MX2014001355A - Inmunoterapia contra el vhc. - Google Patents

Abstract

La invención se refiere al uso de interleucina-7 (IL-7) para tratar hepatitis C en un paciente infectado con el virus de la hepatitis C, en el que dicho paciente se ha tratado o está tratándose con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales que reduce la carga viral.

Description

INMUNOTERAPIA CONTRA EL VHC Campo de la Invención La presente invención se refiere al campo del tratamiento de la hepatitis C. Más en particular proporciona una nueva terapia contra la hepatitis C, usando interleucina-7 (IL-7) .

Antecedentes de la Invención La hepatitis C es la principal causa de enfermedad hepática crónica y sus complicaciones incluyendo fibrosis hepática y cirrosis, fallo hepático y carcinoma hepatocelular .

El virus de la hepatitis C (VHC) es un problema de salud pública importante a nivel mundial. La Organización Mundial de la Salud (OMS) estima que hasta 170 millones de individuos a nivel mundial (un 3 % de la población mundial) están infectados con el virus de la hepatitis C (VHC) , más de 130 millones de estos individuos están infectados crónicamente y en riesgo de desarrollar cirrosis hepática y cáncer de hígado. Aproximadamente cuatro millones de personas se infectan con VHC cada año (World Health Organization. Viral cancers : Hepatitis C. online www.who . int; WHO 2010) .

El estándar de cuidado actual (SOC) para la erradicación del VHC del hígado consiste en terapia con interferón tipo I pegilado (PegIFN) y nucleósido de ribavirina (RBV) sintético (Fried MW et al; N Engl J Med. 2002; 347 ( 13) : 975-82 ; EASL Clinical Practice Guideline: Management of hepatitis C virus infection, J Hepatol . 2011; 55:245-264). Sin embargo, esta terapia estándar tiene una eficacia limitada e impredecible, un perfil de toxicidad extenso que conduce con frecuencia a la interrupción del tratamiento y es muy cara. Menos de la mitad de los individuos infectados crónicamente por el VHC de genotipo 1 y 4 responden al tratamiento a largo plazo (48 semanas) de la terapia estándar (PegIFN/RBV) (Testino G et al; Hepatogastroenterology 2011; 58 ( 106) : 536-8 ) .

Interferón (IFN) es una citocina antiviral muy activa pero es linfopénica, con una baja tolerancia clínica. Así aunque IFN muestra una actividad antiviral, también bloquea la producción y el mantenimiento de células T de memoria central protectora a largo plazo. Esto se traduce a una alta frecuencia de recidivas en pacientes infectados por el VHC crónicos tratados con PegIFN/RBV. Además, en comparación con un grupo control, el tratamiento extendido con peg-interferón en pacientes con hepatitis C crónica avanzada está asociado con mortalidad global excesiva (Di Bisceglie AM et al; Hepatology 2011; 53 (4 ) : 1100-8 ) .

Se han desarrollado nuevos compuestos antivirales que seleccionan como diana la inhibición de diferentes etapas del ciclo de vida del VHC. Varios fármacos antivirales nuevos (inhibidores de moléculas pequeñas de la replicación viral también denominados antivirales de acción directa (DAA) , incluyendo inhibidores de proteasa e inhibidores de polimerasa) para hepatitis C se encuentran actualmente en una fase avanzada de desarrollo. Telaprevir y boceprevir han llegado al mercado (Ghany et al, Hepathology, 2011, 54(4) : 1433-1444) . Estos nuevos agentes antivirales se han sometido a prueba en monoterapia o en terapia de múltiples fármacos con o sin estándar de cuidado (PegIFN/RBV) .

Sin embargo, la monoterapia con antivirales de acción directa generalmente da como resultado el desarrollo de resistencia a fármacos que reduce considerablemente su eficacia y conduce a fallo del tratamiento. La resistencia a fármacos es una limitación significativa al uso de DAA. Por ejemplo, la monoterapia con telaprevir (un inhibidor de NS3/4 proteasa) induce una reducción de la carga viral de cerca del 99 % en el intervalo de dos días del inicio de la terapia pero con frecuencia, aunque continúe el tratamiento, existe un rebote en la carga viral en el intervalo de diez días (Kieffer TL et al; Hepatology; 2007 Sep; 46(3):631-9) debido a la aparición de la resistencia a fármacos (Rong L et al; Sci Transí Med; 2010 May 5; 2 ( 30 ) : 30ra32 ) . La infección crónica se mantiene mediante una elevada tasa de mutación y una rápida producción de virus de la hepatitis C, en su mayor parte en el hígado. Esta alta variabilidad y diversidad del virus de la hepatitis C provoca una resistencia a una o múltiples clases de DAA. Por consiguiente, la mayoría de los tratamientos fallan debido a la replicación de variantes resistentes a agentes antivirales. Por otro lado, los fármacos antivirales de acción directa en monoterapia o terapia de combinación han mostrado su potencial para aumentar la tasa de respuesta y/o acortar la duración de tratamiento, pero únicamente actúan como una terapia aditiva junto con PegIFN/RBV (McHutchison JG et al; N Engl J Med. 2009; 360 (18) : 1827-38) . La eficacia de estas terapias combinadas se ha demostrado únicamente para infección de genotipo 1. Además, inducen más efectos secundarios y aumentan el coste del tratamiento. Finalmente su eficacia sigue siendo incierta en cuanto a cuestiones de resistencia a fármacos potencial.

Varios agentes inmuno-moduladores (entre los cuales se encuentran anticuerpos monoclonales, citocinas tales como el nuevo interferón lambda, vacunas y agonistas de TLR) que pueden estimular una respuesta inmunitaria general y especifica frente al VHC se encuentran también en desarrollo.

Diversos grupos científicos están trabajando actualmente para desarrollar vacunas basadas tanto en células T como anticuerpos para prevenir y también para tratar la infección por el VHC, pero hasta este momento no existen vacunas. Además no puede ser posible desarrollar una vacuna que seleccione como diana todos los genotipos de VHC debido al alto grado de diversidad genética mostrado por el virus.

La IL-7, una citocina que es crítica para el desarrollo de las células T y la homeostasis, ha mostrado una interesante actividad antiviral en modelos preclínicos del VCML crónico (ratones infectados con clon 13 de VCML con viremia de alto nivel persistente), pero su actividad solo se desarrolla a dosis muy altas de IL-7 que no son apropiadas para someter a prueba en pacientes (Pellegrini M et al; Cell 2011; 144 (4) : 601-13) .

A pesar del hecho de que las diversas terapias para controlar el virus se han mejorado durante la pasada década, siguen existiendo limitaciones entre las que se encuentran la duración del tratamiento; la eficacia del tratamiento en la curación de VHC crónico; la tolerabilidad del tratamiento, el coste excesivo y el acceso inadecuado. No todos los pacientes infectados por el VHC se benefician del tratamiento antiviral. Ninguno de los tratamientos propuestos hasta ahora pueden ofrecer una amplia tasa de respuesta durante un plazo muy corto (semanas) - junto con un efecto prolongado que proporciona protección frente a recidivas. Actualmente, los pacientes infectados por el VHC que no responden tienen opciones de tratamiento limitadas. Por tanto se necesita una terapia mejorada para tratar la infección por el VHC y enfermedades y muertes relacionadas con el VHC.

Sumario de la Invención La invención propone la inmunoterapia con IL-7 para estimular una respuesta inmunitaria eficaz contra un virus VHC, en combinación con un tratamiento antiviral corto que reduzca la concentración del virus VHC circulante.

La invención proporciona IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C en un paciente infectado con el virus de la hepatitis C, en combinación o posteriormente, con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales.

Preferentemente el agente antiviral o combinación de agentes antivirales está en una cantidad terapéuticamente eficaz que reduce la carga viral del VHC a menos de 5 Logio IU/ml, preferentemente menos de 4 Logio IU/ml, más preferentemente menos de 3 Logio IU/ml.

En una realización preferente, IL-7 se usa en un paciente que se ha tratado con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales, de modo que se reduce la carga viral, antes de la administración con IL-7.

Por tanto se proporciona un nuevo régimen terapéutico para tratar o inhibir la infección de hepatitis C en un sujeto humano que lo necesita, que comprende: administrar un tratamiento antiviral para reducir la carga viral de hepatitis C y administrar una composición farmacéutica de interleucina-7 para restablecer las funciones inmunitarias y proporcionar una curación duradera tras la interrupción de la terapia.

Preferentemente, el agente antiviral o combinación de agentes antivirales reduce la carga viral a menos de 5 Logio IU/ml, preferentemente menos de 4 Logio IU/ml, más preferentemente menos de 3 Logio IU/ml, antes de la administración con IL-7.

El agente antiviral se selecciona ventajosamente del grupo que consiste en un interferón, un inhibidor de proteasa, un inhibidor de polimerasa, un inhibidor de la entrada de virus, un inhibidor de helicasa y ribavirina, o combinaciones de los mismos.

En otras palabras, la invención se refiere al uso de interleucina-7 (IL-7), para la fabricación de un medicamento para tratar hepatitis C en un paciente infectado con el virus de la hepatitis C, en combinación o posteriormente, con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales.

Se describe un procedimiento para tratar hepatitis C en un paciente infectado con el virus de la hepatitis C (VHC) , procedimiento que comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un agente antiviral o de una combinación de agentes antivirales de modo que se reduzca la carga viral del VHC, mientras que se administra al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de IL-7 de modo que se estimule una respuesta inmunitaria eficaz contra el virus residual.

En una realización particular, el tratamiento con el agente antiviral o la combinación de agentes antivirales se inicia simultáneamente con el tratamiento con IL-7, y se mantiene durante al menos parte del tratamiento con IL-7, preferentemente durante de 6 a 12 semanas.

En otra realización, el tratamiento con el agente antiviral o la combinación de agentes antivirales se inicia antes del tratamiento con IL-7, y se mantiene durante al menos parte del tratamiento con IL-7, preferentemente durante de 6 a 12 semanas.

En otra realización, el tratamiento con el agente antiviral o la combinación de agentes antivirales se inicia una semana después del tratamiento con IL-7, y se mantiene durante al menos parte del tratamiento con IL-7, preferentemente durante de 6 a 12 semanas. Este régimen puede ser útil especialmente cuando el agente antiviral es un interferón. De hecho, ya que interferón es linfopénico, iniciar la terapia con IL-7 una semana antes puede ayudar al sistema inmunitario a responder de manera eficaz.

La invención hace posible inducir una respuesta inmunitaria antiviral amplia y estable que selecciona como diana muchas cuasi especies virales, que bloquea el escape viral mediante mutación y que previene la recidiva del VHC tras completar o interrumpir el tratamiento.

La invención permite ampliar el repertorio de la respuesta inmunitaria especifica en los pacientes (es decir la diversidad del repertorio de TCR se amplia) . Esto da como resultado la prevención de recidivas .

Se desarrolla una respuesta antiviral rápida y eficaz y se obtiene un aclaramiento viral.

Además, la protección sostenida se consigue y se soporta mediante la producción de células T de memoria central a largo plazo especificas para el virus huésped (paciente) .

Breve Descripción de las Figuras de la Invención La figura 1 es una gráfica que muestra la evolución de la carga viral del VHC tal como se determina mediante cuantificación de ARN del VHC con respecto al tiempo (días) en 12 pacientes sometidos a 52 semanas de terapia estándar con pegIFN+RBV (ribavirina) (iniciada 9 semanas (en promedio) antes de la terapia con IL-7 para confirmar la ausencia de respuesta a la terapia estándar) , a la que se añadió un ciclo corto de IL-7 (CYT107) (10 g/kg, una vez a la semana, durante 4 semanas comenzando el día 0) .

Los pacientes que aclararon el virus VHC redujeron su carga viral del VHC en 2 Logio IU/ml (media) entre selección y DO y tenían una carga viral inferior a 5 Logio IU/ml antes de la terapia con IL-7.

La figura 2 es una gráfica que muestra la evolución de la diversidad de células T en 12 pacientes sometidos a terapia estándar con pegIFN+RBV (ribavirina) de 52 semanas (iniciada 9 semanas (en promedio) antes de la terapia con IL-7 para confirmar la ausencia de respuesta a la terapia estándar) , a la que se añadió un ciclo corto de IL-7 (CYT107) (10 µg/kg, una vez a la semana, durante 4 semanas comenzando el día 0) . 5/12 pacientes eran divpénicos, lo que implica que mostraron una reducción de moderada a grave de la diversidad inmunitaria, antes de la terapia con IL-7. Tras la terapia con IL-7, la diversidad de células T normal se restableció en todos los pacientes y permaneció estable al menos hasta D56.

Descripción detallada de la invención: Se describe en el presente documento un procedimiento para tratar hepatitis C en un paciente infectado con un virus VHC, procedimiento que comprende administrar interleucina-7 (IL-7) como terapia añadida en dicho paciente.

Sorprendentemente, sometiendo a prueba diversas asociaciones en diversas poblaciones de pacientes, los inventores han encontrado que mientras la terapia con IL-7 parece inactiva en infección por VHC crónica y no puede aclarar el virus en pacientes con cargas virales altas comúnmente observadas (es decir 7A N del VHC superior a 5 Logio IU/ml, generalmente entre 5 a 7 Logi0 IU/ml) , si un agente antiviral se usa para reducir la carga viral hasta niveles de moderados o bajos (es decir ARN del VHC inferior a 5 Logio IU/ml, preferentemente inferior a 4 Logio IU/ml) entonces una terapia con IL-7 aditiva corta puede (1) desarrollar una actividad antiviral interesante y aclarar rápidamente el virus en la mayoría de pacientes, (2) ampliar el recuento, la diversidad y la funcionalidad de células T, e (3) inducir una respuesta inmunitaria eficaz y estable, evitando una recidiva del VHC tras interrumpir o completar el tratamiento. La terapia con IL-7 aditiva puede prevenir también la fibrosis hepática asociada con la hepatitis C y minimizar el riesgo de cirrosis .

Esto se demostró bien en pacientes con VHC crónicos, identificados previamente como que no responden a la terapia estándar (PegIFN/RBV) , que mostraron una reducción moderada en su carga viral tras la re-introducción de la terapia estándar y aclararon el virus con la adición de la terapia con IL-7 cuando la carga viral disminuyó por debajo de 4 Logio IU/ml.

La hepatitis C es una hepatitis viral que resulta de una infección por un virus de la hepatitis C (VHC) . En el presente documento se contempla cualquier cepa o genotipo (1, 2, 3, 4, 5, 6) de VHC. Preferentemente, el paciente se infecta con genotipo de VHC 1 ó 4.

En el contexto de la invención, el término "tratar" o "tratamiento", tal como se usa en el presente documento, significa curar, invertir, aliviar, inhibir el progreso de, o prevenir el trastorno o la afección a los que se aplica tal término, o uno o más síntomas de tal trastorno o afección. El término "curar" preferentemente significa que se observa aclaramiento viral.

Por "reducir la carga viral" se quiere decir reducir la cantidad de virus VHC circulante que puede medirse, por ejemplo mediante RT-PCR cuantitativa. La carga viral se expresa en Logio IU/ml.

De acuerdo con la invención, el término "paciente" o "paciente que lo necesita" está destinado a un mamífero humano o no humano infectado o que probablemente va a infectarse con el VHC. El paciente puede ser un hombre o una mujer, de cualquier edad, incluyendo niños o adolescentes. El paciente puede ser asintomático o puede mostrar signos tempranos o avanzados de hepatitis. En una realización particular, el paciente muestra una carga viral del VHC alta cuando éste inicia el tratamiento con el agente antiviral. Una "carga viral del VHC alta" significa generalmente superior a 2 Logio IU/ml, todavía preferentemente superior a 3 Logio IU/ml, más preferentemente superior a 4 Logio IU/ml, todavía más preferentemente superior a 5 Logio IU/ml.

En otra realización, cualquier paciente, independientemente de su carga viral del VHC, puede beneficiarse del tratamiento de la invención.

Agentes anti virales : La carga viral del VHC se reduce hasta por debajo aproximadamente de 5 Logio IU/ml, preferentemente hasta por debajo de aproximadamente 4 Logio IU/ml, más preferentemente hasta por debajo de aproximadamente 3 Logio IU/ml durante una primera fase de tratamiento con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales.

En una realización particular, el agente antiviral puede incluir interferón, ribavirina, inhibidores de la VHC proteasa, inhibidores de VHC polimerasa (incluyendo inhibidores nucleosidicos, nucleotidicos y no nucleosidicos de la polimerasa) , inhibidores de entrada de virus VHC, inhibidores de helicasa y una combinación de los mismos. Interferón (IFN) incluye, pero no se limita a, IFN alfa, pegilado o no, que comprende una variante de IFN alfa tal como IFN alfa-2a o IFN alfa-2b, IFN lambda o IFN omega, especialmente interferón alfa-2a, e incluso preferentemente interferón alfa-2a pegilado, combinado o no con ribavirina. El interferón alfa-2a pegilado combinado con ribavirina es actualmente el tratamiento estándar. Las combinaciones de interferón, asociado o no con ribavirina, con inhibidores de la VHC proteasa o inhibidores de la VHC polimerasa, se contemplan también. Como alternativa, las combinaciones de antivirales de acción directa (DAA) , preferentemente al menos un inhibidor de la VHC proteasa y al menos un inhibidor de la VHC polimerasa, pueden usarse como agentes antivirales.

En términos generales, el tratamiento antiviral puede comprender cualquiera de los fármacos mencionados a continuación, especialmente interferón, ribavirina, inhibidores de la VHC proteasa, inhibidores de la VHC polimerasa (incluyendo inhibidores nucleosidicos , nucleotidicos y no nucleosidicos de la polimerasa) , inhibidores de entrada, inhibidores helicasa, y otros agentes anti-hepatitis C o combinaciones de los mismos: (1) interferón y/o ribavirina; (2) inhibidores de NS3 proteasa a base de sustrato (documento WO 98/22496) ; (3) inhibidores a base de no sustrato tales como derivados de 2, 4, 6-trihidroxi-3-nitro-benzamida (Sudo K. et al., Biochemical and Biophysical Research Communications, 238:643-647 (1997); Sudo K., et al. Antiviral Chemistry and Chemotherapy, 9:186 (1998)), incluyendo RD3-4082 y RD3-4078, el primero sustituido en la amida con una cadena de carbono 14 y procesando el último un grupo para-fenoxifenilo; (4) derivados de tiazolidina, que muestran inhibición relevante en un ensayo de HPLC de fase inversa con una proteina de fusión NS3/4A y sustrato NS5A/5B (Sudo K. et al., Antiviral Research, 32: 9-18 (1996)), especialmente compuesto RD-1-6250, que tiene un resto cinamoilo fusionado sustituido con una cadena alquilica larga, RD4 6205 y RD4 6193; (5) tiazolidinas y benzanilidas , identificadas en Kakiuchi N. et al. J. FEBS Letters 421, 217-220; y Takeshita N. et al. Analytical Biochemistry, 247: 242-246 (1997); (6) una fenantrenoquinona, que tiene actividad contra proteasa en un SDS-PAGE y ensayo auto-radiográfico y se aisla del caldo de cultivo de fermentación de Streptomyces sp., Sch 68631 (Chu M. et al., Tetrahedron Letters, 37: 7229-7232 (1996)), y Sch 351633, aislado del hongo Penlcilllum gríseofuluum, que demuestra actividad en un ensayo de proximidad de centelleo; (7) inhibidores de NS3 selectivos basados en la macromolécula elgin c, aislada de sanguijuela (Qasim M. A. et al., Biochemistry, 36: 1598-1607 (1997) ); (8) inhibidores de helicasa (patente estadounidense n.° 5.633.358); (9) inhibidores de la polimerasa, tales como análogos de nucleótidos, gliotoxina (Ferrari E. et al., Journal de Virology, 73:1649-1654 (1999)), y el producto natural cerulenina (Lohmann V. et al., Virology, 249: 108-118 (1998)); (10) oligodesoxinucleótidos de fosforotioato antisentido (S-ODN) complementarios a tramos de secuencia en la región no codificante en 5' (NCR) del virus, o nucleótidos 326-348 que comprenden el extremo 3' de la NCR y nucleótidos 371-388 ubicados en la región que codifica el núcleo del ARN del VHC; (11) inhibidores de la traducción dependiente de IRES; (12) ribozimas resistentes a nucleasas; y (13) compuestos variados incluyendo l-amino-alquilciclohexanos (patente estadounidense n.° 6.034.134 concedida a Gold et al.), alquil-lipidos (patente estadounidense n.° 5.922.757 concedida a Chojkier et al.), vitamina E y otros antioxidantes (patente estadounidense n.° 5.922.757 concedida a Chojkier et al.), escualeno, amantadina, ácidos biliares (patente estadounidense n.° 5.846.964 concedida a Ozeki et al.), ácido N- ( fosfonoacetil ) -L-aspártico, (patente estadounidense n.° 5.830.905 concedida a Diana et al.), bencenodicarboxamidas (patente estadounidense n.° 5.633.388 concedida a Diana et al.), derivados de ácido poliadenilico (patente estadounidense n.° 5.496.546 concedida a Wang et al.), 2 ' , 3 ' -didesoxi-inosina (patente estadounidense n.° 5.026.687 concedida a Yarchoan et al.), y bencimidazoles (patente estadounidense n.° 5.891.874 concedida a Colacino et al.) .

- - Más recientemente, otros fármacos anti-virales, también denominados antivirales de acción directa (DAA) , se han desarrollado, principalmente dependiendo de enzimas polimerasa y proteasa como dianas, y que pueden usarse también como agentes antivirales: (1) Inhibidores de proteasa tal como telaprevir (VX-950) que es un inhibidor peptidomimético especifico de NS3/NS4a proteasa (Reesink HW Gastroenterology 2006, 131:997-1002) y boceprevir (SCHS03034) (Sarrazin C Gastroenterology 2007, 132:1270-1278). Otros inhibidores de proteasa de interés incluyen danoprevir, vaniprevir. (2) Inhibidores de polimerasa de análogos ribonucleosidicos 2' y 3' sustituidos tales como valopicitabina, un profármaco del análogo nucleosidico 2-C-metilcitidina (NM283) (Pierra C J med chem. 2006, 49:6614-6620), e inhibidores de la 7ARN polimerasa dependientes de 7ARN no nucleosidico, tales como derivados de bencimidazol JTK-109 y JTK-003 (Tomei L. J Virology 2004, 78 (2) : 938-946) .

Los inhibidores de polimerasa no nucleosidicos incluyen tegobuvir, filibuvir.

Los inhibidores de polimerasas nucleosidicos o nucleotidicos incluyen RG7128, PSI-7977.

También se han desarrollado moduladores inmunitarios que pueden inducir una respuesta anti-viral, incluyendo los agonistas de receptor tipo Toll tales como isatoribina (TLR7) (Horsmans Y, Hepatology 2005, 42:724-731), resiquimod (TLR7 y 8) (Pockros PJ, Hepatology 2007, 47:174-182), y CPG10101 (TLR9) (McHutchison JG, Hepatology 2007, 46:1341-1349).

El agente antiviral preferentemente es un antiviral de acción directa (D7AA) o interferón o ribavirina, se usa o bien - - solo, junto o en combinación con otros agentes antivirales. Telaprevir y boceprevir son inhibidores de proteasa preferidos útiles en la presente invención.

Las combinaciones preferidas incluyen (i) interferón y ribavirina, (ii) interferón, ribavirina y DAA(s), (iii) interferón y DAA(s), (iv) ribavirina y DAA(s).

Los interferones (IFN) son una familia de citocinas bien conocida secretadas por una gran variedad de células eucariotas tras la exposición a diversos mitógenos. Los interferones se han clasificado por sus características químicas y biológicas en cuatro grupos: IFN-alfa (leucocitos), IFN-beta (fibroblastos), IFN-gamma (linfocitos) y IFN-lambda. IFN-alfa y beta se conocen como interferones de tipo I; IFN-gamma se conoce como interferón de tipo II o inmunitario e IFN-Lambda se conoce como interferón de tipo III. Los IFN de tipo I y los IFN de tipo III muestran actividades biológicas notablemente similares. Los IFN de tipo III (interferón lambda (IFN-?) o interleucina-28/29), muestran actividades de tipo IFN, aunque ejercen su acción a través de un complejo receptor distinto de los IFN de tipo I. Los IFN muestran actividades anti-virales, inmuno-reguladoras y anti-proliferativas . En la presente invención, el interferón que va a usarse preferentemente es interferón-alfa .

Los interferones-alfa adecuados típicos incluyen, pero no se limitan a, IFNDa-2b recombinante tal como interferón INTRON A disponible de Schering Corporation, Kenilworth, N.J., IFNa-2a recombinante tal como interferón ROFERON® disponible de Hoffmann-La Roche, Nutley, N.J., IFN- -2c - - recombinante tal como alfa 2 interferón Berofor® disponible de Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc., Ridgefield, Conn. IFN-a??, una combinación purificada de interferones alfa naturales tales como SUMIFERON® disponible de Sumitomo, Japón o como IFN-a?? WELLFERON® (INS) disponible de Glaxo-Wellcome Ltd., Londres, Gran Bretaña, o un interferón alfa consenso tal como los descritos en las patentes estadounidenses n.os 4.897.471 y 4.695.623 (especialmente ejemplos 7, 8 ó 9 de los mismos) y el producto especifico disponible de Amgen, Inc., Newbury Park, Calif., o IFN-ocn3, una mezcla de interferones alfa naturales preparada por Interferón Sciences y disponible de Purdue Frederick Co . , Norwalk, Conn., como ALFERON® o interferón alfa recombinante disponible de Frauenhoffer Institute, Alemania o que está disponible de Green Cross, Corea del Sur.

Se prefiere usar IFNDD -2b o IFNDa-2a. En una realización más preferida, el interferón está en forma pegilada. Un interferón pegilado es un conjugado de interferón modificado con polietilenglicol .

Se prefiere conjugado de polietilen-glicol-interferón alfa-2a (véase el documento EP 809 996), tal como PEGASYS® .

Puede usarse también interferón lambda pegilado (tal como se ha desarrollado por Bristol Myers Squibb por ejemplo) .

Además, interferón puede fusionarse o conjugarse para dar una proteína tal como albúmina. Por ejemplo, albúmina-interferón alfa-b (alb-IFN) (Albuferon®) es una molécula polipeptídica que combina la actividad terapéutica de interferón alfa con la semivida larga de albúmina sérica humana .

En una realización todavía preferida se usa interferón no más de seis semanas, especialmente se usa interferón no más de tres semanas tras el tratamiento con IL-7.

De hecho, en la presente invención, el agente antiviral es preferentemente un agente antiviral de acción directa (D7AA) que selecciona como diana el genotipo viral del VHC del paciente tal como un inhibidor de proteasa o un inhibidor de polimerasa, y preferentemente una combinación de los mismos. Interleucina 7: Dentro del contexto de la presente invención, "IL-7" designa un polipéptido de IL-7 mamífero (por ejemplo humano, simio, bovino, equino, felino o canino) . Más preferentemente, el polipéptido de IL-7 es un polipéptido de IL-7 humano.

Los polipéptidos de IL-7 humanos preferidos de esta invención comprenden una secuencia de aminoácidos tal como se ha descrito en el documento EP 314 415 o en el documento WO 2004/018681 A2, también como cualquier variante y homologo natural de la misma. La secuencia de IL-7 humana está también disponible en bancos de genes. La proteína de tipo natural típica comprende 152 aminoácidos y, opcionalmente, un residuo de metionina N-terminal adicional. Las variantes de la misma incluyen, más preferentemente, variantes alélicas naturales que resultan del polimorfismo natural, incluyendo SNP, variantes de corte y empalme, etc.

El polipéptido de IL-7 usado en la presente invención es preferentemente una IL-7 recombinante . El término "recombinante", tal como se usa en el presente documento, significa que el polipéptido se obtiene o se deriva de un sistema de expresión recombinante, es decir, de un cultivo de - - células huésped (por ejemplo, microbianas o de insectos o plantas o mamíferos) o de plantas o animales transgénicos modificados mediante ingeniería genética para que contengan una molécula de ácido nucleico que codifica un polipéptido de IL-7. "Microbiana" se refiere a proteínas recombinantes preparadas en sistemas de expresión bacterianos. "De mamíferos" se refiere a glicoproteínas recombinantes preparadas en sistemas de expresión mamíferos. Todas estas células huésped deberían expresar preferentemente o bien de manera natural o tras la transgénesis un gen de glicosiltransferasa y/o sialiltransferasa apropiado. El polipéptido de IL-7 puede glicosilarse también por medio del uso de moléculas de glicosiltransferasa y/o sialiltransferasa apropiadas in vitro o in vivo, o mediante injerto de estructuras de oligosacáridos . Se prefieren células CHO.

Un ejemplo específico de un polipéptido de IL-7 humano es un polipéptido de SEC ID NO: 1 que comprende los puentes disulfuro Cys2-Cys92; Cys34-Cysl29 y Cys47-Cysl41, tal como se ha descrito en el documento EP 1 527 179.

También, los polipéptidos de IL-7 de la presente invención pueden comprender la secuencia de un polipéptido de IL-7 maduro, o además comprenden residuos de aminoácidos adicionales, tales como un péptido de secreción, por ejemplo. Los ejemplos preferidos de tales péptidos de secreción incluyen, sin limitación, un péptido señal seleccionado del grupo que consiste en el péptido señal de EPO, péptido señal de SEAP, péptido señal de IgGkappa, péptido señal de lactotransferina/vitronectina, péptido señal de VIP/vitronectina y péptido señal de citostatina-bis .

En una realización preferente, IL-7 está en forma hiperglicosilada, tal como se ha descrito en el documento WO 2007/010401.

Dentro del contexto de la presente invención, el término "IL-7 hiperglicosilada" designa un polipéptido de IL-7 que tiene al menos tres residuos de aminoácidos glicosilados, un punto isoeléctrico promedio inferior a 6,5 y un peso molecular promedio superior a 27 KDa tal como se determina mediante electroforesis en gel-SDS .

La estructura y el número de unidades de oligosacáridos unidas a un sitio de glicosilación particular en el polipéptido de IL-7 hiperglicosilado pueden ser variables. Éstas pueden ser, por ejemplo, N-acetil-glucosamina, N-acetil-galactosamina, mañosa, galactosa, glucosa, fucosa, xilosa, ácido glucurónico, ácido idurónico y/o ácidos siálicos .

Más preferentemente, los polipéptidos de IL-7 hiperglicosilados comprenden cadena (s) de hidratos de carbono unida (s) en N y/o unida (s) en O seleccionada ( s ) de: a) una cadena de azúcar de tipo mamífero, preferentemente del tipo expresado por las células CHO; b) una cadena de azúcar que comprende una cadena de N-hidrato de carbono compleja (por ejemplo, una estructura triantenaria o biantenaria) , más preferentemente que contiene moléculas de mañosa y acetilglucosamina de alto peso molecular y residuos de ácido siálico terminales de alto peso molecular; c) una cadena de azúcar que comprende una cadena de 0-hidrato de carbono sin y preferentemente con un residuo de ácido siálico terminal; d) una cadena de azúcar sialilada mediante alfa2, 6-sialiltransferasa o alfa2 , 3-sialiltransferasa; y/o - - e) una cadena de azúcar sialilada que muestra entre 3 y 30 sialil-N-acetilgalactosamina, preferentemente de 7 a 23.

La (s) cadena (s) de hidrato de carbono preferida (s) en particular comprende (n) una estructura triantenaria o biantenaria con sialilación terminal parcial o completa. Además las cadenas de hidrato de carbono preferidas comprenden estructuras triantenarias y tri o bi-sialilación y/o una estructura diantenaria con disialilación .

El polipéptido de interleucina-7 hiperglicosilado de interés tiene ventajosamente un punto isoeléctrico promedio inferior a 6,5 y un peso molecular aparente promedio superior a 27 kDa, entre 28 KDa y 65 KDa (teórico para una glicosilación 7N + 10) , preferentemente entre 28 KDa y 35 KDa (tal como se muestra para una glicosilación 3N + 10) , mediante electroforesis en gel (confirmada por inmunotransferencia tipo Western) que se traduce a 25 kDa mediante análisis de espectrometría de masas.

Un "sitio de glicosilación" designa cualquier residuo de aminoácido o región en un polipéptido que se somete a glicosilación, es decir, la unión de una estructura de hidrato de carbono. Tales sitios son normalmente sitios de N-glicosilación (es decir, cualquier residuo de aminoácido o región en un polipéptido que permite la unión de una estructura de hidrato de carbono a través de un enlace con N) y/o sitios de O-glicosilación (es decir, cualquier residuo de aminoácido o región en un polipéptido que permite la unión de una estructura de hidrato de carbono a través de un enlace con 0) . Las secuencias consenso para sitios de glicosilación se conocen por sí en la técnica. Como ilustración, un sitio de N-glicosilación consenso tiene normalmente la siguiente estructura: Asn-X-Ser/Thr, en la que X es cualquier aminoácido excepto prolina. Tales sitios de glicosilación pueden estar presentes o bien de manera natural dentro de una secuencia de polipéptido de IL-7 y/o puede añadirse o crearse de manera artificial dentro de dicha secuencia.

Una composición de IL-7 preferida útil en la presente invención comprende al menos el 80 % de polipéptidos recombinantes de IL-7 humanos que tienen al menos tres residuos de aminoácidos glicosilados, un punto isoeléctrico promedio inferior a 6, 5 y un peso molecular promedio superior a 27 KDa tal como se determina mediante electroforesis en gel-SDS y que comprenden los puentes disulfuro Cys2-Cys92; Cys34-Cysl29 y Cys47-Cysl41.

Los polipéptidos de IL-7 preferentemente están N-glicosilados en al menos tres residuos de aminoácidos distintos .

En otra realización preferida, IL-7 está fusionada a otra entidad de proteina. Ciertos ejemplos de proteínas de fusión de IL-7 se describen en el documento WO2005/063820. Por ejemplo está en forma de una proteina de fusión de IL-7 tal como (1) una IL-7 unida funcionalmente a una parte Fe de una cadena pesada de IgG, normalmente a través de una región de bisagra peptidica y el resto IgG es preferentemente una IgGl o IgG4 humana tal como se describe en el documento WO2007/010401, (2) una proteína de fusión tal como se describe en las patentes estadounidenses 7.323.549 y 7.589.179, y la solicitud de patente estadounidense 20090010875, (3) una IL-7 asociada funcionalmente a una albúmina sérica humana ("HSA") o una parte de una HSA, como proteína de fusión, tal como se describe en el documento WO2007/010401, o (4) una IL-7 asociada funcionalmente al factor de crecimiento humano (HGF) o una parte del mismo, como proteina de fusión.

Están englobadas las variantes de IL-7 que muestran identidad de secuencia de aminoácidos sustancial con respecto a IL-7 de mamífero maduras de tipo natural y actividad biológica sustancialmente equivalente, por ejemplo, en bioensayos estándares o ensayos de afinidad de unión al receptor de IL-7. Por ejemplo, IL-7 se refiere a una secuencia de aminoácidos de un polipéptido recombinante o no recombinante que tiene una secuencia de aminoácidos de: i) una variante alélica nativa o que se produce de manera natural de un polipéptido de IL-7, ii) un fragmento biológicamente activo de un polipéptido de IL-7, iii) un análogo polipeptídico biológicamente activo de un polipéptido de IL-7, o iv) una variante biológicamente activa de un polipéptido de IL-7.

Una "variante" de una proteína de IL-7 se define como una secuencia de aminoácidos que está alterada en uno o más aminoácidos. La variante puede tener cambios "conservativos", en los que un aminoácido sustituido tiene propiedades químicas o estructurales similares, por ejemplo, sustitución de leucina con isoleucina. Más raramente, una variante puede tener cambios "no conservativos", por ejemplo sustitución de una glicina con un triptófano. Ciertas variaciones minoritarias similares pueden incluir también deleciones o inserciones de aminoácidos o ambas. La guía para determinar cuáles y cuántos residuos de aminoácidos pueden sustituirse, insertarse o delecionarse sin suprimir la actividad biológica puede encontrarse usando programas informáticos bien - - conocidos en la técnica, por ejemplo software para modelación molecular o para producir alineaciones. Las proteínas de IL-7 variantes incluidas dentro de la invención incluyen proteínas de IL-7 que conservan la actividad de IL-7. Los polipéptidos de IL-7 que además incluyen adiciones, sustituciones o deleciones están incluidos también dentro de la invención siempre que las proteínas conserven la actividad de IL-7 biológica equivalente sustancialmente . Por ejemplo, truncamientos de IL-7 que conservan la actividad biológica comparable como la forma de longitud completa de la proteína de IL-7 están incluidos dentro de la invención. La actividad de la proteína de IL-7 puede medirse usando ensayos de proliferación celular in vitro. La actividad de las variantes de IL-7 de la invención mantienen la actividad biológica de al menos el 30%, al menos el 40%, 50%, 60%, 70%, preferentemente al menos el 80%, 90% , 95% o incluso el 99% en comparación con la IL-7 de tipo natural.

Las proteínas de IL-7 variantes también incluyen polipéptidos que tienen al menos aproximadamente el 70%, 75%, 80% , 85%, 90%, 95% más de identidad de secuencia con la IL-7 de tipo natural. Para determinar el porcentaje de identidad de dos secuencias de aminoácidos o de dos ácidos nucleicos, las secuencias se alinean para fines de comparación óptima (por ejemplo, pueden introducirse huecos en la secuencia de una primera secuencia de aminoácidos o ácido nucleico para el alineamiento óptimo con una segunda secuencia de aminoácidos o ácido nucleico) . El porcentaje de identidad entre las dos secuencias es una función del número posiciones idénticas compartidas por las secuencias (es decir, porcentaje de homología = n.° de posiciones idénticas/n . ° total de - - posiciones, multiplicado por 100) . La determinación del porcentaje de homología entre dos secuencias puede realizarse usando un algoritmo matemático. Un ejemplo preferido no limitativo de un algoritmo matemático usado para la comparación de dos secuencias es el algoritmo de Karlin y Altschul (1990) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 87:2264-68, modificado como en Karlin y Altschul (1993) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 90:5873-77. Un algoritmo de este tipo se incorpora en los programas NBLAST y XBLAST de Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-10. Las búsquedas de nucleótidos BLAST pueden realizarse con el programa NBLAST, puntuación = 100, longitud de palabra = 12. Las búsquedas de proteínas BLAST pueden realizarse con el programa XBLAST, puntuación = 50, longitud de palabra = 3. Para obtener alineaciones con huecos para fines de comparación, puede usarse Gapped BLAST tal como se describe en Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Research 25 (17) : 3389-3402. Cuando se usan los programas BLAST y Gapped BLAST, pueden usarse los parámetros por defecto de los respectivos programas (por ejemplo, XBLAST y NBLAST) .

Régimen : De acuerdo con la invención, IL-7 va a administrarse preferentemente una o dos veces a la semana, preferentemente durante un periodo de dos a seis semanas, preferentemente cuatro semanas, que define un ciclo de tratamiento con IL-7. Tal ciclo puede repetirse al menos una vez.

En una realización preferente, IL-7 se administra una vez a la semana durante cuatro semanas.

En una realización preferente, el tratamiento con el agente antiviral o la combinación de agentes antivirales se mantiene durante al menos parte del tratamiento con IL-7, - - preferentemente el tratamiento con el agente antiviral o combinación de agentes antivirales no se interrumpe.

Lo más preferentemente, IL-7 va a administrarse en combinación con el agente antiviral o combinación de agentes antivirales. IL-7 puede administrarse entonces de manera separada, simultánea o secuencial con el agente antiviral o combinación de agentes antivirales.

En una realización particular, IL-7 se administra de manera simultánea con el agente antiviral o combinación de agentes antivirales.

En un protocolo preferido, al paciente va a administrarse IL-7 antes del agente antiviral o la combinación de agentes antivirales, preferentemente una semana antes .

En otro protocolo preferido, al paciente va a administrarse IL-7 desde el inicio de la terapia al mismo tiempo que el agente antiviral o la combinación de agentes antivirales, preferentemente comenzando entre DO y DIO, lo más preferentemente comenzando entre D3 y D7.

En otro protocolo preferido, al paciente va a administrarse un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales durante una primera fase, que es preferentemente de al menos una semana de duración, de modo que se reduzca la carga viral, seguida de una segunda fase de preferentemente 2 a 6 semanas de IL-7, preferentemente combinada con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales.

La administración de IL-7 puede estar seguida de una tercera fase que dura al menos de 1 a 3 semanas, o puede extenderse más allá de 4 ó 6 semanas o más de tratamiento con - - un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales. Preferentemente, esta tercera fase dura de 1 a 9 semanas.

En total, al paciente se le administra ventajosamente el agente antiviral o combinación de agentes antivirales durante un periodo de 6 a 12 semanas.

El agente antiviral o combinación de agentes antivirales es preferentemente el mismo/la misma durante todas las fases de tratamiento. Sin embargo puede cambiarse si se desea.

En una realización preferente, el protocolo implica una reducción preliminar pero rápida de la carga viral del paciente, seguida de la adición de una terapia con IL-7 a corto plazo, mientras que los tratamientos antivirales anteriores se mantienen durante este periodo y durante algunas semanas después.

Cuando los tratamientos se interrumpen, el sistema inmunitario del paciente puede controlar de manera eficaz y estable por si mismo el virus VHC.

La cantidad de agente antiviral tal como interferón puede ser de 2 a 10 millones de IU por semana en una base semanal, de dos o tres veces a la semana, o diaria. En una realización preferente, el interferón-alfa administrado es interferón-alfa-2b y la cantidad de interferón administrada es de 3 millones de IU dos o tres veces a la semana.

En una realización particular, el interferón-alfa administrado es un interferón alfa-2b pegilado y la cantidad de interferón administrada es de 0,5 a 2,0 microgramos/kg de peso corporal, por semana en una base semanal, de dos o tres veces a la semana, o diaria. Como alternativa, el interferón administrado es un interferón alfa-2a pegilado y la cantidad de interferón administrado es de 20 a 250 microgramos/ kilogramo de peso corporal por semana en una base semanal, de dos o tres veces a la semana, o diaria.

Otros agentes antivirales tal como ribavirina puede administrarse de aproximadamente 400 a aproximadamente 1600 mg por día, preferentemente de aproximadamente 600 a aproximadamente 1200 mg/dia o de aproximadamente 800 a aproximadamente 1200 mg/dia y lo más preferentemente de aproximadamente 1000 a aproximadamente 1200 mg/kg al día basándose en el peso del paciente.

Otros agentes antivirales tales como telaprevir pueden administrarse de aproximadamente 750 mg tres veces al día (preferentemente distanciadas 7-9 horas) .

Otros agentes antivirales tal como boceprevir pueden administrarse de aproximadamente 800 mg tres veces al día (distanciadas 7-9 horas) .

Preferentemente, la cantidad eficaz de interleucina-7 gue va a administrarse está comprendida entre aproximadamente 3 y 30 g/kg, preferentemente entre aproximadamente 5 y 20 µg/kg, y es preferentemente de aproximadamente 10 µg/kg de peso corporal, más preferentemente 20 µg/kg de peso corporal. Preferentemente se administra en una base semanal, preferentemente durante de 2 a 6 semanas.

Si se desea puede administrarse IL-7 dos veces a la semana .

En realizaciones preferidas, IL-7 puede administrarse una vez a la semana, durante un periodo cíclico de dos a cuatro semanas. El ciclo podría repetirse al menos una vez.

IL-7 y el agente antiviral pueden administrarse simultáneamente, o bien de manera separada o dentro de la - - misma formulación. Preferentemente, se administran simultáneamente, y ambas terapias pueden iniciarse al mismo tiempo o IL-7 puede iniciarse una semana antes del agente antiviral. Más preferentemente, se administran de manera separada, de acuerdo con diferentes programas. La dosis de agente antiviral se administra preferentemente durante el mismo periodo de tiempo que el paciente recibe dosis de IL-7. Composiciones farmacéuticas : Las composiciones farmacéuticas que comprenden IL-7 pueden ser adecuadas para vías oral, rectal o parenteral, más en particular por vía intravenosa, subcutánea, intradérmica, intra-arterial, intra-peritoneal o intra-muscular, como también intranasal. Se prefiere la vía parenteral, especialmente subcutánea. Por ejemplo, el principio activo está asociado con un vehículo, excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptable que puede seleccionarse de disoluciones o suspensiones de neutras a ligeramente ácidas, isotónicas, salinas tamponadas y más preferentemente de sacarosa, trehalosa y aminoácido. El vehículo farmacéuticamente compatible está contenido preferentemente en un tampón apropiado para formar una disolución isotónica. Un tampón apropiado tiene preferentemente un intervalo de pH comprendido entre 4,5 y 7,5, preferentemente de 5,0 a 7,0, incluso más preferentemente de aproximadamente 5,5 y es preferentemente una sal orgánica seleccionada de un tampón citrato de sodio o un tampón acetato de amonio. La composición farmacéutica puede estar en forma de una suspensión, disolución, gel, polvo, sólido, etc. La composición es preferentemente una forma líquida.

La composición puede comprender agentes estabilizadores, - - tales como azúcar, aminoácidos, proteínas, tensioactivos , etc. La composición puede comprender cualquier disolución salina, incluyendo fosfatos, cloruros, etc.

Una composición farmacéutica particular de acuerdo con la invención comprende, además del principio activo farmacológico, una proteína y/o un tensioactivo . Esta presencia de una proteína, o cualquier otra molécula de alto peso molecular de origen natural, reduce la exposición de IL-7 al sistema inmunitario huésped y por tanto evita efectos secundarios. Más preferentemente, la proteína es no inmunogénica en el sujeto, tal como cualquier proteína de origen humano. Un ejemplo más preferido de proteína es albúmina sérica humana. El tensioactivo puede seleccionarse de tensioactivos conocidos tales como productos de polisorbato, preferentemente Tween20® o Tween80®. Una composición específica de esta invención comprende albúmina sérica humana (preferentemente de 2 a 5 mg/ml) o polisorbato (T een 20 o 80 (normalmente el 0, 005 %)) o cualquier otra sustancia tal como una sustancia tensioactiva o un aminoácido (por ejemplo, arginina, glutamato o una mezcla de arginina y glutamato) o azúcar (por ejemplo, sacarosa, trehalosa, sorbitol), que puede prevenir la inmunogenicidad de IL-7 debido a la agregación de proteínas y/o persistencia local del producto farmacéutico en el sitio de inyección tras la administración de la composición.

En una realización particular, la vía de administración es la vía oral. En comparación con otras hormonas polipeptídica, la vía oral es de hecho aceptable para IL-7, especialmente en forma iperglicosilada, debido a la estabilidad excepcional de esta proteína. Las composiciones pueden estar entonces en forma sólida, tal como un comprimido o un polvo o una cápsula o en forma de un líquido, tal como un jarabe o una emulsión, preparadas en un vehículo farmacéuticamente aceptable apropiado. Preferentemente el vehículo es estable por sí mismo en el tracto gastrointestinal y en el sistema circulatorio y muestra una semivida en plasma aceptable.

Son ventajosas las cápsulas resistentes a los ácidos gástricos, tales como cápsulas resistentes a los ácidos gástricos que contienen una micro-emulsión o formulación de liposomas de polipéptido de IL-7.

Pueden usarse principios activos adicionales, tales como agentes inmuno-estimulantes, preferentemente seleccionados de un factor de crecimiento celular hematopoyético, una citocina, una molécula antigénica (o antígeno) y un adyuvante, para su uso combinado, separado o secuencial.

Indicación terapéutica : La invención permite una reducción drástica de la carga viral del VHC .

El aclaramiento viral y el alivio de los síntomas pueden observarse en el intervalo de 1 semana a 6 meses, preferentemente en el intervalo de 1 semana a 3 meses tras el tratamiento .

La invención hace posible inhibir la evolución de la enfermedad y obtener un aclaramiento sustancialmente completo del virus. En otras palabras el ARN del VHC se vuelve indetectable en el paciente.

La invención es útil en particular para prevenir o retrasar cualquier evolución mortal que resulte de la infección por el VHC, en particular cualquier aparición de fibrosis hepática o cirrosis o hepatocarcinoma .

El protocolo de la invención es de particular interés en un paciente que no ha respondido a un tratamiento anterior. Estos pacientes incluyen pacientes que no responden (también denominados pacientes que responden parcialmente o pacientes que responden lentamente) o pacientes de respuesta nula. En particular, los pacientes que no responden (también denominados pacientes que responden parcialmente o pacientes que responden lentamente) son pacientes para los que el ARN del VHC ha disminuido en 2 logs en la semana 12 pero no se vuelve indetectable en la semana 24, tras el inicio de un tratamiento, especialmente un tratamiento anterior con interferón solo, o una combinación de ribavirina y interferón, que es actualmente el tratamiento estándar. Es poco probable que estos pacientes consigan SVR (respuesta viral sostenida) incluso cuando se tratan de nuevo con terapia estándar. Los pacientes de respuesta nula son pacientes para los que el ARN del VHC no ha disminuido en al menos 1 log (un factor de 10) tras 4 semanas de tratamiento, o en 2 logs tras 12 semanas de tratamiento. Es extremadamente poco probable que estos pacientes consigan SVR incluso cuando se vuelven a tratar con terapia estándar.

La ausencia de respuesta viral a tratamientos previos se define como respuesta nula o ausencia de respuesta viral temprana (EVR) , definida por una disminución de cargas de ARN del VHC inferior a 2 logs tras 12 semanas tal como se mide mediante una prueba de RT-PCR cuantitativa, en comparación con niveles básales medidos mediante una técnica similar. O, ausencia de respuesta al final del tratamiento definida mediante ARN del VHC detectable al final del tratamiento.

El protocolo de la invención puede ser también ventajoso para tratar un paciente sin tratamiento, es decir un paciente que no se ha tratado nunca para una infección por VHC, más en particular un paciente que no se ha tratado nunca con ribavirina o cualquier interferón.

Los pacientes con hepatitis C que se han tratado para la infección, especialmente con ribavirina o cualquier interferón, pueden ser también buenos candidatos para la terapia de combinación de la invención. Éstos incluyen pacientes con hepatitis C que han recaído tras la respuesta inicial a tratamientos previos.

Los pacientes que muestran irrupción viral pueden beneficiarse también del tratamiento de la invención. Una irrupción viral se produce cuando un paciente consigue una respuesta bajo terapia (especialmente terapia con interferón) pero entonces pierde la respuesta a pesar de la terapia continua .

Los pacientes con infecciones por hepatitis C agudas o crónicas están englobados, incluyendo los pacientes con recidiva, pacientes que no responden y pacientes de respuesta nula .

En una realización particular, el paciente se ha genotipado para polimorfismo de nucleótido sencillo en el locus del gen IL28b que codifica para interferón-lambda-3 (véase Thomson et al, Gastroenterology . 2010, 139 ( 1 ) : 120-9, y la solicitud de patente internacional WO2011/013019) . Un genotipo CC en SNP rsl2979860 es indicativo de un paciente que responde a un tratamiento con SOC, especialmente tratamiento interferón-alfa pegilado (PEG-IF -alfa) más ribavirina (RBV) . Un genotipo CT o TT es indicativo de un paciente que no responde o paciente de respuesta nula. En una realización preferente, un paciente con un genotipo CT o TT en SNP rsl2979860 puede beneficiarse ventajosamente del tratamiento de la presente invención.

El protocolo es útil contra la alta variabilidad y diversidad de virus de hepatitis C, evitando la aparición de resistencia al tratamiento, beneficiando a más pacientes y proporcionando una respuesta más rápida, eficaz y más sostenida .

El protocolo de la invención puede ser útil además en un paciente co-infectado con VHC y otro virus, tales como VIH, VHB, VPH, VHS O CMV.

Especialmente este procedimiento puede ser útil para pacientes co-infectados con VIH/VHC que presentan con recuentos de células T CD4 bajos (<400 0?4/µ1) entre los cuales alguno no puede tratarse debido a sus recuentos de células T CD4 muy bajos (<250 0?4/µ1), que no compatible con el tratamiento con interferón.

En este caso, el mismo régimen de tratamiento puede aplicarse tras un ciclo de preparación de aproximadamente 2 a 4 semanas de IL-7 o cualquier otro agonista de IL-7 para restablecer los recuentos de células T CD4 adecuados antes de aplicar el protocolo descrito en el presente documento.

El protocolo de la invención podría adaptarse además a los pacientes co-infectados con VHC/VHB que presentan con una carga viral detectable del VHB. En este caso una reducción preliminar de la carga viral del VHB podría obtenerse en un pretratamientno de 3 a 4 meses con un agente antiviral directo anti-VHB, tal como entecavir o tenofovir.

Las figuras y los ejemplos ilustran la invención sin limitar su alcance.

EJEMPLOS Ejemplo 1: Evaluación en la enfermedad hepática de hepatitis C de IL-7 en un estudio en fase I/IIa Procedimientos : Se diseñó un estudio en fase I/IIa para evaluar la seguridad y beneficios individuales de dosis semanales de interleucina-7 en pacientes adultos infectados por genotipo 1 ó 4 del virus de la hepatitis C y resistentes al actual "estándar de cuidado" (SOC) con peg-interferón y ribavirina tras 12 semanas de esta bi-terapia estándar.

La ausencia de respuesta viral al estándar de cuidado actual con interferón-alfa pegilado + ribavirina, identificada como ausencia de respuesta viral temprana (EVR) , se define como una disminución de cargas de ARN del VHC inferiores a 2 logs, tal como se mide mediante una prueba de PCR cuantitativa tras 12 semanas de terapia estándar, en comparación con niveles básales medidos mediante una técnica similar. 0, ausencia de respuesta a final del tratamiento definida mediante ARN del VHC detectable al final del tratamiento (24 semanas o 48 semanas) .

En este estudio de etiqueta abierta, de dosis en aumento (3, 10 y 20 µg/kg/semana) CYT107 (IL-7 glicosilada humana recombinante ) se administró por vía subcutánea durante 4 semanas (DO a D21) como una terapia aditiva a la terapia de SOC de 52 semanas iniciada 9 semanas (en promedio) antes de CYT107 para confirmar la ausencia de response a SOC.

Se incluyeron 6 pacientes en cada nivel de dosis y 6 más si al menos 2 pacientes tenía una reducción del ARN del VHC > 2 logs.

Resultados : No hubieron acontecimientos adversos graves o anomalías clínicamente relevantes en los parámetros biológicos en relación con el tratamiento con CYT107.

En D56, CYT107 (10 µ? ?/e??t????) indujo (valores promedio) : - un aumento de células T + 341 0?4/µ1 ( + 168%) y + 209 COB/µ? (+179 %) más que la corrección de la linfopenia inicial inducida por el SOC previo con CYT107 (-147/µ1 de CD4) . - una ampliación de la diversidad de repertorio de TCR (+25 %) en los 4 pacientes con baja diversidad a DO (45 %) . un aumento del número de CD3 que expresa los receptores a4/ß7 (+ 73 %) .

Estos aumentos en recuentos, diversidad y direccionamiento de células T estaban asociados con una tasa acelerada de disminución viral del VHC y aclaramiento en la semana 12 en 5/12 pacientes. Después, el ARN del VHC permaneció indetectable (seguimiento actual en promedio: 11 meses) . Los pacientes que respondían tenían una carga viral moderada (< 4,52 log/ml) en la iniciación de CYT107.

Tal como se muestra en la figura 1, los 7 pacientes que no pudieron reducir su carga viral durante la reintroducción del estándar de cuidado no aclararon el virus con la terapia aditiva de IL-7 (10 µg/kg, una vez a la semana, durante 4 semanas comenzando el día 0) , mientras que los 5 pacientes que redujeron sus cargas virales por debajo de 5 Logio IU/ml con la bi-terapia estándar aclararon el virus con el mismo - - tratamiento de IL-7 (administrado en el día 0) .

La figura 2 muestra que tras la terapia de IL-7 se restableció la diversidad de células T normal en todos los pacientes y permaneció estable al menos hasta D56.

Conclusiones : En pacientes con VHC crónicos definidos como pacientes que no responden a la bi-terapia estándar con PEG-interferón y ribavirina, el tratamiento de IL-7 era seguro y expandía tanto células T CD4 como CD8, un efecto conocido por proporcionar una respuesta inmunitaria eficaz y estable. IL-7 también contribuía a un aumento del direccionamiento de células T en órganos linfoides y la normalización de la diversidad del repertorio de TCR. Este efecto se asoció sistemáticamente con el aclaramiento viral en pacientes que redujeron sus cargas virales por debajo de 5 Logio IU/ml con la bi-terapia estándar.

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Interleucina-7 (IL-7), para su uso en el tratamiento de la hepatitis C en un paciente infectado con el virus de la hepatitis C, en combinación o posteriormente, con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales.

2. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el agente antiviral o combinación de agentes antivirales está en una cantidad terapéuticamente eficaz que reduce la carga viral del VHC a menos de 5 Logio IU/ml, preferentemente menos de 4 Logio IU/ml, más preferentemente menos de 3 Logio IU/ml.

3. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, para su uso en un paciente que se ha tratado con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales, de modo que se reduce la carga viral, antes de la administración con IL-7, preferentemente en la que el agente antiviral o combinación de agentes antivirales reduce la carga viral a menos de 5 Logio IU/ml, preferentemente menos de 4 Logio IU/ml, más preferentemente menos de 3 Logi0 IU/ml, antes de la administración con IL-7.

. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que el agente antiviral se selecciona del grupo que consiste en un inhibidor de proteasa tal como telaprevir o boceprevir, un inhibidor de polimerasa, un inhibidor de la entrada de virus y un inhibidor de helicasa, o combinaciones de los mismos, opcionalmente en combinación con interferón y/o ribavirina.

5. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que el agente antiviral es interferón, tal como interferón alfa o interferón consenso o interferón lambda, preferentemente IFNalfaD2a o IFNalfa-2b, o bien solo o en combinación con otro agente antiviral, tal como ribavirina, estando el interferón preferentemente en forma pegilada.

6. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que el tratamiento con el agente antiviral o la combinación de agentes antivirales se inicia simultáneamente con el tratamiento con IL-7, y se mantiene durante al menos parte del tratamiento con IL-7, preferentemente durante de 6 a 12 semanas.

7. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que el tratamiento con el agente antiviral o la combinación de agentes antivirales se inicia antes del tratamiento con IL-7, y se mantiene durante al menos parte del tratamiento con IL-7, preferentemente durante de 6 a 12 semanas .

8. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que IL-7 va a administrarse una vez a la semana, preferentemente durante un periodo de dos a seis semanas, preferentemente cuatro semanas, definiendo de ese modo un ciclo de tratamiento con IL-7, que se repite opcionalmente al menos una vez.

9. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que IL-7 va a administrarse de manera separada, simultánea 0 secuencial con el agente antiviral o combinación de agentes antivirales, y en la que el tratamiento con IL-7 se inicia antes de la administración del agente antiviral o combinación de agentes antivirales, preferentemente una semana antes.

10. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que al paciente va a administrarse un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales durante una primera fase de una semana, de modo que se reduce la carga viral, seguida de una segunda fase de cuatro semanas de IL-7 combinada con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales, en la que el agente antiviral o combinación de agentes antivirales puede ser preferentemente el mismo/la misma durante todas las fases de tratamiento.

11. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con la reivindicación 10, en la que la administración de IL-7 va a seguirse por una tercera fase de 1 a 9 semanas de tratamiento con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales, en la que el agente antiviral o combinación de agentes antivirales puede ser preferentemente el mismo/la misma durante todas las fases de tratamiento .

12. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en la que el paciente tiene infección de hepatitis C crónica genotipo 1 a 6, preferentemente genotipo 1 a 4, preferentemente genotipo 1.

13. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, para obtener aclaramiento viral del VHC, para prevenir o retrasar la aparición de fibrosis hepática y cirrosis, y/o para prevenir la recidiva de la infección por VHC.

14. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en la que la IL-7 está en forma de una proteina de fusión, preferentemente en fusión con el fragmento Fe de una inmunoglobulina .

15. La IL-7 para su uso en el tratamiento de la hepatitis C de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, en la que la IL-7 es una IL-7 humana de tipo natural o una variante de la misma, preferentemente en forma hiperglicosilada . RESUMEN DE LA INVENCÓN La invención se refiere al uso de interleucina-7 (IL-7) para tratar hepatitis C en un paciente infectado con el virus de la hepatitis C, en el que dicho paciente se ha tratado o está tratándose con un agente antiviral o una combinación de agentes antivirales que reduce la carga viral.