KR940006066B1 - Skin makeup material - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 피부세포의 노화를 예방하고 보호해 주는 기능을 갖는 제제에 관한 것으로, 특히 유해한 활성 산소류로 부터 피부세포의 손상을 막는 화장료에 관한 것이다.The present invention relates to a formulation having a function of preventing and protecting aging of skin cells, and more particularly to cosmetics that prevent damage to skin cells from harmful free radicals.
피부는 세포라는 단위체로 구성되어 있고 세포는 세포막으로 둘러싸여 있다. 또 세포막은 지질이중충과 단백질이 관여한다고 알려져 있으며, 이러한 세포막의 지질성분이 어떤 원인에 의하여 과산화지질을 생성한다고 하면 세포막의 기능을 원만히 수행할 수 없으므로 세포는 구조적, 기능적 손상을 입게 된다. 따라서 생체내의 과산화지질 생성을 억제하기 위한 수단으로 주로 천연 항산화제에 대한 연구가 집중되어 왔다. 천연 항산화제에 대한 연구로는 인돌 및 폴리페놀화합물들, 플라보노이드성분, 향신료의 성분들, 인삼중의 말톨성분등의 항산화작용에 대한 보고가 있으며, 또 비타민의 항산화작용에 대한 연구로서 수용성 비타민 중에서 아스코르빈산, 비타민 B6, 비타민 D, 비타민 E등의 항산화작용에 대한 보고가 있다.The skin is composed of cells called cells, which are surrounded by cell membranes. In addition, the cell membrane is known to be involved in the lipid duplexes and proteins, and if the lipid components of the cell membrane to produce lipid peroxide due to some cause, the cell membrane can not perform the function of the cell membrane structurally and functionally damaged. Therefore, researches on natural antioxidants have been concentrated mainly as a means for suppressing the production of lipid peroxide in vivo. Studies on natural antioxidants include reports on the antioxidant activity of indole and polyphenolic compounds, flavonoids, spices, and maltol in ginseng. There are reports of antioxidant activity of ascorbic acid, vitamin B 6 , vitamin D and vitamin E.
최근 산소의 피부노화에 대한 연구가 급속히 진행되어 산소의 활성화반응, 즉 유해한 활성산소의 생성에 대한 연구가 많이 진행되고 있다. 유해한 활성산소로는 슈퍼옥사이드(O2 -), 히드록실라디칼(·OH), 싱글렛옥시전(·O2)등이 있다. 어느 것이나 생존하는데 산소를 필요로 하는 생체계에서 발생되는데 이들은 기저상태의 산소에 비해 대단히 반응성이 크기 때문에 생체 구성물질인 단백질이나, 핵산등과 반응하기 쉬운 상태이다.Recently, the research on the skin aging of oxygen has been rapidly progressed, and the research on the activation of oxygen, that is, the generation of harmful free radicals, is being conducted. Hazardous free radicals include superoxide (O 2 − ), hydroxyl radical (.OH), and singlet oxygen (.O 2 ). All of them are generated in a living system that requires oxygen to survive. They are more reactive than the oxygen in the ground state, and thus are easily reacted with proteins, nucleic acids, and the like.
최근 여성과 화장품 메이커의 최대 고민중 하나인 안면의 이상색소 침착증, 주름 및 각종 염증성질환이 활성산소종과 밀접한 관계가 있고 또한 유해한 활성산소종의 멜라닌 형성반응을 급속히 증가시킨다는 보고도 있다[참조 : Niwa, Y. (1986), Fragrance Journal, No. 79, 89-99]. 이들 활성산소중 싱글렛옥시전은 광합성이나, 고에너지조사라는 특수한 환경 아래서뿐 아니라 생체내에서 슈퍼옥사이드라디칼을 거쳐 효소반응으로 생성될 수 있음을 물론, 백혈구의 식균작용[참조 : Krinsky, N.I. (1982), Pure and Appl. Chem., 51, 649]시나 면역자극[참조 : Klebanoff, S.J. (1980), Ann. Int. Med., 93, 480]에 의해서도 생성되어 조직의 염증, 세포막의 산화적 변질등의 관여함이 속속 밝혀지고 있다. 기미, 주근깨등은 노출부위에서 잘 발생하지만 기미, 주근깨를 형성하는 멜라닌의 생성은 산화반응으로서 활성산소가 존재하면 삽시간에 멜라닌이 형성된다. 지표에 도달하는 태양광의 각 파장별 강도 및 파장열 피부의 투과율을 계산해 보면 UVB(280-320nm) 보다도 UVA(320-400nm)에 폐해가 크다고 알려져 있다. 특히 UVA영역의 자외선에 의한 피부손상 및 멜라닌 생성의 주원인이 되는 활성산소는 싱글렛옥시전으로 보고되어 있다. 기미, 주근깨 치료에 옛부터 비타민 C, 비타민 E가 싱글렛옥시전을 비롯한 활성산소를 제거시키는 소거제라는 사실을 알게 되었다. 지외선, 특히 UVA에 의한 피부세포손상의 주원인은 여러 활성산소 중에서 가장 반응성이 큰 싱글렛옥시전이며 이는 태양광선 노출시 피부에서 생성되는 피부단백질의 변성 및 광발암등을 일으킬 수 있다고 알려지고 있으며 피부노화의 주원인으로 이해되고 있다.Recently, facial pigmentation, wrinkles and various inflammatory diseases, one of the biggest concerns of women and cosmetic makers, are closely related to reactive oxygen species and also rapidly increase the melanin formation reaction of harmful reactive oxygen species. Niwa, Y. (1986), Fragrance Journal, No. 79, 89-99]. Among these free radicals, singletoxygens can be produced by enzymatic reactions via superoxide radicals in vivo as well as under the specific environment of photosynthesis and high energy irradiation, as well as phagocytosis of leukocytes [Krinsky, N.I. (1982), Pure and Appl. Chem., 51, 649] Sina immune stimulation [Klebanoff, S.J. (1980), Ann. Int. Med., 93, 480] has been shown to be involved in tissue inflammation, oxidative deterioration of cell membranes. Spots, freckles, etc. occur well in the exposed area, but the production of melanin, which forms spots, freckles, is an oxidation reaction. When active oxygen is present, melanin is formed in no time. When calculating the intensity of each wavelength of sunlight reaching the surface and the transmittance of the wavelength string skin, it is known that the harmfulness to UVA (320-400 nm) is greater than that of UVB (280-320 nm). In particular, active oxygen, which is a major cause of skin damage and melanin production by UV rays in the UVA region, has been reported as a singlet oxyjeon. From the old days in the treatment of blemishes and freckles, I learned that vitamin C and vitamin E are scavengers that remove free radicals including singlet oxyjeon. The main cause of skin cell damage caused by UV rays, especially UVA, is the most reactive singlet oxygen, which is known to cause degeneration of skin proteins and photocarcinogenesis when exposed to sunlight. It is understood as the main cause of skin aging.
본 발명자는 이와 같이 유해한 활성산소를 제거하는 방법을 수년간 연구해 오다가, 예로 부터 한약재로 널리 사용되어 온 여러가지 생약들중에 몇가지 종류에 대해서는 현저한 싱글렛옥시전의 소거작용이 있음을 발견하고, 이들의 적혈구 세포에 대한 광용혈의 정도를 측정함으로써 세포막에 대한 본 발명의 생약들의 세포보호효과를 입증하였다. 적혈구는 활성산소에 의한 생체세포의 노화연구의 대상으로서 이용하기에 최적이다. 왜냐하면 적혈구막은 구조적으로 많이 연구되고 있고, 새로운 시료를 쉽게 얻을 수 있기 때문에 생체막의 모델로서 천연물, 의약품 및 화장품원료등의 세포막에 대한 영향을 평가하는 수단으로서 또는 세포막에 대한 활성산소에 의한 지질과산화, 단백질손상 및 용혈메카니즘을 이해하기 위한 대상으로 이용되고 있다.The present inventors have been studying how to remove such harmful free radicals for many years, and found that there is a remarkable scavenging action of singletoxygen among several kinds of herbal medicines which have been widely used as herbal medicines since ancient times. By measuring the degree of photohemolysis on erythrocyte cells, the cytoprotective effect of the inventive drugs on cell membrane was demonstrated. Erythrocytes are optimal for use as the subject of aging studies of living cells by free radicals. Because erythrocyte membranes are structurally studied and new samples can be easily obtained, as a model of biological membranes, as a means of evaluating the effects on cell membranes of natural products, pharmaceuticals, and cosmetics, or lipid peroxidation by free radicals on cell membranes, It is used as an object to understand protein damage and hemolysis mechanism.
활성산소 특히 피부세포손상의 주원인이 되는 싱글렛옥시전은 혈구막에서의 지질과산화, 단백질손상을 통하여 세포막을 파괴시켜 용혈을 일으킨다.Singletoxygen, which is the main cause of free radicals and skin cell damage, causes hemolysis by destroying cell membranes through lipid peroxidation and protein damage in the blood cell membrane.
본 발명을 상세히 설명하면, 본 발명자는 한약재로 사용되는 수백종의 생약들에 대해서 유해한 활성산소에 대한 소거능을 조사한 결과 네가지 생약, 즉 오배자(五倍子), 아선약(阿仙藥), 개자(芥子), 후박(厚朴) 및 이들의 혼합물에 있어서는 특이하게 높은 유해한 활성산소에 대해서 세포보호효과를 갖는다는 사실을 알아내고 이를 실험적으로 입증하기에 이르렀다.When the present invention is described in detail, the present inventors examined the scavenging ability of harmful active oxygen against hundreds of herbal medicines used as herbal medicines, and thus, four herbal medicines, ie, quintet, Sun Yat-sen (仙藥), Gaji (, 子), It has been found that the thick and the mixture thereof have a cytoprotective effect against unusually high harmful free radicals and have been proved experimentally.
이들 네가지 생약들은 한방에서 널리 사용되어 왔다. 즉, 오배자(Galla Rhois)는 붉나부(Rhoisjavanica)의 잎에 오배자 진딧물이 자상을 주어 생긴 벌레집으로, 고르지 않으면 불규칙한 2 내지 4개의 갈라진 모양을 하거나 깨어져 있다. 설사, 출혈 등에 수렴약으로 쓰이고, 피혁공업, 어망방부, 잉크제조등 공업용으로도 사용되어 왔다. 아선약(Gambir)은 천초과에 속하는 아선약나무(Uncaria gambir)의 잎과 어린가지에서 얻은 건조한 수성엑기스로 수렴제, 구중청량제(口中淸凉濟)의 원료등으로 사용되어 왔다. 개자(Sinapis Semen)는 십자화과(十字花科)에 속하는 초본인 개자(Brassica juncea)의 성숙한 씨를 말린 것이다. 인적약(引赤藥), 국소자극약, 발포약등으로 사용되며, 식욕향진 및 방부의 효과가 있다. 후박(Machili Cortex)은 후박나무(Machilus thunbergii)의 수피를 말린 것으로, 방향성의 냄새가 있으며 수렴성으로 흉복부팽만, 동통, 곽란, 이뇨, 진해약에 쓰여 왔다. 종래 공지된 특허(85 JP-147698, J62 010006-A)에 의하면 오배자 추출물의 경우 피부에 발랐을때 부작용을 일으키지 않고 우수한 피부미백효과를 부여하는 성질이 있다고 알려져 있다. 아선약의 경우 공지특허(89 JP-064744, J02 243632-A)에 따르면 지질과산화 형성의 저해제로 작용한다고 알려져 있다. 그러나 현재까지 이들 생약 및 그 혼합물을 세포보호효과의 용도로 화장료에 구체적으로 사용한 예는 없었다. 따라서 본 발명자는 이들 생약이 갖는 세포보호효과를 이용한 새로운 피부화장료를 발명하기에 이르렀다.These four herbs have been widely used in herbal medicine. In other words, Galla Rhois is a bug house formed by stagnation of the aphid aphids on the leaves of Rhoisjavanica. If it is uneven, it has two or four irregular shapes or is broken. It is used as a convergent medicine for diarrhea and bleeding, and it has also been used for industrial purposes such as leather industry, fishing net protection and ink manufacturing. Gambir is a dry aquatic extract obtained from the leaves and sprigs of Uncaria gambir, which belongs to the genus, and has been used as a raw material for astringents and deadweight fresheners. Sinapis Semen is a dried seed of the Brassica juncea, a herb that belongs to the Cruciferaceae. It is used as a personal medicine, a topical stimulant, a foaming medicine, etc., and has an appetite stimulation and antiseptic effect. Mochili Cortex is a dried bark of Machilus thunbergii that has a aromatic odor and has been used in astringent swelling, pain, ovulation, diuresis and antitussives. According to a conventionally known patent (85 JP-147698, J62 010006-A), it is known that the gall bladder extract has a property of giving excellent skin whitening effect without causing side effects when applied to the skin. Substances are known to act as inhibitors of lipid peroxidation according to known patents (89 JP-064744, J02 243632-A). However, there have been no examples of specifically using these herbal medicines and mixtures thereof in cosmetics for the purpose of cytoprotective effect. Therefore, the present inventors have invented a new skin cosmetic using the cytoprotective effect of these herbal medicines.
본 발명 생약들에 대한 세포보호효과는 적혈구 광용혈실험을 통해 수행하였다. 적혈구 광용혈에 관한 연구는 지질과산화[참조 : Goldstein, B. D. and Harber, L. C. (1972), J. Clin. Invest., 51, 892 ; Roshchupkin, D. I., Pelenisyn, A. B., Potspenfe, A. Y., Talisky, V. V. and Vlakimirov, Y. A. (1975), Photochem. Photobiol., 21, 63], 의약품이나 화장품 첨가물의 광증감작용을 평가하는 수단으로서[참조 : Kahn, G. and Fleisehaker, B. (1971) J. Imvest, Dermatol., 56, 85] 그리고 최근에 관심이 고조되고 있는 광용혈 촉진물질들이 세포의 생체막에 미치는 영향을 검토하는 모델로서[참조 : Piling, G. A. and Sibley, M. T. (1987) Photochem. Photobiol., 46, 39] 혹은 적혈구막에 대한 활성산소나 광에 의한 용혈의 메카니즘을 이해하기 위한 대상으로써[참조 : Michelson, A. M. and Durosay, P. (1987) Photochem, Photobiol., 25, 55] 연구되고 있다.Cytoprotective effect on the herbal medicines of the present invention was carried out through the red blood cell photohemolysis experiment. Studies on red blood cell hemolysis have been described in Lipid Peroxidation [Goldstein, B. D. and Harber, L. C. (1972), J. Clin. Invest., 51, 892; Roshchupkin, D. I., Pelenisyn, A. B., Potspenfe, A. Y., Talisky, V. V. and Vlakimirov, Y. A. (1975), Photochem. Photobiol., 21, 63], as a means of assessing the photosensitization of pharmaceutical or cosmetic additives (Kahn, G. and Fleisehaker, B. (1971) J. Imvest, Dermatol., 56, 85) and recently As a model to examine the effects of photohemolytic promoters of increasing interest on cellular membranes of cells [Piling, GA and Sibley, MT (1987) Photochem. Photobiol., 46, 39] or as an object to understand the mechanism of free radicals or photohemolysis of red blood cells [Michelson, AM and Durosay, P. (1987) Photochem, Photobiol., 25, 55] Is being studied.
그런데 광용혈실험은 연구자에 따라 그 방법이 다르고 광용혈에 미치는 요인이 많아 여러가지 어려운 점이 많았다. 본 발명자들은 광용혈에 미치는 광증감제, 광조사시간, 적혈구 농도 및 ageing, Post-incubation, 산소의 영향등을 검토하여 재현성이 높고 정량적 결과를 비교할 수 있는 방법을 확립한 바 있다[참조 : Lee, T. Y., Lee, D. H., and Park, S. N. (1987), Photochem Photobiol., 45 Supplement : 10s].However, the method of photohemolysis was different depending on the researcher, and there were many difficulties due to many factors affecting photohemolysis. The present inventors have established a method to compare quantitative results with high reproducibility by examining the photosensitizer, light irradiation time, erythrocyte concentration and the effects of ageing, post-incubation, and oxygen on photohemolysis. , TY, Lee, DH, and Park, SN (1987), Photochem Photobiol., 45 Supplement: 10s].
본 발명에 사용된 생약재들은 추출하기 전에 당해 재료중에 혼재하는 불순물을 제거하기 위해 세정함이 바람직하다. 또한 추출의 수율을 향상시키기 위한 수단으로 당해 재료를 롤밀(Roll mill), 그라인딩밀(Grinding mill)과 같은 분쇄기등으로 미리 미세하게 분쇄하고 추출은 여러번 나누어 실시하는 것이 좋다. 추출은 생약제 1중량부에 대하여 2 내지 20중량부, 바람직하게는 3 내지 10중량부의 단일 혹은 혼합용매를 가하고 상압 내지 5kg/㎠의 압력, 바람직하게는 상압 내지 2kg/㎠의 압력과 40 내지 120℃, 바람직하게는 50 내지 80℃의 온도에서 10분간 내지 24시간, 바람직하게는 1시간 내지 9시간 추출을 실시한다. 추출의 효율을 향상시키기 위해 필요하다면 추출을 3 내지 5회로 나누어 실시할 수 있다. 필요하다면 아지믹서로 1,000 내지 4,000rpm으로 교반해 준다. 실용적으로 상압에서 60 내지 80℃의 온도에서 3시간 정도 추출하되 3회 나누어 추출하는 것이 유리하다. 추출하여 얻어진 추출액은 여과 혹은 원심분리등의 조작에 의하여 고형분과 분리하고, 필요에 따라서 적당한 수단, 예를 들면 진공회전증발 또는 동결건조를 실시해서 농축한다. 추출은 물 혹은 물에 가용인 극성유기용매, 예컨대 메탄올, 에탄올을 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 극성유기용매의 사용량은 추출액중에 있어서의 목적물질의 함유량을 고려하여 결정하지만 에탄올을 용매로 사용하는 경우를 예를 들면 에탄올 농도가 60 내지 95%(v/v)가 되도록 함이 좋다.The herbal medicines used in the present invention are preferably washed to remove impurities mixed in the material before extraction. In addition, as a means for improving the yield of extraction, the material is finely ground in advance by a mill such as a roll mill, a grinding mill, or the like. Extraction is performed by adding 2 to 20 parts by weight, preferably 3 to 10 parts by weight of a single or mixed solvent, based on 1 part by weight of the herbal medicine, and a pressure of atmospheric pressure to 5 kg / cm 2, preferably a pressure of atmospheric pressure to 2 kg / cm 2 and 40 to 120 Extraction is carried out for 10 minutes to 24 hours, preferably 1 hour to 9 hours at a temperature of < RTI ID = 0.0 > In order to improve the efficiency of extraction, the extraction can be carried out in three to five times if necessary. If necessary, stir at 1,000 to 4,000 rpm with an azimixer. Practically extracting about 3 hours at a temperature of 60 to 80 ℃ at atmospheric pressure is advantageously divided three times. The extract obtained by extraction is separated from the solid by an operation such as filtration or centrifugation, and concentrated by appropriate means, for example, vacuum rotary evaporation or lyophilization, as necessary. Extraction can be used alone or in combination with water or polar organic solvents soluble in water such as methanol and ethanol. The amount of the polar organic solvent used is determined in consideration of the content of the target substance in the extract, but it is preferable that the ethanol concentration is 60 to 95% (v / v), for example, when ethanol is used as the solvent.
이하 실시예를 통하여 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail through examples.
[추출실시예 1.]Extraction Example 1.
잘 건조된 오배자 100g을 잘게 분쇄한 후 냉각환류기가 부착된 추출기에 넣고 여기에 95% 에탄올 500ml을 가하고 60℃에서 1시간 동안 가온하고 냉각하여 여액을 추출하고 다시 500ml의 95% 에탄올을 가하고 70℃에서 1시간 동안 아지믹서하면서 추출하고 여과하였다. 각 추출물을 합한 후 진공회전 증발기로 감압농축하여 약 2.3g의 잔사를 얻었다.Finely pulverize 100 g of well-dried gallnuts and place in an extractor equipped with a reflux condenser. Add 500 ml of 95% ethanol to it, warm it at 60 ° C for 1 hour, cool it, extract the filtrate, and add 500 ml of 95% ethanol to 70 ° C. Extracted and filtered with aziger for 1 hour at. Each extract was combined and concentrated under reduced pressure with a vacuum rotary evaporator to obtain a residue of about 2.3 g.
[추출실시예 2.][Extraction Example 2.]
오배자 50g과 개자 50g을 냉각환류기가 부착된 추출기에 넣고 여기에 80% 에탄올 400ml를 가하고 70℃에서 1시간씩 3회 추출여과하여, 여액을 모두 합한 후 진공회전 증발기로 감압농축하여 약 8.2g의 잔사를 얻었다.Put 50g of 50g and 50g of barley in an extractor with cooling reflux, add 400ml of 80% ethanol and extract filtration three times at 70 ℃ for 1 hour. Combine all the filtrates and concentrate under reduced pressure with a vacuum rotary evaporator. A residue was obtained.
[추출실시예 3.][Extraction Example 3.]
개자 120g과 후박 120g이 함유된 둥근 플라스크에 에탄올 600ml과 증류수 600ml을 가하고 냉각환류기를 부착하고 24시간 추출하되 3회로 나누어 실시하였다. 추출후 여액들을 모두 합하고 진공회전 증발기로서 농축하여 약 12.1g의 잔사를 얻었다.600 ml of ethanol and 600 ml of distilled water were added to a round flask containing 120 g of barley and 120 g of thick gourd, followed by extraction with a reflux for 24 hours. After extraction, the filtrates were combined and concentrated by vacuum rotary evaporator to obtain a residue of about 12.1 g.
[추출실시예 4.][Extraction Example 4.]
개자 150g을 잘 분쇄하고 가압추출기에 넣고 600ml의 증류수를 가한 후 2kg/㎠의 압력을 가하면서 8시간 동안 끓인 후 100메쉬 여과포로 여과한 후 여액은 진공회전 증발기로 적당히 농축하고 다시 동결건조하여 약 3.5g의 잔사를 수득하였다.Grind 150 g of each individual well, put it in a pressure extractor, add 600 ml of distilled water, boil it for 8 hours under a pressure of 2kg / ㎠, filter it with 100 mesh filter cloth, and concentrate the filtrate with a vacuum rotary evaporator. 3.5 g of residue was obtained.
[추출실시예 5.][Extraction Example 5.]
잘 세척하고 건조된 후박 200g을 분쇄하고, 이를 환류기가 부착된 가압추출기에 넣고, 여기에 1000ml의 증류수와 100ml의 95% 에탄올을 가하고 1.5kg/㎠의 압력을 가하면서 5시간 동안 3차례 끓인 후 100메쉬 여과포로 여과하고 여액은 모두 합하여 진공회전 증발기로 적당히 농축 후 동결건조하여 약 5.8g의 잔사를 얻었다.After washing well and dried 200 g of dried foil, put it in a pressure extractor equipped with a reflux machine, add 1000 ml of distilled water and 100 ml of 95% ethanol, boil three times for 5 hours while applying a pressure of 1.5 kg / ㎠. Filtration was carried out with a 100 mesh filter cloth, and the filtrates were all combined, then concentrated appropriately with a vacuum rotary evaporator, and lyophilized to obtain a residue of about 5.8 g.
[추출실시예 6.][Extraction Example 6.]
오배자 50g과 후박 50g의 함유된 삼각플라스크에 에탄올 300ml와 증류수 200ml를 가하고 냉각 환류기를 부착한 후 9시간 동안 3회 추출하고 여과하였다. 추출후 여액을 모두 합하고 진공회전 증발기로서 농축하여 약 12.1g의 잔사를 얻었다.300 ml of ethanol and 200 ml of distilled water were added to a Erlenmeyer flask containing 50 g of 50 g and 50 g of thick gourd, attached with a reflux condenser, and extracted three times for 9 hours and filtered. After extraction, the filtrates were combined and concentrated by vacuum rotary evaporator to obtain about 12.1 g of residue.
[추출실시예 7.][Extraction Example 7.]
오배자 50g, 개자 50g 및 아선약 50g을 잘게 분쇄기로 분쇄한 후 냉각환류기가 부착된 추출기에 넣고 여기에 80% 에탄올 600ml를 가하고 이하 추출실시예 2에 준하여 추출하여 약 10.2g의 잔사를 수득하였다.Fifty g of 50 g, 50 g of barley and 50 g of sundae were finely crushed by a pulverizer, and put into an extractor equipped with a reflux condenser. Then, 600 ml of 80% ethanol was added thereto, followed by extraction according to Extraction Example 2 to obtain a residue of about 10.2 g.
본 발명자는 상기 방법으로 추출하여 얻은 네종류의 생약 및 그 혼합추출물들의 화장료중에서의 세포보호능을 알아보기 위하여 일곱종류의 처방으로 화장료를 제조하고 비교하였다. 즉 오배자추출물이 함유된 화장료, 오배자 및 개자추출물이 함유된 화장료, 개자추출물이 함유된 화장료, 후박추출물이 함유된 화장료, 개자 및 후박추출물이 함유된 화장료, 오배자 및 후박추출물이 함유된 화장료, 오배자, 개자 및 아선약이 함유된 화장료가 그것이다.The present inventors prepared and compared the cosmetics by seven kinds of prescriptions in order to find out the cellular protection of the four kinds of herbal medicines and the mixed extracts obtained by the above method in the cosmetics. That is, cosmetics containing gall bladder extract, cosmetics containing gall bladder and larvae extracts, cosmetics containing larvae extracts, cosmetics containing pleated extracts, cosmetics containing ginseng and pear extracts, cosmetics containing gall bladder and thick thin extracts, gall bladder , Cosmetics containing honeysuckle and sunscreen.
[시험예 1.][Test Example 1.]
[세포보호능 측정][Cell protective capacity measurement]
실시예 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7의 화장수에 대하여 유해한 활성산소에 대한 세포보호능을 측정하였다. 세포보호능의 측정은 적혈구의 광용혈실험으로 하였다.The cell protection against harmful free radicals was measured for the lotion of Examples 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7. The cytoprotective activity was measured by photohemolysis of red blood cells.
즉, 토끼로 부터 채취된 혈액을 원심분리(800rpm, 5분)하고 세척하고 얻은 적혈구를 생리식염수로 희석하여 적혈구 현탁액(적혈구 6천만개/35ml)을 제조하였다. 직경 1.0cm의 10ml 파이렉스시험관 8개를 준비하고 각각에 적혈구 현탁액 3.5ml씩 넣었다.That is, the blood collected from rabbits was centrifuged (800 rpm, 5 minutes), washed, and the obtained red blood cells were diluted with physiological saline to prepare a red blood cell suspension (60 million red blood cells / 35 ml). Eight 10 ml Pyrex test tubes with a diameter of 1.0 cm were prepared, and 3.5 ml of red blood cell suspensions were placed in each.
8개의 시험관중 1개는 대조군으로서 에탄올 50ml씩을 첨가하고 나머지 7개는 처리군으로서 시료를 50ml씩을 첨가하고 암소에서 30분간 융화시켰다. 융화가 끝난 후 광증감제로서 로즈벵갈(rose bengal)의 수용액(12ppm) 0.5ml를 첨가하고 입구를 파리필름으로 봉한 후 내부를 검게 칠한 50cm×20cm×25cm의 직육면체의 상자안에 20watt의 형광등을 장치하고 형광등에서 5cm 거리에 그 시험관들을 배열시키고 15분동안 광조사하였다. 광조사가 끝난 후 시험관들을 암소에 두면서 15분간 간격으로 700나노미터에 흡광도를 측정하였다.One of the eight test tubes was added with 50 ml of ethanol as a control and the remaining seven were added with 50 ml of sample as a treatment group and allowed to hydrate in the dark for 30 minutes. After the melting, 0.5 ml of an aqueous solution of rose bengal (12 ppm) is added as a photosensitizer, and the entrance is sealed with a fly film, and a 20-watt fluorescent lamp is placed in a box of 50 cm × 20 cm × 25 cm rectangular black painted inside. The tubes were arranged at a distance of 5 cm from the fluorescent tube and irradiated with light for 15 minutes. After light irradiation, absorbance was measured at 700 nanometers at intervals of 15 minutes while placing the tubes in the dark.
이 파장에서 적혈구 현탁액의 투광도의 증가는 적혈구 용혈에 비례한다. 모든 실험은 27℃ 항온실에서 실시하였으며, 시료가 활성산소류로 부터 세포를 보호하는 활성은 위의 측정조건에서 첨가된 적혈구의 50%가 광용혈하는데 소요되는 시간(분)으로 정의하였다.The increase in the light transmittance of the red blood cell suspension at this wavelength is proportional to the red blood cell hemolysis. All experiments were carried out in a 27 ℃ constant temperature room, the activity of the sample to protect the cells from free radicals was defined as the time (in minutes) for 50% of the red blood cells added under the above measurement conditions.
[표 1]TABLE 1
화장수들의 세포보호능Cell protection of lotions
실시예 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7의 화장수들의 유해산소에 대한 세포보호능을 조사한 결과 표 1과 같다.As a result of examining the cytoprotective ability against harmful oxygen of the lotion of Examples 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 is shown in Table 1.
표 1에서 보는 바와 같이 실시예 2, 6, 7의 경우 대조(control)에 비해 세포보호능이 5배 이상 높았고, 실시예 1, 3, 4, 5의 경우 대조(control)에 비해 4배 이상 높았다.As shown in Table 1, the cell protective capacity of Examples 2, 6, and 7 was 5 times higher than that of the control, and that of Examples 1, 3, 4, and 5 was 4 times higher than that of the control. .
따라서 본 발명의 오배자추출물, 오배자 및 개자 혼합추출물, 개자 및 후박 혼합추출물, 개자추출물, 후박추출물, 오배자 및 개자 혼합추출물을 피부화장료에 배합하여 사용하면 우수한 세포보호효과를 기대할 수 있다.Therefore, when the compound of the present invention gallja extract, gallja and barberry mixed extract, dog and baekgae extract, baekja extract, baekgae extract, gallja and barberry mixed extract can be used in combination with skin cosmetics, excellent cell protection effect can be expected.
시험 1에서 확인된 본 발명의 생약들의 세포보호능을 근거로 하여 본 발명의 생약추출물을 함유한 화장료들을 제조하였다. 본 발명의 피부화장료에는 중량을 기준으로 하여 활성성분 0.001중량% 내지 10중량%를 함유하는 것이 바람직하다.Cosmetics containing the herbal extract of the present invention were prepared based on the cytoprotective ability of the herbal drugs of the present invention identified in Test 1. The skin cosmetic of the present invention preferably contains from 0.001% to 10% by weight of the active ingredient based on the weight.
[실시예 8]Example 8
화장수toilet water
%단위 : 중량부% Unit: parts by weight
제조방법 : 상기의 원료 12에 원료 1-5를 용해시키고, 또 원료 6에 원료 7-9를 용해시켜 이 두액을 합한다. 여기에 원료 10-11을 첨가하여 혼합한다.Manufacturing method: The raw material 1-5 is dissolved in raw material 12, and raw material 7-9 is dissolved in raw material 6, and the two solutions are combined. Raw material 10-11 is added and mixed here.
[실시예 9]Example 9
크림cream
%단위 : 중량부% Unit: parts by weight
제조방법 : 상기 원료 1-10을 70℃로 가열 용해한 다음 11-13을 원료 18에 용해 70℃로 가열한 것에 유화한다. 이 유화한 것을 55℃로 냉각한 후 원료 14-17을 가하여 교반하고 이를 실온으로 냉각한다.Preparation Method: The raw material 1-10 was dissolved by heating to 70 ℃ and 11-13 was dissolved in the raw material 18 and heated to 70 ℃ emulsified. After cooling this emulsified thing to 55 degreeC, raw materials 14-17 are added and stirred, and it cools to room temperature.
[실시예 10]Example 10
에센스essence
%단위 : 중량부% Unit: parts by weight
제조방법 : 원료 20에 원료 12를 분산시킨 후, 여기에 원료 1-3, 5-11, 13-14를 혼합하여 수상으로 한다. 원료 15에 원료 4, 원료 16-18을 용해시킨 것을 알콜상으로 한다. 알콜상을 수상에 교반하면서 서서히 가하고 여기에 원료 19을 혼합한다.Manufacturing method: After dispersing the raw material 12 in the raw material 20, the raw material 1-3, 5-11, 13-14 is mixed to give an aqueous phase. What dissolve | melted the raw material 4 and the raw material 16-18 in the raw material 15 is made into the alcohol phase. The alcohol phase is slowly added to the water phase with stirring, and the raw material 19 is mixed thereto.
[실시예 11]Example 11
스킨로션Skin lotion
%단위 : 중량부% Unit: parts by weight
제조방법 : 원료 1-8을 실온에서 가하고 교반한 후 여과한다.Preparation Method: Add Raw Materials 1-8 at room temperature, stir and filter.
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