MX2010011972A - Derivados de aminodihidrotiazina como inhibidores de bace para el tratamiento de la enfermedad de alzheimer. - Google Patents

Abstract

La presente invención proporciona inhibidores de BACE de Fórmula (I): métodos para su uso, e intermediarios y métodos para su preparación. (ver fórmula (I)).

Description

DERIVADOS DE AMINODIHIDRO IAZINA COMO INHIBIDORES DE BACE PARA EL TRATAMIENTO DE LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER Campo de la invención La presente invención está en el campo de tratamiento de enfermedad de Alzheimer y otras enfermedades y trastornos que involucran el péptido ß(?ß), un segmento peptídico neurotóxico y altamente agregatorio de la proteínas precursora amiloide (APP) . Específicamente se proporcionan potentes inhibidores de enzima que escinde la proteína precursora amiloide de ß-secretasa o ß-sitio (BACE) . La inhibición completa o parcial de BACE se ha mostrado que tiene un efecto significativo en las patologías relacionadas con placas y dependientes de placas en modelos de ratones que sugieren que aún pequeñas reducciones en los niveles ?ß pueden resultar en reducción significativa a largo plazo en déficits sinápticos y carga de placas, proporcionando así beneficios terapéuticos significativos.

Actualmente los inhibidores de BACE descritos son análogos de estado de transición peptidomimético, que contienen típicamente una porción hidroxietilo . Aunque muchos de estos compuestos son potentes inhibidores de BACE, sus altos pesos moleculares y baja permeabilidad de membrana los vuelve pobres candidatos farmacéuticos. Ha existido una progresión de moléculas peptidomiméticas grandes a moléculas pequeñas, tal como una variedad de andamiajes de hidroxietilamina asi como andamiajes que contienen heterociclicos . Véase, por ejemplo, Durham and Shepherd, Current Opinión in Drug Discovery & Development, 9(6), 776-791 (2006) ) . Ciertos compuestos de aminotiazina se han descrito como inhibidores de BACE en WO 2007/049532.

Los inhibidores de BACE que son potentes y más eficaces son necesarios para proporcionar tratamientos para trastornos mediados por péptido ?ß, tal como enfermedad de Alzheimer. La presente invención proporciona nuevos inhibidores de BACE potentes y eficaces.

La presente invención proporciona compuestos de Fórmula I : I donde : n es 0, 1, ó 2; R1 es pirimidinilo, pirazinilo opcionalmente sustituido con cloro o fluoro, o piridinilo opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno independientemente seleccionado de cloro, fluoro, y alcoxi de C1-C3; R2 es en cada caso independientemente seleccionado de cloro y fluoro; R3 es hidrógeno o alquilo de C1-C4 opcionalmente sustituido con hidroxi; y R4 es hidrógeno o alquilo de C1-C3; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

La presente invención también proporciona un método para tratar la enfermedad de Alzheimer en un paciente que comprende administrar a un paciente en necesidad de tal tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de Fórmula I.

La presente invención adicionalmente proporciona un método para prevenir la progresión de deterioro cognitivo leve a la enfermedad de Alzheimer en un paciente que comprende administrar a un paciente en necesidad de tal tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de Fórmula I.

La presente invención adicionalmente proporciona un método para prevenir la progresión en un paciente en riesgo de desarrollar enfermedad de Alzheimer que comprende administrar a un paciente en necesidad de tal tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de Fórmula I.

La presente invención también proporciona un método para inhibir BACE en un paciente que comprende administrar a un paciente en necesidad de tal tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de Fórmula I.

La presente invención también proporciona un método para inhibir la escisión mediada por ß-secretasa de proteína precursora amiloide que comprende administrar a un paciente en necesidad de tal tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de Fórmula I.

La presente invención adicionalmente proporciona un método para la inhibición de la producción de péptido ?ß que comprende administrar a un paciente en necesidad de tal tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de Fórmula I .

La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula I, en combinación con un portador, diluyente, o excipiente farmacéuticamente aceptable.

Además, esta invención proporciona un compuesto de Fórmula I para uso en terapia, en particular para el tratamiento de enfermedad de Alzheimer o para la prevención de la progresión de deterioro cognitivo leve a enfermedad de Alzheimer. Esta invención también proporciona el uso de un compuesto de Fórmula I para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de enfermedad de Alzheimer. Esta invención adicionalmente proporciona el uso de un compuesto de Fórmula I para la manufactura de un medicamento para la prevención de la progresión de deterioro cognitivo leve a enfermedad de Alzheimer. La invención también proporciona el uso de un compuesto de Fórmula I para la manufactura de un medicamento para la inhibición de BACE. La invención adicionalmente proporciona el uso de un compuesto de Fórmula I para la manufactura de un medicamento para la inhibición de la producción de péptido ?ß.

Adicionalmente, esta invención proporciona una formulación farmacéutica adaptada para el tratamiento de enfermedad de Alzheimer. Además, esta invención proporciona una formulación farmacéutica adaptada para la prevención de la progresión de deterioro cognitivo leve a enfermedad de Alzheimer. Esta invención también proporciona una formulación farmacéutica adaptada para la inhibición de BACE.

Además, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica adaptada para la inhibición de escisión mediada por ß-secretasa de la proteina precursora amiloide. La presente invención también proporciona una formulación farmacéutica adaptada para el tratamiento de afecciones que resultan de niveles excesivos de péptido ?ß que comprende un compuesto de Fórmula I o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable en combinación con uno o más excipientes, portadores, o diluyentes farmacéuticamente aceptables .

Los términos químicos generales usados en las fórmulas anteriores tienen sus significados usuales. Por ejemplo, el término "alquilo de C1-C3" se refiere a metilo, etilo, propilo, e isopropilo. El término "alquilo de C1-C4" se refiere a porciones metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, y ter-butilo.

"Alquilo de C1-C4 opcionalmente sustituido con hidroxi" es un grupo alquilo de C1-C en donde uno de los átomos de hidrógeno es reemplazado con una porción hidroxi.

El término "alcoxi de C1-C3" es un grupo alquilo de C1-C3 unido a un átomo de oxigeno y se refiere a metoxi, etoxi, propoxi, e iso-propoxi.

El término "grupo protector nitrógeno" se considera una porción que es estable a condiciones de reacción proyectadas y aún puede ser selectivamente removida por reactivos y condiciones de reacción compatibles con la amina regenerada. Tales grupos son bien conocidos por los artesanos expertos y se describen en la literatura. Véase, por ejemplo, Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Tercera Edición, Capitulo 7, John iley and Sons In., (1999).

El término "inhibición de producción de péptido ?ß" se considera que disminuye los niveles in vivo de péptido ?ß en un paciente a niveles normales, si es excesivo, a subnormales, como se requiera.

El término "cantidad efectiva de un compuesto de Fórmula I" se considera la dosis o dosis de un compuesto de Fórmula I requerida para inhibir BACE de manera suficiente para disminuir los niveles in vivo de péptido ?ß en un paciente a niveles normales o sub-normales .

El término "tratamiento" se considera que incluye retardar o detener la progresión de la enfermedad en un paciente .

El deterioro cognitivo leve se ha definido como una fase prodromal potencial de demencia asociada con enfermedad de Alzheimer basado en la presentación clínica y en la progresión de pacientes que exhiben deterioro cognitivo leve a demencia por Alzheimer con el tiempo. (Morris, et al., Arch. Neurol., 58, 397-405 (2001); Petersen, et al., Arch. Neurol., 56, 303-308 (1999)). El término "prevención de la progresión de deterioro cognitivo leve a enfermedad de Alzheimer" incluye retrasar, detener, o invertir la progresión de deterioro cognitivo leve a enfermedad de Alzheimer en un paciente.

El artesano experto apreciará que los compuestos de Fórmula I pueden existir en formas tautoméricas, como se representa en la Figura (1) . Cuando se da cualquier referencia en esta solicitud a uno de los tautómeros específicos de los compuestos de fórmula I, se entiende que abarca tanto formas tautoméricas como todas las mezclas de las mismas.

Figura (1) El artesano experto apreciará que los compuestos Fórmula I están comprendidos de un núcleo que contiene menos un centro quiral: Figura (2) Aunque la presente invención contempla todos los enantioméros individuales, asi como mezclas de los enantiómeros de los compuestos incluyendo racematos, los compuestos con la configuración absoluta en el átomo etiquetado I como se ilustra en la Figura (2) son compuestos preferidos de Fórmula I.

Figura (3) Adicionalmente, cuando se sustituyen apropiadamente, los compuestos con la configuración absoluta del átomo etiquetado 2, como se ilustra en la Figura (3) son compuestos preferidos de Fórmula I.

Adicionalmente, el artesano experto apreciará que se pueden crear centros quirales adicionales en los compuestos de la invención por la selección de ciertas variables. La presente invención contempla todos los enantiómeros o diastereómeros individuales, asi como mezclas de los enantiómeros y diastereómeros de los compuestos incluyendo racematos .

El artesano experto también apreciará que las designaciones Cahn-Ingold-Prelog (R) o (S) para todos los centros quirales variarán dependiendo de las configuraciones de sustitución del compuesto particular. Los enantiómeros o diastereómeros únicos se pueden preparar comenzando con los reactivos quirales o por técnicas sintéticas estereoselectivas o estereoespecificas . Alternativamente, los enantiómeros o diastereómeros únicos se pueden aislar de mezclas por técnicas de cristalización o cromatográficas quirales estándares en cualquier punto conveniente en la síntesis de compuestos de la invención. Los enantiómeros y diastereómeros únicos de los compuestos de la invención son una modalidad preferida de la invención.

Los compuestos de la presente invención son aminas, y por consiguiente reaccionan con cualquiera de un número de ácidos inorgánicos y orgánicos para formar las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente aceptables y la metodología común para prepararlas son bien conocidas en la técnica. Véase, por ejemplo, P. Stahl, et al. Handbook of Pharmaceutical Salts : Properties, Selection and Use, (VCHA/Wiley-VCH, 2002); S.M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol . 66, No. 1, Enero 1977. Las sales farmacéuticamente aceptables preferidas son aquellas formadas con ácido clorhídrico.

Aunque todos los compuestos de Fórmula I son inhibidores útiles de BACE, son preferidas ciertas clases de compuestos. Los siguientes párrafos describen tales clases preferidas : a) R1 es pirimidinilo; b) R1 es pirazinilo opcionalmente sustituido con fluoro; c) R1 es piridinilo opcionalmente sustituido con una o dos veces en cada caso independientemente seleccionado de cloro, fluoro, o metoxi; d) R1 es piridinilo opcionalmente sustituido con fluoro o metoxi; e) R1 es piridinilo opcionalmente sustituido con fluoro; f) R2 es fluoro; g) R2 es clóreh) n es 0 i) n es 1 j ) n es 2 k) R3 es hidrógeno; 1) R3 es metilo sustituido con hidroxi; m) R3 es metilo; n) R3 es isopropilo sustituido con hidroxi; o) R4 es hidrógeno; p) R4 es metilo; q) El compuesto de Fórmula I tiene una configuración absoluta de (S) en el centro quiral adyacente al nitrógeno del anillo aminotiazina; r) El compuesto de Fórmula I es una base libre; s) El compuesto de Fórmula I es una sal farmacéuticamente aceptable; t) El compuesto de Fórmula I es la sal clorhidrato; u) El compuesto de Fórmula I es la sal diclorhidrato .

Una modalidad preferida de la presente invención se refiere a compuestos de Fórmula I, donde R1 es pirimidinilo, piridinilo opcionalmente sustituido una o dos veces en cada caso independientemente seleccionado de cloro, fluoro, o metoxi, o pirazinilo opcionalmente sustituido con fluoro; R2 es cloro o fluoro; R3 es hidrógeno, metilo, metilo sustituido con hidroxi, o iso-propilo sustituido con hidroxi; R4 es hidrógeno o metilo; y n es 0, 1 ó 2; o una sal de los mismos farmacéuticamente aceptable. En la modalidad, es preferido que la configuración absoluta del centro quiral adyacente al nitrógeno del anillo aminotiazina sea (S); o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

Otra modalidad preferida de la presente invención se refiere a compuestos de Fórmula I donde R1 es pirimidinilo, piridinilo opcionalmente sustituido una o dos veces en cada caso independientemente seleccionado de cloro, fluoro, o metoxi, o pirazinilo opcionalmente sustituido con fluoro; R2 es cloro o fluoro; R3 es hidrógeno, metilo, metilo sustituido con hidroxi, o iso-propilo sustituido con hidroxi; R4 es hidrógeno; y n es 0, 1 ó 2; o una sal de los mismos farmacéuticamente aceptable. En la modalidad, es preferido que la configuración absoluta del centro quiral adyacente al nitrógeno del anillo aminotiazina sea (S) o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

Una modalidad más preferida de la presente invención se refiere a compuestos de Fórmula I donde R1 es pirimidinilo, piridinilo opcionalmente sustituido una o dos veces en cada caso independientemente seleccionado de cloro o fluoro, o pirazinilo opcionalmente sustituido con fluoro; R2 es cloro o fluoro; R3 es hidrógeno, metilo; R4 es hidrógeno; y n es 0, 1 ó 2; o una sal de los mismos farmacéuticamente aceptable. En la modalidad, es preferido que la configuración absoluta del centro quiral adyacente al nitrógeno del anillo aminotiazina sea (S) ; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

Una modalidad adicional de la presente invención se refiere a compuestos de Fórmula I donde R1 es pirimidinilo, piridinilo opcionalmente sustituido con fluoro o metoxi, o pirazinilo opcionalmente sustituido con fluoro; R2 es fluoro; R3 es hidrógeno o metilo; R4 es hidrógeno; y n es 1 ó 2; o una sal de los mismos farmacéuticamente aceptable. En la modalidad, es preferido que la configuración absoluta del centro quiral adyacente al nitrógeno del anillo aminotiazina sea (S) ; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

Una modalidad más preferida de la presente invención se refiere a compuestos de Fórmula I donde R1 es pirimidinilo, piridinilo opcionalmente sustituido con fluoro, o pirazinilo opcionalmente sustituido con fluoro; R2 es fluoro; R3 es hidrógeno o metilo; R4 es hidrógeno; y n es 1 ó 2; o una sal de los mismos farmacéuticamente aceptable. En la modalidad, es preferido que la configuración absoluta del centro quiral adyacente al nitrógeno del anillo aminotiazina sea (S) , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

Una modalidad especialmente preferida de la presente invención se refiere a compuestos de Fórmula I donde R1 es pirimidinilo; R2 es fluoro; R3 es hidrógeno; R4 es hidrógeno; y n es 2; o una sal de los mismos farmacéuticamente aceptable. En la modalidad, es preferido que la configuración absoluta del centro quiral adyacente al nitrógeno del anillo aminotiazina sea (S) ; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

Una modalidad adicional especialmente preferida de la presente invención relacionada con los compuestos de Fórmula I es una sal de los mismos farmacéuticamente aceptable.

Otra modalidad especialmente preferida de la presente invención relacionada con los compuestos de Fórmula I es o una sal de los mismos farmacéuticamente aceptable.

Los compuestos de Fórmula I son inhibidores de BACE. Por consiguiente, la presente invención también proporciona un método para inhibir BACE en un paciente que comprende administrar a un paciente en necesidad del tratamiento una cantidad inhibidora de BACE de un compuesto de Fórmula I. Es preferido que el paciente a ser tratado por la administración de los compuestos de Fórmula I sea humano.

Como inhibidores de BACE, los compuestos presente invención son útiles para suprimir la producción de péptido ?ß, y por lo tanto para el tratamiento de trastornos que resultan de niveles de péptido ?ß excesivos debido a la sobre-producción y/o depuración de péptido ?ß. Una modalidad adicional de la presente invención es el uso de un compuesto de Fórmula I para la manufactura de un medicamento para tratar una enfermedad o afección capaz de ser mejorada o prevenida por inhibición de BACE. Por lo tanto, se cree que los compuestos de Fórmula I son útiles en el tratamiento o prevención de enfermedad de Alzheimer, deterioro cognitivo leve, Síndrome de Down, Hemorragia Cerebral Hereditaria con Amiloidosis del Tipo Dutch, angiopatia amiloide cerebral, otras demencias degenerativas tales como: demencias de origen vascular y degenerativo mezclado, demencia asociada con enfermedad de Parkinson, demencia asociada con parálisis supranuclear progresiva, demencia asociada con degeneración córtico basal, y cuerpo de Lewy difuso tipo de enfermedad de Alzheimer.

Los compuestos de la presente invención se pueden preparar por una variedad de procedimientos conocidos en la técnica, algunos de los cuales se ilustran en los Esquemas de reacción posteriores. Se reconocerá por uno de experiencia en la técnica que las etapas individuales en los siguientes esquemas de reacción se pueden variar para proporcionar los compuestos de Fórmula I. El orden particular de las etapas requeridas para producir los compuestos de Fórmula I es dependiente del compuesto particular que es sintetizado, el compuesto de partida, y la labilidad relativa de las porciones sustituidas. Los productos de cada etapa en los esquemas de reacción posteriores se pueden recuperar por métodos convencionales, incluyendo extracción, evaporación, precipitación, cromatografía, filtración, trituración, y cristalización .

Ciertos centros estereoquímicos se han dejado sin especificar y ciertos sustituyentes se han eliminado en los siguientes esquemas de reacción por el motivo de claridad y no se proponen para limitar la enseñanza de los esquemas de reacción en cualquier forma. Además, los isómeros, enantiómeros, o diastereómeros individuales se pueden separar en cualquier punto conveniente en la síntesis de compuestos de Fórmula I por métodos tal como cromatografía.

Adicionalmente, los intermediarios descritos en los siguientes esquemas de reacción contienen un número de grupos protectores de nitrógeno. El grupo protector variable puede ser el mismo o diferente en cada caso dependiendo de las condiciones de reacción particulares y las transformaciones particulares a ser realizadas. Las condiciones de protección y desprotección son bien conocidas para el experto en la técnica y se describen en la literatura. Véase, por ejemplo, Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, supra .

En los esquemas de reacción posteriores, todos los sustituyentes, a menos que se indique de otra forma, están definidos previamente. Como se apreciará, los compuestos de las fórmulas (la) a (le), (2), y (3) se pueden preparar fácilmente por métodos que son bien conocidos y establecidos en la técnica, incluyendo métodos y procedimientos similares a aquéllos descritos en la presente. Los materiales de partida de requisito están comercialmente disponibles o se pueden preparar a partir de materiales comercialmente disponibles por métodos bien conocidos por el experto en la técnica .

Esquema de Reacción I El Esquema de Reacción I muestra la reacción de un compuesto apropiado de cualquiera de fórmulas (la) a (le), donde R5 es un grupo protector de nitrógeno, tal como acetilo, benzoilo, o t-butoxicarbonilo, con un compuesto apropiado de fórmula (2) o fórmula (3) para proporcionar un compuesto de fórmula 1 después de la desprotección del intermediario (4) .

Un compuesto de cualesquiera de las fórmulas (la) a (le) se hacer reaccionar con un compuesto de fórmula (2) en una reacción de acoplamiento Suzuki usando un reactivo de paladio adecuado, tal como cloruro de bis (trifenilfosfina) paladio (II), tetraquistrifenilfosfina de paladio, PdCl2, o acetato de paladio(II), en la presencia de una base adecuada, tal como carbonato de cesio, carbonato de sodio, o carbonato de potasio. Tales reacciones se pueden realizar en un solvente adecuado, tal como 1 , 2-dimetoxietano, agua, etanol, acetonitrilo, dimetilformaraida, o dioxano, o mezclas de los mismos.

Alternativamente, un compuesto de cualquier fórmula (la) a (le) se hace reaccionar con un compuesto de la fórmula (3) en una reacción de acoplamiento Stille usando un reactivo de paladio adecuado, tal como cloruro de bis ( trifenilfosfina) paladio ( II ) , PdCl2, o tetraquistrifenilfosfina de paladio, en la presencia de un aditivo adecuado, tal como cloruro de litio o fluoruro de cesio. Tales reacciones se realizaron en un solvente adecuado, tal como tolueno o DMF, o mezclas de los mismos .

En una etapa opcional, una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de Fórmula I se puede formar haciendo reaccionar una base libre apropiada de Fórmula I con un ácido farmacéuticamente aceptable apropiado en un solvente adecuado bajo condiciones estándares. Adicionalmente, la formación de tales sales puede ocurrir simultáneamente en la desprotección de un grupo protector de nitrógeno. La formación de tales sales es bien conocida y apreciada en la técnica .

Los compuestos de la fórmula (la) se pueden preparar por dos variantes. Los esquemas de reacción II y III muestran las etapas sintéticas que inician con un compuesto apropiado de la fórmula (i) para proporcionar un compuesto de fórmula (la) en la cual R6 es metilo o etilo y R5 es un grupo protector de nitrógeno adecuado, tal como acetilo, benzoilo, o t-butoxicarbonilo . quema de Reacción 1. ) HCI 2.) Reducción En el Esquema de Reacción II, un compuesto de fórmula (i) se hace reaccionar con amida de ácido 2-metil-propan-2-sulfinico en la presencia de Ti(OEt) 4 en un solvente adecuado, tal como THF, para dar un compuesto de fórmula (ii) . Un compuesto de fórmula (iii) es preparado adicionando n-BuLi a diisopropilamina en un solvente adecuado, tal como THF. El compuesto de acetato apropiado se adiciona seguido por un exceso de triisopropóxido de clorotitanio . Un compuesto de fórmula (ii) se adiciona a la solución de un compuesto de fórmula (iii) para dar un compuesto de fórmula (iv) . La desprotección de la amina se realiza por métodos conocidos en la técnica y es seguido por la reducción del éster al alcohol por métodos bien conocidos en la técnica, por ejemplo por el uso de hidruro de litio y aluminio o borohidruro de litio. Al alcohol (v) se adiciona isotiocianato de benzoilo. El compuesto intermediario se trata con HC1 para facilitar tanto la formación de tiazeno y remoción del grupo benzoilo, y luego un grupo protector de nitrógeno adecuado se adiciona para proporcionar un compuesto de la fórmula (la) .

Esquema de Reacción III (1 a) En el Esquema de Reacción III, un exceso de bromuro de vinilmagnesio se adiciona a un compuesto de fórmula (i) en un solvente adecuado, tal como THF, para dar un compuesto de fórmula (vi). El alcohol (vi) es tratado con cloruro de tionilo o PBr3 en un solvente adecuado, tal como hexano o etanol, seguido por la adición de tiourea para dar un compuesto de fórmula (vii). El compuesto de fórmula (vii) es tratado con ácido a una temperatura elevada para proporcionar la aminotiazina racémica la cual está protegida con un grupo protector de nitrógeno adecuado y sometido a condiciones de purificación, tales como cromatografía quiral o cristalización, para proporcionar un compuesto de fórmula (la) .

Esquema de Reacción IV El Esquema de Reacción IV muestra las etapas sintéticas que inician con un compuesto apropiado de fórmula (ii) para proporcionar un compuesto de fórmula (Ib). Un exceso de cloruro de 2-metilalilmagnesio se adiciona a una solución de un compuesto de fórmula (ii) en un solvente adecuado, tal como diclorometano . El intermediario resultante se trata con una solución de HC1 en un solvente adecuado, tal como dioxano, para dar un compuesto de fórmula (viii) . La amina (viii) se hace reaccionar con isotiocianato de benzoilo en un solvente adecuado, tal como THF, para proporcionar un compuesto de fórmula (ix) . El tratamiento de un compuesto de fórmula (ix) con un exceso de yodo en un solvente adecuado, tal como diclorometano, proporcionará un compuesto de fórmula (x) . Finalmente, la adición de hidruro de tri-n-butilestaño y AIBN en un solvente adecuado, tal como tolueno, proporcionará un compuesto de fórmula (Ib) .

Esquema de Reacción V Reducción (1c) (xv) El Esquema de Reacción V muestra las etapas sintéticas para proporcionar un compuesto de fórmula (le) partiendo con un compuesto apropiado de fórmula (iv) . X es bromo o cloro, R5 es un grupo protector de nitrógeno adecuado. R6 es metilo o etilo. El compuesto (xi) se prepara haciendo reaccionar N, O-dimetilhidroxilamina con un exceso de butil litio en un solvente adecuado, tal como THF. Un compuesto de fórmula (iv) se adiciona a una solución del compuesto (xi) para proporcionar un compuesto de fórmula (xü) . Un exceso del haluro de magnesio apropiado (xiii) se adicionó a una solución de un compuesto de fórmula (xii) en un solvente adecuado, tal como THF. La cetona resultante (xiv) se reduce al alcohol (xv) por condiciones bien conocidas y apreciadas en la técnica, por ejemplo por borohidruro de sodio en un solvente adecuado, tal como metanol. Al alcohol (xv) se adiciona isotiocianato de benzoilo. El compuesto intermediario es tratado con HC1 y luego se adiciona un grupo protector de nitrógeno adecuado para proporcionar un compuesto de la fórmula (le) .

Esquema de Reacción VI El Esquema de Reacción VI muestra las etapas sintéticas para proporcionar un compuesto de fórmula (Id) y un compuesto de fórmula (le), partiendo con un compuesto apropiado de fórmula (xvi), donde R5 es un grupo protector de nitrógeno adecuado.

Un compuesto de fórmula (xvii) se prepara haciendo reaccionar primero bromuro de (metil) trifenilfosfonio y n-butil litio en un solvente adecuado, tal como THF. A esta solución, se adiciona lentamente un compuesto de fórmula (xvi) , por ejemplo por un embudo de adición o bomba de jeringa. Un compuesto de fórmula (xviii) se prepara por la adición de glioxalato de etilo y trifluorometansulfonato de iterbio a un compuesto de fórmula (xvii) en un solvente adecuado, tal como acetonitrilo .

Un compuesto de fórmula (xix) se prepara vía un proceso de tres etapas: primera, el alcohol de un compuesto de fórmula (xviii) se transforma a un grupo de separación, por ejemplo por reacción con anhídrido de ácido trifluorometansulfónico en la presencia de una base de amina apropiada, tal como 2,6-lutidina o diisopropiletilamina en un solvente adecuado tal como cloruro de metileno. Un exceso de tiourea se adiciona y luego el intermediario resultante se adiciona a un exceso de ácido sulfúrico. El grupo amino resultante de un compuesto de fórmula (xix) está protegido con un grupo protector de nitrógeno adecuado por métodos bien conocidos y descritos en la técnica para dar un compuesto de fórmula (xx) . La reacción de un compuesto de fórmula (xx) se puede realizar en dos variantes para producir ya sea un compuesto de fórmula (Id) o un compuesto de fórmula (le) .

Un compuesto de (Id) se puede preparar por la reducción del éster de compuesto (xx) por métodos bien conocidos o descritos en la técnica, por ejemplo, un exceso de borohidruro de litio en un solvente adecuado, tal como THF.

Un compuesto de (le) se puede preparar haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (xx) con un exceso de cloruro de metilmagnesio en un solvente adecuado, tal como THF.

Preparaciones y Ejemplos Las siguientes preparaciones y ejemplos además ilustran la invención.

Los nombres para los compuestos de la presente invención se proporcionan por ChemDraw® Ultra, versión 10.0.

Las abreviaturas usadas en la presente se definen de acuerdo con Aldrichimica Acta, Vol. 17, No. 1. 1984. Otras abreviaturas se definen como sigue: "SCX" es intercambio de catión fuerte; "ca." es cerca o aproximadamente; "EtOAc" es acetato de etilo; "MeOH" es metanol; "DCM" es diclorometano; "THF" es tetrahidrofurano; "Et20" es éter dietilico; "(OEt)" es etóxido; "equiv" es equivalentes; "FRET" es transferencia de energía por resonancia de fluorescencia; "RFU" es unidad de fluorescencia relativa; "DMEM" es Medio de Eagle Modificado de Dulbecco; "F12" es medio F12 de Ham; "FBS" es Suero de Bovino Fetal.

Los datos de espectrometría de masa, a menos que se especifique de otra forma, se obtiene vía LC/MS: columna Xbridge C18 (2.1 x 50 pm x 3.5 µp?) a una temperatura de 50°C +/- 10°C con una velocidad de flujo de 1 ml/min. El sistema de elución es 5 a 100% ACN w/ bicarbonato de amonio 10 mM (pH 10) por 7.0 minutos luego se mantiene a 100% ACN por 1.0 minuto acoplado con ionización por electrorrocio (intervalo de exploración de 100-800 amu; etapa de 0.2 amu; Fragmentador 80 v; ganancia 1.0; umbral 80).

Ciertos compuestos se purifican vía HPLC, método A: columna Xterra® RP18 (30 x 300 mm) a temperatura ambiente con una velocidad de flujo de 40 ml/min. El sistema de elución es o consiste de un gradiente isocrático de 0:100 (acetonitrilo: (0.1% HC1 en H20) ) a 50:50 (acetonitrilo: (0.1% HC1 en H20) ) por 20 minutos. Cualesquiera otras condiciones de HPLC se especifican de otra forma.

Preparación 1 [1- (5-Bromo-2, 4-difluoro-fenil) -etiliden] -amida del ácido (R) -2-metil-propan-2-sulfinico A una solución de 1- (5-bromo-2, 4-difluoro-fenil) -etanona (19 g, 64.7 mmoles, 1 equiv.) y amida del ácido (R)-2-metil-propan-2-sulfinico (10.2 g, 84.1 mmoles, 0.76 equiv) en THF (0.3 M, 215 mi) se agregó Ti(OEt)4 (29.5 g, 129 mmoles, 2.0 equiv) en una porción única a temperatura ambiente. La reacción se calentó a 70 °C y se dejó agitar 18 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, y se vertió en agua. La suspensión resultante se filtró a través de una almohadilla de tierra diatomácea y se lavó con acetato de etilo. El filtrado se colectó y extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida para producir un residuo. El residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice, eluyendo con un gradiente lineal de hexano a hexano: acetato de etilo (3:1) durante 20 minutos para producir el compuesto del título (81% de rendimiento) : MS (m/z) : 338, 340 (M+l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla 1 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de [1- (5-bromo-2, 4-difluoro-fenil) -etiliden] -amida del ácido (R) -2-metil-propan-2-sulfínico .

Tabla 1 Datos físicos Prep. No. Nombre químico MS (m/z) [1- ( 3-bromo-4-fluoro-fenil) -etiliden] - la amida del ácido (R) -2-metil-propan-2- 320, 322 (M+l) sulfínico [1- ( 5-bromo-2-fluoro-fenil ) - Ib etiliden] -amida del ácido (R)-2-metil- 320, 322 (M+l) propan-2-sulfínico (R) -N- (1- (3-bromofenil) etiliden) -2- le 302, 304 (M+l) metilpropan-2-sulfinamida (R) -N- (1- (5-bromo-2- Id clorofenil) etiliden) -2-metilpropan-2- 336, 338 (M+l) sulfinamida Preparación 2 Ester metílico del ácido (S) -3- ( (R) -2-metil-propan-2- sulfinilamino) -3- (5-bromo-2, 4-difluoro-fenil ) -butírico Se agregó n-butil litio (41.9 mi, 105 mmoles, 2 equiv) (2.5 M en Hexano) a una solución a -78°C de diisopropilamina (10.6 g, 105 mmoles, 2 equiv) en THF (262 mi) . Después de 15 minutos, se agregó por goteo acetato de metilo (7.7 g, 105 mmoles, 2 equiv) y la reacción se dejó agitar por 30 minutos. A la reacción se agregó por goteo una solución de triisopropóxido de clorotitanio (31.6 g, 115 mmoles, 2.2 equiv) en THF (50 mi). Después de agitación por 60 minutos a -78 °C, una solución de [1- (3-bromo-fenil) -etiliden] -amida del ácido 2-metil-propan-2-sulfínico (12.2 g, 40.4 mmoles, 1 equiv) en THF (50 mi) se agregó por goteo. La reacción se agitó por 3 h a -78 °C. La reacción se apagó con una solución saturada de cloruro de amonio (100 mi) , se calentó a temperatura ambiente, y se diluyó con agua (100 mi) . La suspensión resultante se filtró a través de una almohadilla de tierra diatomácea y se lavó con acetato de etilo. El filtrado se colectó y extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron y se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida para producir un residuo. El residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de hexano : acetato de etilo (5:1) a hexano: acetato de etilo (10:7) durante 20 minutos para producir el compuesto del título (72% de rendimiento): S (m/z) : 412, 414 ( +l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla 2 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de éster metílico del ácido (S) -3- ( (R) -2-metil-propan-2-sulfinilamino) -3- (5-bromo-2, 4-difluoro-fenil ) -butírico.

Tabla 2 Datos físicos Prep. No. Nombre químico MS (m/z) 3- (5-bromo-2, 4-difluorofenil) -3- ( (R) - 2a 1, 1-dimetiletilsulfinamido) butanoato 426, 428 (M+l) de (S) -etilo éster metílico del ácido (S) -3- ( (R) -2- 2b metil-propan-2-sulfinilamino) -3- (3- 394, 396 (M+l) bromo-4-fluoro-fenil) -butírico éster metílico del ácido (S) -3- ( (R) -2-c metil-propan-2-sulfinilamino) -3- (5- 394, 396 (M+l) bromo-2-fluoro-fenil) -butírico éster metílico del ácido (S) -3- ( (R) -2-d metil-propan-2-sulfinilamino) -3-fenil- 376 378 (M+l) butírico 3- (5-bromo-2-clorofenil) -3- ( (R) -1, 1-e dimetiletilsulfinamido) butanoato de 410, 412 (M+l) (S) -metilo Preparación 3 Clorhidrato de 3-amino-3- (2, 4-difluorofenil) -butanoato (S) -metilo A una solución de éster metílico del ácido (S)-3- ( (R) -2-metil-propan-2-sulfinilamino) -3-fenil-butírico (15.5 g; 37.6 mmoles; 1 equiv) y metanol (100 mi) se agregó cloruro de hidrógeno (4M en dioxano) (100 mi, 400 mmol, 11 equiv) en una porción única. La reacción se agitó a temperatura ambiente por lh. El solvente se removió bajo presión reducida para producir el compuesto del título el cual se utilizó sin purificación adicional (>95% de rendimiento) : MS (m/z) : 306, 308 (M+l).

Los siguientes compuestos en la Tabla 3 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de clorhidrato de 3-amino-3- ( 2 , 4-difluorofenil ) -butanoato de (S) -metilo.

Tabla 3 Preparación 4 (S) -3-amino-3- (5-bromo-2, 4-difluorofenil) butan-l-ol A una solución a 0°C de clorhidrato de (S)-etil-3- amino-3- (2, -difluorofenil) -butanoato (40.2 g, 90.5 mmoles, 1 equiv) en THF (180 mi) se agregó hidruro de litio y aluminio (1M en THF) (118 mi, 118 mmoles) durante 45 minutos mientras se mantuvo la temperatura de reacción interna por debajo de 15 °C. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó por 1.5 h. La reacción se enfrió a 0°C y y se apagó por la adición por goteo de agua (4.5 mi), hidróxido de sodio 2 M (4.5 mi), y agua (13.6 mi) . El sólido resultante se removió por filtración y se enjuagó con acetato de etilo. El filtrado se secó sobre MgS04 y se filtró. El solvente se removió bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo el cual se utilizó sin purificación adicional (71% de rendimiento, 73% de pureza como se determinó por LCMS) : MS (m/z): 280, 282.

Preparación 5 (S) -3-Amino-3- ( 3-bromo-fenil ) -butan-l-ol A una solución a 0°C de clorhidrato de 3-amino-3-(4-fluorofenil) -butanoato de (S) -metilo (14 g, 38.6 mmoles, 1 equiv) en THF (200 mi) se agregó borohidruro de litio (1.67 g, 77.1 mmoles, 2 equiv) cuidadosamente. Después de 5 minutos, la mezcla de reacción se calentó a 50 °C y se agitó. Hasta la terminación, la reacción se enfrió en un baño de hielo y se apagó por adición por goteo de agua. La reacción se acidificó con HC1 1N (100 mi) . Después de agitación por lh, la solución se hizo básica con NaOH 5N, y se extrajo con diclorometano . Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo (94 % de rendimiento): MS (m/z) : 244.0 y 246.0 (M+l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla 4 se prepararon esencialmente de acuerdo con la preparación de (S) -3-Amino-3- (3-bromo-fenil) -butan-l-ol .

Tabla 4 Preparación 6 (S) -l-benzoil-3- [1- (5-bromo-2, 4-difluoro-fenil ) -3-hidroxi-l- metil-propil] -tiourea A una solución de (S) -3-amino-3- (5-bromo-2, 4-difluoro-fenil ) -butan-l-ol (9.5 g, 34 inmoles, 1 equiv) en THF (50 mi) se agregó bis (trimetilsilil) trifluoroacetamida (8.7g, 34 mmol,l equiv). Después de 2 h, se agregó por goteo isotiocianato de benzoilo (5.5 g, 34 mmoles, 1 equiv). La reacción se agitó 18 h, se apagó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se extrajeron con HC1 1N y NaCl acuoso saturado. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo (> 95% de rendimiento, 90 % de pureza como se determinó por LCMS): MS (m/z) : 443, 445 (M+l).

Los siguientes compuestos en la Tabla 5 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de (S) -l-benzoil-3- [1- (5-bromo-2, 4-difluoro-fenil ) -3-hidroxi-1-metil-propil] -tiourea.

Tabla 5 Preparación 7 (S) -4- (5-bromo-2, 4-difluorofenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3- tiazin-2-amina A una solución de (S) -l-benzoil-3- [1- (5-bromo-2, - difluoro-fenil) -3-hidroxi-l-metil-propil] -tiourea (41 g, 68 mmoles) en 1,4-dioxano (20 mi) se agregó una solución acuosa de HC1 (5 N, 407 mi, 2.0 moles, 30 equiv) . La suspensión resultante se calentó a 100 °C. Después de agitación por 20 h, la reacción se concentró bajo presión reducida. La mezcla resultante se trató con una solución acuosa de HC1 (5 N, 407 mi, 2.0 moles) y se agitó a 100 °C por 18 h. La suspensión se enfrió a 10 °C y el pH se ajustó a pH 10 con una solución acuosa al 50% de NaOH. La solución acuosa resultante se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de columna instantánea de gel de sílice eluyendo con un gradiente de etapa de hexano: acetona (4:1) a hexano: acetona (3:1) para producir el compuesto del título (57% de rendimiento, 85% de pureza como se determinó por LCMS): S (m/z) : 321, 323 (M+l).

Los siguientes compuestos en la Tabla 6 se prepararon esencialmente de acuerdo con la preparación de (S) -4- (5-bromo-2, 4-difluorofenil ) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina.

Tabla 6 Datos físicos Prep. No. Nombre químico MS (m/z) Clorhidrato de (S) -4- (3-bromo-4- 7a fluoro-fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- 303, 305 (M+l) [1,3] tiazin-2-ilamina Clorhidrato de (S) -4- ( 3-bromofenil ) -4- 7b metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2- 285, 287 (M+l) amina (S)-4 - ( 5-bromo-2-clorofenil) -4-metil- 7c 319, 321 (M+l) 5, 6 -dihidro-4H- 1, 3-tiazin-2-amina Preparación 8 éster ter-butílico del ácido (S) - [4- (5-Bromo-2-fluoro-fenil) - 4-metil-5, 6-dihidro-4H- [1, 3] tiazin-2-il] -carbámico Una solución de (S) -l-benzoil-3- [1- (5-bromo-2-fluoro-fenil ) -3-hidroxi-l-metil-propil ] -tiourea (0.79 g, 1.8 mmoles) y HC1 acuoso (5 N, 25 mi, 71 mmoles) se calentó a 100°C. Después de agitación por 6 h, la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se dejó reposar durante la noche. La reacción se concentró bajo presión reducida para producir el clorhidrato de (S) -4- (5-bromo-2-fluorofenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina crudo [ S (m/z) : 303, 305 (M+l)].

A una solución de clorhidrato de (S) -4- (5-bromo-2-fluorofenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina en THF (30 mi) y bicarbonato de sodio acuoso saturado (15 mi) se agregó di- t-butildicarbonato (0.77 g, 3.5 mmoles). Después de 4 h, la reacción se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de columna instantánea de gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de hexano a hexano: acetato de etilo (3:1) para producir el compuesto del título (69% de rendimiento) : MS (m/z) : 403, 405 (M+l) Preparación 9 4- (5-bromo-2, 4-difluorofenil ) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l , 3- tiazin-2-ilcarbamato de (S) - ter-butilo A una solución de ( S ) -4- ( 5-bromo-2 , 4-difluorofenil ) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina (14.3 g, 39 mmoles 1 equiv) en 1,4-dioxano (190 mi) se agregó una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (190 mi) y agua (30 mi) a temperatura ambiente. La suspensión se agitó por 5 minutos seguido por la adición de di- ter-butildicarbonato (17 g, 78 mmoles, 2 equiv). Después de lh, la reacción se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice eluyendo con hexano: acetato de etilo (4:1) para producir el compuesto del título (78% de rendimiento) : MS (m/z) : 421, 423 (M+l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla 7 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de 4- (5-bromo-2, 4-difluorofenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato de (S) - ter-butilo.

Tabla 7 Preparación 10 2-Bromo-3-il-but-3-en-2-ol A una solución de 3-bromoacetofenona (50 g, 250 inmoles; 1 equiv) en MTBE (375 mi) a 10 °C, se agregó bromuro de vinilmagnesio (0.7 M en THF, 250 mmoles; 360 mi, 1 equiv) por goteo. La reacción se calentó a reflujo por 16 h. La reacción se enfrió y se apagó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La mezcla se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice eluyendo con un gradiente de etapa de hexanos: acetato de etilo (9:1) a hexanos: acetato de etilo (4:1) para producir el compuesto del título (40 g, 42% de rendimiento) : XH NMR (400 MHz, CDC13):1.64 (s, 3H) , 5.18 (d, J = 14 Hz, 1H) , 5.30 (d, J = 23 Hz, 1H), 6.13 (dd, J = 14, 23 Hz, 1H) , 7.21(t, J = 11 Hz, 1H) , 7.36-7.40 (m, 2 H) , 7.63 (s, 1H) .

Preparación 11 Clorhidrato de 2- [3- (3-Bromo-fenil) -but-2-enil] -isotiourea A una solución a 0°C de 2-bromo-3-il-but-3-en-2-ol (11 g, 29 mmoles, 1 equiv) y hexano (20 mi) se agregó cloruro de tionilo (6.9 g, 58 mmoles, 2 equiv) . La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente en este tiempo emitió gas vigorosamente. La reacción se agitó a temperatura ambiente hasta que cesó de emitir gas y el solvente se removió bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en acetonitrilo (100 mi). Tiourea (2.2 g, 29 mmoles, 1 equiv) se agregó y la reacción se calentó a 50 °C. Después de 2 h, la reacción se enfrió a temperatura ambiente. El precipitado resultante se colectó por filtración y se lavó con acetonitrilo para producir el compuesto del título (90 % de rendimiento): MS (m/z) : 285.0, 287.0 ( +l) .

Preparación 12 4- (3-Bromo-fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- [1, 3] tiazin-2- ilamina Una suspensión de clorhidrato de 2- [3- ( 3-bromo-fenil ) -but-2-enil] -isotiourea (17 g, 52 inmoles) en HC1 12 M (53 mi, 640 mmoles, 12 equiv) se calentó a 100 °C. Después de 24 h, la solución se enfrió a temperatura ambiente. El pH de la solución se ajustó a pH 10 con NaOH 2N acuoso y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo (70 % de rendimiento): MS (m/z) : 285.0, 287.0 (M+l) .

Preparación 13 N- (4- (3-bromofenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2- il ) acetamida A una solución de 0°C de 4- (3-bromo-fenil) -4-metil- 5, 6-dihidro-4H- [ 1 , 3] tiazin-2-ilamina (10 g, 35 mmoles, 1 equiv) y trietilamina (4.3 g, 42 mmoles, 1.2 equiv) en diclorometano (70 mi) se agregó por goteo cloruro de acetilo (2.8 g, 35 mmoles, 1 equiv) durante 5 minutos. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Después de 1 h, la reacción se diluyó con diclorometano y se extrajo con agua. Las capas orgánicas se separaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía de gel de sílice eluyendo con hexano: acetato de etilo (1:1) para producir el compuesto del título (87% de rendimiento) : MS (m/z) : 327, 329 (M+l) .

Preparación 14 (S) -N- [4- (3-Bromo-fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- [1, 3] tiazin- 2-il] -acetamida Se purificó la 4- (3-bromo-fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- [1, 3] tiazin-2-ilamina (20 g, 61 mmoles) por separación quiral de HPLC [Columna: 8 x 32 cm chiralpak AD; Eluyente: 60:40:0.2 (alcohol isopropílico : heptanos: dimetiletilamina) ; Flujo: 350 ml/min a UV 260 nm] . El segundo isómero eluyente se aisló para proporcionar el compuesto del título enantioméricamente enriquecido (35% de rendimiento) : MS (m/z) : 327, 329 (M+l) Preparación 15 Ester ter-butilico del ácido (S) - [4- (2, 4-difluoro-5- pirimidin-5-il-fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- [1,3] tiazin-2- il] -carbámico A una solución a 100°C de ( S ) -4- ( 5-bromo-2 , 4-difluorofenil ) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina (12.6 g, 29.9 mmol, 1 equiv) en 1, 2-dimetoxietano: agua: etanol (15: 7: 5, 300 mi) se agregó un ácido pirimidin-5-borónico (25 g, 203 mmoles, 6.8 equiv) seguido por carbonato de cesio (58 g, 180 mmoles, 6 equiv) y cloruro de bis ( trifenilfosfina) paladio ( II ) (4.2 g, 6.0 moles, 0.2 equiv) . Después de 40 minutos, la reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice eluyendo con un gradiente de etapa de hexanos: acetato de etilo (7:3) a hexanos: acetato de etilo (1:1) para producir el compuesto del título (67% de rendimiento): MS (m/z) : 421 (M+l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla 8 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de éster ter-butilico del ácido ( S ) - [ 4- ( 2 , 4-difluoro-5-pirimidin-5-il-fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- [1,3] tiazin-2-il ] -carbámico .

Tabla 8 Datos físicos Prep. No. Nombre químico MS (m/z) (S) -N-{4-[3- (5-Metoxi-piridin-3-il) - 15a fenil] -4-metil-5, 6-dihidro-4H- 356 (M+l) [1,3] tiazin-2-il } -acetamida (S) -N- (4- (3- (5-cloro-2-fluoropiridin- 15b 3-il) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- 378 ( +l) 1, 3-tiazin-2-il) acetamida Éster ter-butílico del ácido (S)-[4- ( -fluoro-3-pirimidin-5-il-fenil) -4- 15c 403 (M+l) metil-5, 6-dihidro-4H- [1,3] tiazin-2- il] -carbámico Éster ter-butílico del ácido (S)-[4- (2-fluoro-5-pirimidin-5-il-fenil) -4- 15d 403 (M+l) metil-5, 6-dihidro-4H- [1,3] tiazin-2- il] -carbámico (S) -N- [4-Metil-4- (3-pirimidin-5-il- 15e fenil) -5, 6-dihidro-4H- [1, 3] tiazin-2- 327 (M+l) il] -acetamida Éster ter-butílico del ácido (S)-{4- [4-fluoro-3- (2-fluoro-piridin-3-il) - 15f 420 (M+l) fenil] -4-metil-5, 6-dihidro-4H- [1,3] tiazin-2-il } -carbámico Ester ter-butílico del ácido (S)-{4- [2, 4-difluoro-5- (2-fluoro-piridin-3- 15g 438 (M+l) il) -fenil] -4-metil-5, 6-dihidro-4H- [1, 3] tiazin-2-il}-carbámico 4- (2, -difluoro-5- (5-fluoropiridin-3- 15h il) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3- 438 (M+l) tiazin-2-ilcarbamato de (S) -ter-butilo (S) -4- (2-cloro-5- (5-cloro-2- 15i fluoropiridin-3-il) fenil) -4-metil-5, 6- 370, 372 (M+l) dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina1 N-{4-[3- (5-Metoxi-piridin-3-il) - 15j fenil] -4-metil-5, 6-dihidro-4H- 356 (M+l) [1,3] tiazin-2-il } -acetamida (S) -N- (4- (3- (2-fluoropiridin-3- 15k il) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3- 344 (M+l) tiazin-2-il) acetamida El grupo t-butoxicarbonilo se escindió bajo condiciones de reacción.

Preparación 16 (S) -4- (3- (2-fluoropiridin-3-il) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- 1, 3-tiazin-2-amina A una solución de (S) -N- (4- (3- (2-fluoropiridin-3-il) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-il ) acetamida (450 mg, 1.3 mmoles) en metanol (40 mi) se agregó una solución de K2CO3 (210 mg, 1.5 mmoles) en metanol: agua (2:1, 15ml) . La reacción se agitó a temperatura ambiente por 6 h. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se disolvió en acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se lavó con agua y NaCl acuoso saturado, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir un residuo. El residuo se purificó usando cromatografía de columna SCX para producir el compuesto del título (65% de rendimiento): MS (m/z) : 302 (M+l) .

Preparación 17 (S)-4- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3- tiazin-2-amina A una solución de 4- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato de (S)-ter-butilo (1.1 g, 2.7 mmoles) y metanol (10 mi) se agregó ácido trifluoroacético (10 mi). La mezcla de reacción se calentó a 60 °C. Después de 15 h, el solvente se removió bajo presión reducida. Se agregó agua al residuo resultante y la mezcla se hizo básica con bicarbonato de sodio saturado. La fase acuosa básica se extrajo con diclorometano . La fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y el solvente se removió bajo presión reducida para producir el compuesto del título (62 % de rendimiento): S (m/z) : 303, 305 (M+l).

Preparación 18 (S) -N- (4- ( 3-bromo-4-fluorofenil ) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l , 3- tiazin-2-il) acetamida A una solución de (S) -4- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina (550 mg, 1.8 mmoles, 1.0 equiv) en tetrahidrofurano (20 mi) se agregó piridina (720 mg, 9.0 mmoles, 5 equiv) y anhídrido de ácido acético (220 mg, 2.2 mmoles, 1.2 equiv). Después de 10 minutos, la reacción se vertió en agua y la mezcla acuosa se extrajo con diclorometano . La fase orgánica se separó y se lavó con HC1 1N y NaCl acuoso saturado, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida para producir el compuesto del título (83 % de rendimiento) : MS (m/z) 345, 347 (M+l).

Preparación 19 4- (4-fluoro-3- (pirazin-2-il ) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- 1, 3-tiazin-2-ilcarbamato de (S) - ter-butilo Una solución de éster ter-butílico del ácido (S)- [4- (3-bromo-4-fluoro-fenil ) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- [1, 3] tiazin-2-il] -carbámico (100 mg, 250 umoles, 1 equiv) , tetraquis (trifenilfosfina) paladio (14mg, 12.40 moles, 0.05 equiv) y 2-tributilestanilpirazina (96 mg, 250 pmoles, 1 equiv) en dioxano (3 mi) se irradió en un microondas de grado laboratorio a una temperatura de 130 °C y se mantuvo por 20 minutos. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice eluyendo con un aumento de gradiente lineal de hexano a hexano: acetato de etilo (1:4) de 20 min para producir el compuesto del título (14 % de rendimiento, 90% de pureza como se determinó por LCMS) : MS (m/z) : 403 (M+l) .

Preparación 20 (S) -N- (4- (4-fluoro-3- (3-fluoropirazin-2-il ) fenil) -4-metil- 5 , 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2-il) acetamida Una solución de (S) -N- (4- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2-il) acetamida (500 mg, 1.5 mmoles, 1 equiv), 2-fluoro-3- ( tributilestanil) pirazina (1.7 g, 4.3 mmoles, 3.0 equiv) en tolueno (15 mi) se agregó cloruro de bis (trifenilfosfina) paladio (II) (51 mg, 72 ymoles, 0.05 equiv) y cloruro de litio (92 mg, 2.2 mmoles, 1.5 equiv) . La reacción se irradió en un microondas de grado laboratorio a una temperatura de 130 °C y se mantuvo por 3 h. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se purificó por cromatogra ía de gel de sílice eluyendo con un aumento de gradiente lineal de hexano a hexano: acetato de etilo (1:1) de 20 min para producir el compuesto del título (31 % de rendimiento) : MS (m/z): 363 (M+l) .

El siguiente compuesto en la Tabla 9 se preparó esencialmente de acuerdo con la preparación de ( S) -N- ( 4- ( 4- fluoro-3- (3-fluoropirazin-2-il) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H- l,3-tiazin-2-il) acetamida .

Tabla 9 Preparación 21 (R) -N- ( (S) -2- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-metilpent-4-en-2-il) - 2-metilpropan-2-sulfinamida KG2-E01905-021-2 A una solución a 0°C de (R, Z ) -N- ( 1- ( 3-bromo- - fluorofenil) etiliden) -2-metilpropan-2-sulfinamida (10 g, 31 mmoles, 1.0 equiv) en diclorometano (100 mi) se agregó lentamente cloruro de 2-metilalilmagnesio (0.5 M en THF, 250 mi, 125.92 mmoles, 4 equiv). Después de 2 h, la reacción se apagó con cloruro de amonio saturado y se extrajo con acetato de etilo. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de diclorometano a 10% diclorometano : acetato de etilo para producir el compuesto del título (35 % de rendimiento) : MS (m/z) : 376, 378 (M+l) .

Preparación 22 (S) -2- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-metilpent-4-en-2-amina A una solución de (R)-N-((S)-2- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-metilpent-4-en-2-il ) -2-metilpropan-2-sulfinamida (1.8 g, 5.1 mmoles, 1 equiv) en 1,4-dioxano (6 mi) se agregó cloruro de hidrógeno (4.0 M en 1,4-dioxano, 15 mi) . La reacción se agitó por 5 minutos y el solvente se removió bajo presión reducida. Al residuo se agregó bicarbonato de sodio acuoso saturado y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo (97 % de rendimiento): XH N R(CDC13, 400MHz) d 7.66 (dd, 1H, J= 6.40, J = 2.80Hz), 7.37-7.33 (m, 1H) , 7.02 (t, 1H, J = 8.40Hz), 4.83 (s, 1H), 4.62 (s, 1H) , 2.47 (d, 1H, J = 13.2 Hz) , 2.35 (d, 1H, J = 13.2 Hz), 1.44 (s, 3H) , 1.36 (s, 3H) .

Preparación 23 (S) -N- (2- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-metilpent-4-en-2- ilcarbamotioil ) benzamida A una solución de (S) -2- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-metilpent-4-en-2-amina (1.3 g, 4.6 mmoles, 1.0 equiv) en THF (5 mi) se agregó isotiocianato de benzoilo (0.63 mi, 4.6 mmoles, 1 equiv) . La reacción se agitó a temperatura ambiente por 3 h. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de 20 % diclorometano : hexanos a 50 % diclorometano : hexanos para producir el compuesto del título (84 % de rendimiento) : MS (m/z) : 457, 459 (M+23).

Preparación 24 N- ( (4S) -4- (3-bromo- -fluorofenil) -6- (yodometil ) -4, 6-dimetil- 5 , 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-il ) enzamida A una solución a 0°C de (S) -N- (2- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-metilpent-4-en-2-ilcarbamotioil ) benzamida (1.3 g, 3.0 mmoles, 1.0 equiv) en diclorometano (40 mi) se agregó yodo (1.5 g, 5.9 mmoles, 2.0 equiv) . La reacción se agitó a 0°C por 1 h y gradualmente se calentó a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se apagó con tiosulfato de sodio acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con diclorometano. La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo (82 % de rendimiento) : S (m/z) : 561, 563 (M+l).

Preparación 25 (S) -N- (4- (3-bromo- 4-fluorofenil) -4, 6, 6-trimetil-5, 6-dihidro 4H-1, 3-tiazin-2-il) benzamida A una solución de N- ( (4S) -4- (3-bromo-4- fluorofenil) -6- (yodometil) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2-il) enzamida (0.13 g, 0.23 mmoles, 1.0 equiv) en tolueno (1.5 mi) se agregó 2-2' -azo-bis-isobutironitrilo (0.006 g, 0.03 mmoles, 0.15 equiv) e hidruro de tri-b-butilestaño. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 3 h y se concentró bajo presión reducida. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de 5% acetato de etilo : hexanos a 20 % acetato de etilo : hexanos para producir el compuesto del título (25 % de rendimiento) : MS (m/z) : 435, 437 (M+l) .

Preparación 26 (S) -N- (4- (4-fluoro-3- (pirimidin-5-il) fenil) -4, 6, 6-trimetil- 5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-il ) benzamida A una solución a 97°C de ( S ) -N- ( 4- ( 3-bromo-4-fluorofenil) -4, 6, 6-trimetil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2-il)benzamida (0.067 g, 0.15 mmoles, 1.0 equiv) en 1,2-dimetoxietano (1.5 mi), etanol (0.7 mi) y agua (1.0 mi) se agregó ácido pirimidin-5-borónico (0.095 g, 0.77 mmoles, 5.0 equiv), carbonato de cesio (0.301 g, 0.92 mmoles, 6.1 equiv) y cloruro de bis ( trifenilfosfina) paladio (II) (0.022 g, 0.03 mmoles, 0.2 equiv) . La mezcla de reacción se agitó a 97 °C por 20 minutos. Después de enfriamiento a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía de columna instantánea de gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de diclorometano a 15% acetato de etilo : diclorometano para producir el compuesto del título (46 % de rendimiento): MS (m/z) : 435 ( +l) .

Preparación 27 (S) -3- (3-Bromo-fenil) -A/-metoxi-N-metil-3- (R) - ( 2-metil-propan- 2-sulfinilamino) -butiramida A una solución a -78 °C de clorhidrato de N, 0-dimetilhidroxilamina (12 g, 130 mmoles, 5.0 equiv) en THF (200 mi) se agregó n-butil litio (100 mi, 250 mmoles, lOequiv) (2.5 M en Hexanos) vía cánula. La reacción se agitó por 15 minutos y una solución de éster metílico del ácido (S) -3- ( (R) -2-metil-propan-2-sulfinilamino) -3-fenil-butírico (9.5 g, 25 mmoles, 1.0 equiv) en THF (50 mi) se agregó por goteo. La reacción se calentó a -60 °C, y se mantuvo a esta temperatura por 1 h. La reacción se apagó con cloruro de amonio acuoso saturado, se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se extrajo con agua, NaCl acuoso saturado, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir el compuesto del título (60 % de rendimiento): MS (m/z) : 405, 407 ( +l).

Los siguientes compuestos en la Tabla 10 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de (S) -3- (3-Bromo-fenil) -W-metoxi-N-metil-3- (R) - (2-metil-propan-2-sulfinilamino) -butiramida .

Tabla 10 Datos físicos Prep. No. Nombre químico MS (m/z) (S) -3- (3-bromo-4-fluorofenil) -3- ( (R) - 27a 1, 1-dimetiletilsulfinamido) -N-metoxi- 423, 425 (M+l) N-metilbutanamida (S) -3- (5-bromo-2, 4-difluorofenil) -3- 27b ( (R) -1, 1-dimetiletilsulfinamido) -N- 441, 443 (M+l) metoxi-N-metilbutanamida Preparación 28 [ (S) -1- (3-bromo-fenil) -l-metil-3-oxo-butil ] -amida del ácido (R) -2-metil-propan-2-sulfinico una solución a -78°C de (S) -3- (3-bromo-fenil) metoxi-W-metil-3- (R) - (2-metil-propan-2-sulfinilamino) -butiramida (1.5 g, 3.7 mmoles; 1.0 equiv) en THF (53 mi) se agregó bromuro de metilmagnesio (6.2 mi, 18.5 mmoles, 5.0 equiv) y la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Después de 1 h, la reacción se enfrió a -78 °C y se apagó con cloruro de amonio acuoso saturado. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo (>95 % de rendimiento): S (m/z) 360, 362 (M+l) Los siguientes compuestos en la Tabla 11 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de [ (S) -1- (3-bromo-fenil) -l-metil-3-oxo-butil] -amida del ácido (R) -2-Metil-propan-2-sulfinico.

Tabla 11 Preparación 29 (R) -N- ( (2S) -2- (3-bromofenil) -4-hidroxipentan-2 metilpropan-2-sulfinamida PG6-E01647-028 A una solución de [ (S) -1- ( 3-bromo-fenil ) -l-metil-3-oxo-butil] -amida del ácido (R) -2-metil-propan-2-sulfínico (1.34 g, 3.5 mmoles, 1.0 equiv) en metanol (20 mi) se agregó tetrahidroborato de sodio (1.4 g, 35 mmoles, 10.0 equiv). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se apagó cuidadosamente con agua y se extrajo el acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio y el solvente se removió bajo presión reducida para producir una mezcla de diastereómeros . Los diastereómeros se separaron por cromatografía en gel de sílice (120 g) eluyendo con un gradiente de (50:50) acetato de etilo: hexano a (100: 0) acetato de etilo: hexano. El segundo isómero eluyente se aisló y el solvente se removió bajo presión reducida para producir el compuesto del título como un diastereómero único (45 % de rendimiento) : MS (m/z) : 362, 364 (M+l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla 12 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de (R) -N- ( (2S) -2- (3-bromofenil) -4-hidroxipentan-2-il) -2-metilpropan-2-sulfinamida .

Tabla 12 El compuesto del título se aisló y utilizó como una mezcla de diastereómeros . 3 El compuesto del título se aisló y utilizó como una mezcla 65:35 de diastereómeros.

Preparación 30 (S) -4-Amino-4- ( 3-bromo-fenil ) -pentan-2-ol HCI Una solución de cloruro de hidrógeno (5 mi; 13 equiv; 20 mmoles) (4 M en dioxano) y [ (S) -1- ( 3-bromo-fenil ) - 3-hidroxi-l-metil-butil ] -amida del ácido (R) -2-metil-propan- 2-sulfinico (570 mg, 1.6 mmoles, 1.0 equiv) como un diastereómero único se agitó por 5 minutos. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se hizo básico con bicarbonato de sodio acuoso saturado. La fase acuosa se extrajo con diclorometano . La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo: S (m/z): 358, 360 (M+l).

Los siguientes compuestos en la Tabla 13 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de (S ) -4-Amino-4- ( 3-bromo-fenil ) -pentan-2-ol .

Tabla 13 4 El compuesto del título se aisló como una mezcla de diastereómeros .

Preparación 31 (4S, 6R) -4- (3-bromofenil) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-l, 3- tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo A una solución de (S) -4-amino-4- (3-bromo-fenil) -pentan-2-ol (410 mg, 794 ymoles) como un diastereómero único en THF (10 mi) se agregó bis (trimetilsilil) trifluoroacetamida (204 mg, 0.79 mmoles) . Después de 1 h, isotiocianato de benzoilo (259 mg, 1.7 mmoles) se agregó por goteo. La reacción se agitó por 1 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. Al residuo resultante se agregó cloruro de hidrógeno 5N (25 mi, 125 mmoles) y la reacción se calentó a 100 °C. Después de 48 h, el solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se dividió entre THF (20 mi) y bicarbonato de sodio saturado (10 mi) . A la mezcla se agregó dicarbonato de di-ter-butilo (347 mg, 1.6 mmoles) y la reacción se agitó por 48 h. La reacción se diluyó con agua y se extrajo con diclorometano. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El producto se purificó por gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de hexano a hexano: acetato de etilo (5:2) durante 20 minutos para producir el compuesto del titulo (52% de rendimiento, 70% de pureza como se determinó por LCMS) : S (m/z) : 399, 401 (M+l) .

Preparación 32 Ter-butil- (4S, 6R) -4- (3-bromo-4-fluorofenil) -4, 6-dimetil-5, 6- dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato Una solución de (R) -N- ( (2S) -2- (3-bromo-4-fluorofenil) -4-hidroxipentan-2-il) -2-metilpropan-2-sulfinamida como una mezcla 1:5 de diastereómeros (2 g, 1.0 equiv) en dioxano (5 mi) se agregó por goteo una solución de cloruro de hidrógeno 4N en dioxano (20 mi, 80 mmoles) a 0 °C. La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó por 5 minutos. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se hizo básico con bicarbonato de sodio acuoso saturado. La fase acuosa se extrajo con diclorometano . La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida .

El residuo resultante se disolvió en THF (50 mi) y se enfrió a 0 °C. Se agregó por goteo isotiocianato de benzoilo (1.7 g, 10.5 mmoles). La reacción se agitó por 1 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en dioxano (5 mi) y se transfirió a un recipiente de reacción de vidrio de pared gruesa. A la solución se agregó cloruro de hidrógeno 5N (75 mi, 375 mmoles) . El recipiente de reacción se tapó y calentó a 100°C. Después de 24 h, el solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se dividió entre THF (20 mi) y bicarbonato de sodio acuoso saturado (10 mi). A la mezcla se agregó dicarbonato de di-ter-butilo (1.7 g, 7.9 mmoles) y la reacción se agitó por 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con diclorometano . La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de columna usando gel de sílice (340 g) eluyendo con un gradiente de (0:100) Acetato de etilo: Hexano a (50: 50) Acetato de etilo: Hexano durante 25 min. El segundo diastereómero eluyente se colectó y el solvente se removió bajo presión reducida para producir 595 mg de una mezcla : Preparación 32: el compuesto del título, ter-butil- ( 4S, 6R) -4-( 3-bromo-4-fluorofenil ) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato: MS (m/z) : 417, 419 (M+l) ; y Preparación 32a: N- ( (4S, 6R) -4- (3-bromo-4-fluorofenil) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-il ) benzamida : MS (m/z) 421, 423 (M+l) .

Preparación 33 (4S) -4- (5-bromo-2, 4-difluorofenil ) -4, 6-dimetil-5 , 6-dihidro- 4H-1, 3-tiazin-2-amina una solución a 0 °C de (4S) amino-4- (5-bromo- 2, 4-difluorofenil) pentan-2-ol (1.3 g, 4.4 mmoles) como una mezcla de diastereómeros en THF (50 mi) se agregó isotiocianato de benzoilo (1.4 g, 1.2 mmoles) por goteo y la reacción se agitó por 1 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en dioxano (5 mi) y se transfirió a un recipiente de reacción de vidrio de pared gruesa. A la mezcla se agregó cloruro de hidrógeno 5N (75 mi, 375 mmoles) y la reacción se calentó a 100 °C. Después de 36 h, el solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se disolvió en agua. La mezcla acuosa se extrajo con acetato de etilo. La fase acuosa se hizo básica con NaOH 5N y se extrajo con 3:1 cloroformo : IPA. La fase cloroformo : IPA se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y el solvente se removió bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo.

El extracto de acetato de etilo se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y el solvente se removió bajo presión reducida. El residuo resultante se pasó a través de una columna SCX equilibrada con MeOH, se lavó con metanol, seguido por elución con NH3 2N en MeOH (50 mi) . El lavado de NH3 2N en MeOH se colectó y el solvente se removió bajo presión reducida. El residuo se combinó con el compuesto del titulo a partir de la extracción de cloroformo : IPA para producir el compuesto del titulo como una mezcla de (6R y 6S) (4S) -4- (5-bromo-2, 4-difluorofenil ) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-1, 3-tiazin-2-amina . (64% de rendimiento, 80% de pureza como se determinó por LCMS) : MS (m/z) : 335, 337 (M+l) .

Preparación 34 (4S, 6R) -4- (5-bromo-2, -difluorofenil ) -4, 6-dimetil-5, 6- dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo A una mezcla de (6R y 6S) (4S) -4- (5-bromo-2, 4-difluorofenil) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2-amina en THF (20 mi) y bicarbonato de sodio acuoso saturado (10 mi) se agregó dicarbonato de di-ter-butilo (900 mg, 4.1 mmoles) . Después de 2 h, la reacción se diluyó con agua y se extrajo con diclorometano . La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El producto se purificó por gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de hexano a hexano: acetato de etilo (4:1) durante 5 minutos. El segundo diastereómero eluyente se colectó y el solvente se removió bajo presión reducida para producir el titulo: (43% de rendimiento) : MS (m/z) : 435, 437 (M+l) .

Preparación 35 Ester ter-butilico del ácido [ ( 4S, 6R) -4 , 6-dimetil-4- ( 3- pirimidin-5-il-fenil) -5, 6-dihidro-4H- [1,3] tiazin-2-il] - carbámico A una solución a 100°C de (4S, 6R) -4- (3-bromofenil) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo en 1, 2-dimetoxietano : agua: etanol [(3: 1.5: 1), 12 mi] se agregó, en una porción única, ácido pirimidin-5-borónico (128mg, 5.9 mmoles, 2.5 equiv) , cloruro de bis ( trifenilfosfina) paladio ( II ) (29 mg, 41 µ??????, 0.1 equiv) y carbonato de cesio (1.24 g, 1.24 mmoles, 3 equiv). Después de 20 minutos, la reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua, y se extrajo con diclorometano. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de columna instantánea de gel de sílice eluyendo con un gradiente lineal de hexano a hexano: acetato de etilo (5:2) durante 20 minutos para producir el compuesto del titulo (39% de rendimiento) : MS (m/z) : 399 (M+l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla 14 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de éster ter-butilico del ácido [ (4S, 6R) -4, 6-dimetil-4- (3-pirimidin-5-il-fenil) -5, 6-dihidro-4H- [1, 3] tiazin-2-il] - carbámico .

Tabla 14 Aislado como una mezcla del compuesto del título y N- ( (4S, 6R) -4-(3-bromo-4-fluorofenil) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-il)benzamida. MS (m/z) : 421 (M+l) .

Preparación 36 l-bromo-3- (prop-l-en-2-il ) enceno Se suspendió bromuro de metiltrifenilfosfonio (35.7 g, 97.9mmoles, 1.3 equiv) en tetrahidrofurano (100 mi) y se enfrió a O °C. Se agregó lentamente W-butil litio (2.5M en Hexanos, 27.0 g, 97.7 mmoles, 39.2 mi, 1.3 equiv) a la mezcla vía un embudo de adición. La solución resultante se agitó por 1 h a 0 °C. Una solución de 3-bromoacetofenona (15.0 g, 75.3 mmoles, 10.0 mi, 1.0 equiv) en tetrahidrofurano (50 mi) se agregó lentamente vía un embudo de adición. La mezcla resultante se calentó a temperatura ambiente y se agitó por 3 h. La reacción se enfrió a 0°C y se apagó con solución de cloruro de amonio acuoso saturado. Las capas se dividieron en un embudo de separación y la fase acuosa se extrajo con hexanos. La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró, y se dejó reposar durante la noche a temperatura ambiente. La fase orgánica se decantó de un precipitado y se concentró bajo presión reducida. El sólido resultante se diluyó con hexanos y se filtró. El precipitado se lavó con hexanos. El filtrado se concentró y la mezcla resultante se purificó por cromatografía de columna instantánea de gel de sílice (hexanos) para producir el compuesto del título (83% de rendimiento) : 1H N R (CDCI3, 400MHz) d 7.59 (t, 1H, J=1.72 Hz), 7.40-7.36 (m, 2H) , 7.18 (t, 1H, J = 8 Hz), 5.36 (s, 1H) , 5.12-5.10 (m, 1H) , 2.13-3.11 (m, 3H) .

El siguiente compuesto en la Tabla 15 se preparó esencialmente de acuerdo con la preparación de l-bromo-3-(prop-l-en-2-il ) benceno.

Tabla 15 ti NMR(CDC13, 400MHz): d 7.61 (dd, 1H, J = 6.8, 2.2Hz), 7.36-7.32 (m, 1H), 7.05 (t, 1H, J = 8.4Hz), 5.29 (s, 1H) , 5.09-5.07 (m, 1H) , .10-2.09 (m, 3H) .

Preparación 37 4- (3-Bromofenil) -2-hidroxipent-4-enoato de etilo A una solución de 2-bromo-l-fluoro-4- (prop-l-en-2- il)benceno (12.3 g, 62.2 mmol, 1.0 equiv) en acetonitrilo (124 mi, 0.5 M) se agregaron glioxalato de etilo (38.1 g, 37 mi, 187 inmoles, 3 equiv) e hidrato de trifluorometansulfonato de iterbio (7.72 g, 12.4 mmoles, 0.2 equiv). La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se concentró bajo presión reducida y se diluyó con éter dietílico. La solución resultante se lavó dos veces con agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía de columna instantánea en gel de sílice (330g) en dos lotes usando un gradiente de 0-100% acetato de etilo/hexanos para producir el compuesto del título (87% de rendimiento) : H N R (CDC13, 400 MHz): d 7.53 (t, 1H, J = 1.9 Hz), 7.41-7.37 (dt, 1H) , 7.33- 7.30 (dt, 1H), 7.18 (t, 1H, J = 7.6 Hz) , 5.37 (s, 1H) , 5.22 (s, 1H) , 4.26-4.21 (m, 1H) , 4.17-3.99 (m, 2H) , 2.99 (dd, J = 14.8, 4.8 Hz), 2.83-2.72 (m, 2H) , 1.23 (t, 3H, J = 7.6 Hz) .

El siguiente compuesto en la Tabla 16 se preparó esencialmente de acuerdo con la preparación de 4- (3- bromo enil ) -2-hidroxipent-4-enoato de etilo.

Tabla 16 H NMR(CDC13, 400MHz): d 7.59-7.55(m, 1H) , 7.32-7.27 (m, 1H) , 7.08 .03 (m, 1H) , 5.33 (s, 1H) , 5.20 (s, 1H) , 4.26-4.20 (m, 1H) , 4.19 4.02 (m, 2H), 2.96 (dd, J= 14.8, 4.8Hz), 2.80-2.73 (m, 2H) , 1.24 (t, 3H, J = 7.6Hz) Preparación 38 2-Amino-4- ( 3-bromofenil ) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-6- carboxilato de etilo A una solución de 4- ( 3-bromofenil ) -2-hidroxipent-4-enoato de etilo (5.1 g, 17 mmoles) en acetonitrilo (68 mi) se agregó 2,6-lutidina (2.19 g, 20.4 mmol, 1.2 equiv) . La reacción se enfrió a 0 °C y se agregó por goteo anhídrido trifluorometansulfónico (3.30 mi, 19.6 mmol, 1.15 equiv) durante aproximadamente 5 minutos. La mezcla se agitó a 0 °C por 20 minutos. Se agregó tiourea (2.59 g, 34.0 mmol, 2 equiv) y la reacción se calentó a temperatura ambiente. Después de 45 minutos, la mezcla se concentró bajo presión reducida. El aceite anaranjado viscoso resultante luego se agregó vía pipeta larga a ácido sulfúrico agitado (17.8 M, 8 mi) a temperatura ambiente. Después de 20 minutos, la mezcla se agregó por goteo a una solución a 0°C agitada vigorosamente de K2C03 (ca. 50 g) en 50 mi de H20) . Se agregó agua adicional para habilitar la agitación en formación sólida durante el enfriamiento. El sólido canela/anaranjado se colectó por filtración. El sólido se dejó secar en el papel filtro por una corriente de aire por 1 h para producir el compuesto del título como una mezcla de diastereómeros el cual se utilizó sin purificación adicional: MS (m/z) : 357, 359 (M+l).

El siguiente compuesto en la Tabla 17 se preparó esencialmente como se describe en la preparación de 2-amino- 4- (3-bromofenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-6- carboxilato de etilo.

Tabla 17 Diastereómeros racémicos Preparación 39 4- ( 3-Bromofenil ) -2- ( ter-butoxicarbonilamino) -4-metil dihidro-4H-l , 3-tiazin-6-carboxilato de etilo A una suspensión de 2-amino-4- ( 3-bromofenil ) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-6-carboxilato de etilo (6.1 g, 17 mmol) en 1, 4-dioxano (35 mi), agua (18 mi), y bicarbonato de sodio acuoso saturado (18 mi) se agregó di-t-butildicarbonato (7.42 g, 34.0 mmol, 2 equiv) . La mezcla se agitó por casi 60 h. La reacción se diluyó con agua y se extrajo tres veces con CH2CI2. La capa orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró, y se concentró bajo presión reducida para producir un aceite café. El aceite se purificó por cromatografía de columna instantánea en gel de sílice (150 g) eluyendo con un gradiente de 0 a 100% acetato de etilo/hexano para producir el compuesto del título como una mezcla de diastereómeros (64% de rendimiento): MS (m/z) : 457, 459 ( +l) .

El siguiente compuesto en la Tabla 18 se preparó esencialmente de acuerdo con la preparación de 4- (3-bromofenil) -2- ( er-butoxicarbonilamino) -4-metil-5, 6-dihidro- 4H-1, 3-tiazin-6-carboxilato de etilo.

Tabla 18 Diastereómeros racémicos Preparación 40 (4S, 6S) -4- ( 3-bromofenil) -2- (ter-butoxicarbonilamino) -4-metil 5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-6-carboxilato de etilo Se purificó 4- ( 3-bromofenil ) -2- ( ter-butoxicarbonilamino) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-6-carboxilato de etilo (3.5 g, 7.7 mmol) por HPLC quiral en dos fases: (Columna: Chiralcel OJ 8 x 32 cm; Eluyente: 1 : 3 (3A alcohol : heptano) ; Flujo: 400 ml/min a UV 240 nm) , proporcionando el corte 1 que contiene picos 1 y 2 de 3; luego los picos 1 y 2 se purificaron adicionalmente por cromatografía quiral adicional (Columna: Chiralcel OD 8 x 32 cm; Eluyente 1 : 9 (alcohol isopropílico : heptano); Flujo: 400 ml/min a UV 240 nm) . El aislamiento del segundo isómero eluyente proporcionó el compuesto del título después de la concentración de las fracciones bajo presión reducida (14% de rendimiento) .

Preparación 41 ( +/-) (4S, 6S) -4- (3-bromofenil) -6- (hidroximetil) -4-metil-5, 6- dihidro-4tf-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo A una solución a 0°C de 4- ( 3-bromofenil ) -2- ( ter-butoxicarbonilamino) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-6-carboxilato de etilo (2.0 g, 4.4 mmol) en tetrahidrofurano (87 mi) y etanol (25 mi) se agregó borohidruro de litio (289 mg, 13.1 mmol, 3 equiv) . La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó por 4 h. La mezcla de reacción se apagó con NH4C1 saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado y se secaron sobre Na2S04. La mezcla se filtró y se concentró para producir un aceite amarillo claro. El aceite se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice (120 g) usando un gradiente de 0 a 100% acetato de etilo/hexano para producir el compuesto del título (29% de rendimiento) : MS (m/z) : 415, 417 (M+l).

Preparación 42 (4S, 6S) -4- (3-bromofenil) -6- (hidroximetil ) -4-metil-5, 6- dihidro-4ií-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo ( +/-) (4S, 6S) -4- (3-bromofenil) -6- (hidroximetil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-jutiio (870 mg, 2.1 mmol) se purificó por separación quiral de HPLC: (Columna: Chiralpak AD 8 x 36 cm x 20 ym; Eluyente: 100% 3A alcohol etílico; Flujo: 400 ml/min a UV 250 nm) . El segundo isómero eluyente se aisló para proporcionar el compuesto del título enantioméricamente enriquecido (38.5% de rendimiento): S (m/z) : 415, 417 (M+l) .

Preparación 43 (+/-) (4S, 6S) -6- (hidroximetil) -4-metil-4- (3- (pirimidin-5- il) fenil) -5, 6-dihidro-4¿í-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter butilo A una solución a 110°C de ( +/-) (4S, 6S) -4- (3-bromofenil) -6- (hidroximetil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo (150 mg, 0.36 mmol) en 1, 2-dimetoxietano (4.5 mi), etanol (1.5 mi), y agua (2.3 mi) se agregó ácido pirimidin-5-borónico (112 mg, 0.90 mmoles, 2.5 equiv) , carbonato de cesio (353 mg, 1.08 mmol, 3 equiv) , y cloruro de bis ( trifenilfosfina) paladio ( II ) (25 mg, 0.036 mmol, 0.1 equiv). La reacción se agitó a 110 °C. Después de 20 minutos, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y H20. Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice (5% MeOH/DCM) para producir el compuesto del título (29% de rendimiento) : MS (m/z) : 415 (M+l) .

El siguiente compuesto en la Tabla 19 se preparó esencialmente de acuerdo con la preparación de ( +/-) (4S, 6S) - 6- (hidroximetil) -4-metil-4- (3- (pirimidin-5-il ) fenil) -5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo.

Tabla 19 Preparación 44 (+/-) (4S, 6S) -4- (3-bromofenil) -6- (2-hidroxipropan-2-il) -4- metil-5, 6-dihidro-4íí-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo A una solución a 0°C de 2-amino-4- ( 3-bromofenil ) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-6-carboxilato de etilo (250 mg, 0.55 mmol) en tetrahidrofurano (5.5 mi) se agregó cloruro de metilmagnesio (0.58 mi, 1.75 mmol, 3.2 equiv) . Después de 15 minutos, se agregó cloruro de metilmagnesio adicional (0.38 mi, 1.2 mmol, 2 equiv). Después de 30 minutos, la mezcla de reacción se apagó con NHC1 acuoso saturado y se diluyó con acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado, se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice (80 g) eluyendo con un gradiente de 0 a 100% acetato de etilo/hexanos para producir el compuesto del título (26% de rendimiento) : MS (m/z) : 443, 445 (M+l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla 20 se prepararon esencialmente de acuerdo con la preparación de ( +/-) (4S, 6S) -4- (3-bromofenil) -6- ( 2-hidroxipropan-2-il ) -4-metil-5, 6-dihidro-4íT-l, 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo.

Tabla 20 Preparación 45 (+/-) (4S, 6S) -4- (4-fluoro-3- (pirimidin-5-il) fenil) -6- (2- hidroxipropan-2-il) -4-metil-5, 6-dihidro-4.fi-1 , 3-tiazin-2- ilcarbamato de ter-butilo A una solución a 100°C de (4S, 6S) -4- (3-bromo-4-fluorofenil) -6- (2-hidroxipropan-2-il) -4-metil-5, 6-dihidro-4tf-1, 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo (1.11 g, 2.41 mmoles, 1.0 equiv) en 1, 2-dimetoxietano (22 mi) y agua (7 mi) se agregaron ácido pirimidin-5-borónico (1.2 g, 9.6 mmol, 4 equiv), cloruro de bis (trifenilfosfina)paladio (II) (508 mg, 0.723 mmol, 0.3 equiv) , y carbonato de cesio (2.36 g, 7.2 mmol, 3 equiv). Después de 25 min, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se dividió entre EtOAc y agua. La fase acuosa se extrajo 3 veces con EtOAc. La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida para producir el producto crudo. El residuo crudo se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice (80 g) eluyendo con EtOAc para producir: Preparación 45: el compuesto del título, (460 mg, 41% de rendimiento): S (m/z): 461 (M+l); y Preparación 45a: ( +/-) 2- ( (4S, 6S) -2-amino-4- (4-fluoro-3-(pirimidin-5-il) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4ií-l , 3-tiazin-6-il) propan-2-ol, (145 mg) : MS (m/z): 361 (M+l).

Los siguientes compuestos en la Tabla 21 se prepararon esencialmente de acuerdo con la preparación de (+/-) (4S, 6S) -4- (4-fluoro-3- (pirimidin-5-il ) fenil ) -6- (2-hidroxipropan-2-il) -4-metil-5, 6-dihidro-4tf-l , 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo .

Tabla 21 Compuesto racémico preparado y purificado vía condiciones de cromatografía quiral descritas posteriormente en la Preparación 45.

Preparación 46 (4S, 6S) -4- (4-fluoro-3- (pirimidin-5-il) fenil) -6- (2- hidroxipropan-2-il) -4-metil-5, 6-dihidro-4íí-l , 3-tiazin-2- ilcarbamato de ter-butilo ( +/-) (4S, 6S) -4- (4-fluoro-3- (pirimidin-5-il ) fenil) - 6- (2-hidroxipropan-2-il) -4-metil-5, 6-dihidro-4#-l, 3-tiazin-2- ilcarbamato de ter-butilo (455 mg, 0.99 mmol) se purificó por separación quiral de HPLC (Columna: Chiralpak AD-H 2.1 x 25 cm x 5 µp?; Eluyente: 20% EtOH/C02; Flujo: 70 ml/min a UV 225 nm) . El segundo isómero eluyente se aisló para proporcionar el compuesto del titulo enantioméricamente enriquecido (29%) : MS (m/z) : 461 (M+l) .

Ejemplos Ejemplo 1 Sal diclorhidrato de (S) -4- (3- (2-fluoropiridin-3-il) fenil) -4- metil-5, 6-dihidro-4fí-l, 3-tiazin-2-amina A una solución de (S) -4- (3- ( 2-fluoropiridin-3-il) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina (160 mg, 0.531 mmoles) en THF (4 mi) se agregó una solución saturada de HC1 en dioxano (2 mi) a 0 °C. La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente por 4h. El solvente se removió bajo presión reducida. El sólido resultante se lavó repetidamente con éter anhidro y se secó bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo (87% de rendimiento) : MS (m/z) : 302 (M+l) .

Ejemplo 2 Diclorhidrato de (S) -4- [3- ( 5-cloro-2-fluoro-piridin-3-il) - fenil] -4-metil-5, 6-dihidro-4fí- [1,3] tiazin-2-ilamina 2785443, PG6-E01268-074 Una solución de (S) -W-{4- [3- (5-cloro-2-fluoro-piridin-3-il) -fenil] -4-metil-5, 6-dihidro-4H- [1, 3] tiazin-2-il } -acetamida (430 mg, 1.1 mmoles) en ácido trifluoroacético (50 mi) y metanol (50 mi) se agitó por 8 h a 60 °C. El solvente se removió bajo presión reducida. El residuo se disolvió en agua y se neutralizó con bicarbonato saturado y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida para producir un residuo. El residuo se purificó por cromatografía de columna instantánea de gel de sílice eluyendo con acetato de etilo. La amina resultante se disolvió en diclorometano y gas de HC1 se burbujeó a través de la solución por 30 segundos. El solvente se removió bajo presión reducida para producir el compuesto del título (52%) : MS (m/z) : 336 (M+l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla prepararon esencialmente como se describe en la preparación de diclorhidrato de (S) -4- [3- (5-cloro-2-fluoro-piridin-3-il) - fenil] -4-metil-5, 6-dihidro-4i7- [1, 3] tiazin-2-ilamina .

Tabla 22 Purificado por HPLC preparativa de fase inversa: método A Ejemplo 5 (S) -4- (2, 4-Difluoro-5-pirimidin-5-il-fenil) -4-metil-5, 6- dihidro-4ií- [1,3] tiazin-2-ilamina En una solución de éster ter-butilico del ácido (S) - [4- (2, 4-difluoro-5-pirimidin-5-il-fenil) -4-metil-5, 6- dihidro-4H- [1, 3] tiazin-2-il] -carbámico (263 mg, 625 pmoles) en diclorometano (15 mi) a temperatura ambiente se burbujeó gas de HC1 por 1 minuto. La reacción se selló con un septo y se agitó 18 h. El solvente se removió bajo presión reducida para producir el compuesto del título (>95% de rendimiento) : MS (m/z) : 321 (M+l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla 23 se prepararon esencialmente de acuerdo con la preparación (S) -4- (2, 4-difluoro-5-pirimidin-5-il-fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H -[1,3] tiazin-2-ilamina .

Tabla 23 Datos físicos Ej. No. Nombre químico MS (m/z) Diclorhidrato de (S) -4- (4-fluoro-3- 6 pirimidin-5-il-fenil ) -4-metil-5, 6- 303 (M+l) dihidro-4H- [1,3] tiazin-2-ilamina Diclorhidrato de (S) -4- (2-fluoro-5- 7 pirimidin-5-il-fenil ) -4-metil-5, 6- 303 (M+l) dihidro-4H- [1,3] tiazin-2-ilamina Clorhidrato de (S) -4- [4-fluoro-3- (2- 8 fluoro-piridin-3-il) -fenil] -4-metil- 320 (M+l) 5, 6-dihidro-4H- [1,3] tiazin-2-ilamina12 Clorhidrato de (S) -4- (2, 4-difluoro-5- (2-fluoropiridin-3-il) fenil) -4-metil- 9 338 (M+l) 5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina13 Clorhidrato de (S) -4- (2-cloro-5- (5- cloro-2-fluoropiridin-3-il) fenil) -4- 10 370, 372 (M+l) metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2- amina 14 Diclorhidrato de (S) -4- (2, 4-difluoro- 5- (5-fluoropiridin-3-il) fenil) -4- 11 338 (M+l) metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2- amina Diclorhidrato de (S) -4- (4-fluoro-3- 12 (pirazin-2-il) fenil) -4-metil-5, 6- 303 (M+l) dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina13 (+/-) ( (4S, 6S) -2-amino-4-metil-4- (3- 13 (pirimidin-5-il) fenil) -5, 6-dihidro-4H- 315 (M+l) 1, 3-tiazin-6-il)metanol ( (4S, 6S) -2-amino-4-metil-4- (3- 14 (pirimidin-5-il) fenil) -5, 6-dihidro-4H- 315 (M+l) 1, 3-tiazin-6-il)metanol Diclorhidrato de (4S, 6R) -4, 6-dimetil- 15 4- (3- (pirimidin-5-il) fenil) -5, 6- 299 (M+l) dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina13 Diclorhidrato de (4S, 6R) -4- (2, 4- difluoro-5- (pirimidin-5-il ) fenil) -4, 6- 16 335 (M+l) dimetil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2- amina13 (+/-) 2-( (4S,6S)-2-amino-4-(4-fluoro- 3- (pirimidin-5-il) fenil) -4-metil-5, 6- 17 361 (M+l) dihidro-4H-l, 3-tiazin-6-il ) propan-2-ol Purificado por cristalización de acetonitrilo 13 Purificado por HPLC preparativa de fase inversa, método A 14 HC1 1M en éter usado en lugar de HC1 (g) Ejemplo 18 Diclorhidrato de (S) -4-metil-4- ( 3-pirimidin-5-il-fenil ) -5, 6- dihidro-4H- [1,3] tiazin-2-ilamina Una solución de (S) -N- [4-Metil-4- ( 3-pirimidin-5-il- fenil) -5, 6-dihidro-4H- [1, 3] tiazin-2-il] -acetamida (2.7 g, 8.3 mmoles, 1.0 equiv) se agitó en cloruro de hidrógeno 5N (50 mi, 250 mmoles, 30 equiv) a 100 °C por 2 h. La reacción se enfrió y los volátiles se removieron bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase acuosa se neutralizó con bicarbonato de sodio acuoso saturado y se extrajo el acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida para producir un residuo. El residuo se filtró a través de un tapón de gel de sílice y se lavó con acetato de etilo. El tapón de gel de sílice se lavó adicionalmente con acetato de etilo que contiene acetato de etilo e isopropil amina a 10%. El lavado con isopropil amina a 10% en acetato de etilo se colectó y el solvente se removió bajo presión reducida. La amina libre resultante se disolvió en una solución de 100 mi de agua que contiene 14 mi de HC1 1N. La solución resultante se secó por congelación para producir el compuesto del título (81% de rendimiento) : MS (m/z) : 285 (M+l) .

Los siguientes compuestos en la Tabla 24 se prepararon esencialmente como se describe en la preparación de diclorhidrato de (S) -4-metil-4- (3-pirimidin-5-il-fenil) -5, 6-dihidro-4H- [1,3] tiazin-2-ilamina .

Tabla 24 Purificado por cristalización de la sal de HCl cruda a partir de 2-5% metanol en acetonitrilo .

Purificado por HPLC, método ? Ejemplo 22 Diclorhidrato de ( 4S, 6R) -4- ( 4-fluoro-3- (pirimidin-5- il) fenil) -4, 6-dimetil-5 , 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-amina En una mezcla 1:1 de (4S, 6R) -4- (4-fluoro-3- (pirimidin-5-il) fenil) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-j utilo y N- ( (4S, 6R) -4- (3-bromo-4-fluorofenil) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-il)benzamida (360 mg) en diclorometano (10 mi) a temperatura ambiente se burbujeó gas de HCl por 1 minuto. La reacción se selló con un septo y se agitó 18h. El solvente se removió bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida para producir N- ( (4S, 6R) -4- (3-bromo-4-fluorofenil) -4, 6-dimetil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-2-il)benzamida como un residuo. Al residuo resultante se agregó HC1 5N (5 mi) y la reacción se calentó a 100 °C por 2 h. El solvente se removió bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo crudo.

La fase acuosa del lavado de acetato de etilo inicial se neutralizó con bicarbonato de sodio saturado y se extrajo con (3:1) CHC13 : alcohol isopropilico . La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. Este material se combinó con el producto crudo y se purificó por HPLC preparativa: columna Xterra® RP18 (30 x 300 mm) a temperatura ambiente y a flujo de 40 ml/min. El sistema de elución consiste de un gradiente isocrático de 0:100 (acetonitrilo : (0.1 % HC1 en ¾0) ) por 1-5 min seguido por un gradiente lineal de 10:90 (acetonitrilo : (0.1 % HC1 en H20) ) a 30:70 (acetonitrilo : (0.1 % HC1 en H20) ) durante 20 min. Las fracciones se combinaron y se concentraron bajo presión reducida para producir el compuesto del titulo (50% de rendimiento) : MS (m/z) : 317 (M+l) .

Ejemplo 23 (+/-) 2- ( (4S, 6S) -2-amino-4- (4-fluoro-3- (pirimidin-5 il) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-6-il ) propan burbujeó gas de cloruro de hidrógeno a través de una solución de ( +/-) (4S, 6S) -6- (2-hidroxipropan-2-il) -4-metil-4- (3- (pirimidin-5-il ) fenil) -5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2-ilcarbamato de ter-butilo (33 mg, 0.075 mmol) en diclorometano (5 mi) y la mezcla resultante se selló y se agitó por 16 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y se purificó por paso a través de una columna SCX equilibrada con MeOH, eluyendo con NH3 7N en MeOH. La base libre resultante se disolvió en MeOH y se agregó HC1 1N en Et20 (aproximadamente 5 equiv) . La mezcla se concentró y co-evaporó con Et20 dos veces para producir el compuesto del titulo (87% de rendimiento) : MS (m/z) : 343 (M+l) .

Ejemplo 24 2- ( (4S, 6S) -2-amino-4- (4-fluoro-3- (pirimidin-5-il ) fenil) metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-6-il ) propan-2-ol Una solución de (4S, 6S) -6- (2-hidroxipropan-2-il) -4 metil-4- (3- (pirimidin-5-il ) fenil) -5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin- 2-ilcarbaraato de ter-butilo (221 mg, 0.50 mmol) en ácido trifluoroacético (2 mi) se agitó a temperatura ambiente por 80 min. La mezcla se agregó directamente a una columna SCX equilibrada con MeOH. La columna se lavó con MeOH (100 mi) y el producto se eluyó con NH3 7N en MeOH (100ml) . La solución se concentró bajo presión reducida. El residuo se diluyó con CH2C12 y se burbujeó HC1 (g) por 5 min. La mezcla de reacción se concentró para . producir el compuesto del título (67.5% de rendimiento) : MS (m/z) : 343 (M+l) .

El siguiente compuesto en la Tabla 25 se preparó esencialmente como se describe en la preparación de 2- ( (4S, 6S) -2-amino-4- (4-fluoro-3- (pirimidin-5-il ) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l, 3-tiazin-6-il ) propan-2-ol .

Tabla 25 Procedimientos de Ensayo In Vitro: Para los ensayos celulares y enzimáticos in vitro, los compuestos de prueba se prepararon en DMSO para elaborar una solución madre 10 mM. La solución madre se diluyó en serie en DMSO para obtener una curva de dilución de diez puntos con concentraciones de compuesto finales que varían desde 10 mM a 1 p en una placa de fondo redondo de 96 cavidades antes de conducir los ensayos de célula completa y enzimáticos in vitro.

Ensayos de inhibición de proteasa in vitro: Ensayo de FRET de BACE Las diluciones seriales de los compuestos de prueba se prepararon como se describió anteriormente. Los compuestos son adicionalmente diluidos 20X en amortiguador KH2 PO4 . Diez µ? de cada dilución se agregaron a cada cavidad en la hilera A a H de una placa negra de bajo enlace de proteína correspondiente que contiene la mezcla de reacción (25 µ? de KH2PO4 50 mM, pH 4.6, TRITON® X-100 1 mM, 1 mg/ml de Albúmina de Suero Bovino, y 15 µ? de sustrato FRET) (Véase Yang, et al., J. Neurochemistry, 91(6) 1249-59 (2004)). El contenido se mezcló bien en un sacudidor de placas por 10 minutos. Quince µ? de BACE humana doscientos pM (1-460) : Fe (Véase Vasser, et al., Science, 286, 735-741 (1999)) en el amortiguador KH2P04 se agregaron a la placa que contiene sustrato y compuestos de prueba para iniciar la reacción. La RFU de la mezcla en el tiempo 0 se registró a longitud de onda de excitación de 355 nm y longitud de onda de emisión de 460 nm, después de mezclado breve en un sacudidor de placas. La placa de reacción se cubrió con chapa de aluminio y se mantuvo en un horno humidificado oscuro a temperatura ambiente por 16 a 24 h. La RFU al final de la incubación se registró con el mismo ajuste de excitación y emisión. La diferencia de la RFU en el tiempo 0 y al final de la incubación es representativa de la actividad de BACE bajo el tratamiento con compuesto. Las diferencias de RFU son graficadas contra concentración de inhibidor y una curva se ajustó con una ecuación logística de cuatro parámetros para obtener los valores EC50 e IC5o. (Véase Sinha, et al., Nature, 402, 537-540 (2000) ) .

Los compuestos ejemplificados en la presente se probaron esencialmente como se describió anteriormente y exhibieron un valor IC50 para BACE de menos de 1 µ?. Los siguientes compuestos ejemplificados se probaron esencialmente como se describió anteriormente y exhibieron la siguiente actividad para BACE: Tabla 26 Estos datos demuestran que los compuestos de la Tabla 26 inhiben la actividad de enzima BACE recombinante purificada in vitro.

Expresión de BACE humana Humana (número de acceso: AF190725) se clonó de ADNc de cerebro total por PCR a temperatura ambiente. Las secuencias de nucleótido correspondientes a las secuencias de aminoácido #1 a 460 se insertaron en el polipéptido de IgGi(Fc) humana que codifica el ADNc (Vassar et al. 1999). Esta proteina de fusión de BACE (1-460) y Fe humana, nombrada huBACE : Fe, se construyó en el vector pJB02. La BACE ( 1-460 ): Fe humana (.huBACE:Fc) se expresó temporalmente en células HEK293. 250 g de ADNc de cada constructo se mezclaron con Fugene 6 y se agregaron a 1 litro de células HEK293. Cuatro días después de la transfección, los medios acondicionados se recolectaron para purificación.

Purificación de uBACE : Fe La huBACE:Fc se purificó por cromatografía dé Proteína A. La enzima se almacenó a -80°C en alícuotas pequeñas.

Ensayos de célula completa para medir la Inhibición de Actividad de Beta-Secretasa Ensayo de Célula Completa HEK293Swe El ensayo de célula completa rutinario para la medición de la inhibición de actividad de beta-secretasa utiliza la linea celular de riñon embriónico humano HEK293p (No. de Acceso ATCC CRL-1573) que expresa establemente un ADNc APP751 humano que contiene la mutación doble que se presenta naturalmente Lys651Met652 a Asn651Leu652 , comúnmente llamada la mutación Sueca (señalada HEK293/APP751sw) y que muestra sobreproducir Abeta (Citrón, et al., Nature, 360, 672-674 (1992)). Los ensayos de reducción de ?ß in vitro se han descrito en la literatura (Véase Dovey, et al., Journal of Neurochemistry, 76, 173-181 (2001); Seubert, et al., Nature, 361, 260 (1993); y Johnson-Wood, et al., Proc. Nati. Acad. Scie. USA, 94, 1550-1555 (1997)).

Se incubaron las células (HEK293/APP751sw a 3.5xl04 células/cavidad, que contienen 200 µ? de medios de cultivo, DMEM que contiene 10% FBS) a 37°C por 4 a 24 h en la presencia/ausencia de inhibidores (diluidos en DMSO) a la concentración deseada. Al final de la incubación, los medios acondicionados se analizaron para evidencia de actividad de beta-secretasa, por ejemplo, por análisis de péptidos Abeta. Los péptidos Abeta totales (Abeta 1-x) se midieron por un ELISA de intercalación, usando monoclonal 266 como un anticuerpo de captura y 3D6 biotinilado como anticuerpo reportero. Alternativamente, los péptidos Abeta 1-40 y Abeta 1-42 se midieron por un ELISA de intercalación, usando 2G3 monoclonal como un anticuerpo de captura para Abeta 1-40, y 21F12 monoclonal como un anticuerpo de captura para Abeta 1- 42. Tanto los ELISAs de Abeta 1-40 como Abeta 1-42 usaron 3D6 biotinilado como el anticuerpo reportero. La concentración de Abeta liberado en los medios acondicionados después del tratamiento con compuesto corresponde a la actividad de BACE bajo tales condiciones. La curva de inhibición de 10 puntos se gráfico y ajustó con la ecuación logística de cuatro parámetros para obtener los valores EC50 e IC50 para el efecto de disminución Abeta. Los siguientes compuestos ejemplificados se probaron esencialmente como se describió anteriormente y exhibieron la siguiente actividad para el efecto de disminución Abeta: Tabla 27 Estos datos demuestran que los compuestos de la Tabla 27 inhiben BACE humana endógena nativa en células in vitro.

Ensayo Neuronal Primario PDAPP Un ensayo de célula completa confirmatorio también se corrió en cultivos neuronales primarios generados de ratones embriónicos transgénicos PDAPP. Las neuronas córticas primarias se prepararon de embriones PDAPP de 16 Días Embriónicos y se cultivaron en placas de 96 cavidades (15 x 104 células/cavidad en DMEM/F12 (1:1) más 10% FBS ) . Después de 4-6 días in vitro, los medios de cultivo se reemplazaron con DME /F12 libre de suero (1:1) que contiene suplemento B27 y las neuronas se incubaron a 37°C por 24 h en la presencia/ausencia de inhibidores (diluidos en DMSO) a la concentración deseada. Al final de la incubación, los medios acondicionados se analizaron para evidencia de actividad de beta-secretasa, por ejemplo, por análisis de péptidos Abeta. Los péptidos Abeta totales (Abeta 1-x) se midieron por un ELISA de intercalación, usando 266 monoclonal como un anticuerpo de captura y 3D6 biotinilado como anticuerpo reportero. Alternativamente, los péptidos Abeta 1-40 y Abeta 1-2 se midieron por un ELISA de intercalación, usando 2G3 monoclonal como un anticuerpo de captura para Abeta 1-40, y 21F12 monoclonal como un anticuerpo de captura para Abeta 1-42. Tantos los ELISA Abeta 1-40 como Abeta 1-42 usaron 3D6 biotinilado como el anticuerpo reportero. La concentración de Abeta liberado en los medios acondicionados después del tratamiento con compuesto corresponde a la actividad de BACE bajo tales condiciones. La curva de inhibición de 10 puntos se graficó y ajustó con la ecuación logística de cuatro parámetros para obtener los valores EC5o e IC50 para el efecto de disminución de Abeta. Los siguientes compuestos ejemplificados se probaron esencialmente como se describió anteriormente y exhibieron la siguiente actividad para el efecto de disminución de Abeta: Tabla 28 Estos datos demuestran que los compuestos de la Tabla 28 inhiben BACE murina endógena nativa en células in vitro.

Inhibición In vivo de Beta-Secretasa Varios modelos animales, incluyendo ratón, cobayo, perro, y mono, se pueden usar para seleccionar la inhibición de actividad de beta-secretasa in vivo después del tratamiento con compuesto. Los animales usados en esta invención pueden ser animales de tipo silvestre, transgénicos, o de genes noqueados. Por ejemplo, el modelo de ratón PDAPP, preparado como se describe en Games et al., Nature 373, 523-527 (1995), y otros animales no transgénicos o de genes knockout son útiles para analizar la inhibición in vivo de producción de Abeta y sAPPbeta en la presencia de compuestos inhibidores. Generalmente, ratones PDAPP de 2 a 12 meses de edad, ratones con genes knockout o animales no transgénicos son administrados con compuesto formulado en vehículos, tal como aceite de maíz, ciclodextrano, amortiguadores de fosfato, PHARMASOLVE®, u otros vehículos adecuados. Una a veinticuatro horas después de la administración del compuesto, los animales son sacrificados, y los cerebros así como el fluido cerebroespinal y plasma se removieron para análisis de Abetas, C99 y fragmentos sAPP. (Véase Dovey, et al., Journal of Neurochemistry, 96, 173-181 (2001); y Johnson-Wood, et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 94, 1550-1555 (1997)).

Para estudios de eficacia estándar, los animales son dosificados con varias concentraciones de compuesto y se compararon con un grupo de control tratado con vehículo dosificado al mismo tiempo. Para algunos estudios de transcurso de tiempo, el tejido cerebral, plasma o fluido cerebroespinal se obtuvo de animales seleccionados, comenzando en el tiempo 0 para establecer una línea de base.

El compuesto se administró a otros grupos y se sacrificaron varias veces después de la dosificación. El tejido cerebral, plasma o fluido cerebroespinal se obtuvo de animales seleccionados y se analizaron para la presencia de productos de escisión APP, incluyendo péptidos Abeta, sAPPbeta y otros fragmentos APP, por ejemplo, por ensayos ELISA de intercalación específicos. Al final del período de prueba, los animales se sacrificaron y los tejidos cerebrales, plasma o fluido cerebroespinal se analizaron para la presencia de péptidos Abeta, C99 y sAPPbeta. Los tejidos cerebrales de animales transgénicos APP también se analizaron para la cantidad de placas beta-amiloide después del tratamiento con compuesto .

Los animales (PDAPP u otros ratones transgénicos o no transgénicos APP) administrados con un compuesto inhibidor pueden demostrar la reducción de Abeta o sAPPbeta en tejidos cerebrales, plasma o fluidos cerebroespinales y disminución de placas beta-amiloide en tejido cerebral, cuando se comparan con controles tratados con vehículo o controles de Tiempo Cero. Por ejemplo, 3 horas después de la administración de 100 mg/kg de dosis sub-cutánea del compuesto del ejemplo 19 a ratones PDAPP machos jóvenes, los niveles de péptido Abeta 1-x, C99 y sAPPb se redujeron aproximadamente 30%, 50% y 20% en la corteza cerebral, respectivamente, comparados con ratones tratados con vehículo. De manera similar, 3 horas después de la administración de una dosis sub-cutánea de 30 mg/kg del compuesto del ejemplo 5 a ratones PDAPP machos jóvenes, los niveles de péptido Abeta 1-x, C99 y sAPPb se redujeron aproximadamente 50%, 45% y 30%, respectivamente, comparados con ratones tratados con vehículo. Consistente con los cambios en Abeta, C99 y sAPPs de cerebro, 3 horas después de la administración oral de una doss de 10 mg/kg del compuesto del ejemplo 5, los niveles de Abeta 1-x en CFS y plasma se redujeron aproximadamente 50% y 60%, respectivamente.

Un compuesto ejemplificado en WO 2007/049532 y sus enantiómeros se probaron como se describe esencialmente en los ensayos anteriores y exhibieron las siguientes actividades : Tabla 2917 ELISA ELISA ELISA de ELISA de de A- de A- A-beta A-beta beta beta (1-40) (1-42) Estructura BACE (1-40) (1-42 ) de de de HEK de HEK Neurona Neurona 293 S e 293 Swe PDAPP PDAPP 116, 000 21,400 35,300 HCI 28 , 000 13 , 200 16 , 400 7 , 820 10 , 400 HCI >100 , 00 16 , 500 23 , 700 28 , 100 46, 800 0 HCI Todos los datos en la Tabla 29 se reportaron como IC50 (nM) .

Los compuestos de la presente invención son preferiblemente formulados como composiciones farmacéuticas administradas por una variedad de rutas. Muy preferiblemente, tales compuestos son para administración oral. Tales composiciones farmacéuticas y procesos para preparar las mismas son bien conocidas en la técnica. Véase, por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (A. Gennaro, et al., eds., 19th ed., Mack Publishing Co., 1995).

Los compuestos de Fórmula I son generalmente efectivos sobre un amplio intervalo de dosificación. Por ejemplo, las dosificaciones por día normalmente caen dentro del intervalo de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal. En algunos casos los niveles de dosificación por debajo del limite inferior del intervalo antedicho pueden ser más que adecuados, mientras que en otros casos aún dosis mayores pueden ser empleadas sin causar algún efecto secundario dañino, y por lo tanto el intervalo de dosificación anterior no se propone para limitar el alcance de la invención en alguna forma. Se entenderá que la cantidad del compuesto actualmente administrado será determinada por un médico, a la luz de las circunstancias relevantes, incluyendo la afección a ser tratada, la ruta de administración elegida, el compuesto o compuestos actuales administrados, la edad, peso, y respuesta del paciente individual, y la severidad de los síntomas del paciente.

Claims (10)

1. REIVINDICACIONES compuesto de Fórmula I: I caracterizado porque: n es 0, 1, ó 2; R1 es pirimidinilo, pirazinilo opcionalmente sustituido con cloro o fluoro, o piridinilo opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno independientemente seleccionado de cloro, fluoro, y alcoxi de C1-C3; R2 es en cada caso independientemente seleccionado de cloro o fluoro; R3 es hidrógeno o alquilo de C1-C4 opcionalmente sustituido con hidroxi; y R4 es hidrógeno o alquilo de Ci-C3; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
2. 2. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R1 es pirimidinilo, piridinilo opcionalmente sustituido una o dos veces en cada caso independientemente seleccionado de cloro, fluoro, o metoxi, o pirazinilo opcionalmente sustituido con fluoro; R2 es cloro o fluoro; R3 es hidrógeno, metilo, metilo sustituido con hidroxi, o iso-propilo sustituido con hidroxi; R4 es hidrógeno; y n es 0, 1 ó 2; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
3. 3. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, caracterizado porque R1 es pirimidinilo, piridinilo opcionalmente con fluoro, o pirazinilo opcionalmente sustituido con fluoro; R2 es fluoro; R3 es hidrógeno o metilo; R4 es hidrógeno; y n es 1 ó 2; o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
4. 4. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque R1 es pirimidinilo, R2 es fluoro, R3 es hidrógeno, R4 es hidrógeno, y n es 2, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
5. 5. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque la configuración del centro quiral adyacente al nitrógeno de la aminotiazina es (S) , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
6. 6. El compuesto 4- (2 , 4-difluoro-5- (pirimidin-5-il) fenil ) -4-metil-5, 6-dihidro-4#-l, 3-tiazin-2-amina : o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
7. 7. Un compuesto de conformidad con la reivindicación caracterizado porque el compuesto es (S) -4- (2, 4-difluoro-(pirimidin-5-il ) fenil) -4-metil-5, 6-dihidro-4H-l , 3-tiazin-2-amina : o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.
8. 8. Una formulación farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, en combinación con un portador, diluyente, o excipiente farmacéuticamente aceptable.
9. 9. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 para el uso en terapia.
10. 10. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 para el uso en el tratamiento de enfermedad de Alzheimer.