USO DE PIRIMIDILAMINOBENZAMIDAS PARA EL TR ATAM1E NTQ DE
ENFERMEDADES QUE RESPONDEN A LA MODULACIÓN DE LA
ACTIVIDAD DE LA CINASA TIE-2
Breve Descripción De La Invención La presente invención se refiere al uso de compuestos de pipmidilaminobenzamida para la preparación de un fármaco para el tratamiento de enfermedades que responden a la modulación de la actividad de cinasa, especialmente la actividad de la cmasa T?e-2, y a un método para tratar enfermedades que responden a la modulación de la actividad de cinasa, especialmente la actividad de la cinasa T?e-2, especialmente para el tratamiento curativo y/o profiláctico de la leucemia y síndromes mielodisplásticos
Antecedentes de la invención Entre las cinasas, pueden distinguirse las cinasas tipo receptor y las cinasas tipo no receptor, asi como también cinasas de tirosma y de sepna/treonina Entre las cinasas de tirosma tipo receptor, la T?e-2 (el receptor para ang?opoyet?na-1 , también llamada TEK) se expresa en células endotélicas que revisten el lumen de los vasos sanguíneos Se ha demostrado que T?e-2 se involucra en migración, germinación y supervivencia de células endotélicas y en reclutamiento de células pependoté cas durante angiogénesis A diferencia de VEGF (factor de crecimiento endotéhco vascular) y sus receptores de cinasa de tirosina, que controlan el
comienzo de la angiogénesis, las angiopoyetinas y la cinasa del receptor de T?e-2 se involucran en estabilización de vasos y remodelado vascular T?e-2 se activa por la ang?opoyet?na-1 , pero se antagoniza por un segundo ligando, la ang?opoyetina-2 (ang2) En sitios donde la angiogénesis tiene lugar, el antagonista ang2 se sobreregula De esta manera, aún no ha sido posible concluir razonablemente si la inhibición de T?e-2 promueve o inhibe la angiogénesis En vista del gran número de mecanismos involucrados en la patogénesis del desarrollo y crecimiento de tumores, así como también en la patogénesis de otras enfermedades proliferativas, existe una necesidad de encontrar moduladores novedosos y útiles de la actividad de cinasas que con frecuencia juegan un papel importante De esta manera, los compuestos que modulan la actividad de T?e-2 podrían afectar el crecimiento tumoral y la angiogénesis, esto podría proporcionar una estrategia novedosa para dirigirse a vasos tumorales que no se afectan por la inhibición de VEGFR El problema a resolver por la presente invención es proporcionar compuestos químicos novedosos con propiedades ventajosas que sean útiles en el tratamiento de enfermedades prohferativas, tales como enfermedades tumorales
Descripción General De La Invención Sorprendentemente, los compuestos de
pipmidilaminobenzamida de la presente invención son capaces de inhibir la actividad de las cinasas T?e-2 y por lo tanto son útiles para el tratamiento de enfermedades prohferativas
Descripción detallada de la invención La presente invención se relaciona con el uso de compuestos de pipmidilaminobenzamida de la fórmula I
en donde R-¡ representa hidrogeno, alquilo inferior, alcoxi inferior-alquilo inferior, aciloxi-alquilo inferior, carboxi-alquilo inferior, alcoxicarbonilo inferior-alquilo inferior, o fenilo-alquilo inferior, R2 representa hidrógeno, alquilo inferior, opcionalmente sustituido por uno o más radicales R3 idénticos o diferentes, cicloalquilo, benzocicloalquilo, heterociclilo, un grupo aplo, o un grupo heteroarllo mono o bt c i cl i co que comprende cero, uno, dos o tres átomos de nitrógeno de anillo y cero o un átomo de oxígeno y cero o un átomo de azufre, cuyos grupos en cada caso son no sustituidos o mono o polisustituidos, y R3 representa hidroxi, alcoxi inferior, aciloxi, carboxi,
alcoxicarbonilo inferior, carbamoilo, carbamoilo N-mono o N,N-disustituido, amino amino mono o disustituido cicloalquilo, heterocichlo, un grupo aplo, o un grupo heteroarllo mono o biciclico que comprende cero, uno, dos o tres átomos de nitrógeno de anillo y cero o un átomo de oxigeno y cero o un átomo de azufre, cuyos grupos en cada caso son no sustituidos o mono o pohsustituidos, o en donde R^ y R¿ en conjunto representan alquileno con cuatro, cinco o seis átomos de carbono opcionalmente mono o disustituido por alquilo inferior cicloalquilo, heterociclilo, fenilo, hidroxi, alcoxi inferior, amino, amino mono o disustituido, oxo, pipdilo, pirazinilo o pipmidinilo, benzalquileno con cuatro o cinco átomos de carbono, oxaalquileno con un oxígeno y tres o cuatro átomos de carbono, o azaalquileno con un nitrógeno y tres o cuatro átomos de carbono en donde el nitrógeno es no sustituido o se sustituye por alquilo inferior, fenilo-alquilo inferior, alcoxicarbonilo inferior-alquilo inferior, carboxi-alquilo inferior, carbamoilo-alquilo inferior, carbamoilo N-mono o N,N-d?sust?tu?do-alqu?lo inferior, cicloa Iqui lo , alcoxicarbonilo inferior, carboxi, fenilo, fenilo sustituido, pipdinilo, pipmid inilo, o pirazmilo, R4 representa hidrogeno, alquilo inferior, o halógeno, y un N-oxido o una sal farmacéuticamente aceptable de tal compuesto para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades dependientes de cinasa, especialmente enfermedades dependientes de la cinasa T?e-2, por ejemplo, como fármacos para tratar una o mas enfermedades
p rol if erati vas La presente invención ademas se relaciona con el uso de los compuestos de la formula I para tratar o prevenir enfermedades dependientes de cinasa especialmente enfermedades dependientes de T?e-2 Los términos generales utilizados anteriormente y a continuación de preferencia tienen, dentro del contexto de esta descripción, los siguientes significados, a menos que se indique de otra manera El prefijo "inferior" denota un radical que tiene hasta, y que incluye, un máximo de 7 especialmente hasta, y que incluye, un máximo de 4 átomos de carbono, los radicales en cuestión son ya sea lineales o ramificados con ramificación sencilla o múltiple Cuando la forma plural se utiliza para compuestos, sales, y similares, esto se considera que significa también un solo compuesto, sal, o similar Cualesquiera átomos de carbono asimétricos pueden presentarse en la configuración (R), (S) o (R,S), de preferencia en la configuración (R) o (S) Los compuestos de esta manera pueden presentarse como mezclas de isómeros o como isómeros puros, de preferencia como enantiomero-diaestereómeros puros La invención se relaciona también con posibles tautómeros de los compuestos de la formula I Alquilo inferior es de preferencia alquilo con desde, y que incluye 1, hasta y que incluye 7, de preferencia desde, y que incluye 1, hasta y que incluye 4, y es lineal o ramificado, de preferencia,
alquilo inferior es butilo, tales como n-butilo, sec-butilo, isobutilo, ter-butilo, prop i lo , tales como n-propilo o isopropilo, etilo o metilo De preferencia alquilo inferior es metilo, propilo o ter-butilo Acilo inferior es de preferencia formilo o alquilcarbonilo inferior, en particular acetilo Un grupo aplo es un radical aromático que se enlaza a la molécula mediante un enlace ubicado en un átomo de carbono del anillo aromático del radical En una modalidad preferida, arrio es un radical aromático que tiene 6 a 14 átomos de carbono, especialmente fenilo, naftilo, tetrahidronaftilo, fluorenilo o fenantrenilo, y es no sustituido o se sustituye por uno o más, de preferencia hasta tres, en especial uno o dos sustituyentes, especialmente seleccionados de amino, amino mono- o disustituido, halógenos, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, alquenllo inferior, alq uinilo inferior, fenilo, hidroxi, hidroxi eterificado o estepficado, nitro, ciano, carboxi, carboxi estepficado, alcanoilo, benzoilo, carbamoilo, carbamoilo N-mono- o N, N-disustituido, amidino, guanidino, ureido, mercapto, sulfo, alquiltio inferior, feniltio, fenilo-alquiltio inferior, alquilfeniltio inferior, alquilsulfinilo inferior, fenilsulfmilo, fenilo-alquilsulfinilo inferior, alquilfenilsulfinilo inferior, alquilsulfonilo inferior, f eni Isulfon i lo , fenilo-alquilsulfonilo inferior, alquilfenilsulfonilo inferior, halógeno-alquilmercapto inferior, halógeno-alquilsulfonilo inferior, tales como especialmente tpfluorometansulfonilo, dihidroxibora (-B(OH)2), heterocichlo, un grupo heteroarllo mono o biciclico y alquilendioxi inferior enlazado en átomos de carbono
adyacentes del anillo, tal como metilendioxi Aplo es de más preferencia fenilo, naftilo o tetrahidronaftilo, que es en cada caso ya sea no sustituido o se sustituye independientemente por uno o dos sustituyentes seleccionados del grupo que comprende halógenos, especialmente fluor, cloro, o bromo, hidroxi, hidroxi eterificado por alquilo inferior, por ejemplo por metilo, por halógeno-alquilo inferior, por ejemplo tpfluorometilo, o por fenilo, alquilendioxi inferior enlazado a dos átomos de carbono adyacentes, por ejemplo metilendioxi, alquilo inferior, por ejemplo metilo o propilo, halógeno-alquilo inferior, por ejemplo tpfluorometilo, hidroxi-alquilo inferior, por ejemplo hidroximetilo o 2-h?drox?-2-prop?lo, alcoxi inferior-alquilo inferior, por ejemplo metoximetilo o 2-metox?et?lo, alcoxicarbonilo inferior-alquilo inferior, por ejemplo metoxi-carbonilmetilo; alq uinilo inferior, tal como 1 -propini lo, carboxi estepficado, especialmente alcoxicarbonilo inferior, por ejemplo metoxicarbonilo, n-propoxicarbonilo o iso-propoxicarbonilo, carbamoilo N-mono sustituido, en particular carbamoilo monosustituido por alquilo inferior, por ejemplo metilo, n-propilo o iso-propilo, amino, alquilamino inferior, por ejemplo metilamino, di-alquilamino inferior, por ejemplo dimetilamino o dietilamino, alquileno infepor-ammo, por ejemplo pi rro I id i no o pipepdino, oxaalquileno infepor-amino, por ejemplo morfohno, azaalquileno infepor-amino, por ejemplo piperazino, acilamino, por ejemplo acetilammo o benzoilamino; alquilsulfonilo inferior, por ejemplo metilsulfonilo, sulfamoilo, o fenilsulfonilo
Un grupo cicloalquilo es de preferencia ciclopropilo, ciclopentilo, ciclohexilo o cicloheptilo, y puede ser no sustituido o se sustituye por uno o más, especialmente uno o dos, sustituyentes seleccionados del grupo definido en lo anterior como sustituyentes para aplo, de mayor preferencia por alquilo inferior, tal como metilo, alcoxi inferior, tales como metoxi o etoxi, o hidroxi, y además por oxo o fusionado a un anillo benzo, tal como en benzociclopentilo o benzociclohexilo Alquilo sustituido es alquilo como se define por último, especialmente alquilo inferior, de preferencia metilo, donde uno o más, especialmente hasta tres, sustituyentes pueden presentarse, de manera primaria del grupo seleccionado de halógenos, especialmente flúor, amino, N-alquilamino inferior, N,N-d?-alqu?lam?no inferior, N-alcanoilamino inferior, hidroxi, ciano, carboxi, alcoxicarbonilo inferior, y fenilo-alcoxicarbonilo inferior Tpfluorometilo se prefiere en especial Amino mono- o disustituido es especialmente amino sustituido por uno o dos radicales seleccionados independientemente entre si de alquilo inferior, tal como metilo, id roxi-a Iq u ilo inferior, tal como 2-h?drox?et?lo, alcoxi inferior alquilo inferior, tal como metoxietilo; fenilo-alquilo inferior, tal como bencilo o 2-f en ileti lo , alcanoilo inferior, tal como acetilo, benzoilo, benzoilo sustituido, en donde el radical fenilo se sustituye especialmente por uno o más, de preferencia uno o dos, sustituyentes seleccionados de nitro, amino, halógenos, N-alquilamino inferior, N,N-d?-alqu?lam?no inferior,
hidroxi, ciano, carboxi, alcoxicarbonilo inferior, alcanoilo inferior, y carbamoilo, y fenilo-alcoxicarbonilo inferior, en donde el radical fenilo es no sustituido o se sustituye especialmente por uno o más, de preferencia uno o dos, sustituyentes seleccionados de nitro, amino, halógenos, N-alquilamino inferior, N,N-d?-alqu?lam?no inferior, hidroxi, ciano, carboxi, alcoxicarbonilo inferior, alcanoilo inferior, y carbamoilo, y es de preferencia N-alquilamino inferior, tal como N-metilamino, hidroxi-alquilamino inferior, tales como 2-hidroxietilamino o 2- hidroxipropilo, alcoxi inferior alquilo inferior, tal como metoxietilo, fenilo-alquilamino inferior, tal como bencilamino, N,N-d?-alqu?lam?no inferior, N-fenilo-alquilo infepor-N-alquilamino inferior, N,N-d?-alqu?lfen?lam?no inferior, alcanoilamino inferior, tal como acetilamino, o un sustituyente seleccionado del grupo que comprende benzoilamino y fenilo-alcoxicarbonilamino inferior, en donde el radical fenilo en cada caso es no sustituido o se sustituye especialmente por nitro o amino, o también por halógenos, amino, N-alquilamino inferior, N,N-d?-alqu?lam?no inferior, hidroxi, ciano, carboxi, alcoxicarbonilo inferior, alcanoilo inferior, carbamoilo o ammocarbonilamino Amino disustituido es también alquileno infepor-amino, por ejemplo pirrohdino, 2-oxop?rrol?dmo o pipepdino, oxaalquileno infepor-amino, por ejemplo morfolmo, o azaalquileno infepor-amino, por ejemplo piperazino o piperazino N-sustituido, tales como N-metilpiperazino o N-metoxicarbonilpiperazmo Los halógenos son especialmente flúor, cloro, bromo, o yodo,
especialmente fluor, cloro, o bromo Hidroxi eterificado es especialmente alquiloxi de 8 a 20 átomos de carbono, tal como n-deciloxi, alcoxi inferior (preferido), tales como metoxi, etoxi, isopropiloxi, o ter-butiloxi, fenilo-alcoxi inferior, tales como benciloxi, feniloxi, halogeno-alcoxi inferior, tales como tpfluorometoxi, 2,2,2-tr?fluoroetox? o 1 , 1 ,2,2-tetrafluoroetox?, o alcoxi inferior que se sustituye por heteroarllo mono o biciclico que comprende uno o dos átomos de nitrógeno, de preferencia alcoxi inferior que se sustituye por imidazohlo, tal como 1 H-?m?dazol-1 -ilo, pirrolilo, bencimidazolilo, tal como 1 -bencimidazolilo, pipdilo, especialmente 2-, 3- o 4-p?r?d?lo, pipmidinilo, especialmente 2-pipmidinilo, pirazinilo, isoquinohnilo, especialmente 3-?soqu?nolm?lo, quinolmilo, indolilo o tiazolilo Hidroxi estepficado es especialmente alcanoiloxi inferior, benzoiloxi, alcoxicarboniloxi inferior, tal como ter-butoxicarboniloxi, o fenilo-alcoxicarboniloxi inferior, tal como benciloxicarboniloxi Carboxi estepficado es especialmente alcoxicarbonilo inferior, tales como ter-butoxicarbonilo, iso-propoxicarbonilo, metoxicarbonilo o etoxicarbonilo, fenilo-alcoxicarbonilo inferior, o feniloxicarbonilo Alcanoilo de manera primaria es alquilcarbonilo, especialmente alcanoilo inferior, por ejemplo acetilo. Carbamoilo N-mono- o N,N-d?sust?tu?do se sustituye especialmente por uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados de alquilo inferior, fenilo-alquilo inferior e hidroxi-alquilo inferior, o alquileno inferior, oxa-alquileno inferior o aza-
alquileno inferior opcionalmente sustituido en el átomo de nitrógeno terminal Un grupo heteroarllo mono- o bicíclico que comprende cero, uno, dos o tres átomos de nitrógeno de anillo y cero o un átomo de oxigeno y cero o un átomo de azufre, cuyos grupos en cada caso son no sustituidos o mono- o polisustituidos, se refiere a una porción heterocichca que es insaturada en el anillo que une el radical heteroarllo al resto de la molécula en la formula I y es de preferencia un anillo, donde en el anillo de unión, pero opcionalmente también en cualquier anillo templado, por lo menos un átomo de carbono se reemplaza por un heteroatomo seleccionado del grupo que consiste de nitrógeno, oxigeno y azufre, donde el anillo de unión de preferencia tiene 5 a 12, de más preferencia 5 ó 6 átomos de anillo, y que puede ser no sustituido o sustituirse por uno o mas, especialmente uno o dos, sustituyentes seleccionados del grupo definido en lo anterior como sustituyentes para aplo, de mayor preferencia por alquilo inferior, tal como metilo, alcoxi inferior, tales como metoxi o etoxi, o hidroxi De preferencia el grupo heteroarllo mono o biciclico se selecciona de 2H-p?rrol?lo, pirro 11 lo , imidazolilo, bencimidazolilo, pirazolilo, indazolilo, pupnilo, pipdilo, pirazinilo, pipmidinilo, pipdazmilo, 4H-qu?nol?z?n?lo, isoquinolilo, quinolilo, ftalazinilo, naftipdinilo, quinoxalilo, quinazolmilo, quinolinilo, ptepdinilo, indohzinilo, 3H-?ndol?lo, indohlo, isoindolilo, oxazo lo, isoxazolilo, tiazohlo, isotiazolilo, tpazohlo, tetrazolilo, furazanilo, benzo[d]p?razol?lo, ti en i lo y furanilo De más preferencia el grupo
heteroarllo mono- o b ic i cl ico se selecciona del grupo que consiste de p i rrol i lo , imidazolilo, tal como 1 H-?m?dazol-1 -ilo, bencimidazolilo, tal como 1 -bencimidazohlo, indazohlo, especialmente 5-?ndazol?lo, pipdilo, especialmente 2-, 3- o 4-p?r?d?lo, pipmidinilo, especialmente 2-p?r?m?d?n?lo, pirazinilo, isoq uinohn ilo, especialmente 3-isoq uino n ilo, quinohnilo, especialmente 4- u 8-qu?nol?n?lo, indolilo, especialmente 3-?ndol?lo tiazolilo, benzo[d]p?razol?lo, ti en i lo , y furanilo En una modalidad preferida de la invención el radical pipdilo se sustituye por hidroxi en la posición orto al átomo de nitrógeno y por lo tanto existe por lo menos parcialmente en la forma del tautómero correspondiente que es p?pd?n-(1 H)2-ona En otra modalidad preferida, el radical pipmidinilo se sustituye por hidroxi en posición 2 y 4 y por lo tanto existe en varias formas tautoméricas, por ejemplo como p?r?m?d?n-(1 H,3H)2,4-d?ona Heterociclilo es especialmente un sistema heterocíchco de cinco, seis o siete miembros con uno o dos heteroátomos seleccionados del grupo que comprende nitrógeno, oxigeno, y azufre, que puede ser insaturado o completa o parcialmente saturado, y es no sustituido o se sustituye especialmente por alquilo inferior, tal como metilo, fenilo-alquilo inferior, tal como bencilo, oxo, o heteroarllo, tal como 2-p??eraz?n?lo, heterociclilo es especialmente 2-o 3-p?rrol?d?n?lo, 2-oxo-5-p?rrol?d?n?lo, pipepdinilo, N-benc?l-4-pipepdinilo, N-alquilo ?nfer?or-4-p?per?d?n?lo, N-alquilo infepor-piperazinilo, morfolinilo, por ejemplo 2- o 3-morfol?n?lo, 2-oxo-1H-azep?n-3-?lo, 2-tetrah?drofuran?lo, o 2-met?l- 1 ,3-d?oxolan-2-?lo
Las sales son especialmente las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula I Tales sales se forman, por ejemplo, como sales de adición acida, de preferencia con ácidos orgánicos o inorgánicos, a partir de los compuestos de la fórmula I con un átomo de nitrógeno básico, especialmente las sales farmacéuticamente aceptables Ácidos inorgánicos adecuados son, por ejemplo, ácidos halogenados, tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, o ácido fosfórico Ácidos orgánicos adecuados son, por ejemplo, los ácidos carboxílico, fosfónico, sulfónico o sulfámico, por ejemplo ácido acético, ácido propiónico, acido octanoico, ácido decanoico, ácido dodecanoico, ácido glicólico, acido láctico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido adípico, ácido pimélico, ácido subépco, ácido azelaico, ácido málico, ácido tartárico, acido cítrico, aminoácidos, tales como ácido glutámico o ácido aspártico, ácido maleico, ácido hidroximaleico, ácido metilmaleico, ácido ciclohexancarboxílico, ácido adamantancarboxilico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido 4-aminosahcíhco, ácido ftáhco, ácido fenilacético, ácido mandélico, ácido cinnamico, acido metan- o etan-sulfónico, ácido 2-hidroxietansulfónico, ácido etan-1 ,2-d?sulfón?co, ácido bencensulfónico, ácido 2-naftalensulfón?co, ácido 1 ,5-naftalen-disulfónico, ácido 2-, 3- o 4-met?lbencensulfón?co, ácido metilsulfúpco, ácido etilsulf úrico , ácido dodecilsulfúpco, ácido N-ciclohexilsulfamico, ácido N-metil-, N-etil- o N-propil-sulfámico, u otros ácidos protónicos orgánicos, tal como ascórbico ácido
En presencia de radicales negativamente cargados, tales como carboxi o sulfo, las sales pueden también formarse con bases, por ejemplo sales metálicas o de amonio, tales como sales de metales alcalinos o de metales alcalmoterreos, por ejemplo sales de sodio, potasio, magnesio o calcio, o sales de amonio con amoniaco o aminas orgánicas adecuadas, tales como monoammas terciarias, por ejemplo tpetilamina o tr?(2-h?drox?et?l)am?na, o bases heterocíchcas, por ejemplo N-etil-pipepdina o N,N'-d?met?lp?peraz?na Cuando un grupo básico y un grupo ácido se presentan en la misma molécula, un compuesto de la formula I puede también formar sales internas Para propósitos de aislamiento o purificación es también posible utilizar sales farmacéuticamente inaceptables, por ejemplo picratos o percloratos Para uso terapéutico, solamente las sales o compuestos libres farmacéuticamente aceptables se emplean (donde se puedan aplicar en la forma de preparaciones farmacéuticas), y por lo tanto estos se prefieren En vista de la estrecha relación entre los compuestos novedosos en forma libre y aquellos en la forma de sus sales, incluyendo aquellas sales que pueden utilizarse como intermediarios, por ejemplo en la purificación o identificación de los compuestos novedosos, cualquier referencia a los compuestos libres, anteriormente y a continuación, se entenderá que se refiere también a las sales correspondientes, cuando sea apropiado y conveniente Los compuestos dentro del alcance de la formula I y el
proceso para su fabricación se describen en WO 04/005281 publicada el 15 de Enero de 2004 que por esto se incorpora en la presente solicitud por referencia Un compuesto preferido es 4-Met?l-3-[[4-(3-p?r?d?n?l)-2-p?pm?d?n?l]am?no]-?/-[5-(4-met?l-1H-?m?dazol-1-?l)-3-(tr?fluoromet?l)fen?l]benzam?da Los términos "tratamiento" o "terapia" (especialmente de enfermedades o trastornos dependientes de proteína cinasa de tirosina) se refieren al tratamiento profiláctico o de preferencia terapéutico (incluyendo pero no limitado a paliativo, de curación, de alivio de síntomas, de reducción de síntomas, de regulación de cinasa y/o de inhibición de cinasa) de las enfermedades, especialmente de las enfermedades mencionadas en lo siguiente Un animal (o paciente) de sangre caliente es de preferencia un mamífero, especialmente un ser humano Donde subsecuentemente o en lo anterior se menciona el término "uso" (como verbo o sustantivo) (con relación al uso de un compuesto de la formula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo), éste (si no se indica de manera diferente o sugiere de manera diferente por el contexto) incluye cualquiera o más de las siguientes modalidades de la invención, respectivamente (si no se estipula de otra manera) el uso en el tratamiento de una enfermedad dependiente de proteina cinasa (especialmente de tirosma, más en especial T?e-2), el uso para la fabricación de composiciones farmacéuticas para utilizarse en el tratamiento de una enfermedad dependiente de proteina cinasa, métodos de uso de uno o más
compuestos de la fórmula I en el tratamiento de una enfermedad dependiente de proteína cinasa y/o proliferativa, preparaciones farmacéuticas que comprenden uno o más compuestos de la fórmula I para el tratamiento de la enfermedad dependiente de proteína cinasa, y uno o mas compuestos de la formula I en el tratamiento de la enfermedad dependiente de proteína cinasa, cuando sea apropiado y conveniente, si no se estipula de otra manera En particular, las enfermedades que se tratarán y de esta manera se prefieren para el "uso" de un compuesto de la fórmula I se seleccionan de las enfermedades dependientes de proteína cinasa (especialmente de tirosina) ("dependiente" significa también "soportada", no solo "únicamente dependiente") mencionadas en lo siguiente, especialmente enfermedades proliferativas mencionadas en lo siguiente, más en especial cualquiera o más de estas u otras enfermedades que dependen de T?e-2, por ejemplo cinasa T?e-2 normal y/o mutada, activada de manera constitutiva, altamente expresada de manera aberrante En un sentido preferido de la invención, una enfermedad o trastorno dependiente de la actividad de una proteína cinasa (de preferencia tirosina), especialmente T?e-2, donde un compuesto de la fórmula I puede utilizarse es una o más de una enfermedad proliferativa (que significa una dependiente o inadecuada incluyendo un padecimiento hiperproliferativo, tal como uno o más de leucemia, hiperplasia, fibrosis (especialmente pulmonar, pero también otros tipos de fibrosis, tal como fibrosis renal), angiogénesis, psoriasis,
ateroesclerosis y proliferación de músculo liso en los vasos sanguíneos tales como estenosis o restenosis subsecuente a angioplastia Ademas un compuesto de la fórmula I puede utilizarse para el tratamiento de trombosis y/o escleroderma así como también de hipertensión pulmonar La utilidad de los inhibidores de T?e-2 para el tratamiento de la hipertensión pulmonar es evidente a partir de la literatura (J Thorac Cardiovasc Surg 2005 Feb, 129(2) 268-76, Ann Thorac Surg 2004 Feb, 77(2) 449-56, discussion 456-7, Proc Nati Acad Sci U S A 2003 Oct 14,100(21) 12331-6 Epub 2003 Sep 25) Se prefiere el uso de un compuesto de la fórmula I en la terapia (incluyendo profilaxis) de un trastorno proliferativo (que especialmente es dependiente de (por ejemplo inadecuado) la actividad de T?e-2) seleccionado de enfermedades tumorales o cancerosas, especialmente de preferencia en contra de un tumor benigno o especialmente maligno o enfermedad cancerosa, de más preferencia tumores solidos, por ejemplo carcinoma del cerebro, riñon, hígado, glándula adrenal, vejiga, mama, estomago (especialmente tumores gástricos), ovarios, colon, recto, próstata, páncreas, pulmón (por ejemplo carcinomas pulmonares de célula pequeña o grande), vagina, tipodes, sarcoma, ghoblastomas, mieloma múltiple o cáncer gastrointestinal, especialmente carcinoma de colon o adenoma colorrectal o un tumor del cuello y cabeza, por ejemplo carcinoma escamoso de la cabeza y cuello, incluyendo neoplasias, especialmente de carácter epitelial, por ejemplo en el
case de carcinoma mamario; una hiperproliferación epidérmica (diferente a cáncer), especialmente psoriasis; hiperplasia prostática; o una leucemia, especialmente leucemia mieloide aguda (AML) y leucemia mieloide crónica (CML). Un compuesto de la fórmula I o su uso hace posible ocasionar la regresión de tumores y prevenir la formación de metástasis tumorales y el crecimiento de (también micro)metástasis. La angiogénesis se considera como un prerrequisito absoluto para aquellos tumores que crecen más allá de un diámetro máximo de aproximadamente 1-2 mm; hasta este límite, el oxígeno y nutrientes pueden suministrarse a las células tumorales por difusión. Cada tumor, sin importar su origen y su causa, de esta manera es dependiente de la angiogénesis para su crecimiento después de que ha alcanzado cierto tamaño. Tres mecanismos principales juegan un papel importante en la actividad de los inhibidores de la angiogénesis en contra de tumores: 1) Inhibición del crecimiento de vasos, especialmente capilares, en tumores latentes no vascularizados, con el resultado de que no existe crecimiento neto tumoral debido al balance que se alcanza entre apoptosis y proliferación; 2) Prevención de la migración de células tumorales debido a la ausencia de flujo sanguíneo a y desde los tumores; y 3) Inhibición de la proliferación de células endotélicas, que de esta manera evita el efecto estimulante del crecimiento parácrino ejercido en el tejido circundante por las células endotélicas que revisten normalmente los vasos.
Los compuestos de la formula I, con respecto a su capacidad para inhibir la cinasa T?e-2, y para modular de esta manera la angiogénesis, son especialmente apropiados para el uso en contra de enfermedades o trastornos relacionados con la actividad inadecuada de la cinasa T?e-2, especialmente una sobrexpresión de la misma Entre estas enfermedades, especialmente (por ejemplo las isquémicas) retinopatias, (por ejemplo las relacionadas con la edad) degeneración macular, psoriasis, obesidad, hemangioblastoma, hemangioma, enfermedades inflamatorias, tales como enfermedades inflamatorias reumatoides o reumáticas, especialmente artritis, tal como artritis reumatoide, u otros trastornos inflamatorios crónicos, tal como asma crónica, ateroesclerosis arterial o posterior a trasplante, endometposis, y especialmente enfermedades neoplásticas, por ejemplo los llamados tumores sólidos (especialmente canceres del tracto gastrointestinal, el páncreas, mama, estómago, cerviz, vejiga, riñon, próstata, ovarios, endometpo, pulmón, cerebro, melanoma, sarcoma de Kaposi, carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, mesotepoma pleural maligno, hnfoma o mieloma múltiple) y además tumores líquidos (por ejemplo leucemias) son especialmente importantes Los compuestos de la fórmula I son especialmente de uso para prevenir o tratar enfermedades que se activan por angiogénesis persistente, tal como restenosis, por ejemplo, restenosis inducida por endoprótesis vascular, enfermedad de Crohn, enfermedad de Hodgkín, enfermedades oculares, tales como retinopatía diabética y
glaucoma neovascular, enfermedades renales, tales como glomerulonefptis, nefropatia diabética, enfermedad de inflamación intestinal, nefroesclerosis maligna, síndromes microangiopáticos trombóticos, (por ejemplo crónicos) rechazos de trasplantes y glomérulopatia, enfermedades fibroticas, tal como cirrosis del hígado, enfermedades proliferativas de células mesangiales, daños del tejido nervioso, y para inhibir la reoclusion de vasos después del tratamiento con catéter de globo, para utilizarse en prótesis vasculares o después de insertar dispositivos mecánicos para mantener los vasos abiertos, tal como, por ejemplo, endoprotesis vasculares, como inmunosupresores, como un asistente en la cicatrización de heridas abiertas, y para tratar manchas de edad y dermatitis por contacto De preferencia, la invención se relaciona con el uso de compuestos de la formula I, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en el tratamiento de tumores sólidos como se menciona en la presente La dosificación precisa del compuesto de la formula I que se empleará para modular la actividad de la cinasa T?e-2 depende de diversos factores incluyendo el huésped, la naturaleza y la severidad del padecimiento que se trata, el modo de administración El compuesto de la formula I puede administrarse por cualquier ruta incluyendo de manera oral parenteral, por ejemplo, de manera intrapeptoneal, intravenosa, intramuscular, subcutánea, intratumoral, o rectal, o enteralmente De preferencia el compuesto de la formula I
se administra de manera oral, de preferencia a una dosificación diaria de 1-300 mg/kg de peso corporal o, para la mayor parte de los primates superiores, una dosificación diaria de 50-5000, de preferencia 500-3000 mg Una dosificación diaria oral preferida es 1-75 mg/kg de peso corporal o, para la mayor parte de los primates superiores, una dosificación diaria de 10-2000 mg, administrada como una dosis sencilla o dividida en dosis múltiples, tal como dosificación dos veces al día Usualmente, una dosis pequeña se administra inicialmente y la dosificación se incrementa gradualmente hasta que la dosificación óptima para el huésped bajo tratamiento se determina El límite superior de dosificación es aquel impuesto por los efectos colaterales y puede determinarse por ensayo para el huésped que se trata Los compuestos de la formula I pueden combinarse con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables y, opcionalmente, uno o más de otros adyuvantes farmacéuticos convencionales y administrarse de manera enteral, por ejemplo oralmente, en la forma de tabletas, cápsulas, comprimidos oblongos, etc o parenteralmente, por ejemplo, de manera intrapeptoneal o intravenosa, en la forma de soluciones o suspensiones inyectables estériles. Las composiciones entérales y parenterales pueden prepararse por medios convencionales
Ejemplos La eficacia de los compuestos de pipmidilaminobenzamida de la fórmula I para el tratamiento de enfermedades dependientes de la actividad de la cinasa T?e-2 se ilustra por los resultados de los siguientes ejemplos Estos ejemplos ilustran la invención sin limitar de ninguna manera su alcance
Eiemplo 1 : Autofosfoplacion del receptor de T?e-2 La inhibición de la autofosfoplacion del receptor de T?e-2 puede confirmarse con un experimento m vitro en células tales como células COS transfectadas (ATCC Numero CRL-1651), que de manera permanente expresan T?e-2 humana (SwissProt AccNo Q02763), se cultivan en medio de cultivo completo (con 10% de suero bovino fetal = FCS) en placas de cultivo celular de 6 cavidades y se incuban a 37°C bajo 5% de CO2 hasta que muestran aproximadamente 90% de confluencia Los compuestos que se probarán se diluyen entonces en medio de cultivo (sin FCS, con 0 1% de albúmina sérica bovina) y se agregan a las células Los controles comprenden medio sin compuestos de prueba
Después de 40 minutos de incubación a 37°C, se agrega ortovanadato para dar la concentración final de 10 mM Después de una incubación adicional durante 20 minutos a 37°C, las células se lavan dos veces con PBS (solución salina amortiguada de pH de fosfatos) helada y se hsan inmediatamente en 100 µl de regulador de
de pH de lisis por cavidad Los Usados se centrifugan entonces para eliminar los núcleos celulares, y las concentraciones de proteína de los sobrenadantes se determinan utilizando un ensayo de proteína comercial (BIORAD) Los Usados pueden entonces ya sea utilizarse inmediatamente o, si es necesario, almacenarse a -20°C Un ELISA intercalado se lleva a cabo para medir la fosforilación de T?e-2 un anticuerpo monoclonal para T?e-2 (por ejemplo ant?-T?e2 clon AB33, Upstate, Cat Nr 05-584 o anticuerpo monoclonal comparable) se inmoviliza utilizando 0 1 ml de una solución a 2µg/ml en placas de ELISA negras (OptiPlate™ HTRF-96 de Packard) Las placas se lavan entonces y los sitios de unión a proteina libres restantes se saturan con 3% de TopBlock® (Juro, Cat # TB232010) en solución salina amortiguada de pH de fosfatos con Tween 20® (monolaurato de pol?ox?et?len(20)sorb?tán, ICI/Uni-quema) (PBST) Los Usados celulares (100 µg de proteína por pozo) se incuban entonces en estas placas durante la noche a 4°C en conjunto con un anticuerpo antifosfotirosina acoplado con fosfatasa alcalina (PY20 AP de Zymed) La (las placas se lavan otra vez y la) unión del anticuerpo antifosfotirosina al receptor fosfoplado capturado se demuestra entonces utilizando un sustrato AP luminiscente (CDP-Star, listo para usar, con Emerald II, Applied Bio-systems) La luminiscencia se mide en un Contador de Centelleo de Microplacas Packard Top Count La diferencia entre la señal del control positivo (estimulado con vanadato) y aquella del control negativo (no estimulado) corresponde a la fosforilación de T?e-2 máxima (= 100
%) La actividad de las sustancias probadas se calcula como porcentaje de inhibición de la fosforilación de T?e-2 máxima, y la concentración de la sustancia que induce la mitad de la inhibición máxima se define como la IC50 (dosis inhibitoria para 50% de inhibición) Para los compuestos de la fórmula I, de preferencia pueden encontrarse valores de IC50 en el intervalo de 00005 a 5 µM, por ejemplo de más preferencia de 0 001 a 1 µM Por ejemplo, el compuesto 4-Met?l-3-[[4-(3-p?r?d?n?l)-2-p?r?m?d?n?l]am?no]-?/-[5-(4-met?l-1H-?m?dazol-1-?l)-3-(tr?fluoromet?l)fen?l]-benzam?da, cuando se diluye a 500, 100, 10 o 1 nM muestra valores de IC50 entre 10-20 nM.
Los resultados indican un perfil de selectividad ventajoso de los compuestos de la fórmula I con una inhibición bastante específica para la cinasa T?e-2, donde selectividad no significa necesariamente que sólo la cinasa T?e-2 se inhibe a un grado ventajoso y farmacéuticamente relevante