KR20230117169A

KR20230117169A - 항-소르틸린 항체의 사용 방법

Info

Publication number: KR20230117169A
Application number: KR1020237021821A
Authority: KR
Inventors: 아르논 로센탈; 펠릭스 리지아 예; 마이클 에프. 와드; 로버트 폴; 후아 롱; 이지에 리아오
Original assignee: 알렉터 엘엘씨
Priority date: 2020-12-02
Filing date: 2021-12-01
Publication date: 2023-08-07
Also published as: US20240101681A1; EP4255930A1; AU2021392039A1; WO2022120352A1; CA3202986A1; JP2023553399A

Abstract

본 개시내용은 일반적으로 이를 필요로 하는 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 및/또는 지연시키기 위한, 소르틸린 단백질, 예를 들어 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린 내의 하나 이상의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항체의 용도에 관한 것이다.

Description

항-소르틸린 항체의 사용 방법

관련 출원에 대한 상호 참조

본 출원은 2020년 12월 2일에 출원된 미국 가출원 번호 63/120,670 및 2021년 10월 25일에 출원된 미국 가출원 번호 63/271,658의 이익을 주장하며, 이들의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

ASCII 텍스트 파일의 서열 목록의 제출

ASCII 텍스트 파일의 하기 제출의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다: 서열 목록의 컴퓨터 판독가능 형태 (CRF) (파일명: 735022003640SEQLIST.TXT, 기록 날짜: 2021년 11월 29일, 크기: 55,902 바이트).

분야

본 개시내용은 항-소르틸린 항체의 치료 용도에 관한 것이다.

소르틸린은 여러 리간드의 수용체로서 작용하고 트랜스-골지 네트워크 (TGN)로부터 분해를 위한 후기 엔도좀 및 리소좀으로의 선택 카고의 분류에서 작용하는 유형 I 막횡단 단백질이다. 소르틸린은 분비된 단백질 프로그래뉼린 (PGRN)에 결합하고 리소좀 분해를 위해 이를 표적화하여, 그러므로 프로그래뉼린의 세포외 수준을 음성적으로 조절한다 (Hu, F et al. (2010) Neuron 68, 654-667). 이에 따라, 소르틸린의 결핍은 생체내 마우스 모델 및 시험관내 인간 세포 둘 모두에서 혈장 프로그래뉼린 수준을 유의하게 증가시킨다 (Carrasquillo, M.M et al., (2010) Am J Hum Genet 87, 890-897; Lee, W.C et al., (2014) Hum Mol Genet 23, 1467-1478). 더욱이, 소르틸린의 다형성은 인간에서 프로그래뉼린 혈청 수준과 강하게 연관된 것으로 제시된 바 있다 (Carrasquillo MM e al., (2010), Am J Hum Genet. 10; 87(6):890-7).

GRN 유전자에 의해 코딩되는 프로그래뉼린 (PGRN)은 분비되는 성장 인자-유사 영양성 및 항염증성 단백질이며, 이는 또한 식이-유도 비만 및 인슐린 저항성에 관여하는 아디포카인 역할을 한다 (Nguyen DA et al., (2013). Trends in Endocrinology and Metabolism, 24, 597- 606).

프로그래뉼린 결핍은 조기-발병 신경변성 질환인 전두측두엽 치매 (FTD)의 모든 유전가능한 형태의 대략 25%를 차지한다. 프로그래뉼린에서의 이형접합성 기능 상실 돌연변이를 갖는 환자는 단백질의 ~50% 감소된 세포외 수준을 갖고, 이들은 변함없이 FTD를 발생시켜 프로그래뉼린을 질환에 대한 원인 유전자로 만들 것이다 (Baker, M et al., (2006) Nature 442, 916-919; Carecchio M et al., (2011) J Alzheimers Dis 27, 781-790; Cruts, M et al., (2008) Trends Genet 24, 186-194; Galimberti, D et al., (2010) J Alzheimers Dis 19, 171-177).

프로그래뉼린은 또한 파킨슨병과 연관되어 있다. GRN 파킨슨병 위험 대립유전자는 혈장, 뇌척수액 및 뇌 내 감소된 프로그래뉼린 수준과 연관되어 있다. 또한, 프로그래뉼린의 동형접합성 기능 상실은 뉴런 세로이드 리포푸신증을 야기하고, 프로그래뉼린의 이형접합성 기능 상실은 전두측두엽 치매 (FTD)를 야기하며, 때때로 파킨슨증 증세를 동반한다 (문헌 [Smith et al., Am J Hum Genet (2012) 90(6):1102-1107]; [Boeve et al., Brain (2006) 129(Pt 11):3103-3114]; 및 [Wauters et al., Neurobiol Aging (2018) 67:84-94]). 또한, 감소된 혈장 프로그래뉼린 수준은 파킨슨병의 증가된 중증도와 연관되어 있다 (Yao et al., Neurosci Lett (2020) 725:134873). 프로그래뉼린 결핍은 또한 설치류 파킨슨병 모델에서 결과를 악화시키는 반면 (Martens et al., J Clin Invest (2012) 122(11):3955-3959), 프로그래뉼린 유전자의 전달은 이러한 결과를 개선한다 (Van Kampen et al., PLoS One (2014) 7;9(5):e97032).

또한, 알츠하이머병 환자에서 프로그래뉼린 돌연변이체 대립유전자가 식별되었다 (Seelaar, H et al., (2011). Journal of neurology, neurosurgery, and psychiatry 82, 476-486). 중요하게는, 프로그래뉼린은 여러 질환 모델에서 보호적으로 작용하며, 증가된 프로그래뉼린 수준은 허혈로부터 행동 회복을 가속화하고 (Tao, J et al., (2012) Brain Res 1436, 130-136; Egashira, Y. et al., (2013) J Neuroinflammation 10, 105), 근위축성 측삭 경화증 (Laird, A.S et al., (2010). PLoS One 5, e13368.) 및 관절염 (Tang, W et al., (2011). Science 332, 478-484)의 모델에서 병리를 약화시키고, 알츠하이머병 모델에서 기억력 결핍을 예방한다 (Minami, S.S et al., (2014). Nat Med 20, 1157-1164).

단백질, 예컨대 프로그래뉼린과의 다양한 상호작용을 통해, 소르틸린 및 이의 다중 리간드는 다양한 질환, 장애 및 병태, 예컨대 전두측두엽 치매 (FTD), 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 근위축성 측삭 경화증-전두측두엽 치매 표현형, 알츠하이머병, 파킨슨병, 우울증, 신경정신과적 장애, 혈관성 치매, 발작, 망막 이영양증, 연령 관련 황반 변성, 녹내장, 외상성 뇌 손상, 노화, 상처 치유, 뇌졸중, 관절염 및 죽상경화성 혈관 질환에 관여하는 것으로 제시된 바 있다.

소르틸린을 표적화하는 신규 치료용 항체는 소르틸린 또는 프로그래뉼린 활성과 연관된 질환을 치료하기 위한 하나의 해결책이다. 그러나, 모노클로날 항체의 투여는 이러한 치료 용도에 대한 챌린지를 제시할 수 있다. 예를 들어, 치료용 항체는 일반적으로 제한된 경구 생체이용률을 가지므로, 전형적으로 정맥내, 피하 또는 근육내로 투여된다 (Ovacik, M and Lin, L, (2018) Clin Transl Sci 11, 540-552). 이용가능한 투여 옵션 중 피하 투여는 집에서 그리고 종종 환자에 의해 수행될 수 있기 때문에 가장 편리한 반면, 정맥내 투여는 더 높은 전신 노출을 전달한다. 뇌척수액 (CSF)으로의 전달은 높은 전신 용량을 필요로 하기 때문에, 피하 투여가 충분히 높은 용량을 전달하지 않을 수 있으므로 일반적으로 정맥내 투여가 사용된다. 그러나, 정맥내 투여는 치료가 수년에 걸쳐 투여될 수 있고 달리 환자 순응이 어려울 수 있는 신경변성 질환, 예컨대 알츠하이머병, 파킨슨병 또는 FTD를 갖는 환자에게 어려울 수 있다.

따라서, 소르틸린 활성과 연관된 하나 이상의 질환, 장애 및 병태를 치료하기 위해 소르틸린 단백질에 특이적으로 결합하는 치료용 항체가 필요하다. 또한, 올바른 용량으로 환자를 치료하고 환자 순응을 용이하게 하는 방식으로 해당 용량을 투여하는 방법을 식별하기 위한 추가 필요성이 있다.

특허, 특허 출원 및 간행물을 포함하여 본원에 인용된 모든 참고문헌은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

한 측면에서, 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법으로서, 항-소르틸린 항체를 적어도 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호(SEQ ID NO): 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 방법이 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키는 방법으로서, 항-소르틸린 항체를 적어도 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 방법이 본원에 제공된다. 일부 실시양태에서, 프로그래뉼린 수준의 증가는 개체의 뇌척수액, 개체의 혈장 또는 둘 모두 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 포함한다.

또 다른 측면에서, 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법으로서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 150 mg 내지 약 600 mg의 용량으로 개체에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 방법이 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키는 방법으로서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 150 mg 내지 약 600 mg의 용량으로 개체에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 방법이 본원에 제공된다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 또는 피하 주사에 의해 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 적어도 약 6 mg/kg, 적어도 약 15 mg/kg, 적어도 약 30 mg/kg 또는 적어도 약 60 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6 mg/kg 내지 약 30 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 30 mg/kg 또는 약 60 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 방법은 하기를 포함한다: (a) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 60 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 59 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량을 투여하는 것; (b) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 30 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 29 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량을 투여하는 것; (c) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 15 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 14 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량을 투여하는 것; (d) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 7 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 약 15 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 30 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량을 투여하는 것; (e) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 15 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 16 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 30 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량을 투여하는 것; 또는 (f) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 30 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 31 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량을 투여하는 것.

일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 또는 덜 빈번하게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회, 약 5주마다 1회, 약 6주마다 1회, 약 7주마다 1회, 약 8주마다 1회, 약 9주마다 1회 또는 약 10주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 4주마다 1회, 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 15 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 15 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 4주마다 1회, 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 30 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 30 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 4주마다 1회, 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 60 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 60 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 적어도 약 270 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 150 mg 내지 약 600 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 150 mg, 약 270 mg, 약 300 mg 또는 약 600 mg 중 어느 하나의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 150 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 270 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 300 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 600 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 2주마다, 약 4주마다, 약 6주마다 또는 약 8주마다 중 어느 하나로 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 인간 IgG1 이소타입을 갖는다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 아미노산 치환 L234A, L235A 및 P331S를 포함하는 Fc 영역을 포함하고, 여기서 잔기 위치의 넘버링은 EU 넘버링에 따른다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 25 또는 26의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 31 또는 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 방법은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액 또는 뇌척수액의 샘플에서 프로그래뉼린 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 방법은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액의 샘플에서 백혈구 내 소르틸린 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 방법은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액 또는 뇌척수액의 샘플에서 신경필라멘트 경쇄 (NF-L), Tau, 하나 이상의 신경염증의 바이오마커, 하나 이상의 염증 바이오마커, 하나 이상의 보체 기능의 바이오마커, 및/또는 하나 이상의 미세아교세포 활성의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, (a) 하나 이상의 신경염증의 바이오마커는 IL-6, SPP1, IFI2712A, CHIT1, YKL-40, GFAP, YWHAE, CSF1, AIF1, LY86, CD86 및 TOP2A로 이루어진 군으로부터 선택되고/거나; (b) 하나 이상의 염증 바이오마커는 오스테오폰틴 (SPP1), YWHAE (14-3-3 단백질 엡실론), 동종이식 염증 인자 1 (AIF1), 콜로니 자극 인자 1 (CSF1), 키티나제 1 (CHIT1), 림프구 항원 86 (LY86) 및 CD86으로 이루어진 군으로부터 선택되고/거나; (c) 하나 이상의 보체 기능의 바이오마커는 C1qb 및 C1qc로 이루어진 군으로부터 선택되고/거나; (d) 하나 이상의 미세아교세포 활성의 바이오마커는 YKL-40, GFAP 및 인터류킨-6으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 정맥내 주입에 의한 6 mg/kg 또는 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 1.4배, 적어도 약 1.8배, 적어도 약 2배, 적어도 약 2.2배, 적어도 약 2.4배, 적어도 약 2.6배, 적어도 약 2.8배 또는 적어도 약 3배의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내에 존재한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 용량은 6 mg/kg이고, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 5일, 약 7일, 약 12일, 약 17일, 약 24일, 약 29일 또는 약 42일에 존재한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 용량은 15 mg/kg이고, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 5일, 약 7일, 약 12일, 약 17일, 약 24일, 약 29일, 약 42일 또는 약 56일에 존재한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 정맥내 주입에 의한 6 mg/kg, 15 mg/kg, 30 mg/kg 또는 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 110%, 적어도 약 120%, 적어도 약 130%, 적어도 약 140%, 적어도 약 150%, 적어도 약 160%, 적어도 약 170%, 적어도 약 180%, 적어도 약 190%, 적어도 약 200%, 적어도 약 210%, 적어도 약 220%, 적어도 약 230%, 적어도 약 240%, 적어도 약 250%, 적어도 약 260%, 적어도 약 270%, 적어도 약 280%, 적어도 약 290% 또는 적어도 약 300%의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 용량은 6 mg/kg이고, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일 또는 약 28일에 존재한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 용량은 15 mg/kg이고, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일, 약 28일, 약 35일 또는 약 42일에 존재한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 용량은 30 mg/kg이고, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일, 약 28일, 약 35일, 약 42일, 약 49일 또는 약 56일에 존재한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 용량은 60 mg/kg이고, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일, 약 28일, 약 35일, 약 42일, 약 49일, 약 56일, 약 63일, 약 70일, 약 77일 또는 약 84일에 존재한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 피하 주사에 의한 약 150 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 110%, 적어도 약 120%, 적어도 약 130%, 적어도 약 140%, 적어도 약 150%, 적어도 약 160%, 적어도 약 170%, 적어도 약 180%, 적어도 약 190% 또는 적어도 약 200%의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 피하 주사에 의한 약 300 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 110%, 적어도 약 120%, 적어도 약 130%, 적어도 약 140%, 적어도 약 150%, 적어도 약 160%, 적어도 약 170%, 적어도 약 180%, 적어도 약 190% 또는 적어도 약 200%의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 피하 주사에 의한 약 600 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 110%, 적어도 약 120%, 적어도 약 130%, 적어도 약 140%, 적어도 약 150%, 적어도 약 160%, 적어도 약 170%, 적어도 약 180%, 적어도 약 190% 또는 적어도 약 200%의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일 또는 약 28일에 존재한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 정맥내 주입에 의한 6 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 6%, 적어도 약 7%, 적어도 약 8%, 적어도 약 9%, 적어도 약 10%, 적어도 약 11%, 적어도 약 12%, 적어도 약 13%, 적어도 약 14%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19% 또는 적어도 약 20%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 5일, 약 7일, 약 12일, 약 14일, 약 17일, 약 21일, 약 24일, 약 28일, 약 29일, 약 35일, 약 42일, 약 49일 또는 약 56일에 존재한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 정맥내 주입에 의한 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70% 또는 적어도 약 80%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 5일, 약 7일, 약 12일, 약 14일, 약 17일, 약 21일, 약 24일, 약 28일, 약 29일, 약 35일, 약 42일, 약 49일 또는 약 56일에 존재한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 정맥내 주입에 의한 30 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 70%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 5일, 약 7일, 약 12일, 약 14일, 약 17일, 약 21일, 약 24일, 약 28일, 약 29일, 약 35일, 약 42일, 약 49일 또는 약 56일에 존재한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 정맥내 주입에 의한 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 70%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일, 약 28일, 약 35일, 약 42일, 약 49일, 약 56일, 약 63일, 약 70일, 약 77일 또는 약 84일에 존재한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 피하 주사에 의한 약 150 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 70%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 피하 주사에 의한 약 300 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 70%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 피하 주사에 의한 약 600 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 70%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일 또는 약 21일에 존재한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 전두측두엽 치매, 진행성 핵상 마비, 알츠하이머병, 혈관성 치매, 발작, 망막 이영양증, 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 외상성 뇌 손상, 척수 손상, 치매, 뇌졸중, 파킨슨병, 급성 파종성 뇌척수염, 망막 변성, 연령 관련 황반 변성, 녹내장, 다발성 경화증, 패혈성 쇼크, 박테리아 감염, 관절염 또는 골관절염으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 개체는 질환, 장애 또는 손상의 위험이 있다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 파킨슨병이다. 일부 실시양태에서, 개체는 파킨슨병의 위험이 있다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 산발성 파킨슨병이다. 일부 실시양태에서, 개체는 GBA1 유전자에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이를 갖는다. 일부 실시양태에서, 개체는 GBA1 유전자에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이에 대해 동형접합성 또는 이형접합성이다. 일부 실시양태에서, GBA1 유전자에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이는 c.1226A > G, c.1448T > C, IVS2 + 1G > A, RecNciI, 84insGG 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 GBA1 유전자에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이는 N370S, L444P, R120W, H255Q, D409H, E326K, T369M, R496H 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 GBA1 유전자 산물에서의 아미노산 치환을 초래하는 GBA1 유전자에서의 돌연변이이다. 일부 실시양태에서, 파킨슨병은 호엔 및 야르 기준 (Hoehn and Yahr criteria)에 기초하여 병기 I 내지 병기 III으로 분류된다. 일부 실시양태에서, 개체는 항-소르틸린 항체의 투여 전 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료를 취하는 중이다. 일부 실시양태에서, 개체는 항-소르틸린 항체를 사용한 치료의 시작 후 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료를 계속 취한다. 일부 실시양태에서, 방법은 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료와 조합하여 항-소르틸린 항체를 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료는 글루타메이트 길항제, 항콜린제, 도파민 효능제, 레보도파 (L-DOPA 및 데카르복실라제 [DDC] 억제제), 모노아민 옥시다제 B (MAO-B) 억제제, 카테콜-O-메틸트랜스퍼라제 (COMT) 억제제, 베타 차단제, 선택적 세로토닌 흡수 억제제 (SSRI), 삼환계 항우울제 (TCA) 또는 인도메타신으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 방법은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 프로그래뉼린, GCase 및/또는 알파-시누클레인의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커는 GCase 단백질, GCase 활성, lyso-Gb1, 하나 이상의 카텝신, LAMP1, N-아세틸-D-글루코사민 키나제 (NAGK) 및 글루코실세라미드로부터 선택되고; 임의로 여기서 하나 이상의 카텝신은 카텝신 B (CTSB) 및 카텝신 D (CTSD)로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 방법은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체의 인지 기능을 평가하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 인지 기능은 몬트리올 인지 평가 (MoCA)를 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 방법은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체의 운동 기능을 평가하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 운동 기능은 통합 파킨슨병 평가 척도 (UPDRS) 파트 III의 운동 장애 학회 (MDS)-후원 개정판 (MDS-UPDRS 파트 III), 또는 UPDRS 총 척도를 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 적어도 약 6개월 또는 적어도 약 24주 동안 개체에게 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 전두측두엽 치매 (FTD)이다. 일부 실시양태에서, 개체는 (a) GRN 유전자에서의 하나 이상의 돌연변이에 대해 이형접합성이고, 임의로 여기서 하나 이상의 돌연변이는 기능 상실 돌연변이이고/거나; (b) C9orf72 헥사뉴클레오티드 반복 확장에 대해 이형접합성이고/거나; (c) FTD 증상을 갖거나, FTD 증상을 갖지 않거나, 전증상 FTD를 갖고/거나; (d) FTD-GRN, 또는 GRN 유전자에서의 하나 이상의 돌연변이에 의해 야기되는 FTD를 갖는다. 일부 실시양태에서, (a) 개체는 전증상 FTD를 갖고, (i) Nfl, SPP1, YWHAE, AIF1, CSF1, CHIT1 및 LY86으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이오마커의 상승된 수준, 및/또는 (ii) NAGK 및 CTSB로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이오마커의 감소된 수준을 갖거나; 또는 (b) 개체는 FTD 증상을 갖지 않고, (i) GRN 유전자에서의 하나 이상의 돌연변이에 대해 이형접합성이고/거나, (ii) 감소된 PGRN 수준 또는 기능을 갖는다.

일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 알츠하이머병이다.

일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 ALS이다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 방법은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 프로그래뉼린, GCase 및/또는 알파-시누클레인의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다. 선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 방법은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커는 GCase 단백질, GCase 활성, lyso-Gb1, 하나 이상의 카텝신, LAMP1, N-아세틸-D-글루코사민 키나제 (NAGK) 및 글루코실세라미드로부터 선택되고; 임의로 여기서 하나 이상의 카텝신은 카텝신 B (CTSB) 및 카텝신 D (CTSD)로부터 선택된다. 선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 방법은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체의 인지 기능을 평가하는 것을 추가로 포함한다. 선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 개체는 인간이다.

또 다른 측면에서, 항-소르틸린 항체를 투여받는 개체의 치료를 모니터링하는 방법으로서, 하나 이상의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 포함하며, 여기서 하나 이상의 바이오마커는 프로그래뉼린, GCase, 신경필라멘트 경쇄 (NF-L), Tau, 하나 이상의 신경염증의 마커, 하나 이상의 염증 바이오마커, 하나 이상의 보체 기능의 바이오마커, 하나 이상의 미세아교세포 활성의 바이오마커, 또는 알파-시누클레인으로부터 선택되고, 여기서 하나 이상의 바이오마커의 수준은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 측정되는 것인 방법이 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 항-소르틸린 항체를 투여받는 개체의 치료를 모니터링하는 방법으로서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 포함하는 방법이 본원에 제공된다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커는 GCase 단백질, GCase 활성, lyso-Gb1, 하나 이상의 카텝신, LAMP1, N-아세틸-D-글루코사민 키나제 (NAGK) 및 글루코실세라미드로부터 선택되고; 임의로 여기서 하나 이상의 카텝신은 카텝신 B (CTSB) 및 카텝신 D (CTSD)로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 방법은 샘플 내 하나 이상의 바이오마커의 수준에 기초하여 개체에서 항-소르틸린 항체의 활성을 평가하는 것을 추가로 포함한다.

선행 실시양태 중 임의의 것과 조합될 수 있는 일부 실시양태에서, (a) 하나 이상의 신경염증의 마커는 IL-6, SPP1, IFI2712A, CHIT1, YKL-40, GFAP, YWHAE, CSF1, AIF1, LY86, CD86 및 TOP2A로부터 선택되고/거나; (b) 하나 이상의 염증 바이오마커는 오스테오폰틴 (SPP1), YWHAE (14-3-3 단백질 엡실론), 동종이식 염증 인자 1 (AIF1), 콜로니 자극 인자 1 (CSF1), 키티나제 1 (CHIT1), 림프구 항원 86 (LY86) 및 CD86으로부터 선택되고/거나; (c) 하나 이상의 보체 기능의 바이오마커는 C1qb 및 C1qc로부터 선택되고/거나; (d) 하나 이상의 미세아교세포 활성의 바이오마커는 YKL-40, GFAP 및 인터류킨-6으로부터 선택된다.

또 다른 측면에서, 소르틸린 단백질에 결합하는 항체로서, 여기서 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 항체는 인간 IgG1 이소타입을 갖고, 아미노산 치환 L234A, L235A 및 P331S를 포함하는 Fc 영역을 포함하고, 여기서 잔기 위치의 넘버링은 EU 넘버링에 따른 것인 항체가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 소르틸린 단백질에 결합하는 항체로서, 여기서 항체는 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 31 또는 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 것인 항체가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법에서 사용하기 위한 적어도 약 6 mg/kg 용량의 항-소르틸린 항체로서, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 항체가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키는 방법에서 사용하기 위한 적어도 약 6 mg/kg 용량의 항-소르틸린 항체로서, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 항체가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법에서 사용하기 위한 소르틸린 단백질에 결합하는 항체로서, 여기서 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 항체는 인간 IgG1 이소타입을 갖고, 아미노산 치환 L234A, L235A 및 P331S를 포함하는 Fc 영역을 포함하고, 여기서 잔기 위치의 넘버링은 EU 넘버링에 따른 것인 항체가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키는 방법에서 사용하기 위한 소르틸린 단백질에 결합하는 항체로서, 여기서 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 항체는 인간 IgG1 이소타입을 갖고, 아미노산 치환 L234A, L235A 및 P331S를 포함하는 Fc 영역을 포함하고, 여기서 잔기 위치의 넘버링은 EU 넘버링에 따른 것인 항체가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법에서 사용하기 위한 소르틸린 단백질에 결합하는 항체로서, 여기서 항체는 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 31 또는 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 것인 항체가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키는 방법에서 사용하기 위한 소르틸린 단백질에 결합하는 항체로서, 여기서 항체는 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 31 또는 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 것인 항체가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키기 위한 의약의 제조에서의 적어도 약 6 mg/kg 용량의 항-소르틸린 항체의 용도로서, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 용도가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키기 위한 의약의 제조에서의 적어도 약 6 mg/kg 용량의 항-소르틸린 항체의 용도로서, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 용도가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키기 위한 의약의 제조에서의 소르틸린 단백질에 결합하는 항체의 용도로서, 여기서 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 항체는 인간 IgG1 이소타입을 갖고, 아미노산 치환 L234A, L235A 및 P331S를 포함하는 Fc 영역을 포함하고, 여기서 잔기 위치의 넘버링은 EU 넘버링에 따른 것인 용도가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키기 위한 의약의 제조에서의 소르틸린 단백질에 결합하는 항체의 용도로서, 여기서 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 항체는 인간 IgG1 이소타입을 갖고, 아미노산 치환 L234A, L235A 및 P331S를 포함하는 Fc 영역을 포함하고, 여기서 잔기 위치의 넘버링은 EU 넘버링에 따른 것인 용도가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키기 위한 의약의 제조에서의 소르틸린 단백질에 결합하는 항체의 용도로서, 여기서 항체는 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 31 또는 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 것인 용도가 본원에 제공된다.

또 다른 측면에서, 질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키기 위한 의약의 제조에서의 소르틸린 단백질에 결합하는 항체의 용도로서, 여기서 항체는 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 31 또는 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 것인 용도가 본원에 제공된다.

도 1은 실시예 1에 기재된 연구 설계의 다이어그램이다. CSF = 뇌척수액; D = 연구 일자; IV = 정맥내; SC = 피하. 연구 동안 CSF 샘플을 수득한 연구 일자가 표시되어 있다.
도 2a-2c는 실시예 1-2에 기재된 연구의 코호트 1의 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 도 2a는 항-소르틸린 항체 ALX를 6 mg/kg의 용량으로 투여받은 코호트 1의 대상체 1-8 각각에 대한 연구 1일차에 표시된 시간 (투약전, EOI, 4HR, 8HR, 12HR)에서 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제공한다. y축은 100, 150 및 200 ng/ml로 표시되어 있다. 도 2b는 위약을 투여받은 코호트 1의 대상체 1-3 각각에 대한 연구 1일차에 표시된 시간 (투약전, EOI, 4HR, 8HR, 12HR)에서 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제공한다. y축은 100, 150 및 200 ng/ml로 표시되어 있다. 도 2c는 표시된 연구 일자에 위약 또는 항체 ALX를 투여받은 코호트 1의 대상체에 대한 혈장 내 프로그래뉼린의 평균 수준을 제시한다.
도 3a-3c는 실시예 1-2에 기재된 연구의 코호트 2의 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 도 3a는 항-소르틸린 항체 ALX를 15 mg/kg의 용량으로 투여받은 코호트 2의 대상체 1-6 각각에 대한 연구 1일차에 표시된 시점에서 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제공한다. 도 3b는 위약을 투여받은 코호트 2의 대상체 1-2 각각에 대한 연구 1일차에 표시된 시점에서 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제공한다. 도 3c는 표시된 연구 일자에 위약 또는 항체 ALX를 투여받은 코호트 2의 대상체에 대한 혈장 내 프로그래뉼린의 평균 수준을 제시한다.
도 4는 표시된 연구 일자에 항-소르틸린 항체 ALX 또는 위약을 투여받은 코호트 1 및 2의 대상체에 대한 혈장 내 프로그래뉼린의 평균 수준을 제시한다.
도 5a-5d는 실시예 1-2에 기재된 연구의 코호트 1 및 2의 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제공한다. 도 5a는 위약의 투여 후 표시된 일자에 연구의 코호트 1 및 2에서 위약을 투여받은 각 대상체에 대한 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 각 라인은 하나의 대상체를 나타낸다. 도 5b는 항체의 투여 후 표시된 일자에 코호트 1에서 항체 ALX (6 mg/kg)를 투여받은 각 대상체에 대한 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 각 라인은 하나의 대상체를 나타낸다. 도 5c는 항체의 투여 후 표시된 일자에 코호트 2에서 항체 ALX (15 mg/kg)를 투여받은 각 대상체에 대한 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 각 라인은 하나의 대상체를 나타낸다. 도 5d는 항체 또는 위약의 투여 후 표시된 일자에 코호트 1 및 2에서 항체 ALX 또는 위약을 투여받은 대상체에 대한 혈장 내 프로그래뉼린의 평균 수준을 제시한다. 코호트 1 및 2에서 위약을 투여받은 모든 대상체는 풀링되었다 ("풀링된 위약"). SD = 단일 용량; IV = 정맥내.
도 6은 실시예 1-2에 기재된 연구의 코호트 1 및 2의 대상체의 CSF 내 프로그래뉼린 수준의 변화를 제시한다. CSF 내 프로그래뉼린 수준은 CSF 내 기준선 프로그래뉼린 수준과 비교하여 표시된 연구 일자에 평균 백분율 변화로 제시된다. 각 연구 일자에 각 코호트에 대한 프로그래뉼린 CSF 수준의 분석에 포함된 대상체의 수는 그래프 아래에 제시된다.
도 7a-7b는 실시예 4에 기재된 바와 같이 20 mg/kg, 60 mg/kg 및 200 mg/kg의 용량으로 4주 동안 매주 1회 항체를 정맥내 투여받은 시노몰구스 원숭이의 혈청 내 항-소르틸린 항체 ALX의 평균 농도 (ng/ml)를 제공한다. 도 7a는 연구 1일차, 8일차 및 15일차에 투여된 항체의 각각의 용량 후 표시된 시간 (h)에 혈청 내 항-소르틸린 항체 ALX의 평균 농도를 제시한다. 도 7b는 연구 22일차 및 29일차에 투여된 항체의 각각의 용량 후 표시된 시간 (h)에 혈청 내 항-소르틸린 항체 ALX의 평균 농도를 제시한다.
도 8a-8c는 실시예 4에 기재된 바와 같이 0 mg/kg (대조군), 20 mg/kg, 60 mg/kg 및 200 mg/kg의 용량으로 4주 동안 매주 1회 항체 ALX를 정맥내 투여받은 시노몰구스 원숭이에서 백혈구 (WBC) 내 소르틸린 발현 수준, 혈청 프로그래뉼린, 및 CSF 프로그래뉼린을 제시한다. 도 8a는 항체 ALX의 제1 용량의 투여 후 표시된 시간에서 기준선 수준의 퍼센트로서 백혈구 내 소르틸린 발현 수준 (SORT1)을 제시한다. 도 8b는 항체 ALX의 제1 용량의 투여 후 표시된 시간에서 기준선 수준의 퍼센트로서 혈청 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 도 8c는 항체 ALX의 제1 용량의 투여 후 표시된 시간에서 기준선 수준의 퍼센트로서 CSF 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 도 8a-8c에서, 화살표는 항체 ALX의 용량의 투여 시간을 나타낸다.
도 9는 연구 동안 다양한 시점에서 등록된 집단의 참여자 배치의 다이어그램이다. IV = 정맥내; SD = 단일 용량; SC = 피하. ^a대상체에 의한 철회 (n =2); ^b대상체에 의한 철회; ^c의사의 결정; ^d의사의 결정 (n = 1) 및 대상체에 의한 철회 (n = 3); ^e유해 사건.
도 10a-10b는 실시예 5에 기재된 바와 같이 6 mg/kg (코호트 1), 15 mg/kg (코호트 2), 30 mg/kg (코호트 3), 60 mg/kg (코호트 4) 용량의 항체 ALX의 단일 정맥내 용량을 투여받은 코호트, 또는 600 mg의 ALX 항체의 단일 피하 용량을 투여받은 코호트 (SD SC 코호트)에서 대상체의 혈청 및 CSF 내 항-소르틸린 항체 ALX의 평균 농도 (ng/ml)를 제시한다. 도 10a는 ALX의 단일 정맥내 또는 피하 용량의 투여 후 표시된 시간 (일)에서 ALX의 혈청 농도를 제시한다. 도 10b는 ALX의 단일 정맥내 또는 피하 용량의 투여 후 표시된 시간 (일)에서 ALX의 평균 CSF 농도를 제시한다.
도 11a-11b는 실시예 5에 기재된 바와 같이 6 mg/kg (코호트 1), 15 mg/kg (코호트 2), 30 mg/kg (코호트 3), 60 mg/kg (코호트 4) 용량의 항체 ALX의 단일 정맥내 용량을 투여받은 코호트, 또는 600 mg의 ALX 항체의 단일 피하 용량을 투여받은 코호트 (SD SC 코호트)에서 프로그래뉼린의 혈장 및 CSF 농도의 기준선으로부터의 평균 백분율 변화를 제시한다. 도 11a는 항체 ALX의 단일 용량의 투여 후 표시된 시간 (일)에서 프로그래뉼린의 혈장 농도의 기준선으로부터의 평균 백분율 변화를 제시한다. 도 11b는 항체 ALX의 단일 용량의 투여 후 표시된 시간 (일)에서 프로그래뉼린의 CSF 농도의 기준선으로부터의 평균 백분율 변화를 제시한다.
도 12는 단일 용량 피하 코호트의 설계의 다이어그램을 제시한다. 대상체는 150 mg 항체 ALX의 단일 피하 용량을 투여받는다. 단일 용량은 화살표로 표시된 바와 같이 1일차에 투여된다. CSF 샘플을 수득한 연구 일자는 사각형으로 표시된다. LP = 요추 천자; BL = 기준선; SC = 피하; EoS = 연구 종료.
도 13은 다중-용량 피하 코호트의 설계의 다이어그램을 제시한다. 300 mg의 항체 ALX의 7개 용량을 화살표로 표시된 바와 같이 1일차, 15일차, 29일차, 43일차, 57일차, 71일차 및 85일차에 대상체 (n = 10)에게 투여한다. CSF 샘플을 수득한 연구 일자는 사각형으로 표시된다. LP = 요추 천자; BL = 기준선; SC = 피하; HV = 건강한 지원자; EoS = 연구 종료.
도 14는 다중-용량 정맥내 코호트의 설계의 다이어그램을 제시한다. 30 mg/kg의 항체 ALX 또는 위약의 4개 용량을 8:2 (항체 ALX:위약)의 비율로 화살표로 표시된 바와 같이 1일차, 29일차, 57일차 및 85일차에 대상체 (n = 10)에게 투여한다. CSF 샘플을 수득한 연구 일자는 사각형으로 표시된다. LP = 요추 천자; BL = 기준선; IV = 정맥내; HV = 건강한 지원자; EoS = 연구 종료.
도 15는 실시예 1에 기재된 연구 설계의 다이어그램을 제시한다. CSF = 뇌척수액; DLAE = 용량-제한 유해 사건; IV = 정맥내; PD = 약력학; PK = 약동학; SC = 피하; SD = 단일 용량. ^a 투약후 CSF 샘플링은 25, 43 또는 57일차에 2개의 시점에서 발생하였음; ^b 투약후 CSF 샘플링은 25, 43, 57 또는 85일차에 2개의 시점에서 발생하였음; ^c 투약후 CSF 샘플링은 43, 57 또는 85일차에 2개의 시점에서 발생하였음; ^d 투약후 CSF 샘플링은 25, 43, 57 또는 85일차에 2개의 시점에서 발생하였음; ^e 6-mg/kg, 15-mg/kg 및 30-mg/kg 용량 그룹의 참여자를 12주 동안 추적하였음; ^f 60-mg/kg 용량 그룹의 참여자를 16주 동안 추적하였음; ^g 6-mg/kg, 15-mg/kg 및 30-mg/kg 용량 그룹의 참여자를 위한 최종 연구 방문; ^h 60-mg/kg 용량 그룹의 참여자를 위한 최종 연구 방문; ⁱ 투약후 CSF 샘플링은 8, 13, 18, 25 또는 43일차에 2개의 시점에서 발생하였음.

정의

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "예방하는"은 개체에서 특정한 질환, 장애 또는 병태의 발생 또는 재발에 관한 예방을 제공하는 것을 포함한다. 개체는 특정한 질환, 장애 또는 병태에 걸리기 쉽거나 민감성이 있거나, 또는 이러한 질환, 장애 또는 병태를 발병할 위험이 있을 수 있지만, 아직 질환, 장애 또는 병태로 진단되지 않았다.

본원에서 사용된 바와 같이, 특정한 질환, 장애 또는 병태를 발병할 "위험이 있는" 개체는 본원에 기재된 치료 방법 전에 검출가능한 질환 또는 질환의 증상을 갖거나 갖지 않을 수 있고, 검출가능한 질환 또는 질환의 증상을 나타내거나 나타내지 않았을 수 있다. "위험이 있는"은 관련 기술분야에 공지된 바와 같이 특정한 질환, 장애 또는 병태의 발병과 상관관계가 있는 측정가능한 파라미터인 하나 이상의 위험 인자를 개체가 가지고 있음을 나타낸다. 이들 위험 인자 중 하나 이상을 갖는 개체는 이들 위험 인자 중 하나 이상을 갖지 않은 개체보다 특정한 질환, 장애 또는 병태를 발병할 더 높은 확률을 갖는다.

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "치료" 또는 "치료하는"은 임상 병리 과정 동안 치료되는 개체의 자연 과정을 변경하도록 설계된 임상 개입을 지칭한다. 치료의 바람직한 효과는 진행 속도 감소, 진행 지연, 병리학적 상태의 호전 또는 완화, 및 특정한 질환, 장애 또는 병태의 관해 또는 개선된 예후를 포함한다. 예를 들어, 특정한 질환, 장애 또는 병태와 연관된 하나 이상의 증상이 경감 또는 제거되는 경우 개체는 성공적으로 "치료"된다.

"유효량"은 원하는 치료적 또는 예방적 결과를 달성하기 위해 필요한 기간 동안 및 투여량에서 적어도 유효한 양을 지칭한다. 유효량은 하나 이상의 투여로 제공될 수 있다. 유효량은 본원에서 인자, 예컨대 개체의 질환 상태, 연령, 성별 및 체중, 및 개체에서 원하는 반응을 유도하는 치료 능력에 따라 달라질 수 있다. 유효량은 또한 치료의 임의의 독성 또는 해로운 효과가 치료적으로 유익한 효과보다 더 중요한 양이다. 예방적 사용을 위해, 유익한 또는 원하는 결과는 질환의 생화학적, 조직학적 및/또는 행동적 증상, 질환의 발달 동안 나타나는 이의 합병증 및 중간 병리학적 표현형을 포함하여 위험을 제거 또는 감소시키거나, 중증도를 줄이거나, 질환의 발병을 지연시키는 것과 같은 결과를 포함한다. 치료 용도를 위해, 유익한 또는 원하는 결과는 임상 결과, 예컨대 질환으로부터 기인하는 하나 이상의 증상의 감소, 질환을 앓고 있는 사람들의 삶의 질의 증가, 질병 치료에 필요한 다른 약제의 용량의 감소, 또 다른 약제의 효과의 향상 (예컨대 표적화를 통한), 질환 진행 지연 및/또는 생존 연장을 포함한다. 약물, 화합물 또는 제약 조성물의 유효량은 직접적으로 또는 간접적으로 예방적 또는 치료적 치료를 성취하기에 충분한 양이다. 임상적 맥락에서 이해되는 바와 같이, 약물, 화합물 또는 제약 조성물의 유효량은 또 다른 약물, 화합물 또는 제약 조성물과 함께 달성되거나 달성되지 않을 수 있다. 그러므로, "유효량"은 하나 이상의 치료제를 투여하는 맥락에서 고려될 수 있으며, 단일 작용제는 하나 이상의 다른 작용제와 함께 바람직한 결과가 달성될 수 있거나 달성되는 경우 유효량으로 제공되는 것으로 고려될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, 또 다른 화합물 또는 조성물과 "함께" 또는 "조합하여" 투여는 동시 투여 및/또는 상이한 시간에서의 투여를 포함한다. 함께 또는 조합하여 투여는 또한 상이한 투약 빈도 또는 간격의 투여를 포함하고, 동일한 투여 경로 또는 상이한 투여 경로를 사용하는 투여를 포함하여, 공동-제형으로서의 투여 또는 별도의 조성물로서의 투여를 포함한다.

치료, 예방 또는 위험 감소의 목적을 위한 "개체"는 인간, 가축 및 농장 동물, 및 동물원, 스포츠 또는 애완 동물, 예컨대 개, 말, 토끼, 소, 돼지, 햄스터, 저빌, 마우스, 페럿, 래트, 고양이 등을 포함하는 포유동물로서 분류되는 임의의 동물을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 개체는 인간이다.

달리 명시되지 않는 한, 용어 "소르틸린", "소르틸린 단백질" 및 "소르틸린 폴리펩티드"는 영장류 (예를 들어, 인간 및 시노몰구스 원숭이) 및 설치류 (예를 들어, 마우스 및 래트)를 포함하는 임의의 포유동물 공급원으로부터의 임의의 천연 소르틸린을 지칭하기 위해 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 일부 실시양태에서, 상기 용어는 야생형 서열 및 자연 발생 변이체 서열, 예를 들어 스플라이스 변이체 또는 대립유전자 변이체를 둘 모두 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 용어는 "전장", 프로세싱되지 않은 소르틸린 뿐만 아니라 세포에서의 프로세싱으로부터 생성되는 임의의 형태의 소르틸린을 포함한다. 일부 실시양태에서, 소르틸린은 인간 소르틸린이다. 일부 실시양태에서, 예시적인 인간 소르틸린의 아미노산 서열은 서열식별번호: 1이다.

용어 "항-소르틸린 항체", "소르틸린에 결합하는 항체" 및 "소르틸린에 특이적으로 결합하는 항체"는 항체가 소르틸린을 표적화하는데 진단제 및/또는 치료제로서 유용하도록 충분한 친화도로 소르틸린에 결합할 수 있는 항체를 지칭한다. 한 실시양태에서, 관련되지 않은 비-소르틸린 폴리펩티드에 대한 항-소르틸린 항체의 결합 정도는 예를 들어 방사면역검정 (RIA), 생물층 간섭법 검정 (예를 들어, 포르테바이오(ForteBio) 시스템 사용), 또는 표면 플라즈몬 공명 (SPR) 검정에 의해 측정된 바와 같이 소르틸린에 대한 항체의 결합의 약 10% 미만이다 (예를 들어, 문헌 [Hearty et al., Methods Mol Biol (2012) 907:411-42]; [Vishal and Rafique, Analytical Biochemistry (2017) 536, pp. 16-31]; [Estep et al., MAb (2013) 5(2):270-8]; 및 [Friguet et al., Analytical Biochemistry (1993) 210(2): 344-350] 참조). 특정 실시양태에서, 소르틸린에 결합하는 항체는 < 1μM, < 100 nM, < 10 nM, < 1 nM, < 0.1 nM, < 0.01 nM 또는 < 0.001 nM (예를 들어, 10^-8 M 이하, 예를 들어 10^-8 M 내지 10^-13 M, 예를 들어 10^-9 M 내지 10^-13 M)의 해리 상수 (KD)를 갖는다. 특정 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 상이한 종으로부터의 소르틸린 사이에 보존된 소르틸린의 에피토프에 결합한다.

용어 "이뮤노글로불린" (Ig)은 본원에서 "항체"와 상호교환적으로 사용된다. 용어 "항체"는 본원에서 가장 넓은 의미로 사용되며, 특히 모노클로날 항체, 폴리클로날 항체, 적어도 2개의 무손상 항체로부터 형성된 것을 포함하는 다중특이적 항체 (예를 들어, 이중특이적 항체), 및 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 항체 단편을 포함한다.

"천연 항체"는 일반적으로 2개의 동일한 경쇄 ("L") 및 2개의 동일한 중쇄 ("H")로 구성된 약 150,000 달톤의 이종사량체 당단백질이다. 각 경쇄는 하나의 공유결합적 디술피드 결합에 의해 중쇄에 연결되는 반면, 디술피드 연결의 수는 상이한 이뮤노글로불린 이소타입의 중쇄 사이에서 다양하다. 각 중쇄 및 경쇄는 또한 규칙적으로 이격된 쇄내 디술피드 브릿지를 갖는다. 각 중쇄는 한쪽 말단에 가변 도메인 (V_H), 이어서 다수의 불변 도메인을 갖는다. 각 경쇄는 한쪽 말단에 가변 도메인 (V_L) 및 이의 다른 말단에 불변 도메인을 가지며; 경쇄의 불변 도메인은 중쇄의 제1 불변 도메인과 정렬되고, 경쇄 가변 도메인은 중쇄의 가변 도메인과 정렬된다. 특정한 아미노산 잔기는 경쇄 및 중쇄 가변 도메인 사이의 경계면을 형성하는 것으로 여겨진다.

상이한 클래스의 항체의 구조 및 특성에 대해서는, 예를 들어 문헌 [Basic and Clinical Immunology, 8th Ed., Daniel P. Stites, Abba I. Terr and Tristram G. Parslow (eds.), Appleton & Lange, Norwalk, CT, 1994, page 71 and Chapter 6]을 참조한다.

임의의 척추동물 종으로부터의 경쇄는 이들의 불변 도메인의 아미노산 서열에 기초하여 카파 ("κ") 및 람다 ("λ")로 불리는 2개의 명백하게 구별되는 유형 중 하나에 할당될 수 있다. 이들의 중쇄의 불변 도메인 (CH)의 아미노산 서열에 따라, 이뮤노글로불린은 상이한 클래스 또는 이소타입에 할당될 수 있다. 5개의 클래스의 이뮤노글로불린이 있다: IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM (각각 알파 ("α"), 델타 ("δ"), 엡실론 ("ε"), 감마 ("γ") 및 뮤 ("μ")로 명명된 중쇄를 가짐). γ 및 α 클래스는 CH 서열 및 기능의 상대적으로 사소한 차이에 기초하여 서브클래스 (이소타입)로 추가로 나뉘며, 예를 들어 인간은 하기 서브클래스를 발현한다: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2. 상이한 클래스의 이뮤노글로불린의 서브유닛 구조 및 3차원 구성은 널리 공지되어 있으며, 일반적으로 예를 들어 문헌 [Abbas et al., Cellular and Molecular Immunology, 4^th ed. (W.B. Saunders Co., 2000)]에 기재되어 있다.

항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 "가변 영역" 또는 "가변 도메인"은 항체의 중쇄 또는 경쇄의 아미노-말단 도메인을 지칭한다. 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인은 각각 "V_H" 및 "V_L"로 지칭될 수 있다. 이들 도메인은 일반적으로 항체의 가장 가변적인 부분 (동일한 클래스의 다른 항체에 비해)이고, 항원 결합 부위를 함유한다.

용어 "가변"은 가변 도메인의 특정 세그먼트가 항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체 사이에서 서열이 광범위하게 상이하다는 사실을 지칭한다. 가변 도메인은 항원 결합을 매개하고, 이의 특정한 항원에 대한 특정한 항체의 특이성을 정의한다. 그러나, 가변성은 가변 도메인의 전체 범위에 고르게 분포되지 않는다. 대신, 이는 경쇄 및 중쇄 가변 도메인 둘 모두에서 초가변 영역 (HVR)으로 불리는 3개의 세그먼트에 농축되어 있다. 가변 도메인의 보다 고도로 보존된 부분은 프레임워크 영역 (FR)으로 불린다. 천연 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인은 각각 4개의 FR 영역을 포함하며, 주로 베타-시트 구성을 채택하고, 3개의 HVR에 의해 연결되며, 이는 루프 연결을 형성하고, 일부 경우에 베타-시트 구조의 일부를 형성한다. 각 쇄의 HVR은 FR 영역에 의해 매우 근접하게 함께 유지되며, 다른 쇄로부터의 HVR과 함께, 항체의 항원-결합 부위의 형성에 기여한다 (문헌 [Kabat et al., Sequences of Immunological Interest, Fifth Edition, National Institute of Health, Bethesda, MD (1991)] 참조). 불변 도메인은 항원에 대한 항체의 결합에 직접적으로 관여하지 않지만, 다양한 이펙터 기능, 예컨대 항체-의존적-세포성 독성에서 항체의 참여를 나타낸다.

"단리된" 항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 (예를 들어, 자연적으로 또는 재조합적으로) 이의 생산 환경의 구성성분으로부터 식별, 분리 및/또는 회수된 항체이다. 바람직하게는, 단리된 폴리펩티드는 이의 생산 환경으로부터의 모든 다른 오염물질 구성성분과의 회합이 없다. 재조합 형질감염된 세포로부터 기인한 것과 같은 생산 환경으로부터의 오염물질 구성성분은 전형적으로 항체에 대한 연구, 진단 또는 치료 용도를 방해하는 물질이며, 효소, 호르몬, 및 다른 단백질성 또는 비단백질성 용질을 포함할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 폴리펩티드는 하기와 같이 정제될 것이다: (1) 예를 들어 로우리(Lowry) 방법에 의해 결정된 바와 같은 항체의 95 중량% 초과, 및 일부 실시양태에서 99 중량% 초과로; (2) 스피닝 컵 서열분석기를 사용하여 N-말단 또는 내부 아미노산 서열의 적어도 15개의 잔기를 수득하기에 충분한 정도로, 또는 (3) 쿠마시 블루 또는 바람직하게는 은 염색을 사용하여 비환원 또는 환원 조건 하에 SDS-PAGE에 의해 균질성으로. 단리된 항체는 항체의 자연 환경의 적어도 하나의 구성성분이 존재하지 않을 것이기 때문에 재조합 T 세포 내의 제자리 항체를 포함한다. 그러나, 일반적으로 단리된 폴리펩티드 또는 항체는 적어도 하나의 정제 단계에 의해 제조될 것이다.

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "모노클로날 항체"는 실질적으로 동종인 항체 집단으로부터 수득된 항체, 예컨대 본 개시내용의 모노클로날 항-소르틸린 항체를 지칭하며, 즉 집단을 포함하는 개별 항체는 소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이 및/또는 번역후 변형 (예를 들어, 이성질체화, 아미드화 등)을 제외하고는 동일하다. 모노클로날 항체는 고도로 특이적이며, 단일 항원성 부위에 대해 지시된다. 전형적으로 상이한 결정인자 (에피토프)에 대해 지시된 상이한 항체를 포함하는 폴리클로날 항체 제제와 달리, 각각의 모노클로날 항체는 항원 상의 단일 결정인자에 대해 지시된다. 이들의 특이성 외에도, 모노클로날 항체는 다른 이뮤노글로불린에 의해 오염되지 않은 하이브리도마 배양에 의해 합성된다는 장점이 있다. 수식어 "모노클로날"은 실질적으로 동종인 항체 집단으로부터 수득된 바와 같은 항체의 특징을 나타내며, 임의의 특정한 방법에 의한 항체의 생산을 필요로 하는 것으로 해석되어서는 안된다. 예를 들어, 본 발명에 따라 사용되는 모노클로날 항체는 하기 방법 중 하나 이상을 포함하나 이에 제한되지는 않는 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다: 래트, 마우스, 토끼, 기니아 피그, 햄스터 및/또는 닭을 포함하나 이에 제한되지는 않는 동물을 DNA(들), 바이러스-유사 입자, 폴리펩티드(들) 및/또는 세포(들) 중 하나 이상으로 면역화하는 방법, 하이브리도마 방법, B-세포 클로닝 방법, 재조합 DNA 방법, 및 인간 이뮤노글로불린 서열을 코딩하는 인간 이뮤노글로불린 유전자좌 또는 유전자의 일부 또는 전부를 갖는 동물에서 인간 또는 인간-유사 항체를 생산하기 위한 기술.

용어 "전장 항체", "무손상 항체" 또는 "전체 항체"는 항체 단편과는 대조적으로 실질적으로 무손상 형태의 항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 지칭하기 위해 상호교환적으로 사용된다. 구체적으로, 전체 항체는 Fc 영역을 포함하는 중쇄 및 경쇄를 갖는 항체를 포함한다. 불변 도메인은 천연 서열 불변 도메인 (예를 들어, 인간 천연 서열 불변 도메인) 또는 이의 아미노산 서열 변이체일 수 있다. 일부 경우에, 무손상 항체는 하나 이상의 이펙터 기능을 가질 수 있다.

"항체 단편"은 무손상 항체의 일부, 바람직하게는 무손상 항체의 항원 결합 및/또는 가변 영역을 포함한다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab')₂ 및 Fv 단편; 디아바디; 선형 항체 (미국 특허 5,641,870, 실시예 2; 문헌 [Zapata et al., Protein Eng. 8(10):1057-1062 (1995)] 참조); 항체 단편으로부터 형성된 단일-쇄 항체 분자 및 다중특이적 항체를 포함한다.

항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 파파인 소화는 "Fab" 단편으로 불리는 2개의 동일한 항원-결합 단편, 및 잔류 "Fc" 단편, 쉽게 결정화하는 능력을 반영하는 명칭을 생성한다. Fab 단편은 H 쇄의 가변 영역 도메인 (V_H) 및 하나의 중쇄의 제1 불변 도메인 (C_H1)과 함께 전체 L 쇄로 이루어진다. 각 Fab 단편은 항원 결합에 관하여 1가이며, 즉 단일 항원-결합 부위를 갖는다. 항체의 펩신 처리는 상이한 항원-결합 활성을 갖는 2개의 디술피드 연결된 Fab 단편에 대략적으로 상응하고 여전히 항원을 가교시킬 수 있는 단일의 큰 F(ab')₂ 단편을 생성한다. Fab' 단편은 항체 힌지 영역으로부터의 하나 이상의 시스테인을 포함하는 C_H1 도메인의 카르복시 말단에 몇 개의 추가 잔기를 가짐으로써 Fab 단편과 상이하다. Fab'-SH는 본원에서 불변 도메인의 시스테인 잔기(들)가 유리 티올 기를 보유하는 Fab'에 대한 명칭이다. F(ab')₂ 항체 단편은 원래 이들 사이에 힌지 시스테인을 갖는 Fab' 단편 쌍으로서 생성되었다. 항체 단편의 다른 화학적 커플링이 또한 공지되어 있다.

Fc 단편은 디술피드에 의해 함께 유지된 H 쇄 둘 모두의 카르복시-말단 부분을 포함한다. 항체의 이펙터 기능은 특정 유형의 세포에서 발견되는 Fc 수용체 (FcR)에 의해 또한 인식되는 영역인 Fc 영역의 서열에 의해 결정된다.

"Fv"는 완전한 항원-인식 및 -결합 부위를 함유하는 최소 항체 단편이다. 이 단편은 긴밀한 비공유결합적 회합으로 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄 가변 영역 도메인의 이량체로 이루어진다. 이들 2개의 도메인의 폴딩으로부터, 항원 결합을 위한 아미노산 잔기에 기여하고 항체에 대한 항원 결합 특이성을 부여하는 6개의 초가변 루프 (각각 H 및 L 쇄로부터 3개의 루프)가 나온다. 그러나, 단일 가변 도메인 (또는 항원에 특이적인 3개의 HVR만을 포함하는 Fv의 절반)조차도 전체 결합 부위보다 더 낮은 친화도에서도 항원을 인식하고 결합하는 능력을 갖는다.

"sFv" 또는 "scFv"로도 약칭되는 "단일-쇄 Fv"는 단일 폴리펩티드 쇄에 연결된 VH 및 VL 항체 도메인을 포함하는 항체 단편이다. 바람직하게는, sFv 폴리펩티드는 sFv가 항원 결합을 위해 원하는 구조를 형성할 수 있게 하는 V_H 및 V_L 도메인 사이에 폴리펩티드 링커를 추가로 포함한다. sFv의 검토에 대해서는, 문헌 [Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994)]을 참조한다.

항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 "기능적 단편"은 일반적으로 무손상 항체의 항원 결합 또는 가변 영역 또는 변형된 FcR 결합 능력을 보유하거나 갖는 항체의 F 영역을 포함하는 무손상 항체의 일부를 포함한다. 항체 단편의 예는 선형 항체, 단일-쇄 항체 분자 및 항체 단편으로부터 형성된 다중특이적 항체를 포함한다.

용어 "디아바디"는 가변 도메인의 쇄내에서는 아니지만 쇄간 쌍형성이 달성되어 이에 의해 2가 단편, 즉 2개의 항원-결합 부위를 갖는 단편을 생성하도록 V_H 및 V_L 도메인 사이에 짧은 링커 (약 5-10개 잔기)를 갖는 sFv 단편 (선행 단락 참조)을 구축함으로써 제조된 작은 항체 단편을 지칭한다. 이중특이적 디아바디는 2개의 항체의 V_H 및 V_L 도메인이 상이한 폴리펩티드 쇄 상에 존재하는 2개의 "교차" sFv 단편의 이종이량체이다.

본원에서 사용된 바와 같은 "키메라 항체"는, 중쇄 및/또는 경쇄의 일부는 특정한 종으로부터 유래되거나 특정한 항체 클래스 또는 서브클래스에 속하는 항체의 상응하는 서열과 동일하거나 상동성인 반면, 쇄(들)의 나머지는 또 다른 종으로부터 유래되거나 또 다른 항체 클래스 또는 서브클래스에 속하는 항체의 상응하는 서열과 동일하거나 상동성인 항체 (이뮤노글로불린), 예컨대 본 개시내용의 키메라 항-소르틸린 항체, 뿐만 아니라 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 이러한 항체의 단편을 지칭한다. 관심 키메라 항체는 본원에서 항체의 항원-결합 영역이 예를 들어 마카크 원숭이를 관심 항원으로 면역화함으로써 생산된 항체로부터 유래된 프리마티즈드(PRIMATIZED)^® 항체를 포함한다. 본원에서 사용된 바와 같은 "인간화 항체"는 "키메라 항체"의 서브세트로 사용된다.

비인간 (예를 들어, 뮤린) 항체의 "인간화" 형태, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 인간화 형태는 비인간 HVR로부터의 아미노산 잔기 및 인간 FR로부터의 아미노산 잔기를 포함하는 키메라 항체이다. 특정 실시양태에서, 인간화 항체는 적어도 하나, 전형적으로 2개의 가변 도메인 중 실질적으로 모두를 포함할 것이며, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 HVR (예를 들어, CDR)은 비인간 항체의 것에 상응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR은 인간 항체의 것에 상응한다. 인간화 항체는 임의로 인간 항체로부터 유래된 항체 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 수 있다. 항체, 예를 들어 비인간 항체의 "인간화 형태"는 인간화를 거친 항체를 지칭한다.

"인간 항체"는 인간에 의해 생성된 항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 보유하고/거나 본원에 개시된 바와 같은 인간 항체를 제조하기 위한 임의의 기술을 사용하여 만들어진 항체이다. 인간 항체의 이러한 정의는 구체적으로 비인간 항원-결합 잔기를 포함하는 인간화 항체를 배제한다. 인간 항체는 파지-디스플레이 라이브러리 및 효모-기반 플랫폼 기술을 포함하여 관련 기술분야에 공지된 다양한 기술을 사용하여 생산될 수 있다. 인간 항체는 항원 챌린지에 반응하여 이러한 항체를 생산하도록 변형되었지만 내인성 유전자좌가 무능하게 된 트랜스제닉 동물, 예를 들어 면역화된 제노마우스 뿐만 아니라 인간 B-세포 하이브리도마 기술을 통해 생성된 동물에 항원을 투여함으로써 제조될 수 있다.

본원에서 사용될 때, 용어 "초가변 영역", "HVR" 또는 "HV"는 서열이 초가변적이고/거나 구조적으로 정의된 루프를 형성하는 항체-가변 도메인의 영역, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 영역을 지칭한다. 일반적으로, 항체는 6개의 HVR (V_H에 3개 (H1, H2, H3) 및 V_L에 3개 (L1, L2, L3))을 포함한다. 천연 항체에서, H3 및 L3은 6개의 HVR 중 가장 다양성을 나타내며, 특히 H3은 항체에 미세한 특이성을 부여하는 독특한 역할을 하는 것으로 여겨진다. 중쇄로만 이루어진 자연 발생 낙타 항체는 경쇄의 부재 하에 기능적이고 안정적이다.

다수의 HVR 묘사가 사용되고 있으며 본원에 포함된다. 일부 실시양태에서, HVR은 서열 가변성에 기초한 카바트 상보성-결정 영역 (CDR)일 수 있으며 가장 흔히 사용된다 (Kabat et al., supra). 일부 실시양태에서, HVR은 코티아 CDR일 수 있다. 대신에 코티아는 구조적 루프의 위치를 지칭한다 (Chothia and Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). 일부 실시양태에서, HVR은 AbM HVR일 수 있다. AbM HVR은 카바트 CDR 및 코티아 구조적 루프 간의 타협을 나타내며, 옥스포드 몰레큘라(Oxford Molecular)의 AbM 항체-모델링 소프트웨어에 의해 사용된다. 일부 실시양태에서, HVR은 "접촉" HVR일 수 있다. "접촉" HVR은 이용가능한 복잡한 결정 구조의 분석에 기초한다. 이들 각각의 HVR로부터의 잔기는 하기 언급되어 있다.

HVR은 하기와 같은 "연장된 HVR"을 포함할 수 있다: VL에서 24-36 또는 24-34 (L1), 46-56 또는 50-56 (L2), 및 89-97 또는 89-96 (L3), 및 VH에서 26-35 (H1), 50-65 또는 49-65 (바람직한 실시양태) (H2), 및 93-102, 94-102 또는 95-102 (H3). 가변-도메인 잔기는 이들 연장된-HVR 정의 각각에 대한 문헌 [Kabat et al., supra]에 따라 넘버링된다.

"프레임워크" 또는 "FR" 잔기는 본원에 정의된 바와 같은 HVR 잔기 이외의 가변-도메인 잔기이다.

본원에서 사용된 바와 같은 "억셉터 인간 프레임워크"는 인간 이뮤노글로불린 프레임워크 또는 인간 컨센서스 프레임워크로부터 유래된 V_L 또는 V_H 프레임워크의 아미노산 서열을 포함하는 프레임워크이다. 인간 이뮤노글로불린 프레임워크 또는 인간 컨센서스 프레임워크로부터 "유래된" 억셉터 인간 프레임워크는 이의 동일한 아미노산 서열을 포함할 수 있거나, 또는 기존의 아미노산 서열 변화를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 기존의 아미노산 변화의 수는 10 이하, 9 이하, 8 이하, 7 이하, 6 이하, 5 이하, 4 이하, 3 이하, 또는 2 이하이다. 기존의 아미노산 변화가 VH에 존재하는 경우, 바람직하게는 이러한 변화는 위치 71H, 73H 및 78H 중 3, 2 또는 1개에서만 발생하며; 예를 들어, 이들 위치에서의 아미노산 잔기는 71A, 73T 및/또는 78A일 수 있다. 한 실시양태에서, VL 억셉터 인간 프레임워크는 V_L 인간 이뮤노글로불린 프레임워크 서열 또는 인간 컨센서스 프레임워크 서열과 서열이 동일하다.

"인간 컨센서스 프레임워크"는 인간 이뮤노글로불린 V_L 또는 V_H 프레임워크 서열의 선택에서 가장 흔히 발생하는 아미노산 잔기를 나타내는 프레임워크이다. 일반적으로, 인간 이뮤노글로불린 V_L 또는 V_H 서열의 선택은 가변 도메인 서열의 서브그룹으로부터 이루어진다. 일반적으로, 서열의 서브그룹은 문헌 [Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)]에서와 같은 서브그룹이다. 예는 V_L에 대한 것을 포함하며, 서브그룹은 문헌 [Kabat et al., supra]에서와 같이 서브그룹 카파 I, 카파 II, 카파 III 또는 카파 IV일 수 있다. 추가적으로, V_H에 대해, 서브그룹은 문헌 [Kabat et al., supra]에서와 같이 서브그룹 I, 서브그룹 II 또는 서브그룹 III일 수 있다.

예를 들어, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 특정된 위치에서의 "아미노산 변형"은 특정된 잔기의 치환 또는 결실, 또는 특정된 잔기에 인접한 적어도 하나의 아미노산 잔기의 삽입을 지칭한다. 특정된 잔기에 "인접한" 삽입은 이의 1개 내지 2개의 잔기 내에 삽입을 의미한다. 삽입은 특정된 잔기에 대한 N-말단 또는 C-말단일 수 있다. 본원에서 바람직한 아미노산 변형은 치환이다.

"친화도-성숙" 항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 변경(들)을 보유하지 않는 부모 항체와 비교하여 항원에 대한 항체의 친화도의 개선을 초래하는 이의 하나 이상의 HVR의 하나 이상의 변경을 갖는 항체이다. 한 실시양태에서, 친화도-성숙 항체는 표적 항원에 대해 나노몰 또는 심지어 피코몰 친화도를 갖는다. 친화도-성숙 항체는 관련 기술분야에 공지된 절차에 의해 생성된다. 예를 들어, 문헌 [Marks et al., Bio/Technology 10:779-783 (1992)]은 VH- 및 VL-도메인 셔플링에 의한 친화도 성숙을 기술한다. HVR 및/또는 프레임워크 잔기의 무작위 돌연변이유발은 예를 들어 문헌 [Barbas et al. Proc Nat. Acad. Sci. USA 91:3809-3813 (1994)]; [Schier et al. Gene 169:147-155 (1995)]; [Yelton et al. J. Immunol. 155:1994-2004 (1995)]; [Jackson et al., J. Immunol. 154(7):3310-9 (1995)]; 및 [Hawkins et al., J. Mol. Biol. 226:889-896 (1992)]에 기재되어 있다.

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "특이적으로 인식하다" 또는 "특이적으로 결합하다"는 생물학적 분자를 포함하는 이질적 분자 집단의 존재 하에 표적의 존재를 결정하는 표적 및 항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체 사이의 유인 또는 결합과 같은 측정가능하고 재현가능한 상호작용을 지칭한다. 예를 들어, 표적 또는 에피토프에 특이적으로 또는 우선적으로 결합하는 항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 다른 표적 또는 표적의 다른 에피토프에 결합하는 것보다 더 큰 친화도로, 결합력으로, 더 쉽게 및/또는 더 긴 지속시간 동안 이 표적 또는 에피토프에 결합하는 항체이다. 또한, 예를 들어 제1 표적에 특이적으로 또는 우선적으로 결합하는 항체 (또는 모이어티)는 제2 표적에 특이적으로 또는 우선적으로 결합하거나 결합하지 않을 수 있다는 것이 이 정의를 읽음으로써 이해된다. 이와 같이, "특이적 결합" 또는 "우선적 결합"이 반드시 배타적 결합을 요구하는 것은 아니다 (포함할 수 있음). 표적에 특이적으로 결합하는 항체는 적어도 약 10 ³M ^-1또는 10 ⁴M ^-1, 때때로 약 10 ⁵M ^-1또는 10 ⁶M ^-1, 다른 경우에 약 10 ⁶M ^-1또는 10 ⁷M ^-1, 약 10 ⁸M ^-1내지 10 ⁹M ^-1, 또는 약 10 ¹⁰M ^-1내지 10 ¹¹M ^-1또는 그 초과의 회합 상수를 가질 수 있다. 다양한 면역검정 형식이 특정한 단백질과 특이적으로 면역반응하는 항체를 선택하기 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 고체상 ELISA 면역검정은 단백질과 특이적으로 면역반응하는 모노클로날 항체를 선택하기 위해 일상적으로 사용된다. 예를 들어, 특이적 면역반응성을 결정하기 위해 사용될 수 있는 면역검정 형식 및 조건에 대한 설명에 대해서는, 문헌 [Harlow and Lane (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, New York]을 참조한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 소르틸린 단백질 및 제2 단백질 간의 "상호작용"은 단백질-단백질 상호작용, 물리적 상호작용, 화학적 상호작용, 결합, 공유결합적 결합 및 이온 결합을 제한 없이 포함한다. 본원에서 사용된 바와 같이, 항체는 항체가 2개의 단백질 사이의 상호작용을 방해, 감소 또는 완전히 제거할 때 2개의 단백질 간의 "상호작용을 억제한다". 본 개시내용의 항체 또는 이의 단편은 항체 또는 이의 단편이 2개의 단백질 중 하나에 결합할 때 2개의 단백질 간의 "상호작용을 억제한다".

항체 "이펙터 기능"은 항체의 Fc 영역 (천연 서열 Fc 영역 또는 아미노산 서열 변이체 Fc 영역)에 기인하는 생물학적 활성을 지칭하며, 항체 이소타입에 따라 다양하다.

본원에서 용어 "Fc 영역"은 천연-서열 Fc 영역 및 변이체 Fc 영역을 포함하는 이뮤노글로불린 중쇄의 C-말단 영역을 정의하는데 사용된다. 이뮤노글로불린 중쇄의 Fc 영역의 경계는 다양할 수 있지만, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 일반적으로 위치 Cys226의 아미노산 잔기 또는 Pro230로부터 이의 카르복실-말단까지 스트레치되는 것으로 정의된다. Fc 영역의 C-말단 리신 (EU 넘버링 시스템에 따른 잔기 447)은 예를 들어 항체의 생산 또는 정제 동안, 또는 항체의 중쇄를 코딩하는 핵산을 재조합적으로 조작함으로써 제거될 수 있다. 따라서, 무손상 항체의 조성물은 모든 K447 잔기가 제거된 항체 집단, K447 잔기가 제거되지 않은 항체 집단, 및 K447 잔기가 있거나 없는 항체의 혼합물을 갖는 항체 집단을 포함할 수 있다. 본 개시내용의 항체에서 사용하기에 적합한 천연-서열 Fc 영역은 인간 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함한다.

"천연 서열 Fc 영역"은 자연에서 발견되는 Fc 영역의 아미노산 서열과 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 천연 서열 인간 Fc 영역은 천연 서열 인간 IgG1 Fc 영역 (비-A 및 A 알로타입); 천연 서열 인간 IgG2 Fc 영역; 천연 서열 인간 IgG3 Fc 영역; 및 천연 서열 인간 IgG4 Fc 영역 뿐만 아니라 이의 자연 발생 변이체를 포함한다.

"변이체 Fc 영역"은 적어도 하나의 아미노산 변형, 바람직하게는 하나 이상의 아미노산 치환(들)에 의해 천연 서열 Fc 영역과 상이한 아미노산 서열을 포함한다. 바람직하게는, 변이체 Fc 영역은 천연 서열 Fc 영역 또는 부모 폴리펩티드의 Fc 영역과 비교하여 적어도 하나의 아미노산 치환, 예를 들어 천연 서열 Fc 영역 또는 부모 폴리펩티드의 Fc 영역에서 약 1 내지 약 10개의 아미노산 치환, 및 바람직하게는 약 1 내지 약 5개의 아미노산 치환을 갖는다. 본원에서 변이체 Fc 영역은 바람직하게는 천연 서열 Fc 영역 및/또는 부모 폴리펩티드의 Fc 영역과 적어도 약 80% 상동성을 보유할 것이며, 가장 바람직하게는 적어도 약 90% 상동성, 보다 바람직하게는 적어도 약 95% 상동성을 보유할 것이다.

"Fc 수용체" 또는 "FcR"은 항체의 Fc 영역에 결합하는 수용체를 설명한다. 바람직한 FcR은 천연 서열 인간 FcR이다. 더욱이, 바람직한 FcR은 IgG 항체 (감마 수용체)에 결합하고 FcγRI, FcγRII 및 FcγRIII 서브클래스의 수용체 (이들 수용체의 대립유전자 변이체 및 대안적으로 스플라이싱된 형태 포함)를 포함하는 것이며, FcγRII 수용체는 FcγRIIA ("활성화 수용체") 및 FcγRIIB ("억제 수용체")를 포함하며, 이는 주로 이의 세포질 도메인이 상이한 유사한 아미노산 서열을 갖는다. 활성화 수용체 FcγRIIA는 이의 세포질 도메인에 면역수용체 티로신-기반 활성화 모티프 ("ITAM")를 함유한다. 억제 수용체 FcγRIIB는 이의 세포질 도메인에 면역수용체 티로신-기반 억제 모티프 ("ITIM")를 함유한다. 미래에 식별될 것을 포함하는 다른 FcR은 본원에서 용어 "FcR"에 포함된다. FcR은 또한 항체의 혈청 반감기를 증가시킬 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 펩티드, 폴리펩티드 또는 항체 서열에 관하여 "퍼센트 (%) 아미노산 서열 동일성" 및 "상동성"은 서열을 정렬하고 필요한 경우 갭을 도입하여 최대 퍼센트 서열 동일성을 달성하고, 서열 동일성의 일부로서 어떠한 보존적 치환을 고려하지 않은 후, 특정 펩티드 또는 폴리펩티드 서열 내의 아미노산 잔기와 동일한 후보 서열 내의 아미노산 잔기의 백분율을 지칭한다. 퍼센트 아미노산 서열 동일성을 결정하는 목적을 위한 정렬은 예를 들어 공개적으로 이용가능한 컴퓨터 소프트웨어, 예컨대 BLAST, BLAST-2, ALIGN 또는 MEGALIGN™ (DNASTAR) 소프트웨어를 사용하여 관련 기술분야의 기술 내에 있는 다양한 방식으로 달성될 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 비교되는 서열의 전장에 걸쳐 최대 정렬을 달성하는데 필요한 관련 기술분야에 공지된 임의의 알고리즘을 포함하여 정렬을 측정하기 위한 적절한 파라미터를 결정할 수 있다.

"단리된" 세포는 그것이 생산된 환경에서 일반적으로 회합되는 적어도 하나의 오염물질 세포로부터 식별되고 분리된 분자 또는 세포이다. 일부 실시양태에서, 단리된 세포는 생산 환경과 회합된 모든 구성성분과의 회합이 없다. 단리된 세포는 자연에서 발견되는 형태 또는 환경이 아닌 다른 형태이다. 단리된 세포는 조직, 장기 또는 개체에 자연적으로 존재하는 세포와 구별된다. 일부 실시양태에서, 단리된 세포는 본 개시내용의 숙주 세포이다.

항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 코딩하는 "단리된" 핵산 분자는 그것이 생산된 환경에서 일반적으로 회합되는 적어도 하나의 오염물질 핵산 분자로부터 식별되고 분리된 핵산 분자이다. 바람직하게는, 단리된 핵산은 생산 환경과 회합된 모든 구성성분과의 회합이 없다. 본원에서 폴리펩티드 및 항체를 코딩하는 단리된 핵산 분자는 자연에서 발견되는 형태 또는 환경이 아닌 다른 형태이다. 따라서, 단리된 핵산 분자는 세포에 자연적으로 존재하는 본원의 폴리펩티드 및 항체를 코딩하는 핵산과 구별된다.

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "벡터"는 그것이 연결된 또 다른 핵산을 수송할 수 있는 핵산 분자를 지칭하는 것으로 의도된다. 벡터의 한 유형은 "플라스미드"이며, 이는 추가 DNA 세그먼트가 라이게이션될 수 있는 원형 이중 가닥 DNA를 지칭한다. 또 다른 유형의 벡터는 파지 벡터이다. 또 다른 유형의 벡터는 바이러스 벡터이며, 여기서 추가 DNA 세그먼트는 바이러스 게놈에 라이게이션될 수 있다. 특정 벡터는 이들이 도입되는 숙주 세포에서 자율적으로 복제할 수 있다 (예를 들어, 박테리아 복제 기점을 갖는 박테리아 벡터 및 에피솜 포유동물 벡터). 다른 벡터 (예를 들어, 비-에피솜 포유동물 벡터)는 숙주 세포로의 도입 시 숙주 세포의 게놈에 통합될 수 있고, 이에 의해 숙주 게놈과 함께 복제된다. 더욱이, 특정 벡터는 작동가능하게 연결된 유전자의 발현을 지시할 수 있다. 이러한 벡터는 본원에서 "재조합 발현 벡터" 또는 간단히 "발현 벡터"로 지칭된다. 일반적으로, 재조합 DNA 기술에서 유용한 발현 벡터는 종종 플라스미드 형태이다. 본 명세서에서, "플라스미드" 및 "벡터"는 플라스미드가 가장 흔히 사용되는 벡터 형태이므로 상호교환적으로 사용될 수 있다.

본원에서 상호교환적으로 사용된 바와 같은 "폴리뉴클레오티드" 또는 "핵산"은 임의의 길이의 뉴클레오티드의 중합체를 지칭하며, DNA 및 RNA를 포함한다. 뉴클레오티드는 데옥시리보뉴클레오티드, 리보뉴클레오티드, 변형된 뉴클레오티드 또는 염기, 및/또는 이들의 유사체, 또는 DNA 또는 RNA 폴리머라제에 의해 또는 합성 반응에 의해 중합체에 혼입될 수 있는 임의의 기질일 수 있다.

"숙주 세포"는 폴리뉴클레오티드 삽입물의 혼입을 위한 벡터(들)에 대한 수용자일 수 있거나 수용자였던 개별 세포 또는 세포 배양물을 포함한다. 숙주 세포는 단일 숙주 세포의 자손을 포함하고, 자손은 자연적, 우발적 또는 고의적 돌연변이로 인해 원래의 부모 세포와 반드시 완전히 동일 (형태학 또는 게놈 DNA 보체에서)하지 않을 수 있다. 숙주 세포는 본 개시내용의 폴리뉴클레오티드(들)로 생체내에서 형질감염된 세포를 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같은 "담체"는 사용되는 투여량 및 농도에서 노출되는 세포 또는 포유동물에 무독성인 제약상 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제를 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "약"은 이 기술분야의 통상의 기술자에게 쉽게 공지된 각각의 값에 대한 통상적인 오차 범위를 지칭한다. 본원에서 "약" 값 또는 파라미터에 대한 언급은 해당 값 또는 파라미터 자체에 관한 실시양태를 포함 (및 설명)한다.

본 명세서 및 첨부된 청구범위에서 사용된 바와 같이, 단수 형태는 문맥상 명백하게 달리 나타내지 않는 한 복수 지시대상을 포함한다. 예를 들어, "항체"에 대한 언급은 하나 내지 많은 항체 (예컨대 몰량)에 대한 언급이며, 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 이의 등가물 등을 포함한다.

본원에 기재된 본 개시내용의 측면 및 실시양태는 측면 및 실시양태를 "포함하는", "이루어진" 및 "본질적으로 이루어진"을 포함하는 것으로 이해된다.

개요

본 개시내용은 항-소르틸린 항체를 개체에게 투여함으로써 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 및/또는 지연시키는 방법에 관한 것이다. 치료 또는 지연될 수 있는 질환, 장애 또는 손상의 비제한적 예는 전두측두엽 치매, 진행성 핵상 마비, 알츠하이머병, 혈관성 치매, 발작, 망막 이영양증, 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 외상성 뇌 손상, 척수 손상, 치매, 뇌졸중, 파킨슨병, 급성 파종성 뇌척수염, 망막 변성, 연령 관련 황반 변성, 녹내장, 다발성 경화증, 패혈성 쇼크, 박테리아 감염, 관절염 및 골관절염을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료 또는 지연될 수 있는 질환 또는 장애는 신경변성 질환, 예컨대 알츠하이머병, 파킨슨병 또는 전두측두엽 치매이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료 또는 지연될 수 있는 질환 또는 장애는 알츠하이머병이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료 또는 지연될 수 있는 질환 또는 장애는 파킨슨병이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료 또는 지연될 수 있는 질환 또는 장애는 전두측두엽 치매이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료 또는 지연될 수 있는 질환 또는 장애는 ALS이다. 임의의 상기 실시양태에서, 개체는 질환 또는 장애의 위험이 있다. 하기 기재된 바와 같이, 본 개시내용의 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 적합한 용량으로 환자를 치료하는 방법, 및/또는 환자 순응을 장려하는 방식으로 해당 용량을 투여하는 방법을 식별하기 위한 관련 기술분야의 요구를 충족시킨다.

신경변성 질환, 예컨대 알츠하이머병, 파킨슨병, ALS 및 전두측두엽 치매를 갖는 환자는 전형적으로 이러한 질환에 장기간 동안 영향을 받으며, 그러므로 수년에 걸쳐 정기적인 치료를 필요로 한다. 집에서 치료제의 정맥내 투여가 수행될 수 없기 때문에, 환자는 주입 센터로 이송되어야 하며, 이는 환자 및 간병인 둘 모두에게 부담이 될 수 있다. 또한, 이들 질환과 연관될 수 있는 기억 상실, 감정 기복, 공격성 및 다른 행동 증상은 환자 순응을 어렵게 만들 수 있다. 그러므로, 신경변성 질환, 예컨대 알츠하이머병, 파킨슨병, ALS 및 전두측두엽 치매를 갖는 환자를 위한 치료의 드문 정맥내 투여는 이러한 질환을 앓고 있는 환자에게 유리하다. 또한, 피하 투여, 예를 들어 피하 주사에 의한 피하 투여는 예를 들어 간병인에 의해 또는 환자 자신에 의해 집에서 수행될 수 있기 때문에 신경변성 질환, 예컨대 알츠하이머병, 파킨슨병, ALS 및 전두측두엽 치매를 갖는 환자를 위한 치료의 편리한 투여 방식이다.

유리하게는, 인간에게 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 단일 용량의 정맥내 투여는 약력학적 (PD) 효과, 예를 들어 혈장 및 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하며, 이는 연장된 기간 (예를 들어, 항-소르틸린 항체의 단일 용량 후 최대 약 57일 또는 그 초과)에 걸쳐 지속된다. 예를 들어 실시예 1-2를 참조한다.

또한, 유리하게는, 시노몰구스 원숭이에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 다중 용량의 투여는 혈청 및 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가와 함께 백혈구 내 소르틸린 발현의 감소를 초래하며, 이는 항-소르틸린 항체의 마지막 용량 후 몇 주 (예를 들어, 최대 약 6주 또는 그 초과) 동안 지속되며, 이는 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 오래 지속되는 약력학적 효과를 나타낸다 (예를 들어, 실시예 4 참조).

그러므로, 본원에 제공된 방법은 정맥내 주입 (예를 들어, 실시예 1-3 참조)에 의한 또는 피하 투여 (예를 들어, 실시예 1 참조)에 의한 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 상대적 드문 투여를 허용하며, 이는 신경변성 질환, 예컨대 알츠하이머병, 파킨슨병, ALS 및 전두측두엽 치매를 갖는 환자에게 특히 유익하다.

따라서, 일부 실시양태에서, 본 개시내용은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 적어도 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 투여함으로써 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 및/또는 지연시키는 방법에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 항체의 투여는 정맥내 주입에 의한 또는 피하 주사에 의한 것이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 또는 덜 빈번하게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 알츠하이머병이다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 파킨슨병이다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 ALS이다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 전두측두엽 치매이다.

치료 용도

본 개시내용은 개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 및/또는 지연시키는 방법으로서, 항-소르틸린 항체를 개체에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 본원에 개시된 바와 같이, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 전두측두엽 치매, 진행성 핵상 마비, 알츠하이머병, 혈관성 치매, 발작, 망막 이영양증, 근위축성 측삭 경화증, 외상성 뇌 손상, 척수 손상, 치매, 뇌졸중, 파킨슨병, 급성 파종성 뇌척수염, 망막 변성, 연령 관련 황반 변성, 녹내장, 다발성 경화증, 패혈성 쇼크, 박테리아 감염, 관절염 또는 골관절염의 진행을 치료 및/또는 지연시키기 위해 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 전두측두엽 치매이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 알츠하이머병이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 파킨슨병이다.

파킨슨병

특발성 또는 원발성 파킨슨증, 저운동성 경직 증후군 (HRS) 또는 진전 마비로 지칭될 수 있는 파킨슨병은 운동 시스템 제어에 영향을 미치는 신경변성 뇌 장애이다. 뇌에서 도파민-생산 세포의 점진적인 사멸은 파킨슨병의 주요 증상을 유발한다. 가장 종종, 파킨슨병은 50세 이상의 사람들에게서 진단된다. 파킨슨병의 증상은 떨림 (예를 들어, 손, 팔, 다리, 턱 및 얼굴), 사지 및 몸통의 근육 경직, 운동 느림 (운동완서), 자세 불안정, 보행 곤란, 신경정신과적 문제, 언어 또는 행동의 변화, 우울증, 불안, 통증, 정신병, 치매, 환각 및 수면 문제를 제한 없이 포함한다.

파킨슨병은 대부분의 사람들에서 특발성 (공지된 원인 없음)이다. 파킨슨병의 대부분의 경우는 가족 중에 명백한 장애 병력이 없는 사람들에서 발생하고, 환경적 인자 및 유전적 인자 간의 복잡한 상호작용으로 인해 발생하는 것으로 생각된다. 파킨슨병의 이러한 경우는 "산발성" 파킨슨병으로 지칭된다.

또한, 파킨슨병 환자의 약 15%는 파킨슨병의 공지된 가족력을 가지며, 특정 가족 사례는 PARK2, LRRK2, PARK7, PINK1, PRKN 또는 SNCA와 같은 유전자에서의 돌연변이와 연관되어 있다.

GBA1 및/또는 UCHL1 유전자에서의 돌연변이는 또한 파킨슨병과 연관되어 있으며 질환을 발병할 위험을 변형하는 것으로 생각된다. 예를 들어, 파킨슨병 환자의 약 5%는 리소좀 효소 베타-글루코세레브로시다제 (GBA)를 코딩하는 GBA1 유전자에서의 돌연변이를 운반한다. 이형접합성 또는 동형접합성 GBA1 돌연변이가 파킨슨병의 위험을 약 20배 내지 약 30배만큼 증가시키는 것으로 밝혀졌다. 또한, 파킨슨병에서의 GBA1 돌연변이는 더 이른 발병 연령 및 더 빠른 인지 및 운동 감퇴와 연관되어 있다. 예를 들어 문헌 [Stoker et al., Pathological Mechanisms and Clinical Aspects of GBA1 Mutation-Associated Parkinson's Disease, Parkinson's Disease: Pathogenesis and Clinical Aspects, Codon Publications; 2018, Chapter 3]; medlineplus[dot]gov/genetics/condition/parkinson-disease/#resources; 및 www[dot]ninds[dot]nih[dot]gov/Disorders/All-Disorders/Parkinsons-Disease-Challenges-Progress-and-Promise을 참조한다.

GRN 유전자에 의해 코딩되는 프로그래뉼린 (PGRN)은 또한 파킨슨병과 연관되어 있다. GRN 파킨슨병 위험 대립유전자는 혈장, 뇌척수액 및 뇌 내 감소된 프로그래뉼린 수준과 연관되어 있는 반면, 프로그래뉼린의 동형접합성 기능 상실은 뉴런 세로이드 리포푸신증을 야기하고, 프로그래뉼린의 이형접합성 기능 상실은 전두측두엽 치매 (FTD)를 야기하며, 때때로 파킨슨증 증세를 동반한다 (문헌 [Smith et al., Am J Hum Genet (2012) 90(6):1102-1107]; [Boeve et al., Brain (2006) 129(Pt 11):3103-3114]; 및 [Wauters et al., Neurobiol Aging (2018) 67:84-94]). 또한, 감소된 혈장 프로그래뉼린 수준은 파킨슨병의 증가된 중증도와 연관되어 있다 (Yao et al., Neurosci Lett (2020) 725:134873). 프로그래뉼린 결핍은 또한 설치류 파킨슨병 모델에서 결과를 악화시키는 반면 (Martens et al., J Clin Invest (2012) 122(11):3955-3959), 프로그래뉼린 유전자의 전달은 이러한 결과를 개선한다 (Van Kampen et al., PLoS One (2014) 7;9(5):e97032).

프로그래뉼린은 그래뉼린에 대한 ∼88-kDa 전구체 단백질이다. 이것은 독특한 "비드 온 어 스트링(beads-on-a-string)" 구조를 형성하는 고도로 보존된 다기능적 분비 당단백질이다. 이의 활성은 중추 신경계 (CNS) 신경염증의 조절, 흥분독성, 산화 스트레스, 시냅스생성, 염증 및 아밀로이드 생산을 제어함으로써 세포 신호전달 경로에 영향을 미침 (Hsiung et al., GeneReviews. University of Washington, Seattle), 자가분비 뉴런 성장 인자로서 작용함, 뇌에서 신경돌기 성장의 촉진 (Gass et al., Mol Neurodegener (2012) 10(7):33), 및 운동 및 피질 뉴런의 생존의 촉진 및 향상 (De Muynck et al., Neurobiol Aging (2013) 34(11):2541-2547)을 포함한다.

최근 게놈-와이드 연관 연구 (GWAS)는 파킨슨병 위험의 유전적 결정인자가 리소좀 유전자, 예컨대 GBA, GPNMB, GALC, CTSB 및 GRN에 대해 풍부하다는 것을 밝혀내었다 (Nalls et al., Lancet Neurol (2019) 18(2):1091-1102). 또한, 수용체-매개 흡수 후, 프로그래뉼린은 리소좀으로 수송되고, 인간에서 이의 완전한 부재는 조기 발병 리소좀 저장 장애를 야기하는 것으로 공지되어 있다 (Paushter et al., Acta Neuropathol (2018) 136(1):1-17). 이들 관찰은 프로그래뉼린이 리소좀 기능에 역할을 한다는 것을 시사한다. 새로운 증거는 또한 프로그래뉼린이 리소좀 효소, 예컨대 카텝신 D 및 글루코세레브로시다제 (GCase)와 상호작용한다는 것을 시사한다. 또한, 프로그래뉼린은 이의 결합 파트너인 프로사포신 (PSAP)과 함께 이들 효소의 활성을 조절하는 것으로 생각된다 (문헌 [Arrant et al., Acta Neuropathologica Comm (2019) 7(1):218]; [Valdez et al., Hum Mol Genet (2020) 29(5):716-726]; [Zhou et al., PLoS One (2019) 14(7):e0212382]; [Valdez et al., Hum Mol Genet (2017) 26(24):4861-4872]; [Zhou et al., J Cell Biol (2015) 210(6):991-1002]; 및 [Zhou et al., Mol Neurodegener (2017) 23;12(1):62]).

따라서, 예를 들어 파킨슨병을 갖거나 가질 위험이 있는 개체의 뇌척수액 및/또는 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 증가시키는 것은 예를 들어 GCase 활성의 증가, 염증의 감소 및/또는 리소좀 기능의 개선에 의해 파킨슨병의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서 파킨슨병의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 파킨슨병을 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서, 예를 들어 혈장 및/또는 뇌척수액에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키고/거나; 소르틸린 수준을 감소시키고/거나; 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제하고/거나; 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제하여, 이에 의해 파킨슨병의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료되는 질환 또는 장애는 파킨슨병, 예컨대 산발성 파킨슨병 또는 GBA1 유전자 또는 GBA1 유전자 산물에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이를 갖는 개체에서의 파킨슨병이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료되는 파킨슨병은 산발성 파킨슨병이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료되는 파킨슨병은 GBA1 유전자 또는 GBA1 유전자 산물에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이를 갖는 개체에서의 파킨슨병이다. 일부 실시양태에서, 개체는 GBA1 유전자 또는 GBA1 유전자 산물에서의 하나 이상의 돌연변이에 대해 동형접합성 또는 이형접합성이다. GBA1 유전자 또는 GBA1 유전자 산물에서의 병원성 돌연변이는 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Avenali et al., Front Aging Neurosci, 2020]; [O'Reagan et al., J. Parkinsons Dis, 7:411-422 (2017)]; [Zhang et al., Front. Mol. Neurosci, 11:43 (2018)]; 및 [Zhang et al., Parkisons Dis, 3136415 (2018)]을 참조한다. GBA1 유전자 또는 GBA1 유전자 산물에서의 예시적인 병원성 돌연변이는 N370S (c.1226A > G), L444P (c.1448T > C), R120W, IVS2 + 1G > A, H255Q, D409H, RecNciI, E326K, T369M, R496H 및 84insGG를 제한 없이 포함한다. GBA1 유전자 또는 GBA1 유전자 산물에서의 돌연변이의 존재는 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예컨대 서열분석, 폴리머라제 연쇄 반응, 혼성화 방법, 예컨대 형광 제자리 혼성화, 질량 분광법 및 이뮤노블롯팅을 사용하여 평가될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료되는 개체는 호엔 및 야르 기준에 기초하여, 예를 들어 문헌 [Hoehn and Yahr, Neurology (1967) 17:427-42] 및 [Goetz et al., Mov Disord (2004) 19:1020-8]에 기재된 바와 같이 병기 I 내지 병기 III으로 분류되는 파킨슨병을 갖는다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료되는 개체는 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 투여 전 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료, 예컨대 글루타메이트 길항제, 항콜린제, 도파민 효능제, 레보도파 (L-DOPA 및 데카르복실라제 [DDC] 억제제), 모노아민 옥시다제 B (MAO-B) 억제제, 카테콜-O-메틸트랜스퍼라제 (COMT) 억제제, 베타 차단제, 선택적 세로토닌 흡수 억제제 (SSRI), 삼환계 항우울제 (TCA) 또는 인도메타신을 취하는 중이다. 일부 실시양태에서, 개체는 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 사용한 치료의 시작 후 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료를 계속 취한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료, 예컨대 글루타메이트 길항제, 항콜린제, 도파민 효능제, 레보도파 (L-DOPA 및 데카르복실라제 [DDC] 억제제), 모노아민 옥시다제 B (MAO-B) 억제제, 카테콜-O-메틸트랜스퍼라제 (COMT) 억제제, 베타 차단제, 선택적 세로토닌 흡수 억제제 (SSRI), 삼환계 항우울제 (TCA) 및 인도메타신과 조합하여 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것을 포함한다.

파킨슨병의 치료 또는 지연은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 평가될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료된 개체에서의 파킨슨병의 치료 또는 지연은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후의 개체의 인지 기능에 기초하여 평가된다. 인지 기능은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예컨대 몬트리올 인지 평가 (MoCA)를 사용하여 평가될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Nareddine et al., J American Geriatrics Soc (2005) 53(4):695-9]을 참조한다. 일부 실시양태에서, 파킨슨병의 치료 또는 지연은 파킨슨병에 대한 하나 이상의 임상적 평가에 기초하여 평가된다. 본원에 제공된 방법에 따라 치료된 개체에서 파킨슨병의 치료 또는 지연을 평가하기 위해 사용될 수 있는 파킨슨병에 대한 임상적 평가의 예는 통합 파킨슨병 평가 척도 (UPDRS) 파트 III의 운동 장애 학회 (MDS)-후원 개정판 (MDS-UPDRS 파트 III), 또는 UPDRS 총 척도를 제한 없이 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Goetz et al., (2008) Movement Disorders 23(15):2129-2170]을 참조한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료된 개체에서의 파킨슨병의 치료 또는 지연은 파킨슨병의 하나 이상의 바이오마커, 예컨대 프로그래뉼린, GCase 단백질 또는 활성, 및/또는 알파-시누클레인 단백질의 수준에 기초하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 파킨슨병의 하나 이상의 바이오마커의 수준은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 평가된다. 개체로부터 수득된 샘플에서 하나 이상의 바이오마커의 수준을 측정하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA)을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료된 개체에서의 파킨슨병의 치료 또는 지연은 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커의 수준에 기초하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커의 수준은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 평가된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커는 GCase 단백질, GCase 활성, 글루코실스핑고신 (lyso-Gb1) 및/또는 글루코실세라미드이다. 개체로부터 수득된 샘플에서 하나 이상의 바이오마커의 수준을 측정하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA)을 포함한다. 일부 실시양태에서, lyso-Gb1 또는 글루코실세라미드의 수준은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예컨대 질량 분광법, 예를 들어 고압 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분광법을 사용하여 측정될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 사용한 치료는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%의 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 사용한 치료는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275%, 적어도 약 300% 또는 그 초과의 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 사용한 치료는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 GCase 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%의 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 GCase 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 사용한 치료는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 GCase 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275%, 적어도 약 300% 또는 그 초과의 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 GCase 단백질 수준의 증가를 초래한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 사용한 치료는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 GCase 활성 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%의 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 GCase 활성 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 사용한 치료는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 GCase 활성 수준과 비교하여 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275%, 적어도 약 300% 또는 그 초과의 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 GCase 활성 수준의 증가를 초래한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 사용한 치료는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 알파-시누클레인 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 약 100%의 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 알파-시누클레인 단백질 수준의 감소를 초래한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 사용한 치료는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 lyso-Gb1 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 약 100%의 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 글루코실스핑고신 (lyso-Gb1) 수준의 감소를 초래한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 사용한 치료는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 글루코실세라미드 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 약 100%의 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 글루코실세라미드 수준의 감소를 초래한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료된 개체에서의 파킨슨병의 치료 또는 지연은 뇌척수액 프로테옴 내 하나 이상의 단백질의 수준에 기초하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 뇌척수액 프로테옴 내 하나 이상의 단백질의 수준은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 뇌척수액의 샘플에서 평가된다. 개체로부터 수득된 샘플에서 뇌척수액 프로테옴 내 하나 이상의 단백질의 수준을 측정하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 질량 분광법 및 웨스턴 블롯을 포함한다.

전두측두엽 치매

전두측두엽 치매 (FTD)는 뇌의 전두엽의 점진적 악화로부터 기인하는 병태이다. 시간이 지남에 따라, 변성은 측두엽으로 진행될 수 있다. 유병률에서 알츠하이머병 (AD)에 이어 두 번째로, FTD는 초로기 치매 사례의 20%를 차지한다. FTD의 임상적 특색은 기억력 결핍, 행동 이상, 성격 변화 및 언어 장애를 포함한다 (Cruts, M. & Van Broeckhoven, C., Trends Genet. 24:186-194 (2008); Neary, D., et al., Neurology 51:1546-1554 (1998); Ratnavalli, E., Brayne, C., Dawson, K. & Hodges, J. R., Neurology 58:1615-1621 (2002)).

FTD 사례의 상당 부분은 상염색체 우성 방식으로 유전되지만, 한 가족에서도 증상은 행동 장애가 있는 FTD로부터 원발성 진행성 실어증, 코르티코-기저 신경절 변성에 이르기까지 스펙트럼에 걸쳐 있을 수 있다. 대부분의 신경변성 질환과 마찬가지로 FTD는 병든 뇌에 특정 단백질 응집체의 병리학적 존재를 특징으로 할 수 있다. 역사적으로, FTD의 첫 번째 설명은 신경원섬유 매듭 또는 피크체에서 과다인산화된 Tau 단백질의 뉴런내 축적의 존재를 인식하였다. 미세소관 연관 단백질 Tau에 대한 인과적 역할은 여러 패밀리에서 Tau 단백질을 코딩하는 유전자에서의 돌연변이의 식별에 의해 뒷받침되었다 (Hutton, M., et al., Nature 393:702-705 (1998)). 그러나, 대부분의 FTD 뇌는 과다인산화된 Tau의 축적을 나타내지 않지만, 유비퀴틴 (Ub) 및 TAR DNA 결합 단백질 (TDP43)에 대한 면역반응성을 나타낸다 (Neumann, M., et al., Arch. Neurol. 64:1388-1394 (2007)). Ub 봉입체 (FTD-U)를 갖는 FTD 사례의 대부분은 프로그래뉼린 유전자에서의 돌연변이를 보유하는 것으로 나타났다.

프로그래뉼린 돌연변이는 반수체기능부전을 초래하고, 가족성 FTD 사례의 거의 50%에 존재하는 것으로 공지되어 있어, 프로그래뉼린 돌연변이를 FTD에 대한 주요 유전적 기여자로 만든다. 이론에 얽매이는 것을 원하지 않지만, 프로그래뉼린 돌연변이의 기능 상실 이형접합성 특징은 건강한 개체에서 프로그래뉼린 발현이 건강한 개체를 FTD의 발병으로부터 보호하는데 용량 의존적으로 중요한 역할을 한다는 것을 나타내는 것으로 여겨진다. 따라서, 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제함으로써 프로그래뉼린 수준을 증가시키는 것은 FTD의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서 FTD의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, FTD를 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서, 예를 들어 혈장 및/또는 뇌척수액에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키고/거나; 소르틸린 수준을 감소시키고/거나; 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제하고/거나; 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제하여, 이에 의해 FTD의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 신경인지 및/또는 기능 테스트 또는 평가 (즉, 임상 결과 평가)에서 기준선으로부터의 변화에 의해 결정될 수 있다. FTD 진행의 치료 및/또는 지연을 평가하기 위해 사용될 수 있는 신경인지 및 기능 테스트의 비제한적 예는 전두측두엽 치매 임상적 평가 척도 (FCRS), 전두측두엽 치매 평가 척도 (FRS), 임상적 전반적 인상-개선 (CGI-I) 평가, 신경정신과적 검사 (NPI) 평가, 색 선로 테스트 (CTT) 파트 2, 신경심리학적 상태 평가를 위한 반복가능한 배터리 (RBANS), 델리스-카플란 실행 기능 시스템 색상-단어 간섭 테스트, 대인관계 반응 지수, 윈터라이트 랩(Winterlight Lab) 언어 평가 (WLA), 및 써머라이트 랩(Summerlight Lab) 언어 평가 (SLA)를 포함한다. 일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 하나의 신경인지 및/또는 기능 테스트 또는 평가에서 기준선으로부터의 변화에 의해 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 하나 초과의 신경인지 및/또는 기능 테스트 또는 평가 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9개 또는 그 초과의 신경인지 및/또는 기능 테스트 또는 평가)에서 기준선으로부터의 변화에 의해 결정될 수 있다.

일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 전반적 및/또는 국부적 뇌 부피, 백질 고강도의 부피, 뇌 관류, 분획 이방성, 평균 확산성, 축 확산성, 및 방사형 확산성 및/또는 기능적 뇌 활성에서 기준선으로부터의 변화에 의해 결정된다. 특정 실시양태에서, 뇌 관류는 동맥 스핀 라벨링 MRI에 의해 측정된다. 특정 실시양태에서, 방사형 확산성은 확산 텐서 영상화에 의해 측정된다. 특정 실시양태에서, 기능적 뇌 활성은 기능적 MRI에 의해 측정된다.

일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 전혈, 혈장 및 CSF에서 신경변성의 마커의 기준선으로부터의 변화에 의해 결정된다. 신경변성의 마커는 신경필라멘트 경쇄 (Nfl), Tau 및/또는 pTau를 제한 없이 포함할 수 있다. 신경필라멘트 경쇄는 퀀테릭스(Quanterix) 및/또는 로슈 디아그노스틱스(Roche Diagnostics)로부터의 검정을 제한 없이 포함하는 방법에 의해 측정될 수 있다. 일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 리소좀 기능의 마커의 기준선으로부터의 변화에 의해 결정된다. 리소좀 기능의 마커는 제한 없이 카텝신, 예컨대 카텝신 B (CTSB), NAGK (N-아세틸-D-글루코사민 키나제), GCase 단백질, GCase 활성, 글루코실스핑고신 (lyso-Gb1) 및/또는 글루코실세라미드일 수 있다. 일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 염증 마커, 예컨대 오스테오폰틴 (SPP1), YWHAE (14-3-3 단백질 엡실론), 동종이식 염증 인자 1 (AIF1), 콜로니 자극 인자 1 (CSF1), 키티나제 1 (CHIT1), 림프구 항원 86 (LY86) 및 CD86의 수준의 기준선으로부터의 변화에 의해 결정된다. 리소좀 기능의 특정 바이오마커는 PGRN이 결핍될 때 과발현될 수 있다. 예를 들어, 카텝신 D (CTSD) 및 Lamp1은 PGRN-결핍 마우스 (GRN 녹아웃 마우스)에서 과발현된다. 문헌 [Huang et al. (2020) Acta Neuropath Comm 8:163]; [Goetzl et al., (2014) Acta Neuropathol 127(6):845-60]; 및 [Lui et al., (2016) Cell 165:921-935]을 참조한다. 따라서, PGRN 기능의 복구는 PGRN이 결핍될 때 증가되는 리소좀 기능의 바이오마커의 발현을 감소시킬 수 있다. 보체 기능의 특정 바이오마커는 PGRN이 결핍될 때 과발현을 나타낸다. 예를 들어, C1qb 및 C1qc (보체 단백질 C1q를 구성하는 서브유닛)는 PGRN-결핍 (GRN 녹아웃) 마우스에서 증가된 수준을 나타낸다. 문헌 [Huang et al. (2020) Acta Neuropath Comm 8:163]; [Goetzl et al., (2014) Acta Neuropathol 127(6):845-60]; 및 [Lui et al., (2016) Cell 165:921-935]을 참조한다. 따라서, PGRN 기능의 복구는 PGRN이 결핍될 때 증가되는 보체 기능의 바이오마커의 발현을 감소시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 미세아교세포 활성의 마커의 기준선으로부터의 변화에 의해 결정된다. 미세아교세포 활성의 마커는 제한 없이 YKL-40 및/또는 인터류킨-6일 수 있다. 일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 말초 세포에서 메신저 리보핵산 (mRNA) 발현의 기준선으로부터의 변화에 의해 결정된다. 일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 FTD 질환 생물학 및/또는 항-소르틸린 항체에 대한 반응과 관련된 분석물의 기준선으로부터의 변화에 의해 결정된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 단백질, 예컨대 상기 기재된 임의의 마커의 수준은 개체로부터 수득된 샘플, 예컨대 전혈, 혈장 및/또는 CSF의 샘플에서 측정될 수 있다. 개체로부터 수득된 샘플에서 하나 이상의 단백질의 수준을 측정하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA)을 포함한다.

일부 실시양태에서, FTD 진행의 치료 및/또는 지연은 신경염증 및/또는 미세아교세포 활성화의 기준선으로부터의 변화에 의해 결정된다. 신경염증 및/또는 미세아교세포 활성화는 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법에 의해 측정될 수 있다. 특정 실시양태에서, 신경염증 및/또는 미세아교세포 활성화는 전이체 단백질-양전자 방출 (TSPO-PET) 영상화를 사용하여 측정될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료되는 개체는 GRN (그래뉼린 유전자)에서의 돌연변이에 대해 이형접합성이다. 일부 실시양태에서, GRN에서의 돌연변이는 기능 상실 돌연변이이다. 일부 실시양태에서, 개체는 C9orf72 헥사뉴클레오티드 반복 확장에 대해 이형접합성이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료되는 개체는 FTD 증상을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따라 치료되는 개체는 FTD 증상을 나타내지 않는다. 일부 이러한 실시양태에서, 개체는 전증상이다. 일부 이러한 경우에, 개체는 GRN 유전자에서의 돌연변이에 대해 이형접합성이거나 감소된 PGRN 수준 또는 기능을 갖는 것으로 식별되었지만 FTD 증상을 나타내지 않는다. 일부 이러한 경우에, 대상체는 FTD-GRN, 또는 GRN 유전자에서의 돌연변이에 의해 야기되는 FTD를 갖는다. 전증상 개체의 일부 실시양태에서, 개체는 정상 수준에 비해 하나 이상의 바이오마커의 상승된 수준, 예컨대 Nfl, SPP1, YWHAE, AIF1, CSF1, CHIT1 또는 LY86의 상승된 수준을 나타낼 수 있고/거나, 정상 수준에 비해 하나 이상의 바이오마커의 감소된 수준, 예컨대 NAGK 또는 CTSB의 감소된 수준을 나타낼 수 있다.

알츠하이머병

알츠하이머병 (AD)은 치매의 가장 흔한 형태이다. 상기 질환에 대한 치유법은 없으며, 진행됨에 따라 악화되고 결국 사망에 이른다. 가장 종종, AD는 65세 이상의 사람들에서 진단된다. 그러나, 덜 유행하는 조기-발병 알츠하이머병은 훨씬 더 일찍 발생할 수 있다.

알츠하이머병의 흔한 증상은 행동 증상, 예컨대 최근 사건을 기억하는데 어려움이 있음, 인지 증상, 혼란, 과민성 및 공격성, 감정 기복, 언어 문제, 및 장기간 기억 상실을 포함한다. 상기 질환이 진행됨에 따라, 신체 기능이 상실되어 궁극적으로 사망에 이르게 된다. 알츠하이머병은 완전히 드러나기 전까지 공지되지 않은 가변적인 양의 시간 동안 발생하며 수년 동안 진단되지 않은 상태로 진행될 수 있다.

소르틸린은 아밀로이드 전구체 단백질 (APP) 및 APP 프로세싱 효소 BACE1에 결합하는 것으로 제시된 바 있다. 이론에 얽매이는 것을 원하지 않지만, 이들 상호작용이 알츠하이머병에 관여한다고 여겨진다. 따라서, 및 이론에 얽매이는 것을 원하지 않지만, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 이러한 상호작용을 억제하고 이를 필요로 하는 개체에서 알츠하이머병을 예방, 이의 위험을 감소 또는 치료하기 위해 이용될 수 있다고 여겨진다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서 알츠하이머병의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 알츠하이머병을 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서, 예를 들어 혈장 및/또는 뇌척수액에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키고/거나; 소르틸린 수준을 감소시키고/거나; 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제하고/거나; 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제하여, 이에 의해 알츠하이머병의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 및 이론에 얽매이는 것을 원하지 않지만, 소르틸린 및 본 개시내용의 뉴로트로핀 (예를 들어, 프로-뉴로트로핀, 프로-뉴로트로핀-3, 프로-뉴로트로핀-4/5, 프로-NGF, 프로-BDNF, 뉴로트로핀-3, 뉴로트로핀-4/5, NGF, BDNF 등), p75, 아밀로이드 전구체 단백질 (APP), 및/또는 A 베타 펩티드 사이의 상호작용을 억제하거나, 또는 소르틸린의 하나 이상의 활성을 억제하는 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 이를 필요로 하는 개체에서 알츠하이머병의 진행을 치료 및/또는 지연시키기 위해 이용될 수 있다고 여겨진다.

혈관성 치매

혈관성 치매 (VaD)는 뇌혈관 질환 (뇌 내의 혈관 질환)으로 인한 것으로 여겨지는 기억력 및 다른 인지 기능의 미묘한 진행성 악화이다. 뇌혈관 질환은 뇌 (대뇌)에 있는 혈관 (맥관구조)의 진행성 변화이다. 연령과 연관된 가장 흔한 혈관 변화는 혈관벽에 콜레스테롤 및 다른 물질의 축적이다. 이는 혈관벽의 비후화 및 경화, 뿐만 아니라 혈관의 협소화를 초래하고, 이는 영향을 받은 동맥에 의해 공급되는 뇌 영역으로의 혈류의 감소 또는 심지어 완전한 중단을 초래할 수 있다. 혈관성 치매 환자는 종종 알츠하이머병 (AD) 환자와 유사한 증상을 나타낸다. 그러나, 뇌의 관련 변화는 AD 병리로 인한 것이 아니라 뇌의 만성 혈류 감소로 인한 것이며, 결국 치매를 초래한다. VaD는 노인에서 가장 흔한 유형의 치매 중 하나로 간주된다. VaD의 증상은 기억력의 어려움, 조직화 및 복잡한 문제 해결의 어려움, 느린 사고, 산만 또는 "방심 상태", 기억에서 단어를 상기하는 어려움, 기분 또는 행동의 변화, 예컨대 우울증, 과민성 또는 무관심, 및 환각 또는 망상을 포함한다.

이론에 얽매이는 것을 원하지 않지만, 소르틸린의 하나 이상의 활성, 또는 소르틸린 및 프로그래뉼린, 본 개시내용의 뉴로트로핀 (예를 들어, 프로-뉴로트로핀, 프로-뉴로트로핀-3, 프로-뉴로트로핀-4/5, 프로-NGF, 프로-BDNF, 뉴로트로핀-3, 뉴로트로핀-4/5, NGF, BDNF 등), 뉴로텐신, 지질단백질 리파제, 아포지질단백질 AV, 및/또는 수용체-연관 단백질 사이의 하나 이상의 상호작용은 혈관성 치매에 관여한다고 여겨진다. 따라서, 및 이론에 얽매이는 것을 원하지 않지만, 소르틸린 및 본 개시내용의 뉴로트로핀 (예를 들어, 프로-뉴로트로핀, 프로-뉴로트로핀-3, 프로-뉴로트로핀-4/5, 프로-NGF, 프로-BDNF, 뉴로트로핀-3, 뉴로트로핀-4/5, NGF, BDNF 등), 뉴로텐신, p75, 소르틸린 프로펩티드 (Sort-pro), 아밀로이드 전구체 단백질 (APP), A 베타 펩티드, 지질단백질 리파제 (LpL), 아포지질단백질 AV (APOA5), 아포지질단백질 E (APOE), 및/또는 수용체 연관 단백질 (RAP) 사이의 상호작용을 억제하거나; 또는 소르틸린의 하나 이상의 활성을 억제하는 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 이를 필요로 하는 개체에서 혈관성 치매를 예방, 이의 위험을 감소 또는 치료하기 위해 이용될 수 있다고 여겨진다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서 혈관성 치매의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 혈관성 치매를 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서, 예를 들어 혈장 및/또는 뇌척수액에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키고/거나; 소르틸린 수준을 감소시키고/거나; 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제하고/거나; 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제하여, 이에 의해 혈관성 치매의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

치매

치매는 정상적인 노화로부터 예상될 수 있는 것 이상으로, 이전에 손상되지 않은 사람에서 전반적 인지 능력의 심각한 상실로 나타나는 비특이적 증후군 (즉, 일련의 징후 및 증상)이다. 치매는 예를 들어 독특한 전반적 뇌 손상의 결과로서 정적일 수 있다. 대안적으로, 치매는 진행성일 수 있으며, 이는 신체의 손상 또는 질환으로 인해 장기간 감퇴를 초래한다. 치매는 노인 집단에서 훨씬 더 흔하지만, 65세 이전에도 발생할 수 있다. 치매의 영향을 받는 인지 구역은 기억력, 주의 지속시간, 언어 및 문제 해결을 제한 없이 포함한다. 일반적으로, 개체가 치매로 진단되기 전에 적어도 6개월 동안 증상이 나타나야 한다. 치매의 예시적인 형태는 전두측두엽 치매, 알츠하이머병, 혈관성 치매, 문의성 치매, 및 루이소체가 있는 치매를 제한 없이 포함한다.

이론에 얽매이는 것을 원하지 않지만, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 치매의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다고 여겨진다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서 치매의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 치매를 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서, 예를 들어 혈장 및/또는 뇌척수액에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키고/거나; 소르틸린 수준을 감소시키고/거나; 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제하고/거나; 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제하여, 이에 의해 치매의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

발작, 망막 이영양증, 외상성 뇌 손상 및 척수 손상

본원에서 사용된 바와 같이, 망막 이영양증은 망막의 변성을 수반하는 임의의 질환 또는 병태를 지칭한다. 이러한 질환 또는 병태는 시력 상실 또는 완전한 실명을 유발할 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, 발작은 또한 간질성 발작을 포함하고, 뇌에서 비정상적 과잉 또는 동기 뉴런 활성의 일시적 증상을 지칭한다. 외향 효과는 거친 몸부림치는 움직임만큼 극적일 수 있거나, 짧은 의식 상실만큼 경증할 수 있다. 발작은 정신 상태의 변경, 긴장 또는 간대 운동, 경련, 및 다양한 다른 정신 증상으로 나타날 수 있다.

외상성 뇌 손상 (TBI)은 또한 두개내 손상으로 공지될 수 있다. 외상성 뇌 손상은 외부의 힘이 뇌에 외상적으로 손상을 입힐 때 발생한다. 외상성 뇌 손상은 중증도, 메커니즘 (폐쇄성 또는 관통성 두부 손상), 또는 다른 특색 (예를 들어, 특정 위치에서 또는 광범위한 구역에 걸쳐 발생)에 기초하여 분류될 수 있다.

척수 손상 (SCI)은 질환 대신에 외상에 의해 야기되는 척수에 대한 임의의 손상을 포함한다. 척수 및 신경근이 손상된 위치에 따라, 통증에서 마비, 실금에 이르기까지 증상이 광범위하게 다양할 수 있다. 척수 손상은 다양한 수준의 "불완전"으로 설명되며, 이는 환자에 대한 효과 없음에서 총 기능 상실을 의미하는 "완전한" 손상까지 다양할 수 있다.

프로-뉴로트로핀 (예를 들어, 프로- 뉴로트로핀-4/5, 뉴로트로핀-4/5, 프로-NGF, 프로-BDNF 등)은 발작, 망막 이영양증, 외상성 뇌 손상 및 척수 손상에서 역할을 하는 것으로 제시된 바 있다.

따라서, 및 이론에 얽매이는 것을 원하지 않지만, 소르틸린 및 본 개시내용의 뉴로트로핀 (예를 들어, 프로-뉴로트로핀, 프로-뉴로트로핀-3, 프로-뉴로트로핀-4/5, 프로-NGF, 프로-BDNF, 뉴로트로핀-3, 뉴로트로핀-4/5, NGF, BDNF 등) 사이의 상호작용을 억제하거나; 또는 소르틸린의 하나 이상의 활성을 억제하는 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 이를 필요로 하는 개체에서 발작, 망막 이영양증, 외상성 뇌 손상 및/또는 척수 손상을 예방, 이의 위험을 감소 또는 치료하기 위해 이용될 수 있다고 여겨진다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서 망막 이영양증, 외상성 뇌 손상 및/또는 척수 손상의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 망막 이영양증, 외상성 뇌 손상 및/또는 척수 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서, 예를 들어 혈장 및/또는 뇌척수액에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키고/거나; 소르틸린 수준을 감소시키고/거나; 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제하고/거나; 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제하여, 이에 의해 망막 이영양증, 외상성 뇌 손상 및/또는 척수 손상의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

바람직하지 않은 노화 증상

본원에서 사용된 바와 같이, 바람직하지 않은 노화 증상은 기억 상실, 행동 변화, 치매, 알츠하이머병, 망막 변성, 죽상경화성 혈관 질환, 청력 상실 및 세포 파괴를 제한 없이 포함한다.

일부 실시양태에서, 및 이론에 얽매이는 것을 원하지 않지만, 소르틸린 및 프로그래뉼린, 본 개시내용의 뉴로트로핀 (예를 들어, 프로-뉴로트로핀, 프로-뉴로트로핀-3, 프로-뉴로트로핀-4/5, 프로-NGF, 프로-BDNF, 뉴로트로핀-3, 뉴로트로핀-4/5, NGF, BDNF 등), 뉴로텐신, p75, 지질단백질 리파제 (LpL), 아포지질단백질 AV (APOA5), 및/또는 수용체 연관 단백질 (RAP) 사이의 상호작용을 억제하거나; 또는 소르틸린의 하나 이상의 활성을 억제하는 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 하나 이상의 바람직하지 않은 노화 증상을 예방, 이의 위험을 감소 또는 치료하기 위해 이용될 수 있다고 여겨진다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서 하나 이상의 바람직하지 않은 노화 증상의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 바람직하지 않은 노화 증상을 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서, 예를 들어 혈장 및/또는 뇌척수액에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키고/거나; 소르틸린 수준을 감소시키고/거나; 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제하고/거나; 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제하여, 이에 의해 하나 이상의 바람직하지 않은 노화 증상의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

근위축성 측삭 경화증 (ALS)

본원에서 사용된 바와 같이, 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 운동 뉴런 질환 또는 루게릭병은 상호교환적으로 사용되며, 빠르게 진행되는 쇠약, 근육 위축 및 속상수축, 근육 긴장, 말하기 어려움 (구음장애), 삼키기 어려움 (연하곤란) 및 호흡하기 어려움 (호흡곤란)을 특징으로 하는 다양한 병인을 갖는 쇠약화 질환을 지칭한다.

GRN 유전자에서의 이형접합성 기능 상실 돌연변이로 인한 프로그래뉼린 반수체기능부전은 CSF 프로그래뉼린 수준의 감소를 초래하고, TDP-43 병리를 갖는 전두측두엽 치매 (FTD)의 발병 원인이 된다 (Sleegers et al., (2009) Ann Neurol 65:603; Smith et al., (2012) Am J Hum Genet 90:1102). TDP-43은 또한 ALS의 주요 병리학적 단백질로서 식별되었으며, 이는 ALS 및 FTD 사이의 유사성을 시사한다.

예를 들어, TDP-43에서의 20개 이상의 우성 돌연변이가 산발성 및 가족성 ALS 환자에서 식별되었으며 (Lagier-Tourenne et al., (2009) Cell 136:1001), TDP-43 양성 응집체는 ALS 사례의 대략 95%에서 발견된다 (Prasad et al., (2019) Front Mol Neurosci 12:25). 또한, ALS 위험 유전자, 예컨대 MOBP, C9ORF72, MOBKL2B, NSF 및 FUS는 또한 FTD를 야기할 수 있다 (Karch et al., (2018) JAMA Neurol 75:860). 또한, 프로그래뉼린 및 C9ORF72 돌연변이 둘 모두는 비정상적인 미세아교세포 활성화와 연관되며, 이는 FTD 및 ALS의 또 다른 흔한 병리인 것으로 보인다 (Haukedal et al., (2019) J Mol Biol 431:1818). 다른 증거는 또한 ALS 및 FTD가 중첩되는 유전적, 신경병리학적 및 임상적 특색과 밀접하게 관련된 병태임을 시사한다 (Weishaupt et al., (2016) Trends Mol Med 22:769; McCauley et al., (2018) Acta Neuropathol 137:715). 종합하면, 이들 결과는 질환 둘 모두가 공유된 치료로부터 이익을 얻을 수 있고 프로그래뉼린 유전적 가변성이 ALS 과정의 개질제로서 작용한다는 것을 시사한다.

더욱이, 프로그래뉼린의 손실이 급성 및 만성 신경변성의 다중 모델에서 해롭다는 입증과는 별도로 (Boddaert et al., (2018) Methods Mol Biol 1806:233), 프로그래뉼린의 과발현은 ALS의 많은 동물 모델에서 보호적인 것으로 밝혀졌다 (Laird et al., (2010) PLoS One 5:e13368; Tauffenberger et al., (2013) Hum Mol Genet 22:782; Beel et al., (2018) Mol Neurodegener 13:55; Chang et al., (2017) J Exp Med 214:2611). 또한, GRN의 일반적인 변이체는 ALS 환자에서 발병 시 연령 감소 및 발병 후 더 짧은 생존과 유의하게 연관되어 있다 (Sleegers et al., (2008) Neurology 71:253).

요약하면, 인간 유전학 및 질환 모델로부터의 데이터 둘 모두는 TDP-43 병리와 연관된 ALS 사례에서 병리를 감소시키는데 있어서 프로그래뉼린에 대한 보호적 기능을 지원한다.

일부 실시양태에서, 및 이론에 얽매이는 것을 원하지 않지만, 소르틸린 및 프로그래뉼린, 본 개시내용의 뉴로트로핀 (예를 들어, 프로-뉴로트로핀, 프로-뉴로트로핀-3, 프로-뉴로트로핀-4/5, 프로-NGF, 프로-BDNF, 뉴로트로핀-3, 뉴로트로핀-4/5, NGF, BDNF 등), 뉴로텐신, p75, 지질단백질 리파제 (LpL), 아포지질단백질 AV (APOA5), 및/또는 수용체 연관 단백질 (RAP) 사이의 상호작용을 억제하거나; 또는 소르틸린의 하나 이상의 활성을 억제하는 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 하나 이상의 바람직하지 않은 ALS 증상을 예방 또는 치료하기 위해 이용될 수 있다고 여겨진다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서 ALS의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, ALS를 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서, 예를 들어 혈장 및/또는 뇌척수액에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키고/거나; 소르틸린 수준을 감소시키고/거나; 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제하고/거나; 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제하여, 이에 의해 ALS의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, 개체는 C9orf72 헥사뉴클레오티드 반복 확장에 대해 이형접합성이다.

일부 실시양태에서, ALS 진행의 치료 및/또는 지연은 뇌 위축, 뇌 연결성, 뇌 유리수 및/또는 뇌 염증의 기준선으로부터의 변화에 의해 결정된다. MRI를 제한 없이 포함하는 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법은 뇌 위축, 뇌 연결성, 뇌 유리수 및/또는 뇌 염증을 측정하는데 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 뇌 위축은 구조적 MRI를 사용하여 측정된다. 특정 실시양태에서, 뇌 유리수 및/또는 뇌 염증은 확산 텐서 영상화 (DTI)를 사용하여 측정된다.

일부 실시양태에서, ALS 진행의 치료 및/또는 지연은 프로그래뉼린, 신경변성의 마커, 아교세포 활성화의 마커 및/또는 TDP-43 병리의 마커의 기준선으로부터의 변화에 의해 결정된다. 특정 실시양태에서, 프로그래뉼린은 아디포겐(Adipogen) 면역검정을 사용하여 측정된다. 특정 실시양태에서, 신경변성의 마커는 신경필라멘트 경쇄를 제한 없이 포함한다. 신경필라멘트 경쇄는 퀀테릭스 및/또는 로슈 디아그노스틱스로부터의 검정을 제한 없이 포함하는 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법에 의해 측정될 수 있다. 특정 실시양태에서, 아교세포 활성화의 마커는 YKL-40 (CHI3L), IL-6 및/또는 GFAP를 제한 없이 포함한다. GFAP는 로슈 디아그노스틱스로부터의 검정을 제한 없이 포함하는 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 측정될 수 있다.

다발성 경화증

다발성 경화증 (MS)은 또한 파종성 경화증 또는 파종성 뇌척수염으로 지칭될 수 있다. MS는 뇌 및 척수의 축색돌기 주변의 지방 미엘린초가 손상되어 탈수초화 및 흉터형성 뿐만 아니라 광범위한 징후 및 증상을 유발하는 염증성 질환이다. 예를 들어, www.ninds.nih.gov/Disorders/Patient-Caregiver-Education/Hope-Through-Research/Multiple-Sclerosis-Hope-Through-Research 참조.

MS의 증상은 감각의 변화, 예컨대 민감성 상실 또는 아린감; 따끔거림 또는 무감각, 예컨대 감각저하 및 감각이상; 근육 쇠약; 클로누스; 근육 경련; 이동의 어려움; 조정 및 균형의 어려움, 예컨대 운동실조; 언어 문제, 예컨대 구음장애 또는 삼키기 문제, 예컨대 연하곤란; 시각 문제, 예컨대 안구진탕, 시신경염 (섬광시 및 복시 포함); 피로; 급성 또는 만성 통증; 방광 및 장의 어려움; 다양한 정도의 인지 장애; 우울증 또는 불안정한 기분의 정서적 증상; 평소보다 높은 주변 온도에 대한 노출로 인한 현존 증상의 악화인 우토프(Uhthoff) 현상; 및 목을 구부릴 때 등으로 흐르는 전기 감각인 레미떼(Lhermitte) 징후를 제한 없이 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서 MS의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, MS를 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서, 예를 들어 혈장 및/또는 뇌척수액에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키고/거나; 소르틸린 수준을 감소시키고/거나; 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제하고/거나; 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제하여, 이에 의해 MS의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

녹내장 및 황반 변성

녹내장은 시력 상실 및 실명을 초래하는 손상된 시신경을 특징으로 하는 질환 그룹을 기술하지만 이에 제한되지 않는다. 녹내장은 일반적으로 각막 아래 전방의 증가된 체액 압력 (예를 들어, 안구내 압력)에 의해 야기된다. 녹내장은 시력에 중요한 망막 신경절 세포의 연속적인 손실을 초래한다. 연령-관련 황반 변성은 일반적으로 노인에게 영향을 미치며 주로 시야의 중심 영역인 황반에서 시력 상실을 야기한다. 황반 변성은 제한 없이, 드루젠, 색소 변화, 왜곡된 시력, 눈의 출혈, 위축, 감소된 시력, 흐린 시력, 중심 암점, 감소된 색각 및 감소된 대비 민감성을 야기한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서 녹내장 또는 황반 변성의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다. 일부 실시양태에서, 녹내장 또는 황반 변성을 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것은 개체에서, 예를 들어 혈장 및/또는 뇌척수액에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키고/거나; 소르틸린 수준을 감소시키고/거나; 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제하고/거나; 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제하여, 이에 의해 녹내장 또는 황반 변성의 진행을 치료 및/또는 지연시킬 수 있다.

투여 및 제약 투여량

본원에 제공된 항-소르틸린 항체 (및 임의의 추가 치료제)는 비경구, 폐내, 비강내, 병소내, 뇌척수내, 두개내, 척수내, 활액낭내, 척수강내, 경구, 국소 또는 흡입 경로를 포함하는 임의의 적합한 수단에 의해 투여될 수 있다. 비경구 투여는 근육내, 동맥내, 관절내, 복강내, 피하 또는 정맥내 투여를 포함한다. 정맥내 투여는 볼루스로서의 또는 일정 기간에 걸친 연속 주입에 의한 투여를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체의 투여는 정맥내 투여에 의한 것이다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체의 투여는 피하 주사에 의한 것이다. 다양한 시점에 걸친 단일 또는 다중 투여, 볼루스 투여 및 펄스 주입을 포함하나 이에 제한되지는 않는 다양한 투약 스케줄이 본원에서 고려된다.

본원에 제공된 항-소르틸린 항체는 양호한 의료 행위와 일치하는 방식으로 제형화, 투약 및 투여된다. 이 맥락에서 고려해야 할 인자는 치료될 특정한 질환 또는 장애, 치료될 특정한 포유동물, 개별 환자의 임상적 상태, 장애의 원인, 작용제의 전달 부위, 투여 방법, 투여 일정, 및 의료 종사자에게 공지된 기타 인자를 포함한다. 항체는 그럴 필요는 없지만 문제의 질환 또는 장애를 예방 또는 치료하기 위해 현재 사용되는 하나 이상의 작용제와 임의로 제형화된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 하나 이상의 추가 항-소르틸린 작용제, 예컨대 하나 이상의 항-소르틸린 항체와 조합하여 제형화 및/또는 투여된다. 이러한 다른 작용제의 유효량은 제형에 존재하는 항체의 양, 질환, 장애 또는 치료의 유형, 및 상기 논의된 기타 인자에 의존한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 특정한 항-소르틸린 항체에 대한 투여량은 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 투여를 제공받은 개체에서 경험적으로 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 개체는 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 증분 용량을 제공받는다. 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 효능을 평가하기 위해, 본 개시내용의 임의의 질환, 장애 또는 손상의 임상적 증상 (예를 들어, 전두측두엽 치매, 진행성 핵상 마비, 알츠하이머병, 혈관성 치매, 발작, 망막 이영양증, 근위축성 측삭 경화증, 외상성 뇌 손상, 척수 손상, 치매, 뇌졸중, 파킨슨병, 변연계-우세 연령-관련 TDP43 뇌병증 (LATE), 급성 파종성 뇌척수염, 망막 변성, 연령 관련 황반 변성, 녹내장, 다발성 경화증, 패혈성 쇼크, 박테리아 감염, 관절염 또는 골관절염)을 모니터링할 수 있다.

정맥내 투여

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 질환, 장애 또는 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 정맥내 주입에 의해 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 전두측두엽 치매, 진행성 핵상 마비, 알츠하이머병, 혈관성 치매, 발작, 망막 이영양증, 근위축성 측삭 경화증, 외상성 뇌 손상, 척수 손상, 치매, 뇌졸중, 파킨슨병, 급성 파종성 뇌척수염, 망막 변성, 연령 관련 황반 변성, 녹내장, 다발성 경화증, 패혈성 쇼크, 박테리아 감염, 관절염 또는 골관절염이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 알츠하이머병이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 전두측두엽 치매이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 파킨슨병이다.

일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 적어도 약 6 mg/kg의 용량으로 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 6 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 용량으로 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 최대 약 30 mg/kg의 용량으로 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 15 mg/kg 내지 약 30 mg/kg의 용량으로 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 최대 약 60 mg/kg의 용량으로 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 용량은 약 6 mg/kg, 약 7 mg/kg, 약 8 mg/kg, 약 9 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 11 mg/kg, 약 12 mg/kg, 약 13 mg/kg, 약 14 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 16 mg/kg, 약 17 mg/kg, 약 18 mg/kg, 약 19 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 21 mg/kg, 약 22 mg/kg, 약 23 mg/kg, 약 24 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 26 mg/kg, 약 27 mg/kg, 약 28 mg/kg, 약 29 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 31 mg/kg, 약 32 mg/kg, 약 33 mg/kg, 약 34 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 36 mg/kg, 약 37 mg/kg, 약 38 mg/kg, 약 39 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 41 mg/kg, 약 42 mg/kg, 약 43 mg/kg, 약 44 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 46 mg/kg, 약 47 mg/kg, 약 48 mg/kg, 약 49 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 51 mg/kg, 약 52 mg/kg, 약 53 mg/kg, 약 54 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 56 mg/kg, 약 57 mg/kg, 약 58 mg/kg, 약 59 mg/kg 또는 약 60 mg/kg이다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 6 mg/kg의 용량으로 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 15 mg/kg의 용량으로 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 30 mg/kg의 용량으로 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 60 mg/kg의 용량으로 정맥내 투여된다.

이러한 용량은 간헐적으로 투여될 수 있다. 특정 실시양태에서, 투약 빈도는 1일 3회, 1일 2회, 1일 1회, 격일 1회, 매주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회 또는 그 이하의 빈도이다. 특정 실시양태에서, 투약 빈도는 1개월마다 1회, 2개월마다 1회, 3개월마다 1회, 4개월마다 1회, 5개월마다 1회, 6개월마다 1회 또는 그 이하의 빈도이다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 하기 기재된 임의의 투약 레지멘을 사용하여 상기 임의의 용량으로 정맥내 투여된다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 4주마다 1회 또는 더 빈번하게 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 1주마다 1회 (q1w) 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 2주마다 1회 (q2w) 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 3주마다 1회 (q3w) 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 4주마다 1회 (q4w) 정맥내 투여된다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 4주마다 1회 또는 덜 빈번하게 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 4주마다 1회 (q4w) 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 5주마다 1회 (q5w) 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 6주마다 1회 (q6w) 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 7주마다 1회 (q7w) 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 8주마다 1회 (q8w) 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 9주마다 1회 (q9w) 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 10주마다 1회 (q10w) 정맥내 투여된다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 1개월마다 1회 또는 덜 빈번하게 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 1개월마다 1회 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 2개월마다 1회 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 3개월마다 1회 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 4개월마다 1회 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 5개월마다 1회 정맥내 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 6개월마다 1회 정맥내 투여된다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 약 28일마다 1회 적어도 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 1개월마다 1회 적어도 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 적어도 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 적어도 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w) 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 약 28일마다 1회 적어도 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 1개월마다 1회 적어도 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 적어도 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 적어도 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w) 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 약 28일마다 1회 최대 약 30 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 1개월마다 1회 최대 약 30 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 28일마다 1회 적어도 약 30 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 1개월마다 1회 적어도 약 30 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 적어도 약 30 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 적어도 약 30 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 28일마다 1회 적어도 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 1개월마다 1회 적어도 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 적어도 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 적어도 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w) 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 약 28일마다 1회 약 6 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 1개월마다 1회 약 6 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 약 6 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 약 6 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 약 28일마다 1회 약 6 mg/kg, 약 7 mg/kg, 약 8 mg/kg, 약 9 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 11 mg/kg, 약 12 mg/kg, 약 13 mg/kg, 약 14 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 16 mg/kg, 약 17 mg/kg, 약 18 mg/kg, 약 19 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 21 mg/kg, 약 22 mg/kg, 약 23 mg/kg, 약 24 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 26 mg/kg, 약 27 mg/kg, 약 28 mg/kg, 약 29 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 31 mg/kg, 약 32 mg/kg, 약 33 mg/kg, 약 34 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 36 mg/kg, 약 37 mg/kg, 약 38 mg/kg, 약 39 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 41 mg/kg, 약 42 mg/kg, 약 43 mg/kg, 약 44 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 46 mg/kg, 약 47 mg/kg, 약 48 mg/kg, 약 49 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 51 mg/kg, 약 52 mg/kg, 약 53 mg/kg, 약 54 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 56 mg/kg, 약 57 mg/kg, 약 58 mg/kg, 약 59 mg/kg 또는 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 1개월마다 1회 약 6 mg/kg, 약 7 mg/kg, 약 8 mg/kg, 약 9 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 11 mg/kg, 약 12 mg/kg, 약 13 mg/kg, 약 14 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 16 mg/kg, 약 17 mg/kg, 약 18 mg/kg, 약 19 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 21 mg/kg, 약 22 mg/kg, 약 23 mg/kg, 약 24 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 26 mg/kg, 약 27 mg/kg, 약 28 mg/kg, 약 29 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 31 mg/kg, 약 32 mg/kg, 약 33 mg/kg, 약 34 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 36 mg/kg, 약 37 mg/kg, 약 38 mg/kg, 약 39 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 41 mg/kg, 약 42 mg/kg, 약 43 mg/kg, 약 44 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 46 mg/kg, 약 47 mg/kg, 약 48 mg/kg, 약 49 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 51 mg/kg, 약 52 mg/kg, 약 53 mg/kg, 약 54 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 56 mg/kg, 약 57 mg/kg, 약 58 mg/kg, 약 59 mg/kg 또는 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 약 6 mg/kg, 약 7 mg/kg, 약 8 mg/kg, 약 9 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 11 mg/kg, 약 12 mg/kg, 약 13 mg/kg, 약 14 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 16 mg/kg, 약 17 mg/kg, 약 18 mg/kg, 약 19 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 21 mg/kg, 약 22 mg/kg, 약 23 mg/kg, 약 24 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 26 mg/kg, 약 27 mg/kg, 약 28 mg/kg, 약 29 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 31 mg/kg, 약 32 mg/kg, 약 33 mg/kg, 약 34 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 36 mg/kg, 약 37 mg/kg, 약 38 mg/kg, 약 39 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 41 mg/kg, 약 42 mg/kg, 약 43 mg/kg, 약 44 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 46 mg/kg, 약 47 mg/kg, 약 48 mg/kg, 약 49 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 51 mg/kg, 약 52 mg/kg, 약 53 mg/kg, 약 54 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 56 mg/kg, 약 57 mg/kg, 약 58 mg/kg, 약 59 mg/kg 또는 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 약 6 mg/kg, 약 7 mg/kg, 약 8 mg/kg, 약 9 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 11 mg/kg, 약 12 mg/kg, 약 13 mg/kg, 약 14 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 16 mg/kg, 약 17 mg/kg, 약 18 mg/kg, 약 19 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 21 mg/kg, 약 22 mg/kg, 약 23 mg/kg, 약 24 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 26 mg/kg, 약 27 mg/kg, 약 28 mg/kg, 약 29 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 31 mg/kg, 약 32 mg/kg, 약 33 mg/kg, 약 34 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 36 mg/kg, 약 37 mg/kg, 약 38 mg/kg, 약 39 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 41 mg/kg, 약 42 mg/kg, 약 43 mg/kg, 약 44 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 46 mg/kg, 약 47 mg/kg, 약 48 mg/kg, 약 49 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 51 mg/kg, 약 52 mg/kg, 약 53 mg/kg, 약 54 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 56 mg/kg, 약 57 mg/kg, 약 58 mg/kg, 약 59 mg/kg 또는 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 약 28일마다 1회 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 1개월마다 1회 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 약 28일마다 1회 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 1개월마다 1회 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 약 15 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 약 28일마다 1회 약 30 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 1개월마다 1회 약 30 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 약 30 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 약 30 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 (q4w), 즉 약 28일마다 1회 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 1개월마다 1회 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6주마다 1회 (q6w) 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 8주마다 1회 (q8w) 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 정맥내 투여하는 것을 포함한다.

특정 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량은 예를 들어 주입 펌프를 사용하여 약 60분에 걸쳐 개체에게 정맥내 투여된다.

특정 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 적어도 1개의 용량, 적어도 2개의 용량, 적어도 3개의 용량, 적어도 4개의 용량, 적어도 5개의 용량, 적어도 6개의 용량, 적어도 7개의 용량, 적어도 8개의 용량, 적어도 9개의 용량, 적어도 10개의 용량, 적어도 11개의 용량, 적어도 12개의 용량, 적어도 13개의 용량, 적어도 14개의 용량, 적어도 15개의 용량, 적어도 16개의 용량, 적어도 17개의 용량, 적어도 18개의 용량, 적어도 19개의 용량, 적어도 20개의 용량, 적어도 21개의 용량, 적어도 22개의 용량, 적어도 23개의 용량, 적어도 24개의 용량, 적어도 25개의 용량, 적어도 26개의 용량, 적어도 27개의 용량, 적어도 28개의 용량, 적어도 29개의 용량, 적어도 30개의 용량, 적어도 31개의 용량, 적어도 32개의 용량, 적어도 33개의 용량, 적어도 34개의 용량, 적어도 35개의 용량, 적어도 36개의 용량 또는 그 초과가 개체에게 정맥내 투여된다. 특정 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 적어도 6개의 용량이 개체에게 투여된다.

일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 제1 용량은 치료 기간의 첫째 날에 투여되고, 항-소르틸린 항체의 투여는 그 후에 약 4주마다 1회 또는 더 빈번하게 계속된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 제1 용량은 치료 기간의 첫째 날에 투여되고, 항-소르틸린 항체의 투여는 그 후에 약 1주마다 1회 (q1w), 약 2주마다 1회 (q2w), 약 3주마다 1회 (q3w) 또는 약 4주마다 1회 (q4w) 계속된다.

일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 제1 용량은 치료 기간의 첫째 날에 투여되고, 항-소르틸린 항체의 투여는 그 후에 약 4주마다 1회 또는 덜 빈번하게 계속된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 제1 용량은 치료 기간의 첫째 날에 투여되고, 항-소르틸린 항체의 투여는 그 후에 약 4주마다 1회 (q4w), 약 5주마다 1회 (q5w), 약 6주마다 1회 (q6w), 약 7주마다 1회 (q7w), 약 8주마다 1회 (q8w), 약 9주마다 1회 (q9w) 또는 약 10주마다 1회 (q10w) 계속된다.

일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 제1 용량은 치료 기간의 첫째 날에 투여되고, 항-소르틸린 항체의 투여는 그 후에 약 1개월마다 1회 또는 덜 빈번하게 계속된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 제1 용량은 치료 기간의 첫째 날에 투여되고, 항-소르틸린 항체의 투여는 그 후에 약 1개월마다 1회, 약 2개월마다 1회, 약 3개월마다 1회, 약 4개월마다 1회, 약 5개월마다 1회 또는 약 6개월마다 1회 계속된다.

일부 실시양태에서, 개체는 적어도 약 1개월, 적어도 약 2개월, 적어도 약 3개월, 적어도 약 4개월, 적어도 약 5개월, 적어도 약 6개월, 적어도 약 7개월, 적어도 약 8개월, 적어도 약 9개월, 적어도 약 10개월, 적어도 약 11개월, 적어도 약 12개월 또는 그 초과의 치료 기간 동안 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된다. 일부 실시양태에서, 개체는 적어도 약 12개월, 적어도 약 15개월, 적어도 약 18개월, 적어도 약 21개월, 적어도 약 24개월, 적어도 약 27개월, 적어도 약 30개월, 적어도 약 33개월, 적어도 약 36개월 또는 그 초과의 치료 기간 동안 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된다. 일부 실시양태에서, 개체는 적어도 약 1년, 적어도 약 2년, 적어도 약 3년, 적어도 약 4년, 적어도 약 5년 또는 그 초과의 치료 기간 동안 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된다.

일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 초기 더 높은 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 초기 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 59 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 30 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 초기 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 29 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 초기 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 59 mg/kg, 약 6 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 초기 더 낮은 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 초기 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 약 7 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 약 15 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 30 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 초기 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 약 16 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 30 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 30 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 초기 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 약 31 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량이 투여된다.

관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 이해되는 바와 같이, 본원에 제공된 방법에 따라, 예를 들어 관련 기술분야에 공지된 방법에 따라 치료되는 개체 및/또는 질환 또는 장애의 모니터링에 기초하여, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 다른 투여량 레지멘이 사용될 수 있다.

피하 투여

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 질환, 장애 또는 손상을 갖거나 가질 위험이 있는 개체에게 피하 투여에 의해 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 전두측두엽 치매, 진행성 핵상 마비, 알츠하이머병, 혈관성 치매, 발작, 망막 이영양증, 근위축성 측삭 경화증, 외상성 뇌 손상, 척수 손상, 치매, 뇌졸중, 파킨슨병, 급성 파종성 뇌척수염, 망막 변성, 연령 관련 황반 변성, 녹내장, 다발성 경화증, 패혈성 쇼크, 박테리아 감염, 관절염 또는 골관절염이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 알츠하이머병이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 전두측두엽 치매이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 파킨슨병이다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 적어도 약 150 mg의 용량으로 개체에게 피하 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 적어도 약 260 mg의 용량으로 개체에게 피하 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 260 mg 내지 약 4000 mg의 용량으로 개체에게 피하 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 260 mg, 약 280 mg, 약 300 mg, 약 320 mg, 약 340 mg, 약 360 mg, 약 380 mg, 약 400 mg, 약 420 mg, 약 440 mg, 약 460 mg, 약 480 mg, 약 500 mg, 약 520 mg, 약 540 mg, 약 560 mg, 약 580 mg, 약 600 mg, 약 620 mg, 약 640 mg, 약 660 mg, 약 680 mg, 약 700 mg, 약 720 mg, 약 740 mg, 약 760 mg, 약 780 mg, 약 800 mg, 약 820 mg, 약 840 mg, 약 860 mg, 약 880 mg, 약 900 mg, 약 920 mg, 약 940 mg, 약 960 mg, 약 980 mg, 약 1000 mg, 약 1020 mg, 약 1040 mg, 약 1060 mg, 약 1080 mg, 약 1100 mg, 약 1120 mg, 약 1140 mg, 약 1160 mg, 약 1180 mg, 약 1200 mg, 약 1220 mg, 약 1240 mg, 약 1260 mg, 약 1280 mg, 약 1300 mg, 약 1320 mg, 약 1340 mg, 약 1360 mg, 약 1380 mg, 약 1400 mg, 약 1420 mg, 약 1440 mg, 약 1460 mg, 약 1480 mg, 약 1500 mg, 약 1520 mg, 약 1540 mg, 약 1560 mg, 약 1580 mg, 약 1600 mg, 약 1620 mg, 약 1640 mg, 약 1660 mg, 약 1680 mg, 약 1700 mg, 약 1720 mg, 약 1740 mg, 약 1760 mg, 약 1780 mg, 약 1800 mg, 약 1820 mg, 약 1840 mg, 약 1860 mg, 약 1880 mg, 약 1900 mg, 약 1920 mg, 약 1940 mg, 약 1960 mg, 약 1980 mg, 약 2000 mg, 약 2020 mg, 약 2040 mg, 약 2060 mg, 약 2080 mg, 약 2100 mg, 약 2120 mg, 약 2140 mg, 약 2160 mg, 약 2180 mg, 약 2200 mg, 약 2220 mg, 약 2240 mg, 약 2260 mg, 약 2280 mg, 약 2300 mg, 약 2320 mg, 약 2340 mg, 약 2360 mg, 약 2380 mg, 약 2400 mg, 약 2420 mg, 약 2440 mg, 약 2460 mg, 약 2480 mg, 약 2500 mg, 약 2520 mg, 약 2540 mg, 약 2560 mg, 약 2580 mg, 약 2600 mg, 약 2620 mg, 약 2640 mg, 약 2660 mg, 약 2680 mg, 약 2700 mg, 약 2720 mg, 약 2740 mg, 약 2760 mg, 약 2780 mg, 약 2800 mg, 약 2820 mg, 약 2840 mg, 약 2860 mg, 약 2880 mg, 약 2900 mg, 약 2920 mg, 약 2940 mg, 약 2960 mg, 약 2980 mg, 약 3000 mg, 약 3020 mg, 약 3040 mg, 약 3060 mg, 약 3080 mg, 약 3100 mg, 약 3120 mg, 약 3140 mg, 약 3160 mg, 약 3180 mg, 약 3200 mg, 약 3220 mg, 약 3240 mg, 약 3260 mg, 약 3280 mg, 약 3300 mg, 약 3320 mg, 약 3340 mg, 약 3360 mg, 약 3380 mg, 약 3400 mg, 약 3420 mg, 약 3440 mg, 약 3460 mg, 약 3480 mg, 약 3500 mg, 약 3520 mg, 약 3540 mg, 약 3560 mg, 약 3580 mg, 약 3600 mg, 약 3620 mg, 약 3640 mg, 약 3660 mg, 약 3680 mg, 약 3700 mg, 약 3720 mg, 약 3740 mg, 약 3760 mg, 약 3780 mg, 약 3800 mg, 약 3820 mg, 약 3840 mg, 약 3860 mg, 약 3880 mg, 약 3900 mg, 약 3920 mg, 약 3940 mg, 약 3960 mg, 약 3980 mg 또는 약 4000 mg 중 어느 하나의 용량으로 개체에게 피하 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 270 mg 내지 약 600 mg, 약 600 mg 내지 약 675 mg, 약 675 mg 내지 약 720 mg, 약 720 mg 내지 약 1350 mg, 약 1350 mg 내지 약 1600 mg, 약 1600 mg 내지 약 1800 mg, 또는 약 1800 mg 내지 약 3600 mg의 용량으로 개체에게 피하 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 270 mg, 약 675 mg, 약 720 mg, 약 1350 mg, 약 1800 mg 또는 약 3600 mg의 용량으로 개체에게 피하 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 150 mg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 270 mg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 300 mg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 600 mg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 675 mg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 720 mg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 1350 mg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 1600 mg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 1800 mg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 3600 mg의 용량으로 피하 투여된다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 약 6 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 용량으로 개체에게 피하 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 최대 약 30 mg/kg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 최대 약 60 mg/kg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 용량은 약 6 mg/kg, 약 7 mg/kg, 약 8 mg/kg, 약 9 mg/kg, 약 10 mg/kg, 약 11 mg/kg, 약 12 mg/kg, 약 13 mg/kg, 약 13.3 mg/kg, 약 14 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 16 mg/kg, 약 17 mg/kg, 약 18 mg/kg, 약 19 mg/kg, 약 20 mg/kg, 약 21 mg/kg, 약 22 mg/kg, 약 23 mg/kg, 약 24 mg/kg, 약 25 mg/kg, 약 26 mg/kg, 약 27 mg/kg, 약 28 mg/kg, 약 29 mg/kg, 약 30 mg/kg, 약 31 mg/kg, 약 32 mg/kg, 약 33 mg/kg, 약 34 mg/kg, 약 35 mg/kg, 약 36 mg/kg, 약 37 mg/kg, 약 38 mg/kg, 약 39 mg/kg, 약 40 mg/kg, 약 41 mg/kg, 약 42 mg/kg, 약 43 mg/kg, 약 44 mg/kg, 약 45 mg/kg, 약 46 mg/kg, 약 47 mg/kg, 약 48 mg/kg, 약 49 mg/kg, 약 50 mg/kg, 약 51 mg/kg, 약 52 mg/kg, 약 53 mg/kg, 약 54 mg/kg, 약 55 mg/kg, 약 56 mg/kg, 약 57 mg/kg, 약 58 mg/kg, 약 59 mg/kg 또는 약 60 mg/kg이다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 6 mg/kg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 13.3 mg/kg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 15 mg/kg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 30 mg/kg의 용량으로 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 약 60 mg/kg의 용량으로 피하 투여된다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 하기 기재된 임의의 투약 레지멘을 사용하여 상기 임의의 용량으로 피하 투여된다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 4주마다 1회 (q4w) 또는 더 빈번하게 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 1주마다 1회 (q1w) 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 2주마다 1회 (q2w) 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 3주마다 1회 (q3w) 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 4주마다 1회 (q4w) 피하 투여된다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 4주마다 1회 (q4w) 또는 덜 빈번하게 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 4주마다 1회 (q4w) 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 5주마다 1회 (q5w) 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 6주마다 1회 (q6w) 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 7주마다 1회 (q7w) 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 8주마다 1회 (q8w) 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 9주마다 1회 (q9w) 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 10주마다 1회 (q10w) 피하 투여된다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 1개월마다 1회 또는 덜 빈번하게 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 1개월마다 1회 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 2개월마다 1회 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 3개월마다 1회 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 4개월마다 1회 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 5개월마다 1회 피하 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 약 6개월마다 1회 피하 투여된다.

특정 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 용량은 피하 주사로서 개체에게 피하 투여된다. 특정 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 용량은 저속 피하 주사로서 약 15분에 걸쳐 개체에게 피하 투여된다.

특정 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 적어도 1개의 용량, 적어도 2개의 용량, 적어도 3개의 용량, 적어도 4개의 용량, 적어도 5개의 용량, 적어도 6개의 용량, 적어도 7개의 용량, 적어도 8개의 용량, 적어도 9개의 용량, 적어도 10개의 용량, 적어도 11개의 용량, 적어도 12개의 용량, 적어도 13개의 용량, 적어도 14개의 용량, 적어도 15개의 용량, 적어도 16개의 용량, 적어도 17개의 용량, 적어도 18개의 용량, 적어도 19개의 용량, 적어도 20개의 용량, 적어도 21개의 용량, 적어도 22개의 용량, 적어도 23개의 용량, 적어도 24개의 용량, 적어도 25개의 용량, 적어도 26개의 용량, 적어도 27개의 용량, 적어도 28개의 용량, 적어도 29개의 용량, 적어도 30개의 용량, 적어도 31개의 용량, 적어도 32개의 용량, 적어도 33개의 용량, 적어도 34개의 용량, 적어도 35개의 용량, 적어도 36개의 용량 또는 그 초과가 개체에게 피하 투여된다. 특정 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 적어도 6개의 용량이 개체에게 투여된다.

일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 제1 용량은 치료 기간의 첫째 날에 투여되고, 항-소르틸린 항체의 투여는 그 후에 약 4주마다 1회 (q4w) 또는 더 빈번하게 계속된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 제1 용량은 치료 기간의 첫째 날에 투여되고, 항-소르틸린 항체의 투여는 그 후에 약 1주마다 1회 (q1w), 약 2주마다 1회 (q2w), 약 3주마다 1회 (q3w) 또는 약 4주마다 1회 (q4w) 계속된다.

일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 제1 용량은 치료 기간의 첫째 날에 투여되고, 항-소르틸린 항체의 투여는 그 후에 약 4주마다 1회 (q4w) 또는 덜 빈번하게 계속된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 제1 용량은 치료 기간의 첫째 날에 투여되고, 항-소르틸린 항체의 투여는 그 후에 약 4주마다 1회 (q4w), 약 5주마다 1회 (q5w), 약 6주마다 1회 (q6w), 약 7주마다 1회 (q7w), 약 8주마다 1회 (q8w), 약 9주마다 1회 (q9w) 또는 약 10주마다 1회 (q10w) 계속된다.

일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 초기 더 높은 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 초기 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 59 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 30 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 초기 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 29 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 초기 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 59 mg/kg, 약 6 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 초기 더 낮은 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량이 투여된다. 일부 실시양태에서, 약 6 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 초기 용량이 개체에게 투여된 후, 이어서 약 7 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 약 15 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 30 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량이 투여된다.

소르틸린 항체

일부 측면에서, 본 개시내용은 소르틸린, 예를 들어 인간 소르틸린 단백질 또는 포유동물 소르틸린 단백질에 결합하는 항-소르틸린 항체를 제공한다.

소르틸린 단백질

일부 측면에서, 본 개시내용은 소르틸린 단백질에 결합하는 항-소르틸린 항체를 제공한다. 소르틸린은 소르틸린 1, sort1, SORT1, 100 kDa NT 수용체, 당단백질 95 (GP95), 프로그래뉼린 수용체 (PGRN-R), 및 뉴로텐신 수용체 3 (NT-3 또는 NTR-3)으로 다양하게 지칭된다. 소르틸린은 유형 I 막 수용체를 코딩하는 831개 아미노산 단백질이다. 인간 소르틸린, 래트 소르틸린, 시노몰구스 원숭이 소르틸린 및 마우스 소르틸린을 제한 없이 포함하는 다양한 소르틸린 상동체가 공지되어 있다. 인간 소르틸린의 아미노산 서열은 서열식별번호: 1 (프로그래뉼린 결합에 참여할 것으로 예측되는 핵심 아미노산 잔기는 굵게 도시되고, 예측된 프로-NGF 결합 영역은 밑줄 표시됨)로서 하기 제시되어 있다:

추가적으로, 마우스 소르틸린의 아미노산 서열은 서열식별번호: 2에 제시되어 있다:

추가적으로, 래트 소르틸린의 아미노산 서열은 서열식별번호: 3에 제시되어 있다:

추가적으로, 시노몰구스 원숭이 소르틸린의 아미노산 서열은 서열식별번호: 27에 제시되어 있다:

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 포유동물 소르틸린 단백질, 인간 소르틸린 단백질, 영장류 소르틸린 단백질 (예를 들어, 시노몰구스 원숭이 소르틸린), 마우스 소르틸린 단백질 및/또는 래트 소르틸린 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 포유동물 소르틸린 단백질, 인간 소르틸린 단백질, 영장류 소르틸린 단백질 (예를 들어, 시노몰구스 원숭이 소르틸린), 마우스 소르틸린 단백질 및 래트 소르틸린 단백질 중 하나 이상 내의 에피토프에 결합할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 인간 소르틸린에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 마우스 소르틸린에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 시노몰구스 원숭이 소르틸린에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 인간 소르틸린 및 마우스 소르틸린에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 인간 소르틸린, 마우스 소르틸린 및 시노몰구스 원숭이 소르틸린에 결합한다.

일부 실시양태에서, 소르틸린 단백질은 신호 서열을 포함하는 프레단백질이다. 일부 실시양태에서, 소르틸린 단백질은 성숙 단백질이다. 일부 실시양태에서, 성숙 소르틸린 단백질은 신호 서열을 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 성숙 소르틸린 단백질은 세포 상에 발현된다.

본 개시내용의 소르틸린 단백질은 신호 서열, 프로펩티드, 루미날 도메인, Vps10p 도메인 (예를 들어, Asp-box 모티프, 10-블레이드 베타-프로펠러 구조 및 소수성 루프 포함), 10 CC 도메인, 막횡단 도메인 및 세포질 도메인을 제한 없이 포함하는 여러 도메인을 포함한다. 추가적으로, 본 개시내용의 소르틸린 단백질은 뇌, 척수, 심장 및 골격근, 갑상선, 태반 및 고환을 제한 없이 포함하는 다수의 조직에서 높은 수준으로 발현된다. 소르틸린은 분류 수용체의 Vpsl0p 패밀리의 구성원이며, 이는 또한 A-유형 반복부를 갖는 분류 단백질-관련 수용체 (SorLA), 소르틸린-관련 수용체 CNS 발현 1 (SorCS1), 소르틸린-관련 수용체 CNS 발현 2 (SorCS2), 및 소르틸린-관련 수용체 CNS 발현 3 (SorCS3)을 제한 없이 포함한다. 소르틸린의 루미날 영역은 효모 Vps10p의 2개의 루미날 도메인 각각과 정렬된다 (Vps10p 도메인). Vps10p 도메인의 특징은 아미노-말단 프로펩티드 및 10개의 보존된 시스테인 (10CC) 잔기를 함유하는 카르복시-말단 세그먼트이다. Vpsl0p 패밀리의 다른 수용체는 아미노-말단에 위치된 Vps10p 도메인을 공유하고, 추가 엑토도메인을 함유한다.

분류 수용체의 Vps10p 패밀리는 신경계 및 다른 곳 모두 내에 다양한 기능을 갖는다. 수용체는 프로그래뉼린 (PGRN), 프로-신경 성장 인자 (프로-NGF), 신경 성장 인자 (NGF), PCSK9, 프로-뉴로트로핀, 뉴로트로핀, 프로-뉴로트로핀-3 (프로-NT3), 프로-뉴로트로핀-4/5, 프로-뇌-유래 신경영양 인자 (프로-BDNF), 뇌-유래 신경영양 인자 (BDNF), 뉴로트로핀-3 (NT3), 뉴로트로핀-4/5, 뉴로텐신, p75NTR, 소르틸린 프로펩티드 (Sort-pro), 아밀로이드 전구체 단백질 (APP), 지질단백질 리파제 (LpL), 아포지질단백질, 아포지질단백질 AV (APOA5), 아포지질단백질 E (APOE 2, 3, 4), 수용체-연관 단백질 (RAP), 및 플라스미노겐 활성화제 시스템의 요소를 제한 없이 포함하는 다기능적 결합 여러 상이한 리간드인 것으로 제시된 바 있으며; 세포내 분류, 엔도시토시스 및 신호 도입에 관여한다. 본 개시내용의 소르틸린 단백질은 지질단백질 리파제, 뉴로텐신 및 신경 성장 인자의 프로-형태의 신속한 엔도시토시스를 매개하고; 골지로부터 후기 엔도좀으로의 수송을 위한 단백질을 표적화하는 것으로 제시된 바 있다. 또한, 본 개시내용의 소르틸린 단백질은 세포막 상의 p75와 복합체를 형성하고 프로-신경 성장 인자 (NGF)-유도 뉴런 사멸에 필수적인 것으로 제시된 바 있다. 또한 최근에 Vps10p 수용체 패밀리의 구성원은 NGF, 뇌 유래 신경영양 인자, 뉴로트로핀-3 및 뉴로트로핀-4/5를 포함하는 뉴로트로핀 패밀리의 구성원, 또는 뉴로트로핀의 프로-도메인 형태 (프로-뉴로트로핀)와 상호작용하는 것으로 제시된 바 있다. 본 개시내용의 소르틸린 단백질은 또한 PCSK9에 결합하고 그의 세포외 수준을 조절하는 것으로 제시된 바 있으며, 이는 리소좀에서 분해를 위해 저밀도 지질단백질 수용체를 표적화하여 LDL 콜레스테롤의 증가된 수준을 초래한다.

본원에 개시된 바와 같이, 본 개시내용의 소르틸린 단백질 및 프로-뉴로트로핀 또는 뉴로트로핀 사이의 상호작용은 10-블레이드 베타-프로펠러 구조 및 Asp-box 모티프를 함유하는 Vps10p 도메인에 의해 매개된다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 소르틸린 단백질은 10-블레이드 베타-프로펠러 구조를 포함하고 인간 소르틸린 (서열식별번호: 1)의 아미노산 잔기 78-611 또는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 78-611에 상응하는 포유동물 소르틸린의 아미노산 잔기 내에 위치된 Vps10p 도메인을 함유한다. 특정 실시양태에서, 인간 소르틸린 (서열식별번호: 1)의 아미노산 잔기 190-220 또는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 190-220에 상응하는 포유동물 소르틸린의 아미노산 잔기는 Vps10p 도메인 내에 위치된다.

본 개시내용의 Vps10p 도메인은 Asp-box 모티프를 포함할 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, Asp-box 모티프는 하기 서열을 갖는다: (S/T)-X-(D/N)-X-X-X-X-(W/F/Y) (서열식별번호: 22), 또는 X-X-(S/T)-X-(D/N)-X-G-X-(T/S)-(W/F/Y)-X (서열식별번호: 23), 여기서 X는 임의의 아미노산을 나타낸다. 인간 소르틸린에서, Asp-box 모티프는 아미노산 잔기 200-207 (SSDFAKNF (서열식별번호: 24))에 위치된다. 따라서, 특정 실시양태에서, Asp-box 모티프는 인간 소르틸린 (서열식별번호: 1)의 아미노산 잔기 200-207 또는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 200-207에 상응하는 포유동물 소르틸린의 아미노산 잔기에 위치된다.

본원에 개시된 바와 같이, 본 개시내용의 소르틸린 단백질 및 p75 사이의 상호작용은 Vps10p 도메인의 소수성 루프의 10CC 도메인에 의해 매개된다.

특정 실시양태에서, 본 개시내용의 소르틸린 단백질은 인간 소르틸린 (서열식별번호: 1)의 아미노산 잔기 610-757 또는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 610-757에 상응하는 포유동물 소르틸린의 아미노산 잔기 내에 위치된 10CC 도메인을 함유한다. 일부 실시양태에서, 인간 소르틸린 (서열식별번호: 1)의 아미노산 잔기 592-593, 610-660 및/또는 667-749 또는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 592-593, 610-660 및/또는 667-749에 상응하는 포유동물 소르틸린의 아미노산 잔기는 소르틸린의 10CC 도메인 내에 위치된다.

다른 실시양태에서, 본 개시내용의 소르틸린 단백질은 인간 소르틸린 (서열식별번호: 1)의 아미노산 잔기 130-141 또는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 130-141에 상응하는 포유동물 소르틸린의 아미노산 잔기 내에 위치된 Vps10p 도메인 내에 소수성 루프를 함유한다.

관련 기술분야의 통상의 기술자가 이해하는 바와 같이, 본 개시내용의 도메인의 시작 및 종료 잔기는 사용된 컴퓨터 모델링 프로그램 또는 도메인을 결정하기 위해 사용된 방법에 따라 달라질 수 있다.

예시적인 항-소르틸린 항체

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 방법에서 사용되는 항-소르틸린 항체는 본원에 참조로 포함된 WO2016164637A1에 기재되어 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 하기 중 하나 이상을 포함한다: (a) 서열식별번호: 6에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) 서열식별번호: 7에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 및 (c) 서열식별번호: 8에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; 및/또는 여기서 경쇄 가변 도메인은 하기 중 하나 이상을 포함한다: (a) 서열식별번호: 9에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (b) 서열식별번호: 10에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및 (c) 서열식별번호: 11에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3을 포함하고, 여기서 경쇄 가변 도메인은 HVR-L1, HVR-L2 및 HVR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 아미노산 서열 YTFTKYYMS (서열식별번호: 6)에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1을 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 아미노산 서열 YTFTKYYMS (서열식별번호: 6)에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 아미노산 서열 IINPIGGSTSYAQKFQG (서열식별번호: 7)에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2를 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 아미노산 서열 IINPIGGSTSYAQKFQG (서열식별번호: 7)에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 아미노산 서열 ARDPSGIALAGPASRGYQGMDV (서열식별번호: 8)에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 아미노산 서열 ARDPSGIALAGPASRGYQGMDV (서열식별번호: 8)에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 아미노산 서열 RASQSVSSNLA (서열식별번호: 9)에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1을 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 아미노산 서열 RASQSVSSNLA (서열식별번호: 9)에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 아미노산 서열 GASTRAT (서열식별번호: 10)에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2를 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 아미노산 서열 GASTRAT (서열식별번호: 10)에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 아미노산 서열 QQARLGPWT (서열식별번호: 11)에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 아미노산 서열 QQARLGPWT (서열식별번호: 11)에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 아미노산 서열 YTFTKYYMS (서열식별번호: 6)을 포함하는 HVR-H1, 아미노산 서열 IINPIGGSTSYAQKFQG (서열식별번호: 7)을 포함하는 HVR-H2, 및 아미노산 서열 ARDPSGIALAGPASRGYQGMDV (서열식별번호: 8)을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 아미노산 서열 RASQSVSSNLA (서열식별번호: 9)을 포함하는 HVR-L1, 아미노산 서열 GASTRAT (서열식별번호: 10)을 포함하는 HVR-L2, 및 아미노산 서열 QQARLGPWT (서열식별번호: 11)을 포함하는 HVR-L3을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 하기 중 하나 이상을 포함한다: (a) 항체 S-15-10-7의 HVR-H1 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1; (b) 항체 S-15-10-7의 HVR-H2 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2; 및 (c) 항체 S-15-10-7의 HVR-H3 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3; 및/또는 여기서 경쇄 가변 도메인은 하기 중 하나 이상을 포함한다: (a) 항체 S-15-10-7의 HVR-L1 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1; (b) 항체 S-15-10-7의 HVR-L2 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2; 및 (c) 항체 S-15-10-7의 HVR-L3 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3을 포함하고, 여기서 경쇄 가변 도메인은 HVR-L1, HVR-L2 및 HVR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 항체 S-15-10-7의 HVR-H1 아미노산 서열에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1을 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 항체 S-15-10-7의 HVR-H1 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 항체 S-15-10-7의 HVR-H2 아미노산 서열에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2를 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 항체 S-15-10-7의 HVR-H2 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 항체 S-15-10-7의 HVR-H3 아미노산 서열에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 항체 S-15-10-7의 HVR-H3 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 항체 S-15-10-7의 HVR-L1 아미노산 서열에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1을 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 항체 S-15-10-7의 HVR-L1 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 항체 S-15-10-7의 HVR-L2 아미노산 서열에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2를 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 항체 S-15-10-7의 HVR-L2 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 항체 S-15-10-7의 HVR-L3 아미노산 서열에 비해 치환 (예를 들어, 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하는 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하지만, 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 최대 1개, 최대 2개, 최대 3개, 최대 4개, 최대 5개 또는 최대 6개의 아미노산이 항체 S-15-10-7의 HVR-L3 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 HVR-H1 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 항체 S-15-10-7의 HVR-H2 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 항체 S-15-10-7의 HVR-H3 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 HVR-L1 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 항체 S-15-10-7의 HVR-L2 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 항체 S-15-10-7의 HVR-L3 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 중쇄 가변 도메인 및 경쇄 가변 도메인을 포함하며, 여기서 중쇄 가변 도메인은 VH FR1, VH FR2, VH FR3 및 VH FR4로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 프레임워크 영역 (FR)을 포함하고, 여기서: VH FR1은 서열식별번호: 12의 아미노산 서열을 포함하고, VH FR2는 서열식별번호: 13의 아미노산 서열을 포함하고, VH FR3은 서열식별번호: 14의 아미노산 서열을 포함하고, VH FR4는 서열식별번호: 15의 아미노산 서열을 포함하고/거나; 경쇄 가변 도메인은 VL FR1, VL FR2, VL FR3 및 VL FR4로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 프레임워크 영역을 포함하고, 여기서: VL FR1은 서열식별번호: 16의 아미노산 서열을 포함하고, VL FR2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하고, VL FR3은 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하고, VL FR4는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 20의 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고/거나; 여기서 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 21의 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 20의 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고/거나; 여기서 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 21의 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 20의 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 HVR-H1 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 항체 S-15-10-7의 HVR-H2 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 항체 S-15-10-7의 HVR-H3 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고/거나; 여기서 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 21의 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 경쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 HVR-L1 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 항체 S-15-10-7의 HVR-L2 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 항체 S-15-10-7의 HVR-L3 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 중쇄 가변 도메인 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고/거나; 여기서 경쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 경쇄 가변 도메인 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 중쇄 가변 도메인 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 HVR-H1 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 항체 S-15-10-7의 HVR-H2 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 항체 S-15-10-7의 HVR-H3 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고/거나; 여기서 경쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 경쇄 가변 도메인 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서 경쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 HVR-L1 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 항체 S-15-10-7의 HVR-L2 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 항체 S-15-10-7의 HVR-L3 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 20의 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 치환 (예를 들어, 서열식별번호: 20에 비해 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하지만, 해당 서열을 포함하는 항-소르틸린 항체는 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 총 1 내지 10개의 아미노산이 서열식별번호: 20의 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 특정 실시양태에서, 총 1 내지 6개의 아미노산이 서열식별번호: 20의 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 특정 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 HVR 외부 영역 (즉, FR 영역)에서 발생한다. 일부 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 하나 이상의 FR 영역 (즉, VH FR1, VH FR2, VH FR3 및/또는 VH FR4)에서 발생한다. 특정 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 하나 이상의 HVR (즉, HVR-H1, HVR-H2 및/또는 HVR-H3)에서 발생한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함하며, 이는 해당 서열의 번역후 변형을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 21의 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 치환 (예를 들어, 서열식별번호: 21에 비해 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하지만, 해당 서열을 포함하는 항-소르틸린 항체는 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 총 1 내지 10개의 아미노산이 서열식별번호: 21의 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 특정 실시양태에서, 총 1 내지 6개의 아미노산이 서열식별번호: 21의 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 특정 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 HVR 외부 영역 (즉, FR 영역)에서 발생한다. 일부 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 하나 이상의 FR 영역 (즉, VL FR1, VL FR2, VL FR3 및/또는 VL FR4)에서 발생한다. 특정 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 하나 이상의 HVR (즉, HVR-L1, HVR-L2 및/또는 HVR-L3)에서 발생한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하며, 이는 해당 서열의 번역후 변형을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 중쇄 가변 도메인 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 치환 (예를 들어, 항체 S-15-10-7의 중쇄 가변 도메인 아미노산 서열에 비해 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하지만, 해당 서열을 포함하는 항-소르틸린 항체는 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 총 1 내지 10개의 아미노산이 항체 S-15-10-7의 중쇄 가변 도메인 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 특정 실시양태에서, 총 1 내지 6개의 아미노산이 항체 S-15-10-7의 중쇄 가변 도메인 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 특정 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 HVR 외부 영역 (즉, FR 영역)에서 발생한다. 일부 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 하나 이상의 FR 영역 (즉, VH FR1, VH FR2, VH FR3 및/또는 VH FR4)에서 발생한다. 특정 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 하나 이상의 HVR (즉, HVR-H1, HVR-H2 및/또는 HVR-H3)에서 발생한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 항체 S-15-10-7의 중쇄 가변 도메인 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함하며, 이는 해당 서열의 번역후 변형을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 경쇄 가변 도메인은 항체 S-15-10-7의 경쇄 가변 도메인 아미노산 서열에 대한 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고, 치환 (예를 들어, 항체 S-15-10-7의 경쇄 가변 도메인 아미노산 서열에 비해 보존적 치환, 삽입 또는 결실)을 함유하지만, 해당 서열을 포함하는 항-소르틸린 항체는 소르틸린에 결합하는 능력을 보유한다. 특정 실시양태에서, 총 1 내지 10개의 아미노산이 항체 S-15-10-7의 경쇄 가변 도메인 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 특정 실시양태에서, 총 1 내지 6개의 아미노산이 항체 S-15-10-7의 경쇄 가변 도메인 아미노산 서열에서 치환, 삽입 및/또는 결실되었다. 특정 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 HVR 외부 영역 (즉, FR 영역)에서 발생한다. 일부 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 하나 이상의 FR 영역 (즉, VL FR1, VL FR2, VL FR3 및/또는 VL FR4)에서 발생한다. 특정 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 하나 이상의 HVR (즉, HVR-L1, HVR-L2 및/또는 HVR-L3)에서 발생한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체는 항체 S-15-10-7의 경쇄 가변 도메인 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하며, 이는 해당 서열의 번역후 변형을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 항체 S-15-10-7의 중쇄 가변 도메인 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 항체 S-15-10-7의 경쇄 가변 도메인 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 31 또는 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 예를 들어 WO2016164637A1 (그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같은 항-소르틸린 항체 S-15-10-7이다.

표 1: 항-소르틸린 항체 서열.

일부 측면에서, 본 개시내용은 또한 소르틸린 단백질에 결합하는 항체를 제공한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 본원의 "예시적인 항-소르틸린 항체" 섹션에 기재된 임의의 항-소르틸린 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 소르틸린 및/또는 포유동물 소르틸린 단백질에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 IgG1 이소타입을 갖는다. 일부 실시양태에서, 항체는 아미노산 치환 L234A, L235A 및 P331S를 포함하는 Fc 영역을 포함하고, 여기서 잔기 위치의 넘버링은 EU 넘버링에 따른다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다.

항-소르틸린 항체 결합 영역

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린의 아미노산 잔기 237-247 내의 하나 이상의 아미노산, 또는 인간 소르틸린의 아미노산 잔기 237-247에 상응하는 소르틸린 단백질 상의 아미노산 잔기에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 237-247 내의 하나 이상의 아미노산, 또는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 237-247에 상응하는 단백질 상의 아미노산 잔기에 결합한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린의 아미노산 잔기 314-338 내의 하나 이상의 아미노산, 또는 인간 소르틸린의 아미노산 잔기 314-338에 상응하는 소르틸린 단백질 상의 아미노산 잔기에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 314-338 내의 하나 이상의 아미노산, 또는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 314-338에 상응하는 단백질 상의 아미노산 잔기에 결합한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린의 아미노산 잔기 237-247 및 314-338 내의 하나 이상의 아미노산, 또는 인간 소르틸린의 아미노산 잔기 237-247 및 314-338에 상응하는 소르틸린 단백질 상의 아미노산 잔기에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 237-247 및 314-338 내의 하나 이상의 아미노산, 또는 서열식별번호: 1의 아미노산 잔기 237-247 및 314-338에 상응하는 단백질 상의 아미노산 잔기에 결합한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린과 같은 소르틸린 단백질의 아미노산 서열 NGLWVSKNFGG (서열식별번호: 4) 내의 하나 이상의 아미노산에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린과 같은 소르틸린 단백질의 아미노산 서열 FASVMADKDTTRRIHVSTDQGDTWS (서열식별번호: 5) 내의 하나 이상의 아미노산에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린과 같은 소르틸린 단백질의 아미노산 서열 NGLWVSKNFGG (서열식별번호: 4) 및 아미노산 서열 FASVMADKDTTRRIHVSTDQGDTWS (서열식별번호: 5) 내의 하나 이상의 아미노산에 결합한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린 단백질과 같은 소르틸린 단백질의 베타 프로펠러 도메인 내의 하나 이상의 아미노산에 결합한다.

항-소르틸린 항체 결합 친화도

본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 표적 항원 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린)에 대해 마이크로몰, 나노몰 또는 피코몰 친화도를 가질 수 있다.

특정 실시양태에서, 표적 항원 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린)에 대한 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 결합 친화도는 해리 상수 (K_D)에 의해 측정된다. 해리 상수는 생화학적 또는 생물물리적 기술, 예컨대 형광 활성화 세포 분류 (FACS), 유동 세포계측법, 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA), 표면 플라즈몬 공명 (SPR), 생물층 간섭법 (예를 들어, 포르테바이오(ForteBio)에 의한 옥텟 시스템(Octet System) 참조), 메소 스케일(meso scale) 디스커버리 검정 (예를 들어, MSD-SET 참조), 등온 적정 열량측정법 (ITC), 시차 주사 열량측정법 (DSC), 원편광 이색성 (CD), 정지-흐름 분석, 및 비색 또는 형광 단백질 용융 분석; 또는 세포 결합 검정을 포함하는 관련 기술분야에 공지된 임의의 분석 기술을 통해 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 소르틸린 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린)에 대한 해리 상수 (K_D)는 대략 25℃의 온도에서 결정된다. 일부 실시양태에서, 소르틸린 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린)에 대한 해리 상수 (K_D)는 대략 4℃의 온도에서 결정된다. 일부 실시양태에서, 소르틸린 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린)에 대한 해리 상수 (K_D)는 예를 들어 FACS 또는 생물층 간섭법 검정을 이용하여 4℃ 또는 실온에서 측정된다. 일부 실시양태에서, 소르틸린 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린)에 대한 해리 상수 (K_D)는 예를 들어 세포 결합 검정, 포르테바이오 검정, 또는 MSD-SET 검정을 이용하여 4℃ 또는 실온에서 측정된다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 < 1 μM, < 100 nM, < 10 nM, < 1 nM, < 0.1 nM, < 0.01 nM 또는 < 0.001 nM (예를 들어, 10^-8 M 이하, 예를 들어 10^-8 M 내지 10^-13 M, 예를 들어 10^-9 M 내지 10^-13 M)의 표적 항원 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린)에 대한 해리 상수 (K_D)를 갖는다.

특정 실시양태에서, 인간 소르틸린 및/또는 포유동물 소르틸린, 예를 들어 마우스 소르틸린 또는 시노몰구스 원숭이 소르틸린에 대한 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 K_D는 100 nM 미만, 90 nM 미만, 80 nM 미만, 70 nM 미만, 60 nM 미만, 50 nM 미만, 40 nM 미만, 30 nM 미만, 20 nM 미만, 10 nM 미만, 9 nM 미만, 8 nM 미만, 7 nM 미만, 6 nM 미만, 5 nM 미만, 4 nM 미만, 3 nM 미만, 2 nM 미만, 1 nM 미만, 0.5 nM 미만, 0.1 nM 미만, 0.09 nM 미만, 0.08 nM 미만, 0.07 nM 미만, 0.06 nM 미만, 0.05 nM 미만, 0.04 nM 미만, 0.03 nM 미만, 0.02 nM 미만, 0.01 nM 미만, 0.009 nM 미만, 0.008 nM 미만, 0.007 nM 미만, 0.006 nM 미만, 0.005 nM 미만, 0.004 nM 미만, 0.003 nM 미만, 0.002 nM 미만, 0.001 nM 미만, 또는 0.001 nM 미만이다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 0.005 nM 내지 약 100 nM 범위의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 0.005 nM 내지 약 1 nM 범위, 예를 들어 약 0.005 nM, 약 0.006 nM, 약 0.007 nM, 약 0.008 nM, 약 0.009 nM, 약 0.01 nM, 약 0.02 nM, 약 0.03 nM, 약 0.04 nM, 약 0.05 nM, 약 0.06 nM, 약 0.07 nM, 약 0.08 nM, 약 0.09 nM, 약 0.1 nM, 약 0.2 nM, 약 0.3 nM, 약 0.4 nM, 약 0.5 nM, 약 0.6 nM, 약 0.7 nM, 약 0.8 nM, 약 0.9 nM 또는 약 1 nM 중 임의의 범위의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 1 nM 내지 약 10 nM 범위, 예를 들어 약 1 nM, 약 1.2 nM, 약 1.4 nM, 약 1.6 nM, 약 1.8 nM, 약 2 nM, 약 2.2 nM, 약 2.4 nM, 약 2.6 nM, 약 2.8 nM, 약 3 nM, 약 3.2 nM, 약 3.4 nM, 약 3.6 nM, 약 3.8 nM, 약 4 nM, 약 4.2 nM, 약 4.4 nM, 약 4.6 nM, 약 4.8 nM, 약 5 nM, 약 5.2 nM, 약 5.4 nM, 약 5.6 nM, 약 5.8 nM, 약 6 nM, 약 6.2 nM, 약 6.4 nM, 약 6.6 nM, 약 6.8 nM, 약 7 nM, 약 7.2 nM, 약 7.4 nM, 약 7.6 nM, 약 7.8 nM, 약 8 nM, 약 8.2 nM, 약 8.4 nM, 약 8.6 nM, 약 8.8 nM, 약 9 nM, 약 9.2 nM, 약 9.4 nM, 약 9.6 nM, 약 9.8 nM 또는 약 10 nM 중 임의의 범위의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 0.029 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 1.3 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 1.32 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 2.3 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 3.16 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 3.3 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 0.005 nM 내지 약 100 nM 범위의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 1 nM 내지 약 10 nM 범위, 예를 들어 약 1 nM, 약 1.2 nM, 약 1.4 nM, 약 1.6 nM, 약 1.8 nM, 약 2 nM, 약 2.2 nM, 약 2.4 nM, 약 2.6 nM, 약 2.8 nM, 약 3 nM, 약 3.2 nM, 약 3.4 nM, 약 3.6 nM, 약 3.8 nM, 약 4 nM, 약 4.2 nM, 약 4.4 nM, 약 4.6 nM, 약 4.8 nM, 약 5 nM, 약 5.2 nM, 약 5.4 nM, 약 5.6 nM, 약 5.8 nM, 약 6 nM, 약 6.2 nM, 약 6.4 nM, 약 6.6 nM, 약 6.8 nM, 약 7 nM, 약 7.2 nM, 약 7.4 nM, 약 7.6 nM, 약 7.8 nM, 약 8 nM, 약 8.2 nM, 약 8.4 nM, 약 8.6 nM, 약 8.8 nM, 약 9 nM, 약 9.2 nM, 약 9.4 nM, 약 9.6 nM, 약 9.8 nM 또는 약 10 nM 중 임의의 범위의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 1.2 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 1.23 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 1.4 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 6.4 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 약 7.42 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다.

일부 실시양태에서, 소르틸린 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린)에 대한 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 해리 상수 (K_D)는 포르테바이오 결합 검정을 사용하여 결정된다. 예시적인 포르테바이오 결합 검정에서, 친화도 측정은 일반적으로 이전에 기재된 바와 같이 수행된다 (Estep　et al., MAbs. 2013 Mar-Apr;5(2):270-8). 간략하게, 포르테바이오 친화도 측정은 항-소르틸린 항체를 AHQ 센서에 온라인으로 로딩함으로써 수행된다. 기준선 확립을 위해 센서는 30분 동안 검정 완충액에서 오프라인으로 평형화된 후, 60초 동안 온라인으로 모니터링된다. 아비드 결합 측정을 위해, 로딩된 항-소르틸린 항체를 갖는 센서는 100 nM 항원 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린, 예컨대 인간 또는 마우스 소르틸린 Fc 융합 단백질)에 노출된 후, 오프레이트 측정을 위해 검정 완충액으로 옮긴다. 추가의 아비드 결합은 비오틴화된 소르틸린 단백질, 예를 들어 인간 또는 마우스 소르틸린 단량체를 SA 센서 상에 로딩하고 용액 중 약 100 nM 항-소르틸린 항체에 노출시킴으로써 결정될 수 있다. 1가 결합 측정은 소르틸린, 예컨대 인간 또는 마우스 소르틸린 Fc 융합 단백질을 AHQ 센서에 로딩한 후, 약 100 nM의 항-소르틸린 항체 Fab에 노출함으로써 수득될 수 있다. 추가의 1가 측정은 비오틴화된 소르틸린 단백질, 예를 들어 인간 또는 마우스 소르틸린 단량체를 SA 센서에 로딩한 후, 이어서 용액 중 약 100 nM 항-소르틸린 항체 Fab에 노출함으로써 이루어질 수 있다. 동역학 데이터는 예를 들어 포르테바이오에 의해 제공된 데이터 분석 소프트웨어의 모델을 사용하여 1:1 결합을 사용하여 피팅될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 포르테바이오 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 0.5 nM 내지 약 2 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 포르테바이오 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 2 nM 내지 약 4 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 포르테바이오 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 0.9 nM, 약 0.96 nM, 약 0.98 nM, 약 1 nM, 약 1.18 nM, 약 1.2 nM 또는 약 1.24 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 포르테바이오 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 2.3 nM 또는 약 3.3 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 포르테바이오 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 0.5 nM 내지 약 2 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 포르테바이오 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 1 nM 내지 약 8 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 포르테바이오 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 0.6 nM, 약 0.68 nM, 약 0.7 nM, 약 0.76 nM, 약 0.77 nM, 약 0.8 nM, 약 0.9 nM, 약 1 nM, 약 1.11 nM 또는 약 1.2 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 포르테바이오 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 1.4 nM 또는 약 6.4 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다.

일부 실시양태에서, 소르틸린 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린)에 대한 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 해리 상수 (K_D)는 메소 스케일 디스커버리 검정 (예를 들어, MSD-SET 참조)을 사용하여 결정된다. 예시적인 MSD-SET 검정에서, 평형 친화도 측정은 이전에 기재된 바와 같이 수행된다 (Estep et al., (2013) MAb 5(2):270-8). 용액 평형 적정 (SET)은 항원 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린, 예컨대 비오틴화된 인간 소르틸린 또는 마우스 소르틸린)을 갖는 PBS + 0.1% IgG-비함유 BSA (PBSF)에서 수행되며, 이는 50 pM에서 일정하게 유지되고 10 nM에서 시작하여 항-소르틸린 항체의 3 내지 5배 연속 희석물과 함께 인큐베이션된다. 항-소르틸린 항체 (PBS 중 20 nM)를 표준 결합 MSD-ECL 플레이트에 밤새 4℃에서 또는 실온에서 30분 동안 코팅한다. 그 후, 플레이트를 700 rpm에서 진탕하면서 30분 동안 차단한 후, 이어서 세척 완충액 (PBSF + 0.05% Tween 20)으로 3회 세척한다. SET 샘플을 적용하고, 700 rpm에서 진탕하면서 150초 동안 플레이트에서 인큐베이션한 후, 이어서 1회 세척한다. 플레이트 상에 포획된 항원 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린, 예컨대 비오틴화된 인간 소르틸린 또는 마우스 소르틸린)은 플레이트에서 3분 동안 인큐베이션에 의해 PBSF에서 250 ng/mL 술포태그-라벨링 스트렙타비딘으로 검출된다. 플레이트를 세척 완충액으로 3회 세척한 후, 계면활성제를 갖는 1x 판독 완충액 T를 사용하여 MSD 섹터 이미저 2400 기구에서 판독한다. 퍼센트 유리 항원은 프리즘(Prism)에서 적정된 항체의 함수로 플롯팅되고, KD를 추출하기 위한 2차 방정식에 피팅된다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 MSD-SET 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 0.02 nM 내지 약 0.3 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 MSD-SET 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 1 nM 내지 약 5 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 MSD-SET 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 0.023 nM, 약 0.032 nM, 약 0.076 nM, 약 0.19 nM, 약 0.23 nM 또는 약 0.26 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 MSD-SET 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 2.3 nM 또는 약 3.3 nM의 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 MSD-SET 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 0.05 nM 내지 약 0.2 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 MSD-SET 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 1 nM 내지 약 8 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 MSD-SET 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 0.07 nM, 약 0.1 nM 또는 약 0.11 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어, MSD-SET 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 1.4 nM 또는 약 6.4 nM의 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다.

일부 실시양태에서, 소르틸린 (예를 들어, 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린)에 대한 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 해리 상수 (K_D)는 세포-기반 검정, 예컨대 세포 결합 검정을 사용하여 결정된다. 예시적인 세포 결합 검정에서, 세포 결합 친화도 측정은 인간 또는 마우스 소르틸린을 발현하는 세포, 예컨대 마우스 소르틸린으로 일시적으로 형질감염되거나 인간 소르틸린을 안정적으로 발현하는 HEK293T 세포를 사용하여 4℃에서 수행된다. 세포를 수확하고, PBS에서 세척하고, 항체의 K_D에 가까운 양의 항체와 함께 인큐베이션한다. 항체를 FACS 완충액 (PBS + 2% FBS + 0.01% NaAzide)에 희석한다. 얼음 위에서 1시간 동안 인큐베이션 후, 세포를 FACS 완충액에서 3회 세척하고, 항-인간 PE 접합된 2차 항체 (BD 바이오사이언시스(BD Biosciences), 1:100 희석)와 함께 30분 동안 얼음 위에서 인큐베이션한다. 그 후, 세포를 200 μl FACS 완충액에서 2회 세척하고, 후속적으로 FACS Canto 또는 iQE FACS 스크리닝 기구 (인텔리사이트 코포레이션(Intellicyt Corp))에서 분석한다. 인간 및/또는 마우스 소르틸린에 대한 결합을 PE의 중앙값 형광 강도 (MFI)로서 측정한다. 세포-발현 소르틸린에 대한 겉보기 친화도의 결정을 위해, 항체를 세포에 적정 (예를 들어, 인간 소르틸린의 경우 0.16-40 nM 및 마우스 소르틸린의 경우 0.39-50 nM)으로 첨가하고, 이들의 결합 K_D를 비-선형 곡선 피팅 (예를 들어, 변형된 OneSiteTotal, 그래프 패드 프리즘 사용)에 의해 결정한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 세포 결합 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 1 nM 내지 약 10 nM (예를 들어, 약 1 nM, 약 2 nM, 약 3 nM, 약 4 nM, 약 5 nM, 약 6 nM, 약 7 nM, 약 8 nM, 약 9 nM 또는 약 10 nM 중 어느 하나)의 세포 상에 발현된 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 세포 결합 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 2.17 nM의 세포 상에 발현된 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 세포 결합 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 3.16 nM의 세포 상에 발현된 인간 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 세포 결합 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 1 nM 내지 약 24 nM (예를 들어, 약 1 nM, 약 2 nM, 약 3 nM, 약 4 nM, 약 5 nM, 약 6 nM, 약 7 nM, 약 8 nM, 약 9 nM, 약 10 nM, 약 11 nM, 약 12 nM, 약 13 nM, 약 14 nM, 약 15 nM, 약 16 nM, 약 17 nM, 약 18 nM, 약 19 nM, 약 20 nM, 약 21 nM, 약 22 nM, 약 23 nM 또는 약 24 nM 중 어느 하나)의 세포 상에 발현된 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 예를 들어 세포 결합 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 7.42 nM의 세포 상에 발현된 마우스 소르틸린에 대한 해리 상수 (K_D)로 결합한다.

일부 실시양태에서, 소르틸린에 대한 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 K_D는 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 1가 항체 (예를 들어, Fab) 또는 1가 형태의 전장 항체를 사용하여 결정된다. 일부 실시양태에서, K_D는 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 2가 항체 및 단량체성 재조합 소르틸린 단백질을 사용하여 결정된다.

항-소르틸린 항체 활성

특정 측면에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 세포 수준 (예를 들어, 소르틸린의 세포 표면 수준, 소르틸린의 세포내 수준 및/또는 소르틸린의 총 수준)을 감소시키고/거나; 프로그래뉼린 수준 (예를 들어, 프로그래뉼린의 세포외 수준 및/또는 프로그래뉼린의 세포 수준)을 증가시키고/거나; 프로그래뉼린 및 소르틸린 사이의 상호작용 (예를 들어, 결합)을 억제한다. 특정 측면에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린의 세포외 수준을 증가시키고 소르틸린의 세포 수준을 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 소르틸린의 세포 수준의 감소는 소르틸린의 세포 표면 수준의 감소, 소르틸린의 세포내 수준의 감소, 소르틸린의 총 수준의 감소, 또는 이들의 임의의 조합이다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 (a) 소르틸린 분해, 소르틸린 절단, 소르틸린 내재화, 소르틸린 하향 조절 또는 이들의 임의의 조합을 유도함; (b) 하나 이상의 단백질과 상호작용하기 위해 이용가능한 소르틸린의 유효 수준을 감소시키거나 소르틸린의 분해를 유도하거나 또는 둘 모두에 의해 소르틸린 및 하나 이상의 단백질 사이의 상호작용을 억제함; (c) 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제함; (d) 소르틸린 및 프로-신경 성장 인자 (프로-NGF) 사이의 상호작용을 억제함; (e) 인간 소르틸린에 특이적으로 결합함; (f) 인간 소르틸린 및 마우스 소르틸린에 특이적으로 결합하거나, 인간 소르틸린, 마우스 소르틸린 및 시노몰구스 원숭이 소르틸린에 특이적으로 결합함; (g) 하나 이상의 프로그래뉼린 활성을 유도함; (h) 프로그래뉼린 또는 이의 단편의 엔도좀 내재화를 감소시킴; (i) 프로그래뉼린의 유효 농도를 증가시킴; (j) 세포 상에 발현된 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 억제함; (k) 하나 이상의 전염증성 매개체의 발현을 감소시킴; 및 이들의 임의의 조합이다.

본원에서 고려된 바와 같이, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 또한 뉴로트로핀, 예컨대 프로-뉴로트로핀, 프로-뉴로트로핀-3, 뉴로트로핀-3, 프로-뉴로트로핀-4/5, 뉴로트로핀-4/5, 프로-신경 성장 인자 (프로-NGF), 신경 성장 인자 (NGF), 프로-뇌-유래 신경영양 인자 (프로-BDNF), 뇌-유래 신경영양 인자 (BDNF), 및 뉴로트로핀-4 (NT-4), 뉴로텐신, 저친화도 신경 성장 인자 (NGF) 수용체 (p75), 지질단백질 리파제 (LpL), 아포지질단백질 AV (APOA5), 아포지질단백질 E (APOE), 예컨대 APOE2, APOE3 및 APOE4, 아밀로이드 전구체 단백질 (APP), A 베타 펩티드, PCSK9, p75NTR 및 수용체 연관 단백질 (RAP)을 제한 없이 포함하는 하나 이상의 단백질과 소르틸린의 상호작용 (예를 들어, 결합)을 억제할 수 있다.

본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 또한 시토카인, 예컨대 유형 I 및 II 인터페론, IL-6, IL12p70, IL12p40, IL-1β, TNF-α, IL-8, CRP, IL-20 패밀리 구성원, IL-33, LIF, OSM, CNTF, GM-CSF, IL-11, IL-12, IL-17, IL-18, CRP, 및 케모카인, 예컨대 CXCL1, CCL2, CCL3, CCL4 및 CCL5를 제한 없이 포함하는 하나 이상의 전염증성 매개체의 발현을 감소시킬 수 있다.

소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용의 억제

소르틸린은 프로그래뉼린과 직접적으로 상호작용 (예를 들어, 결합)하고 프로그래뉼린의 분해를 매개하는 것으로 제시된 바 있다 (예를 들어, 문헌 [Zheng, Y et al., (2011) PLoS ONE 6(6): e21023]). 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 감소, 차단 또는 억제한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린에 대한 프로그래뉼린 결합을 포화 항체 농도에서 20% 이상만큼 감소시키는 경우 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용 (예를 들어, 결합)을 억제하며, 이는 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예컨대 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 검정 또는 세포-기반 검정을 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 포화 항체 농도에서 대조군 항체에 비해 소르틸린에 대한 프로그래뉼린 결합을 감소시키는 경우 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용 (예를 들어, 결합)을 억제하며, 이는 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 검정 또는 세포-기반 검정을 사용하여 평가된다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린에 대한 프로그래뉼린의 결합을 적어도 약 20%, 적어도 약 21%, 적어도 약 22%, 적어도 약 23%, 적어도 약 24%, 적어도 약 25%, 적어도 약 26%, 적어도 약 27%, 적어도 약 28%, 적어도 약 29%, 적어도 약 30%, 적어도 약 31%, 적어도 약 32%, 적어도 약 33%, 적어도 약 34%, 적어도 약 35%, 적어도 약 36%, 적어도 약 37%, 적어도 약 38%, 적어도 약 39%, 적어도 약 40%, 적어도 약 41%, 적어도 약 42%, 적어도 약 43%, 적어도 약 44%, 적어도 약 45%, 적어도 약 46%, 적어도 약 47%, 적어도 약 48%, 적어도 약 49% 또는 적어도 약 50%만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린에 대한 프로그래뉼린의 결합을 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 100%만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린에 대한 인간 프로그래뉼린의 결합을 약 20% 내지 약 50%, 예를 들어 약 20%, 약 21%, 약 22%, 약 23%, 약 24%, 약 25%, 약 26%, 약 27%, 약 28%, 약 29%, 약 30%, 약 31%, 약 32%, 약 33%, 약 34%, 약 35%, 약 36%, 약 37%, 약 38%, 약 39%, 약 40%, 약 41%, 약 42%, 약 43%, 약 44%, 약 45%, 약 46%, 약 47%, 약 48%, 약 49% 또는 약 50% 중 어느 하나만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린에 대한 인간 프로그래뉼린의 결합을 약 21%만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린에 대한 인간 프로그래뉼린의 결합을 약 36%만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 마우스 소르틸린에 대한 마우스 프로그래뉼린의 결합을 약 20% 내지 약 50%, 예를 들어 약 20%, 약 21%, 약 22%, 약 23%, 약 24%, 약 25%, 약 26%, 약 27%, 약 28%, 약 29%, 약 30%, 약 31%, 약 32%, 약 33%, 약 34%, 약 35%, 약 36%, 약 37%, 약 38%, 약 39%, 약 40%, 약 41%, 약 42%, 약 43%, 약 44%, 약 45%, 약 46%, 약 47%, 약 48%, 약 49% 또는 약 50% 중 어느 하나만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 마우스 소르틸린에 대한 마우스 프로그래뉼린의 결합을 약 21%만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 마우스 소르틸린에 대한 마우스 프로그래뉼린의 결합을 약 24%만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 소르틸린에 대한 프로그래뉼린의 결합, 예를 들어 인간 소르틸린에 대한 인간 프로그래뉼린의 결합 또는 마우스 소르틸린에 대한 마우스 프로그래뉼린의 결합은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예컨대 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 검정 또는 세포-기반 검정을 사용하여 평가될 수 있다.

일부 실시양태에서, 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용, 예를 들어 결합은 세포-기반 검정을 사용하여 평가될 수 있다. 예시적인 세포-기반 검정에서, 재조합 인간 또는 마우스 프로그래뉼린 (아디포겐)은 제조업체의 지침에 따라 써모사이언티픽/피어스(ThermoScientific/Pierce)로부터의 EZ-링크 마이크로 NHS-PEG4 키트로 비오틴화된다. 인간 또는 마우스 소르틸린을 발현하는 세포는 관련 기술분야에 공지된 바와 같이 생성될 수 있다. 소르틸린-발현 세포 또는 대조군 세포를 수확하고 PBS에서 세척한다. 비오틴화된 인간 또는 마우스 프로그래뉼린을 항-소르틸린 항체 (10 μg/ml), 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체 또는 대조군 이소타입 항체를 갖거나 갖지 않는 PBS+ 2% FBS에 첨가하고, 얼음 위에서 2시간 동안 인큐베이션한다. 세포를 PBS+ 2% FBS에서 3회 세척한 후, 세포를 얼음 위에서 30분 동안 스트렙타비딘-APC (BD 바이오사이언시스, 1:100)에서 인큐베이션한다. 그 후, 세포를 다시 세척하고, PBS+ 2% FBS에서 재현탁하고, 예를 들어 FACSCanto™ 유동 세포계측기 (BD 바이오사이언시스, 캐나다 온타리오주 미시소거)에서 유동 세포계측법에 의해 분석한다. 프로그래뉼린 결합은 소르틸린 발현 세포 집단의 APC의 중앙값 형광 강도로서 측정된다. 본원에 기재된 세포-기반 검정의 일부 실시양태에서, 인간 또는 마우스 비오틴화된 프로그래뉼린은 0 nM 내지 약 100 nM의 증가하는 농도에서 사용된다. 본원에 기재된 세포-기반 검정의 일부 실시양태에서, 인간 또는 마우스 소르틸린-발현 세포를 67 nM의 항-소르틸린 항체, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체와 함께 15 nM 비오틴화된 인간 또는 마우스 프로그래뉼린과 함께 인큐베이션한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린에 대한 인간 프로그래뉼린의 결합을 약 20% 내지 약 50%, 예를 들어 약 20%, 약 21%, 약 22%, 약 23%, 약 24%, 약 25%, 약 26%, 약 27%, 약 28%, 약 29%, 약 30%, 약 31%, 약 32%, 약 33%, 약 34%, 약 35%, 약 36%, 약 37%, 약 38%, 약 39%, 약 40%, 약 41%, 약 42%, 약 43%, 약 44%, 약 45%, 약 46%, 약 47%, 약 48%, 약 49% 또는 약 50% 중 어느 하나만큼 감소시키며, 이는 세포-기반 검정, 예컨대 본원에 기재된 세포-기반 검정을 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린에 대한 인간 프로그래뉼린의 결합을 약 21%만큼 감소시키며, 이는 세포-기반 검정, 예컨대 본원에 기재된 세포-기반 검정을 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 인간 소르틸린에 대한 인간 프로그래뉼린의 결합을 약 36%만큼 감소시키며, 이는 세포-기반 검정, 예컨대 본원에 기재된 세포-기반 검정을 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 마우스 소르틸린에 대한 마우스 프로그래뉼린의 결합을 약 20% 내지 약 50%, 예를 들어 약 20%, 약 21%, 약 22%, 약 23%, 약 24%, 약 25%, 약 26%, 약 27%, 약 28%, 약 29%, 약 30%, 약 31%, 약 32%, 약 33%, 약 34%, 약 35%, 약 36%, 약 37%, 약 38%, 약 39%, 약 40%, 약 41%, 약 42%, 약 43%, 약 44%, 약 45%, 약 46%, 약 47%, 약 48%, 약 49% 또는 약 50% 중 어느 하나만큼 감소시키며, 이는 세포-기반 검정, 예컨대 본원에 기재된 세포-기반 검정을 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 마우스 소르틸린에 대한 마우스 프로그래뉼린의 결합을 약 21%만큼 감소시키며, 이는 세포-기반 검정, 예컨대 본원에 기재된 세포-기반 검정을 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 마우스 소르틸린에 대한 마우스 프로그래뉼린의 결합을 약 24%만큼 감소시키며, 이는 세포-기반 검정, 예컨대 본원에 기재된 세포-기반 검정을 사용하여 평가된다.

일부 실시양태에서, 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용은 시험관내 검정을 사용하여 평가될 수 있다. 예를 들어, 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용은 포르테바이오 및 표면 플라즈몬 공명 분석을 사용하여 평가될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Skeldal, S et al., (2012) J Biol Chem., 287:43798]; 및 [Andersen, OS et al., (2010) THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 285,12210-12222]). 예시적인 검정에서, 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용은 표면 플라즈몬 공명 (SPR) 분석을 사용하여 특징화된다. 고정화된 소르틸린에 대한 인간 또는 마우스 프로그래뉼린의 직접 결합, 뿐만 아니라 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 존재 또는 부재 하에 고정화된 프로그래뉼린에 대한 인간 또는 마우스 소르틸린의 결합의 결정은 표준 러닝 완충액 (10 mM HEPES, pH 7.4, 140 mM NaCl, 2 mM CaCl₂, 1 mM EGTA 및 0.005% Tween 20)으로서 CaHBS를 사용하여 비아코어2000 기구 (비아코어(Biacore), 스웨덴)에서 수행될 수 있다. 비아코어로부터의 바이오센서 칩 (CM5, 카탈로그 번호 BR-1000-14)은 NHS/EDC, 예를 들어 공급업체에 의해 기재된 바와 같은 방법을 사용하여 활성화된 후, 이어서 79 fmol/㎟의 단백질 밀도로 소르틸린으로 코팅되고, 천연 프로그래뉼린 단백질의 친화도 측정을 위해 사용될 수 있다. 리간드 결합 실험의 각 사이클 후 플로우 셀의 재생은 재생 완충액 (10 mM 글리신-HCl, pH 4.0, 500 mM NaCl, 20 mM EDTA 및 0.005% Tween 20)의 2개의 10-μl 펄스 및 0.001% SDS의 단일 주사에 의해 수행된다. 친화도 추정을 위한 센서그램의 피팅은 비아이밸류에이션(BIAevaluation) 버전 3.1을 사용하여 수행될 수 있다. 유사한 프로토콜에 따라, His-프로그래뉼린의 고정화는 또한 제조업체의 지침 (비아코어, 스웨덴)에 따라 NHS/EDC 커플링 키트를 사용하여 CM5 바이오센서 칩 상에서 수행될 수 있으며, 고정화된 단백질의 유사한 표면 밀도 (∼300 fmol/㎟)를 제공한다. 고정화된 프로그래뉼린을 갖는 바이오센서 칩은 또한 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 부재 또는 존재 하에 소르틸린의 결합을 검사하기 위해 사용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용은 면역검정, 예컨대 ELISA 검정을 사용하여 평가될 수 있다. 예시적인 검정에서, 인간 또는 마우스 소르틸린 (R&D 시스템스(R&D Systems))을 ELISA 플레이트 (PBS 중 2 μg/ml) 상에 밤새 고정화한다. 플레이트를 세척 완충액 (PBS+ 0.05% TWEEN20)에서 세척하고, 1시간 동안 37℃에서 결합 완충액 (PBS+ 1% BSA)으로 차단한다. 재조합 인간 또는 마우스 프로그래뉼린 (아디포겐)을 써모사이언티픽/피어스로부터의 EZ-링크 마이크로 NHS-PEG4 키트로 비오틴화시킨다. 비오틴화된 프로그래뉼린을 고정화된 소르틸린에 다양한 농도로 첨가하고, 실온에서 30분 동안 인큐베이션한다. 플레이트를 세척 완충액에서 3회 세척하고, 스트렙타비딘-HRP (결합 완충액 중 1:200, R&D 시스템스)와 함께 20분 동안 인큐베이션한다. 플레이트를 다시 3회 세척하고, 색상이 나타날 때까지 TMB 기질 용액과 함께 인큐베이션한다. 50ul의 2N 황산을 첨가함으로써 반응을 중지시키고, 바이오텍 시너지(Biotek Synergy) H1 플레이트 판독기를 사용하여 색상을 정량화한다. 데이터를 프리즘에서 분석하고 피팅한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체에 의한 프로그래뉼린 및 소르틸린 사이의 상호작용의 억제는 경쟁 검정, 예컨대 시험관내 경쟁 검정을 사용하여 평가된다. 예시적인 경쟁 검정에서, 표준 샌드위치 형식 비닝을 사용하는 포르테 바이오 옥텟 Red384 시스템 (팔 포르테 바이오 코포레이션(Pall Forte Bio Corporation), 미국 캘리포니아주 멘로 파크)을 사용한다. 대조군 항-표적 IgG를 AHQ 센서 상에 로딩하고, 센서 상의 비점유된 Fc-결합 부위를 비관련 IgG1 항체로 차단한다. 그 후, 센서를 100 nM 표적 항원에 노출시킨 후, 이어서 제2 항-표적 항체에 노출시킨다. 데이터 프로세싱은 포르테바이오의 데이터 분석 소프트웨어 7.0을 사용하여 수행된다. 항원 회합 후 제2 항체에 의한 추가 결합은 비점유된 에피토프 (비경쟁자)를 나타내는 반면, 결합 없음은 에피토프 차단 (경쟁자)을 나타낸다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린 수준 또는 발현을 감소시킴으로써 (예를 들어, 본원에 기재된 바와 같이) 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용 (예를 들어, 결합)을 억제 또는 감소시킨다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체에 의한 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용 (예를 들어, 결합)의 억제는 예를 들어 하기 기재된 바와 같이 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체에 의한 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용 (예를 들어, 결합)의 억제는 예를 들어 하기 기재된 바와 같이 세포외 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래한다.

소르틸린 수준의 감소

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 세포 수준을 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 세포 수준을 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 100%만큼 감소시키며, 이는 예를 들어 관련 기술분야에 공지되거나 본원에 기재된 임의의 시험관내, 세포-기반 또는 생체내 방법을 사용하여 평가된다. 일부 실시양태에서, 소르틸린의 세포 수준의 감소는 소르틸린의 세포 표면 수준의 감소, 소르틸린의 세포내 수준의 감소, 소르틸린의 총 수준의 감소, 또는 이들의 임의의 조합이다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 세포 표면 수준을 감소시킨다. 소르틸린의 세포 표면 수준은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예컨대 시험관내 세포-기반 검정 또는 적합한 생체내 방법을 사용하여 측정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 세포 표면 수준의 20% 이상의 감소를 유도하는 경우 소르틸린의 세포 표면 수준을 감소시키며, 이는 예를 들어 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 세포-기반 검정 또는 적합한 생체내 방법에 의해 측정된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 포화 항체 농도에서 및/또는 대조군 항체에 비해 소르틸린의 세포 표면 수준의 감소를 유도하는 경우 소르틸린의 세포 표면 수준을 감소시키며, 이는 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 세포-기반 검정 또는 적합한 생체내 방법에 의해 측정된 바와 같다.

예시적인 세포-기반 검정에서, 소르틸린을 발현하는 세포, 예컨대 인간 U-251 세포 또는 뮤린 Neuro-2A (N2A) 세포를 72시간 동안 50 nM 항-소르틸린 항체와 함께 인큐베이션한다. 그 후, 세포를 트립신으로 수확하고, PBS에서 세척하고, 또 다른 1차 항-소르틸린 항체 (예를 들어, 약 5 μg/ml의 농도)로 라벨링한다. 세포를 1시간 동안 얼음 위에서 1차 항체와 함께 인큐베이션한 후, 세포를 PBS+ 2% FBS에서 3회 세척한 후, 2차 항체, 예컨대 5 μg/ml 항-인간 PE 2차 항체 (서던 바이오테크(Southern Biotech)) 또는 또 다른 적합한 2차 항체와 함께 인큐베이션한다. 그 후, 세포를 다시 세척하고, 소르틸린의 세포 표면 수준을 유동 세포계측법을 사용하여, 예를 들어 FACSCanto™ 시스템을 사용하여 정량화하고, PE의 중앙값 형광 강도로서 측정한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린의 세포 표면 수준의 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 100%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 시험관내 세포-기반 검정을 사용하여, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린의 세포 표면 수준의 적어도 약 51.6%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 시험관내 세포-기반 검정을 사용하여, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린의 세포 표면 수준의 적어도 약 87.82%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 시험관내 세포-기반 검정을 사용하여, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린의 세포 표면 수준의 적어도 약 89%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 시험관내 세포-기반 검정을 사용하여, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 약 0.63 nM의 항-소르틸린 항체의 농도를 사용하여 평가된다.

일부 실시양태에서, 소르틸린의 세포 표면 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 개체로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 경우에, 인간 소르틸린의 세포 표면 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 인간으로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 경우에, 마우스 소르틸린의 세포 표면 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 마우스로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 경우에, 시노몰구스 원숭이 소르틸린의 세포 표면 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 시노몰구스 원숭이로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 세포 표면 수준의 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 100%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 생체내 방법에 의해 측정된 바와 같다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 세포내 수준을 감소시킨다. 소르틸린의 세포내 수준은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예컨대 시험관내 세포-기반 검정 또는 적합한 생체내 방법을 사용하여 측정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 세포내 수준의 20% 이상의 감소를 유도하는 경우 소르틸린의 세포내 수준을 감소시키며, 이는 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 세포-기반 검정 또는 적합한 생체내 방법에 의해 측정된 바와 같다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 포화 항체 농도에서 및/또는 대조군 항체에 비해 소르틸린의 세포내 수준의 감소를 유도하는 경우 소르틸린의 세포내 수준을 감소시키며, 이는 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 세포-기반 검정 또는 적합한 생체내 방법에 의해 측정된 바와 같다. 예를 들어, 소르틸린의 세포내 수준은 시험관내 세포 기반 검정에 의해 소르틸린을 발현하는 세포, 예를 들어 인간 소르틸린을 발현하는 인간 U251 세포, 또는 마우스 소르틸린을 발현하는 마우스 Neuro2A 세포를 사용하여 평가될 수 있다. 일부 경우에, 소르틸린의 세포내 수준은 시험관내 세포 기반 검정에 의해, 예를 들어 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구를 사용하여 평가될 수 있다. 일부 경우에, 인간 소르틸린의 세포내 수준은 시험관내 세포 기반 검정에 의해, 예를 들어 인간 대식세포, 인간 수지상 세포 및/또는 인간 백혈구를 사용하여 평가될 수 있다. 일부 경우에, 소르틸린의 세포내 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 개체로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 경우에, 인간 소르틸린의 세포내 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 인간으로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 경우에, 마우스 소르틸린의 세포내 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 마우스로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 경우에, 시노몰구스 원숭이 소르틸린의 세포내 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 시노몰구스 원숭이로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린의 세포내 수준의 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 100%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 또는 생체내 방법에 의해 측정된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린의 세포내 수준의 적어도 약 51.6%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 시험관내 세포-기반 검정에 의해 측정된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린의 세포내 수준의 적어도 약 89%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 시험관내 세포-기반 검정에 의해 측정된 바와 같다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 총 수준을 감소시킨다. 소르틸린의 총 수준은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예컨대 시험관내 세포-기반 검정 또는 적합한 생체내 방법을 사용하여 측정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 총 수준의 20% 이상의 감소를 유도하는 경우 소르틸린의 총 수준을 감소시키며, 이는 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 세포-기반 검정 또는 적합한 생체내 방법에 의해 측정된 바와 같다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 포화 항체 농도에서 및/또는 대조군 항체에 비해 소르틸린의 총 수준의 감소를 유도하는 경우 소르틸린의 총 수준을 감소시키며, 이는 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 세포-기반 검정 또는 적합한 생체내 방법에 의해 측정된 바와 같다. 예를 들어, 소르틸린의 총 수준은 시험관내 세포 기반 검정에 의해 소르틸린을 발현하는 세포, 예를 들어 인간 소르틸린을 발현하는 인간 U251 세포 또는 마우스 소르틸린을 발현하는 마우스 Neuro2A 세포를 사용하여 평가될 수 있다. 일부 경우에, 소르틸린의 총 수준은 시험관내 세포 기반 검정에 의해, 예를 들어 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구를 사용하여 평가될 수 있다. 일부 경우에, 인간 소르틸린의 총 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 인간으로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 경우에, 마우스 소르틸린의 총 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 마우스로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 경우에, 시노몰구스 원숭이 소르틸린의 총 수준은 생체내에서, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체로 치료된 시노몰구스 원숭이로부터 수득된 대식세포, 수지상 세포 및/또는 백혈구에서 평가될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린의 총 수준의 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 100%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 또는 생체내 방법에 의해 측정된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린의 총 수준의 적어도 약 51.6%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 시험관내 세포-기반 검정에 의해 측정된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 소르틸린의 총 수준의 적어도 약 89%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 시험관내 세포-기반 검정에 의해 측정된 바와 같다.

일부 실시양태에서, 소르틸린의 총 수준은 시험관내 세포 기반 검정에 의해 평가될 수 있다. 예시적인 검정에서, 백혈구, 예컨대 1차 단핵구, 예를 들어 인간 1차 단핵구는 제조업체의 프로토콜에 따라 로세테셉(RosetteSep) 인간 단핵구 풍부화 칵테일 (스템셀 테크놀로지스(STEMCELL Technologies))을 사용하여 혈액, 예를 들어 헤파린화된 인간 혈액 (퍼시픽 혈액 센터(Blood Centers of the Pacific))으로부터 단리된다. 단핵구는 10% 소태아 혈청 (하이클론(Hyclone)) 및 대식세포로의 분화를 유도하기 위해 50 μg/ml M-CSF (페프로텍(Peprotech)) 또는 수지상 세포로의 분화를 유도하기 위해 100 μg/ml IL-4 + 100 μg/ml GM-CSF (페프로텍)를 함유하는 RPMI (인비트로젠(Invitrogen))에 시딩된다. 5일 후, 세포를 수확한다. 대식세포의 경우, 플레이트에 부착된 세포만을 세포 스크레이퍼를 사용하여 수확한다. 수지상 세포의 경우, 현탁액 중 세포를 수집한다. PBS에서 세척 후, 세포를 12-웰 플레이트에 0.4 Mi/웰로 플레이팅한다. 50 나노몰의 대조군 항체 또는 Fab, 또는 전장 항-소르틸린 항체 (IgG) 또는 항-소르틸린 항체 Fab, 예를 들어 본 개시내용의 항-소르틸린 항체 또는 본 개시내용의 항-소르틸린 항체 Fab를 각 웰에 첨가하고 48시간 동안 인큐베이션한다. 그 후, 세포를 프로테아제 억제제 (라이프 테크놀로지스(Life Technologies))를 갖는 RIPA 완충액 (써모 피셔 사이언티픽(Thermo Fisher Scientific))을 사용하여 얼음 위에서 용해시켰다. 용해물을 수집하고 10,000xg에서 10분 동안 4℃에서 원심분리한다. 상청액을 수집하고, 단백질 농도를 제조업체의 지침 (써모 피셔 피어스)에 따라 BCA 키트를 사용하여 측정한다. 그 후, 세포 용해물을 이뮤노블롯에 의해 분석한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 백혈구 내 소르틸린의 총 수준을 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 99% 또는 100%만큼 감소시키며, 이는 예를 들어 시험관내 세포 기반 검정을 사용하여, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 백혈구 내 소르틸린의 총 수준의 적어도 약 51.6%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 시험관내 세포 기반 검정을 사용하여, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 평가된다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 백혈구 내 소르틸린의 총 수준의 적어도 약 89%의 감소를 유도하며, 이는 예를 들어 시험관내 세포 기반 검정을 사용하여, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 평가된다.

본원에서 사용된 바와 같이, 소르틸린 수준은 소르틸린을 코딩하는 유전자의 발현 수준; 소르틸린을 코딩하는 하나 이상의 전사체의 발현 수준; 소르틸린 단백질의 발현 수준; 및/또는 세포 내 및/또는 세포 표면 상에 존재하는 소르틸린 단백질의 양을 지칭할 수 있다. 일부 실시양태에서, 소르틸린 수준은 소르틸린의 유효 농도를 지칭한다. 유전자 발현, 전사, 번역, 및/또는 단백질 존재비 또는 편재화의 수준을 측정하기 위한 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 소르틸린 수준을 결정할 수 있다. 일부 실시양태에서, 소르틸린 단백질의 세포 수준, 예컨대 소르틸린 단백질의 세포 표면 수준, 소르틸린 단백질의 세포내 수준 및/또는 소르틸린 단백질의 총 수준은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예컨대 유동 세포계측법-기반 방법, 이뮤노블롯팅 방법, 예컨대 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 면역조직화학, 영상화 방법, 예컨대 형광 현미경검사법, 및 면역검정, 예컨대 ELISA를 사용하여 측정된다.

특정 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린 분해를 유도함으로써 소르틸린의 세포 수준 (예를 들어, 소르틸린의 세포 표면 수준, 소르틸린의 세포내 수준 및/또는 소르틸린의 총 수준)을 감소시킬 수 있다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린 분해를 유도한다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 하향조절을 유도함으로써 소르틸린의 세포 수준 (예를 들어, 소르틸린의 세포 표면 수준, 소르틸린의 세포내 수준 및/또는 소르틸린의 총 수준)을 감소시킬 수 있다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린 하향조절을 유도한다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 절단을 유도함으로써 소르틸린의 세포 수준 (예를 들어, 소르틸린의 세포 표면 수준, 소르틸린의 세포내 수준 및/또는 소르틸린의 총 수준)을 감소시킬 수 있다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린 절단을 유도한다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 내재화를 유도함으로써 소르틸린의 세포 수준 (예를 들어, 소르틸린의 세포 표면 수준, 소르틸린의 세포내 수준 및/또는 소르틸린의 총 수준)을 감소시킬 수 있다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린 내재화를 유도한다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 쉐딩(shedding)을 유도함으로써 소르틸린의 세포 수준 (예를 들어, 소르틸린의 세포 표면 수준, 소르틸린의 세포내 수준 및/또는 소르틸린의 총 수준)을 감소시킬 수 있다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린 쉐딩을 유도한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 탈감작화를 유도한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 리간드 모방체로서 작용하여 소르틸린을 일시적으로 활성화시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 세포 수준의 감소 및/또는 소르틸린 및 하나 이상의 소르틸린 리간드 사이의 상호작용 (예를 들어, 결합)의 억제를 유도하기 전에 리간드 모방체로서 작용하고 소르틸린을 일시적으로 활성화시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 분해를 유도하기 전에 리간드 모방체로서 작용하고 소르틸린을 일시적으로 활성화시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 절단을 유도하기 전에 리간드 모방체로서 작용하고 소르틸린을 일시적으로 활성화시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 내재화를 유도하기 전에 리간드 모방체로서 작용하고 소르틸린을 일시적으로 활성화시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 쉐딩을 유도하기 전에 리간드 모방체로서 작용하고 소르틸린을 일시적으로 활성화시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린 발현의 하향조절을 유도하기 전에 리간드 모방체로서 작용하고 소르틸린을 일시적으로 활성화시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린의 탈감작화를 유도하기 전에 리간드 모방체로서 작용하고 소르틸린을 일시적으로 활성화시킨다.

본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 마이크로몰, 나노몰 또는 피코몰 범위의 절반-최대 유효 농도 (EC₅₀) (예를 들어, 시험관내에서 측정될 때)로 소르틸린의 세포 수준을 감소시킬 수 있다. 특정 실시양태에서, 항체의 EC₅₀은 < 1 μM, < 100 nM, < 10 nM, < 1 nM, < 0.1 nM, < 0.01 nM 또는 < 0.001 nM 중 어느 하나이다. 특정 실시양태에서, 항체의 EC₅₀은 100 nM 미만, 90 nM 미만, 80 nM 미만, 70 nM 미만, 60 nM 미만, 50 nM 미만, 40 nM 미만, 30 nM 미만, 20 nM 미만, 10 nM 미만, 9 nM 미만, 8 nM 미만, 7 nM 미만, 6 nM 미만, 5 nM 미만, 4 nM 미만, 3 nM 미만, 2 nM 미만, 1 nM 미만, 0.5 nM 미만, 0.1 nM 미만, 0.09 nM 미만, 0.08 nM 미만, 0.07 nM 미만, 0.06 nM 미만, 0.05 nM 미만, 0.04 nM 미만, 0.03 nM 미만, 0.02 nM 미만, 0.01 nM 미만, 0.009 nM 미만, 0.008 nM 미만, 0.007 nM 미만, 0.006 nM 미만, 0.005 nM 미만, 0.004 nM 미만, 0.003 nM 미만, 0.002 nM 미만, 0.001 nM 미만, 또는 0.0009 nM 미만이다. 특정 실시양태에서, 항체의 EC₅₀은 예를 들어 시험관내에서 측정될 때 약 0.086 nM이다. 특정 실시양태에서, 항체의 EC₅₀은 약 1000 pM, 약 950 pM, 약 900 pM, 약 850 pM, 약 800 pM, 약 750 pM, 약 700 pM, 약 650 pM, 약 600 pM, 약 550 pM, 약 500 pM, 약 450 pM, 약 400 pM, 약 350 pM, 약 300 pM, 약 250 pM, 약 200 pM, 약 150 pM, 약 100 pM, 약 50 pM, 약 40 pM, 약 30 pM, 약 20 pM, 약 10 pM, 약 1 pM, 약 0.5 pM, 약 0.1 pM 또는 약 0.05 pM 중 어느 하나 미만이다. 일부 실시양태에서, 항체의 EC₅₀은 약 1000 pM, 약 950 pM, 약 900 pM, 약 850 pM, 약 800 pM, 약 750 pM, 약 700 pM, 약 650 pM, 약 600 pM, 약 550 pM, 약 500 pM, 약 450 pM, 약 400 pM, 약 350 pM, 약 300 pM, 약 250 pM, 약 200 pM, 약 150 pM, 약 100 pM, 약 50 pM, 약 40 pM, 약 30 pM, 약 20 pM, 약 10 pM, 약 1 pM, 약 0.5 pM 또는 약 0.1 pM의 상한, 및 약 0.05 pM, 약 0.1 pM, 약 0.5 pM, 약 1 pM, 약 10 pM, 약 20 pM, 약 30 pM, 약 40 pM, 약 50 pM, 약 100 pM, 약 150 pM, 약 200 pM, 약 250 pM, 약 300 pM, 약 350 pM, 약 400 pM, 약 450 pM, 약 500 pM, 약 550 pM, 약 600 pM, 약 650 pM, 약 700 pM, 약 750 pM, 약 800 pM, 약 850 pM, 약 900 pM 또는 약 950 pM의 독립적으로 선택된 하한을 갖는 범위 중 어느 하나일 수 있으며, 여기서 하한은 상한 미만이다. 일부 실시양태에서, 항체의 EC₅₀은 약 1 pM, 약 2 pM, 약 3 pM, 약 4 pM, 약 5 pM, 약 6 pM, 약 7 pM, 약 8 pM, 약 9 pM, 약 10 pM, 약 15 pM, 약 20 pM, 약 25 pM, 약 30 pM, 약 35 pM, 약 40 pM, 약 45 pM, 약 50 pM, 약 55 pM, 약 60 pM, 약 65 pM, 약 70 pM, 약 75 pM, 약 80 pM, 약 85 pM, 약 90 pM, 약 95 pM, 약 100 pM, 약 105 pM, 약 110 pM, 약 115 pM, 약 120 pM, 약 125 pM, 약 130 pM, 약 135 pM, 약 140 pM, 약 145 pM, 약 150 pM, 약 155 pM, 약 160 pM, 약 165 pM, 약 170 pM, 약 175 pM, 약 180 pM, 약 185 pM, 약 190 pM, 약 195 pM 또는 약 200 pM 중 어느 하나이다. 특정 실시양태에서, 항체의 EC₅₀은 약 86 pM이다.

항체 EC₅₀ 값을 측정하는 다양한 방법은 예를 들어 유동 세포계측법에 의한 것을 포함하여 관련 기술분야에 공지되어 있다. 일부 실시양태에서, EC₅₀은 소르틸린을 발현하는 세포, 예를 들어 소르틸린, 예를 들어 인간 소르틸린 또는 포유동물 소르틸린을 발현하도록 조작된 세포를 사용하여 시험관내에서 측정된다. 일부 실시양태에서, EC₅₀은 대략 4℃의 온도에서 측정된다. 일부 실시양태에서, EC₅₀은 대략 25℃의 온도에서 측정된다. 일부 실시양태에서, EC₅₀은 대략 35℃의 온도에서 측정된다. 일부 실시양태에서, EC₅₀은 대략 37℃의 온도에서 측정된다. 일부 실시양태에서, EC₅₀은 1가 항체 (예를 들어, Fab) 또는 1가 형태의 전장 항체를 사용하여 결정된다. 일부 실시양태에서, EC₅₀은 향상된 Fc 수용체 결합을 나타내는 불변 영역을 함유하는 항체를 사용하여 결정된다. 일부 실시양태에서, EC₅₀은 감소된 Fc 수용체 결합을 나타내는 불변 영역을 함유하는 항체를 사용하여 결정된다.

프로그래뉼린 수준의 증가

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린 수준을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 프로그래뉼린 수준은 제한 없이 프로그래뉼린의 세포외 수준, 프로그래뉼린의 세포내 수준 및 프로그래뉼린의 총 수준을 지칭할 수 있다. 일부 실시양태에서, 프로그래뉼린 수준의 증가는 프로그래뉼린의 세포외 수준의 증가를 포함한다. 일부 실시양태에서, 프로그래뉼린 수준의 증가는 프로그래뉼린의 세포내 수준의 증가를 포함한다. 일부 실시양태에서, 프로그래뉼린 수준의 증가는 프로그래뉼린의 총 수준의 증가를 포함한다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 또는 생체내 (예를 들어, 개체의 뇌, 혈액 및/또는 말초 장기에서) 프로그래뉼린 수준을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린 수준의 20% 이상의 증가를 유도하는 경우 프로그래뉼린 수준을 증가시키며, 이는 예를 들어 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 세포-기반 검정 또는 조직-기반 (예컨대 뇌 조직-기반) 검정에 의해 측정된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 포화 항체 농도에서 및/또는 대조군 항체에 비해 프로그래뉼린 수준의 증가를 유도하는 경우 프로그래뉼린 수준을 증가시키며, 이는 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 임의의 시험관내 세포-기반 검정 또는 조직-기반 (예컨대 뇌 조직-기반) 검정에 의해 측정된 바와 같다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 프로그래뉼린의 세포외 수준을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 프로그래뉼린의 세포외 수준을 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 프로그래뉼린의 세포외 수준을 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275% 또는 적어도 약 300%만큼 증가시킨다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 (예를 들어, 개체의 뇌, 혈액 및/또는 말초 장기에서) 프로그래뉼린의 세포외 수준을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 프로그래뉼린의 세포외 수준을 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 프로그래뉼린의 세포외 수준을 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275% 또는 적어도 약 300%만큼 증가시킨다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 프로그래뉼린의 세포내 수준을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%만큼 시험관내 프로그래뉼린의 세포내 수준을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275% 또는 적어도 약 300%만큼 시험관내 프로그래뉼린의 세포내 수준을 증가시킨다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 (예를 들어, 개체의 뇌, 혈액 및/또는 말초 장기에서) 프로그래뉼린의 세포내 수준을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 프로그래뉼린의 세포내 수준을 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 프로그래뉼린의 세포내 수준을 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275% 또는 적어도 약 300%만큼 증가시킨다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 프로그래뉼린의 총 수준을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 프로그래뉼린의 총 수준을 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 프로그래뉼린의 총 수준을 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275% 또는 적어도 약 300%만큼 증가시킨다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 (예를 들어, 개체의 뇌, 혈액 및/또는 말초 장기에서) 프로그래뉼린의 총 수준을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 프로그래뉼린의 총 수준을 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 프로그래뉼린의 총 수준을 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275% 또는 적어도 약 300%만큼 증가시킨다.

본원에서 사용된 바와 같이, 프로그래뉼린 수준은 프로그래뉼린을 코딩하는 유전자의 발현 수준; 프로그래뉼린을 코딩하는 하나 이상의 전사체의 발현 수준; 프로그래뉼린 단백질의 발현 수준; 및/또는 세포로부터 분비되고/거나 세포 내에 존재하는 프로그래뉼린 단백질의 양을 지칭할 수 있다. 일부 실시양태에서, 프로그래뉼린 수준은 프로그래뉼린의 유효 농도를 지칭한다. 유전자 발현, 전사, 번역, 단백질 존재비, 단백질 분비, 및/또는 단백질 편재화의 수준을 측정하기 위한 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 프로그래뉼린 수준을 결정할 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린 분비를 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100% 중 어느 하나만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린 분비를 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275% 또는 적어도 약 300% 중 어느 하나만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린 분비를 적어도 약 1.1배, 적어도 약 1.2배, 적어도 약 1.3배, 적어도 약 1.4배, 적어도 약 1.5배, 적어도 약 1.6배, 적어도 약 1.7배, 적어도 약 1.8배, 적어도 약 1.9배, 적어도 약 2배, 적어도 약 2.1배, 적어도 약 2.2배, 적어도 약 2.3배, 적어도 약 2.4배, 적어도 약 2.5배, 적어도 약 2.6배, 적어도 약 2.7배, 적어도 약 2.8배, 적어도 약 2.9배, 적어도 약 3배, 적어도 약 3.1배, 적어도 약 3.2배, 적어도 약 3.3배, 적어도 약 3.4배, 적어도 약 3.5배, 적어도 약 3.6배, 적어도 약 3.7배, 적어도 약 3.8배, 적어도 약 3.9배 또는 적어도 약 4배 중 어느 하나만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린 분비를 약 1.9배만큼 증가시킨다.

프로그래뉼린 분비를 측정하는 다양한 방법은 예를 들어 ELISA에 의한 것을 포함하여 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예시적인 검정에서, U-251 인간 성상세포종 세포를 96-웰 디쉬에 시딩하고 밤새 인큐베이션한다. 다음날 아침, 항-소르틸린 항체 (예를 들어, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체), 뿐만 아니라 대조군 항체 (예를 들어, 양성 대조군 항체, 예컨대 R&D 시스템스로부터의 염소 항-인간 소르틸린 (gtSort), AF3154, 및/또는 이소타입 대조군 항체, 예컨대 염소 IgG, ADI-88 (인간 IgG1) 및 ADI-89 (인간 IgG1))를 50 nM 또는 5 nM 최종 희석물로 첨가하고, 그러므로 세포를 약 72시간 동안 인큐베이션한다. 그 후, 세포 배양 배지를 수집하고, 배지 샘플 중 프로그래뉼린의 농도를 R&D 시스템스 인간 프로그래뉼린 듀오세트 ELISA 키트를 사용하여 측정한다. 일부 실시양태에서, EC₅₀은 인간 소르틸린을 발현하는 세포를 사용하여 시험관내에서 측정된다. 일부 실시양태에서, 프로그래뉼린 분비는 1가 항체 (예를 들어, Fab) 또는 1가 형태의 전장 항체를 사용하여 결정된다. 일부 실시양태에서, 프로그래뉼린 분비는 향상된 Fc 수용체 결합을 나타내는 불변 영역을 함유하는 항체를 사용하여 결정된다. 일부 실시양태에서, 프로그래뉼린 분비는 감소된 Fc 수용체 결합을 나타내는 불변 영역을 함유하는 항체를 사용하여 결정된다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 프로그래뉼린의 유효 농도를 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 프로그래뉼린의 유효 농도를 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 시험관내 프로그래뉼린의 유효 농도를 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275% 또는 적어도 약 300%만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 (예를 들어, 개체의 뇌, 혈액 및/또는 말초 장기에서) 프로그래뉼린의 유효 농도를 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 프로그래뉼린의 유효 농도를 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 적어도 약 100%만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 생체내 프로그래뉼린의 유효 농도를 적어도 약 100%, 적어도 약 125%, 적어도 약 150%, 적어도 약 175%, 적어도 약 200%, 적어도 약 225%, 적어도 약 250%, 적어도 약 275% 또는 적어도 약 300%만큼 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린의 세포외 수준, 프로그래뉼린의 세포내 수준, 프로그래뉼린의 총 수준, 프로그래뉼린을 코딩하는 유전자의 발현 수준, 프로그래뉼린을 코딩하는 하나 이상의 전사체의 발현 수준, 프로그래뉼린 단백질의 발현 수준, 세포로부터 분비된 프로그래뉼린 단백질의 양, 및/또는 세포 내에 존재하는 프로그래뉼린 단백질의 양을 증가시킴으로써 시험관내 또는 생체내 프로그래뉼린의 유효 농도를 증가시킨다. 프로그래뉼린의 유효 농도를 측정하기 위해 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법, 예컨대 본원에 기재된 임의의 시험관내, 생체내 또는 세포-기반 검정, 예를 들어 ELISA, 웨스턴 블롯, 유동 세포계측법 및 질량 분광법이 사용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린 또는 이의 단편의 엔도좀 내재화를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린 또는 이의 단편의 엔도좀 내재화 및 분해를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 소르틸린 및 프로그래뉼린 사이의 상호작용을 감소, 억제 또는 차단함으로써 프로그래뉼린 또는 이의 단편의 엔도좀 내재화를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린 또는 이의 단편의 엔도좀 내재화를 감소시키고, 프로그래뉼린의 수준, 예를 들어 프로그래뉼린의 세포외 수준을 증가시킨다. 영상화 방법, 예컨대 형광 현미경검사법, 공초점 현미경검사법 또는 내부 전반사 영상화 (TIRF), 또는 유동 세포계측법을 제한 없이 포함하는, 단백질, 예컨대 프로그래뉼린의 내재화 (예를 들어, 엔도좀 내재화)를 측정하기 위한 방법 및 시약은 관련 기술분야에 공지되어 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 하나 이상의 프로그래뉼린 활성을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 프로그래뉼린 수준 (예를 들어, 상기 기재된 바와 같음), 예컨대 프로그래뉼린의 유효 농도, 프로그래뉼린의 세포외 수준, 프로그래뉼린의 세포내 수준, 프로그래뉼린의 총 수준, 프로그래뉼린을 코딩하는 유전자의 발현 수준, 프로그래뉼린을 코딩하는 하나 이상의 전사체의 발현 수준, 프로그래뉼린 단백질의 발현 수준, 세포로부터 분비된 프로그래뉼린 단백질의 양, 및/또는 세포 내에 존재하는 프로그래뉼린 단백질의 양을 증가시킴으로써 하나 이상의 프로그래뉼린 활성을 증가시킨다.

일부 실시양태에서, 임의의 상기 실시양태에 따른 항-소르틸린 항체는 임의의 특색을 개별적으로 또는 조합하여 혼입할 수 있다.

항체 단편

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 항체 단편이다. 항체 단편은 Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')₂, Fv 및 scFv 단편, 및 하기 기재된 다른 단편을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 특정 항체 단편의 검토에 대해서는, 문헌 [Hudson et al. Nat. Med. 9:129-134 (2003)]을 참조한다. scFv 단편의 검토에 대해서는, 예를 들어 WO 93/16185; 및 미국 특허 번호 5571894 및 5587458을 참조한다. 샐비지 수용체 결합 에피토프 잔기를 포함하고 증가된 생체내 반감기를 갖는 Fab 및 F(ab')₂ 단편의 논의에 대해서는, 미국 특허 번호 5869046을 참조한다.

디아바디는 2가 또는 이중특이적일 수 있는 2개의 항원-결합 부위를 갖는 항체 단편이다. 예를 들어 EP404097; WO 1993/01161; 문헌 [Hudson et al. Nat. Med. 9:129-134 (2003)]을 참조한다. 트리아바디 및 테트라바디는 또한 문헌 [Hudson et al. Nat. Med. 9:129-134 (2003)]에 기재되어 있다. 단일-도메인 항체는 항체의 중쇄 가변 도메인의 전부 또는 일부 또는 경쇄 가변 도메인의 전부 또는 일부를 포함하는 항체 단편이다. 특정 실시양태에서, 단일-도메인 항체는 인간 단일-도메인 항체이다 (예를 들어, 미국 특허 번호 6248516 참조).

항체 단편은 본원에 기재된 바와 같이 재조합 숙주 세포 (예를 들어, 이. 콜라이(E. coli) 또는 파지)에 의한 생산 뿐만 아니라 무손상 항체의 단백질분해 소화를 포함하나 이에 제한되지는 않는 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다.

일부 실시양태에서, 항체 단편은 제2 소르틸린 항체 및/또는 하기로부터 선택된 질환-유발 단백질에 특이적으로 결합하는 하나 이상의 항체와 조합하여 사용된다: 아밀로이드 베타 또는 이의 단편, Tau, IAPP, 알파-시누클레인, TDP-43, FUS 단백질, 프리온 단백질, PrPSc, 헌팅틴, 칼시토닌, 슈퍼옥시드 디스뮤타제, 아탁신, 루이소체, 심방 나트륨 이뇨 인자, 섬 아밀로이드 폴리펩티드, 인슐린, 아포지질단백질 AI, 혈청 아밀로이드 A, 메딘, 프로락틴, 트랜스티레틴, 리소자임, 베타 2 마이크로글로불린, 겔솔린, 케라토에피텔린, 시스타틴, 이뮤노글로불린 경쇄 AL, S-IBM 단백질, 반복-연관 비-ATG (RAN) 번역 산물, 디펩티드 반복 (DPR) 펩티드, 글리신-알라닌 (GA) 반복 펩티드, 글리신-프롤린 (GP) 반복 펩티드, 글리신-아르기닌 (GR) 반복 펩티드, 프롤린-알라닌 (PA) 반복 펩티드, 프롤린-아르기닌 (PR) 반복 펩티드, 및 이들의 임의의 조합.

키메라 및 인간화 항체

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 키메라 항체이다. 특정 키메라 항체는 예를 들어 미국 특허 번호 4816567에 기재되어 있다. 한 예에서, 키메라 항체는 비인간 가변 영역 (예를 들어, 마우스, 래트, 햄스터, 토끼 또는 비인간 영장류, 예컨대 원숭이로부터 유래된 가변 영역) 및 인간 불변 영역을 포함한다. 추가 예에서, 키메라 항체는 클래스 또는 서브클래스가 부모 항체의 것으로부터 변화된 "클래스 스위치된" 항체이다. 키메라 항체는 이의 항원-결합 단편을 포함한다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 인간화 항체이다. 전형적으로, 비인간 항체는 부모 비인간 항체의 특이성 및 친화도를 보유하면서 인간에 대한 면역원성을 감소시키기 위해 인간화된다. 특정 실시양태에서, 인간화 항체는 인간에서 실질적으로 비면역원성이다. 특정 실시양태에서, 인간화 항체는 인간화 항체가 유래된 또 다른 종으로부터의 항체와 표적에 대해 실질적으로 동일한 친화도를 갖는다. 예를 들어 미국 특허 번호 5530101, 5693761; 5693762; 및 5585089를 참조한다. 특정 실시양태에서, 이의 면역원성을 감소시키면서 항원 결합 도메인의 천연 친화도를 감쇠시키지 않고 변형될 수 있는 항체 가변 도메인의 아미노산이 식별된다. 예를 들어 미국 특허 번호 5766886 및 5869619를 참조한다. 일반적으로, 인간화 항체는 HVR (또는 이의 일부)이 비인간 항체로부터 유래되고 FR (또는 이의 일부)이 인간 항체 서열로부터 유래되는 하나 이상의 가변 도메인을 포함한다. 인간화 항체는 또한 임의로 인간 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 것이다. 일부 실시양태에서, 인간화 항체의 일부 FR 잔기는 예를 들어 항체 특이성 또는 친화도를 복구 또는 개선하기 위해 비인간 항체 (예를 들어, HVR 잔기가 유래된 항체)로부터의 상응하는 잔기로 치환된다.

인간화 항체 및 이의 제조 방법은 예를 들어 문헌 [Almagro et al. Front. Biosci. 13:161 9-1633 (2008)]에서 검토되며, 예를 들어 미국 특허 번호 5821337, 7527791, 6982321 및 7087409에 추가로 기재되어 있다. 인간화를 위해 사용될 수 있는 인간 프레임워크 영역은 하기를 포함하나 이에 제한되지는 않는다: "최적-피팅" 방법을 사용하여 선택된 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Sims et al. J. Immunol. 151:2296 (1993)] 참조); 경쇄 또는 중쇄 가변 영역의 특정한 서브그룹의 인간 항체의 컨센서스 서열로부터 유래된 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Carter et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:4285 (1992)]; 및 [Presta et al., J. Immunol. 151 :2623 (1993)] 참조); 인간 성숙 (체세포 돌연변이된) 프레임워크 영역 또는 인간 생식계열 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Almagro and Fransson Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)] 참조); 및 스크리닝 FR 라이브러리로부터 유래된 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Baca et al. J. Biol. Chem. 272:10678-10684 (1997)] 및 [Rosok et al. J. Biol. Chem. 271:22611-22618 (1996)] 참조).

인간 항체

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 인간 항체이다. 인간 항체는 관련 기술분야에 공지된 다양한 기술을 사용하여 생산될 수 있다. 인간 항체는 일반적으로 문헌 [van Dijk et al. Curr. Opin. Pharmacol. 5:368-74 (2001)] 및 [Lonberg Curr. Opin. Immunol. 20:450-459 (2008)]에 기재되어 있다.

인간 항체는 항원 챌린지에 반응하여 무손상 인간 항체 또는 인간 가변 영역을 갖는 무손상 항체를 생성하도록 변형된 트랜스제닉 동물에 면역원을 투여함으로써 제조될 수 있다. 이러한 마우스가 마우스 항체의 부재 하에 인간 항체를 생산할 것이라고 예상하여 인간 Ig 유전자좌의 큰 단편으로 마우스 항체 생산에서 결핍된 마우스 계통을 조작할 수 있다. 큰 인간 Ig 단편은 항체 생산 및 발현의 적절한 조절 뿐만 아니라 큰 가변 유전자 다양성을 보존할 수 있다. 항체 다양화 및 선택을 위한 마우스 기계를 이용하고 인간 단백질에 대한 면역학적 관용성의 결여를 이용함으로써, 이들 마우스 계통에서 재생산된 인간 항체 레퍼토리는 인간 항원을 포함하여 임의의 관심 항원에 대한 높은 친화도 완전 인간 항체를 생성할 수 있다. 하이브리도마 기술을 사용하여, 원하는 특이성을 갖는 항원-특이적 인간 MAb를 생산하고 선택할 수 있다. 특정 예시적인 방법은 미국 특허 번호 5545807, EP 546073 및 EP 546073에 기재되어 있다. 또한, 예를 들어 미국 특허 번호 6075181 및 6150584 (제노마우스(XENOMOUSE)™ 기술을 설명함); 미국 특허 번호 5770429 (HUMAB® 기술을 설명함); 미국 특허 번호 7041870 (K-M 마우스(K-M MOUSE)® 기술을 설명함) 및 미국 특허 출원 공개 번호 US 2007/0061900 (벨로시마우스(VELOCIMOUSE)® 기술을 설명함)을 참조한다. 이러한 동물에 의해 생성된 무손상 항체로부터의 인간 가변 영역은 예를 들어 상이한 인간 불변 영역과 조합함으로써 추가로 변형될 수 있다.

인간 항체는 또한 하이브리도마-기반 방법에 의해 제조될 수 있다. 인간 모노클로날 항체의 생산을 위한 인간 골수종 및 마우스-인간 이종골수종 세포주가 기재되어 있다 (예를 들어, 문헌 [Kozbor J. Immunol. 133:3001 (1984)] 및 [Boerner et al. J. Immunol. 147:86 (1991)] 참조). 인간 B-세포 하이브리도마 기술을 통해 생성된 인간 항체는 또한 문헌 [Li et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1 03:3557-3562 (2006)]에 기재되어 있다. 추가 방법은 예를 들어 미국 특허 번호 7189826 (하이브리도마 세포주로부터의 모노클로날 인간 IgM 항체의 생산을 설명함)에 기재된 것을 포함한다. 인간 하이브리도마 기술 (트리오마(Trioma) 기술)은 또한 문헌 [Vollmers et al. Histology and Histopathology 20(3):927-937 (2005)] 및 [Vollmers et al. Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology 27(3):185-91 (2005)]에 기재되어 있다. 인간 항체는 또한 인간-유래 파지 디스플레이 라이브러리로부터 선택된 Fv 클론 가변 도메인 서열을 단리함으로써 생성될 수 있다. 그 후, 이러한 가변 도메인 서열은 원하는 인간 불변 도메인과 조합될 수 있다. 항체 라이브러리로부터 인간 항체를 선택하는 기술은 하기 기재되어 있다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 시험관내 방법 및/또는 원하는 활성 또는 활성들을 갖는 항체에 대한 조합적 라이브러리의 스크리닝에 의해 단리된 인간 항체이다. 적합한 예는 파지 디스플레이 (CAT, 모르포시스(Morphosys), 다이액스(Dyax), 바이오사이트(Biosite)/메다렉스(Medarex), 소마(Xoma), 심포젠(Symphogen), 알렉시온(Alexion) (이전에 프롤리페론(Proliferon)), 아피메드(Affimed)), 리보솜 디스플레이 (CAT), 효모-기반 플랫폼 (아디맙(Adimab)) 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 특정 파지 디스플레이 방법에서, VH 및 VL 유전자의 레퍼토리는 폴리머라제 연쇄 반응 (PCR)에 의해 별도로 클로닝되고 파지 라이브러리에서 무작위로 재조합되며, 이는 그 후 문헌 [Winter et al. Ann. Rev. Immunol. 12: 433-455 (1994)]에 기재된 바와 같이 항원-결합 파지에 대해 스크리닝될 수 있다. 예를 들어, 파지 디스플레이 라이브러리를 생성하고, 이러한 라이브러리를 원하는 결합 특징을 보유하는 항체에 대해 스크리닝하는 다양한 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다. 또한, 문헌 [Sidhu et al. J. Mol. Biol. 338(2): 299-310, 2004]; [Lee et al. J. Mol. Biol. 340(5): 1073-1093, 2004]; [Fellouse Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34):12467-12472 (2004)]; 및 [Lee et al. J. Immunol. Methods 284(2):1 19-132 (2004)]을 참조한다. 파지는 전형적으로 항체 단편을 단일-쇄 Fv (scFv) 단편 또는 Fab 단편으로서 제시한다. 면역화된 공급원으로부터의 라이브러리는 하이브리도마 구축의 요구 없이 면역원에 대한 고친화도 항체를 제공한다. 대안적으로, 문헌 [Griffiths et al. EMBO J. 12: 725-734 (1993)]에 기재된 바와 같이, 나이브 레퍼토리는 (예를 들어, 인간으로부터) 클로닝되어 임의의 면역화 없이 폭넓은 범위의 비-자기 및 또한 자기-항원에 대한 항체의 단일 공급원을 제공할 수 있다. 최종적으로, 문헌 [Hoogenboom et al. J. Mol. Biol., 227: 381-388, 1992]에 기재된 바와 같이, 나이브 라이브러리는 또한 줄기 세포로부터의 비재배열된 V-유전자 세그먼트를 클로닝하고, 무작위 서열을 포함하는 PCR 프라이머를 사용하여 고도로 가변 HVR3 영역을 코딩하고, 시험관내에서 재배열을 성취함으로써 합성적으로 제조될 수 있다. 인간 항체 파지 라이브러리를 설명하는 특허 공보는 예를 들어 미국 특허 번호 5750373, 및 미국 특허 공개 번호 2007/0292936 및 2009/0002360을 포함한다. 인간 항체 라이브러리로부터 단리된 항체는 본원에서 인간 항체 또는 인간 항체 단편으로 간주된다.

Fc 영역을 포함하는 불변 영역

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, Fc 영역은 인간 IgG1, IgG2, IgG3 및/또는 IgG4 이소타입이다. 일부 실시양태에서, 항체는 IgG 클래스, IgM 클래스 또는 IgA 클래스의 것이다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 특정 실시양태에서, 항체는 IgG2 이소타입을 갖는다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 IgG2 불변 영역을 함유한다. 일부 실시양태에서, 인간 IgG2 불변 영역은 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 억제성 Fc 수용체에 결합한다. 특정 실시양태에서, 억제성 Fc 수용체는 억제성 Fc-감마 수용체 IIB (FcγIIB)이다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 특정 실시양태에서, 항체는 IgG1 이소타입을 갖는다. 일부 실시양태에서, 항체는 마우스 IgG1 불변 영역을 함유한다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 IgG1 불변 영역을 함유한다. 일부 실시양태에서, 인간 IgG1 불변 영역은 Fc 영역을 포함한다. 예시적인 인간 IgG1 중쇄 불변 영역은 서열식별번호: 28 또는 서열식별번호: 29에 제공된다. 일부 실시양태에서, 항체는 억제성 Fc 수용체에 결합한다. 특정 실시양태에서, 억제성 Fc 수용체는 억제성 Fc-감마 수용체 IIB (FcγIIB)이다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 특정 실시양태에서, 항체는 IgG4 이소타입을 갖는다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 IgG4 불변 영역을 함유한다. 일부 실시양태에서, 인간 IgG4 불변 영역은 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 억제성 Fc 수용체에 결합한다. 특정 실시양태에서, 억제성 Fc 수용체는 억제성 Fc-감마 수용체 IIB (FcγIIB)이다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 특정 실시양태에서, 항체는 하이브리드 IgG2/4 이소타입을 갖는다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 IgG2의 EU 넘버링에 따른 아미노산 118 내지 260 및 인간 IgG4의 EU 넘버링에 따른 아미노산 261-447을 포함하는 아미노산 서열을 포함한다 (WO 1997/11971; WO 2007/106585).

일부 실시양태에서, Fc 영역은 아미노산 치환을 포함하지 않는 Fc 영역을 포함하는 상응하는 항체와 비교하여 보체를 활성화시키지 않으면서 클러스터링을 증가시킨다.

또한, 이펙터 기능을 변형하고/거나 항체의 혈청 반감기를 증가시키도록 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 변형하는 것이 바람직할 수 있다. 예를 들어, 불변 영역 상의 Fc 수용체 결합 부위는 특정 Fc 수용체, 예컨대 FcγRI, FcγRII 및/또는 FcγRIII에 대한 결합 친화도를 제거 또는 감소시켜 항체-의존적 세포-매개 세포독성을 감소시키도록 변형 또는 돌연변이될 수 있다. 일부 실시양태에서, 이펙터 기능은 항체의 Fc 영역 (예를 들어, IgG의 CH2 도메인에서)의 N-글리코실화를 제거함으로써 손상된다. 일부 실시양태에서, 이펙터 기능은 WO 99/58572 및 문헌 [Armour et al. Molecular Immunology 40: 585-593 (2003)]; [Reddy et al. J. Immunology 164:1925-1933 (2000)]에 기재된 바와 같이 인간 IgG의 233-236, 297 및/또는 327-331과 같은 영역을 변형함으로써 손상된다. 다른 실시양태에서, 또한, ITIM-함유 FcgRIIb (CD32b)에 대한 결합 선택성을 증가시켜, 예를 들어 항체-의존적 세포-매개 세포독성 및 항체-의존적 세포 포식작용을 포함한 체액성 반응을 활성화시키지 않으면서 인접한 세포 상의 항-소르틸린 항체의 클러스터링을 증가시키도록 이펙터 기능을 변형하도록 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 변형하는 것이 바람직할 수 있다.

항체의 혈청 반감기를 증가시키기 위해, 예를 들어 미국 특허 5739277에 기재된 바와 같이 샐비지 수용체 결합 에피토프를 항체 (특히 항체 단편) 내로 혼입할 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같은 용어 "샐비지 수용체 결합 에피토프"는 IgG 분자의 생체내 혈청 반감기를 증가시키는 것을 담당하는 IgG 분자 (예를 들어, IgG₁, IgG₂, IgG₃ 또는 IgG₄)의 Fc 영역의 에피토프를 지칭한다.

다중특이적 항체

다중특이적 항체는 동일한 또는 또 다른 폴리펩티드 (예를 들어, 본 개시내용의 하나 이상의 소르틸린 폴리펩티드) 상의 것들을 비롯한 적어도 2개의 상이한 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 항체이다. 일부 실시양태에서, 다중특이적 항체는 이중특이적 항체일 수 있다. 일부 실시양태에서, 다중특이적 항체는 삼중특이적 항체일 수 있다. 일부 실시양태에서, 다중특이적 항체는 사중특이적 항체일 수 있다. 이러한 항체는 전장 항체 또는 항체 단편 (예를 들어, F(ab')₂ 이중특이적 항체)으로부터 유래될 수 있다. 일부 실시양태에서, 다중특이적 항체는 소르틸린 상의 제1 부위에 결합하는 제1 항원 결합 영역을 포함하고, 소르틸린 상의 제2 부위에 결합하는 제2 항원 결합 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 다중특이적 항체는 소르틸린에 결합하는 제1 항원 결합 영역 및 제2 폴리펩티드에 결합하는 제2 항원 결합 영역을 포함한다.

소르틸린에 결합하는 제1 항원 결합 영역 (여기서 제1 항원 결합 영역은 본원에 기재된 항체 (예를 들어, 항체 S-15-10-7)의 6개의 HVR을 포함함) 및 제2 폴리펩티드에 결합하는 제2 항원 결합 영역을 포함하는 다중특이적 항체가 본원에 제공된다. 일부 실시양태에서, 제1 항원 결합 영역은 본원에 기재된 항체 (예를 들어, 항체 S-15-10-7)의 V_H 또는 V_L을 포함한다.

본원에 제공된 다중특이적 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 제2 폴리펩티드는 a) 혈액-뇌-장벽을 가로지르는 수송을 용이하게 하는 항원; (b) 트랜스페린 수용체 (TR), 인슐린 수용체 (HIR), 인슐린-유사 성장 인자 수용체 (IGFR), 저밀도 지질단백질 수용체 관련 단백질 1 및 2 (LPR-1 및 2), 디프테리아 독소 수용체, CRM197, 라마 단일 도메인 항체, TMEM 30(A), 단백질 형질도입 도메인, TAT, Syn-B, 페네트라틴, 폴리-아르기닌 펩티드, 안지오펩 펩티드 및 ANG1005로부터 선택된 혈액-뇌-장벽을 가로지르는 수송을 용이하게 하는 항원; (c) 아밀로이드 베타, 올리고머 아밀로이드 베타, 아밀로이드 베타 플라크, 아밀로이드 전구체 단백질 또는 이의 단편, Tau, IAPP, 알파-시누클레인, TDP-43, FUS 단백질, C9orf72 (염색체 9 오픈 리딩 프레임 72), c9RAN 단백질, 프리온 단백질, PrPSc, 헌팅틴, 칼시토닌, 슈퍼옥시드 디스뮤타제, 아탁신, 아탁신 1, 아탁신 2, 아탁신 3, 아탁신 7, 아탁신 8, 아탁신 10, 루이소체, 심방 나트륨 이뇨 인자, 섬 아밀로이드 폴리펩티드, 인슐린, 아포지질단백질 AI, 혈청 아밀로이드 A, 메딘, 프로락틴, 트랜스티레틴, 리소자임, 베타 2 마이크로글로불린, 겔솔린, 케라토에피텔린, 시스타틴, 이뮤노글로불린 경쇄 AL, S-IBM 단백질, 반복-연관 비-ATG (RAN) 번역 산물, 디펩티드 반복 (DPR) 펩티드, 글리신-알라닌 (GA) 반복 펩티드, 글리신-프롤린 (GP) 반복 펩티드, 글리신-아르기닌 (GR) 반복 펩티드, 프롤린-알라닌 (PA) 반복 펩티드, 유비퀴틴, 및 프롤린-아르기닌 (PR) 반복 펩티드로부터 선택된 질환-유발 단백질; (d) 면역 세포 상에 발현되는 리간드 및/또는 단백질, 여기서 리간드 및/또는 단백질은 CD40, OX40, ICOS, CD28, CD137/4-1BB, CD27, GITR, PD-L1, CTLA-4, PD-L2, PD-1, B7-H3, B7-H4, HVEM, BTLA, KIR, GAL9, TIM3, A2AR, LAG-3 및 포스파티딜세린으로부터 선택됨; 및/또는 (e) 하나 이상의 종양 세포 상에 발현되는 단백질, 지질, 폴리사카라이드 또는 당지질, 및 이들의 임의의 조합이다.

혈액-뇌 장벽을 가로지르는 수송을 용이하게 하는 수많은 항원은 관련 기술분야에 공지되어 있다 (예를 들어, 문헌 [Gabathuler R. Neurobiol. Dis. 37:48-57 (2010) 참조]. 이러한 제2 항원은 트랜스페린 수용체 (TR), 인슐린 수용체 (HIR), 인슐린-유사 성장 인자 수용체 (IGFR), 저밀도 지질단백질 수용체 관련 단백질 1 및 2 (LPR-1 및 2), CRM197 (디프테리아 독소의 비-독성 돌연변이체)을 포함한 디프테리아 독소 수용체, 라마 단일 도메인 항체, 예컨대 TMEM 30(A) (플립파제(Flippase)), 단백질 형질도입 도메인, 예컨대 TAT, Syn-B, 또는 페네트라틴, 폴리-아르기닌 또는 일반적으로 양으로 하전된 펩티드, 안지오펩 펩티드, 예컨대 ANG1005 (예를 들어, 문헌 [Gabathuler, 2010] 참조), 및 혈액-뇌 장벽 내피 세포 상에 풍부화된 다른 세포 표면 단백질 (예를 들어, 문헌 [Daneman et al. PLoS One 5(10):e13741 (2010)] 참조)을 제한 없이 포함한다.

다가 항체는 소르틸린 항원 뿐만 아니라, 제한 없이 추가의 항원, 예컨대 Aβ 펩티드 항원 또는 α-시누클레인 단백질 항원, Tau 단백질 항원, TDP-43 단백질 항원, 프리온 단백질 항원, 헌팅틴 단백질 항원, RAN 번역 산물 항원 (글리신-알라닌 (GA), 글리신-프롤린 (GP), 글리신-아르기닌 (GR), 프롤린-알라닌 (PA) 또는 프롤린-아르기닌 (PR)으로 구성된 디펩티드 반복부 (DPR 펩티드) 포함), 인슐린 수용체 항원, 또는 인슐린 유사 성장 인자 수용체 항원, 트랜스페린 수용체 항원, 또는 혈액 뇌 장벽을 가로지르는 항체 수송을 용이하게 하는 임의의 다른 항원을 인식할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제2 폴리펩티드는 트랜스페린이다. 일부 실시양태에서, 제2 폴리펩티드는 Tau이다. 일부 실시양태에서, 제2 폴리펩티드는 Aβ이다. 일부 실시양태에서, 제2 폴리펩티드는 TREM2이다. 일부 실시양태에서, 제2 폴리펩티드는 α-시누클레인이다.

다가 항체는 적어도 하나의 폴리펩티드 쇄 (및 바람직하게는 2개의 폴리펩티드 쇄)를 함유하며, 여기서 폴리펩티드 쇄 또는 쇄들은 2개 이상의 가변 도메인을 포함한다. 예를 들어, 폴리펩티드 쇄 또는 쇄들은 VD1-(X1)_n-VD2-(X2)_n-Fc를 포함할 수 있으며, 여기서 VD1은 제1 가변 도메인이고, VD2는 제2 가변 도메인이고, Fc는 Fc 영역의 하나의 폴리펩티드 쇄이고, X1 및 X2는 아미노산 또는 폴리펩티드를 나타내고, n은 0 또는 1이다. 유사하게, 폴리펩티드 쇄 또는 쇄들은 V_H-C_H1-유연성 링커-V_H-C_H1-Fc 영역 쇄; 또는 V_H-C_H1-V_H-C_H1-Fc 영역 쇄를 포함할 수 있다. 본원에서 다가 항체는 바람직하게는 적어도 2개 (및 바람직하게는 4개)의 경쇄 가변 도메인 폴리펩티드를 추가로 포함한다. 본원에서 다가 항체는 예를 들어, 약 2 내지 약 8개의 경쇄 가변 도메인 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 여기서 고려되는 경쇄 가변 도메인 폴리펩티드는 경쇄 가변 도메인을 포함하고, 임의로 CL 도메인을 추가로 포함한다.

다중특이적 항체를 제조하는 기술은 상이한 특이성을 갖는 2개의 이뮤노글로불린 중쇄- 경쇄 쌍의 재조합 공동-발현 (문헌 [Milstein and Cuello Nature 305: 537 (1983)], WO 93/08829, 및 [Traunecker et al. EMBO J. 10:3655 (1991)] 참조), 및 "놉-인-홀(knob-in-hole)" 조작 (예를 들어, 미국 특허 번호 5731168 참조)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 또한 WO 2013/026833 (크로스맙(CrossMab))을 참조한다. 다중특이적 항체는 또한 항체 Fc- 이종이량체성 분자를 제조하기 위한 정전기적 스티어링 효과를 조작함 (WO 2009/089004A1); 2개 이상의 항체를 가교시킴 (예를 들어, 미국 특허 번호 4676980 참조); 류신을 사용함; 이중특이적 항체 단편을 제조하기 위한 "디아바디" 기술을 사용함 (예를 들어, 문헌 [Hollinger et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448 (1993)] 참조); 및 단일-쇄 Fv (scFv) 이량체를 사용함 (예를 들어, 문헌 [Gruber et al. J. Immunol. 152:5368 (1994)] 참조); 및 예를 들어 문헌 [Tutt et al. J. Immunol. 147: 60 (1991)]에 기재된 바와 같이 삼중특이적 항체를 제조함으로써 제조될 수 있다.

"옥토푸스(Octopus) 항체"를 포함한 3개 이상의 기능적 항원 결합 부위를 갖는 조작된 항체가 또한 본원에 포함된다 (예를 들어, US 2006/0025576 참조). 본원에서 항체는 또한 다중 소르틸린 항원에 결합하는 항원 결합 부위를 포함하는 "이중 작용 FAb" 또는 "DAF"를 포함한다 (예를 들어, US 2008/0069820 참조).

개선된 안정성을 갖는 항체

제조, 저장 및 생체내 투여 동안 안정성을 개선하기 위한 본 개시내용의 항-소르틸린 항체 또는 이의 항체 단편의 아미노산 서열 변형이 또한 고려된다. 예를 들어, 산화 및 탈아미드화를 제한 없이 포함하는 다중 경로를 통해 본 개시내용의 항체 또는 항체 단편의 분해를 감소시키는 것이 바람직할 수 있다. 항체 또는 항체 단편의 아미노산 서열 변이체는 항체 또는 항체 단편을 코딩하는 핵산에 적절한 뉴클레오티드 변화를 도입함으로써 또는 펩티드 합성에 의해 제조된다. 이러한 변형은 예를 들어 항체의 아미노산 서열 내의 잔기로부터의 결실 및/또는 그 내로의 삽입 및/또는 이의 치환을 포함한다. 최종 구축물이 원하는 특징 (즉, 분해에 대한 감소된 민감성, 및 본원에 기재된 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 특징 중 하나 이상)을 보유한다면 결실, 삽입 및 치환의 임의의 조합이 최종 구축물에 도달할 수 있다.

항체 변이체

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체의 아미노산 서열 변이체가 고려된다. 예를 들어, 항체의 결합 친화도 및/또는 다른 생물학적 특성을 개선하는 것이 바람직할 수 있다.

치환, 삽입 및 결실 변이체

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 항체 변이체가 제공된다. 항체의 아미노산 서열 변이체는 항체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열 내로 적절한 변형을 도입함으로써 또는 펩티드 합성에 의해 제조될 수 있다. 이러한 변형은 예를 들어 항체의 아미노산 서열 내의 잔기로부터의 결실 및/또는 그 내로의 삽입 및/또는 이의 치환을 포함한다.

표 2: 아미노산 치환

항체의 생물학적 특성의 실질적인 변형은 (a) 예를 들어 시트 또는 나선 입체형태로서의 치환의 구역에서의 폴리펩티드 백본의 구조, (b) 표적 부위에서의 분자의 전하 또는 소수성, 또는 (c) 측쇄의 벌크를 유지하는 것에 대한 이들의 효과가 유의하게 상이한 치환을 선택함으로써 성취된다. 자연 발생 잔기는 공통 측쇄 특성에 기초하여 그룹으로 나뉜다:

(1) 소수성: 노르류신, Met, Ala, Val, Leu, Ile;

(2) 중성 친수성: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;

(3) 산성: Asp, Glu;

(4) 염기성: His, Lys, Arg;

(5) 쇄 배향에 영향을 미치는 잔기: Gly, Pro; 및

(6) 방향족: Trp, Tyr, Phe.

예를 들어, 비-보존적 치환은 이들 클래스 중 하나의 구성원의 또 다른 클래스로부터의 구성원에 대한 교환을 수반할 수 있다. 이러한 치환된 잔기는 예를 들어 비인간 항체와 상동성인 인간 항체의 영역 내로, 또는 분자의 비-상동성 영역 내로 도입될 수 있다.

본원에 기재된 폴리펩티드 또는 항체에 대한 변화를 생성하는데 있어서, 특정 실시양태에 따라, 아미노산의 소수성 인덱스가 고려될 수 있다. 각각의 아미노산은 이의 소수성 및 전하 특징에 기초하여 소수성 인덱스로 할당되었다. 이들은 이소류신 (+4.5); 발린 (+4.2); 류신 (+3.8); 페닐알라닌 (+2.8); 시스테인/시스틴 (+2.5); 메티오닌 (+1.9); 알라닌 (+1.8); 글리신 (-0.4); 트레오닌 (-0.7); 세린 (-0.8); 트립토판 (-0.9); 티로신 (-1.3); 프롤린 (-1.6); 히스티딘 (-3.2); 글루타메이트 (-3.5); 글루타민 (-3.5); 아스파르테이트 (-3.5); 아스파라긴 (-3.5); 리신 (-3.9); 및 아르기닌 (-4.5)이다.

단백질에 대한 상호작용성 생물학적 기능을 부여하는데 있어서 소수성 아미노산 인덱스의 중요성은 관련 기술분야에서 이해된다. 문헌 [Kyte et al. J. Mol. Biol., 157:105-131 (1982)]. 특정 아미노산은 유사한 소수성 인덱스 또는 스코어를 갖는 다른 아미노산에 대해 치환될 수 있으며, 여전히 유사한 생물학적 활성을 보유하는 것으로 공지되어 있다. 소수성 인덱스에 기초하여 변화를 생성하는데 있어서, 특정 실시양태에서, 이의 소수성 인덱스가 ±2 이내인 아미노산의 치환이 포함된다. 특정 실시양태에서, ±1 이내인 것들이 포함되고, 특정 실시양태에서, ±0.5 이내인 것들이 포함된다.

또한, 유사 아미노산의 치환은 친수성에 기초하여 효과적으로 이루어질 수 있으며, 특히 여기서 이에 의해 생성되는 생물학적으로 기능적인 단백질 또는 펩티드는 면역학적 실시양태에서 사용하기 위해 의도되는 것으로 관련 기술분야에서 이해된다. 특정 실시양태에서, 이의 인접한 아미노산의 친수성에 의해 지배되는 바와 같은 아미노산의 가장 큰 국소 평균 친수성은 이의 면역원성 및 항원성, 즉 단백질의 생물학적 특성과 상관관계가 있다.

하기 친수성 값이 이들 아미노산 잔기에 할당되었다: 아르기닌 (+3.0); 리신 (+3.0±1); 아스파르테이트 (+3.0±1); 글루타메이트 (+3.0±1); 세린 (+0.3); 아스파라긴 (+0.2); 글루타민 (+0.2); 글리신 (0); 트레오닌 (-0.4); 프롤린 (-0.5±1); 알라닌 (-0.5); 히스티딘 (-0.5); 시스테인 (-1.0); 메티오닌 (-1.3); 발린 (-1.5); 류신 (-1.8); 이소류신 (-1.8); 티로신 (-2.3); 페닐알라닌 (-2.5); 및 트립토판 (-3.4). 유사한 친수성 값에 기초하여 변화를 생성하는데 있어서, 특정 실시양태에서, 이의 친수성 값이 ±2 이내인 아미노산의 치환이 포함되고, 특정 실시양태에서, ±1 이내인 것들이 포함되고, 특정 실시양태에서, ±0.5 이내인 것들이 포함된다. 또한, 친수성에 기초하여 1차 아미노산 서열로부터 에피토프를 식별할 수 있다. 이들 영역은 또한 "에피토프 코어 영역"으로 지칭된다.

특정 실시양태에서, 치환, 삽입 또는 결실은 이러한 변경이 항원에 결합하는 항체의 능력을 실질적으로 감소시키지 않는 한 하나 이상의 HVR 내에서 발생할 수 있다. 예를 들어, 결합 친화도를 실질적으로 감소시키지 않는 보존적 변경 (예를 들어, 본원에 제공된 바와 같은 보존적 치환)은 HVR에서 이루어질 수 있다. 이러한 변경은 예를 들어 HVR에서의 항원 접촉 잔기의 외부에 있을 수 있다. 상기 제공된 변이체 VH 및 VL 서열의 특정 실시양태에서, 각각의 HVR은 비변경되거나, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개 이하의 아미노산 치환을 함유한다.

아미노산 서열 삽입은 길이가 1개의 잔기 내지 백개 이상의 잔기를 포함하는 폴리펩티드의 범위인 아미노- 및/또는 카르복실-말단 융합체, 뿐만 아니라 단일 또는 다중 아미노산 잔기의 서열내 삽입을 포함한다. 말단 삽입의 예는 N-말단 메티오닐 잔기를 갖는 항체를 포함한다. 항체 분자의 다른 삽입 변이체는 효소 (예를 들어, ADEPT에 대한) 또는 항체의 혈청 반감기를 증가시키는 폴리펩티드에 대한 항체의 N- 또는 C-말단에의 융합을 포함한다.

항체의 적절한 입체형태를 유지하는데 관여하지 않는 임의의 시스테인 잔기는 또한 분자의 산화적 안정성을 개선하고, 비정상적 가교를 방지하기 위해 일반적으로 세린으로 치환될 수 있다. 반대로, 시스테인 결합(들)은 이의 안정성을 개선하기 위해 항체에 첨가될 수 있다 (특히 항체가 항체 단편, 예컨대 Fv 단편인 경우).

글리코실화 변이체

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 항체가 글리코실화되는 정도를 증가 또는 감소시키도록 변경된다. 항체에의 글리코실화 부위의 첨가 또는 결실은 편리하게는 하나 이상의 글리코실화 부위가 생성 또는 제거되도록 아미노산 서열을 변경함으로써 성취될 수 있다.

항체의 글리코실화는 전형적으로 N-연결 또는 O-연결된다. N-연결은 아스파라긴 잔기의 측쇄에의 탄수화물 모이어티의 부착을 지칭한다. 트리펩티드 서열 아스파라긴-X-세린 및 아스파라긴-X-트레오닌 (여기서 X는 프롤린을 제외한 임의의 아미노산임)은 아스파라긴 측쇄에의 탄수화물 모이어티의 효소적 부착을 위한 인식 서열이다. 그러므로, 폴리펩티드에서의 이들 트리펩티드 서열 중 어느 하나의 존재는 잠재적 글리코실화 부위를 생성한다. O-연결된 글리코실화는 히드록시아미노산, 가장 흔히 세린 또는 트레오닌에의 당 N-아세틸갈락토스아민, 갈락토스 또는 자일로스 중 하나의 부착을 지칭하지만, 5-히드록시프롤린 또는 5-히드록시리신이 또한 사용될 수 있다.

본 개시내용의 항체에의 글리코실화 부위의 첨가는 편리하게는 이것이 상기 기재된 트리펩티드 서열 중 하나 이상을 함유하도록 아미노산 서열을 변경함으로써 성취될 수 있다 (N-연결된 글리코실화 부위에 대해). 변경은 또한 원래 항체의 서열에의 하나 이상의 세린 또는 트레오닌 잔기의 첨가 또는 이에 의한 치환에 의해 이루어질 수 있다 (O-연결된 글리코실화 부위에 대해).

본 개시내용의 항체가 Fc 영역을 포함하는 경우, 이에 부착된 탄수화물은 변경될 수 있다. 포유동물 세포에 의해 생산된 천연 항체는 전형적으로 일반적으로 Fc 영역의 CH2 도메인의 카바트 넘버링에 따른 Asn297에의 N-연결에 의해 부착되는 분지형 비안테나리 올리고사카라이드를 포함한다. 올리고사카라이드는 다양한 탄수화물, 예를 들어 만노스, N-아세틸 글루코사민 (GlcNAc), 갈락토스 및 시알산, 뿐만 아니라 비안테나리 올리고사카라이드 구조의 "줄기"에서의 GlcNAc에 부착된 푸코스를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체에서의 올리고사카라이드의 변형은 특정 개선된 특성을 갖는 항체 변이체를 생성하기 위해 이루어질 수 있다.

한 실시양태에서, Fc 영역에 (직접적으로 또는 간접적으로) 부착된 푸코스가 결여된 탄수화물 구조를 갖는 항체 변이체가 제공된다. 예를 들어, 미국 특허 공개 번호 2003/0157108 및 2004/0093621을 참조한다. "탈푸코실화된" 또는 "푸코스-결핍" 항체 변이체와 관련된 간행물의 예는 하기를 포함한다: US 2003/0157108; US 2003/0115614; US 2002/0164328; US 2004/0093621; US 2004/0132140; US 2004/0110704; US 2004/0110282; US 2004/0109865; Okazaki et al. J. Mol. Biol. 336:1239-1249 (2004); Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87:614 (2004). 탈푸코실화된 항체를 생산할 수 있는 세포주의 예는 단백질 푸코실화에 있어서 결핍된 Led 3 CHO 세포 (Ripka et al. Arch. Biochem. Biophys. 249:533-545 (1986); US 2003/0157108), 및 녹아웃 세포주, 예컨대 알파-1,6-푸코실트랜스퍼라제 유전자, FUT8, 녹아웃 CHO 세포 (예를 들어, 문헌 [Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)] 및 [Kanda et al. Biotechnol. Bioeng. 94(4):680-688 (2006)] 참조)를 포함한다.

변형된 불변 영역

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 예를 들어 동일한 이소타입의 야생형 또는 비변형된 Fc 영역에 비해 하나 이상의 변형을 포함하는 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, Fc 영역은 Fc 감마 수용체에 결합할 수 있다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 변형된 항체 Fc 영역은 IgG1 변형된 Fc 영역이다. 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc 영역은 하나 이상의 변형을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc 영역은 (예를 들어, 동일한 이소타입의 야생형 Fc 영역에 비해) 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 아미노산 치환은 N297A (Bolt S et al. (1993) Eur J Immunol 23:403-411), D265A (Shields et al. (2001) R. J. Biol. Chem. 276, 6591-6604), L234A, L235A (Hutchins et al. (1995) Proc Natl Acad Sci USA, 92:11980-11984; Alegre et al., (1994) Transplantation 57:1537-1543. 31; Xu et al., (2000) Cell Immunol, 200:16-26), G237A (Alegre et al. (1994) Transplantation 57:1537-1543. 31; Xu et al. (2000) Cell Immunol, 200:16-26), C226S, C229S, E233P, L234V, L234F, L235E (McEarchern et al., (2007) Blood, 109:1185-1192), P331S (Sazinsky et al., (2008) Proc Natl Acad Sci USA 2008, 105:20167-20172), S267E, L328F, A330L, M252Y, S254T 및/또는 T256E로부터 선택되며, 여기서 아미노산 위치는 EU 넘버링 관례에 따른다.

본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 N297A 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 D265A 및 N297A 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 D270A 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역은 EU 넘버링에 따른 L234A 및 L235A 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 L234A 및 G237A 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 L234A, L235A 및 G237A 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 P238D, L328E, E233, G237D, H268D, P271G 및 A330R 돌연변이 중 하나 이상 (모두 포함)을 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 S267E/L328F 돌연변이 중 하나 이상을 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 P238D, L328E, E233D, G237D, H268D, P271G 및 A330R 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 P238D, L328E, G237D, H268D, P271G 및 A330R 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 P238D, S267E, L328E, E233D, G237D, H268D, P271G 및 A330R 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 P238D, S267E, L328E, G237D, H268D, P271G 및 A330R 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 C226S, C229S, E233P, L234V 및 L235A 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 L234F, L235E 및 P331S 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 S267E 및 L328F 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 S267E 돌연변이를 포함한다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 IgG1의 불변 중쇄 1 (CH1) 및 힌지 영역을 카파 경쇄를 갖는 IgG2의 CH1 및 힌지 영역 (EU 넘버링에 따른 IgG2의 아미노산 118-230)으로 치환한 것을 포함한다.

본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 2개 이상의 아미노산 치환을 포함하지 않는 Fc 영역을 갖는 상응하는 항체와 비교하여 보체를 활성화시키지 않으면서 항체 클러스터링을 증가시키는 2개 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 따라서, 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc 영역은 위치 E430G에서의 아미노산 치환 및 L234F, L235A, L235E, S267E, K322A, L328F, A330S, P331S 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택된 잔기 위치에서의 Fc 영역에서의 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다 (EU 넘버링에 따름). 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc 영역은 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, L243A, L235A 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc 영역은 EU 넘버링에 따른 위치 E430G 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc 영역은 EU 넘버링에 따른 위치 E430G 및 K322A에서의 아미노산 치환을 포함한다. 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc 영역은 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, A330S 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc 영역은 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, K322A, A330S 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc 영역은 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, K322A 및 A330S에서의 아미노산 치환을 포함한다. 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc 영역은 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, K322A 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다.

본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc는 보체 활성화를 제거하기 위해 EU 넘버링 관례에 따른 A330L 돌연변이 (Lazar et al. Proc Natl Acad Sci USA, 103:4005-4010 (2006)), 또는 L234F, L235E 및/또는 P331S 돌연변이 중 하나 이상 (Sazinsky et al. Proc Natl Acad Sci USA, 105:20167-20172 (2008))을 추가로 포함할 수 있다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc는 EU 넘버링에 따른 A330L, A330S, L234F, L235E 및/또는 P331S 아미노산 치환 중 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다. 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc는 인간 혈청에서 항체 반감기를 향상시키기 위한 하나 이상의 돌연변이를 추가로 포함할 수 있다 (예를 들어, EU 넘버링 관례에 따른 M252Y, S254T 및 T256E 돌연변이 중 하나 이상 (모두 포함)). 본원에 제공된 IgG1 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG1 변형된 Fc는 EU 넘버링에 따른 E430G, E430S, E430F, E430T, E345K, E345Q, E345R, E345Y, S440Y 및/또는 S440W 아미노산 치환 중 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 인간 IgG1 이소타입 (huIgG1)을 갖고, Fc 영역은 N297A, N297Q, D265A, L234A, L235A, C226S, C229S, P238S, E233P, L234V, P238A, A327Q, A327G, P329A, K322A, L234F, L235E, P331S, T394D, A330L, M252Y, S254T 또는 T256E, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하며, 여기서 잔기의 넘버링은 EU 넘버링에 따른다. 본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG1 Fc 영역을 포함하는 항체는 A330L, L234F, L235E 또는 P331S, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 추가로 포함하며, 여기서 잔기의 넘버링은 EU 넘버링에 따른다. 본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG1 Fc 영역을 포함하는 항체는 M252Y, S254T 또는 T256E, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 추가로 포함하며, 여기서 잔기의 넘버링은 EU 넘버링에 따른다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 인간 IgG4 이소타입 (huIgG4)을 갖고, Fc 영역은 E233P, F234V, L234A/F234A, L235A, G237A, E318A, S228P, L236E, S241P, L248E, T394D, M252Y, S254T, T256E, N297A, N297Q, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 포함하며, 여기서 잔기의 넘버링은 EU 넘버링에 따른다. 본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG4 Fc 영역을 포함하는 항체는 M252Y, S254T 또는 T256E, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 치환을 추가로 포함하며, 여기서 잔기의 넘버링은 EU 넘버링에 따른다. 본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG4 Fc 영역을 포함하는 항체는 S228P 아미노산 치환을 추가로 포함하며, 여기서 잔기의 넘버링은 EU 넘버링에 따른다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 인간 IgG1 이소타입 (huIgG1)을 갖고, Fc 영역은 위치 L234A, L235A 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함하고, 여기서 잔기 위치의 넘버링은 EU 넘버링에 따른다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 불변 영역을 포함하는 huIgG1 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 26의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 불변 영역을 포함하는 huIgG1 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 변형된 항체 Fc 영역은 IgG2 변형된 Fc 영역이다. 일부 실시양태에서, IgG2 변형된 Fc 영역은 하나 이상의 변형을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, IgG2 변형된 Fc 영역은 (예를 들어, 동일한 이소타입의 야생형 Fc 영역에 비해) 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 본원에 제공된 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 하나 이상의 아미노산 치환은 V234A (Alegre et al. Transplantation 57:1537-1543 (1994); Xu et al. Cell Immunol, 200:16-26 (2000)); G237A (Cole et al. Transplantation, 68:563-571 (1999)); H268Q, V309L, A330S, P331S (US 2007/0148167; Armour et al. Eur J Immunol 29: 2613-2624 (1999); Armour et al. The Haematology Journal 1(Suppl.1):27 (2000); Armour et al. The Haematology Journal 1(Suppl.1):27 (2000)); C219S, 및/또는 C220S (White et al. Cancer Cell 27, 138-148 (2015)); S267E, L328F (Chu et al. Mol Immunol, 45:3926-3933 (2008)); 또는 M252Y, S254T, 및/또는 T256E로부터 선택된다 (EU 넘버링 관례에 따름). IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 V234A 및 G237A에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 C219S 또는 C220S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 A330S 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 S267E 및 L328F에서의 아미노산 치환을 포함한다.

본원에 제공된 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링 관례에 따른 C127S 아미노산 치환을 포함한다 (문헌 [White et al., (2015) Cancer Cell 27, 138-148]; [Lightle et al. Protein Sci. 19:753-762 (2010)]; 및 WO 2008/079246). IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 EU 넘버링 관례에 따른 C214S 아미노산 치환을 포함하는 카파 경쇄 불변 도메인을 갖는 IgG2 이소타입을 갖는다 (문헌 [White et al. Cancer Cell 27:138-148 (2015)]; [Lightle et al. Protein Sci. 19:753-762 (2010)]; 및 WO 2008/079246).

본원에 제공된 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링 관례에 따른 C220S 아미노산 치환을 포함한다. IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 EU 넘버링 관례에 따른 C214S 아미노산 치환을 포함하는 카파 경쇄 불변 도메인을 갖는 IgG2 이소타입을 갖는다.

본원에 제공된 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링 관례에 따른 C219S 아미노산 치환을 포함한다. IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 EU 넘버링 관례에 따른 C214S 아미노산 치환을 포함하는 카파 경쇄 불변 도메인을 갖는 IgG2 이소타입을 갖는다.

본원에 제공된 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 IgG2 이소타입 중쇄 불변 도메인 1(CH1) 및 힌지 영역을 포함한다 (White et al. Cancer Cell 27:138-148 (2015)). 본원에 제공된 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 특정 실시양태에서, IgG2 이소타입 CH1 및 힌지 영역은 EU 넘버링에 따른 아미노산 118-230의 아미노산 서열을 포함한다. IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체 Fc 영역은 EU 넘버링 관례에 따른 S267E 아미노산 치환, L328F 아미노산 치환 또는 둘 모두, 및/또는 N297A 또는 N297Q 아미노산 치환을 포함한다.

본원에 제공된 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, E430S, E430F, E430T, E345K, E345Q, E345R, E345Y, S440Y 및 S440W에서의 하나 이상의 아미노산 치환을 추가로 포함한다. IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 인간 혈청에서 항체 반감기를 향상시키기 위한 하나 이상의 돌연변이를 추가로 포함할 수 있다 (예를 들어, EU 넘버링 관례에 따른 M252Y, S254T 및 T256E 돌연변이 중 하나 이상 (모두 포함)). IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 A330S 및 P331S 아미노산 치환을 추가로 포함할 수 있다.

본원에 제공된 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 IgG2/4 하이브리드 Fc이다. 일부 실시양태에서, IgG2/4 하이브리드 Fc는 IgG2 아미노산 118 내지 260 및 IgG4 아미노산 261 내지 447을 포함한다. 본원에 제공된 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 H268Q, V309L, A330S 및 P331S에서의 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다.

본원에 제공된 IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 A330L, L234F, L235E 또는 P331S, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택된 하나 이상의 추가 아미노산 치환을 포함한다.

본원에 제공된 IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 특정 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 C127S, L234A, L234F, L235A, L235E, S267E, K322A, L328F, A330S, P331S, E345R, E430G, S440Y, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택된 잔기 위치에서의 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, L243A, L235A 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G 및 K322A에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, A330S 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, K322A, A330S 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, K322A 및 A330S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, K322A 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 S267E 및 L328F에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 C127S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG1 및/또는 IgG2 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E345R, E430G 및 S440Y에서의 아미노산 치환을 포함한다.

본원에 제공된 항체 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 항체는 IgG4 이소타입을 갖고 변형된 Fc 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, IgG4 변형된 Fc 영역은 하나 이상의 변형을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, IgG4 변형된 Fc 영역은 (예를 들어, 동일한 이소타입의 야생형 Fc 영역에 비해) 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 본원에 제공된 IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 하나 이상의 아미노산 치환은 L235A, G237A, S229P, L236E (Reddy et al. J Immunol 164:1925-1933(2000)), S267E, E318A, L328F, M252Y, S254T 및/또는 T256E로부터 선택된다 (EU 넘버링 관례에 따름). IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링 관례에 따른 L235A, G237A 및 E318A 아미노산 치환을 추가로 포함할 수 있다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링 관례에 따른 S228P 및 L235E 아미노산 치환을 추가로 포함할 수 있다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG4 변형된 Fc는 EU 넘버링 관례에 따른 S267E 및 L328F 아미노산 치환을 추가로 포함할 수 있다.

본원에 제공된 IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG4 변형된 Fc는 EU 넘버링 관례에 따른 S228P 돌연변이 (Angal et al. Mol Immunol. 30:105-108 (1993)) 및/또는 항체 안정화를 향상시키기 위한 문헌 (Peters et al. J Biol Chem. 287(29):24525-33 (2012))에 기재된 하나 이상의 돌연변이를 포함한다.

본원에 제공된 IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, IgG4 변형된 Fc는 인간 혈청에서 항체 반감기를 향상시키기 위한 하나 이상의 돌연변이를 추가로 포함할 수 있다 (예를 들어, EU 넘버링 관례에 따른 M252Y, S254T 및 T256E 돌연변이 중 하나 이상 (모두 포함)).

본원에 제공된 IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 L235E 아미노산 치환을 포함한다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 특정 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 C127S, F234A, L235A, L235E, S267E, K322A, L328F, E345R, E430G, S440Y, 및 이들의 임의의 조합으로부터 선택된 잔기 위치에서의 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G, L243A, L235A 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G 및 P331S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430G 및 K322A에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E430에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc 영역은 EU 넘버링에 따른 위치 E430G 및 K322A에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 S267E 및 L328F에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 C127S에서의 아미노산 치환을 포함한다. IgG4 변형된 Fc 영역 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Fc는 EU 넘버링에 따른 위치 E345R, E430G 및 S440Y에서의 아미노산 치환을 포함한다.

핵산, 벡터 및 숙주 세포

본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 예를 들어 미국 특허 번호 4816567에 기재된 바와 같이 재조합 방법 및 조성물을 사용하여 생산될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체 중 임의의 것을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 갖는 단리된 핵산이 제공된다. 이러한 핵산은 항-소르틸린 항체의 경쇄 가변 도메인 (V_L)을 포함하는 아미노산 서열 및/또는 중쇄 가변 도메인 (V_H)을 포함하는 아미노산 서열을 코딩할 수 있다 (예를 들어, 항체의 경쇄 및/또는 중쇄). 일부 실시양태에서, 이러한 핵산을 포함하는 하나 이상의 벡터 (예를 들어, 발현 벡터)가 제공된다. 일부 실시양태에서, 이러한 핵산 또는 벡터를 포함하는 숙주 세포가 또한 제공된다. 일부 실시양태에서, 숙주 세포는 (1) 항체의 V_L을 포함하는 아미노산 서열 및 항체의 V_H를 포함하는 아미노산 서열을 코딩하는 핵산을 포함하는 벡터, 또는 (2) 항체의 V_L을 포함하는 아미노산 서열을 코딩하는 핵산을 포함하는 제1 벡터 및 항체의 V_H를 포함하는 아미노산 서열을 코딩하는 핵산을 포함하는 제2 벡터를 포함한다 (예를 들어, 이로 형질도입되었다). 일부 실시양태에서, 숙주 세포는 진핵생물, 예를 들어 차이니즈 햄스터 난소 (CHO) 세포 또는 림프계 세포 (예를 들어, Y0, NS0, Sp20 세포)이다. 본 개시내용의 숙주 세포는 또한 단리된 세포, 시험관내에서 배양된 세포, 및 생체외에서 배양된 세포를 제한 없이 포함한다.

본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 제조하는 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, 방법은 항-소르틸린 항체를 코딩하는 핵산을 포함하는 본 개시내용의 숙주 세포를 항체의 발현에 적합한 조건 하에 배양하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 후속적으로 숙주 세포 (또는 숙주 세포 배양 배지)로부터 회수된다.

본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 재조합 생산을 위해, 항-소르틸린 항체를 코딩하는 핵산은 단리되고, 숙주 세포에서의 추가의 클로닝 및/또는 발현을 위해 하나 이상의 벡터 내로 삽입된다. 이러한 핵산은 통상적인 절차를 사용하여 (예를 들어, 항체의 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 유전자에 특이적으로 결합할 수 있는 올리고뉴클레오티드 프로브를 사용함으로써) 쉽게 단리 및 서열분석될 수 있다.

본 개시내용의 항-소르틸린 항체 중 임의의 것을 코딩하는 핵산 서열을 포함하는 적합한 벡터는 클로닝 벡터 및 발현 벡터를 제한 없이 포함한다. 적합한 클로닝 벡터는 표준 기술에 따라 구축될 수 있거나, 관련 기술분야에서 이용가능한 다수의 클로닝 벡터로부터 선택될 수 있다. 선택되는 클로닝 벡터는 사용되도록 의도된 숙주 세포에 따라 달라질 수 있지만, 유용한 클로닝 벡터는 일반적으로 자기-복제하는 능력을 갖고/거나, 특정한 제한 엔도뉴클레아제에 대한 단일 표적을 보유할 수 있고/거나, 벡터를 포함하는 클론을 선택하는데 사용될 수 있는 마커에 대한 유전자를 운반할 수 있다. 적합한 예는 플라스미드 및 박테리아 바이러스, 예를 들어 pUC18, pUC19, 블루스크립트(Bluescript) (예를 들어, pBS SK+) 및 이의 유도체, mpl8, mpl9, pBR322, pMB9, ColE1, pCR1, RP4, 파지 DNA, 및 셔틀 벡터, 예컨대 pSA3 및 pAT28을 포함한다. 이들 및 많은 다른 클로닝 벡터는 상업적 판매자, 예컨대 바이오래드(BioRad), 스트레이트진(Strategene) 및 인비트로젠으로부터 이용가능하다.

항체-코딩 벡터의 클로닝 또는 발현을 위한 적합한 숙주 세포는 원핵생물 또는 진핵생물 세포를 포함한다. 예를 들어, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 특히 글리코실화 및 Fc 이펙터 기능이 필요하지 않은 경우 박테리아에서 생산될 수 있다. 박테리아에서의 항체 단편 및 폴리펩티드의 발현에 대한 정보에 대해서는, 예를 들어 미국 특허 번호 5648237, 5789199 및 5840523을 참조한다. 발현 후, 항체는 가용성 분획으로 박테리아 세포 페이스트로부터 단리될 수 있고, 추가로 정제될 수 있다.

원핵생물 외에도, 진핵생물 미생물, 예컨대 이의 글리코실화 경로가 "인간화"되어, 부분적으로 또는 전체적으로 인간 글리코실화 패턴을 갖는 항체의 생산을 초래하는 진균 및 효모 균주를 포함한 필라멘트성 진균 또는 효모는 또한 항체-코딩 벡터에 대한 적합한 클로닝 또는 발현 숙주이다 (예를 들어, 문헌 [Gerngross Nat. Biotech. 22:1409-1414 (2004)]; 및 [Li et al. Nat. Biotech. 24:210-215 (2006)]).

글리코실화된 항체의 발현을 위한 적합한 숙주 세포는 또한 다세포 유기체 (무척추동물 및 척추동물)로부터 유래될 수 있다. 무척추동물 세포의 예는 식물 및 곤충 세포를 포함한다. 특히 스포돕테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda) 세포의 형질감염을 위한, 곤충 세포와 함께 사용될 수 있는 수많은 바큘로바이러스 균주가 식별되었다. 식물 세포 배양물은 또한 숙주로서 이용될 수 있다 (예를 들어, 트랜스제닉 식물에서 항체를 생산하기 위한 플란티바디스(PLANTIBODIES)™ 기술을 설명하는 미국 특허 번호 5959177, 6040498, 6420548, 7125978 및 6417429).

척추동물 세포는 또한 숙주로서 사용될 수 있다. 예를 들어, 현탁액에서 성장하도록 적응된 포유동물 세포주는 유용할 수 있다. 유용한 포유동물 숙주 세포주의 다른 예는 SV40에 의해 형질전환된 원숭이 신장 CV1 주 (COS-7); 인간 배아 신장 주 (예를 들어 문헌 [Graham et al. J. Gen Virol. 36:59 (1977)]에 기재된 바와 같은 293 또는 293 세포); 베이비 햄스터 신장 세포 (BHK); 마우스 세르톨리 세포 (예를 들어 문헌 [Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)]에 기재된 바와 같은 TM4 세포); 아프리카 녹색 원숭이 신장 세포 (VERO-76); 인간 자궁경부 암종 세포 (HELA); 개 신장 세포 (MDCK); 버팔로 래트 간 세포 (BRL 3A); 인간 폐 세포 (W138); 인간 간 세포 (Hep G2); 마우스 유방 종양 (MMT 060562) 세포; 예를 들어 문헌 [Mather et al. Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982)]에 기재된 바와 같은 TRI 세포; MRC 5 세포; 및 FS4 세포이다. 다른 유용한 포유동물 숙주 세포주는 DHFR- CHO 세포를 포함한 차이니즈 햄스터 난소 (CHO) 세포 (Urlaub et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216 (1980)); 및 골수종 세포주, 예컨대 Y0, NS0 및 Sp2/0을 포함한다. 항체 생산에 적합한 특정 포유동물 숙주 세포주의 검토에 대해서는, 예를 들어, 문헌 [Yazaki and Wu, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ), pp. 255-268 (2003)]을 참조한다.

진단 용도

본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 또한 진단 유용성을 갖는다. 따라서, 본 개시내용은 진단 목적을 위해, 예컨대 개체에서 또는 개체로부터 유래된 조직 샘플에서 소르틸린 단백질의 검출을 위해 본 개시내용의 항체 또는 이의 기능적 단편을 사용하는 방법을 제공한다.

일부 실시양태에서, 개체는 인간이다. 일부 실시양태에서, 개체는 본 개시내용의 질환, 장애 또는 손상을 앓고 있거나 발병할 위험이 있는 인간 환자이다. 일부 실시양태에서, 진단 방법은 생물학적 샘플, 예컨대 생검 검체, 조직 또는 세포에서 소르틸린 단백질을 검출하는 것을 수반한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항-소르틸린 항체는 생물학적 샘플과 접촉되고, 항원-결합 항체가 검출된다. 예를 들어, 생검 검체는 질환-연관 세포 또는 소르틸린 수준을 검출 및/또는 정량화하기 위해 본원에 기재된 항-소르틸린 항체로 염색될 수 있다. 검출 방법은 항원-결합 항체의 정량화를 수반할 수 있다. 생물학적 샘플에서 항체 검출은 면역형광 현미경검사법, 면역세포화학, 면역조직화학, ELISA, FACS 분석, 면역침전 또는 마이크로-양전자 방출 단층촬영을 포함하여 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법으로 발생할 수 있다. 특정 실시양태에서, 항체는 예를 들어 ¹⁸F로 방사성라벨링되고, 후속적으로 마이크로-양전자 방출 단층촬영 분석을 이용하여 검출된다. 항체-결합은 또한 비침습적 기술, 예컨대 양전자 방출 단층촬영 (PET), X선 컴퓨터 단층촬영, 단일-광자 방출 컴퓨터 단층촬영 (SPECT), 컴퓨터 단층촬영 (CT) 및 컴퓨터 축 단층촬영 (CAT)에 의해 개체에서 정량화될 수 있다.

다른 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 예를 들어 전임상 질환 모델 (예를 들어, 비인간 질환 모델, 예컨대 마우스 또는 시노몰구스 원숭이 질환 모델)로부터 채취된 뇌 검체에서 미세아교세포를 검출 및/또는 정량화하는데 사용될 수 있다. 이와 같이, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 예를 들어 대조군과 비교하여 질환, 장애 또는 손상, 예컨대 전두측두엽 치매, 진행성 핵상 마비, 알츠하이머병, 혈관성 치매, 발작, 망막 이영양증, 근위축성 측삭 경화증, 외상성 뇌 손상, 척수 손상, 치매, 뇌졸중, 파킨슨병, 급성 파종성 뇌척수염, 망막 변성, 연령 관련 황반 변성, 녹내장, 다발성 경화증, 패혈성 쇼크, 박테리아 감염, 관절염 또는 골관절염에 대한 모델에서 치료 후 치료 반응을 평가하는데 유용할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-소르틸린 항체는 예를 들어 대조군과 비교하여 신경변성 또는 신경계 질환 또는 장애, 예컨대 전두측두엽 치매, 알츠하이머병 또는 파킨슨병에 대한 모델에서 치료 후 치료 반응을 평가하는데 유용할 수 있다.

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일부 실시양태에서, 본원에 제공된 질환 또는 장애의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법은 개체가 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액 (예를 들어, 혈장 또는 혈청) 또는 뇌척수액의 샘플에서 프로그래뉼린 단백질 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전과 비교하여 개체의 혈장 및/또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전과 비교하여 적어도 약 1.4배, 적어도 약 1.8배, 적어도 약 2배, 적어도 약 2.2배, 적어도 약 2.4배, 적어도 약 2.6배, 적어도 약 2.8배, 적어도 약 3배, 적어도 약 3.2배, 적어도 약 3.4배, 적어도 약 3.6배, 적어도 약 3.8배, 적어도 약 4배, 적어도 약 4.2배, 적어도 약 4.4배, 적어도 약 4.6배, 적어도 약 4.8배, 적어도 약 5배, 적어도 약 5.2배, 적어도 약 5.4배, 적어도 약 5.6배, 적어도 약 5.8배, 적어도 약 6배, 적어도 약 6.2배, 적어도 약 6.4배, 적어도 약 6.6배, 적어도 약 6.8배, 적어도 약 7배, 적어도 약 7.2배, 적어도 약 7.4배, 적어도 약 7.6배, 적어도 약 7.8배, 적어도 약 8배, 적어도 약 8.2배, 적어도 약 8.4배, 적어도 약 8.6배, 적어도 약 8.8배, 적어도 약 9배, 적어도 약 9.2배, 적어도 약 9.4배, 적어도 약 9.6배, 적어도 약 9.8배, 적어도 약 10배 또는 그 초과의 개체의 혈장 및/또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전과 비교하여 적어도 약 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20% 또는 그 초과 중 어느 하나의 개체의 혈장 및/또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전과 비교하여 적어도 약 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200%, 210%, 220%, 230%, 240%, 250%, 260%, 270%, 280%, 290%, 300% 또는 그 초과 중 어느 하나의 개체의 혈장 및/또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다.

일부 실시양태에서, 개체의 혈장 및/또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1시간, 약 2시간, 약 4시간, 약 6시간, 약 8시간, 약 10시간, 약 12시간, 약 14시간, 약 16시간, 약 18시간, 약 20시간, 약 22시간, 약 24시간 또는 그 초과 중 어느 하나에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 및/또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 24시간, 약 36시간, 약 48시간, 약 60시간, 약 72시간 또는 그 초과 중 어느 하나에 존재한다.

일부 실시양태에서, 개체의 혈장 및/또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 4일, 약 5일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 9일, 약 10일, 약 11일, 약 12일, 약 13일, 약 14일, 약 15일, 약 16일, 약 17일, 약 18일, 약 19일, 약 20일, 약 21일, 약 22일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일, 약 43일, 약 44일, 약 45일, 약 46일, 약 47일, 약 48일, 약 49일, 약 50일, 약 51일, 약 52일, 약 53일, 약 54일, 약 55일, 약 56일, 약 57일, 약 58일, 약 59일, 약 60일, 약 61일, 약 62일, 약 63일, 약 64일, 약 65일, 약 66일, 약 67일, 약 68일, 약 69일, 약 70일, 약 71일, 약 72일, 약 73일, 약 74일, 약 75일, 약 76일, 약 77일, 약 78일, 약 79일, 약 80일, 약 81일, 약 82일, 약 83일, 약 84일, 약 85일, 약 86일, 약 87일, 약 88일, 약 89일, 약 90일, 약 91일, 약 92일, 약 93일, 약 94일, 약 95일, 약 96일, 약 97일, 약 98일, 약 99일, 약 100일, 약 101일, 약 102일, 약 103일, 약 104일, 약 105일, 약 106일, 약 107일, 약 108일, 약 109일, 약 110일, 약 111일, 약 112일, 약 113일, 약 114일, 약 115일, 약 116일, 약 117일, 약 118일, 약 119일, 약 120일, 약 121일, 약 122일, 약 123일, 약 124일, 약 125일, 약 126일, 약 127일, 약 1280일, 약 129일, 약 130일, 약 131일, 약 132일, 약 133일, 약 134일, 약 135일, 약 136일, 약 137일, 약 138일, 약 139일, 약 140일, 약 141일, 약 142일, 약 143일, 약 144일, 약 145일, 약 146일, 약 147일, 약 148일, 약 149일, 약 150일, 약 151일, 약 152일, 약 153일, 약 154일, 약 155일, 약 156일, 약 157일, 약 158일, 약 159일, 약 160일, 약 161일, 약 162일, 약 163일, 약 164일, 약 165일, 약 166일, 약 167일, 약 168일, 약 169일, 약 170일, 약 171일, 약 172일, 약 173일, 약 174일, 약 175일, 약 176일, 약 177일, 약 178일, 약 179일, 약 180일, 약 181일, 약 182일, 약 183일, 약 184일, 약 185일, 약 186일, 약 187일, 약 188일, 약 189일, 약 190일, 약 191일, 약 192일, 약 193일, 약 194일, 약 195일, 약 196일, 약 197일, 약 198일, 약 199일, 약 200일, 약 201일 또는 그 초과 중 어느 하나에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 6 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 1.2배, 적어도 약 1.3배, 적어도 약 1.4배, 적어도 약 1.5배, 적어도 약 1.6배, 적어도 약 1.7배, 적어도 약 1.8배, 적어도 약 1.9배, 적어도 약 2배, 적어도 약 2.1배, 적어도 약 2.2배, 적어도 약 2.3배, 적어도 약 2.4배, 적어도 약 2.5배, 적어도 약 2.6배, 적어도 약 2.7배, 적어도 약 2.8배, 적어도 약 2.9배, 적어도 약 3배, 적어도 약 3.1배, 적어도 약 3.2배, 적어도 약 3.3배, 적어도 약 3.4배, 적어도 약 3.5배, 적어도 약 3.6배, 적어도 약 3.7배, 적어도 약 3.8배, 적어도 약 3.9배, 적어도 약 4배, 적어도 약 4.1배, 적어도 약 4.2배, 적어도 약 4.3배, 적어도 약 4.4배, 적어도 약 4.5배, 적어도 약 4.6배, 적어도 약 4.7배, 적어도 약 4.8배, 적어도 약 4.9배, 적어도 약 5배 또는 그 초과의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 6 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 2배 이상의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 6 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 3배 이상의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 6 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200%, 210%, 220%, 230%, 240%, 250% 또는 그 초과 중 어느 하나의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 13일, 약 14일, 약 18일, 약 21일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일, 약 43일, 약 44일, 약 45일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 43일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 42일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 43일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 28일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 15 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 1.2배, 적어도 약 1.3배, 적어도 약 1.4배, 적어도 약 1.5배, 적어도 약 1.6배, 적어도 약 1.7배, 적어도 약 1.8배, 적어도 약 1.9배, 적어도 약 2배, 적어도 약 2.1배, 적어도 약 2.2배, 적어도 약 2.3배, 적어도 약 2.4배, 적어도 약 2.5배, 적어도 약 2.6배, 적어도 약 2.7배, 적어도 약 2.8배, 적어도 약 2.9배, 적어도 약 3배, 적어도 약 3.1배, 적어도 약 3.2배, 적어도 약 3.3배, 적어도 약 3.4배, 적어도 약 3.5배, 적어도 약 3.6배, 적어도 약 3.7배, 적어도 약 3.8배, 적어도 약 3.9배, 적어도 약 4배, 적어도 약 4.1배, 적어도 약 4.2배, 적어도 약 4.3배, 적어도 약 4.4배, 적어도 약 4.5배, 적어도 약 4.6배, 적어도 약 4.7배, 적어도 약 4.8배, 적어도 약 4.9배, 적어도 약 5배 또는 그 초과의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 15 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 2배 이상의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 15 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 3배 이상의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 15 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200%, 210%, 220%, 230%, 240%, 250% 또는 그 초과 중 어느 하나의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 13일, 약 14일, 약 18일, 약 21일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일, 약 43일, 약 44일, 약 45일, 약 46일, 약 47일, 약 48일, 약 49일, 약 50일, 약 51일, 약 52일, 약 53일, 약 54일, 약 55일, 약 56일, 약 57일, 약 58일, 약 59일, 약 60일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 42일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 30 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 1.2배, 적어도 약 1.3배, 적어도 약 1.4배, 적어도 약 1.5배, 적어도 약 1.6배, 적어도 약 1.7배, 적어도 약 1.8배, 적어도 약 1.9배, 적어도 약 2배, 적어도 약 2.1배, 적어도 약 2.2배, 적어도 약 2.3배, 적어도 약 2.4배, 적어도 약 2.5배, 적어도 약 2.6배, 적어도 약 2.7배, 적어도 약 2.8배, 적어도 약 2.9배, 적어도 약 3배, 적어도 약 3.1배, 적어도 약 3.2배, 적어도 약 3.3배, 적어도 약 3.4배, 적어도 약 3.5배, 적어도 약 3.6배, 적어도 약 3.7배, 적어도 약 3.8배, 적어도 약 3.9배, 적어도 약 4배, 적어도 약 4.1배, 적어도 약 4.2배, 적어도 약 4.3배, 적어도 약 4.4배, 적어도 약 4.5배, 적어도 약 4.6배, 적어도 약 4.7배, 적어도 약 4.8배, 적어도 약 4.9배, 적어도 약 5배 또는 그 초과의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 30 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 2배 이상의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 30 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 3배 이상의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 30 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200%, 210%, 220%, 230%, 240%, 250%, 260%, 270%, 280%, 290%, 300% 또는 그 초과 중 어느 하나의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 13일, 약 18일, 약 21일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일, 약 43일, 약 44일, 약 45일, 약 46일, 약 47일, 약 48일, 약 49일, 약 50일, 약 51일, 약 52일, 약 53일, 약 54일, 약 55일, 약 56일, 약 57일, 약 58일, 약 59일, 약 60일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 56일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 60 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 1.2배, 적어도 약 1.3배, 적어도 약 1.4배, 적어도 약 1.5배, 적어도 약 1.6배, 적어도 약 1.7배, 적어도 약 1.8배, 적어도 약 1.9배, 적어도 약 2배, 적어도 약 2.1배, 적어도 약 2.2배, 적어도 약 2.3배, 적어도 약 2.4배, 적어도 약 2.5배, 적어도 약 2.6배, 적어도 약 2.7배, 적어도 약 2.8배, 적어도 약 2.9배, 적어도 약 3배, 적어도 약 3.1배, 적어도 약 3.2배, 적어도 약 3.3배, 적어도 약 3.4배, 적어도 약 3.5배, 적어도 약 3.6배, 적어도 약 3.7배, 적어도 약 3.8배, 적어도 약 3.9배, 적어도 약 4배, 적어도 약 4.1배, 적어도 약 4.2배, 적어도 약 4.3배, 적어도 약 4.4배, 적어도 약 4.5배, 적어도 약 4.6배, 적어도 약 4.7배, 적어도 약 4.8배, 적어도 약 4.9배, 적어도 약 5배 또는 그 초과의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 60 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 2배 이상의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 60 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 3배 이상의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 60 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200%, 210%, 220%, 230%, 240%, 250%, 260%, 270%, 280%, 290%, 300% 또는 그 초과 중 어느 하나의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 13일, 약 14일, 약 18일, 약 21일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일, 약 43일, 약 44일, 약 45일, 약 46일, 약 47일, 약 48일, 약 49일, 약 50일, 약 51일, 약 52일, 약 53일, 약 54일, 약 55일, 약 56일, 약 57일, 약 58일, 약 59일, 약 60일, 약 61일, 약 62일, 약 63일, 약 64일, 약 65일, 약 66일, 약 67일, 약 68일, 약 69일, 약 70일, 약 71일, 약 72일, 약 73일, 약 74일, 약 75일, 약 76일, 약 77일, 약 78일, 약 79일, 약 80일, 약 81일, 약 82일, 약 83일, 약 84일, 약 85일, 약 86일, 약 87일, 약 88일, 약 89일, 약 90일, 약 91일, 약 92일, 약 93일, 약 94일, 약 95일, 약 96일, 약 97일, 약 98일, 약 99일, 약 100일, 약 101일, 약 102일, 약 103일, 약 104일, 약 105일, 약 106일, 약 107일, 약 108일, 약 109일, 약 110일, 약 111일, 약 112일, 약 113일, 약 114일, 약 115일, 약 116일, 약 117일, 약 118일, 약 119일, 약 120일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 84일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 84일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 150 mg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 피하 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200% 또는 그 초과 중 어느 하나의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 13일, 약 14일, 약 18일, 약 21일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 28일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 28일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 300 mg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 피하 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200% 또는 그 초과 중 어느 하나의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 13일, 약 14일, 약 18일, 약 21일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 28일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 28일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 600 mg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 피하 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190%, 200% 또는 그 초과 중 어느 하나의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 13일, 약 14일, 약 18일, 약 21일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 28일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 28일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 6 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 6%, 적어도 약 7%, 적어도 약 8%, 적어도 약 9%, 적어도 약 10%, 적어도 약 11%, 적어도 약 12%, 적어도 약 13%, 적어도 약 14%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19%, 적어도 약 20%, 적어도 약 21%, 적어도 약 22%, 적어도 약 23%, 적어도 약 24%, 적어도 약 25% 또는 그 초과의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 6 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 6 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 10% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 6 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 12% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 6 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 15% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 6 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 18% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 13일, 약 14일, 약 18일, 약 21일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일, 약 43일, 약 44일, 약 45일, 약 46일, 약 47일, 약 48일, 약 49일, 약 50일, 약 51일, 약 52일, 약 53일, 약 54일, 약 55일, 약 56일, 약 57일, 약 58일, 약 59일, 약 60일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 25일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 43일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 15 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 6%, 적어도 약 7%, 적어도 약 8%, 적어도 약 9%, 적어도 약 10%, 적어도 약 11%, 적어도 약 12%, 적어도 약 13%, 적어도 약 14%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19%, 적어도 약 20%, 적어도 약 21%, 적어도 약 22%, 적어도 약 23%, 적어도 약 24%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 100% 또는 그 초과의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 15 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 15% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 15 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 60% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 15 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 80% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 13일, 약 14일, 약 18일, 약 21일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일, 약 43일, 약 44일, 약 45일, 약 46일, 약 47일, 약 48일, 약 49일, 약 50일, 약 51일, 약 52일, 약 53일, 약 54일, 약 55일, 약 56일, 약 57일, 약 58일, 약 59일, 약 60일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 25일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 43일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 30 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 6%, 적어도 약 7%, 적어도 약 8%, 적어도 약 9%, 적어도 약 10%, 적어도 약 11%, 적어도 약 12%, 적어도 약 13%, 적어도 약 14%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19%, 적어도 약 20%, 적어도 약 21%, 적어도 약 22%, 적어도 약 23%, 적어도 약 24%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 100% 또는 그 초과의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 30 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 15% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 30 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 60% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 30 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 80% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 13일, 약 14일, 약 18일, 약 21일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일, 약 43일, 약 44일, 약 45일, 약 46일, 약 47일, 약 48일, 약 49일, 약 50일, 약 51일, 약 52일, 약 53일, 약 54일, 약 55일, 약 56일, 약 57일, 약 58일, 약 59일, 약 60일, 약 61일, 약 62일, 약 63일, 약 64일, 약 65일, 약 66일, 약 67일, 약 68일, 약 69일, 약 70일, 약 71일, 약 72일, 약 73일, 약 74일, 약 75일, 약 76일, 약 77일, 약 78일, 약 79일, 약 80일, 약 81일, 약 82일, 약 83일, 약 84일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 25일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 43일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 60 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 6%, 적어도 약 7%, 적어도 약 8%, 적어도 약 9%, 적어도 약 10%, 적어도 약 11%, 적어도 약 12%, 적어도 약 13%, 적어도 약 14%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19%, 적어도 약 20%, 적어도 약 21%, 적어도 약 22%, 적어도 약 23%, 적어도 약 24%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 적어도 약 100% 또는 그 초과의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 60 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 15% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 60 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 60% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 60 mg/kg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 정맥내 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 80% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 8일, 약 13일, 약 18일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일, 약 43일, 약 44일, 약 45일, 약 46일, 약 47일, 약 48일, 약 49일, 약 50일, 약 51일, 약 52일, 약 53일, 약 54일, 약 55일, 약 56일, 약 57일, 약 58일, 약 59일, 약 60일, 약 61일, 약 62일, 약 63일, 약 64일, 약 65일, 약 66일, 약 67일, 약 68일, 약 69일, 약 70일, 약 71일, 약 72일, 약 73일, 약 74일, 약 75일, 약 76일, 약 77일, 약 78일, 약 79일, 약 80일, 약 81일, 약 82일, 약 83일, 약 84일, 약 85일, 약 86일, 약 87일, 약 88일, 약 89일, 약 90일, 약 91일, 약 92일, 약 93일, 약 94일, 약 95일, 약 96일, 약 97일, 약 98일, 약 99일, 약 100일, 약 101일, 약 102일, 약 103일, 약 104일, 약 105일, 약 106일, 약 107일, 약 108일, 약 109일, 약 110일, 약 111일, 약 112일, 약 113일, 약 114일, 약 115일, 약 116일, 약 117일, 약 118일, 약 119일, 약 120일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 25일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 43일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 57일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 84일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 150 mg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 피하 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 6%, 적어도 약 7%, 적어도 약 8%, 적어도 약 9%, 적어도 약 10%, 적어도 약 11%, 적어도 약 12%, 적어도 약 13%, 적어도 약 14%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19%, 적어도 약 20%, 적어도 약 21%, 적어도 약 22%, 적어도 약 23%, 적어도 약 24%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70% 또는 그 초과의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 300 mg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 피하 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 6%, 적어도 약 7%, 적어도 약 8%, 적어도 약 9%, 적어도 약 10%, 적어도 약 11%, 적어도 약 12%, 적어도 약 13%, 적어도 약 14%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19%, 적어도 약 20%, 적어도 약 21%, 적어도 약 22%, 적어도 약 23%, 적어도 약 24%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70% 또는 그 초과의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 8일, 약 13일, 약 18일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 21일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 42일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 7일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 14일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 27일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 600 mg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 피하 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 6%, 적어도 약 7%, 적어도 약 8%, 적어도 약 9%, 적어도 약 10%, 적어도 약 11%, 적어도 약 12%, 적어도 약 13%, 적어도 약 14%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19%, 적어도 약 20%, 적어도 약 21%, 적어도 약 22%, 적어도 약 23%, 적어도 약 24%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70% 또는 그 초과의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 600 mg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 피하 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 40% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 600 mg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 피하 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 35% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 약 600 mg의 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 용량의 개체에게의 피하 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 20% 이상의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가를 초래한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 6일, 약 8일, 약 13일, 약 18일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일 또는 그 초과에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 21일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내부터 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 42일 이상까지 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 7일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 14일 이상에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준의 증가는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 27일 이상에 존재한다.

일부 실시양태에서, 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준은 개체로부터 수득된 샘플에서 측정된다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 단백질 수준은 개체로부터 수득된 혈액의 샘플에서 측정된다. 일부 실시양태에서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준은 개체로부터 수득된 뇌척수액의 샘플에서 측정된다. 일부 실시양태에서, 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준은 관련 기술분야에 공지된 단백질을 정량화하는 임의의 방법을 사용하여 결정된다. 프로그래뉼린 단백질을 정량화하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA)을 포함한다. 특정 실시양태에서, 개체의 혈장 또는 뇌척수액 내 프로그래뉼린 단백질 수준은 ELISA 검정을 사용하여 결정된다.

소르틸린

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 질환 또는 장애의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법은 백혈구 내 소르틸린 단백질 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 백혈구 내 소르틸린 단백질 수준은 개체가 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액의 샘플에서 측정된다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법에 따른 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 개체에게의 투여는 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 백혈구 내 소르틸린 단백질 수준과 비교하여 개체의 백혈구 내 소르틸린 단백질 수준의 감소를 초래한다. 일부 실시양태에서, 항-소르틸린 항체의 투여 후 개체의 백혈구 내 소르틸린 단백질 수준은 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 백혈구 내 소르틸린 단백질 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 6%, 적어도 약 7%, 적어도 약 8%, 적어도 약 9%, 적어도 약 10%, 적어도 약 11%, 적어도 약 12%, 적어도 약 13%, 적어도 약 14%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19%, 적어도 약 20%, 적어도 약 21%, 적어도 약 22%, 적어도 약 23%, 적어도 약 24%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95% 또는 약 100%만큼 감소된다. 일부 실시양태에서, 개체의 백혈구 내 소르틸린 수준의 감소는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1시간, 약 2시간, 약 4시간, 약 6시간, 약 8시간, 약 10시간, 약 12시간, 약 14시간, 약 16시간, 약 18시간, 약 20시간, 약 22시간, 약 24시간 또는 그 초과 중 어느 하나에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 백혈구 내 소르틸린 수준의 감소는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 24시간, 약 36시간, 약 48시간, 약 60시간, 약 72시간 또는 그 초과 중 어느 하나에 존재한다. 일부 실시양태에서, 개체의 백혈구 내 소르틸린 수준의 감소는 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 3일, 약 4일, 약 5일, 약 6일, 약 7일, 약 8일, 약 9일, 약 10일, 약 11일, 약 12일, 약 13일, 약 14일, 약 15일, 약 16일, 약 17일, 약 18일, 약 19일, 약 20일, 약 21일, 약 22일, 약 23일, 약 24일, 약 25일, 약 26일, 약 27일, 약 28일, 약 29일, 약 30일, 약 31일, 약 32일, 약 33일, 약 34일, 약 35일, 약 36일, 약 37일, 약 38일, 약 39일, 약 40일, 약 41일, 약 42일, 약 43일, 약 44일, 약 45일, 약 46일, 약 47일, 약 48일, 약 49일, 약 50일, 약 51일, 약 52일, 약 53일, 약 54일, 약 55일, 약 56일, 약 57일, 약 58일, 약 59일, 약 60일, 약 61일, 약 62일, 약 63일, 약 64일, 약 65일, 약 66일, 약 67일, 약 68일, 약 69일, 약 70일, 약 71일, 약 72일, 약 73일, 약 74일, 약 75일, 약 76일, 약 77일, 약 78일, 약 79일, 약 80일, 약 81일, 약 82일, 약 83일, 약 84일, 약 85일, 약 86일, 약 87일, 약 88일, 약 89일, 약 90일, 약 91일, 약 92일, 약 93일, 약 94일, 약 95일, 약 96일, 약 97일, 약 98일, 약 99일, 약 100일, 약 101일, 약 102일, 약 103일, 약 104일, 약 105일, 약 106일, 약 107일, 약 108일, 약 109일, 약 110일, 약 111일, 약 112일, 약 113일, 약 114일, 약 115일, 약 116일, 약 117일, 약 118일, 약 119일, 약 120일, 약 121일, 약 122일, 약 123일, 약 124일, 약 125일, 약 126일, 약 127일, 약 1280일, 약 129일, 약 130일, 약 131일, 약 132일, 약 133일, 약 134일, 약 135일, 약 136일, 약 137일, 약 138일, 약 139일, 약 140일, 약 141일, 약 142일, 약 143일, 약 144일, 약 145일, 약 146일, 약 147일, 약 148일, 약 149일, 약 150일, 약 151일, 약 152일, 약 153일, 약 154일, 약 155일, 약 156일, 약 157일, 약 158일, 약 159일, 약 160일, 약 161일, 약 162일, 약 163일, 약 164일, 약 165일, 약 166일, 약 167일, 약 168일, 약 169일, 약 170일, 약 171일, 약 172일, 약 173일, 약 174일, 약 175일, 약 176일, 약 177일, 약 178일, 약 179일, 약 180일, 약 181일, 약 182일, 약 183일, 약 184일, 약 185일, 약 186일, 약 187일, 약 188일, 약 189일, 약 190일, 약 191일, 약 192일, 약 193일, 약 194일, 약 195일, 약 196일, 약 197일, 약 198일, 약 199일, 약 200일, 약 201일 또는 그 초과 중 어느 하나에 존재한다.

일부 실시양태에서, 개체의 백혈구 내 소르틸린 단백질 수준은 관련 기술분야에 공지된 단백질을 정량화하는 임의의 방법을 사용하여 결정된다. 소르틸린 단백질을 정량화하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 (ELISA) 검정을 포함한다. 특정 실시양태에서, 백혈구 내 소르틸린 단백질 수준은 ELISA 검정을 사용하여 결정된다.

질환 및 신경염증 바이오마커

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 질환 또는 장애의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법은 신경필라멘트 경쇄 (NF-L)의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, NF-L의 수준은 개체가 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액 (예를 들어, 혈장) 또는 뇌척수액의 샘플에서 측정된다. 개체로부터 수득된 샘플에서 NF-L의 수준을 측정하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA)을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 질환 또는 장애의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법은 Tau 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, Tau 수준은 개체가 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액 또는 뇌척수액의 샘플에서 측정된다. 개체로부터 수득된 샘플에서 Tau 수준을 측정하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA)을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 질환 또는 장애의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법은 하나 이상의 신경염증의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 신경염증의 바이오마커의 수준은 개체가 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액 또는 뇌척수액의 샘플에서 측정된다. 신경염증의 바이오마커는 IL-6, SPP1, IFI2712A, CHIT1, YKL-40, GFAP, YWHAE, CSF1, AIF1, LY86, CD86 및 TOP2A를 제한 없이 포함한다. 개체로부터 수득된 샘플에서 하나 이상의 바이오마커의 수준을 측정하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA)을 포함한다.

치료를 모니터링하는 방법

또한 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 투여받는 개체의 치료를 모니터링하는 방법이 본원에 제공된다.

일부 실시양태에서, 치료를 모니터링하는 방법은 개체가 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 프로그래뉼린 단백질, GCase 단백질, 신경필라멘트 경쇄 (NF-L), Tau, 하나 이상의 신경염증의 마커, 또는 알파-시누클레인 단백질로부터 선택된 하나 이상의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 샘플 내 하나 이상의 바이오마커의 수준에 기초하여 개체에서 항-소르틸린 항체의 활성을 평가하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 샘플은 개체의 뇌척수액 또는 개체의 혈액, 예를 들어 혈장으로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 개체의 뇌척수액으로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 개체의 혈액, 예를 들어 혈장으로부터 유래된다. 개체로부터 수득된 샘플에서 하나 이상의 바이오마커의 수준을 측정하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA)을 포함한다.

일부 실시양태에서, 치료를 모니터링하는 방법은 개체가 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 뇌척수액의 샘플에서 하나 이상의 뇌척수액 프로테옴의 바이오마커를 측정하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방법은 샘플 내 하나 이상의 바이오마커의 수준에 기초하여 개체에서 항-소르틸린 항체의 활성을 평가하는 단계를 추가로 포함한다. 개체로부터 수득된 샘플에서 하나 이상의 바이오마커의 수준을 측정하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 질량 분광법, 웨스턴 블롯, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA)을 포함한다.

일부 실시양태에서, 치료를 모니터링하는 방법은 개체가 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 샘플에서 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커는 GCase 단백질, GCase 활성, lyso-Gb1, 또는 글루코실세라미드로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 방법은 샘플 내 하나 이상의 바이오마커의 수준에 기초하여 개체에서 항-소르틸린 항체의 활성을 평가하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 샘플은 개체의 뇌척수액 또는 개체의 혈액, 예를 들어 혈장으로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 개체의 뇌척수액으로부터 유래된다. 일부 실시양태에서, 샘플은 개체의 혈액, 예를 들어 혈장으로부터 유래된다. 개체로부터 수득된 샘플에서 하나 이상의 바이오마커의 수준을 측정하는데 사용될 수 있는 방법의 비제한적 예는 SOMASCAN 검정 (예를 들어, 문헌 [Candia et al. (2017) Sci Rep 7, 14248] 참조), 웨스턴 블롯, 질량 분광법, 유동 세포계측법 및 효소-결합 면역흡착 검정 (ELISA)을 포함한다.

제약 조성물

본 개시내용의 항-소르틸린 항체 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물 및/또는 제약 제형이 본원에 제공된다.

일부 실시양태에서, 제약상 허용되는 담체는 바람직하게는 사용되는 투여량 및 농도에서 수용자에게 무독성이다. 본원에 기재된 항체는 고체, 반고체, 액체 또는 기체성 형태로 제제로 제형화될 수 있다. 이러한 제형의 예는 정제, 캡슐, 분말, 과립, 연고, 용액, 좌제, 주사, 흡입제, 겔, 마이크로스피어 및 에어로졸을 제한 없이 포함한다. 제약상 허용되는 담체는 원하는 제형에 따라, 동물 또는 인간 투여를 위한 제약 조성물을 제형화하는데 통상적으로 사용되는 비히클인 희석제의 제약상-허용되는 비-독성 담체를 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 제약 조성물은 예를 들어, 조성물의 pH, 삼투압, 점도, 투명도, 색상, 등장성, 냄새, 멸균성, 안정성, 용해 또는 방출의 속도, 흡착 또는 침투를 변형, 유지 또는 보존하기 위한 제형 물질을 포함할 수 있다.

특정 실시양태에서, 제약상 허용되는 담체는 아미노산 (예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌 또는 리신); 항미생물제; 항산화제 (예컨대 아스코르브산, 아황산나트륨 또는 아황산수소나트륨); 완충제 (예컨대 보레이트, 바이카르보네이트, 트리스-HCl, 시트레이트, 포스페이트 또는 다른 유기산); 벌크화제 (예컨대 만니톨 또는 글리신); 킬레이트화제 (예컨대 에틸렌디아민 테트라아세트산 (EDTA)); 착화제 (예컨대 카페인, 폴리비닐피롤리돈, 베타-시클로덱스트린 또는 히드록시프로필-베타-시클로덱스트린); 충전제; 모노사카라이드; 디사카라이드; 및 다른 탄수화물 (예컨대 글루코스, 만노스 또는 덱스트린); 단백질 (예컨대 혈청 알부민, 젤라틴 또는 이뮤노글로불린); 착색제, 향미제 및 희석제; 유화제; 친수성 중합체 (예컨대 폴리비닐피롤리돈); 저분자량 폴리펩티드; 염-형성 반대이온 (예컨대 나트륨); 보존제 (예컨대 벤즈알코늄 클로라이드, 벤조산, 살리실산, 티메로살, 페네틸 알콜, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로르헥시딘, 소르브산 또는 과산화수소); 용매 (예컨대 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜); 당 알콜 (예컨대 만니톨 또는 소르비톨); 현탁화제; 계면활성제 또는 습윤화제 (예컨대 플루로닉스, PEG, 소르비탄 에스테르, 폴리소르베이트, 예컨대 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80, 트리톤, 트로메타민, 레시틴, 콜레스테롤, 틸록사팔); 안정성 증진제 (예컨대 수크로스 또는 소르비톨); 긴장성 증진제 (예컨대 알칼리 금속 할라이드, 바람직하게는 염화나트륨 또는 염화칼륨, 만니톨, 소르비톨); 전달 비히클; 희석제; 부형제 및/또는 제약 아주반트를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 다양한 유형의 투여에 적합한 제형의 추가의 예는 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Pharmaceutical Press 22nd ed. (2013)]에서 찾을 수 있다. 약물 전달을 위한 방법의 간략한 검토에 대해서는, 문헌 [Langer, Science 249:1527-1533 (1990)]을 참조한다.

비경구 투여에 적합한 제형은 항산화제, 완충제, 정균제 및 제형을 의도된 수용자의 혈액과 등장성이 되게 하는 용질을 포함할 수 있는 수성 및 비-수성, 등장성 멸균 주사 용액, 및 현탁화제, 가용화제, 증점제, 안정화제 및 보존제를 포함할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 현탁액을 포함한다.

제형은 뇌 또는 중추 신경계에서의 체류 및 안정화를 위해 최적화될 수 있다. 작용제가 두개 구획 내로 투여되는 경우, 작용제는 구획에서 보유되고, 혈액 뇌 장벽을 확산하거나 다르게는 가로지르지 않는 것이 바람직하다. 안정화 기술은 분자량의 증가를 달성하기 위해 기, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜, 폴리아크릴아미드, 중성 단백질 담체 등에의 가교, 다량체화 또는 연결을 포함한다.

체류를 증가시키기 위한 다른 전략은 생체분해성 또는 생체침식성 삽입물에서의 항체, 예컨대 본 개시내용의 항-소르틸린 항체의 포착을 포함한다. 항체의 방출의 속도는 중합체성 매트릭스를 통한 수송, 및 삽입물의 생체분해의 속도에 의해 제어된다. 삽입물은 입자, 시트, 패치, 플라크, 섬유, 마이크로캡슐 등일 수 있으며, 선택된 삽입 부위와 혼화성인 임의의 크기 또는 형상의 것일 수 있다. 사용될 수 있는 생체분해성 중합체성 조성물은 분해되는 경우 단량체를 포함한 생리학상 허용되는 분해 산물을 초래하는 유기 에스테르 또는 에테르일 수 있다. 무수물, 아미드, 오르토에스테르 등은 그 자체로 또는 다른 단량체와 조합으로 용도를 발견할 수 있다. 중합체는 축합 중합체일 수 있다. 중합체는 가교되거나 비-가교될 수 있다. 특히 관심이 있는 것은 단독- 또는 공중합체인 히드록시지방족 카르복실산의 중합체 및 폴리사카라이드이다. 관심 폴리에스테르 중에서 포함되는 것은 D-락트산, L-락트산, 라세미 락트산, 글리콜산, 폴리카프로락톤 및 이들의 조합의 중합체이다. 관심 폴리사카라이드 중에는 알긴산칼슘, 및 관능화된 셀룰로스, 특히 수불용성, 약 5 kD 내지 500 kD의 분자량을 특징으로 하는 카르복시메틸셀룰로스 에스테르 등이 있다. 생체분해성 히드로겔은 또한 본 개시내용의 삽입물에서 사용될 수 있다. 히드로겔은 전형적으로 액체를 흡수하는 능력을 특징으로 하는 공중합체 물질이다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 제약 조성물 또는 제형은 본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 포함하고, 정맥내 주입 및/또는 피하 주사에 의해 인간 대상체에게 투여하기에 적합하다.

키트/제조품

본 개시내용의 항-소르틸린 항체를 포함하는 제조품 (예를 들어, 키트)이 본원에 제공된다. 제조품은 본원에 기재된 항체를 포함하는 하나 이상의 용기를 포함할 수 있다. 용기는 바이알, 보틀, 자(jar), 유연성 패키징 (예를 들어, 밀봉된 마일라(Mylar) 또는 플라스틱 백) 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는 임의의 적합한 패키징일 수 있다. 용기는 단위 용량, 벌크 패키지 (예를 들어, 다중-용량 패키지) 또는 하위-단위 용량일 수 있다.

일부 실시양태에서, 키트는 제2 작용제를 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제는 주사용 정균수 (BWFI), 포스페이트-완충 염수, 링거 용액 및 덱스트로스 용액을 포함하나 이에 제한되지는 않는 제약상-허용되는 완충제 또는 희석제이다. 일부 실시양태에서, 제2 작용제는 제약상 활성 작용제이다.

제조품 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, 제조품은 본 개시내용의 방법에 따라 사용하기 위한 지침서를 추가로 포함한다. 지침서는 일반적으로 의도된 치료를 위한 투여량, 투약 스케줄 및 투여 경로에 대한 정보를 포함한다. 일부 실시양태에서, 이들 지침서는 전두측두엽 치매, 진행성 핵상 마비, 알츠하이머병, 혈관성 치매, 발작, 망막 이영양증, 근위축성 측삭 경화증, 외상성 뇌 손상, 척수 손상, 치매, 뇌졸중, 파킨슨병, 급성 파종성 뇌척수염, 망막 변성, 연령 관련 황반 변성, 녹내장, 다발성 경화증, 패혈성 쇼크, 박테리아 감염, 관절염 또는 골관절염으로부터 선택된 질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체를 예방, 이의 위험을 감소 또는 치료하기 위한 본 개시내용의 임의의 방법에 따른 본 개시내용의 항체 (예를 들어, 본원에 기재된 항-소르틸린 항체)의 투여의 설명을 포함한다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 전두측두엽 치매이다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 알츠하이머병이다. 일부 실시양태에서, 질환, 장애 또는 손상은 파킨슨병이다. 일부 실시양태에서, 지침서는 항-소르틸린 항체 및 제2 작용제 (예를 들어, 제2 제약상 활성 작용제)의 사용을 위한 지침서를 포함한다.

본 개시내용은 하기 실시예를 참조로 보다 충분히 이해될 것이다. 그러나, 이들은 본 개시내용의 범위를 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다. 본 개시내용 전반에 걸쳐 모든 인용문헌은 명시적으로 본원에 참조로 포함된다.

실시예

실시예 1: 정맥내 및 피하 항-소르틸린 항체 ALX의 안전성, 관용성, 약동학, 약력학 및 생체이용률을 평가하기 위한 건강한 지원자에서의 I상 연구.

본 실시예는 정맥내 또는 피하 투여된 항-소르틸린 항체 ALX의 안전성, 관용성, 약동학, 약력학 및 생체이용률을 평가하기 위한 건강한 지원자에서의 I상 연구를 설명한다.

항-소르틸린 항체 ALX는 서열식별번호: 31 또는 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 본 연구에서, 서열식별번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 코딩하는 하나 이상의 핵산을 발현시킴으로써 항-소르틸린 항체 ALX를 생산하였다.

I. 연구 목적

본 연구의 1차 목적은 건강한 인간 지원자 (HV)에서 정맥내 (IV) 주입에 의해 증량하는 단일 용량으로 또는 단일 피하 (SC) 투여로서 투여될 때 항체 ALX의 안전성, 관용성, 약동학 (PK), 약력학 (PD) 및 생체이용률을 평가하는 것이다. 본 연구는 또한 HV에서 IV 주입에 의해 또는 SC 투여로서 항체 ALX의 다중 용량의 투여를 평가하도록 설계된다.

A. 1차 결과 척도

본 연구의 1차 결과 척도는 유해 사건 (AE) 및 용량-제한 유해 사건 (DLAE)을 경험한 대상체의 수에 기초하여 평가된 항체 ALX의 안전성 및 관용성의 평가이다.

B. 2차 결과 척도

본 연구의 2차 결과 척도는 하기를 포함한다:

· 항체 ALX의 혈청 및 뇌척수액 (CSF) 농도에 기초하여 평가된 항체 ALX의 약동학 (PK).

· 혈청 또는 혈장 및 CSF 내 항체 ALX에 대한 최대 농도 (C_max).

· 항체 ALX의 혈청 및 CSF 농도에 기초한 항체 ALX에 대한 곡선 아래 면적 (AUC).

II. 연구 참여자

건강한 남성 및 여성 인간 지원자가 본 연구에 포함된다.

A. 포함 기준

하기 기준을 충족하는 건강한 인간 지원자가 본 연구에 포함된다.

· 남성 또는 여성, 18-65세 연령 (포함), 스크리닝 시.

· 체질량 지수 18.0-35.0 kg/m² (포함).

· 체중 45-120 kg (포함).

· 병력, 신체 검사, 실험실 테스트, 12 리드 심전도 (ECG) 및 활력 징후로부터 임상적으로 유의한 소견이 없음에 기초하여 양호한 신체 건강.

B. 배제 기준

하기 기준 중 임의의 것을 충족하는 대상체는 본 연구에 포함되지 않는다.

· 키메라, 인간 또는 인간화 항체 또는 융합 단백질에 대한 중증 알레르기, 아나필락시스 또는 기타 과민 반응의 공지된 병력.

· 소아기 열성 발작을 제외한 발작의 과거 병력.

· 스크리닝 전 30일 이내에 경구 또는 IV 항생제가 필요한 심각한 감염.

· 면역-저해 약제의 지속적인 효과로 인해 임상적으로 유의한 전신 면역저하 상태.

· 주요 우울증, 정신분열증, 분열정동 장애 또는 양극성 장애의 병력.

· 치유될 가능성이 있는 것으로 간주되는 경우를 제외하고 암의 병력은 항암 요법 또는 방사선요법으로 적극적으로 치료되고 있지 않고, 향후 3년 동안 치료가 필요할 가능성이 없고, 재발 가능성이 낮은 것으로 간주된다.

· B형 간염 표면 항원, 항-C형 간염 바이러스 항체 또는 항-인간 면역결핍 바이러스 (HIV)-1 및 -2 항체 또는 항원에 대해 양성, 또는 중추 신경계의 스피로헤타 감염 (예를 들어, 매독, 라임병 또는 보렐리아증)의 병력.

· 콕크로프트-골트(Cockcroft-Gault) 공식을 사용하여 계산된 바와 같은 < 30 mL/min의 스크리닝 크레아티닌 클리어런스 (CL)로 표시된 바와 같은 만성 신장 질환, 이는 재테스트되는 경우 < 30 mL/min으로 유지된다.

· ≥ 2 × 정상의 상한의 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST) 또는 알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALT) 또는 ≥ 1.5 × 정상의 상한의 총 빌리루빈의 스크리닝에 의해 표시된 바와 같고, 약간 상승된 초기 결과 또는 임상적으로 유의한 합성 기능 테스트의 이상으로 인해 재테스트되는 경우 이들 한계 이상으로 유지되는 손상된 간 기능.

· 지난 2년 이내에, 불안정적 또는 임상적으로 유의한 심혈관 질환 (예를 들어, 심근경색, 협심증, 또는 뉴욕심장협회 클래스 II 이상의 심부전).

· 비제어되는 고혈압 (즉, > 140 mmHg 수축기 또는 > 90 mmHg 이완기의 지속적인 안정 시 혈압).

· 완전한 왼쪽 다발 갈래 차단, 2도 또는 3도 심장 차단, 또는 이전 심근경색의 증거를 포함하여 임상적으로 유의한 비정상적인 ECG의 병력 또는 존재.

· 남성 참여자의 경우 > 450 ms 및 여성 참여자의 경우 > 470 ms (3중 스크리닝 측정의 평균)의 프리데리시아(Fridericia) 공식을 사용하여 수정된 QT 간격.

· 심실 부정맥의 병력 또는 심실 부정맥, 예컨대 구조적 심장 질환 (예를 들어, 중증 좌심실 수축 기능장애 또는 좌심실 비대), 관상동맥 심장 질환 (증상이 있거나 진단 테스트에 의해 입증된 허혈이 있음), 임상적으로 유의한 전해질 이상 (예를 들어, 저칼륨혈증, 저마그네슘혈증 또는 저칼슘혈증)에 대한 위험 인자, 또는 설명할 수 없는 급사 또는 긴 QT 증후군의 가족력.

III. 연구 설계

본 연구는 IV 및 SC 경로를 통해 투여된 항-소르틸린 항체 ALX의 단일 용량의 안전성, 관용성, PK, PD 및 생체이용률을 조사하도록 설계된 인간 최초의 I상 연구이다. 연구 설계의 개요는 도 1에 제공된다. 본 연구는 또한 IV 및 SC 경로를 통한 항체 ALX의 다중 용량의 투여를 평가한다.

본 연구는 11명의 HV 참여자의 대략 3개 코호트에서 항체 ALX의 단일 상승 용량 (SAD)의 IV 투여를 포함한다. 제1 3개 코호트에 대한 용량 수준은 6 mg/kg, 15 mg/kg 및 30 mg/kg이다. 일부 실시양태에서, 추가적인 IV SAD 코호트가 60 mg/kg으로 포함된다.

SAD IV 코호트에 더하여, 하나의 단일 용량 (SD) 코호트는 항체 ALX의 SC 투여의 생체이용률 및 관용성을 평가한다. SD SC 코호트는 600 mg의 고정 용량으로 항체 ALX를 투여받은 9명의 HV 참여자를 포함한다. 투약 유연성이 필요한 경우 하나의 추가 SD SC 코호트가 등록된다. 하기 코호트를 또한 하기 기재된 바와 같이 평가한다: 단일 용량 SC 150 mg 코호트, 다중-용량 (MD) SC 코호트, 및 다중-용량 IV 코호트.

모든 코호트는 뇌에서 PK 및 PD를 평가하기 위해 투약전 (기준선) 및 투약후 2개의 시점에서 뇌척수액 (CSF) 샘플링을 필요로 한다. 각 코호트 내의 서브그룹은 코호트 전체에 걸쳐 더 많은 시점 (투약후 총 3개의 시점)에서 CSF 샘플링을 허용하기 위해 상이한 투약후 시점에서 CSF를 샘플링하였다. CSF 서브그룹은 IV 및 SC 코호트 둘 모두에 대해 하기 기재되어 있다.

본 연구에서 모든 참여자는 안전성, PK, PD 및 생체이용률의 평가를 위해 항체 ALX의 단일 용량 후 12주 동안 추적조사된다. 일부 실시양태에서, 참여자는 항체 ALX의 단일 용량 후 16주 동안 추적조사된다.

A. 단일-상승-용량 IV 코호트

각 SAD IV 코호트에서, 11명의 HV 참여자는 최대 3개의 용량 코호트 (코호트 1, 2 및 3)에서 8:3 (항체 ALX:PBO)의 비율로 항체 ALX 또는 위약 (PBO)을 받도록 무작위화된다. 통틀어, 대략 33명의 HV 참여자가 포함된다. 제1 SAD IV 코호트는 6 mg/kg의 항체 ALX를 투약받는다. 후속 SAD IV 코호트에 대한 용량 수준은 15 mg/kg 및 30 mg/kg의 항체 ALX이다. 60 mg/kg의 항체 ALX의 추가적인 SAD IV 용량이 추가될 수 있다 (도 1에 제시되지 않음). 일부 실시양태에서, 추가적인 SAD 코호트는 60 mg/kg으로 포함된다. SAD IV 코호트의 개요는 표 3에 제공된다.

표 3. 단일 상승 용량 IV 코호트.

각 SAD IV 코호트의 제1 6명의 참여자는 기준선, 25일차 및 43일차에 CSF 샘플링을 받았다. 각 SAD IV 코호트의 나머지 5명의 참여자는 기준선, 43일차 및 57일차에 CSF 샘플링을 받았다. 각 SAD IV 코호트의 11명의 참여자의 전체 무작위화는 8:3 (항체 ALX:PBO)이다. 각 SAD IV 코호트 내에서, 25일차 및 57일차에 항체 ALX를 투약받은 4명의 참여자 및 기준선 및 43일차에 항체 ALX를 투약받은 8명의 참여자에 대해 CSF를 샘플링한다. 투약후 CSF 시점은 발생하는 PK 및 PD 데이터에 의해 보증되는 경우 변경된다.

또 다른 실시양태에서, 6 mg/kg IV 코호트에 대해, 기준선 및 25, 43 또는 57일차에 2개의 시점에서 CSF를 샘플링하였다 (도 15). 또 다른 실시양태에서, 15 mg/kg IV 코호트에 대해, 기준선 및 25, 43 또는 57일차에 2개의 시점에서 CSF를 샘플링하였다 (도 15). 또 다른 실시양태에서, 30 mg/kg IV 코호트에 대해, 기준선 및 25, 43, 57 또는 85일차에 2개의 시점에서 CSF를 샘플링하였다 (도 15). 또 다른 실시양태에서, 60 mg/kg IV 코호트에 대해, 기준선 및 43, 57 또는 85일차에 2개의 시점에서 CSF를 샘플링하였다 (도 15). 또 다른 실시양태에서, 위약 SD IV 코호트에 대해, 기준선 및 25, 43, 57 또는 85일차에 2개의 시점에서 CSF를 샘플링하였다 (도 15).

이전 코호트로부터의 발생하는 안전성, 관용성, PK 및 PD 데이터에 기초하여, 용량 수준을 조정할 수 있거나, 1개 이상의 코호트를 생략 또는 확장할 수 있거나, 또는 중간 용량의 코호트를 추가할 수 있다. 확장된 코호트 또는 중간 용량의 코호트는 공개-라벨이며, 항체 ALX를 투약받은 최대 9명의 참여자를 포함한다.

B. 단일-용량 SC 코호트 - 600 mg

SD SC 600 mg 코호트는 9명의 HV의 공개-라벨 코호트이다. 이 코호트는 SAD IV 코호트 2 (15 mg/kg)에 대한 13일차 방문까지의 임상 안전성 데이터에 기초하여 항체 ALX의 15 mg/kg 용량이 일반적으로 안전하고 관용성이 있는 경우 등록된다. SD SC 코호트는 600 mg의 항체 ALX의 단일 용량을 투여받으며, 이는 본 연구에서 허용된가장 낮은 체중 (45 kg)에 대한 13.3 mg/kg의 최대 용량 수준에 상응한다. SD SC 코호트에 대한 PBO 그룹이 없다.

제1 3명의 참여자는 기준선, 25일차 및 43일차에 CSF 샘플링을 받았다. 다음 3명의 참여자는 기준선, 25일차 및 57일차에 CSF 샘플링을 받았다. 나머지 3명의 참여자는 기준선, 43일차 및 57일차에 CSF 샘플링을 받았다. 각각의 투약후 CSF 시점 (25일차, 43일차 및 57일차)은 6명의 참여자에 대한 CSF 샘플링을 포함한다. 투약후 CSF 시점은 발생하는 PK 및 PD 데이터에 의해 보증되는 경우 변경된다.

또 다른 실시양태에서, SD SC 600 mg 코호트의 제1 참여자는 기준선, 25일차 및 43일차에 CSF 샘플링을 받았다. 제2 참여자는 기준선, 13일차 및 25일차에 CSF 샘플링을 받았다. 제3 참여자는 기준선, 18일차 및 25일차에 CSF 샘플링을 받았다. 다음 3명의 참여자는 기준선, 8일차 및 13일차에 CSF 샘플링을 받았다. 다음 3명의 참여자는 기준선, 8일차 및 18일차에 CSF 샘플링을 받았다. 한 실시양태에서, CSF 샘플은 하기 표 4에 제시된 시점에서 수집된다.

표 4. 단일-용량 SC 600 mg 코호트에 대한 CSF 샘플 수집 시점.

C. 단일 용량 SC 코호트 - 150 mg

단일 용량 SC 150 mg 코호트는 6명의 HV 참여자의 코호트이고, 1일차에 150 mg의 항체 ALX의 단일 용량을 투여받는다. CSF 샘플 (LP, 요추 천자)을 기준선, 6일차 및 13일차에 채취한다 (도 12).

D. 다중-용량 SC 코호트

다중-용량 (MD) SC 코호트는 10명의 HV 참여자의 코호트에서 300 mg의 항체 ALX의 7개 용량을 투여받는다 (도 13). 300 mg 항체 ALX 용량은 1일차, 15일차, 29일차, 43일차, 57일차, 71일차 및 85일차에 대상체에게 투여된다. CSF 샘플 (LP)을 기준선, 92일차 및 97일차에 채취한다.

E. 다중-용량 IV 코호트

MD IV 코호트에서, 10명의 HV 참여자는 8:2 (항체 ALX:PBO)의 비율로 항체 ALX 또는 위약 (PBO)을 받도록 무작위화된다 (도 14). MD IV 코호트는 1일차, 29일차, 57일차 및 85일차에 30 mg/kg의 항체 ALX 또는 위약을 투여받는다. CSF 샘플 (LP)을 기준선 및 97일차 및 113일차에 채취한다.

F. 연구 의약품, 용량 및 투여 경로

IV 코호트의 경우, 항체 ALX를 대략 60분에 걸쳐 주입 펌프를 사용하여 단일 말초 IV 주입으로서 투여한다.

SC 코호트의 경우, 항체 ALX를 15분에 걸쳐 저속 주사로서 투여한다. 600 mg 용량의 항체 ALX에 대해 12 mL의 총 부피를 투여한다.

G. 위약 대조군, 용량 및 투여 경로

IV 코호트의 경우, 일반 식염수 (0.9% NaCl)를 대략 60분에 걸쳐 주입 펌프를 사용하여 단일 말초 IV 주입으로서 PBO로서 투여한다.

SC 코호트의 경우, PBO 그룹이 없다.

H. 연구 지속시간

각 참여자에 대한 총 연구 지속시간은 대략 4개월이다. 일부 실시양태에서, 각 참여자에 대한 총 연구 지속시간은 대략 3-6개월이다. 이는 연구 약물 투여 전 최대 28일의 스크리닝 기간, 1일차에 항체 ALX 또는 PBO의 단일 IV 주입 투여 또는 SC 투여 (IV 코호트에만 해당), 또는 IV 또는 SC 항체 ALX 또는 PBO의 다중 용량 (IV 코호트에만 해당) (각각은 각 코호트의 투약 스케줄에 따름), 및 57일차 (연구 약물 투여 후 8주), 85일차 (연구 약물 투여 후 12주), 113일차 (연구 약물 투여 후 16주), 또는 141일차 (연구 약물 투여 후 20주)까지의 추적조사 (각 코호트에 대해 지정된 추적조사 기간에 따름)를 포함한다.

IV. 연구 절차

A. 투약전 절차 및 평가

항체 ALX 또는 PBO의 투여 전, 하기 평가를 수행한다:

· 신체 검사 또는 제한된 증상-구동 검사.

· 신경학적 검사.

· 키 및 체중.

· 혈압 (BP), 맥박, 체온 및 호흡률을 포함한 활력 징후.

· 3중 12-리드 ECG.

· 화학, 혈액학, 응고, 혈청학 및 소변검사를 위한 혈액 및 소변 샘플.

· 항-약물 항체 (ADA) 및 PK 분석을 위한 혈청 샘플; 프로그래뉼린 및 탐색 바이오마커를 위한 혈장 샘플; 및 백혈구 분석을 위한 전혈 샘플.

· 탐색 바이오마커를 위한 전혈 샘플.

· 전체 게놈 서열분석 (WGS).

· 요추 천자를 통한 CSF 샘플.

· 병용 약제 검토.

· 기록된 심각한 유해 사건 (SAE) 및 AE.

B. 투약

항체 ALX 또는 PBO를 상기 기재된 바와 같이 참여자에게 투여한다. 임상 실험실 테스트가 또한 수행되지 않는 한 투약일에 금식은 적용가능하지 않다.

C. 투약후

항체 ALX 또는 PBO의 투여 후, 하기 평가를 수행한다:

· PK 분석을 위한 혈청 샘플; 프로그래뉼린 및 바이오마커를 위한 혈장 샘플; 및 백혈구 분석을 위한 전혈 샘플.

· 3중 12-리드 ECG.

· BP, 맥박, 체온 및 호흡률을 포함한 활력 징후.

· 병용 약제 검토.

· 기록된 SAE 및 AE.

V. 연구 평가

A. 임상적 평가

스크리닝 전 30일 이내에 받은 임의의 이전 약제를 기록한다. 스크리닝부터 추적조사 기간까지 모든 병용 약제 및 공동 요법을 기록한다.

사전 동의를 얻은 시점부터 연구 약물의 제1 투여까지, 모든 SAE 뿐만 아니라 프로토콜 절차와 관련된 임의의 AE를 기록한다. 연구 약물의 제1 투여의 시점부터 추적조사 기간까지, 악화 또는 병력 변화를 포함한 임의의 SAE 및 AE를 기록한다.

인구 통계학적 정보 (생년월일, 성별, 인종)를 기록한다.

병력 또는 현재 질환, 다른 적절한 병력, 및 기저 질환에 관한 정보를 포함한 모든 관련 병력을 연구 약물 투여 전 스크리닝 시 기록한다.

완전한 신체 검사 (PE)를 스크리닝 및 연구 완료 또는 조기 종결 (ET) 시 수행한다. 완전한 PE는 머리, 눈, 귀, 코 및 목의 평가, 및 심혈관계, 피부계, 근골격계, 호흡계 및 위장관계의 평가를 포함한다. 기준선에서 관찰된 이상을 기록한다. 스크리닝 시 키 (cm) 및 체중 (kg)을 측정하고, BMI를 계산한다.

완전한 신경학적 검사는 의식, 방향, 뇌신경, 운동 및 감각 시스템, 조정 및 보행, 및 반사의 평가를 포함한다. 기준선 이상으로부터의 변화를 각각의 후속 신경학적 검사에서 기록한다. 새롭거나 악화된 이상은 임상적으로 유의한 것으로 간주되는 경우 AE로서 기록한다.

활력 징후를 평가하고, 기준선에서 관찰된 이상을 기록한다. 후속 방문에서, 새롭거나 악화된 이상은 임상적으로 유의한 것으로 간주되는 경우 AE로서 기록한다. 임상 안전 기준으로부터 모든 ECG를 분석한다 (집중적인 QT 분석 없음). 참여자의 병력, PE 및 병용 약제와 관련된 ECG 보고서의 검토 후 ECG 변화의 임상적 유의성을 결정한다.

임상 안전성 실험실 테스트 (화학, 혈액학, 소변검사, 혈청학, 약물 및 알콜 스크린 및 임신 테스트)를 위해 혈액 및 소변 샘플을 수집한다. 범위를 벗어난 값은 확인되고 임상적으로 유의한 것으로 간주된 경우, 또는 참여자가 연구를 중단하거나 치료를 받을 필요가 있는 경우 연구 약물 시작 후 AE로서 기록한다.

항-약물 항체 (ADA)의 결정을 위해 혈청 샘플을 수집한다. 주입-관련 반응의 징후 및 증상을 갖는 참여자에서 추가적인 ADA 샘플을 수집한다. 상응하는 추가적인 PK 샘플을 동일한 시점에 수득한다.

B. 안전성 평가

유해 사건 (AE)을 기록하고, 세계보건기구 (WHO) 독성 등급 척도에 따라 등급화한다. WHO 독성 등급 척도 내에서 AE가 특정되지 않은 경우, AE를 하기와 같이 등급화한다: 등급 1 (경증: 일시적 또는 경증 불편함; 활동 제한 없음; 의학적 개입 또는 요법 필요 없음; 참여자는 징후 또는 증상을 인식할 수 있지만 합리적으로 잘 관용함); 등급 2 (중등도: 경증 내지 중등도의 활동 제한; 필요하지 않거나 최소한의 의학적 개입/요법); 등급 3 (중증: 현저한 활동 제한; 의학적 개입/요법 필요함, 예를 들어 입원); 등급 4 (생명-위협: 유해 경험이 발생함에 따라 사망할 위험이 있음); 또는 등급 5 (사망).

AE가 연구 치료와 확실히, 아마도 또는 가능하게 관련된 것으로 간주되는 경우, 예를 들어 사건이 연구 약물의 사용과 관련이 있다는 명확한 증거가 있는 경우, 또는 사건이 참여자의 의학적 병태, 병용 요법 또는 기타 원인에 의해 설명될 수 없고 사건 및 연구 약물 투여 사이에 그럴듯한 시간적 관계가 있는 경우, AE는 연구 약물 (즉, 항체 ALX)과 관련이 있다. 연구 약물과의 관련성이 있을 것 같지 않거나 연구 치료와 확실히 관련이 없는 것으로 간주되는 경우, 예를 들어 사건이 참여자의 근본적인 의학적 병태, 병용 요법 또는 기타 원인에 의해 쉽게 설명될 수 있는 경우, 또는 대안적인 설명이 더 가능성이 있는 사건 (예를 들어, 병용 약제 또는 진행 중인 의학적 병태) 또는 연구 약물 투여 및/또는 노출과의 시간적 관계가 인과 관계가 있을 것 같지 않음을 시사하는 경우, AE는 연구 약물과 관련이 없다.

심각한 유해 사건 (SAE)은 사망, 생명-위협 AE, 입원환자 입원, 기존 입원의 연장, 지속적이거나 유의한 장애/무능, 또는 선천성 기형/출생 결함을 초래하는 임의의 용량에서 발생하는 임의의 AE이다. 참여자를 위험에 빠뜨리거나 나열된 결과 중 하나를 방지하기 위해 개입이 필요한 경우, 다른 중요한 의학적 사건은 또한 SAE로 간주된다.

용량-제한 AE (DLAE)는 연구 약물과 관련된 것으로 평가되는 AE이고, 참여자가 연구 약물을 받은 것으로 확인되며, 연구 약물 외에 다른 명백하게 기인하는 원인이 없는 SAE, 연구 약물 외에 다른 명백하게 기인하는 원인이 없는 등급 3 이상의 AE, 또는 지지 요법 및/또는 감소된 주입 속도로 즉시 해결되지 않는 주입 동안 또는 주입 완료 후 24시간 이내에 발생하는 주입 관련 독성 (예를 들어, 알레르기 반응/과민감성, 약물 발열, 두드러기, 호흡곤란, 홍조, 기관지 경련, 천명, 저산소증, 또는 주입 부위 통증)의 등급 2 이상의 AE이다.

C. 약동학 평가

항체 ALX의 혈청 농도의 평가를 위해 혈청 샘플을 수집한다.

뇌척수액 샘플을 또한 항체 ALX의 농도에 대해 평가한다.

D. 약력학 평가

프로그래뉼린 수준의 평가를 위해 혈장 샘플을 수집한다. 백혈구 내 소르틸린 발현의 평가 및 다른 분석물의 평가를 위해 전혈 샘플을 수집한다.

뇌척수액 샘플을 프로그래뉼린 수준에 대해 평가한다.

E. 바이오마커 평가

신경필라멘트 경쇄 (NF-L), Tau, 신경염증의 마커, 및 질환 생물학 및 항체 ALX에 대한 반응과 관련된 다른 분석물의 수준을 포함하는 바이오마커의 평가를 위해 혈장 샘플을 수집한다.

NF-L, Tau, 신경염증의 마커, 및 질환 생물학 및 항체 ALX에 대한 반응과 관련된 다른 분석물의 수준을 포함하는 바이오마커에 대해 뇌척수액 샘플을 평가한다.

항체 ALX에 대한 반응을 예측하거나, 더 중증인 질환 상태로의 진행과 연관이 있거나, AE 발병에 대한 민감성과 연관이 있거나, 질환 생물학에 대한 지식 및 이해를 증가시킬 수 있는, 흔하고 희귀한 유전자 변이체를 식별하기 위해 전체 게놈 서열분석을 통한 분석을 가능하게 하도록 DNA 추출의 스크리닝 시 혈액 샘플을 수집한다.

VI. 연구 종점 및 통계

인구 통계학적 및 기준선 값, 안전성 종점, PK, PD 및 PK/PD 상관관계를 포함하는 모든 척도에 대한 요약 통계가 제공된다 (예를 들어, 누락되지 않은 값의 수, 평균, 중앙값, 표준 편차, 연속 변수에 대한 최소값 및 최대값, 및 범주형 변수에 대한 수 및 백분율). 안전성 파라미터에 대한 공식적인 통계적 추론은 이루어지지 않는다. 누락된 데이터에 대해 대체가 사용되지 않는다.

A. 안전성 분석 및 종점

안전성 집단은 임의의 양의 연구 약물 (항체 ALX 또는 PBO)을 받는 모든 등록된 참여자를 포함한다. 안전성 집단은 치료 용량 수준/코호트에 의해 설명되고 요약된다.

본 연구의 안전성 종점은 하기를 포함한다:

· AE의 발생률, 성질 및 중증도.

· 용량-제한 AE (DLAE)의 발생률.

· AE로 인한 치료 중단의 발생률.

· 기준선으로부터 임상 실험실 테스트 결과의 평균 변화; 치료-발생 비정상적 실험실 값 및 AE로서 보고된 비정상적 실험실 값의 발생률.

· 기준선으로부터 ECG 평가의 평균 변화 및 비정상적 ECG 평가의 발생률.

· 비정상적 혈압 및 심박수의 평균 변화 및 발생률.

· 기준선으로부터 활력 징후의 평균 변화 및 비정상적 활력 징후 측정의 발생률.

· 신체 및 신경학적 검사 이상.

· 기준선에서의 ADA 유병률에 비해 연구 동안 항-약물 항체 (ADA)의 발생률.

투약 시 또는 투약 후에 발생하는 모든 치료 발생 AE는 규제 활동을 위한 의학 사전 (MedDRA) 코딩 용어, 적절한 시소러스 수준, 및 중증도에 의해 요약된다. 또한, 사망 및 중단을 유발하는 사건을 포함한 모든 심각한 AE (SAE)가 별도로 나열되고 요약된다. DLAE는 치료 용량 수준/코호트에 의해 나열되고 요약된다. 모든 AE는 최신 버전의 MedDRA를 사용하여 코딩되며, MedDRA 시스템 장기 클래스 및 바람직한 용어에 의해 분류된다.

B. 약동학적 분석 및 종점

PK 집단은 PK 파라미터의 결정을 위한 적절한 평가를 받은 안전성 집단의 모든 참여자를 포함한다.

본 연구의 PK 종점은 하기를 포함한다:

· 항체 ALX의 혈청 및 뇌척수액 농도.

· 항체 ALX 혈청 농도 또는 PK 파라미터 및 안전성 종점 사이의 관계. PK 파라미터는 하기를 포함한다: C_max, 최대 관찰 농도까지의 시간 (T_max), 시간 0부터 시간 t까지의 AUC, 시간 0부터 무한대까지의 AUC, 무한대까지 외삽된 AUC의 백분율, 시간 0부터 tau까지의 AUC, 제거 속도 상수, 말단 반감기 (t_½), 말단 단계 동안의 분포 부피 (V_s.), 및 클리어런스 (CL).

· 항체 ALX에 대한 혈청 농도, CSF 농도 또는 PK 파라미터 및 활성 또는 PD 종점 사이의 관계.

· SC 투여된 항체 ALX의 생체이용률.

개별 및 평균 혈장 항체 ALX 농도-시간 데이터는 치료 용량 수준/코호트에 의해 도표화되고 플롯팅된다. 적용가능한 경우, 항체 ALX의 혈청 PK는 단일 또는 다중 용량 후 수득된 결과에 기초하여 AUC, C_max, 총 혈청 CL, V_z 및 t_½로 표시된 바와 같은 총 노출 추정치에 의해 요약된다. PK 파라미터에 대한 추정치는 기술 통계 (평균, 표준 편차, 최소값, 최대값, 기하 평균 및 변동 계수)에 의해 도표화되고 요약되며; 로그 변환된 C_max 및 지정된 AUC 파라미터를 로그-변환된 용량과 관련시키는 회귀 (승) 모델을 사용하여 용량 비례성을 탐색한다. 개별 및 평균 항체 ALX CSF 농도-시간 데이터는 치료 용량 수준/코호트에 의해 도표화되고, 시간에 따라 플롯팅된다. SC 투여된 항체 ALX의 생체이용률을 추정한다. 용량, 인구 통계학, 안전성 (QT 변화 포함), 및 PD 측정과 관련된 PK 파라미터의 잠재적 상관관계를 탐색한다. 집단 PK 분석을 포함하여 이들 상관관계를 특징화하기 위한 추가적인 모델링을 수행한다.

C. 약력학적 분석 및 종점

PD 집단은 기준선 PD 평가 및 적어도 하나의 투약후 PD 평가 둘 모두를 갖는 안전성 집단의 모든 참여자를 포함한다.

본 연구의 PD 종점은 기준선에 비해 투약후 혈장 및 CSF 내 프로그래뉼린 수준의 변화를 포함한다.

PD 종점은 치료 용량 수준/코호트에 의해 설명되고 요약된다.

D. 바이오마커 분석 및 종점

바이오마커 집단은 특정 관심 파라미터에 대한 해석가능한 결과를 제공하기 위해 필요한 기준선 및 투약후 측정치를 갖는 안전성 집단의 모든 참여자를 포함한다.

본 연구의 바이오마커 종점은 하기를 포함한다:

· 기준선에 비해 투약후 혈액 및 CSF 내 신경염증의 마커 및 다른 분석물의 수준의 변화.

· 기준선에서의 바이오마커 및 안전성, PK, 활성, 면역원성 또는 다른 바이오마커 종점 사이의 관계.

혈액 및 CSF 샘플에서 평가된 바이오마커는 NF-L, 뿐만 아니라 전두측두엽 치매 (FTD) 또는 다른 신경변성 병태와 관련된 다른 혈액/CSF 마커를 포함한다. 또한, 바이오마커는 혈액으로부터 추출된 DNA에 대해 수행된 전체 게놈 서열분석을 통해 식별된 희귀 유전자 변이체를 포함한다.

실시예 2: 정맥내 및 피하 항-소르틸린 항체 ALX의 안전성, 관용성, 약동학, 약력학 및 생체이용률을 평가하기 위한 건강한 지원자에서의 I상 연구의 결과.

본 실시예는 실시예 1에 기재된 I상 연구의 단일 상승 용량 (SAD) 정맥내 (IV) 코호트 1 및 2로부터의 결과를 제공한다.

실시예 1에 상세히 기재된 바와 같이, SAD IV 코호트 1의 건강한 지원자 (HV)는 6 mg/kg의 항체 ALX의 단일 정맥내 용량을 투여받았고, SAD IV 코호트 2의 HV는 15 mg/kg의 항체 ALX의 단일 정맥내 용량을 투여받았다.

표 5는 프로그래뉼린 혈장 수준이 결정되는 동안 다양한 시점에서 참여자 할당의 개요를 제공한다.

표 5. 코호트 1 및 2에서 건강한 지원자 참여자 할당 및 혈장 프로그래뉼린 수준 평가.

도 2a-2b는 연구 1일차에 표시된 시간에서 코호트 1의 각 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 도 2a는 항체 ALX를 투여받은 대상체에 대한 혈장 프로그래뉼린 수준을 제공하고 (n = 8), 도 2b는 위약을 투여받은 대상체에 대한 혈장 프로그래뉼린 수준을 제공한다 (n = 3). 도 2c는 연구의 최대 85일차까지 표시된 일자에 코호트 1에서 위약 또는 항체 ALX를 투여받은 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린의 평균 수준을 제공한다. 이들 결과는 6 mg/kg의 용량으로 투여된 항체 ALX가 기준선과 비교하여 약 2배 내지 약 3배의 혈장 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하였고, 혈장 프로그래뉼린 수준이 항체 ALX의 투여 후 약 42일에 기준선 수준으로 복귀되었음을 제시하였다.

도 3a-3b는 연구 1일차에 표시된 시간에서 코호트 2의 각 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 도 3a는 항체 ALX를 투여받은 대상체에 대한 혈장 프로그래뉼린 수준을 제공하고 (n = 6), 도 3b는 위약을 투여받은 대상체에 대한 혈장 프로그래뉼린 수준을 제공한다 (n = 2). 도 3c는 연구의 최대 57일차까지 표시된 일자에 코호트 2에서 위약 또는 항체 ALX를 투여받은 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린의 평균 수준을 제공한다. 전반적으로, 이들 결과는 15 mg/kg의 용량으로 투여된 항체 ALX가 기준선과 비교하여 약 2배 내지 약 3배의 혈장 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하였고, 혈장 프로그래뉼린 수준이 연구의 약 57일차에 기준선 수준으로 복귀되었음을 제시하였다.

도 4는 연구의 57일차 (코호트 2) 또는 85일차 (코호트 1)까지 표시된 일자에 코호트 1 및 2에서 항체 ALX 또는 위약을 투여받은 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 비교를 제공한다.

도 5a는 위약의 투여 후 표시된 일자에 코호트 1 및 2에서 위약을 투여받은 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 도 5b-5c는 항체 ALX의 투여 후 표시된 일자에 코호트 1 (도 5b) 및 코호트 2 (도 5c)에서 항체 ALX를 투여받은 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준을 제시한다. 도 5d는 위약 또는 항체 ALX의 투여 후 표시된 일자에 코호트 1 및 2에서 항체 ALX 또는 위약을 투여받은 대상체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 비교를 제공한다. 도 5d에서, 코호트 1 및 2에서 위약을 투여받은 대상체는 풀링되었다. 전반적으로, 이들 결과는 항체 ALX의 투여가 기준선에 비해 약 2배 내지 약 3배의 혈장 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하였고, 혈장 프로그래뉼린 수준이 항체 ALX의 투여 후 약 42일 (코호트 1) 또는 약 56일 (코호트 2)에 기준선 수준으로 복귀되었음을 제시하였다.

도 6은 기준선과 비교하여 최대 57일차까지 표시된 연구 일자에 코호트 1 및 2에서 항체 ALX 또는 위약을 투여받은 대상체의 CSF 내 프로그래뉼린 수준의 평균 백분율 변화를 제시한다. CSF 프로그래뉼린 수준은 연구 약 25일차에 코호트 1 (6 mg/kg)의 대상체의 경우 기준선으로부터 약 18% 및 코호트 2 (15 mg/kg)의 대상체의 경우 기준선으로부터 약 80% 증가하였다. 항체 ALX를 투여받은 코호트 1 및 2의 대상체에 대한 상승된 CSF 프로그래뉼린 수준은 연구의 최대 57일차까지 존재하였다.

현재 이용가능한 안전성 결과는 항체 ALX가 최대 30 mg/kg의 단일 용량에서 잘 관용되는 것으로 보인다는 것을 입증하였다.

전반적으로, 이들 실시예에 기재된 결과는 항체 ALX의 단일 IV 용량의 투여가 혈장 및 CSF 내 프로그래뉼린 수준의 현저한 상승을 초래하였고, 이러한 상승이 적어도 6주 동안 지속되었음을 제시한다.

실시예 3: 파킨슨병을 갖는 환자에서 항-소르틸린 항체 ALX의 안전성, 관용성, 약동학 및 약력학을 평가하는 IIa상 연구.

본 실시예는 파킨슨병 (PD)을 갖는 환자에서 선택된 바이오마커의 안전성, 관용성, 약동학 및 약력학 반응을 평가하는, 항-소르틸린 항체 ALX의 무작위화된, 위약-대조, 용량 증량 IIa상 연구를 설명한다.

I. 연구 목적

본 연구의 목적은 산발성 (특발성) PD를 갖는 환자, 뿐만 아니라 GBA1 유전자에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이를 갖는 PD 환자에서 항체 ALX의 6개월 저용량 (15 mg/kg) 및 고용량 (30 mg/kg) 레지멘의 안전성, 관용성 및 핵심 바이오마커에 대한 효과를 평가하는 것이다. 분석된 핵심 바이오마커는 프로그래뉼린, GCase 및 알파-시누클레인을 포함한다.

A. 1차 결과 척도

본 연구의 1차 결과 척도는 연구 지속시간에 걸쳐 각 치료 그룹에서 유해 사건 (AE), 심각한 유해 사건 (SAE), 및 중단을 유발하는 AE의 수를 포함한다. 안전성 및 관용성은 추가적인 안전성 평가 (예를 들어, 임상 안전성 실험실 테스트, 활력 징후, 체중, 심전도 [ECG] 파라미터 및 신체 검사)에 기초한다. 본 연구의 추가 1차 결과 척도는 뇌척수액 (CSF) 및 혈액-기반 바이오마커 (예를 들어, 프로그래뉼린, GCase 및 알파-시누클레인)의 변화를 포함한다. CSF 및 혈액-기반 바이오마커의 변화는 기준선부터 치료 종료 (EOT)까지 평가된다.

B. 2차 결과 척도

본 연구에 대한 2차 결과 척도는 통합 파킨슨병 평가 척도 (UPDRS) 파트 III의 운동 장애 학회 (MDS)-후원 개정판 (MDS-UPDRS 파트 III), 및 UPDRS 총 척도의 스코어에 의해 평가되는 운동 검사의 변화를 포함한다. 몬트리올 인지 평가 (MoCA) 스코어에 의해 평가되는 전체 인지 기능의 변화를 또한 측정할 수 있다. 2차 결과 척도를 기준선부터 치료 종료 (EOT)까지 평가한다.

II. 연구 참여자

산발성 PD를 갖는 대상체 또는 GBA1 유전자에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이를 갖는 PD 환자 48명이 본 연구에 포함된다.

A. 포함 기준

하기 기준을 충족하는 대상체가 본 연구에 포함된다.

· ≥ 40세 및 ≤ 80세 연령의 성인 남성 및 여성.

· 산발성 PD 또는 적어도 하나의 병원성 GBA1 돌연변이를 갖는 PD, 및 I-III 사이(포함)의 확인된 병기를 갖는 호엔 및 야르 기준의 확인된 진단.

본 연구의 시작 전에 PD 약제, 예컨대 글루타메이트 길항제, 항콜린제, 도파민 효능제, 레보도파 (L-DOPA 및 데카르복실라제 [DDC] 억제제), 모노아민 옥시다제 B (MAO-B) 억제제, 카테콜-O-메틸트랜스퍼라제 (COMT) 억제제, 베타 차단제, 선택적 세로토닌 흡수 억제제 (SSRI), 삼환계 항우울제 (TCA) 또는 인도메타신을 취하는 중인 대상체는 본 연구 동안 약제를 계속 취할 수 있다.

B. 배제 기준

하기 기준을 충족하는 대상체는 본 연구에 포함되지 않는다:

· 요추 천자의 안전한 완료를 방해할 수 있는 항응고제 (예를 들어, 와파린)를 사용한 현재 치료.

· 항체 ALX 또는 이의 부형제에 대한 공지된 민감성의 병력.

· 손상된 신장 기능.

· 활성 암 진단, 피부암 편평 세포 암종 제외.

· 중등도/중증 간 장애.

· 연구 스크리닝 6개월 이내의 주요 심혈관 사건 (예를 들어, 심근경색, 급성 관상동맥 증후군, 비대상성 울혈성 심부전, 폐색전증 또는 관상동맥 혈관재형성).

III. 연구 설계

본 연구는 정맥내 (IV) 투여를 통해 매달 투여되는 항체 ALX의 2개의 용량 수준 (15 mg/kg 및 30 mg/kg)의 무작위화된, 위약-대조, 순차적 연구이다. 대상체를 PD 증세 (산발성 또는 GBA1 유전자 돌연변이)로 계층화한다.

연구 대상체를 3개의 연구 아암으로 무작위화한다: 15 mg/kg 용량의 항체 ALX, n=16; 30 mg/kg 용량의 항체 ALX, n=16; 및 위약, n=16. 각 치료 아암 내에서, 항체 ALX 대 위약의 무작위화 비율은 2:1이다. 연구 치료를 정맥내 주입에 의해 투여한다. 항체 ALX 또는 위약을 총 6회 투여에 대해 1개월마다 1회 (즉, 28일마다 1회) 투여한다. 용량 수준 및 빈도는 용량 수준, 예를 들어 60 mg/kg을 제거 또는 추가하고/거나, 정맥내 투약 빈도 (예를 들어, 6주마다 (q6w) 또는 8주마다 (q8w))를 변경하고/거나, 본원에 기재된 바와 같은 피하 투여에 의한 투약을 포함하도록 변형될 수 있다. 위약은 염수이며, 맹검을 보장하기 위한 적절한 절차가 있다.

IV. 바이오마커 및 표적 결착

상기 논의된 바와 같이, 본 연구의 1차 결과 척도는 CSF 및 혈액-기반 바이오마커 (예를 들어, 프로그래뉼린, GCase 및 알파-시누클레인)의 변화를 포함한다.

바이오마커 분석을 위해 혈장 및 CSF 샘플을 수집한다. CSF 및 혈액-기반 바이오마커의 변화를 기준선부터 치료 종료 (EOT)까지 평가한다.

항체 ALX 치료 후 혈장 및 CSF 프로그래뉼린 수준을 표적 결착의 마커로서 측정한다.

항체 ALX의 리소좀 약력학적 효과를 모니터링하기 위해, CSF 및 혈장 내 GCase 단백질, GCase 활성, 및 이의 기질 lyso-Gb1 및 글루코실세라미드의 변화를 분석한다.

알파-시누클레인 및 CSF 프로테옴은 질환 상태의 변화를 평가하는데 사용된다.

모든 검정은 엄격하게 품질 제어되고 검증된다.

실시예 4: 시노몰구스 원숭이에서 항-소르틸린 항체 ALX의 연구.

본 실시예는 시노몰구스 원숭이에서 항-소르틸린 항체 ALX의 4-주 독성학 연구의 결과를 설명한다.

시노몰구스 원숭이는 총 5개 용량에 대해 4주 동안 매주 1회 20, 60 또는 200 mg/kg의 용량으로 항체 ALX를 정맥내 투여받았다. 이 연구는 또한 6-주 회수 기간을 포함하였다.

도 7a-7b는 연구 1, 8 및 15일차 (도 7a) 또는 연구 22 및 29일차 (도 7b)에 항체 ALX의 용량의 투여 후 표시된 시간 (h)에 혈청 내 항체 ALX의 평균 농도를 제시한다. 최대 농도 (C_max) 및 시간 0부터 168시간까지의 곡선 아래 면적 (AUC_0-168)에 의해 평가된 노출은 용량 수준이 20 mg/kg/용량에서 200 mg/kg/용량으로 증가함에 따라 증가하였으며, 일반적으로 용량 비례하였다. 22일차에, 성별-조합된 평균 C_max 및 AUC_0-168은 20 mg/kg 용량 그룹의 경우 각각 855 μg/mL 및 70600 μg*h/mL; 60 mg/kg 용량 그룹의 경우 각각 2770 μg/mL 및 248000 μg*h/mL; 및 200 mg/kg 용량 그룹의 경우 각각 7960 μg/mL 및 744000 μg*h/mL였다. 원숭이에서 다중 용량 후 항체 ALX의 축적이 관찰되었다. 성별 조합된 평균 C_max 및 AUC_0-168 비율 (22일차/1일차)은 용량에 따라 1.40 내지 1.44 및 1.59 내지 1.84의 범위였다.

백혈구 (WBC) 내 소르틸린 발현은 항체 ALX의 매주 투여 후 지속적으로 하향-조절되었으며, 소르틸린의 하향-조절의 유의한 차이가 20, 60 및 200 mg/kg의 용량 수준에 걸쳐 관찰되지 않았다 (도 8a). 도 8b에 제시된 바와 같이, 프로그래뉼린의 말초 혈청 수준은 소르틸린의 하향-조절과 동시에 증가하였고, 연구 지속시간 전반에 걸쳐 기준선보다 3배 초과 상승된 상태를 유지하였다. CSF 프로그래뉼린 수준은 투약 단계 동안 샘플링된 모든 시점에서 기준선보다 2배 내지 3배 초과 높았다 (도 8c). 6-주 회수 단계의 종료 시, 200 mg/kg 그룹의 4마리 동물 중 3마리에서 혈청 및 CSF 프로그래뉼린 수준 둘 모두는 유의하게 상승된 상태를 유지하였으며, 이는 오래 지속되는 약력학적 효과를 나타낸다 (도 8b-8c).

본 연구의 결과는 또한 시노몰구스 원숭이에서 매주 최대 200 mg/kg의 용량으로 투여된 항체 ALX가 잘 관용되었음을 제시하였다. 독성동력학 분석은 노출이 치료 기간에 걸쳐 항체 ALX 치료된 동물에서 유지되었음을 나타내었고, 연구 동안 항체 ALX-관련 유해 소견은 없었다. 유해 효과가 관찰되지 않는 수준 (NOAEL)은 시노몰구스 원숭이의 경우 200 mg/kg이었다.

4주 동안 최대 300 mg/kg의 용량으로 항체 ALX를 투여받은 RccHan:WIST 래트에서 추가적인 독성학 연구는 항체 ALX가 잘 관용되었음을 제시하였다. 독성동력학 분석은 노출이 치료 기간에 걸쳐 항체 ALX 치료된 동물에서 유지되었음을 나타내었고, 항체 ALX-관련 유해 소견은 없었다. 유해 효과가 관찰되지 않는 수준 (NOAEL)은 래트의 경우 300 mg/kg이었다.

실시예 5: 정맥내 및 피하 항-소르틸린 항체 ALX의 안전성, 관용성, 약동학, 약력학 및 생체이용률을 평가하기 위한 건강한 지원자에서의 I상 연구의 결과.

본 실시예는 실시예 1에 기재된 I상 연구의 단일-상승 용량 (SAD) 정맥내 (IV) 코호트 1-4 및 단일 용량 600 mg 피하 (SC) 코호트로부터의 추가 결과를 제공한다.

실시예 1에 상세히 기재된 바와 같이, 추가적인 단일-용량 (SD) 피하 코호트의 HV는 항체 ALX를 600 mg의 고정 용량으로 투여받았다. 이 용량은 연구에서 허용된 가장 낮은 체중 (45 kg)의 경우 13.3 mg/kg의 최대 용량 수준에 상응한다. 이 코호트는 안전성 검토 위원회가 15 mg/kg IV 용량 수준이 일반적으로 안전하고 관용가능하다고 결정한 후에 등록되었다.

도 9는 연구 동안 다양한 시점에서 등록된 집단의 참여자 배치의 개요를 제공한다. 연구에 등록된 총 55명의 참여자 중 54명의 참여자 (92.8%)는 약물 치료를 완료하였고, 43명의 참여자 (78.2%)는 연구를 완료하였다. 표 6에 제시된 바와 같이, 기준선 인구 통계학 및 특징은 그룹에 걸쳐 유사하였다. 모든 그룹에 걸쳐, 대부분의 참여자는 백인 또는 흑인이었고, 대다수는 히스패닉 또는 라티노가 아니었다.

표 6: 기준선 인구 통계학 및 특징 (안전성 집단)

표 7에 제시된 바와 같이, 대부분의 유해 사건 (AE)은 중증도가 경증 내지 중등도인 것으로 간주되었으며, 가장 빈번한 AE는 두통 (25.6%), 빈혈 (9.3%) 및 시술 통증 (9.3%)이었다. 하나의 대상체는 연구 치료와 관련된 것으로 간주되는 주입 반응의 하나의 심각하고 중증인 사건을 나타내었고 (60 mg/kg IV 그룹), 그러므로 주입 직후 연구 약물을 중단하였지만 동일한 날 이내에 회수되었다. 또 다른 대상체는 연구 치료와 관련되지 않은 것으로 간주되는 인플루엔자 A의 하나의 심각하고 중증인 유해 사건을 나타내었다 (위약 그룹). 마지막 대상체 (30 mg/kg 그룹)는 사구체 여과율의 중증 감소 및 상승된 크레아티닌을 공동으로 나타냈었지만, 둘 모두는 심각하지 않았으며, 연구 치료와 관련되지 않은 것으로 간주되었다.

표 7: 모든 그룹에 걸쳐 2명 이상의 대상체에서 발생하는 TEAE (안전성 집단)

도 10a-10b는 SAD IV 용량 또는 단일 피하 용량의 ALX의 투여 후 각 코호트에서 ALX의 평균 혈청 및 뇌척수액 (CSF) 농도를 제시한다. 도 10a는 ALX의 평균 혈청 농도가 ALX의 SAD IV 용량의 투여 후 용량-의존적 방식으로 증가하였고, 600 mg의 ALX의 단일 SC 용량 후 최대 30일 동안 검출되었음을 제시한다. 도 10b는 CSF 농도가 ALX의 SAD IV 용량의 투여 후 용량-의존적 방식으로 증가하였고, 600 mg의 ALX의 단일 SC 용량 후 최대 17일 동안 검출되었음을 제시한다. ALX의 평균 혈청 및 CSF 농도 둘 모두는 60 mg/kg의 단일 IV 용량 후 최대 84일까지 검출되었다 (도 10a-10b).

표 8은 코호트 1-4 및 SD SC 코호트에 대한 ALX의 평균 혈청 약동학 (PK) 파라미터의 요약을 제공한다. 표 8에 제시된 바와 같이, 평균 혈청 분배 계수는 0.0015 내지 0.0007의 범위였다.

표 8: ALX의 평균 (표준 편차) 혈청 PK 파라미터의 요약 (PK 집단)

AUC_inf, 시간 0부터 무한대로 외삽된 농도-시간 곡선 아래 면적; CL, 총 신체 클리어런스; C_max, 최대 관찰 농도; CSF, 뇌척수액; IV, 정맥내; NE, 평가가능하지 않음; PC, 분배 계수; PK, 약동학; SC, 피하; t_1/2= 말단 제거 반감기; t_max = 최대 관찰 농도의 시간. ^a = CSF ALX 샘플이 수집되지 않았기 때문에 PC를 계산할 수 없었다. ^b = CSF 샘플이 정량화 한계 미만이기 때문에 PC를 계산할 수 없었다.

도 11a-11b는 표시된 연구 일자에 각 코호트의 프로그래뉼린의 혈장 및 CSF 농도의 기준선으로부터의 백분율 변화를 제시한다. ALX의 SAD IV 용량은 말초 (도 11a) 및 뇌 (도 11b)에서 프로그래뉼린 (PGRN) 수준의 증가를 야기하였으며, 증가의 지속시간에 대한 용량-의존적 효과를 가졌다. 도 11a는 혈장 PGRN 수준의 ALX-유도 증가가 IV 용량 수준이 증가함에 따라 연장되었음을 제시한다. 600 mg ALX의 SC 투여는 투약후 최대 29일까지 지속되는 혈장 PGRN의 강력한 증가를 야기하였다. 도 11b는 투약후 최대 24일까지 지속되는 CSF PGRN의 병렬 증가를 제시한다.

전반적으로, 이들 실시예에 기재된 결과는 ALX가 단일-용량 IV 또는 SC 투여로 안전하고 잘 관용되는 것으로 밝혀졌다는 것을 제시한다. 이들 결과는 ALX 노출이 용량-비례적 방식으로 증가하였고 CSF ALX 농도에 의해 입증된 바와 같이 중추 신경계에 분포되었음을 제시하였다. 이들 결과는 ALX가 만성 병태에서 IV 및 SC ALX의 발달을 지원하는 PK/약력학 (PD) 프로파일과 함께 CSF 내 PGRN 수준의 강력한 조정제임을 입증한다.

표 9: 서열.

SEQUENCE LISTING <110> Alector LLC <120> METHODS OF USE OF ANTI-SORTILIN ANTIBODIES <130> 73502-20036.40 <140> Not Yet Assigned <141> Concurrently Herewith <150> US 63/271,658 <151> 2021-10-25 <150> US 63/120,670 <151> 2020-12-02 <160> 32 <170> FastSEQ for Windows Version 4.0 <210> 1 <211> 831 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Glu Arg Pro Trp Gly Ala Ala Asp Gly Leu Ser Arg Trp Pro His 1 5 10 15 Gly Leu Gly Leu Leu Leu Leu Leu Gln Leu Leu Pro Pro Ser Thr Leu 20 25 30 Ser Gln Asp Arg Leu Asp Ala Pro Pro Pro Pro Ala Ala Pro Leu Pro 35 40 45 Arg Trp Ser Gly Pro Ile Gly Val Ser Trp Gly Leu Arg Ala Ala Ala 50 55 60 Ala Gly Gly Ala Phe Pro Arg Gly Gly Arg Trp Arg Arg Ser Ala Pro 65 70 75 80 Gly Glu Asp Glu Glu Cys Gly Arg Val Arg Asp Phe Val Ala Lys Leu 85 90 95 Ala Asn Asn Thr His Gln His Val Phe Asp Asp Leu Arg Gly Ser Val 100 105 110 Ser Leu Ser Trp Val Gly Asp Ser Thr Gly Val Ile Leu Val Leu Thr 115 120 125 Thr Phe His Val Pro Leu Val Ile Met Thr Phe Gly Gln Ser Lys Leu 130 135 140 Tyr Arg Ser Glu Asp Tyr Gly Lys Asn Phe Lys Asp Ile Thr Asp Leu 145 150 155 160 Ile Asn Asn Thr Phe Ile Arg Thr Glu Phe Gly Met Ala Ile Gly Pro 165 170 175 Glu Asn Ser Gly Lys Val Val Leu Thr Ala Glu Val Ser Gly Gly Ser 180 185 190 Arg Gly Gly Arg Ile Phe Arg Ser Ser Asp Phe Ala Lys Asn Phe Val 195 200 205 Gln Thr Asp Leu Pro Phe His Pro Leu Thr Gln Met Met Tyr Ser Pro 210 215 220 Gln Asn Ser Asp Tyr Leu Leu Ala Leu Ser Thr Glu Asn Gly Leu Trp 225 230 235 240 Val Ser Lys Asn Phe Gly Gly Lys Trp Glu Glu Ile His Lys Ala Val 245 250 255 Cys Leu Ala Lys Trp Gly Ser Asp Asn Thr Ile Phe Phe Thr Thr Tyr 260 265 270 Ala Asn Gly Ser Cys Lys Ala Asp Leu Gly Ala Leu Glu Leu Trp Arg 275 280 285 Thr Ser Asp Leu Gly Lys Ser Phe Lys Thr Ile Gly Val Lys Ile Tyr 290 295 300 Ser Phe Gly Leu Gly Gly Arg Phe Leu Phe Ala Ser Val Met Ala Asp 305 310 315 320 Lys Asp Thr Thr Arg Arg Ile His Val Ser Thr Asp Gln Gly Asp Thr 325 330 335 Trp Ser Met Ala Gln Leu Pro Ser Val Gly Gln Glu Gln Phe Tyr Ser 340 345 350 Ile Leu Ala Ala Asn Asp Asp Met Val Phe Met His Val Asp Glu Pro 355 360 365 Gly Asp Thr Gly Phe Gly Thr Ile Phe Thr Ser Asp Asp Arg Gly Ile 370 375 380 Val Tyr Ser Lys Ser Leu Asp Arg His Leu Tyr Thr Thr Thr Gly Gly 385 390 395 400 Glu Thr Asp Phe Thr Asn Val Thr Ser Leu Arg Gly Val Tyr Ile Thr 405 410 415 Ser Val Leu Ser Glu Asp Asn Ser Ile Gln Thr Met Ile Thr Phe Asp 420 425 430 Gln Gly Gly Arg Trp Thr His Leu Arg Lys Pro Glu Asn Ser Glu Cys 435 440 445 Asp Ala Thr Ala Lys Asn Lys Asn Glu Cys Ser Leu His Ile His Ala 450 455 460 Ser Tyr Ser Ile Ser Gln Lys Leu Asn Val Pro Met Ala Pro Leu Ser 465 470 475 480 Glu Pro Asn Ala Val Gly Ile Val Ile Ala His Gly Ser Val Gly Asp 485 490 495 Ala Ile Ser Val Met Val Pro Asp Val Tyr Ile Ser Asp Asp Gly Gly 500 505 510 Tyr Ser Trp Thr Lys Met Leu Glu Gly Pro His Tyr Tyr Thr Ile Leu 515 520 525 Asp Ser Gly Gly Ile Ile Val Ala Ile Glu His Ser Ser Arg Pro Ile 530 535 540 Asn Val Ile Lys Phe Ser Thr Asp Glu Gly Gln Cys Trp Gln Thr Tyr 545 550 555 560 Thr Phe Thr Arg Asp Pro Ile Tyr Phe Thr Gly Leu Ala Ser Glu Pro 565 570 575 Gly Ala Arg Ser Met Asn Ile Ser Ile Trp Gly Phe Thr Glu Ser Phe 580 585 590 Leu Thr Ser Gln Trp Val Ser Tyr Thr Ile Asp Phe Lys Asp Ile Leu 595 600 605 Glu Arg Asn Cys Glu Glu Lys Asp Tyr Thr Ile Trp Leu Ala His Ser 610 615 620 Thr Asp Pro Glu Asp Tyr Glu Asp Gly Cys Ile Leu Gly Tyr Lys Glu 625 630 635 640 Gln Phe Leu Arg Leu Arg Lys Ser Ser Val Cys Gln Asn Gly Arg Asp 645 650 655 Tyr Val Val Thr Lys Gln Pro Ser Ile Cys Leu Cys Ser Leu Glu Asp 660 665 670 Phe Leu Cys Asp Phe Gly Tyr Tyr Arg Pro Glu Asn Asp Ser Lys Cys 675 680 685 Val Glu Gln Pro Glu Leu Lys Gly His Asp Leu Glu Phe Cys Leu Tyr 690 695 700 Gly Arg Glu Glu His Leu Thr Thr Asn Gly Tyr Arg Lys Ile Pro Gly 705 710 715 720 Asp Lys Cys Gln Gly Gly Val Asn Pro Val Arg Glu Val Lys Asp Leu 725 730 735 Lys Lys Lys Cys Thr Ser Asn Phe Leu Ser Pro Glu Lys Gln Asn Ser 740 745 750 Lys Ser Asn Ser Val Pro Ile Ile Leu Ala Ile Val Gly Leu Met Leu 755 760 765 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Ser Phe Lys Thr Ile Gly Val Lys Ile Tyr 290 295 300 Ser Phe Gly Leu Gly Gly Arg Phe Leu Phe Ala Ser Val Met Ala Asp 305 310 315 320 Lys Asp Thr Thr Arg Arg Ile His Val Ser Thr Asp Gln Gly Asp Thr 325 330 335 Trp Ser Met Ala Gln Leu Pro Ser Val Gly Gln Glu Gln Phe Tyr Ser 340 345 350 Ile Leu Ala Ala Asn Asp Asp Met Val Phe Met His Val Asp Glu Pro 355 360 365 Gly Asp Thr Gly Phe Gly Thr Ile Phe Thr Ser Asp Asp Arg Gly Ile 370 375 380 Val Tyr Ser Lys Ser Leu Asp Arg His Leu Tyr Thr Thr Thr Gly Gly 385 390 395 400 Glu Thr Asp Phe Thr Asn Val Thr Ser Leu Arg Gly Val Tyr Ile Thr 405 410 415 Ser Val Leu Ser Glu Asp Asn Ser Ile Gln Thr Met Ile Thr Phe Asp 420 425 430 Gln Gly Gly Arg Trp Lys His Leu Arg Lys Pro Glu Asn Ser Glu Cys 435 440 445 Asp Ala Thr Ala Lys Asn Lys Asn Glu Cys Ser Leu His Ile His Ala 450 455 460 Ser Tyr Ser Ile Ser Gln Lys Leu Asn Val Pro Met Ala Pro Leu Ser 465 470 475 480 Glu Pro Asn Ala Val Gly Ile Val Ile Ala His Gly Ser Val Gly Asp 485 490 495 Ala Ile Ser Val Met Val 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130 135 140 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 180 185 190 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 195 200 205 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 210 215 220 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 225 230 235 240 Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 245 250 255 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 260 265 270 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 275 280 285 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 290 295 300 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 305 310 315 320 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 325 <210> 30 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 30 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Arg Leu Gly Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 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Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys 340 345 350 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 355 360 365 Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 370 375 380 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 385 390 395 400 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 405 410 415 Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 420 425 430 Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 435 440 445 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 450 455

Claims

개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법으로서, 항-소르틸린 항체를 적어도 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 방법.
질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키는 방법으로서, 항-소르틸린 항체를 적어도 약 6 mg/kg의 용량으로 개체에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 방법.
제2항에 있어서, 프로그래뉼린 수준의 증가가 개체의 뇌척수액, 개체의 혈장 또는 둘 모두 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 또는 피하 주사에 의해 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 적어도 약 6 mg/kg, 적어도 약 15 mg/kg, 적어도 약 30 mg/kg 또는 적어도 약 60 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6 mg/kg 내지 약 30 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6 mg/kg, 약 15 mg/kg, 약 30 mg/kg 또는 약 60 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 하기를 포함하는 방법:
(a) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 60 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 59 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량을 투여하는 것;
(b) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 30 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 29 mg/kg, 또는 약 6 mg/kg 내지 약 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량을 투여하는 것;
(c) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 15 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 6 mg/kg 내지 약 14 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 낮은 용량을 투여하는 것;
(d) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 7 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 약 15 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 30 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량을 투여하는 것;
(e) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 15 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 16 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 또는 약 30 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량을 투여하는 것; 또는
(f) 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 30 mg/kg의 초기 용량으로 투여한 후, 이어서 약 31 mg/kg 내지 약 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 더 높은 용량을 투여하는 것.
제5항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회 또는 덜 빈번하게 투여하는 것을 포함하는 방법.
제9항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 약 4주마다 1회, 약 5주마다 1회, 약 6주마다 1회, 약 7주마다 1회, 약 8주마다 1회, 약 9주마다 1회 또는 약 10주마다 1회 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 4주마다 1회, 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 15 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 15 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 4주마다 1회, 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 30 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 30 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 4주마다 1회, 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 60 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 정맥내 주입에 의해 약 6주마다 1회 또는 약 8주마다 1회 약 60 mg/kg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 적어도 약 270 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 150 mg 내지 약 600 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제18항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 150 mg, 약 270 mg, 약 300 mg 또는 약 600 mg 중 어느 하나의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제18항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 150 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제18항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 270 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제18항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 300 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제18항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 600 mg의 용량으로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제17항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 2주마다, 약 4주마다, 약 6주마다 또는 약 8주마다 중 어느 하나로 투여하는 것을 포함하는 방법.
제17항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 피하 주사에 의해 약 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체가 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열식별번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체가 인간 IgG1 이소타입을 갖는 것인 방법.
제27항에 있어서, 항-소르틸린 항체가 아미노산 치환 L234A, L235A 및 P331S를 포함하는 Fc 영역을 포함하고, 여기서 잔기 위치의 넘버링이 EU 넘버링에 따른 것인 방법.
제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체가 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 31 또는 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체가 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 32의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체가 서열식별번호: 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄, 및 서열식별번호: 31의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 것인 방법.
제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액 또는 뇌척수액의 샘플에서 프로그래뉼린 수준을 측정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액의 샘플에서 백혈구 내 소르틸린 수준을 측정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈액 또는 뇌척수액의 샘플에서 신경필라멘트 경쇄 (NF-L), Tau, 하나 이상의 신경염증의 바이오마커, 하나 이상의 염증 바이오마커, 하나 이상의 보체 기능의 바이오마커, 및/또는 하나 이상의 미세아교세포 활성의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제34항에 있어서,
(a) 하나 이상의 신경염증의 바이오마커가 IL-6, SPP1, IFI2712A, CHIT1, YKL-40, GFAP, YWHAE, CSF1, AIF1, LY86, CD86 및 TOP2A로 이루어진 군으로부터 선택되고/거나;
(b) 하나 이상의 염증 바이오마커가 오스테오폰틴 (SPP1), YWHAE (14-3-3 단백질 엡실론), 동종이식 염증 인자 1 (AIF1), 콜로니 자극 인자 1 (CSF1), 키티나제 1 (CHIT1), 림프구 항원 86 (LY86) 및 CD86으로 이루어진 군으로부터 선택되고/거나;
(c) 하나 이상의 보체 기능의 바이오마커가 C1qb 및 C1qc로 이루어진 군으로부터 선택되고/거나;
(d) 하나 이상의 미세아교세포 활성의 바이오마커가 YKL-40, GFAP 및 인터류킨-6으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
방법.
제1항 내지 제7항 및 제26항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 정맥내 주입에 의한 6 mg/kg 또는 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 1.4배, 적어도 약 1.8배, 적어도 약 2배, 적어도 약 2.2배, 적어도 약 2.4배, 적어도 약 2.6배, 적어도 약 2.8배 또는 적어도 약 3배의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제36항에 있어서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일 이내에 존재하는 것인 방법.
제36항 또는 제37항에 있어서, 항-소르틸린 항체의 용량이 6 mg/kg이고, 여기서 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 5일, 약 7일, 약 12일, 약 17일, 약 24일, 약 29일 또는 약 42일에 존재하는 것인 방법.
제36항 또는 제37항에 있어서, 항-소르틸린 항체의 용량이 15 mg/kg이고, 여기서 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 5일, 약 7일, 약 12일, 약 17일, 약 24일, 약 29일, 약 42일 또는 약 56일에 존재하는 것인 방법.
제1항 내지 제7항 및 제26항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 정맥내 주입에 의한 6 mg/kg, 15 mg/kg, 30 mg/kg 또는 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 110%, 적어도 약 120%, 적어도 약 130%, 적어도 약 140%, 적어도 약 150%, 적어도 약 160%, 적어도 약 170%, 적어도 약 180%, 적어도 약 190%, 적어도 약 200%, 적어도 약 210%, 적어도 약 220%, 적어도 약 230%, 적어도 약 240%, 적어도 약 250%, 적어도 약 260%, 적어도 약 270%, 적어도 약 280%, 적어도 약 290% 또는 적어도 약 300%의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제40항에 있어서, 항-소르틸린 항체의 용량이 6 mg/kg이고, 여기서 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일 또는 약 28일에 존재하는 것인 방법.
제40항에 있어서, 항-소르틸린 항체의 용량이 15 mg/kg이고, 여기서 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일, 약 28일, 약 35일 또는 약 42일에 존재하는 것인 방법.
제40항에 있어서, 항-소르틸린 항체의 용량이 30 mg/kg이고, 여기서 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일, 약 28일, 약 35일, 약 42일, 약 49일 또는 약 56일에 존재하는 것인 방법.
제40항에 있어서, 항-소르틸린 항체의 용량이 60 mg/kg이고, 여기서 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일, 약 28일, 약 35일, 약 42일, 약 49일, 약 56일, 약 63일, 약 70일, 약 77일 또는 약 84일에 존재하는 것인 방법.
제1항 내지 제4항, 제18항 내지 제20항 및 제26항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 피하 주사에 의한 약 150 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 110%, 적어도 약 120%, 적어도 약 130%, 적어도 약 140%, 적어도 약 150%, 적어도 약 160%, 적어도 약 170%, 적어도 약 180%, 적어도 약 190% 또는 적어도 약 200%의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제1항 내지 제4항, 제17항 내지 제19항, 제22항 및 제26항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 피하 주사에 의한 약 300 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 110%, 적어도 약 120%, 적어도 약 130%, 적어도 약 140%, 적어도 약 150%, 적어도 약 160%, 적어도 약 170%, 적어도 약 180%, 적어도 약 190% 또는 적어도 약 200%의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제1항 내지 제4항, 제17항 내지 제19항, 제23항 및 제26항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 피하 주사에 의한 약 600 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 110%, 적어도 약 120%, 적어도 약 130%, 적어도 약 140%, 적어도 약 150%, 적어도 약 160%, 적어도 약 170%, 적어도 약 180%, 적어도 약 190% 또는 적어도 약 200%의 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제45항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 개체의 혈장 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일 또는 약 28일에 존재하는 것인 방법.
제1항 내지 제7항, 제26항 내지 제38항, 제40항 및 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 정맥내 주입에 의한 6 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 6%, 적어도 약 7%, 적어도 약 8%, 적어도 약 9%, 적어도 약 10%, 적어도 약 11%, 적어도 약 12%, 적어도 약 13%, 적어도 약 14%, 적어도 약 15%, 적어도 약 16%, 적어도 약 17%, 적어도 약 18%, 적어도 약 19% 또는 적어도 약 20%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제1항 내지 제7항, 제26항 내지 제37항, 제39항, 제40항 및 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 정맥내 주입에 의한 15 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70% 또는 적어도 약 80%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제1항 내지 제7항, 제26항 내지 제35항, 제40항 및 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 정맥내 주입에 의한 30 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 70%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제1항 내지 제5항, 제7항, 제26항 내지 제35항, 제40항 및 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 정맥내 주입에 의한 60 mg/kg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 70%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제49항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 2일, 약 5일, 약 7일, 약 12일, 약 14일, 약 17일, 약 21일, 약 24일, 약 28일, 약 29일, 약 35일, 약 42일, 약 49일 또는 약 56일에 존재하는 것인 방법.
제52항에 있어서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일, 약 21일, 약 28일, 약 35일, 약 42일, 약 49일, 약 56일, 약 63일, 약 70일, 약 77일 또는 약 84일에 존재하는 것인 방법.
제1항 내지 제4항, 제18항 내지 제20항, 제26항 내지 제35항, 제45항 및 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 피하 주사에 의한 약 150 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 70%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제1항 내지 제4항, 제17항 내지 제19항, 제22항, 제26항 내지 제35항, 제46항 및 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 피하 주사에 의한 약 300 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 70%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제1항 내지 제4항, 제17항 내지 제19항, 제23항, 제26항 내지 제35항, 제47항 및 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 피하 주사에 의한 약 600 mg의 항-소르틸린 항체의 하나의 용량의 개체에게의 투여가 항-소르틸린 항체의 투여 전 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준과 비교하여 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60% 또는 적어도 약 70%의 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가를 초래하는 것인 방법.
제55항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 개체의 뇌척수액 내 프로그래뉼린 수준의 증가가 항-소르틸린 항체의 투여 후 약 1일, 약 7일, 약 14일 또는 약 21일에 존재하는 것인 방법.
제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 질환, 장애 또는 손상이 전두측두엽 치매, 진행성 핵상 마비, 알츠하이머병, 혈관성 치매, 발작, 망막 이영양증, 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 외상성 뇌 손상, 척수 손상, 치매, 뇌졸중, 파킨슨병, 급성 파종성 뇌척수염, 망막 변성, 연령 관련 황반 변성, 녹내장, 다발성 경화증, 패혈성 쇼크, 박테리아 감염, 관절염 및 골관절염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
제59항에 있어서, 개체가 질환, 장애 또는 손상의 위험이 있는 것인 방법.
제1항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 질환, 장애 또는 손상이 파킨슨병인 방법.
제61항에 있어서, 질환, 장애 또는 손상이 산발성 파킨슨병인 방법.
제61항에 있어서, 개체가 GBA1 유전자에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이를 갖는 것인 방법.
제63항에 있어서, 개체가 GBA1 유전자에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이에 대해 동형접합성 또는 이형접합성인 방법.
제63항 또는 제64항에 있어서, GBA1 유전자에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이가 c.1226A > G, c.1448T > C, IVS2 + 1G > A, RecNciI, 84insGG 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는 GBA1 유전자에서의 적어도 하나의 병원성 돌연변이가 N370S, L444P, R120W, H255Q, D409H, E326K, T369M, R496H 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 GBA1 유전자 산물에서의 아미노산 치환을 초래하는 GBA1 유전자에서의 돌연변이인 방법.
제61항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 파킨슨병이 호엔 및 야르 기준에 기초하여 병기 I 내지 병기 III으로 분류되는 것인 방법.
제61항 내지 제66항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 투여 전 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료를 취하는 중인 방법.
제67항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체를 사용한 치료의 시작 후 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료를 계속 취하는 것인 방법.
제61항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료와 조합하여 항-소르틸린 항체를 투여하는 것을 포함하는 방법.
제67항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 파킨슨병에 대한 하나 이상의 치료가 글루타메이트 길항제, 항콜린제, 도파민 효능제, 레보도파 (L-DOPA 및 데카르복실라제 [DDC] 억제제), 모노아민 옥시다제 B (MAO-B) 억제제, 카테콜-O-메틸트랜스퍼라제 (COMT) 억제제, 베타 차단제, 선택적 세로토닌 흡수 억제제 (SSRI), 삼환계 항우울제 (TCA) 및 인도메타신으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
제61항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 프로그래뉼린, GCase 및/또는 알파-시누클레인의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제61항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제72항에 있어서, 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커가 GCase 단백질, GCase 활성, lyso-Gb1, 하나 이상의 카텝신, LAMP1, N-아세틸-D-글루코사민 키나제 (NAGK) 및 글루코실세라미드로 이루어진 군으로부터 선택되고; 임의로 여기서 하나 이상의 카텝신이 카텝신 B (CTSB) 및 카텝신 D (CTSD)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
제61항 내지 제73항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체의 인지 기능을 평가하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제74항에 있어서, 인지 기능이 몬트리올 인지 평가 (MoCA)를 사용하여 평가되는 것인 방법.
제61항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체의 운동 기능을 평가하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제76항에 있어서, 운동 기능이 통합 파킨슨병 평가 척도 (UPDRS) 파트 III의 운동 장애 학회 (MDS)-후원 개정판 (MDS-UPDRS 파트 III), 또는 UPDRS 총 척도를 사용하여 평가되는 것인 방법.
제61항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 항-소르틸린 항체를 적어도 약 6개월 또는 적어도 약 24주 동안 개체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 질환, 장애 또는 손상이 전두측두엽 치매 (FTD)인 방법.
제79항에 있어서, 개체가
(a) GRN 유전자에서의 하나 이상의 돌연변이에 대해 이형접합성이고, 임의로 여기서 하나 이상의 돌연변이는 기능 상실 돌연변이이고/거나;
(b) C9orf72 헥사뉴클레오티드 반복 확장에 대해 이형접합성이고/거나;
(c) FTD 증상을 갖거나, FTD 증상을 갖지 않거나, 전증상 FTD를 갖고/거나;
(d) FTD-GRN, 또는 GRN 유전자에서의 하나 이상의 돌연변이에 의해 야기되는 FTD를 갖는 것인
방법.
제80항에 있어서,
(a) 개체가 전증상 FTD를 갖고, (i) Nfl, SPP1, YWHAE, AIF1, CSF1, CHIT1 및 LY86으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이오마커의 상승된 수준, 및/또는 (ii) NAGK 및 CTSB로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 바이오마커의 감소된 수준을 갖거나; 또는
(b) 개체가 FTD 증상을 갖지 않고, (i) GRN 유전자에서의 하나 이상의 돌연변이에 대해 이형접합성이고/거나, (ii) 감소된 PGRN 수준 또는 기능을 갖는 것인
방법.
제1항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 질환, 장애 또는 손상이 알츠하이머병인 방법.
제1항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 질환, 장애 또는 손상이 ALS인 방법.
제79항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 프로그래뉼린, GCase 및/또는 알파-시누클레인의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제79항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제85항에 있어서, 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커가 GCase 단백질, GCase 활성, lyso-Gb1, 하나 이상의 카텝신, LAMP1, N-아세틸-D-글루코사민 키나제 (NAGK) 및 글루코실세라미드로 이루어진 군으로부터 선택되고: 임의로 여기서 하나 이상의 카텝신이 카텝신 B (CTSB) 및 카텝신 D (CTSD)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
제79항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체의 인지 기능을 평가하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제1항 내지 제87항 중 어느 한 항에 있어서, 개체가 인간인 방법.
항-소르틸린 항체를 투여받는 개체의 치료를 모니터링하는 방법으로서, 하나 이상의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 포함하며, 여기서 하나 이상의 바이오마커는 프로그래뉼린, GCase, 신경필라멘트 경쇄 (NF-L), Tau, 하나 이상의 신경염증의 마커, 하나 이상의 염증 바이오마커, 하나 이상의 보체 기능의 바이오마커, 하나 이상의 미세아교세포 활성의 바이오마커, 및 알파-시누클레인으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 하나 이상의 바이오마커의 수준은 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 측정되는 것인 방법.
항-소르틸린 항체를 투여받는 개체의 치료를 모니터링하는 방법으로서, 개체가 항-소르틸린 항체의 하나 이상의 용량을 받기 전 및 후에 개체로부터 수득된 혈장 또는 뇌척수액의 샘플에서 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커의 수준을 측정하는 것을 포함하는 방법.
제90항에 있어서, 하나 이상의 리소좀 기능의 바이오마커가 GCase 단백질, GCase 활성, lyso-Gb1, 하나 이상의 카텝신, LAMP1, N-아세틸-D-글루코사민 키나제 (NAGK) 및 글루코실세라미드로 이루어진 군으로부터 선택되고; 임의로 여기서 하나 이상의 카텝신이 카텝신 B (CTSB) 및 카텝신 D (CTSD)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
제89항 내지 제91항 중 어느 한 항에 있어서, 샘플 내 하나 이상의 바이오마커의 수준에 기초하여 개체에서 항-소르틸린 항체의 활성을 평가하는 것을 추가로 포함하는 방법.
제89항 또는 제92항에 있어서,
(a) 하나 이상의 신경염증의 마커가 IL-6, SPP1, IFI2712A, CHIT1, YKL-40, GFAP, YWHAE, CSF1, AIF1, LY86, CD86 및 TOP2A로 이루어진 군으로부터 선택되고/거나;
(b) 하나 이상의 염증 바이오마커가 오스테오폰틴 (SPP1), YWHAE (14-3-3 단백질 엡실론), 동종이식 염증 인자 1 (AIF1), 콜로니 자극 인자 1 (CSF1), 키티나제 1 (CHIT1), 림프구 항원 86 (LY86) 및 CD86으로 이루어진 군으로부터 선택되고/거나;
(c) 하나 이상의 보체 기능의 바이오마커가 C1qb 및 C1qc로 이루어진 군으로부터 선택되고/거나;
(d) 하나 이상의 미세아교세포 활성의 바이오마커가 YKL-40, GFAP 및 인터류킨-6으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인
방법.
개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키는 방법에서 사용하기 위한 적어도 약 6 mg/kg 용량의 항-소르틸린 항체로서, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 항-소르틸린 항체.
질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키는 방법에서 사용하기 위한 적어도 약 6 mg/kg 용량의 항-소르틸린 항체로서, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 항-소르틸린 항체.
개체에서 질환, 장애 또는 손상의 진행을 치료 또는 지연시키기 위한 의약의 제조에서의 적어도 약 6 mg/kg 용량의 항-소르틸린 항체의 용도로서, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 용도.
질환, 장애 또는 손상을 갖는 개체에서 프로그래뉼린 수준을 증가시키기 위한 의약의 제조에서의 적어도 약 6 mg/kg 용량의 항-소르틸린 항체의 용도로서, 여기서 항체는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함하고, 여기서 중쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H1, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H2, 및 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-H3을 포함하고, 경쇄 가변 도메인은 서열식별번호: 9의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L1, 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L2, 및 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 포함하는 HVR-L3을 포함하는 것인 용도.