los grupos protectores de hidroxilo se pueden separar por procedimientos estándar bien conocidos (tales como los descritos en Protective Groups in Organic Chemistry, páginas 46-119, editado por J F W McOmie (Plenum Press, 1973)). Por ejemplo, cuando Rb es un grupo terbutildimetilsililo, se puede separar por tratamiento con trifluorhidrato de trietilamina. La presente invención también incluye compuestos marcados isotópicamente, los cuales son idénticos a los mencionados en las fórmulas I y siguientes, pero por el hecho de que uno o más átomos estén sustituidos por un átomo que tiene una masa atómica o un número de masa diferente al de la masa atómica o el número de masa encontrado habitualmente en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos (núclidos) que se pueden incorporar en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor, yodo y cloro tales como 3H, 11C, 4C, 8F, 3l y 25l. Los compuestos de la presente invención y sales farmacéuticamente aceptables de tales compuestos que contienen los isótopos mencionados antes y/u otros isótopos de otros átomos, están dentro del alcance de la presente invención. Los compuestos marcados isotómicamente de la presente invención, por ejemplo, aquellos en los cuales se han incorporado isótopos radioactivos tales como 3H, 14C, son útiles en ensayos para determinar distribución en tejido del medicamento y/o sustrato. Los isótopos tritiados, es decir, 3H y con carbono 14, es decir, 14C son preferidos particularmente por su facilidad de preparación y susceptibilidad a detección. Los isótopos 11C y 8F son útiles particularmente en PET (tomografía de emisión de positrones) y 125l es útil particularmente en SPECT (tomografía computarizada de emisión de fotones única), todos útiles en la formación de imágenes del cerebro. Además, la sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio, es decir 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas que resultan de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo una vida media in vivo aumentada o requerimientos de dosificación reducidos, y por lo tanto, se pueden preferir en algunas circunstancias. Los compuestos marcados isotópicamente de fórmula I y siguientes de esta invención se pueden preparar generalmente al llevar a cabo los procedimientos descritos en los esquemas y/o en los ejemplos siguientes, al sustituir un reactivo marcado isotópicamente, disponible fácilmente, por un reactivo no marcado isotópicamente. Se puede determinar la eficacia de un compuesto como un antagonista del receptor de CRF por medio de diversos métodos de ensayo. Los antagonistas de CRF adecuados de esta invención son capaces de inhibir la unión específica de CRF a su receptor y antagonizar actividades relacionadas con CRF. Se puede realizar un análisis de un compuesto de estructura (I) para determinar su actividad como un antagonista de CRF por uno o más ensayos aceptados generalmente para este propósito que incluyen (pero que no se limitan a) los ensayos descritos por DeSouza et al (J. Neuroscience 7.88, 1987) y Battaglia et al. (Synapse 1:572, 1987). Como se menciona en lo anterior, los antagonistas de CRF adecuados incluyen compuestos que demuestran afinidad por el receptor de CRF. La afinidad por el receptor de CRF se puede determinar por estudios de unión que miden la capacidad de un compuesto para inhibir la unión de CRF radio marcado (por ejemplo [125l]tirosina-CFR) a su receptor (por ejemplo receptores preparados a partir de membranas de corteza cerebral de rata). El ensayo de unión de radioligando descrito por DeSouza et al. (supra, 1987) proporciona un ensayo en donde se determina la afinidad del compuesto por el receptor de CRF. Tal actividad típicamente se calcula a partir de la CI5o como la concentración de un compuesto necesaria para desplazar 50% del ligando radiomarcado del receptor y se reporta como un valor "K¡" calculado por la siguiente ecuación: K _ C/50 '' 1+ L/KD , en donde L = radioligando y KD = afinidad del radioligando para el receptor (Cheng and Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22:3099, 1973).

Además de inhibir la unión del receptor de CRF, se puede establecer la actividad antagonista del receptor de CRF de un compuesto por la capacidad del compuesto para antagonizar una actividad relacionada con CRF. Por ejemplo, se sabe que CRF estimula varios procesos bioquímicos que incluyen actividad de adenilato ciclasa. Por lo tanto los compuestos pueden ser evaluados como antagonistas de CRF por su capacidad para antagonizar la actividad de adenilato ciclasa estimulada por CRF, por ejemplo, medición de las concentraciones de AMPc. El ensayo de actividad de adenilato ciclasa estimulado por CRF descrito por Battaglia et al. (supra, 1987) proporciona un ensayo para determinar la capacidad de un compuesto para antagonizar la actividad de CRF. En consecuencia, se puede determinar la actividad de un antagonista de receptor de CRF por técnicas de ensayo que generalmente incluyen un ensayo de unión inicial (tal como el descrito por DeSouza {supra, 1987)) seguido por un protocolo de determinación sistemática de AMPc (tal como el descrito por Battaglia (supra, 1987)). Con referencia a las afinidades de unión al receptor de CRF, los antagonistas del receptor de CRF de esta invención tienen una K¡ menor de 10 µ?. En una modalidad preferida de esta invención, un antagonista de receptor de CRF tiene una K¡ menor de 1 µ? y de manera más preferible menor de 0.25 µ? (es decir, 250 nM). Como se establece con mayor detalle en lo siguiente, se pueden realizar ensayos respecto a los valores K¡ de los compuestos representativos de esta invención por ios métodos que se establecen en el ejemplo 7. Los antagonistas de receptor de CRF de la presente invención demuestran actividad en el sitio de receptor de CRF y se pueden utilizar como agentes terapéuticos para el tratamiento de una amplia gama de desórdenes o enfermedades que incluyen desórdenes o enfermedades endocrinas, psiquiátricas y neurológicas. De manera más específica, los antagonistas de receptor de CRF de la presente invención pueden ser útiles para tratar condiciones fisiológicas o desórdenes que surgen de la hipersecreción de CRF. Debido a que se considera que CRF es un neurotransmisor fundamental que activa y coordina las respuestas endocrinas, de comportamiento y automática al estrés, los antagonistas del receptor de CRF de la presente invención se pueden utilizar para tratar desórdenes neuropsiquiátricos. Los desórdenes neuropsiquiátricos susceptibles a tratamiento por los antagonistas de receptor de CRF de esta invención incluyen desórdenes efectivos tales como depresión; desórdenes relacionados con la ansiedad tales como desorden de ansiedad generalizada, desorden de pánico, desorden obsesivo-compulsivo, agresión anormal, anormalidades cardiovasculares tales como angina inestable e hipertensión reactiva; y desórdenes en la alimentación tales como anorexia nerviosa, bulimia y síndrome de intestino irritable (IBS). Los antagonistas de CRF también pueden ser útiles para tratar supresión inmunológica inducida por estrés relacionada con diversos estados de enfermedad así como apoplejía. Otros usos de los antagonistas de CRF de esta invención incluyen el tratamiento de condiciones inflamatorias (tales como artritis reumatoide, uveítis, asma, enfermedad de intestino inflamatorio (IBD) y motilidad gastrointestinal), enfermedad de Cushing, espasmos infantiles, epilepsia y otros ataques apopléjicos tanto en niños como en adultos, y diversos casos de abuso y supresión de sustancias de abuso (incluyendo alcoholismo). En otra modalidad de la invención se describen composiciones farmacéuticas que contienen uno o más antagonistas receptores de CRF. Para los propósitos de administración, los compuestos de la presente invención se pueden formular como composiciones farmacéuticas. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención comprenden un antagonista receptor de CRF de la presente invención (es decir, un compuesto de la estructura (I)) y un vehículo y/o diluyente farmacéuticamente aceptable.

El antagonista receptor de CRF está presente en la composición en una cantidad que es eficaz para tratar un desorden particular -esto es, en una cantidad suficiente para obtener actividad antagonista de receptor de CRF y preferiblemente con toxicidad aceptable para el paciente. Preferiblemente, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden incluir un antagonista receptor de CRF en una cantidad de 0.1 mg a 250 mg por dosificación, en base en la vía de administración, y de manera más preferible de 1 mg a 60 mg. Las concentraciones apropiadas y las dosificaciones se pueden determinar fácilmente por una persona experta en la técnica. El vehículo y/o los diluyentes farmacéuticamente aceptables son materia conocida para los expertos en la técnica. Para composiciones formuladas como soluciones líquidas, los vehículos y/o diluyentes aceptables incluyen solución salina y agua estéril y opcionalmente pueden incluir antioxidantes, amortiguadores, bacterioestáticos u otros aditivos comunes. Las composiciones también se pueden formular como pildoras, cápsulas, gránulos o tabletas (comprimidos) que contiene, además de un antagonista de receptor de CRF, diluyentes, agentes dispersantes y tensioactivos, aglutinantes y lubricantes. Un experto en esta técnica puede formular adicionalmente el antagonista receptor de CRF de una manera apropiada, de acuerdo con las prácticas aceptadas, tales como las descritas en Remington's Pharmaceutical Sciences, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA 1990).

Además, también se incluyen dentro del contexto de esta invención a los precursores (profármacos o promedicamentos). Los precursores son cualquier vehículo unido covalentemente que libera un compuesto de estructura (I) in vivo cuando tal precursor se administra a un paciente. Los precursores generalmente se preparan al modificar grupos funcionales de manera tal que la modificación se separa, ya sea por manipulación sistemática o bien in vivo, lo que genera el compuesto original. Con respecto a los estereoisómeros, los compuestos de estructura (I) pueden tener centros quirales y pueden presentarse como racematos, mezclas racémicas y como enantiómeros o diastereoisómeros individuales. Se incluyen dentro de la presente invención la totalidad de tales formas isoméricas, que incluyen las mezclas de las mismas. Además, algunas de las formas cristalinas de los compuestos de estructura (I) pueden existir como polimorfos, los cuales se incluyen en la presente invención. Además, algunos de los compuestos de estructura (I) también pueden formar solvatos con agua u otros solventes orgánicos. Tales solvatos se incluyen similarmente dentro del alcance de esta invención. En otra modalidad, la presente invención proporciona un método para tratar diversos desórdenes o enfermedades que incluyen desórdenes o enfermedades endocrinas, psiquiátricas y neurológicas. Tales métodos incluyen la administración de un compuesto de la presente invención a un animal homeotérmico en una cantidad suficiente para tratar el desorden o la enfermedad. Tales métodos incluyen la administración sistémica de un antagonista receptor de CRF de esta invención, preferiblemente en forma de una composición farmacéutica. Como se utiliza en la presente, la administración sistémica incluye métodos de administración orales y parenterales. Para administración oral las composiciones farmacéuticas adecuadas de los antagonistas de receptor de CRF incluyen polvos, granulos, pildoras, tabletas y cápsulas así como líquidos, jarabes, suspensiones y emulsiones. Estas composiciones también pueden incluir saborizantes, conservadores, agentes que mejoren la suspensión, espesantes y emulsificantes así como otros aditivos farmacéuticamente aceptables. Para administración parenteral, los compuestos de la presente invención se pueden preparar en soluciones de inyección acuosa que pueden contener, además del antagonista de receptor de CRF, amortiguadores, antioxidantes, bacterioestáticos y otros aditivos utilizados habitualmente en tales soluciones. Como se menciona en lo anterior, la administración de un compuesto de la presente invención se puede utilizar para tratar una amplia variedad de desórdenes o enfermedades. En particular, los compuestos de la presente invención se pueden administrar a un animal homeotérmico para el tratamiento de depresión, desorden de ansiedad, desorden de pánico, desorden obsesivo-compulsivo, agresión anormal, angina inestable, hipertensión reactiva, anorexia nerviosa, bulimia, síndrome de intestino irritable (IBS), enfermedad de intestino inflamatorio (IBD), supresión inmunológica inducida por estrés, apoplejía, inflamación, enfermedad de Cushing, espasmos infantiles, epilepsia y abuso de sustancias o supresión (abstinencia). Los siguientes ejemplos se proporcionan con propósitos de ilustración y no como una limitación.

EJEMPLOS Los antagonistas de receptor de CRF de esta invención se pueden preparar por los métodos descritos en los ejemplos 1 a 6. El ejemplo 7 presenta un método para determinar la actividad de unión de receptor (K¡) y el ejemplo 8 describe un ensayo para realizar una detección sistemática de compuestos de esta invención para determinar actividad de adenilato ciclasa estimulada por CRF. En los intermediarios y los ejemplos, a menos que se indique de otra manera: Las temperaturas de fusión (p.f.) se determinan en un aparato Gallenkamp m.p. y se presentan sin corrección. Todas las temperaturas se espesan como °C. Se miden los espectros infrarrojos en un instrumento FT-IR. Los espectros de resonancia magnética del protón (RMN 1H) se registran a 400 MHz, los desplazamientos químicos se reportan en ppm campo abajo (d) a partir de Me Si utilizado como estándar interno, y se asignan como singuletes (s), dobletes (d) doblete de dobletes (dd), tripletes (t), cuartetes (c) o multipletes (m). La cromatografía en columna se lleva a cabo sobre gel de sílice (Merck AG Darmstaadt, Alemania). En el texto se utilizan las siguientes abreviaturas: EtOAc = acetato de etilo, cHex = ciclohexano, CH2CI2 = diclorometano, Et20 = dietiléter, DDQ = 2,3-dicloro-5,6-diciano-1 ,4-benzoquinona; DMF = ?,?-dimetilformamida, DIPEA = N,N-dilsopropiletilamina, MeOH = metanol, Et3N = trietilamina, TBS = terbutildimetilsililo; TBP = terbutildifenilsililo; TFA = ácido trifluoroacético, THF = tetrahidrofurano, DIBAL-H = hidruro de diisobutilaluminio, DMAP = dimetilaminopiridina, LHMDS = hexametildisilazano de litio; CCD se refiere a cromatografía en capa delgada sobre placas de sílice y "seco" se refiere a una solución secada sobre sulfato de sodio anhidro; t.a. se refiere a temperatura ambiente.

EJEMPLO 1 Síntesis del Intermediario Representativo de Piridina compuesto 2 La cloropiridina 1 se disuelve en THF y se agrega a una suspensión agitada de LAH en THF a -78°C. La mezcla se agita durante 6 horas a esta temperatura durante 1 hora a -30°C. La mezcla después se trata con precaución con agua, NaOH acuoso 15% y agua con agitación vigorosa. La mezcla se calienta hasta la temperatura ambiente y se filtra. El precipitado blanco se lava liberalmente con acetato de etilo. Las porciones orgánicas combinadas se secan con MgS04 y se concentran bajo vacío. La purificación por cromatografía instantánea proporciona el compuesto 2 deseado.

Compuesto 3 Se agregan 6 equivalentes de DMSO a una solución agitada de 3 equivalentes de cloruro de oxalilo en diclorometano a -70°C. Después de 15 minutos, se agrega 1 equivalente del alcohol 2 en diclorometano, seguido por trietilamina. Se permite que la mezcla se caliente hasta la temperatura ambiente y se agita durante 1 hora. La mezcla se lava con 75 mi de bicarbonato de sodio acuoso, se seca con gS0 y se concentra bajo vacío. La purificación por cromatografía instantánea proporciona el producto deseado 3.

Compuesto 4 Se agrega bromuro de alquenilmagnesio en 1 equivalente de THF a una solución agitada de 1 equivalente del aldehido 3 en THF a -78°C. La mezcla se agita a esta temperatura durante 30 minutos, se calienta hasta la temperatura ambiente y se suspende con bicarbonato de sodio acuoso. La mezcla después se extrae con acetato de etilo y los extractos combinados se secan con MgS0 y se concentran bajo vacío. La purificación por cromatografía instantánea proporciona el compuesto 4 deseado.

EJEMPLO 2 Síntesis del Intermediario Representativo de Pirimidina compuesto 2 La cloropirimidina 1 se disuelve en THF y se agrega a una suspensión agitada de LAH en THF a -78°C. La mezcla se agita durante 6 horas a esta temperatura durante 1 hora a -30°C. La mezcla después se trata con precaución con agua, NaOH acuoso 15% y agua con agitación vigorosa. La mezcla se calienta hasta la temperatura ambiente y se filtra. El precipitado blanco se lava liberalmente con acetato de etilo. Las porciones orgánicas combinadas se secan con MgS04 y se concentran bajo vacío. La purificación por cromatografía instantánea proporciona el producto deseado 2.

Compuesto 3 Se agregan 6 equivalentes de DMSO a una solución agitada de cloruro de oxalilo (3 equivalentes) en diclorometano a -70°C. Después de 15 minutos, se agrega 1 equivalente del alcohol 2 en diclorometano, seguido por trietilamina. Se permite que la mezcla se caliente hasta la temperatura ambiente y se agita durante 1 hora. La mezcla se lava con 75 mi de bicarbonato de sodio acuoso, se seca con MgS04 y se concentra bajo vacío. La purificación por cromatografía instantánea proporciona el producto deseado 3.

Compuesto 4 Se agrega bromuro de alquenílmagnesio en 1 equivalente de THF a una solución agitada de 1 equivalente del aldehido 3 en THF a -78°C. La mezcla se agita a esta temperatura durante 30 minutos, se calienta hasta la temperatura ambiente y se suspende con bicarbonato de sodio acuoso. La mezcla se extrae con acetato de etilo y los extractos combinados se secan con MgS04 y se concentran bajo vacío. La purificación por cromatografía instantánea proporciona el producto deseado 4.

EJEMPLO 3 Síntesis de los compuestos representativos de Estructura (I) Compuesto 2: La enona 1 (compuesto 4 de los ejemplos 1 y 2 anteriores, 4.26 mmoles), 4.3 mmoles de R-|NH2 y 4.3 mmoles de ácido toluensulfónico monohidratado en 20 mi de etanol se calientan a 60°C durante 16 horas. La mezcla se concentra, se capta en 50 mi de acetato de etilo, se lava con 20 mi de NaHC03 acuoso, se seca con MgS04 y se concentra bajo vacío. El residuo se purifica en una columna de gel de sílice (elusión con acetato de etilo 25% en hexanos) para proporcionar el compuesto 2.

Compuesto 4: Se agrega LDA en THF (0.325 M, 0.83 mi, 0.27 mmoles) a una solución agitada del óxido de fosfina (66 mg, 0.27 mmoles) en 2 mi de THF a -25°C. Después de 15 minutos se agrega el compuesto 2 1 1 mg, 0.034 mmoles) en 1 mi de THF y la mezcla se agita durante 5 minutos. Se agregan 30 mg de NaH, la mezcla se calienta a temperatura ambiente y se agita durante 16 horas. La mezcla se diluye con 15 mi de agua y se extrae con EtOAc (4 x 10 mi). Los extractos combinados se secan con MgS0 , se concentran al vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa (elusión con 30% de EtOAc/Hex.) para proporcionar un aceite el cual después se trata con TsOH.H20 (4.2 mg, 0.022 mmoles) y 0.085 mmoles de R4NH2 a 130°C durante 16 horas. La mezcla se enfría a temperatura ambiente, se diluye con 2 mi de NaHC03 acuoso y se extrae con EtOAc (4 x 2 mi). Los extractos combinados se secan con MgS04, se concentran al vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa para proporcionar el compuesto 4.

Compuesto 3: El compuesto 2 (68 mg, 0.23 mmoles) y 0.35 mmoles de R4HNNH2 se calientan a 140°C durante 5 horas. La mezcla se enfría a temperatura ambiente, se diluye con 2 mi de NaHC03 acuoso y se extrae con EtOAc (4 2 mi). Los extractos combinados se secan con MgS0 , se concentran al vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa (elusión con 30% de EtOAc/hexano) para proporcionar el compuesto 3.

EJEMPLO 4 Síntesis de los compuestos representativos de estructura (1) 4a Z = O, Y = O 5a Z = 0 4b Z = S, Y = 0 5b Z = NR 4c Z = O, Y = NR7 5c Z = S 4d Z = S, Y = NR7 Compuesto 2: La enona 1 (compuesto 4 de los ejemplos 1 y 2, 4.26 mmoles), 4.3 mmoles de R1NH2 y 4.3 mmoles de ácido toluensulfónico monohidratado en 20 mi de etanol se calientan a 60°C durante 16 horas. La mezcla se concentra, se capta en 50 mi de acetato de etilo, se lava con 20 mi de NaHCC>3 acuoso, se seca con MgS04 y se concentra bajo vacío. El residuo se purifica sobre una columna de gel de sílice (elusión con 25% de acetato de etilo en hexanos) para proporcionar el compuesto 2.

Compuesto 3: Una cantidad de 0.16 mmoles de la cetona 2, ácido p-toluensulfónico monohidratado (30 mg, 0.16 mmoles) y 0.18 mmoles de R4NH2 se disuelven en 0.5 mi de etanol y se calientan a 80°C en un tubo sellado durante 20 horas. La mezcla se enfría a temperatura ambiente, se diluye con 2 mi de NaHC03 acuoso y se extrae con acetato de etilo (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secan con gS04, se concentran bajo vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa para proporcionar el compuesto 3.

Compuesto 4a: (Z = O, Y = O) Se disuelven 0.095 mmoles de la cetona 3 en 1 mi de metanol y se trata con borohidruro de sodio (25 mg, 0.66 mmoles). La mezcla se agita durante 4 horas, se diluye con 2 mi de NaHC03 acuoso y se extrae con acetato de etilo (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secan con MgS04, se concentran bajo vacío y el residuo se capta en 1 mi de tolueno y se trata con una solución de fosgeno en tolueno (20%, 0.1 mi). Después de 16 horas, la solución se concentra bajo vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa para proporcionar 32 mg (75%) del carbonato 4a como un aceite amarillo.

Compuesto 4b: (Z = O, Y = O) Se disuelven 0.095 mmoles de la cetona 3 en 1 mi de metanol y se trata con borohidruro de sodio (25 mg, 0.66 mmoles). La mezcla se agita durante 4 horas, se diluye con 2 mi de NaHC03 acuoso y se extrae con acetato de etilo (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secan con MgS04, se concentran bajo vacío y el residuo se capta en 1 mi de tolueno y se trata con una solución de tiofósgeno en tolueno (20%, 0.1 mi). Después de 16 horas, la solución se concentra bajo vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa para proporcionar 25 mg (55%) del compuesto 7b como un aceite amarillo.

Compuesto 4c: (Z = O, Y = NR7) Una cantidad de 0.095 mmoles de la cetona 3 y 0.20 mi de amina se disuelven en 1 mi de acetonitrilo y se tratan con 25 mg de cianoborohidruro de sodio. Se agrega 1 gota de ácido acético y la mezcla se agita durante 4 horas, se diluye con 2 mi de NaHC03 acuoso y se extrae con acetato de etilo (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secan con MgS04, se concentran bajo vacío y el residuo se capta en 1 mi de tolueno y se trata con una solución de fosgeno en tolueno (20%, 0.1 mi). Después de 18 horas, la solución se concentra bajo vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa para proporcionar la urea 4c.

Compuesto 4d: (Z = S, Y = NR7) Una cantidad de 0.095 mmoles de la cetona 3 y 0.20 mi de amina se disuelven en 1 mi de acetonitrilo y se tratan con 25 mg de cianoborohidruro de sodio. Se agrega 1 gota de ácido acético y la mezcla se agita durante 4 horas, se diluye con 2 mi de NaHCC>3 acuoso y se extrae con acetato de etilo (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secan con MgS0 , se concentran bajo vacío y el residuo se capta en 1 mi de tolueno y se trata con una solución de tiofósgeno en tolueno (20%, 0.1 mi). Después de 18 horas, la solución se concentra bajo vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa para proporcionar la tiourea 4d.

Compuesto 5a: (Z = O) Una cantidad de 0.16 mmoles de la cetona 3, 30 mg de urea y 25 mg de ZnC se calientan a 200°C durante 5 h. La mezcla se enfría a temperatura ambiente, se diluye con 2 mi de NaHC03 acuoso y se extrae con acetato de etilo (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secan con MgS04, se concentran bajo vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa para proporcionar la urea 5a. Compuesto 5b: (Z = NRg) La urea del procedimiento anterior (5a, 0.070 mmoles) y P.CI5 (15 mg, 0.070 mmoles) se calientan a 90°C en tolueno durante 3 horas, tiempo durante el cual se forma un sólido blanco. La mezcla se enfría hasta la temperatura ambiente y se trata con 0.10 mi de amina. Se continúa agitando durante 30 minutos. La mezcla se diluye con 2 mi de NaHC03 acuoso y se extrae con acetato de etilo (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secan con MgS0 , se concentran bajo vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa para proporcionar la guanidina 5b.

Compuesto 5c: (Z = S) La urea del procedimiento anterior (5a, 0.070 mmoles) y 50 mg de P Sio se calienta en tolueno a 90°C durante 20 horas. La mezcla se enfría hasta la temperatura ambiente, se diluye con 2 mi de NaHC03 acuoso y se extrae con acetato de etilo (4 x 2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secan con MgS0 , se concentran bajo vacío y el residuo se purifica por CCD preparativa para proporcionar la tiourea 5c.

EJEMPLO 5 Síntesis de los compuestos representativos de estructura (Xla) Intermediario 1 Ester metílico del ácido (4,6-dicloro-2-metilp¡r¡midin-5-il)acét¡co Se agrega en porciones sodio (1.74 g, 3 equivalentes) a 60 mi de MeOH anhidro a 0°C bajo N2. Después de que se consume el sodio metálico se agrega clorhidrato de acetamidina (7.06 g, 3 equivalentes). Después de 20 minutos de agitación, se separa por filtración el NaCI precipitado. Se agrega una solución del éster dietílico del ácido 2-etoxicarbonilsuccínico (6.04 g, 24.5 mmoles) en 20 mi de MeOH anhidro a la solución de acetamidina libre y la mezcla se agita a t.a. durante 2 días. La mezcla de reacción se concentra a sequedad al vacío y se obtienen 8.69 g de una espuma amarilla que después se mezcla con 70 mi de POCI3 y se calienta a reflujo durante 3.5 h. La solución resultante se enfría a temperatura ambiente y se vierte lentamente en 600 mi de hielo/agua y 50 mi de NH4OH, con agitación vigorosa. El producto se extrae con EtOAc (3 x 50 mi) y con Et20 (3 x 20 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavan con 60 mi de H2O y 40 mi de salmuera, se secan sobre Na2S0 , se filtran y se concentran al vacío. El aceite crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/AcOEt 9:1 ). Se obtiene el intermediario 1 como un sólido amarillo (4.27 g; 73%). RMN-1H (CDCI3): d 5.85 (m, 1H), 5.15 (de, 1 H), 5.11 (de, 1H), 3.61 (dt, 2H), 2.67 (s, 3H). EM (m/z): 202 [M]+.2CI; 167 [MH-CI]+,1 CI.

Intermediario 2 Ester metílico del ácido 2-(4,6-dicloro-2-metilpirimidin-5-il)pent-4-enoico A una solución del intermediario 1 (3g, 1 equivalente) en 60 mi de THF anhidro a -78°C bajo N2, se agrega a gotas LiHMDS (1 M en THF) (16.03 mi, 1.25 equivalentes). La mezcla de reacción se enfría a 0°C y se agita durante 30 min. La mezcla de reacción se enfría a -78°C y se agrega a gotas yoduro de alilo (1.58 mi, 1.35 equivalentes) durante 1.5 h. La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 3 h y después se agregan 30 mi de agua y la mezcla de reacción se extrae con EtOAc (3 x 60 mi). Las capas orgánicas se recuperan y se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 20 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, 5% de EtOAc/cicIohexano). Se obtiene el intermediario 2 como un sólido blanco (2.4 g, 8.76 mmoles, 68%).

RMN- H (CDCI3): d 5.77 (m, 1 H), 5.03 (m, 2H), 4.43 (dd, 1 H), 3.76 (s, 3H), 3.12 (m, 1 H), 2.78 (m, 1 H), 2.73 (s, 3H). EM (m/z): 275 [ ]+.

Intermediario 3 2-(4,6-dicloro-2-metilpirimidin-5-inpent-4-en-1-ol A una solución del intermediario 2 (257 mg, 0.937 mmoles) en 9.3 mi de CH2CI2 anhidro, a -78°C bajo N2, se agrega DIBA1-H (solución 1 M en hexano, 5.6 mi, 6 equivalentes). Después de la adición de DIBA1-H, la mezcla de reacción se agita a -78°C durante 1 h y a 0°C durante 2 h. La mezcla de reacción se vierte en una solución de HCI 0.5N en 20 mi de hielo y se extrae con CH2CI3 (3 x 10 mi). Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2S04, se filtran y se concentran al vacío. Se obtienen 200 mg del intermediario 3 como un aceite incoloro (rendimiento, 86%). RMN- H (CDCI3): d 5.76 (m, 1 H), 5.12 (m, 1 H), 5.01 (m, 1H), 4.16 (m, 1 H), 4.06 (m, 1 H), 3.91 (m, 1 H), 2.8-2.6 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 1.50 (t, 1 H). EM (m/z): 247 [M]+, 2CI.

Intermediario 4 5-n-(terbutildifenilsilaniloximetil)-but-3-en¡n-4,6-dicloro-2-metilpirimidina A una solución del intermediario 3 (152 mg, 0.61 mmoles) en 4 mi de DMF anhidra a 0°C bajo N2, se agrega 4-DMAP (3.8 mg, 0.05 equivalentes), imidazol (430 mg, 10 equivalentes) y Ph2/BuSiCI (0.32 mi, 2 equivalentes). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 2 h. A esta solución se agregan 5 mi de NH4CI acuoso saturado en agua y la mezcla se extrae con Et20 (2 x 15 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavan una vez con agua, una vez con salmuera y se secan sobre Na2S04. Los sólidos se filtran, el solvente se evapora y el aceite amarillo crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 95:5). Se obtiene el intermediario 4 como un aceite incoloro (270 mg, 0.55 mmoles, 90%). RMN-1H (CDCI3): d 7.65 (dd, 2H), 7.56 (dd, 2H), 7.49-7.36 (m, 6H), 5.67 (m, 1 H), 5.03 (dd, 1 H), 4.94 (dd, 1 H), 4.17 (m, 1 H), 4.00 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.69 (m, 1 H), 2.55 (m, 1 H), 0.98 (s, 9H). EM (m/z): 485 [MH]+, 2CI.

Intermediario 5 4-(terbut¡ldifen¡lsilaniloxi)-3-(4,6-dicloro-2-metilpirimídin-5-il)-1-ol A una solución del intermediario 4 (1 .52 g, 3.14 mmoles) en una mezcla de CH2CI2 anhidro/MeOH (4/1 v/v, 50 mi), a -78°C se le burbujea 03 durante 15 min mientras se agita. La mezcla de reacción se diluye con MeOH anhídrido (10 mi) y se agrega NaBH4 (475 mg, 4 eq) a -78°C. La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 3 h y después se suspende con 15 mi de NH4CI acuoso saturado y el producto se extrae con EtOAc (3 x 60 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 20 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex EtOAc 8:2). Se obtiene el intermediario 5 como un aceite amarillo (1.14 g, 2.34 mmoles, 74%). RMN-1H (DMSO): d 7.55-7.33 (m, 10H), 4.46 (t, 1 H), 4.09,397,2.92 (m, 3H), 3.40-3.20 (m, 2H), 2.00-1 .76 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 0.84 (s, 9H). EM (m/z): 489 [MH]+.

Intermediario 6 Ester 4-(terbutildifenilsilaniloxi)-3-(4,6-dicloro-2-metilpirimidin-5-il)-butílico del ácido metansulfónico A una solución del intermediario 5 (1.14 g, 2.33 mmoles) en 46 mi de CH2CI2 anhidro a 0°C se agrega Et3N (1.6 mi, 5 equivalentes) y MsCI (378 µ?, 2.1 equivalentes). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 30 min. Después se agregan 15 mi de agua y la mezcla de reacción se extrae con CH2CI2 (3 x 60 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 20 ml) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 8:2). El intermediario 6 se obtiene como un aceite amarillo (1 .28 g, 2.26 mmoles, 97%). RMN- H (DIVISO): d 7.60-7.30 (m, 10H), 4,20,4.10-3.90 (m,m 5H), 3.07 (s, 3H), 2.57 (s, 3H), 2.34-2.06 (m, 2H), 0.84 (s, 9H). EM (m/z): 567 [MH]+.

Intermediario 7 5-(terbutildifenilsilaniloximetil)-4-cloro-2-metil-8-[4-(1 ,1 ,2-trifluorometil)-2-trifluorometilfenill-5,6 ,7,8-tetrahidrop¡r¡do[2,3-cnpirimid¡na A una solución de 2,4-bis(trifluorometil)anilina (15.6 mg, 1 equivalente) en 1 mi de DMF anhidra a 0°C se agrega NaH 80%/aceite (4.5 mg, 2.2 equivalentes). La mezcla de reacción se agita a 0°C durante 15' min y después a t.a. durante 15 min. La mezcla de reacción se enfría a 0°C y se agrega una solución del intermediario 6 (38.7 mg, 0.068 mmoles) en 0.3 mi de DMF anhidra. La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 1.5 h. Después se agregan 2 mi de agua y la mezcla de reacción se extrae con EtOAc (3 x 7 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 10 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex EtOAc 9:1 ). El intermediario 7 se obtiene como un aceite amarillo (19.4 mg, 0.029 mmoles, 43%). RMN-1H (CDCI3): d 7.98,7.94 (d, d, 1 H), 7.88,7.80 (dd.dd, 1 H), 7.77-7.58, 7.44-7.32 (m, m, 3H), 7.35,7.14 (d,d, 1 H), 3.98,3.94 (dd, dd, 1H), 3.73,3.55 (t,m, 1 H), 3.63,3.59 (m,m, 1 H), 3.44-3.36 (m, 2H), 3.38-3.30 (m, 2H), 2.55,2.40 (m,m, 1 H), 2.17,2.15 (s,s 1 H), 2.04,1.90 (m,m, 1 H), 0.98 (s, 9H). EM (m/z): 664 [MH]+.

Intermediario 8 {4-cloro-2-metil-8-r4-d ,1 ,2-trifluoroetil 2-trifluorometilfenin-516J,8-tetrahidropiridor2,3-cnpirimidin-5-il)-metanol A una solución del intermediario 7 (52 mg, 0.078 mmoles) en 1 mi de DMF anhidro a t.a. bajo N2, se agrega Et3N-3HF (102 µ?, 8 equivalentes) y la mezcla de reacción se agita a t.a. durante la noche. Después se diluye con 2 mi de agua y se extrae con Et20 (3 x 5 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCl acuoso saturado (1 x 7 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora. El producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 6:4). Se obtiene el intermediario 8 como un aceite transparente (27 mg, 0.063 mmoles, 81 %). RMN-1H (D SO): d 8.26-8.12 (m, 2H), 7.90-7.80 (d, 1 H), 5.08-4.98 (t, 1 H), 3.90-3.60 (2H), 3.70-3.30 (2H), 3.24-3.10 (1 H), 2.30 (m, 1 H), 2.09 (s, 3H), 2.00-1.80 (m, 1 H). EM (m/z): 425 [MH]+.

Intermediario 9 Ester 4-cloro-2-metil-8-r4-(1 ,1 ,2-trifluoroetil)-2-trifluorometilfenin-5,6 J18-tetrahidropiridor2,3- lpirimidin-5-il-metílico del ácido metansulfónico A una solución del intermediario 8 (130 mg, 0.306 mmoles) en 4 mi de CH2CI2 anhidro a 0°C, se agregan Et3N (213 µ?, 5 equivalentes) y MsCI (50 µ?, 2.1 equivalentes). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 3 h. Después se agregan 8 mi de agua y la mezcla de reacción se extrae con CH2CI2 (3 x 30 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 10 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar el producto crudo el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 65/35). Se obtiene el intermediario 9 como un aceite transparente (138 mg, 0.274 mmoles, 90%). RMN-1H (DMSO): d 8.30-8.14 (m, 2H), 7.95-7.80 (d,d, 1 H), 4.56- 4.20 (2H), 3.9-3.4 (m, 3H), 3.25 (s, 3H), 2.1 1 (s, 3H), 2.2-1.9 (m, 2H). EM (m/z): 425 [MH]+.

Intermediario 10 7-Metil-1-(1-propilbutin-5-[4-(1 ,1 ,2-trifluoroetin-2-trifluorometilfen¡n-1 ,2,2a, 3,4,5-hexahidro-1 ,5,6, 8-tetraazaacenaftileno Una mezcla del intermediario 9 (135 mg, 0.27 mmoles) y heptil-4-amina (0.5 mi, 12 equivalentes) se calienta a 130°C (frasco con tapa roscada, baño de arena) durante 3 h. La mezcla de reacción después se enfría hasta la t.a. y se diluye con 3 mi de CH2CI2. El solvente se evapora y el producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 9:1 ). Se obtiene el intermediario 10 como un sólido amarillo (29.4 mg, 0.06 mmoles, 23%). RMN-1H (CDCI3): d 7.99 (s, 1 H), 7.83 (d, 1 H), 7.48 (d, 1 H), 4.06-3.24 (m amplio, 5H), 2-23-2.2 (m amplio, 4H), 1.74-1 -1 (m amplio, 10H), 0.97 (t, 3H), 0.91 (t, 3H). EM (m/z): 478 [MH]+.

Intermediario 1 1 4-f5-(terbutildifenils¡laniloximetil)-4-cloro-2-metil-6,7-dihidro-5H-pirido-[2,3-tyipirimidin-8-¡n-3-metilbenzon¡tr¡lo A una solución de 4-amino-3-metilbenzonitrilo (14 mg, 0.106 mmoles) en 3.5 mi de DMF a 0°C bajo N2 se agrega NaH 80%/aceite (4.5 mg, 0.1 12 mmoles). Se agrega el intermediario 6 (60 mg, 0.106 mmoles) después de 30 min y la mezcla de reacción se agita a t.a. durante 2 h. Después se enfría a t.a. y se diluye con 20 mi de agua. El producto se extrae con EtOAc (3 x 25 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavan con NaCI acuoso saturado (2 x 20 mi) y se secan sobre Na2S0 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora. El producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, ciclonexano/EtOAc 80%). Se obtiene el intermediario 1 1 como un aceite transparente (28 mg, 0.52 mmoles, rendimiento = 47%). RMN-1H (CDCI3): d 7.65 (s, 1 H), 7.55 (m, 4H), 7.35 (m, 6H), 7.10 (d, 1 H), 6.95 (d, 1 H), 3.92 (m, 1 H), 3.8 (m, 2H), 3.5-3.3 (m, 2H), 2.21 (m, 1 H), 2.44 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.61 (m, 1 H), 1.10 (s, 9H). E (m/z): 567 [MHf.

Intermediario 12 4-(4-Cloro-5-hidrox¡metil-2-metil-6,7-dihidro-5/-/-pirido[2,3- npirimidin-8-il)-3-metilbenzonitrilo A una solución del intermediario 11 (28 mg, 0.05 mmoles) en 2.5 mi de DMF anhidra a t.a. bajo N2 se agrega Et3N-3HF (44 µ?, 0.290 mmoles) y la mezcla de reacción se agita a t.a. durante 12 h. Se diluye con 20 mi de agua y el producto se extrae con EtOAc (3 x 25 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (2 x 20 mi) y se secan sobre Na2S0 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora. El producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 6:4). Se obtiene el intermediario 1 1 como un aceite transparente (22 mg, 0.08 mmoles, 75%). RMN-1H (CDCI3): d 7.61-7.58 (m, 2H), 7.27 (m, 1 H), 3.92-3.81 (m, 3H), 3.50-3.35 (m, 2H), 2.4 (m, 1 H), 2.26 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 1.8 (m, 1 H). E (m/z) 329 [MHf.

Intermediario 13 4-n-(1-Etilpropin-7-metil-2,2a,3.4-tetrahidro-1 H-1.5.6,8-tetraazaacenaftilen-5-in-3-met¡lbenzonitrilo A una solución del intermediario 12 (43 mg, 0.131 mmoles) en 2.5 mi de CH2CI2 a 0°C, bajo N2 se agregan MsCI (13 µ?, 0.328 mmoles) y Et3N (87 µ?, 0.655 mmoles) y la mezcla de reacción se agita a t.a. durante 1 h y después se diluye con 20 mi de agua. La mezcla de reacción se extrae con EtOAc (3 x 25 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (2 x 20 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora. El producto crudo se disuelve en 3-aminopentano (143 µ?, 1.23 mmoles) y la mezcla de reacción se calienta a 100°C (frasco con tapón de rosca, baño de arena) durante 16 h. Se enfría a t.a. y la mezcla de reacción se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 75:25). Se obtiene el intermediario 13 como un sólido blanco (23 mg, 0.074 mmoles, 50%).

RMN-1H (CDCI3): d 7.50 (d, 1 H), 7.30 (dd, 1 H), 7.55 (d, 1 H), 3.86 (m, 1 H), 3.70-3.23 (ft, 2H), 3.42 (m, 1 H), 3.63 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.24 (s, 2H), 2.18 (m, 1 H), 1.74 (m, 1 H), 1.59-1.45 (m, 4H), 0.99-0.78 (t+t, 6H). EM (m/z): 362 [MH]+.

Intermediario 14 3-Metil-4 7-metil-1-(1-propilbutil)-2,2a13,4-tetrahidro-1 -y-1.5.6.8-tetraazaacenaftilen-5-ill-benzonitrilo A una solución del intermediario 12 (14 mg, 0.043 mmoles) en 1.5 mi de CH2CI2 anhidro a 0°C, bajo N2, se agregan MsCi (4 µ?, 0.109 mmoles) y Et3N (28 µ?, 0.216) la mezcla de reacción se agita a t.a. durante 1 h y después se diluye con 20 mi de agua. El producto se extrae con EtOAc (3 x 25). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (2 x 20 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora. El producto crudo se disuelve en 4-etilamina (50 µ?, 0.349 mmoles) y la mezcla de reacción se calienta a 100°C (frasco con tapón de vidrio, baño de arena) durante 16 h. Después se enfría a t.a. y la mezcla de reacción se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 75:25). Se obtiene el intermediario 14 como un sólido blanco (5.0 mg, 0.020 mmoles, 40%).

RMN-1H (CDCI3): d 7.73 (s, 1 H), 7.65 (dd, 1 H), 7.41 (d, 1 H), 3.95 (m, 1 H), 3.78-3.6 (m, 2H), 3.5-3.24 (t, 2H), 2.27 (m, 1 H), 2.18 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65 (m, 1 H), 1.55-1.40 (m, 4H), 1 .38- .10 (m, 4H), 0.95-0.88 (t+t, 6H). EM (m/z): 389 [ H]+.

Intermediario 15 4-[5-(terbutildifenilsilaniloximetil)-4-cloro-2-metil-6,7-dihidro-5/-/-piridor2,3-Qlpirimidin-8-ill-3-clorobenzonitrilo A una solución de 4-amino-3-clorobenzonitrilo (86 mg, 0.566 mmoles) en 3,5 mi de DMF a 0°C bajo N2 se agrega NaH 80%/aceite (17 mg, 0.566 mmoles). Se agrega el intermediario 6 (308 mg, 0.546 mmoles) después de 30 min y la mezcla de reacción se agita a t.a. durante 2 h. Después se enfría a t.a. y se diluye con 30 mi de agua. El producto se extrae con EtOAc (3 x 45 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavan con NaCI acuoso saturado (2 x 20 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora. El producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 8:2). Se obtiene el intermediario 15 como un aceite transparente (1 10 mg, 0.184 mmoles, 35%). RMN-1H (CDCI3): d 7.65 (s, 1 H), 7.55 (m, 4H), 7.35 (m, 6H), 7.10 (d, 1 H), 6.95 (d, 1 H), 3.92 (m, 1 H), 3.8 (m, 2H), 3.5-3.3 (m, 2H), 2.21 (m, 1 H), 2.10 (s, 3H), 1.61 (m, 1 H), 1.10 (s, 9H). EM (m/z): 587 [MH]+.

Intermediario 16 3-Cloro-4-(4-cloro-5-hidroximetil-2-metil-617-dihidro-5H-piridor2,3- |pirimidin-8-il-benzonitrilo A una solución del intermediario 15 (1 10 mg, 0.19 mmoles) en 2.5 mi de DMF anhidra a ta. bajo N2, se agrega Et3N-3HF (260 µ?, 1.91 mmoles) la mezcla de reacción se agita a t.a. durante 2 h. Se diluye con 20 mi de agua y el producto se extrae con EtOAc (3 x 20 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (2 x 20 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora. El producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 6:4). Se obtiene el intermediario 16 como un aceite transparente (53 mg, 0.15 mmoles, 81 %). RMN-1H (CDCI3): d 7.95-8.8 (m, 2H), 7.3 (d, 1 H), 3.9 (m, 1 H), 3 (m, 2H), 3.5-3.3 (m, 2H), 2.2 (m, 1 H), 2.15 (s, 3H), 1.8 (m, 1 H). E (m/z): 349 [MH]+.

Intermediario 17 3-Cloro-4-r7-metil-1-(1-proDilbutil)-2.2a,3,4-tetrahidro-1 -1.5.6.8-tetraazaacenaftilen-5-ill-benzonitrilo A una solución del intermediario 16 (52 mg, 0.149 mmoles) en 1.5 mi de CH2CI2 anhidro a 0°C bajo N2, se agrega MsCI (16 µ?, 0.373 mmoles) y Et3N (90 µ? 0.745 mmoles). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 1 h y después se diluye con 20 mi de agua. El producto se extrae con EtOAc (3 x 25 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (2 x 20 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora. El producto crudo se disuelve en 4-heptilamina (188 µ?, 1.49 mmoles) y la mezcla de reacción se calienta a 100°C (frasco con tapón roscado, baño de arena) durante 16 h. Después se enfría a t.a. y la mezcla de reacción se purifica por cromatografía instantánea (ge! de sílice, cHex/EtOAc 8:2). Se obtiene el intermediario 17 como un sólido blanco (36.0 mg, 0.084 mmoles, 60%). RMN-1H (CDCI3): d 7.74 (d, 1 H), 7.56 (dd, 1 H), 7.49 (d, 1 H), 4.05 (m, 1 H), 3.78-3.6 (m, 2H), 3.5-3.24 (t, 2H), 2.27 (s, 13), 2.18 (m, 1 H), 1.55-1.40 (m, 4H), 1.38-1 .10 (m, 4H), 0.95-0.88 (t+t, 6H). EM (m/z): 410 [MH]+.

Intermediario 18 3-Cloro^-ri-n-etilpropilV7-metil-2,2a,3,4-tetrahidro-1 - -1 .5.6.8-tetraazaacenaft¡len-5-¡n-benzonitrilo A una solución del intermediario 16 (35 mg, 0.1 12 mmoies) en 1.5 mi de CH2CI2 anhidro a 0°C bajo N2l se agregan MsCI (12 µ?, 0.277 mmoies) y Et3N (68 µ? 0.560 mmoies) la mezcla de reacción se agita a ta. durante 1 h y después se diluye con 20 mi de agua. El producto se extrae con EtOAc (3 x 25 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (2 x 20 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora. El producto crudo se disuelve en 3-aminopentano (158 pl, 1.12 mmoies) y la mezcla de reacción se calienta a 100°C (frasco con tapón roscado, baño de arena) durante 16 h. Después se enfría a t.a. y la mezcla de reacción se purifica por cromatografía instantánea (gei de sílice, cHex/EtOAc 75:25). Se obtiene el intermediario 18 como un sólido blanco (18.0 mg, 0.084 mmoies, 53%). RMN-1H (CDCI3): d 7.74 (d, 1 H), 7.55 (dd, 1 H), 7.50 (d, 1 H), 3.95 (m, 1 H), 3.78-3.65 (m, 2H), 3.45 (m, 1 H), 3.69-3.23 (t+t, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.18 (m, 1 H), 1.55-1.46 (m, 4H), 0.97-0.78 (t+t, 6H). EM (m/z): 382 [MH]+.

Intermediario 19 5-(2,4-Bis-trifluorometi[fenil)-1-(1-etilpropil)-7-metil-1 ,2,2a,3,4,5-hexahidro-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftilen A una solución del intermediario 18 (45 mg, 0.106 mmoles) en 2.5 mi de CH2CI2 anhidro a 0°C bajo N2, se agrega MsCI (10 µ?, 0.265 mmoles) y Et3N (70 µ? 0.530 mmoles) y la mezcla de reacción se agita a t.a. durante 1 h y después se diluye con 20 mi de agua. El producto se extrae con EtOAc (3 x 25 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (2 x 20 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora. El producto crudo se disuelve en 3-aminopentano (184 µ?, 0.992 mmoles) y la mezcla de reacción se calienta a 100°C (frasco con tapón roscado, baño de arena) durante 16 h. Después se enfría a t.a. y la mezcla de reacción se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 75:25). Se obtiene el intermediario 19 como un sólido blanco (28.0 mg, 0.064 mmoles, 60%). RMN-1H (CDCI3): d 7.98 (d, 1 H), 7.83 (dd, 1 H), 7.49 (d, 1 H), 3.87 (m, 1 H), 3.70-3.23 (t+t, 2H), 3.44 (m, 1 H), 3.63 (m, 2H), 2.23 (s, 3H), 2.18 (m, 1 H), 1.55-1.47 (m, 4H), 0.99-0.88 (t+t, 6H). EM (m/z): 458 [MH]+.

EJEMPLO 5-1 -1 7-Metil-1-(1-propilbutil)-5-r4-(1 J ,2-trifluoroetil)-2-trifluorometilfenil1- 1 ,2,2a,3 A5-exahidro-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftileno A una solución del intermediario 10 (21 mg, 0.043 mmoles) en 1 .0 mi de CH2CI2 anhidro, se agrega DDQ (9.7 mg, 1 equivalente). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 3.5 h. El solvente se evapora y el producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice cHex/EtOAc 9:1 ). Se obtiene el ejemplo 5-1-1 como un aceite transparente (14 mg, 0.028 mmoles, 67%).

EJ EMPLO 5-1 -2 3-Metil-4-(7-metil-1-(1-propilbutil)-3,4-dihidro-1H-1 , 5,6,8- tetraazaacenaftilen-5-inbenzonitrilo A una solución del intermediario 14 (15 mg, 0.038 mmoles) en 1.5 mi de CH2CI2, se agrega DDQ (9.6 mg, 0.042 mmoles). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 3 h. El solvente se evapora y el producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice cicIohexano/EtOAc 7:3). Se obtiene el ejemplo 5-1 -2 como un sólido blanco (8 mg, 0.021 mmoles, 56%).

EJ EM PLO 5-1 -3 4-? -( 1 -etilpropil)-7-met¡l-3,4-dihidro-1 H-i ,5,6,8-tetraazaacenaftilen-5-W-3- benzonitrilo A una solución del intermediario 13 (18 mg, 0.049 mmoles) en 1.5 mi de CH2CI2, se agrega DDQ (14.5 mg, 0.064 mmoles). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 3 h. El solvente se evapora y el producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice cHex/EtOAc 7:3). Se obtiene el ejemplo 5-1-3 como un sólido blanco (10 mg, 0.029 mmoles, 60%).

EJ E M P LO 5-1 -4 3-Cloro-4-r7-metíl-1 -(1 -propilbutil)-3,4-dihidro-1 HA ,5,6,8- tetraazaacenaftilen-5-inbenzonitrilo A una solución del intermediario 17 (15 mg, 0.04 mmoles) en 1.0 mi de CH2CI2, se agrega DDQ (14.5 mg, 0.064 mmoles). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 3 h. El solvente se evapora y el producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice cEx/EtOAc 7:3). Se obtiene el ejemplo 5-1-4 como un sólido blanco (8.1 mg, 0.02 mmoles, 56%).

EJ EMPLO 5-1 -5 3-Cloro-4-n -(1 -etilpropil)-7-metil-3,4-dih¡dro-1 HA ,5,6,8- tetraazaacenaftilen-5-inbenzonitrilo A una solución del intermediario 18 (12 mg, 0.032 mmoles) en 1 .0 mi de CH2CI2 anhidro, se agrega DDQ (10.5 mg, 0.042 mmoles). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 3 h. El solvente se evapora y el producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice cEx/EtOAc 7:3). Se obtiene el ejemplo 5-1-5 como un sólido blanco (8.0 mg, 0.02 mmoles, 60%).

EJ EMPLO 5-1 -6 5-(2,4-Bistrifiuorometilfenil)-1 -(1 -etilpropil)-7-metil-1 ,3,4,5-tetrahidro- 1 ,5,6,8-tetraazaacenaftilen A una solución del intermediario 19 (20 mg, 0.044 mmoles) en 1.5 mi de CH2CI2 anhidro, se agrega DDQ (12.5 mg, 0.053 mmoles). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 3 h. El solvente se evapora y el producto crudo se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice cEx/EtOAc 7:3). Se obtiene el ejemplo 5-1-6 como un sólido blanco (1 1 mg, 0.024 mmoles, 60%).

Todos los datos analíticos se establecen en el siguiente cuadro 1.

(Xla) CUADRO 1 EJEMPLO 6 Síntesis de los compuestos representativos de estructura (Xib) Intermediario 20 4-Cloro-3-(2-metoxivin¡n-6-met¡l-1 -( 1 -propilbutil)-1 /-/-pirroli3,2-clpiridina A una solución de cloruro de (metoximetil)-trifenilfosfonio (70 mg, 3 equivalentes) en 1 mi de THF anhidro a 0°C, bajo N2, se agrega a gotas BuLi 1.6M en THF (128 µ?, 3 equivalentes). La mezcla de reacción roja resultante se agita a 0°C durante 10 min y 20 min adicionales a ta. Después la mezcla de reacción se enfría a 0°C y se agrega a gotas una solución de 4-cloro-6-metil-1 -(1 -propilbuti!)-1 H-pirrol[3,2-c]piridin-3-carbaldehído (que se prepara siguiendo los procedimientos indicados en J. Heterocyclic Chem.; 1996, 33, 303; J. Heterociclic Chem.; 1992, 29, 359; Heterocycles; 2000, 53, 1 1 , 2415; tetrahedron; 1985, 41 , 10, 1945. datos analíticos: RMN-1H (DMSO): d 8.40 (s, 1 H), 7.70 (s, 1 H), 10.4 (s, 1 H), 2.53 (s, 3H), 4.57 (m, 1 H), 1.92/1.79 (m/m, 4H), 1.70/0.90 (m/m, 4H), 0.77 (t, 6H); EM (m/z): 293 [MHf) (20 mg, 0.068 mimóles) en 1 mi de THF anhidro. La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 1 h. Después se agregan 3 mi de agua y el producto se extrae con EtOAc (3 x 5 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 5 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo, el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 95:05). Se obtiene el intermediario 20 como un aceite amarillo (15 mg, 0.046 mmoles, 70%). RMN-1H (CDCI3): d (trans) 6.98 (s, 1 H), 2.59 (s, 3H), 6.69 (s, 1 H), 6.81 (d, 1 H), 6.40 (d, 1 H), 4.21 (m, 1 H), 1.82 (m, 4H), 1.53 (m, 4H), 0.85 (dt, 6H), 3.83 (s, 3H0; (cis) 6.94 (s, 1 H), 2.59 (s, 3H), 7.62 (s, 1 H), 4.21 (m, 1 H), 1.82 (m, 4H), 1.53 (m, 4H), 0.85 (dt, 6H), 6.19 (d, 1 H), 6.30 (d, 1 H), 3.72 (s, 3H). EM (m/z): 321 [MH]+.

Intermediario 21 í4-Cloro-6-metil-1-(1-propilbutil)-1 H-pirrolí3,2-c1piridin-3-ill-acetaldehído A una solución del intermediario 20 (85 mg, 0.26 mmoles) en 2 mi de THF anhidro a 0°C bajo N2 se agregan a gotas 2 mi de HCI 2N. La mezcla de reacción amarilla resultante se agita a 70°C durante 1.5 h. Después se agrega 1 mi de NaHC03 acuoso saturado y el producto se extrae con EtOAc (3 x 5 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 5 mi) y se secan sobre Na2S0 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo, el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 8:2). Se obtiene el intermediario 21 como un aceite amarillo (55 mg, 0.179 mmoles, 70%). RMN-1H (CDCI3): d 9.85 (s, 1 H), 7.07 (s, 1 H), 7.01 , (s, 1 H), 4.21 (m, 1 H), 4.04 (s, 2H), 2.60 (s, 3H), 1.82 (m, 4H), 1 .16 (m, 4H), 0.85 (dt, 6H). EM (m/z): 307 [MH]+.

Intermediario 22 f4-Cloro-6-metil-1 -(1-propilbutin-1 H-pirroir3,2-c1piridin-3-ill-etanol A una solución del intermediario 21 (53 mg, 0.173 mmoles) en 4 mi de MeOH anhidro a 0°C bajo N2 se agregan NaBH4 (13.1 mg, 2 equivalentes). La mezcla de reacción se agita a 0°C durante 1 h. Después se agrega 1 mi de agua y el producto que se extrae con EtOAc (3 x 5 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 5 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo, el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 7:3). Se obtiene el intermediario 22 como un aceite amarillo (49.8 mg, 0.161 mmoles, 93%).

RMN- H (DMSO): d 7.37 (s, 1 H), 7.33 (s, 1 H), 4.63 (t, 1 H), 3.64 (t, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.44 (s, 3H), 1.77 (m, 4H), 0.89-1.79 (m, 4H), 0.77 (t, 6H). EM (m/z): 309 [MH]+.

Intermediario 23 3- 2-(terbutildimetilsilaniloxi)-etill-4-cloro-6-metil-1-(1-propilbütin-1 H-pirrol[3,2-clpiridina A una solución del intermediario 22 (49.8 mg, 0.173 mmoles) en 2 mi de DMF anhidra a 0DC bajo N2 se agregan imidazol (1 10 mg, 10 equivalentes), TBSCI (67 mg, 2.8 equivalentes) y DMAP (2 mg, 0.1 equivalentes). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante la noche. Después se agrega 1 mi de agua y el producto se extrae con Et^O (3 5 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 5 mi) y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo, el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 9:1 ). Se obtiene el intermediario 23 como un aceite amarillo (65 mg, 0.154 mmoles, 95%). RMN-1H (DMSO): d 6.95 (s/s, 1/1 H), 4.17 (m, 1 H), 3.91 (t, 2H), 3.16 (t, 2H), 2.58 (s, 3H), 1.80 (m, 4H), 1 .14-1.05 (m/m, 4H), 0.88 (s, 9H), 0.85 (t, 6H), 0.00 (s, 6H). EM (m/z): 423 [MH]+.

Intermediario 24 (2,4-Bistrifluorometilfenil)-f3-r2-(terbutildimetilsilaniloxi)-etin-6-metil-1-(1-propilbut¡l)-1-1/-/-pirrolí3,2-c1pirid¡n-4-in-am¡na A una mezcla de tris(dibencilidenacetona)paladio(0) (3.7 mg, 0.1 equivalentes), 2-(diciclohexilfosfino)-2'-metilbifen¡lo (4.4 mg, 0.3 equivalentes), y K3PO4 (23 mg, 2.8 equivalentes), se agrega una solución del intermediario 23 (17 mg, 0.04 mmoles) y 2,4-bis(trifluoromet¡l)anilina (18 mg, 2 equivalentes) en 1 mi de DME anhidro a t.a. bajo N2 (frasco de microondas con tapa de apriete). La mezcla de reacción se irradia en un sistema de síntesis de microondas enfocado CEM ( odel Discovery) a 100°C, 150 W, una presión de 414 kPa (60 Psi) durante 20 min (con enfriamiento concomitante). Después se agrega 1 mi de agua y el producto se extrae con Et.20 (3 x 5 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado y se secan sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo, el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 95:05). Se obtiene el intermediario 24 como un aceite amarillo 21 .5 mg, 0.035 mmoles, 88%). RMN-1H (DMSO): d 7.83 (d, 1 H), 7.79 (dd, 1 H), 8.16 (d, 1 H), 8.23 (s, 1 ), 7.22 (s, 1 H), 7.16 (s, 1 H), 2.43 (s, 3H), 4.35 (m, 1 H), 3.77 (t, 2H), 2.94 (t, 2H), 1 .8 (m, 4H), 1.15-0.95 (m/m, 4H), 0.79 (t; 6H), 0.68 (s, 9H), -0.31 (s 6H). EM (m/z): 616 [MH]+.

Intermediario 25 2-r4-(2,4-bistrifluorometilfenil)-6-metil-1 (1 -propilbutiO-1 H-pirroir3,2-c1piridin-3-¡n-etanol A una solución del intermediario 24 (60 mg, 0.097 mmoles) en 5 mi de DMF seca a ta., se agregan Et3N-3HF ( 33 mg, 6µ?, 8.4 equivalentes). La mezcla de reacción se agita a ta. durante la noche. Después se agregan 2 mi de agua y el producto se extrae con EtOAc (3 x 5 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 5 mi) y se seca sobre Na2S04 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo, el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice, cHex/EtOAc 9:1 ). Se obtiene el intermediario 25 como un sólido blanco (24.4 mg, 0.048 mmoles, 50%). RMN-1H (DMSO): d 9.01 (sa, 1 H), 8.07 (d, 1 H), 7.81 (s, 1 H), 7.76 (dd, 1 H), 7.19 (s, 1 H), 7.10 (s, 1 H), 5.19 (sa, 1 H), 4.35 (m, 1 H), 3.63 (m, 2H), 2.88 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.85-1.65 (m, 4H), 1.20,0-90 (m, 4H), 0.80 (m, 6H) EM (m/z): 502 [MH]+.

EJEMPLO 6-1 -1 5-(2,4-Bistrifluorometilfenil)-7-metil-1 -(1 propilbutilH ,3 ,4,5-tetrahidro- 1 ,5,6-triazaacenaftileno A una solución el intermediario 25 (23.4 mg, 0.04 mmoles) en 2 mi de CH2CI2 se seca a t.a. se agregan Et3N (13.5 µ?, 2 equivalentes) y sCI (6.16 µ?, 2 equivalentes). La mezcla de reacción se agita a t.a. durante 2 h. Después se agregan 2 mi de agua y el producto se extrae con CH2CI2 (3 x 5 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavan con NaCI acuoso saturado (1 x 5 mi) y se secan sobre Na2S0 anhidro. Los sólidos se filtran y el solvente se evapora para proporcionar un producto crudo el cual se purifica por cromatografía instantánea (gel de sílice cHex/EtOAc 9:1 ). Se obtiene el ejemplo 6-1-1 como un aceite amarillo (6 mg, 0.012 mmoles, 31 %). Todos los datos analíticos se establecen en el siguiente cuadro 2.

(Xlb) CUADRO 2 EJEMPLO 7 Actividad de Unión del Receptor de CRF Se pueden evaluar los compuestos de esta invención para determinar su actividad de unión al receptor de CRF mediante un ensayo de unión radioligando estándar, como se describe generalmente por DeSouza et al. (J. Neurosci. 7:88-100, 1987). Mediante la utilización de varios ligandos de CRF radiomarcados, se puede utilizar el ensayo para evaluar la actividad de unión de los compuestos de la presente invención con cualquier subtipo de receptor CRF. Brevemente, el ensayo de unión involucra el desplazamiento de un ligando de CRF radiomarcado a partir del receptor de CRF. De manera más específica, el ensayo de unión se realiza en tubos Eppendorf 1.5 mi utilizando aproximadamente 1 x 106 por tubo transfectadas de manera estable con receptores CRF humanos. Cada tubo recibe aproximadamente 0.1 mi de amortiguador de ensayo (por ejemplo, solución salina amortiguada con fosfato de Dulbecco, cloruro de magnesio 10 mM, bacitracina 20 µ?) con o sin sauvagina sin marcar, urotensina I o CRF (concentración final, 1 µ?) para determinar la unión no específica, 0.1 mi de [125l] tirosina-CRF ovina (concentración final -200 p o aproximadamente la KD, determinada por análisis Scatchard) y 0.1 mi de una suspensión de membrana de células que contienen el receptor CRF. La mezcla se incuba durante 2 horas a 22°C seguido por la separación del radioligando unido y libre, por centrifugación. Después de dos lavados del sedimento, los tubos se cortan justo por encima del sedimento y se monitorean en un cortador de radiación ? para determinar radioactividad con una eficiencia de aproximadamente 80%. Todos los datos de unión de radioligando se analizan utilizando el programa de ajuste de curva de mínimos cuadrados no lineal LIGAND de Munson y Rodbard (Anal. Biochem. 107:220, 1990).

EJEMPLO 8 Actividad de Adenilatos Ciclasa Estimulada por CRF Los compuestos de la presente invención también se pueden evaluar mediante diversas pruebas funcionales. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención se pueden someter a un análisis sistemático para determinar actividad de adenilato ciclasa estimulada por CRF. Se puede realizar un ensayo para la determinación de la actividad de adenilato ciclasa estimulada por CRF como se describe generalmente por Battaglia et al. (Synapse 1 :572, 1987), con modificaciones para adaptar el ensayo a preparaciones de células completas. De manera más específica, la mezcla de ensayo estándar puede contener lo siguiente en un volumen final de 0.5 mi: L-glutamina 2 m , HEPES 20 mM e IMBX 1 mM en amortiguador DMEM. En estudios de estimulación, las células completas transfectadas con receptores CRF se siembran en placas, en placas de 24 pozos y se incuban durante 1 h a 37°C con diversas concentraciones de péptidos relacionados o no relacionados con CRF con el fin de establecer el perfil del orden de clasificación farmacológica del subtipo de receptor particular. Después de la incubación, el medio se aspira, los pozos se enjuagan una vez suavemente con medio fresco y se aspira el medio. Para determinar la cantidad de AMPc intracelular, se agregan a cada pozo 300 µ? de una solución de etanol 95% y ácido clorhídrico acuoso 20 mM y las suspensiones resultantes se incuban a -20°C durante 16 a 18 horas. La solución se separa y se coloca en tubos Eppendorf de 1.5 mi y los pozos se lavan con 200 µ? adicionales de la mezcla de etanol/ácido clorhídrico acuoso y se junta con la primera fracción. Las muestras se liofiíizan y después se resuspenden en 500 µ? de amortiguador de acetato de sodio. La medición de AMPc en las muestras se realiza utilizando un equipo de anticuerpo único de Biomedical Technologies Inc. (Stoughton, MA). Para la determinación funcional de los compuestos, una concentración única de CRF o de péptidos relacionados que provoca 80% de estimulación en la producción de AMPc se incuba junto con diversas concentraciones de compuestos competidores (10~12 a 10"6 M). Se apreciará que aunque se han descrito en la presente modalidades específicas de la invención para propósitos de ilustración, se pueden realizar diversas modificaciones sin por esto apartarse del espíritu y alcance de la invención. En consecuencia, la invención no se limita excepto por las reivindicaciones anexas.

Claims (13)

NOVEDAD DE LA I NVENCION REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto que tiene la siguiente estructura: o un estereoisómero, precursor o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque: A es un enlace o C=(Z); X es nitrógeno o CR3; Y es .N= -N(R7)-, -C(R8)= o -O-; Z es O, S o NR9; R-i es alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido; R2 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, halo, ciano, haloalquilo; R3 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, halo o haloalquilo; R4 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, C(0)Ri, arilo, arilo sustituido, heterociclo o heterociclo sustituido; R5 es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, C(0)Ri, NR10R11 o ciano; R6 es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, C(0)Ri, NR10R11 o ciano; R es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido C(0)R , arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido; R8 es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, C(0)alquilo, NR10Rn o ciano; R9 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido; y R10 y Rn son iguales o diferentes y son independientemente hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido.

2. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque X es CR3.

3. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque X es nitrógeno.

4.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque tiene la siguiente estructura: en el que Ri es alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido; R2 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, halo, ciano o haloalquilo; R3 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, halo o haloalquilo; R4 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, C(0)Ri, arilo, arilo sustituido, heterociclo o heterociclo sustituido; R5 es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, C(0)R1, NRi0 n o ciano; R6 es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, C(0)Ri , NR10R11 o ciano; R7 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido C(0)Ri , arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido; Ra es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, C(0)alquilo, NR10R11 o ciano; y R10 y Rn son iguales o diferentes y son independientemente hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido.

5.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque tiene la siguiente estructura: en donde R-? es alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido; R2 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, halo, ciano, haloalquilo; R3 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, halo o haloalquilo; R4 es hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, C(0)R!, arilo, arilo sustituido, heterociclo o heterociclo sustituido; R5 es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, C(0)Ri , NR-ioRn o ciano; Re es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, C(0)Ri , NR10Rn o ciano; R8 es hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, alcoxi, tioalquilo, C(0)alquilo, NR10Rn o ciano; y R10 y Rn son ¡guales o diferentes y son independientemente hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido.

6. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque se selecciona del grupo que consiste de: 7-metil-1-(1-propilbutil)-5-[4-(1 ,1 ,2-trifluoroetil)-2-trifluorometilfenil]-1 ,2,2a,3,4,5-hexah¡dro-1 ,5,6,8-tetraazaacenaft¡leno; 3-metil-4-[7-metil-1-(1-propilbutil)-3,4-dihidro-1 H-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftilen-5-il]-benzonitrilo; 4-[1-(1-etilpropil)-7-metil-3,4-dihidro-1 H-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftilen-5-il]-3-met¡lbenzon¡trilo; 3-cloro-4-[7-met¡l-1 -(1-propilbutil)-3,4-dihidro-1 H-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftilen-5-il]-benzonitrilo; 3-cloro-4-[1 -(1 -etilpropil)-7-metil-3,4-dihidro-1 H-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftilen-5-il]-benzonitrilo; 5-(2,4-bistrifluorometilfenil)-1-(1-etilpropil)-7-metil-1 ,3,4,5-tetrahidro-1 ,5,6,8-tetraazaacenaftileno; 5-(2,4-bistrifluoromet¡lfenil)-7-metil-1-(1-propilbutil)-1 )3,4,5-tetrahidro-1 ,5,6,-triaazaacenaftileno.

7. - Una composición que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , en combinación con un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

8. - El uso de un compuesto de la reivindicación 1 , para preparar un medicamento para tratar un desorden que manifiesta hipersecreción de CRF en un animal homeotérmico.

9. - El uso como se reclama en la reivindicación 8, en donde el desorden es apoplejía.

10. - El uso como se reclama en la reivindicación 8, en donde el desorden es depresión.

11.- El uso como se reclama en la reivindicación 8, en donde el desorden es ansiedad.

12. - El uso como se reclama en la reivindicación 8, en donde el desorden es síndrome de intestino irritable (IBS).

13. - El uso como se reclama en la reivindicación 8, en donde el desorden es enfermedad de intestino inflamatorio (IBD).