KR830005350A - 표면 결합체용 융합단백질 및 진핵 단백질 제조방법 - Google Patents

표면 결합체용 융합단백질 및 진핵 단백질 제조방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

표면 결합체용 융합단백질 및 진핵 단백질 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (18)

  1. N-말단 단부로 원핵세포 단백질과 C-만단 단부로 진핵세포 단백질을 포함하되 원핵 및 진핵세포부분을 효소 또는 화학적 수단에 의하여 특이하게 분해할 수 있는 융합 단백질을 제조하는 방법에 있어서, 진핵 단백질에 유전암호를 붙이는데 옥시 뉴클레오디드 배열을 전달 매개체의 원핵세포 유전자내의 어떤 부위에 삽입하고, 미생물을 최종이동 전달매개체로 형질절환시켜, 형질절환된 미생물을 융합 단백질의 표면에 적당한 상황하에서 배양시키는 한편, 진핵 단백질에 유전암호를 붙이는 데옥신클레오디드 배열이 효소 또는 화학적 수단에 의하여 특이하게 인지되고 분해될 수 있는 하나 이상의 아미노산 배열로 이루어지고 특수분해 배열에 유전암호를 붙이는 데옥시뉴클레오티드 배열을 갖고 있는 특수분해 결합체의 3'-말단에 결합되게 함을 특징으로한 융합 단백질을 제조하는 방법.
  2. 청구버위 제1항의 방법에 있어서, 상기 특수분해 결합체는 (1)제한 부위와 (2)상기 결합체의 5'-말단에 bncm을 함유한 데옥시뉴클레오티드 배열로 이루어져, 상기 제한 부위가 제한 엔도뉴클레아제에 의하여 인지 분해될 수 있게 하였는데 여기에서 b와 c는 데옥시뉴클레오티드이며 n과 m은 n+m=0,1 또는 2가 되는 정수로 하는 융합 단백질을 제조하는 방법.
  3. 청구범위 제1항 또는 제2항의 방법에 있어서, 상기 특수분해 결합체가 엔테로키나제, 칼리크레인 B와 카이모신으로 이루어진 집단으로부터 선택된 효소에 의하여 특이하게 이니되고 분해될 수 있는 특수분해 배열에 유전암호를 붙이는 융합 단백질을 제조하는 방법.
  4. 청구범위 제1항의 방법에 있어서, 특수분해 결합체는 배열 5'-(GAL)(n)AAJ-3' 또는 5'-(GAL)(n)WGZ-3'로 구성된 프러스 성상체를 갖는 데옥시뉴클레오티드 배열을 포함하되 여기서 L은 A,T,C 또는 G이고, J는 A 또는 G,W는 Z가 A 또는 G인 경우는 A,Z가 A,G,C 또는 T인 경우는 C 그리고 Z는 W가 C인 경우는 A,T,C 및 G,W가 A인 경우는 A 및 G이고 n은 데옥시뉴클레오티드 배열에 있어서 3중코든 GAL의 수이며 2,3 또는 4일 수 있는데, 상기 특수분해 결합체는 엔테로키나제에 의하여 특이하게 인지, 분해될 수 있는 특수분해 배열에 유전암호를 붙이는 융합 단백질을 제조하는 방법.
  5. 청구범위 제4항의 방법에 있어서, L이 T 또는 G,J가 A,W가 C이고 Z가 T인 융합단백질을 제조하는 방법.
  6. 청구범위 제4항의 방법에 있어서, 특수분해 결합체가 5'-말단에 HindⅢ 엔도뉴클라아제를 위한 제한 부위를 갖고 있는 데옥시뉴클레오티드 배열을 포함한 융합단백질을 제조하는 방법.
  7. 청구범위 제6항의 방법에 있어서, HindⅢ 엔도뉴클라아제를 위한 제한 부위를 갖고 있는 데옥시뉴클레오티드가 배열 5'-CCAACCTTGG-3'로 이루어진 프러스 성상체를 포함하는 융합단백질을 제조하는 방법.
  8. N-말단 단부로 원핵세포의 부분과, C-말단 단부로 진핵세포의 단백질로 이루어지고, 용이하게 정제되는 융합단백질을 제조하는 방법에 있어서, 진핵세포 단백질에 유전암호를 붙이는 데옥시뉴클레오티드 배열을 전달 매개체의 원핵세포 유전자내의 부위로 삽입하고, 미생물을 최종 전달매개체의 의하여 형질전환 시키며, 이 형질전환된 미생물을 융합단백질의 표현에 적당한 상태하에서 배양하는 한편, 진핵세포의 단백질에 유전암호를 붙이는데 옥시뉴클레오티드 배열이 선택적으로 고체상 물질에 결합할 수 있는 아미노산 배열에 유전암호를 붙이는 데옥시뉴클레오티드 배열로 이루어져 특수정제 결합체의 3'-말단에 결합되는 융합단백질을 제조하는 방법.
  9. 청구범위 제8항의 방법에 있어서, 특수 정제 결합체가 중음이온성 아미노산 배열, 중양이온성 아미노산 배열, 소수성 아미노산 배열과 면역유전자 펩티드로 이루어진 집단으로부터 선택된 아미노산 배열에 유전암호를 붙이는 융합단백질을 제조하는 방법.
  10. 청구범위 제8항의 방법에 있어서, 특수정제 결합체가 배열 5'-(GAL)(m)AAK(GAL)(n)AAJ-3'(여기서 L은 A,T,C 또는 G,K는 T 또는 C,T A는 또는 G이고, m과 n은 데옥시뉴클레오티드 배열내의 3중코든 GAL의 수이며 m은 1,2,3 또는 4일수도 있으며 n은 2,3 또는 4일 수 있다).로 된 프러스 성상체의 데옥시뉴클레오티드 배열을 가진 융합단백질은 제조하는 방법.
  11. 청구범위 제8항의 방법에 있어서, 특수 정제 결합체가 루신, 이소루신, 발린과 페닐발린으로 이루어진 집단으로부터 선택된 아미노산 배열에 유전암호를 붙이고, 상기 배열이 길이로 10-50 아미노산을 포함하는 융합단백질을 제조하는 방법.
  12. 미생물내에서, 진핵단백질을 생성하는 방법에 있어서, 진핵단백질에 유전암호를 붙이는 데옥시뉴클레오티드를 전달매개체안으로 삽입하고, 미생물을 최종전달매개체에 의해 형질전환시켜 이 형질 전환된 미생물을 진핵 단백질의 표현에 저강한 상태하에서 배양하는 한편, 진핵단백질에 유전암호를 붙이는 데옥시뉴클레오티드 배열이 16개 리보솜 RNA의 3'-말단과 3-11 데옥시뉴클레오티드로 이루어진 데옥시뉴클레오티드 배열과 상동한 최초의 데옥시뉴클레오티드 배열로 구성된 리보솜 결합부위 결합체의 3'-말단에 결합되는 특징을 가진 진핵단백질을 제조하는 방법.
  13. 청구범위 제12항의 방법에 있어서, 미보솜 결합부위 결합체가 종지 코든을 포함하는 진핵단백질을 제조하는 방법.
  14. 청구범위 제12항의 방법에 있어서, 리보솜 결합부위의 결합체가 조촉매 체절을 포함하는 진핵단백질을 제조하는 방법.
  15. 청구범위 제13항의 방법에 있어서 리보솜 결합부위 결합체가 배열 5'-L(n)TAGGAGGAL(m)-3' 또는 5'-L(n)TAGGAGGATCAATTCC-3'(여기서 L은 A,T,C 또는 T,n은 0,1 또는 2이고 m은 3-11까지의 정수이며 n과 m은 배열내의 L 데옥시뉴클레오트드의 수를 나타냄)을 가진 프러스 성상체의 데옥시뉴클레오티드 배열을 포함하는 진핵단백질을 제조하는 방법.
  16. 청구범위 제14항의 방법에 있어서, 리보솜 결합부위 결합체가 배열 5'-TATJATJAGGAGGAL(m)-3'(여기서 J는 A 또는 G,L은 A,T,C 또는 G이고 m은 3-11까지의 정수이며 배열내의 L-데옥시뉴클레오티드의 수를 나타냄)을 갖고 있는 프러스 성상체의 데옥시뉴클레오티드를 포함하는 진핵단백질을 제조하는 방법.
  17. 미생물에서 진핵단백질을 제조하는 방법에 있어서, 진핵단백질에 유전암호를 붙이는 데옥시뉴클레오티드를 전달매개체내에 삽입하고, 미생물을 최종 전달매개체에 의하여 형질전환 시켰으며, 이 형질전환된 미생물을 진핵단백질의 표현에 적당한 상태하에서 배양하는 한편, 진핵단백질에 유전암호를 붙이는 데옥시뉴클레오티드 배열은 제한 엔도뉴클라제에 의하여 이지되고 분해될 수 있는 제한 부위를 가진 첫번째의 데옥시뉴클레오티드 배열, 16개의 리보솜RNA의 3'-말단과 상등한 두번째 데옥시뉴클레오티드 배열, 3-11 데옥시뉴클레오티드를 갖고 있는 세번째 데옥시뉴클레오티드 배열, 개시코든을 갖고 있는 네번째 데옥시뉴클레오티드 배열, 고체상 물질에 선택적으로 결합하는 아미노산 배열에 유전암호를 붙이는 다섯번째 에옥시뉴클레오티드 배열과 효소 또는 화학적 수단에 의하여 인지되고 분해될 수 있는 하나이상의 아미노산 배열로 이루어진 특수분해 배열에 유전암호를 붙이는 여섯번째 데옥시뉴클레오티드 배열로 이루어져, 복합 결합체의 3'-말단에 결합되며 상기의 첫번째, 두번째, 세번째, 네번째, 다섯번째와 여섯번째 데옥시뉴클레오티드 배열이 번역의 방향으로 함께 결합되는 진핵단백질을 제조하는 방법.
  18. 청구범위 제17항의 방법에 있어서, 복합 결합체가 배열 5'-CCAACCTTGGAGGAGGATCAA-TTCCATGGALGALGALGA-LLAAKGALGALGALGALAAJ-3' 또는 5'-CCAAGCTTGGAA-GGAGGAT-AATTCCATGGALGALALAAKGALGALGALGAGAAJ-3'(여기서 L은 A,T,C 또는 G,J는 A 또는 G이고 K는 T 또는 C임)을 갖고 있는 프러스 성상체의 데옥시뉴클레오티드 배열을 포함하는 진핵단백질을 생성하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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